JP2022516496A - キメラ受容体ポリペプチド及びその使用 - Google Patents
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Abstract
ａ）細胞外標的結合ドメイン；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及び／又はｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチドが提供される。そのようなキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸及びそのようなキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞並びにその使用も提供される。
Description
関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１月１４日に出願された国際特許出願ＰＣＴ／中国特許出願公開２０１９／０７１６０９号明細書の優先権の利益を主張し、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１９年１月１４日に出願された国際特許出願ＰＣＴ／中国特許出願公開２０１９／０７１６０９号明細書の優先権の利益を主張し、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：コンピューターで読み取り可能な形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７６１４２２００１５４１ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２０年１月１０日、サイズ：１５２ＫＢ）。
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本発明は、細胞外標的結合ドメイン、細胞外Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内シグナル伝達ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチドに関する。
全てのＴ細胞の発達及び機能は、その抗原受容体に依存する。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、リガンド結合モジュール及びシグナル伝送モジュールの２つの機能的に異なるモジュールで構成される多タンパク質複合体である。リガンド結合モジュールは、２つの可変ポリペプチド鎖、ＴＣＲα及びＴＣＲβで構成され、これらは、共有結合したヘテロ二量体を形成し、ＴＣＲのリガンド特異性の原因となる。ＴＣＲ複合体のシグナル伝送モジュールは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ及びζを含むインバリアントなポリペプチド鎖で構成される。それらの中で、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δは、非共有結合したＣＤ３εγ及びＣＤ３εδヘテロ二量体を形成する一方、ζは、共有結合したζζホモ二量体を形成する。ＴＣＲ複合体の表面発現には、完全に組み立てられた複合体サブユニットのセットが必要である。組み立ては、小胞体においてＣＤ３εδ及びＣＤ３εγヘテロ二量体の形成から始まる。次に、これらは、それぞれＴＣＲα及びＴＣＲβと結合して中間複合体を生成する。ζζホモ二量体は、連結する最後のサブユニットであり、その取り込み時にＴＣＲ複合体全体が原形質膜に輸送される（Ｋｌａｕｓｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）；Ｅｘｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，（１９９１）；Ｄａｖｅ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）；Ｍａｒｉｅ－Ｃａｒｄｉｎｅ ａｎｄ Ｓｃｈｒａｖｅｎ，（１９９９）；Ｋａｎｅ ｅｔ ａｌ．，（２０００）；Ｍａｔｔｈｅｗ ｅｔ ａｌ．，（２００４）。
ＴＣＲαβへのｐＭＨＣの結合は、ＣＤ３シグナル伝達ユニットを介して細胞に伝送され、ＴＣＲ－ＣＤ３のクラスター化及びコンフォメーションの変化を伴う。多くの実験により、Ｔ細胞の活性化には、ＣＤ３鎖の細胞質尾部（ＣＤ３ζζ、ＣＤ３εγ及びＣＤ３εδ）内に位置する３つの異なる細胞内シグナル伝達モチーフによって調節されるＴＣＲ媒介シグナルのカスケードが関与することが示されている（Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１８５），（２０１０）。キメラ分子を使用した研究は、ＴＣＲ複合体の全てのシグナル伝達鎖の細胞質尾部がＴＣＲのαβ認識モダリティをバイパスして、細胞傷害性及び／又はサイトカイン産生につながるシグナルを独立して伝達できることを示している。しかし、ＣＤ３ζ鎖のみを介したシグナルは、休止Ｔリンパ球をプライミングするには不十分であり（Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９５）、マウスの変異ＣＤ３εシグナル伝達ドメインは、不完全なＴ細胞機能を示した（Ｍａｔｔｈｅｗ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９３），２０１４）ことが以前に報告されている。したがって、ＣＤ３εγ、ＣＤ３εδ及びζζ鎖は、相乗効果など、Ｔ細胞機能に寄与する際に互いに補完し合う（Ｂｏｒｒｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１６３），（１９９９）。
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、結合ドメイン、スペーサードメイン、膜貫通ドメイン及び１つ又は２つの共刺激分子と連結したＣＤ３ζを含む細胞内シグナル伝達ドメインを含むモジュラー融合タンパク質である。ＣＡＲ構造は、「第１世代のＣＡＲ」と呼ばれるＣＤ３ζシグナル伝達ドメインのみを含む初期の構成から大幅に進化した。それ以来、Ｔ細胞の持続性及び増殖を増強するために、共刺激性の末端ドメインが追加され、第２世代（例えば、ＣＤ３ζ＋４１ＢＢ又はＣＤ２８シグナル伝達ドメイン）及び第３世代（例えば、ＣＤ３ζ＋４１ＢＢ及びＣＤ２８シグナル伝達ドメイン）ＣＡＲを生じた。
ＣＡＲ Ｔ細胞の養子移入は、血液媒介腫瘍の処置において目覚ましい成功を収めている。著しくは、白血病におけるＣＤ１９ ＣＡＲの使用（Ｇｉｌｌ，Ｓ，ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖ，（２０１５）並びにリンパ腫及び骨髄腫の患者における適応症が探求されている。固形腫瘍に焦点を当てた臨床試験が増えている。残念ながら、臨床結果は、あまり有望なものではない。現在までに報告された２つの最もポジティブな試験では、神経芽細胞腫を標的とするためにＧＤ２ ＣＡＲを使用し（１１人中３人の患者が完全寛解）（Ｌｏｕｉｓ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ（１１８），（２０１１）、肉腫についてＨＥＲ２ ＣＡＲを使用した（１７人中４人の患者が病状の安定を示す）（Ａｈｍｅｄ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ（３３），（２０１５）。
患者の血清における不十分な輸送、限られた持続性及びＴ細胞阻害活性は、観察された有効性の欠如に寄与していることが示唆されている（Ｋｅｒｓｈａｗ，ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ（１２），（２００６）。いくつかの装甲ＣＡＲ－Ｔ設計（免疫チェックポイント阻害剤、ＩＬ－１２などの構成的分泌）は、Ｔ細胞活性の向上又は腫瘍への細胞輸送の向上により抗腫瘍効果を高めることが期待されていた（Ｏｌａｄａｐｏ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｒｅｐｏｒｔｓ，（２０１７）。一方、より優れた細胞死滅効果、インビボでの持続性及び腫瘍微小環境に対するより優れた耐性を備えたＣＡＲ Ｔ細胞の包括的な機能を改善するための新しい設計は、依然としてコア要件である。
Ｔ細胞媒介免疫は、悪性細胞を排除するための抗原（Ａｇ）特異性Ｔリンパ球を発達させる適応プロセスである。近年、免疫学及び腫瘍生物学の根本的な進歩により、細胞ベースの免疫療法の分野において大きい進歩がもたらされた。例えば、標的癌免疫療法について、Ｔ細胞を関与させるための１つの有望なアプローチが近年開発された。この新しいアプローチは、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼ばれる。ＣＡＲを備えたＴ細胞は、Ｔ細胞上の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タイプのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と一致しないが、標的細胞表面抗原を発現する細胞を含む多様な細胞を攻撃するようにリダイレクトできる。抗体特異性を有するＴＣＲ分子を操作するためのいくつかの試みもなされてきた。例えば、国際公開第２０１５／１１７２２９号パンフレット及び国際公開第２０１６／１８７３４９号パンフレットを参照されたい。
現在のＣＡＲ－Ｔ及びＴＣＲ－Ｔアプローチの最も顕著な有害作用の１つは、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）又はサイトカインストームである。現在のＣＡＲ－Ｔ及びＴＣＲ－Ｔの腫瘍抗原の非存在下での基礎シグナル伝達（持続性シグナル伝達）は、実質的なものであり得、Ｔ細胞の分化及び枯渇を増加させ、それらの効力を制限し得る。持続性シグナル伝達により、ＣＡＲ－Ｔ及びＴＣＲ－Ｔ細胞は、刺激がない場合でもサイトカイン産生を示す。
本明細書において言及される全ての公報、特許、出願特許及び公開出願特許の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書において言及される全ての公報、特許、出願特許及び公開出願特許の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
一態様における本発明は、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）膜貫通ドメイン；及びｄ）任意選択により、細胞内ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチド（本明細書において「ＳＴＳポリペプチド」とも称される）を提供し、ここで、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通及び／又は細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）任意選択により、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＣＤ３ε又はＴＣＲγ／δなど、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζからなる群から選択されるＴＣＲサブユニット（例えば、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を特異的に認識するＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ；例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）又は単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ；例えば、抗ＣＤ３ ｓｄＡｂ）である。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインなどの２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）を特異的に認識する標的抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）又は設計アンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメインなどの２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ同じ標的抗原（例えば、同じ抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）上の同じエピトープを特異的に認識する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ同じ標的抗原上の異なるエピトープを特異的に認識する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ異なる標的抗原を特異的に認識する。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＡＦＰ、ＣＤ４、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＥＡ、ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｖＩＩＩなど）、ＧＤ２、ＧＰＣ－２、ＧＰＣ－３、ＨＥＲ２、ＬＩＬＲＢ４、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＧＦ１Ｒ、メソテリン、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＷＴ１、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ１、メソテリン、ＴＧＦａＲＩＩ、ＴＧＦｂＲＩＩ、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ４、ＨＰＶ関連抗原、ＥＢＶ関連抗原（ＬＭＰ１及びＬＭＰ２など）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、標的抗原は、ＢＣＭＡである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂである。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニット、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、全て同じである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニットは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットと異なる。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメイン；又はｂ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３εシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３εを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３γシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３γを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３δシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３δを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－ＣＤ３ε膜貫通ドメイン－ＣＤ３ε細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－－ＣＤ３γ膜貫通ドメイン－ＣＤ３γ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－ＣＤ３δ膜貫通ドメイン－ＣＤ３δ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第２のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第３のリンカー－ＣＤ３εシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３εを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。
上記の実施形態のいずれかによるいくつかの実施形態において、第１、第２及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかの配列を含む。
別の態様において、上記のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする単離された核酸が提供される。本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸のいずれかを含む核酸ベクターも提供される。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、１つ以上の連結配列を介して接続された、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸のいずれか２つ以上を含む。いくつかの実施形態において、連結配列は、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａをコードする核酸並びに内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）の配列からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、核酸ベクターは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む。
別の態様において、上記の１つ以上のキメラ受容体ポリペプチド、上記の１つ以上の核酸又は上記の１つ以上の核酸ベクターを含む単離された免疫細胞が提供される。いくつかの実施形態において、単離された免疫細胞は、上記の２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、上記の核酸又は核酸ベクターのいずれかを含む単離された免疫細胞が提供される。いくつかの実施形態において、単離された免疫細胞は、Ｔαβ細胞、Ｔγδ細胞、エフェクターＴ細胞、メモリーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、単離された免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば、エフェクターＴ細胞）である。いくつかの実施形態において、単離された免疫細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及び／又は操作されたＴＣＲをさらに含む。
別の態様において、上記の免疫細胞のいずれか及び任意選択による薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態において、個体（例えば、ヒト）の疾患を処置する方法であって、有効量の上記の免疫細胞のいずれか又は上記の医薬組成物のいずれかを個体に投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、静脈内、腫瘍内又は皮下に投与される。いくつかの実施形態において、疾患は、癌である。いくつかの実施形態において、癌は、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される。
本明細書に記載の構築物のいずれかを作製する方法、製造品及び本明細書に記載の方法に適したキットも提供される。
本発明は、ａ）細胞外標的結合ドメイン；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン；及びｄ）細胞内ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチド（本明細書において「ＳＴＳポリペプチド」とも称される）を提供し、ここで、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通及び／又は細胞内ドメインを含む。ＳＴＳポリペプチドをコードする単離された核酸及びベクター、ＳＴＳポリペプチドを発現する操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）、それらの医薬組成物及び疾患（癌など）を処置するためのそのようなＳＴＳポリペプチド又はその医薬組成物の使用も提供される。
ＳＴＳポリペプチドは、免疫細胞、例えばエフェクターＴ細胞などのＴ細胞で発現される場合、有意な細胞死滅効果を示した。ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδの細胞内ドメインは、従来、シグナル伝達ドメインを欠いているか、又は共刺激なしでＴ細胞を刺激するには不十分であると考えられていたが、驚くべきことに、ＳＴＳポリペプチドを発現する操作されたＴ細胞（「ＳＴＳ－Ｔ細胞」と称される）の細胞死滅効果は、ＳＴＳポリペプチドにおいて細胞内共刺激ドメインの存在を必要としなかった。さらに、細胞外シグナルを細胞内ドメインに伝送するために必要であると考えられているＴＣＲサブユニットのいかなる細胞外ドメインもＳＴＳポリペプチドが含まない場合でも、細胞死滅効果が観察された。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）武装Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ）などの以前の構築物と比較して、ＳＴＳ－Ｔ細胞は、抗原刺激時のサイトカイン放出が低く、エクスビボ増殖特性が改善され、投与時にインビボでより長く持続した。さらに、操作されたＴ細胞受容体（操作されたＴＣＲ）及びＴ細胞抗原カプラー（ＴＡＣ）プラットフォーム（例えば、操作されたＴＣＲ－Ｔ細胞、ＴＡＣ－Ｔ細胞）と異なり、ＳＴＳ－Ｔ細胞上の内因性ＴＣＲ及びＣＤ３分子は、ＴＣＲサブユニット（例えば、抗ＣＤ３εｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲｓｃＦｖ）の結合ドメインを発現する細胞で予想されるように細胞表面上でダウンレギュレートされなかった。
理論に拘束されるものではないが、ＳＴＳポリペプチドの細胞外標的結合ドメインは、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合し、ＳＴＳポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を標的細胞（例えば、腫瘍細胞）の近くに導くことができる。細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の表面にあるＴＣＲ複合体のＴＣＲサブユニット（例えば、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）に結合することができ、内因性ＴＣＲ複合体を介してシグナルを伝送する。追加的又は代替的に、ＳＴＳポリペプチドは、１つ以上の内因性ＴＣＲサブユニットと共にＴＣＲ複合体に組み込まれ得、同じＴＣＲ複合体においてシグナルを伝送する。ＳＴＳポリペプチドの様々な構造及び可能なメカニズムが図１～９に示される。
したがって、一態様における本出願は、細胞外標的結合ドメイン、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン、膜貫通及び細胞内ドメインを含むキメラ受容体ポリペプチドを提供し、ここで、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインを含む。そのようなキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸及びそのような核酸を含む核酸ベクターも提供される。
別の態様において、細胞外標的結合ドメイン、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン、膜貫通及び細胞内ドメインを含む、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞が提供され、ここで、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインを含む。
処置目的でキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞を作製及び使用する方法並びにそのような方法に有用なキット及び製造品も提供される。
定義
本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、臨床病理の過程中に処置される個体又は細胞の自然経過を変えるように設計された臨床的介入を指す。処置の望ましい効果には、疾患の進行速度の低下、病状の改善又は緩和及び寛解又は予後の改善が含まれる。例えば、癌に関連する１つ以上の症状が緩和又は解消される場合（限定されないが、癌性細胞の増殖の減少（又は破壊）、疾患に起因する症状の減少、疾患に罹患している人の生活の質の向上、疾患の処置に必要な他の医薬の用量の減少及び／又は個体の生存の延長を含む）、個体は、癌の「処置」に成功している。
本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、臨床病理の過程中に処置される個体又は細胞の自然経過を変えるように設計された臨床的介入を指す。処置の望ましい効果には、疾患の進行速度の低下、病状の改善又は緩和及び寛解又は予後の改善が含まれる。例えば、癌に関連する１つ以上の症状が緩和又は解消される場合（限定されないが、癌性細胞の増殖の減少（又は破壊）、疾患に起因する症状の減少、疾患に罹患している人の生活の質の向上、疾患の処置に必要な他の医薬の用量の減少及び／又は個体の生存の延長を含む）、個体は、癌の「処置」に成功している。
本明細書で使用される場合、「疾患の進行を遅延させる」とは、疾患（癌など）の発達を延期させ、妨害し、緩慢化し、遅らせ、安定化させ、且つ／又は延ばすことを意味する。この遅延は、疾患及び／又は処置される個体の履歴に応じて時間の長さが変動し得る。当業者に明らかなように、十分な又は著しい遅延は、個体が疾患を発達させないという点で、事実上、予防を包含し得る。例えば、転移の発生などの後期癌は、遅延され得る。
「有効量」は、少なくとも特定の障害の測定可能な改善をもたらすために必要な最小量である。本明細書における有効量は、患者の病状、年齢、性別及び体重並びに個体において所望の応答を誘発する抗体の能力などの要因に応じて変化し得る。有効量は、治療上有益な効果が処置の毒性効果又は有害効果を凌ぐ量でもある。治療的使用に関して、有益な又は望ましい結果は、疾患に起因する１つ以上の症状の減少、疾患に罹患している人の生活の質の向上、疾患の処置に必要な他の医薬の用量の減少、ターゲティングなどによる別の薬剤の効果の増強、病気の進行の遅延及び／又は個体の生存の延長などの臨床結果を含む。癌又は腫瘍の場合、有効量の薬剤は、癌細胞の数の減少；腫瘍サイズの縮小；末梢器官への癌細胞の浸潤の阻害（即ちある程度遅らせるか又は望ましくは止める）；腫瘍転移の阻害（即ちある程度遅らせ且つ望ましくは止める）；腫瘍の成長のある程度の阻害；及び／又は障害に関連する１つ以上の症状のある程度の緩和において効果を有し得る。
