JP2023025885A - ヒスチダーゼ産生促進剤 - Google Patents
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Abstract
【課題】表皮ケラチノサイトにおけるヒスチダーゼ産生によるウロカニン酸の生成促進を介し、皮膚の紫外線抵抗性を増強して、紫外線に起因する皮膚疾患の予防や皮膚状態の改善に有効なヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤を提供する。【解決手段】ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤を含む皮膚の紫外線防御を目的とした医薬品、医薬部外品、化粧品及び飲食品。本発明のハマナスの抽出物は、優れたヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進効果を示した。【選択図】なし
Description
本発明は、ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ産生促進剤、ＣＥＢＰＥ産生促進剤、並びに該産生促進剤を含む皮膚の紫外線抵抗性増強剤に関するものである。
紫外線を過剰に浴びた皮膚においては、紅斑や水泡を形成したり、メラニン生成も促進され、皮膚の黒色化、弾力性の低下、しわの発生をもたらす。従って、紫外線から皮膚を保護するために種々の紫外線防御剤が開発されている。それらには、酸化亜鉛、酸化チタン等の無機系紫外線散乱剤及びパラメトキシケイ皮酸２－エチルヘキシル等の有機系紫外線吸収剤がある。前者は、紫外線を反射するものであるため、塗布した皮膚上の白残りはさけられず、又使用感が十分でない。一方、後者は紫外線を吸収するものであるため、白くならないという利点があるが、多く配合すると油性感、べたつきが出てくる。さらに有機系紫外線吸収剤は、皮膚一次刺激等の点で安全性に対する懸念がある。又、紫外線防御剤を配合した皮膚外用剤を塗布した場合、時間経過とともに汗や皮脂の影響でその一部が取れ、紫外線防御効果の低下がさけられない。
ウロカニン酸は、皮膚に存在するアミノ酸であるヒスチジンからヒスチダーゼにより合成される。ウロカニン酸に紫外線吸収能があること（非特許文献１）及びヒスチジンの元となるフィラグリン発現を抑制した皮膚組織では、ウロカニン酸量が低下するとともに紫外線感受性が高まること（非特許文献２）が報告されている。すなわち、ヒスチダーゼの産生を促進させることによって、ウロカニン酸の生成量を増大させ、皮膚の紫外線抵抗性を増強させることができる。
従来、ヒスチダーゼ産生促進及び紫外線抵抗性増強効果を有する物質としては、ユズ抽出物（特許文献１）、真珠又は貝殻に含まれる水不溶性タンパク質の酵素分解物（特許文献２）が知られている。ヒスチダーゼの産生を促進し、ウロカニン酸の生成を介して皮膚の紫外線抵抗性を増強することができる、さらなる物質の開発が望まれる。
ハマナス（学名：Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ）はバラ科バラ属に属し、日本、朝鮮半島、中国北部などに自生する落葉低木である。ハマナスは、多くの品種が存在し、観賞用のほか、染料や香料の原料として用いられており、果実はローズヒップとしてジャムなどの食用にもなる。ハマナスは、これまでにテストステロン５α－リダクターゼ阻害作用（特許文献３）、脱毛防止・発毛効果等の養毛作用（特許文献４）、α－アミラーゼ活性阻害作用及びα－グルコシダーゼ活性阻害作用（特許文献５）、皮脂合成抑制作用（特許文献６）等があることが知られている。しかしながら、ヒスチダーゼ産生促進効果についてはこれまで何ら知られていない。
Ｚｅｎｉｓｅｋ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１８（４），５８９－５９１（１９５５）
Ｍｉｌｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１３０（９），２２８６－２２９４（２０１０）
本発明は、ヒスチダーゼの産生を促進することにより、ウロカニン酸の生成を介して皮膚の紫外線抵抗性を増強することができる、ヒスチダーゼ産生促進剤を提供することである。
本発明者らは、上記課題の解決に向け鋭意検討を行った結果、ハマナスの抽出物が優れたヒスチダーゼ産生促進作用を有すること、それによりウロカニン酸の生成を介して皮膚の紫外線抵抗性を増強することを見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は、以下の発明を包含する。
（１）ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ産生促進剤。
（２）ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするＣＥＢＰＥ産生促進剤。
（３）（１）又は（２）記載の剤を含む、皮膚の紫外線抵抗性増強用組成物。
（１）ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ産生促進剤。
（２）ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするＣＥＢＰＥ産生促進剤。
（３）（１）又は（２）記載の剤を含む、皮膚の紫外線抵抗性増強用組成物。
本発明のハマナスの抽出物は、ヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進効果に優れていた。この抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤は、皮膚におけるウロカニン酸の生成を高め、皮膚の紫外線抵抗性を増強する。皮膚自体の紫外線抵抗性を増強することから、紫外線吸収剤又は紫外線散乱剤を皮膚に塗布するよりも、汗や皮脂、接触により皮膚から取れて紫外線防御効果が低下する影響が少ない。本発明のヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤は、作用が緩和な植物の抽出物を有効成分とすることから、副作用がなく安全性が高い。よって、医薬品、医薬部外品、化粧品、飲食品に安心して使用できる。
