JP2022521558A - ペラミビル溶液吸入剤およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

本出願は、ペラミビル溶液吸入剤およびその製造方法に関する。前記溶液吸入剤は、ペラミビル、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤および水により製造され、ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌよりも大きく、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌよりも小さく、前記溶液吸入剤のｐＨ値は５．０～６．０で、且つ非加熱方法で滅菌しており、前記浸透圧調整剤は、塩化ナトリウムまたはグルコースから選択される。前記溶液吸入剤は、よりよい安定性と優れた肺へのターゲット作用を有することによって、薬物の有効性と安全性を著しく向上させる。【選択図】無し

Description

本出願は、医薬技術分野に関し、特に、ペラミビル溶液吸入剤およびその製造方法に関する。

ペラミビルは、化学名が（‐）‐（１Ｓ、２Ｓ、３Ｒ、４Ｒ）‐２‐ヒドロキシ‐３‐［（１Ｓ）‐１‐アセトアミド‐２‐エチル］ブチル‐４‐グアニジノシクロペンタン‐１‐カルボン酸であり、シクロペンタン誘導体類のインフルエンザウイルスノイラミニダーゼ（ＮＡ）の阻害剤である。ペラミビルはシクロペンタン誘導体であり、リンクに接続される基には、親水性のカルボキシル基とグアニジノ基、また、疎水性のイソペンチル基とアセトアミド基があり、極性の異なる４つの基は、それぞれインフルエンザウイルスＮＡ構造における異なる活性部位領域に作用する。カルボキシル基部分は、ＮＡ活性部位の３つのアルギニン残基Ａｒｇ１１８、Ａｒｇ２９２、Ａｒｇ３７１と強い分子間作用を形成し、アセトアミド基のメチル部分は、ＮＡ疎水性ポケットにおけるＴｒｐ１７８とＩｌｅ２２２に作用し、カルボニル基酸素はＡｒｇ１５２と作用し、グアニジノ基は、ＮＡの活性部位のＡｓｐ１５１、Ｇｌｕ１１９、Ｇｌｕ２２７およびＴｒｐ２２７と強い分子間作用を発生し、Ｂ型インフルエンザウイルスＮＡの場合、イソアミル基部分はＡｌａ２４６、Ａｒｇ２２４およびＩｌｅ２２２により構成された疎水性ポケットと強く作用するが、Ａ型インフルエンザウイルスＮＡの場合、イソアミル基部分はＧｌｕ２７６の疎水性部分に作用する。ペラミビル分子の複数の基は、それぞれインフルエンザウイルスＮＡ分子の複数の活性部位に作用して、ＮＡの活性を強く抑制することによって、宿主細胞において子孫ウイルス粒子の複製および放出を阻止する。

ペラミビルは経口投与可能性が低いため、主に注射液などの非経口製剤に製造されている。例えば、ＣＮ１０１３１４５７９Ａには、無水ペラミビル結晶およびその医薬組成物が開示されており、組成物は、２００ｍｇの無水ペラミビル結晶、マンニトール、適量の塩酸および注射用水を１００ｍＬに加えた２００ｍｇのペラミビル結晶を含有する注射液を含む。また、２００ｍｇの無水ペラミビル結晶、マンニトール、適量の塩酸および注射用水を２０ｍＬに加えて凍結乾燥した凍結乾燥粉末注射を含む。

ＣＮ１０２０５８５２２Ａには、ピペラミビル（piperamivir）、非水溶媒、共溶媒、および注射用水により構成されたピペラミビル注射液およびその製造方法が開示されている。うち、ピペラミビルと非水溶媒の重量と体積の比（ｇ／ｍｌ）は１：１０～１００であり、処方における非水溶媒の用量比は２０％～６０％（ｖ／ｖ）であり、共溶媒の用量は１％～２０％（ｗ／ｖ）であり、前記非水溶媒は、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレングリコールの１つまたは複数の混合溶媒であり、前記共溶媒は、グルコース、ソルビトール、マンニトール、イノシトールの１つまたは複数である。溶液の透明度を維持しながら、注射用水、塩化ナトリウムまたはブドウ糖輸液を任意の比で希釈できる、ピペラミビル注射液およびその製造方法が提供されている。前記注射液は、ペラミビルの溶解度を向上させると共に、合理的な製剤処方と製造方法で注射薬の要件を満たすこともでき、適量の非水溶媒と共溶媒を使用することにより、ペラミビルの溶解度を高め、また溶液の安定性を維持することによって、臨床において、希釈して使用する場合、溶液の濁り、投与できない等の問題の発生を回避し、非水溶媒の用量を可能な限り低減し、元の薬剤の濃度を向上させる。ＣＮ１０２７０２０３３Ａには、アモルファスペラミビルおよびその製造方法と医薬組成物が開示されており、注射液は、２００ｍｇのアモルファスペラミビル、マンニトール、適量の塩酸および１００ｍｌに加えた注射用水を含む。

