JP2022521997A - 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ｒｎａの使用 - Google Patents

全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ｒｎａの使用 Download PDF

Info

Publication number
JP2022521997A
JP2022521997A JP2021550102A JP2021550102A JP2022521997A JP 2022521997 A JP2022521997 A JP 2022521997A JP 2021550102 A JP2021550102 A JP 2021550102A JP 2021550102 A JP2021550102 A JP 2021550102A JP 2022521997 A JP2022521997 A JP 2022521997A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
promoter
substance
chain structure
length
double chain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2021550102A
Other languages
English (en)
Inventor
リンリン チェン，
リー ヤン，
チューシャオ リウ，
シャン リー，
ファン ナン，
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Institute of Nutrition and Health of CAS
Original Assignee
Shanghai Institute of Nutrition and Health of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Institute of Nutrition and Health of CAS filed Critical Shanghai Institute of Nutrition and Health of CAS
Publication of JP2022521997A publication Critical patent/JP2022521997A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本発明では、全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡの促進物質の使用を提供する。【選択図】 図１

Description

本開示は、バイオ医薬の分野に属し、全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ＲＮＡ（ｃｉｒｃＲＮＡ）の使用に特に関する。
全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）は、典型的な多臓器性多組織性自己免疫疾患であり、複雑及び多様な臨床及び免疫学的症状、例えば、免疫学的寛容、リンパ球機能の制御不全及びリンパ球アポトーシスの障害、補体欠損症及び免疫複合体クリアランス機能障害、並びにサイトカイン分泌の制御不全を有し、免疫系全体の障害をほとんど包含する。臨床的には、ＳＬＥは、多臓器、例えば、腎臓、神経及び精神系、並びに血液系の障害として主に現れる。重要臓器が侵される前のＳＬＥ患者における早期診断は、ＳＬＥを予防及び治療し、患者の生活の質を高め、患者の生産性を向上させるのに非常に意義がある。しかし、生物学的診断のための現存するマーカーは、臓器の障害後に生じる、主に生物化学的及び免疫学的変化であり、ＳＬＥ患者における臓器障害の早期診断において使用することができない。
現在のところ、ＳＬＥの原因及び病因は、いまだ完全には理解されておらず、種々の因子、例えば、家族性の遺伝、性ホルモンによる撹乱及び環境因子に起因すると考えられている。したがって、特定の治療手段がいまだに欠乏しており、ＳＬＥの予防及び治療を増強することが基本的に不可能となっている。
先行技術における問題を解決するために、本開示の目的は、ＳＬＥにおけるｃｉｒｃＲＮＡの発現、及びＳＬＥの生物学的機能に対するこの制御作用を試験し、ＳＬＥの診断及び治療におけるｃｉｒｃＲＮＡの発現産物の使用を提供することである。
上記の目的及び関連する他の目的を達成するために、本開示では、以下の技術的解決法を採用する。
本開示の第１の態様では、ＳＬＥを治療するための医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質の使用を提供する。
本開示の第２の態様では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効量対象に投与することによりＳＬＥを治療するための方法を提供する。
本開示の第３の態様では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効用量含む、ＳＬＥを治療するための医薬を提供する。
本開示の第４の態様では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効用量と、ＳＬＥを治療するための少なくとも１つの追加の医薬とを含む、ＳＬＥを治療するための医薬の組合せを提供する。
本開示の第５の態様では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効量対象に投与し、ＳＬＥを治療するための追加の医薬を有効量対象に投与し、及び／又はＳＬＥを治療するための他の手段を対象に適用することにより、ＳＬＥを治療するための方法を提供する。
本開示の第６の態様では、
（１）ｃｉｒｃＲＮＡの経路を制御して環状ＲＮＡのレベルを増強する作用、及び
（２）ｃｉｒｃＲＮＡのレベルを細胞において直接上昇させる作用
からなる群から選択される１つ又は複数の作用を有する医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質の使用を提供する。
本開示の第７の態様では、ＳＬＥを治療するための医薬の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質の使用を提供する。
本開示の第８の態様では、全身性エリテマトーデスを検出するための物質の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの使用を提供する。
本開示の第９の態様では、ＳＬＥを検出するためのキットの調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質の使用を提供する。
本開示の第１０の態様では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための少なくとも１つの物質を含む、ＳＬＥを検出するためのキットを提供する。
先行技術と比較して、本開示は、以下の有益な作用を有する。
本開示によれば、１対の特定のプライマーは、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの発現を検出するように設計した。次いで、ＳＬＥを有する患者における１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの発現が検出され、この結果により、発現レベルの有意な低下が示された。したがって、ｃｉｒｃＲＮＡは、ＳＬＥの診断マーカーとして使用することができる。加えて、本開示では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子の細胞機能をｉｎ ｖｉｔｒｏで試験し、この場合、ｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子配列をｐＺＷ１ベクターに挿入して、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの高発現のための発現ベクターを構築した。空のベクターをトランスフェクトした対照と比較して、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子が高発現したＳＬＥ患者由来の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＫＲ）のリン酸化レベルの有意な下方制御、並びにＳＬＥ患者のＰＢＭＣ及び免疫Ｔ細胞におけるサイトカインＩＦＮベータ及びＳＬＥの診断遺伝子の発現の下方制御を示した。１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子及びこの発現産物が、ＳＬＥを治療するための医薬の調製において使用可能であることが示された。まとめると、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子は、ＳＬＥをより正確及び迅速に診断するＳＬＥの診断マーカーとして機能し得る。ｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子発現産物は、ＳＬＥの治療のための医薬を調製するための分子として機能し、ＳＬＥを治療するための新たな方法を提供し得る。
染色体上のｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの位置マップを例示する。 特異的検出プライマーを用いて検出した、ＳＬＥ患者におけるｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの発現を例示する。 ｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａによって得た受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を例示する。 ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及び特殊な２重鎖構造を有する同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２６種、並びに特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の２次構造図を例示する。 ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及び特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の高発現後のＰＫＲ及びＰＫＲの下流遺伝子のリン酸化レベルを例示する。 ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの高発現後に検出した、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣ及び免疫Ｔ細胞における、ＰＫＲのリン酸化レベル、並びにサイトカインＩＦＮベータ並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現の下方制御を例示する。 ｃｉｒｃＰＯＬＲ２ＡをヒトＨｅＬａ細胞へ導入後のサイトカインＩＦＮベータ、ＴＮＦα及びＩＬ６の発現を例示する。 ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性実験系を用いたｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａのインキュベーション後のｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性のレベルにおける変化を例示する。
本開示の特定の実施形態をさらに記載する前に、本開示の保護範囲は、以下の特定の実施形態に制限されないことが理解されるべきである。また、本開示の例において使用する用語は、特定の実施形態について記載することを意図し、本開示の保護範囲を制限することを意味しないことが理解されるべきである。特定の条件により特定しない以下の例における実験方法は、従来の条件又は製造者により推奨される条件に従って一般に行う。
数値範囲を例において示す場合、本開示において他に特定しない限り、各数値範囲の２つのエンドポイント及び２つのエンドポイント間の任意の値が選択され得ることが理解されるべきである。他に定義しない限り、本開示において使用するすべての技術的及び化学的用語は、当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。例において使用する特定の方法、設備、及び材料に加えて、本開示の例において記載するものと等価又は類似の任意の方法、設備、及び材料を使用して、従来の知識及び本開示の記載に従って当業者により本開示を実行することができる。
他に特定しない限り、本開示において開示する実験方法、検出方法、及び調製方法のすべてでは、分子生物学、生物化学、クロマチンの構造及び分析、分析化学、細胞培養、組換えＤＮＡ技術、並びに関連する分野における従来の技術を採用する。
ｃｉｒｃＲＮＡは、最近発見された非コードＲＮＡ分子である。伝統的直鎖状ＲＮＡとは異なって、ｃｉｒｃＲＮＡは、５’キャップ及び３’ポリ（Ａ）尾部を有しない共有結合したループ構造を有することが見出されている。最近の研究では、ｃｉｒｃＲＮＡは、種々の生体細胞において広範に存在するバックスプライシングにより主に形成され、非常に高い構造安定性、エキソヌクレアーゼによる分解の難しさ、組織特異性、並びにこの発現の時間的及び空間的特異性等により特徴づけられることが示されている。このような特性により、ｃｉｒｃＲＮＡが、疾患の診断及び治療のための方法の開発及び適用において広範な可能性を有することとなっている。
本開示の例では、ＳＬＥを治療するための医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質の使用を提供する。不完全２重鎖構造は、完全相補性塩基対形成、及び不対塩基により形成されるバルジ又は内部ループの両方が存在する、ＲＮＡにより形成されるステムループ２重鎖構造として定義される。不完全２重鎖構造の長さは、相補性塩基対の数により算出する。バルジ又は内部ループが存在し、バルジ又は内部ループを形成する不対塩基の数が４以下である場合、多重の不完全２重鎖構造ではなく単一の不完全２重鎖構造であると、さらに考えられる。
本明細書において使用する場合、特殊な２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、同一の物質を指す。
本開示の例において使用する１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１、ｃｉｒｃＣＮＮ２、ｃｉｒｃＤＨＸ３４、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４、ｃｉｒｃＥＺＨ２、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ、ｃｉｒｃＰＴＫ２、ｃｉｒｃＰＶＴ１、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４、ｃｉｒｃＴＢＣＤ、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１及びｃｉｒｃＶＡＰＢからなる群から選択される任意の１つ又は複数である。
本開示の例において使用する、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ促進物質、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１促進物質、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１促進物質、ｃｉｒｃＣＮＮ２促進物質、ｃｉｒｃＤＨＸ３４促進物質、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４促進物質、ｃｉｒｃＥＺＨ２促進物質、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２促進物質、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１促進物質、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８促進物質、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８促進物質、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２促進物質、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ促進物質、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ促進物質、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ促進物質、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ促進物質、ｃｉｒｃＰＴＫ２促進物質、ｃｉｒｃＰＶＴ１促進物質、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１促進物質、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２促進物質、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３促進物質、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４促進物質、ｃｉｒｃＴＢＣＤ促進物質、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１促進物質、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１促進物質、及びｃｉｒｃＶＡＰＢ促進物質からなる群から選択される任意の１つ又は複数である。
ｃｉｒｃＲＮＡの詳細な情報を以下に記載する。
ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５４０９３）。このゲノム位置は、ｃｈｒ６：１５７，３５７，９６８～１５７，４０６，０３９である。対応する直鎖状遺伝子は、ＡＲＩＤ１Ｂ（ｃｈｒ６：１５７，２５６，６００～１５７，４７３，５３８）となる。環化配列は、２８６塩基を有する。ＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６３３９７）。このゲノム位置は、ｃｈｒ９：１３，８７７３，４７８～１３８，７７４，９２４である。対応する直鎖状遺伝子は、ＣＡＭＳＡＰ１（ｃｈｒ９：１３８，７００，３３３～１３８，７９９，００５）となる。環化配列は、４２５塩基を有する。ＣＡＭＳＡＰ１遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＣＣＮＢ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５２３０５）。このゲノム位置は、ｃｈｒ５：６８，４７０，７０３～６８，４７１，３６４である。対応する直鎖状遺伝子は、ＣＣＮＢ１（ｃｈｒ５：６８，４６２，８３７～６８，４７４，０７０）となる。環化配列は、３７８塩基を有する。ＣＣＮＢ１遺伝子の第６及び第７のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＣＮＮ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２４５６０）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１９：１，０３２，３９０～１，０３２，６９５である。対応する直鎖状遺伝子は、ＣＮＮ２（ｃｈｒ１９：１，０２６，２７４～１，０３９，０６７）となる。環化配列は、２０５塩基を有する。ＣＮＮ２遺伝子の第３及び第４のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＤＨＸ３４（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２６２９７）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１９：４７，８６５，７３２～４７，８６５，９５０である。対応する直鎖状遺伝子は、ＤＨＸ３４（ｃｈｒ１９：４７，８５２，５３８～４７，８８５，９６１）となる。環化配列は、２１８塩基を有する。ＤＨＸ３４遺伝子の第６のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＥＰＨＢ４（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５６００１）。このゲノム位置は、ｃｈｒ７：１００，４１０，３６８～１００，４１０，８３０である。対応する直鎖状遺伝子は、ＥＰＨＢ４（ｃｈｒ７：１００，４００，１８７～１００，４２３，１４８）となる。環化配列は、３６２塩基を有する。ＥＰＨＢ４遺伝子の第１０及び第１１のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＥＺＨ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５７１７４）。このゲノム位置は、ｃｈｒ７：１４８，５４３，５６１～１４８，５４４，３９７である。対応する直鎖状遺伝子は、ＥＺＨ２（ｃｈｒ７：１４８，５０４，４６４～１４８，５８１，４４１）となる。環化配列は、２５３塩基を有する。ＥＺＨ２遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＦＣＨＯ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５２５１５）。このゲノム位置は、ｃｈｒ５：７２，３７０，５６８～７２，３７３，３２０である。対応する直鎖状遺伝子は、ＦＣＨＯ２（ｃｈｒ５：７２，２５１，８０８～７２，３８６，３４８）となる。環化配列は、２６８塩基を有する。ＦＣＨＯ２遺伝子の第１９及び第２０のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＦＧＦＲ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６０９９３）。このゲノム位置は、ｃｈｒ８：３８，３１４，８７３～３８，３１５，０５２である。対応する直鎖状遺伝子は、ＦＧＦＲ１（ｃｈｒ８：３８，２６８，６５６～３８，３２５，３６３）となる。環化配列は、１７９塩基を有する。ＦＧＦＲ１遺伝子の第２のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＦＫＢＰ８（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２５１８９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１９：１８，６５０，１８０～１８，６５０，５３０である。対応する直鎖状遺伝子は、ＦＫＢＰ８（ｃｈｒ１９：１８，６４２，５６１～１８，６５４，３８７）となる。環化配列は、２５９塩基を有する。ＦＫＢＰ８遺伝子の第３及び第４のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６２２４４）。このゲノム位置は、ｃｈｒ９：１１４，１４８，６５６～１１４，１５４，１０４である。対応する直鎖状遺伝子は、ＫＩＡＡ０３６８（ｃｈｒ９：１１４，１２２，９７２～１１４，２４６，６３７）となる。環化配列は、４３５塩基を有する。ＫＩＡＡ０３６８遺伝子の第２８、第２９、第３０及び第３１のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿４２５８９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ２：９，０８３，３１５～９，０９８，７７１である。対応する直鎖状遺伝子は、ＭＢＯＡＴ２（ｃｈｒ２：８，９９２，８２０～９，１４３，９４２）となる。環化配列は、２２４塩基を有する。ＭＢＯＡＴ２遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２５７２６）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１９：３，６６０，９６３～３，６６１，９９９である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＩＰ５Ｋ１Ｃ（ｃｈｒ１９：３，６３０，１７９～３，７００，４７７）となる。環化配列は、２４９塩基を有する。ＰＩＰ５Ｋ１Ｃ遺伝子の第４及び第５のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２２４１９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１７：７，４０２，３５７～７，４０２，８１０である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＯＬＲ２Ａ（ｃｈｒ１７：７，３８７，６８５～７，４１７，９３３）となる。環化配列は、３３６塩基を有する。ＰＯＬＲ２Ａ遺伝子の第９及び第１０のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿４０６５９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ２：２９，００６，７７２～２９，０１１，６７５である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＰＰ１ＣＢ（ｃｈｒ２：２８，９７４，６１２～２９，０２５，８０６）となる。環化配列は、２２４塩基を有する。ＰＰＰ１ＣＢ遺伝子の第５及び第６のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６０９１９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ８：３７，６２３，０４３～３７，６２３，８７３である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＲＯＳＣ（ｃｈｒ８：３７，６２０，１０１～３７，６３７，２８６）となる。環化配列は、２２０塩基を有する。ＰＲＯＳＣ遺伝子の第２、第３及び第４のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＴＫ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６０２８１）。このゲノム位置は、ｃｈｒ８：１４１，８８９，５６９～１４１，９００，８６８である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＴＫ２（ｃｈｒ８：１４１，６６７，９９９～１４２，０１１，３３２）となる。環化配列は、３９４塩基を有する。ＰＴＫ２遺伝子の第３及び第４のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＰＶＴ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿６００２９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ８：１２８，９０２，８３４～１２８，９０３，２４４である。対応する直鎖状遺伝子は、ＰＶＴ１（ｃｈｒ８：１２８，８０６，７７９～１２９，１１３，４９９）となる。環化配列は、４１０塩基を有する。ＰＶＴ１遺伝子の第２のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＲＥＬＬ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿４８４５７）。このゲノム位置は、ｃｈｒ４：３７，６３３，００６～３７，６４０，１２６である。対応する直鎖状遺伝子は、ＲＥＬＬ１（ｃｈｒ４：３７，５９２，４２２～３７，６８７，９９８）となる。環化配列は、４３４塩基を有する。ＲＥＬＬ１遺伝子の第４、第５及び第６のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿４８４１）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１１：６１，２０５，０９６～６１，２０５，５８５である。対応する直鎖状遺伝子は、ＳＤＨＡＦ２（ｃｈｒ１１：６１，２０５，０９６～６１，２０５，５８５）となる。環化配列は、３３４塩基を有する。ＳＤＨＡＦ２遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５４７９１）。このゲノム位置は、ｃｈｒ６：３，４１０，４２１～３，４１６，０８９である。対応する直鎖状遺伝子は、ＳＬＣ２２Ａ２３（ｃｈｒ６：３，２６９，１９６～３，４５７，２５６）となる。環化配列は、２５９塩基を有する。ＳＬＣ２２Ａ２３遺伝子の第２及び第３のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＳＮＨＧ４（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５０４６４）。このゲノム位置は、ｃｈｒ５：１３８，６１４，０１５～１３８，６１４，８１８である。対応する直鎖状遺伝子は、ＳＮＨＧ４（ｃｈｒ５：１３８，６０９，４４１～１３８，６１８，８７３）となる。環化配列は、１６１塩基を有する。ＳＮＨＧ４遺伝子の第３及び第４のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＴＢＣＤ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿２２９６９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ１７：８０，８５８，５２６～８０，８６９，６６５である。対応する直鎖状遺伝子は、ＴＢＣＤ（ｃｈｒ１７：８０，７０９，９４０～８０，８８１，６０９）となる。環化配列は、３８９塩基を有する。ＴＢＣＤ遺伝子の第１７、第１８、第１９、第２０、第２１及び第２２のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５４１８８）。このゲノム位置は、ｃｈｒ６：１５９，００４，９８５～１５９，０１０，８１４である。対応する直鎖状遺伝子は、ＴＭＥＭ１８１（ｃｈｒ６：１５８，９５７，４６８～１５９，０４９，５２２）となる。環化配列は、３２４塩基を有する。ＴＭＥＭ１８１遺伝子の第３、第４及び第５のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＵＩＭＣ１（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿５１２４９）。このゲノム位置は、ｃｈｒ５：１７６，３７０，３３５～１７６，３８５，１５５である。対応する直鎖状遺伝子は、ＵＩＭＣ１（ｃｈｒ５：１７６，３３２，００６～１７６，４３３，４０９）となる。環化配列は、３９７塩基を有する。ＵＩＭＣ１遺伝子の第７、第８、第９及び第１０のエキソンを含む。
ｃｉｒｃＶＡＰＢ（データベースＩＤ：ＨＳＡ＿ＣＩＲＣｐｅｄｉａ＿３４８２４）。このゲノム位置は、ｃｈｒ２０：５７，０１４，０００～５７，０１６，１３９である。対応する直鎖状遺伝子は、ＶＡＰＢ（ｃｈｒ２０：５６，９６４，１７５～５７，０２６，１５６）となる。環化配列は、２５８塩基を有する。ＶＡＰＢ遺伝子の第４及び第５のエキソンを含む。
実施形態では、ＳＬＥを治療するための医薬は、
（１）ＳＬＥ患者由来の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルを低下させる作用と、（２）ＳＬＥ患者の単核細胞及び免疫Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びに全身性エリテマトーデスの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現を下方制御する作用と
からなる群から選択される少なくとも１つの作用を有する。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを増強するための物質である。詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ促進物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂのレベルを増強するための物質を指し、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１促進物質は、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１のレベルを増強するための物質を指し、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１促進物質は、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１のレベルを増強するための物質を指し、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２促進物質は、ｃｉｒｃＣＮＮ２のレベルを増強するための物質を指し、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４促進物質は、ｃｉｒｃＤＨＸ３４のレベルを増強するための物質を指し、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４促進物質は、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４のレベルを増強するための物質を指し、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２促進物質は、ｃｉｒｃＥＺＨ２のレベルを増強するための物質を指し、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２促進物質は、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２のレベルを増強するための物質を指し、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１促進物質は、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１のレベルを増強するための物質を指し、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８促進物質は、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８のレベルを増強するための物質を指し、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８促進物質は、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８のレベルを増強するための物質を指し、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２促進物質は、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２のレベルを増強するための物質を指し、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ促進物質は、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃのレベルを増強するための物質を指し、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ促進物質は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａのレベルを増強するための物質を指し、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ促進物質は、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢのレベルを増強するための物質を指し、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ促進物質は、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣのレベルを増強するための物質を指し、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２促進物質は、ｃｉｒｃＰＴＫ２のレベルを増強するための物質を指し、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１促進物質は、ｃｉｒｃＰＶＴ１のレベルを増強するための物質を指し、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１促進物質は、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１のレベルを増強するための物質を指し、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２促進物質は、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２のレベルを増強するための物質を指し、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３促進物質は、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３のレベルを増強するための物質を指し、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４促進物質は、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４のレベルを増強するための物質を指し、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤ促進物質は、ｃｉｒｃＴＢＣＤのレベルを増強するための物質を指し、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１促進物質は、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１のレベルを増強するための物質を指し、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１促進物質は、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１のレベルを増強するための物質を指し、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢ促進物質は、ｃｉｒｃＶＡＰＢのレベルを増強するための物質を指す。
