JP2022543773A - 免疫細胞へのｒｎａ干渉剤の送達のための組成物及び方法 - Google Patents

免疫細胞へのｒｎａ干渉剤の送達のための組成物及び方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2022543773A
JP2022543773A JP2022506331A JP2022506331A JP2022543773A JP 2022543773 A JP2022543773 A JP 2022543773A JP 2022506331 A JP2022506331 A JP 2022506331A JP 2022506331 A JP2022506331 A JP 2022506331A JP 2022543773 A JP2022543773 A JP 2022543773A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
compound
lipid
cells
immune cell
immune
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2022506331A
Other languages
English (en)
Other versions
JPWO2021022173A5 (ja
Inventor
イー－チュン ファン、エリック
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ModernaTx Inc
Original Assignee
ModernaTx Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ModernaTx Inc filed Critical ModernaTx Inc
Publication of JP2022543773A publication Critical patent/JP2022543773A/ja
Publication of JPWO2021022173A5 publication Critical patent/JPWO2021022173A5/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5176—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本開示は、ｓｉＲＮＡなどのＲＮＡ干渉剤を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）、及びそれらを免疫細胞に送達する方法を特徴とする。組成物及び方法は、ＬＮＰが送達される免疫細胞の活性を調節するために、例えば、調節またはエフェクター免疫細胞活性を調節するために使用することができる。したがって、本開示は、免疫応答を調節するため、例えば、がん及び感染症などにおいて免疫応答を刺激するため、または自己免疫及び炎症性障害などにおいて免疫応答を阻害するための組成物及び方法を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年７月３１日に出願された米国仮特許出願第６２／８８１２７９号の利益を主張し、この出願の内容は、その全体が参照により組み込まれる。
免疫応答を調節する能力は、がん及び感染症の治療における免疫応答の上方調節、ならびに自己免疫疾患、アレルギー及び炎症反応の治療における免疫応答の下方調節、ならびに臓器移植拒絶の予防及び移植片対宿主病の阻害を含む、様々な臨床状況において有益である。異常な免疫応答に関与する生物学的経路及び／または分子の機能を調節するためのいくつかの治療ツールが存在する。これらのツールには、例えば、小分子、サイトカイン、ステロイド、及び治療用抗体が含まれる。しかしながら、このような薬剤の免疫調節効果を制御することは、特に長期的な全身投与中には困難であり得る。例えば、多くの免疫抑制性薬物の一般的な副作用は、これらの薬物の大部分が非選択的に作用し、感染症に対する感受性の増加及びがん免疫監視の低下をもたらすため、免疫不全である。加えて、免疫刺激薬の一般的な副作用は、望ましくない自己免疫または炎症作用であり得る。
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路は、治療上の利益のためなど、細胞活性を調節する手段として遺伝子発現を調節するための経路としても探索されている。例えば、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）などのＲＮＡ干渉剤を使用して、ｍＲＮＡの翻訳を防止し、それによって目的の標的タンパク質の発現をノックダウンすることができる。しかしながら、ｓｉＲＮＡの効果的な細胞内送達を達成することは依然として困難であり、無効な送達は、ｓｉＲＮＡの分解及び／または望ましくない非特異的効果をもたらす。
免疫細胞活性を調節し、それによって免疫応答を調節する追加の有効な薬剤が、当該技術分野で必要とされている。
本開示は、免疫細胞活性を調節する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を含むＲＮＡ干渉剤を含む、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、ＲＮＡ干渉剤を免疫細胞に効果的に送達することができる、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を提供する。ｓｉＲＮＡは、それが送達される免疫細胞の活性を上方調節または下方調節し、それによって免疫応答を調節することができる。様々な実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、制御性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、Ｔｈ７細胞、エフェクターＴ細胞）、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、またはマクロファージであり得る。
一実施形態では、脂質ナノ粒子は、カチオン性及び／またはイオン性脂質を含む。一実施形態では、ＬＮＰは、ステロールまたは他の構造的脂質（例えば、フィトステロール、もしくはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせ）を含む。一実施形態では、脂質ナノ粒子は、免疫細胞送達強化脂質を含み、この免疫細胞送達強化脂質は、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）の免疫細胞への送達を促進する。
したがって、一態様では、本開示は、免疫細胞への送達が増強された免疫療法の方法で使用するための脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、
ＬＮＰが、
（ｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉｉ）免疫細胞への送達のためのＲＮＡ干渉剤と、を含み、
（ｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質、及び／または（ｉｉ）イオン性脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞へのＬＮＰの送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
増強された送達が、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰに対する、当該ＬＮＰの特徴である、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）に関する。
一実施形態では、脂質ナノ粒子は、
（ｉｖ）非カチオン性ヘルパー脂質もしくはリン脂質、及び／または
（ｖ）ＰＥＧ脂質、をさらに含む。
一実施形態では、ステロールまたは他の構造的脂質は、フィトステロールもしくはコレステロール、またはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせである。一実施形態では、ステロールまたは他の構造的脂質は、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるフィトステロールを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑに結合し、及び／または当該脂質を含むＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進し、及び／または免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑ結合ＬＮＰの免疫細胞への取り込みを増加させる。
一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞内の転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、サイトカインまたはケモカインなどの免疫細胞内の可溶性タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、細胞内アダプタータンパク質または細胞内シグナル伝達分子などの、免疫細胞内の細胞内タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞上の受容体などの膜結合タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。
一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞またはＢ細胞などのリンパ球である。他の実施形態では、免疫細胞は、例えば、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはマクロファージであり得る。
一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ＦｏｘＰ３ ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡであり、免疫細胞は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ＲＯＲｃ ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡであり、免疫細胞は、Ｔｈ１７細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ＩＬ－１７ａ ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡであり、免疫細胞は、Ｔｈ１７細胞である。
一実施形態では、免疫細胞へのＬＮＰの送達は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔヘルパー細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｅｆｆ細胞）、またはＢ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞もしくはマクロファージの活性化または活性の調節など、免疫細胞の活性化または活性の調節をもたらす。
別の態様では、本開示は、本開示の脂質ナノ粒子と、薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と、を含む、薬学的組成物に関する。
前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示は、脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体、または薬学的組成物を含む容器と、個体における免疫応答を調節するための脂質ナノ粒子または薬学的組成物の投与に関する説明書を含む添付文書と、を含む、キットを提供する。いくつかの態様では、添付文書は、脂質ナノ粒子または薬学的組成物の単独投与、または個体における免疫応答を調節するための別の免疫調節剤及び任意の薬学的に許容される担体を含む組成物と組み合わせた投与に関する説明書をさらに含む。
前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示は、個体における免疫応答を調節するための薬剤の製造における、本開示の脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体の使用であって、薬剤が、脂質ナノ粒子と、任意の薬学的に許容される担体と、を含み、治療が、薬剤及び任意の薬学的に許容される担体の投与を含む、使用を提供する。
別の態様では、本開示は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）にＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を送達するためのインビトロ方法であって、免疫細胞を、免疫細胞送達強化脂質を含む本開示のＬＮＰと接触させることを含む、インビトロ方法を提供する。一実施形態では、本方法は、免疫細胞の活性化または活性の調節をもたらす。
別の態様では、本開示は、対象における免疫応答を調節するための方法であって、それを必要とする対象において免疫応答が調節されるように、本開示の脂質ナノ粒子またはその薬学的組成物をその対象に投与することを含む、方法に関する。一実施形態では、免疫応答を調節することは、対象における免疫応答を刺激することを含む。別の実施形態では、免疫応答を調節することは、対象における免疫応答を阻害することを含む。一態様では、対象における免疫応答を調節することは、サイトカイン産生を調節することを含む。別の態様では、対象における免疫応答を調節することは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞またはＢ細胞）の増殖を調節することを含む。別の態様では、対象における免疫応答を調節することは、免疫細胞の少なくとも１つのエフェクター機能を調節することを含む。別の態様では、対象における免疫応答を調節することは、免疫グロブリン産生（例えば、抗原特異的抗体産生）を調節することを含む。
前述のまたは関連する態様のうちのいずれかでは、本開示は、対象、例えば、対象における免疫応答を調節することから利益を受けるであろう疾患または状態を有する対象を治療するための方法を提供する。治療方法は、それを必要とする対象に、前述のもしくは関連する免疫調節治療組成物のうちのいずれか、または前述のもしくは関連する脂質ナノ粒子担体のうちのいずれかを投与することを含む。いくつかの態様では、免疫調節治療組成物または脂質ナノ粒子担体は、別の治療剤（例えば、別の免疫調節剤）と組み合わせて投与される。
一実施形態では、投与されるナノ粒子は、例えば、対象ががんを有する場合、対象における免疫応答の刺激をもたらす。治療することができるがんの種類の非限定的な例を本明細書に記載する。免疫刺激方法の別の実施形態では、対象は、ウイルス、細菌、真菌、酵母または寄生性病原体によって媒介される疾患などの感染症を有する。免疫刺激方法の別の実施形態では、対象は、ワクチンを投与されているか、または投与された対象であり、この方法は、ワクチンに対する免疫応答を増強するために使用される。
一実施形態では、投与されたナノ粒子は、例えば、対象が自己免疫疾患を有するか、自己免疫疾患を有する疑いがあるか、または自己免疫疾患を発症するリスクがある場合、対象における免疫応答の阻害をもたらす。治療することができる自己免疫疾患の種類の非限定的な例を本明細書に記載する。免疫抑制方法の別の実施形態では、対象は、アレルギー性障害を有する。免疫抑制方法の別の実施形態では、対象は、炎症反応を有する。免疫抑制方法の別の実施形態では、対象は、移植レシピエント（例えば、ＧＶＨＤに罹患している対象を含む、固形臓器移植または骨髄移植のレシピエント）である。免疫抑制方法の別の実施形態では、対象は、免疫療法（例えば、養子Ｔ細胞療法）を受けており、この方法は、免疫療法によって対象において刺激されている免疫応答を下方調節するために使用される。
別の態様では、本開示は、対象におけるＴ細胞応答を調節する方法であって、Ｔ細胞応答が対象において調節されるように、本開示の脂質ナノ粒子組成物及び任意の薬学的に許容される担体を対象に投与することを含む、方法を提供する。一実施形態では、Ｔ細胞応答は、対象において刺激される。一実施形態では、Ｔ細胞応答は、対象において阻害される。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、Ｆｏｘｐ３転写因子またはＲＯＲ転写因子などの転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、ＩＬ－１７ａなどのサイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする。
別の態様では、本開示は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含む、免疫細胞送達脂質ナノ粒子に関する。
別の態様では、本開示は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含む、免疫細胞送達脂質ナノ粒子に関する。
さらに別の態様では、本開示は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質、または（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質もしくはリン脂質、または（ｖ）ＰＥＧ脂質のうちの１つ以上が、Ｃ１ｑ結合脂質を欠く脂質ナノ粒子と比較して、Ｃ１ｑに結合する、及び／またはＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進するＣ１ｑ結合脂質である、免疫細胞送達脂質ナノ粒子に関する。
一実施形態では、増強された送達は、免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質ナノ粒子に対するものである。一実施形態では、増強された送達は、好適な対照に対するものである。
一実施形態では、薬剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、薬剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する可溶性タンパク質（例えば、サイトカイン）の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する細胞内タンパク質（例えば、転写因子）の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する膜貫通タンパク質の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫機能を増強する。一実施形態では、薬剤は、免疫機能を阻害する。
一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｂ細胞である。他の実施形態では、免疫細胞は、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはマクロファージである。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、フィトステロール、またはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む。一実施形態では、フィトステロールは、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール
Figure 2022543773000001
またはその塩もしくはエステルである。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールまたはその塩と、を含む。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトスタノールである。一実施形態では、フィトステロールは、カンペステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、ブラシカステロールである。
一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール、及びスチグマステロール、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、スチグマステロールである。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールと、を含み、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、ステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール－ｄ７、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される。一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールと、を含み、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、ステロールまたはその塩もしくはエステルは、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、コレステロールと、フィトステロールと、を含み、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約１％～５０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約１０％～４０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約２０％～３０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約３０％である。
免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、イオン性脂質は、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩＩｄ）、（Ｉ ＩＸ）、（Ｉ ＩＸａ１）、（Ｉ ＩＸａ２）、（Ｉ ＩＸａ３）、（Ｉ ＩＸａ４）、（Ｉ ＩＸａ５）、（Ｉ ＩＸａ６）、（Ｉ ＩＸａ７）、または（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかの化合物を含む。一実施形態では、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１１３、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－２４４、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３０９、化合物Ｉ－３１７、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－３２２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－３３１、化合物Ｉ－３３２、化合物Ｉ－３４７、化合物Ｉ－３４８、化合物Ｉ－３４９、化合物Ｉ－３５０、化合物Ｉ－３５２及び化合物Ｉ－Ｍからなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１及び化合物Ｉ－１８１からなる群から選択される化合物を含む。
一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ細胞、またはＴｈ１７細胞などのＴｅｆｆ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、イオン性脂質は、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物を含む。
一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、及び化合物Ｉ－２４４からなる群から選択される化合物を含む。
一実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣ、化合物Ｈ－４０９、化合物Ｈ－４１８、化合物Ｈ－４２０、化合物Ｈ－４２１、及び化合物Ｈ－４２２からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、リン脂質は、ＤＳＰＣである。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質はＤＳＰＣである。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質はＤＭＰＥである。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質は化合物Ｈ－４０９である。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、ＤＯＰＣである。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、ＤＭＰＥである。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、化合物Ｈ－４０９である。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ＰＥＧ脂質を含む。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、化合物Ｐ－４１５、化合物Ｐ－４１６、化合物Ｐ－４１７、化合物Ｐ－４１９、化合物Ｐ－４２０、化合物Ｐ－４２３、化合物Ｐ－４２４、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１、化合物Ｐ－Ｌ２、化合物Ｐ－Ｌ３、化合物Ｐ－Ｌ４、化合物Ｐ－Ｌ６、化合物Ｐ－Ｌ８、化合物Ｐ－Ｌ９、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ２２、化合物Ｐ－Ｌ２３、及び化合物Ｐ－Ｌ２５からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、ＰＥＧ脂質は、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ１、及び化合物Ｐ－Ｌ２からなる群から選択される化合物を含む。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、モル％のステロールまたは他の構造的脂質は、１８．５％のフィトステロールであり、構造的脂質の総モル％は、３８．５％である。免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、モル％のステロールまたは他の構造的脂質は、２８．５％のフィトステロールであり、構造的脂質の総モル％は、３８．５％である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ細胞、またはＴｈ１７細胞などのＴｅｆｆ細胞）である。
一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、
（ｉ）化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物である約５０モル％のイオン性脂質と、
（ｉｉ）ＤＳＰＣである約１０モル％のリン脂質と、
（ｉｉｉ）β－シトステロール及びコレステロールから選択される約３８．５モル％の構造的脂質と、
（ｉｖ）化合物Ｐ－４２８である約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、少なくとも１つの修飾された核酸塩基、ヌクレオシド及び／またはヌクレオチドを含む。
免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、Ｆｏｘｐ３をコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｆｏｘｐ３、ＩＲＦ４、エストロゲン受容体１、ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ１０、ＨＤＡＣ１１及びＡＥＰからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍｉＲ－１４６ｂまたは抗ｍｉＲ－１４６ｂを標的とする。
免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔｅｆｆ細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、Ｔｅｆｆ細胞は、Ｔｈ１７細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ＲＯＲγｔまたはＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ＲＯＲγｔ、ＩＬ－１７ａ、Ｔｂｅｔ、Ｋｖ１．３、ＫＣＡ３．１及びＫＣＮＮＡからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。
別の態様では、本開示は、免疫細胞に薬剤を送達する方法であって、免疫細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、薬剤が免疫細胞に送達される、方法に関する。
別の態様では、本開示は、Ｔ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｔ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、Ｔ細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、Ｔ細胞活性化または活性が調節される、方法に関する。
一実施形態では、Ｔ細胞は、Ｔｒｅｇ細胞である。一実施形態では、Ｔ細胞は、Ｔｅｆｆ細胞である。一実施形態では、Ｔｅｆｆ細胞は、Ｔｈ１７細胞である。
別の態様では、本開示は、タンパク質に対する免疫応答を増加させる方法であって、免疫細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、タンパク質に対する免疫応答が増加する、方法に関する。
別の態様では、本開示は、がん抗原に対するＴ細胞応答を増加させる方法であって、Ｔ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、がん抗原に対するＴ細胞応答が増加する、方法に関する。
別の態様では、本開示は、対象における免疫応答を調節する方法であって、対象に免疫細胞送達脂質ナノ粒子を投与することを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、免疫応答が対象において調節される、方法に関する。
別の態様では、本開示は、Ｂ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｂ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
それにより、Ｂ細胞活性化または活性が調節される、方法に関する。
本方法の一実施形態では、増強された送達は、免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質ナノ粒子に対するものである。一実施形態では、増強された送達は、好適な対照に対するものである。
本方法の一実施形態では、薬剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、薬剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する可溶性タンパク質（例えば、サイトカイン）の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する細胞内タンパク質（例えば、転写因子）の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫細胞活性を調節する膜貫通タンパク質の発現を阻害する。一実施形態では、薬剤は、免疫機能を増強する。一実施形態では、薬剤は、免疫機能を阻害する。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｂ細胞である。他の実施形態では、免疫細胞は、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはマクロファージである。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、フィトステロール、またはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む。一実施形態では、フィトステロールは、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール
Figure 2022543773000002
またはその塩もしくはエステルである。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールまたはその塩と、を含む。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトスタノールである。一実施形態では、フィトステロールは、カンペステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、ブラシカステロールである。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール、及びスチグマステロール、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロールである。一実施形態では、フィトステロールは、スチグマステロールである。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールと、を含み、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、ステロールまたはその塩もしくはエステルは、β－シトステロール－ｄ７、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される。本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールと、を含み、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、ステロールまたはその塩もしくはエステルは、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、コレステロールと、フィトステロールと、を含み、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約１％～５０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約１０％～４０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約２０％～３０％である。一実施形態では、コレステロールのモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約３０％である。
本方法の一実施形態では、イオン性脂質は、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩＩｄ）、（Ｉ ＩＸ）、（Ｉ ＩＸａ１）、（Ｉ ＩＸａ２）、（Ｉ ＩＸａ３）、（Ｉ ＩＸａ４）、（Ｉ ＩＸａ５）、（Ｉ ＩＸａ６）、（Ｉ ＩＸａ７）、または（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかの化合物を含む。一実施形態では、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１１３、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－２４４、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３０９、化合物Ｉ－３１７、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－３２２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－３３１、化合物Ｉ－３３２、化合物Ｉ－３４７、化合物Ｉ－３４８、化合物Ｉ－３４９、化合物Ｉ－３５０、化合物Ｉ－３５２及び化合物Ｉ－Ｍからなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１及び化合物Ｉ－１８１からなる群から選択される化合物を含む。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ細胞、またはＴｈ１７細胞などのＴｅｆｆ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、イオン性脂質は、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物を含む。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、イオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、及び化合物Ｉ－２４４からなる群から選択される化合物を含む。
本方法の一実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣ、化合物Ｈ－４０９、化合物Ｈ－４１８、化合物Ｈ－４２０、化合物Ｈ－４２１、及び化合物Ｈ－４２２からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、リン脂質は、ＤＳＰＣである。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質はＤＳＰＣである。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質はＤＭＰＥである。一実施形態では、免疫細胞はＴ細胞であり、リン脂質は化合物Ｈ－４０９である。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質は、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、ＤＯＰＣである。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、ＤＭＰＥである。一実施形態では、免疫細胞は、単球または骨髄細胞であり、リン脂質は、化合物Ｈ－４０９である。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、ＰＥＧ脂質を含む。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、化合物Ｐ－４１５、化合物Ｐ－４１６、化合物Ｐ－４１７、化合物Ｐ－４１９、化合物Ｐ－４２０、化合物Ｐ－４２３、化合物Ｐ－４２４、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１、化合物Ｐ－Ｌ２、化合物Ｐ－Ｌ３、化合物Ｐ－Ｌ４、化合物Ｐ－Ｌ６、化合物Ｐ－Ｌ８、化合物Ｐ－Ｌ９、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ２２、化合物Ｐ－Ｌ２３、及び化合物Ｐ－Ｌ２５からなる群から選択される化合物を含む。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、ＰＥＧ脂質は、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ１、及び化合物Ｐ－Ｌ２からなる群から選択される化合物を含む。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、モル％のステロールまたは他の構造的脂質は、１８．５％のフィトステロールであり、構造的脂質の総モル％は、３８．５％である。免疫細胞送達脂質ナノ粒子の一実施形態では、モル％のステロールまたは他の構造的脂質は、２８．５％のフィトステロールであり、構造的脂質の総モル％は、３８．５％である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｒｅｇ細胞、またはＴｈ１７細胞などのＴｅｆｆ細胞）である。
本方法の一実施形態では、免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、
（ｉ）化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物である約５０モル％のイオン性脂質と、
（ｉｉ）ＤＳＰＣである約１０モル％のリン脂質と、
（ｉｉｉ）β－シトステロール及びコレステロールから選択される約３８．５モル％の構造的脂質と、
（ｉｖ）化合物Ｐ－４２８である約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
本方法の一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、少なくとも１つの修飾された核酸塩基、ヌクレオシド及び／またはヌクレオチドを含む。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、Ｆｏｘｐ３をコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｆｏｘｐ３、ＩＲＦ４、エストロゲン受容体１、ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ１０、ＨＤＡＣ１１及びＡＥＰからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍｉＲ－１４６ｂまたは抗ｍｉＲ－１４６ｂを標的とする。
本方法の一実施形態では、免疫細胞は、Ｔｅｆｆ細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、Ｔｅｆｆ細胞は、Ｔｈ１７細胞である。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、ＲＯＲγｔまたはＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ＲＯＲγｔ、ＩＬ－１７ａ、Ｔｂｅｔ、Ｋｖ１．３、ＫＣＡ３．１及びＫＣＮＮＡからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする。
Ａ～Ｃは、ＬＮＰに配合されたＦｏｘｐ３に対する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）構築物の３つの異なる商業的供給源を使用したインビトロ分化マウス制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）におけるＦｏｘｐ３発現の変化を示すヒストグラムである。Ａ～Ｂは、２４時間（Ａ）または４８時間（Ｂ）のいずれかについて、ＬＮＰ封入対照またはＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡとともにインキュベートした分化Ｔｒｅｇの結果を示す。Ｃは、ＬＮＰ封入対照またはＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡで２４時間インキュベートし、次いで洗浄し、２４時間培地で更新した分化Ｔｒｅｇの結果を示す。グラフは、生ＣＤ４＋Ｔ細胞集団内のＦｏｘｐ３の平均蛍光強度（ＭＦＩ）を示す。 Ａ～Ｃは、Ｖｅｎｄｏｒ １からの単一のｓｉＲＮＡ構築物をＦｏｘｐ３に対して封入するＬＮＰとともにインビトロでインキュベートした、培養マウス脾細胞（Ａ）、分化マウスＴｒｅｇ（Ｂ）、またはエクスビボマウスＴｒｅｇ（Ｃ）におけるＦｏｘｐ３発現の変化を示すヒストグラムである。脾細胞を、１０μｇ／ｍｌまたは１μｇ／ｍｌのｓｉＲＮＡ（それぞれ、１０×及び１×、Ａ）で２４時間培養した。分化したＴｒｅｇ及びエクスビボＴｒｅｇを、１μｇ／ｍｌのｓｉＲＮＡで２４時間培養した（Ｂ及びＣ）。対照＝スクランブルｓｉＲＮＡ。 Ａ～Ｂは、Ｖｅｎｄｏｒ １からの単一のｓｉＲＮＡ構築物をＦｏｘｐ３（Ａ）または対照ｓｉＲＮＡ（Ｂ）に対して封入するＬＮＰの５倍希釈による、分化したマウスＴｒｅｇにおけるＦｏｘｐ３発現のインビトロでの変化を示すヒストグラムである。 Ａ～Ｂは、Ｖｅｎｄｏｒ １からの単一のｓｉＲＮＡ構築物をＦｏｘｐ３に対して封入するＬＮＰの５倍希釈によるマウスＴｒｅｇ分化発現の破壊を示すヒストグラムである。ナイーブマウスＣＤ４＋Ｔ細胞を、６日間（Ａ）または７日間（Ｂ）Ｔｒｅｇ分化条件で培養した。示されるｓｉＲＮＡは、分化の開始時に培養物に添加された。 対照またはＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを封入するＬＮＰとともにインキュベートした分化Ｔｒｅｇで培養したエフェクターＣＤ４＋ＣＤ２５－Ｔ細胞（Ｔｅｆｆ）の増殖を示すグラフである。ｘ軸は、Ｔｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比を示す。ｙ軸は、増殖したＴｅｆｆ細胞のパーセンテージを示す。点線は、刺激のない増殖の量を表す。 Ａ～Ｂは、ＲＡＲ関連オーファンタンパク質受容体Ｃ（ＲＯＲｃ）、インターロイキン－１７ａ（ＩＬ－１７ａ）、またはスクランブルｓｉＲＮＡに対して、ｓｉＲＮＡプールを封入するＬＮＰの連続希釈液で培養した分化マウスＴｈ１７細胞のグラフである。分化したＴｈ１７細胞を、ｓｉＲＮＡで２４時間（Ａ）または４８時間（Ｂ）培養し、次いでホルボール１２－ミリステート１３－アセテート（ＰＭＡ）、イオノマイシン、及びブレフェルジンＡで６時間刺激して、細胞内サイトカインシグナルを増幅した。表されるのは、生ＣＤ４＋Ｔ細胞集団内のＩＬ－１７ａのＭＦＩである。点線は、ｓｉＲＮＡを受けなかった細胞のＩＬ－１７ａ ＭＦＩを表す。
本開示は、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を封入する脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、免疫細胞へのＬＮＰの送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、それにより、ＲＮＡ干渉剤を免疫細胞に送達する、ＬＮＰを提供する。本開示は、免疫細胞にＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を送達するためにインビトロ及びインビボでＬＮＰを使用する方法をさらに提供する。本開示は、本開示のＬＮＰを使用して、免疫細胞活性を調節し、それによって免疫応答を調節する方法をさらに提供する。
実施例で実証されるように、ｓｉＲＮＡ（単一の構築物またはプールされた）は、免疫細胞送達強化脂質を含むＬＮＰに封入されており、これらの製剤は、ｓｉＲＮＡが標的とするｍＲＮＡが免疫細胞内で下方調節されるように、ｓｉＲＮＡを免疫細胞（例えば、脾細胞、Ｔｒｅｇ細胞）に送達することが実証されている（例えば、実施例１～３及び６を参照されたい）。さらに、免疫細胞へのＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡの送達により、免疫細胞の分化が調節されることが実証された（実施例４を参照）。さらに、免疫細胞へのＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡの送達により、免疫細胞の機能活性が調節されることが実証された（実施例５を参照）。
ＲＮＡ干渉剤に加えて、本開示のＬＮＰは、典型的には、ステロールまたは他の構造的脂質と、イオン性脂質と、を含み、ステロール／構造的脂質及びイオン性脂質のうちのいずれかまたは両方は、ＬＮＰの免疫細胞への送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、増強された送達は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰに対する当該ＬＮＰの特徴である。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、非カチオン性ヘルパー脂質、またはリン脂質及び／またはＰＥＧ脂質をさらに含むことができる。
ＬＮＰの様々な成分、及びＬＮＰの使用方法は、以下のサブセクションで詳細に説明される。
ＲＮＡ干渉剤
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、標的としたｍＲＮＡ分子を中和することによってＲＮＡ分子が遺伝子発現または翻訳を阻害する生物学的プロセスを指す。ＲＮＡｉは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）によって制御され、細胞の細胞質内の短い二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓＲＮＡ）によって開始される遺伝子サイレンシングプロセスである。小さいリボ核酸分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及びマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）のうちの２種類は、ＲＮＡ干渉の中心である。ＲＮＡｉは天然の細胞プロセスであるが、ＲＮＡｉの成分はまた、インビトロ及びインビボで目的の標的遺伝子／ｍＲＮＡの発現を阻害するために合成及び利用されている。
自然なプロセスとして、ｄｓＲＮＡは、ｄｓＲＮＡ及び短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）と結合してそれらを切断し、２０～２５塩基対の二本鎖断片を産生するリボヌクレアーゼタンパク質Ｄｉｃｅｒを活性化することによって、ＲＮＡｉを開始する。これらの短い二本鎖断片は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる。次いで、これらのｓｉＲＮＡは、ＲＩＳＣ－ローディング複合体（ＲＬＣ）によって、一本鎖に分離され、活性ＲＩＳＣに組み込まれる。ＲＩＳＣに組み込まれた後、ｓｉＲＮＡは、標的ｍＲＮＡに塩基対を形成し、それを切断することにより、それが翻訳テンプレートとして使用されることを防止する。
広義のＲＮＡｉの現象は、ｍｉＲＮＡの遺伝子サイレンシング効果も含む。マイクロＲＮＡは、例えば、発生中に遺伝子発現を調節するのに役立つ、遺伝子コードされた非コードＲＮＡである。天然に存在する成熟ｍｉＲＮＡは、外因性ｄｓＲＮＡから産生されるｓｉＲＮＡに構造的に類似しているが、成熟に達する前に、ｍｉＲＮＡは広範囲な転写後修飾を受け、Ｄｉｃｅｒによって切断されて、ＲＩＳＣ複合体に組み込まれ得る成熟ｍｉＲＮＡ分子を産生するプレｍｉＲＮＡのｄｓＲＮＡ部分を含む。
したがって、本開示のＬＮＰによって封入されたＲＮＡ干渉剤は典型的にはｓｉＲＮＡであるが、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）プロセスを媒介するかまたはそれに関与する任意の薬剤は、ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡを含むＲＮＡ干渉剤として使用することができ、これらの各々は以下にさらに詳細に記載される。
ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡを含むＲＮＡ干渉剤は、カスタム設計及び合成を含む当該技術分野において市販されている（例えば、Ｄｈａｒｍａｃｏｎ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、及び／または当該技術分野において十分に確立された標準的な方法によって合成され得る。加えて、ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡを含むＲＮＡ干渉剤は、当該技術分野に記載されているように、それらの特性（例えば、治療特性）を増強するように化学的に修飾され得る。例えば、当該技術分野において知られている化学修飾ｓｉＲＮＡは、ウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｃｒｄｄ．ｏｓｄｄ．ｎｅｔ／ｓｅｒｖｅｒｓ／ｓｉｒｎａｍｏｄ／のデータベースに詳細に記載されている。実験的に検証された化学修飾ｓｉＲＮＡのＳｉＲＮＡｍｏｄデータベースは、Ｄａｒ，Ｓ．Ａ．ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ６：２００３１にも記載されている。ＲＮＡ干渉剤の合成及び修飾は、以下にさらに詳細に記載される。
低分子干渉ＲＮＡ
短干渉ＲＮＡまたはサイレンシングＲＮＡとも称される低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は、ＲＮＡｉ経路内で動作して、相補ヌクレオチド配列を有する特定の標的配列の発現を妨げる二本鎖ＲＮＡ分子のクラスであり、典型的には、２０～２５塩基対の長さである。ｓｉＲＮＡは、転写後にｍＲＮＡを分解することによって遺伝子発現を阻害し、それによって翻訳を防止する。本明細書で使用する場合、「ｓｉＲＮＡ」という用語は、限定されないが、ショートマー、ロングマー、２’５’異性体、及びＤｉｃｅｒ基質ＲＮＡを含む、当該技術分野で知られているすべての形態のｓｉＲＮＡを包含する。天然に存在する及び人工的に合成されたｓｉＲＮＡ、ならびにそれらの療法における使用（例えば、ナノ粒子によって送達される）は、当該技術分野において記載されている（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ ａｎｄ Ｂａｌｃｏｍｂｅ（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８６：９５０－９５２；Ｅｌｂａｓｈｉｒ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１１：４９４－４９８；Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐ．１９：３６７－３７３；Ｗｉｔｔｒｕｐ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．１６：５４３－５５２を参照されたい）。
したがって、一実施形態では、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰと会合／によって封入されたＲＮＡ干渉剤は、ｓｉＲＮＡである。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのプールは、脂質系組成物と会合／によって封入される。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのプールは、同じ遺伝子を標的とする２つ以上のｓｉＲＮＡである。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのプールは、同じ遺伝子を標的とする２つ、３つ、または４つの異なるｓｉＲＮＡである。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのプールは、個々のｓｉＲＮＡと比較して、標的遺伝子の発現をさらに低下させる。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのプールは、個々のｓｉＲＮＡと比較して、標的遺伝子の発現を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以上低下させる。
一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、リンパ球で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、Ｔ細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、Ｂ細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、ＮＫ細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、樹状細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、骨髄細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、マクロファージで発現される標的配列の発現を阻害する。
別の実施形態において、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における転写因子（例えば、ＦｏｘＰ３、ＲＯＲｃ、Ｔ－ｂｅｔ、ＲｏＲγｔ、ＳＴＡＴ３、ＡｈＲ、ＮＦｋＢ）の発現を阻害する。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における細胞質タンパク質（例えば、Ｍｃｌ－１、ＨＤＡＣ１０ヒストンデアセチラーゼ、アスパラギニルエンドペプチダーゼ（ＡＥＰ）、ＳＯＣＳ１、ＳＯＣＳ２、ＰＰＡＲｇ、ＧＩＬＺ、ＡＭＫａ１、ＡＭＫａ２、ＳＨＰ－１、ＳＨＰ－２、ＣＡＭＫＫ２、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、ＴＤＯ）の発現を阻害する。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における膜貫通タンパク質（例えば、抗体、Ｔ細胞受容体、免疫チェックポイント阻害剤などの細胞表面受容体）の発現を阻害する。別の実施形態において、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における分泌タンパク質（例えば、サイトカイン、ケモカイン）の発現を阻害する。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における細胞内シグナル伝達タンパク質の発現を阻害する。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における酵素（例えば、ＡＭＰＫａ１、ＡＭＰＫａ２、ＨＤＡＣ１０、ＡＥＰ、ＳＨＰ－１、ＳＨＰ－２、ＣＡＭＫＫ２、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、ＴＤＯ）の発現を阻害する。
マイクロＲＮＡ
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、ＲＮＡサイレンシング及び遺伝子発現の転写後調節において機能する、低分子非コードＲＮＡ分子（典型的には、約２２ヌクレオチドを含有する）である。ｍｉＲＮＡは、ｍＲＮＡ分子内の相補配列との塩基対合を介して遺伝子発現を阻害し、ｍＲＮＡの切断、そのポリＡ尾部の短縮によるｍＲＮＡの不安定化、及び／またはリボソームによるタンパク質へのｍＲＮＡの翻訳効率の低下をもたらす。ｍＲＮＡ切断に関して、ｍｉＲＮＡと標的ｍＲＮＡ配列との間の完全な相補性を考慮すると、タンパク質Ａｇｏ２がｍＲＮＡを切断し、直接的なｍＲＮＡ分解をもたらすことができることが実証されている。ｍｉＲＮＡ及びそれらの機能は、当該技術分野で記載されている（例えば、Ａｍｂｒｏｓ（２００４）Ｎａｔｕｒｅ ４３１：３５０－３５５；Ｂａｒｔｅｌ（２００４）Ｃｅｌｌ １１６：２８１－２９７；Ｂａｒｔｅｌ（２００９）Ｃｅｌｌ １３６：２１５－２３３；Ｆａｂｉａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．７９：３５１－３７９を参照されたい）。
したがって、一実施形態では、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰと会合／によって封入されたＲＮＡ干渉剤は、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、リンパ球で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、Ｔ細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、Ｂ細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、樹状細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、骨髄細胞で発現される標的配列の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、マクロファージで発現される標的配列の発現を阻害する。
別の実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における転写因子（例えば、ＦｏｘＰ３、ＲＯＲｃ、Ｔ－ｂｅｔ、ＲｏＲγｔ、ＳＴＡＴ３、ＡｈＲ、ＮＦｋＢ）の発現を阻害する。一実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における細胞質タンパク質（例えば、Ｍｃｌ－１、ＨＤＡＣ１０ヒストンデアセチラーゼ、アスパラギニルエンドペプチダーゼ（ＡＥＰ）、ＳＯＣＳ１、ＳＯＣＳ２、ＰＰＡＲｇ、ＧＩＬＺ、ＡＭＫａ１、ＡＭＫａ２、ＳＨＰ－１、ＳＨＰ－２、ＣＡＭＫＫ２、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、ＴＤＯ）の発現を阻害する。別の実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における膜貫通タンパク質（例えば、抗体、Ｔ細胞受容体、免疫チェックポイント阻害剤などの細胞表面受容体）の発現を阻害する。別の実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における分泌タンパク質（例えば、サイトカイン、ケモカイン）の発現を阻害する。別の実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における細胞内シグナル伝達タンパク質の発現を阻害する。別の実施形態では、ｍｉＲＮＡは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における酵素（例えば、ＡＭＰＫａ１、ＡＭＰＫａ２、ＨＤＡＣ１０、ＡＥＰ、ＳＨＰ－１、ＳＨＰ－２、ＣＡＭＫＫ２、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、ＴＤＯ）の発現を阻害する。
免疫細胞活性の調節及び／または免疫応答の調節のために、好適なｍｉＲＮＡの非限定的な例としては、Ｌｅｔ－７ｄ－５ｐ、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１０ｂ、ｍｉＲ－１５、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２０ｂ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－９６、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４６、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１８１ａ及びｍｉＲ－２１０が挙げられる。
例示的な標的ｍＲＮＡ
ＲＮＡ干渉剤が標的とする（例えば、ｓｉＲＮＡによってノックダウンするために標的とする）ｍＲＮＡは、所望の転帰に基づいて選択され得る。本発明のＬＮＰが現在、免疫細胞を標的とすることが見出されていることを考えると、当業者は、免疫細胞に様々な当業者に認識されているＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を送達し、様々な免疫細胞の活性へ、それによって免疫応答を増強または低減することができる。
例えば、一実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔヘルパー細胞（例えばＴｈ１７細胞）、Ｔエフェクター細胞（例えばＣＴＬ）、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、マクロファージなどの免疫応答を自然に刺激するものである。免疫応答を下方調節するために、ｍＲＮＡは、細胞の分化、活性及び／または機能的効果を自然に刺激する細胞内で標的とされ得る。したがって、かかる標的ｍＲＮＡのノックダウンは、細胞の分化、活性及び／または機能的効果を阻害し、それによって免疫応答を阻害する。このタイプのアプローチの非限定的な例は、ＲＡＲ関連オーファン核受容体（ＲＯＲ）転写因子を標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のＴｈ１７細胞への送達である（実施例６を参照）。ＲＯＲ転写因子（ＲＯＲｃ、ＲＯＲγｔ、ＲＯＲαを含む）は、細胞内の様々な遺伝子の発現を調節することにより、Ｔｈ１７細胞の分化に重要な役割を果たすことが実証されている（例えば、Ｈｕｈ，Ｊ．Ｒ ａｎｄ Ｌｉｔｔｍａｎ，Ｄ．Ｒ．（２０１２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４２：２２３２－２２３７；Ｃａｓｔｒｏ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．（２０１７）ＰＬｏＳＯｎｅ １２（８）：ｅ０１８０１８６８を参照されたい）。さらに、Ｔｈ１７細胞は、いくつかの炎症誘発性サイトカインを発現することが知られており、これらの細胞の作用は、複数のヒト自己免疫疾患に関連付けられている。したがって、Ｔｈ１７細胞内のＲＯＲを標的とすることにより、例えば、自己免疫障害を有する対象において、細胞の活性を下方調節し、それによって免疫応答を下方調節することができる。同様に、このタイプのアプローチの別の例は、サイトカインＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のＴｈ１７細胞への送達である（実施例６を参照）。ＩＬ－１７ａは、Ｔｈ１７細胞によって発現される炎症促進性サイトカインであり、したがって、これらの細胞におけるＩＬ－１７ａを標的とすることにより、例えば、自己免疫障害を有する対象において、細胞の炎症促進活性を下方調節することにより、免疫応答を下方調節することができる。本開示のＲＮＡ干渉剤（ｓｉＲＮＡ）の例示的なｍＲＮＡ標的であるＴヘルパー細胞またはマクロファージなどの免疫細胞によって産生されるさらなる炎症促進性サイトカインとしては、ＩＬ－１（例えば、ＩＬ－１β）、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α及びＧＭ－ＣＳＦが挙げられる。
別の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔヘルパー細胞（例えばＴｈ１７細胞）、Ｔエフェクター細胞（例えばＣＴＬ）、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、マクロファージなどの免疫応答を自然に刺激するものである。免疫応答を（さらに）刺激するために、ｍＲＮＡは、細胞の分化、活性及び／または機能的効果を自然に阻害する細胞内で標的とされ得る。したがって、そのような（負の調節因子）標的ｍＲＮＡのノックダウンは、細胞の分化、活性、及び／または機能的効果を促進し、それによって免疫応答を刺激する。このタイプのアプローチの非限定的な例は、Ｔ細胞内の免疫チェックポイント分子（ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４など）をコードするｍＲＮＡを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のＴ細胞内への送達である。かかる免疫チェックポイント分子は、Ｔ細胞の活性を下方調節する役割を果たす。したがって、かかる（負の調節因子）標的ｍＲＮＡの活性をノックダウンすることによって、Ｔ細胞活性が維持または上方調節され、それによって免疫応答を刺激する。
別の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞またはＢｒｅｇ細胞などの免疫応答を自然に阻害するものである。免疫応答を刺激するために、ｍＲＮＡは、これらの阻害細胞の分化、活性及び／または機能効果を自然に刺激する細胞内で標的とされ得る。したがって、かかる標的ｍＲＮＡのノックダウンは、阻害性細胞の分化、活性及び／または機能的効果を阻害し、それによって免疫応答を刺激する。このタイプのアプローチの非限定的な例は、Ｆｏｘｐ３転写因子を標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のＴｒｅｇ細胞内への送達である（実施例１～５を参照されたい）。Ｆｏｘｐ３は、細胞内の様々な遺伝子の発現を調節することによって、Ｔｒｅｇ細胞の分化及び機能において重要な役割を果たすことが実証されている（例えば、Ｚｈｉｙｕａｎ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：５５８－５６５；Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ，Ｊ．Ａ．（２０１７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８：９７９－９８０を参照されたい）。したがって、Ｔｒｅｇ細胞においてＦｏｘｐ３を標的とすることにより、これらの阻害性細胞の活性は、例えば、がんまたは感染症を有する対象において、下方調節され、それによって免疫応答を刺激することができる。同様に、このタイプのアプローチの別の例は、サイトカインＩＬ－１０をコードするｍＲＮＡを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のＢｒｅｇ細胞内への送達である。免疫応答を抑制するＢｒｅｇ細胞は、少なくとも部分的にサイトカインＩＬ－１０を介して、それらの効果を媒介する。したがって、これらの阻害性Ｂ細胞においてＩＬ－１０を標的とすることにより、これらの細胞の阻害効果は、例えば、がんを有する対象において、下方調節され、それによって免疫応答を刺激することができる。
さらに別の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞またはＢｒｅｇ細胞などの免疫応答を自然に下方調節するものである。免疫応答を（さらに）阻害するために、ｍＲＮＡは、これらの細胞の分化、活性、及び／または機能的効果を自然に阻害するかかる細胞内で標的とされ得る。したがって、そのような（負の調節因子）標的ｍＲＮＡのノックダウンは、これらの阻害性細胞の分化、活性、及び／または機能的効果を促進し、それによって免疫応答を阻害する。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞であり、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｔｒｅｇ抑制機能を阻害する（すなわち、低減する）。非限定的な例としては、Ｆｏｘｐ３を標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）、またはその除去がＴｒｅｇの抑制機能を阻害することが示されているＩＲＦ４などのＦｏｘｐ３と相互作用するタンパク質（例えば、Ｚｈｅｎｇ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｎａｔｕｒｅ ４５８：３５１－３５６を参照されたい）、及びその除去がＴｒｅｇの抑制機能を阻害することも示されているエストロゲン受容体１を標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）（例えば、ＭｃＫａｒｎｓ，Ｓ．（２０１５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９４（Ｓｕｐｐｌ．１）：１８４．２１を参照されたい）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞であり、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｔｒｅｇ抑制機能を増強（すなわち、増加）する。非限定的な例としては、ヒストンデアセチラーゼ６、１０もしくは１１（ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ１０もしくはＨＤＡＣ１１）、またはアスパラギニルエンドペプチダーゼ（ＡＥＰ）を標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞であり、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍｉＲ－１４６ｂなどのｍｉＲＮＡを標的とする。Ｔｒｅｇ中のｍｉＲ－１４６ｂのノックダウンは、Ｔｒｅｇ生存、増殖及び抑制機能を増強することが示されている（例えば、Ｌｕ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｂｌｏｏｄ １２８：１４２４－１４３５を参照されたい）。したがって、ｍｉＲ－１４６ｂをノックダウンするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を使用して、Ｔｒｅｇ抑制機能を増強することができるが、抗ｍｉＲ－１４６ｂをノックダウンするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を使用して、Ｔｒｅｇ抑制機能を阻害することができる。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、Ｔｅｆｆ細胞であり、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｔｅｆｆ調節異常（例えば、Ｔｅｆｆ応答の抑制、Ｔｈ１７細胞のＴｒｅｇ細胞への偏向）を引き起こす。非限定的な例としては、Ｋｖ１．３カリウムチャネル、ＫＣＡ３．１カルシウム活性化カリウムチャネル、ＫＣＮＮ４カルシウム活性化カリウムチャネル、Ｔｂｅｔ転写因子、ＲＯＲγｔ転写因子及びＩＬ－１７ａを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰが送達される免疫細胞は、骨髄細胞であり、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、骨髄細胞活性を調節する。非限定的な例としては、抗ｍｉＲ－３３、ｍｉＲ－９９ａ、Ｃａｍｋ４及びｍｉＲ－１０ｂを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰによって封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍＴＯＲＣ１またはｍＴＯＲＣ２の成分などの、ラパマイシン複合体（ｍＴＯＲＣ）の哺乳類標的の成分を標的とする。例えば、一実施形態では、ＬＮＰによって封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍＴＯＲＣ１の成分であるＲａｐｔｏｒを標的とする。別の実施形態では、ＬＮＰによって封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ｍＴＯＲＣ２の成分であるＲｉｃｔｏｒを標的とする。
ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）によって阻害され、それによって免疫応答を調節（上方調節または下方調節）することができる追加の特異的タンパク質（例えば、サイトカイン、ケモカイン、共刺激分子、動員因子、転写因子、エフェクター分子）は、以下のサブセクションに詳細に記載される。
可溶性標的
一実施形態では、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰと会合／によって封入されたＲＮＡ干渉剤は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における可溶性標的の発現を調節することによって、天然に存在する可溶性標的の活性を調節する。一実施形態では、細胞は、リンパ球である。天然に存在する可溶性標的の非限定的な例には、サイトカイン及びケモカインが含まれる。免疫応答を刺激または阻害する特定の用途に好適なサイトカイン及びケモカインを以下にさらに記載する。
一実施形態では、例えば、がん療法または感染症（例えば、ウイルス、細菌、真菌、原虫、または寄生虫感染症）の治療などの、免疫応答の刺激が望ましい状況で、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰを使用する方法を使用して、免疫細胞の活性化または活性を刺激する（上方調節する、増強する）。別の実施形態では、脂質系組成物、例えばＬＮＰを使用する方法は、例えば、自己免疫疾患、アレルギー及び移植などの、免疫応答の阻害が望ましい状況で、免疫細胞の活性化または活性を阻害する（下方調節する、低減する）ために使用される。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が標的とするｍＲＮＡは、免疫細胞内でのサイトカインの発現レベルがノックダウンされるようなサイトカインである。サイトカインは、免疫系を調節する細胞内シグナル伝達の媒介物質である。免疫細胞の活性化または活性を刺激することができるサイトカインの非限定的な例としては、ＩＬ－１（炎症促進性サイトカイン）、ＩＬ－２（Ｔ細胞分化を促進するＴ細胞成長因子）、ＩＬ－３（骨髄系統細胞の増殖を刺激する）、ＩＬ－４（Ｂ及びＴ細胞増殖及びＢ細胞分化を刺激する）、ＩＬ－５（Ｂ細胞成長を刺激する）、ＩＬ－６（炎症促進性）、ＩＬ－７（リンパ系統細胞の分化を刺激する）、ＩＬ－１２（ナイーブＴ細胞のＴｈ１細胞への分化）、ＩＬ－１３（活性化Ｂ及びＴ細胞増殖及びＢ細胞分化の刺激）、ＩＬ－１５（Ｔ細胞及びＮＫ細胞活性化及び増殖の調節）、ＩＬ－１７（炎症促進性であり、ケモカインを誘導する）、ＩＬ－１８（炎症促進性であり、ＩＦＮ放出を促進する）、ＩＬ－２１（炎症促進性であり、ＮＫ及びＣＴＬ増殖を調節する）、ＩＬ－２３（炎症促進性）、ＴＮＦα（全身炎症を刺激し、腫瘍形成及びウイルス複製を阻害する）、ＴＮＦβ（二次リンパ器官の発達を調節する）、ＩＦＮα（ウイルス感染に対する先天性免疫に関与する）、ＩＦＮβ（ウイルス感染に対する先天性免疫に関与する）、ＩＦＮγ（ウイルス及び他の感染病原体に対する先天性及び適応性免疫に関与する）、ＧＭ－ＣＳＦ（白血球産生を刺激し、抗腫瘍Ｔ細胞を増強する）、Ｇ－ＣＳＦ（白血球産生を刺激する）、及びそれらの組み合わせが含まれる。
一実施形態では、サイトカインは、炎症促進性サイトカインであり、その非限定的な例としては、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２３、ＴＮＦα、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β、及びＩＦＮ－γが挙げられる。炎症促進サイトカインは、炎症応答の刺激が所望される状況で、例えば、がん療法またはウイルス感染における抗腫瘍免疫を増加させるために使用され得る。一実施形態では、サイトカインは、Ｔ細胞活性化を促進する。Ｔ細胞活性化または分化を促進するサイトカインの非限定的な例には、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、及びＩＦＮ－αが含まれる。一実施形態では、サイトカインは、Ｔｈ２応答を促進する。Ｔｈ２応答を促進するサイトカインの非限定的な例には、ＩＬ－４及びＩＬ－１０が含まれる。一実施形態では、サイトカインは、Ｂ細胞の活性化を促進する。Ｂ細胞活性化を促進するサイトカインの非限定的な例には、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３及びＩＦＮ（例えば、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β及びＩＦＮ－γ）が含まれる。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が標的とするｍＲＮＡは、免疫細胞におけるケモカインまたはケモカイン受容体の発現レベルがノックダウンされるようなケモカインまたはケモカイン受容体である。ケモカインは、炎症細胞（顆粒球及び単球／マクロファージを含む）の輸送を制御するとともに、多種多様な免疫細胞（リンパ球、ナチュラルキラー細胞及び樹状細胞を含む）の移動を調節する物質であることが実証されている。したがって、ケモカインは、炎症応答及び免疫応答の両方の調節に関与する。さらに、ケモカインは、がん細胞の増殖特性及び侵襲特性に効果を有することが示されている（ケモカインの概説については、例えば、Ｍｕｋａｉｄａ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ １７０３８１，ｐｇ．１－１５を参照されたい）。一実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、制御性Ｔ細胞に作用し、その非限定的な例としては、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２８、ＣＣＲ４、及びＣＣＲ１０が挙げられる。別の実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、細胞傷害性Ｔ細胞に作用し、その非限定的な例としては、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１及びＣＸＣＲ３が挙げられる。別の実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、ナチュラルキラー細胞に作用し、その非限定的な例としては、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ２、ＣＣＬ８、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２１、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５、ＣＣＲ２及びＣＸ３ＣＲ１が挙げられる。別の実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、未成熟樹状細胞に作用し、その非限定的な例としては、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ２、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ１、ＣＣＬ１７、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ８及びＣＸＣＲ４が挙げられる。別の実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、成熟樹状細胞に作用し、その非限定的な例としては、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２１、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＲ７及びＣＸＣＲ４が挙げられる。別の実施形態では、ケモカインまたはケモカイン受容体は、腫瘍関連マクロファージに作用し、その非限定的な例としては、ＣＣＬ２、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５及びＣＸＣＲ４が挙げられる。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）が標的とするｍＲＮＡは、動員因子をコードする。本明細書で使用する場合、「動員因子」は、所望の位置（例えば、腫瘍部位または炎症性部位）への免疫細胞の動員を促進する任意のタンパク質を指す。例えば、特定のケモカイン、ケモカイン受容体及びサイトカインは、リンパ球の動員に関与することが示されている（例えば、Ｏｅｌｋｒｕｇ，Ｃ．ａｎｄ Ｒａｍａｇｅ，Ｊ．Ｍ．（２０１４）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７８：１－８を参照されたい）。動員因子の非限定的な例には、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ５、ＣＣＲ５、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１６、及びＩＦＮ－γが含まれる。
細胞内標的
一実施形態では、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰと会合／によって封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における細胞内標的の発現を調節することによって、天然に存在する細胞内標的の活性を調節する。一実施形態では、細胞は、リンパ球である。天然に存在する細胞内標的の非限定的な例には、酵素を含む、転写因子及び細胞シグナル伝達カスケード分子が含まれる。免疫応答の刺激または阻害における特定の用途に好適な転写因子及び細胞内シグナル伝達カスケード分子を以下にさらに記載する。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、タンパク質標的は、転写因子である。本明細書で使用する場合、「転写因子」は、遺伝子の転写を調節するＤＮＡ結合タンパク質を指す。一実施形態では、タンパク質は、免疫応答を増加または分極させる転写因子である。一実施形態では、タンパク質は、Ｉ型ＩＦＮ応答を刺激する転写因子である。別の実施形態では、タンパク質は、ＮＦκＢ媒介型炎症促進性応答を刺激する転写因子である。転写因子の非限定的な例には、インターフェロン調節因子（ＩＲＦ－１、ＩＲＦ－３、ＩＲＦ－５、ＩＲＦ－７、ＩＲＦ－８、及びＩＲＦ－９を含むＩＲＦ）、ＣＲＥＢ、ＲＯＲｃ、ＲＯＲγ、ＲＯＲγｔ、ＲＯＲα、ＳＯＣＳ、ＮＦκＢ、ＦｏｘＰ３、Ｔ－ｂｅｔ、ＳＴＡＴ３、及びＡｈＲが含まれる。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、タンパク質標的は、細胞内アダプタータンパク質である。一実施形態では、細胞内アダプタータンパク質は、Ｉ型ＩＦＮ応答を刺激する。別の実施形態では、細胞内アダプタータンパク質は、ＮＦκＢ媒介型炎症促進性応答を刺激する。Ｉ型ＩＦＮ応答を刺激する、及び／またはＮＦκＢ媒介型炎症促進性応答を刺激する細胞内アダプタータンパク質の非限定的な例には、ＳＴＩＮＧ、ＭＡＶＳ及びＭｙＤ８８が含まれる。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、タンパク質標的は、細胞内シグナル伝達タンパク質である。一実施形態では、タンパク質は、ＴＬＲシグナル伝達経路の細胞内シグナル伝達タンパク質である。一実施形態では、細胞内シグナル伝達タンパク質は、Ｉ型ＩＦＮ応答を刺激する。別の実施形態では、細胞内シグナル伝達タンパク質は、ＮＦκＢ媒介型炎症促進性応答を刺激する。Ｉ型ＩＦＮ応答を刺激する、及び／またはＮＦκＢ媒介型炎症促進性応答を刺激する細胞内シグナル伝達タンパク質の非限定的な例としては、ＭｙＤ８８、ＩＲＡＫ１、ＩＲＡＫ２、ＩＲＡＫ４、ＴＲＡＦ３、ＴＲＡＦ６、ＴＡＫ１、ＴＡＢ２、ＴＡＢ３、ＴＡＫ－ＴＡＢ１、ＭＫＫ３、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６、ＭＫＫ７、ＩＫＫα、ＩＫＫβ、ＴＲＡＭ、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ１、及びＴＢＫ１が挙げられる。
免疫応答の上方または下方調節のための細胞内シグナル伝達分子の他の非限定的な例としては、Ｍｃｌ－１、ＡＭＰＫａ１、ＡＭＰＫａ２、ＧＩＬＺ、ＰＰＡＲｇ、ＨＤＡＣ１０、ＡＥＰ、ＳＨＰ－１、ＳＨＰ－２、ＣＡＭＫＫ２ ＩＤＯ１、ＩＤＯ２及びＴＤＯが挙げられる。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、ｍＲＮＡは、転写因子、例えば、寛容性を促進する寛容原性転写因子、例えば、ＲｅｌＡ、Ｒｕｎｘ１、Ｒｕｎｘ３及びＦｏｘＰ３をコードする。
膜結合／膜貫通標的
一実施形態では、脂質系組成物、例えば、ＬＮＰと会合／によって封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）における膜結合／膜貫通標的の発現を調節することによって、天然に存在する膜結合／膜貫通標的の活性を調節する。天然に存在する膜結合／膜貫通標的の非限定的な例には、共刺激分子、免疫チェックポイント分子、ホーミングシグナル、及びＨＬＡ分子が含まれる。免疫応答の刺激または阻害における特定の用途に好適な膜結合標的／膜貫通標的を以下にさらに記載する。
免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、タンパク質標的は、免疫応答を上方調節する共刺激因子であるか、または免疫応答を下方調節する共刺激因子の拮抗剤である。免疫応答を上方調節する共刺激因子の非限定的な例には、ＣＤ２８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ１３７及びＣＤ１３７Ｌが含まれる。免疫応答を下方調節する共刺激分子の非限定的な例には、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、及びＣＴＬＡ－４が含まれる。免疫細胞の活性化または活性を調節する一実施形態では、タンパク質標的は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を下方調節する免疫チェックポイントタンパク質であり、その非限定的な例としては、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、及びＰＤ－Ｌ１、及びＰＤ－Ｌ２が挙げられる。
一実施形態では、膜結合／膜貫通タンパク質標的は、ホーミングシグナルである。
一実施形態では、膜結合／膜貫通タンパク質標的は、ＨＬＡ－ＧなどのＨＬＡ分子である。非古典的ＨＬＡクラスＩ分子ＨＬＡ－Ｇは、それを発現する細胞を細胞溶解から保護する強力な阻害分子である。この機能は、母体免疫系による破壊からの胎児細胞栄養芽細胞の保護、レシピエント免疫系による細胞溶解からの同種移植片の保護、及び抗腫瘍免疫からの腫瘍の保護に重要であることが報告されている。したがって、ＨＬＡ－Ｇを下方調節するＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を使用して、例えば腫瘍を有する対象において、免疫媒介型細胞溶解を促進し、抗腫瘍免疫を刺激することができる。
ＲＮＡ干渉剤の合成及び修飾
ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡなどのＲＮＡ干渉剤は、当該技術分野において十分に確立された方法によって調製することができる。現在、ＲＮＡ干渉剤を生成するために使用されている５つの方法がある：化学合成、インビトロ転写、ＲＮａｓｅ ＩＩＩファミリー酵素（例えば、Ｄｉｃｅｒ、ＲＮａｓｅ ＩＩＩ）による長い二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）の消化、発現プラスミドまたはウイルスベクターからの細胞内での発現、及びＰＣＲ由来発現カセットからの細胞内での発現。さらに、ＲＮＡ干渉剤のカスタム設計及び合成は、商業的に利用可能である（例えば、Ｄｈａｒｍａｃｏｎ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）。
一実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、非修飾核酸塩基、ヌクレオシドまたはヌクレオチドから構成される。別の実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、１つ以上の修飾核酸塩基、ヌクレオシドまたはヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、修飾ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、参照非修飾剤と比較して、安定性の増強、細胞内保持、及び／または薬剤が導入される細胞の先天性免疫応答の実質的な誘導の欠如を含む有用な特性を有し得る。したがって、修飾ＲＮＡ干渉剤の使用は、薬剤の機能の効率及び／または薬剤の細胞内保持を増強させ、かつ薬剤の免疫原性を低減することができる。
いくつかの実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、１つ以上（例えば、１、２、３、または４つ）の異なる修飾核酸塩基、ヌクレオシド、またはヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上）の異なる修飾核酸塩基、ヌクレオシド、またはヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、修飾剤は、対応する非修飾剤と比較して、薬剤が導入される細胞の分解を低減させている可能性がある。
例えば、一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、少なくとも１つのヌクレオシドの２’－Ｏ－メチル化を含む（すなわち、メチル基は、薬剤中の少なくとも１つのヌクレオシドのリボース部分の２’ヒドロキシルに添加される）。修飾ＲＮＡ干渉剤は、少なくとも１つの２’－Ｏ－メチル－アデノシン、少なくとも１つの２’－Ｏ－メチル－グアノシン、少なくとも１つの２’－Ｏ－メチル－ウルアシル、少なくとも１つの２’－Ｏ－メチル－シトシン、またはそれらの任意の組み合わせを含むことができる。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾ウラシルである。修飾ウラシルを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドには、シュードウリジン（ψ）、ピリジン－４－オンリボヌクレオシド、５－アザ－ウリジン、６－アザ－ウリジン、２－チオ－５－アザ－ウリジン、２－チオ－ウリジン（ｓ２Ｕ）、４－チオ－ウリジン（ｓ４Ｕ）、４－チオ－シュードウリジン、２－チオ－シュードウリジン、５－ヒドロキシ－ウリジン（ｈｏ５Ｕ）、５－アミノアリル－ウリジン、５－ハロ－ウリジン（例えば、５－ヨード－ウリジンまたは５－ブロモ－ウリジン）、３－メチル－ウリジン（ｍ３Ｕ）、５－メトキシ－ウリジン（ｍｏ５Ｕ）、ウリジン５－オキシ酢酸（ｃｍｏ５Ｕ）、ウリジン５－オキシ酢酸メチルエステル（ｍｃｍｏ５Ｕ）、５－カルボキシメチル－ウリジン（ｃｍ５Ｕ）、１－カルボキシメチル－シュードウリジン、５－カルボキシヒドロキシメチル－ウリジン（ｃｈｍ５Ｕ）、５－カルボキシヒドロキシメチル－ウリジンメチルエステル（ｍｃｈｍ５Ｕ）、５－メトキシカルボニルメチル－ウリジン（ｍｃｍ５Ｕ）、５－メトキシカルボニルメチル－２－チオ－ウリジン（ｍｃｍ５ｓ２Ｕ）、５－アミノメチル－２－チオ－ウリジン（ｎｍ５ｓ２Ｕ）、５－メチルアミノメチル－ウリジン（ｍｎｍ５Ｕ）、５－メチルアミノメチル－２－チオ－ウリジン（ｍｎｍ５ｓ２Ｕ）、５－メチルアミノメチル－２－セレノ－ウリジン（ｍｎｍ５ｓｅ２Ｕ）、５－カルバモイルメチル－ウリジン（ｎｃｍ５Ｕ）、５－カルボキシメチルアミノメチル－ウリジン（ｃｍｎｍ５Ｕ）、５－カルボキシメチルアミノメチル－２－チオ－ウリジン（ｃｍｎｍ５ｓ２Ｕ）、５－プロピニル－ウリジン、１－プロピニル－シュードウリジン、５－タウリノメチル－ウリジン（τｍ５Ｕ）、１－タウリノメチル－シュードウリジン、５－タウリノメチル－２－チオ－ウリジン（τｍ５ｓ２Ｕ）、１－タウリノメチル－４－チオ－シュードウリジン、５－メチル－ウリジン（ｍ５Ｕ、すなわち、核酸塩基デオキシチミンを有する）、１－メチル－シュードウリジン（ｍ１ψ）、５－メチル－２－チオ－ウリジン（ｍ５ｓ２Ｕ）、１－メチル－４－チオ－シュードウリジン（ｍ１ｓ４ψ）、４－チオ－１－メチル－シュードウリジン、３－メチル－シュードウリジン（ｍ３ψ）、２－チオ－１－メチル－シュードウリジン、１－メチル－１－デアザ－シュードウリジン、２－チオ－１－メチル－１－デアザ－シュードウリジン、ジヒドロウリジン（Ｄ）、ジヒドロシュードウリジン、５，６－ジヒドロウリジン、５－メチル－ジヒドロウリジン（ｍ５Ｄ）、２－チオ－ジヒドロウリジン、２－チオ－ジヒドロシュードウリジン、２－メトキシ－ウリジン、２－メトキシ－４－チオ－ウリジン、４－メトキシ－シュードウリジン、４－メトキシ－２－チオ－シュードウリジン、Ｎ１－メチル－シュードウリジン、３－（３－アミノ－３－カルボキシプロピル）ウリジン（ａｃｐ３Ｕ）、１－メチル－３－（３－アミノ－３－カルボキシプロピル）シュードウリジン（ａｃｐ３ψ）、５－（イソペンテニルアミノメチル）ウリジン（ｉｎｍ５Ｕ）、５－（イソペンテニルアミノメチル）－２－チオ－ウリジン（ｉｎｍ５ｓ２Ｕ）、α－チオ－ウリジン、２’－Ｏ－メチル－ウリジン（Ｕｍ）、５，２’－Ｏ－ジメチル－ウリジン（ｍ５Ｕｍ）、２’－Ｏ－メチル－シュードウリジン（ψｍ）、２－チオ－２’－Ｏ－メチル－ウリジン（ｓ２Ｕｍ）、５－メトキシカルボニルメチル－２’－Ｏ－メチル－ウリジン（ｍｃｍ５Ｕｍ）、５－カルバモイルメチル－２’－Ｏ－メチル－ウリジン（ｎｃｍ５Ｕｍ）、５－カルボキシメチルアミノメチル－２’－Ｏ－メチル－ウリジン（ｃｍｎｍ５Ｕｍ）、３，２’－Ｏ－ジメチル－ウリジン（ｍ３Ｕｍ）、及び５－（イソペンテニルアミノメチル）－２’－Ｏ－メチル－ウリジン（ｉｎｍ５Ｕｍ）、１－チオ－ウリジン、デオキシチミジン、２’－Ｆ－アラ－ウリジン、２’－Ｆ－ウリジン、２’－ＯＨ－アラ－ウリジン、５－（２－カルボメトキシビニル）ウリジン、及び５－［３－（１－Ｅ－プロペニルアミノ）］ウリジンが含まれる。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾シトシンである。修飾シトシンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドには、５－アザ－シチジン、６－アザ－シチジン、シュードイソシチジン、３－メチル－シチジン（ｍ３Ｃ）、Ｎ４－アセチル－シチジン（ａｃ４Ｃ）、５－ホルミル－シチジン（ｆ５Ｃ）、Ｎ４－メチル－シチジン（ｍ４Ｃ）、５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）、５－ハロ－シチジン（例えば、５－ヨード－シチジン）、５－ヒドロキシメチル－シチジン（ｈｍ５Ｃ）、１－メチル－シュードイソシチジン、ピロロ－シチジン、ピロロ－シュードイソシチジン、２－チオ－シチジン（ｓ２Ｃ）、２－チオ－５－メチル－シチジン、４－チオ－シュードイソシチジン、４－チオ－１－メチル－シュードイソシチジン、４－チオ－１－メチル－１－デアザ－シュードイソシチジン、１－メチル－１－デアザ－シュードイソシチジン、ゼブラリン、５－アザ－ゼブラリン、５－メチル－ゼブラリン、５－アザ－２－チオ－ゼブラリン、２－チオ－ゼブラリン、２－メトキシ－シチジン、２－メトキシ－５－メチル－シチジン、４－メトキシ－シュードイソシチジン、４－メトキシ－１－メチル－シュードイソシチジン、リシジン（ｋ２Ｃ）、α－チオ－シチジン、２’－Ｏ－メチル－シチジン（Ｃｍ）、５，２’－Ｏ－ジメチル－シチジン（ｍ５Ｃｍ）、Ｎ４－アセチル－２’－Ｏ－メチル－シチジン（ａｃ４Ｃｍ）、Ｎ４，２’－Ｏ－ジメチル－シチジン（ｍ４Ｃｍ）、５－ホルミル－２’－Ｏ－メチル－シチジン（ｆ５Ｃｍ）、Ｎ４，Ｎ４，２’－Ｏ－トリメチル－シチジン（ｍ４２Ｃｍ）、１－チオ－シチジン、２’－Ｆ－アラ－シチジン、２’－Ｆ－シチジン、及び２’－ＯＨ－アラ－シチジンが含まれる。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾アデニンである。修飾アデニンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドには、ａ－チオ－アデノシン、２－アミノ－プリン、２，６－ジアミノプリン、２－アミノ－６－ハロ－プリン（例えば、２－アミノ－６－クロロ－プリン）、６－ハロ－プリン（例えば、６－クロロ－プリン）、２－アミノ－６－メチル－プリン、８－アジド－アデノシン、７－デアザ－アデニン、７－デアザ－８－アザ－アデニン、７－デアザ－２－アミノ－プリン、７－デアザ－８－アザ－２－アミノ－プリン、７－デアザ－２，６－ジアミノプリン、７－デアザ－８－アザ－２，６－ジアミノプリン、１－メチル－アデノシン（ｍ１Ａ）、２－メチル－アデニン（ｍ２Ａ）、Ｎ６－メチル－アデノシン（ｍ６Ａ）、２－メチルチオ－Ｎ６－メチル－アデノシン（ｍｓ２ｍ６Ａ）、Ｎ６－イソペンテニル－アデノシン（ｉ６Ａ）、２－メチルチオ－Ｎ６－イソペンテニル－アデノシン（ｍｓ２ｉ６Ａ）、Ｎ６－（ｃｉｓ－ヒドロキシイソペンテニル）アデノシン（ｉｏ６Ａ）、２－メチルチオ－Ｎ６－（ｃｉｓ－ヒドロキシイソペンテニル）アデノシン（ｍｓ２ｉｏ６Ａ）、Ｎ６－グリシニルカルバモイル－アデノシン（ｇ６Ａ）、Ｎ６－スレオニルカルバモイル－アデノシン（ｔ６Ａ）、Ｎ６－メチル－Ｎ６－スレオニルカルバモイル－アデノシン（ｍ６ｔ６Ａ）、２－メチルチオ－Ｎ６－スレオニルカルバモイル－アデノシン（ｍｓ２ｇ６Ａ）、Ｎ６，Ｎ６－ジメチル－アデノシン（ｍ６２Ａ）、Ｎ６－ヒドロキシノルバリルカルバモイル－アデノシン（ｈｎ６Ａ）、２－メチルチオ－Ｎ６－ヒドロキシノルバリルカルバモイル－アデノシン（ｍｓ２ｈｎ６Ａ）、Ｎ６－アセチル－アデノシン（ａｃ６Ａ）、７－メチル－アデニン、２－メチルチオ－アデニン、２－メトキシ－アデニン、α－チオ－アデノシン、２’－Ｏ－メチル－アデノシン（Ａｍ）、Ｎ６，２’－Ｏ－ジメチル－アデノシン（ｍ６Ａｍ）、Ｎ６，Ｎ６，２’－Ｏ－トリメチル－アデノシン（ｍ６２Ａｍ）、１，２’－Ｏ－ジメチル－アデノシン（ｍ１Ａｍ）、２’－Ｏ－リボシルアデノシン（リン酸）（Ａｒ（ｐ））、２－アミノ－Ｎ６－メチル－プリン、１－チオ－アデノシン、８－アジド－アデノシン、２’－Ｆ－アラ－アデノシン、２’－Ｆ－アデノシン、２’－ＯＨ－アラ－アデノシン、及びＮ６－（１９－アミノ－ペンタオキサノナデシル）－アデノシンが含まれる。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾グアニンである。修飾グアニンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドには、ａ－チオ－グアノシン、イノシン（Ｉ）、１－メチル－イノシン（ｍ１Ｉ）、ワイオシン（ｉｍＧ）、メチルワイオシン（ｍｉｍＧ）、４－デメチル－ワイオシン（ｉｍＧ－１４）、イソワイオシン（ｉｍＧ２）、ウィブトシン（ｙＷ）、ペルオキシウィブトシン（ｏ２ｙＷ）、ヒドロキシウィブトシン（ＯｈｙＷ）、低修飾（ｕｎｄｅｒｍｏｄｉｆｉｅｄ）ヒドロキシウィブトシン（ＯｈｙＷ＊）、７－デアザ－グアノシン、クエオシン（Ｑ）、エポキシクエオシン（ｏＱ）、ガラクトシル－クエオシン（ｇａｌＱ）、マンノシル－クエオシン（ｍａｎＱ）、７－シアノ－７－デアザ－グアノシン（ｐｒｅＱ０）、７－アミノメチル－７－デアザ－グアノシン（ｐｒｅＱ１）、アルカエオシン（Ｇ＋）、７－デアザ－８－アザ－グアノシン、６－チオ－グアノシン、６－チオ－７－デアザ－グアノシン、６－チオ－７－デアザ－８－アザ－グアノシン、７－メチル－グアノシン（ｍ７Ｇ）、６－チオ－７－メチル－グアノシン、７－メチル－イノシン、６－メトキシ－グアノシン、１－メチル－グアノシン（ｍ１Ｇ）、Ｎ２－メチル－グアノシン（ｍ２Ｇ）、Ｎ２，Ｎ２－ジメチル－グアノシン（ｍ２２Ｇ）、Ｎ２，７－ジメチル－グアノシン（ｍ２，７Ｇ）、Ｎ２，Ｎ２，７－ジメチル－グアノシン（ｍ２，２，７Ｇ）、８－オキソ－グアノシン、７－メチル－８－オキソ－グアノシン、１－メチル－６－チオ－グアノシン、Ｎ２－メチル－６－チオ－グアノシン、Ｎ２，Ｎ２－ジメチル－６－チオ－グアノシン、α－チオ－グアノシン、２’－Ｏ－メチル－グアノシン（Ｇｍ）、Ｎ２－メチル－２’－Ｏ－メチル－グアノシン（ｍ２Ｇｍ）、Ｎ２，Ｎ２－ジメチル－２’－Ｏ－メチル－グアノシン（ｍ２２Ｇｍ）、１－メチル－２’－Ｏ－メチル－グアノシン（ｍ１Ｇｍ）、Ｎ２，７－ジメチル－２’－Ｏ－メチル－グアノシン（ｍ２，７Ｇｍ）、２’－Ｏ－メチル－イノシン（Ｉｍ）、１，２’－Ｏ－ジメチル－イノシン（ｍ１Ｉｍ）、２’－Ｏ－リボシルグアノシン（リン酸）（Ｇｒ（ｐ））、１－チオ－グアノシン、Ｏ６－メチル－グアノシン、２’－Ｆ－アラ－グアノシン、及び２’－Ｆ－グアノシンが含まれる。
いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、シュードウリジン（ψ）、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）、２－チオウリジン、４’－チオウリジン、５－メチルシトシン、２－チオ－１－メチル－１－デアザ－シュードウリジン、２－チオ－１－メチル－シュードウリジン、２－チオ－５－アザ－ウリジン、２－チオ－ジヒドロシュードウリジン、２－チオ－ジヒドロウリジン、２－チオ－シュードウリジン、４－メトキシ－２－チオ－シュードウリジン、４－メトキシ－シュードウリジン、４－チオ－１－メチル－シュードウリジン、４－チオ－シュードウリジン、５－アザ－ウリジン、ジヒドロシュードウリジン、５－メトキシウリジン、または２’－Ｏ－メチルウリジンである。いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。一実施形態では、修飾核酸塩基は、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）であり、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）で完全に修飾される。いくつかの実施形態では、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）は、薬剤中のウラシルの７５～１００％を表す。いくつかの実施形態では、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）は、薬剤中のウラシルの１００％を表す。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾シトシンである。修飾シトシンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドとしては、Ｎ４－アセチル－シチジン（ａｃ４Ｃ）、５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）、５－ハロ－シチジン（例えば、５－ヨード－シチジン）、５－ヒドロキシメチル－シチジン（ｈｍ５Ｃ）、１－メチル－シュードイソシチジン、２－チオ－シチジン（ｓ２Ｃ）、２－チオ－５－メチル－シチジンが含まれる。いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾アデニンである。修飾アデニンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドとしては、７－デアザ－アデニン、１－メチル－アデノシン（ｍ１Ａ）、２－メチル－アデニン（ｍ２Ａ）、Ｎ６－メチル－アデノシン（ｍ６Ａ）が含まれる。いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾グアニンである。修飾グアニンを有する例示的な核酸塩基及びヌクレオシドとしては、イノシン（Ｉ）、１－メチル－イノシン（ｍ１Ｉ）、ワイオシン（ｉｍＧ）、メチルワイオシン（ｍｉｍＧ）、７－デアザ－グアノシン、７－シアノ－７－デアザ－グアノシン（ｐｒｅＱ０）、７－アミノメチル－７－デアザ－グアノシン（ｐｒｅＱ１）、７－メチル－グアノシン（ｍ７Ｇ）、１－メチル－グアノシン（ｍ１Ｇ）、８－オキソ－グアノシン、７－メチル－８－オキソ－グアノシンが含まれる。いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は、１－メチル－シュードウリジン（ｍ１ψ）、５－メトキシ－ウリジン（ｍｏ５Ｕ）、５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α－チオ－グアノシン、またはα－チオ－アデノシンである。いくつかの実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、前述の修飾核酸塩基のうちの１つ以上の組み合わせ（例えば、前述の修飾核酸塩基のうちの２、３、または４つの組み合わせ）を含む。
いくつかの実施形態では、薬剤は、シュードウリジン（ψ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、シュードウリジン（ψ）及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、１－メチル－シュードウリジン（ｍ１ψ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、１－メチル－シュードウリジン（ｍ１ψ）及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、２－チオウリジン（ｓ２Ｕ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、２－チオウリジン及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、５－メトキシ－ウリジン（ｍｏ５Ｕ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、５－メトキシ－ウリジン（ｍｏ５Ｕ）及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、２’－Ｏ－メチルウリジンを含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、２’－Ｏ－メチルウリジン及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、Ｎ６－メチル－アデノシン（ｍ６Ａ）を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、Ｎ６－メチル－アデノシン（ｍ６Ａ）及び５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）を含む。
ある特定の実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、特定の修飾のために均一に修飾される（すなわち、完全に修飾される、配列全体を通して修飾される）。例えば、薬剤は、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）または５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）で均一に修飾され得、このことは、薬剤配列中のすべてのウリジンまたはすべてのシトシンヌクレオシドが、Ｎ１－メチルシュードウリジン（ｍ１ψ）または５－メチル－シチジン（ｍ５Ｃ）で置き換えられることを意味する。同様に、本開示の薬剤は、上記のものなどの修飾残基での置換によって、配列に存在する任意の種類のヌクレオシド残基について均一に修飾され得る。
本開示のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、糖、核酸塩基、及び／またはヌクレオシド間連結に対する修飾の組み合わせを含み得る。これらの組み合わせは、本明細書に記載される任意の１つ以上の修飾を含み得る。
ある特定の実施形態では、本開示の薬剤の天然ヌクレオチドは修飾ヌクレオシドで部分的または完全に置換され得る。非限定的な例として、天然ヌクレオチドウリジンは、本明細書に記載される修飾ヌクレオシドで置換され得る。別の非限定的な例では、天然ヌクレオシドウリジンは、本明細書に開示される修飾ヌクレオシドのうちの少なくとも１つで部分的に置換され得る（例えば、天然ウリジンの約０．１％、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９．９％）。
脂質ナノ粒子
本開示のＲＮＡ干渉剤、例えば、ｓｉＲＮＡは、ポリヌクレオチド配列の免疫細胞への送達を促進するために脂質ナノ粒子中に封入される。したがって、一群の実施形態では、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が提供される。本明細書に記載されるＬＮＰの各々は、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡの製剤として使用され得る。一実施形態では、脂質ナノ粒子は、イオン性脂質と、ステロールまたは他の構造的脂質と、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、任意にＰＥＧ脂質と、１つ以上のポリヌクレオチド、例えば、ｓｉＲＮＡと、を含む、脂質を含む。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、ｓｉＲＮＡの免疫細胞への送達を促進する免疫細胞送達強化脂質を含む。一実施形態では、ＬＮＰは、フィトステロール、またはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせを含む。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
任意の特定のメカニズムまたは理論に拘束されることは意図されていないが、本開示のＬＮＰによる免疫細胞へのＲＮＡ干渉剤の増強された送達は、ＬＮＰ中に存在する場合、免疫細胞送達強化脂質を欠くＬＮＰと比較して、細胞会合及び／または取り込み、内在化、細胞内輸送、及び／または処理、及び／またはエンドソーム脱出を増強することによって機能し得る、有効量の免疫細胞送達強化脂質、例えば、コレステロール類似体もしくはアミノ脂質、またはそれらの組み合わせの存在に起因すると考えられ、及び／または免疫細胞による認識及び／または免疫細胞への結合を増強し得る。さらに、インビトロ実験では、ＬＮＰの免疫細胞取り込み／細胞会合のために血清が絶対的に必要であることが観察された。様々な血清成分の枯渇を通じて、補体成分１ｑ（Ｃ１ｑ）が免疫細胞によるＬＮＰの取り込みに関与していることを決定した。したがって、任意の特定のメカニズムまたは理論に束縛されることを意図しないが、一実施形態では、本開示の免疫細胞送達強化脂質は、Ｃ１ｑに結合するか、またはかかる脂質を含むＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進する。したがって、免疫細胞への核酸分子の送達のための本開示のＬＮＰをインビトロで使用するために、Ｃ１ｑを含む培養条件（例えば、血清を含む培養培地の使用、または無血清培地への外因性Ｃ１ｑの添加）を使用する。本開示のＬＮＰをインビボで使用するために、Ｃ１ｑに対する要件は、内因性Ｃ１ｑによって与えられる。
免疫細胞送達ＬＮＰは、（ｉ）イオン性脂質と、（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、（ｖ）ＬＮＰ内に封入された及び／またはＬＮＰと会合されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）と、を含み、免疫細胞送達ＬＮＰ中の（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）構造的脂質もしくはステロールのうちの１つ以上は、有効量の免疫細胞送達強化脂質を含む。
別の実施形態では、本開示の免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上は、免疫細胞への脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含む。一実施形態では、増強された送達は、免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質ナノ粒子に対するものである。別の実施形態では、増強された送達は、好適な対照に対するものである。
別の実施形態では、本開示の免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤（例えばｓｉＲＮＡ）と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質、または（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質もしくはリン脂質、または（ｖ）ＰＥＧ脂質のうちの１つ以上は、Ｃ１ｑ結合脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑに結合するか、またはＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進（例えば、増加、刺激、増強）するＣ１ｑ結合脂質である。
別の実施形態では、本開示の免疫細胞送達脂質ナノ粒子は、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
（ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤（例えばｓｉＲＮＡ）と、
（ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上は、対照ＬＮＰ（例えば、（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）ステロールもしくは他の構造的脂質を欠くＬＮＰ）と比較して、Ｃ１ｑに結合するか、またはＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進（例えば、増加、刺激、増強）する。
別の態様では、本開示は、免疫細胞送達脂質のスクリーニング方法であって、試験免疫細胞送達脂質を含む試験ＬＮＰをＣ１ｑと接触させることと、Ｃ１ｑへの結合を測定することと、を含み、試験免疫細胞送達脂質が、Ｃ１ｑに結合するか、またはそれを含むＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進（例えば、増加、刺激、増強）するときに、免疫細胞送達脂質として選択される、方法を提供する。
ＬＮＰの脂質含有量
上述のように、脂質に関して、免疫細胞送達ＬＮＰは、（ｉ）イオン性脂質と、（ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、（ｉｖ）ＰＥＧ脂質と、を含み、免疫細胞送達ＬＮＰ中の（ｉ）イオン性脂質、または（ｉｉ）構造的脂質もしくはステロールのうちの１つ以上は、有効量の免疫細胞送達強化脂質を含む。これらのカテゴリーの脂質は、以下により詳細に記載される。
（ｉ）イオン性脂質
本開示の脂質ナノ粒子は、１つ以上のイオン性脂質を含む。ある特定の実施形態では、本開示のイオン性脂質は、中心アミン部分及び少なくとも１つの生分解性基を含む。本明細書に記載されるイオン性脂質は、核酸分子を哺乳類細胞または臓器に送達するために、本開示の脂質ナノ粒子において有利に使用され得る。以下に記載されるイオン性脂質の構造は、それらを本発明の他の脂質と区別するための接頭辞Ｉを含む。
本発明の第１の態様では、本明細書に記載の化合物は、式（Ｉ Ｉ）：
Figure 2022543773000003