本発明に用いるハマナスとしては、ハマナス（学名：Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ Ｔｈｕｎｂ．）、ヤエハマナス（学名：Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ Ｔｈｕｎｂ． ｖａｒ． ｐｌｅｎａ）、マイカイ（学名：Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ Ｔｈｕｎｂ． ｖａｒ． ｐｌｅｎａ Ｒｅｇｅｌ）等が挙げられる。本発明において、ハマナスの抽出物は、植物体全体（全草）、あるいは、葉、茎、花、芽、実、種子、根等の植物体の一部又はそれらの混合物の抽出物をいうが、葉の抽出物が好ましい。また、抽出には、これらの植物体をそのまま使用してもよく、乾燥、粉砕、細切等の処理を行ってもよい。
本発明のハマナスの抽出方法は、特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温又は低温で抽出したものであっても良い。抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、１－ブタノール、２－ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３－ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は、１種でも２種以上を混合して用いても良い。
上記抽出物は抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて濃縮、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭等の処理をして用いても良い。又、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良いし、カラム精製等を行い、有効成分を濃縮したり単離したりしてから用いても良い。本発明で用いるハマナスは、天然由来の植物であり、ハマナスから抽出される成分は、多様な構造の化合物が多数同時に存在する混合物である。したがって、含有する成分の構造又は特性をすべて明らかにすることは困難であり、抽出物として扱うことが好ましい。
表皮ケラチノサイトにおいては、フィラグリン遺伝子が発現すると前駆体としてフィラグリンが１０～１２個連結したプロフィラグリンが合成される。プロフィラグリンは、脱リン酸化とプロテアーゼによる分解を受け、フィラグリンとなる。そのフィラグリンが角質層にてさらに分解される時に生じるヒスチジンからヒスチダーゼにより、紫外線吸収能を有し、皮膚の紫外線抵抗性に寄与するウロカニン酸が合成される。したがって、本発明に用いるハマナスの抽出物は、ヒスチダーゼ及びその発現を調整する転写因子であるＣＥＢＰＥの産生を促進する作用を介して、ウロカニン酸の生成を促進し、ケラチノサイト及び皮膚の紫外線抵抗性を増強させることができる。又、ハマナスの抽出物は、該紫外線抵抗性増強作用を介して、紫外線に起因する皮膚疾患の予防や皮膚状態の改善、例えば、皮膚がん、脂漏性角化症、日光皮膚炎等の予防、しみ、しわ、たるみ等の改善等に有用である。
本発明におけるヒスチダーゼは、ヒスチジンをウロカニン酸に変換する酵素であり、ヒスチジンアンモニアリアーゼ又はヒスチジナーゼとも呼ばれる。「ヒスチダーゼ産生促進」とは、細胞におけるヒスチダーゼ遺伝子の発現促進をいうが、それに続くヒスチダーゼタンパク質の合成、ヒスチダーゼ酵素活性の亢進をも包含する。
発明におけるＣＥＢＰＥは、ＣＣＡＡＴ／ｅｎｈａｎｃｅｒ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｃ／ＥＢＰ）,ｅｐｓｉｌｏｎ、ＣＲＰとも呼ばれる転写因子である。ヒスチダーゼは、ＣＥＢＰＥを転写因子として遺伝子発現が調整されており、ＣＥＢＰＥの発現を促進することにより、ヒスチダーゼの遺伝子発現が促進される。本発明における「ＣＥＢＰＥ産生促進」とは、細胞におけるＣＥＢＰＥ遺伝子の発現促進をいうが、それに続くＣＥＢＰＥ転写因子の合成、ヒスチダーゼ遺伝子発現プロモーター領域の活性化をも包含する。
本発明における「皮膚の紫外線抵抗性増強用組成物」とは、皮膚内部で紫外線吸収能を有するウロカニン酸を増加させることにより、皮膚の紫外線抵抗性を増強し、紫外線の影響から皮膚を防御する外用及び内用組成物をいう。
本発明のヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤を生体内に投与する場合は、そのまま投与することも可能であるが、本発明の効果を損なわない範囲で適当な添加物とともに皮膚外用及び内用組成物に含有して提供することが好ましい。本発明の組成物には、医薬品、医薬部外品、化粧品等が含まれる。
本発明のヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤を医薬品に含有する場合は、薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物と混合し、患部に適用するのに適した製剤形態の各種製剤に製剤化することができる。薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物としては、その剤形、用途に応じて賦形剤、増粘剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、保存剤、分散剤、乳化剤、ゲル化剤、色素、香料等を用いることができる。本発明の医薬品に適した形態は外用製剤であり、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、液剤、貼付剤等が挙げられる。軟膏剤は、均質な半固形状の外用製剤をいい、油脂性軟膏、乳剤性軟膏、水溶性軟膏を含む。ゲル剤は、水不溶性成分の抱水化合物を水性液に懸濁した外用製剤をいう。液剤は、液状の外用製剤をいい、ローション剤、懸濁剤、乳剤、リニメント剤等を含む。
本発明のヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤を医薬部外品や化粧品に含有する場合は、その剤形は、水溶液系、可溶化系、乳化系、粉末系、粉末分散系、油液系、ゲル系、軟膏系、エアゾール系、水－油二層系、又は水－油－粉末三層系等のいずれでもよい。又、該医薬部外品や化粧品は、ヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤とともに、皮膚外用組成物において通常使用されている各種成分、添加剤、基剤等をその種類に応じて選択し、適宜含有し、当分野で公知の手法に従って製造することができる。その形態は、液状、乳液状、クリーム状、ゲル状、ペースト状、スプレー状等のいずれであってもよい。