ペラミビルは、患者の呼吸器組織に滞留することによって、抗インフルエンザ効果を発揮するため、ペラミビルを、非経口経路で呼吸器組織病変に直接到達する吸入剤に製造することによって、体の他の組織に対する潜在的な不良反応を低減する。吸入剤には、乾燥粉末吸入剤、噴霧剤、溶液吸入剤等がある。子供や高齢者、呼吸機能の低い患者等の自発呼吸困難な人には、乾燥粉末吸入製剤を採用すると充分な量の薬物を吸入し難い状況があるため、溶液吸入剤はこのような患者の応用により便利である。ペラミビルは、溶液吸入剤に製造できるが、まだ多くの挑戦がある。

霧化に適する溶液型吸入剤の場合、通常に、１）滅菌媒体、２）低粘度液体、低表面張力、３）適度なｐＨ、４）平均直径が５μｍよりも小さいまたは３μｍよりも小さく形成できる液滴、５）スプレーに対して相対的に安定である処方、６）刺激性の防腐剤および安定剤は含まない等の、幾つかの基本的な性質を満たす必要がある。粒度と剤形は、吸入される製剤の効果に影響する主な要素であり、うち、粒度は主な要素の１つであり、吸入による薬物の伝送は、喉、気管、気管支および肺胞等の気道の異なる部位に、薬物を堆積することができる。通常、粒度が小さいほど、粒子が空気中に浮遊している時間が長くなり、薬物を気道のより深い部位に伝送することができる。

粒度と剤形の両方は、何れも吸入されるコルチコステロイドの効果に影響を与える。薬物の剤形は、肺への該薬物の伝送に重要な影響を及ぼし、したがって、その効果に影響を与えている。肺への薬物の伝送において最も重要なことは、エアロゾルキャリアと伝送される粒度である。また、肺への堆積度の減少は、中咽頭での堆積度が増加することを示している。応用している特定の剤形により、一部のコルチコステロイドは口や咽頭に堆積する可能性が高く、また局所的な副作用を引き起こす可能性がある。うち、肺の気道と鼻腔を覆う粘液毛布に堆積した液滴は、繊毛の作用下で咽頭に移動し、このような粒子は、通常上気道に堆積された比較的に大きい薬物粒子であるが、鼻腔と肺からの粘液、細胞および破片は咽頭に集まり、唾液と混ざり合い、飲み込むことで消化管に入る。したがって、より小さい粒径、且つより狭い粒度分布を有する噴霧された液滴を製造することが望ましいが，このような粒子を製造することは困難である。

よりよい霧化を実現するために、通常、共溶媒および界面活性剤を吸入剤の処方に添加し製造しているが、気道に対して刺激があるため、エタノール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール等の短鎖脂肪アルコールの共溶媒は、吸入投与の時に少量しか許容できず、特に、子供達に適していない。ほとんどの界面活性剤は何れも所定の毒性を有している。したがって、これらの状況は吸入製剤の研究開発を制限している。

研究（「超音波霧化中の薬物の分解に関する研究」）によると、リンコマイシン溶液がエアロゾルに霧化された後に硫化物を生成することによって、頭痛、めまいおよび吐き気等の臨床症状を引き起こす可能性があるという報告がある。さらなる研究により、超音波霧化の後に腐敗臭が発生するリンコマイシンエアロゾルには、ジチオメチルと硫化水素が含有されており、また未知の硫化物も混合されていることが分かり、ＳＣＨ_３を含むリンコマイシンの側鎖結合部は、超音波のエネルギーによって、他の硫化物に分解されやすいため、他の薬物も超音波霧化される時に、潜在的な熱分解変化を引き起こす可能性があると考えられている。したがって、ペラミビル溶液吸入剤の研究開発でも、ペラミビルが超音波溶解されるという潜在的な問題に直面している。

