JP2022543033A - ヘモグロビン依存性細菌を培養するための方法及び組成物 - Google Patents

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Abstract

ヘモグロビン依存性細菌の培養に関する方法及び組成物が本明細書に提供される。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年８月２日に出願された米国仮特許出願第６２／８８２，０２１号明細書；２０１９年９月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／８９８，３７２号明細書；及び２０２０年２月７日に出願された米国仮特許出願第６２／９７１，３９１号明細書の利益を主張し、前記出願のそれぞれの全内容は、その全体がこの参照により本明細書に組み込まれる。
ヒトのマイクロバイオームの組成は、その健康及びウェルビーイングにおいて重要な役割を果たし得る。実際に、個体のマイクロバイオームの妨害は、炎症性腸疾患、免疫障害、２型糖尿病、神経変性障害、心血管疾患及び癌を含む多くの疾患に関係するとされている。従って、マイクロバイオームの調節は、そうした疾患の魅力的な治療戦略である。
ヒトのマイクロバイオームを調節する１つの方法は、１つ又は複数の有益細菌株をヒトに投与することによるものである。しかし、こうした治療法の開発は、多くの細菌株（特に増殖にヘモグロビン（又はヘミンなどのその誘導体）を必要とする細菌株について）の大規模生産が困難であることにより妨げられている。
ヘモグロビンは、肺内で大気酸素を捕捉して、それを身体の残りの部分に運搬する、赤血球中の鉄含有金属タンパク質である。鉄は、細菌を含め、ほぼあらゆる形態の生物にとって不可欠な栄養素である。ヘモグロビンは、ヒトにおいて鉄の最も豊富な貯蔵器であることから、ヒトマイクロバイオームを構成する細菌の多くは、その主要な鉄供給源としてヘモグロビン又はその誘導体を利用する。多くの場合、こうしたヘモグロビン依存性細菌は、最適なインビトロ増殖のためにヘモグロビン又はヘミンの存在を必要とする。しかし、市販のヘモグロビン及びその誘導体は、典型的には、ブタの血液などからの動物供給源から精製されており、そのため、精製ヘモグロビンは、高価になる。さらに、ヘモグロビンの供給源となる動物により、特定の集団間で倫理的及び／又は宗教的異議が起こり得る。最後に、ＧＭＰ（適正製造規範）グレードのヘモグロビンは、調達が容易ではなく、製薬目的のヘモグロビン依存性細菌の大規模製造をとりわけ困難にしている。
従って、ヘモグロビン、その誘導体又はいずれかの他の動物由来成分の非存在下において、ヘモグロビン依存性細菌の最適な増殖を可能にする組成物及び方法が強く求められている。
本明細書で実証されるように、シアノバクテリア（シアノバクテリアを含むバイオマスを含む）及び／又はシアノバクテリア由来成分などの特定のヘモグロビン代替物質をヘモグロビンの代わりに使用して、培養中のヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる。本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビン若しくはその誘導体の非存在下において且つ／又はより少ない量のヘモグロビン若しくはその誘導体を使用して、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持する。
例えば、本明細書で実証されるように、スピルリナ及び／又は特定のスピルリナ由来の成分（例えば、可溶性スピルリナ成分）をヘモグロビンの代わりに増殖培地中に使用して、そうでなければヘモグロビン依存性である細菌のインビトロ培養を促進することができ、こうした細菌として、プレボテラ（プレボテラ）属の細菌（例えば、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ））、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の細菌、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）属の細菌、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属の細菌、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属の細菌、アリスティペス（Ａｌｌｉｓｔｉｐｅｓ）属の細菌が挙げられる。スピルリナは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）シアノバクテリアのバイオマスであり、メキシコ及び一部のアフリカの国で数世紀にわたってヒトにより消費されている。より近年では、スピルリナは、タンパク質及び多くの栄養素の豊富な供給源として認識されており、従って、栄養補助食品として一般に消費されている。スピルリナは、比較的安価であり、ベジタリアン、コーシャ（ｋｏｓｈｅｒ）適性であり、且つＧＭＰグレードで容易に入手可能であるため、細菌細胞培養用途でヘモグロビンに代わるものとして魅力的である。
特定の態様では、ヘモグロビン、ヘモグロビン誘導体及び／又は特定の実施形態では任意の動物性製品の非存在下でヘモグロビン依存性細菌の培養を可能にする方法及び組成物が提供される。ヘモグロビンの非存在下において、ヘモグロビン依存性細菌の増殖は、本明細書に提供される特定のヘモグロビン代替物質を細胞培地中に含めることによって達成される。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるシアノバクテリア（例えば、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属、例えばアルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）のシアノバクテリア）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるシアノバクテリアのバイオマス（例えば、スピルリナ）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるシアノバクテリアの成分（例えば、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属、例えばアルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）のシアノバクテリアの成分）（例えば、その可溶性成分）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができる緑藻である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができる緑藻の成分（例えば、可溶性成分）である。
従って、特定の態様では、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌を培養するための方法及び組成物が本明細書に提供される。いくつかの態様では、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない条件下でヘモグロビン依存性細菌を培養するのに有用である、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質を含む組成物（例えば、増殖培地）並びにそうした組成物を製造及び／又は使用する方法が本明細書に提供される。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、スピルリナ又はその成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるスピルリナ成分、例えば可溶性スピルリナ成分）である。例えば、スピルリナ又はその成分（例えば、その可溶性成分）を含む培地中でヘモグロビン依存性細菌を培養するための方法及び組成物が本明細書に提供される。いくつかの態様では、本明細書には、ヘモグロビン又はその誘導体がない条件下でヘモグロビン依存性細菌を培養するのに有用なスピルリナ又はその成分を含む組成物（例えば、培地）並びにそうした組成物を製造及び／又は使用する方法が本明細書に提供される。一部の実施形態では、スピルリナの成分は、クロロフィルＡを含む。
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌の培養に使用するための増殖培地が本明細書に提供され、この増殖培地は、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、ヘモグロビン依存性細菌を含む。特定の実施形態では、本明細書には、ヘモグロビン依存性細菌の増殖培地中でヘモグロビン又はその誘導体の代替物質として使用するための本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）が提供される。
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供され、この方法は、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中で（例えば、ヘモグロビン又はその誘導体の非存在下で）ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む。いくつかの態様では、ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供され、この方法は、（ａ）本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）とヘモグロビン依存性細菌とを増殖培地に添加するステップと；（ｂ）増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップとを含む。
特定の態様では、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）とヘモグロビン依存性細菌とを含む増殖培地を含む細菌組成物が提供される。
特定の態様では、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む培地中にヘモグロビン依存性細菌を含むバイオリアクターが本明細書に提供される。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供され、この方法は、本明細書に提供されるバイオリアクター内でヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む。
一部の実施形態では、増殖培地は、スピルリナを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌ、少なくとも０．７５ｇ／Ｌ、少なくとも１ｇ／Ｌ、少なくとも１．２５ｇ／Ｌ、少なくとも１．５ｇ／Ｌ、少なくとも１．７５ｇ／Ｌ、少なくとも２ｇ／Ｌ、少なくとも２．２５ｇ／Ｌ、少なくとも２．５ｇ／Ｌ、少なくとも２．７５ｇ／Ｌ、少なくとも３ｇ／Ｌ、少なくとも３．２５ｇ／Ｌ、少なくとも３．５ｇ／Ｌ、少なくとも３．７５ｇ／Ｌ、少なくとも４ｇ／Ｌ、少なくとも４．２５ｇ／Ｌのスピルリナを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌ且つ２ｇ／Ｌ以下のスピルリナを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約１ｇ／Ｌのスピルリナを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約２ｇ／Ｌのスピルリナを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及び／又はグルコースを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムＫ２ＨＰＯ４及び約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである。特定の実施形態では、増殖培地は、６．５のｐＨである。本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない。特定の実施形態では、増殖培地は、動物性製品を含まない。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス及び／又はシアノバクテリア成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるシアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス及び／又はシアノバクテリア成分）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質として機能することができるあらゆるシアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分を、本明細書に提供される方法及び組成物で使用することができる。特定の実施形態では、シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである。一部の実施形態では、シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである。一部の実施形態では、シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である。一部の実施形態では、シアノバクテリアは、スピルリナである。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻バイオマス及び／又は緑藻成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができる緑藻、緑藻バイオマス及び／又は緑藻成分）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質として機能することができるあらゆる緑藻、緑藻バイオマス及び／又は緑藻成分を、本明細書に提供される方法及び組成物で使用することができる。特定の実施形態では、緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである。一部の実施形態では、緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである。
本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、最適な増殖（即ち本明細書に記載のスピルリナ又はその成分の非存在下での最適な増殖）のためにヘモグロビン又はヘモグロビン誘導体の存在を必要とするあらゆる細菌であり得る。本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス・インディスティンクタス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｉｎｄｉｓｔｉｎｃｔｕｓ）、アリスティペス・シャヒイ（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ）、アリスティペス・チモネンシス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バクテロイデス・アシディファシエンス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ａｃｉｄｉｆａｃｉｅｎｓ）、バクテロイデス・セルロシリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）、バクテロイデス・エガーシイ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｅｇｇｅｒｔｈｉｉ）、バクテロイデス・インテスティナリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、バクテロイデス・ユニフォルミス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ）、コリンゼラ・アエロファシエンス（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ ａｅｒｏｆａｃｉｅｎｓ）、クロアシバシルス・エブリエンシス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｖｒｙｅｎｓｉｓ）、クロストリジウム・カダベリス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃａｄａｖｅｒｉｓ）、クロストリジウム・コクレアツム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｏｃｌｅａｔｕｍ）、キューティバクテリウム・アクネス（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）、エイセンベルギエラ種（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ ｓｐ．）、エリシペロトリクス種（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ ｓｐ．）、ユーバクテリウム・ハリイ（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｌｌｉｉ）／アナエロバクテリウム・ハリイ（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ ｈａｌｉｉ）、ユーバクテリウム・インフィルマム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆｉｒｍｕｍ）、メガスファエラ・ミクロヌシフォルミス（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ ｍｉｃｒｏｎｕｃｉｆｏｒｍｉｓ）、パラバクテロイデス・ジスタソニス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｄｉｓｔａｓｏｎｉｓ）、ペプトニフィラス・ラクリモリス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｌａｃｒｉｍａｌｉｓ）、ラリミクロビウム・ホミニス（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｈｏｍｉｎｉｓ）、シュトルウォルチア・サテレス（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ ｓａｔｅｌｌｅｓ）又はツリシバクター・サングイニス（Ｔｕｒｉｃｉｂａｃｔｅｒ ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）である。
本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種の株である。一部の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）のゲノム配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）の１６Ｓ配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）である。
一部の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０、２０１９年９月１０日寄託）のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＰＴＡ－１２６１４０）のゲノム配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＰＴＡ－１２６１４０）の１６Ｓ配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＰＴＡ－１２６１４０）である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質の１つ又は複数を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株に由来する。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６６９６、２０２０年３月５日寄託）のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＰＴＡ－１２６６９６）のゲノム配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＰＴＡ－１２６６９６）の１６Ｓ配列に対して少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．１％の配列同一性、少なくとも９９．２％の配列同一性、少なくとも９９．３％の配列同一性、少なくとも９９．４％の配列同一性、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％又は１００％の配列同一性）を含む株である。特定の実施形態では、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＰＴＡ－１２６６９６）である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス（Ａｌｌｉｓｔｉｐｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス（Ａｌｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａである。
一部の実施形態では、増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌ、少なくとも０．７５ｇ／Ｌ、少なくとも１ｇ／Ｌ、少なくとも１．２５ｇ／Ｌ、少なくとも１．５ｇ／Ｌ、少なくとも１．７５ｇ／Ｌ、少なくとも２ｇ／Ｌ、少なくとも２．２５ｇ／Ｌ、少なくとも２．５ｇ／Ｌ、少なくとも２．７５ｇ／Ｌ、少なくとも３ｇ／Ｌ、少なくとも３．２５ｇ／Ｌ、少なくとも３．５ｇ／Ｌ、少なくとも３．７５ｇ／Ｌ、少なくとも４ｇ／Ｌ又は少なくとも４．２５ｇ／Ｌの、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌ且つ２ｇ／Ｌ以下の、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約１ｇ／Ｌの、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約２ｇ／Ｌの、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及び／又はグルコースを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムＫ２ＨＰＯ４及び約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む。一部の実施形態では、増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである。特定の実施形態では、増殖培地は、約６．５のｐＨである。
本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない。特定の実施形態では、増殖培地は、動物性製品を含まない。
本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中において、ヘモグロビン代替物質がないこと以外には（例えば、ヘモグロビンの非存在下の）同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する。一部の実施形態では、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度は、ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、少なくとも２００％、少なくとも２１０％、少なくとも２２０％、少なくとも２３０％、少なくとも２４０％、少なくとも２５０％、少なくとも２６０％、少なくとも２７０％、少なくとも２８０％、少なくとも２９０％、少なくとも３００％、少なくとも３１０％、少なくとも３２０％、少なくとも３３０％、少なくとも３４０％、少なくとも３５０％、少なくとも３６０％、少なくとも３７０％、少なくとも３８０％、少なくとも３９０％又は少なくとも４００％高い。一部の実施形態では、増幅速度は、２００％～４００％上昇する。
本明細書に提供される方法及び組成物の特定の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中において、ヘモグロビン代替物質がないこと以外には（例えば、ヘモグロビンの非存在下の）同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中において、ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、少なくとも２００％、少なくとも２１０％、少なくとも２２０％、少なくとも２３０％、少なくとも２４０％、少なくとも２５０％、少なくとも２６０％、少なくとも２７０％、少なくとも２８０％、少なくとも２９０％、少なくとも３００％、少なくとも３１０％、少なくとも３２０％、少なくとも３３０％、少なくとも３４０％、少なくとも３５０％、少なくとも３６０％、少なくとも３７０％、少なくとも３８０％、少なくとも３９０％又は少なくとも４００％高い細胞密度まで増殖する。一部の実施形態では、細菌細胞密度は、２００％～４００％高い。
特定の態様では、本明細書に開示されるヘモグロビン依存性細菌と、本明細書に開示されるヘモグロビン代替物質とを含む細菌組成物（例えば、医薬組成物）が提供される。