含有成分としては、例えば、油脂類（オリーブ油、ヤシ油、月見草油、ホホバ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油等）、ロウ類（ラノリン、ミツロウ、カルナウバロウ等）、炭化水素類（流動パラフィン、スクワレン、スクワラン、ワセリン等）、脂肪酸類（ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸等）、高級アルコール類（ミリスチルアルコール、セタノール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール等）、エステル類（ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、トリオクタン酸グリセリン、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸ステアリル等）、有機酸類（クエン酸、乳酸、α－ヒドロキシ酢酸、ピロリドンカルボン酸等）、糖類（マルチトール、ソルビトール、キシロビオース、Ｎ－アセチル－Ｄ－グルコサミン等）、蛋白質及び蛋白質の加水分解物、アミノ酸類及びその塩、ビタミン類、植物・動物抽出成分、種々の界面活性剤、保湿剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、安定化剤、防腐剤、殺菌剤、香料等が挙げられる。
医薬部外品や化粧品の種類としては、例えば、化粧水、乳液、ジェル、美容液、一般クリーム、日焼け止めクリーム、パック、マスク、洗顔料、化粧石鹸、ファンデーション、おしろい、浴用剤、ボディローション、ボディシャンプー、ヘアシャンプー、ヘアコンディショナー、頭皮用ローション、頭皮用クリーム、ヘアトニック、育毛剤等が挙げられる。
本発明の皮膚の紫外線抵抗性増強用組成物におけるヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤の含有量は、表皮ケラチノサイトにおけるヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進作用を発揮できる量である限り特に限定はされないが、例えばハマナスの抽出物の乾燥固形物重量として０．００００１～１０重量％が好ましく、０．０００１～１重量％がより好ましい。上記の量はあくまで例示であって、組成物の種類や形態、一般的な使用量、効能・効果、及びコスト等を考慮して適宜設定・調整すればよい。
また、本発明のヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤は、内用組成物にも含有できる。本発明において、飲食品とは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、又は特定保健用食品を含む意味で用いられる。飲食品の形態は、食用に適した形態、例えば、固形状、液状、顆粒状、粒状、粉末状、カプセル状、クリーム状、ペースト状のいずれであってもよい。
飲食品の種類としては、パン類、麺類、菓子類、乳製品、水産・畜産加工食品、油脂及び油脂加工食品、調味料、各種飲料（清涼飲料、炭酸飲料、美容ドリンク、栄養飲料、果実飲料、乳飲料等）及び該飲料の濃縮原液及び調整用粉末等が挙げられるが、これらに限定はされない。
本発明の飲食品は、その種類に応じて通常使用される添加物を適宜含有してもよい。添加物としては、食品衛生上許容されうる添加物であればいずれも使用できるが、例えば、ブドウ糖、ショ糖、果糖、異性化液糖、アスパルテーム、ステビア等の甘味料；クエン酸、リンゴ酸、酒石酸等の酸味料；デキストリン、澱粉等の賦形剤；結合剤、希釈剤、香料、着色料、緩衝剤、増粘剤、ゲル化剤、安定剤、保存剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤等が挙げられる。
本発明の飲食品におけるハマナスの抽出物の含有量は、表皮ケラチノサイトにおけるヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進作用を発揮できる量であればよいが、対象飲食品の一般的な摂取量、飲食品の形態、効能・効果、呈味性、嗜好性及びコスト等を考慮して適宜設定すればよい。
次に、本発明を詳細に説明するため、具体的な実施例を挙げて説明する。これらの実施例は効果を具体的に説明するもので、発明の範囲を限定するものではない。実施例中の含有量は重量％である。
ハマナスの抽出物を以下のとおり製造した。
（製造例１）ハマナス葉の熱水抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉の熱水抽出物５．２gを得た。
（製造例１）ハマナス葉の熱水抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉の熱水抽出物５．２gを得た。
（製造例２）ハマナス葉の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉の５０％エタノール抽出物４．８gを得た。
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉の５０％エタノール抽出物４．８gを得た。
（製造例３）ハマナス葉のエタノール抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉のエタノール抽出物４．１gを得た。
ハマナス（葉の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉のエタノール抽出物４．１gを得た。
（製造例４）ハマナス実の熱水抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実の熱水抽出物４．７gを得た。
ハマナス（実の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実の熱水抽出物４．７gを得た。
（製造例５）ハマナス実の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実の５０％エタノール抽出物４．１gを得た。
ハマナス（実の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実の５０％エタノール抽出物４．１gを得た。
（製造例６）ハマナス実のエタノール抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実のエタノール抽出物３．１gを得た。
ハマナス（実の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実のエタノール抽出物３．１gを得た。
（製造例７）ハマナス花の熱水抽出物の調製
ハマナス（花の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花の熱水抽出物４．０gを得た。
