JP2022519263A - 光防御用植物由来組成物 - Google Patents

Abstract

ＵＶ吸収性材料、任意で１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコース、をウルシの葉および／または未熟果から得るための方法、ならびに当該方法で得られるＵＶ吸収性材料、および当該ＵＶ吸収性材料を含む組成物を本明細書に記載する。本方法は、ウルシの葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、水混和性有機溶媒を除去することを含む。本明細書に記載の組成物は、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度が少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである日焼け止め組成物のみならず、医薬用および／または化粧用の組成物である。

Description

関連出願
本願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、２０１９年２月７日出願の米国仮特許出願第６２／８０２，２１９号について、優先権に基づく権利を主張するものである。

技術分野
本発明は、そのいくつかの実施形態において、光防御、特に植物材料から得られ得るＵＶ防止用の組成物に関するが、これらに限定されるものではない。

表皮の表面および内部層に直接影響を与える太陽照射、特にその紫外Ｂ（ＵＶＢ）領域に対する慢性的な曝露は、日焼け、紅斑、免疫応答の変調および外因性皮膚老化の増加を含む、複数の病理生理学的変化と関連付けられている［Matsurama & Anathaswamy, Toxicol Appl Pharmacol 2004, 195:298-308、Kraemer, Proc Natl Acad Sci USA 1997, 94:11-14、Lavker et al., J Am Acad Dermatol 1995, 32:53-62、Portugal-Cohen et al., Exp Dermatol 2009, 18:781-789］。重要な点は、ＵＶＢは細胞のアポトーシスを誘導し、表皮細胞のＤＮＡを損傷して、さらに皮膚を傷つけ得る点であり、これは皮膚癌の発生の主要リスクの１つと考えられている［Tuorkey, Eur J Cancer Prev2015, 24:430-438］。

日焼け止めは太陽照射に対する防御として使用されており、皮膚癌に対抗するための重要なツールとしてのみならず、太陽照射によって誘導される他の皮膚の不調、例えば、老化、皴の形成、望まない色素沈着およびコラーゲンの消失、の緩和も目的とする［Mancebo et al., Dermatol Clin 2014, 32:427-428］。しかしながら、現在使用されている市販の日焼け止めは皮膚を貫通して浸透し、循環器系に到達し、体に全身性の損傷をもたらすことが報告されている［Touitou & Godin, Clin Dermatol 2008, 26:375-379］。日焼け止めで処置され、続いてＵＶ照射に暴露された皮膚は、逆説的であるが、劇的に増加したＲＯＳ（活性酸素種）の存在を示す［Hanson et al., Free Radic Biol Med 2006, 41:1205-1212］。これは、日焼け止めの最外皮膚層を貫通する能力と、いくつかの日焼け止めのラジカルを好む能力とを示している。さらに日焼け止めの入った化粧品を使用する個人の尿および母乳から日焼け止めおよびその分解副産物が検出されている［Hayden et al., Lancet 1997, 350:863-86］。いくつかの日焼け止めについては、エストロゲン受容体や甲状腺受容体に結合し、活性化する能力も報告されている［Gilbert et al., Int J Cosmet Sci 2013, 35:208-219］。

日焼け止めは有意な毒性をヒトの使用者に示すだけでなく、泳者の付けた日焼け止めや排水によって運ばれた日焼け止めによる汚染は、サンゴやサンゴ礁に対して生態学的且つ実存的な脅威となる［Danovaro et al., Environ Health Perspect 2008, 116:441-447］。

ウルシ（Ｓｕｍａｃ）（シリア語で赤という意味）は、Rhus属およびウルシ科（Anacardiaciae family）の関連属に属する植物である。

特によく知られたウルシの種であるRhus coriariaは、典型的には高さ１～３メートルの低木または小木であり、その葉は小葉が９～１５枚の奇数羽状複葉であり、その花序はまとまった直立円錐花序であり、小さな緑がかった白い花を付け、その果実は長軟毛で、赤い、単一種子の石果である。Rhus coriariaは地中海のマキーおよび森林に野生で生息し、深く、よく乾燥した土壌に生育する。

ウルシの主たる用途は、中近東で一般的なスパイスであり、酸っぱい果実から作られる。未成熟化および種子も食される。さらにウルシは着色成分およびタンニンを含み、これらは上等な皮革の染色およびなめしに使用され、シルクやウールといったタンパク質が主成分の織物材料を染色することもできる［Shabbir, J Animal Plant Sci2012, 22:505-512］。植物の異なる部分から様々な色の染料を調製することができる。さらに種子から抽出した油はろうそくの製造に用いることができる。ウルシは、加水分解可能なタンニン（ガロタンニンを含む）、揮発性油、アントシアニン、没食子酸、ならびにミリセチン、ケルセチンおよびケンフェロール等のフラボノイドを保持することが報告されている［Mavlyanov et al., Chem Nat Comp 1997, 33:209、Guvenc & Koyuncu, Turkish J Med Sci 1994, 20:11-13、el-Sissi et al., Planta Med 1972, 21:67-71、Mehrdad et al., J AOAC Int 2009, 92:1035-1043］。

ウルシは次の性質：抗微生物作用［Adwan et al., Asian Pac J Trop Med 2010, 266-269］、抗真菌作用［Hashem & Alamri, Saudi J Biol Sci 2010, 17:167-175］、抗酸化および軟骨防御作用［Panico et al., J Med Plant Res 2009, 3:855-861］、化学損傷時のＤＮＡ保護作用［Chakraborty et al., Mut Res 2009, 661:10-17］、血糖降下作用［Giancarlo et al., Nat Prod Res 2006, 20:882-896］、抗虚血および血管弛緩作用［Beretta et al., Planta Med 2009, 75:1482-1488］を有することが報告されており、さらに非変異原生である［Al-Bataina et al., J Trace Elem Med Biol 2003, 17:85-90］。

米国特許出願公開第２０１０／０２１５６３０号明細書は、病原となる虫類に対する効果を保存する目的で、虫および微生物に対する薬剤を紫外線照射から保護するためにアニス、アストラガルス、香菜、桂皮、丁子、ディル、コロハ、ナツシロギク、葛、甘草、シャクヤク、マジョラム、オレガノ、パプリカ、ペパーミント、ナンキンハゼ、ローズマリー、セージ、スペアミント、立浪草、セントジョンズワート、ウルシ、タラゴン、タイムおよび／またはカノコソウの抽出物を使用することを記載する。

「タンニン」という用語は、典型的にはタンニンのヒドロキシル基またはカルボキシル基を介して、種々の分子と強力な複合体を形成することのできるポリフェノール様生物分子を意味する。

植物由来のタンニンは、典型的には、次の主要な２つのクラスの一方に属する：フェノール基によってエステル化された中心炭水化物を含む、加水分解可能なタンニン（没食子酸またはエラグ酸由来）、およびフラボノイド類の縮合重合によって形成される縮合タンニン。没食子酸エステルを含む加水分解可能タンニンは、「ガロタンニン」とも呼ばれる。

「タンニン酸」という用語には、グルコースまたはキナ酸のポリガロイルエステルが含まれる。市販のタンニン酸は、通常、タラ（Tara spinosa）の鞘、ヌルデ（Rhus chinensis）またはアレッポカシ（Aleppo oak）(Quercus infectoria）の没食子、あるいはスンマーク（tanner’s sumac)（Rhus coriaria）の葉から抽出される。原料に応じて、多くのガロイル部分は典型的には２～１２の範囲であるが、タンニン酸の化学式は、多くの場合、慣例として、デカガロイルグルコースの式で表される。

グルコースのガロイルエステルで構成された分子が２０の植物の科から５００超同定されており、その範囲は非常に単純な、分子量が３３２Ｄａである１－モノガロイル－β－グルコース（グルコガリン）から、分子量が４０００Ｄａ超の複雑なポリマーにまで及ぶ。

Rothman & Henningsen［J Invest Dermatol 1947, 9:307-313］は、p-アミノ安息香酸の日焼け防止効果について記載しており、このような目的でタンニン酸が頻繁に使用されているものの、UV照射への暴露の際には急激な分解という問題が発生することを記載している。

米国特許第４，１０４，３６８号明細書は、長鎖四級アンモニウム塩と日除け効果を提供する酸性部分（例えば、ｐ－アミノ安息香酸およびその誘導体、サリチル酸およびその誘導体、マロン酸およびその誘導体、桂皮酸およびその誘導体、タンニン酸および没食子酸、ナフトールスルホン酸、ならびにアントラニル酸）を含む、整肌および日除け効果を提供するための組成物について記載している。

タンニン酸は、米国特許第５，１６９，６２４号、第８，７０３，７５３号、第９，７３７，４７２号、および第１０，０６４，７９７号の明細書において、日焼け止め処方用のＵＶフィルター剤のリストに含まれている。

米国特許第１０，１１１，８２１号明細書は、局所的に投与した組成物を用いて電磁放射スペクトルの一部を除くことで、特定波長の電磁放射を投与する光療法を記載している。広範囲にわたる紫外線吸収分子がそこに記載されており、ペンタガロイルグルコースも含まれる。

米国特許第７，７７６，９１５号明細書は、年老いた皮膚の外観を向上させるための局所用組成物であって、リポイド酸、カルニチンおよびカルノシンと、任意の追加成分、例えば、抗酸化剤、抗糖化剤、コラーゲン促進剤、ミトコンドリア系蘇生剤（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｒｅｓｕｓｃｉｔａｎｔｓ）、チオレドキシン、グルタチオン、ＮＡＤＨ、抗炎症剤、脱色素剤、皮膚保護脂質および日焼け止め剤を含むものを記載している。ペンタガロイルグルコースは、抗炎症剤の長いリストの中に含まれている。

米国特許第４，７４１，９１５号明細書は、ペンタガロイルグルコース等のガロタンニン類の食品や化粧品（シェービングフォーム、アフターシェーブ、ボディローション、メイク落とし用乳液、顔用クリーム、日焼けローション、マスク等）における抗酸化剤としての使用を記載している。

さらなる背景技術には、Berardini et al.［Rapid Commun Mass Spectrom 2004, 18:2208-2216］、Chuarienthong et al.［Int J Cosmet Sci 2010, 32:99-106］、Cohen et al.［Negev, Dead Sea and Arava Studies 2015, 7:66-74］、Haddock et al.［J Chem Soc Perkin Trans 1 1982, 0:2535-2545］、Nichols & Katiyar［Arch Dermatol Res 2010, 302:71-83］、Ozer et al.［J Ethnopharmacol2015, 161:86-91］、Schuch et al.［Free Rad Biol Med 2017, 107:110-124］、Schwack & Rudolph［J Photochem Photobiol B Biol 1995, 28:229-234］、およびWineman et al.［J Herbal Med 2015, 5:199-206］が含まれる。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から抽出された材料を含み、当該材料は紫外線および／またはブルーライトを吸収する組成物が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ＵＶ吸収性材料と、皮膚医学的に許容される担体とを含み、前記ＵＶ吸収性材料がウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果の抽出物であり、前記ＵＶ吸収性材料の組成物中の濃度が少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである、日焼け止め組成物が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から単離された１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースと、皮膚医学的に許容される担体とを含み、前記１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの組成物中の濃度が少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである、日焼け止め組成物が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から抽出されたＵＶ吸収性材料と、皮膚医学的に許容される担体とを含む、医薬用または化粧用の組成物が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から単離された１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースと、皮膚医学的に許容される担体とを含む、医薬用または化粧用の組成物が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、ＵＶ吸収性材料を得るための方法であって、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、前記水混和性有機溶媒を除去して、ＵＶ吸収性材料を得ることを含む方法が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを得るための方法であって、ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、前記水混和性有機溶媒を除去して、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを得ることを含む方法が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、任意の対応する実施形態に基づき、本明細書において記載された方法によって得られたＵＶ吸収性材料が提供される。

本発明のいくつかの実施形態の一態様においては、任意の対応する実施形態に基づき、本明細書において記載された方法によって得られた１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースが提供される。

本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ウルシはRhus coriariaを含む。

組成物に関連する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は波長３００ｎｍで路長１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な量である。

本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ＵＶ吸収性材料は、複数のガロイル置換基の結合したグルコース部分を有する、少なくとも１種の化合物を含む。

複数のガロイル置換基の結合したグルコース部分を有する、少なくとも１種の化合物に関連する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、少なくとも１種の化合物は１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含む。

１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含むＵＶ吸収性材料の本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ＵＶ吸収性材料中の１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度は、少なくとも９５重量％である。