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、
Ｒ１が、Ｃ５～３０アルキル、Ｃ５～２０アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ”Ｍ’Ｒ’からなる群から選択され、
Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成し、
Ｒ４が、水素、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、－ＣＱ（Ｒ）２、及び非置換Ｃ１～６アルキルからなる群から選択され、ここでＱが、炭素環、複素環、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、
－Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、
－Ｎ（Ｒ）Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、
－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｒ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）ＯＲ、及び－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲから選択され、各ｏが、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎが、独立して、１、２、３、４、及び５から選択され、
各Ｒ５が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ６が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
Ｍ及びＭ’が、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｓ）－、－ＣＨ（ＯＨ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｍ”が、結合、Ｃ１～１３アルキルまたはＣ２～１３アルケニルであり、
Ｒ７が、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
Ｒ８が、Ｃ３～６炭素環及び複素環からなる群から選択され、
Ｒ９が、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１～６アルキル、－ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ３～６炭素環及び複素環からなる群から選択され、
Ｒ１０が、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、及びＣ２～３アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒが、独立して、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊、及びＨからなる群から選択され、
各ｑが、独立して、１、２、及び３から選択され、
各Ｒ’が、独立して、Ｃ１～１８アルキル、Ｃ２～１８アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ”が、独立して、Ｃ３～１５アルキル及びＣ３～１５アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒ＊が、独立して、Ｃ１～１２アルキル及びＣ２～１２アルケニルからなる群から選択され、
各Ｙが、独立して、Ｃ３～６炭素環であり、
各Ｘが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩからなる群から選択され、
ｍが、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、及び１３から選択され、Ｒ４が、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－ＣＨＱＲ、または－ＣＱ（Ｒ）２であるとき、（ｉ）Ｑは、ｎが１、２、３、４、もしくは５である場合に－Ｎ（Ｒ）２ではないか、あるいは（ｉｉ）Ｑは、ｎが１または２である場合に５、６、または７員のヘテロシクロアルキルではない。
本開示の別の態様は、式（Ｉ ＩＩＩ）とも称される式（ＩＩＩ）
Figure 2022543773000004
の化合物、またはそのＮ－オキシド、
またはその塩もしくは異性体、
またはその塩もしくは異性体に関し、式中、
Ｒ１が、Ｃ５～３０アルキル、Ｃ５～２０アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ”Ｍ’Ｒ’からなる群から選択され、
Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成し、
Ｒ４が、水素、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、－ＣＱ（Ｒ）２、及び非置換Ｃ１～６アルキルからなる群から選択され、ここでＱが、炭素環、複素環、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、－Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｒ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）ＯＲ、及び－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲから選択され、各ｏが、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎが、独立して、１、２、３、４、及び５から選択され、
Ｒｘが、Ｃ１～６アルキル、Ｃ２～６アルケニル、－（ＣＨ２）ｖＯＨ、及び－（ＣＨ２）ｖＮ（Ｒ）２からなる群から選択され、
ｖが、１、２、３、４、５、及び６から選択され、
各Ｒ５が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ６が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
Ｍ及びＭ’が、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｓ）－、－ＣＨ（ＯＨ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｍ”が、結合、Ｃ１～１３アルキルまたはＣ２～１３アルケニルであり、
Ｒ７が、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
Ｒ８が、Ｃ３～６炭素環及び複素環からなる群から選択され、
Ｒ９が、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１～６アルキル、－ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、Ｃ２～６アルケニル、Ｃ３～６炭素環及び複素環からなる群から選択され、
Ｒ１０が、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、及びＣ２～３アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒが、独立して、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊、及びＨからなる群から選択され、
各ｑが、独立して、１、２、及び３から選択され、
各Ｒ’が、独立して、Ｃ１～１８アルキル、Ｃ２～１８アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ”が、独立して、Ｃ３～１５アルキル及びＣ３～１５アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒ＊が、独立して、Ｃ１～１２アルキル及びＣ２～１２アルケニルからなる群から選択され、
各Ｙが、独立して、Ｃ３～６炭素環であり、
各Ｘが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩからなる群から選択され、
ｍは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、及び１３から選択される。
ある特定の実施形態では、式（Ｉ Ｉ）とも称される、式（Ｉ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＩＡ）とも称される、式（ＩＡ）：
Figure 2022543773000005

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、式中、ｌが、１、２、３、４、及び５から選択され、ｍが、５、６、７、８、及び９から選択され、Ｍ１は、結合またはＭ’であり、Ｒ４が、水素、非置換Ｃ１～３アルキル、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、または－（ＣＨ２）ｎＱであり、式中、Ｑが、
ＯＨ、－ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｒ８、
－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、
ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルであり、Ｍ及びＭ’が、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。例えば、ｍは、５、７、または９である。例えば、Ｑは、ＯＨ、－ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、または－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２である。例えば、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、または－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒである。
ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＩＢ）とも称される、式（ＩＢ）：
Figure 2022543773000006

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、そのすべての変数は、本明細書に定義される通りである。例えば、ｍは、５、６、７、８、及び９から選択され、Ｍ及びＭ’は、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。例えば、ｍは、５、７、または９である。ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＩＩ）とも称される、式（ＩＩ）：
Figure 2022543773000007

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、式中、ｌは、１、２、３、４、及び５から選択され、Ｍ１は、結合またはＭ’であり、Ｒ４は、水素、非置換Ｃ１～３アルキル、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、または－（ＣＨ２）ｎＱであり、ここでｎは、２、３、または４であり、Ｑは、ＯＨ、－ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｒ８、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ヘテロアリール、またはヘテロシクロアルキルであり、Ｍ及びＭ’は、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。
本開示の別の態様は、式（Ｉ ＶＩ）：
Figure 2022543773000008

の化合物、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体に関し、式中、
Ｒ１が、Ｃ５～３０アルキル、Ｃ５～２０アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ”Ｍ’Ｒ’からなる群から選択され、
Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成し、
各Ｒ５が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ６が、独立して、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
Ｍ及びＭ’が、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｓ）－、－ＣＨ（ＯＨ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｍ”が、結合、Ｃ１～１３アルキルまたはＣ２～１３アルケニルであり、
Ｒ７が、Ｃ１～３アルキル、Ｃ２～３アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒが、独立して、Ｈ、Ｃ１～３アルキル及びＣ２～３アルケニルからなる群から選択され、
ＲＮが、Ｈ、またはＣ１～３アルキルであり、
各Ｒ’が、独立して、Ｃ１～１８アルキル、Ｃ２～１８アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ”が、独立して、Ｃ３～１５アルキル及びＣ３～１５アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒ＊が、独立して、Ｃ１～１２アルキル及びＣ２～１２アルケニルからなる群から選択され、
各Ｙが、独立して、Ｃ３～６炭素環であり、
各Ｘが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩからなる群から選択され、
Ｘａ及びＸｂが、それぞれ独立して、ＯまたはＳであり、
Ｒ１０が、Ｈ、ハロ、－ＯＨ、Ｒ、－Ｎ（Ｒ）２、－ＣＮ、－Ｎ３、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＯＲ、－ＳＲ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ、－ＮＯ２、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－ＮＨ（ＣＨ２）ｔ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ、－Ｎ（（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ）２、炭素環、複素環、アリール及びヘテロアリールからなる群から選択され、
ｍが、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、及び１３から選択され、
ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０から選択され、
ｒが、０または１であり、
ｔ１が、１、２、３、４、及び５から選択され、
ｐ１が、１、２、３、４、及び５から選択され、
ｑ１が、１、２、３、４、及び５から選択され、
ｓ１が、１、２、３、４、及び５から選択される。
一実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）とも称される、式（ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩ－ａ）とも称される、式（ＶＩ－ａ）：
Figure 2022543773000009

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、式中、
各Ｒ１ａ及びＲ１ｂが、独立して、Ｃ１～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択され、
Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｃ１～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成する。
別の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩ）とも称される、式（ＶＩＩ）：
Figure 2022543773000010

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、式中、
ｌが、１、２、３、４、及び５から選択され、
Ｍ１が、結合またはＭ’であり、
各Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩＩ）：
Figure 2022543773000011

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含み、式中、
ｌが、１、２、３、４、及び５から選択され、
Ｍ１が、結合またはＭ’であり、
各Ｒａ’及びＲｂ’が、独立して、Ｃ１～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｃ１～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。
式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、または（Ｉ ＶＩＩＩ）のうちのいずれか１つの化合物は、適用可能な場合、以下の特徴のうちの１つ以上を含む。
いくつかの実施形態では、Ｍ１は、Ｍ’である。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’は、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－である。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの少なくとも１つは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－である。
ある特定の実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの少なくとも１つは、－ＯＣ（Ｏ）－である。
ある特定の実施形態では、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－であり、Ｍ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－であり、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－である。ある特定の実施形態では、Ｍ及びＭ’はそれぞれ、－ＯＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’はそれぞれ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
ある特定の実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの少なくとも１つは、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’は、独立して、－Ｓ－Ｓ－である。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの少なくとも１つは、－Ｓ－Ｓである。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの一方は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－であり、他方は、－Ｓ－Ｓ－である。例えば、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－であり、Ｍ’は、－Ｓ－Ｓ－であるか、あるいはＭ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－であり、Ｍは、－Ｓ－Ｓ－である。
いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’のうちの１つは、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－であり、ここで、Ｍ”は、結合、Ｃ１～１３アルキルまたはＣ２～１３アルケニルである。他の実施形態では、Ｍ”は、Ｃ１～６アルキルまたはＣ２～６アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｍ”は、Ｃ１～４アルキルまたはＣ２～４アルケニルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ４アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ２アルケニルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ３アルケニルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ４アルケニルである。
いくつかの実施形態では、ｌは、１、３、または５である。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、水素である。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、水素ではない。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、非置換メチルまたは－（ＣＨ２）ｎＱであり、ここで、Ｑは、ＯＨ、－ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、または－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒである。
いくつかの実施形態では、Ｑは、ＯＨである。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒである。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒである。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲである。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｒ８である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２である。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲである。
いくつかの実施形態では、ｎは、２である。
いくつかの実施形態では、ｎは、３である。
いくつかの実施形態では、ｎは、４である。
いくつかの実施形態では、Ｍ１は、存在しない。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ５は、ヒドロキシルである。例えば、１つのＲ５は、ヒドロキシルである。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ６は、ヒドロキシルである。例えば、１つのＲ６は、ヒドロキシルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ５及びＲ６のうちの１つは、ヒドロキシルである。例えば、１つのＲ５はヒドロキシルであり、各Ｒ６は水素である。例えば、１つのＲ６はヒドロキシルであり、各Ｒ５は水素である。
いくつかの実施形態では、Ｒｘは、Ｃ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｘは、Ｃ１～３アルキルである。例えば、Ｒｘは、メチルである。例えば、Ｒｘは、エチルである。例えば、Ｒｘは、プロピルである。
いくつかの実施形態では、Ｒｘは、－（ＣＨ２）ｖＯＨであり、ｖは、１、２、または３である。例えば、Ｒｘは、メタノイルである。例えば、Ｒｘは、エタノイルである。例えば、Ｒｘは、プロパノイルである。
いくつかの実施形態では、Ｒｘは、－（ＣＨ２）ｖＮ（Ｒ）２であり、ｖは、１、２、または３であり、各Ｒは、Ｈまたはメチルである。例えば、Ｒｘは、メタンアミノ、メチルメタンアミノ、またはジメチルメタンアミノである。例えば、Ｒｘは、アミノメタニル、メチルアミノメタニル、またはジメチルアミノメタニルである。例えば、Ｒｘは、アミノエタニル、メチルアミノエタニル、またはジメチルアミノエタニルである。例えば、Ｒｘは、アミノプロパニル、メチルアミノプロパニル、またはジメチルアミノプロパニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ１～１８アルキル、Ｃ２～１８アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、または－ＹＲ”である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ３～１４アルキルまたはＣ３～１４アルケニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ２～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ３～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１～８アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１～５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１～３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、及びＣ５アルキルから選択される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ４アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｃ５アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－（ＣＨＲ５Ｒ６）ｍ－Ｍ－ＣＲ２Ｒ３Ｒ７とは異なる。
いくつかの実施形態では、－ＣＨＲ１ａＲ１ｂ－は、－（ＣＨＲ５Ｒ６）ｍ－Ｍ－ＣＲ２Ｒ３Ｒ７とは異なる。
いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｃ１～３アルキルから選択される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｃ４アルキル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルキル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルキル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルキル、Ｃ７アルケニル、Ｃ９アルキル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１１アルキル、Ｃ１１アルケニル、Ｃ１７アルキル、Ｃ１７アルケニル、Ｃ１８アルキル、及びＣ１８アルケニルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ２～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ３～１４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１～８アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１～５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１～３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、及びＣ５アルキルから選択される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒｂ’は、Ｃ４アルキルである。
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ ＩＩａ）とも称される、式（ＩＩａ）：
Figure 2022543773000012

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、Ｒ４は、本明細書に記載される通りである。
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ ＩＩｂ）とも称される、式（ＩＩｂ）：
Figure 2022543773000013

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、Ｒ４は、本明細書に記載される通りである。
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ ＩＩｃ）または（Ｉ ＩＩｅ）とも称される、式（ＩＩｃ）または（ＩＩｅ）：
Figure 2022543773000014

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、Ｒ４は、本明細書に記載される通りである。
別の実施形態では、式（Ｉ Ｉ）の化合物は、式（Ｉ ＩＩｆ）：
Figure 2022543773000015

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、
式中、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－または－ＯＣ（Ｏ）－であり、Ｍ”は、Ｃ１～６アルキルまたはＣ２～６アルケニルであり、Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｃ５～１４アルキル及びＣ５～１４アルケニルからなる群から選択され、ｎが、２、３、及び４から選択される。
さらなる実施形態では、式（Ｉ Ｉ）の化合物は、式（ＩＩｄ）：
Figure 2022543773000016
のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、ｎは、２、３、または４であり、ｍ、Ｒ’、Ｒ”、及びＲ２～Ｒ６は、本明細書に記載される通りである。例えば、Ｒ２及びＲ３の各々は、独立して、Ｃ５～１４アルキル及びＣ５～１４アルケニルからなる群から選択され得る。
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ ＩＩｇ）とも称される、式（ＩＩｇ）：
Figure 2022543773000017

のもの、またはそれらのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体であり、式中、ｌは、１、２、３、４、及び５から選択され、ｍは、５、６、７、８、及び９から選択され、Ｍ１は、結合またはＭ’であり、Ｍ及びＭ’は、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ－Ｓ－、アリール基、及びヘテロアリール基から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｃ１～１４アルキル、及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択される。例えば、Ｍ”は、Ｃ１～６アルキル（例えば、Ｃ１～４アルキル）またはＣ２～６アルケニル（例えば、Ｃ２～４アルケニル）である。例えば、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ５～１４アルキル及びＣ５～１４アルケニルからなる群から選択される。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩａ）：
Figure 2022543773000018

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩＩａ）：
Figure 2022543773000019

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩＩｂ）：
Figure 2022543773000020

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩｂ－１）：
Figure 2022543773000021

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩｂ－２）：
Figure 2022543773000022
のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩｂ－３）：
Figure 2022543773000023
のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。別の実施形態では、式（ＶＩ））の化合物のサブセットは、式（ＶＩＩｃ）：
Figure 2022543773000024
のものを含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（ＶＩＩｄ）：
Figure 2022543773000025

のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
別の実施形態では、式（Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩＩｃ）：
Figure 2022543773000026

のものを含む。
別の実施形態では、式Ｉ ＶＩ）の化合物のサブセットは、式（Ｉ ＶＩＩＩｄ）：
Figure 2022543773000027
のもの、またはそのＮ－オキシド、またはその塩もしくは異性体を含む。
式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、Ｉ（ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、または（Ｉ ＶＩＩＩｄ）のうちのいずれか１つの化合物は、該当する場合、以下の特徴のうちの１つ以上を含む。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２からなる群から選択され、ここでＱは、Ｃ３～６炭素環、Ｎ、Ｏ、Ｓ、及びＰから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する５～１４員の芳香族または非芳香族複素環、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、－Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、ならびに－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲから選択され、各ｏは、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎは、独立して、１、２、３、４、及び５から選択される。
別の実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２からなる群から選択され、Ｑは、Ｃ３～６炭素環、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する５～１４員のヘテロアリール、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ならびにＮ、Ｏ、及びＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を有し、オキソ（＝Ｏ）、ＯＨ、アミノ、及びＣ１～３アルキルから選択される１つ以上の置換基で置換されている５～１４員のヘテロシクロアルキルから選択され、各ｏは、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎは、独立して、１、２、３、４、及び５から選択される。
別の実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２からなる群から選択され、ここで、Ｑは、Ｃ３～６炭素環、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する５～１４員の複素環、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲから選択され、各ｏは、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎは、独立して、１、２、３、４、及び５から選択され、Ｑは、５～１４員の複素環であり、かつ（ｉ）Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｎＱであり、ここで、ｎは、１または２であるか、あるいは（ｉｉ）Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲであり、ここでｎは１であるか、あるいは（ｉｉｉ）Ｒ４は、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２であり、次いでＱが、５～１４員のヘテロアリール、または８～１４員のヘテロシクロアルキルのいずれかである。
別の実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６炭素環、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱ、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２からなる群から選択され、ここでＱは、Ｃ３～６炭素環、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する５～１４員のヘテロアリール、－ＯＲ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＸ２Ｈ、－ＣＸＨ２、－ＣＮ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲから選択され、各ｏは、独立して、１、２、３、及び４から選択され、各ｎは、独立して、１、２、３、４、及び５から選択される。
別の実施形態では、Ｒ４は－（ＣＨ２）ｎＱであり、ここでＱは、Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８であり、ｎは、１、２、３、４、及び５から選択される。さらなる実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｎＱであり、ここでＱは、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８であり、ここでＲ８は、Ｃ３～６シクロアルキルなどのＣ３～６炭素環であり、ｎは、１、２、３、４、及び５から選択される。例えば、Ｒ４は－（ＣＨ２）３ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ８であり、Ｒ８は、シクロプロピルである。
別の実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱであり、ここで、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒであり、ｎは、１、２、３、４、及び５から選択され、ｏは、１、２、３、及び４から選択される。さらなる実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱであり、ここで、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒであり、式中、Ｒは、Ｃ１～Ｃ３アルキルであり、ｎは、１、２、３、４、及び５から選択され、ｏは、１、２、３、及び４から選択される。別の実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｏＣ（Ｒ１０）２（ＣＨ２）ｎ－ｏＱであり、ここでＱは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒであり、式中、Ｒは、Ｃ１～Ｃ３アルキルであり、ｎは３であり、ｏは１である。いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、またはＣ２～３アルケニルである。例えば、Ｒ４は、３－アセトアミド－２，２－ジメチルプロピルである。
いくつかの実施形態では、１つのＲ１０は、Ｈであり、１つのＲ１０は、Ｃ１～３アルキルまたはＣ２～３アルケニルである。別の実施形態では、各Ｒ１０は、Ｃ１～３アルキルまたはＣ２～３アルケニルである。別の実施形態では、各Ｒ１０は、Ｃ１～３アルキル（例えば、メチル、エチルまたはプロピル）である。例えば、１つのＲ１０はメチルであり、１つのＲ１０は、エチルまたはプロピルである。例えば、１つのＲ１０はエチルであり、１つのＲ１０は、メチルまたはプロピルである。例えば、１つのＲ１０はプロピルであり、１つのＲ１０は、メチルまたはエチルである。例えば、各Ｒ１０は、メチルである。例えば、各Ｒ１０は、エチルである。例えば、各Ｒ１０は、プロピルである。
いくつかの実施形態では、１つのＲ１０は、Ｈであり、１つのＲ１０は、ＯＨである。別の実施形態では、各Ｒ１０は、ＯＨである。
別の実施形態では、Ｒ４は、非置換Ｃ１～４アルキル、例えば、非置換メチルである。
別の実施形態では、Ｒ４は、水素である。
ある特定の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）を有する化合物であって、式中、Ｒ４が、－（ＣＨ２）ｎＱまたは－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲであり、ここでＱが、－Ｎ（Ｒ）２であり、ｎは、３、４、及び５から選択される、化合物を提供する。
ある特定の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）を有する化合物であって、式中、Ｒ４が、－（ＣＨ２）ｎＱ、－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲ、－ＣＨＱＲ、及び－ＣＱ（Ｒ）２からなる群から選択され、ここでＱが、－Ｎ（Ｒ）２であり、ｎは、１、２、３、４、及び５から選択される、化合物を提供する。
ある特定の実施形態において、本開示は、式（Ｉ）を有する化合物であって、Ｒ２及びＲ３が、独立して、Ｃ２～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３が、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成し、Ｒ４が、－（ＣＨ２）ｎＱまたは－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲであり、ここでＱが、－Ｎ（Ｒ）２であり、ｎが、３、４、及び５から選択される、化合物を提供する。
ある特定の実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ２～１４アルキル、Ｃ２～１４アルケニル、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択されるか、あるいはＲ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成する。いくつかの実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ２～１４アルキル及びＣ２～１４アルケニルからなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、独立して、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成する。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ５～２０アルキル及びＣ５～２０アルケニルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、ヒドロキシルで置換されたＣ５～２０アルキルである。
他の実施形態では、Ｒ１は、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ”Ｍ’Ｒ’からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、Ｒ１は、－Ｒ＊ＹＲ”及び－ＹＲ”から選択される。いくつかの実施形態では、Ｙは、シクロプロピル基である。いくつかの実施形態では、Ｒ＊は、Ｃ８アルキルまたはＣ８アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ”は、Ｃ３～１２アルキルである。例えば、Ｒ”は、Ｃ３アルキルであり得る。例えば、Ｒ”は、Ｃ４～８アルキル（例えば、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、またはＣ８アルキル）であり得る。
いくつかの実施形態では、Ｒは、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊であり、ｑは、１、２、及び３から選択され、Ｒ＊は、アミノ、Ｃ１～Ｃ６アルキルアミノ、及びＣ１～Ｃ６ジアルキルアミノからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されているＣ１～１２アルキルである。例えば、Ｒは、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊であり、ｑは、１、２、及び３から選択され、Ｒ＊は、Ｃ１～Ｃ６ジアルキルアミノで置換されたＣ１～１２アルキルである。例えば、Ｒは、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊であり、ｑは、１、２、及び３から選択され、Ｒ＊は、Ｃ１～Ｃ６ジアルキルアミノで置換されたＣ１～３アルキルである。例えば、Ｒは、（ＣＨ２）ｑＯＲ＊であり、ｑは、１、２、及び３から選択され、Ｒ＊は、ジメチルアミノ（例えば、ジメチルアミノエタニル）で置換されたＣ１～３アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ５～２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ８アルキルである。他の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ９アルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１４アルキルである。他の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１８アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ２１～３０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ２６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ２８アルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ１は、
Figure 2022543773000028
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ５～２０アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１８アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、リノレイルである。
ある特定の実施形態では、Ｒ１は分岐鎖（例えば、デカン－２－イル、ウンデカン－３－イル、ドデカン－４－イル、トリデカン－５－イル、テトラデカン－６－イル、２－メチルウンデカン－３－イル、２－メチルデカン－２－イル、３－メチルウンデカン－３－イル、４－メチルドデカン－４－イル、またはヘプタデカ－９－イル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ１は、
Figure 2022543773000029
である。
ある特定の実施形態では、Ｒ１は、非置換Ｃ５～２０アルキルまたはＣ５～２０アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、置換Ｃ５～２０アルキルまたはＣ５～２０アルケニル（例えば、１－シクロプロピルノニルなどのＣ３～６炭素環で置換されているか、またはＯＨもしくはアルコキシで置換されている）である。例えば、Ｒ１は、
Figure 2022543773000030
である。
他の実施形態では、Ｒ１は、－Ｒ”Ｍ’Ｒ’である。ある特定の実施形態では、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。例えば、Ｒ１は、
Figure 2022543773000031
であり、式中、ｘ１は、１～１３の整数（例えば、３、４、５、及び６から選択される）であり、ｘ２は、１～１３の整数（例えば、１、２、及び３から選択される）であり、ｘ３は、２～１４の整数（例えば、４、５、及び６から選択される）である。例えば、ｘ１は３、４、５、及び６から選択され、ｘ２は１、２、及び３から選択され、ｘ３は４、５、及び６から選択される。
他の実施形態では、Ｒ１は、－（ＣＨＲ５Ｒ６）ｍ－Ｍ－ＣＲ２Ｒ３Ｒ７とは異なる。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、－Ｒ＊ＹＲ”及び－ＹＲ”から選択される。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃ３～８シクロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃ６～１０アリールである。いくつかの実施形態では、Ｙは、シクロプロピル基である。いくつかの実施形態では、Ｙは、シクロヘキシル基である。ある特定の実施形態では、Ｒ＊は、Ｃ１アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ”は、Ｃ３～１２アルキル及びＣ３～１２アルケニルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ”は、Ｃ８アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｙに隣接するＲ”は、Ｃ１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｙに隣接するＲ”は、Ｃ４～９アルキル（例えば、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７もしくはＣ８、またはＣ９アルキル）である。
いくつかの実施形態では、Ｒ”は、置換Ｃ３～１２（例えば、例えば、ヒドロキシルで置換されたＣ３～１２アルキル）である。例えば、Ｒ”は、
Figure 2022543773000032
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ４アルキル及びＣ４アルケニルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、Ｃ５アルキル及びＣ５アルケニルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ６アルキル及びＣ６アルケニルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ７アルキル及びＣ７アルケニルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ９アルキル及びＣ９アルケニルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、Ｃ４アルキル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルキル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルキル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルキル、Ｃ７アルケニル、Ｃ９アルキル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１１アルキル、Ｃ１１アルケニル、Ｃ１７アルキル、Ｃ１７アルケニル、Ｃ１８アルキル、及びＣ１８アルケニルから選択され、各々は、直鎖または分岐鎖のいずれかである。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、直鎖である。いくつかの実施形態では、Ｒ’は、分岐鎖である。
いくつかの実施形態では、Ｒ’は、
Figure 2022543773000033
である。いくつかの実施形態では、Ｒ’は、
Figure 2022543773000034
であり、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－である。他の実施形態では、Ｒ’は、
Figure 2022543773000035
であり、Ｍ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
他の実施形態では、Ｒ’は、Ｃ１１アルキル及びＣ１１アルケニルから選択される。他の実施形態では、Ｒ’は、Ｃ１２アルキル、Ｃ１２アルケニル、Ｃ１３アルキル、Ｃ１３アルケニル、Ｃ１４アルキル、Ｃ１４アルケニル、Ｃ１５アルキル、Ｃ１５アルケニル、Ｃ１６アルキル、Ｃ１６アルケニル、Ｃ１７アルキル、Ｃ１７アルケニル、Ｃ１８アルキル、及びＣ１８アルケニルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、直鎖Ｃ４～１８アルキルまたはＣ４～１８アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、分岐鎖（例えば、デカン－２－イル、ウンデカン－３－イル、ドデカン－４－イル、トリデカン－５－イル、テトラデカン－６－イル、２－メチルウンデカン－３－イル、２－メチルデカン－２－イル、３－メチルウンデカン－３－イル、４－メチルドデカン－４－イル、またはヘプタデカ－９－イル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、
Figure 2022543773000036