ビタミンＢ１２及び／又はＦｅＣｌ２は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進するためにヘモグロビンの代わりに用いることができないことを示す。図１は、補足物質を一切含まない増殖培地と比較した、０．０２ｇ／Ｌ若しくは０．２ｇ／ＬのビタミンＢ１２、ＦｅＣｌ２又は両方の組合せを補充した増殖培地中で培養されるヘモグロビン依存性細菌プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の増殖曲線である。 スピルリナは、ヘモグロビンの非存在下でヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するが、クロロフィリンは支持しないことを示す。図２は、補足物質を一切含まない増殖培地と比較した、０．０２ｇ／Ｌ若しくは０．２ｇ／Ｌのスピルリナ又はクロロフィリンを補充した増殖培地中で培養されるプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の増殖曲線を示す。 水に溶解させたスピルリナは、０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させたスピルリナより良好に機能することを示す。図３は、水又は０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させた０．０２ｇ／Ｌ若しくは０．２ｇ／Ｌのスピルリナを補充した増殖培地及びヘモグロビンの非存在下の培地中で培養されるプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の増殖曲線を示す。 スピルリナ及びその可溶性成分は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するためにヘモグロビンの代わりに用いられ得ることを示す。図４は、ヘモグロビン又は陰性対照を補充した増殖培地と比較した、０．２ｇ／Ｌ若しくは２ｇ／Ｌのスピルリナ（濾過若しくは非濾過）又は０．０５ｇ／Ｌ若しくは０．１ｇ／Ｌのクロロフィリンを補充した増殖培地中で培養されるプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の増殖曲線を示す。 スピルリナと一緒に（ヘモグロビンの非存在下で）培養したヘモグロビン依存性細菌は、ヘモグロビンと一緒に培養したものと機能的に均等であることを示す。散布図は、遅延型過敏症（ＤＴＨ）のモデルマウスにおける様々な培地中で増殖させたプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の有効性を示す。各コホートのマウス（１コホート当たり５匹）に、ビヒクル；１ｍｇ／ｋｇのデキサメタゾン；１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＢＭ１培地（Ｂ１２なし）で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマス（Ｖ３）；１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＢＭ１培地で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマス（Ｖ４）；１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＳＰＹＧ１培地で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマス（Ｖ１）；又はヘモグロビンを含む増殖培地で培養した１０ｍｇ粉末のプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）を投与した。散布図上の棒は、中央値及び標準偏差を表す。アスタリスク（＊＊＊及び＊＊＊＊）は、値が対照と比較して統計的に有意であることを示す。 スピルリナは、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するためにヘモグロビンの代わりに用いられ得ることを示す。図６は、０．０２ｇ／Ｌのヘモグロビン、ＦｅＣｌ２又は陰性対照を補充した増殖培地と比較した、１ｇ／Ｌのスピルリナを補充したＳＰＹ増殖培地（５ｇ／ＬのＮ－アセチル－グルコサミン（ＮＡＧ）を含む）中で培養されるフルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ａの増殖曲線を示す。 スピルリナは、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するためにヘモグロビンの代わりに用いられ得ることを示す。図７は、０．０２ｇ／Ｌのヘモグロビン、ＦｅＣｌ２又は陰性対照を補充した増殖培地と比較した、１ｇ／Ｌのスピルリナを補充したＳＰＹ増殖培地（５ｇ／ＬのＮ－アセチル－グルコサミン（ＮＡＧ）を含む）中で培養されるフルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＰＴＡ－１２６６９６）の増殖曲線を示す。ＮＡＧは、Ｎ－アセチル－グルコサミンを指す。 スピルリナは、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するためにヘモグロビンの代わりに用いられ得ることを示す。図８は、０．０２ｇ／Ｌのヘモグロビン、ＦｅＣｌ２又は陰性対照を補充した増殖培地と比較した、１ｇ／Ｌのスピルリナを補充したＳＰＹＧ５増殖培地中で培養されるパラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａの増殖曲線を示す。ＳＰＹＧ５は、５ｇ／Ｌのグルコースを補充したＳＰＹ増殖培地（表６）を指す。 パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂ増殖は、ヘモグロビンと比較して、スピルリナの添加により部分的に回復されることを示す。ヘモグロビン又はスピルリナを添加しない場合、増殖は、観察されない。 ヘモグロビン含有培地又はスピルリナ若しくはヘモグロビンを含まない培地中での同じ株の増殖と比較した、スピルリナの存在下でのフェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）株Ａの増殖を示す。 バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａの増殖は、その増殖培地中でのスピルリナの存在により支持されることを示す。培地にスピルリナを添加しない場合、株は、増殖しない。 ヘモグロビン含有培地又はスピルリナ若しくはヘモグロビンを含まない培地中での同じ株の増殖と比較した、スピルリナ含有培地アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａの増殖を示す。
特定の態様では、ヘモグロビン、ヘモグロビン誘導体及び／又は特定の実施形態では任意の動物性製品の非存在下でヘモグロビン依存性細菌の培養を可能にする方法及び組成物が提供される。具体的には、培地中にヘモグロビンの代わりに使用されて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができるヘモグロビン代替物質が本明細書に開示される。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア（例えば、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属、例えばアルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）のシアノバクテリア）、シアノバクテリアのバイオマス（例えば、スピルリナ）、シアノバクテリアの成分（例えば、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属、例えばアルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／若しくはアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）のシアノバクテリアの成分並びに／又はスピルリナの成分）、緑藻及び／又は緑藻の成分である。
従って、特定の態様では、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌を培養するための方法及び組成物が本明細書に提供される。いくつかの態様では、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない条件下でヘモグロビン依存性細菌を培養するのに有用である、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質を含む組成物（例えば、増殖培地）並びにそうした組成物を製造及び／又は使用する方法が本明細書に提供される。
定義
本明細書で使用される場合、「嫌気性条件」は、通常の大気条件と比較して低いレベルの酸素を含む条件である。例えば、一部の実施形態では、嫌気性条件は、酸素レベルが８％以下の酸素の分圧（ｐＯ２）である条件である。いくつかの事例では、嫌気性条件は、ｐＯ２が２％以下である条件である。いくつかの事例では、嫌気性条件は、ｐＯ２が０．５％以下である条件である。特定の実施形態では、嫌気性条件は、酸素以外のガス、例えば窒素及び／又は二酸化炭素（ＣＯ２）でバイオリアクター及び／又は培養フラスコをパージすることによって達成され得る。
本明細書で使用される場合、ヘモグロビンの「誘導体」は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができるヘモグロビン由来の化合物を含む。ヘモグロビンの誘導体の例として、ヘミン及びプロトポリフィリンがある。
「遺伝子」という用語は、生物学的機能に関連するあらゆる核酸を指すために広義に使用される。「遺伝子」という用語は、特定のゲノム配列及びそのゲノム配列によりコードされるｃＤＮＡ又はｍＲＮＡに適用される。
２つの核酸分子の核酸配列間の「同一性」は、例えば、Ｐｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４ （他のプログラムには、ＧＣＧプログラムパッケージ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２（Ｉ）：３８７ （１９８４））、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、ＦＡＳＴＡ Ａｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌｅｃ Ｂｉｏｌ ２１５：４０３（１９９０）； Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｈｕｇｅ Ｃｏｍｐｕｔｅｒｓ，Ｍａｒｔｉｎ Ｊ．Ｂｉｓｈｏｐ，ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，１９９４及びＣａｒｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．（１９８８）ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈ ４８：１０７３が含まれる）に記載されているようにデフォルトパラメータを用いる「ＦＡＳＴＡ」プログラムなどの公知のコンピュータアルゴリズムを使用して、同一性のパーセンテージとして決定することができる。例えば、国立バイオテクノロジー情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）のデータベースのＢＬＡＳＴ機能を使用して同一性を決定することができる。他の市販又は公的に利用可能なプログラムには、ＤＮＡＳｔａｒ「ＭｅｇＡｌｉｇｎ」プログラム（Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）及びＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ（ＵＷＧ）「Ｇａｐ」プログラム（Ｍａｄｉｓｏｎ Ｗｉｓ．））がある。
「マイクロバイオーム」は、対象又は患者の身体部位上に存在するか又は身体部位中に常在する微生物を広く指す。マイクロバイオーム中の微生物は、細菌、ウイルス、真核微生物及び／又はウイルスを含み得る。マイクロバイオーム中の個々の微生物は、代謝的に活性、休眠中、潜伏性であるか若しくは胞子として存在するものであり得るか、浮遊状態で若しくはバイオフィルム中に存在するか、又は持続的に若しくは一時的にマイクロバイオーム中に存在するものであり得る。マイクロバイオームは、片利共生若しくは健康状態のマイクロバイオームであり得るか、又は疾患状態のマイクロバイオームであり得る。マイクロバイオームは、対象若しくは患者に固有であり得るか、又はマイクロバイオームの構成成分は、健康状態（例えば、前癌状態若しくは癌状態）若しくは処置条件（例えば、抗生物質による処置、様々な微生物への曝露）の変化のために調節、導入若しくは枯渇され得る。いくつかの態様では、マイクロバイオームは、粘膜表面で生じる。いくつかの態様では、マイクロバイオームは、腸内マイクロバイオームである。いくつかの態様では、マイクロバイオームは、腫瘍マイクロバイオームである。
「菌株」とは、同じ細菌種の密接に関連するメンバーと区別できるような遺伝子シグネチャーを有する細菌種のメンバーを指す。遺伝子シグネチャーは、少なくとも１つの遺伝子の全て又は一部の欠如、少なくとも１つの調節領域（例えば、プロモータ、ターミネータ、リボスイッチ、リボソーム結合部位）の全て又は一部の欠如、少なくとも１つの天然プラスミドの欠如（「キュアリング」）、少なくとも１つの組換え遺伝子の存在、少なくとも１つの変異遺伝子の存在、少なくとも１つの外来遺伝子（別の種に由来する遺伝子）の存在、少なくとも１つの変異した調節領域（例えば、プロモータ、ターミネータ、リボスイッチ、リボソーム結合部位）の存在、少なくとも１つの非天然プラスミドの存在、少なくとも１つの抗生物質耐性カセットの存在又はそれらの組合せであり得る。異なる菌株間の遺伝子シグネチャーは、ＰＣＲ増幅及び任意選択でそれに続く目的のゲノム領域又は全ゲノムのＤＮＡ配列決定によって同定することができる。ある菌株が（同じ種の別の菌株と比較して）抗生物質耐性を獲得若しくは喪失した場合又は生合成能力（栄養要求性菌株など）を獲得若しくは喪失した場合、それぞれ抗生物質を使用した選択又は栄養素／代謝産物を使用した逆選択によって菌株を区別することができる。
ヘモグロビン依存性細菌
いくつかの態様では、ヘモグロビン依存性細菌を培養するための方法及び組成物が本明細書に提供される。本明細書で使用される場合、「ヘモグロビン依存性細菌」とは、ヘモグロビン、ヘモグロビン誘導体又はスピルリナを含有する同じ増殖培地と比較して、ヘモグロビン、ヘモグロビン誘導体又はスピルリナを含まない増殖培地中で培養される場合、増殖速度が遅くなり、且つ／又は最大細胞密度が低減する細菌を指す。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌から選択される。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６６９６）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株は、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ（ＰＴＡ－１２６６９６）のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス（Ａｌｌｉｓｔｉｐｅｓ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス（Ａｌｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）種のものである。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、アリスティペス・インディスティンクタス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｉｎｄｉｓｔｉｎｃｔｕｓ）、アリスティペス・シャヒイ（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ）、アリスティペス・チモネンシス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バクテロイデス・アシディファシエンス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ａｃｉｄｉｆａｃｉｅｎｓ）、バクテロイデス・セルロシリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）、バクテロイデス・エガーシイ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｅｇｇｅｒｔｈｉｉ）、バクテロイデス・インテスティナリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、バクテロイデス・ユニフォルミス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ）、コリンゼラ・アエロファシエンス（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ ａｅｒｏｆａｃｉｅｎｓ）、クロアシバシルス・エブリエンシス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｖｒｙｅｎｓｉｓ）、クロストリジウム・カダベリス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃａｄａｖｅｒｉｓ）、クロストリジウム・コクレアツム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｏｃｌｅａｔｕｍ）、キューティバクテリウム・アクネス（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）、エイセンベルギエラ種（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ ｓｐ．）、エリシペロトリクス種（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ ｓｐ．）、ユーバクテリウム・ハリイ（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｌｌｉｉ）／アナエロバクテリウム・ハリイ（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ ｈａｌｉｉ）、ユーバクテリウム・インフィルマム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆｉｒｍｕｍ）、メガスファエラ・ミクロヌシフォルミス（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ ｍｉｃｒｏｎｕｃｉｆｏｒｍｉｓ）、パラバクテロイデス・ジスタソニス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｄｉｓｔａｓｏｎｉｓ）、ペプトニフィラス・ラクリモリス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｌａｃｒｉｍａｌｉｓ）、ラリミクロビウム・ホミニス（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｈｏｍｉｎｉｓ）、シュトレウォーシア・サテレス（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ ｓａｔｅｌｌｅｓ）又はツリシバクター・サングイニス（Ｔｕｒｉｃｉｂａｃｔｅｒ ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列（例えば、ゲノム配列、１６Ｓ配列、ＣＲＩＳＰＲ配列）に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性（例えば、少なくとも９９．５％の配列同一性、少なくとも９９．６％の配列同一性、少なくとも９９．７％の配列同一性、少なくとも９９．８％の配列同一性、少なくとも９９．９％の配列同一性）を含む株である。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、表１に列記される１つ若しくは複数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５若しくはそれを超える）のタンパク質及び／又は表１に列記されるタンパク質をコードする１つ若しくは複数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５若しくはそれを超える）の遺伝子を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）の菌株である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、表１に列記されるタンパク質の全て及び／又は表１に列記されるタンパク質をコードする遺伝子の全てを含む。
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一部の実施形態では、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌は、表２に列記される１つ若しくは複数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５若しくはそれを超える）のタンパク質及び／又は表２に列記されるタンパク質をコードする１つ若しくは複数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５若しくはそれを超える）の遺伝子を含まないか又は実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である。一部の実施形態では、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌は、表２に列記されるタンパク質の全て及び／又は表２に列記されるタンパク質をコードする遺伝子の全てを含まない。
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一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、表１に列記される１つ若しくは複数のタンパク質を含み、且つ表２に列記される１つ若しくは複数のタンパク質を含まないか又は実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株は、表１に列記されるタンパク質の全て及び／又は表１に列記されるタンパク質をコードする遺伝子の全てを含み、且つ表２に列記されるタンパク質の全て及び／又は表２に列記されるタンパク質をコードする遺伝子の全てを含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である。
ヘモグロビン代替物質
本明細書に開示されるように、特定の藻類、藻類バイオマス及び藻類由来成分は、ヘモグロビンの代わりに培地中で使用されて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を促進することができる。
本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質は、ヘモグロビン又はその誘導体の非存在下でヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持する。本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質は、より低い量のヘモグロビン又はその誘導体の使用と共にヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持することもできる。例えば、培養物が、本明細書に記載のヘモグロビン代替物質と組み合わせて、より低い量のヘモグロビン（例えば、約０．０２ｇ／Ｌ未満のヘモグロビン、例えば約０．０１ｇ／Ｌ又は約０．００５ｇ／Ｌ以下のヘモグロビン）を含有しても、典型的な量のヘモグロビンを含有する培地中の同じ細菌の増殖と比較して依然として同等のヘモグロビン依存性細菌の増殖が達成される。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、スピルリナ又はその成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるスピルリナ成分、例えば可溶性スピルリナ成分）である。本明細書で開示される通り、スピルリナ成分は、濾過後にヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができ、これは、スピルリナの可溶性成分がヘモグロビン代替物質であることを示している。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス及び／又はシアノバクテリア成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができるシアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス及び／又はシアノバクテリア成分）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質として機能することができるあらゆるシアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分を、本明細書に提供される方法及び組成物で使用することができる。特定の実施形態では、シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである。一部の実施形態では、シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである。一部の実施形態では、シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物で使用されるヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻バイオマス及び／又は緑藻成分（即ちヘモグロビンの代わりに用いられて、そうでなければヘモグロビン依存性の細菌の増殖を支持することができる緑藻、緑藻バイオマス及び／又は緑藻成分）である。特定の実施形態では、ヘモグロビン代替物質として機能することができるあらゆる緑藻、緑藻バイオマス又は緑藻成分を、本明細書に提供される方法及び組成物で使用することができる。特定の実施形態では、緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである。一部の実施形態では、緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである。
一部の実施形態では、例えば増殖培地の他の成分と合わせる前に、ヘモグロビン代替物質を滅菌する。滅菌は、超高温（ＵＨＴ）処理、オートクレーブ処理又は濾過により行われ得る。一部の実施形態では、ヘモグロビン代替物質をオートクレーブ処理する。一部の実施形態では、ヘモグロビン代替物質を濾過する。
増殖培地
一部の実施形態では、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質を含む増殖培地が本明細書に提供される。特定の実施形態では、増殖培地は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持するのに十分な量の本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分（例えば、可溶性成分））を含む。特定の実施形態では、増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌ、少なくとも０．７５ｇ／Ｌ、少なくとも１ｇ／Ｌ、少なくとも１．２５ｇ／Ｌ、少なくとも１．５ｇ／Ｌ、少なくとも１．７５ｇ／Ｌ、少なくとも２ｇ／Ｌ、少なくとも２．２５ｇ／Ｌ、少なくとも２．５ｇ／Ｌ、少なくとも２．７５ｇ／Ｌ、少なくとも３ｇ／Ｌ、少なくとも３．２５ｇ／Ｌ、少なくとも３．５ｇ／Ｌ、少なくとも３．７５ｇ／Ｌ、少なくとも４ｇ／Ｌ又は少なくとも４．２５ｇ／Ｌの、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む。一部の実施形態では、増殖培地は、約１ｇ／Ｌの、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、約２ｇ／Ｌの、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質を含有する。一部の実施形態では、本明細書に提供される増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌ且つ３ｇ／Ｌ以下の、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌ且つ２ｇ／Ｌ以下の、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含有しない。本明細書に提供される方法及び組成物の一部の実施形態では、増殖培地は、動物性製品を含有しない。