ハマナス（花の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０～１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花の熱水抽出物４．０gを得た。
（製造例８）ハマナス花の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（花の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花の５０％エタノール抽出物３．５gを得た。
ハマナス（花の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花の５０％エタノール抽出物３．５gを得た。
（製造例９）ハマナス花のエタノール抽出物の調製
ハマナス（花の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花のエタノール抽出物２．０gを得た。
ハマナス（花の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス花のエタノール抽出物２．０gを得た。
（試験例１）ＣＥＢＰＥノックダウンによるヒスチダーゼ発現変化
ＣｈＩＰ－ｓｅｑのデータベース（ＣｈＩＰ－Ａｔｌａｓ）を参照し、ヒスチダーゼ近傍に結合する転写因子を調べた。その結果、表皮分化に関与することが知られている転写因子であるＣＥＢＰＥのピークがヒスチダーゼ上に報告された。すなわち、ＣＥＢＰＥはヒスチダーゼのＤＮＡ配列上に結合し、ヒスチダーゼ発現を調整する可能性が示唆された。次に、１２ｗｅｌｌプレートにヒト由来ケラチノサイトを各２×１０４Ｃｅｌｌｓ播種し、２４時間後に２ｍＭのＣａＣｌ２を添加することにより分化誘導を行った。１０日間分化誘導した後にｓｉＲＮＡ処理を行い、ＣＥＢＰＥのノックダウンを行った。ｓｉＲＮＡ処理には、ＣＥＢＰＥ ＴｒｉＦＥＣＴａ ＲＮＡｉキット（ＩＤＴ）を使用し、導入試薬にはＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＲＮＡｉＭＡＸ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用した。ｓｉＲＮＡ処理終了後に再度２ｍＭのＣａＣｌ２を添加した培地にて２４時間培養を行った後に総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡの抽出には、ＲＮＡｉｓｏ ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いた。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲ法によりヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲ法にはＳＹＢＲ Ｓｅｌｅｃｔ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用い、内部標準として、１８ＳｒＲＮＡを用いた。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲの操作は定められた方法にしたがい、ヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現量を内部標準である１８ＳｒＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。尚、ヒスチダーゼ、ＣＥＢＰＥ及び１８ＳｒＲＮＡ用のプライマーは、以下に示したものを使用した。
ＣｈＩＰ－ｓｅｑのデータベース（ＣｈＩＰ－Ａｔｌａｓ）を参照し、ヒスチダーゼ近傍に結合する転写因子を調べた。その結果、表皮分化に関与することが知られている転写因子であるＣＥＢＰＥのピークがヒスチダーゼ上に報告された。すなわち、ＣＥＢＰＥはヒスチダーゼのＤＮＡ配列上に結合し、ヒスチダーゼ発現を調整する可能性が示唆された。次に、１２ｗｅｌｌプレートにヒト由来ケラチノサイトを各２×１０４Ｃｅｌｌｓ播種し、２４時間後に２ｍＭのＣａＣｌ２を添加することにより分化誘導を行った。１０日間分化誘導した後にｓｉＲＮＡ処理を行い、ＣＥＢＰＥのノックダウンを行った。ｓｉＲＮＡ処理には、ＣＥＢＰＥ ＴｒｉＦＥＣＴａ ＲＮＡｉキット（ＩＤＴ）を使用し、導入試薬にはＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＲＮＡｉＭＡＸ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用した。ｓｉＲＮＡ処理終了後に再度２ｍＭのＣａＣｌ２を添加した培地にて２４時間培養を行った後に総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡの抽出には、ＲＮＡｉｓｏ ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いた。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲ法によりヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲ法にはＳＹＢＲ Ｓｅｌｅｃｔ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用い、内部標準として、１８ＳｒＲＮＡを用いた。リアルタイムＲＴ－ＰＣＲの操作は定められた方法にしたがい、ヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現量を内部標準である１８ＳｒＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。尚、ヒスチダーゼ、ＣＥＢＰＥ及び１８ＳｒＲＮＡ用のプライマーは、以下に示したものを使用した。
ヒスチダーゼ用のプライマーセット
ＣＴＧＡＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＡ（配列番号１）
ＧＡＣＣＧＡＡＡＣＣＧＡＡＡＡＧＣＡＡ（配列番号２）
ＣＥＢＰＥ用のプライマーセット
ＣＧＣＣＣＧＴＧＧＴＧＴＴＡＴＴＴＡＡＡＧ（配列番号３）
ＧＧＣＡＧＡＧＧＧＡＧＡＡＧＣＡＧＡＧＡ（配列番号４）
１８ＳｒＲＮＡ用のプライマーセット
ＣＣＧＡＧＣＣＧＣＣＴＧＧＡＴＡＣ（配列番号５）
ＣＡＧＴＴＣＣＧＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＡＧＡ（配列番号６）
ＣＴＧＡＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＡ（配列番号１）
ＧＡＣＣＧＡＡＡＣＣＧＡＡＡＡＧＣＡＡ（配列番号２）
ＣＥＢＰＥ用のプライマーセット
ＣＧＣＣＣＧＴＧＧＴＧＴＴＡＴＴＴＡＡＡＧ（配列番号３）
ＧＧＣＡＧＡＧＧＧＡＧＡＡＧＣＡＧＡＧＡ（配列番号４）
１８ＳｒＲＮＡ用のプライマーセット
ＣＣＧＡＧＣＣＧＣＣＴＧＧＡＴＡＣ（配列番号５）
ＣＡＧＴＴＣＣＧＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＡＧＡ（配列番号６）
これらの試験結果を表１に示した。その結果、ＣＥＢＰＥノックダウンによりヒスチダーゼｍＲＮＡ発現量は低下した。したがって、転写因子ＣＥＢＰＥはヒスチダーゼの遺伝子発現を制御していることが示された。
（試験例２）紫外線によるＣＥＢＰＥ発現減少に対するハマナスの抽出物の効果
実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１～９）のＣＥＢＰＥ産生に及ぼす影響を、ＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現量を指標に評価した。具体的方法について以下に記載する。
実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１～９）のＣＥＢＰＥ産生に及ぼす影響を、ＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現量を指標に評価した。具体的方法について以下に記載する。
６ｃｍシャーレにヒト由来ケラチノサイトを１×１０５ｃｅｌｌｓ播種し、その翌日に２ｍＭのＣａＣｌ２を添加することにより分化誘導を行った。分化誘導６日目に各試料を１０μｇ／ｍＬ添加した。その２４時間後にＵＶＢ領域の紫外線を５０ｍＪ／ｃｍ２で照射した。照射後は再度各試料を添加した培地にて２４時間培養した後に総ＲＮＡの抽出を行った。コントロールには試料の代わりに精製水を添加した細胞を用いた。ＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現量を試験例１と同様の方法で測定した。
これらの試験結果を表２に示した。その結果、ハマナスの抽出物（製造例１～３）の全てに、紫外線によるＣＥＢＰＥのｍＲＮＡ発現低下を抑制する効果が認められた。ハマナスの抽出物（製造例４～９）についても同様の効果が確認された。
（試験例３）ヒスチダーゼ産生に対するハマナスの抽出物の効果
実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１～９）のヒスチダーゼ産生に及ぼす影響を、ヒスチダーゼのｍＲＮＡ発現量を指標に評価した。具体的方法について以下に記載する。
実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１～９）のヒスチダーゼ産生に及ぼす影響を、ヒスチダーゼのｍＲＮＡ発現量を指標に評価した。具体的方法について以下に記載する。
６ｃｍシャーレにヒト由来ケラチノサイトを１×１０５ｃｅｌｌｓ播種し、その翌日に２ｍＭのＣａＣｌ２を添加することにより分化誘導を行った。分化誘導６日目に各試料を０．１、１、１０μｇ／ｍＬ添加した。その２４時間後に総ＲＮＡの抽出を行った。コントロールには試料の代わりに精製水を添加した細胞を用いた。ヒスチダーゼのｍＲＮＡ発現量を試験例１と同様の方法で測定した。
これらの試験結果を表３に示した。その結果、ハマナスの抽出物（製造例１）に、ヒスチダーゼのｍＲＮＡ発現を促進する効果が認められた。ハマナスの抽出物（製造例２～９）についても同様に試験を行い、効果が確認された。
製品の処方例
製造例１～９で製造したハマナスの抽出物を含有した製品の処方例を以下に示す。
製造例１～９で製造したハマナスの抽出物を含有した製品の処方例を以下に示す。
（処方例１）ローション
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） ０．１
２．１，３－ブチレングリコール ８．０
３．グリセリン ２．０
４．キサンタンガム ０．０２
５．クエン酸 ０．０１
６．クエン酸ナトリウム ０．１
７．エタノール ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１
１０．香料 ０．１
１１．精製水 残量
［製造方法］成分１～６及び１１と、成分７～１０をそれぞれ均一に溶解した後、両者を混合し濾過しローションを調製する。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） ０．１
２．１，３－ブチレングリコール ８．０
３．グリセリン ２．０
４．キサンタンガム ０．０２
５．クエン酸 ０．０１
６．クエン酸ナトリウム ０．１
７．エタノール ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１
１０．香料 ０．１
１１．精製水 残量
［製造方法］成分１～６及び１１と、成分７～１０をそれぞれ均一に溶解した後、両者を混合し濾過しローションを調製する。
（処方例２） クリーム
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ０．１
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．１，３－ブチレングリコール ８．５
１４．精製水 残量
［製造方法］成分２～９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１～1４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。次いで、油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ０．１
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．１，３－ブチレングリコール ８．５
１４．精製水 残量
［製造方法］成分２～９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１～1４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。次いで、油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
（処方例３）乳液
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例３） ０．１