別の文献（「ペラミビルバルク薬の安定性に関する研究」、甘微等、現代薬物および臨床（Ｄｒｕｇｓ＆Ｃｌｉｎｉｃ）、２０１８年）には、ペラミビルのバルク薬が１００℃の条件下で４８時間内では安定であり、１０日間の光照射の状況下で、ペラミビルの安定性が優れており、ペラミビルは、アルカリ性および中性の環境下で安定性が優れており、酸性条件下では不安定であり、ｐＨ値の低下に従って安定性が悪くなるという報告がある。ペラミビルは、酸性の環境では非常に不安定であり、アルカリ性および中性条件下で優れた安定性を有する。したがって、ペラミビル溶液吸入剤の安定性をどのように改善するかということも、解決すべき緊急の問題である。

本発明の目的は、従来技術の欠点を克服し、関連物質の生成を効果的に低減することができ、より小さく、より均一に分布された粒径を有し、肺組織への薬物の堆積を有利にし、よりよい安定性を有するペラミビル溶液吸入剤を提供することである。また、本発明のペラミビル溶液吸入剤は、ｐＨ５．５の条件下でよりよい安定性を有する。また、本発明のペラミビル溶液吸入剤は、肺組織にターゲット分布されることができ、ペラミビル注射液に対して、肺組織における本発明のペラミビル溶液吸入剤の薬物濃度が静脈内投与（１０ｍｇ／ｋｇ）の１．５８～５．３１倍である。また、本発明のペラミビル溶液吸入剤は、超音波プロセスによりもたらす薬物の分解および化学反応を、よりよく低減することができる。

本発明が前記技術問題を解決する技術案は、以下の通りである。

本発明は、ペラミビル溶液吸入剤を提供しており、前記溶液吸入剤は、ペラミビル、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤および水により製造されており、うち、ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌよりも大きく、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌよりも小さく、前記溶液吸入剤のｐＨ値は５．０～６．０で、且つ非加熱方法で滅菌しており、前記浸透圧調整剤は、塩化ナトリウムまたはグルコースから選択されており、前記溶液吸入剤は霧化された後、その質量中央値空気力学的直径（ＭＭＡＤ）が３μｍ～４μｍの間であり、微細粒子の有効堆積率（ＦＰＦ）が６０％～８０％の間である。

うち、ペラミビルの濃度は、１５ｍｇ／ｍｌより大きく且つ２５ｍｇ／ｍｌより小さく、好ましくは２０ｍｇ／ｍｌであり、浸透圧調整剤の濃度は、８ｍｇ／ｍｌより小さく且つ６ｍｇ／ｍｌより大きく、好ましくは７ｍｇ／ｍｌであり、前記浸透圧調整剤は塩化ナトリウムである。

本発明では、非加熱の殺菌工程を利用し、好ましくは無菌工程を利用する。

前記ｐＨ調整剤は、希塩酸であり、より好ましくは５％の希塩酸である。

前記水は注射用水である。

うち、ペラミビル溶液吸入剤は、ｐＨ値が５．５であり、前記ｐＨ条件下で優れた安定性を有する。

前記溶液吸入剤をエアロゾル吸入して１時間後、肺組織における薬物の濃度は７μｇ／ｇよりも大きく、または、３時間後、肺組織における薬物の濃度は５μｇ／ｇよりも大きい。

前記溶液吸入剤の微細粒子用量（ＦＰＤ）は１０ｍｇよりも大きく、粒子の幾何標準偏差は３．０よりも小さい。

本発明は、ペラミビル溶液吸入剤をさらに提供しており、前記溶液吸入剤は、ペラミビル、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤、リン酸二水素ナトリウムおよび水により製造されており、うち、ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌよりも大きく、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌよりも小さく、リン酸二水素ナトリウムの濃度は０．０５ｍｇ／ｍｌ～０．２ｍｇ／ｍｌであり、前記溶液吸入剤のｐＨ値は５．５で、且つ非加熱方法で滅菌しており、前記浸透圧調整剤は、塩化ナトリウムまたはグルコースから選択されており、前記溶液吸入剤は霧化された後、その質量中央値空気力学的直径（ＭＭＡＤ）が３μｍ～４μｍの間であり、微細粒子の有効堆積率（ＦＰＦ）が６０％～８０％の間である。