である。
ある特定の実施形態では、Ｒ’は、非置換Ｃ１～１８アルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ’は、置換Ｃ１～１８アルキル（例えば、メトキシなどのアルコキシで置換されたＣ１～１５アルキル、または１－シクロプロピルノニルなどのＣ３～６炭素環、またはＣ（Ｏ）Ｏ－アルキル、またはＣ（Ｏ）ＯＣＨ３もしくはＯＣ（Ｏ）ＣＨ３などのＯＣ（Ｏ）－アルキル）である。例えば、Ｒ’は、
Figure 2022543773000037
である。
ある特定の実施形態では、Ｒ’は、分岐鎖Ｃ１～１８アルキルである。例えば、Ｒ’は、
Figure 2022543773000038
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ”は、Ｃ３～１５アルキル及びＣ３～１５アルケニルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ”は、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、またはＣ８アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ”は、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、Ｃ１２アルキル、Ｃ１３アルキル、Ｃ１４アルキル、またはＣ１５アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｍ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
いくつかの実施形態では、Ｍ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、または－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－であり、Ｍ”は、Ｃ１～４アルキルまたはＣ２～４アルケニルである。
他の実施形態では、Ｍ’は、アリール基またはヘテロアリール基である。例えば、Ｍ’は、フェニル、オキサゾール、及びチアゾールからなる群から選択され得る。
いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－Ｍ”－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－であり、Ｍ’は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。いくつかの実施形態では、Ｍは、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－であり、Ｍ’は、－ＯＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’は、それぞれ、－ＯＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｍ及びＭ’はそれぞれ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
他の実施形態では、Ｍは、アリール基またはヘテロアリール基である。例えば、Ｍは、フェニル、オキサゾール、及びチアゾールからなる群から選択され得る。
いくつかの実施形態では、Ｍは、Ｍ’と同じである。他の実施形態では、ＭはＭ’とは異なる。
いくつかの実施形態では、Ｍ”は、結合である。いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ１～１３アルキルまたはＣ２～１３アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｍ”は、Ｃ１～６アルキルまたはＣ２～６アルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｍ”は、直鎖アルキルまたはアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｍ”は、分岐鎖であり、例えば、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２－である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ５は、Ｈである。いくつかの実施形態では、各Ｒ６は、Ｈである。ある特定のかかる実施形態では、各Ｒ５及び各Ｒ６は、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ７は、Ｈである。他の実施形態では、Ｒ７は、Ｃ１～３アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、またはｉ－プロピル）である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ５～１４アルキルまたはＣ５～１４アルケニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、同じである。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ８アルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ２アルキルである。他の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ４アルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ５アルキルである。他の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ７アルキルである。
他の実施形態では、Ｒ２及びＲ３は異なる。ある特定の実施形態では、Ｒ２は、Ｃ８アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ１～７（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、またはＣ７アルキル）またはＣ９アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ７アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ９アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ７及びＲ３は、Ｈである。
ある特定の実施形態では、Ｒ２は、Ｈである。
いくつかの実施形態では、ｍは、５、６、７、８、または９である。いくつかの実施形態では、ｍは、５、７、または９である。例えば、いくつかの実施形態では、ｍは、５である。例えば、いくつかの実施形態では、ｍは、７である。例えば、いくつかの実施形態では、ｍは、９である。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｎＱ及び－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＯＲ、－ＯＨ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＮ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、
－Ｎ（Ｈ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、
－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、－Ｃ（Ｒ）Ｎ（Ｒ）２Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、炭素環、及び複素環からなる群から選択される。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｒ８、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＲ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、または－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲである。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２、または－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、チオ尿素またはそのアイソスター（ｉｓｏｓｔｅｒｅ）、例えば、
Figure 2022543773000039

または－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２である。例えば、Ｑが－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２である場合、ｎは、４または５である。例えば、Ｒ９は、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－Ｃ（＝ＮＲ９）Ｒまたは－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）ＯＲ、例えば、－ＣＨ（＝Ｎ－ＯＣＨ３）、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－ＯＣＨ３、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）－ＯＨ、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）－ＯＣＨ３である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－ＯＨである。
ある特定の実施形態では、Ｑは、置換または非置換の５～１０員のヘテロアリールであり、例えば、Ｑは、トリアゾール、イミダゾール、ピリミジン、プリン、２－アミノ－１，９－ジヒドロ－６Ｈ－プリン－６－オン－９－イル（またはグアニン－９－イル）、アデニン－９－イル、シトシン－１－イル、またはウラシル－１－イルであり、これらの各々は、任意に、アルキル、ＯＨ、アルコキシ、－アルキル－ＯＨ、－アルキル－Ｏ－アルキルから選択される１つ以上の置換基で置換され、置換基は、さらに置換されることができる。ある特定の実施形態では、Ｑは、置換５～１４員のヘテロシクロアルキルであり、例えば、オキソ（＝Ｏ）、ＯＨ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、及びＣ１～３アルキルから選択される１つ以上の置換基で置換されている。例えば、Ｑは、４－メチルピペラジニル、４－（４－メトキシベンジル）ピペラジニル、イソインドリン－２－イル－１，３－ジオン、ピロリジン－１－イル－２，５－ジオン、またはイミダゾリジン－３－イル－２，４－ジオンである。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－ＮＨＲ８であり、Ｒ８は、オキソ（＝Ｏ）、アミノ（ＮＨ２）、モノまたはジアルキルアミノ、Ｃ１～３アルキル及びハロから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されたＣ３～６シクロアルキルである。例えば、Ｒ８は、シクロブテニル、例えば、３－（ジメチルアミノ）－シクロブタ－３－エン－４－イル－１，２－ジオンである。さらなる実施形態では、Ｒ８は、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ（ＮＨ２）、モノまたはジアルキルアミノ、Ｃ１～３アルキル、ヘテロシクロアルキル、及びハロから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されたＣ３～６シクロアルキルであり、モノまたはジアルキルアミノ、Ｃ１～３アルキル、及びヘテロシクロアルキルは、さらに置換されている。例えば、Ｒ８は、オキソ、アミノ、及びアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルであり、アルキルアミノは、例えば、Ｃ１～３アルコキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、及びハロのうちの１つ以上でさらに置換されている。例えば、Ｒ８は、３－（（（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）シクロブタ－３－エニル－１，２－ジオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ及びアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、３－（エチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ、チオ、及びアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、３－（エチルアミノ）－４－チオキソシクロブタ－２－エン－１－オンまたは２－（エチルアミノ）－４－チオキソシクロブタ－２－エン－１－オンである。例えば、Ｒ８は、チオ、及びアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、３－（エチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジチオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ及びジアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、３－（ジエチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ、チオ、及びジアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、２－（ジエチルアミノ）－４－チオキソシクロブタ－２－エン－１－オンまたは３－（ジエチルアミノ）－４－チオキソシクロブタ－２－エン－１－オンである。例えば、Ｒ８は、チオ、及びジアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、３－（ジエチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジチオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ及びアルキルアミノまたはジアルキルアミノのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルであり、アルキルアミノまたはジアルキルアミノは、例えば、１つ以上のアルコキシでさらに置換されている。例えば、Ｒ８は、３－（ビス（２－メトキシエチル）アミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオンである。例えば、Ｒ８は、オキソ、及びヘテロシクロアルキルのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、オキソ、及びピペリジニル、ピペラジニル、またはモルホリニルのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルである。例えば、Ｒ８は、オキソ、及びヘテロシクロアルキルのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルであり、ヘテロシクロアルキルは、例えば、１つ以上のＣ１～３アルキルでさらに置換されている。例えば、Ｒ８は、オキソ、及びヘテロシクロアルキルのうちの１つ以上で置換されたシクロブテニルであり、ヘテロシクロアルキル（例えば、ピペリジニル、ピペラジニル、またはモルホリニル）は、メチルでさらに置換されている。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－ＮＨＲ８であり、Ｒ８は、アミノ（ＮＨ２）、モノまたはジアルキルアミノ、Ｃ１～３アルキル、及びハロから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されたヘテロアリールである。例えば、Ｒ８は、チアゾールまたはイミダゾールである。
特定の実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２であり、式中、Ｒ９は、ＣＮ、Ｃ１～６アルキル、ＮＯ２、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、－ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ、またはＨである。例えば、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（ＣＨ３）２、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）ＮＨＣＨ３、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）ＮＨ２である。いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２であり、式中、Ｒ９は、ＣＮであり、Ｒは、モノまたはジアルキルアミノで置換されたＣ１～３アルキルであり、例えば、Ｒは、（（ジメチルアミノ）エチル）アミノである。いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＮＲ９）Ｎ（Ｒ）２であり、Ｒ９は、Ｃ１～６アルキル、ＮＯ２、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、－ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ、またはＨであり、Ｒは、モノまたはジアルキルアミノで置換されたＣ１～３アルキルであり、例えば、Ｒは、（（ジメチルアミノ）エチル）アミノである。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（Ｒ）２であり、式中、Ｒ９は、ＮＯ２、ＣＮ、Ｃ１～６アルキル、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、－ＯＲ、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ、またはＨである。例えば、Ｑは、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）Ｎ（ＣＨ３）２、－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）ＮＨＣＨ３、または－ＮＨＣ（＝ＣＨＲ９）ＮＨ２である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、－Ｎ（ＯＲ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、例えば、－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ３、－Ｎ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３、－Ｎ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－Ｎ（ＯＣＨ３）Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３、－Ｎ（ＯＣＨ３）Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－Ｎ（ＯＨ）Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、または－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ３である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒであり、式中、Ｒは、Ｃ１～３アルコキシルまたはＳ（Ｏ）ｚＣ１～３アルキルで任意に置換されたアルキルであり、式中、ｚは、０、１、または２である。
ある特定の実施形態では、Ｑは、非置換または置換Ｃ６～１０アリール（フェニルなど）またはＣ３～６シクロアルキルである。
いくつかの実施形態では、ｎは、１である。他の実施形態では、ｎは、２である。さらなる実施形態では、ｎは、３である。ある特定の他の実施形態では、ｎは、４である。例えば、Ｒ４は、－（ＣＨ２）２ＯＨであり得る。例えば、Ｒ４は、－（ＣＨ２）３ＯＨであり得る。例えば、Ｒ４は、－（ＣＨ２）４ＯＨであり得る。例えば、Ｒ４は、ベンジルであり得る。例えば、Ｒ４は、４－メトキシベンジルであり得る。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６炭素環である。いくつかの実施形態では、Ｒ４は、Ｃ３～６シクロアルキルである。例えば、Ｒ４は、任意に、例えば、ＯＨ、ハロ、Ｃ１～６アルキルなどで置換されたシクロヘキシルであり得る。例えば、Ｒ４は、２－ヒドロキシシクロヘキシルであり得る。
いくつかの実施形態では、Ｒは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒは、モノまたはジアルキルアミノで置換されたＣ１～３アルキルであり、例えば、Ｒは、（（ジメチルアミノ）エチル）アミノである。
いくつかの実施形態では、Ｒは、Ｃ１～３アルコキシル、アミノ、及びＣ１～Ｃ３ジアルキルアミノからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１～６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒは、非置換Ｃ１～３アルキルまたは非置換Ｃ２～３アルケニルである。例えば、Ｒ４は、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、または－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ３であり得る。
いくつかの実施形態では、Ｒは、置換Ｃ１～３アルキル、例えば、ＣＨ２ＯＨである。例えば、Ｒ４は、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨ２）３ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨ２）３ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＢｎ、－（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２ＯＨ、－（ＣＨ２）３ＮＨＣＨ２ＯＣＨ３、－（ＣＨ２）３ＮＨＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＳＣＨ３、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２であり得る。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、以下の群のうちのいずれかから選択される：
Figure 2022543773000040
Figure 2022543773000041
Figure 2022543773000042
Figure 2022543773000043
Figure 2022543773000044
Figure 2022543773000045
Figure 2022543773000046
いくつかの実施形態において、
Figure 2022543773000047
は、以下の群のうちのいずれかから選択される：
Figure 2022543773000048
Figure 2022543773000049
Figure 2022543773000050
Figure 2022543773000051
Figure 2022543773000052
Figure 2022543773000053
Figure 2022543773000054
Figure 2022543773000055
Figure 2022543773000056
Figure 2022543773000057
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、以下の群のうちのいずれかから選択される：
Figure 2022543773000058
Figure 2022543773000059
いくつかの実施形態において、
Figure 2022543773000060
は、以下の群のうちのいずれかから選択される：
Figure 2022543773000061
いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物は、アニオンをさらに含む。本明細書に記載されるように、アニオンは、アミンと反応してアンモニウム塩を形成することができる任意のアニオンであり得る。例としては、塩化物、臭化物、ヨウ化物、フッ化物、酢酸塩、ギ酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ジフルオロ酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、及びリン酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の式のうちのいずれかの化合物は、筋肉内投与のためのナノ粒子組成物を作製するのに好適である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、Ｎ、Ｏ、Ｓ、及びＰから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する５～１４員の芳香族または非芳香族複素環を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、芳香族または非芳香族のいずれかの、任意に置換されたＣ３～２０炭素環（例えば、Ｃ３～１８炭素環、Ｃ３～１５炭素環、Ｃ３～１２炭素環、またはＣ３～１０炭素環）を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、Ｃ３～６炭素環を形成する。他の実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、シクロヘキシルまたはフェニル基などのＣ６炭素環を形成する。ある特定の実施形態では、複素環またはＣ３～６炭素環は、１つ以上のアルキル基で置換される（例えば、同じ環原子で、または隣接もしくは非隣接環原子で）。例えば、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、１つ以上のＣ５アルキル置換を有するシクロヘキシルまたはフェニル基を形成し得る。ある特定の実施形態では、Ｒ２及びＲ３によって形成される複素環またはＣ３～６炭素環は、炭素環基で置換されている。例えば、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、シクロヘキシルで置換されたシクロヘキシルまたはフェニル基を形成し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、シクロヘプチル、シクロペンタデカニル、またはナフチル基などのＣ７～１５炭素環を形成する。
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、－（ＣＨ２）ｎＱ及び－（ＣＨ２）ｎＣＨＱＲから選択される。いくつかの実施形態では、Ｑは、－ＯＲ、－ＯＨ、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ、－ＣＸ３、－ＣＮ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｈ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、－Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ）２、－Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｈ）（Ｒ）、及び複素環からなる群から選択される。他の実施形態では、Ｑは、イミダゾール、ピリミジン、及びプリンからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、複素環または炭素環を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、Ｃ３～６炭素環を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、Ｃ６炭素環を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、フェニル基を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、シクロヘキシル基を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、複素環を形成する。ある特定の実施形態では、複素環またはＣ３～６炭素環は、１つ以上のアルキル基で置換される（例えば、同じ環原子で、または隣接もしくは非隣接環原子で）。例えば、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合される原子と一緒になって、１つ以上のＣ５アルキル置換を有するフェニル基を形成し得る。
いくつかの実施形態では、Ｒ５及びＲ６の少なくとも１つの存在は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｍに隣接するＲ５及びＲ６のうちの一方は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルであり、他方はＨである。いくつかの実施形態では、Ｍに隣接するＲ５及びＲ６のうちの一方は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルであり、他方はＨであり、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－または－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
いくつかの実施形態では、Ｒ５及びＲ６の最大で１つの存在は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｍに隣接するＲ５及びＲ６のうちの一方は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルであり、他方はＨである。いくつかの実施形態では、Ｍに隣接するＲ５及びＲ６のうちの一方は、Ｃ１～３アルキル、例えば、メチルであり、他方はＨであり、Ｍは、－ＯＣ（Ｏ）－または－Ｃ（Ｏ）Ｏ－である。
いくつかの実施形態では、Ｒ５及びＲ６のうちの少なくとも１つの存在は、メチルである。
式（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩｂ）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩＩｃ）、または（ＶＩＩＩｄ）のうちのいずれか１つの化合物は、適用可能な場合、以下の特徴のうちの１つ以上を含む。
いくつかの実施形態では、ｒは、０である。いくつかの実施形態では、ｒは、１である。
いくつかの実施形態では、ｎは２、３、または４である。いくつかの実施形態では、ｎは、２である。いくつかの実施形態では、ｎは、４である。いくつかの実施形態では、ｎは、３ではない。
いくつかの実施形態では、ＲＮは、Ｈである。いくつかの実施形態では、ＲＮは、Ｃ１～３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲＮは、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲＮは、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲＮは、Ｃ２アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｘａは、Ｏである。いくつかの実施形態では、Ｘａは、Ｓである。いくつかの実施形態では、Ｘｂは、Ｏである。いくつかの実施形態では、Ｘｂは、Ｓである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｔ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ、－Ｎ（（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ）２、及び複素環からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、－ＮＨ（ＣＨ２）ｔ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ、－Ｎ（（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ）２、及び複素環からなる群から選択される。
Ｒ１０が、ＮＨ（ＣＨ２）ｏＮ（Ｒ）２であるいくつかの実施形態では、ｏは、２、３、または４である。
－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２であるいくつかの実施形態では、ｐ１は、２である。－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２であるいくつかの実施形態では、ｑ１は、２である。
Ｒ１０が、－Ｎ（（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ）２であるいくつかの実施形態では、ｓ１は、２である。
Ｒ１０が、－ＮＨ（ＣＨ２）ｏＮ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｐＯ（ＣＨ２）ｑＮ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｓＯＲ、または－Ｎ（（ＣＨ２）ｓＯＲ）２であるいくつかの実施形態では、Ｒは、ＨまたはＣ１～Ｃ３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒは、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒは、Ｃ２アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲはＨである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲはＨであり、１つのＲはＣ１～Ｃ３アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲはＨであり、１つのＲは、Ｃ１アルキルである。例えば、いくつかの実施形態では、ＲはＨであり、１つのＲは、Ｃ２アルキルである。Ｒ１０が、－ＮＨ（ＣＨ２）ｔ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｐ１Ｏ（ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｒ）２、－ＮＨ（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ、または－Ｎ（（ＣＨ２）ｓ１ＯＲ）２であるいくつかの実施形態では、各Ｒは、Ｃ２～Ｃ４アルキルである。
例えば、いくつかの実施形態では、１つのＲは、Ｈであり、１つのＲは、Ｃ２～Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、複素環である。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、モルホリニルである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ１０は、メチルピペラジニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ５及びＲ６の各存在は、Ｈである。
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下のものからなる群から選択される。
Figure 2022543773000062
Figure 2022543773000063
Figure 2022543773000064
Figure 2022543773000065
さらなる実施形態では、式（Ｉ Ｉ）の化合物は、以下のものからなる群から選択される。
Figure 2022543773000066
いくつかの実施形態では、式（Ｉ Ｉ）または式（Ｉ ＩＶ）の化合物は、以下のものからなる群から選択される。
Figure 2022543773000067
Figure 2022543773000068
Figure 2022543773000069
Figure 2022543773000070
Figure 2022543773000071
Figure 2022543773000072
Figure 2022543773000073
Figure 2022543773000074
Figure 2022543773000075
Figure 2022543773000076
Figure 2022543773000077
Figure 2022543773000078
Figure 2022543773000079
Figure 2022543773000080
Figure 2022543773000081
Figure 2022543773000082
Figure 2022543773000083
いくつかの実施形態では、本開示の脂質は、以下の化合物Ｉ－３４０Ａを含む：
Figure 2022543773000084
式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、または（Ｉ ＶＩＩＩｄ）に記載の脂質の中心アミン部分は、生理的ｐＨでプロトン化され得る。したがって、脂質は、生理的ｐＨで正または部分的正電荷を有し得る。そのような脂質は、カチオン性またはイオン性（アミノ）脂質と称される場合がある。脂質はまた、双性イオン性、すなわち、正電荷及び負電荷の両方を有する中性分子であってもよい。
いくつかの態様では、本開示のイオン性脂質は、式Ｉ（Ｉ ＩＸ）：
Figure 2022543773000085
の化合物のうちの１つ以上、またはその塩もしくは異性体であり得、式中、
Ｗは、
Figure 2022543773000086
であり、
環Ａは、
Figure 2022543773000087
であり、
ｔは、１または２であり、
Ａ１及びＡ２は、それぞれ独立して、ＣＨまたはＮから選択され、
Ｚは、ＣＨ２であるか、または存在せず、ＺがＣＨ２である場合、破線（１）及び（２）はそれぞれ単結合を表し、Ｚが存在しない場合、破線（１）及び（２）は両方とも存在せず、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、独立して、Ｃ５～２０アルキル、Ｃ５～２０アルケニル、－Ｒ”ＭＲ’、－Ｒ＊ＹＲ”、－ＹＲ”、及び－Ｒ＊ＯＲ”からなる群から選択され、
ＲＸ１及びＲＸ２は、それぞれ独立して、ＨまたはＣ１～３アルキルであり、
各Ｍは、独立して、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）－、－Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｓ）－、－ＣＨ（ＯＨ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、アリール基、及びヘテロアリール基からなる群から選択され、
Ｍ＊は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｗ１及びＷ２は、それぞれ独立して、－Ｏ－及び－Ｎ（Ｒ６）－からなる群から選択され、
各Ｒ６は、独立して、Ｈ及びＣ１～５アルキルからなる群から選択され、
Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３は、結合、－ＣＨ２－、－（ＣＨ２）２－、－ＣＨＲ－、－ＣＨＹ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｎ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－、－（ＣＨ２）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）ｎ－、－ＣＨ（ＯＨ）－、－Ｃ（Ｓ）－、及び－ＣＨ（ＳＨ）－からなる群から独立して選択され、
各Ｙが、独立して、Ｃ３～６炭素環であり、
各Ｒ＊が、独立して、Ｃ１～１２アルキル及びＣ２～１２アルケニルからなる群から選択され、
各Ｒは、独立して、Ｃ１～３アルキル及びＣ３～６炭素環からなる群から選択され、
各Ｒ’は、独立して、Ｃ１～１２アルキル、Ｃ２～１２アルケニル、及びＨからなる群から選択され、
各Ｒ”は、独立して、Ｃ３～１２アルキル、Ｃ３～１２アルケニル、及び－Ｒ＊ＭＲ’からなる群から選択され、
ｎは、１～６の整数であり、
式中、環Ａが
Figure 2022543773000088
である場合、
ｉ）Ｘ１、Ｘ２、及びＸ３のうちの少なくとも１つが、－ＣＨ２－ではない、及び／または
ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５のうちの少なくとも１つは、－Ｒ”ＭＲ’である。
いくつかの実施形態では、化合物は、式（Ｉ ＩＸａ１）～（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかである：
Figure 2022543773000089
Figure 2022543773000090
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、米国出願第６２／２７１，１４６号、同第６２／３３８，４７４号、同第６２／４１３，３４５号、及び同第６２／５１９，８２６号、ならびにＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０６８３００号に記載される化合物のうちの１つ以上である。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、米国出願第６２／５１９，８２６号に記載される化合物１～１５６から選択される。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、米国出願第６２／５１９，８２６号に記載される化合物１～１６、４２～６６、６８～７６、及び７８～１５６から選択される。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、
Figure 2022543773000091
（化合物Ｉ－３５６（本明細書では化合物ＭもしくはＩ－Ｍとも称される）、またはその塩である。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、
Figure 2022543773000092
［化合物Ｉ－Ｎ］、またはその塩である。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、
Figure 2022543773000093
［化合物Ｉ－Ｏ］、またはその塩である。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、
Figure 2022543773000094
［化合物Ｉ－Ｐ］、またはその塩である。
いくつかの実施形態では、イオン性脂質は、
Figure 2022543773000095
［化合物Ｉ－Ｑ］、またはその塩である。
本明細書の式のうちのいずれかに記載の脂質、例えば、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の中心アミン部分は、生理学的ｐＨでプロトン化され得る。したがって、脂質は、生理的ｐＨで正または部分的正電荷を有し得る。そのような脂質は、カチオン性またはイオン性（アミノ）脂質と称される場合がある。脂質はまた、双性イオン性、すなわち、正電荷及び負電荷の両方を有する中性分子であってもよい。
いくつかの実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で約１モル％～９９モル％の範囲である。
一実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、または９９モル％である。
一実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で約３０モル％～約７０モル％、約３５モル％～約６５モル％、約４０モル％～約６０モル％、及び約４５モル％～約５５モル％の範囲である。
１つの特定の実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で約４５モル％である。
１つの特定の実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で約４０モル％である。
１つの特定の実施形態では、本発明のイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物の量は、脂質組成物中で約５０モル％である。
本明細書に開示されるイオン性アミノ脂質、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有する化合物に加えて、本明細書に開示される脂質系組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、コレステロール及び／またはコレステロール類似体、非カチオン性ヘルパー脂質、構造的脂質、ＰＥＧ脂質、及びそれらの任意の組み合わせなどの追加の成分を含むことができる。
本発明の追加のイオン性脂質は、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、（１３Ｚ，１６５Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニドコサ－１３－１６－ジエン－１－アミン（Ｌ６０８）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる非限定的な群から選択され得る。これらに加えて、イオン性アミノ脂質はまた、環状アミン基を含む脂質でもあり得る。
本発明のイオン性脂質はまた、国際公開第ＷＯ２０１７／０７５５３１Ａ１号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に開示される化合物でもあり得る。例えば、イオン性アミノ脂質としては、
Figure 2022543773000096
及びそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
本発明のイオン性脂質はまた、国際公開第ＷＯ２０１５／１９９９５２Ａ１号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に開示される化合物でもあり得る。例えば、イオン性アミノ脂質としては、
Figure 2022543773000097
Figure 2022543773000098
及びそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
前述のまたは関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、例えば、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩＩ）、（ＶＩ）、（ＶＩ－ａ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、（ＶＩＩｂ－１）、（ＶＩＩｂ－２）、（ＶＩＩｂ－３）、（ＶＩＩｃ）、（ＶＩＩｄ）、（ＶＩＩＩｃ）、（ＶＩＩＩｄ）、（ＩＸ）、（ＩＸａ１）、（ＩＸａ２）、（ＩＸａ３）、（ＩＸａ４）、（ＩＸａ５）、（ＩＸａ６）、（ＩＸａ７）、または（ＩＸａ８）（明確にするために、これらのそれぞれの前に文字Ｉが付いている）のうちのいずれかを有するいずれかの化合物に含まれる化合物を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １～３５６のうちのいずれかを含む化合物を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １８（化合物Ｘとも称される）、Ｉ ２５（化合物Ｙとも称される）、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １１３、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２４４、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、Ｉ ３２２、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、Ｉ ３３０、Ｉ ３３１、及びＩ ３３２からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含む。別の実施形態において、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １８（化合物Ｘとも称される）、Ｉ ２５（化合物Ｙとも称される）、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、及びＩ ３３０からなる群から選択される化合物を含む。別の実施形態において、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １８２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、及びＩ ３２６からなる群から選択される化合物を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本発明の化合物、例えば、化合物番号１～３５６のうちのいずれかを含む化合粒の合成は、２０１８年９月１９日に出願された米国特許出願第６２／７３３，３１５号の合成説明に従う。
代表的な合成経路：
化合物Ｉ－１８２：ヘプタデカン－９－イル８－（（３－（（２－（メチルアミノ）－３，４－ジオキソシクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）プロピル）（８－（ノニルオキシ）－８－オキソオクチル）アミノ）オクタノエート３－メトキシ－４－（メチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオン
Figure 2022543773000099
１００ｍＬのジエチルエーテル中の３，４－ジメトキシ－３－シクロブテン－１，２－ジオン（１ｇ、７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中の２Ｍメチルアミン溶液（３．８ｍＬ、７．６ｍｍｏｌ）及びほぼ直ちに形成されたｐｐｔ．を添加した。混合物を室温で２４時間撹拌し、次いで濾過し、濾過固体をジエチルエーテルで洗浄し、空気乾燥した。濾過固体を高温のＥｔＯＡｃに溶解し、濾過し、濾液を室温まで冷却させ、次いで０℃まで冷却してｐｐｔを得た。これを濾過により単離し、冷ＥｔＯＡｃで洗浄し、空気乾燥させ、次いで真空下で乾燥させて、３－メトキシ－４－（メチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオン（０．７０ｇ、５ｍｍｏｌ、７３％）を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：ｐｐｍ８．５０（ｂｒ．ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６９Ｈｚ）；４．２７（ｓ，３Ｈ）；３．０２（ｓｄｄ，３Ｈ，Ｊ＝４２Ｈｚ，４．５Ｈｚ）。
ヘプタデカン－９－イル８－（（３－（（２－（メチルアミノ）－３，４－ジオキソシクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）プロピル）（８－（ノニルオキシ）－８－オキソオクチル）アミノ）オクタノエート
Figure 2022543773000100
１０ｍＬのエタノール中のヘプタデカン－９－イル８－（（３－アミノプロピル）（８－（ノニルオキシ）－８－オキソオクチル）アミノ）オクタノエート（２００ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、３－メトキシ－４－（メチルアミノ）シクロブタ－３－エン－１，２－ジオン（３９ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた無色の溶液を室温で２０時間撹拌し、その後、ＬＣ／ＭＳによって出発アミンが残存しなかった。溶液を真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中０～１００％（ジクロロメタン中の１％ＮＨ４ＯＨ、２０％ＭｅＯＨの混合物））で精製して、ヘプタデカン－９－イル８－（（３－（（２－（メチルアミノ）－３，４－ジオキソシクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）プロピル）（８－（ノニルオキシ）－８－オキソオクチル）アミノ）オクタノエート（１３８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、６０％）をグミ状の白色固体として得た。ＵＰＬＣ／ＥＬＳＤ：ＲＴ＝３分．Ｃ５１Ｈ９５Ｎ３Ｏ６のＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ（ＭＨ＋）８３３．４．１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：ｐｐｍ７．８６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）；４．８６（五重線，１Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）；４．０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）；３．９２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ）；３．２０ （ｓ，６Ｈ）；２．６３（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）；２．４２（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）；２．２８（ｍ，４Ｈ）；１．７４（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）；１．６１（ｍ，８Ｈ）；１．５０（ｍ，５Ｈ）；１．４１（ｍ，３Ｈ）；１．２５（ｂｒ．ｍ，４７Ｈ）；０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）。
化合物Ｉ－３０１：ヘプタデカン－９－イル８－（（３－（（２－（メチルアミノ）－３，４－ジオキソシクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）プロピル）（８－オキソ－８－（ウンデカン－３－イルオキシ）オクチル）アミノ）オクタノエート
Figure 2022543773000101
ヘプタデカン－９－イル８－（（３－アミノプロピル）（８－オキソ－８－（ウンデカン－３－イルオキシ）オクチル）アミノ）オクタノエート（５００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）をヘプタデカン－９－イル８－（（３－アミノプロピル）（８－（ノニルオキシ）－８－オキソオクチル）アミノ）オクタノエートの代わりに使用したことを除き、化合物Ｉ－３０１を化合物１８２と同様に調製した。水性ワークアップ後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中の０～５０％（ジクロロメタン中１％ＮＨ４ＯＨ、２０％ＭｅＯＨの混合物））によって精製し、ヘプタデカン－９－イル８－（（３－（（２－（メチルアミノ）－３，４－ジオキソシクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）プロピル）（８－オキソ－８－（ウンデカン－３－イルオキシ）オクチル）アミノ）オクタノエート（１８０ｍｇ、３２％）を白色ワックス状固体として得た。ＨＰＬＣ／ＵＶ（２５４ｎｍ）：ＲＴ＝６．７７分．Ｃ５２Ｈ９７Ｎ３Ｏ６のＭＳ（ＣＩ）：ｍ／ｚ（ＭＨ＋）８６０．７。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ｐｐｍ４．８６－４．７９（ｍ，２Ｈ）；３．６６（ｂｓ，２Ｈ）；３．２５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ）；２．５６－２．５２（ｍ，２Ｈ）；２．４２－２．３７（ｍ，４Ｈ）；２．２８（ｄｄ，４Ｈ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，７．４Ｈｚ）；１．７８－１．６８（ｍ，３Ｈ）；１．６４－１．５０（ｍ，１６Ｈ）；１．４８－１．３８（ｍ，６Ｈ）；１．３２－１．１８（ｍ，４３Ｈ）；０．８８－０．８４（ｍ，１２Ｈ）。
（ｉｉ）コレステロール／構造的脂質
本明細書に記載される免疫細胞送達ＬＮＰは、１つ以上の構造的脂質を含む。
本明細書で使用する場合、「構造的脂質」という用語は、ステロールを指し、また、ステロール部分を含有する脂質を指す。脂質ナノ粒子内に構造的脂質を組み込むことは、粒子内の他の脂質の凝集を軽減するのに役立ち得る。構造的脂質には、コレステロール、フェコステロール、エルゴステロール、バシカステロール、トマチジン、トマチン、ウルソール、α－トコフェロール、及びそれらの混合物が含まれ得るが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロールである。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロール及びコルチコステロイド（例えば、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、及びヒドロコルチゾンなど）、またはそれらの組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、構造的脂質は、ステロールである。本明細書で定義されるとき、「ステロール」は、ステロイドアルコールからなるステロイドの亜群である。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、ステロイドである。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロールである。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロールの類似体である。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、α－トコフェロールである。構造的脂質の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：
Figure 2022543773000102
本明細書に記載される免疫細胞送達ＬＮＰは、１つ以上の構造的脂質を含む。
本明細書で使用する場合、「構造的脂質」という用語は、ステロールを指し、また、ステロール部分を含有する脂質を指す。脂質ナノ粒子内に構造的脂質を組み込むことは、粒子内の他の脂質の凝集を軽減するのに役立ち得る。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロール及びコルチコステロイド（例えば、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン及びヒドロコルチゾンなど）、またはそれらの組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、構造的脂質は、ステロールである。本明細書で定義されるとき、「ステロール」は、ステロイドアルコールからなるステロイドの亜群である。構造的脂質には、ステロール（例えば、フィトステロールまたはズーステロール）が含まれ得るが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態では、構造的脂質は、ステロイドである。例えば、ステロールは、コレステロール、β－シトステロール、フェコステロール、エルゴステロール、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、エルゴステロール、トマチジン、トマチン、ウルソール酸、α－トコフェロール、または本明細書の表１～１６の化合物Ｓ１～１４８のうちのいずれか１つを含み得るが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロールである。ある特定の実施形態では、構造的脂質は、コレステロールの類似体である。
ある特定の実施形態では、構造的脂質は、α－トコフェロールである。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＩ：
Figure 2022543773000103
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、もしくは
Figure 2022543773000104
であり、
Ｒｂ１、Ｒｂ２、及びＲｂ３のそれぞれが、独立して、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、もしくは任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000105
であり、
各
Figure 2022543773000106
が、独立して、単結合もしくは二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、あるいはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000107
を形成し、
Ｌ１ａが、存在しないか、
Figure 2022543773000108
であり、
Ｌ１ｂが、存在しないか、
Figure 2022543773000109
であり、
ｍが、１、２、または３であり、
Ｌ１ｃが、存在しないか、
Figure 2022543773000110
であり、
Ｒ６が、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０シクロアルキル、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０シクロアルケニル、任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリール、任意に置換されたＣ２～Ｃ９ヘテロシクリル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ９ヘテロアリールである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩａ：
Figure 2022543773000111
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩｂ：
Figure 2022543773000112
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩｃ：
Figure 2022543773000113
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩｄ：
Figure 2022543773000114
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、存在しない。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、
Figure 2022543773000115
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ａは、
Figure 2022543773000116
である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１ｂは、存在しない。いくつかの実施形態では、Ｌ１ｂは、
Figure 2022543773000117
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ｂは、
Figure 2022543773000118
である。
いくつかの実施形態では、ｍは、１または２である。いくつかの実施形態では、ｍは、１である。いくつかの実施形態では、ｍは、２である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１ｃは、存在しない。いくつかの実施形態では、Ｌ１ｃは、
Figure 2022543773000119
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１ｃは、
Figure 2022543773000120
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は
Figure 2022543773000121
であり、式中、
ｎ１は、０、１、２、３、４、または５であり、
各Ｒ７は、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、各Ｒ７は、独立して
Figure 2022543773000122
である。
いくつかの実施形態では、ｎ１は、０、１、または２である。いくつかの実施形態では、ｎは、０である。いくつかの実施形態では、ｎ１は、１である。いくつかの実施形態では、ｎ１は、２である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０シクロアルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０モノシクロアルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は
Figure 2022543773000123
であり、式中、
ｎ２は、０、１、２、３、４、または５であり、
ｎ３は、０、１、２、３、４、５、６、または７であり、
ｎ４は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、または９であり、
ｎ５は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１であり、
ｎ６は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３であり、
各Ｒ８は、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、各Ｒ８は、独立して、
Figure 2022543773000124
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０ポリシクロアルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、
Figure 2022543773000125
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ３～Ｃ１０シクロアルケニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、
Figure 2022543773000126
であり、式中、
ｎ７は、０、１、２、３、４、５、６、または７であり、
ｎ８は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、または９であり、
ｎ９は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１であり、
各Ｒ９は、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、
Figure 2022543773000127
である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ９は、独立して
Figure 2022543773000128
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ２～Ｃ９ヘテロシクリルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は
Figure 2022543773000129
であり、式中、
ｎ１０は、０、１、２、３、４、または５であり、
ｎ１１は、０、１、２、３、４、または５であり、
ｎ１２は、０、１、２、３、４、５、６、または７であり、
ｎ１３は、０、１、２、３、４、５、６、７、８、または９であり、
各Ｒ１０は、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｙ１及びＹ２の各々は、独立して、Ｏ、Ｓ、ＮＲＢ、またはＣＲ１１ａＲ１１ｂであり、
式中、ＲＢは、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂの各々は、独立して、Ｈ、ハロ、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｙ２がＣＲ１１ａＲ１１ｂである場合、Ｙ１は、Ｏ、Ｓ、またはＮＲＢである。
いくつかの実施形態では、Ｙ１は、Ｏである。
いくつかの実施形態では、Ｙ２は、Ｏである。いくつかの実施形態では、Ｙ２は、ＣＲ１１ａＲ１１ｂである。
いくつかの実施形態では、各Ｒ１０は、独立して
Figure 2022543773000130
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、任意に置換されたＣ２～Ｃ９ヘテロアリールである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は
Figure 2022543773000131
であり、式中、
Ｙ３は、ＮＲＣ、Ｏ、またはＳであり、
ｎ１４は、０、１、２、３、または４であり、
ＲＣは、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
各Ｒ１２は、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ６は、
Figure 2022543773000132
である。いくつかの実施形態では、Ｒ６は、
Figure 2022543773000133
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＩＩ：
Figure 2022543773000134
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000135
であり、
Figure 2022543773000136
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000137
を形成し、
Ｌ１が、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキレンであり、
Ｒ１３ａ、Ｒ１３ｂ、及びＲ１３ｃの各々は、独立して、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＩａ：
Figure 2022543773000138
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＩｂ：
Figure 2022543773000139
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022543773000140
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１３ａ、Ｒ１３ｂ、及びＲ１３ｃのそれぞれは、独立して、
Figure 2022543773000141
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＩＩＩ：
Figure 2022543773000142
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000143
であり、
各
Figure 2022543773000144
が、独立して、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、ヒドロキシル、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、－ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４ｃであり、式中、Ｒ４ｃは、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000145
を形成し、
Ｒ１４が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ１５が、
Figure 2022543773000146
であり、式中、
Ｒ１６が、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ１７ｂが、Ｈ、ＯＲ１７Ｃ、任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリール、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ１７Ｃが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
ｏ１が、０、１、２、３、４、５、６、７、または８であり、
ｐ１が、０、１、または２であり、
ｐ２が、０、１、または２であり、
Ｚが、ＣＨ２Ｏ、Ｓ、またはＮＲＤであり、式中、ＲＤが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
各Ｒ１８が、独立して、ハロまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＩＩａ：
Figure 2022543773000147
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＩＩｂ：
Figure 2022543773000148
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ１４は、Ｈ、
Figure 2022543773000149
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１４は、
Figure 2022543773000150
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１５は、
Figure 2022543773000151
である。いくつかの実施形態では、Ｒ１５は、
Figure 2022543773000152
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１６はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ１６は、
Figure 2022543773000153
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１７ａは、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７ａは、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１７ｂは、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７ｂは、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７ｂは、ＯＲ１７ｃである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１７ｃは、Ｈ、
Figure 2022543773000154
である。いくつかの実施形態では、Ｒ１７Ｃは、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ１７Ｃは、
Figure 2022543773000155
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１５は、
Figure 2022543773000156
である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ１８は、独立して
Figure 2022543773000157
である。
いくつかの実施形態では、Ｚは、ＣＨ２である。いくつかの実施形態では、Ｚは、Ｏである。いくつかの実施形態では、Ｚは、ＮＲＤである。
いくつかの実施形態では、ｏ１は、０、１、２、３、４、５、または６である。
いくつかの実施形態では、ｏ１は、０である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、１である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、２である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、３である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、４である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、５である。いくつかの実施形態では、ｏ１は、６である。
いくつかの実施形態では、ｐ１は、０または１である。いくつかの実施形態では、ｐ１は、０である。いくつかの実施形態では、ｐ１は、１である。
いくつかの実施形態では、ｐ２は、０または１である。いくつかの実施形態では、ｐ２は、０である。いくつかの実施形態では、ｐ２は、１である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＩＶ：
Figure 2022543773000158
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000159