詳細には、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルは、種々の化学的、物理的及び生物学的方法を使用することにより増強することができる。このような方法は、
（１）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの経路を制御して、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを増強する方法、及び
（２）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを細胞において直接上昇させる方法
を含むが、これらに限定されない。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルは、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの高発現により直接上昇させることができる。
詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂのレベルは、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂの高発現により増強することができ、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１のレベルは、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１の高発現により増強することができ、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１のレベルは、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１の高発現により増強することができ、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２のレベルは、ｃｉｒｃＣＮＮ２の高発現により増強することができ、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４のレベルは、ｃｉｒｃＤＨＸ３４の高発現により増強することができ、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４のレベルは、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４の高発現により増強することができ、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２のレベルは、ｃｉｒｃＥＺＨ２の高発現により増強することができ、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２のレベルは、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２の高発現により増強することができ、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１のレベルは、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１の高発現により増強することができ、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８のレベルは、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８の高発現により増強することができ、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８のレベルは、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８の高発現により増強することができ、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２のレベルは、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２の高発現により増強することができ、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃのレベルは、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃの高発現により増強することができ、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａのレベルは、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの高発現により増強することができ、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢのレベルは、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢの高発現により増強することができ、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣのレベルは、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣの高発現により増強することができ、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２のレベルは、ｃｉｒｃＰＴＫ２の高発現により増強することができ、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１のレベルは、ｃｉｒｃＰＶＴ１の高発現により増強することができ、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１のレベルは、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１の高発現により増強することができ、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２のレベルは、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２の高発現により増強することができ、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３のレベルは、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３の高発現により増強することができ、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４のレベルは、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４の高発現により増強することができ、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤのレベルは、ｃｉｒｃＴＢＣＤの高発現により増強することができ、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１のレベルは、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１の高発現により増強することができ、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１のレベルは、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１の高発現により増強することができ、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢのレベルは、ｃｉｒｃＶＡＰＢの高発現により増強することができる。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの経路を制御する方法では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのアゴニストを使用することにより１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを増強することができる。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを増強する方法は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを増加させることを指す。好ましくは、増強前のレベルと比較して、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルは、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも３０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは７０％、最も好ましくは少なくとも９０％増強される。
本開示の例では、細胞における１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのレベルを、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの高発現により直接上昇させた後、ＳＬＥ患者の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルが有意に低下し、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣ及び免疫Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現が下方制御されることを実証した。したがって、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの経路を制御する上述の方法により、ＳＬＥ患者の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルの有意な低下と、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣ及び免疫Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現の下方制御とを生じ得ることも理解され得る。それ故、このような方法は、ＳＬＥを治療するために有用であると考えられる。
ＳＬＥを治療するための医薬は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を必然的に含み、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、上記の作用のための活性成分として機能する。
ＳＬＥを治療するための医薬では、上記の作用を有する活性成分は単に、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質であってもよく、また、類似の作用を有する他の分子を含んでもよい。
言い換えれば、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、活性成分単独又は活性成分のうちの１つであり得る。
ＳＬＥを治療するための医薬は、単一成分からなる薬物又は複合成分からなる薬物であり得る。
ＳＬＥを治療するための医薬は、種々の形態、例えば、固体、液体、ゲル、半液体及びエアロゾルであってもよく、詳細には限定されない。
ＳＬＥを治療するための医薬の対象は、主に哺乳動物、例えば、げっ歯類及び霊長類等である。
本開示において提供するＳＬＥを治療するための方法は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効量対象に投与するステップを含む。
対象は、哺乳動物であり得る。哺乳動物は、好ましくは、げっ歯類、偶蹄動物、奇蹄動物、ウサギ類、霊長類等からなる群から選択される。霊長類は、好ましくは、サル、類人猿又はヒトである。
対象は、ＳＬＥを有する患者又はＳＬＥの予防若しくは緩和が期待される個人であり得る。或いは、対象は、ＳＬＥを有する患者又はＳＬＥの予防若しくは緩和が期待される個人から単離したＳＬＥ細胞であり得る。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、ＳＬＥの治療を受ける前、間又は後に対象に投与することができる。
本開示において提供するＳＬＥを治療するための医薬は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効用量含む。
実施形態では、ＳＬＥを治療するための医薬は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効用量、並びに薬学的に許容される担体を含む。
ＳＬＥを治療するための医薬は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を必然的に含み、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、上記の作用のための活性成分である。
ＳＬＥを治療するための医薬では、上記の作用を有する活性成分は単に、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質であってもよく、また、類似の作用を有する他の分子を含んでもよい。
言い換えれば、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、活性成分単独又は活性成分のうちの１つであり得る。
ＳＬＥを治療するための医薬は、単一成分からなる薬物又は複合成分からなる薬物であり得る。
ＳＬＥを治療するための医薬は、種々の形態、例えば、固体、液体、ゲル、半液体及びエアロゾルであってもよく、詳細には限定されない。
ＳＬＥを治療するための医薬の対象は、主に哺乳動物、例えば、げっ歯類及び霊長類等である。
本開示において提供するＳＬＥを治療するための医薬の組合せは、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を有効用量と、ＳＬＥを治療するための少なくとも１つの追加の医薬とを含む。
併用治療のための医薬の組合せは、次の形態のいずれか１つであり得る。
Ｉ）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質、及びＳＬＥを治療するための追加の医薬を、個々の製剤にそれぞれ調製する。製剤の投与形態は、同一又は異なってもよく、この投与経路も、同一又は異なってもよい。
ＳＬＥを治療するための追加の医薬が抗体である場合、非経口投与を一般に使用する。ＳＬＥを治療するための追加の医薬が化学製剤である場合、投与経路は、胃腸管投与及び非経口投与のように多様化することができる。一般には、各化学製剤のための公知の投与経路が推奨される。
ＩＩ）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質、並びにＳＬＥを治療するための追加の医薬を、化合物製剤に製剤化する。１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質、並びにＳＬＥを治療するための追加の医薬により製剤化する化合物製剤は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質、並びにＳＬＥを治療するための追加の医薬を、同一の投与経路を介して投与し、同時に投与する場合、適用することができる。