医薬用または化粧用の組成物の本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、組成物は皮膚老化および創傷からなる群より選ばれる病態の治療養である。

化粧用組成物に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、化粧用組成物は皮膚の若返り用組成物および／またはピーリング用組成物である。

ＵＶ吸収性材料に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ＵＶ吸収性材料は、ウルシの葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、前記水混和性有機溶媒を除去して、ＵＶ吸収性材料を得ることを含む方法によって得られ得る。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、水混和性有機溶媒はＣ_１－４アルコールを含む。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、水混和性有機溶媒はエタノール、アセトンおよび／またはグリセリンを含む。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ウルシの葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒との接触は、ソックスレー抽出器を用いて実施する抽出を含む。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、ウルシの葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒との接触は、ウルシの葉および／または未熟果の乾燥重量１ｇ当たり５～４０ｍｌの前記水混和性有機溶媒の比率を用いて実施される。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、方法は、極性溶媒と非極性溶媒との間のＵＶ吸収性材料の分配と、極性溶媒に分配された画分の回収とをさらに含む。

極性溶媒と非極性溶媒との間の分配を含む方法の、本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、非極性溶媒はアルカンを含む。

極性溶媒と非極性溶媒との間の分配を含み、非極性溶媒はアルカンを含む方法に関連した本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、アルカンはヘキサンを含む。

極性溶媒と非極性溶媒との間の分配を含む方法に関連した本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、極性溶媒は水を含む。

極性溶媒と非極性溶媒との間の分配を含む方法に関連した本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、方法は極性溶媒に分配された画分の水と水不混和性極性有機溶媒との間の分配、および水不混和性極性有機溶媒に分配された画分の回収をさらに含む。

水と水不混和性極性有機溶媒との間の分配を含む方法に関連した本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、水不混和性極性有機溶媒はエステルを含む。

水とエステルを含む水不混和性極性有機溶媒との間の分配を含む方法に関連した本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、エステルは酢酸エチルを含む。

水と水不混和性極性有機溶媒との間の分配を含む方法の、本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、方法は水不混和性極性有機溶媒に分配される画分を水を含む溶媒と接触させることでＵＶ吸収性材料を結晶化させることをさらに含む。

方法に関する本明細書に記載のいくつかの任意の実施形態によると、方法は、前記ＵＶ吸収性材料のカラムクロマトグラフィーによる精製をさらに含む。

特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術および／または科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により通常理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと同様のまたは等価な方法および材料を、本発明の実施形態の実践または試験に使用することができるが、例示的な方法および／または材料を下記に記載する。矛盾する場合、定義を含む特許明細書が優先する。加えて、材料、方法、および実施例は単なる例示であり、必ずしも限定を意図するものではない。

本発明のいくつかの実施形態について、その例示のみを目的として添付の図面を参照して本明細書に記載する。以下、特に図面を詳細に参照して示す細部は、例示を目的とし、また本発明の実施形態の詳細な説明を目的とすることを強調する。同様に、図面と共に説明を見ることで、本発明の実施形態をどのように実践し得るかが当業者には明らかとなる。

図１は、（イスラエル内の）種々の地理的位置から得たRhus coriariaの枝、小枝、葉、未熟果、熟果および根のエタノール抽出物（０．１ｍｇ／ｍｌ）のＳＰＦ値を示す棒グラフである。 図２は、本発明の例示的な実施形態に従って、Rhus coriariaの葉から例示的ＵＶ吸収物質（ＳＨ－１０１）を抽出するための方法を模式的に示す。 図３は、ＳＰＦ値、および図２に示したように５０グラムの乾燥Rhus coriaria葉粉末から抽出した材料のパーセント収率を、エタノール抽出物を得るために用いたエタノール容量（単位：ｍｌ）の関数としてを示すグラフである。 図４Ａ～４Ｃは、本発明のいくつかの実施形態に基づき、Rhus coriariaの葉から抽出した例示的ＵＶ吸収物質（ＳＨ－４０１）（図４Ａと４Ｂ）のＨＰＬＣクロマトグラム（吸収は２９０ｎｍ）、ならびにＨＰＬＣクロマトグラムの主要ピークと関連付けられる例示物質のＵＶ吸収スペクトル（図４Ｃ）を示す（ここに提示した結果は３回の実験の代表的なものである）。 図４Ａ～４Ｃは、本発明のいくつかの実施形態に基づき、Rhus coriariaの葉から抽出した例示的ＵＶ吸収物質（ＳＨ－４０１）（図４Ａと４Ｂ）のＨＰＬＣクロマトグラム（吸収は２９０ｎｍ）、ならびにＨＰＬＣクロマトグラムの主要ピークと関連付けられる例示物質のＵＶ吸収スペクトル（図４Ｃ）を示す（ここに提示した結果は３回の実験の代表的なものである）。 図４Ａ～４Ｃは、本発明のいくつかの実施形態に基づき、Rhus coriariaの葉から抽出した例示的ＵＶ吸収物質（ＳＨ－４０１）（図４Ａと４Ｂ）のＨＰＬＣクロマトグラム（吸収は２９０ｎｍ）、ならびにＨＰＬＣクロマトグラムの主要ピークと関連付けられる例示物質のＵＶ吸収スペクトル（図４Ｃ）を示す（ここに提示した結果は３回の実験の代表的なものである）。 図５は、Rhus coriariaの葉から抽出した例示的ＵＶ吸収化合物（ペンタガロイルグルコース）の、ＮＭＲ解析で決定した構造表す。 図６は、Rhus coriariaから単離した例示物質（ＳＨ－４０１）、粗Rhus coriaria抽出物、および市販のＵＶＢフィルター剤の、濃度０．０１ｍｇ／ｍｌ（ｎ＝３）のＳＰＦ値を示す棒グラフである。 図７は、ＳＨ－４０１（濃度が０．０１ｍｇ／ｍｌ）のＳＰＦ値の、ＳＨ－１０１のフィルムをＵＶ照射に暴露した時間に対する関数（ｎ＝３）を示す棒グラフである。 図８Ａ～８Ｃは、ＳＨ－４０１（化合物）濃度の関数として示した、ヒト皮膚移植片をＳＨ－４０１とインキュベートしたときの（ＭＴＴアッセイで求めた）表皮細胞生存率（図８Ａ）、および０．０２、０．１、０．２、１または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－４０１または市販のＳＰＦ３０の組成物（Ｄｒ．Ｆｉｓｈｅｒ）によって事前に処理したヒト皮膚移植片の、ＵＶＢ照射（３５０ｍＪ／ｃｍ^２）への暴露から２４時間後の細胞におけるアポトーシスのレベル（図８Ｂ）とＴＮＦαのレベル（図８Ｃ）を示すグラフである（＊は非照射ベヒクル対照（０）に対するｐ＜０．０５、＃は照射ベヒクル対照（ＵＶ）に対するｐ＜０．０５、ｎ＝３）。 図８Ａ～８Ｃは、ＳＨ－４０１（化合物）濃度の関数として示した、ヒト皮膚移植片をＳＨ－４０１とインキュベートしたときの（ＭＴＴアッセイで求めた）表皮細胞生存率（図８Ａ）、および０．０２、０．１、０．２、１または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－４０１または市販のＳＰＦ３０の組成物（Ｄｒ．Ｆｉｓｈｅｒ）によって事前に処理したヒト皮膚移植片の、ＵＶＢ照射（３５０ｍＪ／ｃｍ^２）への暴露から２４時間後の細胞におけるアポトーシスのレベル（図８Ｂ）とＴＮＦαのレベル（図８Ｃ）を示すグラフである（＊は非照射ベヒクル対照（０）に対するｐ＜０．０５、＃は照射ベヒクル対照（ＵＶ）に対するｐ＜０．０５、ｎ＝３）。 図８Ａ～８Ｃは、ＳＨ－４０１（化合物）濃度の関数として示した、ヒト皮膚移植片をＳＨ－４０１とインキュベートしたときの（ＭＴＴアッセイで求めた）表皮細胞生存率（図８Ａ）、および０．０２、０．１、０．２、１または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－４０１または市販のＳＰＦ３０の組成物（Ｄｒ．Ｆｉｓｈｅｒ）によって事前に処理したヒト皮膚移植片の、ＵＶＢ照射（３５０ｍＪ／ｃｍ^２）への暴露から２４時間後の細胞におけるアポトーシスのレベル（図８Ｂ）とＴＮＦαのレベル（図８Ｃ）を示すグラフである（＊は非照射ベヒクル対照（０）に対するｐ＜０．０５、＃は照射ベヒクル対照（ＵＶ）に対するｐ＜０．０５、ｎ＝３）。 図９は、０、０．０２、０．１、０．２、１または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－１０１で処理し、ＵＶＢ照射有りまたは無しの皮膚移植片における、ＤＣＦＤＡ（ジクロロフルオレセイン二酢酸）アッセイで決定したＲＯＳ（活性酸素種）発生レベル（任意単位）を示す棒グラフである（ｎ＝３、＊はＵＶＢおよび０μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－１０１処理に対するｐ＜０．０５）。 図１０は、０、０．０２、０．１、０．２、１または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－１０１で処理し、ＵＶＢ照射有りまたは無しの皮膚移植片における、ＥＬＩＳＡアッセイによってＭＤＡ（マロンジアルデヒド）濃度として測定した脂質過酸化レベルを示す棒グラフである（ｎ＝３、＊はＵＶＢおよび０μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－１０１処理に対するｐ＜０．０５）。 図１１は、ＤＰＰＨ（ジフェニルピクリルヒドラジル）色変化に基づき決定された、ＳＨ－４０１が０．１、０．５または１重量％の濃度で活性酸素種を除去する能力（マイクロモルのＴｏｒｏｌｏｘ相当単位として測定）を示す棒グラフである（０％のＳＨ－４０１のベヒクルを対照とした。ｎ＝３、＊はベヒクル対照に対するｐ＜０．０５）。 図１２は、ＵＶＢ照射（３５０ｍＪ／ｃｍ^２）および／または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－４０１（化合物）とのインキュベーションによる処理後の皮膚移植片の、ＣＯＭＥＴ ＤＮＡ断片化アッセイに付した表皮細胞の画像である。（皮膚の処理後に表皮を引きはがし、単細胞試料をＥＤＴＡで得た。画像は３回の実験の代表であり、矢印は損傷を受けた細胞の「テール部」を示す。） 図１３は、０、０．０１、０．０２、０．２または２μｇ／ｃｍ^２のＳＨ－４０１で処理後、３５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ照射有りまたは無しの皮膚移植片から単離した表皮細胞における、ＥＬＩＳＡによって決定したシクロブタンピリミジン二量体（ＣＰＤ）レベルを示す棒グラフである（ｎ＝３、＊は非照射ベヒクル対照に対するｐ＜０．０５、＃は照射ベヒクル対照に対するｐ＜０．０５）。 図１４のＡ～Ｄは、３５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ照射（図１４Ｂと１４Ｄ）またはＵＶＢ照射なし（図１４Ａと１４Ｃ）であり、ＳＨ－４０１とのインキュベーション（図１４Ｃと１４Ｄ）またはＳＨ－４０１とのインキュベーションなし（図１４Ａと１４Ｂ）の皮膚移植片の組織学的画像を示す（対照＝ＳＨ－４０１またはＵＶＢに暴露されていない対照試料、図１４Ｂ中の矢印は注目すべき特徴を強調するものであり、全ての画像が３つの試料を代表するものである）。 図１５のＡおよびＢは、ＵＶＢ照射および記載の濃度のＳＨ－１０１に暴露されたか、あるいはＳＨ－１０１なしの暴露（ＵＶＢ）に付された皮膚移植片における、ＥＬＩＳＡによって決定したプロコラーゲンレベル（図１５Ａ）およびＭＭＰ１レベル（図１５Ｂ）（対照＝ＳＨ－４０１またはＵＶＢに暴露されていないベヒクル対照試料、＊はベヒクル対照に対するｐ＜０．０５、＃はＵＶＢのみの群に対するｐ＜０．０５、ｎ＝３）。 図１６は、ＳＨ－１０１またはベヒクル（エタノール）に２４時間曝露した、創傷を誘導したコンフルエントなＨａＣａＴ細胞（２本の縦線の間）の顕微鏡画像である（対照＝ＳＨ－４０１またはベヒクルに暴露されていない対照試料、全ての画像が３つの試料を代表するものである）。

