CN115969888A - 一株唾液联合乳杆菌及其在制备治疗癌症的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一株唾液联合乳杆菌及其在制备治疗癌症的药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了一株唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)XA‑1416，此唾液联合乳杆菌XA‑1416可以显著降低结肠肿瘤的生长速度，可以显著增加PD‑1抑制剂的响应效率，在PD‑1抑制剂存在的情况下进一步降低结肠肿瘤的生长速度，可以显著增加结肠癌肿瘤组织中CD8+T细胞的浸润，可以显著促进CD8+T细胞分泌TNF‑α，对胃癌细胞系AGS和结肠癌细胞系HCT116的增殖具有显著的抑制作用，可见，唾液联合乳杆菌XA‑1416在制备治疗癌症的药物中极具应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一株唾液联合乳杆菌及其在制备治疗癌症的药物中的应用，属于生物医药技术领域。
背景技术
肿瘤是指生物体内由多种因素导致的其细胞异常生长而引发的疾病，按其对生物体的特性及危害又分为恶性肿瘤和良性肿瘤。恶性肿瘤，又称为癌症，具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征。
PD-1/PD-L1免疫疗法(immunotherapy)是一类抗癌免疫疗法，其通过阻断PD1/PD-L1信号通路使癌细胞死亡，从而治疗多种类型癌症，改善患者总生存期。然而，PD-1/PD-L1免疫疗法目前在临床应用上存在比较多的问题，并不是所有的患者都适用于该疗法。
例如，从PD-1抑制剂启动临床试验起，已有15～20％的患者出现了耐药；并且，PD-1抑制剂存在比较强的副作用；另外，有部分患者对PD-1/PD-L1免疫疗法并不响应，此种由响应效率低引发的继发耐药现象也限制了PD-1/PD-L1免疫疗法在临床上的应用(参见文献：Jin-Yu Sun et al.2005)。
因此，亟需找到能够有效治疗癌症，且耐药性和副作用小的治疗癌症的药物，或者，亟需找到能够降低PD-1抑制剂耐药性和副作用，且提高PD-1/PD-L1免疫疗法响应效率的方法。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了提供了一株唾液联合乳杆菌(LigilactobacillusSalivarius)XA-1416，所述唾液联合乳杆菌XA-1416保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.40307，保藏日期为2022年09月05日。
所述唾液联合乳杆菌XA-1416来源于深圳地区的健康人群冻存粪便样本，该菌株经测序分析，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示，将测序得到的序列在NCBI中进行核酸序列比对，结果显示菌株为唾液联合乳杆菌，命名为唾液联合乳杆菌XA-1416。
本发明还提供了上述唾液联合乳杆菌XA-1416在制备治疗癌症的药物中的应用。
在本发明的一种实施方式中，所述癌症为泛实体瘤导致的癌症；所述泛实体瘤导致的癌症为胃癌、直肠癌或结肠癌。
在本发明的一种实施方式中，所述药物还含有PD-1抑制剂。
在本发明的一种实施方式中，所述药物还含有药物载体和/或药用辅料。
在本发明的一种实施方式中，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。
在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂和/或释放阻滞剂。
在本发明的一种实施方式中，所述药物的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
在本发明的一种实施方式中，所述药物中，唾液联合乳杆菌XA-1416的活菌数不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