本明細書で使用される場合、「併用して」は、別の処置様式に加えたある処置様式の投与を指す。したがって、「併用して」は、個体への他の処置様式の投与前、その間又はその後のある処置法様式の投与を指す。
処置の目的について、「対象」又は「個体」とは、ヒト、飼育動物及び家畜並びに犬、馬、猫、牛などの動物園、スポーツ又はペット動物を含む、哺乳動物として分類される任意の動物を指す。
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）及び所望の生物学的活性を示す限り、抗体フラグメントを特異的に包含する。
「天然抗体」、「全長抗体」、「無傷の抗体」及び「全抗体」という用語は、本明細書では互換的に使用され、以下に定義される抗体フラグメントではなく、実質的に無傷の形態の抗体を指す。これらの用語は、特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。ネイティブ抗体は、通常、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質であり、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重鎖（Ｈ）から構成される。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結している一方、ジスルフィド連結の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖は、規則的に間隔を置いた鎖内ジスルフィド架橋を有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、その後にいくつかの定常ドメインが続く。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインとアラインされ、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインとアラインされる。特定のアミノ酸残基は、軽鎖及び重鎖の可変ドメイン間の界面を形成すると考えられている。
「定常ドメイン」という用語は、免疫グロブリンの他の部分、抗原結合部位を含む可変ドメインと比較してより保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３ドメイン（総称してＣＨ）及び軽鎖のＣＬドメインを含有する。
抗体の「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の重鎖又は軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「ＶＨ」と称され得る。軽鎖の可変ドメインは、「ＶＬ」と称され得る。これらのドメインは、一般に抗体の最も可変的な部分であり、抗原結合部位を含む。
「可変」という用語は、抗体間で可変ドメインの特定の部分が配列において大きく異なり、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合及び特異性において使用されるという事実を指す。しかし、可変性は、抗体の可変ドメイン全体に均等に分布していない。これは、軽鎖及び重鎖の両方の可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、主にベータシート配置を採用し、３つのＨＶＲによって接続され、ベータシート構造を接続する（場合によりその一部を形成する）ループを形成する４つのＦＲ領域をそれぞれ含む。各鎖のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して保持され、他の鎖のＨＶＲと共に抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関与しないが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）における抗体の関与などの様々な免疫エフェクター機能を示す。
任意の哺乳動物種からの抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明確に異なるタイプの１つに割り当てることができる。
本明細書で使用されるＩｇＧ「アイソタイプ」又は「サブクラス」という用語は、それらの定常領域の化学的及び抗原的特徴によって定義される免疫グロブリンのサブクラスのいずれかを意味する。
抗体（免疫グロブリン）は、その重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて異なるクラスに割り当てることができる。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２にさらに分類され得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、γ、ε、γ及びμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元配置は、よく知られており、例えばＡｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）に一般的に記載されている。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質又はペプチドとの共有結合又は非共有結合によって形成されるより大きい融合分子の一部であり得る。
「全長抗体」、「無傷の抗体」及び「全抗体」という用語は、本明細書では互換的に使用され、以下に定義される抗体フラグメントではなく、実質的に無傷の形態の抗体を指す。これらの用語は、特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。
「抗体フラグメント」は、無傷の抗体の一部を含み、好ましくはその抗原結合領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗体フラグメントは、抗原結合フラグメントである。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖフラグメント；二特異性抗体；直鎖抗体；単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）などの単鎖抗体分子；ＶＨＨフラグメント又はＶＮＡＲフラグメントなどのドメイン抗体（ｓｄＡｂ）；並びに抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられる。
抗体のパパイン消化により、それぞれ単一の抗原結合部位を有する「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれる２つの同一の抗原結合フラグメントが産生され、残りの「Ｆｃ」フラグメントは、その名称に容易に結晶化する能力が反映されている。ペプシン処置により、２つの抗原結合部位を有しつつ抗原を架橋もできるＦ（ａｂ’）２フラグメントが生成される。
「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含有する最小の抗体フラグメントである。一実施形態において、二本鎖Ｆｖ種は、緊密な非共有結合の１つの重鎖及び１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種では、軽鎖及び重鎖が二本鎖Ｆｖ種と類似の「二量体」構造で会合できるように、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインを可動性ペプチドリンカーによって共有結合させることができる。各可変ドメインの３つのＨＶＲが相互作用して、ＶＨ－ＶＬ二量体の表面に抗原結合部位を定義するのは、この構造である。まとめると、６つのＨＶＲは、抗体に抗原結合特異性を与える。ただし、単一の可変ドメイン（又は抗原に特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖの半分）であっても、結合部位全体よりも親和性が低いものの、抗原を認識し、結合する能力を有する。
Ｆａｂフラグメントには、重鎖及び軽鎖の可変ドメインが含まれ、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）も含まれる。Ｆａｂ’フラグメントは、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端にいくつかの残基が追加されている点でＦａｂフラグメントと異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基が遊離チオール基を有するＦａｂ’の本明細書における名称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは、元来、ヒンジシステインを間に有するＦａｂ’フラグメントのペアとして生成された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングも知られている。
「単鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間において、ｓｃＦｖが抗原結合のために望ましい構造を形成することを可能にするポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦｖのレビューについては、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｅｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１９９４．２６９－３１５を参照されたい。
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する抗体フラグメントを指し、このフラグメントは、同じポリペプチド鎖（ＶＨ－ＶＬ）内の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間のペアリングを可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、ドメインは、別の鎖の相補的ドメインとペアリングを強制され、２つの抗原結合部位を作る。ダイアボディは、二価又は二重特異性であり得る。ダイアボディは、例えば、欧州特許第４０４，０９７号明細書；国際公開第１９９３／０１１６１号パンフレット；Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）；及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８（１９９３）により詳細に記載されている。トライアボディ及びテトラボディもＨｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）に記載されている。
「重鎖のみの抗体」又は「ＨＣＡｂ」という用語は、重鎖を含むが、抗体に通常見られる軽鎖を欠く機能的抗体を指す。ラクダ科の動物（ラクダ、ラマ、アルパカなど）は、ＨＣＡｂを産生することが知られている。
「単一ドメイン抗体」又は「ｓｄＡｂ」という用語は、単一の単量体可変抗体ドメインから構成される抗体フラグメントを指す。いくつかの場合、単一ドメイン抗体は、ラクダ科のＨＣＡｂから操作され、そのようなｓｄＡｂは、本明細書において「ナノボディ」又は「ＶＨＨ」と称される。ラクダｓｄＡｂは、最小の既知の抗原結合抗体フラグメントの１つである（例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－８（１９９３）；Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３７４：１６８－７３（１９９５）；Ｈａｓｓａｎｚａｄｅｈ－Ｇｈａｓｓａｂｅｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｎｄ），８：１０１３－２６（２０１３）を参照されたい）。
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、例えば、集団を含む個々の抗体は、少量で存在し得る可能な変異、例えば天然に存在する変異を除いて同一である。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、別々の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。特定の実施形態において、そのようなモノクローナル抗体は、典型的には、標的に結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、ここで、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列からの単一の標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって得られた。例えば、選択プロセスは、ハイブリドーマクローン、ファージクローン又は組換えＤＮＡクローンのプールなど、複数のクローンからの固有のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列は、例えば、標的との親和性を高めるため、標的結合配列をヒト化するため、細胞培養における産生を改善するため、インビボでの免疫原性を低下させるため、多重特異性抗体を作るためなど、さらに変更できること及び改変された標的結合配列を含む抗体も本発明のモノクローナル抗体であることを理解すべきである。異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられている。モノクローナル抗体調製物は、その特異性に加えて、それらが典型的には他の免疫グロブリンによって汚染されていない点で有利である。
「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団から得られる抗体の特徴を示し、いかなる特定の方法によっても抗体の産生を必要とすると解釈されるべきでない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５－９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ １４（３）：２５３－２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）；及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）を参照されたい）、ヒト免疫グロブリン遺伝子座又はヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の部分又は全部を有する、ヒト又はヒト様抗体を動物で産生するための技術（例えば、国際公開第１９９８／２４８９３号パンフレット；国際公開第１９９６／３４０９６号パンフレット；国際公開第１９９６／３３７３５号パンフレット；国際公開第１９９１／１０７４１号パンフレット；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０７号明細書；同第５，５４５，８０６号明細書；同第５，５６９，８２５号明細書；同第５，６２５，１２６号明細書；同第５，６３３，４２５号明細書；及び同第５，６６１，０１６号明細書；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；及びＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）を参照されたい）を含む様々な技術によって作製され得る。
本明細書のモノクローナル抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の一部が、特定の種に由来するか又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一又は相同である「キメラ」抗体を特異的に含み、鎖の残りの部分が、別の種に由来するか又は別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体及びそのような抗体のフラグメント（それらが望ましい生物活性を示す限り）の対応する配列と同一又は相同である（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照されたい）。キメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＴＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、ここで、抗体の抗原結合領域は、例えば、アカゲザルを目的の抗原で免疫することによって産生された抗体に由来する。
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態において、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲからの残基が、望ましい特異性、親和性及び／又は能力を有する、マウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲからの残基で置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの場合、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基に置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能をさらに改善するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、実質的に少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの全てを含み、超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、任意選択により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部も含む。詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）；並びに米国特許第６，９８２，３２１号明細書及び同第７，０８７，４０９号明細書も参照されたい。
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有するもの及び／又は本明細書に開示されるヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当技術分野で知られている様々な技術を使用して産生することができる。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１（１９９１）。ヒトモノクローナル抗体の調製には、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載されている方法も利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋ及びｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）も参照されたい。ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答してそのような抗体を生成するように改変されたが、その内因性遺伝子座が無効化された、トランスジェニック動物（例えば、免疫化ゼノマウス）に抗原を投与することによって調製できる（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥＴＭ技術に関して、米国特許第６，０７５，１８１号明細書及び同第６，１５０，５８４号明細書を参照されたい）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されたヒト抗体について、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０３：３５５７－３５６２（２００６）も参照されたい。
本明細書で使用される場合、「結合する」、「と特異的に結合する」又は「に特異的な」という用語は、標的と抗体との間の結合などの測定可能で再現可能な相互作用を指し、相互作用は、生体分子を含む分子の異種集団の存在における標的の存在を決定する。例えば、標的（エピトープであり得る）に結合するか又は特異的に結合する抗体は、他の標的に結合するよりも高い親和性、結合力、容易性及び／又はより長い期間でこの標的に結合する抗体である。一実施形態において、関連しない標的への抗体の結合の度合いは、例えば、放射免疫測定法（ＲＩＡ）によって測定された、標的への抗体の結合の約１０％より小さい。特定の実施形態において、標的に特異的に結合する抗体は、１μＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下又は０．１ｎＭ以下の解離定数（Ｋｄ）を有する。特定の実施形態において、抗体は、異種由来のタンパク質中に保存されたタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態において、特異的な結合は、排他的結合を含み得るが、必要とはしない。
本明細書で使用される「キメラ抗原受容体」又は「ＣＡＲ」は、Ｔ細胞などの細胞に１つ以上の抗原特異性を移植する遺伝子操作された受容体を指す。ＣＡＲは、「人工Ｔ細胞受容体」、「キメラＴ細胞受容体」又は「キメラ免疫受容体」としても知られている。いくつかの実施形態において、ＣＡＲは、腫瘍抗原に特異的な抗体の細胞外可変ドメイン及びＴ細胞又は他の受容体の細胞内シグナル伝達ドメイン（１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインなど）を含む。「ＣＡＲ－Ｔ」は、ＣＡＲを発現するＴ細胞を指す。
本明細書で使用される「Ｔ細胞受容体」又は「ＴＣＲ」は、ＭＨＣ分子に結合した特定の抗原ペプチドに結合する細胞外抗原結合ドメインを含む、内因性又は組換え／操作されたＴ細胞受容体を指す。いくつかの実施形態において、ＴＣＲは、ＴＣＲαポリペプチド鎖及びＴＣＲβポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲは、ＴＣＲγポリペプチド鎖及びＴＣＲδポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲは、腫瘍抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲは、腫瘍抗原／ＭＨＣに特異的に結合する。「ＴＣＲ－Ｔ」は、組換え／操作されたＴＣＲを発現するＴ細胞を指す。
本明細書で使用される「ＴＣＲ複合体」は、ＴＣＲ及びＣＤ３の複合体を指す。本明細書で使用される「ＴＣＲサブユニット」は、例えば、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ及びＣＤ３ζを含むＴＣＲ複合体のサブユニットを指す。
「組換え」という用語は、（１）天然に存在する環境から取り出されたか、（２）遺伝子が天然に見出されるポリヌクレオチドの全部又は一部に関連していないか、（３）天然では連結されていないポリヌクレオチドに機能的に連結されているか、又は（４）天然に存在しない生体分子、例えば遺伝子又はタンパク質を指す。「組換え」という用語は、クローン化されたＤＮＡ単離物、化学的に合成されたポリヌクレオチド類似体又は異種システムによって生物学的に合成されたポリヌクレオチド類似体並びにそのような核酸によってコードされるタンパク質及び／又はｍＲＮＡに関連して使用することができる。
「発現する」という用語は、核酸のタンパク質への翻訳を指す。タンパク質は、発現し細胞内に残るか、細胞表面膜の成分になるか、又は細胞外マトリックス又は培地に分泌され得る。
「宿主細胞」という用語は、発現ベクターの複製又は発現をサポートすることができる細胞を指す。宿主細胞は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などの原核細胞又は酵母、昆虫細胞、両生類細胞若しくは哺乳動物細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、エフェクターＴ細胞などの免疫細胞）などの真核細胞であり得る。
本明細書で使用される「トランスフェクトされた」、又は「形質転換された」、又は「形質導入された」という用語は、外因性核酸が宿主細胞にトランスファー又は導入されるプロセスを指す。「トランスフェクトされた」、又は「形質転換された」、又は「形質導入された」細胞は、外因性核酸をトランスフェクトされた、形質転換された又は形質導入された細胞である。
「インビボ」という用語は、細胞が得られる生物の体内を指す。「エクスビボ」又は「インビトロ」は、細胞が得られる生物の体外を意味する。
「細胞」という用語は、一次対象細胞及びその子孫を含む。
本明細書で使用される場合、「免疫調節剤」という用語は、免疫系に対して効果（阻害効果又は刺激効果など）を有する任意のタンパク質又はペプチドベースの薬剤を指す。
本明細書で使用される場合、「免疫チェックポイント阻害剤」という用語は、Ｔ細胞の活性化及び機能を調節することができる１つ以上のチェックポイントタンパク質を完全に又は部分的に減少させるか、阻害するか又は妨害する分子を指す。
本明細書で使用される場合、「免疫賦活剤」という用語は、免疫応答の強度を刺激、活性化又は増加させる分子を指す。
本明細書で使用される場合、「治療用タンパク質」という用語は、治療効果を有する任意のタンパク質又はペプチドベースの薬剤を指す。
本明細書に記載の発明の実施形態は、「からなる」及び／又は「本質的にからなる」実施形態を含むことが理解される。
本明細書における「約」のついた値又はパラメータへの言及は、その値又はパラメータ自体を対象とする変形形態を含む（且つ説明する）。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、「Ｘ」の説明を含む。
本明細書で使用される場合、「ない」のついた値又はパラメータへの言及は、一般に、値又はパラメータ「以外の」を意味し、説明する。例えば、方法がＸタイプの癌を処置するために用いられないことは、方法がＸ以外のタイプの癌を処置するために用いられることを意味する。
本明細書において使用される「約Ｘ～Ｙ」という用語は、「約Ｘ～約Ｙ」と同じ意味を有する。
本明細書及び添付した請求項において使用される場合、文脈上明確に別段の指示がない限り、単数形の「１つの」、「又は」及び「その」は、複数の指示対象を含む。
キメラ受容体ポリペプチド（ＳＴＳポリペプチド）
一態様において、本発明は、キメラ受容体ポリペプチド（又はＳＴＳポリペプチド）を提供する。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域（又はＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれかの細胞外ドメインの可変領域）を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。
一態様において、本発明は、キメラ受容体ポリペプチド（又はＳＴＳポリペプチド）を提供する。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域（又はＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれかの細胞外ドメインの可変領域）を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。
いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。
いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニット（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）などの２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）を含む。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原（即ち異なる標的抗原の異なるエピトープ）に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＢＣＭＡに特異的に結合する２つ以上の標的抗原結合ドメイン（ｓｄＡｂ）は、同じである。いくつかの実施形態において、ＢＣＭＡに特異的に結合する２つ以上の標的抗原結合ドメイン（ｓｄＡｂ）は、異なる。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインなどの２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含む。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットにそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＴＣＲサブユニット上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、同じＴＣＲサブユニット上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、異なるＴＣＲサブユニット（即ち異なるＴＣＲサブユニットの異なるエピトープ）に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニットは、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットと同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニットは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの１つは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂであり、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの他の１つは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの１つは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂであり、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの他の１つは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの１つは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖであり、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインの他の１つは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、異なる（例えば、異なる構造又は異なるエピトープに結合する）。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。
いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）、ｄ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、２つ以上（例えば、２つ）の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δからなる群から選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３εの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの可変領域を含まないが、ＴＣＲαの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲα定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの可変領域を含まないが、ＴＣＲβの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲβ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリ
ペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂを含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
ペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂを含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３εの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの可変領域を含まないが、ＴＣＲαの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲα定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの可変領域を含まないが、ＴＣＲβの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲβ定常
領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上の標的抗原結合ドメイン間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ライナーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択されるリンカーによって接続されている。
領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上の標的抗原結合ドメイン間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ライナーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択されるリンカーによって接続されている。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（又は任意のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を含まない。いくつかの実施形態において、ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δからなる群から選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３εの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの可変領域を含まないが、ＴＣＲαの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲα定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの可変領域を含まないが、ＴＣＲβの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲβ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、
キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂを含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂを含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３εの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの可変領域を含まないが、ＴＣＲαの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲα定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの可変領域を含まないが、ＴＣＲβの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲβ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの可変領域を含まないが、ＴＣＲγの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲγ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの可変領域を含まないが、ＴＣＲδの定常領域を含む（例えば、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインのＮ末端のＴＣＲδ定常領域を含む）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいず
れの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上の標的抗原結合ドメイン間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上（例えば、２つ）の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ライナーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択されるリンカーによって接続されている。
れの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、１つ以上の任意選択によるリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上の標的抗原結合ドメイン間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上（例えば、２つ）の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ライナーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択されるリンカーによって接続されている。
いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂを含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかのアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３εに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含むｓｄＡｂであるか、又は配列番号２４のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３εシグナルペプチドを含まないＣＤ３ε細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３γシグナルペプチドを含まないＣＤ３γ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３δシグナルペプチドを含まないＣＤ３δ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３εシグナルペプチドを含まないＣＤ３ε細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３γシグナルペプチドを含まないＣＤ３γ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３δシグナルペプチドを含まないＣＤ３δ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例
えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからな
る）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、配列番号４３～４８のいずれかのアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、配列番号５１～５８のいずれかのアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、配列番号６１のアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからな
る）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２４を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、配列番号４３～４８のいずれかのアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、配列番号５１～５８のいずれかのアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、配列番号６１のアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
いくつかの実施形態において、ａ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲγ／δに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメインであって、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３εシグナルペプチドを含まないＣＤ３ε細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３γシグナルペプチドを含まないＣＤ３γ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３δシグナルペプチドを含まないＣＤ３δ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３εシグナルペプチドを含まないＣＤ３ε細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３γシグナルペプチドを含まないＣＤ３γ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＣＤ３δシグナルペプチドを含まないＣＤ３δ細胞外ドメイン；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒ
ンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意
選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、配列番号６２又は６３のアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
ンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｇ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂを含む細胞外標的結合ドメイン（例えば、配列番号２６を含む）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの定常領域；ｇ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの定常領域；ｇ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの定常領域；ｇ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの定常領域；ｇ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｈ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意
選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）タンデムに配置された第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６を含む）を含み、任意選択により、任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）によって接続された細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、配列番号２７を含む）；ｅ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｇ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。いくつかの実施形態において、抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１のリンカー、第２のリンカー及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、配列番号６２又は６３のアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドが提供される。
異なる態様については、以下の様々なセクションでさらに詳細に論じられる。
細胞外標的結合ドメイン
細胞外標的結合ドメインは、標的分子に特異的に結合する。
細胞外標的結合ドメインは、標的分子に特異的に結合する。
いくつかの実施形態における細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）は、同じ標的分子に特異的に結合する。例えば、いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）を含み、それぞれが同じ標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）上の同じ又は異なるエピトープを認識する。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）を含み、それぞれが異なる標的抗原を認識する。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）のＶＨＨドメイン又はｓｄＡｂを含み、それぞれが同じ標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）上の同じ又は異なるエピトープを認識する。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）のＶＨＨドメイン又はｓｄＡｂを含み、それぞれが異なる標的抗原を認識する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）は、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）は、１つ以上のリンカー（本明細書に記載の任意のリンカーなど）によって接続されている。いくつかの実施形態において、１つ以上のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかから選択される。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）は、同じである。２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）は、異なる。
いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、同族の受容体に特異的に結合するリガンドを含む。適切なリガンド／受容体ペアには、ＮＧＫ２Ｄリガンド／受容体ペア、ＩＬ２リガンド／受容体ペア、ＢＣＭＡリガンド／受容体ペア、ＴＡＣＩリガンド／受容体ペア、ＩＬ－１３リガンド／受容体ペア、ＩＬ－３リガンド／受容体ペア、ＩＬ－４リガンド／受容体ペア、ＶＥＧＦリガンド／受容体ペア、ＨＥＲ１リガンド／受容体ペア、ＨＥＲ２リガンド／受容体ペアなどが含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する抗原結合ドメインである。適切な標的抗原結合ドメインには、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、ミニボディ、ダイアボディ、ドメイン抗体変異体（ｄＡｂ）、ＶＨＨ、フィブロネクチン３ドメイン変異体、設計アンキリンリピートタンパク質（「ＤＡＲＰｉｎ」）などのアンキリンリピート変異体及び他のタンパク質足場に由来する他の抗原特異的結合ドメインなどの抗体又はそのフラグメントが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＤＡＲＰｉｎである。いくつかの実施形態において、標的抗原に特異的に結合する標的抗原結合ドメインへの言及は、ａ）他の分子に対するその結合親和性の少なくとも約１０（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００又はそれを超える数のいずれかを含む）倍である親和性；又はｂ）他の分子との結合に関するＫｄの約１／１０以下（例えば、１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００又はそれ未満）のＫｄで、標的抗原結合ドメインが標的抗原に結合することを意味する。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析又は放射性免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当技術分野で知られている方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当技術分野で知られている方法によって決定することができる。
いくつかの実施形態において、標的分子（標的抗原など）は、細胞表面分子（細胞表面抗原など）である。いくつかの実施形態において、細胞表面分子又は抗原は、タンパク質、炭水化物及び脂質からなる群から選択される。例えば、腫瘍抗原は、腫瘍関連炭水化物抗原（ＴＡＣＡ）であり得、これは、正常細胞と区別することができる癌細胞上に表示される異常な炭水化物構造である。いくつかの実施形態において、細胞表面分子又は抗原は、罹患細胞において発現される疾患関連分子又は抗原である。いくつかの実施形態において、疾患は、癌であり、疾患関連分子又は抗原は、癌細胞で発現される腫瘍関連分子又は抗原である。いくつかの実施形態において、腫瘍関連分子又は抗原は、腫瘍性タンパク質である。いくつかの実施形態において、腫瘍性タンパク質は、癌原遺伝子の変異の結果であり、腫瘍性タンパク質は、突然変異を含むネオエピトープを含む。例えば、いくつかの実施形態において、標的分子又は抗原は、細胞表面腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを含む腫瘍性タンパク質）である。いくつかの実施形態において、疾患は、ウイルス感染であり、疾患関連分子又は抗原は、感染細胞で発現されるウイルス関連分子又は抗原である。例えば、いくつかの実施形態において、標的分子又は抗原は、細胞表面ウイルス関連分子又は抗原である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭ（例えば、約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ又は５００ｎＭ、これらの値の間の任意の範囲を含む）のＫｄで標的分子又は抗原に結合する。