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 残量
［製造方法］成分２～８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０～１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例３） ０．１
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 残量
［製造方法］成分２～８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０～１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
（処方例４）ゲル剤
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例４） ０．１
２．エタノール ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．） ０．１
５．香料 適量
６．１，３－ブチレングリコール ５．０
７．グリセリン ５．０
８．キサンタンガム ０．１
９．カルボキシビニルポリマー ０．２
１０．水酸化カリウム ０．２
１１．精製水 残量
［製造方法］成分２～５と、成分１及び６～１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例４） ０．１
２．エタノール ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．） ０．１
５．香料 適量
６．１，３－ブチレングリコール ５．０
７．グリセリン ５．０
８．キサンタンガム ０．１
９．カルボキシビニルポリマー ０．２
１０．水酸化カリウム ０．２
１１．精製水 残量
［製造方法］成分２～５と、成分１及び６～１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
（処方例５）軟膏
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例５） ２．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．） ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン １０．０
４．流動パラフィン ５．０
５．セタノール ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
７．プロピレングリコール １０．０
８．精製水 残量
［製造方法］成分２～５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６～８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例５） ２．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．） ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン １０．０
４．流動パラフィン ５．０
５．セタノール ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
７．プロピレングリコール １０．０
８．精製水 残量
［製造方法］成分２～５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６～８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
（処方例６）パック
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例６） ０．１
２．ポリビニルアルコール １２．０
３．エタノール ５．０
４．１，３－ブチレングリコール ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．） ０．５
７．クエン酸 ０．１
８．クエン酸ナトリウム ０．３
９．香料 適量
１０．精製水 残量
［製造方法］成分１～１０を均一に溶解し製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例６） ０．１
２．ポリビニルアルコール １２．０
３．エタノール ５．０
４．１，３－ブチレングリコール ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．） ０．５
７．クエン酸 ０．１
８．クエン酸ナトリウム ０．３
９．香料 適量
１０．精製水 残量
［製造方法］成分１～１０を均一に溶解し製品とする。
（処方例７）ファンデーション
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例７） １．０
２．ステアリン酸 ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．） １．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
５．セタノール １．０
６．液状ラノリン ２．０
７．流動パラフィン ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル ６．５
９．パラオキシ安息香酸ブチル ０．１
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
１１．ベントナイト ０．５
１２．プロピレングリコール ４．０
１３．トリエタノールアミン １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１５．二酸化チタン ８．０
１６．タルク ４．０
１７．ベンガラ １．０
１８．黄酸化鉄 ２．０
１９．香料 適量
２０．精製水 残量
［製造方法］成分２～９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１１～１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５～１８を加え、水相とする。水相を８０℃に昇温し、油相に水相を徐々に加え乳化する。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃で成分１９を加え、３０℃まで冷却して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例７） １．０