本開示において提供するＳＬＥを治療するための方法は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を対象に投与するステップと、ＳＬＥを治療するための追加の医薬を有効量対象に投与し、及び／又はＳＬＥを治療するための他の手段を対象に適用するステップとを含む。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質の有効量、並びにＳＬＥを治療するための少なくとも１つの追加の医薬の有効量は、同時又は連続的に投与することができる。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡが、本開示において第１発見されたＳＬＥの治療標的であることを考慮すれば、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質によって、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質以外のＳＬＥを治療するための追加の医薬との併用薬物治療において相加的な治療作用を少なくとも達成し、これによりＳＬＥの治療作用をさらに増強することができる。
ＳＬＥを治療するための追加の医薬は、抗体、化学製剤又は標的医薬を含むが、これらに限定されない。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、胃腸管に又は非経口的に投与することができる。ＳＬＥを治療するための追加の医薬は、胃腸管に又は非経口的に投与することができる。
本開示の例では、
（１）ＳＬＥ患者の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルを低下させる作用と、（２）ＳＬＥ患者のＰＢＭＣ及び免疫細胞Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現を下方制御する作用と
からなる群から選択される１つ又は複数の作用を有する、医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質のうちの１つ又は複数の使用を提供する。
本開示の例では、ＳＬＥを治療するための医薬の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの使用を提供する。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、標的として機能する。詳細には、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１、ｃｉｒｃＣＮＮ２、ｃｉｒｃＤＨＸ３４、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４、ｃｉｒｃＥＺＨ２、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ、ｃｉｒｃＰＴＫ２、ｃｉｒｃＰＶＴ１、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４、ｃｉｒｃＴＢＣＤ、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１及びｃｉｒｃＶＡＰＢのうちの１つ又は複数が、標的として機能する。
使用は、詳細には、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを対象として、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質を、ＳＬＥを治療するための代替医薬として捜し出す候補物質のスクリーニングを指す。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの促進物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡのための高発現物質であり得る。詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ促進物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ高発現物質であり、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１促進物質は、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１高発現物質であり、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１促進物質は、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１高発現物質であり、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２促進物質は、ｃｉｒｃＣＮＮ２高発現物質であり、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４促進物質は、ｃｉｒｃＤＨＸ３４高発現物質であり、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４促進物質は、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４高発現物質であり、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２促進物質は、ｃｉｒｃＥＺＨ２高発現物質であり、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２促進物質は、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２高発現物質であり、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１促進物質は、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１高発現物質であり、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８促進物質は、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８高発現物質であり、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８促進物質は、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８高発現物質であり、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２促進物質は、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２高発現物質であり、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ促進物質は、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ高発現物質であり、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ促進物質は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ高発現物質であり、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ促進物質は、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ高発現物質であり、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ促進物質は、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ高発現物質であり、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２促進物質は、ｃｉｒｃＰＴＫ２高発現物質であり、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１促進物質は、ｃｉｒｃＰＶＴ１高発現物質であり、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１促進物質は、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１高発現物質であり、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２促進物質は、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２高発現物質であり、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３促進物質は、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３高発現物質であり、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４促進物質は、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４高発現物質であり、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤ促進物質は、ｃｉｒｃＴＢＣＤ高発現物質であり、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１促進物質は、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１高発現物質であり、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１促進物質は、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１高発現物質であり、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢ促進物質は、ｃｉｒｃＶＡＰＢ高発現物質である。
本開示では、ＳＬＥを検出するための物質の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの使用を提供する。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、バイオマーカーとして機能する。
実施形態では、ＳＬＥを検出するための物質は、ＳＬＥの判定又は診断において使用する。
ＳＬＥを検出するための物質は、液体形態を含むが、これに限定されないことに留意することが必要である。
実施形態では、ＳＬＥを検出するための物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質から選択される。詳細には、ＳＬＥを検出するための物質は、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に認識させるための物質、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に認識させるための物質、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に認識させるための物質、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に認識させるための物質、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に認識させるための物質、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に認識させるための物質、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に認識させるための物質、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に認識させるための物質、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に認識させるための物質、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に認識させるための物質、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に認識させるための物質、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に認識させるための物質、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に認識させるための物質、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に認識させるための物質、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に認識させるための物質、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に認識させるための物質、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に認識させるための物質、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に認識させるための物質、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に認識させるための物質、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に認識させるための物質、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に認識させるための物質、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に認識させるための物質、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に認識させるための物質、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に認識させるための物質、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に認識させるための物質、及び（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に認識させるための物質からなる群から選択される１つ又は複数である。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に検出するためのプライマー対である。詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に検出するためのプライマー対である。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣにおける発現が、正常対象における発現よりも有意に減少することが試験において第１に見出される。
本開示では、ＳＬＥを検出するためのキットの調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質の使用を提供する。
詳細には、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に認識させるための物質、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に認識させるための物質、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に認識させるための物質、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に認識させるための物質、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に認識させるための物質、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に認識させるための物質、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に認識させるための物質、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に認識させるための物質、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に認識させるための物質、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に認識させるための物質、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に認識させるための物質、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に認識させるための物質、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に認識させるための物質、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に認識させるための物質、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に認識させるための物質、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に認識させるための物質、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に認識させるための物質、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に認識させるための物質、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に認識させるための物質、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に認識させるための物質、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に認識させるための物質、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に認識させるための物質、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に認識させるための物質、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に認識させるための物質、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に認識させるための物質、及び（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に認識させるための物質からなる群から選択される。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、バイオマーカーとして機能する。