一部の実施形態では、増殖培地は、スピルリナ、シアノバクテリア又は緑藻の成分、例えば本明細書に開示されるスピルリナ、シアノバクテリア又は緑藻の可溶性成分を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、本明細書に開示されるスピルリナ、シアノバクテリア又は緑藻の可溶性成分を含有する。例えば、スピルリナ溶液（例えば、再懸濁スピルリナ溶液（例えば、凍結乾燥バイオマスからの液体混合物）から得られる上清を増殖培地に使用することができる（例えば、上清は、スピルリナ溶液を濾過又は遠心分離した後に得られる））。
一部の実施形態では、増殖培地は、糖、酵母エキス、植物性ペプトン、緩衝剤、塩、微量元素、界面活性剤、消泡剤及び／又はビタミンを含有し得る。
一部の実施形態では、増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及び／又はグルコースを含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、１ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、０ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、リン酸一カリウムを含有しない。
一部の実施形態では、増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、０ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、塩化アンモニウムを含有しない。
一部の実施形態では、増殖培地は、０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、グルシデックス２１Ｄを含有しない。
一部の実施形態では、増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／Ｌのグルコースを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、５ｇ／Ｌのグルコースを含有する。
一部の実施形態では、増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのＮ－アセチル－グルコサミン（ＮＡＧ）を含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、１０ｇ／ＬのＮＡＧを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、５ｇ／ＬのＮＡＧを含有する。
特定の実施形態では、増殖培地は、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウム、約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウム、約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウム、約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄ及び／又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、表３の培地である。
特定の実施形態では、増殖培地は、本明細書に提供されるヘモグロビン代替物質、即ち約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウム、約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌ及び／又は約５ｇ／Ｌのグルコースを含有する。一部の実施形態では、増殖培地は、表４の培地である。
特定の実施形態では、増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである。一部の実施形態では、増殖培地は、約６．５のｐＨである。
一部の実施形態では、増殖培地に添加する前に、シアノバクテリア又はそのバイオマス、例えばスピルリナを凍結乾燥バイオマスからの液体培地として調製し、オートクレーブ処理又は濾過により滅菌する。一部の実施形態では、スピルリナの凍結乾燥バイオマスを増殖培地に添加した後、これを以下に説明するように滅菌する。
一部の実施形態では、培地を滅菌する。滅菌は、超高温（ＵＨＴ）処理、オートクレーブ処理又は濾過により行われ得る。ＵＨＴ処理は、非常に高い温度で短時間実施される。ＵＨＴの範囲は、１３５～１８０℃であり得る。例えば、培地を１３５℃で１０～３０秒滅菌することができる。
培養方法
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進する方法及び／又は組成物が本明細書に提供される。こうした方法は、本明細書に提供される増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含み得る。これらの方法は、本明細書に開示される増殖培地の温度及びｐＨを維持するステップを含み得る。培養は、比較的小さい体積の増殖培地（例えば、１Ｌ）中で開始し得、そこで細菌を対数増殖期に到達させる。こうした培養物をより大きい体積の増殖培地（例えば、２０Ｌ）に移し、さらに増殖させて、より大きいバイオマスを達成する。バイオマスの最終量の必要に応じて、そのような移し替えを２回以上繰り返し得る。本方法は、バイオリアクター内でのヘモグロビン依存性細菌のインキュベーションを含み得る。
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌を３５℃～３９℃の温度でインキュベートする。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を約３７℃の温度でインキュベートする。
特定の実施形態では、本明細書に提供される方法及び／又は組成物は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖速度を高めることから、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中において、ヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する。一部の実施形態では、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度は、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、少なくとも２００％、少なくとも２１０％、少なくとも２２０％、少なくとも２３０％、少なくとも２４０％、少なくとも２５０％、少なくとも２６０％、少なくとも２７０％、少なくとも２８０％、少なくとも２９０％、少なくとも３００％、少なくとも３１０％、少なくとも３２０％、少なくとも３３０％、少なくとも３４０％、少なくとも３５０％、少なくとも３６０％、少なくとも３７０％、少なくとも３８０％、少なくとも３９０％又は少なくとも４００％高い。一部の実施形態では、増幅速度は、約２００％～約４００％上昇する。速度は、所与の時間量内に到達した細胞密度（例えば、６００ｎｍの波長での光学密度（ＯＤ６００）により測定される）として測定され得る。特定の実施形態では、こうした速度は、細菌の対数増殖期（又は指数増殖期）中に測定及び比較され、任意選択で、対数期は、初期対数期である。
特定の実施形態では、本明細書に提供される方法及び／又は組成物は、細菌細胞密度を増大することから、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較して高い細菌細胞密度まで増殖する。一部の実施形態では、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ又はその成分）を含む増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌は、本明細書に開示のヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中でヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、少なくとも２００％、少なくとも２１０％、少なくとも２２０％、少なくとも２３０％、少なくとも２４０％、少なくとも２５０％、少なくとも２６０％、少なくとも２７０％、少なくとも２８０％、少なくとも２９０％、少なくとも３００％、少なくとも３１０％、少なくとも３２０％、少なくとも３３０％、少なくとも３４０％、少なくとも３５０％、少なくとも３６０％、少なくとも３７０％、少なくとも３８０％、少なくとも３９０％又は少なくとも４００％高い細胞密度まで増殖する。一部の実施形態では、細菌細胞密度は、約２００％～約４００％高い。細胞密度は、細菌増殖の定常期で測定され得（例えば、ＯＤ６００又は細胞計数により）、任意選択で、定常期は、初期定常期である。一部の実施形態では、定常期は、指数増殖期後に増殖速度が遅くなる段階として決定される（例えば、増殖曲線から）。他の実施形態では、定常期は、培地中の低いグルコースレベルによって決定される。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法は、嫌気性雰囲気下でヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む。特定の態様では、ＣＯ２を含む嫌気性雰囲気下でヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供される。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、１％超のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、５％超のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１１％、少なくとも１２％、少なくとも１３％、少なくとも１４％、少なくとも１５％、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％又は少なくとも２５％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、１０％～４０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、２０％～３０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２１％、約２２％、約２３％、約２４％、約２５％、約２６％、約２７％、約２８％、約２９％、約３０％、約３１％、約３２％、約３３％、約３４％、約３５％、約３６％、約３７％、約３８％、約３９％又は約４０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２を含む。
特定の態様では、嫌気性雰囲気は、Ｎ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、９５％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、９０％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、９５％未満、９２％未満、９０％未満、８７％未満、８５％未満、８２％未満、８０％未満、７７％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、８５％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、８０％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、６５％～８５％のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、７０％～８０％のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約６５％、約６６％、約６７％、約２８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約７５％のＮ２を含む。
一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２０％のＣＯ２と約８０％のＮ２とを含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約３０％のＣＯ２と約７０％のＮ２とを含む。
従って、一部の実施形態では、従来の嫌気性培養条件と比較して高いレベルのＣＯ２（例えば、１％超のＣＯ２のレベル、例えば５％超のＣＯ２のレベル、例えば約２５％ＣＯ２のレベルで）を含む嫌気性条件下でヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供される。特定の実施形態では、従来の嫌気性培養条件と比較して高いレベルのＣＯ２（例えば、１％超のＣＯ２のレベル、例えば約２５％ＣＯ２のレベルで）を含む条件下で培養されるヘモグロビン依存性細菌を含むバイオリアクターが本明細書に提供される。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物は、従来の培養条件と比較して細菌収率の増加をもたらす。
特定の態様では、従来の嫌気性培養条件と比較して低いレベルのＮ２（例えば、９５％未満のＮ２のレベル、例えば９０％未満のＮ２のレベル、例えば約７５％のＮ２のレベルで）を含む嫌気性条件下でヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供される。特定の実施形態では、従来の嫌気性条件と比較して低いレベルのＮ２（例えば、９５％未満のＮ２のレベル、例えば約７５％のＮ２のレベルで）を含む条件下で培養されるヘモグロビン依存性細菌を含むバイオリアクターが本明細書に提供される。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法及び組成物は、従来の培養条件と比較して増加した細菌収率をもたらす。
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供され、この方法は、ａ）１％超のＣＯ２を含む嫌気性ガス混合物でバイオリアクターをパージするステップと；ｂ）ステップａ）でパージされたバイオリアクター内でヘモグロビン依存性細菌を培養するステップとを含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、１％超のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、少なくとも約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２１％、約２２％、約２３％、約２４％、約２５％、約２６％、約２７％、約２８％、約２９％、約３０％、約３１％、約３２％、約３３％、約３４％、約３５％、約３６％、約３７％、約３８％、約３９％又は約４０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、少なくとも２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、約２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％又は４０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、５％～３５％のＣＯ２、１０％～４０％のＣＯ２、１０％～３０％のＣＯ２、１５％～３０％のＣＯ２、２０％～３０％のＣＯ２、２２％～２８％のＣＯ２又は２４％～２６％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、５％超のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、１０％～４０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、２０％～３０％のＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２を含む。
特定の態様では、ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法が本明細書に提供され、この方法は、ａ）９５％未満のＮ２を含む嫌気性ガス混合物でバイオリアクターをパージするステップと；ｂ）ステップａ）でパージされたバイオリアクター内でヘモグロビン依存性細菌を培養するステップとを含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、９５％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、９５％未満、９２％未満、９０％未満、８７％未満、８５％未満、８２％未満、８０％未満、７７％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、約６５％、約６６％、約６７％、約２８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、９５％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、９０％未満のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、６５％～８５％のＮ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、７０％～８０％のＮ２ＣＯ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、約７５％のＮ２を含む。
一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される。一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約２０％のＣＯ２と約８０％のＮ２とを含む。一部の実施形態では、嫌気性雰囲気は、約３０％のＣＯ２と約７０％のＮ２とを含む。
一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、約１：９９、約２：９８、約３：９７、約４：９６、約５：９５、約６：９４、約７：９３、約８：９２、約９：９１、約１０：９０、１１：８９、約１２：８８、約１３：８７、約１４：８６、約１５：８５、約１６：８４、約１７：８３、約１８：８２、約１９：８１、約２０：８０、２１：７９、約２２：７８、約２３：７７、約２４：７６、約２５：７５、約２６：７４、約２７：７３、約２８：７２、約２９：７１、約３０：７０、３１：６９、約３２：６８、約３３：６７、約３４：６６、約３５：６５、約３６：６４、約３７：６３、約３８：６２、約３９：６１又は約４０：５０のＣＯ２：Ｎ２を含む。一部の実施形態では、嫌気性ガス組成物は、バイオリアクター内に約２５：７５の比でＣＯ２とＮ２とを含む雰囲気を提供する。
一部の実施形態では、嫌気性ガス混合物は、培養工程中、バイオリアクターに連続的に添加される。一部の実施形態では、連続的に添加される嫌気性ガス混合物は、０．０１～０．１ｖｖｍの速度で添加される。一部の実施形態では、連続的に添加される嫌気性ガス混合物は、０．０２ｖｖｍの速度で添加される。一部の実施形態では、連続的に添加される嫌気性ガス混合物は、前述したガス混合物のいずれか１つを含む。
一部の実施形態では、本明細書に提供される方法は、ヘモグロビン依存性細菌で培地を接種するステップをさらに含み、ここで、細菌は、本明細書に記載の方法に従って増殖培地中で培養される。一部の実施形態では、接種されるヘモグロビン依存性細菌の体積は、増殖培地の０．０１％～１０％ｖ／ｖ（例えば、増殖培地の約０．１％ｖ／ｖ、増殖培地の約０．５％ｖ／ｖ、増殖培地の約１％ｖ／ｖ、増殖培地の約５％ｖ／ｖ）である。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌の体積は、約１ｍＬである。
一部の実施形態では、接種材料は、フラスコ又は小型のバイオリアクター内で調製することができ、そこで増殖をモニターする。例えば、接種材料は、バイオリアクター総容積の約０．１％ｖ／ｖ～５％ｖ／ｖであり得る。一部の実施形態では、接種材料は、バイオリアクター総容積の０．１～３％ｖ／ｖ、０．１～１％ｖ／ｖ、０．１～０．５％ｖ／ｖ又は０．５～１％ｖ／ｖである。一部の実施形態では、接種材料は、バイオリアクター総容積の約０．１％ｖ／ｖ、約０．２％ｖ／ｖ、約０．３％ｖ／ｖ、約０．４％ｖ／ｖ、約０．５％ｖ／ｖ、約０．６％ｖ／ｖ、約０．７％ｖ／ｖ、約０．８％ｖ／ｖ、約０．９％ｖ／ｖ、約１％ｖ／ｖ、約１．５％ｖ／ｖ、約２％ｖ／ｖ、約２．５％ｖ／ｖ、約３％ｖ／ｖ、約４％ｖ／ｖ又は約５％ｖ／ｖである。
一部の実施形態では、接種前に、所望のｐＨ及び温度の増殖培地を用いてバイオリアクターを調製する。培地の初期ｐＨは、プロセス設定点と異なり得る。ｐＨストレスは、低細胞濃度で決定することができ；初期ｐＨは、ｐＨ７．５とプロセス設定点との間であり得る。例えば、ｐＨは、４．５～８．０、好ましくは６．５に設定され得る。発酵工程中、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水酸化アンモニウムを使用して、ｐＨを調節することができる。温度は、２５℃～４５℃、例えば３７℃に調節され得る。
一部の実施形態では、菌株及び接種材料のサイズに応じて、バイオリアクター発酵時間は、変動し得る。例えば、発酵時間は、５時間～４８時間で変動し得る。一部の実施形態では、発酵時間は、５時間～２４時間、８時間～２４時間、８時間～１８時間、８時間～１６時間、８時間～１４時間、１０時間～２４時間、１０時間～１８時間、１０時間～１６時間、１０時間～１４時間、１０時間～１２時間、１２時間～２４時間、１２時間～１８時間、１２時間～１６時間又は１２時間～１４時間で変動し得る。
一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌の培養は、５０～３００のＲＰＭで培養物を攪拌するステップを含む。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、約１５０のＲＰＭで攪拌する。
一部の実施形態では、培養方法は、ヘモグロビン依存性細菌を少なくとも５時間（例えば、少なくとも１０時間）培養するステップを含む。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１０～２４時間培養する。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１４～１６時間培養する。一部の実施形態では、本方法は、約５％ｖ／ｖの培養細胞を増殖培地に接種するステップをさらに含む。一部の実施形態では、増殖培地は、体積が約２０Ｌである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１０～２４時間培養する。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１２～１４時間培養する。一部の実施形態では、本方法は、約０．５％ｖ／ｖの培養細胞を増殖培地に接種するステップをさらに含む。一部の実施形態では、増殖培地は、体積が約３５００Ｌである。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１０～２４時間培養する。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を１２～１４時間培養する。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌を少なくとも定常期に達するまで培養する。
特定の実施形態では、培養方法は、培養細菌を採取するステップをさらに含む。採取時間は、グルコースレベルが２ｇ／Ｌ未満であるか、又は定常期に達したときのいずれかに基づき得る。一部の実施形態では、本方法は、採取後に培養細菌を遠心分離する（例えば、細胞ペーストを生成するために）ステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、細胞ペーストを安定剤溶液で希釈して、細胞スラリーを生成するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、細胞スラリーを凍結乾燥して、粉末を生成するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、粉末をガンマ線で照射するステップをさらに含む。
例えば、一部の実施形態では、発酵が完了したら、培養物を冷却し（例えば、１０℃まで）、遠心分離して、細胞ペーストを収集する。安定剤を細胞ペーストに添加して、入念に混合し得る。採取ステップは、連続的遠心分離により実施され得る。生成物を所望の最終濃度まで様々な賦形剤と一緒に再懸濁し得る。低温保護又は凍結乾燥中の保護のために、賦形剤を添加することができる。賦形剤として、限定はされないが、スクロース、トレハロース若しくはラクトースを挙げることができるか、又はこれらを緩衝剤及び抗酸化剤と混合し得る。凍結乾燥前に、細胞ペレットの小滴を賦形剤と混合してから液体窒素に浸漬し得る。
特定の実施形態では、細胞スラリーを凍結乾燥し得る。生菌を含む材料の凍結乾燥は、一次乾燥から開始し得る。一次乾燥段階中に氷を除去する。この場合、真空を生成し、適切な量の熱を材料に供給して、氷を昇華させる。二次乾燥段階において、生成物に結合した水分子を除去する。その際、温度を一次乾燥段階より高く上昇させて、水分子と生成物との間に形成されたあらゆる物理化学的相互作用を破壊する。また、この段階中の脱着を増強するためにさらに減圧し得る。凍結乾燥工程が完了したら、チャンバーを不活性ガス、例えば窒素で充填し得る。乾燥条件下で凍結乾燥器内に生成物を密閉し、大気水及び汚染物質への曝露を防ぎ得る。凍結乾燥した物質をガンマ線（例えば、１７．５ｋＧｙ）照射し得る。
バイオリアクター
特定の態様では、本明細書に記載の増殖培地（即ち本明細書に開示のヘモグロビン代替物質（例えば、スピルリナ若しくはその成分）及び／又は本明細書に記載のヘモグロビン依存性細菌を含有する増殖培地）を含むバイオリアクターが本明細書に提供される。一部の実施形態では、ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌（例えば、本明細書に記載のプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株）である。一部の実施形態では、こうしたバイオリアクター内で細菌を培養する方法が提供される。
特定の実施形態では、バイオリアクターは、前述した嫌気性条件下に置く。特定の態様では、上に開示した嫌気性雰囲気下でヘモグロビン依存性細菌を含むバイオリアクターが本明細書に提供される。特定の態様では、様々なサイズのバイオリアクターが本明細書に提供される。一部の実施形態では、バイオリアクターは、少なくとも１Ｌの容積、少なくとも５Ｌの容積、少なくとも１０Ｌの容積、少なくとも１５Ｌの容積、少なくとも２０Ｌの容積、少なくとも３０Ｌの容積、少なくとも４０Ｌの容積、少なくとも５０Ｌの容積、少なくとも１００Ｌの容積、少なくとも２００Ｌの容積、少なくとも２５０Ｌの容積、少なくとも５００Ｌの容積、少なくとも７５０Ｌの容積、少なくとも１０００Ｌの容積、少なくとも１５００Ｌの容積、少なくとも２０００Ｌの容積、少なくとも２５００Ｌの容積、少なくとも３０００Ｌの容積、少なくとも３５００Ｌの容積、少なくとも４０００Ｌの容積、少なくとも５０００Ｌの容積、少なくとも７５００Ｌの容積、少なくとも１０，０００Ｌの容積、少なくとも１５，０００Ｌの容積又は少なくとも２０，０００Ｌの容積である。一部の実施形態では、バイオリアクターは、約１Ｌの容積、約５Ｌの容積、約１０Ｌの容積、約１５Ｌの容積、約２０Ｌの容積、約３０Ｌの容積、約４０Ｌの容積、約５０Ｌの容積、約１００Ｌの容積、約２００Ｌの容積、約２５０Ｌの容積、約５００Ｌの容積、約７５０Ｌの容積、約１０００Ｌの容積、約１５００Ｌの容積、約２０００Ｌの容積、約２５００Ｌの容積、約３０００Ｌの容積、約３５００Ｌの容積、約４０００Ｌの容積、約５０００Ｌの容積、約７５００Ｌの容積、約１０，０００Ｌの容積、約１５，０００Ｌの容積又は約２０，０００Ｌの容積である。