２．ステアリン酸 ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．） １．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
５．セタノール １．０
６．液状ラノリン ２．０
７．流動パラフィン ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル ６．５
９．パラオキシ安息香酸ブチル ０．１
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
１１．ベントナイト ０．５
１２．プロピレングリコール ４．０
１３．トリエタノールアミン １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１５．二酸化チタン ８．０
１６．タルク ４．０
１７．ベンガラ １．０
１８．黄酸化鉄 ２．０
１９．香料 適量
２０．精製水 残量
［製造方法］成分２～９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１１～１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５～１８を加え、水相とする。水相を８０℃に昇温し、油相に水相を徐々に加え乳化する。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃で成分１９を加え、３０℃まで冷却して製品とする。
（処方例８）固形石鹸
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例８） ０．１
２．石鹸素地（＊） ８０．０
３．グリセリン １０．０
４．ソルビトール １．０
５．エデト酸 ０．１
６．酸化チタン ０．１
７．香料 適量
８．精製水 残量
（＊）ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウムを含む高級脂肪酸ナトリウム混合物
［製造方法］全成分を混合して、ミキサー及びローラーで混練し、プロッダーで圧縮することによって棒状の成型物に型打ちし、次いで、成形物を冷却し、乾燥することによって、製品を得る。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例８） ０．１
２．石鹸素地（＊） ８０．０
３．グリセリン １０．０
４．ソルビトール １．０
５．エデト酸 ０．１
６．酸化チタン ０．１
７．香料 適量
８．精製水 残量
（＊）ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウムを含む高級脂肪酸ナトリウム混合物
［製造方法］全成分を混合して、ミキサー及びローラーで混練し、プロッダーで圧縮することによって棒状の成型物に型打ちし、次いで、成形物を冷却し、乾燥することによって、製品を得る。
（処方例９）ボディ用洗浄料
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例９） ０．２
２．ステアリン酸 １０．０
３．パルミチン酸 ８．０
４．ミリスチン酸 １２．０
５．ラウリン酸 ４．０
６．オレイルアルコール １．５
７．精製ラノリン １．０
８．ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド １．０
９．グリセリン １０．０
１０．水酸化カリウム ６．０
１１．香料 適量
１２．防腐剤 適量
１３．金属イオン封鎖剤 適量
１４．精製水 残量
［製造方法］成分２～５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１４の適量に成分１０を溶解し、油相に添加しケン化を行う。続いて、成分６～９をケン化物に添加し、室温でさらに成分１、１１～１３及び残りの成分１４を添加する。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例９） ０．２
２．ステアリン酸 １０．０
３．パルミチン酸 ８．０
４．ミリスチン酸 １２．０
５．ラウリン酸 ４．０
６．オレイルアルコール １．５
７．精製ラノリン １．０
８．ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド １．０
９．グリセリン １０．０
１０．水酸化カリウム ６．０
１１．香料 適量
１２．防腐剤 適量
１３．金属イオン封鎖剤 適量
１４．精製水 残量
［製造方法］成分２～５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１４の適量に成分１０を溶解し、油相に添加しケン化を行う。続いて、成分６～９をケン化物に添加し、室温でさらに成分１、１１～１３及び残りの成分１４を添加する。
（処方例１０）ヘアローション
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） ０．２
２．ステアリン酸 ５．０
３．セチルアルコール ５．０
４．流動パラフィン ２．０
５．グリセリンモノステアレート １．３
６．ソルビタンモノオレート １．５
７．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（１０Ｅ．Ｏ．） ０．８
８．グリセリン ６．０
９．防腐剤 適量
１０．精製水 残量
［製造方法］成分２～７を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び８～１０を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら冷却して製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） ０．２
２．ステアリン酸 ５．０
３．セチルアルコール ５．０
４．流動パラフィン ２．０
５．グリセリンモノステアレート １．３
６．ソルビタンモノオレート １．５
７．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（１０Ｅ．Ｏ．） ０．８
８．グリセリン ６．０
９．防腐剤 適量
１０．精製水 残量
［製造方法］成分２～７を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び８～１０を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら冷却して製品とする。