本発明は、そのいくつかの実施形態において、光防御、より具体的には、これに限定されるものではないが、植物材料から得ることのできるUV防除組成物に関する。

本発明の少なくとも１つの実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、必ずしもその用途が、以下の記載に示すまたは実施例で例示する詳細に限定されるものではないことを理解するべきである。本発明は、他の実施形態が可能であり、また、さまざまな手段で実施または実行することが可能である。

本発明者らは、有害なＵＶ照射の防除に特に効果的な薬剤（例：日焼け止め剤）として機能し、驚くべきことに、アンチエイジングおよび創傷治癒効果といった有益な付加的効果を皮膚細胞に対して発揮する天然のＵＶ吸収性材料をウルシから見出した。

本発明を実践に移すに当たり、本発明者らは、ペンタガロイルグルコース等の特定のＵＶ吸収化合物を単離するための効果的な方法さらに見出した。

次に図面に参照する。図１は、ウルシの葉および未熟果のエタノール抽出物が、当該植物の他の部分よりも効果的に有害なＵＶ照射を防除することを示す。

図２は、本発明の例示的な実施形態に基づく、例示的なＵＶ吸収物質（ＳＨ－１０１）をウルシの葉から抽出する方法を示す。図４Ａ～４Ｂは、ＳＨ－４０１の純度およびＵＶ吸収を示す。図３は、ＵＶ吸収性材料の抽出効率に対するエタノール容量の効果を示す。

図５は、考慮すべきスペクトル解析の証拠から決定した、ＳＨ－４０１（ペンタガロイルグルコース）の構造を示す。図６は、日焼け止め剤としてのＳＨ－４０１の効能（ＳＰＦ値で測定）が市販の日焼け止め剤と比べて遜色のないものであることを示す。図７は、ＳＨ－４０１がＵＶ照射への暴露に対して安定であることを示す。

図８Ａは、ＳＨ－４０１がヒト皮膚細胞に対して毒性がないことを示し、図８Ｂ、８Ｃおよび図１４Ａ～１４Ｄは、ＳＨ－４０１がＵＶＢ照射に対してヒト皮膚細胞を保護することを示す。図９および図１０は、ＳＨ－４０１がヒトの皮膚におけるＲＯＳ（活性酸素種）発生および脂質の過酸化を減少させることを示す。図１１は、ＳＨ－４０１が抗酸化剤であることを示す。図１２および図１３は、ＳＨ－４０１が皮膚細胞におけるＵＶ誘導性ＤＮＡ損傷を減少させることを示す。図１５Ａ～１５Ｂは、ＳＨ－４０１が皮膚におけるＵＶ誘導性コラーゲン分解を逆転させることを示す。

組成物：
本発明の実施形態の一態様においては、ＵＶ吸収性材料と、皮膚医学的に許容される担体とを含み、ＵＶ吸収性材料がウルシの葉および／または未熟果の抽出物である組成物が提供される。

本明細書を通じて、「ＵＶ吸収」という用語は、２００ｎｍ～５００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の電磁照射を吸収することを意味する。４００ｎｍ～５００ｎｍの副範囲をここでは「ブルーライト」とも呼び、このような波長の吸収を「ＵＶ吸収」という用語の範囲に含めることは簡潔さのためである。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、「ＵＶ吸収」という用語は、２８０ｎｍ～５００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味する。このような実施形態のいくつかにおいて、「ＵＶ吸収」という用語は、２８０ｎｍ～４００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味し、当該波長は本明細書において「紫外線Ｂ波」（ＵＶＢ）（２８０～３２０ｎｍ）および「紫外線Ａ波」（ＵＶＡ）（３２０～４００ｎｍ）とも呼ばれる。このような実施形態のいくつかにおいて、「ＵＶ吸収」という用語は、２８０ｎｍ～３２０ｎｍ（即ち、ＵＶＢ）の範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味する。このような実施形態のいくつかにおいて、「ＵＶ吸収」という用語は、２９０ｎｍ～３２０ｎｍ（即ち、ＵＶＢ）の範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味する。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、「ＵＶ吸収」という用語は、３００ｎｍ～５００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味する。このような実施形態のいくつかにおいて、「ＵＶ吸収」という用語は、３００ｎｍ～４００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味し、当該波長は当業界において「近紫外線」とも呼ばれる。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、「ＵＶ吸収」という用語は、ブルーライトの吸収、即ち、４００ｎｍ～５００ｎｍの範囲の少なくとも一部の波長の吸収を意味する。当該波長を吸収する材料は容易に視認できる色（例：黄色）を帯びていることがある。

いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．０１ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．０２ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．０５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも１ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも２ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも５ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも１０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも２０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも５０ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は少なくとも１００ｍｇ／ｍｌである。

いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は４００ｍｇ／ｍｌ以下、任意で２００ｍｇ／ｍｌ以下、任意で１００ｍｇ／ｍｌ以下、任意で５０ｍｇ／ｍｌ以下、任意で２０ｍｇ／ｍｌ、および任意で１０ｍｇ／ｍｌ以下である。

いくつかの実施形態において、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は、約０．０５～約１０ｍｇ／ｍｌ、または約１０ｍｇ／ｍｌ～約５０ｍｇ／ｍｌ、または約５０～約２００ｍｇ／ｍｌ、または約１００～約４００ｍｇ／ｍｌであり、その間の任意の中間値および副範囲も含む。

組成物に関連する任意の実施形態のいくつかにおいて、組成物は日焼け止め組成物である。

本明細書において、「日焼け止め組成物」とは、皮膚上に薄い膜として投与されたときに、ＵＶ照射の吸収および／またはＵＶ照射の反射によって、太陽からのＵＶ照射を少なくとも部分的に（典型的には、２９０～３２０ｎｍの範囲の照射、任意でより広い波長範囲、例えば、２９０ｎｍ～４００ｎｍを）防除（ｂｌｏｃｋ）または遮蔽（ｓｃｒｅｅｎ）する組成物を意味する。日焼け止め組成物は任意で、ＵＶ照射または太陽光全般の防除または遮蔽用、および／または太陽光と関連する傷害（例：日焼け、癌リスク）の（例：局所投与による）最小化用と（例えば、日焼け止め組成物のパッケージ内またはパッケージ上に）特定される。

本明細書に記載の任意の実施形態のいくつかにおいては、組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度は、波長３００ｎｍで路長１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な濃度である。いくつかの実施形態において、濃度は、波長３００ｎｍで路長３ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な濃度である。いくつかの実施形態において、濃度は、波長３００ｎｍで路長０．１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な濃度である。いくつかの実施形態において、濃度は、波長３００ｎｍで路長０．０３ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な濃度である。いくつかの実施形態において、濃度は、波長３００ｎｍで路長０．０１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な濃度である。

当業者には認められるように、少なくとも９０％の吸収は、（ランベルト＝ベールの法則によると）吸光度として少なくとも１に対応し（そして少なくとも９９％の吸収は吸光度として少なくとも２に対応し、少なくとも９９．９％の吸収は吸光度として少なくとも３に対応し）、吸光度とは、減衰係数（材料に固有の性質）、濃度および路長の積である。よって路長１ｍｍに対する少なくとも９０％の吸収は、減衰係数および濃度の積が少なくとも１ｍｍ^－１であることに対応する。従ってこのような限定は、与えられた吸光度特性を有する化合物の濃度を定義する。３００ｎｍの照射を吸収する化合物の混合物（例：本明細書に記載のＵＶ吸収性材料）の場合、各化合物の減衰係数および濃度の積の合計が少なくとも１ｍｍ^－１である。

与えられた路長（例：１ｍｍ）が減衰係数および濃度の積を定義する（例：少なくとも１ｍｍ^－１である）ことから、材料による吸収は異なる路長、例えば、組成物中の他の化合物による散乱または吸収を最小化するためにより短い路長で測定してもよいことを理解されたい。従って、例えば、路長１ｍｍにおける吸光度が少なくとも１であることは、任意で、路長１０ｍｍにおける吸光度が（本明細書および当業界で定義されるように）少なくとも１０である、また、路長０．１ｍｍにおける吸光度が（本明細書および当業界で定義されるように）少なくとも０．１であるというように実践的に決定することもできる。

本明細書に記載の任意の実施形態のいくつかにおいては、ＵＶ吸収性材料は、複数のガロイル（即ち、３，４，５－トリヒドロキシベンゾイル）置換基を有する少なくとも１種の化合物、例えば、２～１０のガロイル置換基、または４～６（例：５）のガロイル置換基を有する化合物を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の化合物は、複数のガロイル置換基の結合した炭水化物部分、例えば、グルコース部分を含む。炭水化物部分は、任意で、Ｄ－グルコース部分等の糖（例：ヘキソース）部分、またはキナ酸部分でもよい。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、ガロイル置換基はエステル結合を介して他の部分に結合している、即ち、ガロイルが他の部分の酸素原子に結合している。

ガロイル置換基は任意で骨格部分（例：炭水化物部分）に結合するか、または代わりに、いくつかのガロイル置換基が任意で骨格部分に直接結合し、いくつかのガロイル置換基が他のガロイル置換基に結合することもできる。このような実施形態において、骨格部分（例：グルコース部分）のガロイル置換基のそれぞれがガロイルそのものの形態であるか、またはガロイルで置換されたガロイル（例：３，４－ジヒドロキシ－５－［（３，４，５－トリヒドロキシベンゾイル）オキシ］ベンゾイル）である。このような実施形態において、骨格部分（例：グルコース部分）のガロイル置換基のそれぞれがガロイルそのものの形態である。

本明細書において例示したように、（グルコースの異なる酸素原子に直接結合した５のガロイル部分を含む）１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースは、ウルシから高い効率で抽出することができる。

任意の対応する実施形態のいくつかにおいて、ＵＶ吸収性材料における１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は少なくとも８０重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は少なくとも９０重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は少なくとも９５重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は少なくとも９８重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は、少なくとも９９重量％である。

本明細書に記載の任意の実施形態のいくつかにおいては、任意の対応する実施形態に基づく、ここに記載されたＵＶ吸収性材料は、（例：ウルシからの１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの単離に関連して記載した任意の実施形態による）ウルシの葉および／または未熟果より単離された１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースである。いくつかの実施形態において、（本明細書に記載した任意の対応する実施形態に基づく）１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの濃度は、少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである。

本明細書を通じて、「ウルシ（sumac）」という用語は、Rhus spp.、即ち、ウルシ属（genus Rhus）に属する任意の植物を意味する。ウルシの例としては以下が挙げられるが、これらに限定されるものではない。Rhus chinensis（通称：ヌルデ（Chinese sumac））、Rhus delavayi、Rhus hypoleuca、Rhus punjabensis（通称：パンジャーブ・スマック）、Rhus taitensis、 Rhus sanwicensis、Rhus coriaria（通称：スンマーク（tanner’s sumac、Sicilian sumac、またはelm-leaved sumac））、Rhus aromatica（通称：フラグラント・スマック（fragrant sumac））、Rhus copallinum（通称：ウイングド・スマック（winged sumac またはshining sumac））、Rhus glabra（通称：スムース・スマック（smooth sumac））、Rhus lanceolata（通称：プレーリー・スマック（prairie sumac））、Rhus michauxii（通称：ミショー・スマック（Michaux’s sumac））、Rhus typhina（通称：アメリカハゼノキ（staghorn sumac））、Rhus choriophylla（通称：マーンズ・スマック（Mearn’s sumac））、Rhus integrifolia（通称：レモネード・スマック（lemonade sumac））、Rhus kearneyi（通称：カーニー・スマック（Kearney sumac））、Rhus microphylla（通称：アカシカ（desert sumacまたはlittleleaf sumac））、Rhus ovata（通称：シュガー・スマック（sugar sumac））、Rhus trilobata（通称：スカンクブッシュ・スマック（skunkbush sumac））、Rhus virens（通称：エバーグリーン・スマック（evergreen sumac））、andRhus muelleri（通称：ミューラー・スマック（Muller’s sumac））。例示的な実施形態において、ウルシはRhus coriariaである。

本明細書に記載の任意の実施形態のいくつかにおいては、ＵＶ吸収性材料は、任意の対応する実施形態に基づき、本明細書において記載の方法によって得ることができる。

方法：
本発明の実施形態の一態様においては、ＵＶ吸収性材料（例：本明細書に記載した、任意の対応する実施形態に基づくＵＶ吸収性材料）をウルシから得るための方法が提供される。方法は、ウルシの葉および／または未熟果を水混和性有機溶媒と接触させる工程を含む（例えば、ＵＶ吸収性材料を抽出物として得る）。いくつかの実施形態において、方法は、例えば、溶媒の蒸発によって、水混和性有機溶媒を除去する工程をさらに含む。