実施例１：材料及び方法
増殖培地の調製
ブタヘモグロビンを０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させることにより、ヘモグロビン溶液を調製した。オートクレーブ処理により、溶液を滅菌した。２０ｍｇ／Ｌ又は２００ｍｇ／Ｌの標準濃度を使用した。
スピルリナタブレットを粉末にしてから、水又は０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させることにより、スピルリナを調製した。オートクレーブ処理により溶液を滅菌した後、様々な標準濃度（例えば、０．０２ｇ／Ｌ、０．２ｇ／Ｌ又は２ｇ／Ｌ）で増殖培地に添加した。
クロロフィリン（Ｓｉｇｍａ ｃａｔ＃１１００６－３４－１）を０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させてから、オートクレーブ処理した後、０．０２ｇ／Ｌ、０．０５ｇ／Ｌ、０．１ｇ／Ｌ又は０．２ｇ／Ｌの最終濃度まで増殖培地に添加した。
ビタミンＢ１２及びＦｅＣｌ２を増殖補助物質として、単独で又は組み合わせて試験した。ビタミンＢ１２溶液は、水に溶解させ、０．２２μｍフィルターを用いて滅菌することにより調製した。
増殖分析
各々の増殖分析について４回の反復試験を実施した。凍結細胞バンクからの０．１％接種材料を各培養に使用した。以下に説明するように、ＳＰＹＧ１培地中で細菌を培養した。３７℃の嫌気性環境において培養しながら、プレートリーダで４８時間にわたって３０分毎に光学密度（ＯＤ６００）を測定することにより、細菌の増殖動態を測定した。
実施例２：ヘモグロビン依存性細菌の例示的な製造プロセス
ヘモグロビン依存性細菌、例えばプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の例示的な製造プロセスを本明細書に提示する。この例示的な方法では、ヘモグロビン依存性細菌を、表４に列記する成分を含む増殖培地中で増殖させる。培地は、使用前に濾過滅菌する。
Figure 2022543033000032
Figure 2022543033000033
手短には、１Ｌボトルを１ｍＬの細胞バンクサンプル（－８０℃で保存されていた）で接種する。この菌株が有酸素条件に対して感受性であるため、この接種培養物を３７℃、ｐＨ＝６．５の嫌気性チャンバー内でインキュベートする。ボトルが対数増殖期に達したら（約１４～１６時間の増殖後）、培養物を用いて２０Ｌバイオリアクターを５％ｖ／ｖで接種する。対数増殖期（約１０～１２時間の増殖後）中、培養物を用いて、３５００Ｌバイオリアクターを０．５％ｖ／ｖで接種する。
２５％ＣＯ２及び７５％Ｎ２の組成を有する混合ガスを０．０２ＶＶＭで添加しながら、発酵培養物を連続的に混合する。水酸化アンモニウムによりｐＨを６．５に維持し、温度を３７℃に調節する。採取時間は、定常期に達する時間（約１２～１４時間の増殖後）に基づく。
発酵が完了したら、培養物を１０℃まで冷却し、遠心分離した後、得られた細胞ペーストを収集する。細胞ペーストに１０％安定剤を添加して、入念に混合する（安定剤濃度（スラリー中）：１．５％スクロース、１．５％デキストラン、０．０３％システイン）。細胞スラリーを凍結乾燥し、ガンマ線（室温で、１７．５ｋＧｙ）照射する。
使用することができる他の増殖条件については、例えば、国際公開第２０１９／０５１３８１号パンフレット（その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
Figure 2022543033000034
実施例３：ビタミンＢ１２及び／又はＦｅＣｌ２は、ヘモグロビンの非存在下でヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができない
ヘモグロビン依存性細菌増殖のためのＧＭＰグレード補足物質の別の供給源を見出すために、ビタミンＢ１２及び／又はＦｅＣｌ２などの非動物性製品を増殖補足物質として試験した。代表的なヘモグロビン依存性細菌であるプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）を、ビタミンＢ１２及び／又はＦｅＣｌ２を補充したＳＰＹＧ１培地中で実施例１に記載の通りに増殖させた。増殖培地中の様々な量のビタミンＢ１２、ＦｅＣｌ２（ヘモグロビン関連鉄）又はそれらの組合せは、補足物質を一切含まない増殖培地と比較してヘモグロビン依存性細菌の増殖を改善しなかった。図１からわかるように、ビタミンＢ１２及びＦｅＣｌ２は、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進するためにヘモグロビンの代わりに用いることができない。
実施例４：スピルリナは、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進するためにヘモグロビンの代わりに用いることができる
Ｂ１２又はＦｅＣｌ２とは対照的に、スピルリナを増殖培地に添加すると、ヘモグロビンの非存在下でヘモグロビン依存性細菌（プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９））の増殖が改善された。０．２ｇ／Ｌのスピルリナを添加すると、細菌の増殖が増強され、増殖速度と細胞密度の両方の増加をもたらした（図２）。従って、０．２ｇ／Ｌのスピルリナは、０．０２ｇ／Ｌのスピルリナと比較して増殖を増強したことから、スピルリナは、ヘモグロビンの非存在下で用量依存的にヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進する。
ヘモグロビンの非存在下でクロロフィリンがヘモグロビン依存性細菌の増殖を改善し得るか否かを決定するために、様々な量のクロロフィリンを増殖培地中に滴定した。０．２ｇ／Ｌの濃度のクロロフィリンは、増殖を改善するどころか、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を阻害した（図２）。より低濃度の０．０２ｇ／Ｌでも、クロロフィリンは、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を改善しなかった（図２）。
スピルリナを溶解させるのに最適な溶媒を決定するために、水及び０．０１Ｍ ＮａＯＨにスピルリナが溶解して、ヘモグロビンの非存在下でヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持する能力を比較した。ヘモグロビン依存性細菌は、０．０１Ｍ ＮａＯＨに溶解させたスピルリナと比較して、水に溶解させたスピルリナを含む培地中で増殖させると、より高速に且つより高い細胞密度まで増殖したが（図３）、水及びＮａＯＨのいずれにおけるスピルリナも、ヘモグロビンの非存在下において、また陰性対照よりも高度にヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持した。
スピルリナをヘモグロビン又はその誘導体の代わりに用いることができるか否かを決定するために、ヘモグロビン依存性細菌（プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ））を様々な量のスピルリナを含む増殖培地中で培養し、それらの増殖曲線を、ヘモグロビン又はクロロフィリンを補充した培地中で培養した細菌の増殖曲線と比較した。２ｇ／Ｌで、スピルリナは、ヘモグロビンと同等にヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持した（図４）。実際に、２ｇ／Ｌのスピルリナを含む増殖培地中で培養した細菌は、ヘモグロビンを含む培地と比較してより速い増殖速度を示した（図４）。図２に示すように、クロロフィリンは、いずれの試験濃度でもヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持しなかった（図４）。濾過により滅菌したスピルリナ溶液も細菌の増殖を支持するのに有効であったが、これは、そうしたスピルリナ溶液が、オートクレーブ処理及び濾過をはじめとする様々な滅菌法と適合性であり、スピルリナの可溶性成分が、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を支持する上で十分であることを示している。
実施例５：スピルリナを含む増殖培地中で培養したヘモグロビン依存性細菌は、遅延型過敏症（ＤＴＨ）のマウスモデルにおいて有効である
スピルリナは、ヘモグロビンの存在下で培養されるヘモグロビン依存性細菌と機能的に均等なヘモグロビン依存性細菌の産生を（ヘモグロビンの非存在下で）促進する。スピルリナが、ヘモグロビンの存在下で培養されたヘモグロビン依存性細菌と機能的に均等なヘモグロビン依存性細菌の産生を促進するか否かを試験するために、スピルリナ又はヘモグロビンの存在下で培養したヘモグロビン依存性細菌を遅延型過敏症（ＤＴＨ）のマウスモデルにおけるそれらの有効性について比較した。
遅延型過敏症（ＤＴＨ）は、Ｐｅｔｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（Ｉｎ ｖｉｖｏ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｆｏｒ ｐｓｏｒｉａｓｉｓ ａｎｄ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．Ｂａｓｉｃ＆Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍ＆Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ．２００６．９９（２）：１０４－１１５；また、Ｉｒｖｉｎｇ Ｃ． Ａｌｌｅｎ（ｅｄ．）Ｍｏｕｓｅ Ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ Ｉｎｎａｔｅ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， ２０１３． ｖｏｌ．１０３１，ＤＯＩ １０．１００７／９７８－１－６２７０３－４８１－４＿１３も参照されたい）により論述されているように、アトピー性皮膚炎（又はアレルギー性接触皮膚炎）の動物モデルである。これは、多様な抗原、例えば完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）又は他のアジュバントで乳化した種々の抗原を用いて、様々なマウス及びラット系統に誘導することができる。ＤＴＨは、感作並びに紅斑、浮腫及び細胞浸潤（特に抗原提示細胞（ＡＰＣ）、特に好酸球、活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞及びサイトカイン発現Ｔｈ２細胞の浸潤）を引き起こす抗原特異的Ｔ細胞媒介反応を特徴とする。
ＤＴＨのマウスモデルを作製するために、６つのコホート（１コホート当たり５匹）の６～８週齢Ｃ５７Ｂｌ／６マウスをＴａｃｏｎｉｃ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）から取得した。０日目に、２００μｌ中１：１の比において完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）で乳化した１００μｇのスカシガイ（Ｋｅｙｈｏｌｅ ｌｉｍｐｅｔ）ヘモシアニン（ＫＬＨ）を背中（上部及び下部）の４部位に４回皮下（ｓ．ｃ．）注射することにより、マウスを感作した。８日目に、０．０１％ＤＭＳＯの食塩水溶液１０μｌ中１０μｇのＫＬＨの皮内注射でマウスを攻撃することにより、耳に皮膚ＤＴＨを誘発した。対照として、左耳に１０μｌの０．０１％ＤＭＳＯの食塩水溶液のみを投与した。耳の膨潤として呈示されるＤＴＨ反応は、Ｍｉｔｕｔｏｙｏマイクロメータを用いて、攻撃前及び攻撃後の様々な時点で耳の厚さを測定することにより決定した。個別の動物各々のベースラインとして、皮内攻撃前に耳の厚さを測定した。また、皮内攻撃後２つの時点、約２４時間及び４８時間（即ちそれぞれ９日目及び０日目）でも耳の厚さを測定した。
各コホートのマウスに９日にわたって毎日１回以下の通り投与した：
（ｉ）嫌気性ＰＢＳの経口投与（ビヒクル対照）；
（ｉｉ）１ｍｇ／ｋｇのデキサメタゾンの腹腔内投与（陽性対照）；
（ｉｉｉ）１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＢＭ１培地（Ｂ１２なし）中で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマスの経口投与（Ｖ３）；
（ｉｖ）１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＢＭ１培地中で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマスの経口投与（Ｖ４）；
（ｖ）１ｇ／Ｌのスピルリナを含むＳＰＹＧ１培地中で培養した１×１０９ＣＦＵのプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）バイオマスの経口投与（Ｖ１）；又は
（ｖｉ）ヘモグロビンを含む増殖培地中で培養したプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）の１０ｍｇの粉末の経口投与。
図５で認められるように、スピルリナの存在下で培養されたプレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）（プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９））は、耳の厚さの減少により証明されるＤＴＨの軽減においてヘモグロビンの存在下で培養されたものと全く同様に有効であった。従って、スピルリナは、ヘモグロビンの存在下で培養されたヘモグロビン依存性細菌と機能的に均等なヘモグロビン依存性細菌の産生を（ヘモグロビンの非存在下で）促進する。
実施例６：スピルリナは、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）及びパラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）細菌の増殖を促進するためにヘモグロビンの代わりに用いることができる
以下のヘモグロビン依存性細菌を、スピルリナを含む又は含まない増殖培地中で培養した：フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ａ、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂ及びパラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａ。ヘモグロビン依存性細菌を、表６に列記する成分を含む増殖培地中で増殖した。
Figure 2022543033000035
使用した炭素源は、最終濃度５ｇ／ＬのＮ－アセチル－グルコサミン（ＮＡＧ）又はグルコース（Ｇｌｕ）であった。ヘモグロビン溶液は、最終濃度０．０２ｇ／Ｌで使用し、０．０１Ｍ ＮａＯＨ中の１％ストック溶液から添加した。スピルリナ溶液は、最終濃度１ｇ／Ｌで使用し、０．０１Ｍ ＮａＯＨ中の５％ストック溶液から添加した。
図６～図８に示すように、スピルリナを含む増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体の非存在下でこれらのヘモグロビン依存性細菌の各々の増殖を支持した。スピルリナは、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ａ及びパラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａについて、ヘモグロビン含有培地での増殖と同等レベルまで増殖を回復した（図６及び図８）。フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）株Ｂは、これらの条件でスピルリナを用いた増殖に若干の改善を示し、やはりヘモグロビンを用いた増殖と同等であった。
実施例７：他のヘモグロビン依存性細菌についてヘモグロビンに代わるスピルリナの使用
これらの実験で試験される微生物は、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂ、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）株Ａ、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａ及びアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａであった。
パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂは、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａと同じ属（パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ））に属するが、この属の異なる種に由来する。
最良の増殖条件を決定するために、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａをエンドポイント試験で試験した。
これらの微生物を試験するために使用される基礎培地は、以下の組成のＳＰＹ又はＰＭ１１であった。
Figure 2022543033000036
Figure 2022543033000037
使用される炭素源は、最終濃度５ｇ／Ｌ（Ｇｌｕ５）又は１０ｇ／Ｌ（Ｇｌｕ１０）のグルコース（Ｇｌｕ）であった。
ヘモグロビン溶液は、最終濃度０．２ｇ／Ｌで使用し、０．０１Ｍ ＮａＯＨ中の１％ストック溶液から添加した。
スピルリナ溶液は、最終濃度１ｇ／Ｌ又は２ｇ／Ｌで使用し、０．０１Ｍ ＮａＯＨ中の５％ストック溶液から添加した。
嫌気性条件下のプレートリーダ上の９６ウェルフォーマットで実施した動的増殖試験から、増殖動態曲線を取得する。
最良の増殖条件を決定するために、３つのＯＤ６００測定点を用い、嫌気性条件下でエンドポイント試験を実施した。
図９に示すように、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ｂは、ヘモグロビンと比較して、スピルリナの添加により部分的に回復される。ヘモグロビン又はスピルリナを添加しない場合、増殖は、観察されないため、この株は、ヘモグロビン依存性であるとみなされる。１ｇ／Ｌのスピルリナの添加は、増殖を部分的に回復し、２ｇ／Ｌのスピルリナは、増殖を少なくとも２回増大したため、おそらくスピルリナの濃度を２ｇ／Ｌ超に増加すれば、ヘモグロビンによる増加と同等の増加が達成されるであろう。
図１０に示すように、スピルリナの存在下のフェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）株Ａの増殖は、ヘモグロビン含有培地と同等であるか又はそれより優れている。誘導期は、短縮され、ヘモグロビンを含む培地のそれと類似しており、光学密度は、ヘモグロビンを含む培地よりも高い。
図１１に示すように、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）株Ａの増殖は、スピルリナの添加により支持され、スピルリナがないと、菌株は、増殖しない。
図１２に示すように、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）株Ａの増殖は、ヘモグロビン含有培地中よりも、スピルリナを含有する培地中で優れている。
実施例８：プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃについてヘモグロビンに代わるスピルリナの使用
別のヘモグロビン依存性細菌、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＰＴＡ－１２６１４０）を、スピルリナの存在下において、表９Ａに示す培地中で実施例２に記載の通りに培養した。スピルリナは、ヘモグロビン依存性プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃの増殖を支持した（データは示していない）。
Figure 2022543033000038
１Ｌの培地を製造するために、培地成分を４つの異なる溶液（溶液１～４）に調製し、これらを後に合わせる。
１．溶液１
Figure 2022543033000039
表９Ｂに示す溶液１の成分を蒸留水に溶解させ、体積を最終体積９６０ｍＬに調節する。溶液を１２１℃で３０分間オートクレーブ処理する。
２．溶液２
Figure 2022543033000040
５ｇのＬ－システイン－ＨＣｌを１００ｍＬの蒸留水に添加し、Ｌ－システイン－ＨＣｌが溶解するまで混合する。溶液を穏やかに加熱して、溶解を促進する。溶液を１２１℃で３０分間オートクレーブ処理する。
３．溶液３
Figure 2022543033000041
５０ｇのグルコースを蒸留水に溶解させ、最終体積を１００ｍＬに調節する。溶液を１２１℃で３０分間オートクレーブ処理する。
４．溶液４
Figure 2022543033000042
２５ｇのスピルリナ粉末を水及び水酸化ナトリウムに添加し、溶解するまで攪拌する。再懸濁を促進するために、ある程度の振盪が必要な場合もある。溶液中に再懸濁したら、１μｍフィルターを用いて、懸濁液を濾過する。濾過した溶液を１２１℃で３０分間オートクレーブ処理する。
バイオセーフティキャビネット内で、表９Ｆに示す通り、全ての必要な成分を合わせることにより、培地を完成する。
Figure 2022543033000043
完全培地を脱ガスした後、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）を接種する。
参照による組込み
本明細書に記載される全ての公開特許出願は、個別の刊行物又は特許出願がそれぞれ明示的且つ個別に参照により組み込まれることが示されているのと同様に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾が生じた場合、本明細書に記載の全ての定義を含め、本出願が優先される。
均等物
当業者であれば、本明細書に記載の本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するか、又は常用的な実験のみを用いて確認することができるであろう。こうした均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。

Claims (528)

  1. ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法であって、ヘモグロビン代替物質を含む増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含み、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、方法。
  2. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項１に記載の方法。
  3. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項２に記載の方法。
  4. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項２に記載の方法。
  5. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項４に記載の方法。
  6. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項５に記載の方法。
  7. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項２～６のいずれか一項に記載の方法。
  8. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項２～６のいずれか一項に記載の方法。
  9. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項８に記載の方法。
  10. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項２～６のいずれか一項に記載の方法。
  11. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項１０に記載の方法。
  12. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項１１に記載の方法。
  13. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項１に記載の方法。
  14. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項１３に記載の方法。
  15. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項１４に記載の方法。
  16. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。
  17. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。
  18. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
  20. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
  21. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項２０に記載の方法。
  22. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項２０に記載の方法。
  23. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項２０に記載の方法。
  24. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９．５％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項２０に記載の方法。
  25. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項２０に記載の方法。
  26. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項２０～２５のいずれか一項に記載の方法。
  27. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株に由来する、請求項２０～２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 前記ヘモグロビン代替物質は、増殖培地中でヘモグロビンの代わりに用いられて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