であり、
Figure 2022543773000160
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000161
を形成し、
ｓが、０または１であり、
Ｒ１９が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２０が、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２１が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＶａ：
Figure 2022543773000162
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＶｂ：
Figure 2022543773000163
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ１９は、Ｈ
Figure 2022543773000164
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１９は、
Figure 2022543773000165
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２０は、
Figure 2022543773000166
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２１は、Ｈ、
Figure 2022543773000167
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＶ：
Figure 2022543773000168
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000169
であり、
Figure 2022543773000170
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000171
を形成し、
Ｒ２２が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２３が、ハロ、ヒドロキシル、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６ヘテロアルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶａ：
Figure 2022543773000172
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶｂ：
Figure 2022543773000173
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２２は、Ｈ、
Figure 2022543773000174
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２２は、
Figure 2022543773000175
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２３は、
Figure 2022543773000176
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＶＩ：
Figure 2022543773000177
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000178
であり、
Figure 2022543773000179
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000180
を形成し、
Ｒ２４が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２５ａ及びＲ２５ｂのそれぞれが、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩａ：
Figure 2022543773000181
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩｂ：
Figure 2022543773000182
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２４は、Ｈ、
Figure 2022543773000183
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２４は、
Figure 2022543773000184
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２５ａ及びＲ２５ｂのそれぞれは、独立して、
Figure 2022543773000185
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＶＩＩ：
Figure 2022543773000186
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニル、または
Figure 2022543773000187
であり、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、及びＲ１ｅのそれぞれが、独立して、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000188
であり、
Figure 2022543773000189
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000190
を形成し、
ｑが、０または１であり、
Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂのそれぞれが、独立して、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２６ａ及びＲ２６ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000191
を形成し、Ｒ２６ｃ及びＲ２６のそれぞれが、独立して、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２７ａ及びＲ２７ｂのそれぞれが、Ｈ、ヒドロキシル、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩＩａ：
Figure 2022543773000192
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩＩｂ：
Figure 2022543773000193
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂは、独立して、Ｈ、
Figure 2022543773000194
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂは、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000195
を形成する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂは、それぞれが結合される原子と一緒に、組み合わさって、
Figure 2022543773000196
を形成する。いくつかの実施形態では、Ｒ２６ａ及びＲ２６ｂは、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000197
を形成する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２６Ｃ及びＲ２６のそれぞれは、独立して、Ｈ、
Figure 2022543773000198
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２７ａ及びＲ２７ｂのそれぞれは、Ｈ、ヒドロキシル、または任意に置換されたＣ１～Ｃ３アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ２７ａ及びＲ２７ｂの各々は、独立して、Ｈ、ヒドロキシル、
Figure 2022543773000199
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＶＩＩＩ：
Figure 2022543773000200
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000201
であり、
Figure 2022543773000202
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000203
を形成し、
Ｒ２８が、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
ｒが、１、２、または３であり、
各Ｒ２９が、独立して、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３０ａ、Ｒ３０ｂ、及びＲ３０ｃのそれぞれが、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩＩＩａ：
Figure 2022543773000204
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＶＩＩＩｂ：
Figure 2022543773000205
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ２８は、Ｈ、
Figure 2022543773000206
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ２８は、
Figure 2022543773000207
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３０ａ、Ｒ３０ｂ、及びＲ３０ｃのそれぞれは、独立して、
Figure 2022543773000208
である。
いくつかの実施形態では、ｒは、１である。いくつかの実施形態では、ｒは、２である。いくつかの実施形態では、ｒは、３である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ２９は、独立して、Ｈ、
Figure 2022543773000209
である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ２９は、独立して、Ｈまたは
Figure 2022543773000210
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＩＸ：
Figure 2022543773000211
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ１ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000212
であり、
Figure 2022543773000213
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000214
を形成し、
Ｒ３１が、ＨまたはＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３２ａ及びＲ３２ｂの各々が、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＸａ：
Figure 2022543773000215
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＩＸｂ：
Figure 2022543773000216
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ３１は、Ｈ、
Figure 2022543773000217
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３１は、
Figure 2022543773000218
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３２ａ及びＲ３２ｂのそれぞれは、独立して、
Figure 2022543773000219
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＸ：
Figure 2022543773000220
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000221
であり、
Figure 2022543773000222
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000223
を形成し、
Ｒ３３ａが、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルまたは
Figure 2022543773000224
であり、ここで、Ｒ３５が、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ６～Ｃ１０アリールであり、
Ｒ３３ｂが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであるか、または
Ｒ３５及びＲ３３ｂが、それぞれが結合される原子と一緒になって、任意に置換されたＣ３～Ｃ９ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ３４が、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６ヘテロアルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸａ：
Figure 2022543773000225
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸｂ：
Figure 2022543773000226
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ３３ａは、
Figure 2022543773000227
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３５は、
Figure 2022543773000228
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３５は、
Figure 2022543773000229
であり、式中、
ｔは、０、１、２、３、４、または５であり、
各Ｒ３６は、独立して、ハロ、ヒドロキシル、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、または任意に置換されたＣ１～Ｃ６ヘテロアルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ３４は、
Figure 2022543773000230
であり、ここで、ｕは、０、１、２、３、または４である。
いくつかの実施形態では、ｕは、３または４である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＸＩ：
Figure 2022543773000231
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000232
であり、
Figure 2022543773000233
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000234
を形成し、
Ｒ３７ａ及びＲ３７ｂのそれぞれが、独立して、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ１～Ｃ６ヘテロアルキル、ハロ、またはヒドロキシルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸＩａ：
Figure 2022543773000235
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸＩｂ：
Figure 2022543773000236
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｒ３７ａは、ヒドロキシルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ３７ｂは、
Figure 2022543773000237
である。
ある態様において、本発明の構造的脂質は、式ＳＸＩＩ：
Figure 2022543773000238
（式中、
Ｒ１ａが、Ｈ、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキル、任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルケニル、もしくは任意に置換されたＣ２～Ｃ６アルキニルであり、
Ｘが、ＯまたはＳであり、
Ｒ２が、ＨもしくはＯＲＡであり、式中、ＲＡは、Ｈもしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｈ、もしくは
Figure 2022543773000239
であり、
Figure 2022543773000240
が、単結合または二重結合を表し、
Ｗが、ＣＲ４ａまたはＣＲ４ａＲ４ｂであり、Ｗと隣接する炭素との間に二重結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａであり、Ｗと隣接する炭素との間に単結合が存在する場合、ＷがＣＲ４ａＲ４ｂであり、
Ｒ４ａ及びＲ４ｂのそれぞれが、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５ａ及びＲ５ｂのそれぞれが、独立して、ＨもしくはＯＲＡであるか、またはＲ５ａ及びＲ５ｂが、それぞれが結合される原子と一緒に組み合わさって、
Figure 2022543773000241
を形成し、
Ｑが、Ｏ、Ｓ、またはＮＲＥであり、ここで、ＲＥが、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３８が、任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を特徴とする。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸＩＩａ：
Figure 2022543773000242
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＳＸＩＩｂ：
Figure 2022543773000243
の構造、またはその薬学的に許容される塩を有する。
いくつかの実施形態では、Ｑは、ＮＲＥである。
いくつかの実施形態では、ＲＥは、Ｈまたは
Figure 2022543773000244
である。
いくつかの実施形態では、ＲＥは、Ｈである。いくつかの実施形態では、ＲＥは、
Figure 2022543773000245
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３８は、
Figure 2022543773000246
であり、ここで、ｕは、０、１、２、３、または４である。
いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｏである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ａは、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ａは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｈまたは任意に置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ｂは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ２は、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ４ａは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ４ｂは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、
Figure 2022543773000247
は、二重結合を表す。
いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、
Figure 2022543773000248
である。
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは、Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｒ５ｂは、Ｈである。
ある態様において、本発明は、表１の化合物Ｓ－１～４２、Ｓ－１５０、Ｓ－１５４、Ｓ－１６２～１６５、Ｓ－１６９～１７２及びＳ－１８４のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。本明細書で使用する場合、「ＣＭＰＤ」は、「化合物」を指す。
Figure 2022543773000249
Figure 2022543773000250
Figure 2022543773000251
Figure 2022543773000252
Figure 2022543773000253
ある態様において、本発明は、表２の化合物Ｓ－４３～５０及びＳ－１７５～１７８のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000254
ある態様において、本発明は、表３の化合物Ｓ－５１～６７、Ｓ－１４９及びＳ－１５３のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000255
Figure 2022543773000256
ある態様において、本発明は、表４の化合物Ｓ－６８～７３のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000257
ある態様において、本発明は、表５の化合物Ｓ－７４～７８のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000258
ある態様において、本発明は、表６の化合物Ｓ－７９もしくはＳ－８０のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000259
ある態様において、本発明は、表７の化合物Ｓ－８１～８７、Ｓ－１５２及びＳ－１５７のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000260
ある態様において、本発明は、表８の化合物Ｓ－８８～９７のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000261
ある態様において、本発明は、表９の化合物Ｓ－９８～１０５及びＳ－１８０～１８２のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000262
ある態様において、本発明は、表１０の化合物Ｓ－１０６の構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000263
ある態様において、本発明は、表１１の化合物Ｓ－１０７もしくはＳ－１０８の構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000264
ある態様において、本発明は、表１２の化合物Ｓ－１０９の構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000265
ある態様において、本発明は、表１３の化合物Ｓ－１１０～１３０、Ｓ－１５５、Ｓ－１５６、Ｓ－１５８、Ｓ－１６０、Ｓ－１６１、Ｓ－１６６～１６８、Ｓ－１７３、Ｓ－１７４及びＳ－１７９のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000266
Figure 2022543773000267
Figure 2022543773000268
ある態様において、本発明は、表１４の化合物Ｓ－１３１～１３３のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000269
ある態様において、本発明は、表１５の化合物Ｓ－１３４～１４８、Ｓ－１５１及びＳ－１５９のうちのいずれか１つの構造を有する化合物、またはその任意の薬学的に許容される塩を特徴とする。
Figure 2022543773000270
Figure 2022543773000271
本発明の脂質ナノ粒子の１つ以上の構造的脂質は、構造的脂質の組成物（例えば、２つ以上の構造的脂質の混合物、３つ以上の構造的脂質の混合物、４つ以上の構造的脂質の混合物、または５つ以上の構造的脂質の混合物）であり得る。構造的脂質の組成物は、限定されないが、ステロールの任意の組み合わせ（例えば、コレステロール、β－シトステロール、フェコステロール、エルゴステロール、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、エルゴステロール、トマチジン、トマチン、ウルソール酸、α－トコフェロール、または表１５の化合物１３４～１４８、１５１、及び１５９のいずれか１つ）を含み得る。例えば、本発明の脂質ナノ粒子の１つ以上の構造的脂質は、表１６の組成物１８３であり得る。
Figure 2022543773000272
組成物Ｓ－１８３は、化合物Ｓ－１４１、Ｓ－１４０、Ｓ－１４３、及びＳ－１４８の混合物である。いくつかの実施形態では、組成物Ｓ－１８３は、化合物Ｓ－１４１を約３５％～約４５％、化合物Ｓ－１４０を約２０％～約３０％、化合物Ｓ－１４３を約２０％～約３０％、及び化合物Ｓ－１４８を約５％～約１５％含む。いくつかの実施形態では、組成物１８３は、化合物Ｓ－１４１を約４０％、化合物Ｓ－１４０を約２５％、化合物Ｓ－１４３を約２５％、及び化合物Ｓ－１４８を約１０％含む。
いくつかの実施形態では、構造的脂質は、フィトステロールである。いくつかの実施形態では、フィトステロールは、単独で、または組み合わせて、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、シトスタノール、カンペスタノール、ブラシカステロール、フコステロール、β－シトステロール、スチグマスタノール、β－シトスタノール、エルゴステロール、ルペオール、シクロアルテノール、Δ５－アベナセロール、Δ７－アベナセロール、またはΔ７－スチグマステロール（それらの類似体、塩またはエステルを含む）である。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、単一のフィトステロールである。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、異なるフィトステロール（例えば、２、３、４、５、または６つの異なるフィトステロール）の混合物である。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、１つ以上のフィトステロールと１つ以上のズーステロールとのブレンド、例えば、フィトステロール（例えば、β－シトステロールなどのシトステロール）とコレステロールとのブレンドである。
化合物の比率
本発明の脂質ナノ粒子は、本明細書に記載される構造成分を含むことができる。脂質ナノ粒子の構造成分は、化合物Ｓ－１～１４８のいずれか１つ、本発明の１つ以上の構造化合物の混合物、及び／またはコレステロール及び／またはフィトステロールと組み合わせた化合物Ｓ－１～１４８のうちのいずれか１つであり得る。
例えば、脂質ナノ粒子の構造成分は、本発明の１つ以上の構造化合物（例えば、化合物Ｓ－１～１４８のうちのいずれか）とコレステロールとの混合物であり得る。脂質ナノ粒子内に存在する構造化合物のコレステロールに対するモル％は、０～９９モル％であり得る。脂質ナノ粒子内に存在する構造化合物のコレステロールに対するモル％は、約１０モル％、２０モル％、３０モル％、４０モル％、５０モル％、６０モル％、７０モル％、８０モル％、または９０モル％であり得る。
一態様では、本発明は、２つ以上のステロールを含む組成物を特徴とし、２つ以上のステロールは、β－シトステロール、シトスタノール、カメステロール、スチグマステロール、及びブラシカステロールのうちの少なくとも２つを含む。組成物は、コレステロールをさらに含んでもよい。一実施形態では、β－シトステロールは、組成物中の非コレステロールステロールの約３５～９９％、例えば、約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上を構成する。
別の態様では、本発明は、２つ以上のステロールを含む組成物を特徴とし、２つ以上のステロールは、β－シトステロール及びカンペステロールを含み、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは、組成物中のステロールの０．１～５％を含む。
いくつかの実施形態では、組成物は、シトスタノールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは、０．０５～４．９５％を含み、シトスタノールは、０．０５～４．９５％を含む。
別の態様では、本発明は、２つ以上のステロールを含む組成物を特徴とし、２つ以上のステロールは、β－シトステロール及びシトスタノールを含み、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、シトスタノールは、組成物中のステロールの０．１～５％を含む。
いくつかの実施形態では、組成物は、カンペステロールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは、０．０５～４．９５％を含み、シトスタノールは、０．０５～４．９５％を含む。
いくつかの実施形態では、組成物は、カンペステロールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、組成物中のステロールの７５～８０％を含み、カンペステロールは５～１０％を含み、シトスタノールは１０～１５％を含む。
いくつかの実施形態では、組成物は、追加のステロールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、組成物中のステロールの３５～４５％を含み、スチグマステロールは２０～３０％を含み、カンペステロールは２０～３０％を含み、ブラシカステロールは１～５％を含む。
別の態様では、本発明は、複数の脂質ナノ粒子を含む組成物を特徴とし、複数の脂質ナノ粒子は、イオン性脂質及び２つ以上のステロールを含み、２つ以上のステロールは、β－シトステロール及びカンペステロールを含み、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは、組成物中のステロールの０．１～５％を含む。
いくつかの実施形態では、２つ以上のステロールは、シトスタノールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは０．０５～４．９５％を含み、シトスタノールは０．０５～４．９５％を含む。
別の態様では、本発明は、複数の脂質ナノ粒子を含む組成物を特徴とし、複数の脂質ナノ粒子は、イオン性脂質及び２つ以上のステロールを含み、２つ以上のステロールは、β－シトステロール及びシトスタノールを含み、β－シトステロールは、組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、シトスタノールは、組成物中のステロールの０．１～５％を含む。
いくつかの実施形態では、２つ以上のステロールは、カンペステロールをさらに含む。いくつかの実施形態では、β－シトステロールは組成物中のステロールの９５～９９．９％を含み、カンペステロールは０．０５～４．９５％を含み、シトスタノールは０．０５～４．９５％を含む。
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質／リン脂質
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の脂質系組成物（例えば、ＬＮＰ）は、１つ以上の非カチオン性ヘルパー脂質を含む。いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、リン脂質である。いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、リン脂質の代替物または置換物である。
本明細書で使用する場合、「非カチオン性ヘルパー脂質」という用語は、少なくとも８個の炭素長の少なくとも１つの脂肪酸鎖と、少なくとも１つの極性頭基部分と、を含む脂質を指す。一実施形態では、ヘルパー脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）ではない。一実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、リン脂質またはリン脂質代替物である。いくつかの実施形態では、リン脂質またはリン脂質置換物は、例えば、１つ以上の飽和または（ポリ）不飽和リン脂質、もしくはリン脂質置換物、またはそれらの組み合わせであり得る。一般に、リン脂質は、リン脂質部分と、１つ以上の脂肪酸部分と、を含む。
リン脂質部分は、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リソホスファチジルコリン、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。
脂肪酸部分は、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸（ｐｈｙｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸からなる非限定的な群から選択され得る。
リン脂質には、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジグリセロール（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙ ｇｌｙｃｅｒｏｌ）、及びホスファチジン酸などのグリセロリン脂質が含まれるが、これらに限定されない。リン脂質には、スフィンゴミエリンなどのリンスフィンゴ脂質も含まれる。
いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣ類似体、ＤＳＰＣ置換物、オレイン酸、またはオレイン酸類似体である。
いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、非ホスファチジルコリン（ＰＣ）双性イオン性脂質、ＤＳＰＣ類似体、オレイン酸、オレイン酸類似体、またはｌ，２－ジステアロイル－ｉ７７－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）置換物である。
リン脂質
本明細書に開示される薬学的組成物の脂質組成物は、１つ以上の非カチオン性ヘルパー脂質を含み得る。いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、リン脂質、例えば、１つ以上の飽和または（ポリ）不飽和リン脂質、またはそれらの組み合わせである。一般に、リン脂質は、リン脂質部分と、１つ以上の脂肪酸部分と、を含む。本明細書で使用する場合、「リン脂質」は、リン酸部分と、不飽和脂肪酸鎖などの１つ以上の炭素鎖と、を含む脂質である。リン脂質は、１つ以上の多重（例えば、二重または三重）結合（例えば、１つ以上の不飽和）を含み得る。リン脂質またはその類似体もしくは誘導体は、コリンを含み得る。リン脂質またはその類似体もしくは誘導体は、コリンを含まなくてもよい。特定のリン脂質は、膜への融合を促進し得る。例えば、カチオン性リン脂質は、膜（例えば、細胞膜または細胞内膜）の１つ以上の負に帯電したリン脂質と相互作用し得る。リン脂質を膜に融合させることで、脂質含有組成物の１つ以上の要素が膜を通過することを可能にし、例えば、１つ以上の要素の細胞への送達を可能にすることができる。
リン脂質部分は、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リソホスファチジルコリン、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。
脂肪酸部分は、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸（ｐｈｙｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸からなる非限定的な群から選択され得る。
特定のリン脂質は、膜への融合を促進することができる。例えば、カチオン性リン脂質は、膜（例えば、細胞膜または細胞内膜）の１つ以上の負に帯電したリン脂質と相互作用することができる。膜へのリン脂質の融合により、脂質含有組成物（例えばＬＮＰ）の１つ以上の要素（例えば治療剤）が膜を通過することを可能にし、例えば、１つ以上の要素の標的組織への送達を可能にすることができる。
本開示の脂質ナノ粒子の脂質成分は、１つ以上の（ポリ）不飽和脂質などの１つ以上のリン脂質を含み得る。リン脂質は、１つ以上の脂質二重層に組み立てられていてもよい。一般に、リン脂質は、リン脂質部分と、１つ以上の脂肪酸部分と、を含み得る。例えば、リン脂質は、式（Ｈ ＩＩＩ）：
Figure 2022543773000273
（式中、Ｒｐはリン脂質部分を表し、Ｒ１及びＲ２は同じであるか、または異なっていてもよい不飽和を有するか、または有しない脂肪酸部分を表す）
の脂質であり得る。リン脂質部分は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リソホスファチジルコリン、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。脂肪酸部分は、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸からなる非限定的な群から選択され得る。分岐、酸化、環化、及びアルキンを含む修飾及び置換を有する天然種を含む非天然種も企図される。例えば、リン脂質は、１つ以上のアルキン（例えば、１つ以上の二重結合が三重結合で置き換えられたアルケニル基）で官能化され得るか、またはそれに架橋され得る。適切な反応条件下で、アルキン基は、アジドに曝露されると、銅触媒付加環化を受け得る。このような反応は、膜浸透もしくは細胞認識を促進するためにＬＮＰの脂質二重層を官能化するか、またはＬＮＰを標的化もしくはイメージング部分（例えば、色素）などの有用な成分にコンジュゲートするのに有用であり得る。各々の選択肢は、本発明の別々の実施形態を表す。
本明細書に記載の組成物及び方法に有用なリン脂質は、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：３（ｃｉｓ）ＰＣ）、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＡＰＣ）、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（２２：６（ｃｉｓ）ＰＣ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（４ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＰＥ（１８：２／１８：２）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＰＥ １８：３（９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＡＰＥ １８：３（９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ）、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（２２：６（ｃｉｓ）ＰＥ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。各々の選択肢は、本発明の別々の実施形態を表す。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＳＰＣを含む。ある特定の実施形態において、ＬＮＰは、ＤＯＰＥを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＭＰＥを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＳＰＣ及びＤＯＰＥの両方を含む。
一実施形態では、免疫細胞送達ＬＮＰで使用するための非カチオン性ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及びＤＯＰＣ、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
リン脂質には、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジグリセロール（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙ ｇｌｙｃｅｒｏｌ）、及びホスファチジン酸などのグリセロリン脂質が含まれるが、これらに限定されない。リン脂質には、スフィンゴミエリンなどのリンスフィンゴ脂質も含まれる。
リン脂質の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：
Figure 2022543773000274
Figure 2022543773000275
Figure 2022543773000276
Figure 2022543773000277
Figure 2022543773000278
ある特定の実施形態では、本発明で有用または潜在的に有用なリン脂質は、ＤＳＰＣ（１，２－ジオクタデカノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン）の類似体または変異体である。ある特定の実施形態では、本発明で有用であるか、または潜在的に有用であるリン脂質は、式（Ｈ ＩＸ）
Figure 2022543773000279
の化合物、またはその塩であり、式中、
各Ｒ１は、独立して、任意に置換されたアルキルであるか、または任意に２つのＲ１が、介在原子と一緒に接続されて、任意に置換された単環式カルボシクリルもしくは任意に置換された単環式ヘテロシクリルを形成するか、または任意に３つのＲ１が、介在原子と一緒に接続されて、任意に置換された二環式カルボシクリルもしくは任意に置換された二環式ヘテロシクリルを形成し、
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり、
Ａは、次の式：
Figure 2022543773000280
のものであり、
Ｌ２の各事例は、独立して、結合または任意に置換されたＣ１～６アルキレンであり、任意に置換されたＣ１～６アルキレンの１つのメチレン単位は、任意に
－Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、または－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－で置き換えられ、
Ｒ２の各事例は、独立して、任意に置換されたＣ１～３０アルキル、任意に置換されたＣ１～３０アルケニル、または任意に置換されたＣ１～３０アルキニルであり、任意に、Ｒ２の１つ以上のメチレン単位は、独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、任意に置換されたアルキル、または窒素保護基であり、
環Ｂは、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたヘテロアリールであり、
ｐは、１または２であり、
ただし、この化合物は、式：
Figure 2022543773000281
のものではなく、
Ｒ２の各事例は、独立して、非置換アルキル、非置換アルケニル、または非置換アルキニルである。
ｉ）リン脂質頭部の修飾
ある特定の実施形態では、本発明で有用または潜在的に有用なリン脂質は、修飾リン脂質頭部（例えば、修飾コリン基）を含む。ある特定の実施形態では、修飾頭部を有するリン脂質は、修飾四級アミンを有するＤＳＰＣまたはその類似体である。例えば、式（ＩＸ）の実施形態では、Ｒ１のうちの少なくとも１つは、メチルではない。ある特定の実施形態では、Ｒ１のうちの少なくとも１つは、水素またはメチルではない。ある特定の実施形態では、式（ＩＸ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000282
のうちの１つのものであるか、またはその塩であり、式中、
各ｔは、独立して１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり、
各ｕは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり、
各ｖが、独立して、１、２、または３である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000283
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000284
Figure 2022543773000285
Figure 2022543773000286
のうちの１つであるか、またはその塩である。
一実施形態では、免疫細胞送達ＬＮＰは、非カチオン性ヘルパー脂質として化合物Ｈ－４０９を含む。
（ｉｉ）リン脂質尾部の修飾
ある特定の実施形態では、本発明で有用または潜在的に有用なリン脂質は、修飾尾部を含む。ある特定の実施形態では、本発明で有用であるか、または潜在的に有用であるリン脂質は、修飾尾部を有するＤＳＰＣ（１，２－ジオクタデカノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン）またはその類似体である。本明細書に記載されるように、「修飾尾部」は、より短いもしくはより長い脂肪族鎖、分岐が導入された脂肪族鎖、置換基が導入された脂肪族鎖、１つ以上のメチレンが環状もしくはヘテロ原子基によって置換された脂肪族鎖、またはそれらの任意の組み合わせを有する尾部であり得る。例えば、特定の実施形態では、（Ｈ ＩＸ）の化合物は、式（Ｈ ＩＸ－ａ）のもの、またはその塩であり、式中、Ｒ２の少なくとも１つの事例では、Ｒ２の各事例は、任意に置換されたＣ１～３０アルキルであり、Ｒ２の１つ以上のメチレン単位は独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－，または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられる。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ）の化合物は、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）：
Figure 2022543773000287
のものであるか、またはその塩であり、式中、
各ｘは、独立して、０～３０（両端を含む）の整数であり、
各事例では、Ｇは、独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－からなる群から選択される。各々の選択肢は、本発明の別々の実施形態を表す。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ ＩＸ－ｃ－１）：
Figure 2022543773000288
のものであるか、またはその塩であり、式中、
ｖの各事例は、独立して、１、２、または３である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ ＩＸ－ｃ－２）：
Figure 2022543773000289
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＩＸ－ｃ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000290
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000291
またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ ＩＸ－ｃ－３）：
Figure 2022543773000292
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000293
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ－ｃ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000294
またはその塩である。
ある特定の実施形態では、本発明で有用または潜在的に有用なリン脂質は、修飾ホスホコリン部分を含み、四級アミンをホスホリル基に連結するアルキル鎖は、エチレンではない（例えば、ｎは２ではない）。したがって、ある特定の実施形態において、本発明で有用または潜在的に有用なリン脂質は、式（Ｈ ＩＸ）の化合物であり、式中、ｎは、１、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。例えば、ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000295
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ ＩＸ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000296
Figure 2022543773000297
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、代替の脂質が、本発明のリン脂質の代わりに使用される。そのような代替脂質の非限定的な例には、以下：
Figure 2022543773000298
が含まれる。
リン脂質尾部の修飾
ある特定の実施形態では、本発明で有用なリン脂質は、修飾尾部を含む。ある特定の実施形態では、本発明で有用なリン脂質は、修飾尾部を有するＤＳＰＣまたはその類似体である。本明細書に記載されるように、「修飾尾部」は、より短いもしくはより長い脂肪族鎖、分岐が導入された脂肪族鎖、置換基が導入された脂肪族鎖、１つ以上のメチレンが環状もしくはヘテロ原子基によって置換された脂肪族鎖、またはそれらの任意の組み合わせを有する尾部であり得る。例えば、特定の実施形態では、（Ｈ Ｉ）の化合物は、式（Ｈ Ｉ－ａ）のもの、またはその塩であり、式中、Ｒ２の少なくとも１つの事例では、Ｒ２の各事例は、任意に置換されたＣ１～３０アルキルであり、Ｒ２の１つ以上のメチレン単位は独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられる。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ａ）の化合物は、式（Ｈ Ｉ－ｃ）：
Figure 2022543773000299
のものであるか、またはその塩であり、式中、
各ｘは、独立して、０～３０（両端を含む）の整数であり、
各事例では、Ｇは、独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－からなる群から選択される。各々の選択肢は、本発明の別々の実施形態を表す。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ Ｉ－ｃ－１）：
Figure 2022543773000300
のものであるか、またはその塩であり、式中、
ｖの各事例は、独立して、１、２、または３である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ Ｉ－ｃ－２）：
Figure 2022543773000301
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｉ－ｃ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000302
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000303
またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、式（Ｈ Ｉ－ｃ－３）：
Figure 2022543773000304
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000305
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ－ｃ）の化合物は、以下：
Figure 2022543773000306
またはその塩である。
ホスホコリンリンカーの修飾
ある特定の実施形態では、本発明で有用なリン脂質は、修飾ホスホコリン部分を含み、四級アミンをホスホリル基に連結するアルキル鎖は、エチレンではない（例えば、ｎは２ではない）。したがって、ある特定の実施形態において、本発明で有用なリン脂質は、式（Ｈ Ｉ）の化合物であり、式中、ｎは、１、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。例えば、ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000307
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（Ｈ Ｉ）の化合物は、
Figure 2022543773000308
Figure 2022543773000309
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
以下の実施例で実証されるように、ＤＳＰＣ以外のリン脂質を有する多数のＬＮＰ製剤を調製し、活性について試験した。
リン脂質の置換または置き換え
いくつかの実施形態では、脂質系組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、リン脂質の代わりにオレイン酸またはオレイン酸類似体を含む。いくつかの実施形態では、オレイン酸類似体は、修飾オレイン酸尾部、修飾カルボン酸部分、またはその両方を含む。いくつかの実施形態では、オレイン酸類似体は、オレイン酸のカルボン酸部分が異なる基で置き換えられている化合物である。
いくつかの実施形態では、脂質系組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、リン脂質の代わりに異なる双性イオン性基を含む。
例示的なリン脂質置換及び／または置き換えは、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１７／０９９８２３号（参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
例示的なリン脂質置換及び／または置き換えは、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１７／０９９８２３号（参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
（ｉｖ）ＰＥＧ脂質
ＰＥＧ脂質の非限定的な例には、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン及びホスファチジン酸、ＰＥＧ－セラミドコンジュゲート（例えば、ＰＥＧ－ＣｅｒＣ１４またはＰＥＧ－ＣｅｒＣ２０）、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、及びＰＥＧ修飾１，２－ジアシルオキシプロパン－３－アミンが含まれる。このような脂質は、ＰＥＧ化脂質とも称される。例えば、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、またはＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質であり得る。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、限定されないが、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロールメトキシポリエチレングリコール（ＰＥＧ－ＤＭＧ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［アミノ（ポリエチレングリコール）］（ＰＥＧ－ＤＳＰＥ）、ＰＥＧ－ジステリルグリセロール（ＰＥＧ－ｄｉｓｔｅｒｙｌ ｇｌｙｃｅｒｏｌ）（ＰＥＧ－ＤＳＧ）、ＰＥＧ－ジパルメトレイル、ＰＥＧ－ジオレイル、ＰＥＧ－ジステアリル、ＰＥＧ－ジアシルグリカミド（ＰＥＧ－ＤＡＧ）、ＰＥＧ－ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ－ＤＰＰＥ）、またはＰＥＧ－１，２－ジミリスチルオキシルプロピル－３－アミン（ＰＥＧ－ｌ，２－ｄｉｍｙｒｉｓｔｙｌｏｘｌｐｒｏｐｙｌ－３－ａｍｉｎｅ）（ＰＥＧ－ｃ－ＤＭＡ）を含む。
一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質の脂質部分は、約Ｃ１４～約Ｃ２２、好ましくは約Ｃ１４～約Ｃ１６の長さを有するものを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分、例えば、ｍＰＥＧ－ＮＨ２は、約１０００、２０００、５０００、１０，０００、１５，０００、または２０，０００ダルトンのサイズを有する。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧである。
一実施形態では、本明細書に記載の脂質ナノ粒子は、非拡散性ＰＥＧであるＰＥＧ脂質を含むことができる。非拡散性ＰＥＧの非限定的な例には、ＰＥＧ－ＤＳＧ及びＰＥＧ－ＤＳＰＥが含まれる。
ＰＥＧ脂質は、当該技術分野において知られており、例えば、米国特許第８１５８６０１号及び国際公開第ＷＯ２０１５／１３０５８４Ａ２号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるものである。
概して、本明細書に記載される様々な式の他の脂質成分（例えば、ＰＥＧ脂質）のいくつかは、「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｇｅｎｔｓ，」と題される、２０１６年１２月１０日に出願された国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０００１２９号（参照によりその全体が組み込まれる）に記載されるように合成され得る。
脂質ナノ粒子組成物の脂質成分は、ＰＥＧまたはＰＥＧ修飾脂質などのポリエチレングリコールを含む１つ以上の分子を含み得る。そのような種は、代替的にＰＥＧ化脂質と称され得る。ＰＥＧ脂質は、ポリエチレングリコールで修飾された脂質である。ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物を含む非限定的な群から選択され得る。例えば、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、またはＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質であり得る。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質は、ＰＥＧ ＤＭＧの修飾形態である。ＰＥＧ－ＤＭＧは、以下の構造を有する。
Figure 2022543773000310
一実施形態では、本発明で有用なＰＥＧ脂質は、国際公開第ＷＯ２０１２０９９７５５号に記載されるＰＥＧ化脂質であり得、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に記載されるこれらの例示的なＰＥＧ脂質のうちのいずれかは、ＰＥＧ鎖上にヒドロキシル基を含むように修飾され得る。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ＯＨ脂質である。本明細書で一般的に定義されるとき、「ＰＥＧ－ＯＨ脂質」（本明細書では「ヒドロキシ－ＰＥＧ化脂質」とも称される）は、脂質上に１つ以上のヒドロキシル（－ＯＨ）基を有するＰＥＧ化脂質である。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ－ＯＨ脂質は、ＰＥＧ鎖上に１つ以上のヒドロキシル基を含む。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ－ＯＨまたはヒドロキシ－ＰＥＧ化脂質は、ＰＥＧ鎖の末端に－ＯＨ基を含む。各々の選択肢は、本発明の別々の実施形態を表す。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（ＰＩ）：
Figure 2022543773000311
の化合物、またはその塩もしくは異性体であり、式中、
ｒは、１～１００の整数であり、
Ｒ５ＰＥＧは、Ｃ１０～４０アルキル、Ｃ１０～４０アルケニル、またはＣ１０～４０アルキニルであり、任意に、Ｒ５ＰＥＧの１つ以上のメチレン基は、独立して、Ｃ３～１０カルボシクリレン、４～１０員のヘテロシクリレン、Ｃ６～１０アリーレン、４～１０員のヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、または窒素保護基である。
例えば、Ｒ５ＰＥＧは、Ｃ１７アルキルである。例えば、ＰＥＧ脂質は、式（ＰＩ－ａ）：
Figure 2022543773000312
の化合物、またはその塩もしくは異性体であり、式中、ｒは、１～１００の整数である。
例えば、ＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000313
の化合物、またはその塩もしくは異性体である。
ＰＥＧ脂質は、式（ＰＩＩ）：
Figure 2022543773000314
の化合物、またはその塩もしくは異性体であり得、式中、
ｓは、１～１００の整数であり、
Ｒ’’は、水素、Ｃ１～１０アルキル、または酸素保護基であり、
Ｒ７ＰＥＧは、Ｃ１０～４０アルキル、Ｃ１０～４０アルケニル、またはＣ１０～４０アルキニルであり、任意に、Ｒ５ＰＥＧの１つ以上のメチレン基は、独立して、Ｃ３～１０カルボシクリレン、４～１０員のヘテロシクリレン、Ｃ６～１０アリーレン、４～１０員のヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、または窒素保護基である。
いくつかの実施形態では、Ｒ７ＰＥＧは、Ｃ１０～６０アルキルであり、Ｒ７ＰＥＧの１つ以上のメチレン基は、－Ｃ（Ｏ）－で置き換えられる。例えば、Ｒ７ＰＥＧは、Ｃ３１アルキルであり、Ｒ７ＰＥＧのメチレン基のうちの２つは、－Ｃ（Ｏ）－で置き換えられる。
いくつかの実施形態では、Ｒ’’は、メチルである。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（ＰＩＩ－ａ）：
Figure 2022543773000315
の化合物、またはその塩もしくは異性体であり、式中、ｓは、１～１００の整数である。
例えば、ＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000316
の化合物、またはその塩もしくは異性体である。
ある特定の実施形態では、本発明で有用なＰＥＧ脂質は、式（ＰＩＩＩ）の化合物である。本明細書では、式（ＰＩＩＩ）：
Figure 2022543773000317
の化合物、またはその塩が提供され、式中、
Ｒ３は－ＯＲＯであり、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、または酸素保護基であり、
ｒは、１～１００（両端を含む）の整数であり、
Ｌ１は、任意に置換されたＣ１～１０アルキレンであり、任意に置換されたＣ１～１０アルキレンの少なくとも１つのメチレンは、独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、Ｏ、Ｎ（ＲＮ）、Ｓ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ、またはＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）で置き換えられ、
Ｄは、クリックケミストリーによって得られる部分、または生理学的条件下で切断可能な部分であり、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり、
Ａは、次の式：
Figure 2022543773000318
のものであり、
Ｌ２の各事例は、独立して、結合または任意に置換されたＣ１～６アルキレンであり、任意に置換されたＣ１～６アルキレンの１つのメチレン単位は、任意に、Ｏ、Ｎ（ＲＮ）、Ｓ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ、またはＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）で置き換えられ、
Ｒ２の各事例は、独立して、任意に置換されたＣ１～３０アルキル、任意に置換されたＣ１～３０アルケニル、または任意に置換されたＣ１～３０アルキニルであり、任意に、Ｒ２の１つ以上のメチレン単位は、独立して、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、Ｎ（ＲＮ）、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ），Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ），ＮＲＮＣ（Ｏ），ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）Ｓ、ＳＣ（Ｏ）、Ｃ（＝ＮＲＮ）、Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）、ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｓ）、Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｓ）、ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）、Ｓ（Ｏ）、ＯＳ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）Ｏ、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ、ＯＳ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｏ、ＯＳ（Ｏ）２Ｏ、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ、Ｓ（Ｏ）２、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏで置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、任意に置換されたアルキル、または窒素保護基であり、
環Ｂは、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたヘテロアリールであり、
ｐは、１または２である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、ＰＥＧ－ＯＨ脂質である（すなわち、Ｒ３は、－ＯＲＯであり、ＲＯは、水素である）。ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、式（ＰＩＩＩ－ＯＨ）：
Figure 2022543773000319
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、Ｄは、クリックケミストリーによって得られる部分（例えば、トリアゾール）である。ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、式（ＰＩＩＩ－ａ－１）または（ＰＩＩＩ－ａ－２）：
Figure 2022543773000320
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000321
のうちの１つのものであるか、またはその塩であり、式中、
ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000322
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000323
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000324
Figure 2022543773000325
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、Ｄは、生理学的条件（例えば、エステル、アミド、カーボネート、カルバメート、尿素）下で切断可能な部分である。ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、式（ＰＩＩＩ－ｂ－１）または（ＰＩＩＩ－ｂ－２）：
Figure 2022543773000326
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、式（ＰＩＩＩ－ｂ－１－ＯＨ）または（ＰＩＩＩ－ｂ－２－ＯＨ）：
Figure 2022543773000327
のものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000328
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000329
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000330
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＩＩ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000331
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。
ある特定の実施形態では、本発明で有用なＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ化脂肪酸である。ある特定の実施形態では、本発明で有用なＰＥＧ脂質は、式（ＰＩＶ）の化合物である。本明細書では、式（ＰＩＶ）：
Figure 2022543773000332
の化合物、またはその塩が提供され、式中、
Ｒ３は、－ＯＲＯであり、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、または酸素保護基であり、
ｒは、１～１００（両端を含む）の整数であり、
Ｒ５は、任意に置換されたＣ１０～４０アルキル、任意に置換されたＣ１０～４０アルケニル、または任意に置換されたＣ１０～４０アルキニルであり、任意に、Ｒ５の１つ以上のメチレン基は、任意に置換されたカルボシクリレン、任意に置換されたヘテロシクリレン、任意に置換されたアリーレン、任意に置換されたヘテロアリーレン、Ｎ（ＲＮ）、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、－ＮＲＮＣ（Ｏ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ、Ｃ（Ｏ）Ｓ、ＳＣ（Ｏ）、Ｃ（＝ＮＲＮ）、Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）、ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）、Ｃ（Ｓ）、Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）、ＮＲＮＣ（Ｓ）、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）、Ｓ（Ｏ）、ＯＳ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）Ｏ、ＯＳ（Ｏ）Ｏ、ＯＳ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｏ、ＯＳ（Ｏ）２Ｏ、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ、Ｓ（Ｏ）２、Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）、またはＮ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏで置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、任意に置換されたアルキル、または窒素保護基である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＶ）の化合物は、式（ＰＩＶ－ＯＨ）：
Figure 2022543773000333
のものであるか、またはその塩である。いくつかの実施形態では、ｒは、４０～５０である。いくつかの実施形態では、ｒは、４５である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＩＶ）の化合物は、以下の式：
Figure 2022543773000334
のうちの１つのものであるか、またはその塩である。いくつかの実施形態では、ｒは、４０～５０である。いくつかの実施形態では、ｒは、４５である。
さらに他の実施形態では、式（ＰＩＶ）の化合物は、
Figure 2022543773000335
であるか、またはその塩である。
一実施形態では、式（ＰＩＶ）の化合物は、
Figure 2022543773000336
である。
一態様において、本明細書では、以下の式（ＰＶ）：
Figure 2022543773000337
のＰＥＧ脂質、またはその薬学的に許容される塩を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を提供し、式中、
Ｌ１は、結合、任意に置換されたＣ１～３アルキレン、任意に置換されたＣ１～３ヘテロアルキレン、任意に置換されたＣ２～３アルケニレン、任意に置換されたＣ２～３アルキニレンであり、
Ｒ１は、任意に置換されたＣ５～３０アルキル、任意に置換されたＣ５～３０アルケニル、または任意に置換されたＣ５～３０アルキニルであり、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または酸素保護基であり、
ｒは、２～１００（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000338
のものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｙ１は、結合、－ＣＲ２－、－Ｏ－、－ＮＲＮ－、または－Ｓ－であり、
Ｒの各事例は、独立して、水素、ハロゲン、または任意に置換されたアルキルであり、
ＲＮは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または窒素保護基である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000339
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒの各事例は、独立して、水素、ハロゲン、または任意に置換されたアルキルである。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000340
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｓは、５～２５（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000341
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶ）のＰＥＧ脂質は、
Figure 2022543773000342
Figure 2022543773000343
及びその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
別の態様において、本明細書では、式（ＰＶＩ）：
Figure 2022543773000344
のＰＥＧ脂質、またはその薬学的に許容される塩を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を提供し、式中、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または酸素保護基であり、
ｒは、２～１００（両端を含む）の整数であり、
ｍは、５～１５（両端を含む）の整数、または１９～３０（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000345
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000346
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
別の態様において、本明細書では、式（ＰＶＩＩ）：
Figure 2022543773000347
のＰＥＧ脂質、またはその薬学的に許容される塩を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を提供し、式中、
Ｙ２は、－Ｏ－、－ＮＲＮ－、または－Ｓ－であり、
Ｒ１の各事例は、独立して、任意に置換されたＣ５～３０アルキル、任意に置換されたＣ５～３０アルケニル、または任意に置換されたＣ５～３０アルキニルであり、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または酸素保護基であり、
ＲＮは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または窒素保護基であり、
ｒは、２～１００（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000348

のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000349

のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｓの各事例は、独立して、５～２５（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000350
のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩ）のＰＥＧ脂質は、
Figure 2022543773000351
及びその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
別の態様において、本明細書では、式（ＰＶＩＩＩ）：
Figure 2022543773000352
のＰＥＧ脂質、またはその薬学的に許容される塩を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を提供し、式中、
Ｌ１は、結合、任意に置換されたＣ１～３アルキレン、任意に置換されたＣ１～３ヘテロアルキレン、任意に置換されたＣ２～３アルケニレン、任意に置換されたＣ２～３アルキニレンであり、
Ｒ１の各事例が、独立して、任意に置換されたＣ５～３０アルキル、任意に置換されたＣ３～３０アルケニル、または任意に置換されたＣ５～３０アルキニルであり、
ＲＯは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または酸素保護基であり、
ｒは、２～１００（両端を含む）の整数であり、
ただし、Ｌ１が－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である場合、ＲＯはメチルではない。
ある特定の実施形態では、Ｌ１が、任意に置換されたＣ２またはＣ３アルキレンであるとき、ＲＯは、任意に置換されたアルキルではない。ある特定の実施形態では、Ｌ１が、任意に置換されたＣ２またはＣ３アルキレンであるとき、ＲＯは、水素である。ある特定の実施形態では、Ｌ１が、－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であるとき、ＲＯは、任意に置換されたアルキルではない。ある特定の実施形態では、Ｌ１が、－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であるとき、ＲＯは、水素である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩＩ）のＰＥＧ脂質は、式：
Figure 2022543773000353
のものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｙ１は、結合、－ＣＲ２－、－Ｏ－、－ＮＲＮ－、または－Ｓ－であり、
Ｒの各事例は、独立して、水素、ハロゲン、または任意に置換されたアルキルであり、
ＲＮは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアシル、または窒素保護基であり、
ただし、Ｙ１が結合または－ＣＨ２－である場合、ＲＯはメチルではない。
ある特定の実施形態では、Ｌ１が－ＣＲ２－であるとき、ＲＯは、任意に置換されたアルキルではない。ある特定の実施形態では、Ｌ１が－ＣＲ２－であるとき、ＲＯは水素である。ある特定の実施形態では、Ｌ１が－ＣＨ２－であるとき、ＲＯは、任意に置換されたアルキルではない。ある特定の実施形態では、Ｌ１が－ＣＨ２－であるとき、ＲＯは水素である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000354
Figure 2022543773000355

のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒの各事例は、独立して、水素、ハロゲン、または任意に置換されたアルキルである。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000356
Figure 2022543773000357

のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒの各事例は、独立して、水素、ハロゲン、または任意に置換されたアルキルであり、
各ｓが、独立して、５～２５（両端を含む）の整数である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩＩ）のＰＥＧ脂質は、以下の式：
Figure 2022543773000358
Figure 2022543773000359

のうちの１つのものであるか、またはその薬学的に許容される塩である。
ある特定の実施形態では、式（ＰＶＩＩＩ）のＰＥＧ脂質は、
Figure 2022543773000360
Figure 2022543773000361

及びその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
前述のまたは関連する態様のうちのいずれかでは、ｒが、４０～５０である本発明のＰＥＧ脂質が特徴である。
本明細書で提供するＬＮＰは、ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質を含む既存のＬＮＰ製剤と比較して増加したＰＥＧ脱落を示す。「ＰＥＧ脱落」は、本明細書で使用する場合、ＰＥＧ脂質からのＰＥＧ基の切断を指す。多くの場合、ＰＥＧ脂質からのＰＥＧ基の切断は、血清駆動型エステラーゼ切断または加水分解を通じて生じる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ脱落の速度を制御するように設計されている。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９８％を超えるＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、５０％を超えるＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、６０％超のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、７０％超のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に８０％超のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に９０％超のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、９０％超のＰＥＧ脱落を示す。
他の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９８％未満のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、６０％未満のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、７０％未満のＰＥＧ脱落を示す。ある特定の実施形態では、本明細書で提供するＬＮＰは、ヒト血清中で約６時間後に、８０％未満のＰＥＧ脱落を示す。
本明細書で提供されるＰＥＧ脂質に加えて、ＬＮＰは、１つ以上の追加の脂質成分を含み得る。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＬＮＰ中に、他の脂質に対して０．１５～１５％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して０．１５～５％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して１～５％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して０．１５～２％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して１～２％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して約１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、または２％のモル比で存在する。ある特定の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、他の脂質に対して約１．５％のモル比で存在する。
一実施形態では、本明細書に開示される薬学的組成物の脂質組成物中のＰＥＧ脂質の量は、約０．１モル％～約５モル％、約０．５モル％～約５モル％、約１モル％～約５モル％、約１．５モル％～約５モル％、約２モル％～約５モル％、約０．１モル％～約４モル％、約０．５モル％～約４モル％、約１モル％～約４モル％、約１．５モル％～約４モル％、約２モル％～約４モル％、約０．１モル％～約３モル％、約０．５モル％～約３モル％、約１モル％～約３モル％、約１．５モル％～約３モル％、約２モル％～約３モル％、約０．１モル％～約２モル％、約０．５モル％～約２モル％、約１モル％～約２モル％、約１．５モル％～約２モル％、約０．１モル％～約１．５モル％、約０．５モル％～約１．５モル％、または約１モル％～約１．５モル％の範囲である。
一実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のＰＥＧ脂質の量は、約２モル％である。一実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のＰＥＧ脂質の量は、約１．５モル％である。
一実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のＰＥＧ脂質の量は、少なくとも約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、または５モル％である。
例示的な合成：
化合物：ＨＯ－ＰＥＧ２０００－エステル－Ｃ１８
Figure 2022543773000362
パラジウム炭素（１０重量％、７４ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）を含有する窒素充填フラスコに、ベンジル－ＰＥＧ２０００－エステル－Ｃ１８（８２２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を添加した。フラスコを、排気してＨ２を３回充填し（ｂａｃｋｆｉｌｌｅｄ）、室温及び１気圧のＨ２で１２時間撹拌した。混合物をセライトを通して濾過し、ＤＣＭですすぎ、濾液を真空下で濃縮して、所望の生成物（６９２ｍｇ、８８％）を得た。この方法論を用いると、ｎ＝４０～５０となる。一実施形態では、得られた多分散混合物のｎは、平均で４５で表される。
例えば、ｒの値は、ＰＥＧ脂質内のＰＥＧ部分の分子量に基づいて決定することができる。例えば、２，０００（例えば、ＰＥＧ２０００）の分子量は、約４５のｎ値に対応する。所与の組成物について、ポリマーはしばしば異なるポリマー鎖長の分布として見出されるため、ｎ値は、当該技術分野で許容される範囲内の値の分布を意味することができる。例えば、かかるポリマー組成物の多分散性を理解する当業者は、４５のｎ値（例えば、構造式において）は、実際のＰＥＧ含有組成物、例えば、ＤＭＧ ＰＥＧ２０００のＰＥＧ脂質組成物における４０～５０の値の分布を表すことができることを理解するであろう。
いくつかの態様では、本明細書に開示される薬学的組成物の免疫細胞送達脂質は、ＰＥＧ脂質を含まない。
一実施形態では、本開示の免疫細胞送達ＬＮＰは、ＰＥＧ脂質を含む。一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ ＤＭＧではない。いくつかの態様では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される。いくつかの態様では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される。他の態様では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ＤＭＧである。
一実施形態では、本開示の免疫細胞送達ＬＮＰは、分岐した場合、約１４超または約１０超の鎖長を有するＰＥＧ脂質を含む。
一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、化合物番号Ｐ４１５、Ｐ４１６、Ｐ４１７、Ｐ ４１９、Ｐ ４２０、Ｐ ４２３、Ｐ ４２４、Ｐ ４２８、Ｐ Ｌ１、Ｐ Ｌ２、Ｐ Ｌ１６、Ｐ Ｌ１７、Ｐ Ｌ１８、Ｐ Ｌ１９、Ｐ Ｌ２２及びＰ Ｌ２３のうちのいずれかからなる群から選択される化合物である。一実施形態では、該ＰＥＧ脂質は、化合物番号Ｐ４１５、Ｐ４１７、Ｐ ４２０、Ｐ ４２３、Ｐ ４２４、Ｐ ４２８、Ｐ Ｌ１、Ｐ Ｌ２、Ｐ Ｌ１６、Ｐ Ｌ１７、Ｐ Ｌ１８、Ｐ Ｌ１９、Ｐ Ｌ２２、及びＰ Ｌ２３のいずれかからなる群から選択される化合物である。
一実施形態では、ＰＥＧ脂質は、Ｃｍｐｄ ４２８、ＰＬ１６、ＰＬ１７、ＰＬ １８、ＰＬ１９、ＰＬ １、及びＰＬ ２からなる群から選択される。
免疫細胞送達強化脂質
ＬＮＰ中の免疫細胞送達強化脂質の有効量は、免疫細胞送達強化脂質を欠くＬＮＰと比較して、免疫細胞（例えば、ヒトまたは霊長類免疫細胞）への薬剤の送達を増強し、それによって免疫細胞送達ＬＮＰを作製する。免疫細胞送達強化脂質は、ＬＮＰ中に存在する場合、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、ＬＮＰ中に存在する薬剤の免疫細胞への送達を促進することを特徴とすることができる。
一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、免疫細胞に関連するＬＮＰのパーセンテージの増加をもたらす。別の実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、免疫細胞への核酸分子剤の送達の増加をもたらす。一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｂ細胞への核酸分子剤の送達の増加をもたらす。具体的には、一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、骨髄細胞への核酸分子剤の送達の増加をもたらす。一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｔ細胞への核酸分子剤の送達の増加をもたらす。
一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑに結合するＬＮＰのパーセンテージの増加をもたらす。一実施形態では、ＬＮＰ中の少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、免疫細胞によって取り込まれる（例えば、免疫細胞によってオプソニン化される）Ｃ１ｑ結合ＬＮＰのパーセンテージの増加をもたらす。
一実施形態では、核酸分子がｍＲＮＡである場合、少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質の存在は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球）において、免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰと比較して、ｍＲＮＡによってコードされるタンパク質分子の発現を少なくとも約２倍大きくする。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、イオン性脂質である。上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質（Ｉで示す）は、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩＩｄ）、（Ｉ ＩＸ）、（Ｉ ＩＸａ１）、（Ｉ ＩＸａ２）、（Ｉ ＩＸａ３）、（Ｉ ＩＸａ４）、（Ｉ ＩＸａ５）、（Ｉ ＩＸａ６）、（Ｉ ＩＸａ７）もしく（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかを有する例えばいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １１３、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２４４、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、Ｉ ３２２、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、Ｉ ３３０、Ｉ ３３１、Ｉ ３３２もしくはＩ Ｍのうちのいずれかに含まれる化合物を含む。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、イオン性脂質である。上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１または化合物Ｉ－１８１として本明細書に記載される化合物を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号１８（化合物Ｘとも称される）、Ｉ ２５（化合物Ｙとも称される）、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １１３、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２４４、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３０９、Ｉ ３１７、Ｉ ３２１、Ｉ ３２２、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、Ｉ ３３０、Ｉ ３３１、Ｉ ３３２、Ｉ ３４７、Ｉ ３４８、Ｉ ３４９、Ｉ ３５０、Ｉ ３５１及びＩ ３５２からなる群から選択される少なくとも１つの化合物を含む。別の実施形態において、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １８（化合物Ｘとも称される）、Ｉ ２５（化合物Ｙとも称される）、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、及びＩ ３３０からなる群から選択される化合物を含む。別の実施形態において、本開示のＬＮＰのイオン性脂質は、化合物番号Ｉ １８２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、及びＩ ３２６からなる群から選択される化合物を含む。
免疫細胞送達強化脂質がイオン性脂質を含む実施形態では、イオン性脂質は、ＬＮＰ中に１つのみ存在し得るか、または少なくとも１つの追加のイオン性脂質とのブレンドとして存在し得ることが理解されるであろう。すなわち、イオン性脂質のブレンド（例えば、免疫細胞送達強化効果を有するもの２つ以上、または免疫細胞送達強化効果を有するもの１つと当該効果を有さないもの少なくとも１つ）が用いられ得る。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、ステロールを含む。別の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、天然に存在するステロールを含む。別の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、修飾ステロールを含む。一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、１つ以上のフィトステロールを含む。一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、フィトステロール／コレステロールブレンドを含む。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、有効量のフィトステロールを含む。
「フィトステロール」という用語は、その塩もしくはエステルを含むフィトステロイドである、植物ベースのステロール及びスタノールの群を指す。
「ステロール」という用語は、ステロイドアルコールとしても知られるステロイドの亜群を指す。ステロールは通常、以下の２つのクラスに分類される。（１）「フィトステロール」としても知られる植物ステロール、及び（２）コレステロールなどの「ズーステロール」としても知られる動物ステロール。「スタノール」という用語は、ステロール環構造内に二重結合を有しない飽和ステロールのクラスを指す。
「有効量のフィトステロール」という用語は、所望の活性（例えば、送達強化、免疫細胞取り込み強化、核酸活性強化）を誘発するであろうＬＮＰを含む、脂質系組成物中の１つ以上のフィトステロールの量を意味することが意図される。いくつかの実施形態では、有効量のフィトステロールは、脂質ナノ粒子中のステロールのすべてまたは実質的にすべて（すなわち、約９９～１００％）である。いくつかの実施形態では、フィトステロールの有効量は、脂質ナノ粒子中のステロールのすべてまたは実質的にすべて未満（約９９～１００％未満）であるが、脂質ナノ粒子中の非フィトステロールステロールの量よりも大きい。いくつかの実施形態では、フィトステロールの有効量は、脂質ナノ粒子中のステロールの総量の５０％超、６０％超、７０％超、７５％超、８０％超、８５％超、９０％超または９５％超である。いくつかの実施形態では、フィトステロールの有効量は、脂質ナノ粒子中のステロールの総量の９５～１００％、７５～１００％、または５０～１００％である。
いくつかの実施形態では、フィトステロールは、単独で、または組み合わせて、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、シトスタノール、カンペスタノール、ブラシカステロール、フコステロール、β－シトステロール、スチグマスタノール、β－シトスタノール、エルゴステロール、ルペオール、シクロアルテノール、Δ５－アベナセロール、Δ７－アベナセロール、またはΔ７－スチグマステロール（それらの類似体、塩またはエステルを含む）である。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、単一のフィトステロールである。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、異なるフィトステロール（例えば、２、３、４、５、または６つの異なるフィトステロール）の混合物である。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰのフィトステロール成分は、１つ以上のフィトステロールと１つ以上のズーステロールとのブレンド、例えば、フィトステロール（例えば、β－シトステロールなどのシトステロール）とコレステロールとのブレンドである。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、β－シトステロールである。
いくつかの実施形態では、β－シトステロールは、式：
Figure 2022543773000363

を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、スチグマステロールである。
いくつかの実施形態では、スチグマステロールは、式：
Figure 2022543773000364

を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、カンペステロールである。
いくつかの実施形態では、カンペステロールは、式：
Figure 2022543773000365

を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、シトスタノールである。
いくつかの実施形態では、シトスタノールは、式：
Figure 2022543773000366