ウルシの葉および／または未熟果は、水混和性有機溶媒と接触させる前に、任意で、例えば、空気（任意で乾燥空気）への暴露および／または緩やかな（例えば、１００℃未満、または７５℃未満、または５０℃未満の温度での）加熱によって乾燥させる。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、水混和性有機溶媒は、１つの－ＯＨ基または２つ以上の－ＯＨ基を含むアルコール（任意で２種以上のアルコール）（例：エチレングリコール、プロパンジオール、ブタンジオール、ペンタンジオール、および／またはグリセリン）を含む、および／またはケトン（例：アセトン）を含む。いくつかの実施形態において、水混和性有機溶媒はＣ_１－４アルコール（例：ｔ－ブチルアルコール、１－プロパノール、イソプロパノール、エタノールおよび／またはメタノール）、アセトンおよび／またはグリセリンを含む。いくつかの実施形態においてエタノールは例示的な水混和性有機溶媒である。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、ウルシの葉および／または未熟果と、水混和性有機溶媒との接触は、抽出を含む。このような実施形態において、抽出はソックスレー抽出器で実施する。

本明細書において、「ソックスレー抽出器」という用語は、抽出に使用した溶媒を再利用するように構成された器具であり、材料を抽出するために溶媒を原料（例：ウルシ)と接触させ、材料の抽出に用いた溶媒を蒸発させ、そして溶媒の蒸気を凝集させて、蒸気が原料と接触するように戻すことで、材料をさらに抽出する。「ソックスレー抽出器」という用語には当業界で「クマガワ抽出器」として知られる器具を含む、種々の特定の設計の器具が含まれる。

ソックスレー抽出器に関連する実施形態には、揮発性の水混和性有機溶媒、例えば、（大気圧下の）沸点が１００℃以下の溶媒が特に適している。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、ウルシと接触させる水混和性有機溶媒の量は、１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり少なくとも５ｍｌの溶媒であり、任意で１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり少なくとも１０ｍｌの溶媒であり、任意で１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり少なくとも１５ｍｌの溶媒である。このような実施形態において、溶媒はエタノールを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、ウルシと接触させる水混和性有機溶媒の量は、１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり４０ｍｌ以下の溶媒であり、任意で１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり３０ｍｌ以下の溶媒であり、任意で１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり約２０ｍｌ以下の溶媒である。このような実施形態において、溶媒はエタノールを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、ウルシと接触させる水混和性有機溶媒の量は、１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり５～４０ｍｌの範囲内の溶媒であり、任意で１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり１０～３０ｍｌの溶媒である。本明細書において例示したように、１グラム（乾燥重量）のウルシ当たり約２０ｍｌの水混和性有機溶媒は効率的な抽出を提供することができる。いくつかの実施形態において、溶媒はエタノールを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、方法は、例えばより純度の高い（より効率よく吸収する）ＵＶ吸収性材料を得るために、極性溶媒と非極性溶媒との間の（例：任意の対応する実施形態に基づく、本明細書に記載の水混和性有機溶媒を用いて得られた抽出物の形態の）ＵＶ吸収性材料の分配と、極性溶媒に分配された画分の回収とをさらに含む。

本明細書において、「分配」という用語は、材料を２種の非相溶性の液体と接触させ、例えば、２種の液体のそれぞれに対する材料中の種々の成分の異なる親和性および／または溶解性に基づき、材料の異なる部分を異なる相へと移動（即ち、分配）せしめることを意味する。一方または両方の相を任意で他の相から分離し、相に分配された部分を回収する。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、非極性溶媒は１種以上の炭化水素および任意で１種以上の脂肪族炭化水素を含む。いくつかの実施形態において、非極性溶媒は１種以上のアルカン類、例えば、１種以上の炭素数５～１６のアルカン類を含む。いくつかの実施形態において、ヘキサンは例示的な非極性溶媒である。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、極性溶媒は水を含み、例えば、少なくとも８０重量％の水、または少なくとも９０重量％の水、または少なくとも９５重量％の水、または少なくとも９８重量％の水、または少なくとも９９重量％の水を含む。例示的な実施形態において、極性溶媒は実質的に水からなる。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、非極性溶媒は 脂肪族炭化水素であり、極性溶媒は実質的に水からなる。

特定の論理に縛られるものではないが、非極性溶媒はかなりの量の他の植物由来物質（例：クロロフィル）を極性溶媒に分配されるＵＶ吸収性材料から分離させると信じられている。さらに、（例：本願明細書に記載のような）適切な比率の極性および非極性溶媒は、分離される植物由来物質の割合を増加させる、および／または廃棄となるＵＶ吸収性材料の割合を最小にするとも信じられている。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する非極性溶媒の水に対する比率は少なくとも０．０５ｍｌの溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも０．１ｍｌの溶媒、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも０．１５ｍｌの溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも０．２５ｍｌの溶媒である。このような実施形態において、溶媒はヘキサンを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する非極性溶媒の水に対する比率は、水１ｍｌ当たり１ｍｌ以下の溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり０．６ｍｌ以下の溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり０．４ｍｌ以下の溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり約０．２５ｍｌ以下の溶媒である。このような実施形態において、溶媒はヘキサンを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する非極性溶媒の水１ｍｌに対する比率は０．０５～１ｍｌの溶媒であり、任意で水１ｍｌ当たり０．１～０．６ｍｌの範囲の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり０．１５～０．４ｍｌの範囲の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり約０．２５ｍｌの溶媒である。このような実施形態において、溶媒はヘキサンを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、例えば、より純度の高い（より効率的に吸収する）ＵＶ吸収性材料を得るために、方法は、水と水不混和性極性有機溶媒との間のＵＶ吸収性材料の分配、および水不混和性極性有機溶媒に分配された画分の回収をさらに含む。ＵＶ吸収性材料は、任意で、本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく、（非極性溶媒ではなく）極性溶媒に分配した画分の形態である。

水不混和性極性有機溶媒の例として以下が挙げられるが、これらに限定されるものではない。酢酸Ｃ_１－４アルキル（例：酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、と酢酸ブチル）および炭酸プロピレン等のエステル類、１－ブタノール、２－ブタノール、イソブタノール、アミルアルコール、イソアミルアルコール、オクタノール、およびシクロヘキサノール等のアルコール類、２－ブタノン、メチルイソブチルケトン、アセトフェノン、およびシクロヘキサノン等のケトン類、フルフラアルデヒド等のアルデヒド類、アニリン等のアミン類、ジクロロメタンおよび１，２－ジクロロエタン等の極性塩素化溶媒、二硫化炭素、ならびにニトロメタン、ニトロプロパン、およびニトロベンゼン等のニトロ化合物。いくつかの実施形態において、酢酸エチルが例示的な水不混和性極性有機溶媒である。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する水不混和性極性有機溶媒の水に対する比率は、水１ｍｌ当たり少なくとも０．３ｍｌの溶媒、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも０．６ｍｌの溶媒、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも１ｍｌの溶媒、任意で水１ｍｌ当たり少なくとも１．５ｍｌの溶媒である。このような実施形態において、溶媒は酢酸エチルを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する水不混和性極性有機溶媒の水に対する比率は、水１ｍｌ当たり７．５ｍｌ以下の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり４ｍｌ以下の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり２．５ｍｌ以下の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり約１．５ｍｌ以下の溶媒である。このような実施形態において、溶媒は酢酸エチルを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、分配に使用する水不混和性極性有機溶媒の水に対する比率は、水１ｍｌ当たり０．３～７．５ｍｌの範囲内の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり０．６～４ｍｌの範囲内の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり１～２．５ｍｌの範囲内の溶媒、任意で水１ｍｌ当たり約１．５ｍｌの溶媒である。このような実施形態において、溶媒は酢酸エチルを含む。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、方法は、例えば、より純度の高いＵＶ吸収性材料を得るために、ＵＶ吸収性材料の結晶化の実施をさらに含む。結晶化は、任意で、当業界で知られるいかなる適切な方法で実施してもよい。いくつかの実施形態においては、結晶化は、（例：本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく水不混和性極性有機溶媒に分配された画分の形態の）ＵＶ吸収性材料を水を含む溶媒と接触させることで実施する。

水を含む溶媒は、任意で、例えば、水と、（任意の対応する実施形態に基づき記載した）１以上の水混和性有機溶媒の混合物である。任意の対応する実施形態のいくつかにおいて、水を含む溶媒は、水とアルコールとを含み、例えば、アルコール濃度は、約２０～約８０重量％の範囲内（例：アルコール：水の重量比は２０：８０～８０：２０のアルコール：水）、または約３０～約６０重量％の範囲内（例：アルコール：水の重量比は３０：７０～６０：４０）、または約４０重量％（例：アルコール：水の重量比は４０：６０）である。エタノール／水（例えば４０：６０の重量比）は、結晶化を実行するための例示的な水を含む溶媒である。

結晶化に続き、ＵＶ吸収性材料の結晶は、任意で、濾過および／または溶媒の蒸発によって溶媒から分離することができる。それによって比較的純度の高い、単離されたＵＶ吸収性材料が得られる。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態のいくつかにおいては、本明細書に記載の任意の対応する実施形態（任意で結晶化を直前の工程として含む）に基づき得られたＵＶ吸収性材料は、カラムクロマトグラフィーで、例えば、カラムから出てくる画分のＵＶ吸収を同定することで、さらに精製する。いくつかの実施形態において、固定相は疎水性である。例示的な実施形態において、炭素鎖（オクタデシルまたはＣ１８）結合シリカが固定相に用いられる。水溶液（例：０．１％のトリフルオロ酢酸）とアセトニトリルの勾配が例示的な移動相である。

本明細書に記載の、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含むＵＶ吸収性材料を得るための方法に関連する任意の実施形態のいくつかにおいて、ＵＶ吸収性材料中の１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースは比較的高い、例えば、ＵＶ吸収性材料の少なくとも９５重量％の純度を有す。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度は少なくとも９８重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度は少なくとも９９重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度は少なくとも９９．５重量％である。いくつかの実施形態において、１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度は少なくとも９９．８重量％である。

本発明の実施形態の一態様においては、本明細書において記載した、任意の対応する実施形態に基づく方法によって得られたＵＶ吸収性材料が提供される。

処方および使用:
本明細書において上述したように、本明細書に示す任意の実施形態におけるＵＶ吸収性材料は、皮膚医学的に許容される担体を含む組成物の一部として活用することができる。

このような組成物は任意で局所使用を目的としたいかなる組成物でもよい。

すでに上述したように、組成物は任意で、（例：日照下で）ＵＶ照射を防除または遮蔽する目的で使用される、日焼け止め組成物である。（本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく）日焼け止め組成物は、任意で、日焼け止め以外の主たる使用目的（例：化粧用および／または薬学的用途）を有し、日焼け止め活性は組成物の補助的活性であってもよいことを理解されたい。

上記の代わりにまたは加えて、（本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく）組成物は、任意で、医薬組成物および／または化粧用組成物（例：化粧品に含まれる組成物）である。このような実施形態において、組成物は皮膚老化または創傷の治療用、他えば、創傷治癒を促進するために使用する医薬組成物として、同定されている。いくつかの実施形態において、化粧用組成物は皮膚の若返り用組成物および／またはピーリング用組成物、例えば、皮膚の若返りまたは皮膚のピーリングに使用するために同定されたものである。

本明細書において、「化粧用」および「化粧用組成物」および「化粧品」という用語は、審美目的で使用される局所用の物質または製品（製造品）を意味する。化粧用組成物は、所望の審美的効果の提供を容易にするために、任意で、医薬活性をさらに発揮する物質を含んでもよい。

本明細書に記載の活性成分を有利に使用することのできる化粧用組成物または化粧品としては、例えば、おしろい（ｍａｋｅ－ｕｐ）、ゲル類、マニキュア、アイシャドウ、リップグロス、口紅などが挙げられる。

本明細書において、「医薬／薬学用」という用語は、例えば皮膚を、化粧品によって変化させることを含む、体の少なくとも一部（例：皮膚）の状態および／または行動を有利に変化させることを目的とした任意の化合物および／または組成物を意味する。このような定義は、例えば、化粧的効果を用語の範囲から除き得る規制当局の使用する当該用語の範囲よりも広いことを理解されたい。

医薬用または化粧用組成物の有利な効果は、任意で、ＵＶ照射によって生じる損傷に対する防御と関連付けることができ、このような効果は、任意であるが、必須ではなく、皮膚に到達するＵＶ照射量の減少によって少なくとも部分的に仲介される。