  29. 前記増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
  30. 前記増殖培地は、動物性製品を含まない、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。
  31. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する、請求項１～３０のいずれか一項に記載の方法。
  32. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５０％高い、請求項３１に記載の方法。
  33. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも１００％高い、請求項３１に記載の方法。
  34. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より２００％～４００％高い、請求項３１に記載の方法。
  35. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも３００％高い、請求項３１に記載の方法。
  36. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する、請求項１～３５のいずれか一項に記載の方法。
  37. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５０％高い細胞密度まで増殖する、請求項３６に記載の方法。
  38. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも１００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３６に記載の方法。
  39. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より２００％～４００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３６に記載の方法。
  40. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも３００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３６に記載の方法。
  41. １％超のＣＯ２を含む嫌気性雰囲気下で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む、請求項１～４０のいずれか一項に記載の方法。
  42. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項４１に記載の方法。
  43. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項４１に記載の方法。
  44. 前記嫌気性雰囲気は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項４１に記載の方法。
  45. 前記嫌気性雰囲気は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項４１に記載の方法。
  46. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項４１に記載の方法。
  47. 前記嫌気性雰囲気は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項４１～４６のいずれか一項に記載の方法。
  48. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項４１に記載の方法。
  49. ａ）１％超のＣＯ２を含む嫌気性ガス混合物でバイオリアクターをパージするステップと；
    ｂ）ステップａ）でパージされた前記バイオリアクター内で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップと
    を含む、請求項４１に記載の方法。
  50. 前記嫌気性ガス混合物は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項４９に記載の方法。
  51. 前記嫌気性ガス混合物は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項４９に記載の方法。
  52. 前記嫌気性ガス混合物は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項４９に記載の方法。
  53. 前記嫌気性ガス混合物は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項４９に記載の方法。
  54. 前記嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項４９に記載の方法。
  55. 前記嫌気性ガス混合物は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項４９～５４のいずれか一項に記載の方法。
  56. 前記嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項４９に記載の方法。
  57. 前記バイオリアクターは、約１Ｌ、約２０Ｌ、約３，５００Ｌ又は約２０，０００Ｌのバイオリアクターである、請求項４９～５６のいずれか一項に記載の方法。
  58. 増殖培地にヘモグロビン依存性細菌を接種するステップをさらに含み、前記接種ステップは、ステップｂ）に先行する、請求項４９～５７のいずれか一項に記載の方法。
  59. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、前記増殖培地の約０．１％ｖ／ｖである、請求項５８に記載の方法。
  60. 前記増殖培地は、約１Ｌの体積である、請求項５８に記載の方法。
  61. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、約１ｍＬである、請求項５８に記載の方法。
  62. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項４９～６１のいずれか一項に記載の方法。
  63. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１４～１６時間にわたってインキュベートされる、請求項６２に記載の方法。
  64. 増殖培地に約５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項６２又は６３に記載の方法。
  65. 前記増殖培地は、約２０Ｌの体積である、請求項６４に記載の方法。
  66. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項６４又は６５に記載の方法。
  67. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項６６に記載の方法。
  68. 増殖培地に約０．５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項６６又は６７に記載の方法。
  69. 前記増殖培地は、約３５００Ｌの体積である、請求項６８に記載の方法。
  70. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項６８又は６９に記載の方法。
  71. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項７０に記載の方法。
  72. 前記増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及びグルコースを含む、請求項１～７１のいずれか一項に記載の方法。
  73. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項７２に記載の方法。
  74. 前記増殖培地は、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項７２に記載の方法。
  75. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項７２～７４のいずれか一項に記載の方法。
  76. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項７５に記載の方法。
  77. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項７５に記載の方法。
  78. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項７２～７７のいずれか一項に記載の方法。
  79. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項７８に記載の方法。
  80. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項７８に記載の方法。
  81. 前記増殖培地は、１ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項７２～８０のいずれか一項に記載の方法。
  82. 前記増殖培地は、約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項８１に記載の方法。
  83. 前記増殖培地は、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項８１に記載の方法。
  84. 前記増殖培地は、０．５ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項７２～８３のいずれか一項に記載の方法。
  85. 前記増殖培地は、約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項８４に記載の方法。
  86. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項７２～８５のいずれか一項に記載の方法。
  87. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項８６に記載の方法。
  88. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項７２～８７のいずれか一項に記載の方法。
  89. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項８８に記載の方法。
  90. 前記増殖培地は、２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項７２～８９のいずれか一項に記載の方法。
  91. 前記増殖培地は、約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項９０に記載の方法。
  92. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項７２～９１のいずれか一項に記載の方法。
  93. 前記増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項９２に記載の方法。
  94. 前記増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項１～９３のいずれか一項に記載の方法。
  95. 前記増殖培地は、少なくとも０．７５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項９４に記載の方法。
  96. 前記増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項９４に記載の方法。
  97. 前記増殖培地は、約１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項９４に記載の方法。
  98. 前記増殖培地は、約２ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項９４に記載の方法。
  99. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、３５℃～３９℃の温度でインキュベートされる、請求項１～９８のいずれか一項に記載の方法。
  100. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、約３７℃の温度でインキュベートされる、請求項９９に記載の方法。
  101. 前記増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである、請求項１～１００のいずれか一項に記載の方法。
  102. 前記増殖培地は、約６．５のｐＨである、請求項１０１に記載の方法。
  103. 前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップは、５０～３００のＲＰＭで前記増殖培地を攪拌することを含む、請求項１～１０２のいずれか一項に記載の方法。
  104. 前記増殖培地は、約１５０のＲＰＭで攪拌される、請求項１０３に記載の方法。
  105. 前記嫌気性ガス混合物は、インキュベーション中に連続的に添加される、請求項４９～１０４のいずれか一項に記載の方法。
  106. 前記嫌気性ガス混合物は、約０．０２ｖｖｍの速度で添加される、請求項１０５に記載の方法。
  107. 定常期に到達すると、前記ヘモグロビン依存性細菌を採取するステップをさらに含む、請求項１～１０６のいずれか一項に記載の方法。
  108. 採取後、前記ヘモグロビン依存性細菌を遠心分離して、細胞ペーストを生成するステップをさらに含む、請求項１０７に記載の方法。
  109. 前記細胞ペーストを安定剤溶液で希釈して、細胞スラリーを生成するステップをさらに含む、請求項１０８に記載の方法。
  110. 前記細胞スラリーを凍結乾燥して、粉末を生成するステップをさらに含む、請求項１０９に記載の方法。
  111. 前記粉末をガンマ線で照射するステップをさらに含む、請求項１１０に記載の方法。
  112. ヘモグロビン依存性細菌を培養する方法であって、（ａ）ヘモグロビン代替物質とヘモグロビン依存性細菌とを増殖培地に添加するステップと；（ｂ）前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップとを含み、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、方法。
  113. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項１１２に記載の方法。
  114. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項１１３に記載の方法。
  115. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項１１３に記載の方法。
  116. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項１１５に記載の方法。
  117. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項１１６に記載の方法。
  118. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項１１３～１１７のいずれか一項に記載の方法。
  119. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項１１３～１１７のいずれか一項に記載の方法。
  120. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項１１９に記載の方法。
  121. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項１１３～１１７のいずれか一項に記載の方法。
  122. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項１２１に記載の方法。
  123. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項１２２に記載の方法。
  124. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項１１２に記載の方法。
  125. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項１２４に記載の方法。
  126. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項１２５に記載の方法。
  127. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項１２４～１２６のいずれか一項に記載の方法。
  128. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項１２４～１２６のいずれか一項に記載の方法。
  129. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項１２４～１２６のいずれか一項に記載の方法。
  130. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項１１２～１２９のいずれか一項に記載の方法。
  131. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項１１２～１２９のいずれか一項に記載の方法。
  132. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項１３１に記載の方法。
  133. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項１３１に記載の方法。
  134. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項１３１に記載の方法。
  135. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項１３１に記載の方法。
  136. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項１３１に記載の方法。
  137. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項１３１～１３６のいずれか一項に記載の方法。
  138. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株である、請求項１３１～１３７のいずれか一項に記載の方法。
  139. 前記ヘモグロビン代替物質は、増殖培地中でヘモグロビンの代わりに用いられて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる、請求項１１２～１３８のいずれか一項に記載の方法。
  140. 前記増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない、請求項１１２～１３９のいずれか一項に記載の方法。
  141. 前記増殖培地は、動物性製品を含まない、請求項１１２～１４０のいずれか一項に記載の方法。
  142. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する、請求項１１２～１４１のいずれか一項に記載の方法。
  143. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５０％高い、請求項１４２に記載の方法。
  144. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも１００％高い、請求項１４２に記載の方法。
  145. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より２００％～４００％高い、請求項１４２に記載の方法。
  146. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも３００％高い、請求項１４２に記載の方法。
  147. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する、請求項１１２～１４６のいずれか一項に記載の方法。
  148. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５０％高い細胞密度まで増殖する、請求項１４７に記載の方法。
  149. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも１００％高い細胞密度まで増殖する、請求項１４７に記載の方法。
  150. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より２００％～４００％高い細胞密度まで増殖する、請求項１４７に記載の方法。
  151. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも３００％高い細胞密度まで増殖する、請求項１４７に記載の方法。
  152. １％超のＣＯ２を含む嫌気性雰囲気下で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む、請求項１１２～１５１のいずれか一項に記載の方法。
  153. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項１５２に記載の方法。
  154. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項１５２に記載の方法。
  155. 前記嫌気性雰囲気は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項１５２に記載の方法。
  156. 前記嫌気性雰囲気は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項１５２に記載の方法。
  157. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項１５２に記載の方法。
  158. 前記嫌気性雰囲気は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項１５２～１５７のいずれか一項に記載の方法。
  159. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項１５２に記載の方法。
  160. ａ）１％超のＣＯ２を含む嫌気性ガス混合物でバイオリアクターをパージするステップと；
    ｂ）ステップａ）でパージされた前記バイオリアクター内で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップと
    を含む、請求項１５２に記載の方法。
  161. 前記嫌気性ガス混合物は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項１６０に記載の方法。
  162. 前記嫌気性ガス混合物は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項１６０に記載の方法。
  163. 前記嫌気性ガス混合物は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項１６０に記載の方法。
  164. 前記嫌気性ガス混合物は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項１６０に記載の方法。
  165. 前記嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項１６０に記載の方法。
  166. 前記嫌気性ガス混合物は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項１６０～１６５のいずれか一項に記載の方法。
  167. 前記嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項１６０に記載の方法。
  168. 前記バイオリアクターは、約１Ｌ、約２０Ｌ、約３，５００Ｌ又は約２０，０００Ｌのバイオリアクターである、請求項１６０～１６７のいずれか一項に記載の方法。
  169. 増殖培地にヘモグロビン依存性細菌を接種するステップをさらに含み、前記接種ステップは、ステップｂ）に先行する、請求項１６０～１６８のいずれか一項に記載の方法。
  170. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、前記増殖培地の約０．１％ｖ／ｖである、請求項１６９に記載の方法。
  171. 前記増殖培地は、約１Ｌの体積である、請求項１６９に記載の方法。
  172. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、約１ｍＬである、請求項１６９に記載の方法。
  173. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項１６０～１７２のいずれか一項に記載の方法。
  174. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１４～１６時間にわたってインキュベートされる、請求項１７３に記載の方法。
  175. 増殖培地に約５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項１７３又は１７４に記載の方法。
  176. 前記増殖培地は、約２０Ｌの体積である、請求項１７５に記載の方法。
  177. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項１７５又は１７６に記載の方法。
  178. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項１７７に記載の方法。
  179. 増殖培地に約０．５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項１７７又は１７８に記載の方法。
  180. 前記増殖培地は、約３５００Ｌの体積である、請求項１７９に記載の方法。
  181. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項１７９又は１８０に記載の方法。
  182. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項１８１に記載の方法。
  183. 前記増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及びグルコースを含む、請求項１１２～１８２のいずれか一項に記載の方法。
  184. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項１８３に記載の方法。