本発明の溶液吸入剤は、良好な熱安定性を有し、高温に３０日間置いた後、関連物質の含有量が０．３％よりも小さい。

本発明は、ペラミビル溶液吸入剤の製造方法をさらに提供し、前記製造方法は、ペラミビルの原料と補助材料とを混合し、７０℃～８０℃の水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸を用いて溶液のｐＨ値を５．０～６．０の間に調整した後、プリフィルタリングし、次に無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

有益効果

１．本発明のペラミビル溶液吸入剤は、酸性条件下で、ペラミビル注射液が十分に安定ではないことを解決し、関連物質の生成を効果的に低減することができ、より小さく、より均一に分布された粒径を有し、肺組織への薬物の堆積を有利にする。また、ｐＨ５．５の条件下で、本発明のペラミビル溶液吸入剤はよりよい安定性を有する。
２．本発明のペラミビル溶液吸入剤は、肺組織にターゲット分布されることができ、ペラミビル注射液に対して、肺組織における本発明のペラミビル溶液吸入剤の薬物濃度が、静脈内投与（１０ｍｇ／ｋｇ）の１．５８～５．３１倍である。
３．本発明のペラミビル溶液吸入剤は、超音波プロセスによりもたらす薬物の分解および化学反応を、よりよく低減することができる。

以下、具体的な実施例を参照しながら、本発明をさらに説明する。これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、本発明を説明するためにのみ使用されることを理解されたい。以下の実施例において、具体的な条件が示されていない実験方法は、通常、慣用の条件または製造業者が推奨した条件に従う。

別に定義しない限り、明細書で使用しているすべての専門用語および科学用語は、当業者に熟知している意味と同じである。また、記載された内容と類似または均等の方法および材料は、何れも本発明の方法に適用することができる。明細書で説明されている好ましい実施方法と材料は、単なる例示として使用するものである。

[実施例１]吸入剤処方
表２の処方に従って、ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７０℃～８０℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．０～６．０の間に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

表２の処方１～処方９を、それぞれ密閉の高温（６０℃）、光照射（４５００ｌｘ±５００ｌｘ）の条件下で、０日、５日、１０日、３０日間置いて、関連物質の状況を調査する。

関連物質の含有量の測定方法：ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＵＳＡ、クロマトカラム：Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ_１８（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ、Ａｇｉｌｅｎｔ、ＵＳＡ）、流動相：グラジエント溶出は以下の通りであり、流速は１ｍＬ／分で、試料注入量は２０μＬで、検出波長は２１０ｎｍで、カラム温度は室温である。

以上の実験結果により、ペラミビルとビタミンＣで調整した吸入液は、光照射と高温に５日間置くと、淡黄色の透明な溶液に変化し始め、高温と強光の条件下に３０日間置くと、関連物質が大幅に増加し、残りの処方は、高温と強光の条件下で、各々の時点で何れも無色の透明な溶液であることを示している。また、ペラミビルと塩化ナトリウムとを、クエン酸ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、クエン酸及びプロピレングリコールの少なくとも１つで調整した吸入液は、高温に３０日間置いた後、関連物質も明確に増加し、安定性が劣っている。しかし、ペラミビルと塩化ナトリウム、ペラミビルと塩化ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムで調整した吸入溶液は、高温と光照射の条件下で、何れも優れた安定性を有する。

[実施例２]ペラミビルの溶解度に対する異なるｐＨの影響実験
過量のペラミビルバルク薬を量り取って２５ｍｌのメスフラスコに入れ、０．７％の塩水でマークまでメスアップし、シェーカーに置いて２４時間振盪（２５℃、７５ｒｐｍ）した後、希塩酸（５％、ｖ／ｖ）を用いてそれぞれｐＨを４．０、４．５、５．０、５．５に調整し、継続して４８時間置いた後、０．４５μｍの濾膜でろ過を行い、ろ過液を脱イオン水で２５０倍に希釈し、ペラミビル標準のＨＰＬＣ法を用いて、サンプルにおけるペラミビルの含有量を測定する。