いくつかの実施形態において、標的分子又は抗原は、腫瘍関連分子、免疫系関連分子、ウイルス感染関連分子及び微生物タンパク質からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、標的分子（標的抗原など）は、７０７－ＡＰ、ビオチン化分子、ａ－アクチニン－４、ａｂｌ－ｂｃｒ ａｌｂ－ｂ３（ｂ２ａ２）、ａｂｌ－ｂｃｒ ａｌｂ－ｂ４（ｂ３ａ２）、アジポフィリン、ＡＦＰ、ＡＩＭ－２、アネキシンＩＩ、ＡＲＴ－４、ＢＡＧＥ、ＢＣＭＡ、ｂ－カテニン、ｂｃｒ－ａｂｌ、ｂｃｒ－ａｂｌｐ１９０（ｅ１ａ２）、ｂｃｒ－ａｂｌｐ２１０（ｂ２ａ２）、ｂｃｒ－ａｂｌｐ２１０（ｂ３ａ２）、ＢＩＮＧ－４、ＣＡ－１２５、ＣＡＧ－３、ＣＡＩＸ、ＣＡＭＥＬ、Ｃａｓｐａｓｅ－８、ＣＤ１７１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤＣ２７、ＣＤＫ－４、ＣＥＡ、ＣＬＣＡ２、ＣＬＬ－１、ＣＴＡＧ１Ｂ、Ｃｙｐ－Ｂ、ＤＡＭ－１０、ＤＡＭ－６、ＤＥＫ－ＣＡＮ、ＤＬＬ３、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＧＰ－２、ＥＧＰ－４０、ＥＬＦ２、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ｅｒｂ－Ｂ２、ｅｒｂ－Ｂ３、ｅｒｂ－Ｂ４、ＥＳ－ＥＳＯ－１ａ、ＥＴＶ６／ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＢＰ、胎児アセチルコリン受容体、ＦＧＦ－５、ＦＮ、ＦＲ－α、Ｇ２５０、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＡＧＥ－３、ＧＡＧＥ－４、ＧＡＧＥ－５、ＧＡＧＥ－６、ＧＡＧＥ－７Ｂ、ＧＡＧＥ－８、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧｎＴ－Ｖ、Ｇｐ１００、ｇｐ７５、グリピカン－３（ＧＰＣ３）、ＧＰＣ－２、Ｈｅｒ－２、ＨＬＡ－Ａ＊０２０１－Ｒ１７０Ｉ、ＨＭＷ－ＭＡＡ、ＨＳＰ７０－２ Ｍ、ＨＳＴ－２（ＦＧＦ６）、ＨＳＴ－２／ｎｅｕ、ｈＴＥＲＴ、ｉＣＥ、ＩＬ－１１Ｒα、ＩＬ－１３Ｒα２、ＫＤＲ、ＫＩＡＡ０２０５、Ｋ－ＲＡＳ、Ｌ１細胞接着分子、ＬＡＧＥ－１、ＬＤＬＲ／ＦＵＴ、ルイスＹ、Ｌ１－ＣＡＭ、ＬＩＬＲＢ４、ＩＧＦ１Ｒ、ＣＣＲ５、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲ４、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－１０、ＭＡＧＥ－１２、ＭＡＧＥ－２、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＧＥ－Ａ１、ＭＡＧＥ－Ａ２、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＭＡＧＥ－Ａ６、ＭＡＧＥ－Ｂ１、ＭＡＧＥ－Ｂ２、リンゴ酸酵素、マンマグロビン－Ａ、ＭＡＲＴ－１／メラン－Ａ、ＭＡＲＴ－２、ＭＣ１Ｒ、Ｍ－ＣＳＦ、メソテリン、ＭＵＣ１、ＭＵＣ１６、ＭＵＣ２、ＭＵＭ－１、ＭＵＭ－２、ＭＵＭ－３、ミオシン、ＮＡ８８－Ａ、Ｎｅｏ－ＰＡＰ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＰＭ／ＡＬＫ、Ｎ－ＲＡＳ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＡ１、ＯＧＴ、癌胎児性抗原（ｈ５Ｔ４）、ＯＳ－９、Ｐポリペプチド、Ｐ１５、Ｐ５３、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＰＴＰＲＫ、ＲＡＧＥ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２、ＳＡＲＴ－１、ＳＡＲＴ－２、ＳＡＲＴ－３、ＳＯＸ１０、ＳＳＸ－２、サバイビン、サバイビン－２Ｂ、ＳＹＴ／ＳＳＸ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＬ／ＡＭＬ１、ＴＧＦａＲＩＩ、ＴＧＦｂＲＩＩ、ＴＰ１、ＴＲＡＧ－３、ＴＲＧ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２／ＩＮＴ２、ＴＲＰ－２－６ｂ、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ－Ｒ２、ＷＴ１、α－葉酸受容体及びκ－軽鎖からなる群から選択される腫瘍関連抗原などの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）である。いくつかの実施形態において、第１のエピトープ及び／又は第２のエピトープは、ＡＦＰ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＰＣ３、ＧＰＣ－２、ＤＬＬ３、ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＣＬＬ－１、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＭＳＬＮ、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、ＧＤ２、ＩＬ１３Ｒα２、ＣＡＩＸ、Ｌ１－ＣＡＭ、ＣＡ１２５、ＣＤ１３３、ＦＡＰ、ＣＴＡＧ１Ｂ、ＭＵＣ１、ＦＲ－α、ＣＤ７０、ＣＤ１７１、ＲＯＲ１及びそれらの任意の組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、ＴＡＡは、ＢＣＭＡ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＡＦＰ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＥＡ、ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｖＩＩＩなど）、ＧＤ２、ＧＰＣ－２、ＧＰＣ３、ＨＥＲ２、ＬＩＬＲＢ４、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＧＦ１Ｒ、メソテリン、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＷＴ１、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ１、ＴＧＦａＲＩＩ、ＴＧＦｂＲＩＩ、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４及びＣＣＲ４からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ＴＡＡは、ＢＣＭＡである。
いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤ１、ＣＤ２及びＣＤ３を含む、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、タンデムに配置されたもの）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、２つ以上（２つなど）の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、タンデムに配置された）を含み、それぞれが配列番号２６のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、変異遺伝子によってコードされるネオ抗原又はネオエピトープなどのネオ抗原又はネオエピトープである。遺伝子は、ＡＢＬ１、ＡＣＯｌ１９９７、ＡＣＶＲ２Ａ、ＡＦＰ、ＡＫＴ１、ＡＬＫ、ＡＬＰＰＬ２、ＡＮＡＰＣ１、ＡＰＣ、ＡＲＩＤ１Ａ、ＡＲ、ＡＲ－ｖ７、ＡＳＣＬ２、β２Μ、ＢＲＡＦ、ＢＴＫ、Ｃ１５ＯＲＦ４０、ＣＤＨ１、ＣＬＤＮ６、ＣＮＯＴ１、ＣＴ４５Ａ５、ＣＴＡＧ１Ｂ、ＤＣＴ、ＤＫＫ４、ＥＥＦ１Ｂ２、ＥＥＦ１ＤＰ３、ＥＧＦＲ、ＥＩＦ２Ｂ３、ｅｎｖ、ＥＰＨＢ２、ＥＲＢＢ３、ＥＳＲ１、ＥＳＲＰ１、ＦＡＭ１１ ＩＢ、ＦＧＦＲ３、ＦＲＧ１Ｂ、ＧＡＧＥ１、ＧＡＧＥ １０、ＧＡＴＡ３、ＧＢＰ３、ＨＥＲ２、ＩＤＨ１、ＪＡＫ１、ＫＩＴ、ＫＲＡＳ、ＬＭＡＮ１、ＭＡＢＥＢ１６、ＭＡＧＥＡ１、ＭＡＧＥＡ１０、ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＡ８、ＭＡＧＥＢ１７、ＭＡＧＥＢ４、ＭＡＧＥＣ１、ＭＥＫ、ＭＬＡＮＡ、ＭＬＬ２、ＭＭＰ１３、ＭＳＨ３、ＭＳＨ６、ＭＹＣ、ＮＤＵＦＣ２、ＮＲＡＳ、ＮＹ－ＥＳＯ、ＰＡＧＥ２、ＰＡＧＥ５、ＰＤＧＦＲａ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＭＥＬ、ｐｏｌタンパク質、ＰＯＬＥ、ＰＴＥＮ、ＲＡＣ１、ＲＢＭ２７、ＲＮＦ４３、ＲＰＬ２２、ＲＵＮＸ１、ＳＥＣ３１Ａ、ＳＥＣ６３、ＳＦ３Ｂ １、ＳＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ４５Ａ２、ＳＭＡＰ１、ＳＭＡＰ１、ＳＰＯＰ、ＴＦＡＭ、ＴＧＦＢＲ２、ＴＨＡＰ５、ＴＰ５３、ＴＴＫ、ＴＹＲ、ＵＢＲ５、ＶＨＬ及びＸＰＯＴからなる群から選択できる。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、真菌、ウイルス又は細菌抗原などの病原体抗原である。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）若しくはカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、クリプロコッカス（Ｃｒｙｐｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ヒストプラズマ（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ）、ニューモシスチス（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）又はスタキボトリス（Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒｙｓ）からの真菌抗原である。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、感染細胞において発現されるウイルス関連分子又は抗原（例えば、ウイルス抗原）である。いくつかのヒトの癌は、Ｂ型肝炎ウイルス（肝癌）、パピローマウイルス（子宮頸癌及び他の肛門性器癌；例えば、ＨＰＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ；バーキットリンパ腫及び上咽頭癌）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（カポジ肉腫）及びヒトＴ細胞リンパ球向性ウイルス（成人Ｔ細胞白血病）などのウイルスによって引き起こされる。エイズ患者に発症する癌は、免疫不全の結果として、ＨＩＶによって間接的に引き起こされる。いくつかの実施形態において、標的抗原は、ＣＣＲ５、ＣＤ４などのＨＩＶ関連抗原である。Ｃ型肝炎ウイルス（ＲＮＡウイルス）は、慢性的な組織損傷に起因する肝臓癌の間接的な原因である。いくつかの実施形態において、標的抗原は、発癌性ウイルスからのウイルス抗原である。例示的な発癌性ウイルスには、ＥＢＶ：ＥＢＮＡ－１、ＬＭＰ－１、ＬＭＰ－２Ａ；ＨＰＶ：Ｅ６、Ｅ７、Ｅ５；ＨＢＶ：ＨＢｘ；ＨＣＶ：Ｃｏｒｅ、ＮＳ３、ＮｓＳＡ；ＨＴＬＶ：Ｔａｘ、ＨＢＺ；ＫＳＨＶ：ｖＦＬＩＰ、ＬＡＮＡ、ｖＧＰＣＲ、ｖＩＲＦ－１が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３ Ａ、ＥＢＮＡ３ Ｃ及びＥＢＮＡ ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、ＲＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８及びそのフラグメントを含むが、これらに限定されない腫瘍性タンパク質である。例示的なウイルス病原体には、アデノウイルス科（Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、ＪＣウイルス、ＢＫウイルス、ＨＳＶ、ＨＨＶファミリーのウイルス、ピコルナウイルス科（Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ）、ヘルペスウイルス科（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ）、ヘパドナウイルス科（Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ）、フラビウイルス科（Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）、レトロウイルス科（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ）、オルソミクソウイルス科（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）、パライニキソウイルス科（Ｐａｒａｉｎｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）、パポバウイルス科（Ｐａｐｏｖａｖｉｒｉｄａｅ）、ポリオーマウイルス科（Ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｕｓ）、ラブドウイルス科（Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ）及びトガウイルス科（Ｔｏｇａｖｒｉｄａｅ）のファミリーのものが含まれる。例示的な病原性ウイルスは、天然痘、インフルエンザ、おたふく風邪、はしか、水痘、エボラ及び風疹を引き起こす。標的抗原は、上記のウイルスのいずれかに由来し得る。いくつかの実施形態において、標的抗原は、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫウイルス、ヒトヘルペスウイルス－６（ＨＨＶ６）若しくは他のヘルペスウイルス、インフルエンザ、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、パラインフルエンザウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、ＨＳＶ（単純ヘルペスウイルス）、ＥＢＶ、ＪＣウイルス又はエボラからなる群から選択される日和見ウイルス病原体のウイルス抗原である。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、ボレリア・アフゼリイ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ ａｆｚｅｌｉｉ）抗原、ボレリア・ガリニ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇａｒｉｎｉｉ）抗原、ブルセラ・アボルタス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ ａｂｏｒｔｕｓ）抗原、カンピロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ）抗原、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）抗原、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）抗原、レプトスピラ・ビフレクサ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｂｉｆｌｅｘａ）抗原、肺炎マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）抗原などの細菌抗原である。例示的な病原性細菌には、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ボルデテラ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ）、クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）、スピロへータ（Ｓｐｉｒｏｃｈｅｔｅｓ）及びサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）が含まれる。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロファージ、単球などの免疫系関連分子など、腫瘍進行及び／又は免疫系監視からの逃避に関与する免疫系関連分子である。いくつかの実施形態において、標的抗原は、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４５Ｒ、ＨＬＡ－ＤＲ並びにＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１、ＣＤ２７４）、ＰＤ－Ｌ２（Ｂ７ＤＣ、ＣＤ２７３）、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、ガレクチン９、ＨＶＥＭ、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、ＦＧＬ１、ＣＤ１５５、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ガレクチン－９、ＣＥＡＣＡＭ－１及びＢ７－Ｈ４を含むが、これらに限定されない免疫チェックポイント分子である。
いくつかの実施形態において、標的抗原は、自己免疫抗原である。「自己免疫抗原」は、自己免疫疾患の標的又は原因のいずれかとして機能する任意の自己タンパク質又は自己成分を指す。自己免疫抗原の例には、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオ脂質タンパク質又はミエリンオリゴデンドロサイトタンパク質（多発性硬化症）；末梢ミエリンタンパク質Ｐ０及びＰ２（ギランバレー症候群）；アセチルコリン受容体（重症筋無力症）；心臓ミオシン（リウマチ熱／心筋炎）；ランゲルハンス島のベータ細胞のタンパク質－ＧＡＤ（グルタミン酸脱炭酸酵素）、インスリン（Ｉ型自己免疫性糖尿病）、甲状腺刺激ホルモン受容体（グレーブ病）、血小板（血小板減少性紫斑病）、神経筋接合部（重症筋無力症）、赤血球（自己免疫性溶血性貧血及び細胞内抗原（全身性エリテマトーデスのスプライセオソーム、リボソーム、核酸など）が含まれるが、これらに限定されない。
細胞外ＴＣＲ結合ドメイン
本明細書に記載の細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲ複合体中の１つ以上のサブユニット（例えば、サブユニットの細胞外ドメイン）に特異的に結合する。ＴＣＲ複合体は、ＴＣＲヘテロ二量体（ＴＣＲα／ＴＣＲβ又はＴＣＲγ／ＴＣＲδ）並びに複数のＣＤ３サブユニット、即ちＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζから構成されるＴ細胞の表面に存在するＴＣＲサブユニットの複合体である。これは、抗原の結合に応答してＴ細胞の活性化に関与する。
本明細書に記載の細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲ複合体中の１つ以上のサブユニット（例えば、サブユニットの細胞外ドメイン）に特異的に結合する。ＴＣＲ複合体は、ＴＣＲヘテロ二量体（ＴＣＲα／ＴＣＲβ又はＴＣＲγ／ＴＣＲδ）並びに複数のＣＤ３サブユニット、即ちＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζから構成されるＴ細胞の表面に存在するＴＣＲサブユニットの複合体である。これは、抗原の結合に応答してＴ細胞の活性化に関与する。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、例えば、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζのいずれかを含む、ＴＣＲサブユニット（ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインなど）を特異的に認識するＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）によって特異的に認識されるＴＣＲサブユニットは、本明細書に記載の第１のＴＣＲサブユニット（キメラ受容体ペプチドの膜貫通ドメインが由来する場合）及び／又は第２のＴＣＲサブユニット（キメラ受容体ペプチドの細胞内ドメインが由来する場合）と同じである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）によって特異的に認識されるＴＣＲサブユニットは、本明細書に記載の第１のＴＣＲサブユニット及び／又は第２のＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインによって特異的に認識されるＴＣＲサブユニット（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）、本明細書に記載の第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、全て同じである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じであるが、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）によって特異的に認識されるＴＣＲサブユニットと異なる。
いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＣＤ３ε、例えばＣＤ３ε、ＣＤ３ε／γ、ＣＤ３ε／δのＮ末端などのＣＤ３のサブユニット（例えば、ＣＤ３の細胞外ドメイン）に結合する抗体又はその抗原結合フラグメントを含む。ＣＤ３抗体の例は、当技術分野で知られている（例えば、ムロモナブ、オテリキシズマブ及びビシリズマブ）。いくつかの実施形態において、ＣＤ３のサブユニット（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３ε、ＣＤ３ε／γ、ＣＤ３ε／δのＮ末端など）に結合する抗体又はその抗原結合フラグメントは、ｓｄＡｂ又はｓｃＦｖなどの単鎖抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＤ３のサブユニットに結合する抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＯＫＴ３、ＵＣＨＴ１、ＴＲＸ４、ＨｕＭ２９１、ＳＫ７並びに中国特許出願公開第１０６０８４０４６Ａ号明細書及び中国特許出願公開第１０６０８４０４７Ａ号明細書（これらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に開示されるｓｄＡｂを含むが、これらに限定されない抗ＣＤ３抗体に由来する。いくつかの実施形態において、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３εの細胞外ドメイン）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖなど）は、ＵＣＨＴ１抗ＣＤ３抗体（配列番号２４）のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３ε、ＣＤ３ε／γ、ＣＤ３ε／δの細胞外ドメイン）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖなど）は、ＵＣＨＴ１抗ＣＤ３抗体（配列番号２４）のＶＨ及びＶＬを含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＣＤ３εに特異的に結合するｓｃＦｖ（例えば、ＣＤ３εの細胞外ドメイン）であり、ここで、抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εの細胞外ドメイン）に特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂのＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ε ｓｄＡｂである。
いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ又はＴＣＲδのいずれか、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲの細胞外ドメイン）に結合する抗体又はその抗原結合フラグメントを含む。ＴＣＲ抗体の例は、当技術分野で知られている（例えば、Ｂ１．１、ＩＰ２６、Ｈ５７－５９７、１Ｂ２、ＷＴ３１、７Ｆ１８、３Ｃ１０、ＫＪ１２９８）。
いくつかの実施形態において、ＴＣＲに結合する抗体又はその抗原結合フラグメント（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）は、ｓｄＡｂ又はｓｃＦｖなどの単鎖抗体である。いくつかの実施形態において、ＴＣＲに結合する抗体又はその抗原結合フラグメントは、Ｂ１．１、ＩＰ２６、Ｈ５７－５９７、１Ｂ２、ＷＴ３１、７Ｆ１８、３Ｃ１０、ＫＪ１２９８を含むが、これらに限定されない抗ＴＣＲ抗体に由来する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲγ／δ）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖなど）は、Ｂ１．１抗ＴＣＲγ／δ抗体（配列番号２７）のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲγ／δ）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖなど）は、Ｂ１．１抗ＴＣＲγ／δ抗体（配列番号２７）のＶＨ及びＶＬを含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＴＣＲγ／δ（例えば、ＴＣＲγ／δの定常領域）に特異的に結合するｓｃＦｖであり、ここで、抗ＴＣＲγ／δ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲサブユニット（ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインなど）に、ａ）他の分子に対するその結合親和性の少なくとも約１０（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００又はそれを超える数のいずれかを含む）倍である親和性；又はｂ）他の分子との結合に関するＫｄの約１／１０以下（例えば、１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００又はそれ未満）のＫｄで結合する。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析又は放射性免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当技術分野で知られている方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当技術分野で知られている方法によって決定することができる。
いくつかの実施形態における細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、タンデムに連結されている。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、１つ以上のリンカー（本明細書に記載の任意のリンカーなど）によって接続されている。いくつかの実施形態において、１つ以上のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかから選択される。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、同じＴＣＲサブユニット（例えば、同じＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）に特異的に結合する。例えば、いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含み、それぞれが同じＴＣＲサブユニット上の同じ又は異なるエピトープ（例えば、同じＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン上のエピトープ）を認識する。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）を含み、それぞれが異なるＴＣＲサブユニット（例えば、異なるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を認識する。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインは、異なる。
いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲサブユニット（例えば、ＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）を、約０．１ｐＭ～約５μＭ（例えば、約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ、５００ｎＭ、１μＭ、２μＭ、３μＭ、４μＭ、５μＭ、これらの値の間の任意の範囲を含む）のＫｄで結合する。
膜貫通ドメイン
いくつかの実施形態におけるキメラ受容体ポリペプチドは、膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδなど、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、細胞外及び／又は細胞内領域においてＴＣＲサブユニット膜貫通ドメインに隣接する１つ以上（例えば、最大約５つ）の追加のアミノ酸をさらに含む。
いくつかの実施形態におけるキメラ受容体ポリペプチドは、膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδなど、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、細胞外及び／又は細胞内領域においてＴＣＲサブユニット膜貫通ドメインに隣接する１つ以上（例えば、最大約５つ）の追加のアミノ酸をさらに含む。
キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、天然源又は合成源のいずれかに由来し得る。本明細書で使用される場合、「膜貫通ドメイン」は、細胞膜、好ましくは真核細胞膜中で熱力学的に安定である任意のタンパク質構造を指す。本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドにおける使用に適した膜貫通ドメインは、天然に存在するタンパク質、例えば天然に存在するＴＣＲサブユニットから得ることができる。代替的に、膜貫通ドメインは、合成の、天然に存在しないタンパク質セグメント、例えば細胞膜中で熱力学的に安定な疎水性タンパク質セグメントであり得る。
膜貫通ドメインは、膜貫通ドメインの３次元構造に基づいて分類される。例えば、膜貫通ドメインは、アルファヘリックス、２つ以上のアルファヘリックスからなる複合体、ベータバレル又は細胞のリン脂質二重層をまたぐことができる他の任意の安定な構造を形成し得る。さらに、膜貫通ドメインは、同様に又は代替的に、膜貫通ドメインが膜を通過する数及びタンパク質の配向を含む膜貫通ドメインのトポロジーに基づいても分類され得る。例えば、単回通過の膜タンパク質は、細胞膜を１回横断し、多回通過膜タンパク質は、細胞膜を少なくとも２回（例えば、２回、３回、４回、５回、６回、７回又はそれを超える回数）横断する。膜タンパク質は、細胞の内側及び外側に対するその末端及び膜通過セグメントのトポロジーに応じて、Ｉ型、ＩＩ型又はＩＩＩ型と定義され得る。Ｉ型膜タンパク質は、単一膜貫通領域を有し、タンパク質のＮ末端が細胞の脂質二重層の細胞外側に存在し、且つタンパク質のＣ末端が細胞質側に存在するように配向される。ＩＩ型膜タンパク質も単一膜貫通領域を有するが、タンパク質のＣ末端が細胞の脂質二重層の細胞外側に存在し、且つタンパク質のＮ末端が細胞質側に存在するように配向される。ＩＩＩ型膜タンパク質は、多重膜貫通セグメントを有し、膜貫通セグメントの数並びにＮ末端及びＣ末端の位置に基づいてさらに下位分類され得る。
いくつかの実施形態において、本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、Ｉ型単回通過膜タンパク質に由来する。いくつかの実施形態において、多回通過膜タンパク質由来の膜貫通ドメインも、本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドにおける使用に適する場合がある。多回通過膜タンパク質は、複合（少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ又はそれを超える数）のアルファヘリックス又はベータシート構造を含み得る。好ましくは、多回通過膜タンパク質のＮ末端及びＣ末端は、脂質二重層の両側に存在し、例えば、タンパク質のＮ末端は、脂質二重層の細胞質側に存在し、タンパク質のＣ末端は、細胞外側に存在する。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドがＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン及びＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインの両方を含む場合、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、同じＴＣＲサブユニット又は異なるＴＣＲサブユニットに由来し得る。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインの両方を含み、細胞内ドメインがＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む場合、膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＣＤ１５４、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＫＩＲＤＳ２、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８）、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＩＬ－２Ｒベータ、ＩＬ－２Ｒガンマ、ＩＬ－７Ｒ ａ、ＩＴＧＡ１、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴ ＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤＩＯＯ（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙｌ０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ及び／又はＮＫＧ２Ｃを含む、ＴＣＲサブユニットではないタンパク質の膜貫通に由来し得る。
いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域上のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接するＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態において、そのような細胞外ドメインは、シグナルペプチドを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じである。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じである。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニット、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニット及び細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、全て同じである。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニット、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニット及び細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、全て異なる。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じであるが、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じであるが、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じであるが、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＣＤ３ε膜貫通ドメインに隣接するＣＤ３ε細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＣＤ３γ膜貫通ドメインに隣接するＣＤ３γ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＣＤ３δ膜貫通ドメインに隣接するＣＤ３δ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲα膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲα細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲβ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲβ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲγ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲγ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲδ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲδ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδの群から選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接する前記ＴＣＲサブユニットの定常領域のみを含む。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲα膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲα定常領域（ＴＣＲα可変領域及びシグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲβ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲβ定常領域（ＴＣＲβ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲγ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲγ定常領域（ＴＣＲγ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域においてＴＣＲδ膜貫通ドメインに隣接するＴＣＲδ定常領域（ＴＣＲδ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３ε細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）、ＣＤ３ε膜貫通ドメイン及びＣＤ３ε細胞内ドメインを含み、ＣＤ３εシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３εなどである（以下では構築物「ｅ」とも称される）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）、ＣＤ３γ膜貫通ドメイン及びＣＤ３γ細胞内ドメインを含み、ＣＤ３γシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３γなどである（以下では構築物「ｇ」とも称される）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δ細胞外ドメイン（シグナルペプチドを含まない）、ＣＤ３δ膜貫通ドメイン及びＣＤ３δ細胞内ドメインを含み、ＣＤ３δシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３δなどである（以下では構築物「ｄ」とも称される）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３ε膜貫通ドメイン及びＣＤ３ε細胞内ドメインを含み、いかなるＣＤ３ε細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｅ」とも称される、配列番号４０）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γ膜貫通ドメイン及びＣＤ３γ細胞内ドメインを含み、いかなるＣＤ３γ細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｇ」とも称される、配列番号４１）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δ膜貫通ドメイン及びＣＤ３δ細胞内ドメインを含み、いかなるＣＤ３δ細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｄ」とも称される、配列番号４２）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα定常領域（ＴＣＲα可変領域及びシグナルペプチドを含まない）、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及びＴＣＲα細胞内ドメイン（以下では構築物「ｔａＣ」とも称される、配列番号３２）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβ定常領域（ＴＣＲβ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及びＴＣＲβ細胞内ドメイン（以下では構築物「ｔｂＣ」とも称される、配列番号３３）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγ定常領域（ＴＣＲγ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及びＴＣＲγ細胞内ドメイン（以下では構築物「ｔｇＣ」とも称される、配列番号３６）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδ定常領域（ＴＣＲδ可変領域及びシグナルペプチドを含まない）、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及びＴＣＲδ細胞内ドメイン（以下では構築物「ｔｄＣ」とも称される、配列番号３７）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα膜貫通ドメイン及びＴＣＲα細胞内ドメインを含み、いかなるＴＣＲα細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｔａ」とも称される、配列番号３４）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβ膜貫通ドメイン及びＴＣＲβ細胞内ドメインを含み、いかなるＴＣＲβ細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｔｂ」とも称される、配列番号３５）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγ膜貫通ドメイン及びＴＣＲγ細胞内ドメインを含み、いかなるＴＣＲγ細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｔｇ」とも称される、配列番号３８）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδ膜貫通ドメイン及びＴＣＲδ細胞内ドメインを含み、いかなるＴＣＲδ細胞外ドメインも含まない（以下では構築物「ｓｔｄ」とも称される、配列番号３９）。
ヒンジ領域
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、細胞外ヒンジ領域（以下では「ＳＴＳヒンジ領域」とも称される）を含む。いくつかの実施形態において、ＳＴＳヒンジ領域は、ＴＣＲサブユニットのヒンジ領域又はそのフラグメント、例えばキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来する同じＴＣＲサブユニット（例えば、ＣＤ３ε）のヒンジ領域を含む（例えば、「膜貫通ドメイン」サブセクションを参照されたい）。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来する場合（例えば、ＣＤ３ε）と比較して、異なるＴＣＲサブユニットに由来する（例えば、ＣＤ３γ）。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、細胞外ヒンジ領域（以下では「ＳＴＳヒンジ領域」とも称される）を含む。いくつかの実施形態において、ＳＴＳヒンジ領域は、ＴＣＲサブユニットのヒンジ領域又はそのフラグメント、例えばキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来する同じＴＣＲサブユニット（例えば、ＣＤ３ε）のヒンジ領域を含む（例えば、「膜貫通ドメイン」サブセクションを参照されたい）。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来する場合（例えば、ＣＤ３ε）と比較して、異なるＴＣＲサブユニットに由来する（例えば、ＣＤ３γ）。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドがいかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ）も含まない場合、ヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）及び任意選択により追加のリンカー（ＧＳリンカーなど）は、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインと、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である場合）又は細胞外標的結合ドメイン（細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である場合）とを接続するために使用される。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、細胞表面上の２つのキメラ受容体ポリペプチドの二量体化を促進する（例えば、図７～９を参照されたい）。
いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、天然に存在するタンパク質のヒンジ領域である。ヒンジ領域を含むことが当技術分野で公知である任意のタンパク質のヒンジ領域は、本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドにおける使用に適している。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、天然に存在するタンパク質のヒンジ領域の少なくとも一部であり、キメラ受容体ポリペプチドに可動性を与える。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、ＣＤ８のヒンジ領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒンジは、配列番号３１のアミノ酸配列を含む。
ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ又はＩｇＤ抗体などの抗体のヒンジ領域も、本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドにおける使用に適している。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、抗体の定常ドメインであるＣＨ１及びＣＨ２を結合するヒンジ領域である。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、抗体のものであり、抗体のヒンジ領域及びその抗体の１つ又は複数の定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、抗体のヒンジ領域及びその抗体のＣＨ３定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、抗体のヒンジ領域及びその抗体のＣＨ２定常領域及びＣＨ３定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は、ＩｇＧ抗体、ＩｇＡ抗体、ＩｇＭ抗体、ＩｇＥ抗体又はＩｇＤ抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ＩｇＧ１抗体、ＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ３抗体又はＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、ＩｇＧ１抗体のヒンジ領域及びＣＨ２定常領域及びＣＨ３定常領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、ＩｇＧ１抗体のヒンジ領域及びＣＨ３定常領域を含む。
天然に存在しないペプチドも、本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチドのヒンジ領域として使用され得る。
ヒンジ領域は、約５～１００アミノ酸、例えば約５～１５アミノ酸、１５～７５アミノ酸、２０～５０アミノ酸又は３０～６０アミノ酸のいずれか１つを含有し得る。いくつかの実施形態において、ヒンジ領域は、長さが約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０又は７５アミノ酸の少なくともいずれか１つであり得る。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのヒンジ領域及び膜貫通ドメインは、同じ分子（例えば、同じ免疫細胞共刺激剤、免疫細胞共阻害剤、ＴＣＲサブユニット又はＴ細胞共受容体）に由来する。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドのヒンジ領域は、ＴＣＲαヒンジ領域又はそのフラグメントを含み、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲα膜貫通ドメイン又はそのフラグメントを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドのヒンジ領域及び膜貫通ドメインは、異なる分子（例えば、異なる免疫細胞共刺激剤、免疫細胞共阻害剤、ＴＣＲサブユニット又はＴ細胞共受容体）に由来する。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドのヒンジ領域は、４－１ＢＢヒンジ領域又はそのフラグメントを含み、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３ε膜貫通ドメイン又はそのフラグメントを含む。
細胞内ドメイン
いくつかの実施形態におけるキメラ受容体ポリペプチドは、細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδなど、ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、シグナル伝達ドメイン（例えば、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δの細胞内ドメイン）を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、シグナル伝達ドメイン（例えば、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδの細胞内ドメイン）を欠く。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、共刺激ドメインを欠く。
いくつかの実施形態におけるキメラ受容体ポリペプチドは、細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδなど、ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、シグナル伝達ドメイン（例えば、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δの細胞内ドメイン）を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、シグナル伝達ドメイン（例えば、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδの細胞内ドメイン）を欠く。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、共刺激ドメインを欠く。
いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３εの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３γの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３δの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。
いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＴＣＲαの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＴＣＲβの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＴＣＲγの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＴＣＲδの細胞内ドメインの一部又は全体を含む。
いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含まない。本明細書で使用される「ＩＴＡＭ」は、一般に、多くの免疫細胞において発現されるシグナル伝達分子の尾部に存在する保存タンパク質モチーフである。ＩＴＡＭは、６～８つのアミノ酸によって区切られるアミノ酸配列ＹｘｘＬ／Ｉの反復２つを含み得、ここで、各ｘは、独立して、任意のアミノ酸であり、保存モチーフＹｘｘＬ／Ｉｘ（６～８）ＹｘｘＬ／Ｉを生成する。シグナル伝達分子（例えば、ＣＤ３ζ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ）内のＩＴＡＭは、細胞内のシグナル伝達にとって重要であり、シグナル伝達は、少なくとも部分的には、シグナル伝達分子の活性化後のＩＴＡＭにおけるチロシン残基のリン酸化（例えば、ＬｃｋなどのＳｒｃファミリーキナーゼによる）によって媒介される。ＩＴＡＭは、シグナル伝達経路に関与する他のタンパク質のドッキング部位としても機能し得る。例示的なＩＴＡＭを含有する一次細胞質シグナル伝達配列としては、ＣＤ３ζ、ＦｃＲガンマ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃＲベータ（ＦｃイプシロンＲｉｂ）、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ及びＣＤ６６ｄに由来するものが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の細胞内ドメインは、ＩＴＡＭ含有分子に由来しない。例えば、いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε又はそれらのフラグメントの細胞内ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される細胞内ドメインは、ＩＴＡＭ含有分子に由来するが、ＩＴＡＭ配列を含まない。例えば、いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＩＴＡＭ配列が削除されたＣＤ３γ、ＣＤ３δ又はＣＤ３εの細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、チロシンキナーゼＬｃｋを動員及びそれと相互作用することができるアミノ酸の配列を含む。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと同じである。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインが由来するＴＣＲサブユニットは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインが由来するＴＣＲサブユニットと異なる。