（処方例１１）ヘアトニック
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ２．０
２．９５％エタノール ６０．０
３．グリセリン ２．０
４．精製水 残量
［製造方法］成分１を２に溶解し、成分３及び４を加え、十分撹拌混合し、製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ２．０
２．９５％エタノール ６０．０
３．グリセリン ２．０
４．精製水 残量
［製造方法］成分１を２に溶解し、成分３及び４を加え、十分撹拌混合し、製品とする。
（処方例１２）シャンプー
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例３） ０．１
２．アルキル硫酸トリエタノールアミン １８．０
３．ラウリン酸ジエタノールアミド ３．０
４．メチルセルロース ０．５
５．香料 適量
６．精製水 残量
［製造方法］成分６に成分４を均一に溶解した後、成分１及び２を加え、７０～７５℃で加熱溶解した後、成分３を加え、冷却途中に成分５を加え３０℃まで冷却し製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例３） ０．１
２．アルキル硫酸トリエタノールアミン １８．０
３．ラウリン酸ジエタノールアミド ３．０
４．メチルセルロース ０．５
５．香料 適量
６．精製水 残量
［製造方法］成分６に成分４を均一に溶解した後、成分１及び２を加え、７０～７５℃で加熱溶解した後、成分３を加え、冷却途中に成分５を加え３０℃まで冷却し製品とする。
（処方例１３）浴用剤
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例４） ５．０
２．炭酸水素ナトリウム ５０．０
３．黄色２０２号 適量
４．香料 適量
５．無水硫酸ナトリウム 残量
［製造方法］成分１～５を均一に混合し製品とする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例４） ５．０
２．炭酸水素ナトリウム ５０．０
３．黄色２０２号 適量
４．香料 適量
５．無水硫酸ナトリウム 残量
［製造方法］成分１～５を均一に混合し製品とする。
（処方例１４）錠剤
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） １．０
２．乾燥コーンスターチ ２５．０
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム ２４．０
４．微結晶セルロース ４０．０
５．ポリビニルピロリドン ７．０
６．タルク ３．０
［製造方法］成分１～５を混合し、次いで１０％の水を結合剤として加えて、押出し造粒後乾燥する。成形した顆粒に成分６を加えて混合し打錠する。１錠０．５２ｇとする。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例１） １．０
２．乾燥コーンスターチ ２５．０
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム ２４．０
４．微結晶セルロース ４０．０
５．ポリビニルピロリドン ７．０
６．タルク ３．０
［製造方法］成分１～５を混合し、次いで１０％の水を結合剤として加えて、押出し造粒後乾燥する。成形した顆粒に成分６を加えて混合し打錠する。１錠０．５２ｇとする。
（処方例１５）飲料
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ０．１
２．ステビア ０．０５
３．リンゴ酸 ５．０
４．アスコルビン酸ナトリウム １．０
５．香料 ０．１
６．精製水 残量
［製造方法］成分１～５を成分６の一部の精製水に撹拌溶解する。次いで、成分６の残りの精製水を加えて混合し、９０℃に加熱して５０ｍＬのガラス瓶に充填する。
処方 含有量(重量％）
１．ハマナスの抽出物（製造例２） ０．１
２．ステビア ０．０５
３．リンゴ酸 ５．０
４．アスコルビン酸ナトリウム １．０
５．香料 ０．１
６．精製水 残量
［製造方法］成分１～５を成分６の一部の精製水に撹拌溶解する。次いで、成分６の残りの精製水を加えて混合し、９０℃に加熱して５０ｍＬのガラス瓶に充填する。
本発明に関わる、ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ及びＣＥＢＰＥ産生促進剤は、皮膚の紫外線抵抗性増強効果を発揮する。従って、紫外線に起因する皮膚疾患の予防や皮膚状態の改善、例えば、皮膚がん、脂漏性角化症、日光皮膚炎等の予防、しみ、しわ、たるみ等の改善等を目的とした医薬品、医薬部外品、化粧品、及び飲食品の製造分野において利用できる。
Claims (3)
- ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするヒスチダーゼ産生促進剤。
- ハマナスの抽出物を含有することを特徴とするＣＥＢＰＥ産生促進剤。
- 請求項１又は２記載の剤を含む、皮膚の紫外線抵抗性増強用組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021131315A JP2023025885A (ja) | 2021-08-11 | 2021-08-11 | ヒスチダーゼ産生促進剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021131315A JP2023025885A (ja) | 2021-08-11 | 2021-08-11 | ヒスチダーゼ産生促進剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023025885A true JP2023025885A (ja) | 2023-02-24 |
Family
ID=85252157
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021131315A Pending JP2023025885A (ja) | 2021-08-11 | 2021-08-11 | ヒスチダーゼ産生促進剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2023025885A (ja) |
-
2021
- 2021-08-11 JP JP2021131315A patent/JP2023025885A/ja active Pending
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