実験結果により、ペラミビルの平衡溶解度はｐＨ依存性を有し、ｐＨの低下に従ってその平衡溶解度が増加することを示している。製剤のｐＨの要求（３～８）と生理刺激性等の要素を組み合わせると、ペラミビル吸入溶液のｐＨは４．５～６．０の間でより適切である。

[実施例３]異なるｐＨ条件下でペラミビル吸入溶液の安定性実験
処方１及び処方６は、それぞれ希塩酸（５％ ｖ／ｖ）を用いてｐＨ値を４．５、５．０、５．５に調整した溶液と、希塩酸でｐＨ値を調整していない溶液に分け、その後、ペラミビル溶液をそれぞれ密閉の高温（６０℃）、光照射（４５００ｌＸ±５００ｌＸ）の条件下に０日、３０日間置いて、関連物質の状況を調査する。

実験結果は、ペラミビル吸入液がｐＨ値５．５の条件下で最も安定であり、高温の条件下でも良好な安定性を維持できることを示している。

[実施例４]
処方：
ペラミビル １８ｇ
塩化ナトリウム ６．５ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７５℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．５に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

[実施例５]
処方：
ペラミビル ２０ｇ
塩化ナトリウム ７ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７５℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．５に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

[実施例６]
処方：
ペラミビル １５ｇ
塩化ナトリウム ８ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７０℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．７に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

[実施例７]
処方：
ペラミビル ２０ｇ
塩化ナトリウム ７ｇ
リン酸二水素ナトリウム ０．１ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７０℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．５に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

[実施例８]
処方：
ペラミビル ２５ｇ
グルコース ８ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７５℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．５に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

[実施例９]
処方：
ペラミビル １５ｇ
塩化ナトリウム ８ｇ
リン酸二水素ナトリウム ０．１ｇ
５％塩酸 適量
注射用水 １０００ｍｌ
製造方法：ペラミビルの原料と補助材料とを液体混合タンクで混合し、７５℃の注射用水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、希塩酸（５％ｖ／ｖ）を用いて溶液のｐＨ値を５．５に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る。

実験例１：ペラミビルエアロゾル吸入溶液の品質評価実験
処方１および処方６の吸入溶液の送達速度と総送達量、微細粒子の用量をそれぞれ測定する。

微細粒子用量の測定
ＮＧＩを冷却キャビネットに置き、冷却キャビネットの温度が４℃に下がった後、テストを開始し、ＮＧＩを底流速の真空ポンプおよび流速計に連結し、流速を１５Ｌ／分（±５％）に調整する。２ｍｌのペラミビルエアロゾル吸入溶液（２０ｍｇ／ｍｌ）を含んでいるプラスチックアンプルを取り、よく振った後、アンプルを絞り、ペラミビルエアロゾル吸入溶液を霧化カップに添加し、霧化カップを圧縮機に連結し、まず、底流速の真空ポンプをオンにしてから圧縮機をオンにし、圧縮機によって生成される圧縮空気を利用して霧化し、１６分（完全に霧化される）後に圧縮機をオフにし、霧化カップを取り外してから、底流速の真空ポンプをオフにする。サンプルを添加した霧化カップを取り外し、ＮＧＩから分離し、脱イオン水／メタノール（６０：４０）の混合溶媒を用いてアンプルを洗浄し、薬液を５ｍｌのメスフラスコに回収し、霧化カップを洗浄して残留の薬液を１００ｍｌのメスフラスコに回収し、希釈液を用いて喉管を洗浄し５０ｍｌのメスフラスコに入れ、希釈液を用いてそれぞれ第１の収集層、第２の収集層、第３の収集層、第４の収集層、第５の収集層、第６の収集層、第７の収集層および濾過紙付のＭＯＣ収集層を洗浄し、対応する５０ｍｌのメスフラスコに回収し、３回の平行測定を行う。ＭＯＣ収集層の試験溶液は０．４５μｍの濾膜を介してろ過され、その後のろ過液を取ってＭＯＣ収集層の試験溶液として使用し、他の試験溶液は直接注入することができる。