実施形態では、ＳＬＥを検出するためのキットは、ＳＬＥの判定又は診断において使用する。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、液体形態を含むが、これに限定されないことに留意することが必要である。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に検出するためのプライマー対である。詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に検出するためのプライマー対である。
本開示では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質を含む、ＳＬＥを検出するためのキットを提供する。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡは、バイオマーカーとして機能する。
実施形態では、ＳＬＥを検出するためのキットは、ＳＬＥの判定又は診断において使用する。
１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、液体形態を含むが、これに限定されないことに留意することが必要である。
実施形態では、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に認識させるための物質は、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡを特異的に検出するためのプライマー対である。詳細には、（１）ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２）ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（３）ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（４）ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＣＮＮ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（５）ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＤＨＸ３４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（６）ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（７）ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＥＺＨ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（８）ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（９）ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１０）ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１１）ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１２）ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１３）ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１４）ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１５）ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１６）ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣを特異的に検出するためのプライマー対であり、（１７）ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＴＫ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１８）ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＰＶＴ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（１９）ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２０）ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２１）ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２２）ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２３）ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＢＣＤを特異的に検出するためのプライマー対であり、（２４）ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２５）ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１を特異的に検出するためのプライマー対であり、（２６）ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に認識させるための物質は、ｃｉｒｃＶＡＰＢを特異的に検出するためのプライマー対である。
出願人の研究結果によれば、モデル細胞、すなわち、ヒトＨｅＬａ細胞における、上記の１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの高発現により、プロテインキナーゼＰＫＲ及びこの下流経路の関連するプロテインキナーゼのリン酸化活性を阻害することができる。しかし、特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の高発現では、ＰＫＲ及びこの下流経路の関連するプロテインキナーゼのリン酸化活性を阻害することができない。これにより、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの上記の遺伝子及びこの発現産物が、自然免疫に関与するＰＫＲタンパク質及びこの下流経路の関連するプロテインキナーゼのリン酸化活性を自己免疫疾患において制御する新たな道を開き得ることが明らかとなる。
出願人の研究結果によれば、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの上記の遺伝子の発現は、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣにおいて有意に下方制御される。初代細胞又は免疫細胞Ｔ細胞における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの高発現により、プロテインキナーゼＰＫＲのリン酸化活性、並びにサイトカインＩＦＮベータ及びＳＬＥの診断遺伝子の発現を阻害することができる。これにより、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの遺伝子及びこの発現産物が、ＳＬＥを診断及び治療する新たな道を開き得ることが明らかとなる。
特殊構造を有するｃｉｒｃＲＮＡの特性及び作用は、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを例にとることにより、以下に説明される。
実施例１ 染色体上のｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの位置マップ
染色体上のｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの位置は、図１に示す通りであった。この配列は、ｃｉｒｃｅｘｐｌｏｒｅｒ ｄａｔａｂａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｙａｎｇｌａｂ．ｇｉｔｈｕｂ．ｉｏ／ＣＩＲＣｅｘｐｌｏｒｅｒ／）から得た。ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの遺伝子配列は、配列番号１に示した。ＳＬＥのｃｉｒｃＲＮＡ分子マーカーを検出するための物質は、上流プライマー：ａａｔｃｇｇｃｃｔｇｔｃａｔｇｇｇｔａｔ（配列番号２）及び下流プライマー：ａａａｇｔｃｔｇｃａｔｔｇｔａｃｇｇａｇｔ（配列番号３）を含む１対の特異的プライマーであった。プライマー対は、このようなｃｉｒｃＲＮＡの環状化部位を試験及び分析することにより設計した。プライマーは、ＳｈａｎｇｈａｉＢｉｏｓｕｎｅＣｏ．，ＬＴＤ．社により合成された。
実施例２ 特異的検出プライマーの使用によるＳＬＥ患者におけるｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ発現の検出
ステップ１：ＰＢＭＣを正常な個人及びＳＬＥ患者から得た。
末梢血試料を、ＳｈａｎｇｈａｉＲｅｎｊｉＨｏｓｐｉｔａｌにおいて正常な個人３２人及びＳＬＥ患者３２人から採取した。単離したＰＢＭＣは、密度勾配遠心分離法を使用した後に検出することにより得た。
ステップ２：ＲＮＡ抽出
培養培地を初めに除去した。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、液体を吸引により除去した。細胞を氷上に置き、Ｔｒｉｚｏｌ剤を加えた（１ｍｌを１０ｃｍの培養皿に加え、０．５ｍｌを６ｃｍの培養皿に加え、０．２ｍｌを６ウェルプレートの各ウェルに加えた）。液体が粘稠性になるにつれて、細胞は分離し、液体が透明となるまで完全に破壊された。細胞溶解物をＤＥＰＣで処理したＥＰチューブ内にピペットで移し、０．２倍量のクロロホルムをここに加えた。ＥＰチューブを１５秒間振盪し、数回反転させ、室温で２～３分間静置しておいた。１２０００ｇによる４℃で１５分間の遠心分離後、液体は、底層（赤色のフェノールクロロホルム相）、中層（ピンクの会合相）及び上層（すべてのＲＮＡをここに含む無色の液体相）に分離した。中層が吸引されないことを確認しながら、上清を新たなＥＰチューブに注意深く移し、等量のイソプロパノールをここに加えた。ＥＰチューブを数回反転させ、室温で１０分間静置しておいた。１２０００ｇによる４℃で１５分間の遠心分離後、上清を除去すると、少量の乳白色沈殿物、すなわち、ＲＮＡがＥＰチューブの底に残留した。沈殿物を７５％のＤＥＰＣ－エタノール１ｍｌで２回洗浄した。上清を吸引により除去した後、１０分間風乾した。ＤＥＰＣ処理水２０～３０μｌを沈殿物に加え、よく混合してＲＮＡを溶解した。濃度は、次のように測定した：Ａ２６０／２８０は１．８～２．０の範囲、Ａ２６０／２３０は約２．０及びＡ２６０は０．１～１の範囲。試料を－８０℃で保存した。
ステップ３：ｃＤＮＡを逆転写により得た。
（１）ＲＮＡをＤＮａｓｅで処理した。反応系を以下に示した。
ＲＮＡ １～５μｇ
ＤＥＰＣ処理水
ＲＱ１ＤＮａｓｅ１０×反応緩衝液 １μｌ
ＲＱ１ＲＮａｓｅ不含ＤＮａｓｅ １Ｕ／μｇＲＮＡ
３７℃で３０分間の反応後に停止緩衝液１μｌを加えた後、６５℃で１０分間反応させた。
（２）ランダムプライマー０．５μｇを加えた各反応系を７２℃で５分間反応させ、次いで、２分間氷上に置いた。
（３）逆転写の反応系を以下に示した。
５×逆転写緩衝液 ５μｌ
ｄＮＴＰ（１０ｍＭ） １．２５μｌ
ＲＮａｓｅ阻害剤 ０．５μｌ
ＭＭＬ－Ｖ逆転写酵素 １μｌ
ＤＥＰＣ処理水 ５．２５μｌ
反応系を３７℃で６０分間反応させ、７２℃で１０分間反応させた。
ステップ４：蛍光定量Ｑ－ＰＣＲ
リアルタイム定量ＰＣＲ反応をＢｉｏｒａｄ社のリアルタイムＰＣＲ装置において完了させた。反応系を以下に示した。
２×ＳＹＢＲ ＧｒｅｅｎＴａｑミックス １０μｌ
プライマー（Ｆ＋Ｒ） １μｌ
鋳型 １μｌ
ｄｄＨ２Ｏ ８μｌ
反応条件は、以下の通りであった。
Figure 2022521997000002
データは、２－ΔΔＣＴ法に従って分析した（ＫｅｎｎｅｔｈＪ．Ｌｉｖａｋ，ＴｈｏｍａｓＤ．Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ．Ｍｅｔｈｏｄ，２５，２００１：４０２～４０８）。
図２に示すように、ｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの、ＳＬＥ患者のＰＢＭＣにおける発現は、正常な個人における発現よりも有意に減少した。独立的試料によるｔ検定を行い、この場合、ｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＰＯＬＲ２ＡのＰ値は０．０５よりも低く、有意差を実証した。図３に示すように、受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線をｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａによりプロットし、この場合、曲線下面積（ＡＵＣ）は０．８９を超え、このｃｉｒｃＲＮＡがマーカーとして、ＰＢＭＣ試料の使用によるＳＬＥの同定において非常に高い診断感度及び診断特異性を有したことを示した。
実施例３ ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、特殊な２重鎖構造を有する同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２６種、及び特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の２次構造の模式図
ステップ１：ヒト由来モデル研究細胞、すなわちＰＡ－１卵巣がん細胞株を得た。
ステップ２：ＲＮＡを標識及び抽出した。
培養培地を初めに除去した。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、ＳＨＡＰＥ反応標識化合物ＮＡＩを標識ＲＮＡに加えた。１０分間の標識後、液体を吸引により除去した。細胞を氷上に置き、Ｔｒｉｚｏｌ剤を加えた（１ｍｌを１０ｃｍの培養皿に加え、０．５ｍｌを６ｃｍの培養皿に加え、０．２ｍｌを６ウェルプレートの各ウェルに加えた）。液体が粘稠性になるにつれて、細胞は分離し、液体が透明となるまで完全に破壊された。細胞溶解物をＤＥＰＣで処理したＥＰチューブ内にピペットで移し、０．２倍量のクロロホルムをここに加えた。ＥＰチューブを１５秒間振盪し、数回反転させ、室温で２～３分間静置しておいた。１２０００ｇによる４℃で１５分間の遠心分離後、液体は、底層（赤色のフェノールクロロホルム相）、中層（ピンクの会合相）及び上層（すべてのＲＮＡをここに含む無色の液体相）に分離した。中層が吸引されないことを確認しながら、上清を新たなＥＰチューブに注意深く移し、等量のイソプロパノールをここに加えた。ＥＰチューブを数回反転させ、室温で１０分間静置しておいた。１２０００ｇによる４℃で１５分間の遠心分離後、上清を除去すると、少量の乳白色沈殿物、すなわち、ＲＮＡがＥＰチューブの底に残留した。沈殿物を７５％のＤＥＰＣ－エタノール１ｍｌで２回洗浄した。上清を吸引により除去した後、１０分間風乾した。ＤＥＰＣ処理水２０～３０μｌを沈殿物に加え、よく混合してＲＮＡを溶解した。濃度は、次のように測定した：Ａ２６０／２８０は１．８～２．０の範囲、Ａ２６０／２３０は約２．０及びＡ２６０は０．１～１の範囲。試料を－８０℃で保存した。
ステップ３：ｃＤＮＡを逆転写により得た。
（１）ＲＮＡをＤＮａｓｅで処理した。反応系を以下に示した。
ＲＮＡ １～５μｇ
ＤＥＰＣ処理水
ＲＱ１ＤＮａｓｅ１０×反応緩衝液 １μｌ
ＲＱ１ＲＮａｓｅ不含ＤＮａｓｅ １Ｕ／μｇＲＮＡ
３７℃で３０分間の反応後に停止緩衝液１μｌを加えた後、６５℃で１０分間反応させた。
（２）特異的プライマー０．５μｇを加えた各反応系を７２℃で５分間反応させ、次いで、２分間氷上に置いた。
（３）逆転写の反応系を以下に示した。
５×逆転写緩衝液 ５μｌ
ｄＮＴＰ（１０ｍＭ） １．２５μｌ
ＲＮａｓｅ阻害剤 ０．５μｌ
ＭＭＬ－Ｖ逆転写酵素 １μｌ
ＤＥＰＣ処理水 ５．２５μｌ
反応系を３７℃で６０分間反応させ、４２℃で１８０分間反応させた。逆転写産物をハイスループットシーケンシングＲＮＡ－ｓｅｑ分析に供し、対応するＲＮＡの２次構造を同定した。ｃｉｒｃＲＮＡ２７種の２次構造マップをプロットした。図４は、特殊な２重鎖構造を有するｃｉｒｃＲＮＡ２６種、及び特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の１種を例示する。
実施例４：ｐＺＷ１－ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａベクターの構築（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，２０１４）
ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａのループ領域を、ＰＣＲ法を使用することにより得た。直鎖状完全配列を、多重クローニング部位を介してｐＺＷ１ベクターに挿入した。Ｓａｎｇｅｒシーケンシングにより、配列を挿入しない空のｐＺＷ１ベクターを陰性対照として用いて、組換えプラスミドを同定した。構築したｐＺＷ１－ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａベクターは、配列番号４の配列を有し、これは、詳細には、以下の通りであった。
Figure 2022521997000003