  185. 前記増殖培地は、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項１８３に記載の方法。
  186. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項１８３～１８５のいずれか一項に記載の方法。
  187. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項１８６に記載の方法。
  188. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項１８６に記載の方法。
  189. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項１８３～１８８のいずれか一項に記載の方法。
  190. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項１８９に記載の方法。
  191. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項１８９に記載の方法。
  192. 前記増殖培地は、１ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項１８３～１９１のいずれか一項に記載の方法。
  193. 前記増殖培地は、約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項１９２に記載の方法。
  194. 前記増殖培地は、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項１９２に記載の方法。
  195. 前記増殖培地は、０．５ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項１８３～１９４のいずれか一項に記載の方法。
  196. 前記増殖培地は、約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項１９５に記載の方法。
  197. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項１８３～１９６のいずれか一項に記載の方法。
  198. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項１９７に記載の方法。
  199. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項１８３～１９８のいずれか一項に記載の方法。
  200. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項１９９に記載の方法。
  201. 前記増殖培地は、２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項１８３～２００のいずれか一項に記載の方法。
  202. 前記増殖培地は、約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項２０１に記載の方法。
  203. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項１８３～２０２のいずれか一項に記載の方法。
  204. 前記増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項２０３に記載の方法。
  205. 前記増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項１１２～２０４のいずれか一項に記載の方法。
  206. 前記増殖培地は、少なくとも０．７５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２０５に記載の方法。
  207. 前記増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２０５に記載の方法。
  208. 前記増殖培地は、約１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２０５に記載の方法。
  209. 前記増殖培地は、約２ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２０５に記載の方法。
  210. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、３５℃～３９℃の温度でインキュベートされる、請求項１１２～２０９のいずれか一項に記載の方法。
  211. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、約３７℃の温度でインキュベートされる、請求項２１０に記載の方法。
  212. 前記増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである、請求項１１２～２１１のいずれか一項に記載の方法。
  213. 前記増殖培地は、約６．５のｐＨである、請求項２１２に記載の方法。
  214. 前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップは、５０～３００のＲＰＭで前記増殖培地を攪拌することを含む、請求項１１２～２１３のいずれか一項に記載の方法。
  215. 前記増殖培地は、約１５０のＲＰＭで攪拌される、請求項２１４に記載の方法。
  216. 前記嫌気性ガス混合物は、インキュベーション中に連続的に添加される、請求項１６０～２１５のいずれか一項に記載の方法。
  217. 前記嫌気性ガス混合物は、約０．０２ｖｖｍの速度で添加される、請求項２１６に記載の方法。
  218. 定常期に到達すると、前記ヘモグロビン依存性細菌を採取するステップをさらに含む、請求項１１２～２１７のいずれか一項に記載の方法。
  219. 採取後、前記ヘモグロビン依存性細菌を遠心分離して、細胞ペーストを生成するステップをさらに含む、請求項２１８に記載の方法。
  220. 前記細胞ペーストを安定剤溶液で希釈して、細胞スラリーを生成するステップをさらに含む、請求項２１９に記載の方法。
  221. 前記細胞スラリーを凍結乾燥して、粉末を生成するステップをさらに含む、請求項２２０に記載の方法。
  222. 前記粉末をガンマ線で照射するステップをさらに含む、請求項２２１に記載の方法。
  223. ヘモグロビン代替物質を含む増殖培地中のヘモグロビン依存性細菌を含むバイオリアクターであって、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、バイオリアクター。
  224. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項２２３に記載のバイオリアクター。
  225. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項２２４に記載のバイオリアクター。
  226. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項２２４に記載のバイオリアクター。
  227. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項２２６に記載のバイオリアクター。
  228. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項２２７に記載のバイオリアクター。
  229. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項２２４～２２８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  230. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項２２４～２２８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  231. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項２３０に記載のバイオリアクター。
  232. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項２２４～２２８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  233. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項２３２に記載のバイオリアクター。
  234. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項２３３に記載のバイオリアクター。
  235. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項２２３に記載のバイオリアクター。
  236. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項２３５に記載のバイオリアクター。
  237. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項２３６に記載のバイオリアクター。
  238. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項２３５～２３７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  239. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項２３５～２３７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  240. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項２３５～２３７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  241. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項２２３～２４０のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  242. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項２２３～２４０のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  243. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項２４２に記載のバイオリアクター。
  244. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項２４２に記載のバイオリアクター。
  245. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項２４２に記載のバイオリアクター。
  246. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９．５％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項２４２に記載のバイオリアクター。
  247. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項２４２に記載のバイオリアクター。
  248. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項２４２～２４７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  249. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株に由来する、請求項２４２～２４８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  250. 前記ヘモグロビン代替物質は、増殖培地中でヘモグロビンの代わりに用いられて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる、請求項２２３～２４９のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  251. 前記増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない、請求項２２３～２５０のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  252. 前記増殖培地は、動物性製品を含まない、請求項２２３～２５１のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  253. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する、請求項２２３～２５２のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  254. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５０％高い、請求項２５３に記載のバイオリアクター。
  255. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも１００％高い、請求項２５３に記載のバイオリアクター。
  256. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より２００％～４００％高い、請求項２５３に記載のバイオリアクター。
  257. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも３００％高い、請求項２５３に記載のバイオリアクター。
  258. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する、請求項２２３～２５７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  259. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５０％高い細胞密度まで増殖する、請求項２５８に記載のバイオリアクター。
  260. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも１００％高い細胞密度まで増殖する、請求項２５８に記載のバイオリアクター。
  261. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より２００％～４００％高い細胞密度まで増殖する、請求項２５８に記載のバイオリアクター。
  262. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも３００％高い細胞密度まで増殖する、請求項２５８に記載のバイオリアクター。
  263. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１％超のＣＯ２を含む嫌気性雰囲気下にある、請求項２２３～２６２のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  264. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  265. 前記嫌気性雰囲気は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  266. 前記嫌気性雰囲気は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  267. 前記嫌気性雰囲気は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  268. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  269. 前記嫌気性雰囲気は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項２６３～２６８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  270. 前記嫌気性雰囲気は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項２６３に記載のバイオリアクター。
  271. １Ｌ、２０Ｌ、３５００Ｌ又は２０，０００Ｌのバイオリアクターである、請求項２６３～２７０のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  272. 前記増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及びグルコースを含む、請求項２２３～２７１のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  273. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項２７２に記載のバイオリアクター。
  274. 前記増殖培地は、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項２７２に記載のバイオリアクター。
  275. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項２７２～２７４のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  276. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項２７５に記載のバイオリアクター。
  277. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項２７５に記載のバイオリアクター。
  278. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項２７２～２７７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  279. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項２７８に記載のバイオリアクター。
  280. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項２７８に記載のバイオリアクター。
  281. 前記増殖培地は、１ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項２７２～２８０のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  282. 前記増殖培地は、約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項２８１に記載のバイオリアクター。
  283. 前記増殖培地は、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項２８１に記載のバイオリアクター。
  284. 前記増殖培地は、０．５ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項２７２～２８３のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  285. 前記増殖培地は、約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項２８４に記載のバイオリアクター。
  286. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項２７２～２８５のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  287. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項２８６に記載のバイオリアクター。
  288. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項２７２～２８７のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  289. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項２８８に記載のバイオリアクター。
  290. 前記増殖培地は、２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項２７２～２８９のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  291. 前記増殖培地は、約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項２９０に記載のバイオリアクター。
  292. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項２７２～２９１のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  293. 前記増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項２９２に記載のバイオリアクター。
  294. 前記増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２２３～２９３のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  295. 前記増殖培地は、少なくとも０．７５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２９４に記載のバイオリアクター。
  296. 前記増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２９４に記載のバイオリアクター。
  297. 前記増殖培地は、約１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２９４に記載のバイオリアクター。
  298. 前記増殖培地は、約２ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項２９４に記載のバイオリアクター。
  299. ３５℃～３９℃の温度である、請求項２２３～２９８のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  300. ３７℃の温度である、請求項２９９に記載のバイオリアクター。
  301. 前記増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである、請求項２２３～３００のいずれか一項に記載のバイオリアクター。
  302. 前記増殖培地は、約６．５のｐＨである、請求項３０１に記載のバイオリアクター。
  303. 請求項２２３～３０２のいずれか一項に記載のバイオリアクター内でヘモグロビン依存性細菌を培養する方法であって、前記バイオリアクター内で前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップを含む方法。
  304. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１％超のＣＯ２を含む嫌気性ガス混合物中でインキュベートされる、請求項３０３に記載の方法。
  305. 嫌気性ガス混合物は、少なくとも１０％のＣＯ２を含む、請求項３０３に記載の方法。
  306. 嫌気性ガス混合物は、少なくとも２０％のＣＯ２を含む、請求項３０３に記載の方法。
  307. 嫌気性ガス混合物は、１０％～４０％のＣＯ２を含む、請求項３０３に記載の方法。
  308. 嫌気性ガス混合物は、２０％～３０％のＣＯ２を含む、請求項３０３に記載の方法。
  309. 嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２を含む、請求項３０３に記載の方法。
  310. 前記嫌気性ガス混合物は、ほぼＣＯ２とＮ２とから構成される、請求項３０３～３０９のいずれか一項に記載の方法。
  311. 前記嫌気性ガス混合物は、約２５％のＣＯ２と約７５％のＮ２とを含む、請求項３１０に記載の方法。
  312. インキュベーション前に前記増殖培地に前記ヘモグロビン依存性細菌を接種するステップをさらに含む、請求項３０３～３１１のいずれか一項に記載の方法。
  313. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、前記増殖培地の約０．１％ｖ／ｖである、請求項３１２に記載の方法。
  314. 前記増殖培地は、約１Ｌの体積である、請求項３１２に記載の方法。
  315. ヘモグロビン依存性細菌の体積は、約１ｍＬである、請求項３１２に記載の方法。
  316. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたって培養される、請求項３０３～３１５のいずれか一項に記載の方法。
  317. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１４～１６時間にわたってインキュベートされる、請求項３１６に記載の方法。
  318. 増殖培地に約５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項３１６又は３１７に記載の方法。
  319. 前記増殖培地は、約２０Ｌの体積である、請求項３１８に記載の方法。
  320. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項３１８又は３１９に記載の方法。
  321. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項３２０に記載の方法。
  322. 増殖培地に約０．５％ｖ／ｖの前記培養細菌を接種するステップをさらに含む、請求項３２０又は３２１に記載の方法。
  323. 前記増殖培地は、約３５００Ｌの体積である、請求項３２２に記載の方法。
  324. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１０～２４時間にわたってインキュベートされる、請求項３２２又は３２３に記載の方法。
  325. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、１２～１４時間にわたってインキュベートされる、請求項３２４に記載の方法。
  326. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、３５℃～３９℃の温度でインキュベートされる、請求項３０３～３２５のいずれか一項に記載の方法。
  327. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、３７℃の温度でインキュベートされる、請求項３２６に記載の方法。
  328. 前記ヘモグロビン依存性細菌をインキュベートするステップは、５０～３００のＲＰＭで前記増殖培地を攪拌することを含む、請求項３０３～３２７のいずれか一項に記載の方法。