送達速度と総送達量の測定
指示に従って、呼吸シミュレータと濾過紙を備えた濾過紙装置とを取り付ける。２ｍｌのペラミビルエアロゾル吸入溶液（２０ｍｇ／ｍｌ）を含んでいるプラスチックアンプルを取り、よく振った後、アンプルを絞り、ペラミビルエアロゾル吸入溶液を霧化カップに添加し、霧化カップを圧縮機に連結し、呼吸シミュレータを成人モード（１５サイクル／分の呼吸数、５００ｍｌの潮汐量、吸入と呼気時間の比１：１）に設定する。呼吸シミュレータをオンにし、第１の段階の時間を１分に設定し、呼吸サイクルの開始時に圧縮機をオンにし、呼吸サイクルの終了時に圧縮機を同時にオフにする。希釈液を用いて濾過紙と濾過紙装置を洗浄して、同一の１００ｍｌメスフラスコに回収し、第１の段階の試験溶液とする。また、指示に従って、呼吸シミュレータと濾過紙を備えた濾過紙装置と、霧化カップと、セットの圧縮機とを取り付け、呼吸シミュレータをオンにし、第２の段階の時間を１５分に設定し、呼吸サイクルの開始時に圧縮機をオンにし、呼吸サイクルの終了時に圧縮機を同時にオフにする。希釈液を用いて濾過紙と濾過紙装置を洗浄して、同一の１００ｍｌメスフラスコに回収し、第２の段階の試験溶液とする。

実験結果により、高濃度のペラミビルエアロゾル吸入溶液（２０ｍｇ／ｍｌ）は、総送達量が８ｍｇよりも大きく、ＦＰＤ（微細粒子の用量）が１０ｍｇよりも大きく、ＦＰＦ（微細粒子の有効堆積率）が６１％よりも大きく、ＭＭＡＤ（質量中央値空気力学的直径）が４μｍよりも小さく、ＧＳＤ（幾何標準偏差）が３．０よりも小さく、エアロゾル吸入溶液製剤の品質要件を満たすことを示している。

[実施例２ 組織分布試験]
実験方法：１５匹のＳＤ雄ラットを取り、各組に５匹ずつランダムに３組に分け、静脈内注射を介して、ペラミビル塩化ナトリウム注射液（バッチ番号：３１３９２６２、広州南新製薬有限公司）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、投与５分後、１時間後、３時間後に眼窩の静脈叢から０．２０ｍｌの血を採取した後、麻酔によって動物を死亡させてから肺組織（気管を含む）を取る。全血がヘパリンナトリウムによって抗凝固された後、遠心分離（１００００ｒｐｍ、５分）し、血漿部分を取り、肺組織をきれいに洗浄して秤量し、血漿と肺組織を試験のために-２０℃で保存する。

５４匹のＳＤ雄ラットを取り、各組に６匹ずつランダムに９組に分け、エアロゾル吸入を介してペラミビル化合物塩化ナトリウム溶液（処方１）を投与し、投与用量はそれぞれ、低用量が２．５ｍｇ／ｋｇであり、中用量が５ｍｇ／ｋｇであり、高用量が１０ｍｇ／ｋｇであり、エアロゾル吸入の投与時間は３０分であり、それぞれ投与５分後、１時間後、３時間後に眼窩の静脈叢から０．２０ｍｌの血を採取し、麻酔によって動物を死亡させた後、肺組織（気管を含む）を取る。全血がヘパリンナトリウムによって抗凝固された後、遠心分離（１００００ｒｐｍ、５分）し、血漿部分を取り、肺組織をきれいに洗浄して秤量し、血漿と肺組織を試験のために-２０℃で保存する。

収集処理分析：
肺組織の収集
投与後５分、１時間、３時間で麻酔によってラットを死亡させ、それぞれその体重を計って記録し、その後解剖し、その肺組織（気管を含む）を取り、生理食塩水で肺組織をきれいに洗浄し、濾過紙を用いて肺組織に残っている液体を吸収し、肺組織をＥＰチューブに入れ、重さを計り（ＥＰチューブ自体の重さを取り除く）肺組織の重さを記録し、最後に肺組織を-２０℃の冷蔵庫で保存する。