Figure 2022521997000004

Figure 2022521997000005

Figure 2022521997000006

Figure 2022521997000007

Figure 2022521997000008
実施例５ ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及び特殊な２重鎖構造を有しないｃｉｒｃＲＮＡであるｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の高発現後のＰＫＲ及びＰＫＲの下流遺伝子のリン酸化レベルの検出
実施例４において調製したｐＺＷ１－ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及びｐＺＷ１－ｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５発現ベクターを、Ｌｉｐｏ２０００トランスフェクション法によりヒトＨｅＬａ細胞に導入して、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及びｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５を高発現させた。１２～１４時間後、２重鎖ウイルスＲＮＡの模倣体である刺激化合物ポリ（Ｉ：Ｃ）を加え、対応する時点で細胞を採取して、ウエスタンブロット検出及びＱ－ＰＣＲ検出を行った。
図５に示すように、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの高発現後、ＨｅＬａ細胞におけるＰＫＲリン酸化レベル及びＰＫＲの下流遺伝子のリン酸化レベルは、刺激化合物［ポリ（Ｉ：Ｃ）］（２重鎖ウイルスＲＮＡの模倣体）を加えて自然免疫を刺激した場合に有意に低下した。ｃｉｒｃＳＭＡＲＣＡ５の高発現後、ＨｅＬａ細胞におけるＰＫＲリン酸化レベル及びＰＫＲの下流遺伝子のリン酸化レベルでは、刺激化合物［ポリ（Ｉ：Ｃ）］（２重鎖ウイルスＲＮＡの模倣体）を加えて自然免疫を刺激した場合に有意な変化は示されなかった。
ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ及び同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２５種はすべて、このような特殊な２重鎖構造を有した。上記の実験結果により、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ並びに特殊な２重鎖構造を有する同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２５種の遺伝子及びこの発現産物の高発現を使用して、自然免疫経路に関与するＰＫＲタンパク質のリン酸化レベル及びＰＫＲの下流遺伝子のリン酸化レベルを制御することができることが十分に示された。
実施例６ ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの高発現後のＰＫＲのリン酸化レベルと、サイトカインＩＦＮベータ並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現の検出
ＳＬＥ患者のＰＢＭＣを、密度勾配遠心分離法を使用することにより単離した。実施例４において調製したｐＺＷ１－ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを、エレクトロポレーションによるトランスフェクション法を使用することにより初代細胞に導入して、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを高発現させた。１２～１４時間後、細胞を採取して、ウエスタンブロット検出及びＱ－ＰＣＲ検出を行った。
図６に示すように、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの高発現後、ＳＬＥ患者の単核細胞のＰＫＲリン酸化レベルは、直鎖状ＰＯＬＲ２Ａのみが高発現した場合と比較して有意に低下した。サイトカインＩＦＮベータの発現、並びにＳＬＥの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現は、下方制御された。これにより、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを標的として機能させることが可能であり、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ並びに特殊な２重鎖構造を有する同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２６種の遺伝子及びこの発現産物の高発現を使用してＳＬＥを治療可能であることが十分に示された。
前述は、本開示の単なる好ましい例であり、いかなる形態及び本質においても本開示を制限することは意図しない。いくつかの改良及び付加が、本開示の方法から逸脱することなく当業者により行われることがあり、このような改良及び付加がまた、本開示の保護範囲内に存在するものと解釈されるべきであることが、留意されるべきである。上に開示する技術内容に対して、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく当業者により行われる変更、修飾及び変化の等価な変形形態は、本開示の等価な例であるものとし、上記の例に対して、本開示の技術的本質に従って行われる等価な変形形態のいかなる変更、修飾及び変化も、本開示の保護範囲内に存在するものとする。
実施例７ ｉｎ ｖｉｔｒｏで精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２ＡによるヒトＨｅＬａ細胞のトランスフェクション後のサイトカインＩＦＮベータ、ＴＮＦα及びＩＬ６の発現の検出
ｃｉｒｃＲＮＡをｉｎ ｖｉｔｒｏでのＲＮＡ転写実験及びｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ４ＲＮＡリガーゼ環状化により良好に調製し、ＰＡＧＥ精製法を使用することによりｉｎ ｖｉｔｒｏで精製して、高純度のｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを得た。ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを、リポソームトランスフェクション法を使用してヒトＨｅＬａ細胞に導入した。１時間又は６時間のトランスフェクション後、細胞を採取し、Ｑ－ＰＣＲを実施してサイトカインＩＦＮベータ、ＴＮＦα及びＩＬ６の発現を検出した。
図７に示すように、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを、リポソームトランスフェクション法を使用することによりヒトＨｅＬａ細胞にトランスフェクトした後、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａにより、サイトカインＩＦＮベータ、ＴＮＦα及びＩＬ６の発現の増加は、２重鎖ＲＮＡ基質ポリ（Ｉ：Ｃ）、無精製ＲＮＡ及び直鎖状ＰＯＬＲ２Ａによるトランスフェクションと比較して生じなかった。これにより、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａによって、免疫応答が誘導されないことが十分に示された。上記の実験結果により、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを標的として機能させることが可能であり、これは、生物において不要な免疫応答を誘導しないことが示された。
実施例８ ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａのｉｎ ｖｉｔｒｏでの精製後のＰＫＲリン酸化活性のレベル及びＰＫＲタンパク質に対するｉｎ ｖｉｔｒｏで精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａの制御作用の検出
ｃｉｒｃＲＮＡをｉｎ ｖｉｔｒｏでのＲＮＡ転写実験及びｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ４ＲＮＡリガーゼ環状化により良好に調製し、ＰＡＧＥ精製法を使用することによりｉｎ ｖｉｔｒｏで精製して、高純度のｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを得た。ＰＫＲタンパク質は、Ｈｉｓタグを用いたｉｎ ｖｉｔｒｏでの精製法を使用することにより良好に調製した。ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性の実験系を用いて、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性実験によりインキュベートした。３７℃で３０分間の反応後、細胞を採取し、同位体３２Ｐオートラジオグラフィーに供してＰＫＲリン酸化活性のレベルを検出した。
図８に示すように、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａをｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性の実験系を用いてインキュベートした後、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａにより、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＫＲリン酸化活性のレベルの有意な低下が、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製した直鎖状ＰＯＬＲ２Ａと比較して生じ得る。これにより、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａを標的として機能させることが可能であり、ｉｎ ｖｉｔｒｏで調製及び精製したｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、特殊な２重鎖構造を有する同一型のｃｉｒｃＲＮＡ２６種の遺伝子、並びにこの発現産物を使用してＳＬＥを治療可能であることが十分に示された。
前述は、本開示の単なる好ましい例であり、いかなる形態及び本質においても本開示を制限することは意図しない。いくつかの改良及び付加が、本開示の方法から逸脱することなく当業者により行われることがあり、このような改良及び付加がまた、本開示の保護範囲内に存在するものと解釈されるべきであることが、留意されるべきである。上に開示する技術内容に対して、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく当業者により行われる変更、修飾及び変化の等価な変形形態は、本開示の等価な例であるものとし、上記の例に対して、本開示の技術的本質に従って行われる等価な変形形態のいかなる変更、修飾及び変化も、本開示の保護範囲内に存在するものとする。