本发明还提供了一种治疗癌症的药物，所述药物含有上述唾液联合乳杆菌XA-1416。
在本发明的一种实施方式中，所述癌症为泛实体瘤导致的癌症；所述泛实体瘤导致的癌症为胃癌、直肠癌或结肠癌。
在本发明的一种实施方式中，所述药物还含有PD-1抑制剂。
在本发明的一种实施方式中，所述药物还含有药物载体和/或药用辅料。
在本发明的一种实施方式中，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。
在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂和/或释放阻滞剂。
在本发明的一种实施方式中，所述药物的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
在本发明的一种实施方式中，所述药物中，唾液联合乳杆菌XA-1416的活菌数不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
本发明技术方案，具有如下优点：
本发明提供了一株唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)XA-1416，此唾液联合乳杆菌XA-1416能够治疗癌症，具体体现在：
(1)可以显著降低结肠肿瘤的生长速度；
(2)可以显著增加PD-1抑制剂的响应效率，在PD-1抑制剂存在的情况下进一步降低结肠肿瘤的生长速度；
(3)可以显著增加结肠癌肿瘤组织中CD8+T细胞的浸润；
(4)可以显著促进CD8+T细胞分泌TNF-α；
(5)对胃癌细胞系AGS和结肠癌细胞系HCT116的增殖具有显著的抑制作用，
可见，唾液联合乳杆菌XA-1416在制备治疗癌症的药物中极具应用前景。
另外，唾液联合乳杆菌XA-1416属于肠益生菌，能够改善肠道菌群，具有耐药性和副作用的小优势。
生物材料保藏
一株唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)XA-1416，分类学命名为Ligilactobacillus Salivarius，已于2022年09月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.40307，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
附图说明
图1：不同组小鼠肿瘤的体积变化折线图。图1中，肿瘤体积组间差异采用Two-wayANOVA analysis，*表示p<0.05，***表示p<0.001。
图2：不同组小鼠肿瘤的照片。
图3：不同组小鼠肿瘤的重量统计结果。图3中，nc表示无统计学差异，*表示p<0.05，***表示p<0.001。
图4：唾液联合乳杆菌XA-1416的流式统计分析结果。图4中，采用Mann-Whitneytest，*表示p<0.05。
图5：唾液联合乳杆菌XA-1416对CD8+T细胞分泌Granzyme B的影响。图5中，**表示p<0.01，ns表示无显著差异。
图6：唾液联合乳杆菌XA-1416对CD8+T细胞分泌IFN-γ的影响。图6中，**表示p<0.01，ns表示无显著差异。
图7：唾液联合乳杆菌XA-1416对CD8+T细胞分泌TNF-α的影响。图7中，*表示p<0.05，**表示p<0.01，ns表示无显著差异。
图8：唾液联合乳杆菌XA-1416对胃癌细胞系AGS的增殖影响。图8中，***表示p<0.001。
图9：唾液联合乳杆菌XA-1416对胃癌细胞系HCT116的增殖影响。图9中，***表示p<0.001。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
下述实施例中涉及的培养基如下：
MRS固体培养基：蛋白胨10.0g/L、牛肉浸粉5.0g/L、葡萄糖20.0g/L、乙酸钠5.0g/L、酵母浸粉4.0g/L、柠檬酸氢三铵2.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、硫酸镁0.2g/L、吐温80.01mL/L、琼脂15.0g/L、硫酸锰0.05g/L，pH为6.2。