を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、カンペスタノールである。
いくつかの実施形態では、カンペスタノールは、式：
Figure 2022543773000367
を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、ブラシカステロールである。
いくつかの実施形態では、ブラシカステロールは、式：
Figure 2022543773000368
を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、シトステロールは、フコステロールである。
いくつかの実施形態では、フコステロールは、式：
Figure 2022543773000369
を有し、その類似体、塩またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）は、７０％超の純度を有する。いくつかの実施形態では、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）は、８０％超の純度を有する。いくつかの実施形態では、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）は、９０％超の純度を有する。いくつかの実施形態では、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）は、９５％超の純度を有する。いくつかの実施形態では、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）は、９７％、９８％、または９９％超の純度を有する。
一実施形態では、免疫細胞送達増強ＬＮＰは、２種類以上の構造的脂質を含む。
例えば、一実施形態では、免疫細胞送達増強ＬＮＰは、フィトステロールである少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を含む。一実施形態では、フィトステロールは、ＬＮＰ中に存在する唯一の構造的脂質である。別の実施形態では、免疫細胞送達ＬＮＰは、構造的脂質のブレンドを含む。
一実施形態では、本明細書に開示される薬学的組成物の脂質組成物中のフィトステロール及び構造的脂質（例えば、β－シトステロール及びコレステロール）を合わせた量は、約２０モル％～約６０モル％、約２５モル％～約５５モル％、約３０モル％～約５０モル％、または約３５モル％～約４５モル％の範囲である。
一実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のフィトステロール及び構造的脂質（例えば、β－シトステロール及びコレステロール）を合わせた量は、約２５モル％～約３０モル％、約３０モル％～約３５モル％、または約３５モル％～約４０モル％の範囲である。
一実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のフィトステロール及び構造的脂質（例えば、β－シトステロール及びコレステロール）の量は、約２４モル％、約２９モル％、約３４モル％、または約３９モル％である。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される脂質組成物中のフィトステロール及び構造的脂質（例えば、β－シトステロール及びコレステロール）を合わせた量は、少なくとも約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、または６０モル％である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１つ以上のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）及び１つ以上の構造的脂質（例えば、コレステロール）を含む。いくつかの実施形態では、構造的脂質のモル％は、脂質ナノ粒子内に存在するフィトステロールのモル％の約１％～５０％である。いくつかの実施形態では、構造的脂質のモル％は、脂質系組成物（例えば、ＬＮＰ）中に存在するフィトステロールのモル％の約１０％～４０％である。いくつかの実施形態では、構造的脂質のモル％は、脂質系組成物（例えば、ＬＮＰ）中に存在するフィトステロールのモル％の約２０％～３０％である。いくつかの実施形態では、構造的脂質のモル％は、脂質系組成物（例えば、脂質ナノ粒子）中に存在するフィトステロールのモル％の約３０％である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１５～４０モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３０、または４０モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、２０モル％の超のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）及び２０モル％の未満の構造的脂質（例えば、コレステロール）を含み、その結果、フィトステロール及び構造的脂質の総モル％は、３０～４０モル％である。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約２０モル％、約２１モル％、約２２モル％、約２３モル％、約２４モル％、約２５モル％、約２６モル％、約２７モル％、約２８モル％、約２９モル％、約３０モル％、約３１モル％、約３２モル％、約３３モル％、約３４モル％、約３５モル％、約３７モル％、約３８モル％、約３９モル％、または約４０モル％のフィトステロール（例えば、βシトステロール）と、約１９モル％、約１８モル％、約１７モル％、約１６モル％、約１５モル％、約１４モル％、約１３モル％、約１２モル％、約１１モル％、約１０モル％、約９モル％、約８モル％、約７モル％、約６モル％、約５モル％、約４モル％、約３モル％、約２モル％、約１モル％のまたは約０モル％それぞれの構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約２８モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、約１０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子が含むフィトステロール及び構造的脂質（例えば、コレステロール）の総モル％は、３８．５％である。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、２８．５モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、１０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１８．５モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、２０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。
ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、５０％のイオン性脂質と、１０％のヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、３８．５％の構造的脂質と、１．５％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、５０％イオン性脂質と、１０％ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、３８％構造的脂質と、２％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、５０％のイオン性脂質と、２０％のヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、２８．５％の構造的脂質と、１．５％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、５０％イオン性脂質と、２０％ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、２８％構造的脂質と、２％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、４０％のイオン性脂質と、３０％のヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、２８．５％の構造的脂質と、１．５％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、４０％イオン性脂質と、３０％ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、２８％構造的脂質と、２％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、４５％のイオン性脂質と、２０％のヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、３３．５％の構造的脂質と、１．５％ＰＥＧ脂質と、を含む。ある特定の実施形態では、ＬＮＰは、４５％イオン性脂質と、２０％ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）と、３３％構造的脂質と、２％ＰＥＧ脂質と、を含む。
一態様では、免疫細胞送達増強ＬＮＰは、フィトステロールを含み、ＬＮＰは、追加の構造的脂質を含まない。したがって、ＬＮＰの構造的脂質（ステロール）成分は、フィトステロールからなる。別の態様では、免疫細胞送達増強ＬＮＰは、フィトステロール及び追加の構造的脂質を含む。したがって、ＬＮＰのステロール成分は、フィトステロール、及び１つ以上の追加のステロールまたは構造的脂質を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰの構造的脂質（例えば、フィトステロールまたはフィトステロール／コレステロールブレンドなどのステロール）は、コレステロール、β－シトステロール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４１とも称される）、カンペステロール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４３とも称される）、β－シトスタノール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４４とも称される）、ブラシカステロールまたはスチグマステロール、またはそれらの組み合わせもしくはブレンドとして本明細書に記載される化合物を含む。別の実施形態では、本開示のＬＮＰの構造的脂質（例えば、フィトステロールまたはフィトステロール／コレステロールブレンドなどのステロール）は、コレステロール、β－シトステロール、カンペステロール、β－シトスタノール、ブラシカステロール、スチグマステロール、β－シトステロール－ｄ７、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、化合物Ｓ－３２、またはそれらの組み合わせもしくはブレンドから選択される化合物を含む。別の実施形態では、本開示のＬＮＰの構造的脂質（例えば、フィトステロールまたはフィトステロール／コレステロールブレンドなどのステロール）は、コレステロール、β－シトステロール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４１とも称される）、カンペステロール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４３とも称される）、β－シトスタノール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４４とも称される）、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１４４、ブラシカステロール（本明細書ではＣｍｐｄ Ｓ １４８とも称される）または組成物Ｓ－１８３（約４０％の化合物Ｓ－１４１、約２５％の化合物Ｓ－１４０、約２５％の化合物Ｓ－１４３、及び約１０％のブラシカステロール）として本明細書に記載される化合物を含む。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰの構造的脂質は、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１６７、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３または化合物Ｓ－１７５として本明細書に記載される化合物を含む。
一実施形態では、免疫細胞送達増強ＬＮＰは、非カチオン性ヘルパー脂質、例えば、リン脂質を含む。前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰの非カチオン性ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣまたはＨ－４０９として本明細書に記載される化合物を含む。一実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質、例えば、リン脂質は、ＤＳＰＣである。他の実施形態では、本開示のＬＮＰの非カチオン性ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣ、ＤＰＰＣ、ＰＭＰＣ、Ｈ－４０９、Ｈ－４１８、Ｈ－４２０、Ｈ－４２１またはＨ－４２２として本明細書に記載される化合物を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰのＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択され得る、本明細書に記載の化合物を含む。別の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、化合物番号Ｐ４１５、Ｐ４１６、Ｐ４１７、Ｐ ４１９、Ｐ ４２０、Ｐ ４２３、Ｐ ４２４、Ｐ ４２８、Ｐ Ｌ５、Ｐ Ｌ１、Ｐ Ｌ２、Ｐ Ｌ１６、Ｐ Ｌ１７、Ｐ Ｌ１８、Ｐ Ｌ１９、Ｐ Ｌ２２、Ｐ Ｌ２３、ＤＭＧ、ＤＰＧ及びＤＳＧからなる群から選択される。別の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、Ｃｍｐｄ ４２８、ＰＬ１６、ＰＬ１７、ＰＬ １８、ＰＬ１９、Ｐ Ｌ５、ＰＬ １、及びＰＬ ２からなる群から選択される。
一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質は、有効量のイオン性脂質とフィトステロールとの組み合わせを含む。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｘと、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｘ含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。別の実施形態では、構造的脂質は、３８．５％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８．５％のβ－シトステロール、または（ｉｉ）１０％のコレステロール及び２８．５％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｙと、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｙ含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－１８２と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－１８２含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３２１と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－３２１含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－２９２と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－２９２含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３２６と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－３２６含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３０１と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－３０１含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－４８と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－４８含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－５０と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－５０含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３２８と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－３２８含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３３０と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－３３０含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－１０９と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－１０９含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－１１１と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－１１１含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－１８１と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの化合物Ｉ－１８１含有組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２。構造的脂質成分について、一実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％ですべてコレステロールである。別の実施形態では、構造的脂質は、３８％または２８％の総パーセンテージでコレステロール／β－シトステロールであり、ブレンドは、例えば、（ｉ）２０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び１８％のβ－シトステロール、または（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び２８％のβ－シトステロールを含み得る。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｘ、Ｙ、Ｉ－３２１、Ｉ－２９２、Ｉ－３２６、Ｉ－１８２、Ｉ－３０１、Ｉ－４８、Ｉ－５０、Ｉ－３２８、Ｉ－３３０、Ｉ－１０９、Ｉ－１１１、またはＩ－１８１のうちのいずれかと、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロール、コレステロール／β－シトステロールブレンド、β－シトステロール／β－シトスタノールブレンド、β－シトステロール／カンポステロールブレンド、β－シトステロール／β－シトスタノール／カンポステロールブレンド、コレステロール／カンポステロールブレンド、コレステロール／β－シトスタノールブレンド、コレステロール／β－シトスタノール／カンポステロールブレンド、またはコレステロール／β－シトステロール／β－シトスタノール／カンポステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。これらの組成物の様々な実施形態では、イオン性脂質：リン脂質：構造的脂質：ＰＥＧ脂質の比は、例えば、以下のようにすることができる：（ｉ）５０：１０：３８：２、（ｉｉ）５０：２０：２８：２、（ｉｉｉ）４０：２０：３８：２、（ｉｖ）４０：３０：２８：２、（ｖ）４０：１８．５：４０：１．５、または（ｖｉ）４５：２０：３３．５：１．５。一実施形態では、構造的脂質成分について、ＬＮＰは、例えば、（ｉ）１０％のコレステロール及び３０％のβ－シトステロール、（ｉｉ）１０％のコレステロール及び３０％のカンペステロール、（ｉｉｉ）１０％のコレステロール及び３０％のβ－シトスタノール、（ｉｖ）１０％のコレステロール、２０％のβ－シトステロール及び１０％のカンペステロール、（ｖ）１０％のコレステロール、２０％のβ－シトステロール及び１０％のβ－シトスタノール、（ｖｉ）１０％のコレステロール、１０％のβ－シトステロール及び２０％のカンペステロール、（ｖｉｉ）１０％のコレステロール、１０％のβ－シトステロール及び２０％のカンペステロール、（ｖｉｉｉ）１０％のコレステロール、２０％のカンペステロール及び１０％β－シトスタノール、（ｉｘ）１０％のコレステロール、１０％のカンペステロール及び２０％のβ－シトスタノール、または（ｘ）１０％のコレステロール、１０％のβ－シトステロール、１０％のカンペステロール及び１０％のβ－シトスタノールから構成される４０％の構造的脂質を含むことができる。別の実施形態では、構造的脂質成分について、ＬＮＰは、例えば、（ｉ）３３．５％のコレステロール、（ｉｉ）１８．５％のコレステロール、１５％のβ－シトステロール、（ｉｉｉ）１８．５％のコレステロール、１５％のカンペステロール、または（ｉｖ）１８．５％のコレステロール、１５％のカンペステロールから構成される３３．５％の構造的脂質を含むことができる。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、イオン性脂質として化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、または化合物Ｉ－３２６と、リン脂質としてＤＳＰＣと、構造的脂質としてコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンドと、ＰＥＧ脂質として化合物４２８と、を含む、ＬＮＰを提供する。一実施形態では、ＬＮＰは、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３＋Ｔ細胞）への送達を増強する。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、または化合物Ｉ－２４４を含み、単球への送達を増強する、ＬＮＰを提供する。ＬＮＰの他の成分は、本明細書に開示される成分、例えば、リン脂質としてのＤＳＰＣ、構造的脂質としてのコレステロールまたはコレステロール／β－シトステロールブレンド、及びＰＥＧ脂質としての化合物４２８から選択することができる。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、構造的脂質としてカンポステロール、β－シトスタノールまたはスチグマステロールを含み、単球への送達を増強する、ＬＮＰを提供する。ＬＮＰの他の成分は、本明細書に開示される成分、例えば、イオン性脂質としての化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２または化合物Ｉ－２４４、リン脂質としてのＤＳＰＣ、ならびにＰＥＧ脂質としての化合物４２８から選択することができる。
他の実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子であって、ヘルパー脂質（例えば、リン脂質）としてＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、またはＨ－４０９を含み、単球への送達を増強する、ＬＮＰを提供する。ＬＮＰの他の成分は、本明細書に開示される成分、例えば、イオン性脂質としての化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、または化合物Ｉ－２４４、構造的脂質としてのコレステロール、コレステロール／β－シトステロールブレンド、カンポステロール、β－シトスタノール、またはスチグマステロール、ならびにＰＥＧ脂質としての化合物４２８から選択することができる。
例示的な追加のＬＮＰ成分
界面活性剤
ある特定の実施形態では、本開示の脂質ナノ粒子は、任意に１つ以上の界面活性剤を含む。
ある特定の実施形態では、界面活性剤は、両親媒性ポリマーである。本明細書で使用する場合、両親媒性「ポリマー」は、オリゴマーまたはポリマーを含む両親媒性化合物である。例えば、両親媒性ポリマーは、２つ以上のＰＥＧモノマー単位などのオリゴマー断片を含むことができる。例えば、本明細書に記載される両親媒性ポリマーは、ＰＳ ２０であり得る。
例えば、両親媒性ポリマーは、ブロックコポリマーである。
例えば、両親媒性ポリマーは、凍結保護剤である。
例えば、両親媒性ポリマーは、約３０℃及び大気圧で、水中で２×１０－４Ｍ未満の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）を有する。
例えば、両親媒性ポリマーは、約３０℃及び大気圧で、水中で約０．１×１０－４Ｍ～約１．３×１０－４Ｍの範囲の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）を有する。
例えば、両親媒性ポリマーの濃度は、例えば、凍結または凍結乾燥の前の製剤中、そのＣＭＣからＣＭＣの約３０倍（例えば、そのＣＭＣの最大約２５倍、約２０倍、約１５倍、約１０倍、約５倍、または約３倍）までの範囲である。
例えば、両親媒性ポリマーは、ポロキサマー（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、ポロキサミン（Ｔｅｔｒｏｎｉｃ（登録商標））、ポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル（ポリソルベート）、及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）から選択される。
例えば、両親媒性ポリマーは、ポロキサマーである。例えば、両親媒性ポリマーは、以下の構造のものである：
Figure 2022543773000370
（式中、ａは、１０～１５０の整数であり、ｂは、２０～６０の整数である）。例えば、ａは約１２であり、ｂは約２０であるか、またはａは約８０であり、ｂは約２７であるか、またはａは約６４であり、ｂは約３７であるか、またはａは約１４１であり、ｂは約４４であるか、またはａは約１０１であり、ｂは約５６である。
例えば、両親媒性ポリマーは、Ｐ１２４、Ｐ１８８、Ｐ２３７、Ｐ３３８、またはＰ４０７である。
例えば、両親媒性ポリマーは、Ｐ１８８である（例えば、ポロキサマー１８８、ＣＡＳ番号９００３－１１－６、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ Ｐ１８８としても知られる）。
例えば、両親媒性ポリマーは、ポロキサミン、例えば、ｔｅｔｒｏｎｉｃ ３０４またはｔｅｔｒｏｎｉｃ ９０４である。
例えば、両親媒性ポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、例えば、３ｋＤａ、１０ｋＤａ、または２９ｋＤａの分子量を有するＰＶＰである。
例えば、両親媒性ポリマーは、ＰＳ ２０などのポリソルベートである。
ある特定の実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、両親媒性ポリマーである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤である。
例えば、非イオン性界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテル（Ｂｒｉｊ）、ポロキサマー、ポリソルベート、ソルビタン、及びこれらの誘導体からなる群から選択される。
例えば、ポリエチレングリコールエーテルは、式（ＶＩＩＩ）：
Figure 2022543773000371
の化合物、またはその塩もしくは異性体であり、式中、
ｔは、１～１００の整数であり、
Ｒ１ＢＲＩＪは、独立して、Ｃ１０～４０アルキル、Ｃ１０～４０アルケニル、またはＣ１０～４０アルキニルであり、任意に、Ｒ５ＰＥＧの１つ以上のメチレン基は、独立して、Ｃ３～１０カルボシクリレン、４～１０員のヘテロシクリレン、Ｃ６～１０アリーレン、４～１０員のヘテロアリーレン、－Ｎ（ＲＮ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｏ）Ｓ－、－ＳＣ（Ｏ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）－、－Ｃ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（＝ＮＲＮ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｃ（Ｓ）－、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）－、－ＮＲＮＣ（Ｓ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＯＳ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｏ－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｏ－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）Ｏ－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、－ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＮ）－、または－Ｎ（ＲＮ）Ｓ（Ｏ）２Ｏ－で置き換えられ、
ＲＮの各事例は、独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、または窒素保護基である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ＢＲＩＪは、Ｃ１８アルキルである。例えば、ポリエチレングリコールエーテルは、式（ＶＩＩＩ－ａ）：
Figure 2022543773000372
の化合物、またはその塩もしくは異性体である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１ＢＲＩＪは、Ｃ１８アルケニルである。例えば、ポリエチレングリコールエーテルは、式（ＶＩＩＩ－ｂ）：
Figure 2022543773000373
の化合物、またはその塩もしくは異性体である。
いくつかの実施形態では、ポロキサマーは、ポロキサマー１０１、ポロキサマー１０５、ポロキサマー１０８、ポロキサマー１２２、ポロキサマー１２３、ポロキサマー１２４、ポロキサマー１８１、ポロキサマー１８２、ポロキサマー１８３、ポロキサマー１８４、ポロキサマー１８５、ポロキサマー１８８、ポロキサマー２１２、ポロキサマー２１５、ポロキサマー２１７、ポロキサマー２３１、ポロキサマー２３４、ポロキサマー２３５、ポロキサマー２３７、ポロキサマー２３８、ポロキサマー２８２、ポロキサマー２８４、ポロキサマー２８８、ポロキサマー３３１、ポロキサマー３３３、ポロキサマー３３４、ポロキサマー３３５、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０１、ポロキサマー４０２、ポロキサマー４０３、及びポロキサマー４０７からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ポリソルベートは、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）４０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、またはＴｗｅｅｎ（登録商標）８０である。
いくつかの実施形態では、ソルビタンの誘導体は、Ｓｐａｎ（登録商標）２０、Ｓｐａｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）６５、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、またはＳｐａｎ（登録商標）８５である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中の非イオン性界面活性剤の濃度は、約０．００００１％ｗ／ｖ～約１％ｗ／ｖ、例えば、約０．００００５％ｗ／ｖ～約０．５％ｗ／ｖ、または約０．０００１％ｗ／ｖ～約０．１％ｗ／ｖの範囲である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中の非イオン性界面活性剤の濃度は、約０．０００００１重量％～約１重量％、例えば、約０．０００００２重量％～約０．８重量％、または約０．０００００５重量％～約０．５重量％の範囲である。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中のＰＥＧ脂質の濃度は、約０．０１モル％～約５０モル％、例えば、約０．０５モル％～約２０モル％、約０．０７モル％～約１０モル％、約０．１モル％～約８モル％、約０．２モル％～約５モル％、または約０．２５モル％～約３モル％の範囲である。
アジュバント
いくつかの実施形態では、本発明のＬＮＰは、任意に、１つ以上のアジュバント、例えば、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド（例えば、クラスＡまたはＢ）、ポリ（Ｉ：Ｃ）、水酸化アルミニウム、及びＰａｍ３ＣＳＫ４を含む。
その他の成分
本発明のＬＮＰは、任意に、前述のセクションに記載されるものに加えて１つ以上の成分を含んでもよい。例えば、脂質ナノ粒子は、ビタミン（例えば、ビタミンＡもしくはビタミンＥ）またはステロールなどの１つ以上の小さい疎水性分子を含んでもよい。
脂質ナノ粒子は、１つ以上の透過促進分子、炭水化物、ポリマー、表面改質剤、または他の成分を含んでもよい。例えば、透過促進分子は、米国特許出願公開第２００５／０２２２０６４号に記載される分子であってもよい。炭水化物は、単糖（例えば、グルコース）及び多糖類（例えば、グリコーゲンならびにその誘導体及び類似体）を含んでもよい。
脂質ナノ粒子をカプセル封入または部分的にカプセル封入するために、ポリマーを含めてもよい及び／または使用してもよい。ポリマーは、生分解性及び／または生体適合性であってもよい。ポリマーは、ポリアミン、ポリエーテル、ポリアミド、ポリエステル、ポリカルバメート、ポリ尿素、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリイミド、ポリスルホン、ポリウレタン、ポリアセチレン、ポリエチレン、ポリエチレンイミン、ポリイソシアネート、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリアクリロニトリル、及びポリアリレートから選択され得るが、これらに限定されない。例えば、ポリマーとしては、ポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、エチレン酢酸ビニルポリマー（ＥＶＡ）、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（Ｌ－乳酸）（ＰＬＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（Ｌ－乳酸－コ－グリコール酸）（ＰＬＬＧＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド）（ＰＤＬＡ）、ポリ（Ｌ－ラクチド）（ＰＬＬＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－コ－カプロラクトン）、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－コ－カプロラクトン－コ－グリコリド）、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－コ－ＰＥＯ－コ－Ｄ，Ｌ－ラクチド）、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－コ－ＰＰＯ－コ－Ｄ，Ｌ－ラクチド）、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリウレタン、ポリ－Ｌ－リジン（ＰＬＬ）、ヒドロキシプロピルメタクリレート（ＨＰＭＡ）、ポリエチレングリコール、ポリ－Ｌ－グルタミン酸、ポリ（ヒドロキシ酸）、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリ（エステルアミド）、ポリアミド、ポリ（エステルエーテル）、ポリカーボネート、ポリエチレン及びポリプロピレンなどのポリアルキレン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）などのポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（エチレンテレフタレート）などのポリアルキレンテレフタレート、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルエーテル、ポリ（ビニルアセテート）などのポリビニルエステル、ポリ（ビニルクロリド）（ＰＶＣ）などのポリビニルハライド、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリシロキサン、ポリスチレン、ポリウレタン、アルキルセルロースなどの誘導体化セルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリ（メチル（メタ）アクリレート）（ＰＭＭＡ）、ポリ（エチル（メタ）アクリレート）、ポリ（ブチル（メタ）アクリレート）、ポリ（イソブチル（メタ）アクリレート）、ポリ（ヘキシル（メタ）アクリレート）、ポリ（イソデシル（メタ）アクリレート）、ポリ（ラウリル（メタ）アクリレート）、ポリ（フェニル（メタ）アクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、ポリ（オクタデシルアクリレート）ならびにそれらのコポリマー及び混合物などのアクリル酸のポリマー、ポリジオキサノン及びそれらのコポリマー、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリプロピレンフマレート、ポリオキシメチレン、ポロキサマー、ポロキサミン、ポリ（オルト）エステル、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（ラクチド－コ－カプロラクトン）、トリメチレンカーボネート、ポリ（Ｎ－アクリロイルモルホリン）（ＰＡｃＭ）、ポリ（２－メチル－２－オキサゾリン）（ＰＭＯＸ）、ポリ（２－エチル－２－オキサゾリン）（ＰＥＯＺ）、ならびにポリグリセロールが挙げられ得る。
表面改変剤としては、陰イオン性タンパク質（例えば、ウシ血清アルブミン）、界面活性剤（例えば、ジメチルジオクタデシル－臭化アンモニウムなどのカチオン性界面活性剤）、糖または糖誘導体（例えば、シクロデキストリン）、核酸、ポリマー（例えば、ヘパリン、ポリエチレングリコール、及びポロキサマー）、粘液溶解剤（例えば、アセチルシステイン、マグワート、ブロメライン、パパイン、クレロデンドラム、ブロメキシン、カルボシステイン、エプラジノン、メスナ、アンブロキソール、ソブレロール、ドミオドール、レトステイン、ステップロニン、チオプロニン、ゲルソリン、チモシンβ４、ドルナーゼアルファ、ネルテネキシン、及びエルドステイン）、ならびにＤＮアーゼ（例えば、ｒｈＤＮアーゼ）が挙げられ得るが、これらに限定されない。表面改変剤は、ナノ粒子内及び／またはＬＮＰの表面上に（例えば、コーティング、吸着、共有結合、または他のプロセスによって）配置されてもよい。
脂質ナノ粒子はまた、１つ以上の官能化脂質を含んでもよい。例えば、脂質は、適切な反応条件下でアジドに曝露されたときに、付加環化反応を受け得るアルキン基で官能化されてもよい。特に、脂質二重層は、膜浸透、細胞認識、またはイメージングを促進するのに有用な１つ以上の基でこの方法で官能化されてもよい。ＬＮＰの表面はまた、１つ以上の有用な抗体とコンジュゲートされてもよい。標的化細胞送達、イメージング、及び膜浸透において有用な官能基及びコンジュゲートは、当該技術分野において周知である。
これらの成分に加えて、脂質ナノ粒子は、薬学的組成物に有用な任意の物質を含んでもよい。例えば、脂質ナノ粒子は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または付属成分、例えば、限定されないが、１つ以上の溶媒、分散媒、希釈剤、分散補助剤、懸濁液補助剤、造粒補助剤、崩壊剤、充填剤、流動促進剤、液体ビヒクル、結合剤、表面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、緩衝剤、潤滑剤、油、保存剤、及び他の種などを含んでもよい。また、ワックス、バター、着色剤、コーティング剤、香味剤、及び芳香剤などの賦形剤を含んでもよい。薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ；Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，２００６を参照されたい）。
希釈剤の例としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウムラクトース、スクロース、セルロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖、及び／またはそれらの組み合わせが挙げられ得るが、これらに限定されない。造粒剤及び分散剤は、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、柑橘類パルプ、寒天、ベントナイト、セルロース及び木材製品、天然スポンジ、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリ（ビニルピロリドン）（クロスポビドン）、カルボキシメチルデンプンナトリウム（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、アルファ化デンプン（デンプン１５００）、微結晶性デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム（ＶＥＥＧＵＭ（登録商標））、ラウリル硫酸ナトリウム、四級アンモニウム化合物、及び／またはそれらの組み合わせからなる非限定的なリストから選択され得る。
表面活性剤及び／または乳化剤としては、天然乳化剤（例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドルックス（ｃｈｏｎｄｒｕｘ）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、ウール脂肪、コレステロール、ワックス、及びレシチン）、コロイド粘土（例えば、ベントナイト［ケイ酸アルミニウム］及びＶＥＥＧＵＭ（登録商標）［ケイ酸マグネシウムアルミニウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えば、ステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、トリアセチンモノステアレート、エチレングリコールジステアレート、グリセリルモノステアレート、及びプロピレングリコールモノステアレート、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー、及びカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート［ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０］、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート［ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０］、ソルビタンモノパルミテート［ＳＰＡＮ（登録商標）４０］、ソルビタンモノステアレート［ＳＰＡＮ（登録商標）６０］、ソルビタントリステアレート［ＳＰＡＮ（登録商標）６５］、グリセリルモノオレエート、ソルビタンモノオレエート［ＳＰＡＮ（登録商標）８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えば、ポリオキシエチレンモノステアレート［ＭＹＲＪ（登録商標）４５］、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエトキシル化ヒマシ油、ポリオキシメチレンステアレート、及びＳＯＬＵＴＯＬ（登録商標））、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えば、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標））、ポリオキシエチレンエーテル（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル［ＢＲＩＪ（登録商標）３０］）、ポリ（ビニルピロリドン）、ジエチレングリコールモノラウレート、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ ６８、ＰＯＬＯＸＡＭＥＲ（登録商標）１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドクサートナトリウム、及び／またはそれらの組み合わせが挙げられ得るが、これらに限定されない。
結合剤は、デンプン（例えば、コーンスターチ及びデンプンペースト）、ゼラチン、糖類（例えば、スクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）、天然及び合成ガム（例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモスの抽出物、パンワーガム（ｐａｎｗａｒ ｇｕｍ）、ガティガム（ｇｈａｔｔｉ ｇｕｍ）、イサポールハスク（ｉｓａｐｏｌ ｈｕｓｋｓ）の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、酢酸セルロース、ポリ（ビニルピロリドン）、ケイ酸マグネシウムアルミニウム（ＶＥＥＧＵＭ（登録商標）、及びカラマツアラビノガラクタン（ｌａｒｃｈ ａｒａｂｏｇａｌａｃｔａｎ））、アルギネート、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール、無機カルシウム塩、ケイ酸、ポリメタクリレート、ワックス、水、ならびにそれらの組み合わせ、または任意の好適な結合剤であってもよい。
防腐剤の例には、抗酸化剤、キレート剤、抗菌防腐剤、抗真菌防腐剤、アルコール防腐剤、酸性防腐剤、及び／または他の防腐剤が含まれ得るが、これらに限定されない。抗酸化物質の例としては、αトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、メタ重亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、及び／または亜硫酸ナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。キレート剤の例としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸、及び／またはエデト酸三ナトリウムが挙げられる。抗菌防腐剤の例としては、限定されないが、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコール、及び／またはチメロサールが挙げられる。抗真菌防腐剤の例としては、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、及び／またはソルビン酸が挙げられるが、これらに限定されない。アルコール防腐剤の例としては、エタノール、ポリエチレングリコール、ベンジルアルコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシベンゾエート、及び／またはフェニルエチルアルコールが挙げられるが、これらに限定されない。酸性防腐剤の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、β－カロテン、クエン酸、酢酸、デヒドロアスコルビン酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、及び／またはフィチン酸が挙げられるが、これらに限定されない。他の防腐剤としては、トコフェロール、酢酸トコフェロール、メシル酸デテロキシム（ｄｅｔｅｒｏｘｉｍｅ ｍｅｓｙｌａｔｅ）、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、ＧＬＹＤＡＮＴ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＰＨＥＮＯＮＩＰ（登録商標）、メチルパラベン、ＧＥＲＭＡＬＬ（登録商標）１１５、ＧＥＲＭＡＢＥＮ（登録商標）ＩＩ、ＮＥＯＬＯＮＥ（商標）、ＫＡＴＨＯＮ（商標）、及び／またはＥＵＸＹＬ（登録商標）が挙げられるが、これらに限定されない。
緩衝剤の例には、限定されないが、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、ｄ－グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、ラクトビオン酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、二塩基性リン酸カルシウム、リン酸、三塩基性リン酸カルシウム、水酸化カルシウムリン酸、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、アミノスルホン酸緩衝液（例えば、ＨＥＰＥＳ）、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張食塩水、リンガー液、エチルアルコール、及び／またはそれらの組み合わせが含まれる。潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、麦芽、ベヘン酸グリセリル、水素化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせからなる非限定的な群から選択され得る。
油の例としては、アーモンド、アプリコットカーネル、アボカド、ババス、ベルガモット、ブラックカレント（ｂｌａｃｋ ｃｕｒｒｅｎｔ）シード、ボリジ（ｂｏｒａｇｅ）、カデ（ｃａｄｅ）、カモミール、カノーラ、キャラウェイ、カルナウバ、ヒマシ、シナモン、ココアバター、ココナッツ、タラ肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、イブニングプリムローズ、魚、亜麻仁、ゲラニオール、ヒョウタン、グレープシード、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイナッツ、ラバンディン、ラベンダー、レモン、アオモジ（ｌｉｔｓｅａ ｃｕｂｅｂａ）、マカデミアナッツ、ゼニアオイ（ｍａｌｌｏｗ）、マンゴーシード、メドウフォームシード、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、トウニン、ピーナッツ、ポピーシード、パンプキンシード、ナタネ、米ぬか、ローズマリー、ベニバナ、サンダルウッド、サスクアナ（ｓａｓｑｕａｎａ）、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチバー、クルミ、及び小麦胚芽油、ならびにステアリン酸ブチル、トリカプリル酸グリセリル（ｃａｐｒｙｌｉｃ ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）、トリカプリン酸グリセリル（ｃａｐｒｉｃ ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、シメチコン、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーンオイル、及び／またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
ＬＮＰ組成物
本明細書に記載される脂質ナノ粒子は、１つ以上の特定の用途または標的のために設計され得る。脂質ナノ粒子の要素及びそれらの相対量は、特定の用途もしくは標的に基づいて、及び／または１つ以上の要素の有効性、毒性、費用、使用の容易さ、可用性、または他の特徴に基づいて選択され得る。同様に、脂質ナノ粒子の特定の製剤は、例えば、要素の特定の組み合わせの有効性及び毒性に応じて、特定の用途または標的のために選択され得る。脂質ナノ粒子製剤の有効性及び忍容性は、製剤の安定性によって影響を受け得る。
本発明のＬＮＰは、少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を含む。主題のＬＮＰは、ＬＮＰの成分としての有効量の免疫細胞送達強化脂質を含み、ＬＮＰは、（ｉ）イオン性脂質と、（ｉｉ）コレステロールまたは他の構造的脂質と、（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、（ｉｖ）ＰＥＧ脂質と、（ｖ）ＬＮＰに封入された及び／またはＬＮＰと会合された薬剤（例えば、核酸分子）と、を含み、免疫細胞送達強化脂質の有効量は、免疫細胞送達強化脂質を欠くＬＮＰと比較して、免疫細胞（例えば、ヒトまたは霊長類免疫細胞）への薬剤の送達を増強する。
様々な成分の要素は、特定の画分、例えば、モル％の画分で提供され得る。
例えば、前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰは、構造的脂質またはその塩を含む。いくつかの態様では、構造的脂質は、コレステロールまたはその塩である。さらなる態様では、コレステロールのモル％は、ＬＮＰ中に存在するフィトステロールのモル％の約１％～５０％である。他の態様では、コレステロールのモル％は、ＬＮＰ中に存在するフィトステロールのモル％の約１０％～４０％である。いくつかの態様では、コレステロールのモル％は、ＬＮＰ中に存在するフィトステロールのモル％の約２０％～３０％である。さらなる態様では、コレステロールのモル％は、ＬＮＰ中に存在するフィトステロールのモル％の約３０％である。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰは、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰは、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
上記または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
ある特定の実施形態では、脂質ナノ粒子のイオン性脂質成分は、総モル％が１００％を超えない限り、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のフィトステロール（任意に１つ以上の構造的脂質を含む）と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子のイオン性脂質成分は、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％～約４０モル％のフィトステロール（任意に１つ以上の構造的脂質を含む）と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。特定の実施形態では、脂質成分は、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール（任意に１つ以上の構造的脂質を含む）と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。別の特定の実施形態では、脂質成分は、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール（任意に１つ以上の構造的脂質を含む）と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの実施形態では、フィトステロールは、β－シトステロールであってもよく、非カチオン性ヘルパー脂質は、ＤＯＰＥ、ＤＳＰＣなどのリン脂質、またはオレイン酸などのリン脂質代替物であってもよい。他の実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ＤＭＧであってもよく、及び／または構造的脂質は、コレステロールであってもよい。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のフィトステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％～約４０モル％のフィトステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％～約４０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％～約４０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約１８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４３．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約２０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約２５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約５０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約４５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４８．５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約４０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約５５モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３５モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及び構造的脂質と、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。いくつかの態様では、本開示のＬＮＰは、約６０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質と、約３０モル％のフィトステロール及びコレステロールと、約０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む。
本明細書の実施形態に関するいくつかの態様では、本開示のＬＮＰのフィトステロール及び構造的脂質成分は、約１０：１～１：１０のフィトステロール対構造的脂質、例えば、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９及び１：１０のフィトステロール対構造的脂質（例えば、β－シトステロール対コレステロール）を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのフィトステロール成分は、フィトステロール及び構造的脂質、例えば、コレステロールのブレンドであり、フィトステロール（例えば、β－シトステロール）及び構造的脂質（例えば、コレステロール）はそれぞれ、特定のモル％で存在する。例えば、いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１５～４０モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３０、または４０モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、２０モル％の超のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）及び２０モル％の未満の構造的脂質（例えば、コレステロール）を含み、その結果、フィトステロール及び構造的脂質の総モル％は、３０～４０モル％である。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約２０モル％、約２１モル％、約２２モル％、約２３モル％、約２４モル％、約２５モル％、約２６モル％、約２７モル％、約２８モル％、約２９モル％、約３０モル％、約３１モル％、約３２モル％、約３３モル％、約３４モル％、約３５モル％、約３７モル％、約３８モル％、約３９モル％、または約４０モル％のフィトステロール（例えば、βシトステロール）と、約１９モル％、約１８モル％、約１７モル％、約１６モル％、約１５モル％、約１４モル％、約１３モル％、約１２モル％、約１１モル％、約１０モル％、約９モル％、約８モル％、約７モル％、約６モル％、約５モル％、約４モル％、約３モル％、約２モル％、約１モル％のまたは約０モル％それぞれの構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、約２８モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、約１０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子が含むフィトステロール及び構造的脂質（例えば、コレステロール）の総モル％は、３８．５％である。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、２８．５モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、１０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１８．５モル％のフィトステロール（例えば、β－シトステロール）と、２０モル％の構造的脂質（例えば、コレステロール）と、を含む。
本開示の脂質ナノ粒子は、１つ以上の特定の用途または標的のために設計され得る。例えば、主題の脂質ナノ粒子は、任意に、哺乳類、例えばヒトの体内の特定の免疫細胞（例えば、リンパ球もしくは骨髄細胞）、組織、臓器、またはそれらの系もしくは群へのＲＮＡなどの核酸分子の送達をさらに増強するように設計され得る。脂質ナノ粒子の生理化学的特性は、特定の身体標的に対する選択性を増加させるために改変され得る。例えば、粒径は、免疫細胞取り込みを促進するように調整され得る。上述のように、脂質ナノ粒子に含まれる核酸分子は、免疫細胞への所望の送達に基づいて選択されてもよい。例えば、核酸分子は、特定の適応症、状態、疾患もしくは障害に関して、及び／または特定の細胞、組織、臓器、またはその系もしくは群への送達に関して選択され得る（例えば、局所的または特異的送達）。
ある特定の実施形態では、脂質ナノ粒子は、細胞内で翻訳されて目的のポリペプチドを産生することができる目的のポリペプチドをコードするｍＲＮＡを含み得る。他の実施形態では、脂質ナノ粒子は、他の種類の薬剤、例えば、他の核酸剤、例えば、本明細書に記載されるＤＮＡ及び／またはＲＮＡ剤、例えば、以下でさらに詳細に説明するようなｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、アンチセンス核酸などを含むことができる。
脂質ナノ粒子中の核酸分子の量は、脂質ナノ粒子のサイズ、組成物、所望の標的及び／または用途、または他の特性、ならびに治療及び／または予防の特性に依存し得る。例えば、脂質ナノ粒子に有用なＲＮＡの量は、ＲＮＡのサイズ、配列、及び他の特徴に依存し得る。脂質ナノ粒子中の核酸分子及び他の要素（例えば、脂質）の相対量も変化し得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子中の、イオン性脂質成分と核酸分子との重量／重量比は、約５：１～約６０：１、例えば５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、２５：１、３０：１、３５：１、４０：１、４５：１、５０：１、及び６０：１であり得る。例えば、イオン性脂質成分と核酸分子との重量／重量比は、約１０：１～約４０：１であり得る。ある特定の実施形態では、重量／重量比は、約２０：１である。ＬＮＰ中の核酸分子の量は、例えば、吸収分光法（例えば、紫外線可視分光法）を使用して測定してもよい。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子は、１つ以上のＲＮＡ、及び１つ以上のイオン性脂質を含み、それらの量は、特定のＮ：Ｐ比となるように選択され得る。組成物のＮ：Ｐ比は、ＲＮＡ中のリン酸基の数に対する、１つ以上の脂質中の窒素原子のモル比を指す。一般に、より低いＮ：Ｐ比が好ましい。１つ以上のＲＮＡ、脂質、及びその量は、約２：１～約３０：１、例えば２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１２：１、１４：１、１６：１、１８：１、２０：１、２２：１、２４：１、２６：１、２８：１、または３０：１のＮ：Ｐ比となるように選択され得る。ある特定の実施形態では、Ｎ：Ｐ比は、約２：１～約８：１であってもよい。他の実施形態では、Ｎ：Ｐ比は、約５：１～約８：１である。例えば、Ｎ：Ｐ比は、約５．０：１、約５．５：１、約５．６７：１、約５．７：１、約５．８：１、約５．９：１、約６．０：１、約６．５：１、または約７．０：１であってもよい。例えば、Ｎ：Ｐ比は、約５．６７：１であってもよい。別の実施形態では、Ｎ：Ｐ比は、約５．８：１であってもよい。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子を含む製剤は、塩化物塩などの塩をさらに含み得る。
いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子を含む製剤は、二糖などの糖をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、製剤は、塩化物塩などの塩ではなく、糖をさらに含む。
物理的特性
脂質ナノ粒子の特徴は、その成分に依存し得る。例えば、構造的脂質としてコレステロールを含む脂質ナノ粒子は、異なる構造的脂質を含む脂質ナノ粒子とは異なる特徴を有し得る。同様に、脂質ナノ粒子の特徴は、その成分の絶対量または相対量に依存し得る。例えば、リン脂質のモル分率がより高い脂質ナノ粒子は、リン脂質のモル分率がより低い脂質ナノ粒子とは異なる特徴を有し得る。特徴はまた、脂質ナノ粒子の調製方法及び条件に応じて変化し得る。
脂質ナノ粒子は、多様な方法を特徴とし得る。例えば、顕微鏡法（例えば、透過型電子顕微鏡法または走査型電子顕微鏡法）を用いて、脂質ナノ粒子の形態及びサイズ分布を検査してもよい。動的光散乱法または電位差測定法（例えば、電位差滴定）を用いて、ゼータ電位を測定してもよい。また、動的光散乱法を利用して、粒径を決定してもよい。また、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｌｔｄ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，ＵＫ）などの機器をまた使用して、粒径、多分散性指数、及びゼータ電位などの、脂質ナノ粒子の複数の特徴を測定してもよい。
脂質ナノ粒子の平均サイズは、例えば、動的光散乱（ＤＬＳ）によって測定される、数十ｎｍ～百数十ｎｍであり得る。例えば、平均サイズは、約４０ｎｍ～約１５０ｎｍ、例えば、約４０ｎｍ、４５ｎｍ、５０ｎｍ、５５ｎｍ、６０ｎｍ、６５ｎｍ、７０ｎｍ、７５ｎｍ、８０ｎｍ、８５ｎｍ、９０ｎｍ、９５ｎｍ、１００ｎｍ、１０５ｎｍ、１１０ｎｍ、１１５ｎｍ、１２０ｎｍ、１２５ｎｍ、１３０ｎｍ、１３５ｎｍ、１４０ｎｍ、１４５ｎｍ、または１５０ｎｍであり得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子の平均サイズは、約５０ｎｍ～約１００ｎｍ、約５０ｎｍ～約９０ｎｍ、約５０ｎｍ～約８０ｎｍ、約５０ｎｍ～約７０ｎｍ、約５０ｎｍ～約６０ｎｍ、約６０ｎｍ～約１００ｎｍ、約６０ｎｍ～約９０ｎｍ、約６０ｎｍ～約８０ｎｍ、約６０ｎｍ～約７０ｎｍ、約７０ｎｍ～約１００ｎｍ、約７０ｎｍ～約９０ｎｍ、約７０ｎｍ～約８０ｎｍ、約８０ｎｍ～約１００ｎｍ、約８０ｎｍ～約９０ｎｍ、または約９０ｎｍ～約１００ｎｍであり得る。ある特定の実施形態では、脂質ナノ粒子の平均サイズは、約７０ｎｍ～約１００ｎｍであり得る。特定の実施形態では、平均サイズは、約８０ｎｍであり得る。他の実施形態では、平均サイズは、約１００ｎｍであり得る。
脂質ナノ粒子は、比較的均一であり得る。多分散性指数を使用して、ＬＮＰの均質性、例えば、脂質ナノ粒子の粒径分布を示すことができる。本明細書で使用する場合、「多分散性指数」は、ある系の粒径分布の均質性を説明する比率である。例えば０．３未満の小さい値は、狭い粒径分布を示す。小さい（例えば、０．３未満）多分散性指数は、一般に、狭い粒径分布を示す。脂質ナノ粒子は、約０～約０．２５、例えば、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１０、０．１１、０．１２、０．１３、０．１４、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２１、０．２２、０．２３、０．２４、または０．２５などの多分散性指数を有し得る。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子の多分散性指数は、約０．１０～約０．２０であり得る。
脂質ナノ粒子のゼータ電位を使用して、組成物の界面動電位を示すことができる。本明細書で使用する場合、「ゼータ電位」は、例えば、粒子組成物における脂質の界面動電位である。
例えば、ゼータ電位は、脂質ナノ粒子の表面電荷を説明し得る。より高い荷電種は、体内の細胞、組織、及び他の要素との望ましくない相互作用を生じ得るため、正または負の比較的低い荷電を有する脂質ナノ粒子が一般に望ましい。いくつかの実施形態では、脂質ナノ粒子のゼータ電位は、約－１０ｍＶ～約＋２０ｍＶ、約－１０ｍＶ～約＋１５ｍＶ、約－１０ｍＶ～約＋１０ｍＶ、約－１０ｍＶ～約＋５ｍＶ、約－１０ｍＶ～約０ｍＶ、約－１０ｍＶ～約－５ｍＶ、約－５ｍＶ～約＋２０ｍＶ、約－５ｍＶ～約＋１５ｍＶ、約－５ｍＶ～約＋１０ｍＶ、約－５ｍＶ～約＋５ｍＶ、約－５ｍＶ～約０ｍＶ、約０ｍＶ～約＋２０ｍＶ、約０ｍＶ～約＋１５ｍＶ、約０ｍＶ～約＋１０ｍＶ、約０ｍＶ～約＋５ｍＶ、約＋５ｍＶ～約＋２０ｍＶ、約＋５ｍＶ～約＋１５ｍＶ、または約＋５ｍＶ～約＋１０ｍＶであり得る。
核酸分子の封入の効率は、提供される初期量と比較して、調製後に脂質ナノ粒子に封入されるか、そうでなければ会合される核酸分子の量を記載する。封入効率は、望ましくは高い（例えば、１００％に近い）。封入効率は、例えば、脂質ナノ粒子を分解する前及び分解した後に、脂質ナノ粒子を含有する溶液中の核酸分子の量を１つ以上の有機溶媒または洗剤と比較することによって測定され得る。蛍光を使用して、溶液中の遊離核酸分子（例えばＲＮＡ）の量を測定してもよい。本明細書に記載される脂質ナノ粒子の場合、核酸分子の封入効率は、少なくとも５０％、例えば、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％であり得る。いくつかの実施形態では、封入効率は、少なくとも８０％であり得る。ある特定の実施形態では、封入効率は、少なくとも９０％であり得る。
脂質ナノ粒子は、任意に、１つ以上のコーティングを含んでもよい。例えば、脂質ナノ粒子は、コーティングを有するカプセル、フィルム、または錠剤に配合され得る。本明細書に記載される組成物を含むカプセル、フィルム、または錠剤は、任意の有用なサイズ、引張強さ、硬さ、または密度を有し得る。
薬学的組成物
本発明の脂質ナノ粒子を含む製剤は、薬学的組成物として全体的にまたは部分的に配合され得る。薬学的組成物は、１つ以上の脂質ナノ粒子を含み得る。例えば、薬学的組成物は、１つ以上の異なる治療剤及び／または予防剤を含む１つ以上の脂質ナノ粒子を含み得る。薬学的組成物は、本明細書に記載されるものなどの１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または付属成分をさらに含み得る。薬学的組成物及び薬剤の製剤化及び製造のための一般的なガイドラインは、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ；Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，２００６において入手可能である。従来の賦形剤及び付属成分は、任意の従来の賦形剤または付属成分が、本開示の製剤中のＬＮＰの１つ以上の成分と不適合であり得る場合を除き、任意の薬学的組成物で使用してもよい。賦形剤または付属成分は、成分もしくはＬＮＰとのその組み合わせが任意の望ましくない生物学的影響またはその他の有害な影響をもたらし得る場合、製剤のＬＮＰの成分と不適合であり得る。
薬学的組成物に配合された本開示の脂質ナノ粒子は、単一の核酸または複数の核酸を封入することができる。複数の核酸を封入する場合、核酸は、同じ種類（例えば、すべてのｓｉＲＮＡ）であることもでき、または異なる種類（例えば、ｓｉＲＮＡ及び他のＲＮＡ干渉剤、例えば、ｍｉＲＮＡ、またはｓｉＲＮＡ及びｍＲＮＡ）であることもできる。さらに、複数のＬＮＰを、同じまたは別個の薬学的組成物に配合することができる。例えば、同じまたは別個の薬学的組成物は、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰを含むことができ、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、同じまたは異なる核酸分子を封入し、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、成分として免疫細胞送達強化脂質を含む。他の実施形態では、同じまたは別個の薬学的組成物は、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰを含むことができ、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、同じまたは異なる核酸分子を封入し、第１のＬＮＰは、成分として免疫細胞送達強化脂質を含み、第２のＬＮＰは、免疫細胞送達強化脂質を欠く。
いくつかの実施形態では、１つ以上の賦形剤または付属成分は、ＬＮＰを含む薬学的組成物の総質量または体積の５０％超を構成してもよい。例えば、１つ以上の賦形剤または付属成分は、薬学的規則（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ）の５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上を構成してもよい。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％純粋である。いくつかの実施形態では、賦形剤は、ヒトでの使用及び獣医学的使用が承認されている。いくつかの実施形態では、賦形剤は、米国食品医薬品局によって承認される。いくつかの実施形態では、賦形剤は、医薬品グレードである。いくつかの実施形態では、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、及び／または国際薬局方の基準を満たす。
本開示による薬学的組成物中の１つ以上の脂質ナノ粒子、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、及び／または任意の追加の成分の相対量は、治療される対象の識別、サイズ、及び／または状態に応じて、さらに組成物が投与される経路に応じて変化するであろう。例として、薬学的組成物は、０．１％～１００％（重量／重量）の１つ以上の脂質ナノ粒子を含んでもよい。別の例として、薬学的組成物は、０．１％～１５％（重量／体積）の１つ以上の両親媒性ポリマー（例えば、０．５％、１％、２．５％、５％、１０％、または１２．５％ｗ／ｖ）を含んでもよい。
ある特定の実施形態では、本開示の脂質ナノ粒子及び／または薬学的組成物は、保管及び／または出荷のために冷蔵または凍結される（例えば、４℃以下の温度、例えば、約－１５０℃～約０℃、または約－８０℃～約－２０℃（例えば、約－５℃、－１０℃、－１５℃、－２０℃、－２５℃、－３０℃、－４０℃、－５０℃、－６０℃、－７０℃、－８０℃、－９０℃、－１３０℃、もしくは－１５０℃）で保管される）。例えば、１つ以上の脂質ナノ粒子を含む薬学的組成物は、例えば、約－２０℃、－３０℃、－４０℃、－５０℃、－６０℃、－７０℃、または－８０℃で保管及び／または出荷するために冷蔵される溶液または固体（例えば、凍結乾燥を介して）である。ある特定の実施形態では、本開示はまた、４℃以下の温度、例えば、約－１５０℃～約０℃、または約－８０℃～約－２０℃、例えば、約－５℃、－１０℃、－１５℃、－２０℃、－２５℃、－３０℃、－４０℃、－５０℃、－６０℃、－７０℃、－８０℃、－９０℃、－１３０℃、もしくは－１５０℃の温度で脂質ナノ粒子及び／またはその薬学的組成物を保管することによって、脂質ナノ粒子の安定性を増加させる方法に関する。
１つ以上の脂質ナノ粒子を含む脂質ナノ粒子及び／または薬学的組成物は、腎臓系などの１つ以上の特定の細胞、組織、臓器、またはそれらの系もしくは群への治療的及び／または予防的送達によって提供される治療効果から利益を得る可能性がある患者または対象を含む、任意の患者または対象に投与され得る。脂質ナノ粒子及び脂質ナノ粒子を含む薬学的組成物の本明細書で提供される説明は、主に、ヒトへの投与に好適な組成物を対象とするが、そのような組成物が一般に、任意の他の哺乳類への投与に好適であることが当業者によって理解されるであろう。様々な動物への投与に好適な組成物を提供するために、ヒトへの投与に好適な組成物の修飾が十分に理解されており、通常の知識を有する獣医薬理学者であれば、そのような修飾を、単なる普通の実験（もしあれば）で設計及び／または実施することができる。組成物の投与が企図される対象には、限定されないが、ヒト、他の霊長類、及び他の哺乳類、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、及び／またはラットなどの商業的に関連する哺乳類が含まれる。
１つ以上の脂質ナノ粒子を含む薬学的組成物は、薬理学の分野で知られているか、または今後開発される任意の方法によって調製され得る。一般に、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤及び／または１つ以上の他の付属成分と会合させることと、次いで、望ましいか、必要な場合、生成物を所望の単一または複数回投与単位に分割、成形、及び／または包装することを含む。
本開示による薬学的組成物は、単一の単位用量として、及び／または複数の単位用量として、バルクで調製、包装、及び／または販売してもよい。本明細書で使用する場合、「単位用量」は、所定量の活性成分（例えば、脂質ナノ粒子）を含む薬学的組成物の別個の量である。活性成分の量は、概して、対象に投与される活性成分の投薬量及び／またはそのような投薬量の好都合な割合、例えば、そのような投薬量の２分の１または３分の１に等しい。
薬学的組成物は、様々な投与の経路及び方法に好適な様々な形態で調製され得る。一実施形態では、かかる組成物は、液体形態で調製されるか、または凍結乾燥される（例えば、４℃以下で凍結保存される）。例えば、薬学的組成物は、液体剤形（例えば、エマルション、マイクロエマルション、ナノエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、及びエリキシル）、注射剤形、固体剤形（例えば、カプセル、錠剤、丸剤、粉末、及び顆粒）、局所及び／または経皮投与用の剤形（例えば、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤、及びパッチ）、懸濁液、粉末、及び他の形態で調製され得る。
経口及び非経口投与のための液体剤形には、限定されないが、薬学的に許容されるエマルション、マイクロエマルション、ナノエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、及び／またはエリキシル剤が含まれる。活性成分に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシ、及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含み得る。不活性希釈剤に加えて、経口組成物は、追加の治療剤及び／または予防剤、追加の薬剤、例えば、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、甘味剤、香味剤、及び／または芳香剤を含むことができる。非経口投与のための特定の実施形態では、組成物は、可溶化剤、例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、及び／またはそれらの組み合わせと混合される。
注射用調製物、例えば、滅菌の注射用水性または油性懸濁液は、好適な分散剤、湿潤剤、及び／または懸濁剤を使用して、公知の技術に従って製剤化され得る。滅菌の注射用調製物は、例えば、１，３－ブタンジオール中の溶液として、非毒性の非経口的に許容される希釈剤及び／または溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液、及び／またはエマルションであり得る。使用され得る許容されるビヒクル及び溶媒には、水、リンガー溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、及び等張塩化ナトリウム溶液がある。滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来使用される。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性（ｂｌａｎｄ）固定油を使用することができる。オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に使用することができる。
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通して濾過することによって、及び／または使用前に滅菌水もしくは他の滅菌注射用媒体に溶解もしくは分散させることができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって滅菌され得る。
活性成分の効果を延長するために、多くの場合、皮下または筋肉内注射からの活性成分の吸収を遅くすることが望ましい。これは、水溶性が低い結晶性または非晶質材料の液体懸濁液を使用することによって達成され得る。次いで、薬物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、次いで、その溶解速度は、結晶サイズ及び結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与された薬物形態の遅延吸収は、薬物を油ビヒクルに溶解または懸濁させることによって達成される。注射用デポ形態は、ポリラクチド－ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中で薬物のマイクロ封入マトリックスを形成することによって作製される。薬物対ポリマーの比及び使用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）が挙げられる。デポ注射用製剤は、薬物を、身体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルションに封入することによって調製される。
直腸または膣投与のための組成物は、典型的には、周囲温度では固体であるが、体温では液体である、好適な非刺激性賦形剤、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、または座薬ワックスと、組成物を混合することによって調製することができる座薬であり、したがって、直腸または膣腔内で融解し、活性成分を放出する。
組成物の局所及び／または経皮投与のための剤形としては、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤、及び／またはパッチが挙げられ得る。一般に、活性成分は、必要に応じて、薬学的に許容される賦形剤及び／または任意の必要な防腐剤及び／または緩衝剤と滅菌条件下で混合される。加えて、本開示は、多くの場合、化合物の身体への制御された送達を提供する追加の利点を有する経皮パッチの使用を企図する。そのような剤形は、例えば、化合物を適切な培地に溶解及び／または分配することによって調製され得る。代替的または追加的に、速度は、速度制御膜を提供すること、及び／またはポリマーマトリックス及び／またはゲル中に化合物を分散させることのいずれかによって制御され得る。
本明細書に記載の皮内薬学的組成物の送達に使用するのに好適なデバイスは、米国特許第４，８８６，４９９号、同第５，１９０，５２１号、同第５，３２８，４８３号、同第５，５２７，２８８号、同第４，２７０，５３７号、同第５，０１５，２３５号、同第５，１４１，４９６号、及び同第５，４１７，６６２号に記載されるものなどの短い針デバイスを含む。皮内組成物は、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／３４８５０号及びその機能的等価物に記載されるものなど、針の皮膚への有効な浸透長を制限するデバイスによって投与され得る。液体ジェット注入器を介して、及び／または角質層を貫通し、真皮に到達するジェットを生成する針を介して、液体組成物を真皮に送達するジェット注入デバイスが好適である。ジェット注入デバイスは、例えば、米国特許第５，４８０，３８１号、同第５，５９９，３０２号、同第５，３３４，１４４号、同第５，９９３，４１２号、同第５，６４９，９１２号、同第５，５６９，１８９号、同第５，７０４，９１１号、同第５，３８３，８５１号、同第５，８９３，３９７号、同第５，４６６，２２０号、同第５，３３９，１６３号、同第５，３１２，３３５号、同第５，５０３，６２７号、同第５，０６４，４１３号、同第５，５２０，６３９号、同第４，５９６，５５６号、同第４，７９０，８２４号、同第４，９４１，８８０号、同第４，９４０，４６０号、ならびにＰＣＴ公開第ＷＯ９７／３７７０５及び同第ＷＯ９７／１３５３７号に記載されている。圧縮ガスを使用して、皮膚の外層を通って真皮に至る粉末形態のワクチンを加速する弾道送達粉末／粒子送達デバイスが好適である。代替的または追加的に、従来の注射器は、皮内投与の古典的なマントー法で使用され得る。
局所投与に好適な製剤には、限定されないが、塗布剤、ローション、水中油型及び／または油中水型エマルション（例えば、クリーム、軟膏及び／またはペースト）、及び／または溶液、及び／または懸濁液などの液体及び／または半液体調製物が含まれる。局所投与可能な製剤は、例えば、約１％～約１０％（重量／重量）の活性成分を含んでよいが、活性成分の濃度は、溶媒中の活性成分の溶解限界と同程度であり得る。局所投与用の製剤は、本明細書に記載される追加の成分のうちの１つ以上をさらに含んでもよい。
薬学的組成物は、頬腔を介した肺投与に好適な製剤で調製、包装、及び／または販売され得る。かかる製剤は、活性成分を含む乾燥粒子を含んでもよい。かかる組成物は、好都合には、推進剤の流れが粉末を分散させるように向けられ得る乾燥粉末貯蔵器を含むデバイスを使用して、及び／または密封された容器内の低沸騰推進剤に溶解及び／または懸濁された活性成分を含むデバイスなどの自己推進溶媒／粉末分注容器を使用して、投与するための乾燥粉末の形態である。乾燥粉末組成物は、砂糖などの固体微細粉末希釈剤を含み得、単位用量形態で便宜的に提供される。
低沸騰推進剤は、一般に、大気圧で６５°Ｆ未満の沸点を有する液体推進剤を含む。一般に、推進剤は組成物の５０％～９９．９％（重量／重量）を構成してもよく、活性成分は組成物の０．１％～２０％（重量／重量）を構成してもよい。推進剤は、液体非イオン性及び／または固体アニオン性界面活性剤及び／または固体希釈剤（活性成分を含む粒子と同じ程度の粒径を有し得る）などの追加の成分をさらに含み得る。
肺送達のために製剤化された薬学的組成物は、溶液及び／または懸濁液の液滴の形態の活性成分を提供し得る。そのような製剤は、有効成分を含む、任意に滅菌した、水性及び／または希釈アルコール溶液及び／または懸濁液として、調製、包装、及び／または販売されてもよく、任意の噴霧及び／または噴霧装置を使用して好都合に投与されてもよい。かかる製剤は、限定されないが、サッカリンナトリウムなどの香味剤、揮発性油、緩衝剤、表面活性剤、及び／またはヒドロキシ安息香酸メチルなどの防腐剤を含む１つ以上の追加の成分をさらに含んでもよい。この投与経路によって提供される液滴は、約１ｎｍ～約２００ｎｍの範囲の平均直径を有し得る。
肺送達に有用であると本明細書に記載される製剤は、薬学的組成物の鼻腔内送達に有用である。鼻腔内投与に好適な別の製剤は、活性成分を含み、約０．２μｍ～５００μｍの平均粒子を有する粗製粉末である。このような製剤は、スナッフを要する方法、すなわち、鼻の近くに保持される粉末の容器から鼻通路を介して急速に吸入することによって投与される。
経鼻投与に好適な製剤は、例えば、できるだけ少ない約０．１％（重量／重量）及びできるだけ多い１００％（重量／重量）の活性成分を含んでよく、本明細書に記載される追加の成分のうちの１つ以上を含んでもよい。薬学的組成物は、頬側投与に好適な製剤で調製、包装、及び／または販売され得る。そのような製剤は、例えば、従来の方法を使用して作製される錠剤及び／またはロゼンジの形態であってもよく、かつ例えば、０．１～２０％（重量／重量）の活性成分であってもよく、残りは、経口的に溶解可能な及び／または分解可能な組成物、ならびに所望により、本明細書に記載される追加の成分のうちの１つ以上を含む。あるいは、頬側投与に好適な製剤は、活性成分を含む粉末及び／またはエアロゾル化及び／または噴霧化溶液及び／または懸濁液を含んでもよい。かかる粉末状、エアロゾル化、及び／またはエアロゾル化製剤は、分散されるとき、約０．１ｎｍ～約２００ｎｍの範囲の平均粒子及び／または液滴サイズを有してよく、本明細書に記載される任意の追加の成分のうちの１つ以上をさらに含んでもよい。
薬学的組成物は、眼科投与に好適な製剤で調製、包装、及び／または販売され得る。かかる製剤は、例えば、０．１／１．０％（重量／重量）の溶液、及び／または水性もしくは油性液体賦形剤中の活性成分の懸濁液を含む点眼剤の形態であってよい。そのような点眼剤は、緩衝剤、塩、及び／または本明細書に記載される任意の追加成分の１つ以上の他の成分をさらに含み得る。有用な他の眼科投与可能な製剤には、微結晶形態及び／またはリポソーム調製物中の活性成分を含むものが含まれる。点耳剤及び／または点眼剤は、本開示の範囲内にあるものとして企図される。
脂質系組成物の使用
本開示は、改善された脂質系組成物、特に、免疫細胞へのＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）の送達を増強したＬＮＰ組成物を提供する。本開示は、ＬＮＰの成分が、免疫細胞への封入されたＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）の送達を増強し、その結果、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質の発現が免疫細胞内で阻害される、免疫細胞送達強化脂質として機能するという発見に少なくとも部分的に基づいている。さらに、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質の発現の阻害は、免疫細胞の分化の調節及び／または免疫細胞のエフェクター機能（複数可）の調節など、免疫細胞の活性を調節する。
本開示の改善された脂質系組成物、特にＬＮＰは、免疫細胞へのＲＮＡ干渉剤の送達、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞またはマクロファージ）活性化または活性、及び免疫細胞応答の調節、例えば、免疫応答の上方調節（例えば、がんまたは感染症の治療における免疫を増強するため）、及び免疫応答の下方調節（例えば、自己免疫及び炎症性障害における自己免疫を低減するため）など、インビトロ及びインビボの両方の様々な目的に有用である。
ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のインビトロ送達のために、免疫細胞は、ＬＮＰ及び免疫細胞をエクスビボでインキュベートすることによって、ＬＮＰと接触させる。そのような免疫細胞は、その後、細胞を対象に投与することによってインビボで導入され得る。
ＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）のインビボ送達のために、免疫細胞は、ＬＮＰを対象に投与することによって、ＬＮＰと接触させられ、それによって、対象内の免疫細胞におけるＲＮＡ干渉剤の発現が増加または誘導される。例えば、一実施形態では、ＬＮＰは、静脈内投与される。別の実施形態では、ＬＮＰは、筋肉内投与される。さらに他の実施形態では、ＬＮＰは、皮下、結節内、及び腫瘍内からなる群から選択される経路によって投与される。
インビトロ送達のために、一実施形態では、免疫細胞は、ＬＮＰ及び免疫細胞をエクスビボでインキュベートすることによってＬＮＰと接触させる。一実施形態では、免疫細胞は、ヒト免疫細胞である。別の実施形態では、免疫細胞は、霊長類免疫細胞である。別の実施形態では、免疫細胞は、ヒトまたは非ヒト霊長類免疫細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７低Ｔｒｅｇ細胞、またはＴｈ１７細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｂ細胞（例えば、ＣＤ１９＋Ｂ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、樹状細胞（例えば、ＣＤ１１ｃ＋ＣＤ１１ｂ－樹状細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、単球／マクロファージ（例えば、ＣＤ１１ｃ－ＣＤ１１ｂ＋単球／マクロファージ）である。一実施形態では、免疫細胞は、未成熟ＮＫ細胞（例えば、ＣＤ５６高未成熟ＮＫ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、活性化ＮＫ細胞（例えば、ＣＤ５６ＤＩＭ活性化ＮＫ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、ＮＫ Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３＋ＣＤ５６＋ＮＫ Ｔ細胞）である。
一実施形態では、免疫細胞を、血清またはＣ１ｑの存在下で少なくとも１５分間、ＬＮＰと接触させ、これは、エクスビボでの細胞のトランスフェクションのための十分な時間であることが示されている。別の実施形態では、免疫細胞は、例えば、少なくとも３０分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、または少なくとも２４時間、ＬＮＰと接触させる。