肺組織の予備処理
肺組織／生理食塩水の比率１ｇ／４ｍＬに従って、対応する生理食塩水を肺組織に加え、ホモジナイザーでホモジネートを製造し、遠心分離（１００００ｒｐｍ、１０分）した後、１００μＬの上清を取り、１．５ｍLの遠心管に置いて、１ｇ／ｍＬの内部標準オセルタミビルメタノール溶液４００μLを正確に加え、１分間ボルテックスして混合し、１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、１００μLの上清を取った後、１００μLの水を加えて充分に混合し、その後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を待つ。

標準プログラムで肺組織予備処理
グラジエント希釈法に従って、１ｍｇ／ｍＬの母液を用いて、濃度が０．５μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬおよびイ２００μｇ／ｍＬのペラミビル標準溶液を調製する。ブランクの肺組織ホモジネート９０μLを取り、上述の各濃度の標準液１０μLをそれぞれ正確に加えることによって、濃度がそれぞれ０．０５μｇ／ｍＬ、０．１μｇ／ｍＬ、０．５μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬおよび２０μｇ／ｍＬの肺組織標準品を調製し、各種の肺組織標準品に、１ｇ／ｍＬの内部標準オセルタミビルメタノール溶液４００μLを加え、１分間ボルテックスして混合し、１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、１００μLの上清を取り、その後、１００μLの水を加えて充分に混合し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を待つ。毎日、肺組織の薬物濃度は、何れも標準プログラムで計算する。

測定条件：
クロマトグラフ条件：アゲラ（Ａｇｅｌａ）会社のＶｅｎｕｓｉｌ ＸＢＰ フェニルカラム（１００ｍｍ×２．１ｍｍ、５μｍ）を用いて、流動相Ａ（０．１％のギ酸水溶液、２ｍＭの酢酸アンモニウムを含む）とＢ（０．１％ギ酸のメタノール）の比は６０：４０であり、流速は０．４０ｍＬ／分で、カラム温度は４０℃で、注入量は５μLである。

質量分析条件：イオン源はエレクトロスプレーイオン化源（ＥＳＩ）であり、検出方法は陽イオン検出であり、スキャン方法は多重反応モニタリング（ＭＲＭ）であり、スプレー電圧は５５００Ｖであり、イオン源の温度は５５０℃であり、エアカーテンのガス流速は２５Ｌ／分で、ＧＳ１は５０Ｌ／分で、ＧＳ２は：５０Ｌ／分であり、衝突ガスの流速は６Ｌ／分で、スキャン時間は０．２秒であり、定量および定性に使用されるイオン条件は、表８および図２に示している。

肺組織の薬物濃度
異なる投与方法と投与用量を経て、５分、１時間および３時間での研究の結果（表９）により、ペラミビルは、静脈内注射投与（１０ｍｇ／ｋｇ）された後１時間および３時間で、肺組織における薬物濃度が、エアロゾル吸入投与の各用量組（Ｐ＜０．００１）に比べて何れも著しく低く、５分で、静脈内投与された肺組織の薬物濃度は、エアロゾル吸入投与の中用量組及び高用量組より著しく低いが、低用量の噴霧投与とは統計的に有意な差がない（Ｐ＞０．０５）。肺組織におけるペラミビルの薬物濃度は、エアロゾル吸入投与による用量依存的な特徴を表しており、用量の増加に従って増加する。肺組織の薬物濃度におけるペラミビルの２つの投与方法の差は、時間の延長に従って差が大きくなる。同じ投与の条件下（１０ｍｇ／ｋｇ）で、各時点でのペラミビルの噴霧投与の肺組織濃度は、静脈内投与の２．０２～１１．５８倍であり、各時点での低用量のエアロゾル吸入投与（２．５ｍｇ／ｋｇ）の肺組織濃度は、静脈内投与（１０ｍｇ／ｋｇ）の１．０７～４．５８倍であり、各時点での中用量のエアロゾル吸入投与（５ｍｇ／ｋｇ）の肺組織濃度は、静脈内投与（１０ｍｇ／ｋｇ）の１．５８～５．３１倍である。

[実施例３]
超音波霧化の安定性実験
実施例１における処方１および処方６の吸入溶液を超音波噴霧器（２５００ＫＨｚ）に置いて超音波霧化し、それぞれ０分、２０分、４０分、６０分および９０分後にその関連物質の含有量を測定し、実験結果は表１０に示す通りである。