MRS液体培养基：蛋白胨10.0g/L、牛肉浸粉5.0g/L、葡萄糖20.0g/L、乙酸钠5.0g/L、酵母浸粉4.0g/L、柠檬酸氢三铵2.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、硫酸镁0.2g/L、吐温80.01mL/L、硫酸锰0.05g/L，pH为6.2。
YCFA固体培养基：胰蛋白胨10.0g/L、酵母提取物2.5g/L、碳酸氢钠4.0g/L、葡萄糖2.0g/L、麦芽糖2.0g/L、纤维二糖2.0g/L、半胱氨酸盐酸盐1.0g/L、磷酸氢二钾0.25g/L、磷酸二氢钾0.45g/L、硫酸铵0.9g/L、氯化钠0.9g/L、七水合硫酸镁0.09g/L、二水合氯化钙0.09g/L、刃天青1.0mL/L、氯高铁血红素0.01g/L、VFA mix 6.2mL/L(VFAmix：醋酸17.0mL、丙酸6.0mL、正戊酸1.0mL、异戊酸1.0mL、异丁酸1.0mL)、vitamin solution I 1.0mL/L(vitamin solution I：生物素5.0mg、Vitamin B12 5.0mg、对氨基苯甲酸15.0mg、叶酸VB25.0mg、盐酸维生素B6 75mg)、琼脂15.0g/L，Distilled water定容至1L，pH为7.0。
BHI液体培养基：Tryptone 10.0g/L、Sodium Chloride 5.0g/L、DisodiumHydrogen Phosphate 2.5g/L、Dextrose 2.0g/L、Heart Extract Powder 9.8g/L、BrainsExtract Powder 7.7g/L，pH为7.4。
下述实施例中涉及的消化液如下：
0.25％胰酶消化液：先称取2.5g猪源胰蛋白酶(购自Gibco公司)、0.2g EDTA溶解于PBS缓冲液(购自Solarbio，货号P1020)中，然后用HCl调节pH至7.4，最后加PBS缓冲液定容至1L，即得0.25％胰酶消化液。
下述实施例中涉及的菌悬液、培养上清和死菌的制备方法如下：
取唾液联合乳杆菌菌液按4％(v/v)的接种量接种于MRS液体培养基中，于37℃恒温培养箱中静置培养3d，得到培养液；将培养液经8000g离心10min，得到唾液联合乳杆菌培养上清和唾液联合乳杆菌菌体；将唾液联合乳杆菌菌体经生理盐水洗涤后重悬于PBS缓冲液(购自Solarbio，货号P1020)中至菌浓度为1×108CFU/mL，得到唾液联合乳杆菌菌悬液，将唾液联合乳杆菌菌悬液于-80℃下保存待用；将唾液联合乳杆菌菌体于100℃煮沸15min，得到唾液联合乳杆菌死菌；将唾液联合乳杆菌死菌重悬于MRS液体培养基中至菌浓度为1×108CFU/mL，得到唾液联合乳杆菌死菌悬液。
实验例1：唾液联合乳杆菌XA-1416的获取
本实验例提供了唾液联合乳杆菌XA-1416的获取过程，具体过程如下：
在厌氧工作台中，取来源于深圳地区的29个健康人群冻存粪便样本，按等积混匀，得到混合样本；吸取0.5mL混合样本到厌氧血培养瓶中，于37℃恒温培养箱中静置培养3d后，先吸取0.1mL培养3d的混合样本到0.9mL含1g/LL-半胱氨酸盐酸盐的PBS缓冲液(购自Solarbio，货号P1020)中，得到10-1稀释液，然后吸取0.1mL 10-1稀释液于到0.9mL含1g/LL-半胱氨酸盐酸盐的PBS缓冲液中，得到10-2稀释液，按此操作，依次得到10-3、10-4、10-5、10-6、10-7稀释液；吸取10-5稀释液、10-6稀释液和10-7稀释液分别以100μL/板的涂布量涂布于已除氧YCFA固体培养基上(每个梯度的稀释液对应3个已除氧YCFA固体培养基)，于37℃恒温培养箱中静置培养3d后，挑取单菌落接种于已除氧BHI液体培养基中，于37℃恒温培养箱中静置培养3d，得到菌液；将各菌液所对应的各菌株编号后，参照教科书《微生物学》(沈萍，陈向东主编)中所记载的步骤进行革兰氏染色、菌种鉴定、生理生化实验和基因组鉴定分析，选取具有唾液联合乳杆菌典型特征的菌株，得到菌株XA-1416；
菌株鉴定过程如下：