リンカー
いくつかの実施形態において本明細書に記載されるキメラ受容体ポリペプチドは、本明細書に記載される１つ以上のドメイン間にリンカー（例えば、ペプチドリンカー）を含み得る。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第２のリンカーをさらに含む。細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端にある場合、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端及び膜貫通ドメインのＮ末端（又は膜貫通ドメインのＮ末端に存在する場合、細胞外ヒンジ領域のＮ末端）は、第２のリンカーによって接続されている。細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端にある場合、細胞外標的結合ドメインのＣ末端及び膜貫通ドメインのＮ末端（又は膜貫通ドメインのＮ末端に存在する場合、細胞外ヒンジ領域のＮ末端）は、第２のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメイン内に含まれる２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）は、第３のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン内に含まれる２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ）は、第４のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが細胞外ヒンジ領域を含む場合、細胞外ヒンジ領域は、リンカーを介して膜貫通ドメインのＮ末端にも連結され得る。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインのＣ末端と、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインのＮ末端との間に位置するリンカーが存在する。本明細書に記載の１つ以上のドメインを接続するリンカーは、同じであるか、又は配列及び／若しくは長さが異なるなど、異なり得る。
いくつかの実施形態において本明細書に記載されるキメラ受容体ポリペプチドは、本明細書に記載される１つ以上のドメイン間にリンカー（例えば、ペプチドリンカー）を含み得る。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第２のリンカーをさらに含む。細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端にある場合、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端及び膜貫通ドメインのＮ末端（又は膜貫通ドメインのＮ末端に存在する場合、細胞外ヒンジ領域のＮ末端）は、第２のリンカーによって接続されている。細胞外標的結合ドメインが細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端にある場合、細胞外標的結合ドメインのＣ末端及び膜貫通ドメインのＮ末端（又は膜貫通ドメインのＮ末端に存在する場合、細胞外ヒンジ領域のＮ末端）は、第２のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメイン内に含まれる２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）は、第３のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメイン内に含まれる２つ以上（２つなど）のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ）は、第４のリンカーによって接続されている。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが細胞外ヒンジ領域を含む場合、細胞外ヒンジ領域は、リンカーを介して膜貫通ドメインのＮ末端にも連結され得る。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインのＣ末端と、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインのＮ末端との間に位置するリンカーが存在する。本明細書に記載の１つ以上のドメインを接続するリンカーは、同じであるか、又は配列及び／若しくは長さが異なるなど、異なり得る。
リンカーは、任意の適切な長さのペプチドリンカーであり得る。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、５０、７５、１００又はそれより長いアミノ酸長の少なくともいずれかである。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、約１００、７５、５０、４０、３５、３０、２５、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５又はそれより短いアミノ酸長のいずれか以下である。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、約１アミノ酸～約１０アミノ酸長、約２アミノ酸～約１５アミノ酸長、約３アミノ酸～約１２アミノ酸長、約４アミノ酸～約１０アミノ酸長、約５アミノ酸～約９アミノ酸長、約６アミノ酸～約８アミノ酸長、約１アミノ酸～約２０アミノ酸長、約１０アミノ酸～約２０アミノ酸長、約２１アミノ酸～約３０アミノ酸長、約１０アミノ酸～約２５アミノ酸長、約５アミノ酸～約１５アミノ酸長、約１５アミノ酸～約２０アミノ酸長、約１アミノ酸～約３０アミノ酸長、約５アミノ酸～約３０アミノ酸長、約２アミノ酸～約２０アミノ酸長、約５アミノ酸～約２５アミノ酸長、約５アミノ酸～約２４アミノ酸長、約６アミノ酸～約２３アミノ酸長、約５アミノ酸～約２２アミノ酸長、約６アミノ酸～約２１アミノ酸長、約７アミノ酸～約２０アミノ酸長、約１０アミノ酸～約３０アミノ酸長、約３０アミノ酸～約４０アミノ酸長、約４０アミノ酸～約５０アミノ酸長、約３０アミノ酸～約５０アミノ酸長、約５０アミノ酸～約１００アミノ酸長、約１アミノ酸～約１００アミノ酸長、約２アミノ酸～約１９アミノ酸長、約３アミノ酸～約１８アミノ酸長、約４アミノ酸～約１７アミノ酸長、約４アミノ酸～約１６アミノ酸長、約４アミノ酸～約１５アミノ酸長、約４アミノ酸～約１４アミノ酸長、約４アミノ酸～約１３アミノ酸長、約４アミノ酸～約１２アミノ酸長、約４アミノ酸～約１１アミノ酸長、約４アミノ酸～約９アミノ酸長、約４アミノ酸～約８アミノ酸長、約４アミノ酸～約７アミノ酸長又は約４アミノ酸～約６アミノ酸長である。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０アミノ酸長のいずれかである。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０アミノ酸長のいずれかである。
ペプチドリンカーは、天然に存在する配列又は天然に存在しない配列を有し得る。例えば、重鎖のみ抗体のヒンジ領域に由来する配列をリンカーとして使用し得る。例えば、国際公開第１９９６／３４１０３号パンフレットを参照されたい。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、変異ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、配列番号２１
のアミノ酸配列を含むＩｇＧ４－Ｆｃ－リンカーなどのＩｇＧ４－Ｆｃ－リンカーである。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、αヘリックスリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、可動性リンカーである。例示的な可動性リンカーとしては、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ（配列番号９）、グリシン－セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）ｎ（配列番号１０）を含む）、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号１１）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号１２）又は（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号１３）、ここで、ｎは、１、２、３、４、５などの少なくとも１の整数である）、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマー及び当技術分野で公知の他の可動性リンカーが挙げられる。グリシン及びグリシン－セリンポリマーは、比較的構造化されておらず、したがって成分間の中性テザーとして機能できる可能性がある。グリシンは、アラニンよりも有意に多くのｐｈｉ－ｐｓｉ空間にアクセスし、より長い側鎖を有する残基よりもはるかに制限が少ない（Ｓｃｈｅｒａｇａ，Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍ．１１ １７３－１４２（１９９２）を参照されたい）。例示的な可動性リンカーには、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号１４）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号１５）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号１６）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号１７）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号１８）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号１９）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号２０）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（配列番号５）、Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（配列番号６）、Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号７）、Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号８）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号２）、ＧＧＧＧＳ（配列番号１）、ＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６７）、ＧＧＧＧＳＳ（配列番号６８）などが含まれるが、これらに限定されない。当業者は、キメラ受容体ポリペプチドの設計が、全て又は部分的に可動性であるリンカーを含み得、その結果、リンカーは、可動性リンカー部分及び所望のキメラ受容体ポリペプチドを提供するためのより可動性の低い構造を与える１つ以上の部分を含み得ることを認識するであろう。
いくつかの実施形態において、リンカー（例えば、ペプチドリンカー）は、安定なリンカー（プロテアーゼ、特にマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）によって切断可能でない）である。
いくつかの実施形態において、リンカー（例えば、ペプチドリンカー）は、切断可能なリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、プロテアーゼ基質切断配列、例えばＭＭＰ基質切断配列を含む。ＭＭＰによって切断できる基質配列は、広く研究されてきた。例えば、ＰＬＧＬＡＧの配列（配列番号２５）は、大半のＭＭＰによって切断することができる。いくつかの実施形態において、プロテアーゼ切断部位は、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９又はそれらの組み合わせによって認識される。
シグナルペプチド
本出願のキメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチド（シグナル配列としても知られている）を含み得る。一般に、シグナルペプチドは、ポリペプチドを、細胞における望ましい部位に標的指向させるペプチド配列である。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドを細胞の分泌経路に標的指向させ、キメラ受容体ポリペプチドの脂質二重層への組み込み及び固定を可能にする。本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチド（及び／又は以下に記載されるサイトカイン）における使用に適した、天然に存在するタンパク質のシグナル配列又は天然に存在しない合成シグナル配列を含むシグナルペプチドは、当業者に明らかであろう。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、ＣＤ８α、ＧＭ－ＣＳＦ受容体、ＩＬ－３及びＩｇＧ１重鎖からなる群から選択される分子に由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、ＣＤ８αに由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインが由来するのと同じ分子に由来する（又はキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接して細胞外ドメインが存在するＴＣＲサブユニット、例えばＣＤ３ε細胞外ドメインと同じである）。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３εに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３εに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３ε細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３εに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３γに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３γに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３γ細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３γに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３δに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３δに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３δ細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３δに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲαに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲαに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲα細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲα定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲαに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲβに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲβに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲβ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲβ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲβに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲγに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲγに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲγ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲγ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲγに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲδに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲδに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲδ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲδ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲδに由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインが由来ＴＣＲサブユニットと異なる分子に由来する（又はキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接して細胞外ドメインが存在するＴＣＲサブユニット、例えばＣＤ３ε細胞外ドメインと異なる）。
本出願のキメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチド（シグナル配列としても知られている）を含み得る。一般に、シグナルペプチドは、ポリペプチドを、細胞における望ましい部位に標的指向させるペプチド配列である。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドを細胞の分泌経路に標的指向させ、キメラ受容体ポリペプチドの脂質二重層への組み込み及び固定を可能にする。本明細書で説明されるキメラ受容体ポリペプチド（及び／又は以下に記載されるサイトカイン）における使用に適した、天然に存在するタンパク質のシグナル配列又は天然に存在しない合成シグナル配列を含むシグナルペプチドは、当業者に明らかであろう。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、ＣＤ８α、ＧＭ－ＣＳＦ受容体、ＩＬ－３及びＩｇＧ１重鎖からなる群から選択される分子に由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、ＣＤ８αに由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインが由来するのと同じ分子に由来する（又はキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接して細胞外ドメインが存在するＴＣＲサブユニット、例えばＣＤ３ε細胞外ドメインと同じである）。例えば、いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３εに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３εに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３ε細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３εに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３γに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３γに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３γ細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３γに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＣＤ３δに由来する膜貫通ドメイン、ＣＤ３δに由来する細胞内ドメイン及び／又はＣＤ３δ細胞外ドメインを含む場合、シグナルペプチドもＣＤ３δに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲαに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲαに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲα細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲα定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲαに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲβに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲβに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲβ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲβ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲβに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲγに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲγに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲγ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲγ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲγに由来する。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドが、ＴＣＲδに由来する膜貫通ドメイン、ＴＣＲδに由来する細胞内ドメイン及び／又はＴＣＲδ細胞外ドメイン（例えば、ＴＣＲδ定常領域）を含む場合、シグナルペプチドもＴＣＲδに由来する。いくつかの実施形態において、シグナルペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメイン及び／又は細胞内ドメインが由来ＴＣＲサブユニットと異なる分子に由来する（又はキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接して細胞外ドメインが存在するＴＣＲサブユニット、例えばＣＤ３ε細胞外ドメインと異なる）。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＶＨＨ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなどのｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＶＨＨ、ＤＡＲＰｉｎ）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリ
ンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、第１、第２及び第３のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２及び／又は第３のＴＣＲサブユニットは、異なる。第１、第２、第３及び第４のリンカーは、本明細書に記載のリンカーのいずれかであり得る。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
ンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－（細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＣＤ３ ｓｄＡｂなど））－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ１（第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－細胞外標的結合ドメインのＶＨＨ２（第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂなど））－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域などの第３のＴＣＲサブユニットの）細胞外ドメイン－任意選択による細胞外ヒンジドメイン（例えば、ＣＤ８ヒンジ）－（例えば、第１のＴＣＲサブユニットの）膜貫通ドメイン－（例えば、第２のＴＣＲサブユニットの）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、第１、第２及び第３のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２及び／又は第３のＴＣＲサブユニットは、異なる。第１、第２、第３及び第４のリンカーは、本明細書に記載のリンカーのいずれかであり得る。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかのアミノ酸配列を含む。
キメラ受容体ポリヌクレオチドをコードする核酸
本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸分子（単離された核酸など）も企図され、以下では「ＳＴＳポリペプチドをコードする核酸」又は「ＳＴＳをコードする核酸」とも称される。本発明は、本発明の核酸が挿入されるベクターも提供する。
本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸分子（単離された核酸など）も企図され、以下では「ＳＴＳポリペプチドをコードする核酸」又は「ＳＴＳをコードする核酸」とも称される。本発明は、本発明の核酸が挿入されるベクターも提供する。