実験結果により、処方１のペラミビル塩化ナトリウム溶液吸入剤は、２５００ＫＨｚの電力で超音波霧化から４０分以内に、良好な安定性を維持できるが、１時間後には関連物質の含有量が著しく増加し始め、超音波によって薬物成分が分解され、さらに化学反応が発生した可能性があり、処方にリン酸二水素ナトリウムをさらに加えた後、超音波霧化から９０分以内に、関連物質の増加が顕著ではなく、薬物の超音波安定性を大幅に向上させることを示している。

以上の説明は、本発明の実質的な技術的内容の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の好ましい実施例にすぎない。本発明の実質的な技術的内容は、出願の特許請求の範囲内で広く定義され、他者によって完成された技術的実体または方法は、出願の特許請求の範囲で定義されたものとまったく同じである場合、または同等の変更である場合、該特許請求の範囲内に含まれるもとのみなされる。

Claims (9)

1. ペラミビル溶液吸入剤であって、
   前記溶液吸入剤は、ペラミビル、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤および水により製造され、ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌよりも大きく、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌよりも小さく、前記溶液吸入剤のｐＨ値は５．０～６．０で、且つ非加熱方法で滅菌しており、前記浸透圧調整剤は、塩化ナトリウムまたはグルコースから選択されており、前記溶液吸入剤は霧化された後、その質量中央値空気力学的直径は３μｍ～４μｍの間であり、微細粒子の有効堆積率は６０％～８０％の間である、ことを特徴とするペラミビル溶液吸入剤。
2. ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌより大きく且つ２５ｍｇ／ｍｌより小さく、好ましくは２０ｍｇ／ｍｌであり、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌより小さく且つ６ｍｇ／ｍｌより大きく、好ましくは７ｍｇ／ｍｌであり、前記浸透圧調整剤は塩化ナトリウムである、ことを特徴とする請求項１に記載のペラミビル溶液吸入剤。
3. 前記ｐＨ調整剤は希塩酸である、ことを特徴とする請求項１に記載のペラミビル溶液吸入剤。
4. 前記ｐＨ値は５．５である、ことを特徴とする請求項１に記載のペラミビル溶液吸入剤。
5. 前記溶液吸入剤をエアロゾル吸入してから、1時間後の肺組織における薬物濃度は７μｇ／ｇよりも大きく、または、３時間後の肺組織における薬物濃度は５μｇ／ｇよりも大きい、ことを特徴とする請求項１～４の何れか１項に記載のペラミビル溶液吸入剤。
6. 前記溶液吸入剤の微細粒子用量は１０ｍｇよりも大きく、粒子の幾何標準偏差は３．０よりも小さい、ことを特徴とする請求項１～４の何れか１項に記載のペラミビル溶液吸入剤。
7. ペラミビル溶液吸入剤であって、
   前記溶液吸入剤は、ペラミビル、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤、リン酸二水素ナトリウムおよび水により製造され、ペラミビルの濃度は１５ｍｇ／ｍｌよりも大きく、浸透圧調整剤の濃度は８ｍｇ／ｍｌよりも小さく、リン酸二水素ナトリウムの濃度は０．０５ｍｇ／ｍｌ～０．２ｍｇ／ｍｌであり、前記溶液吸入剤のｐＨ値は５．５で、且つ非加熱方法で滅菌しており、前記浸透圧調整剤は塩化ナトリウムまたはグルコースから選択されており、前記溶液吸入剤は霧化された後、その質量中央値空気力学的直径は３μｍ～４μｍの間であり、微細粒子の有効堆積率は６０％～８０％の間である、ことを特徴とするペラミビル溶液吸入剤。
8. 高温に３０日間置いた後、前記溶液吸入剤の関連物質の含有量は０．３％よりも小さい、ことを特徴とする請求項７に記載のペラミビル溶液吸入剤。
9. 請求項８に記載のペラミビル溶液吸入剤の製造方法は、
   ペラミビルの原料と補助材料とを混合し、７０℃～８０℃の水を１０００ｍｌに加え、撹拌溶解した後冷却し、次に希塩酸を用いて溶液のｐＨ値を５．０～６．０の間に調整し、その後、プリフィルタリングして無菌ろ過を行い、無菌充填してペラミビル溶液を得る、ことを特徴とする製造方法。