上記の代わりにまたは加えて、医薬用または化粧用組成物の有利な効果は、ＵＶ照射量減少以外のメカニズム（例えば、抗酸化作用）による、ＵＶ照射によって誘導される損傷に対する防御と関連付けることができる、および／またはＵＶ照射とは関連しない損傷、例えば、創傷の治療（例：ＵＶ照射と関連しない創傷の治癒の促進）と関連付けることができる。

本発明の実施形態の他の態様においては、（本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく、）ウルシ由来のＵＶ吸収性材料またはウルシ由来のＵＶ吸収性材料を含む組成物の、薬剤（例えば、皮膚老化または創傷治療用薬剤）の製造における使用が提供される。

本発明の実施形態の他の態様においては、治療を必要とする対象における皮膚老化および／または創傷を治療するための方法であって、（本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく）ウルシ由来のＵＶ吸収性材料を対象に局所投与することを含む方法が提供される。

本明細書において、「皮膚医学的に許容される担体」という用語は、生物の皮膚に投与した際に有意な刺激を生じることがなく、且つ投与した化合物の生物活性や性質を無効にすることのない担体または希釈剤を意味する。

従って、本発明の実施形態に基づき使用する組成物は、賦形剤および補助剤を含む１種以上の担体を用いて公知の方法によって処方することが可能であり、当該担体は、上記化合物の化粧用および／または医薬用として使用可能な製剤への加工を容易にする。

本明細書において、「賦形剤」という用語は、組成物に添加されて活性成分、例えば、本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づくＵＶ吸収性材料の投与をさらに容易にする、不活性な物質を指す。適切な固体相またはゲル相の担体または賦形剤には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどのポリマーが挙げられるが、これらに限定されるものではない。

薬物の処方および投与のための技術は「Remington's Pharmaceutical Sciences」、Mack Publishing Co., Easton, PA, latest editionに見出すことができ、本参照をもって本明細書に組み込まれるものとする。

本明細書に記載した、本発明の種々の実施形態における組成物は、当業界で公知の方法、例えば、公知の混合、溶解、顆粒化、湿式粉砕、乳状化、カプセル化、捕捉化または凍結乾燥のための工程によって製造することができる。

本明細書に詳細に記載するように、適切な担体と、任意で組成物に含めることのできる他の材料とを選択することで、本明細書に記載の組成物を局所投与に適した任意の形態に処方することができる。よって、組成物は、例えば、クリーム剤、軟膏剤、ペースト剤、ゲル剤、ローション剤および／または洗浄剤の形状であり得る。

軟膏剤は、典型的には、植物油（例：シアバターおよび／またはカカオバター)またはワセリンまたはワセリン誘導体を主体とする半固体調製物である。他の担体またはベヒクルと同様に、軟膏基剤は、不活性で、安定で、非刺激性で、かつ非感作性である必要がある。

ローション剤は、摩擦を与えずに皮膚表面に適用される調製物である。ローション剤は、典型的には、水基剤またはアルコール基剤の液体または半液体の調製物、例えば、水中油型エマルションである。ローション剤は、より流動性の高い組成物の適用が容易であることから（例：多くの場合、日焼け止め組成物において望ましいように）身体の広い領域を処置する場合に一般に好ましい。

クリーム剤は、水中油型または油中水型のいずれかである、粘稠な液体または半固体のエマルションである。クリーム基剤は典型的には油相と、乳化剤と、水相とを含有する。油相は、「親油」相とも呼ばれ、任意でワセリンおよび／またはセチルアルコールもしくはステアリルアルコールなどの脂肪族アルコールを含む。水相は任意で湿潤剤を含む。クリーム処方中の乳化剤は、任意で非イオン性、アニオン性、カチオン性、または両性の界面活性成分である。

本明細書において、「エマルション」という用語は、2以上の異なる相（例：親水相と親油相)に液体を含む組成物を意味する。非液状物質（例：分散した固体および／または気泡)が任意で存在してもよい。

本明細書および当業界で使用するように、「油中水型エマルション」とは、親油相中に分散した水相によって特徴づけられるエマルションである。

本明細書および当業界で使用するように、「水中油型エマルション」とは、水相中に分散した親油相によって特徴づけられるエマルションである。

ペースト剤は半固体の剤形であって、その基剤の性質によって、脂肪性ペースト剤と単相水性ゲルから作製されたペースト剤とに分けられる。脂肪性ペースト剤の基剤は、一般に、ワセリン、親水性ワセリン等である。単相水性ゲルから作製されたペースト剤は一般に、カルボキシメチルセルロース等を基剤として組み込んでいる。

ゲル処方は、半固体の、懸濁液型の系である。単相ゲル剤は、典型的には水性である担体液全体にわたり実質的に均質に分布した有機巨大分子を含有するが、好ましくは、非水性溶媒と、所望により油とをさらに含有する。好ましい有機巨大分子、すなわちゲル化剤には、カルボマーポリマーのファミリー、例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）の商標で市販されているものとして得られる、カルボキシポリアルキレンなどの架橋アクリル酸ポリマーが含まれる。当該態様における他の種類の好ましいポリマーは、ポリエチレンオキシド、ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレンコポリマー、およびポリビニルアルコールなどの親水性ポリマー、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、およびメチルセルロースなどのセルロース系ポリマー、トラガントおよびキサンタンガムなどのガム、アルギン酸ナトリウム、ならびにゼラチンである。均質なゲルを調製するため、アルコールまたはグリセリンなどの分散剤を添加してもよく、ゲル化剤を、粉砕、機械的混合もしくは撹拌、またはこれらの組合せによって分散してもよい。

局所投与用に処方された組成物は、任意で、パッチ、スワッブ、綿球および／またはパッドに含まれてもよい。

皮膚パッチなどは以下の成分の全てまたは一部を含んでもよい。投与される（例：本明細書に記載の）組成物、任意で使用前に取り除かれる、保存時にパッチを保護するライナー、種々の成分を１つにまとめるおよび／またはパッチを皮膚に張り付けるための粘着剤、外部環境からパッチを保護するための裏剤、および／または皮膚への薬剤の放出を制御するメンブラン。

任意の実施形態において、組成物は室温（例：２０℃）で少なくとも２週間、任意で少なくとも１ヶ月、任意で少なくとも２ヶ月、任意で少なくとも６ヶ月、任意で少なくとも１年間安定（例：実質的な化学的変化および／または相分離なし）である。

本発明の実施形態の文脈に適した医薬組成物、化粧用組成物および日焼け止め組成物としては、それぞれの意図する目的を達成するのに効果的な量の活性成分が含まれた組成物が挙げられる。

特定の目的に対する有効量の決定は、特に本明細書の提供する詳細な開示に照らした、当業者の能力の範囲内である。

投与される医薬用または化粧用の組成物の量および／または医薬用または化粧用の組成物中の活性成分の量は、治療される対象、状態の深刻度、投与方法、医薬組成物を処方する医師の判断などに依存し得る。

投与される日焼け止め組成物および／または活性成分（例：本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づくＵＶ吸収性材料）の量は、保護する太陽光の程度、（例：皮膚の色素形成の影響を受ける）太陽光に対する対象の感受性、ならびに完全な防御が望ましいか否か（例：日焼けを誘導するためには中庸なＵＶ曝露が望ましい）といった因子に依存し得る。

日焼け止め組成物の提供する（例えば、活性成分濃度に相関する）ＵＶ防除活性の程度は、任意で、当業界で知られた他の技術を用いて表す、例えば、紫外線保護指数（ＳＰＦ）値として定量的に表すこともできる。

本明細書に記載の任意の対応する実施形態に基づく組成物は、任意で、組成物の意図する、例えば、本明細書に記載の効果を提供するために、適切な追加の活性成分をさらに含んでもよい。このような追加の活性成分としては、例えば、日焼け止め剤、ＵＶ吸収剤、抗酸化剤、皮膚処置剤および／または本明細書に記載の状態を治療するための薬剤が挙げられる。

例えば、（例：日焼け止め組成物に使用するための）ＵＶ照射の防除における使用に適した追加の活性成分としては以下が挙げられるが、これらに限定されるものではない。ベンゾフェノン類（例：ベンゾフェノン－１、ベンゾフェノン－２、ベンゾフェノン－３、ベンゾフェノン－４、ベンゾフェノン－５、ベンゾフェノン－６、ベンゾフェノン－７、ベンゾフェノン－８、ベンゾフェノン－９、ベンゾフェノン－１０、および安息香酸ジエチルアミノヒドロキシベンゾイルヘキシル）、ｐ－アミノ安息香酸およびその誘導体、例えば、Ｎ－アルキル置換誘導体および／またはそのエステル類（例：Ｎ－ジメチル－ｐ－アミノ安息香酸イソペンチルおよびＮ－ジメチル－ｐ－アミノ安息香酸オクチル）、アボベンゾン、ベモトリジノル、ビソクトリゾール、３－（４－メチルベンジリデン）－カンファ、ドロメトリゾールトリシロキサン、エカムスル、エチルヘキシルトリアゾン、メンチルアントラニレート、オクトクリレン、イスコトリジノール、メトキシシナメートまたはその誘導体（例：エステル）（例：４－メトキシシナメートイソペンチル、４－メトキシシナメートオクチルおよびシノキサート）、ポリシリコーン－１５、サリチル酸およびその塩（例：サリチル酸トロルアミン）またはその誘導体（例：エステル）（例：ホモサレートおよびサリチル酸オクチル），並びにＴｉＯ_２および／またはＺｎＯなどの無機化合物。

いくつかの実施形態において、追加の活性（ＵＶ防除性）成分はＴｉＯ_２および／またはＺｎＯであり、例えば、合成有機薬剤の使用を任意で防止することができる。

創傷の治療および／または創傷治癒の促進に用いるための組成物における使用に適した追加の活性成分としては以下が挙げられるが、これらに限定されるものではない。パンテノールおよびその誘導体（例：エチルパンテノール）、アロエベラ、パントテン酸およびその誘導体、アラントイン、ビサボロール、およびグリシルリチン酸二カリウムといった、皮膚無痛化薬および／または治癒剤。

本明細書に記載の組成物において、（例：ＵＶ誘導性または非ＵＶ誘導性の皮膚損傷を減少させるための）追加の活性成分に適した抗酸化剤としては以下が挙げられるが、これらに限定されるものではない。アスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、カロテンおよびカロテノイド（例：アルファ－カロテン、ベータ－カロテン、カンタキサンチン、クリプトキサンチン、ルテイン、リコペン、ゼアキサンチンおよびビタミンＡ）、クルクミン、ユーゲノール、フラボノイド類（例：フラボン、イソフラボン、フラバノール、フラボノール、フラバノン、スチルベノイド、アントシアニン）、グルタチオン、プロピルガレート、四級ブチルヒドロキシキノン、トコフェロール類（例：ビタミンＥ）、尿酸および抗酸化酵素（例：チオレドキシン、カタラーゼおよびスーパーオキシドジスムーターゼ）。

本明細書に記載の組成物は、例えば、香りや栄養因子（例：皮膚または毛髪の栄養因子）を増やすために添加される追加の成分を含んでもよい。

このような成分は、ヒトにおける局所使用に適当として、健全な医療判断の範囲内で、毒性、不適応、不安定、アレルギー応答等を誘導しないものから選択される。さらにこのような任意の成分は、本発明の活性成分の利点を許容できない程に変化させない限り、有用である。

CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition (1992)は、本発明の組成物における使用に適した、スキンケア業界で使用される広範囲にわたる、非限定的な化粧材料を開示する。このような材料の分類の例としては、研磨剤、吸収剤、香料、顔料、色素／着色剤、エッセンシャルオイル、皮膚感覚惹起剤、収れん剤（例：丁子油、メントール、カンファー、ユーカリオイル、オイゲノール、乳酸メンチルエステル、ウィッチヘーゼル蒸留物）といった審美成分、抗ニキビ薬、固結防止剤、消泡剤、抗微生物剤、例：活性成分としてではなく、組成物の保存用の)抗酸化剤、バインダー、生物学的添加剤、緩衝剤、嵩高剤、キレート化剤、化学添加物、着色剤、化粧用収れん剤、化粧用殺生物剤、変性剤、医薬用収れん剤、外用鎮痛剤、組成物のフィルム形成能および持続性を補助するためのフィルム形成剤または材料（例：ポリマー）（例：エイコセンとビニルピロリドンとの共重合体）、乳白剤、ｐＨ調節剤、推進薬、還元剤、捕捉剤、皮膚調整剤（例：多目的および閉塞性の浸潤剤）、皮膚処置剤、増粘剤、およびビタミンとその誘導体が挙げられる。