  329. 前記増殖培地は、１５０のＲＰＭで攪拌される、請求項３２８に記載の方法。
  330. 前記嫌気性ガス混合物は、インキュベーション中に連続的に添加される、請求項３０３～３２９のいずれか一項に記載の方法。
  331. 前記嫌気性ガス混合物は、０．０２ｖｖｍの速度で添加される、請求項３３０に記載の方法。
  332. 定常期に到達すると、前記ヘモグロビン依存性細菌を採取するステップをさらに含む、請求項３０３～３３１のいずれか一項に記載の方法。
  333. 採取後、前記ヘモグロビン依存性細菌を遠心分離して、細胞ペーストを生成するステップをさらに含む、請求項３３２に記載の方法。
  334. 前記細胞ペーストを安定剤溶液で希釈して、細胞スラリーを生成するステップをさらに含む、請求項３３３に記載の方法。
  335. 前記細胞スラリーを凍結乾燥して、粉末を生成するステップをさらに含む、請求項３３４に記載の方法。
  336. 前記粉末をガンマ線で照射するステップをさらに含む、請求項３３５に記載の方法。
  337. ａ）ヘモグロビン依存性細菌と、
    ｂ）ヘモグロビン代替物質を含む増殖培地と
    を含む組成物であって、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、組成物。
  338. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項３３７に記載の組成物。
  339. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項３３８に記載の組成物。
  340. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項３３８に記載の組成物。
  341. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項３４０に記載の組成物。
  342. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項３４１に記載の組成物。
  343. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項３３８～３４２のいずれか一項に記載の組成物。
  344. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項３３８～３４２のいずれか一項に記載の組成物。
  345. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項３４４に記載の組成物。
  346. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項３３８～３４２のいずれか一項に記載の組成物。
  347. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項３４６に記載の組成物。
  348. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項３４７に記載の組成物。
  349. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項３３７に記載の組成物。
  350. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項３４９に記載の組成物。
  351. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項３５０に記載の組成物。
  352. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項３４９～３５１のいずれか一項に記載の組成物。
  353. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項３４９～３５１のいずれか一項に記載の組成物。
  354. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項３４９～３５１のいずれか一項に記載の組成物。
  355. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項３３７～３５４のいずれか一項に記載の組成物。
  356. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項３３７～３５４のいずれか一項に記載の組成物。
  357. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項３５６に記載の組成物。
  358. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項３５６に記載の組成物。
  359. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項３５６に記載の組成物。
  360. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項３５６に記載の組成物。
  361. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項３５６に記載の組成物。
  362. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項３５６～３６１のいずれか一項に記載の組成物。
  363. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株である、請求項３５６～３６２のいずれか一項に記載の組成物。
  364. 前記ヘモグロビン代替物質は、増殖培地中でヘモグロビンの代わりに用いられて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる、請求項３３７～３６３のいずれか一項に記載の組成物。
  365. 前記増殖培地は、ヘモグロビン又はその誘導体を含まない、請求項３３７～３６４のいずれか一項に記載の組成物。
  366. 前記増殖培地は、動物性製品を含まない、請求項３３７～３６５のいずれか一項に記載の組成物。
  367. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する、請求項３３７～３６６のいずれか一項に記載の組成物。
  368. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５０％高い、請求項３６７に記載の組成物。
  369. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも１００％高い、請求項３６７に記載の組成物。
  370. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より２００％～４００％高い、請求項３６７に記載の組成物。
  371. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも３００％高い、請求項３６７に記載の組成物。
  372. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する、請求項３３７～３７１のいずれか一項に記載の組成物。
  373. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５０％高い細胞密度まで増殖する、請求項３７２に記載の組成物。
  374. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも１００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３７２に記載の組成物。
  375. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より２００％～４００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３７２に記載の組成物。
  376. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも３００％高い細胞密度まで増殖する、請求項３７２に記載の組成物。
  377. 前記増殖培地は、酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及びグルコースを含む、請求項３３７～３７６のいずれか一項に記載の組成物。
  378. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項３７７に記載の組成物。
  379. 前記増殖培地は、約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項３７７に記載の組成物。
  380. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項３７７～３７９のいずれか一項に記載の組成物。
  381. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項３８０に記載の組成物。
  382. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項３８０に記載の組成物。
  383. 前記増殖培地は、１０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項３７７～３８２のいずれか一項に記載の組成物。
  384. 前記増殖培地は、約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項３８３に記載の組成物。
  385. 前記増殖培地は、約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項３８３に記載の組成物。
  386. 前記増殖培地は、１ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項３７７～３８５のいずれか一項に記載の組成物。
  387. 前記増殖培地は、約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項３８６に記載の組成物。
  388. 前記増殖培地は、約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項３８６に記載の組成物。
  389. 前記増殖培地は、０．５ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項３７７～３８８のいずれか一項に記載の組成物。
  390. 前記増殖培地は、約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項３８９に記載の組成物。
  391. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項３７７～３９０のいずれか一項に記載の組成物。
  392. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項３９１に記載の組成物。
  393. 前記増殖培地は、０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項３７７～３９２のいずれか一項に記載の組成物。
  394. 前記増殖培地は、約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項３９３に記載の組成物。
  395. 前記増殖培地は、２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項３７７～３９４のいずれか一項に記載の組成物。
  396. 前記増殖培地は、約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項３９５に記載の組成物。
  397. 前記増殖培地は、５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項３７７～３９６のいずれか一項に記載の組成物。
  398. 前記増殖培地は、約５ｇ／Ｌのグルコース又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項３９７に記載の組成物。
  399. 前記増殖培地は、少なくとも０．５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項３３７～３９８のいずれか一項に記載の組成物。
  400. 前記増殖培地は、少なくとも０．７５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項３９９に記載の組成物。
  401. 前記増殖培地は、少なくとも１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項３９９に記載の組成物。
  402. 前記増殖培地は、約１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項３９９に記載の組成物。
  403. 前記増殖培地は、約２ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項３９９に記載の組成物。
  404. 前記増殖培地は、５．５～７．５のｐＨである、請求項３３７～４０３のいずれか一項に記載の組成物。
  405. 前記増殖培地は、約６．５のｐＨである、請求項４０４に記載の組成物。
  406. ヘモグロビン依存性細菌の培養に使用するための増殖培地であって、ヘモグロビン代替物質を含み、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、増殖培地。
  407. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項４０６に記載の増殖培地。
  408. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項４０７に記載の増殖培地。
  409. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項４０７に記載の増殖培地。
  410. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項４０９に記載の増殖培地。
  411. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項４１０に記載の増殖培地。
  412. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項４０７～４１１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  413. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項４０７～４１１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  414. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項４１３に記載の増殖培地。
  415. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項４０７～４１１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  416. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項４１５に記載の増殖培地。
  417. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項４１６に記載の増殖培地。
  418. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項４０６に記載の増殖培地。
  419. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項４１８に記載の増殖培地。
  420. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項４１９に記載の増殖培地。
  421. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項４１８～４２０のいずれか一項に記載の増殖培地。
  422. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項４１８～４２０のいずれか一項に記載の増殖培地。
  423. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項４１８～４２０のいずれか一項に記載の増殖培地。
  424. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項４０６～４２３のいずれか一項に記載の増殖培地。
  425. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項４０６～４２３のいずれか一項に記載の増殖培地。
  426. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項４２５に記載の増殖培地。
  427. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項４２５に記載の増殖培地。
  428. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項４２５に記載の増殖培地。
  429. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項４２５に記載の増殖培地。
  430. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項４２５に記載の増殖培地。
  431. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項４２５～４３０のいずれか一項に記載の増殖培地。
  432. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株である、請求項４２５～４３１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  433. 前記ヘモグロビン代替物質は、増殖培地中でヘモグロビンの代わりに用いられて、ヘモグロビン依存性細菌の増殖を促進することができる、請求項４０６～４３２のいずれか一項に記載の増殖培地。
  434. ヘモグロビン又はその誘導体を含まない、請求項４０６～４３３のいずれか一項に記載の増殖培地。
  435. 動物性製品を含まない、請求項４０６～４３４のいずれか一項に記載の増殖培地。
  436. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度と比較して増加した速度で増殖する、請求項４０６～４３５のいずれか一項に記載の増殖培地。
  437. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも５０％高い、請求項４３６に記載の増殖培地。
  438. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも１００％高い、請求項４３６に記載の増殖培地。
  439. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より２００％～４００％高い、請求項４３６に記載の増殖培地。
  440. 前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する前記速度は、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖する速度より少なくとも３００％高い、請求項４３６に記載の増殖培地。
  441. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度と比較してより高い細胞密度まで増殖する、請求項４０６～４４０のいずれか一項に記載の増殖培地。
  442. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも５０％高い細胞密度まで増殖する、請求項４４１に記載の増殖培地。
  443. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも１００％高い細胞密度まで増殖する、請求項４４１に記載の増殖培地。
  444. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より２００％～４００％高い細胞密度まで増殖する、請求項４４１に記載の増殖培地。
  445. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、前記ヘモグロビン代替物質を含む前記増殖培地中において、前記ヘモグロビン代替物質がないこと以外には同じ増殖培地中で前記ヘモグロビン依存性細菌が増殖して到達する細胞密度より少なくとも３００％高い細胞密度まで増殖する、請求項４４１に記載の増殖培地。
  446. 酵母エキス、ダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９、ダイズペプトンＥ１１０ １９８８５、リン酸二カリウム、リン酸一カリウム、Ｌ－システイン－ＨＣｌ、塩化アンモニウム、グルシデックス２１Ｄ及びグルコースを含む、請求項４０６～４４５のいずれか一項に記載の増殖培地。
  447. ５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項４４６に記載の増殖培地。
  448. 約１０ｇ／Ｌの酵母エキス１９５１２を含む、請求項４４６に記載の増殖培地。
  449. １０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項４４６～４４８のいずれか一項に記載の増殖培地。
  450. 約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項４４９に記載の増殖培地。
  451. 約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＡ２ＳＣ １９６４９を含む、請求項４４９に記載の増殖培地。
  452. １０ｇ／Ｌ～１５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項４４６～４５１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  453. 約１２．５ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項４５２に記載の増殖培地。
  454. 約１０ｇ／ＬのダイズペプトンＥ１１０ １９８８５を含む、請求項４５２に記載の増殖培地。
  455. １ｇ／Ｌ～３ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項４４６～４５４のいずれか一項に記載の増殖培地。
  456. 約１．５９ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項４５５に記載の増殖培地。
  457. 約２．５ｇ／Ｌのリン酸二カリウムを含む、請求項４５５に記載の増殖培地。
  458. ０．５ｇ／Ｌ～１．５ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項４４６～４５７のいずれか一項に記載の増殖培地。
  459. 約０．９１ｇ／Ｌのリン酸一カリウムを含む、請求項４５８に記載の増殖培地。
  460. ０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項４４６～４５９のいずれか一項に記載の増殖培地。
  461. 約０．５ｇ／ＬのＬ－システイン－ＨＣｌを含む、請求項４６０に記載の増殖培地。
  462. ０．１ｇ／Ｌ～１．０ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項４４６～４６１のいずれか一項に記載の増殖培地。
  463. 約０．５ｇ／Ｌの塩化アンモニウムを含む、請求項４６２に記載の増殖培地。
  464. ２０ｇ／Ｌ～３０ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項４４６～４６３のいずれか一項に記載の増殖培地。
  465. 約２５ｇ／Ｌのグルシデックス２１Ｄを含む、請求項４６４に記載の増殖培地。
  466. ５ｇ／Ｌ～１５ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項４４６～４６５のいずれか一項に記載の増殖培地。
  467. 約５ｇ／Ｌのグルコース又は約１０ｇ／Ｌのグルコースを含む、請求項４６６に記載の増殖培地。
  468. 少なくとも０．５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項４０６～４６７のいずれか一項に記載の増殖培地。
  469. 少なくとも０．７５ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項４６８に記載の増殖培地。
  470. 少なくとも１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項４６８に記載の増殖培地。
  471. 約１ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項４６８に記載の増殖培地。
  472. 約２ｇ／Ｌの前記ヘモグロビン代替物質を含む、請求項４６８に記載の増殖培地。
  473. ５．５～７．５のｐＨである、請求項４０６～４７２のいずれか一項に記載の増殖培地。
  474. 約６．５のｐＨである、請求項４７３に記載の増殖培地。
  475. ヘモグロビン依存性細菌のための増殖培地中でヘモグロビン又はその誘導体の代替物質として使用するためのヘモグロビン代替物質であって、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスであるヘモグロビン代替物質。
  476. シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項４７５に記載のヘモグロビン代替物質。
  477. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項４７６に記載のヘモグロビン代替物質。
  478. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項４７６に記載のヘモグロビン代替物質。
  479. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項４７８に記載のヘモグロビン代替物質。
  480. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項４７９に記載のヘモグロビン代替物質。