取XA-1416菌体，用细菌基因组提取试剂盒提取XA-1416的基因组，使用序列分别如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的27F/1492R引物对，以提取得到的XA-1416的基因组为模板进行扩增，得到XA-1416的16S rRNA(XA-1416的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示)；将XA-1416的16S rDNA在NCBI的Blastn程序进行核酸序列比对，结果显示此菌株为唾液联合乳杆菌，将其命名为唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)XA-1416。
实验例2：唾液联合乳杆菌XA-1416对结肠癌模型小鼠肿瘤生长的影响
本实验例提供了唾液联合乳杆菌XA-1416对结肠癌模型小鼠肿瘤生长的影响实验，实验过程如下：
取20只C57BL/6J小鼠(雌性，5周龄，体重16～20g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司)随机分为4组，每组5只，4组分别为：空白对照组(NC)、灌胃PD-1抑制剂的PD-1治疗组、灌胃唾液联合乳杆菌XA-1416菌悬液的L.salivarius单菌治疗组(Sali)、灌胃PD-1抑制剂和唾液联合乳杆菌XA-1416菌悬液的L.salivarius+PD-1联用治疗组(Sali+PD-1)。
将各组小鼠在恒温恒湿的环境中进行适应性饲养，自由饮水，适应性饲养7天后开始实验。实验开始后，对各组小鼠进行抗生素处理两周，抗生素处理的给药方式为：氨苄青霉素浓度为1mg/mL的抗生素水溶液饮水，新霉素浓度为10mg/mL、甲硝唑浓度为10mg/mL、万古霉素浓度为5mg/mL的混合抗生素水溶液灌胃，灌胃剂量为200μL/只/次，每天灌胃一次。抗生素处理结束后，单菌治疗组小鼠和联用治疗组小鼠按1×108CFU/只/次的剂量灌胃菌悬液，其余组小鼠灌胃等体积PBS缓冲液，每天灌胃一次。灌胃7天后，在每组小鼠皮下接种5×105个MC38细胞(购自ATCC细胞库)，皮下种瘤的当天记为D0(基线)。皮下种瘤后，单菌治疗组小鼠和联用治疗组小鼠持续灌胃菌悬液直至实验结束，空白对照组小鼠和PD-1治疗组小鼠持续灌胃PBS缓冲液直至实验结束。当肿瘤平均体积达到50mm3时，PD-1治疗组小鼠和联用治疗组小鼠开始按100μg/只/次的剂量注射PD-1抑制剂(购自Biocell公司)，每三天注射一次，共注射四次。实验期间，从D0开始每两天观察和量取各组小鼠肿瘤的大小和重量，并按照公式肿瘤体积＝1/2×肿瘤长径2×肿瘤宽径计算各组小鼠的肿瘤体积，量取和计算结果见图1～3。
由图1～3可知，空白对照组的肿瘤快速增长，在D21达到900mm3；PD-1治疗组和L.salivarius单菌治疗组的肿瘤生长速度均显著低于空白对照组，这两组在D21的肿瘤体积约为500mm3；L.salivarius+PD-1联用治疗组的肿瘤生长速度均显著低于空白对照组、PD-1治疗组和L.salivarius单菌治疗组，在D21的肿瘤体积为116mm3。此结果说明唾液联合乳杆菌XA-1416可以显著降低结肠肿瘤的生长速度，并且，可以显著增加PD-1抑制剂的响应效率，在PD-1抑制剂存在的情况下进一步降低结肠肿瘤的生长速度。
实验例3：唾液联合乳杆菌XA-1416对结肠癌模型小鼠肿瘤中相关marker表达的影响
本实验例提供了唾液联合乳杆菌XA-1416对结肠癌模型小鼠肿瘤中相关marker表达的影响实验，实验过程如下：
向肿瘤解离试剂盒(Miltenyi，CAT#130-096-730)的每瓶Enzyme D冻干粉中加入3mL RPMI 1640培养基(Corning Cat#10-040-CVR)，得到Enzyme D溶液；向肿瘤解离试剂盒的每瓶Enzyme R冻干粉中加入2.7mL RPMI 1640培养基，得到Enzyme R溶液；向肿瘤解离试剂盒的每瓶EnzymeA冻干粉中加入1mL肿瘤解离试剂盒里的Buffer 1试剂(Buffer 1试剂：1份Fixation/permeabilization Concentrate(4x)用3份Fixation/Perm Diluent稀释)，得到Enzyme A溶液；向gentleMACS C管中加入2.35mL RPMI 1640培养基、100μL Enzyme D溶液、50μL Enzyme R溶液和12.5μL Enzyme A溶液，得到混合酶溶液；取实验例2获得的D21的各组小鼠肿瘤；取肿瘤，剔除非肿瘤组织，剪成2mm3的小块后，添加至混合酶溶液中，得到混合物；利用gentleMACS Octo组织处理器将混合物进行过滤、重悬、定容至细胞浓度为1×108cell/μL，得到肿瘤细胞悬液。