一実施形態では、免疫細胞を、単一の治療／トランスフェクションのためにＬＮＰと接触させる。別の実施形態では、免疫細胞を、複数の治療／トランスフェクション（例えば、同じ細胞の２つ、３つ、４つ以上の治療／トランスフェクション）のためにＬＮＰと接触させる。同じ細胞の反復トランスフェクションは、トランスフェクトされた細胞のパーセンテージ及びトランスフェクトされた核酸によってコードされるタンパク質の発現のレベルにおいて、細胞生存率に影響を与えることなく、用量関連の増加をもたらすことが実証されている。
別の実施形態では、インビボ送達のために、免疫細胞を、ＬＮＰを対象に投与することによってＬＮＰと接触させ、それによって、核酸を対象内の免疫細胞に送達する。例えば、一実施形態では、ＬＮＰは、静脈内投与される。別の実施形態では、ＬＮＰは、筋肉内投与される。さらに他の実施形態では、ＬＮＰは、皮下、結節内、及び腫瘍内からなる群から選択される経路によって投与される。
一実施形態では、免疫細胞におけるＲＮＡ干渉剤の細胞内濃度が増強される。一実施形態では、免疫細胞におけるＲＮＡ干渉剤の活性が増強される。一実施形態では、免疫細胞におけるＲＮＡ干渉剤の発現が増強される。実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、免疫細胞の活性化または活性を調節する。一実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、免疫細胞の活性化または活性を低下させる。別の実施形態では、ＲＮＡ干渉剤は、免疫細胞の活性化または活性を増加させる。
ある特定の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰによる免疫細胞への核酸の送達は、例えば、対象への投与後に、インビボで、検出可能な量の免疫細胞への送達（例えば、あるパーセンテージの免疫細胞への送達）をもたらす。いくつかの実施形態では、ＬＮＰを含有する免疫細胞送達強化脂質は、免疫細胞の標的部分を含まない（例えば、免疫細胞マーカーに対する特異性を有する抗体、またはＬＮＰに免疫細胞を標的とさせる受容体リガンドを含まない）。例えば、一実施形態では、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの投与は、単回静脈内注射後、インビボで少なくとも約１５％の脾臓Ｔ細胞への核酸の送達をもたらす。別の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの投与は、単回静脈内注射後にインビボで少なくとも約１５％～２５％の脾臓Ｂ細胞への核酸の送達をもたらす。別の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの投与は、単回静脈内注射後にインビボで少なくとも約３５％～４０％の脾臓樹状細胞への核酸の送達をもたらす。別の実施形態では、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの投与は、単回静脈内注射後にインビボで少なくとも約５％～２０％の骨髄細胞（大腿骨及び／または上腕骨）への核酸の送達をもたらす。本明細書で実証される送達レベルは、インビボ免疫療法を可能にする。
一実施形態では、免疫細胞によるＲＮＡ干渉剤の取り込みが増強される。取り込みは、当業者に知られている方法によって決定することができる。例えば、会合／結合及び／または取り込み／内在化は、検出可能に標識された、例えば、蛍光標識されたＬＮＰを使用することによって、ならびに様々なインキュベーション期間後の免疫細胞内または免疫細胞上のそのようなＬＮＰの位置を追跡することによって評価され得る。さらに、Ｒａｄｕ Ｍｉｈａｉｌａ，ｅｔ ａｌ．，（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，Ｖｏｌ．７：２４６－２５５，２０１７；参照により本明細書に組み込まれる）によって記述された普通の微分方程式（ＯＤＥ）ベースのモデルなどの数理モデルにより、送達及び取り込みの定量化が可能になる。
別の実施形態では、ＲＮＡ干渉剤の機能または活性は、免疫細胞への薬剤の送達の指標として使用することができる。例えば、ある特定の割合の免疫細胞におけるタンパク質発現の減少を測定して、タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とするＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）の、その割合の細胞への送達を示すことができる。タンパク質発現の低下は、実施例に記載されるような、当該技術分野において容易に利用可能なアッセイによって測定することができる。
一実施形態では、様々な薬剤を使用して、細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、マクロファージ）を標識して、その特定の免疫細胞集団への送達を測定することができる。例えば、ＬＮＰはまた、レポーター核酸（例えば、検出可能なレポータータンパク質をコードするｍＲＮＡ）を封入することができ、レポーター核酸の発現は、レポーター核酸が送達される細胞集団の標識をもたらす。検出可能なレポータータンパク質の非限定的な例には、強化型緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）及びルシフェラーゼが含まれる。
免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰによる免疫細胞へのＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）の送達は、例えば、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質の発現の減少を検出する（すなわち、タンパク質発現のノックダウン）ことによって、またはＬＮＰと会合された／封入されたＲＮＡ干渉剤によって媒介される効果（例えば、生物学的効果）を検出することによって、インビトロまたはインビボで測定され得る。タンパク質ノックダウンの検出のために、タンパク質は、例えば、タンパク質に特異的に結合する抗体を使用して、免疫蛍光またはフローサイトメトリーによってアッセイすることができる。
本開示の方法は、ＲＮＡ干渉剤を様々な免疫細胞の種類に送達するのに有用である。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、及びマクロファージからなる群から選択される。
本方法は、ＲＮＡ干渉剤を、例えば、脾臓、末梢血、及び／または骨髄に位置する免疫細胞に送達するために使用され得る。一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞である。Ｔ細胞は、当該技術分野において知られている１つ以上のＴ細胞マーカー、典型的にはＣＤ３の発現によって同定することができる。追加のＴ細胞マーカーとしては、ＣＤ４またはＣＤ８が挙げられる。一実施形態では、免疫細胞は、Ｂ細胞である。Ｂ細胞は、当該技術分野において知られている１つ以上のＢ細胞マーカー、典型的にはＣＤ１９の発現によって同定することができる。さらなるＢ細胞マーカーとしては、ＣＤ２４及びＣＤ７２が挙げられる。一実施形態では、免疫細胞は、単球及び／または組織マクロファージである。単球及び／またはマクロファージは、当該技術分野において知られている１つ以上の単球及び／またはマクロファージマーカー、例えば、ＣＤ２、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４及び／またはＣＤ１６の発現によって同定することができる。一実施形態では、免疫細胞は、樹状細胞である。樹状細胞は、当該技術分野において知られている１つ以上の樹状細胞マーカー、典型的にはＣＤ１１ｃの発現によって同定することができる。さらなる樹状細胞マーカーとしては、ＢＤＣＡ－１及び／またはＣＤ１０３が挙げられる。
本開示のＬＮＰを含む、改善された脂質系組成物は、例えば、２つ以上の異なるＬＮＰの投与によって、２つ以上の核酸分子（核酸分子のうちの少なくとも１つがＲＮＡ干渉剤である）を免疫細胞または免疫細胞の異なる集団に送達するのに有用である。一実施形態では、本開示の方法は、免疫細胞を同時にまたは連続的に、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰに接触させること（または対象に投与すること）を含み、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、同じまたは異なる核酸分子（例えば、同じまたは異なるｓｉＲＮＡなどの同じまたは異なるＲＮＡ干渉剤）を封入し、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、成分としてフィトステロールを含む。他の実施形態では、本開示の方法は、免疫細胞を同時にまたは連続的に、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰに接触させること（または対象に投与すること）を含み、第１のＬＮＰ及び第２のＬＮＰは、同じまたは異なる核酸分子（例えば、同じまたは異なるｓｉＲＮＡなどの同じまたは異なるＲＮＡ干渉剤）を封入し、第１のＬＮＰは、成分としてフィトステロールを含み、第２のＬＮＰは、フィトステロールを欠く。
免疫細胞活性を調節する方法
本開示は、免疫細胞活性（例えば、Ｔ細胞活性、Ｂ細胞活性、ＮＫ細胞活性、樹状細胞活性、骨髄細胞活性、及び／またはマクロファージ活性）を調節するための方法を提供する。免疫細胞への送達を増強するために、本開示のＲＮＡ干渉剤は、免疫細胞、または本明細書に記載される少なくとも１つの免疫細胞送達強化脂質を含む脂質ナノ粒子に封入された対象に投与される。
一実施形態では、免疫細胞活性は、インビトロで調節される。一実施形態では、免疫細胞活性は、インビトロで刺激される。一実施形態では、免疫細胞活性は、インビトロで阻害される。別の実施形態では、免疫細胞活性は、インビボで、例えば、ヒト対象などの対象で調節される。一実施形態では、免疫細胞活性は、インビボで刺激される。別の実施形態では、免疫細胞活性は、インビボで阻害される。一実施形態では、本方法は、免疫細胞の活性が調節されるように、少なくとも１つのＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を含む本開示の組成物（またはその脂質ナノ粒子、またはその薬学的組成物）を免疫細胞に投与すること（例えば、対象に投与すること）を含む。一実施形態では、免疫細胞活性を調節することは、免疫細胞増殖を調節することを含む。一実施形態では、免疫細胞活性を調節することは、サイトカイン産生を調節することを含む。一実施形態では、免疫細胞活性を調節することは、免疫細胞エフェクター機能を調節すること、例えば、ＴヘルパーもしくはＴｒｅｇ機能を調節すること、またはＢ細胞による免疫グロブリン産生、例えば、抗原特異的抗体産生を調節することを含む。
免疫細胞活性の調節は、インビトロまたは対象のいずれかにおいて、免疫応答を評価するための当該技術分野で確立された様々な方法によって評価することができ、これには、実施例に記載される方法が含まれるが、これらに限定されない。例えば、様々な実施形態では、調節は、サイトカイン産生及び／または抗体産生のレベルを測定することによって、例えば、標準ＥＬＩＳＡによって、及び／または当該技術分野において知られている標準的な方法によって細胞増殖を評価することによって評価される。
本開示のＬＮＰ組成物は、有効量で対象に投与される。一般に、有効量のＬＮＰ組成物は、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質の発現が阻害されるように、免疫細胞内でのＲＮＡ干渉剤の効率的な発現を可能にするであろう。効率のためのメトリックは、ポリペプチド翻訳（ポリペプチド発現によって示される）、ｍＲＮＡ分解レベル、及び免疫応答インジケータを含み得る。
治療方法
対象における免疫細胞活性を調節するための本開示の方法は、様々な臨床用途、予防用途または治療用途で使用され得る。一実施形態では、免疫細胞活性を調節することは、対象における免疫細胞活性を刺激することを含む。別の実施形態では、免疫細胞活性を調節することは、対象における免疫細胞活性を阻害することを含む。したがって、本開示は、対象における免疫応答を調節（例えば、刺激または阻害）する方法であって、対象において免疫応答が調節（例えば、刺激または阻害）されるように、本開示のＬＮＰ組成物を対象に投与することを含む、方法を提供する。
免疫応答の刺激
免疫応答を刺激する（例えば、増強する）ために、標的免疫細胞（複数可）及びＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質をノックダウンすることにより、以下のいずれかをもたらすように選択される：（ｉ）免疫応答の陽性調節因子（すなわち、上方調節因子）である免疫細胞の刺激により、免疫応答の陽性調節因子の細胞分化の増加、細胞増殖の増加、及び／または細胞エフェクター機能の増加などの効果（複数可）がもたらされ、それによって免疫応答を増強すること、または（ｉｉ）免疫応答の陰性調節因子（すなわち、下方調節因子）である免疫細胞の阻害により、免疫応答の陰性調節因子の細胞分化の減少、細胞増殖の減少、及び／または細胞エフェクター機能の減少などの効果（複数可）がもたらされ、それによって免疫応答を増強すること。
免疫応答を刺激するための一実施形態では、標的免疫細胞は、Ｔｒｅｇ細胞であり、ＲＮＡ干渉剤は、Ｆｏｘｐ３ ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。ｓｉＲＮＡによるＴｒｅｇ細胞内のＦｏｘｐ３のノックダウンは、Ｔｒｅｇ細胞分化の低下（実施例４を参照）及びＴｒｅｇ細胞抑制因子機能の低下（実施例５を参照）をもたらす。したがって、Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを細胞内に送達することによってＴｒｅｇ細胞活性を下方調節することにより、Ｔｒｅｇ細胞の負の調節機能が阻害され、それによって増強された免疫応答が可能になる。
一実施形態では、免疫応答を刺激する方法は、がんに罹患している対象（すなわち、腫瘍保有対象）とともに使用され、それによって、対象のがんに対する免疫応答を増強する。治療可能ながんの非限定的な例としては、副腎皮質癌、進行癌、肛門癌、再生不良性貧血、二本鎖癌、膀胱癌、骨癌、骨転移、脳腫瘍、脳癌、乳癌、小児癌、原発不明癌、キャッスルマン病、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、ユーイング腫瘍、眼癌、胆嚢癌、胃腸カルチノイド腫瘍、胃腸間質腫瘍、妊娠性絨毛疾患、ホジキン病、カポシ肉腫、腎細胞癌、喉頭及び下咽頭癌、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、骨髄異形成症候群（難治性貧血及び難治性細胞減少症を含む）、骨髄増殖性腫瘍または疾患（真性多血症、本態性血小板症及び原発性骨髄線維症を含む）、肝癌（例えば肝細胞癌）、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺カルチノイド腫瘍、皮膚リンパ腫、悪性中皮腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、口腔及び口腔咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、陰茎癌、下垂体腫瘍、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、成人軟部肉腫、基底細胞及び扁平細胞皮膚癌、黒色腫、小腸癌、胃癌、精巣癌、咽頭癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宮肉腫、膣癌、外陰部癌、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、ウィルムス腫瘍、ならびにがん治療によって引き起こされる二次癌が挙げられる。特定の実施形態では、がんは、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）または結腸直腸癌である。他の実施形態では、がんは、血液系癌または造血癌である。
別の実施形態では、免疫応答を刺激する方法は、感染症に罹患している対象とともに使用され、それによって、対象における感染症病原体に対する免疫応答を増強する。治療可能な感染症の非限定的な例には、ウイルス、細菌、菌類、酵母及び寄生性病原体によって引き起こされるものが含まれる。
さらに別の実施形態では、免疫応答を刺激する方法は、ワクチンを投与されているか、または投与された対象とともに使用され、それによって、ワクチン抗原（複数可）に対する免疫応答を増強する。本発明のＬＮＰ組成物は、対象へのワクチン投与の前に、ワクチン投与と同時に、またはワクチン投与の後に投与することができる。
したがって、一態様では、本開示は、免疫応答の刺激をそれを必要とする対象において行う方法であって、本開示の組成物（またはその脂質ナノ粒子、またはその薬学的組成物）を対象に投与することを含む、方法に関する。本方法は、１つ以上の追加の免疫刺激剤（これらの非限定的な例には、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、抗ＰＤ－１、抗ＰＤ－Ｌ１、抗ＰＤ－Ｌ２、及び／または抗ＣＴＬＡ－４が含まれる）などの１つ以上の追加の薬剤を対象に投与することをさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ、または薬学的組成物は、患者に非経口的に投与される。特定の実施形態では、対象は、哺乳類、例えば、ヒトである。様々な実施形態では、対象は、有効量のＬＮＰ組成物を提供される。
免疫応答の阻害
免疫応答を阻害する（例えば、減少させる）ために、標的免疫細胞（複数可）及びＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡによってコードされるタンパク質をノックダウンすることにより、以下のいずれかをもたらすように選択される：（ｉ）免疫応答の陽性調節因子（すなわち、上方調節因子）である免疫細胞の阻害により、免疫応答の陽性調節因子の細胞分化の低下、細胞増殖の低下、及び／または細胞エフェクター機能の低下などの効果（複数可）がもたらされ、それによって免疫応答を阻害すること、または（ｉｉ）免疫応答の陰性調節因子（すなわち、下方調節因子）である免疫細胞の刺激により、免疫応答の陰性調節因子の細胞分化の増加、細胞増殖の増加、及び／または細胞エフェクター機能の増加などの効果（複数可）がもたらされ、それによって免疫応答を阻害すること。
免疫応答を阻害するための一実施形態では、標的免疫細胞はＴｈ１７細胞であり、ＲＮＡ干渉剤はＲＯＲ ｍＲＮＡ（例えば、ＲＯＲｃ、ＲＯＲγｔ及び／またはＲＯＲα）を標的とするｓｉＲＮＡである。免疫応答を阻害するための別の実施形態では、標的免疫細胞はＴｈ１７細胞であり、ＲＮＡ干渉剤はＩＬ－１７ａ ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである。ｓｉＲＮＡによるＴｈ１７細胞内のＲＯＲ及び／またはＩＬ－１７ａのノックダウンは、Ｔｈ１７細胞によるサイトカイン産生（例えば、ＩＬ－１７産生）の減少をもたらし（実施例６を参照）、それによってそれらの機能活性を阻害する。したがって、ＲＯＲ及び／またはＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡの細胞内への送達によってＴｈ１７細胞活性を下方調節することによって、Ｔｈ１７細胞の正の調節機能が阻害され、それによって免疫応答の阻害が可能になる。
一実施形態では、免疫応答を阻害する方法は、自己免疫疾患、アレルギー性障害、または炎症応答を患っている対象を含む、異常な免疫活性を有する対象とともに使用される。別の実施形態では、対象は、自己免疫障害を有する疑いがある。別の実施形態では、対象は、自己免疫障害を発症するリスクがある。本開示の方法に従って治療され得る自己免疫疾患の非限定的な例には、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）、１型糖尿病、多発性硬化症、乾癬、グレイブス病、橋本甲状腺炎、慢性炎症性脱髄性多発神経炎、ギラン・バレー症候群、重症筋無力症、糸球体腎炎及び血管炎が含まれる。
さらに、免疫応答を阻害する方法は、臓器移植レシピエントにおける移植拒絶を阻害し、例えば骨髄移植レシピエントにおける移植片対宿主病を阻害するために使用され得る。さらに、本方法を使用して、免疫療法レジメンにおける免疫細胞活性を下方調節し、それによって、治療目的のために刺激される免疫活性化の程度の制御を提供することができる。特に、免疫療法レジメンが、免疫応答の過剰刺激及びそれによる有害な副作用をもたらす状況では、本開示の免疫抑制方法を使用して、免疫療法レジメンによって提供される免疫刺激の程度を「抑制する（ｔａｍｐ ｄｏｗｎ）」ことにより、それによる有害な副作用を軽減することができる。本発明の方法に従って調節され得る臨床免疫療法レジメンの非限定的な例としては、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１を標的とする薬剤）による治療及びＣＡＲ－Ｔ細胞による治療（養子Ｔ細胞移行免疫療法）が挙げられる。
したがって、一態様では、本開示は、免疫応答の阻害を、それを必要とする対象において行う方法に関し、本方法は、本開示の組成物（またはその脂質ナノ粒子、またはその薬学的組成物）を対象に投与することを含む。本方法は、１つ以上の追加の免疫阻害剤または免疫抑制剤などの１つ以上の追加の薬剤を対象に投与することをさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ、または薬学的組成物は、患者に非経口的に投与される。特定の実施形態では、対象は、哺乳動物、例えば、ヒトである。様々な実施形態では、対象は、有効量のＬＮＰ組成物を提供される。
治療レジメン
本開示の１つ以上のＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）を含む薬学的組成物は、任意の好適な経路によって対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、非経口（例えば、皮下、皮内、静脈内、腹腔内、筋肉内、関節内、動脈内、関節滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、病巣内、もしくは頭蓋内注射、及び任意の好適な注入技術）、経口、経皮または皮内、皮間、直腸、膣内、局所（例えば、粉末、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、及び／またはドロップによる）、粘膜、鼻、頬、経腸、硝子体、腫瘍内、舌下、鼻腔内；気管内注入、気管支注入、及び／または吸入による；経口スプレー及び／または粉末、鼻スプレー、及び／またはエアロゾルとして、及び／または門脈カテーテルを介してなどの、様々な経路のうちの１つ以上によって投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、静脈内、筋肉内、皮内、動脈内、腫瘍内、皮下、または吸入によって投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、筋肉内投与される。しかしながら、本開示は、薬物送達の科学における可能性のある進歩を考慮した任意の適切な経路による本開示の組成物の送達を包含する。一般に、最も適切な投与経路は、１つ以上のｍＲＮＡを含む薬学的組成物の性質（例えば、血流及び胃腸管などの様々な身体環境におけるその安定性）、ならびに患者の状態（例えば、患者が特定の投与経路に耐えることができるかどうか）を含む様々な要因に依存するであろう。
ある特定の実施形態では、本開示の組成物は、所与の用量において、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇを送達するのに十分な投薬量レベルで投与されてもよく、１ｍｇ／ｋｇの用量が、対象の体重１ｋｇ当たり１ｍｇのＲＮＡ干渉剤またはナノ粒子を提供する。特定の実施形態では、本開示のＲＮＡ干渉剤またはナノ粒子を約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの用量で投与してもよい。
いくつかの実施形態では、治療組成物中のＲＮＡ干渉剤の投薬量は、用量当たり、１～５μｇ、５～１０μｇ、１０～１５μｇ、１５～２０μｇ、１０～２５μｇ、２０～２５μｇ、２０～５０μｇ、３０～５０μｇ、４０～５０μｇ、４０～６０μｇ、６０～８０μｇ、６０～１００μｇ、５０～１００μｇ、８０～１２０μｇ、４０～１２０μｇ、４０～１５０μｇ、５０～１５０μｇ、５０～２００μｇ、８０～２００μｇ、１００～２００μｇ、１００～３００μｇ、１２０～２５０μｇ、１５０～２５０μｇ、１８０～２８０μｇ、２００～３００μｇ、３０～３００μｇ、５０～３００μｇ、８０～３００μｇ、１００～３００μｇ、４０～３００μｇ、５０～３５０μｇ、１００～３５０μｇ、２００～３５０μｇ、３００～３５０μｇ、３２０～４００μｇ、４０～３８０μｇ、４０～１００μｇ、１００～４００μｇ、２００～４００μｇ、または３００～４００μｇである。いくつかの実施形態では、免疫調節治療組成物は、皮内または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、免疫調節治療組成物は、０日目に対象に投与される。いくつかの実施形態では、第２の用量の免疫調節治療組成物は、７日目、または１４日目もしくは２１日目に対象に投与される。
いくつかの実施形態では、２５マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、１０マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、３０マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、１００マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、５０マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、７５マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、１５０マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、４００マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、３００マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。いくつかの実施形態では、２００マイクログラムのＲＮＡ干渉剤の投薬量は、対象に投与される免疫調節治療組成物に含まれる。他の実施形態では、免疫調節治療組成物は化学修飾されており、他の実施形態では、免疫調節治療組成物は化学修飾されていない。
いくつかの実施形態では、有効量は、１～１００μｇの総用量である。いくつかの実施形態では、有効量は、１００μｇの総用量である。いくつかの実施形態では、有効量は、対象に合計１回または２回投与される２５μｇの用量である。いくつかの実施形態では、有効量は、対象に合計２回投与される１００μｇの用量である。いくつかの実施形態では、有効量は、１μｇ～１０μｇ、１μｇ～２０μｇ、１μｇ～３０μｇ、５μｇ～１０μｇ、５μｇ～２０μｇ、５μｇ～３０μｇ、５μｇ～４０μｇ、５μｇ～５０μｇ、１０μｇ～１５μｇ、１０μｇ～２０μｇ、１０μｇ～２５μｇ、１０μｇ～３０μｇ、１０μｇ～４０μｇ、１０μｇ～５０μｇ、１０μｇ～６０μｇ、１５μｇ～２０μｇ、１５μｇ～２５μｇ、１５μｇ～３０μｇ、１５μｇ～４０μｇ、１５μｇ～５０μｇ、２０μｇ～２５μｇ、２０μｇ～３０μｇ、２０μｇ～４０μｇ ２０μｇ～５０μｇ、２０μｇ～６０μｇ、２０μｇ～７０μｇ、２０μｇ～７５μｇ、３０μｇ～３５μｇ、３０μｇ～４０μｇ、３０μｇ～４５μｇ ３０μｇ～５０μｇ、３０μｇ～６０μｇ、３０μｇ～７０μｇ、３０μｇ～７５μｇの用量であり、これは、対象に合計１回または２回以上投与され得る。
用量は、所望のレベルのＲＮＡ干渉剤（例えば、ｓｉＲＮＡ）発現及び／または効果（例えば、治療効果）を得るために、同じまたは異なる量で、１日に１回以上投与され得る。所望の投薬量は、例えば、１日３回、１日２回、１日１回、隔日、３日毎、毎週、２週間毎、３週間毎、または４週間毎に送達され得る。ある特定の実施形態では、所望の投薬量は、複数の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４回、またはそれ以上の投与）を使用して送達され得る。例えば、ある特定の実施形態において、本開示の組成物は、少なくとも２回投与され、第２の用量は、第１の用量が投与された後少なくとも１日、または少なくとも３日、または少なくとも７日、または少なくとも１０日、または少なくとも１４日、または少なくとも２１日、または少なくとも２８日、または少なくとも３５日、または少なくとも４２日、または少なくとも４８日後に投与される。ある特定の実施形態では、第１及び第２の用量は、それぞれ０日目及び２日目、またはそれぞれ０日目及び７日目、またはそれぞれ０日目及び１４日目、またはそれぞれ０日目及び２１日目、またはそれぞれ０日目及び４８日目に投与される。追加の用量（すなわち、第３の用量、第４の用量等）は、最初の２つの用量が投与されたのと同じまたは異なるスケジュールで投与することができる。例えば、いくつかの実施形態では、第１及び第２の用量は、７日間空けて投与され、次いで１つ以上の追加用量は、その後毎週投与される。別の実施形態では、第１及び第２の用量は７日間空けて投与され、次いで１つ以上の追加用量は、その後２週間毎に投与される。
いくつかの実施形態では、単回用量は、例えば、外科的処置の前または後、または急性疾患、障害、もしくは状態の場合に投与されてもよい。任意の特定の患者に対する特定の治療的有効、予防的有効、またはその他の適切な用量レベルは、治療されている障害の重症度及び識別（もしあれば）、使用される１つ以上のＲＮＡ干渉剤、使用される特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的な健康、性別、及び食事、使用される特定の薬学的組成物の投与時間、投与経路、及び排泄速度、治療期間、使用される特定の薬学的組成物と組み合わせてまたは一致して使用される薬物、ならびに医学分野で周知の同様の因子を含む様々な要因に依存するであろう。
いくつかの実施形態では、本開示の薬学的組成物は、別の薬剤、例えば、別の治療剤、予防剤、及び／または診断剤と組み合わせて投与されてもよい。「と組み合わせる」とは、これらの送達方法は本開示の範囲内であるが、薬剤が同時に投与されなければならないこと、及び／または送達のために一緒に配合されなければならないことを暗示することは意図されない。例えば、１つ以上の異なるｍＲＮＡを含む１つ以上の組成物は、組み合わせて投与され得る。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療処置と同時に、その前に、またはその後に投与され得る。概して、各薬剤は、その薬剤について決定された用量及び／または時間スケジュールで投与される。いくつかの実施形態では、本開示は、それらのバイオアベイラビリティを改善し、それらの代謝を低減及び／または修飾し、それらの排泄を阻害し、及び／またはそれらの体内での分布を修飾する薬剤と組み合わせた、本開示の組成物、またはそれらのイメージング、診断、もしくは予防組成物の送達を包含する。
併用レジメンで使用する療法（治療薬または手順）の特定の組み合わせは、所望の治療薬及び／または手順と、達成される所望の治療効果との適合性を考慮に入れるであろう。また、使用される療法は、同じ障害に対して所望の効果を達成し得る（例えば、がんを治療するのに有用な組成物は、化学療法剤と同時に投与され得る）、またはそれらは、異なる効果（例えば、任意の有害な効果の制御）を達成し得ることも理解されるであろう。
前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示は、脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体、または薬学的組成物を含む容器と、個体における免疫応答を調節するための脂質ナノ粒子または薬学的組成物の投与に関する説明書を含む添付文書と、を含む、キットを提供する。
前述または関連する態様のうちのいずれかにおいて、本開示は、脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体、または薬学的組成物を含む薬剤と、個体における免疫応答を調節するための薬剤の投与に関する説明書を含む添付文書と、を含む、キットを提供する。
定義
「自己免疫障害」は、本明細書で使用する場合、白血球（例えば、Ｂ細胞、Ｔ細胞、マクロファージ、単球、または樹状細胞）の作用を介して、１つ以上の内因性抗原、すなわち１つ以上の自己抗原に対する病理学的免疫応答（例えば、病理学的な持続時間及び／または大きさ）が、１つ以上の自己抗原を有する細胞への直接攻撃、免疫複合体形成、または局所炎症から生じ得る結果として生じる組織損傷とともに生じる疾患状態を指す。自己免疫疾患は、自己抗原に対する免疫系活性化による炎症の増加を特徴とする。
「同種移植片」、「ホモグラフト」、及び「同種異系移植片」という用語は、死体、生体関連、及び生体非関連ドナーからの移植を含む、異なる遺伝子型を有する同種のある個体から別の個体への臓器または組織の移植を指す。ある個体から同じ個体に移植された移植片は、「自己移植片」または「自家移植片」と称される。２つの遺伝的に同一のまたは同系の個体間で移植された移植片は、「同系移植片」と称される。異なる種の個体間に移植された移植片は、「異種移植片」または「ゼノグラフト」と称される。
本明細書で使用する場合、「免疫応答」またはその同等の「免疫学的応答」という語句は、自己抗原または自己抗原の関連エピトープに対して指向される細胞（抗原特異的Ｔ細胞またはその分泌産物によって媒介される）の発達を指す。細胞免疫応答は、クラスＩまたはクラスＩＩ ＭＨＣ分子と会合したポリペプチドエピトープの提示によって誘発され、抗原特異的ＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞及び／またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を活性化する。応答はまた、他の成分の活性化を伴ってもよい。
本明細書で使用する場合、「免疫細胞」という用語は、リンパ球、例えば、Ｂ細胞及びＴ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、骨髄細胞、例えば、単球、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、好塩基球、及び顆粒球を含む、免疫応答において役割を果たす細胞を指す。
「免疫応答」は、脊椎動物内での外来因子に対する生物学的応答を指し、この応答は、これらの因子及びそれらによって引き起こされる疾患から生物を保護する。免疫応答は、免疫系の細胞（例えば、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、樹状細胞もしくは好中球）及びこれらの細胞もしくは肝臓（抗体、サイトカイン、及び補体を含む）のいずれかによって産生される可溶性巨大分子の作用によって媒介され、脊椎動物身体の侵入病原体、病原体に感染した細胞もしくは組織、がん性もしくは他の異常細胞、または自己免疫もしくは病理学的炎症の場合、正常なヒト細胞もしくは組織の選択的標的化、それへの結合、それに対する損傷、その破壊、及び／またはそれからの除去をもたらす。免疫反応には、例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ４＋もしくはＣＤ８＋Ｔ細胞などのエフェクターＴ細胞もしくはＴｈ細胞の活性化もしくは阻害、またはＴｒｅｇ細胞の阻害が含まれる。
「免疫療法」は、免疫応答を誘導、増強、抑制、または他の方法で修飾することを含む方法による、疾患に罹患しているか、または疾患の罹患もしくは再発のリスクがある対象の治療を指す。
「自己免疫障害を発症するリスクがある」ヒトは、自己免疫障害の家族歴（例えば、１つ以上の炎症性疾患に対する遺伝的素因）を有するヒト、または１つ以上の自己免疫障害／自己抗体誘発状態に曝露されるヒトを指す。例えば、志賀毒素に曝露されたヒトは、典型的なＨＵＳを発症するリスクがある。ある特定のがん（例えば、多発性骨髄腫または慢性リンパ性白血病などの液体腫瘍）を有するヒトは、患者をある特定の自己免疫性溶血性疾患を発症しやすくさせる可能性がある。例えば、ＰＣＨが、様々な感染症（例えば、梅毒）または非ホジキンリンパ腫などの腫瘍の後に発症する可能性がある。別の例では、ＣＡＤを、ＨＩＶ感染、マイコプラズマ肺炎感染症、非ホジキンリンパ腫、またはワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症と関連付けることができる。さらに別の例では、自己免疫性溶血性貧血は、ヒト慢性リンパ性白血病の周知の合併症であり、進行性疾患を有するＣＬＬ患者の約１１％がＡＩＨＡを発症する。３０％ものＣＬＬがＡＩＨＡを発症するリスクがある可能性がある。例えば、Ｄｉｅｈｌ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５（１）：８０－９７及びＧｕｐｔａ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｌｅｕｋｅｍｉａ １６（１０）：２０９２－２０９５を参照されたい。
「自己免疫障害を有する疑いがある」ヒトは、自己免疫障害の１つ以上の症状を呈するヒトである。自己免疫障害の症状は、特定の自己免疫障害によって重症度及び種類が異なり得、発赤、腫れ（例えば、腫れた関節）、触ると温かい関節、関節痛、硬直、関節機能喪失、発熱、悪寒、疲労、エネルギー喪失、疼痛、発熱、蒼白、黄疸、蕁麻疹・皮疹（ｕｒｔｉｃａｒｉａｌ ｄｅｒｍａｌ ｅｒｕｐｔｉｏｎ）、ヘモグロビン尿症、ヘモグロビン血症、及び貧血（例えば、重度の貧血）、頭痛、食欲不振、筋肉硬直、不眠、痒み、鼻詰まり、くしゃみ、咳、めまい、発作、または疼痛などの１つ以上の神経症状を含み得るが、これらに限定されない。以上から、すべてのヒトが「自己免疫障害を有する疑いがある」わけではないことが明らかになる。
投与すること：本明細書で使用する場合、「投与すること」は、組成物を対象または患者に送達する方法を指す。投与方法は、身体の特定の領域または系への送達を標的とする（例えば、特異的に送達する）ように選択され得る。例えば、投与は、非経口（例えば、皮下、皮内、静脈内、腹腔内、筋肉内、関節内、動脈内、関節滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、病巣内、もしくは頭蓋内注射、及び任意の好適な注入技術）、経口、経皮または皮内、皮間、直腸、膣内、局所（例えば、粉末、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、及び／またはドロップによる）、粘膜、鼻、頬、経腸、硝子体、腫瘍内、舌下、鼻腔内；気管内注入、気管支注入、及び／または吸入による；経口スプレー及び／または粉末、鼻スプレー、及び／またはエアロゾルとして、及び／または門脈カテーテルを介するものであってもよい。
およそ、約：本明細書で使用する場合、「およそ」または「約」という用語は、１つ以上の対象の値に適用されるとき、記載される基準値に類似する値を指す。ある特定の実施形態では、「およそ」または「約」という用語は、別段の記載がない限り、または文脈から明らかでない限り（そのような数値が可能な値の１００％を超える場合を除く）、記載された参照値のいずれかの方向（よりも大きいか、よりも小さい）で２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれ以下に収まる値の範囲を指す。例えば、ＬＮＰの脂質成分中の所与の化合物の量の文脈で使用されるとき、「約」は、列挙された値の＋／－５％を意味し得る。例えば、所与の化合物の約４０％を有する脂質成分を含むＬＮＰは、化合物の３０～５０％を含み得る。別の実施例では、少なくとも約１５％のＴ細胞への送達は、１０～２０％のＴ細胞への送達を含み得る。
がん：本明細書で使用する場合、「がん」は、異常及び／または調節されていない細胞増殖、例えば、Ｇ１進行の調節解除された制御を有する細胞を伴う状態である。例示的な非限定的ながんとしては、副腎皮質癌、進行癌、肛門癌、再生不良性貧血、二本鎖癌、膀胱癌、骨癌、骨転移、脳腫瘍、脳癌、乳癌、小児癌、原発不明癌、キャッスルマン病、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、ユーイング腫瘍、眼癌、胆嚢癌、胃腸カルチノイド腫瘍、胃腸間質腫瘍、妊娠性絨毛疾患、ホジキン病、カポシ肉腫、腎細胞癌、喉頭及び下咽頭癌、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、骨髄異形成症候群（難治性貧血及び難治性細胞減少症を含む）、骨髄増殖性腫瘍または疾患（真性多血症、本態性血小板症及び原発性骨髄線維症を含む）、肝癌（例えば肝細胞癌）、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺カルチノイド腫瘍、皮膚リンパ腫、悪性中皮腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、口腔及び口腔咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、陰茎癌、下垂体腫瘍、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、成人軟部肉腫、基底細胞及び扁平細胞皮膚癌、黒色腫、小腸癌、胃癌、精巣癌、咽頭癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宮肉腫、膣癌、外陰部癌、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、ウィルムス腫瘍、ならびにがん治療によって引き起こされる二次癌が挙げられる。特定の実施形態では、がんは、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）または結腸直腸癌である。他の実施形態では、がんは、血液系癌または造血癌である。
接触させること：本明細書で使用する場合、「接触させること」という用語は、２つ以上の実体間の物理的接続を確立することを意味する。例えば、細胞を脂質ナノ粒子組成物と接触させることは、細胞及び脂質ナノ粒子に物理的接続を共有させることを意味する。細胞を、インビボ、インビトロ、及びエクスビボのいずれの外部実体と接触させる方法は、生物学分野において周知である。本開示の例示的な実施形態では、哺乳類細胞を組成物（例えば、本開示のナノ粒子、または薬学的組成物）と接触させるステップは、インビボで行われる。例えば、脂質ナノ粒子組成物と、生物（例えば、哺乳類）内に配置され得る細胞（例えば、哺乳類細胞）との接触は、任意の好適な投与経路（例えば、静脈内、筋肉内、皮内、及び皮下投与を含む、生物への非経口投与）によって行われ得る。インビトロに存在する細胞の場合、組成物（例えば、脂質ナノ粒子）及び細胞は、例えば、組成物を細胞の培養培地に添加することによって接触され得、トランスフェクションを伴うか、またはトランスフェクションをもたらし得る。さらに、２つ以上の細胞を、ナノ粒子組成物と接触させてもよい。
送達すること：本明細書で使用する場合、「送達すること」という用語は、実体を目的地に提供することを意味する。例えば、治療剤及び／または予防剤を対象に送達することは、治療剤及び／または予防剤を含むＬＮＰを対象に（例えば、静脈内、筋肉内、皮内、または皮下経路によって）投与することを含み得る。哺乳類または哺乳類細胞へのＬＮＰの投与は、１つ以上の細胞を脂質ナノ粒子と接触させることを含み得る。
封入する：本明細書で使用する場合、「封入する」という用語は、密封する（ｅｎｃｌｏｓｅ）、包囲する（ｓｕｒｒｏｕｎｄ）、または包む（ｅｎｃａｓｅ）ことを意味する。いくつかの実施形態では、化合物、ポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ）、または他の組成物は、完全に封入され、部分的に封入され、または実質的に封入され得る。例えば、いくつかの実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡは、脂質ナノ粒子、例えば、リポソームに封入され得る。
封入効率：本明細書で使用する場合、「封入効率」は、ＬＮＰの調製に使用される治療剤及び／または予防剤の初期総量に対する、ＬＮＰの一部となる治療剤及び／または予防剤の量を指す。例えば、組成物に最初に提供される合計１００ｍｇの治療剤及び／または予防剤のうち、９７ｍｇの治療剤及び／または予防剤がＬＮＰに封入される場合、封入効率は９７％となり得る。本明細書で使用する場合、「封入」は、完全な、実質的な、または部分的な密閉、閉じ込め、包囲、または包装（ｅｎｃａｓｅｍｅｎｔ）を指し得る。
増強された送達：本明細書で使用する場合、「増強された送達」という用語は、対照ナノ粒子による核酸（例えば、治療用及び／または予防用ｍＲＮＡ）の目的の標的細胞（例えば、免疫細胞）への送達レベルと比較して、ナノ粒子による核酸（例えば、治療用及び／または予防用ｍＲＮＡ）の目的の標的細胞（例えば、免疫細胞）への送達がより多い（例えば、少なくとも１０％多い、少なくとも２０％多い、少なくとも３０％多い、少なくとも４０％多い、少なくとも５０％多い、少なくとも１．５倍多い、少なくとも２倍多い、少なくとも３倍多い、少なくとも４倍多い、少なくとも５倍多い、少なくとも６倍多い、少なくとも７倍多い、少なくとも８倍多い、少なくとも９倍多い、少なくとも１０倍多い）ことを意味する。例えば、本開示の免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰによる「増強された送達」は、免疫細胞送達強化脂質を欠く同じＬＮＰと比較することによって評価され得る。免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの特定の細胞（例えば、免疫細胞）への送達レベルは、フィトステロール含有ＬＮＰを使用して標的細胞内で産生されるタンパク質の量を、免疫細胞送達強化脂質を欠く同じＬＮＰと比較すること（例えば、フローサイトメトリーを使用して平均蛍光強度によって）、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰを使用してトランスフェクトされる標的細胞の％を、免疫細胞送達強化脂質を欠く同じＬＮＰと比較すること（例えば、定量的フローサイトメトリーによって）、または免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰを使用して標的細胞内の治療及び／または予防の量をインビボで、免疫細胞送達強化脂質を欠く同じＬＮＰと比較することによって測定され得る。ナノ粒子の標的細胞への増強された送達は、処置される対象において決定される必要はなく、動物モデル（例えば、マウスまたは非ヒト霊長類モデル）などの代理において決定され得ることが理解されるであろう。例えば、免疫細胞への増強された送達を決定するために、マウスまたはＮＨＰモデルを使用することができ、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰによる目的のタンパク質をコードするｍＲＮＡの送達は、免疫細胞（例えば、脾臓、末梢血、及び／または骨髄からのもの）において、免疫細胞送達強化脂質を欠く同じＬＮＰと比較して評価することができる（例えば、フローサイトメトリー、蛍光顕微鏡など）。
有効量：本明細書で使用する場合、薬剤の「有効量」という用語は、有益または所望の結果、例えば、臨床結果をもたらすのに十分な量であり、したがって、「有効量」は、それが適用される状況に依存する。例えば、本開示の脂質組成物（例えばＬＮＰ）中の免疫細胞送達強化脂質の量の観点から、免疫細胞送達強化脂質の有効量は、免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質組成物（例えばＬＮＰ）と比較して、有益または所望の結果をもたらすのに十分な量である。脂質組成物（例えばＬＮＰ）によってもたらされる有益または所望の結果の非限定的な例としては、トランスフェクトされた細胞のパーセンテージを増加させること、及び／または脂質組成物（例えばＬＮＰ）と会合された／封入された核酸によってコードされるタンパク質の発現レベルを増加させることが挙げられる。有効量の脂質ナノ粒子が対象の免疫細胞に取り込まれるように、免疫細胞送達強化脂質含有脂質ナノ粒子を投与するという観点から、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの有効量は、免疫細胞送達強化脂質を欠くＬＮＰと比較して、有益または所望の結果をもたらすのに十分な量である。対象における有益または所望の結果の非限定的な例としては、免疫細胞送達強化脂質を欠くＬＮＰと比較して、トランスフェクトされた細胞のパーセンテージを増加させること、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰと会合された／によって封入された核酸によってコードされるタンパク質の発現レベルを増加させること、及び／または免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰと会合された／によって封入された核酸もしくはそのコードされたタンパク質のインビボにおける予防または治療効果を増加させることが挙げられる。いくつかの実施形態では、治療有効量の免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰは、感染、疾患、障害、及び／または状態に罹患しているかまたはそれに罹患しやすい対象に投与されるとき、感染、疾患、障害、及び／または状態の症状を治療する、改善する、それらを診断する、予防する、及び／またはその発症を遅延させるのに十分である。別の実施形態では、有効量の脂質ナノ粒子は、免疫細胞の少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％以上における所望のタンパク質の発現をもたらすのに十分である。例えば、免疫細胞送達強化脂質含有ＬＮＰの有効量は、単回静脈内注射後に、少なくとも５％、１０％、もしくは１５％の脾Ｔ細胞、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、もしくは２５％の脾Ｂ細胞、及び／または少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、もしくは４０％の脾樹状細胞のトランスフェクションをもたらす量であり得る。
発現：本明細書で使用する場合、核酸配列の「発現」は、以下の事象のうちの１つ以上を指す：（１）ＤＮＡ配列からのＲＮＡ鋳型の生成（例えば、転写による）、（２）ＲＮＡ転写物の処理（例えば、スプライシング、編集、５’ｃａｐ形成、及び／または３’末端処理による）、（３）ＲＮＡのポリペプチドまたはタンパク質への翻訳；ならびに（４）ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
エクスビボ：本明細書で使用する場合、「エクスビボ」という用語は、生物（例えば、動物、植物、または微生物もしくはその細胞もしくは組織）の外で生じる事象を指す。エクスビボ事象は、天然（例えば、インビボ）環境から最小限に変更された環境で生じ得る。
断片：「断片」は、本明細書で使用する場合、一部分を指す。例えば、タンパク質の断片は、培養細胞から単離された完全長タンパク質を消化することによって得られるか、または組換えＤＮＡ技術によって得られるポリペプチドを含み得る。タンパク質の断片は、例えば、タンパク質の断片がタンパク質の機能活性を保持するように、１つ以上の機能ドメインを含むタンパク質の一部分であり得る。
単離された：本明細書で使用する場合、「単離された」という用語は、それが会合された成分の少なくともいくつかから分離された物質または実体を指す（自然または実験環境において）。単離された物質は、それらが会合されている物質に関連して、様々なレベルの純度を有し得る。単離された物質及び／または実体は、それらが最初に会合された他の成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、またはそれ以上から分離され得る。いくつかの実施形態では、単離された薬剤は、約８０％超、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超純粋である。本明細書で使用する場合、物質は、他の成分を実質的に含まない場合、「純粋」である。
リポソーム：本明細書で使用する場合、「リポソーム」とは、水性内部を囲む脂質含有膜を含む構造を意味する。リポソームは、１つ以上の脂質膜を有し得る。リポソームとしては、単層（ｓｉｎｇｌｅ－ｌａｙｅｒｅｄ）リポソーム（当該技術分野において単層（ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ）リポソームとしても知られている）及び多層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒｅｄ）リポソーム（当該技術分野において多重層（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ）リポソームとしても知られている）が挙げられる。
転移：本明細書で使用する場合、「転移」という用語は、がんが体内において初めて原発性腫瘍として生じた場所から遠位位置に広がるプロセスを意味する。このプロセスの結果として生じた二次性腫瘍は、「転移」と称され得る。
修飾された：本明細書で使用する場合、「修飾された」または「修飾」は、ポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ）の状態の変化または組成もしくは構造の変化を指す。ポリヌクレオチドは、化学的、構造的、及び／または機能的を含む様々な方法で修飾され得る。例えば、ポリヌクレオチドは、１つ以上のＲＮＡ要素の組み込みによって構造的に修飾され得、ＲＮＡ要素は、１つ以上の機能（例えば、翻訳調節活性）を提供する配列及び／またはＲＮＡ二次構造（複数可）を含む。したがって、本開示のポリヌクレオチドは、１つ以上の修飾で構成され得る（例えば、１つ以上の化学的、構造的、または機能的修飾（それらの任意の組み合わせを含む）を含み得る）。
ｍＲＮＡ本明細書で使用する場合、「ｍＲＮＡ」は、メッセンジャーリボ核酸を指す。ｍＲＮＡは、天然型であっても非天然型であってもよい。例えば、ｍＲＮＡは、１つ以上の核酸塩基、ヌクレオシド、ヌクレオチド、またはリンカーなどの修飾及び／または非天然に存在する成分を含み得る。ｍＲＮＡは、キャップ構造、鎖終結ヌクレオシド、ステムループ、ポリＡ配列、及び／またはポリアデニル化シグナルを含み得る。ｍＲＮＡは、ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有し得る。ｍＲＮＡの翻訳、例えば、哺乳類細胞内のｍＲＮＡのインビボ翻訳は、ポリペプチドを生成し得る。従来、ｍＲＮＡ分子の塩基性成分は、少なくともコード領域、５’非翻訳領域（５’－ＵＴＲ）、３’ＵＴＲ、５’キャップ、及びポリＡ配列を含む。
ナノ粒子：本明細書で使用する場合、「ナノ粒子」は、約１０００ｎｍ未満のスケールで任意の１つの構造的特徴を有し、同じ材料のバルクサンプルと比較して新規な特性を示す粒子を指す。通常、ナノ粒子は、約５００ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、または約１００ｎｍのスケールで任意の１つの構造的特徴を有する。また、日常的に、ナノ粒子は、約５０ｎｍ～約５００ｎｍ、約５０ｎｍ～約２００ｎｍ、または約７０～約１２０ｍｎのスケールで任意の１つの構造的特徴を有する。例示的な実施形態では、ナノ粒子は、約１～１０００ｎｍ程度の１つ以上の寸法を有する粒子である。他の例示的な実施形態では、ナノ粒子は、約１０～５００ｎｍの程度の１つ以上の寸法を有する粒子である。他の例示的な実施形態では、ナノ粒子は、約５０～２００ｎｍの程度の１つ以上の寸法を有する粒子である。球状ナノ粒子は、例えば、約５０～１００または７０～１２０ナノメートルの直径を有するであろう。ナノ粒子は、その輸送及び特性の点で、単位として挙動することが最も多い。対応するバルク材料からナノ粒子を分化させる新規の特性は、典型的には、１０００ｎｍ未満のサイズスケールで、または約１００ｎｍのサイズで発達するが、ナノ粒子は、例えば、長円形、管状などである粒子について、より大きなサイズのものであり得ることに留意されたい。ほとんどの分子のサイズは上記の概略に収まるが、個々の分子は通常、ナノ粒子とは称されない。
核酸：本明細書で使用する場合、「核酸」という用語は、その最も広い意味で使用され、ヌクレオチドのポリマーを含む任意の化合物及び／または物質を包含する。これらのポリマーは、ポリヌクレオチドと称される場合が多い。本開示の例示的な核酸またはポリヌクレオチドには、リボ核酸（ＲＮＡ）、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、ＤＮＡ－ＲＮＡハイブリッド、ＲＮＡｉ誘導剤、ＲＮＡｉ剤、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、リボザイム、触媒ＤＮＡ、三重らせん形成を誘導するＲＮＡ、トレオース核酸（ＴＮＡ）、グリコール核酸（ＧＮＡ）、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（β－Ｄ－リボ構成を有するＬＮＡ、α－Ｌ－リボ構成を有するα－ＬＮＡを含むＬＮＡ（ＬＮＡのジアステレオマー）、２’－アミノ機能化を有する２’－アミノ－ＬＮＡ、及び２’－アミノ機能化を有する２’－アミノ－α－ＬＮＡ）またはそれらのハイブリッドが含まれるが、これらに限定されない。
核酸構造：本明細書で使用する場合、「核酸構造」という用語（「ポリヌクレオチド構造」と互換的に使用される）は、核酸（例えば、ｍＲＮＡ）を含む、連結したヌクレオチド、またはその誘導体もしくは類似体の原子、化学成分、元素、モチーフ、及び／または配列の配置または編成を指す。この用語はまた、核酸の二次元または三次元状態も指す。したがって、「ＲＮＡ構造」という用語は、ＲＮＡ分子（例えば、ｍＲＮＡ）を含む、連結されたヌクレオチド、またはその誘導体もしくは類似体の原子、化学成分、要素、モチーフ、及び／または配列の配置または編成を指し、及び／またはＲＮＡ分子の二次元及び／または三次元状態を指す。核酸構造は、組織複雑性の増加に基づいて、本明細書で「分子構造」、「一次構造」、「二次構造」、及び「三次構造」と称される４つの組織カテゴリーにさらに区分することができる。
核酸塩基：本明細書で使用する場合、「核酸塩基」（代替的に、「ヌクレオチド塩基」または「窒素塩基」）という用語は、核酸またはその一部分もしくはセグメントに改善された特性（例えば、結合親和性、ヌクレアーゼ耐性、化学的安定性）を付与する、天然に存在するプリン及びピリミジンの任意の誘導体または類似体を含む、核酸中に見出されるプリンまたはピリミジン複素環式化合物を指す。アデニン、シトシン、グアニン、チミン、及びウラシルは、主に天然核酸に見られる核酸塩基である。当該技術分野において知られている、及び／または本明細書に記載される他の天然、非天然、及び／または合成核酸塩基は、核酸に組み込まれ得る。
ヌクレオシド／ヌクレオチド：本明細書で使用する場合、「ヌクレオシド」という用語は、核酸塩基（例えば、プリンもしくはピリミジン）、またはその誘導体もしくは類似体（本明細書では「核酸塩基」としても称される）に共有結合した糖分子（例えば、ＲＮＡ中のリボースまたはＤＮＡ中のデオキシリボース）、またはその誘導体もしくは類似体を含有するが、ヌクレオシド間連結基（例えば、リン酸基）を欠く化合物を指す。本明細書で使用する場合、「ヌクレオチド」という用語は、核酸またはその一部分もしくはセグメントに改善された化学的及び／または機能的特性（例えば、結合親和性、ヌクレアーゼ耐性、化学的安定性）を付与する、ヌクレオシド間結合基（例えば、リン酸基）に共有結合されたヌクレオシド、またはその任意の誘導体、類似体もしくは修飾を指す。
オープンリーディングフレーム：本明細書で使用する場合、「ＯＲＦ」と略記される「オープンリーディングフレーム」という用語は、ポリペプチドをコードするｍＲＮＡ分子のセグメントまたは領域を指す。ＯＲＦは、重複しないフレーム内コドンの連続した伸長を含み、開始コドンから始まり、停止コドンで終わり、リボソームによって翻訳される。
患者：本明細書で使用する場合、「患者」は、治療を求め得るか、または必要とされ得るか、治療を必要とするか、治療を受けているか、治療を受ける対象、または特定の疾患もしくは状態について訓練された専門家によって治療されている対象を指す。特定の実施形態では、患者は、ヒト患者である。いくつかの実施形態では、患者は、がん（例えば、肝臓癌または結腸直腸癌）に罹患している患者である。
薬学的に許容される：「薬学的に許容される」という語句は、本明細書において、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに、合理的な利益／リスク比に見合った、ヒト及び動物の組織との接触に使用するのに好適な化合物、材料、組成物、及び／または投薬形態を指すために使用される。
薬学的に許容される賦形剤：「薬学的に許容される賦形剤」という語句は、本明細書で使用する場合、本明細書に記載される化合物以外の任意の成分（例えば、活性化合物を懸濁または溶解することができるビヒクル）を指し、患者において実質的に無毒であり、非炎症性である特性を有する。賦形剤としては、例えば、接着防止剤、酸化防止剤、結合剤、コーティング剤、圧縮助剤、崩壊剤、染料（着色剤）、軟化剤、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはコーティング剤、香味料、香料、流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）（流動促進剤（ｆｌｏｗ ｅｎｈａｎｃｅｒ））、潤滑剤、防腐剤、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味剤、及び水和水が挙げられ得る。例示的な賦形剤には、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微結晶セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファ化デンプン、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、シェラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（トウモロコシ）、ステアリン酸、スクロース、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、及びキシリトールが含まれるが、これらに限定されない。
薬学的に許容される塩：本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」は、既存の酸または塩基部分をその塩形態に変換することによって（例えば、遊離塩基基を適切な有機酸と反応させることによって）親化合物が修飾される、開示される化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の鉱物塩または有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホナート、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシルスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシ－エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸、吉草酸塩などが含まれる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに無毒アンモニウム、四級アンモニウム、及びアミンカチオン、例えば、限定されないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられる。本開示の薬学的に許容される塩は、例えば、非毒性の無機または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩を含む。本開示の薬学的に許容される塩は、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から、従来の化学方法によって合成され得る。一般に、かかる塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、水または有機溶媒、または２つの混合物中の化学量論量の適切な塩基または酸と反応させることによって調製することができ、一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水媒体が好ましい。好適な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００８，及びＢｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，１－１９（１９７７）（各々、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見出される。
ポリペプチド：本明細書で使用する場合、「ポリペプチド」または「目的のポリペプチド」という用語は、典型的には、天然に（例えば、単離または精製）または合成的に生成され得るペプチド結合によって接合されるアミノ酸残基のポリマーを指す。
開始前複合体（ＰＩＣ）：本明細書で使用する場合、「開始前複合体」（代替的に、「４３Ｓ開始前複合体」、「ＰＩＣ」と略記される）という用語は、４０Ｓリボソームサブユニット、真核生物開始因子（ｅＩＦ１、ｅＩＦ１Ａ、ｅＩＦ３、ｅＩＦ５）、及びｅＩＦ２－ＧＴＰ－Ｍｅｔ－ｔＲＮＡｉ Ｍｅｔ三元複合体を含むリボ核タンパク質複合体を指し、これは、ｍＲＮＡ分子の５’キャップに固有に結合することができ、結合後に、５’ＵＴＲのリボソーム走査を行うことができる。
ＲＮＡ：本明細書で使用する場合、「ＲＮＡ」は、天然または非天然であり得るリボ核酸を指す。例えば、ＲＮＡは、１つ以上の核酸塩基、ヌクレオシド、ヌクレオチド、またはリンカーなどの修飾及び／または非天然に存在する成分を含み得る。ＲＮＡは、キャップ構造、鎖終結ヌクレオシド、ステムループ、ポリＡ配列、及び／またはポリアデニル化シグナルを含み得る。ＲＮＡは、目的のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有し得る。例えば、ＲＮＡは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）であり得る。特定のポリペプチドをコードするｍＲＮＡの翻訳、例えば哺乳類細胞内のｍＲＮＡのインビボ翻訳は、コードされたポリペプチドを産生し得る。ＲＮＡは、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、非対称干渉ＲＮＡ（ａｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ダイサー基質ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、ｍＲＮＡ、長鎖非コードＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、及びそれらの混合物からなる非限定群から選択され得る。
ＲＮＡ要素：本明細書で使用する場合、「ＲＮＡ要素」という用語は、生物学的機能を提供する、及び／または生物学的活性（例えば、翻訳調節活性）を有するＲＮＡ分子の一部分、断片、またはセグメントを指す。本明細書に記載のものなどの１つ以上のＲＮＡ要素の組み込みによるポリヌクレオチドの修飾は、修飾ポリヌクレオチドに１つ以上の望ましい機能特性を提供する。本明細書に記載されるＲＮＡ要素は、天然に存在する、非天然に存在する、合成される、操作される、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。例えば、調節活性を提供する天然に存在するＲＮＡ要素には、ウイルス、原核生物及び真核生物（例えば、ヒト）のトランスクリプトーム全体に見出される要素が含まれる。特定の真核生物のｍＲＮＡ及び翻訳されたウイルスＲＮＡのＲＮＡ要素は、細胞内の多くの機能の媒介に関与することが示されている。例示的な天然ＲＮＡ要素としては、翻訳開始要素（例えば、内部リボソームエントリー部位（ＩＲＥＳ）、Ｋｉｅｆｔ ｅｔ ａｌ．，（２００１）ＲＮＡ７（２）：１９４－２０６を参照されたい）、翻訳エンハンサー要素（例えば、ＡＰＰ ｍＲＮＡ翻訳エンハンサー要素、Ｒｏｇｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７４（１０）：６４２１－６４３１を参照されたい）、ｍＲＮＡ安定性要素（例えば、ＡＵリッチ要素（ＡＲＥ）、Ｇａｒｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，（２００７）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ８（２）：１１３－１２６を参照されたい）、翻訳抑制要素（例えば、Ｂｌｕｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２００２）Ｍｅｃｈ Ｄｅｖ １１０（１－２）：９７－１１２を参照されたい）、タンパク質結合ＲＮＡ要素（例えば、鉄応答性要素、Ｓｅｌｅｚｎｅｖａ ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ４２５（１８）：３３０１－３３１０を参照されたい）、細胞質ポリアデニル化要素（Ｖｉｌｌａｌｂａ ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ ２１（４）：４５２－４５７）、及び触媒ＲＮＡ要素（例えば、リボザイム、Ｓｃｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １７８９（９－１０）：６３４－６４１を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。
滞留時間：本明細書で使用する場合、「滞留時間」という用語は、ｍＲＮＡ分子に沿った別個の位置または部位における開始前複合体（ＰＩＣ）またはリボソームの占有時間を指す。
特異的送達：本明細書で使用する場合、「特異的送達」、「特異的に送達する」、または「特異的に送達すること」という用語は、標的外細胞（例えば、非免疫細胞）と比較して、目的の標的細胞（例えば、哺乳動物免疫細胞）へのナノ粒子による治療剤及び／または予防剤のより多く（例えば、少なくとも１０％多い、少なくとも２０％多い、少なくとも３０％多い、少なくとも４０％多い、少なくとも５０％多い、少なくとも１．５倍多い、少なくとも２倍多い、少なくとも３倍多い、少なくとも４倍多い、少なくとも５倍多い、少なくとも６倍多い、少なくとも７倍多い、少なくとも８倍多い、少なくとも９倍多い、少なくとも１０倍多い）の送達を意味する。特定の細胞へのナノ粒子の送達レベルは、（例えば、フローサイトメトリーを使用した平均蛍光強度による）標的細胞内で産生されるタンパク質と非標的細胞との量の比較、（例えば、定量的フローサイトメトリーによる）タンパク質を発現する標的細胞と非標的細胞との％の比較、標的細胞対非標的細胞で産生されたタンパク質の量と、当該標的細胞対非標的細胞の総タンパク質の量との比較、または標的細胞対非標的細胞における治療剤及び／または予防剤の量と、当該標的細胞対非標的細胞における総治療剤及び／または予防剤の量との比較によって測定され得る。ナノ粒子が標的細胞に特異的に送達する能力は、処置される対象において決定される必要はなく、動物モデル（例えば、マウスまたはＮＨＰモデル）などの代理において決定され得ることが理解されるであろう。例えば、免疫細胞への特異的送達を決定するために、（例えば、実施例に記載されるような）マウスまたはＮＨＰモデルを使用することができ、対象となるタンパク質をコードするｍＲＮＡの送達は、免疫細胞（例えば、脾臓、末梢血、及び／または骨髄からのもの）において、標準的な方法（例えば、フローサイトメトリー、蛍光顕微鏡法等）によって非免疫細胞と比較して評価することができる。
対象：本明細書で使用する場合、「対象」という用語は、例えば、実験的、診断的、予防的、及び／または治療的目的のために、本開示による組成物が投与され得る任意の生物を指す。典型的な対象としては、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒトなどの哺乳類）及び／または植物が挙げられる。いくつかの実施形態では、対象は、患者であってもよい。
実質的に：本明細書で使用する場合、「実質的に」という用語は、対象となる特徴または特性のすべてのまたはほぼすべての範囲または程度を示す定性的条件を指す。当業者であれば、生物学的現象及び化学的現象が、完全に進行する、及び／または完全に進む、あるいは絶対的な結果を達成もしくは回避することは、たとえあったとしても稀であることを理解するであろう。したがって、「実質的に」という用語は、多くの生物学的及び化学的現象に内在する潜在的な完全性の欠如を捕捉するために本明細書で使用される。
罹患している：疾患、障害、及び／または状態に「罹患している」個体が、疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状と診断されたか、またはそれを示す。
標的化細胞：本明細書で使用する場合、「標的化細胞」は、任意の１つ以上の目的の細胞を指す。細胞は、インビトロ、インビボ、インサイチュ、または生物の組織もしくは器官に見出され得る。生物は、動物、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒト、及び最も好ましくは患者であり得る。標的免疫細胞には、例えば、ＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＤ１９＋Ｂ細胞及びＣＤ１１ｃ＋樹状細胞、ならびに単球、組織マクロファージ、及び骨髄細胞（骨髄内の免疫細胞、造血幹細胞、免疫細胞前駆体及び線維芽細胞を含む）が含まれる。
標的部分：本明細書で使用する場合、「標的部分」は、ナノ粒子に特定の細胞、組織、及び／または器官の種類を標的とさせ得る化合物または薬剤である。
治療剤：「治療剤」という用語は、対象に投与されるとき、治療、診断、及び／または予防効果を有し、及び／または所望の生物学的及び／または薬理学的効果を誘発する任意の薬剤を指す。
トランスフェクション：本明細書で使用する場合、「トランスフェクション」という用語は、種（例えば、ｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド）を細胞に導入する方法を指す。
翻訳調節活性：本明細書で使用する場合、「翻訳調節活性」という用語（「翻訳調節機能」と互換的に使用される）は、ＰＩＣ及び／またはリボソームの活性を含む、翻訳装置の活性を調節する（例えば、制御する、影響する、制御する、変化させる）生物学的機能、機序、またはプロセスを指す。いくつかの態様では、所望の翻訳調節活性は、ｍＲＮＡ翻訳の翻訳忠実性を促進及び／または増強する。いくつかの態様では、所望の翻訳調節活性は、漏出した走査を低減及び／または阻害する。
治療すること：本明細書で使用する場合、「治療すること」という用語は、特定の感染症、疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴の部分的なまたは完全な軽減、寛解、改善、緩和、発症の遅延、進行の阻害、重症度の低減、及び／または発生率の低減を指す。例えば、がんを「治療する」とは、腫瘍の生存、成長、及び／または拡散を阻害することを指し得る。治療は、疾患、障害、及び／または状態に関連する病理を発症するリスクを低減する目的で、疾患、障害、及び／または状態の兆候を示さない対象、及び／または疾患、障害、及び／または状態の早期兆候のみを示す対象に施され得る。
予防すること：本明細書で使用する場合、「予防すること」という用語は、特定の感染症、疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴の発症を部分的または完全に阻害することを指す。
腫瘍：本明細書で使用する場合、「腫瘍」は、良性または悪性に関わらず、組織の異常な成長である。
非修飾：本明細書で使用する場合、「非修飾」は、任意の方法で変更される前の任意の物質、化合物または分子を指す。非修飾は、生体分子の野生型または天然型を指し得るが、必ずしもそうではない。分子は、一連の修飾を受けてもよく、それにより、各修飾分子は、後続の修飾のための「非修飾」開始分子として機能し得る。
本開示の他の実施形態
本開示は、以下の実施形態に関する。このセクション全体を通して、実施形態という用語は、「Ｅ」と略記され、続いて序数詞が続く。例えば、Ｅ１は、実施形態１に相当する。
Ｅ１．脂質ナノ粒子であって、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）有効量のフィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
前記有効量の前記フィトステロールが、前記フィトステロールを欠く脂質ナノ粒子と比較して、免疫細胞への前記ＲＮＡ干渉剤の送達を増強する、前記脂質ナノ粒子。
Ｅ２．前記免疫細胞内の前記ＲＮＡ干渉剤の細胞内濃度が増強される、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３．前記免疫細胞による前記ＲＮＡ干渉剤の取り込みが増強される、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４．前記免疫細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の活性が増強される、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５．前記免疫細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の発現が増強される、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を調節する、Ｅ１～Ｅ５のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を増加させる、Ｅ６に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を低下させる、Ｅ６に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９．前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０．前記免疫細胞内の前記ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡの発現が阻害される、Ｅ１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１．前記ＲＮＡ干渉剤が標的とする前記ｍＲＮＡが、前記免疫細胞の活性化または活性を調節する、Ｅ９またはＥ１０のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１２．前記ｍＲＮＡが、前記免疫細胞の活性化または活性を増加させる、Ｅ１１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１３．前記ｍＲＮＡが、前記免疫細胞の活性化または活性を低下させる、Ｅ１１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１４．前記免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、及びマクロファージからなる群から選択される、Ｅ１～Ｅ１３のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１５．前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、Ｅ１４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１６．前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、Ｅ１４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１７．送達がインビボで増強される、Ｅ１～Ｅ１６のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１８．前記フィトステロールが、７０％超、８０％超、または９０％超の純度を有する、Ｅ１～Ｅ１７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１９．前記フィトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ１～Ｅ１７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２０．前記フィトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ１～Ｅ１７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２１．前記フィトステロールが、シトステロール、スチグマステロール、またはそれらの組み合わせである、Ｅ１～Ｅ２０のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２２．前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２３．前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２４．前記フィトステロールが、β－シトステロール
Figure 2022543773000374
またはその塩もしくはエステルである、Ｅ１～Ｅ２０のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２５．前記β－シトステロールが、７０％超または８０％超の純度を有する、Ｅ２４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２６．前記β－シトステロールが、９０％超の純度を有する、Ｅ２４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２７．前記β－シトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ２４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２８．前記β－シトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ２４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ２９．構造的脂質を含まない、Ｅ１～Ｅ２８のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３０．構造的脂質またはその塩を含む、Ｅ１～Ｅ２８のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３１．前記構造的脂質が、コレステロールまたはその塩である、Ｅ３０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３２．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、Ｅ３１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３３．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、Ｅ３１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３４．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、Ｅ３１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３５．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、Ｅ３１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３６．前記イオン性脂質が、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ１－８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＱもしくはＭのうちのいずれかを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３７．前記イオン性脂質が、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる群から選択される少なくとも１つの脂質である、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３８．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000375
またはその塩である、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ３９．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000376
またはその塩である、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４０．非カチオン性ヘルパー脂質を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４１．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、リン脂質である、Ｅ４０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４２．前記リン脂質が、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ４１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４３．前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、Ｅ４２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４４．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、オレイン酸である、Ｅ４０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４５．ＰＥＧ脂質を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４６．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ４５に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４７．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される、Ｅ４５に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４８．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ＤＭＧである、Ｅ４７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ４９．約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５０．約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５１．約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５２．前記ＲＮＡ干渉剤が、目的のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである、Ｅ１～Ｅ５１のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５３．前記ｓｉＲＮＡが、Ｆｏｘｐ３ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５４．前記ｓｉＲＮＡが、ＲＯＲｃ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５５．前記ｓｉＲＮＡが、ＩＬ－１７ａ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５６．前記免疫細胞が、Ｔｒｅｇ細胞である、Ｅ５３に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５７．前記免疫細胞が、Ｔｈ１７細胞である、Ｅ５４またはＥ５５に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５８．前記ｓｉＲＮＡが、サイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ５９．前記ｓｉＲＮＡが、ケモカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６０．前記ｓｉＲＮＡが、転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６１．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内アダプタータンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６２．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内シグナル伝達タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６３．前記ｓｉＲＮＡが、共刺激分子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６４．前記ｓｉＲＮＡが、免疫チェックポイント分子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６５．前記ｓｉＲＮＡによる前記目的のｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の分化、活性、または機能を低下させる、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６６．前記ｓｉＲＮＡによる前記目的のｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の分化、活性、または機能を増加させる、Ｅ５２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６７．脂質ナノ粒子であって、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）有効量のフィトステロールと、
（ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）ｓｉＲＮＡ分子と、を含み、
前記有効量の前記フィトステロールが、前記フィトステロールを欠く脂質ナノ粒子と比較して、免疫細胞へのｓｉＲＮＡの送達を増強する、前記脂質ナノ粒子。
Ｅ６８．前記免疫細胞内の前記ｓｉＲＮＡの細胞内濃度が増強される、Ｅ６７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ６９．前記免疫細胞による前記ｓｉＲＮＡの取り込みが増強される、Ｅ６７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７０．前記免疫細胞における前記ｓｉＲＮＡの活性が増強される、Ｅ６７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７１．前記免疫細胞における前記ｓｉＲＮＡの発現が増強される、Ｅ６７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７２．前記免疫細胞内の前記ｓｉＲＮＡが標的とするｍＲＮＡの活性が阻害される、Ｅ６７に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７３．前記免疫細胞の分化、活性または機能が阻害される、Ｅ７２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７４．前記免疫細胞の分化、活性または機能が刺激される、Ｅ７２に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７５．前記免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、及びマクロファージからなる群から選択される、Ｅ６７～Ｅ７４のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７６．前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、Ｅ７５に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７７．前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、Ｅ７５に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７８．前記ｓｉＲＮＡの前記免疫細胞への送達が、インビボで増強される、Ｅ６７～Ｅ７７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ７９．前記フィトステロールが、７０％超、８０％超、または９５％超の純度を有する、Ｅ６７～Ｅ７８のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８０．前記フィトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ６７～Ｅ７９のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８１．前記フィトステロールが、シトステロール、スチグマステロール、またはそれらの組み合わせである、Ｅ６７～Ｅ８０のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８２．前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ８１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８３．前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ８１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８４．前記フィトステロールが、β－シトステロール
Figure 2022543773000377