  481. シアノバクテリアである、請求項４７６～４８０のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  482. シアノバクテリアバイオマスである、４７６～４８０のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  483. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項４８２に記載のヘモグロビン代替物質。
  484. シアノバクテリア成分である、請求項４７６～４８０のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  485. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項４８４に記載のヘモグロビン代替物質。
  486. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項４８５に記載のヘモグロビン代替物質。
  487. 緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項４７５に記載のヘモグロビン代替物質。
  488. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項４８７に記載のヘモグロビン代替物質。
  489. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項４８８に記載のヘモグロビン代替物質。
  490. 緑藻である、請求項４８７～４８９のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  491. 緑藻バイオマスである、請求項４８７～４８９のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  492. 緑藻成分である、請求項４８７～４８９のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  493. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項４７５～４９２のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  494. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項４７５～４９２のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  495. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項４９４に記載のヘモグロビン代替物質。
  496. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項４９４に記載のヘモグロビン代替物質。
  497. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項４９４に記載のヘモグロビン代替物質。
  498. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項４９４に記載のヘモグロビン代替物質。
  499. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項４９４に記載のヘモグロビン代替物質。
  500. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項４９４～４９９のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  501. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株である、請求項４９４～５００のいずれか一項に記載のヘモグロビン代替物質。
  502. （ａ）ヘモグロビン依存性細菌と、
    （ｂ）ヘモグロビン代替物質と
    を含む細菌組成物であって、前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリア成分、シアノバクテリアバイオマス、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、細菌組成物。
  503. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア、シアノバクテリアバイオマス又はシアノバクテリア成分である、請求項５０２に記載の細菌組成物。
  504. 前記シアノバクテリアは、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａｌｅｓ）目のものである、請求項５０３に記載の細菌組成物。
  505. 前記シアノバクテリアは、アルスロネマ（Ａｒｔｈｒｏｎｅｍａ）、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）、ブレンノトリクス（Ｂｌｅｎｎｏｔｈｒｉｘ）、クリナリウム（Ｃｒｉｎａｌｉｕｍ）、ゲイトレリネマ（Ｇｅｉｔｌｅｒｉｎｅｍａ）、ハロミクロネマ（Ｈａｌｏｍｉｃｒｏｎｅｍａ）、ハロスピルリナ（Ｈａｌｏｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、ヒドロコレウム（Ｈｙｄｒｏｃｏｌｅｕｍ）、ジャージネマ（Ｊａａｇｉｎｅｍａ）、カタグニメネ（Ｋａｔａｇｎｙｍｅｎｅ）、コムボフォロン（Ｋｏｍｖｏｐｈｏｒｏｎ）、レプトリングビヤ（Ｌｅｐｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、リムノスリックス（Ｌｉｍｎｏｔｈｒｉｘ）、リングビヤ（Ｌｙｎｇｂｙａ）、ミクロコレウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ）、ユレモ（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）、フォルミディウム（Ｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、プランクトリングビヤ（Ｐｌａｎｋｔｏｌｙｎｇｂｙａ）、プランクトトリコイデス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｃｏｉｄｅｓ）、プランクトスリックス（Ｐｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘ）、プレクトネマ（Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ）、シュードアナベナ（Ｐｓｅｕｄｏａｎａｂａｅｎａ）、シュードフォルミジウム（Ｐｓｅｕｄｏｐｈｏｒｍｉｄｉｕｍ）、スキゾスリックス（Ｓｃｈｉｚｏｔｈｒｉｘ）、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、スタリア（Ｓｔａｒｒｉａ）、シンプロカ（Ｓｙｍｐｌｏｃａ）、トリココレウス（Ｔｒｉｃｈｏｃｏｌｅｕｓ）、トリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）又はチコネマ（Ｔｙｃｈｏｎｅｍａ）属のものである、請求項５０３に記載の細菌組成物。
  506. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ）属のものである、請求項５０４に記載の細菌組成物。
  507. 前記シアノバクテリアは、アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）及び／又はアルスロスピラ・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ）である、請求項５０５に記載の細菌組成物。
  508. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアである、請求項５０３～５０７のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  509. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリアバイオマスである、請求項５０３～５０７のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  510. 前記シアノバクテリアバイオマスは、スピルリナである、請求項５０９に記載の細菌組成物。
  511. 前記ヘモグロビン代替物質は、シアノバクテリア成分である、請求項５０３～５０７のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  512. 前記シアノバクテリア成分は、スピルリナ成分である、請求項５１１に記載の細菌組成物。
  513. 前記スピルリナ成分は、可溶性スピルリナ成分である、請求項５１２に記載の細菌組成物。
  514. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻、緑藻成分又は緑藻バイオマスである、請求項５０２に記載の細菌組成物。
  515. 前記緑藻は、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｌｅｓ）目のものである、請求項５１４に記載の細菌組成物。
  516. 前記緑藻は、アカンソスフェラ（Ａｃａｎｔｈｏｓｐｈａｅｒａ）、アクチナストルム（Ａｃｔｉｎａｓｔｒｕｍ）、アパトコッカス（Ａｐａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、アポドコッカス（Ａｐｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、アウキセノクロレラ（Ａｕｘｅｎｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ブランドティア（Ｂｒａｎｄｔｉａ）、カロリブランドティア（Ｃａｒｏｌｉｂｒａｎｄｔｉａ）、カテナ（Ｃａｔｅｎａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クロロパルバ（Ｃｈｌｏｒｏｐａｒｖａ）、クロステリオプシス（Ｃｌｏｓｔｅｒｉｏｐｓｉｓ）、コンパクトクロレラ（Ｃｏｍｐａｃｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、コロナコッカス（Ｃｏｒｏｎａｃｏｃｃｕｓ）、コロナストルム（Ｃｏｒｏｎａｓｔｒｕｍ）、キリンドロケリス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｅｌｉｓ）、ジアカントス（Ｄｉａｃａｎｔｈｏｓ）、ジセルラ（Ｄｉｃｅｌｌｕｌａ）、ジクロスター（Ｄｉｃｌｏｓｔｅｒ）、ディクチオスフェリウム（Ｄｉｃｔｙｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ジディモゲネス（Ｄｉｄｙｍｏｇｅｎｅｓ）、エオミケス（Ｅｏｍｙｃｅｓ）、フィスリセラ（Ｆｉｓｓｕｒｉｃｅｌｌａ）、フォリクラリア（Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉａ）、ゲミネラ（Ｇｅｍｉｎｅｌｌａ）、グロエオティラ（Ｇｌｏｅｏｔｉｌａ）、ゴレンキニオプシス（Ｇｏｌｅｎｋｉｎｉｏｐｓｉｓ）、ヘゲワルディア（Ｈｅｇｅｗａｌｄｉａ）、ヘリコスポリジウム（Ｈｅｌｉｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、ヘイニギア（Ｈｅｙｎｉｇｉａ）、ヒンダキア（Ｈｉｎｄａｋｉａ）、ホルモスポラ（Ｈｏｒｍｏｓｐｏｒａ）、カレンジンラ（Ｋａｌｅｎｊｉｎｌａ）、ケラトコッカス（Ｋｅｒａｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ケルマティア（Ｋｅｒｍａｔｉａ）、レプトクロレラ（Ｌｅｐｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マラスフェリウム（Ｍａｒａｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、マリンクロレラ（Ｍａｒｉｎｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、マルバニア（Ｍａｒｖａｎｉａ）、マサイア（Ｍａｓａｉａ）、マイヤレラ（Ｍｅｙｅｒｅｌｌａ）、ミクラクチニウム（Ｍｉｃｒａｃｔｉｎｉｕｍ）、ムチドスフェリウム（Ｍｕｃｉｄｏｓｐｈａｅｒｉｕｍ）、ムリエラ（Ｍｕｒｉｅｌｌａ）、ナンノクロリス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｉｓ）、ナノクロルム（Ｎａｎｏｃｈｌｏｒｕｍ）、パルメロカエテ（Ｐａｌｍｅｌｌｏｃｈａｅｔｅ）、パラクロレラ（Ｐａｒａｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、プランクトクロレラ（Ｐｌａｎｋｔｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、ポドヘドラ（Ｐｏｄｏｈｅｄｒａ）、プロトテカ（Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ）、シュードクロリス（Ｐｓｅｕｄｏｃｈｌｏｒｉｓ）、シュードシデロセロプシス（Ｐｓｅｕｄｏｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）、プミリオスフェラ（Ｐｕｍｉｌｉｏｓｐｈａｅｒａ）、シデロセリス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｉｓ）、シデロセロプシス（Ｓｉｄｅｒｏｃｅｌｏｐｓｉｓ）又はゾウクロレラ（Ｚｏｏｃｈｌｏｒｅｌｌａ）属のものである、請求項５１５に記載の細菌組成物。
  517. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻である、請求項５１４～５１６のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  518. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻バイオマスである、請求項５１４～５１６のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  519. 前記ヘモグロビン代替物質は、緑藻成分である、請求項５１４～５１６のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  520. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、アナエロブチリクム（Ａｎａｅｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロアシバチルス（Ｃｌｏａｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、コリンセラ（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、クチバクテリウム（Ｃｕｔｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、エイセンベルギエラ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｉｅｌｌａ）、エリシペロトリクス（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｒｉｃｈａｃｅａｅ）、ユーバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）／モギバクテリウム（Ｍｏｇｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フェーカリバクテリウム（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フルニエレラ（Ｆｏｕｒｎｉｅｒｅｌｌａ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メガスフェラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）、パラバクテロイデス（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ペプトニフィルス（Ｐｅｐｔｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、ペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラリミクロビウム（Ｒａｒｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ）、シュトレウォーシア（Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈｉａ）又はベイロネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）属の細菌である、請求項５０２～５１９のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  521. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属のものである、請求項５０２～５１９のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  522. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・アルベンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｌｂｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・アムニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｍｎｉｉ）、プレボテラ・バーゲンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブレビス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｅｖｉｓ）、プレボテラ・ブリアンティイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｒｙａｎｔｉｉ）、プレボテラ・ブッカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ）、プレボテラ・ブッカリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｌｉｓ）、プレボテラ・コプリ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｐｒｉ）、プレボテラ・デンタリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｌｉｓ）、プレボテラ・デンティコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・ディシエンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｉｓｉｅｎｓ）、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・マクロサ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｃｕｌｏｓａ）、プレボテラ・マルシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍａｒｓｈｉｉ）、プレボテラ・メラニノジェニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、プレボテラ・マイカンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｉｃａｎｓ）、プレボテラ・マルチフォルミス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｉｓ）、プレボテラ・ニグレッセンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ）、プレボテラ・オラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒａｌｉｓ）、プレボテラ・オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ）、プレボテラ・オウロラム（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｕｌｏｒｕｍ）、プレボテラ・パレンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｌｅｎｓ）、プレボテラ・サリバーエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｌｉｖａｅ）、プレボテラ・ステルコレア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｔｅｒｃｏｒｅａ）、プレボテラ・タンネラエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔａｎｎｅｒａｅ）、プレボテラ・チモネンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・ジェジュニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｊｅｊｕｎｉ）、プレボテラ・アウランティアカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ａｕｒａｎｔｉａｃａ）、プレボテラ・バーロニアエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂａｒｏｎｉａｅ）、プレボテラ・コロランス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｌｏｒａｎｓ）、プレボテラ・コーポリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｃｏｒｐｏｒｉｓ）、プレボテラ・デンタシニ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔａｓｉｎｉ）、プレボテラ・エノエカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｅｎｏｅｃａ）、プレボテラ・ファルセニイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆａｌｓｅｎｉｉ）、プレボテラ・フスカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｆｕｓｃａ）、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・ロエッシェイイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｌｏｅｓｃｈｅｉｉ）、プレボテラ・マルチサッカリボラックス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｕｌｔｉｓａｃｃｈａｒｉｖｏｒａｘ）、プレボテラ・ナンセイエンシス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎａｎｃｅｉｅｎｓｉｓ）、プレボテラ・オリザエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｙｚａｅ）、プレボテラ・パルディビベンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐａｌｕｄｉｖｉｖｅｎｓ）、プレボテラ・プレウリチディス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｐｌｅｕｒｉｔｉｄｉｓ）、プレボテラ・ルミニコーラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｒｕｍｉｎｉｃｏｌａ）、プレボテラ・サッカロリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・スコポス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｃｏｐｏｓ）、プレボテラ・シャーヒイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｓｈａｈｉｉ）、プレボテラ・ズーグレオフォルマンス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓ）又はプレボテラ・ベロラリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｖｅｒｏｒａｌｉｓ）である、請求項５２１に記載の細菌組成物。
  523. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、プレボテラ・ヒスチコラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｉｓｔｉｃｏｌａ）種のものである、請求項５２１に記載の細菌組成物。
  524. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項５２１に記載の細菌組成物。
  525. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）のヌクレオチド配列に対して少なくとも９９％のゲノム、１６Ｓ及び／又はＣＲＩＳＰＲ配列同一性を含む、請求項５２１に記載の細菌組成物。
  526. 前記プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）は、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｂ５０３２９（ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ５０３２９）又はプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株Ｃ（ＡＴＴＣ寄託番号ＰＴＡ－１２６１４０）である、請求項５２１に記載の細菌組成物。
  527. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表１に列記される１つ又は複数のタンパク質を含むプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）菌株である、請求項５２１～５２６のいずれか一項に記載の細菌組成物。
  528. 前記ヘモグロビン依存性細菌は、表２に列記されるタンパク質を実質的に含まないプレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）株である、請求項５２１～５２７のいずれか一項に記載の細菌組成物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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