取10μL肿瘤细胞悬液添加至流式管中，并在流式管中分别加入0.25μg CD8a抗体(APC-FIRE750荧光)和0.5μg CD45抗体(BV785荧光)(染料和抗体具体信息见表1)配置成混合液；将混合液于流式管中经离心，弃上清，用100μL Buffer 2试剂(Buffer 2试剂：1份Permeabilization Buffer(10x)用9份纯水稀释)重悬至原体积后，进行上机，使用流式细胞仪进行数据采集，使用Kaluza 2.1软件分析不同免疫细胞亚群CD45+(免疫细胞)、CD4-/CD8a+(杀伤性T细胞)的百分比，并利用Bartlett检验检验方差齐性和正态性，分析结果见图4。
由图4可知，与PD-1治疗组相比，L.salivarius单菌治疗组小鼠肿瘤组织中CD8+T细胞(p<0.05)浸润增加(增加了5％)。此结果说明唾液联合乳杆菌XA-1416能够有效地促进抗肿瘤免疫，并主要通过增加CD8+T细胞的浸润来杀伤肿瘤。
表1染料和抗体信息
| 荧光染料 | 抗体 | 货号 | 供应商 | Clone | ISO |
| APC-FIRE750 | CD8a | 100766 | Biolegend | 53-6.7 | Rat IgG2a,κ |
| BV785 | CD45 | 103149 | Biolegend | 30-F11 | Rat IgG2b,κ |
实验例4：唾液联合乳杆菌XA-1416对CD8+T细胞分泌Granzyme B、IFN-γ和TNF-α的影响
本实验例提供了唾液联合乳杆菌XA-1416对CD8+T细胞分泌Granzyme B、IFN-γ和TNF-α的影响实验，实验过程如下：
从Cd4creId2fl/fl小鼠(Taconic Stock#4196)中分离得到淋巴细胞，并利用MACSnegative selection(Thermo Fisher Scientific)(purity>95％)进行CD8+T细胞的纯化；将纯化得到的CD8+T细胞以1×106CFU/mL的添加量添加至预涂有anti-CD3(浓度为1μg/mL)和anti-CD28(浓度为2mg/mL)的含有10ng/mL重组小鼠IL-2的RPMI 1640培养基(CorningCat#10-040-CVR)中，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中静置培养48h；培养48h后，使用PBS缓冲液洗涤CD8+T细胞；洗涤后，以PBS缓冲液为空白对照，以MRS液体培养基为阴性对照，将CD8+T细胞分别添加至唾液联合乳杆菌死菌悬液和唾液联合乳杆菌培养上清中至细胞浓度为1×106CFU/mL，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中静置孵育24h；孵育24h后，通过流式细胞仪检测孵育上清液中Granzyme B、IFN-γ和TNF-α的含量，实验结果见图5～7。
由图5～7可知，唾液联合乳杆菌XA-1416的热灭活死菌降低了CD8+T细胞对TNF-α的表达(p＝0.006)，并且，唾液联合乳杆菌XA-1416的培养上清能够显著促进CD8+T细胞表达TNF-α(p＝0.020)(与阴性对照组相比，增加了4％)。此结果说明唾液联合乳杆菌XA-1416的代谢物能够有效地促进抗肿瘤免疫。
实验例5：唾液联合乳杆菌XA-1416对胃癌细胞系AGS和结肠癌细胞系HCT116增殖的影响
本实验例提供了唾液联合乳杆菌XA-1416对胃癌细胞系AGS和结肠癌细胞系HCT116增殖的影响实验，实验过程如下：