本明細書の記載のいくつかの実施形態における組成物はｉｎ ｖｉｖｏで使用するためのものであるため、組成物は高純度であり且つ有害になり得る汚染物を含まない、例えば、少なくとも国際食品（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄ）（ＮＦ）グレードであり、通常は少なくとも解析グレードであり、好ましくは医薬グレードである。与えられた化合物はその使用前に合成されていなければならないが、この限りにおいて、このような合成またはその後の精製は、合成または精製の過程において使用され得る任意の汚染し得る毒性物質を実質的に含まない製品をもたらすことが好ましい。

本発明の組成物は、所望により、活性成分を含む１種以上の単位剤形を含むことが可能なＦＤＡ（米国食品医薬品局）承認キット等のパック又はディスペンサーデバイスとして提供することができる。パックは、例えば、ブリスターパック等の金属又はプラスチック箔を含むことができる。パック又はディスペンサーデバイスには投与用説明書を添付することができる。パック又はディスペンサーには、医薬品の製造、使用又は販売を規制する政府機関によって定められた形式の容器に関連する通知を添付することもでき、この通知は、組成物の形態やヒト又は動物への投与に関する機関による承認を反映している。このような通知は、例えば、処方薬に関して米国食品医薬品局によって承認された標識、又は承認された製品の添付文書に関するものとすることができる。本発明の任意の実施形態における組成物は、調製し、適切な容器に入れ、（例：本明細書に記載の任意の実施形態に基づく）皮膚の治療および／または防御用として標識することもできる。

従って、本発明のいくつかの実施形態において、本明細書に記載した医薬組成物は、本明細書に記載の状態を、治療を必要とする患者において治療するために、パッケージング材料中に梱包され、パッケージング材料の表面またはその内部に、その識別が印刷されたものである。

本明細書で使用する「約」は、±１０％を意味する。

用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」およびその活用形は、「限定されるものではないが、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｂｕｔ ｎｏｔ ｌｉｍｉｔｅｄ ｔｏ）」を意味する。

「からなる」という用語は、「含み、限定される」ことを意味する。

「から実質的になる」という用語は、組成物、方法または構造が追加の成分、工程および／または部分を含み得ることを意味する。但しこれは、追加の成分、工程および／または部分が、請求項に記載の組成物、方法または構造の基本的かつ新規な特性を実質的に変更しない場合に限られる。

本明細書において、単数形を表す「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他を示さない限り、複数をも対象とする。例えば、「化合物（a compound）」または「少なくとも１種の化合物」には、複数の化合物が含まれ、それらの混合物をも含み得る。

本願全体を通して、本発明のさまざまな実施形態は、範囲形式にて示され得る。範囲形式での記載は、単に利便性および簡潔さのためであり、本発明の範囲の柔軟性を欠く制限ではないことを理解されたい。したがって、範囲の記載は、可能な下位の範囲の全部、およびその範囲内の個々の数値を特異的に開示していると考えるべきである。例えば、１～６といった範囲の記載は、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６等の部分範囲のみならず、その範囲内の個々の数値、例えば１、２、３、４、５および６も具体的に開示するものとする。これは、範囲の大きさに関わらず適用される。

本明細書において数値範囲を示す場合、それは常に示す範囲内の任意の引用数（分数または整数）を含むことを意図する。第１の指示数と第２の指示数「との間の範囲」という表現と、第１の指示数「から」第２の指示数「までの範囲」という表現は、本明細書で代替可能に使用され、第１の指示数および第２の指示数と、それらの間の分数および整数の全てを含むことを意図する。

本明細書で使用する「方法」という用語は、所定の課題を達成するための様式、手段、技術および手順を意味し、化学、薬理学、生物学、生化学および医療の各分野の従事者に既知のもの、または既知の様式、手段、技術および手順から従事者が容易に開発できるものが含まれるが、これらに限定されない。

本明細書で使用する「治療する」という用語は、病態の進行の抑止、実質的な阻害、遅延または逆転、病態の臨床的または審美的な症状の実質的な寛解、あるいは病態の臨床的または審美的な症状の発現の実質的な予防を含む。

明確さのために別個の実施形態に関連して記載した本発明の所定の特徴はまた、１つの実施形態において、これら特徴を組み合わせて提供され得ることを理解されたい。逆に、簡潔さのために１つの実施形態に関連して記載した本発明の複数の特徴はまた、別々に、または任意の好適な部分的な組み合わせ、または適当な他の記載された実施形態に対しても提供され得る。さまざまな実施形態に関連して記載される所定の特徴は、その要素なしでは特定の実施形態が動作不能でない限り、その実施形態の必須要件であると捉えてはならない。

上述したように、本明細書に記載され、特許請求の範囲に請求される本発明のさまざまな実施形態および態様は、以下の実施例によって実験的に支持されるものである。

ここで、上記の記載と共に本発明のいくつかの実施形態を限定することなく説明する以下の実施例に参照する。

材料と方法
材料：
ＤＭＥＭ（１００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを添加したダルベッコの変法イーグル培地）はＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社（イスラエル国）より入手した。
ＤＰＰＨ（ジフェニルピクリルヒドラジル）はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社より入手した。
エタノールはＭｅｒｃｕｒｙ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌｔｄ．より入手した。
メタノールはＭｅｒｃｕｒｙ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌｔｄ．より入手した。
ＭＴＴ（臭化３－（４，５－ジメチルチアゾリ－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウム）はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社より入手した。

防御指数の計算：
Ｄｕｔｒａ ｅｔ ａｌ．［Ｂｒａｚ Ｊ Ｐｈａｒｍａ Ｓｃｉ ２００４， ４０：３８１－３８５］に記載の手順に従い、ＯｐｔＬａｂ（商標）Ｘソフトウエア（Ａｓｃａｎｉｓ社）を使用してマンスール式を用いてＳＰＦ（紫外線防御指数）値を計算するために、吸収スペクトルを用いた。

高速液体クロマトグラフィー：
ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）のクロマトグラムは、次のようにして得た。２度蒸留した水：メタノール比が９５：５の混合物で試料を濃度０．０１ｍｇ／ｍｌに希釈し、光ダイオードアレイ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ社のＨＰＬＣ装置のＲＰ－１８カラムに１０μｌをロードし、９６％のトリフルオロ酢酸（０．１％）水溶液から１００％アセトニトリルの勾配を流速１ｍｌ／分で使用した。

ヒト皮膚移植片上の試験：
インフォームドコンセントへの署名後に、腹部美容整形手術を受ける３０～６０歳の健康な女性から、許可を得て皮膚を採取した。Portugal-Cohen et al.［Exp Dermatol 2011, 20:749-755］に記載の手順に従って０．８×０．８ｃｍ^２の切片に皮膚を切り出すために機械的皮膚プレスを用いた。Portugal-Cohen et al.［Exp Dermatol 2011, 20:749-755］およびCohen et al.［Dead Sea and Arava Studies 2015, 7:66-74］に記載の手順に従い、真皮側が培地に浸漬するように、皮膚移植片を空気/液体界面に維持した。１００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ（ダルベッコの変法イーグル培地）を含む６穴培養プレートに、ヒト皮膚移植片を、真皮側が下で表皮が上になるように加えた。全ての試料を一晩の回復期後に使用した。

実施例１
ＵＶ防除能を有する植物のスクリーニング
種々の植物のＵＶＢ防除能をスクリーニングするために、ユダヤの砂漠に生息する伝統的に使用されているハーブについて大規模スクリーニングを実施した。各試験植物の葉、小枝、枝、果実および根を回収、乾燥、粉砕し、ソクスレーシステムを使用して個別にエタノール、水、クロロフォルムまたは酢酸プロピレングリコールメチルエーテル（ＰＭＡ）で抽出した。真空下で溶媒を蒸発させた後、０．１グラムの粗抽出液を超音波を用いて等量の溶媒に再懸濁し、積分球なしのＣａｒｙ（商標）６０デュアルビーム分光光度計（Ａｇｉｌｅｎｔ社）を用いたＵＶ吸収スペクトル解析のために、既定の濃度に希釈した。

予備結果（データは示さない）は、試験した植物種の大部分において、エタノールによる葉の抽出物が最も高いＵＶ吸光度値を発揮することを示した。

表１に、種々の植物の葉のエタノール抽出物の、（上述した方法で決定した）ＳＰＦ（紫外線防御指数）値をまとめた。

表１に示されるように、スンマーク（tanner's sumac）（Rhus coriaria）の葉のエタノール抽出物が、試験植物の中で最も高いＳＰＦ値（ＵＶＢ照射に対する防御）をｉｎ ｖｉｔｒｏで発揮した。

よって、スンマーク（tanner's sumac）の抽出物をさらなる試験に付した。ウルシの異なる部分の抽出物を種々の栽培地域のウルシから作製した。

図１に示したように、ウルシの葉および未熟果の抽出物が、ＵＶ光の遮蔽においてウルシの枝、小枝、完熟果または根の抽出物よりかなり効果的であった。

実施例２
ウルシの葉からのＵＶ防除物質の単離
上記実施例１に記載した種々のウルシの葉抽出物の内、最も効果的な抽出物（キルヤット・アルバ地方由来の試料）をいくつかの単離技術に付すことでさらに精製した。各工程の後には、本明細書において「ＳＨ－１０１」と称するＵＶ吸収成分を単離するために、得られた画分をＵＶ吸光度によって評価した。その純度は、本明細書において上述した手順に従い、ＨＰＬＣで決定した。

困難な実験の後、最大収率効率を達成するために、以下の一般抽出方法を設計した。

図２に示したように、抽出１００は、その第１の工程において、Rhus coriariaの葉の乾燥粉末を、例えば、粉砕によって得る。乾燥粉末は、任意で、当業界で知られる適切ないかなる技術でも得ることができる。Rhus coriariaの葉から水および揮発性化合物を除去した後には、乾燥粉末１０の重量は未乾燥の葉の重量の約３５±５重量％となり得る。

次の工程において、乾燥粉末１０をエタノール、任意で（例：ソックスレー抽出器を用いて）温かいエタノールと接触させ、その後、エタノールを蒸発させて、Rhus coriariaの葉のエタノール抽出物２０を得る。

乾燥粉末１０対エタノールの（重量対容積）比は、任意で、約１：２０（１グラムの乾燥粉末１０対２０ｍｌのエタノール）であった。この比では、３９．６４±２．３５％（乾燥粉末１０の重量に対するエタノール抽出物２０の重量）の収率が得られた。

図３に示すように、５０グラムの乾燥ウルシ葉粉末を種々の容量のエタノールで抽出した際には、約１０００ｍｌを超える量のエタノールの使用は、低ＳＰＦ値および高収率（抽出物の重量）に関連付けられ、一方、約１０００ｍｌ未満（および特に約４００ｍｌ未満）の使用は類似したＳＰＦ値および低収率と関連付けられた。

これらの結果は、１グラムの乾燥粉末１０に対して約２０ｍｌ超のエタノールの使用は、ＵＶ防除に寄与しない材料の有意な量の抽出をもたらし、一方、１グラムの乾燥粉末１０に対して約２０ｍｌ未満（および特に約８ｍｌ未満）のエタノールの使用は、ＵＶ吸収性材料の抽出の有意な低下をもたらした。

次の工程においては、エタノール抽出物２０を、蒸留水２２に懸濁する工程、ｎ－ヘキサン／水２４で分配する工程、および工程２４で得た水抽出物を酢酸エチル２６で分配する工程に付して、酢酸エチル抽出物３０を得た。ｎ－ヘキサン／水２４で分配する際には、黒緑色の固体をヘキサン相に抽出してもよい。

蒸留水２２への懸濁および分配２４は、任意で、約１グラムのエタノール抽出物２０対約２０ｍｌの水対約５ｍｌのヘキサンという比率（例：約５０グラムのエタノール抽出物２０、約１０００ｍｌの水、および約２５０ｍｌのヘキサン）を用いて実施することができる。分配２６は、任意で、１ｍｌの水対１．５ｍｌの酢酸エチルという比率（例：約１０００ｍｌの水と約１５００ｍｌの酢酸エチル）を用いて実施することができる。これら比率を用いることで、２６．４６±３．７８％（エタノール抽出物２０の重量に対する酢酸エチル抽出物３０の重量）という収率が得られた。

次に酢酸エチル抽出物３０を、任意で４０：６０（エタノール：水）の比のエタノールおよび水の混合物における結晶化３２に付し、続いて濾過および溶媒の蒸発３４を行い、プールした乾燥結晶化上清４０を得る。