Claims (14)

  1. 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質の使用。
  2. 次の特性：
    １）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡが、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１、ｃｉｒｃＣＮＮ２、ｃｉｒｃＤＨＸ３４、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４、ｃｉｒｃＥＺＨ２、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ、ｃｉｒｃＰＴＫ２、ｃｉｒｃＰＶＴ１、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４、ｃｉｒｃＴＢＣＤ、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１及びｃｉｒｃＶＡＰＢから選択される１つ又は複数である特性、並びに
    ２）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質が、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ促進物質、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１促進物質、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１促進物質、ｃｉｒｃＣＮＮ２促進物質、ｃｉｒｃＤＨＸ３４促進物質、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４促進物質、ｃｉｒｃＥＺＨ２促進物質、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２促進物質、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１促進物質、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８促進物質、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８促進物質、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２促進物質、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ促進物質、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ促進物質、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ促進物質、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ促進物質、ｃｉｒｃＰＴＫ２促進物質、ｃｉｒｃＰＶＴ１促進物質、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１促進物質、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２促進物質、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３促進物質、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４促進物質、ｃｉｒｃＴＢＣＤ促進物質、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１促進物質、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１促進物質、及びｃｉｒｃＶＡＰＢ促進物質から選択される１つ又は複数である特性
    のうちの１つ又は複数をさらに含むことを特徴とする、請求項１に記載の使用。
  3. 全身性エリテマトーデスを治療するための前記医薬が、次の作用：（１）全身性エリテマトーデスを有する患者の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルを低下させる作用と、（２）全身性エリテマトーデスを有する患者の単核細胞及び免疫細胞Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びに全身性エリテマトーデスの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現を下方制御する作用と、のうちの少なくとも１つを有することを特徴とする、請求項１に記載の使用。
  4. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質が、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡのレベルを上昇させるための物質を指すことを特徴とする、請求項１に記載の使用。
  5. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡのレベルが、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡを高発現させることにより上昇することを特徴とする、請求項４に記載の使用。
  6. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質が、全身性エリテマトーデスを治療するための前記医薬の活性成分単独又は活性成分のうちの１つであることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
  7. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質を有効用量含む、全身性エリテマトーデスを治療するための医薬。
  8. 次の特性：
    １）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡが、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１、ｃｉｒｃＣＮＮ２、ｃｉｒｃＤＨＸ３４、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４、ｃｉｒｃＥＺＨ２、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ、ｃｉｒｃＰＴＫ２、ｃｉｒｃＰＶＴ１、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４、ｃｉｒｃＴＢＣＤ、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１及びｃｉｒｃＶＡＰＢから選択される１つ又は複数である特性、並びに
    ２）１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質が、ｃｉｒｃＡＲＩＤ１Ｂ促進物質、ｃｉｒｃＣＡＭＳＡＰ１促進物質、ｃｉｒｃＣＣＮＢ１促進物質、ｃｉｒｃＣＮＮ２促進物質、ｃｉｒｃＤＨＸ３４促進物質、ｃｉｒｃＥＰＨＢ４促進物質、ｃｉｒｃＥＺＨ２促進物質、ｃｉｒｃＦＣＨＯ２促進物質、ｃｉｒｃＦＧＦＲ１促進物質、ｃｉｒｃＦＫＢＰ８促進物質、ｃｉｒｃＫＩＡＡ０３６８促進物質、ｃｉｒｃＭＢＯＡＴ２促進物質、ｃｉｒｃＰＩＰ５Ｋ１Ｃ促進物質、ｃｉｒｃＰＯＬＲ２Ａ促進物質、ｃｉｒｃＰＰＰ１ＣＢ促進物質、ｃｉｒｃＰＲＯＳＣ促進物質、ｃｉｒｃＰＴＫ２促進物質、ｃｉｒｃＰＶＴ１促進物質、ｃｉｒｃＲＥＬＬ１促進物質、ｃｉｒｃＳＤＨＡＦ２促進物質、ｃｉｒｃＳＬＣ２２Ａ２３促進物質、ｃｉｒｃＳＮＨＧ４促進物質、ｃｉｒｃＴＢＣＤ促進物質、ｃｉｒｃＴＭＥＭ１８１促進物質、ｃｉｒｃＵＩＭＣ１促進物質、及びｃｉｒｃＶＡＰＢ促進物質から選択される１つ又は複数である特性
    のうちの１つ又は複数をさらに含むことを特徴とする、請求項７に記載の全身性エリテマトーデスを治療するための医薬。
  9. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質を有効用量と、全身性エリテマトーデスを治療するための少なくとも１つの追加の医薬とを含む、全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の組合せ。
  10. 次の作用：（１）全身性エリテマトーデスを有する患者の単核細胞におけるＰＫＲリン酸化レベルを低下させる作用と、（２）全身性エリテマトーデスを有する患者の単核細胞（ＰＢＭＣ）及び免疫細胞Ｔ細胞における、サイトカインＩＦＮベータ並びに全身性エリテマトーデスの診断遺伝子ＭＸ－１、ＬＹ－６Ｅ及びＩＦＩＴ３の発現を下方制御する作用と、のうちの１つ又は複数を有する医薬の調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡ及び／又は１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する前記環状ＲＮＡの促進物質の使用。
  11. 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡの使用。
  12. 全身性エリテマトーデスを検出するための物質の調製又はスクリーニングにおける、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡの使用。
  13. 全身性エリテマトーデスを検出するためのキットの調製における、１６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡを特異的に認識させるための物質の使用。
  14. １６ｂｐ～３３ｂｐの長さの不完全２重鎖構造を有する環状ＲＮＡを特異的に認識させるための物質を少なくとも含む、全身性エリテマトーデスを検出するためのキット。
JP2021550102A 2019-02-25 2019-12-10 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ｒｎａの使用 Pending JP2022521997A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910138059.X 2019-02-25
CN201910138059.XA CN111603477B (zh) 2019-02-25 2019-02-25 环形rna在系统性红斑狼疮制备治疗药物中的应用
PCT/CN2019/124160 WO2020173171A1 (zh) 2019-02-25 2019-12-10 环形rna在系统性红斑狼疮制备治疗药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2022521997A true JP2022521997A (ja) 2022-04-13