胃癌细胞系AGS共培养实验：将1支胃癌细胞系AGS细胞(购自ATCC)添加至含有10％(v/v)胎牛血清、1％(w/v，g/100mL)青霉素和1％(w/v，g/100mL)链霉素的RPMI 1640培养基(Corning Cat#10-040-CVR)的T25细胞瓶中，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中静置培养72h，得到贴壁AGS；弃去T25细胞瓶中的培养上清后，用PBS缓冲液洗涤T25细胞瓶内的贴壁AGS，洗涤结束后，将0.25％胰酶消化液以2mL/瓶的添加量添加至T25细胞瓶中浸泡贴壁AGS 30s，浸泡结束后，弃去0.25％胰酶消化液，将T25细胞瓶内的贴壁AGS于37℃下消化2min，消化结束后，用含有10％(v/v)胎牛血清的RPMI 1640培养基重悬T25细胞瓶内的AGS细胞并吹打均匀，得到细胞浓度为2×104CFU/mL的AGS悬液；以PBS缓冲液为空白对照，以大肠杆菌BL21(DE3)(购自ATCC)为阴性对照，100μL/孔的接种量将AGS悬液接种至96孔板中后，将唾液联合乳杆菌菌体以每孔2×106CFU(MOI＝100：1)的接种量接种至96孔板中，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中静置培养，培养期间，每隔24h检测96孔板中的细胞密度，连续检测4d，检测结果见图8；其中，细胞密度的检测方法为：弃去96孔板中的培养上清后，每孔加入100μL含10μL CCK-8试剂(购自Dojindo公司)的RPMI 1640培养基，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中孵育2h，孵育结束后，用酶标仪测定450nm处的吸光度。
结肠癌细胞系HCT116共培养实验：在胃癌细胞系AGS共培养实验的基础上，将胃癌细胞系AGS细胞替换为结肠癌细胞系HCT116细胞(购自ATCC)，检测结果见图9；其中，细胞密度的检测方法为：弃去96孔板中的培养上清后，每孔加入100μL含10μL CCK-8试剂(购自Dojindo公司)的RPMI 1640培养基，于37℃、5％(v/v)CO2的恒温培养箱中孵育2h，孵育结束后，用酶标仪测定450nm处的吸光度。
由图8～9可知，唾液联合乳杆菌XA-1416的活菌对胃癌细胞系AGS和结肠癌细胞系HCT116的增殖具有显著的抑制作用(与空白对照组相比，抑制了48％)。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)在制备治疗癌症的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述唾液联合乳杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.40307。
3.一株唾液联合乳杆菌(Ligilactobacillus Salivarius)，其特征在于，所述唾液联合乳杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.40307。
4.一种治疗癌症的药物，其特征在于，所述药物含有权利要求3所述的唾液联合乳杆菌。
5.如权利要求4所述的药物，其特征在于，所述药物还含有PD-1抑制剂。
6.如权利要求4或5所述的药物，其特征在于，所述药物还含有药物载体和/或药用辅料。
7.如权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。
8.如权利要求6或7所述的药物，其特征在于，所述药用辅料包含溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂和/或释放阻滞剂。
9.如权利要求4～8任一项所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
10.如权利要求4～9任一项所述的药物，其特征在于，所述癌症为泛实体瘤导致的癌症；所述泛实体瘤导致的癌症为胃癌、直肠癌或结肠癌。
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