結晶化３２は、任意で、抽出物３０と溶媒（エタノール／水）との比が、溶媒１ｍｌ当たり約０．１ｍｇの抽出物３０となるように行う。この比を用いることで、最大の収率である３４．８±４．２％（酢酸エチル抽出物３０の重量に対するプールした乾燥結晶化上清４０の重量）が得られた。

プールした乾燥結晶化上清４０は任意で逆相カラムクロマトグラフィー４２、任意で４％～２５％のアセトニトリル勾配の、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液中のアセトニトリルで溶出するＣ１８カラムを使用し、プールした純粋ＳＨ－４０１ ５０を得る。３０．１５±２．３４％（プールした乾燥結晶化上清４０の重量に対するＳＨ－４０１ ５０の重量）のクロマトグラフィー収率を得た。

上記一般方法を使用した例示的な抽出においては、総ＳＨ－４０１収率として０．４５２±０．０８２％を得た（未乾燥ウルシ葉の重量に対するＳＨ－４０１の重量）。

このシンプルであるが洗練された方法は、化学的に関連する市販の化合物の総費用と同等の費用で化合物の高収率を達成する。また、例えば、植物の環境農業的パラメーターの最適化（例：ＳＨ－１０１の高産生によって特徴づけられる種の使用）によって、さらなる収率の増加を達成し、材料の総費用を削減することもできる。

実施例３
ウルシの葉由来のＵＶ防除物質（ＳＨ－４０１）の特徴付け
上記実施例２に記載した方法などを用いてＳＨ－１０１をウルシの葉から単離した。精製ＳＨ－１０１をＨＰＬＣおよび他のスペクトル分析技術を用いて特徴づけた。

図４Ａおよび図４Ｂに示したように、ＨＰＬＣ解析において、高純度産物を含む画分（保持時間＝１０７．９分）が得られた（ピーク面積％で純度～９９．７９％）。

図４Ｃに示したように、得られた画分は適切なＵＶＢ流域（２９０－３２０ｎｍ）に強い吸収を示し、吸収ピークは２１７ｎｍおよび２７９．５ｎｍであった。

単離された化合物は白色の、大部分が無定形の粉末で、融点は２２０～２５０℃の範囲内であった。

ＳＨ－４０１はＦｅＣｌ_３の存在下では濃い青色を呈し、ＫＩＯ_３の存在下では赤みのある色を呈した。これらの色反応はガロタンニンに関する報告と類似していた［Haddock et al., J Chem Soc Perkin Trans 1 1982, 0:2535-2545］。

さらに赤外（ＫＢｒ）スペクトル（図示せず）は、３９５０ｃｍ^－１および１７１２ｃｍ^－１に吸光度を示し、これらはそれぞれガロイル部分のヒドロキシル基とカルボニル基と一致していた。

まとめると、上記色反応およびＵＶスペクトルと赤外スペクトルは、ＳＨ－４０１がガロタンニンであることを示した。

精製画分を質量分析でさらに解析した。これにはＱ－ＴＯＦ ６５４５（高解像度）ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ／ＡＰＣＩ／ＡＳＡＰ）質量分析計（Ａｇｉｌｅｎｔ社）を使用して、液体クロマトグラフィ－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）および高解像度質量分析の両方を用いた。

下記表２に示したように、ＬＣ－ＭＳで得られた質量スペクトルには、それぞれ（Ｍ－Ｈ）^－イオンと（Ｍ－２Ｈ）^－２イオンに対応する約９３９Ｄａと約４６９Ｄａのピークが含まれ、ＳＨ－４０１の化学式がＣ_４１Ｈ_３２Ｏ_２６であることを示唆した。

重要なことに、ＳＨ－１０１の分子量は一般的な市販のＵＶ吸収性材料の３倍以上であり、この事実は潜在的な皮膚への吸収および潜在的な全身性有害作用を減少させ得る。

さらに、Ｑ－ＴＯＦ質量分析で得た質量スペクトルは、ｍ／ｚ９３９．０９のピーク（上記ＬＣ－ＭＳ結果と一致）を含み、没食子酸アニオン（１６９Ｄａ）に対応するｍ／ｚ１６８．４６のイオンピーク、没食子酸のニュートラルロスによってもたらされると予測される質量（１７０Ｄａのロス）に対応するｍ／ｚ７６９．０８のイオンピーク、およびガロイル部分（Ｃ_７Ｈ_４Ｏ_４）について予想される質量に対応するｍ／ｚ３３１．０７からｍ／ｚ９３９．０９の１５２の一定差で隔てられた一連のイオンピークも含んでいた。

上記結果は、Berardini et al［Rapid Commun Mass Spectrom 2004, 18:2208-2216］における、（マンゴの果皮、果肉および仁由来の）ガロタンニンに関連する、没食子酸のニュートラルロス（１７０．０２Ｄａのロス）およびガロイルの分裂（１５２．０１Ｄａのロス）を含む断片化経路に関する記載と一致している。

従って、上記結果は、ＳＨ－４０１が複数のガロイル部分を含み、分子量が約９４０Ｄａであることを示し、５つのガロイル基と分子量１８０Ｄａの追加部分（例：六炭糖、ＳＨ－１０１はＣ_４１Ｈ_３２Ｏ_２６）とを含むことを示唆している。

ＳＨ－４０１ガロタンニンの構造を^１Ｈ－ＮＭＲおよび^１３Ｃ－ＮＭＲ １Ｄスペクトルデータ（７００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ中で入手）並びにＤＥＰＴ、ＣＯＳＹ、ＨＭＢＣおよびＨＭＱＣ ２Ｄ－ＮＭＲによって決定した。

下記に詳述するように、ＮＭＲデータ解析に基づき、ＳＨ－４０１は図５に示した１，２，３，４，６－ペンタガロイル－β－Ｄ－グルコース（β－Ｄ－グルコピラノース、ペンタキス（３，４，５－トリヒドロキシベンゾエート）の構造を有すると判明した。^１Ｈおよび^１３Ｃのケミカルシフトの帰属を下記表３にまとめた。上述した構造は、上述したＵＶ吸収、赤外および質量スペクトル分析データによって支持されている。

^１Ｈ－ＮＭＲスペクトルは、６．５および７．１５ｐｐｍのスペクトル領域内に５つの芳香族シングレットを含み、これは分子中のガロイル基の５つの磁気的に同等ではないプロトンに帰属される５つの芳香族部分の存在と一致した。

４．３５および６．２５ｐｐｍの間に出現する共鳴で表される第２のセットのプロトンは、グルコピラノース部分の７つの炭素結合プロトンに帰属された。糖領域においては、スペクトルは５つの明確な低磁場シフトプロトン共鳴を示した。大きなカップリング定数を有する６．２３ｐｐｍのダブレットである１つの^１Ｈシグナルはα，β－構造のグルコースアノマープロトンに帰属させることができる。５．９０ｐｐｍの^１Ｈトリプレットおよび５．６１ｐｐｍ（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ）、４．４０ｐｐｍ（ｄｄ，Ｊ＝１２，４４Ｈｚ）と５．５８ｐｐｍの３つの^１Ｈシグナルは、Ｈ－２、Ｈ－4とＨ－６グルコースプロトンに帰属された。これらプロトンのシグナルは、β－Ｄ－グルコピラノースのそれらと比べて有意に低磁場であり、ガロイル単位の位置がこれの中心であることを示唆した。

グルコースメチレン基の２Ｈシグナルは、ＨＭＢＣ実験で示されるように、４．５１および４．３７に出現した。ＤＥＰＴ ＮＭＲデータは、ＳＨ－４０１が厳密に１つのメチレン（ＣＨ_２）基を有することを示した。

^１Ｈ－^１Ｈ等核ＣＯＳＹ実験は、表３に示したように、グルコース部分のＨ－１～Ｈ－６ａ／ｂのカップリングネットワークの同定を可能にした。さらに４．３７ｐｐｍのプロトンと４．５１ｐｐｍのプロトンとの間に観察された相関は、これらプロトンがグルコースメチレン（ＣＨ_２）基に帰属されることを追認した。

^１３Ｃ－ＮＭＲスペクトルは以下のシグナル（δ_Ｃ）を示した。９３．８９、７２．２６、６９．８８、７４．１８、７４．５０（５アノマーＣ）、６３．１９（グルコースメチレンＣ）、１６６．２７（没食子酸エステル１、Ｃ＝Ｏ）、１１９．８１、１１０．６９、１４６．６１、１４６．６１（没食子酸エステル１、Ｃ）、１６７．０８（没食子酸エステル２、Ｃ＝Ｏ）、１２０．３２、１１０．４８、１４６．４３、１４０．３６、（没食子酸エステル２、Ｃ）、１６６．９９（没食子酸エステル３、Ｃ＝Ｏ）、１２０．２８、１１０．５３、１４６．５０、１４０．４１（没食子酸エステル３、Ｃ）、１６７．３６（没食子酸エステル４、Ｃ＝Ｏ）、１２０．４４、１１０．４５、１４６．３４、１４０．１８、（没食子酸エステル４、Ｃ）、１６７．９９、（没食子酸エステル６、Ｃ＝Ｏ）、１２１．１２、１１０．４０、１４６．５３、１４０．０６、（没食子酸エステル６、Ｃ）。

一結合^１Ｈｘ^１３Ｃ相関を検出するためのＨＭＱＣ実験は、約７．１１、７．０５、６．９８、６．９５および６．９０ｐｐｍのケミカルシフトの水素に結合した５つの炭素原子（ガロイル部分のオルト位に帰属）を示した。

広範囲^１Ｈｘ^１３Ｃ相関を検出するためのＨＭＢＣ実験は、約７．０５ｐｐｍのケミカルシフトを有するプロトンが約１４０、１２２および１１０ｐｐｍの位置の炭素原子と相関したことを示した。

総合すると、これら結果は、Ｃ－１、Ｃ－２、Ｃ－３、Ｃ－４およびＣ－６位のヒドロキル期はガロイル化されていることを示す［De Bruyn et al., Bull Soc Chim Belges 1977, 86:259-265］。

上記分子量は、公知の市販のＵＶフィルター剤の３倍を超える。この因子は、皮膚への潜在的な浸透および関連した有害作用を減少さる傾向にある。

図６に示したように、精製方法によって、得られたＳＨ－４０１のＳＰＦ値は、０．０１ｍｇ／ｍｌで粗抽出物に対して１０倍超に増加した、即ち、粗Rhus coriaria混合物は０．６７±０．０９、精製ＳＨ－４０１画分は９．０９±０．７２であった。

この結果は、日焼け止め剤として単離した薬物が粗抽出物混合物よりも優れており、よって、ウルシのＵＶ吸収成分としてのＳＨ－４０１の重要性を確証するものである。

図６にさらに示されるように、ＳＨ－４０１（０．０１ｍｇ／ｍｌ）のＳＰＦ値は試験した市販の合成ＵＶフィルター類と少なくとも同等であった。

光安定性を評価するために、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）のスライド上に純粋ＳＨ－４０１の均一なフィルムを形成するために、２ｍｌのＳＨ－１０１溶液をスライド上に付して溶媒を蒸発させた。次に試料を最長２５時間の種々の期間にわたりＵＶ照射に暴露した。ガラス板をエタノール／水混合物（２：９８％ｖ／ｖ）に浸漬し、フィルムを超音波で溶解させた。ＵＶ試料を次にＵＶ－可視光吸光度スペクトル分析で定量化し、上述した方法に従ってＳＰＦ値を決定し、時間の関数としてプロットした。

図７に示すように、ＳＨ－４０１はＵＶ照射に対してかなりの安定性を示し、１２時間のＵＶ照射に対して実質的なＳＰＦ値の変化を示さなかった。

総合すると、上記結果は、ＳＨ－４０１が効果的な日焼け止め剤として機能するのに十分なＵＶ吸収および光安定性を有することを示す。

実施例４
ウルシの葉由来のＳＨ－４０１のヒト皮膚細胞に対する効果
活性化合物ＳＨ－４０１（実施例２の記載と同様に単離）の安全性と効能を探索するために、上記材料と方法の項に記載した手順に従って、ヒト皮膚移植片に対していくつかの実験を実施した。

図８Ａに示されるように、ＳＨ－４０１の局所投与は、試験した（最大溶解度に至る）全濃度範囲にわたり、ＭＴＴアッセイで決定した皮膚生存率を犠牲にすることはなかった。この結果は、ヒトの皮膚はＳＨ－４０１を広く許容することを示す。