例えば、いくつかの実施形態において、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（例えば、単離された核酸）が提供され、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）ＴＣＲサブユニット（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第３のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｉ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（例えば、単離された核酸）が提供され、ここで、第１、第２及び第３のＴＣＲサブユニットは、全てＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第３のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第３のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択によるヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｉ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（例えば、単離された核酸）が提供され、ここで、第１、第２及び第３のＴＣＲサブユニットは、全てＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、第１、第２及び第３のＴＣＲサブユニットは、全て同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２及び／又は第３のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、配列番号４３～４８、５１～５８及び６１～６３のいずれかのアミノ酸配列を含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（例えば、単離された核酸）が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の核酸のいずれかを含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供される。いくつかの実施形態において、ベクターは、本明細書に記載のいずれかの核酸の２つ以上（２つなど）を含む。いくつかの実施形態において、２つの核酸は、それぞれ別個のプロモーターを有する（同じであるか又は異なり得る）。いくつかの実施形態において、２つの核酸は、同じプロモーター（例えば、ｈＥＦ１α）下で調節される。いくつかの実施形態において、２つ以上（２つなど）のＳＴＳをコードする核酸は、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａ並びに内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）配列をコードする核酸のいずれかなどの１つ以上の連結配列を介して接続される。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）プロモーター；ｂ）第１のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸；ｃ）連結配列（例えば、ＩＲＥＳ又はＰ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａのいずれかをコードする核酸）；及びｄ）第２のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第２の核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され；ここで、第１のキメラ受容体ポリペプチドは、ａ）第１の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第１の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第１の細胞外標的結合ドメイン；ｂ）第５のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第１のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第１の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第５のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第１の膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第１の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され；ここで、第２のキメラ受容体ポリペプチドは、ａ）第２の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第２の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第２の細胞外標的結合ドメイン；ｂ）第６のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第２のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第２の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第６のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第３のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２の膜貫通ドメイン；及びｄ）第４のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第２の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第３のＴＣＲサブユニット及び第４のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１のキメラ受容体ポリペプチドと第２のキメラ受容体ポリペプチドは、同じドメイン配置を有する（例えば、細胞外標的結合ドメインが両方、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端にあるか、細胞外標的結合ドメインが両方、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端にあるか、両方がＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含むか又は含まないか、且つ／又は両方がヒンジ領域を含むか又は両方含まない）。いくつかの実施形態において、第１のキメラ受容体ポリペプチドと第２のキメラ受容体ポリペプチドは、異なるドメイン配置を有する（例えば、１つは細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端に細胞外標的結合ドメインを含み、もう１つは細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端に細胞外標的結合ドメインを含むか、２つのキメラ受容体ポリペプチドが異なる数の標的抗原結合ドメイン及び／又はＴＣＲ抗原結合ドメインを有するか、１つはＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含み、もう１つは含まないか、且つ／又は１つはヒンジ領域を含み、もう１つはヒンジ領域を含まない）。したがって、いくつかの実施形態において、ａ）プロモーター；ｂ）第１のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸；ｃ）連結配列（例えば、ＩＲＥＳ又はＰ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａのいずれかをコードする核酸）；及びｄ）第２のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第２の核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され；ここで、第１のキメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択による第１のシグナルペプチド；ｂ）第１の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第１の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第１の細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）第５のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第１のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第１の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第５のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第７のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第７のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択による第１のヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第１の膜貫通ドメイン；及びｉ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第１の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され；ここで、第２のキメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択による第２のシグナルペプチド；ｂ）第２の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第２の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第２の細胞外標的結合ドメイン；ｃ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）第６のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第２のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第２の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第６のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｅ）任意選択による第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第８のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第８のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択による第２のヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第３のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２の膜貫通ドメイン；及びｉ）第４のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第２の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第３のＴＣＲサブユニット及び第４のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、ａ）プロモーター；ｂ）第１のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸；ｃ）連結配列（例えば、ＩＲＥＳ又はＰ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａのいずれかをコードする核酸）；及びｄ）第２のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第２の核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され；ここで、第１のキメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択による第１のシグナルペプチド；ｂ）第５のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第１のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第１の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第５のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）任意選択による第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）第１の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第１の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第１の細胞外標的結合ドメイン；ｅ）任意選択による第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第７のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第７のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択による第１のヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第１の膜貫通ドメイン；及びｉ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第１の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され；ここで、第２のキメラ受容体ポリペプチドは、Ｎ’からＣ’まで、ａ）任意選択による第２のシグナルペプチド；ｂ）第６のＴＣＲサブユニットに特異的に結合する第２のＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む第２の細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどの第６のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）任意選択による第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｄ）第２の標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する第２の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎなど）を含む第２の細胞外標的結合ドメイン；ｅ）任意選択による第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）；ｆ）任意選択による第８のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン（例えば、第８のＴＣＲサブユニットの非シグナルペプチド及び／又は非可変領域）；ｇ）任意選択による第２のヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ）；ｈ）第３のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２の膜貫通ドメイン；及びｉ）第４のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む第２の細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第３のＴＣＲサブユニット及び第４のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７及び第８のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７及び／又は第８のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２及び第７のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、同じ（例えば、ＴＣＲα）であり、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、同じ（例えば、ＴＣＲβ）であるが、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットと異なる。いくつかの実施形態において、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、第３、第４及び第８のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、同じである。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカーは、異なる。いくつ
かの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー及びＩｇＧ４－Ｆｃリンカーから選択される。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、第１及び第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の標的抗原結合ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂである。
かの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー及びＩｇＧ４－Ｆｃリンカーから選択される。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、第１及び第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２のＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の標的抗原結合ドメインは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂである。
いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２４）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（ウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクターなど）が提供され、ここで、ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第１のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第２のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ（例えば、配列番号２６）－第３のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ（例えば、配列番号２７）－第４のリンカー（例えば、ＧＳリンカー）－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び／又は第４のリンカーは、異なる。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー及びＩｇＧ４－Ｆｃリンカーから選択される。いくつかの実施形態において、第１、第２、第３及び第４のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、異なる。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかである。いくつかの実施形態において、第１及び／又は第２の標的抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。
簡潔には、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸によるキメラ受容体ポリペプチドの発現は、核酸を適切な発現ベクターに挿入することによって達成することができ、その結果、核酸は、例えば、プロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモーター）及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む５’及び３’調節エレメントに作動可能に連結される。ベクターは、真核生物の宿主細胞における複製及び組み込みに適し得る。典型的なクローニング及び発現ベクターは、転写ターミネータ、翻訳ターミネータ、開始配列及び所望の核酸配列の発現を調節するのに有用なプロモーターを含有する。
核酸は、いくつかのタイプのベクターにクローン化することができる。例えば、核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス及びコスミドを含むが、これらに限定されないベクターにクローン化することができる。特に着目されるベクターには、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター及び配列決定ベクターが含まれる。
さらに、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供され得る。ウイルスベクター技術は、当技術分野で周知であり、例えばＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）及び他のウイルス学及び分子生物学の便覧に説明されている。ベクターとして有用なウイルスには、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルスが含まれるが、これらに限定されない。一般に、適切なベクターは、少なくとも１つの生物において機能的な複製起点、プロモーター配列、便宜的な制限エンドヌクレアーゼ部位及び１つ以上の選択可能なマーカーを含む（例えば、国際公開第０１／９６５８４号パンフレット；国際公開第０１／２９０５８号パンフレット；及び米国特許第６，３２６，１９３号明細書を参照されたい）。
多くのウイルスベースシステムが哺乳動物細胞への遺伝子導入のために開発されてきている。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達システムのための簡便なプラットフォームを提供する。当技術分野で公知の手法を用いて、選択した遺伝子をベクターに挿入し、レトロウイルス粒子にパッケージングすることができる。次に、組換えウイルスを単離し、インビボ又はエクスビボのいずれかで対象の細胞に送達することができる。多くのレトロウイルスシステムが当技術分野で公知である。いくつかの実施形態において、アデノウイルスベクターが使用される。多くのアデノウイルスベクターが当技術分野で公知である。いくつかの実施形態において、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなどのレトロウイルスに由来するベクターは、導入遺伝子の長期安定的な組み込み及び娘細胞におけるそれの増殖を可能にするため、長期遺伝子導入を達成するために好適なツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞に形質導入できるという点で、マウス白血病ウイルスなどの腫瘍レトロウイルスに由来するベクターよりもさらなる利点を有する。それらは、免疫原性が低いという追加の利点も有する。いくつかの実施形態において、レンチウイルスベクターは、ｐＬＶＸ－Ｐｕｒｏ又はその改変レンチウイルスベクターなど、Ｈ１Ｖ－１ベースのレンチウイルスベクターである。
追加のプロモーター型要素は、転写開始の頻度を調節する。典型的には、これらは、開始部位の３０～１１０ｂｐ上流の領域に位置するが、最近、多くのプロモーターが開始部位の下流にも機能的要素を含むことが示されている。プロモーター要素間のスペーシングは、可動性であることが多く、要素が互いに反転又は移動するときにプロモーター機能が維持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、活性が低下し始める前にプロモーターエレメント間のスペーシングを５０ｂｐ間隔に増加させることができる。プロモーターに応じて、個々の要素が協同的に又は独立して機能し、転写を活性化できるようである。
適切なプロモーターの一例は、前初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列の高レベルの発現を駆動することができる強力な構成的プロモーター配列である。適切なプロモーターの別の例は、伸長成長因子－１α（ＥＦ－１α）である。しかし、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ロングターミナルリピート（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター並びに限定されないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター及びクレアチンキナーゼプロモーターなどのヒト遺伝子プロモーターを含むが、これらに限定されない他の構成的プロモーター配列を使用し得る。このような構成的プロモーターの導入遺伝子発現を活発にする効率は、多数の研究において広く比較されている。例えば、Ｍｉｃｈａｅｌ Ｃ．Ｍｉｌｏｎｅらは、ＣＭＶ、ｈＥＦ１α、ＵｂｉＣ及びＰＧＫが、一次ヒトＴ細胞におけるキメラ受容体発現を活発にする効率を比較し、ｈＥＦ１αプロモーターが、導入遺伝子発現を最も多く誘導するだけでなく、ＣＤ４及びＣＤ８ヒトＴ細胞において最適に維持されることを結論付けた（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，１７（８）：１４５３－１４６４（２００９））。
誘導性プロモーターも本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使用は、そのような発現が望まれる場合にそれが作動可能に連結されるポリヌクレオチド配列の発現をオンにするか、又は発現が望まれない場合に発現をオフにすることができる分子スイッチを提供する。真核細胞における使用のための例示的な誘導性プロモーターシステムには、ホルモン調節エレメント、合成リガンド調節エレメント及び電離放射線調節エレメントが含まれるが、これらに限定されない。インビトロ又はインビボ哺乳動物システムで使用するためのさらなる例示的な誘導性プロモーターシステムは、Ｇｉｎｇｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５に概説されている。