またはその塩もしくはエステルである、Ｅ６７～Ｅ８３のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８５．前記β－シトステロールが、７０％超、８０％超、または９０％超の純度を有する、Ｅ８４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８６．前記β－シトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ８４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８７．前記β－シトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ８４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８８．構造的脂質を含まない、Ｅ６７～Ｅ８７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ８９．構造的脂質またはその塩をさらに含む、Ｅ６７～Ｅ８７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９０．前記構造的脂質が、コレステロールまたはその塩である、Ｅ８９に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９１．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、Ｅ９０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９２．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、Ｅ９０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９３．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、Ｅ９０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９４．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、Ｅ９０に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９５．前記イオン性脂質が、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ１－８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＱもしくはＭのうちのいずれかを含む、Ｅ６７～Ｅ９４のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９６．前記イオン性脂質が、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる群から選択される少なくとも１つの脂質である、Ｅ６７～Ｅ９５のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９７．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000378

またはその塩である、Ｅ６７～Ｅ９６のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９８．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000379
またはその塩である、Ｅ６７～Ｅ９６のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ９９．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、リン脂質である、Ｅ６７～Ｅ９８のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１００．前記リン脂質が、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ９９に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０１．前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、Ｅ１００に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０２．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、オレイン酸である、Ｅ６７～Ｅ９９のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０３．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ６７～Ｅ１０２のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０４．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される、Ｅ１０３に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０５．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ＤＭＧである、Ｅ１０４に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０６．約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ６７～Ｅ１０５のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０７．約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ６７～Ｅ１０６のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０８．約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ６７～Ｅ１０７のいずれか１つに記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１０９．前記ｓｉＲＮＡが、Ｆｏｘｐ３ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１０．前記ｓｉＲＮＡが、ＲＯＲｃ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１１．前記ｓｉＲＮＡが、ＩＬ－１７ａ ｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１２．前記免疫細胞が、Ｔｒｅｇ細胞である、Ｅ１０９に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１３．前記免疫細胞が、Ｔｈ１７細胞である、Ｅ１１０またはＥ１１に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１４．前記ｓｉＲＮＡが、サイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１５．前記ｓｉＲＮＡが、ケモカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１６．前記ｓｉＲＮＡが、転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１７．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内アダプタータンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１８．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内シグナル伝達タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１１９．前記ｓｉＲＮＡが、共刺激分子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１２０．前記ｓｉＲＮＡが、免疫チェックポイント分子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１２１．前記ｓｉＲＮＡによる前記目的のｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の分化、活性、または機能を低下させる、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１２２．前記ｓｉＲＮＡによる目的のｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の分化、活性、または機能を増加させる、Ｅ６７～１０８に記載の脂質ナノ粒子。
Ｅ１２３．免疫細胞に核酸分子を送達する方法であって、前記免疫細胞を脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と接触させることを含み、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）フィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により、構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
それにより、前記核酸分子が前記免疫細胞に送達される、前記方法。
Ｅ１２４．前記ＲＮＡ干渉剤が、インビボで前記免疫細胞に送達される、Ｅ１２３に記載の方法。
Ｅ１２５．前記免疫細胞内の前記ＲＮＡ干渉剤の細胞内濃度が増強される、Ｅ１２３に記載の方法。
Ｅ１２６．前記免疫細胞による前記ＲＮＡ干渉剤の取り込みが増強される、Ｅ１２３に記載の方法。
Ｅ１２７．前記免疫細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の活性が増強されるか、または前記免疫細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の発現が増強される、Ｅ１２３に記載の方法。
Ｅ１２８．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を調節する、Ｅ１２３～Ｅ１２７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１２９．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を増加させる、Ｅ１２８に記載の方法。
Ｅ１３０．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記免疫細胞の活性化または活性を低下させる、Ｅ１２８に記載の方法。
Ｅ１３１．前記免疫細胞における前記ＲＮＡ干渉剤が標的とするｍＲＮＡの活性が阻害される、Ｅ１２３に記載の方法。
Ｅ１３２．前記ＲＮＡ干渉剤が標的とする前記ｍＲＮＡが、前記免疫細胞の活性化または活性を調節する、Ｅ１３１に記載の方法。
Ｅ１３３．前記ＲＮＡ干渉剤が標的とする前記ｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の活性化または活性を増加させる、Ｅ１３２に記載の方法。
Ｅ１３４．前記ＲＮＡ干渉剤が標的とする前記ｍＲＮＡの阻害が、前記免疫細胞の活性化または活性を低下させる、Ｅ１３２に記載の方法。
Ｅ１３５．前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、Ｅ１２３～Ｅ１３４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１３６．前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、Ｅ１２３～Ｅ１３４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１３７．前記免疫細胞が、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、及びマクロファージからなる群から選択される、Ｅ１２３～Ｅ１３４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１３８．同じまたは異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを欠く、Ｅ１２３～Ｅ１３７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１３９．異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを含む、Ｅ１２３～Ｅ１３７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１４０．Ｔ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｔ細胞を脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と接触させることを含み、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）フィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により、構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
それにより、前記Ｔ細胞活性化または活性が調節される、前記方法。
Ｅ１４１．前記Ｔ細胞活性化または活性が増強される、Ｅ１４０に記載の方法。
Ｅ１４２．前記Ｔ細胞活性化または活性が低減する、Ｅ１４０に記載の方法。
Ｅ１４３．同じまたは異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを欠く、Ｅ１４０～Ｅ１４２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１４４．異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを含む、Ｅ１４０～Ｅ１４２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１４５．タンパク質に対する免疫応答を調節する方法であって、免疫細胞を脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と接触させることを含み、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）フィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により、構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
それにより、前記タンパク質に対する前記免疫応答が増加する、前記方法。
Ｅ１４６．前記タンパク質が、抗原である、Ｅ１４５に記載の方法。
Ｅ１４７．前記タンパク質が、がん抗原または感染症抗原である、Ｅ１４６に記載の方法。
Ｅ１４８．前記タンパク質が、自己免疫または炎症性抗原である、Ｅ１４６に記載の方法。
Ｅ１４９．前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、Ｅ１４５に記載の方法。
Ｅ１５０．前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、Ｅ１４５に記載の方法。
Ｅ１５１．前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫応答が増強される前記タンパク質とは異なるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ１４５～１５０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１５２．同じまたは異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを欠く、Ｅ１４５～Ｅ１５１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１５３．異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを含む、Ｅ１４５～Ｅ１５１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１５４．前記免疫細胞またはＴ細胞が、インビトロで前記脂質ナノ粒子と接触する、Ｅ１２３～Ｅ１５３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１５５．前記免疫細胞またはＴ細胞が、前記脂質ナノ粒子を対象に投与することによって、インビボで前記脂質ナノ粒子と接触する、Ｅ１２３～Ｅ１５３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１８７．前記脂質ナノ粒子が、静脈内投与される、Ｅ１５５に記載の方法。
Ｅ１８８．前記脂質ナノ粒子が、筋肉内投与される、Ｅ１５５に記載の方法。
Ｅ１８９．前記脂質ナノ粒子が、皮下、結節内、及び腫瘍内からなる群から選択される経路によって投与される、Ｅ１５５に記載の方法。
Ｅ１９０．前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ１２３～１５３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１９１．前記フィトステロールが、β－シトステロール
Figure 2022543773000380
またはその塩もしくはエステルである、Ｅ１２３～Ｅ１５３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１９２．前記β－シトステロールが、７０％超、または８０％超、または９０％超の純度を有する、Ｅ１９１に記載の方法。
Ｅ１９３．前記β－シトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ１９１に記載の方法。
Ｅ１９４．前記β－シトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ１９１に記載の方法。
Ｅ１９５．構造的脂質を含まない、Ｅ１９０～Ｅ１９４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１９６．前記脂質ナノ粒子が、構造的脂質またはその塩を含む、Ｅ１９０～Ｅ１９４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ１９７．前記構造的脂質が、コレステロールまたはその塩である、Ｅ１９６に記載の方法。
Ｅ１９８．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、Ｅ１９７に記載の方法。
Ｅ１９９．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、Ｅ１９７に記載の方法。
Ｅ２００．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、Ｅ１９７に記載の方法。
Ｅ２０１．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、Ｅ１９７に記載の方法。
Ｅ２０２．前記イオン性脂質が、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ１－８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＱもしくはＭのうちのいずれかを含む、Ｅ１２３～Ｅ２０１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２０３．前記イオン性脂質が、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる群から選択される少なくとも１つの脂質である、Ｅ１２３～Ｅ２０１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２０４．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000381
またはその塩である、Ｅ１２３～Ｅ２０１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２０５．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000382
またはその塩である、Ｅ１２３～Ｅ２０１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２０６．前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性ヘルパー脂質を含む、Ｅ１２３～Ｅ２０１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２０７．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、リン脂質である、Ｅ２０６に記載の方法。
Ｅ２０８．前記リン脂質が、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ２０７に記載の方法。
Ｅ２０９．前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、Ｅ２０８に記載の方法。
Ｅ２１０．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、オレイン酸である、Ｅ２０６に記載の方法。
Ｅ２１１．前記脂質ナノ粒子が、ＰＥＧ脂質を含む、Ｅ１２３～Ｅ２１０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２１２．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ２１１に記載の方法。
Ｅ２１３．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される、Ｅ２１１に記載の方法。
Ｅ２１４．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ＤＭＧである、Ｅ２１３に記載の方法。
Ｅ２１５．前記脂質ナノ粒子が、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ１２３～Ｅ２１４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２１６．前記脂質ナノ粒子が、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ１２３～Ｅ２１４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２１７．前記脂質ナノ粒子が、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ１２３～Ｅ２１４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２１８．前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、Ｅ１２３～２１７及び１８５～２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２１９．対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象に、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を投与することを含み、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）フィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により、構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
前記ＬＮＰがフィトステロールを含み、それにより、前記ＲＮＡ干渉剤を封入するが前記フィトステロールを欠くＬＮＰによって誘発される免疫応答と比較して、前記対象において免疫応答が調節される、前記方法。
Ｅ２２０．前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、Ｅ２１９に記載の方法。
Ｅ２２１．前記ｓｉＲＮＡが、Ｆｏｘｐ３をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ２２０に記載の方法。
Ｅ２２２．前記ｓｉＲＮＡが、ＲＯＲｃをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ２２０に記載の方法。
Ｅ２２３．前記ｓｉＲＮＡが、ＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ２２０に記載の方法。
Ｅ２２４．前記脂質ナノ粒子が、筋肉内に投与される、Ｅ２１９～Ｅ２２３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２２５．前記脂質ナノ粒子が、皮内投与される、Ｅ２１９～Ｅ２２３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２２６．前記脂質ナノ粒子が、結節内に投与される、Ｅ２１９～Ｅ２２３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２２７．前記免疫応答が、抗原特異的抗体応答である、Ｅ２１９～Ｅ２２６のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２２８．前記免疫応答が、抗原特異的Ｔ細胞応答である、Ｅ２１９～Ｅ２２６に記載の方法。
Ｅ２２９．同じまたは異なるＲＮＡ干渉剤を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを欠く、Ｅ２１９～Ｅ２２８のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３０．異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを含む、Ｅ２１９～Ｅ２２８のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３１．前記フィトステロールが、７０％超の純度を有する、Ｅ２１９～Ｅ２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３２．前記フィトステロールが、８０％超の純度を有する、Ｅ２１９～Ｅ２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３３．前記フィトステロールが、９０％超の純度を有する、Ｅ２１９～Ｅ２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３４．前記フィトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ２１９～Ｅ２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３５．前記フィトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ２１９～Ｅ２３０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３６．前記フィトステロールが、シトステロール、スチグマステロール、またはそれらの組み合わせである、Ｅ２１９～Ｅ２３５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２３７．前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２３６に記載の方法。
Ｅ２３８．前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２３６に記載の方法。
Ｅ２３９．前記フィトステロールが、β－シトステロール
Figure 2022543773000383
またはその塩もしくはエステルである、Ｅ２１９～Ｅ２３５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２４０．前記β－シトステロールが、７０％超または８０％超の純度を有する、Ｅ２３９に記載の方法。
Ｅ２４１．前記β－シトステロールが、９０％超の純度を有する、Ｅ２３９に記載の方法。
Ｅ２４２．前記β－シトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ２３９に記載の方法。
Ｅ２４３．前記β－シトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ２３９に記載の方法。
Ｅ２４４．構造的脂質を含まない、Ｅ２１９～Ｅ２４３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２４５．前記脂質ナノ粒子が、構造的脂質またはその塩を含む、Ｅ２１９～Ｅ２４３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２４６．前記構造的脂質が、コレステロールまたはその塩である、Ｅ２４５に記載の方法。
Ｅ２４７．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、Ｅ２４６に記載の方法。
Ｅ２４８．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、Ｅ２４６に記載の方法。
Ｅ２４９．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、Ｅ２４６に記載の方法。
Ｅ２５０．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、Ｅ２４６に記載の方法。
Ｅ２５１．前記イオン性脂質が、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ１－８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＱもしくはＭのうちのいずれかを含む、Ｅ２１９～Ｅ２５０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２５２．前記イオン性脂質が、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる群から選択される少なくとも１つの脂質である、Ｅ２１９～Ｅ２５０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２５３．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000384
またはその塩である、Ｅ２１９～Ｅ２５０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２５４．前記イオン性脂質が、

Figure 2022543773000385
またはその塩である、Ｅ２１９～Ｅ２５０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２５５．前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性ヘルパー脂質を含む、Ｅ２１９～Ｅ２５４のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２５６．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、リン脂質である、Ｅ２５５に記載の方法。
Ｅ２５７．前記リン脂質が、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ２５６に記載の方法。
Ｅ２５８．前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、Ｅ２５７に記載の方法。
Ｅ２５９．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、オレイン酸である、Ｅ２５５に記載の方法。
Ｅ２６０．前記脂質ナノ粒子が、ＰＥＧ脂質を含む、Ｅ２１９～Ｅ２５９のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２６１．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ２６０に記載の方法。
Ｅ２６２．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される、２６０に記載の方法。
Ｅ２６３．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ＤＭＧである、Ｅ２６２に記載の方法。
Ｅ２６４．前記脂質ナノ粒子が、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２１９～Ｅ２６３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２６４．前記脂質ナノ粒子が、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２１９～Ｅ２６３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２６５．前記脂質ナノ粒子が、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２１９～Ｅ２６３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２６６．Ｂ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｂ細胞を脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と接触させることを含み、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）が、
（ｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉ）フィトステロールと、
（ｉｉｉ）所望により、非カチオン性ヘルパー脂質と、
（ｉｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、
（ｖ）所望により、構造的脂質と、
（ｖｉ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
それにより、前記Ｂ細胞活性化または活性が調節される、前記方法。
Ｅ２６７．Ｂ細胞活性化または活性が増強される、Ｅ２６６に記載の方法。
Ｅ２６８．Ｂ細胞活性化または活性が低減する、Ｅ２６６に記載の方法。
Ｅ２６９．同じまたは異なるＲＮＡ干渉剤を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを欠く、Ｅ２６６～Ｅ２７０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７０．異なる核酸分子を封入する第２のＬＮＰを、同時にまたは連続的に投与することをさらに含み、前記第２のＬＮＰが、フィトステロールを含む、Ｅ２６６～Ｅ２７０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７１．前記Ｂ細胞が、インビトロで前記脂質ナノ粒子と接触する、Ｅ２６６～Ｅ２７２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７２．前記Ｂ細胞が、前記脂質ナノ粒子を対象に投与することによって、インビボで前記脂質ナノ粒子と接触される、Ｅ２６６～Ｅ２７２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７３．前記脂質ナノ粒子が、静脈内投与される、Ｅ２７２に記載の方法。
Ｅ２７４．前記脂質ナノ粒子が、筋肉内投与される、Ｅ２７２に記載の方法。
Ｅ２７５．前記脂質ナノ粒子が、皮下、結節内、及び腫瘍内からなる群から選択される経路によって投与される、Ｅ２７２に記載の方法。
Ｅ２７６．前記Ｂ細胞内の前記ＲＮＡ干渉剤の細胞内濃度が増強される、Ｅ２６６～Ｅ２７５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７７．前記Ｂ細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の活性が増強される、Ｅ２６６～Ｅ２７５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７８．前記Ｂ細胞における前記ＲＮＡ干渉剤の発現が増強される、Ｅ２６６～Ｅ２７５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２７９．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記Ｂ細胞の前記活性化または活性を調節する、Ｅ２６６～Ｅ２７５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２８０．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記Ｂ細胞の前記活性化または活性を増加させる、Ｅ２７９に記載の方法。
Ｅ２８１．前記ＲＮＡ干渉剤が、前記Ｂ細胞の前記活性化または活性を低下させる、Ｅ２７９に記載の方法。
Ｅ２８２．前記フィトステロールが、７０％超、８０％超、９０％超、または９５％超の純度を有する、Ｅ２６６～Ｅ２８１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２８３．前記フィトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ２６６～Ｅ２８１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２８４．前記フィトステロールが、シトステロール、スチグマステロール、またはそれらの組み合わせである、Ｅ２６６～Ｅ２８３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２８５．前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２８４に記載の方法。
Ｅ２８６．前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、Ｅ２８４に記載の方法。
Ｅ２８７．前記フィトステロールが、β－シトステロール
Figure 2022543773000386
またはその塩もしくはエステルである、Ｅ２６６～Ｅ２８３のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２８８．前記β－シトステロールが、７０％超、または８０％超、または９０％超の純度を有する、Ｅ２８７に記載の方法。
Ｅ２８９．前記β－シトステロールが、９５％超の純度を有する、Ｅ２８７に記載の方法。
Ｅ２９０．前記β－シトステロールが、９７％、９８％、または９９％の純度を有する、Ｅ２８７に記載の方法。
Ｅ２９１．構造的脂質を含まない、Ｅ２６６～Ｅ２９０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２９２．前記脂質ナノ粒子が、構造的脂質またはその塩を含む、Ｅ２６６～Ｅ２９１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２９３．前記構造的脂質が、コレステロールまたはその塩である、Ｅ２９２に記載の方法。
Ｅ２９４．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、Ｅ２９３に記載の方法。
Ｅ２９５．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、Ｅ２９３に記載の方法。
Ｅ２９６．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、Ｅ２９３に記載の方法。
Ｅ２９７．前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、Ｅ２９３に記載の方法。
Ｅ２９８．前記イオン性脂質が、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＩＩａ１－８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＱもしくはＭのうちのいずれかを含む、Ｅ２６６～Ｅ２９７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ２９９．前記イオン性脂質が、３－（ジドデシルアミノ）－Ｎ１，Ｎ１，４－トリドデシル－１－ピペラジンエタンアミン（ＫＬ１０）、Ｎ１－［２－（ジドデシルアミノ）エチル］－Ｎ１，Ｎ４，Ｎ４－トリドデシル－１，４－ピペラジンジエタンアミン（ＫＬ２２）、１４，２５－ジトリデシル－１５，１８，２１，２４－テトラアザ－オクタトリアコンタン（ＫＬ２５）、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＤＭＡ）、ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル４－（ジメチルアミノ）ブタノエート（ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ）、（２Ｒ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｒ））、及び（２Ｓ）－２－（｛８－［（３β）－コレスト－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－１－アミン（オクチル－ＣＬｉｎＤＭＡ（２Ｓ））からなる群から選択される少なくとも１つの脂質である、Ｅ２６６～Ｅ２９７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３０２．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000387

またはその塩である、Ｅ２６７～Ｅ２９９のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３００．前記イオン性脂質が、
Figure 2022543773000388