図８Ｂおよび図８Ｃが示すように、ＳＨ－４０１は、カスパーゼ－３活性化アッセイとＥＬＩＳＡアッセイでそれぞれ決定したように、表皮におけるＵＶＢ誘導性アポトーシス（図８Ｂ）およびＴＮＦαの過剰分泌（図８Ｃ）を弱めた。本明細書においてさらに示されるように、ＳＨ－４０１の効果は、対照として使用した市販の処方であるＵｌｔｒａｓｏｌ（商標）ＳＰＦ３０処方（Ｄｒ．Ｆｉｓｈｅｒ）と同等であった。

ＵＶＢ誘導性傷害に共通する特徴の１つがＲＯＳ（活性酸素種）の発生であり、これはＤＮＡ損傷を増加させ、脂質過酸化の発生を増強し、細胞内のタンパク質および膜を妨害する［Schuch et al., Free Rad Biol Med 2017, 107:110-124］。よって、ＵＶＢ照射の有害な影響に対抗する因子と仮定された、皮膚細胞におけるＵＶＢ誘導性ＲＯＳ発生に対するＳＨ－４０１の効果について試験した。ＵＶＢ照射時のＲＯＳ発生をＤＣＦＤＡ（ジクロロフルオレセイン二酢酸）アッセイおよびＲＯＳ発生と関連する脂質過酸化の（ＥＬＩＳＡによる）測定の両方で皮膚移植片において評価した。

図９が示すように、ＤＣＦＤＡアッセイで決定したところ、ＳＨ－４０１は皮膚細胞におけるＵＶＢ誘導性ＲＯＳ発生を用量依存的に弱めた。

さらに図１０が示すように、ＳＨ－４０１は、皮膚細胞におけるＵＶＢ誘導性の脂質過酸化を用量依存的に弱めた。

上記結果は、ＳＨ－４０１はＵＶＢ照射による皮膚細胞におけるＲＯＳ形成を弱めることを示す。

ＤＰＰＨ（ジフェニルピクリルヒドラジル）法を用いて抗酸化能をさらに評価した。ＳＨ－４０１の存在下におけるＤＰＰＨの色変化を検量線に基づきＴｒｏｌｏｘ（６－ヒドロキシ－２，５，７，８－テトラメチルクロマン－２－カルボン酸）当量を抗酸化能に換算した。

図１１に示すように、ＳＨ－４０１は強力な抗酸化剤であり、１重量パーセントの溶液が１００グラム当たり２，３１０マイクロモルのＴｒｏｌｏｘ当量（ＴＥ）単位を示した。

これらの結果は、ＵＶ照射に対するＳＨ－４０１による防御は、少なくとも部分的に、化合物の抗酸化性質によって仲介されることを示す。

さらに、ＯｘｉＳｅｌｅｃｔ（商標）コメットアッセイキットを製造者の説明書に従って使用し、同様に処理した試料のＤＮＡ断片化についてＣＯＭＥＴ（単細胞ゲル電気泳動）アッセイにより決定した。

図１２に示したように、ＣＯＭＥＴアッセイによって決定したところ、ＳＨ－４０１はＵＶＢ誘導性ＤＮＡ損傷を弱めた。

図１３に示したように、ＳＨ－４０１は、ＵＶＢによって生じる初期型のＤＮＡ変異原性であるＵＶＢ誘導性のシクロブタンピリミジン二量体（ＣＰＤ）の形成を減少させた。

ＳＨ－４０１の細胞に対する効果を処理皮膚移植片の組織学的試験によってさらに求めた。

図１４Ａ～１４Ｄに示したように、ＵＶＢ照射は核濃縮「日焼け細胞」の形成および表皮層の減少を誘導し（図１４Ｂ）、ＳＨ－４０１は照射のこういった有害な効果を逆転させた。

これらの結果は、ＳＨ－４０１がヒトの皮膚をＵＶ照射から防御するうえで効果的であることを示す。

実施例５
皮膚老化および創傷治癒に対するＳＨ－４０１の効果
ＳＨ－４０１の皮膚老化に対する効果を評価するために、皮膚老化および皴形成において影響を受ける、細胞外マトリックスバランスの次の２つの重要な因子を試験した：環境損傷に続くコラーゲン合成、およびコラーゲン分解のカギとなる酵素であるマトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ１）の活性。

図１５Ａおよび図１５Ｂに示したように、ＳＨ－４０１は、環境損傷（ＵＶＢ照射）に続いて、用量依存的にコラーゲン合成を促進し、ＭＭＰ１活性を減少させた。

これら結果は、ＳＨ－４０１が皮膚においてアンチエイジング性能を発揮することを示す。

皮膚の創傷治癒に対するＳＨ－４０１の効果をコンフルエントなＨａＣａＴ細胞の創傷閉鎖ｉｎ ｖｉｔｒｏモデルを用いて求めた。

図１６に示したように、ＳＨ－４０１はｉｎ ｖｉｔｒｏのモデルにおいて創傷閉鎖を促進した。

これら結果は、ＳＨ－４０１が創傷治癒を促進することを示す。

本発明をその特定の実施形態との関連で説明したが、多数の代替、改変および変種が当業者には明らかであろう。したがって、そのような代替、改変および変種の全ては、添付の特許請求の範囲の趣旨および広い範囲内に含まれることを意図するものである。

本明細書で言及した全ての刊行物、特許および特許出願は、個々の刊行物、特許および特許出願のそれぞれについて具体的且つ個別の参照により本明細書に組み込む場合と同程度に、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。加えて、本願におけるいかなる参考文献の引用または特定は、このような参考文献が本発明の先行技術として使用できることの容認として解釈されるべきではない。また、各節の表題が使用される範囲において、必ずしも限定として解釈されるべきではない。

さらに本願の基礎出願に係る書類も、本参照をもって本明細書に完全に組み込まれたものとする。

Claims (46)

1. ＵＶ吸収性材料と、皮膚医学的に許容される担体とを含み、前記ＵＶ吸収性材料がウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果の抽出物であり、前記ＵＶ吸収性材料の組成物中の濃度が少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである、日焼け止め組成物。
2. 前記組成物中の前記ＵＶ吸収性材料の濃度が、波長３００ｎｍで路長１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な量である、請求項１に記載の組成物。
3. 前記ウルシがRhus coriariaを含む、請求項１に記載の組成物。
4. 前記ＵＶ吸収性材料が、複数のガロイル置換基の結合したグルコース部分を有する化合物を少なくとも１種含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 少なくとも１種の前記化合物が１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含む、請求項４に記載の組成物。
6. 前記ＵＶ吸収性材料が、前記ウルシの葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、前記水混和性有機溶媒を除去して、ＵＶ吸収性材料を得ることを含む方法によって得られ得るものである、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
7. 前記水混和性有機溶媒がＣ_１－４アルコールを含む、請求項６に記載の組成物。
8. 前記水混和性有機溶媒がエタノール、アセトンおよび／またはグリセリンを含む、請求項７に記載の組成物。
9. 前記接触が、ソックスレー抽出器を用いて実施する抽出を含む、請求項６～８のいずれか一項に記載の組成物。
10. 前記接触が、前記ウルシの葉および／または未熟果の乾燥重量１ｇ当たり５～４０ｍｌの前記水混和性有機溶媒の比率を用いて実施される、請求項６～９のいずれか一項に記載の組成物。
11. 前記方法が、極性溶媒と非極性溶媒との間の前記ＵＶ吸収性材料の分配と、前記極性溶媒に分配される画分の回収とをさらに含む、請求項６～１０のいずれか一項に記載の組成物。
12. 前記非極性溶媒がアルカンを含む、請求項１１に記載の組成物。
13. 前記アルカンがヘキサンを含む、請求項１２に記載の組成物。
14. 前記極性溶媒が水を含む、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の組成物。
15. 前記方法が、前記極性溶媒に分配された画分の水と水不混和性極性有機溶媒との間の分配、および前記水不混和性極性有機溶媒に分配される画分の回収をさらに含む、請求項１１～１４のいずれか一項に記載の組成物。
16. 前記水不混和性極性有機溶媒がエステルを含む、請求項１５に記載の組成物。
17. 前記エステルが酢酸エチルを含む、請求項１６に記載の組成物。
    
18. 前記方法が、前記水不混和性極性有機溶媒に分配される画分の水を含む溶媒との接触による、前記ＵＶ吸収性材料の結晶化をさらに含む、請求項１５～１７のいずれか一項に記載の組成物。
19. 前記方法が、前記ＵＶ吸収性材料のカラムクロマトグラフィーによる精製をさらに含む、請求項６～１８のいずれか一項に記載の組成物。
20. ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から単離された１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースと、皮膚医学的に許容される担体とを含み、前記１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの組成物中の濃度が少なくとも０．００５ｍｇ／ｍｌである、日焼け止め組成物。
21. 前記組成物中のＵＶ吸収性材料の濃度が、波長３００ｎｍで路長１ｍｍの照射の少なくとも９０％を吸収するのに十分な量である、請求項２０に記載の組成物。
22. ウルシ（Rhus spp.）の葉および／または未熟果から抽出されたＵＶ吸収性材料と、皮膚医学的に許容される担体とを含む、医薬用または化粧用の組成物。
23. 前記ウルシがRhus coriariaを含む、請求項２２に記載の組成物。
24. 複数のガロイル置換基の結合したグルコース部分を含む化合物を少なくとも１種含む、請求項２２または２３に記載の組成物。
25. 少なくとも１種の前記化合物が１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含む、請求項２４に記載の組成物。
26. 皮膚老化および創傷からなる群より選ばれる状態の治療用である、請求項２２～２５のいずれか一項に記載の組成物。
27. 前記化粧用の組成物が、皮膚の若返り用組成物および／またはピーリング用組成物である、請求項２２～２５のいずれか一項に記載の組成物。
28. ＵＶ吸収性材料を得るための方法であって、ウルシ（Rhuss spp.）の葉および／または未熟果と水混和性有機溶媒とを接触させ、前記水混和性有機溶媒を除去して、ＵＶ吸収性材料を得ることを含む方法。
29. 前記水混和性有機溶媒がＣ_１－４アルコールを含む、請求項２８に記載の方法。
30. 前記水混和性有機溶媒がエタノール、アセトンおよび／またはグリセリンを含む、請求項２９に記載の方法。
31. 前記接触が、ソックスレー抽出器を用いて実施する抽出を含む、請求項２８～３０のいずれか一項に記載の方法。
32. 前記接触が、前記ウルシの葉および／または未熟果の乾燥重量１ｇ当たり５～４０ｍｌの前記水混和性有機溶媒の比率を用いて実施される、請求項２８～３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 極性溶媒と非極性溶媒との間の前記ＵＶ吸収性材料の分配と、前記極性溶媒に分配された画分の回収とをさらに含む、請求項２８～３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 前記非極性溶媒がアルカンを含む、請求項３３に記載の方法。
35. 前記アルカンがヘキサンを含む、請求項３４に記載の方法。
36. 前記極性溶媒が水を含む、請求項３３～３５のいずれか一項に記載の方法。
37. 前記極性溶媒に分配される画分の水と水不混和性極性有機溶媒との間の分配、および前記水不混和性極性有機溶媒に分配される画分の回収をさらに含む、請求項３３～３６のいずれか一項に記載の方法。
38. 前記水不混和性極性有機溶媒がエステルを含む、請求項３７に記載の方法。
39. 前記エステルが酢酸エチルを含む、請求項３８に記載の方法。
40. 前記水不混和性極性有機溶媒に分配される画分の水を含む溶媒との接触による、前記ＵＶ吸収性材料の結晶化をさらに含む、請求項３７～３９のいずれか一項に記載の方法。
41. 前記ＵＶ吸収性材料のカラムクロマトグラフィーによる精製をさらに含む、請求項２８～４０のいずれか一項に記載の方法。
42. 前記ウルシがRhus coriariaを含む、請求項２８～４１のいずれか一項に記載の方法。
43. 前記ＵＶ吸収性材料が、複数のガロイル置換基の結合したグルコース部分を有する化合物を少なくとも１種含む、請求項２８～４２のいずれか一項に記載の方法。
44. 少なくとも１種の前記化合物が１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースを含む、請求項４３に記載の方法。
45. 前記ＵＶ吸収性材料中の前記１，２，３，４，６－ペンタガロイルグルコースの純度が少なくとも９５重量％である、請求項４４に記載の方法。
46. 請求項２８～４５のいずれか一項に記載の方法で得られたＵＶ吸収性材料。
    

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