Family

ID=72194067

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021550102A Pending JP2022521997A (ja) 2019-02-25 2019-12-10 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ｒｎａの使用

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220243270A1 (ja)
EP (1) EP3933050A4 (ja)
JP (1) JP2022521997A (ja)
CN (2) CN111603477B (ja)
WO (1) WO2020173171A1 (ja)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3724208A4 (en) 2017-12-15 2021-09-01 Flagship Pioneering Innovations VI, LLC COMPOSITIONS WITH CIRCULAR POLYRIBONUCLEOTIDES AND USES THEREOF
CN111118012B (zh) * 2020-02-11 2022-09-06 昆明医科大学 一种抑制hsa_circ_0051680表达的siRNA及其应用
CN112831554B (zh) * 2020-11-17 2022-08-09 温州医科大学 一种SLE相关的环状RNA hsa_circ_0025843及其应用
CN113337607B (zh) * 2021-06-28 2022-11-22 东莞市寮步医院 一种用于检测或疗效评价肝癌的分子标志物及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108441555A (zh) * 2018-05-31 2018-08-24 南昌大学第附属医院 三条环状rna在系统性红斑狼疮生物标志物中的应用
CN109055529A (zh) * 2018-08-24 2018-12-21 中国人民解放军陆军军医大学 circPTPN22及其作为系统性红斑狼疮标志物的应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1341644A (zh) * 2000-09-07 2002-03-27 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——人核内非均－核蛋白32.01和编码这种多肽的多核苷酸
CN101376910B (zh) * 2007-08-27 2012-01-11 中国科学院上海生命科学研究院 微小rna基因在系统性红斑狼疮疾病诊断和治疗中的作用
CA2939860A1 (en) * 2014-03-14 2015-10-08 Andes Biotechnologies S.A. Pharmaceutical compositions comprising rna and use for treating cancer
CN105986014B (zh) * 2015-02-02 2019-11-19 眭维国 系统性红斑狼疮3’端非翻译区长度差异基因及分析方法和应用
CN107385013B (zh) * 2016-05-17 2020-10-30 戴勇 系统性红斑狼疮环状rna的处理方法
CN106834514A (zh) * 2017-03-22 2017-06-13 魏敏杰 一种可直接对微小核糖核酸（microRNA）进行半定量的探针
CN110643694B (zh) * 2018-06-27 2022-11-22 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心 环形RNA circPOLR2A在系统性红斑狼疮检测标志物及制备治疗药物中的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108441555A (zh) * 2018-05-31 2018-08-24 南昌大学第附属医院 三条环状rna在系统性红斑狼疮生物标志物中的应用
CN109055529A (zh) * 2018-08-24 2018-12-21 中国人民解放军陆军军医大学 circPTPN22及其作为系统性红斑狼疮标志物的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LI, H., ET AL., CLINICA CHIMICA ACTA, vol. 480, JPN6023027985, 2018, pages 17 - 25, ISSN: 0005104956 *
LI, L.J., ET AL., IMMUNOLOGY, vol. 155, no. 1, JPN6023027986, 2018, pages 137 - 149, ISSN: 0005104957 *
WANG, X., ET AL., ARTHRITIS RESEARCH & THERAPY, vol. Vol. 20，No. 1，Article:118, JPN6023027984, 2018, pages 1 - 10, ISSN: 0005104955 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111603477A (zh) 2020-09-01
CN113710816A (zh) 2021-11-26
EP3933050A1 (en) 2022-01-05
CN111603477B (zh) 2023-06-02
WO2020173171A1 (zh) 2020-09-03
US20220243270A1 (en) 2022-08-04
EP3933050A4 (en) 2022-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2022521997A (ja) 全身性エリテマトーデスを治療するための医薬の調製における環状ｒｎａの使用
EP2077326A1 (en) Novel nucleic acid
Do et al. miR-511-3p protects against cockroach allergen–induced lung inflammation by antagonizing CCL2
Lochhead et al. MicroRNA expression shows inflammatory dysregulation and tumor‐like proliferative responses in joints of patients with postinfectious Lyme arthritis
WO2009030153A1 (fr) Rôles de micro-arn dans le diagnostic et le traitement du lupus érythémateux systémique
He et al. Identification of a Long noncoding RNA TRAF3IP2-AS1 as key regulator of IL-17 signaling through the SRSF10–IRF1–Act1 axis in autoimmune diseases
CN111956658B (zh) miRNA 148簇作为诊断和/或治疗认知障碍相关疾病标志物的应用
WO2019079361A1 (en) ACTIVE HIV RESERVOIR MARKERS
Shangxun et al. ADAR1 Alleviates Inflammation in a Murine Sepsis Model via the ADAR1‐miR‐30a‐SOCS3 Axis
CN110724738B (zh) lncXXYLT1-AS2的应用、诊断心血管疾病的试剂盒及治疗心血管疾病的药物
Wen et al. MIR222HG attenuates macrophage M2 polarization and allergic inflammation in allergic rhinitis by targeting the miR146a-5p/TRAF6/NF-κB axis
WO2020165907A9 (en) Spt5 inhibitors and uses thereof
CN107937532B (zh) 胶质瘤诊断标志物hsa_circ_0021827及应用
CN112472795B (zh) 用于抑制细胞对炎性因子刺激的应答的生物制剂
CN106420791B (zh) miR-145-3p在制备预防或治疗多发性骨髓瘤疾病药物中的应用
CN111154863B (zh) lncRNA在制备诊断和/或治疗骨关节炎的产品中的应用
CN111118143B (zh) 检测及靶向rp11-754b17.1的试剂及其在关节炎中的应用
CN107937538B (zh) 胶质瘤诊断标志物circ1:201817088|201817285及应用
Song et al. Protective effect of microRNA‐134‐3p on multiple sclerosis through inhibiting PRSS57 and promotion of CD34+ cell proliferation in rats
TWI836429B (zh) 一種預測一癌症病患對於干擾素基因的刺激物激動劑的易感性的方法及套組
CN107937534B (zh) 胶质瘤诊断标志物circ1:29154696|29154910及应用
CN113403390B (zh) lncRNA在儿童心肌炎诊治中的应用
JP2012080777A (ja) ネフローゼ症候群の検査方法、並びにネフローゼ症候群の予防又は治療薬およびそのスクリーニング方法
CN110585228B (zh) LncRNA PTPRE-AS1在制备抑制蟑螂提取物诱导的过敏性哮喘药物中的应用
Wang et al. TGF-β promotes proliferation and inhibits apoptosis of liver cancer Huh-7 cells by regulating MiR-182/CADM1

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20211026

RD01 Notification of change of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7426

Effective date: 20211026

A711 Notification of change in applicant

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711

Effective date: 20220406

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20220406

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20220722

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230711

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20231011

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20231211

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20240111

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20240507