またはその塩である、Ｅ２６６～Ｅ２９７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３０１．前記脂質ナノ粒子が、非カチオン性ヘルパー脂質を含む、Ｅ２６６～Ｅ２９７のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３０２．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、リン脂質である、Ｅ３０１に記載の方法。
Ｅ３０３．前記リン脂質が、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、スフィンゴミエリン、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ３０２に記載の方法。
Ｅ３０４．前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、Ｅ３０３に記載の方法。
Ｅ３０５．前記非カチオン性ヘルパー脂質が、オレイン酸である、Ｅ３０１に記載の方法。
Ｅ３０６．前記脂質ナノ粒子が、ＰＥＧ脂質を含む、Ｅ２６６～Ｅ３０５のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３０７．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ３０６に記載の方法。
Ｅ３０８．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＣ、及びＰＥＧ－ＤＳＰＥ脂質からなる群から選択される、Ｅ３０７に記載の方法。
Ｅ３０９．前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ－ＤＭＧである、Ｅ３０８に記載の方法。
Ｅ３１０．前記脂質ナノ粒子が、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％のリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２６６～Ｅ３０９のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３１１．前記脂質ナノ粒子が、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％のリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールと、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２６６～Ｅ３１０のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３１２．前記脂質ナノ粒子が、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％のリン脂質と、約３８．５モル％のステロールと、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、Ｅ２６６～Ｅ３１１のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３１３．前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、Ｅ２６６～Ｅ３１２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ３１４．前記ｓｉＲＮＡが、サイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３１３に記載の方法。
Ｅ３１５．前記ｓｉＲＮＡが、ケモカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３１３に記載の方法。
Ｅ３１６．前記ｓｉＲＮＡが、転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３１３に記載の方法。
Ｅ３１７．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内アダプタータンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３１３に記載の方法。
Ｅ３１８．前記ｓｉＲＮＡが、細胞内シグナル伝達タンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３１３に記載の方法。
Ｅ３１９．免疫細胞への送達が増強された免疫療法の方法での使用のための脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、
（ｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
（ｉｉ）イオン性脂質と、
（ｉｉｉ）免疫細胞への送達のためのＲＮＡ干渉剤と、を含み、
（ｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質、及び／または（ｉｉ）前記イオン性脂質のうちの１つ以上が、前記免疫細胞への前記ＬＮＰの送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
前記増強された送達が、前記免疫細胞送達強化脂質を欠く対照ＬＮＰに対する、前記ＬＮＰの特徴である、前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）。
Ｅ３２０．前記ステロールまたは他の構造的脂質が、フィトステロールまたはコレステロールである、Ｅ３１９に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２１．前記免疫細胞送達強化脂質が、前記免疫細胞送達強化脂質を欠く前記対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑに結合する、及び／または前記脂質を含む前記ＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進する、及び／または前記免疫細胞送達強化脂質を欠く前記対照ＬＮＰと比較して、Ｃ１ｑ結合性ＬＮＰの前記免疫細胞への取り込みを増加させる、Ｅ３１９またはＥ３２０に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２２．前記ＲＮＡ干渉剤が、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）である、Ｅ３１９～Ｅ３２１のいずれか１つに記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２３．前記ｓｉＲＮＡが、前記免疫細胞内の転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３２２に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２４．前記ｓｉＲＮＡが、前記免疫細胞内のサイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３２２に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２５．前記ｓｉＲＮＡが、前記免疫細胞内の受容体をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３２２に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２６．前記ｓｉＲＮＡが、前記免疫細胞内のシグナル伝達分子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３２２に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２７．前記免疫細胞が、リンパ球である、Ｅ３１９～Ｅ３２６に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２８．前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、Ｅ３１９～Ｅ３２７に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３２９．前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、Ｅ３１９～Ｅ３２７に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３０．前記免疫細胞が、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、またはマクロファージである、Ｅ３１９～３２６に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３１．前記脂質ナノ粒子が、
（ｖｉ）非カチオン性ヘルパー脂質もしくはリン脂質、及び／または
（ｖ）ＰＥＧ脂質、をさらに含む、Ｅ３１９～Ｅ３３０に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３２．前記ステロールまたは他の構造的脂質が、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるフィトステロールを含む、Ｅ３１９～Ｅ３３１に記載の使用のためのＬＮＰ。一実施形態では、前記フィトステロールは、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
Ｅ３３３．前記方法が、免疫細胞の活性化または活性の調節をもたらす、Ｅ３１９～Ｅ３３２に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３４．前記方法が、Ｔ細胞の活性化または活性の調節をもたらす、Ｅ３１９～Ｅ３３３に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３５．前記ｓｉＲＮＡが、ＦｏｘＰ３ ｍＲＮＡを標的とし、前記Ｔ細胞が、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）である、Ｅ３２８に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３６．前記ｓｉＲＮＡが、ＲＯＲｃ ｍＲＮＡを標的とし、前記Ｔ細胞が、Ｔｈ１７細胞である、Ｅ３２８に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３７．前記ｓｉＲＮＡがＩＬ－１７ａ ｍＲＮＡを標的とし、前記Ｔ細胞が、Ｔｈ１７細胞である、Ｅ３２８に記載の使用のためのＬＮＰ。
Ｅ３３８．Ｅ３１９～Ｅ３３７に記載の脂質ナノ粒子と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
Ｅ３３９．個体における免疫応答を調節するための薬剤の製造における、Ｅ３１９～Ｅ３３７に記載の脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体の使用であって、前記薬剤が、前記脂質ナノ粒子と、任意の薬学的に許容される担体と、を含み、前記治療が、前記薬剤及び任意の薬学的に許容される担体の投与を含む、前記使用。
Ｅ３４０．Ｅ３１９～Ｅ３３７に記載の脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体を含む容器と、個体における免疫応答を調節するための前記脂質ナノ粒子の投与に関する説明書を含む添付文書と、を含む、キット。
Ｅ３４１．免疫細胞にＲＮＡ干渉剤を送達するインビトロ方法であって、免疫細胞送達強化脂質を含む、Ｅ３１９～Ｅ３３７に定義されるＬＮＰと前記免疫細胞を接触させることを含む、前記インビトロ方法。
Ｅ３４２．前記方法が、前記免疫細胞の活性化または活性の調節をもたらす、Ｅ３４１に記載のインビトロ方法。
Ｅ３４２．対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象において免疫応答が調節されるように、前記対象に、Ｅ３１９～Ｅ３３７に記載の脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体を投与することを含む、前記方法。
Ｅ３４３．免疫応答が、前記対象において刺激される、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４４．免疫応答が、前記対象において阻害される、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４５．前記免疫応答の調節が、サイトカイン産生の調節を含む、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４６．前記免疫応答の調節が、免疫細胞増殖の調節を含む、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４７．前記免疫応答の調節が、免疫細胞の少なくとも１つのエフェクター機能の調節を含む、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４８．前記免疫応答の調節が、免疫グロブリン産生の調節を含む、Ｅ３４２に記載の方法。
Ｅ３４９．前記対象が、がんに罹患している、Ｅ３４３に記載の方法。
Ｅ３５０．前記対象が、感染症に罹患している、Ｅ３４３に記載の方法。
Ｅ３５１．前記対象がワクチンを投与されているか、または投与された対象であり、前記ワクチンに対する前記免疫応答が刺激される、Ｅ３４３に記載の方法。
Ｅ３５２．前記対象が、自己免疫疾患を有するか、自己免疫疾患を有する疑いがあるか、または自己免疫疾患を発症するリスクがある、Ｅ３４４に記載の方法。
Ｅ３５３．前記対象が、アレルギー性障害を有する、Ｅ３４４に記載の方法。
Ｅ３５４．前記対象が、炎症性障害を有する、Ｅ３４４に記載の方法。
Ｅ３５５．前記対象が、移植レシピエントである、Ｅ３４４に記載の方法。
Ｅ３５６．前記対象が、免疫療法を受けている、Ｅ３４４に記載の方法。
Ｅ３５７．前記対象が、少なくとも１つの追加の免疫調節剤を投与される、Ｅ３４２～Ｅ３５６に記載の方法。
Ｅ３５８．対象におけるＴ細胞応答を調節する方法であって、前記対象においてＴ細胞応答が調節されるように、Ｅ３１９～Ｅ３３７に記載の脂質ナノ粒子、及び任意の薬学的に許容される担体を前記対象に投与することを含む、前記方法。
Ｅ３５９．前記対象において、Ｔ細胞応答が刺激される、Ｅ３５８に記載の方法。
Ｅ３６０．前記対象において、Ｔ細胞応答が、阻害される、Ｅ３５８に記載の方法。
Ｅ３６１．前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、Ｅ３５８に記載の方法。
Ｅ３６２．前記ｓｉＲＮＡが、転写因子をコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３５８に記載の方法。
Ｅ３６３．前記転写因子が、Ｆｏｘｐ３転写因子である、Ｅ３６２に記載の方法。
Ｅ３６４．前記転写因子が、ＲＯＲ転写因子である、Ｅ３６２に記載の方法。
Ｅ３６５．前記ｓｉＲＮＡが、サイトカインをコードするｍＲＮＡを標的とする、Ｅ３５８に記載の方法。
Ｅ３６６．前記サイトカインが、ＩＬ－１７ａである、Ｅ３６５に記載の方法。
均等物及び範囲
当業者であれば、ほんの日常的な実験を用いて、本明細書に記載される本開示による具体的な実施形態に対する多くの均等物を認識するか、またはそれを確認することができよう。本開示の範囲は、以下の説明に限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲に記載されるものである。
特許請求の範囲において、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」などの冠詞は、反対の指示がない限り、または文脈から明らかでない限り、１つ以上を意味し得る。グループの１つ以上のメンバー間に「または（ｏｒ）」を含む請求項または説明は、反対の指示がない限り、または文脈から明らかでない限り、グループのメンバーのうちの１つ、２つ以上、またはすべてが所与の生成物もしくはプロセスにおいて存在するか、使用されるか、または他の方法でそれと関連する場合に満たされるとみなされる。本開示は、グループの正確に１つのメンバーが、所与の生成物もしくはプロセスにおいて存在するか、使用されるか、または他の方法でそれと関連する実施形態を含む。本開示は、グループメンバーのうちの２つ以上、またはすべてが、所与の生成物またはプロセスにおいて存在するか、使用されるか、または他の方法でそれと関連する実施形態を含む。
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、開放的であることを意図し、追加の要素またはステップの包含を許容するが、それを必要としないことにも留意されたい。本明細書で「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語が使用されるとき、したがって、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という用語も包含され、開示される。
範囲が与えられている場合、端点を含む。さらに、別段の指示がない限り、または文脈及び当業者の理解から明らかでない限り、範囲として表現される値は、文脈が別途明確に指示しない限り、本開示の異なる実施形態における記載された範囲内の任意の特定の値またはサブ範囲を、範囲の下限の単位の１０分の１まで仮定することができることを理解されたい。
たとえ引用文献に明示的に記載されていなくても、すべての引用文献、例えば、参照文献、刊行物、データベース、データベースエントリー、及び本明細書に引用される技術は、参照により本出願に組み込まれる。引用元及び本出願の記述が相反する場合、本出願の記述を優先するものとする。
本開示は、以下の実施例を参照することによって、より完全に理解されるであろう。しかしながら、それらは、本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書に記載される実施例及び実施形態は、例示的な目的に過ぎず、それらに照らして様々な修正または変更が当業者に示唆され、本出願及び添付の特許請求の範囲の趣旨及び範囲内に含まれることが理解される。
実施例１：ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを用いたインビトロ分化制御性Ｔ細胞におけるＦｏｘｐ３発現の下方調節
この実施例では、３つの市販の供給源からのＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡ構築物を、免疫細胞への送達を標的とするためのＬＮＰに封入した。ｓｉＲＮＡが標的とするマウスＦｏｘｐ３配列は、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００１１９９３４７．１、ＮＭ＿００１１９９３４８．１及びＮＭ＿０５４０３９．２に示される。以下の表１７に示すように、試験したｓｉＲＮＡ調製物は、Ｆｏｘｐ３遺伝子の様々な異なる領域を標的としていた。
Figure 2022543773000389
表１７に示されるように、Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡは、単一のｓｉＲＮＡ構築物であり、一方、Ｖｅｎｄｏｒ ２ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡ（グループ１及び２）は、それぞれ、４つのｓｉＲＮＡのプールである。スクランブルｓｉＲＮＡは、陰性対照ｓｉＲＮＡである。
ｓｉＲＮＡ構築物は、商業的供給業者から購入した。ｓｉＲＮＡ構築物を、５０：１０：１０：２８．５：１．５の比で、化合物Ｘ／ＤＳＰＣ／コレステロール／β－シトステロール／ＰＥＧ ＤＭＧを含む脂質ナノ粒子に配合した。このような脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）は、免疫細胞送達強化脂質としてβ－シトステロールを含有し、２０１９年１月３０日に出願されたＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９／１５９１３号にさらに記載されており、その内容全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
初期実験は、インビトロで分化したマウス制御性Ｔ細胞を使用して行った。ＥａｓｙＳｅｐ（商標）ナイーブマウスＣＤ４＋Ｔ細胞単離キット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、ナイーブマウスＣＤ４＋Ｔ細胞を総マウス脾細胞から濃縮した。細胞を、１～３×１０６細胞／ｍＬで播種し、それぞれ５ｎｇ／ｍＬのｒｈＩＬ－２及びＴＧＦ－β（いずれもＢｉｏＬｅｇｅｎｄから得た）を含有する完全なＲＰＭＩ培地中の３μｇ／ｍＬの抗ＣＤ３ε（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）でコーティングしたプレート上で５日間培養し、３日目にｒｈＩＬ－２で培地を更新した。５日目に、細胞を洗浄し、ＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡで２４～４８時間インキュベートし、次いで、フローサイトメトリーによってＦｏｘｐ３発現について分析した。ｓｉＲＮＡ用量は、１．０×１０６細胞／ｍＬで１μｇ／ｍＬであった。
結果を、図１Ａ～１Ｃに示す。すべてのＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡは、２４時間及び４８時間の曝露後に、スクランブルｓｉＲＮＡ及び培地と比較して、分化ＴｒｅｇにおけるＦｏｘｐ３ ＭＦＩを低下させた（図１Ａ～１Ｂ）。この傾向は、２４時間後にｓｉＲＮＡを洗い流し、翌日に分析した分化Ｔｒｅｇにも当てはまった（図１Ｃ）。試験した他のＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡと比較して、Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡで観察されたノックダウンが微妙だが一貫して増加した。したがって、Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡ構築物を、さらなる調査のために選択した。
実施例２：ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを用いた、脾細胞及びエクスビボ制御性Ｔ細胞におけるＦｏｘｐ３発現の下方調節
ＬＮＰ封入Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡによるインビトロ分化マウスＴｒｅｇ細胞におけるＦｏｘｐ３発現の下方調節を示す実施例１に記載される結果に基づいて、実施例１に記載されるように調製されたＬＮＰ製剤を、全マウス脾細胞及びマウスエクスビボＴｒｅｇ細胞上でさらに試験した。マウス脾細胞をＲＰＭＩ培地に播種し、１０μｇ／ｍＬまたは１μｇ／ｍＬのＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡ（それぞれ１０×及び１×）のいずれかで２４時間直ちに培養した。エクスビボＴｒｅｇは、マウスＴｒｅｇ単離キット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、ナイーブなＣ５７ＢＬ／６マウスから細胞を磁気的に選別することによって得た。次いで、エクスビボＴｒｅｇを１μｇ／ｍｌのＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡと２４時間インキュベートした。対照は、スクランブルｓｉＲＮＡであった。
結果を、図２Ａ～２Ｃに示す。脾細胞（図２Ａ）について、Ｆｏｘｐ３発現の阻害が用量依存的に観察され、Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡがＣＤ４＋Ｔ細胞内のＦｏｘｐ３ ＭＦＩを低下させた。ｓｉＲＮＡによるＦｏｘＰ３発現の阻害は、インビトロ分化Ｔｒｅｇ（図２Ｂ）においても観察され、実施例１に記載される結果と一致し、エクスビボＴｒｅｇ（図２Ｃ）においても観察された。したがって、これらのデータは、ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡによる全脾細胞調製から、分化Ｔｒｅｇ、定常状態エクスビボＴｒｅｇにおいて、及びＣＤ４＋Ｔ細胞内でＦｏｘｐ３発現が減少し得ることを示す。
実施例３：ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡによるＦｏｘｐ３発現の用量依存性下方調節
この実施例では、Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡの用量滴定を、インビトロで分化したＴｒｅｇで行い、１，０００ｎｇ／ｍＬの上位用量で開始する連続５倍希釈を試験した。分化したＴｒｅｇを１．０×１０６細胞／ｍＬで播種し、以下の用量のＬＮＰ封入ｓｉＲＮＡで培養した：１．６ｎｇ／ｍＬ、８ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ、２００ｎｇ／ｍＬまたは１０００ｎｇ／ｍｌ。対照は、スクランブルｓｉＲＮＡであった。ＬＮＰ封入Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを、実施例１に記載されるように配合した。
結果を、図３Ａ～３Ｂに示す。２４時間のインキュベーション中に、Ｆｏｘｐ３ノックダウンが用量依存的に観察され、Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡは低い５ｎｇ／ｍＬでノックダウン効果を有していた（図３Ａ）。等価用量での２４時間のインキュベーションについて、スクランブルｓｉＲＮＡでノックダウンは観察されなかった（図３Ｂ）。
実施例４：ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡによる制御性Ｔ細胞分化の阻害
この実施例では、インビトロでのＴｒｅｇ分化に対するＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡの効果を調べた。ナイーブＣＤ４＋マウスＴ細胞を単離し、実施例１に記載されるようにＴｒｅｇ培地で培養して、Ｔｒｅｇへの分化を促進した。ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３またはスクランブルｓｉＲＮＡを培養開始時に添加し（４０ｎｇ／ｍｌ～１，０００ｎｇ／ｍｌ）、次いで、Ｆｏｘｐ３ ＭＦＩを、培養６及び７日後の生ＣＤ４＋Ｔ細胞集団内で測定した。ＬＮＰ封入Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを、実施例１に記載されるように配合した。
結果を、図４Ａ（６日目）及び４Ｂ（７日目）に示す。６及び７日間のいずれの培養の後にも、１，０００ｎｇ／ｍｌのＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡは、Ｔｒｅｇの分化を阻害し、一方、低用量またはスクランブルｓｉＲＮＡは、培地単独の対照と比較して、Ｆｏｘｐ３ ＭＦＩに影響を及ぼさなかった。これらのデータは、ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡが、高用量で、ナイーブＣＤ４細胞からのＴｒｅｇのインビトロ分化を阻害することができることを示す。
実施例５：ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡによるＴｅｆｆ細胞のＴｒｅｇ抑制の阻害
Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡは、（実施例１～３に記載されるように）分化ＴｒｅｇにおいてＦｏｘｐ３をノックダウンすることが観察されたため、この実施例では、Ｆｏｘｐ３のノックダウンがＴｒｅｇ機能に与える影響を検討した。分化したマウスＴｒｅｇをマウスＴエフェクター細胞（Ｔｅｆｆ；ＣＤ４＋ＣＤ２５－）と６日間混合し、Ｔｅｆｆの増殖を測定した。Ｆｏｘｐ３－ＧＦＰマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ）からのＴｒｅｇを、実施例１に記載されるように５日間分化させ、ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡ（または対照スクランブルｓｉＲＮＡ）で２４時間培養し、次いでＣＤ４＋ＧＦＰ＋細胞（Ｔｒｅｇ）をＳｏｎｙ ＳＨ８００細胞ソーターによって精製した。Ｔｅｆｆは、ＣＤ４＋ＣＤ２５－細胞をＣＤ４５．１マウスから選別し、次いでＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ １：１０００（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で２０分間標識し、続いて数回洗浄することによって調製した。Ｔｅｆｆを１００，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレート中に播種した。Ｔｒｅｇを、１００，０００個の細胞／ウェルの上位数（１：１のＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比）で添加し、次いで、２倍に希釈して、Ｔｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比を１：１６とした。Ｒａｇ－／－マウスからの１００，０００個の細胞及び１μｇ／ｍＬの抗ＣＤ３ε（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を各ウェルに添加し、刺激をもたらした。Ｔｅｆｆの増殖は、ＣＴＶ希釈によって決定し、増殖％は、分割した生ＣＤ４＋ＣＤ４５．１＋細胞の％を表す。ＬＮＰ封入Ｖｅｎｄｏｒ １ Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡを、実施例１に記載されるように配合した。
結果を図５のグラフに示す。ｘ軸はＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比を示し、ｙ軸はＣＴＶ希釈によって列挙された増殖したＴｅｆｆ細胞のパーセンテージを示す。点線は、刺激を伴わないＴｅｆｆ増殖の量を表し、ここでは、抗ＣＤ３εは、０：１のＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ条件に添加されなかった。統計学的有意性は、二元配置分散分析、続くＴｕｋｅｙ事後試験によって決定し、有意性によってＦｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡでインキュベートしたＴｒｅｇと、培地でインキュベートしたＴｒｅｇとを比較した。これらのデータは、培地または対照ｓｉＲＮＡでインキュベートしたＴｒｅｇと比較して、ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡでインキュベートしたＴｒｅｇで培養した場合、Ｔｅｆｆ細胞が、１：１、１：２、及び１：４のＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比で有意に増殖することができたことを示す。１：８または１：１６のＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ比では、増殖の有意な阻害は観察されなかった。これらのデータは、ＬＮＰ封入Ｆｏｘｐ３ ｓｉＲＮＡがインビトロでＴｒｅｇの抑制機能の破壊を引き起こすことを示す。
実施例６：ＬＮＰ封入ＲＯＲｃ及びＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡを用いたＴｈ１７細胞におけるＩＬ－１７ａ発現の下方調節
この実施例では、マウス由来のナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞は、インビトロでＴｈ１７に分化させ、ＲＯＲｃまたはＩＬ－１７ａに対するｓｉＲＮＡを封入するＬＮＰが、Ｔｈ１７細胞によるＩＬ－１７ａ発現に影響を及ぼす可能性があるかどうかについて試験した。市販のＲＯＲｃ及びＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡを使用した。ｓｉＲＮＡが標的とするマウスＲＯＲｃ配列は、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＲ＿１２１６５６．１、ＮＭ＿０１１２８１．３、ＸＭ＿００６５０１１６２．３、ＸＭ＿００６５０１１６３．２及びＸＭ＿００１２９３７３４．１に示される。ｓｉＲＮＡが標的とするマウスＩＬ－１７ａ配列は、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１０５５２．３に示されている。以下の表１８に示すように、試験したｓｉＲＮＡ調製物は、ＲＯＲｃまたはＩＬ－１７ａ遺伝子の様々な異なる領域を標的とした。
Figure 2022543773000390
表１８に示されるように、Ｖｅｎｄｏｒ ２ ＲＯＲｃ ｓｉＲＮＡ及びＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡは、それぞれ、４つのｓｉＲＮＡのプールである。スクランブルｓｉＲＮＡは、陰性対照ｓｉＲＮＡである。
ｓｉＲＮＡ構築物を、５０：１０：１０：２８．５：１．５の比で、化合物Ｘ／ＤＳＰＣ／コレステロール／β－シトステロール／ＰＥＧ ＤＭＧを含む脂質ナノ粒子に配合した。このような脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）は、免疫細胞送達強化脂質としてβ－シトステロールを含有し、２０１９年１月３０日に出願されたＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９／１５９１３号にさらに記載されており、その内容全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
Ｔｈ１７分化を以下のように実施した：マウスナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞単離キット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ）を使用して、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞をＣ５７ＢＬ／６マウスから単離し、次いで、製造元の指示に従って、マウスのＴｈ１７分化キット（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して５日間培養した。５日目に、ＬＮＰに封入されたスクランブルｓｉＲＮＡ、ＲＯＲｃ ｓｉＲＮＡ、またはＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡのいずれかを、０．０１～１００μｇ／ｍＬの４００，０００個の細胞／ｍＬを含有する培養物に添加した。細胞を２４時間及び４８時間後に採取し、次いでホルボール１２－ミリステート１３－アセテート（ＰＭＡ）、イオノマイシン、及びブレフェルジンＡで６時間刺激して、細胞内サイトカインシグナルを増幅した。フローサイトメトリーを行い、生ＣＤ４＋Ｔ細胞集団内のＩＬ－１７ａのＭＦＩを測定した。
結果を、図６Ａ（２４時間）及び６Ｂ（４８時間）に示す。点線は、ｓｉＲＮＡを受けなかった細胞のＩＬ－１７ａ ＭＦＩを表す。結果は、ＬＮＰ封入ＲＯＲｃ及びＩＬ－１７ａ ｓｉＲＮＡが、２４時間及び４８時間のインキュベーションにおいてＩＬ－１７ａのＭＦＩを約０．１μｇ／ｍＬの用量まで減少させたことを実証し、このことは、スクランブルｓｉＲＮＡではなく、これらのｓｉＲＮＡプールの両方が、Ｔｈ１７細胞におけるＩＬ－１７ａ発現をノックダウンすることができたことを示す。これらのデータは、Ｔｈ１７細胞内に発現されるタンパク質を標的とするｓｉＲＮＡを封入するＬＮＰが、Ｔｈ１７分化細胞内のＩＬ－１７ａ遺伝子発現を変化させる可能性がある、という証拠となる。
他の実施形態
本開示は、その発明を実施するための形態とともに説明されているが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の範囲を例示することを意図し、限定するものではないことを理解されたい。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲の範囲内にある。
本明細書に記載されるすべての参照文献は、それら全体が参照により組み込まれる。

Claims (160)

  1. 免疫細胞送達脂質ナノ粒子であって、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含む、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  2. 免疫細胞送達脂質ナノ粒子であって、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＰＥＧ脂質と、
    （ｖ）ＲＮＡ干渉剤と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含む、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  3. 免疫細胞送達脂質ナノ粒子であって、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質、または（ｉｉｉ）前記非カチオン性ヘルパー脂質もしくはリン脂質、または（ｖ）前記ＰＥＧ脂質のうちの１つ以上がＣ１ｑ結合脂質であって、前記Ｃ１ｑ結合脂質を欠く脂質ナノ粒子と比較して、Ｃ１ｑに結合する、及び／またはＬＮＰのＣ１ｑへの結合を促進する前記Ｃ１ｑ結合脂質である、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  4. 増強された前記送達が、前記免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質ナノ粒子に対するものである、請求項１～３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  5. 増強された前記送達が、好適な対照に対するものである、請求項１～３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  6. 前記薬剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  7. 前記薬剤が、ｍｉＲＮＡである、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  8. 前記薬剤が、免疫細胞活性を調節する可溶性タンパク質の発現を阻害する、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  9. 前記薬剤が、免疫細胞活性を調節する細胞内タンパク質の発現を阻害する、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  10. 前記薬剤が、免疫細胞活性を調節する膜貫通タンパク質の発現を阻害する、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  11. 前記薬剤が、免疫機能を増強する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  12. 前記薬剤が、免疫機能を阻害する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  13. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  14. 前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  15. 前記免疫細胞が、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、またはマクロファージである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  16. フィトステロールまたはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせを含む、請求項１～１５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  17. 前記フィトステロールが、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１６に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  18. 前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、請求項１６に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  19. 前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、請求項１６に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  20. 前記フィトステロールが、β－シトステロール
    Figure 2022543773000391

    またはその塩もしくはエステルである、請求項１６に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  21. フィトステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールまたはその塩とを含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  22. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記フィトステロールまたはその塩もしくはエステルが、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、化合物Ｓ－１４０、化合物Ｓ－１５１、化合物Ｓ－１５６、化合物Ｓ－１５７、化合物Ｓ－１５９、化合物Ｓ－１６０、化合物Ｓ－１６４、化合物Ｓ－１６５、化合物Ｓ－１７０、化合物Ｓ－１７３、化合物Ｓ－１７５、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  23. 前記フィトステロールが、β－シトステロールである、請求項２２に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  24. 前記フィトステロールが、β－シトスタノールである、請求項２２に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  25. 前記フィトステロールが、カンペステロールである、請求項２２に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  26. 前記フィトステロールが、ブラシカステロールである、請求項２２に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  27. 前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記フィトステロールまたはその塩もしくはエステルが、β－シトステロール、及びスチグマステロール、ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  28. 前記フィトステロールが、β－シトステロールである、請求項２７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  29. 前記フィトステロールが、スチグマステロールである、請求項２７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  30. ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールとを含み、前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記ステロールまたはその塩もしくはエステルが、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される、請求項１～２０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  31. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  32. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  33. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  34. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、請求項２１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  35. 前記イオン性脂質が、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩＩｄ）、（Ｉ ＩＸ）、（Ｉ ＩＸａ１）、（Ｉ ＩＸａ２）、（Ｉ ＩＸａ３）、（Ｉ ＩＸａ４）、（Ｉ ＩＸａ５）、（Ｉ ＩＸａ６）、（Ｉ ＩＸａ７）、または（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかの化合物を含む、請求項１～３４のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  36. 前記イオン性脂質が、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１１３、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－２４４、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３０９、化合物Ｉ－３１７、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－３２２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－３３１、化合物Ｉ－３３２、化合物Ｉ－３４７、化合物Ｉ－３４８、化合物Ｉ－３４９、化合物Ｉ－３５０、化合物Ｉ－３５２、及び化合物Ｉ－Ｍからなる群から選択される化合物を含む、請求項１～３４のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  37. 前記イオン性脂質が、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、及び化合物Ｉ－１８１からなる群から選択される化合物を含む、請求項１～３４のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  38. 免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項３７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  39. 免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記イオン性脂質が、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物を含む、請求項３７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  40. 免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記イオン性脂質が、化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、及び化合物Ｉ－２４４からなる群から選択される化合物を含む、請求項３６に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  41. 前記非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質が、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣ、化合物Ｈ－４０９、化合物Ｈ－４１８、化合物Ｈ－４２０、化合物Ｈ－４２１、及び化合物Ｈ－４２２からなる群から選択される化合物を含む、請求項１～４０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  42. 前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、請求項４１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  43. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質が、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む、請求項４１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  44. 前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、請求項４３に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  45. 前記リン脂質が、ＤＭＰＥである、請求項４３に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  46. 前記リン脂質が、化合物Ｈ－４０９である、請求項４３に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  47. 前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質が、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む、請求項４１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  48. 前記リン脂質が、ＤＯＰＣである、請求項４７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  49. 前記リン脂質が、ＤＭＰＥである、請求項４７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  50. 前記リン脂質が、化合物Ｈ－４０９である、請求項４７に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  51. ＰＥＧ脂質を含む、請求項１～５０のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  52. 前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項５１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  53. 前記ＰＥＧ脂質が、化合物Ｐ－４１５、化合物Ｐ－４１６、化合物Ｐ－４１７、化合物Ｐ－４１９、化合物Ｐ－４２０、化合物Ｐ－４２３、化合物Ｐ－４２４、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１、化合物Ｐ－Ｌ２、化合物Ｐ－Ｌ３、化合物Ｐ－Ｌ４、化合物Ｐ－Ｌ６、化合物Ｐ－Ｌ８、化合物Ｐ－Ｌ９、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ２２、化合物Ｐ－Ｌ２３、及び化合物Ｐ－Ｌ２５からなる群から選択される化合物を含む、請求項５１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  54. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項５３に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  55. 前記ＰＥＧ脂質が、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ１、及び化合物Ｐ－Ｌ２からなる群から選択される化合物を含む、請求項５１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  56. 約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項１～５５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  57. 約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項１～５５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  58. 約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項１～５５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  59. 前記モル％のステロールまたは他の構造的脂質が、１８．５％のフィトステロールであり、前記構造的脂質の総モル％が、３８．５％である、請求項５６～５８のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  60. 前記モル％のステロールまたは他の構造的脂質が、２８．５％のフィトステロールであり、前記構造的脂質の総モル％が、３８．５％である、請求項５６～５８のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  61. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項５９または６０に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  62. （ｉ）化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物である約５０モル％のイオン性脂質と、
    （ｉｉ）ＤＳＰＣである約１０モル％のリン脂質と、
    （ｉｉｉ）β－シトステロール及びコレステロールから選択される約３８．５モル％の構造的脂質と、
    （ｉｖ）化合物Ｐ－４２８である約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項１～５５のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  63. 前記ＲＮＡ干渉剤が、少なくとも１つの修飾核酸塩基、ヌクレオシド及び／またはヌクレオチドを含む、請求項１～６２のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  64. 前記免疫細胞が、Ｔｒｅｇ細胞である、請求項１～６３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  65. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項６４に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  66. 前記ｓｉＲＮＡが、Ｆｏｘｐ３をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項６５に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  67. 前記ＲＮＡ干渉剤が、Ｆｏｘｐ３、ＩＲＦ４、エストロゲン受容体１、ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ１０、ＨＤＡＣ１１、及びＡＥＰからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項６４に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  68. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｍｉＲ－１４６ｂまたは抗ｍｉＲ－１４６ｂを標的とする、請求項６４に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  69. 前記免疫細胞が、Ｔｅｆｆ細胞である、請求項１～６３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  70. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項６９に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  71. 前記Ｔｅｆｆ細胞が、Ｔｈ１７細胞である、請求項６９に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  72. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ＲＯＲγｔまたはＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである、請求項７１に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  73. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ＲＯＲγｔ、ＩＬ－１７ａ、Ｔｂｅｔ、Ｋｖ１．３、ＫＣＡ３．１、及びＫＣＮＮＡからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項６９に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子。
  74. 免疫細胞に薬剤を送達する方法であって、前記免疫細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記薬剤が前記免疫細胞に送達される、前記方法。
  75. Ｔ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｔ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、Ｔ細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記Ｔ細胞活性化または活性が調節される、前記方法。
  76. 前記Ｔ細胞が、Ｔｒｅｇ細胞である、請求項７５に記載の方法。
  77. 前記Ｔ細胞が、Ｔｅｆｆ細胞である、請求項７５に記載の方法。
  78. 前記Ｔｅｆｆ細胞が、Ｔｈ１７細胞である、請求項７７に記載の方法。
  79. タンパク質に対する免疫応答を増加させる方法であって、免疫細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記タンパク質に対する前記免疫応答が増加する、前記方法。
  80. がん抗原に対するＴ細胞応答を増加させる方法であって、Ｔ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記がん抗原に対する前記Ｔ細胞応答が増加する、前記方法。
  81. 対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象に、免疫細胞送達脂質ナノ粒子を投与することを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記免疫応答が前記対象において調節される、前記方法。
  82. Ｂ細胞活性化または活性を調節する方法であって、Ｂ細胞を免疫細胞送達脂質ナノ粒子と接触させることを含み、前記免疫細胞送達脂質ナノ粒子が、
    （ｉ）イオン性脂質と、
    （ｉｉ）ステロールまたは他の構造的脂質と、
    （ｉｉｉ）非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、
    （ｉｖ）ＲＮＡ干渉剤と、
    （ｖ）所望により、ＰＥＧ脂質と、を含み、
    （ｉ）前記イオン性脂質、または（ｉｉ）前記ステロールもしくは他の構造的脂質のうちの１つ以上が、免疫細胞への前記脂質ナノ粒子の送達を増強するのに有効な量の免疫細胞送達強化脂質を含み、
    それにより、前記Ｂ細胞活性化または活性が調節される、前記方法。
  83. 増強された前記送達が、前記免疫細胞送達強化脂質を欠く脂質ナノ粒子に対するものである、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  84. 増強された前記送達が、好適な対照に対するものである、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  85. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  86. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｍｉＲＮＡである、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  87. 前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫細胞活性を調節する可溶性タンパク質の発現を阻害する、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  88. 前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫細胞活性を調節する細胞内タンパク質の発現を阻害する、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  89. 前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫細胞活性を調節する膜貫通タンパク質の発現を阻害する、請求項７４～８２のいずれか１項に記載の方法。
  90. 前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫機能を増強する、請求項７４～８９のいずれか１項に記載の方法。
  91. 前記ＲＮＡ干渉剤が、免疫機能を阻害する、請求項７４～８９のいずれか１項に記載の方法。
  92. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項７４～９１のいずれか１項に記載の方法。
  93. 前記免疫細胞が、Ｂ細胞である、請求項７４～９１のいずれか１項に記載の方法。
  94. 前記免疫細胞が、ＮＫ細胞、樹状細胞、骨髄細胞、またはマクロファージである、請求項７４～９１のいずれか１項に記載の方法。
  95. 前記ＬＮＰが、フィトステロール、またはフィトステロールとコレステロールとの組み合わせを含む、請求項７４～９４のいずれか１項に記載の方法。
  96. 前記フィトステロールが、β－シトステロール、スチグマステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項９５に記載の方法。
  97. 前記フィトステロールが、シトステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、請求項９５に記載の方法。
  98. 前記フィトステロールが、スチグマステロールまたはその塩もしくはエステルを含む、請求項９５に記載の方法。
  99. 前記フィトステロールが、β－シトステロール
    Figure 2022543773000392
    またはその塩もしくはエステルである、請求項９５に記載の方法。
  100. 前記ＬＮＰが、フィトステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールまたはその塩と、を含む、請求項７４～９９のいずれか１項に記載の方法。
  101. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記フィトステロールまたはその塩もしくはエステルが、β－シトステロール、β－シトスタノール、カンペステロール、ブラシカステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１００に記載の方法。
  102. 前記フィトステロールが、β－シトステロールである、請求項１０１に記載の方法。
  103. 前記フィトステロールが、β－シトスタノールである、請求項１０１に記載の方法。
  104. 前記フィトステロールが、カンペステロールである、請求項１０１に記載の方法。
  105. 前記フィトステロールが、ブラシカステロールである、請求項１０１に記載の方法。
  106. 前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記フィトステロールまたはその塩もしくはエステルが、β－シトステロール、スチグマステロール、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１００に記載の方法。
  107. 前記フィトステロールが、β－シトステロールである、請求項１０６に記載の方法。
  108. 前記フィトステロールが、スチグマステロールである、請求項１０６に記載の方法。
  109. 前記ＬＮＰが、ステロールまたはその塩もしくはエステルと、コレステロールとを含み、前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記ステロールまたはその塩もしくはエステルが、ブラシカステロール、化合物Ｓ－３０、化合物Ｓ－３１、及び化合物Ｓ－３２からなる群から選択される、請求項７４、７９、８１、及び８３～９１のいずれか１項に記載の方法。
  110. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１％～５０％である、請求項１００に記載の方法。
  111. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約１０％～４０％である、請求項１００に記載の方法。
  112. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約２０％～３０％である、請求項１００に記載の方法。
  113. 前記コレステロールのモル％が、前記脂質ナノ粒子内に存在する前記フィトステロールのモル％の約３０％である、請求項１００に記載の方法。
  114. 前記ＬＮＰが、式（Ｉ Ｉ）、（Ｉ ＩＡ）、（Ｉ ＩＢ）、（Ｉ ＩＩ）、（Ｉ ＩＩａ）、（Ｉ ＩＩｂ）、（Ｉ ＩＩｃ）、（Ｉ ＩＩｄ）、（Ｉ ＩＩｅ）、（Ｉ ＩＩｆ）、（Ｉ ＩＩｇ）、（Ｉ ＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩ）、（Ｉ ＶＩ－ａ）、（Ｉ ＶＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩＩ）、（Ｉ ＶＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩａ）、（Ｉ ＶＩＩＩｂ）、（Ｉ ＶＩＩｂ－１）、（Ｉ ＶＩＩｂ－２）、（Ｉ ＶＩＩｂ－３）、（Ｉ ＶＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩｄ）、（Ｉ ＶＩＩＩｃ）、（Ｉ ＶＩＩＩｄ）、（Ｉ ＩＸ）、（Ｉ ＩＸａ１）、（Ｉ ＩＸａ２）、（Ｉ ＩＸａ３）、（Ｉ ＩＸａ４）、（Ｉ ＩＸａ５）、（Ｉ ＩＸａ６）、（Ｉ ＩＸａ７）もしくは（Ｉ ＩＸａ８）のうちのいずれかの化合物、及び／または化合物Ｘ、Ｙ、Ｉ ４８、Ｉ ５０、Ｉ １０９、Ｉ １１１、Ｉ １１３、Ｉ １８１、Ｉ １８２、Ｉ ２４４、Ｉ ２９２、Ｉ ３０１、Ｉ ３２１、Ｉ ３２２、Ｉ ３２６、Ｉ ３２８、Ｉ ３３０、Ｉ ３３１、Ｉ ３３２もしくはＩ Ｍのうちのいずれかを含む、イオン性脂質を含む、請求項７４～１１３のいずれか１項に記載の方法。
  115. 前記ＬＮＰが、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１１３、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－２４４、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－３２２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－３３１、化合物Ｉ－３３２、及び化合物Ｉ－Ｍからなる群から選択される化合物を含む、イオン性脂質を含む、請求項７４～１１３のいずれか１項に記載の方法。
  116. 前記ＬＮＰが、化合物Ｘ、化合物Ｙ、化合物Ｉ－３２１、化合物Ｉ－２９２、化合物Ｉ－３２６、化合物Ｉ－１８２、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－４８、化合物Ｉ－５０、化合物Ｉ－３２８、化合物Ｉ－３３０、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、及び化合物Ｉ－１８１からなる群から選択される化合物を含む、イオン性脂質を含む、請求項７４～１１３のいずれか１項に記載の方法。
  117. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項１１６に記載の方法。
  118. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記イオン性脂質が、化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物を含む、請求項１１６に記載の方法。
  119. 前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記イオン性脂質が、化合物Ｘ、化合物Ｉ－１０９、化合物Ｉ－１１１、化合物Ｉ－１８１、化合物Ｉ－１８２、及び化合物Ｉ－２４４からなる群から選択される化合物を含む、請求項１１６に記載の方法。
  120. 前記ＬＮＰが、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＣ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む、非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質を含む、請求項７４～１１９のいずれか１項に記載の方法。
  121. 前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、請求項１２０に記載の方法。
  122. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞であり、前記非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質が、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む、請求項１２０に記載の方法。
  123. 前記リン脂質が、ＤＳＰＣである、請求項１２２に記載の方法。
  124. 前記リン脂質が、ＤＭＰＥである、請求項１２２に記載の方法。
  125. 前記リン脂質が、化合物Ｈ－４０９である、請求項１２２に記載の方法。
  126. 前記免疫細胞が、単球または骨髄細胞であり、前記非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質が、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＥ、及び化合物Ｈ－４０９からなる群から選択される化合物を含む、請求項１１９に記載の方法。
  127. 前記リン脂質が、ＤＯＰＣである、請求項１２６に記載の方法。
  128. 前記リン脂質が、ＤＭＰＥである、請求項１２６に記載の方法。
  129. 前記リン脂質が、化合物Ｈ－４０９である、請求項１２６に記載の方法。
  130. 前記ＬＮＰが、ＰＥＧ脂質を含む、請求項７４～１２９のいずれか１項に記載の方法。
  131. 前記ＰＥＧ脂質が、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾ジアルキルグリセロール、及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１３０に記載の方法。
  132. 前記ＰＥＧ脂質が、化合物Ｐ－４１５、化合物Ｐ－４１６、化合物Ｐ－４１７、化合物Ｐ－４１９、化合物Ｐ－４２０、化合物Ｐ－４２３、化合物Ｐ－４２４、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１、化合物Ｐ－Ｌ２、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ２２、及び化合物Ｐ－Ｌ２３からなる群から選択される化合物を含む、請求項１３０に記載の方法。
  133. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項１３２に記載の方法。
  134. 前記ＰＥＧ脂質が、化合物Ｐ－４２８、化合物Ｐ－Ｌ１６、化合物Ｐ－Ｌ１７、化合物Ｐ－Ｌ１８、化合物Ｐ－Ｌ１９、化合物Ｐ－Ｌ１、及び化合物Ｐ－Ｌ２からなる群から選択される化合物を含む、請求項１３０に記載の方法。
  135. 前記ＬＮＰが、約３０モル％～約６０モル％のイオン性脂質と、約０モル％～約３０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約１８．５モル％～約４８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  136. 前記ＬＮＰが、約３５モル％～約５５モル％のイオン性脂質と、約５モル％～約２５モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３０モル％～約４０モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約０モル％～約１０モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  137. 前記ＬＮＰが、約５０モル％のイオン性脂質と、約１０モル％の非カチオン性ヘルパー脂質またはリン脂質と、約３８．５モル％のステロールまたは他の構造的脂質と、約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  138. 前記モル％のステロールまたは他の構造的脂質が、１８．５％のフィトステロールであり、前記構造的脂質の総モル％が、３８．５％である、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  139. 前記モル％のステロールまたは他の構造的脂質が、２８．５％のフィトステロールであり、前記構造的脂質の総モル％が、３８．５％である、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  140. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞である、請求項１３８または１３９に記載の方法。
  141. 前記ＬＮＰが、
    （ｉ）化合物Ｉ－３０１、化合物Ｉ－３２１、及び化合物Ｉ－３２６からなる群から選択される化合物である約５０モル％のイオン性脂質と、
    （ｉｉ）ＤＳＰＣである約１０モル％のリン脂質と、
    （ｉｉｉ）β－シトステロール及びコレステロールから選択される約３８．５モル％の構造的脂質と、
    （ｉｖ）化合物Ｐ－４２８である約１．５モル％のＰＥＧ脂質と、を含む、請求項７４～１３４のいずれか１項に記載の方法。
  142. 前記ＲＮＡ干渉剤が、少なくとも１つの修飾核酸塩基、ヌクレオシド、及び／またはヌクレオチドを含む、請求項７４～１４１のいずれか１項に記載の方法。
  143. 前記免疫細胞が、Ｔｒｅｇ細胞である、請求項７４、７５または８１のいずれか１項に記載の方法。
  144. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項１４３に記載の方法。
  145. 前記ｓｉＲＮＡが、Ｆｏｘｐ３をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項１４４に記載の方法。
  146. 前記ＲＮＡ干渉剤が、Ｆｏｘｐ３、ＩＲＦ４、エストロゲン受容体１、ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ１０、ＨＤＡＣ１１、及びＡＥＰからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項１４３に記載の方法。
  147. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｍｉＲ－１４６ｂまたは抗ｍｉＲ－１４６ｂを標的とする、請求項１４３に記載の方法。
  148. 前記免疫細胞が、Ｔｅｆｆ細胞である、請求項７４、７５または８１のいずれか１項に記載の方法。
  149. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ｓｉＲＮＡである、請求項１４８に記載の方法。
  150. 前記Ｔｅｆｆ細胞が、Ｔｈ１７細胞である、請求項１４８に記載の方法。
  151. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ＲＯＲγｔまたはＩＬ－１７ａをコードするｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡである、請求項１５０に記載の方法。
  152. 前記ＲＮＡ干渉剤が、ＲＯＲγｔ、ＩＬ－１７ａ、Ｔｂｅｔ、Ｋｖ１．３、ＫＣＡ３．１、及びＫＣＮＮＡからなる群から選択されるタンパク質をコードするｍＲＮＡを標的とする、請求項１４８に記載の方法。
  153. 請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
  154. 請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物を含む容器と、個体における免疫応答を調節するための前記脂質ナノ粒子もしくは薬学的組成物の投与に関する説明書を含む添付文書と、を含む、キット。
  155. 個体における免疫応答の調節に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
  156. 個体における免疫細胞への薬剤の送達に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
  157. 個体におけるＴ細胞活性もしくは活性化の調節に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
  158. 個体におけるタンパク質に対する免疫応答の増加に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
  159. 個体におけるがん抗原に対するＴ細胞応答の増加に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
  160. 個体におけるＢ細胞活性もしくは活性化の調節に使用するための、請求項１～７３のいずれか１項に記載の免疫細胞送達脂質ナノ粒子、または請求項１５３に記載の薬学的組成物。
JP2022506331A 2019-07-31 2020-07-31 免疫細胞へのｒｎａ干渉剤の送達のための組成物及び方法 Pending JP2022543773A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962881279P 2019-07-31 2019-07-31
US62/881,279 2019-07-31
PCT/US2020/044535 WO2021022173A1 (en) 2019-07-31 2020-07-31 Compositions and methods for delivery of rna interference agents to immune cells

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022543773A true JP2022543773A (ja) 2022-10-14
JPWO2021022173A5 JPWO2021022173A5 (ja) 2023-08-08

Family

ID=72088399

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022506331A Pending JP2022543773A (ja) 2019-07-31 2020-07-31 免疫細胞へのｒｎａ干渉剤の送達のための組成物及び方法

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20220280639A1 (ja)
EP (1) EP4003296A1 (ja)
JP (1) JP2022543773A (ja)
AU (1) AU2020319876A1 (ja)
CA (1) CA3149386A1 (ja)
WO (1) WO2021022173A1 (ja)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3852764A4 (en) * 2018-09-19 2022-06-15 ModernaTX, Inc. STEROL ANALOGUES AND USES THEREOF
HRP20240586T1 (hr) 2018-10-09 2024-07-19 The University Of British Columbia Sastavi i sustavi koji sadrže transfekcijske sposobne vezikle bez organskih otapala i deterdženta i s njim povezanim postupcima
CA3200234A1 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Daryl C. Drummond Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids, and related methods of use
EP4395748A1 (en) 2021-09-03 2024-07-10 CureVac SE Novel lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids
WO2023064469A1 (en) * 2021-10-13 2023-04-20 Modernatx, Inc. Compositions of mrna-encoded il15 fusion proteins and methods of use thereof
EP4422698A1 (en) 2021-10-29 2024-09-04 CureVac SE Improved circular rna for expressing therapeutic proteins
WO2023144330A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 CureVac SE Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors
WO2023148303A1 (de) * 2022-02-02 2023-08-10 Mslsolutions Gmbh Verfahren zur medikament- und impfstoffherstellung
WO2023227608A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide
US12064479B2 (en) 2022-05-25 2024-08-20 Akagera Medicines, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids and methods of use thereof
CN115286674A (zh) * 2022-06-13 2022-11-04 湖北英纳氏生物科技有限公司 一种阳离子脂质体及其制备方法
WO2023245177A2 (en) * 2022-06-17 2023-12-21 The University Of Chicago Targeted nanomedicine for treating lung disorders
CN116589435A (zh) * 2022-06-20 2023-08-15 成都威斯津生物医药科技有限公司 用于核酸递送的可电离脂质及其组合物
WO2024026475A1 (en) * 2022-07-29 2024-02-01 Modernatx, Inc. Compositions for delivery to hematopoietic stem and progenitor cells (hspcs) and related uses
WO2024064206A1 (en) * 2022-09-20 2024-03-28 Emory University Lipid nanoparticles comprising nucleic acids encoding therapeutic genes and uses in medical methods
US20240156949A1 (en) 2022-10-28 2024-05-16 Glaxosmithkline Biologicals Sa Nucleic Acid Based Vaccine
WO2024131810A1 (en) * 2022-12-21 2024-06-27 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid nanoparticles comprising sterol-modified phospholipids
US20240263196A1 (en) * 2022-12-29 2024-08-08 Life Technologies Corporation Lipid Compositions and Methods for Delivery to Immune Cells
CN116143707B (zh) * 2023-02-24 2024-04-19 山东大学 一种碱基可电离脂质及其制备方法与应用
WO2024184500A1 (en) 2023-03-08 2024-09-12 CureVac SE Novel lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4270537A (en) 1979-11-19 1981-06-02 Romaine Richard A Automatic hypodermic syringe
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
CA1283827C (en) 1986-12-18 1991-05-07 Giorgio Cirelli Appliance for injection of liquid formulations
GB8704027D0 (en) 1987-02-20 1987-03-25 Owen Mumford Ltd Syringe needle combination
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4940460A (en) 1987-06-19 1990-07-10 Bioject, Inc. Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5339163A (en) 1988-03-16 1994-08-16 Canon Kabushiki Kaisha Automatic exposure control device using plural image plane detection areas
FR2638359A1 (fr) 1988-11-03 1990-05-04 Tino Dalto Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5190521A (en) 1990-08-22 1993-03-02 Tecnol Medical Products, Inc. Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin
US5527288A (en) 1990-12-13 1996-06-18 Elan Medical Technologies Limited Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs
GB9118204D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Weston Terence E Needle-less injector
SE9102652D0 (sv) 1991-09-13 1991-09-13 Kabi Pharmacia Ab Injection needle arrangement
US5328483A (en) 1992-02-27 1994-07-12 Jacoby Richard M Intradermal injection device with medication and needle guard
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5569189A (en) 1992-09-28 1996-10-29 Equidyne Systems, Inc. hypodermic jet injector
US5334144A (en) 1992-10-30 1994-08-02 Becton, Dickinson And Company Single use disposable needleless injector
WO1995024176A1 (en) 1994-03-07 1995-09-14 Bioject, Inc. Ampule filling device
US5466220A (en) 1994-03-08 1995-11-14 Bioject, Inc. Drug vial mixing and transfer device
US5599302A (en) 1995-01-09 1997-02-04 Medi-Ject Corporation Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
US5893397A (en) 1996-01-12 1999-04-13 Bioject Inc. Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus
GB9607549D0 (en) 1996-04-11 1996-06-12 Weston Medical Ltd Spring-powered dispensing device
US5993412A (en) 1997-05-19 1999-11-30 Bioject, Inc. Injection apparatus
IT1298087B1 (it) 1998-01-08 1999-12-20 Fiderm S R L Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni
US20050222064A1 (en) 2002-02-20 2005-10-06 Sirna Therapeutics, Inc. Polycationic compositions for cellular delivery of polynucleotides
KR20230098713A (ko) 2009-06-10 2023-07-04 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 향상된 지질 조성물
DK3202760T3 (da) 2011-01-11 2019-11-25 Alnylam Pharmaceuticals Inc Pegylerede lipider og deres anvendelse til lægemiddelfremføring
US8691750B2 (en) * 2011-05-17 2014-04-08 Axolabs Gmbh Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds
EP3556353A3 (en) 2014-02-25 2020-03-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems
SI3766916T1 (sl) * 2014-06-25 2023-01-31 Acuitas Therapeutics Inc. Formulacije novih lipidov in lipidnih nanodelcev za dostavo nukleinskih kislin
EP3247363A4 (en) * 2015-01-21 2018-10-03 Moderna Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle compositions
CA3003055C (en) 2015-10-28 2023-08-01 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
EP3964200A1 (en) 2015-12-10 2022-03-09 ModernaTX, Inc. Compositions and methods for delivery of therapeutic agents
WO2019152557A1 (en) * 2018-01-30 2019-08-08 Modernatx, Inc. Compositions and methods for delivery of agents to immune cells
CN113015540A (zh) * 2018-09-14 2021-06-22 莫得纳特斯公司 使用mrna治疗剂治疗癌症的方法和组合物

Also Published As

Publication number Publication date
US20220280639A1 (en) 2022-09-08
WO2021022173A1 (en) 2021-02-04
AU2020319876A1 (en) 2022-02-24
EP4003296A1 (en) 2022-06-01
CA3149386A1 (en) 2021-02-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2022543773A (ja) 免疫細胞へのｒｎａ干渉剤の送達のための組成物及び方法
US20230027864A1 (en) Compositions and methods for delivery of agents to immune cells
US10881730B2 (en) Immunomodulatory therapeutic MRNA compositions encoding activating oncogene mutation peptides
JP7556848B2 (ja) ｍＲＮＡ治療薬を使用したがんを治療するための方法及び組成物
US20230112857A1 (en) Methods of making tolerogenic dendritic cells
JP2022543467A (ja) 強化された薬剤送達のための組成物及び方法
US20240158458A1 (en) Mrnas encoding immune modulating polypeptides and uses thereof
US20170304261A1 (en) Silvestrol, silvestrol analogs and uses thereof
US20230130155A1 (en) Mrnas encoding metabolic reprogramming polypeptides and uses thereof
US20230085318A1 (en) Polynucleotides for disrupting immune cell activity and methods of use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230731

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20230731

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20240618