本発明における使用のための例示的な誘導性プロモーターシステムは、Ｔｅｔシステムである。例示的な実施形態において、目的のポリヌクレオチドは、１つ以上のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）部位を含むプロモーターの制御下にある。非アクティブ状態では、Ｔｅｔリプレッサー（ＴｅｔＲ）は、ＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターからの転写を抑制する。活性状態、例えばテトラサイクリン（Ｔｃ）、アンヒドロテトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）又はそれらの活性類似体などの誘導剤の存在下において、誘導剤は、ＴｅｔＯからのＴｅｔＲの放出を引き起こし、それにより転写が起こることを可能にする。ドキシサイクリンは、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロキシ－１１－メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキサヒドロテトラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する抗生物質のテトラサイクリンファミリーのメンバーである。
一実施形態において、ＴｅｔＲは、哺乳動物細胞、例えばマウス又はヒト細胞での発現のためにコドン最適化される。大半のアミノ酸は、遺伝子コードの縮重のために複数のコドンによってコードされており、これは、核酸によってコードされるアミノ酸配列を一切変更することなく、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な変化を可能にする。しかし、多くの生物は、「コドンバイアス」（即ち所与のアミノ酸に対する特定のコドンの使用に対するバイアス）としても知られるコドン使用頻度の違いを示す。コドンバイアスは、特定のコドンのｔＲＮＡの優勢種の存在と相関することが多く、これによりｍＲＮＡ翻訳の効率が向上する。したがって、特定の生物（例えば、原核生物）に由来するコード配列は、コドン最適化を通して、異なる生物（例えば、真核生物）における改善された発現のために調整され得る。
Ｔｅｔシステムの他の特定のバリエーションには、以下の「Ｔｅｔ－Ｏｆｆ」及び「Ｔｅｔ－Ｏｎ」システムが含まれる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆシステムでは、転写は、Ｔｃ又はＤｏｘの存在下で非活性である。そのシステムでは、単純ヘルペスウイルスからのＶＰ１６の強力なトランス活性化ドメインに融合したＴｅｔＲから構成されるテトラサイクリン制御トランス活性化タンパク質（ｔＴＡ）が、テトラサイクリン応答性プロモーター要素（ＴＲＥ）の転写制御下にある標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（通常、ヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）の前初期プロモーターに由来する最小プロモーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列コンカテマーで構成される。Ｔｃ又はＤｏｘの非存在下では、ｔＴＡは、ＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏｘの存在下では、ｔＴＡは、ＴＲＥに結合できず、標的遺伝子からの発現は、不活性のままである。
逆に、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、転写は、Ｔｃ又はＤｏｘの存在下で活性である。Ｔｅｔ－Ｏｎシステムは、逆テトラサイクリン制御トランス活性化因子ｒｔＴＡに基づいている。ｔＴＡと同様に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサー及びＶＰ１６トランス活性化ドメインから構成される融合タンパク質である。しかし、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分の４アミノ酸の変化は、Ｄｏｘの存在下で標的導入遺伝子のＴＲＥ内のｔｅｔＯ配列のみを認識できるように、ｒｔＴＡの結合特性を変更する。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、ＴＲＥによって調節される標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによって刺激される。
別の誘導性プロモーターシステムは、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）由来のｌａｃリプレッサーシステムである。（Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）を参照されたい。ｌａｃリプレッサーシステムは、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に連結された目的のポリヌクレオチドの転写を調節することによって機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌａｃＲ）は、ＬａｃＯに結合し、それにより目的のポリヌクレオチドの転写が妨げられる。目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えばイソプロピル－β－Ｄ－チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
エンハンサーは、元来、同じＤＮＡ分子の離れた位置にあるプロモーターからの転写を増加させる遺伝子要素として検出された。長距離にわたって作用するこの能力は、原核生物の転写調節の古典的な研究ではほとんど前例がなかった。その後の研究では、エンハンサー活性を有するＤＮＡの領域がプロモーターによく類似して組織化されていることが示された。即ち、それらは、多くの個々の要素で構成され、それぞれが１つ以上の転写タンパク質に結合する。
ポリペプチド又はその一部の発現を評価するために、細胞に導入される発現ベクターは、選択可能なマーカー遺伝子又はレポーター遺伝子のいずれか又はその両方を含んで、ウイルスベクターを介してトランスフェクト又は感染することが求められる細胞の集団からの発現細胞の同定及び選択を容易にすることもができる。他の態様において、選択可能なマーカーは、別個のＤＮＡ片上に輸送され、コトランスフェクション手順において使用され得る。選択可能マーカー及びレポーター遺伝子は、共に宿主細胞における発現を可能にするために適切な調節配列を隣接させ得る。有用な選択可能なマーカーには、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子が含まれる。
レポーター遺伝子を使用して、トランスフェクトされる可能性のある細胞を同定し、調節配列の機能性を評価する。一般に、リポータ遺伝子は、レシピエント生物又は組織に存在しないか又はそれらによって発現されず、且つ何らかの容易に検出可能な特性、例えば酵素活性により、その発現が示されるポリペプチドをコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後、適切な時間でアッセイされる。好適なレポーター遺伝子として、ルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼをコードする遺伝子又は緑色蛍光性タンパク質遺伝子が挙げられ得る。好適な発現システムは、周知であり、公知の手法を用いて調製され得るか、又は市販のものから得ることができる。一般に、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示す最小の５’隣接領域を有する構築物がプロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子に連結され、プロモーター駆動型転写を調節する能力について薬剤を評価するために使用され得る。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（例えば、単離された核酸）が提供される。発現は、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベルで決定できる。ｍＲＮＡ発現のレベルは、ノーザンブロット法、定量ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ分析などの様々なよく知られた方法を使用して、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定することによって決定できる。タンパク質発現のレベルは、免疫細胞化学染色、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロット分析、発光分析、質量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析などを含む既知の方法で測定できる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含むベクター（レンチウイルスベクターなど）が提供され、これは、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターを含む。いくつかの実施形態において、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態において、プロモーターは、構成的である。いくつかの実施形態において、プロモーターは、ｈＥＦ１α又はサイトメガロウイルス前初期プロモーター（ＰＣＭＶ ＩＥ）である。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸及びキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は操作されたＴＣＲをコードする第２の核酸を含むベクター（レンチウイルスベクターなど）が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、第１のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸及び本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、第２のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第２の核酸を含むベクター（レンチウイルスベクターなど）が提供される。いくつかの実施形態において、２つの核酸は、それぞれ別個のプロモーターを有する。いくつかの実施形態において、２つの核酸は、同じプロモーター（誘導性プロモーターなど）の制御下にあり、２つの核酸は、連結配列を介して接続されている。いくつかの実施形態において、連結配列は、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ、ＢｍＩＦＶ ２Ａなどの自己切断２Ａペプチドをコードする。いくつかの実施形態において、連結配列は、Ｐ２Ａペプチド（例えば、配列番号６６を含む）又はＴ２Ａペプチドをコードする。いくつかの実施形態において、連結配列は、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）である。ＩＲＥＳは、キャップに依存しない方法で翻訳の開始を可能にするＲＮＡ要素である。いくつかの実施形態において、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態において、プロモーターは、構成的である（例えば、ｈＥＦ１α）。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸及びキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は操作されたＴＣＲをコードする第２の核酸は、別個のベクター上にある。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、第１のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第１の核酸及び本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、第２のキメラ受容体ポリペプチドをコードする第２の核酸は、別個のベクター上にある。
遺伝子を細胞に導入及び発現する方法は、当技術分野で知られている。発現ベクターに関連して、ベクターは、当技術分野における任意の方法により、宿主細胞、例えば哺乳動物、細菌、酵母又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的手段によって宿主細胞に移すことができる。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する物理的方法としては、リン酸カルシウム沈殿法、リポフェクション法、微粒子銃、マイクロインジェクション法、エレクトロポレーション法などが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を作製する方法は、当技術分野で周知である。いくつかの実施形態において、宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入は、リン酸カルシウムトランスフェクションによって実施される。
目的のポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための生物学的方法には、ＤＮＡ及びＲＮＡベクターの使用が含まれる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターは、哺乳動物、例えばヒトの細胞に遺伝子を挿入するために最も広く用いられる方法となっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルス１、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号明細書及び同第５，５８５，３６２号明細書を参照されたい。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する化学的手段としては、巨大分子複合体、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ並びに水中油エマルジョン、ミセル、混合ミセル及びリポソームを含む脂質ベースのシステムなどのコロイド分散システムが挙げられる。インビトロ及びインビボで送達媒体として使用するための例示的なコロイドシステムは、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
いくつかの実施形態において、ベクターは、非ウイルス性ベクターである。いくつかの実施形態において、ベクターは、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙ（ＳＢ）トランスポゾンシステム又はＰｉｇｇｙＢａｃトランスポゾンシステムなどのトランスポゾンである。いくつかの実施形態において、ベクターは、例えば、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）及びポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（エチレンイミン）（ＰＥＩ）及びデンドリマーを含む、ポリマーベースの非ウイルス性ベクターである。いくつかの実施形態において、ベクターは、カチオン性リポソーム、脂質ナノエマルジョン及び固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮ）など、カチオン性脂質ベースの非ウイルスベクターである。いくつかの実施形態において、ベクターは、ポリ－Ｌ－リジンなどのペプチドベースの遺伝子非ウイルスベクターである。ゲノム編集に適した既知の非ウイルスベクターのいずれかを使用して、本明細書に記載の核酸を免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）に導入することができる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＹｉｎ Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（２０１４）１５：５２１－５５５；Ａｒｏｎｏｖｉｃｈ ＥＬ ｅｔ ａｌ．“Ｔｈｅ Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙ ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ ｓｙｓｔｅｍ：ａ ｎｏｎ－ｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ．”Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．（２０１１）Ｒ１：Ｒ１４－２０；及びＺｈａｏ Ｓ．ｅｔ ａｌ．“ＰｉｇｇｙＢａｃ ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ ｖｅｃｔｏｒｓ：ｔｈｅ ｔｏｏｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｅ ｅｄｉｔｉｎｇ．”Ｔｒａｎｓｌ．Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０１６）５（１）：１２０－１２５を参照されたい。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸は、エレクトロポレーション、ソノポレーション、フォトポレーション、マグネトフェクション、ハイドロポレーションを含むが、これらに限定されない物理的方法によって免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）に導入される。
非ウイルス送達システムが利用される場合、例示的な送達ビヒクルは、リポソームである。宿主細胞への核酸の導入（インビトロ、エクスビボ又はインビボ）のために、脂質製剤の使用が企図される。別の態様において、核酸は、脂質と関連し得る。脂質に関連する核酸は、リポソームの水性内部に被包されているか、リポソームの脂質二重層に散在しているか、リポソームとオリゴヌクレオチドの両方に関連する連結分子を介してリポソームに付着しているか、リポソーム内に封入されているか、リポソームと複合体化しているか、脂質を含有する溶液に分散しているか、脂質と混合されているか、脂質と組み合わさっているか、脂質内に懸濁物として含有されているか、ミセルに含有されているか若しくは複合体化しているか又は他の方法で脂質と関連し得る。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクター関連組成物は、溶液中の特定の構造に限定されない。例えば、それらは、ミセルとして又は「崩壊した」構造を有する二層構造で存在し得る。それらは、単に溶液中に散在し、サイズ又は形状が均一でない凝集体も形成し得る。脂質は、天然に存在する脂質又は合成脂質であり得る脂肪性物質である。例えば、脂質には、細胞質中に天然に存在する脂肪滴並びに脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール及びアルデヒドなどの長鎖脂肪族炭化水素及びその誘導体を含む化合物のクラスが含まれる。
いくつかの実施形態において、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンシステムは、非ウイルスベクターとして使用される。Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンシステムは、ＤＮＡトランスポゾンが定義されたＤＮＡ配列をほぼランダムに宿主ゲノムへ正確に挿入し、それにより遺伝子発現の寿命を延ばす（複数世代にわたっても）ように操作されている。さらに、転位は、複数のタンデム統合の形成を回避し、これは、多くの場合、導入遺伝子の発現をオフにする結果となる。Ａｒｏｎｏｖｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（Ａｐｒｉｌ ２０１１）．“Ｔｈｅ Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙ ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ ｓｙｓｔｅｍ：ａ ｎｏｎ－ｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ”．Ｈｕｍ Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ．２０（Ｒ１）：Ｒ１４－Ｒ２０。
いくつかの実施形態において、ＰｉｇｇｙＢａｃ（ＰＢ）トランスポゾンシステムは、非ウイルスベクターとして使用される。ＰＢトランスポゾンシステムは、「カットアンドペースト」メカニズムを介してベクターと染色体との間で転置する。転位中、ＰＢトランスポザーゼは、トランスポゾンベクターの両端に位置するトランスポゾン特異的逆方向末端反復（ＩＴＲ）配列を認識し、ＴＴＡＡ染色体部位に統合するために内容物を元の位置から移動する。
宿主細胞における組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために、様々なアッセイが実施され得る。そのようなアッセイには、例えば、サザンブロット法、ノーザンブロット法、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの当業者によく知られた「分子生物学的」アッセイ；例えば免疫学的方法（ＥＬＩＳＡ及びウエスタンブロット法）又は本発明の範囲内に入る薬剤を同定するための本明細書に記載のアッセイにより、特定のペプチドの存在又は不存在を検出するなどの「生化学的」アッセイが含まれる。
キメラ受容体ポリペプチド（ＳＴＳポリペプチド）を発現する免疫細胞
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをその表面に発現する免疫細胞又は操作された哺乳動物免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、これを以下では「ＳＴＳ免疫細胞」又は「ＳＴＳ－Ｔ細胞」とも称する。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸（又はそのベクター）を含み、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、核酸から発現され、免疫細胞表面に局在化される。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、その細胞表面上にＣＡＲ又は操作されたＴＣＲをさらに発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、ＣＡＲ又は操作されたＴＣＲをコードする第２の核酸（キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸と同じベクター上又は異なるベクター上）をさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドは、操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の内因性ＴＣＲ複合体の発現（例えば、内因性ＴＣＲα／β及び／又はＣＤ３発現）に影響を及ぼさない。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをその表面に発現する免疫細胞又は操作された哺乳動物免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、これを以下では「ＳＴＳ免疫細胞」又は「ＳＴＳ－Ｔ細胞」とも称する。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸（又はそのベクター）を含み、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、核酸から発現され、免疫細胞表面に局在化される。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、その細胞表面上にＣＡＲ又は操作されたＴＣＲをさらに発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞（Ｔ細胞など）は、ＣＡＲ又は操作されたＴＣＲをコードする第２の核酸（キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸と同じベクター上又は異なるベクター上）をさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドは、操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の内因性ＴＣＲ複合体の発現（例えば、内因性ＴＣＲα／β及び／又はＣＤ３発現）に影響を及ぼさない。
本発明に有用な例示的な免疫細胞には、樹状細胞（未成熟樹状細胞及び成熟樹状細胞を含む）、Ｔリンパ球（ナイーブＴ細胞、エフェクターＴ細胞、メモリーＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）など）、単球、顆粒球及びそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。免疫細胞の亜集団は、当技術分野で知られている１つ以上の細胞表面マーカー（例えば、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１２３、ＣＤ５６、ＣＤ３４、ＣＤ１４、ＣＤ３３など）の存在又は不存在によって定義することができる。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔαβ細胞、Ｔγδ細胞、エフェクターＴ細胞、メモリーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、エフェクターＴ細胞である。
「免疫エフェクター細胞」は、免疫エフェクター機能を実行できる免疫細胞である。いくつかの実施形態において、免疫エフェクター細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行する。ＡＤＣＣを媒介する免疫エフェクター細胞の例としては、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞、好中球及び好酸球が挙げられる。
いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、ＣＤ４＋／ＣＤ８－、ＣＤ４－／ＣＤ８＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋、ＣＤ４－／ＣＤ８－又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、キメラ受容体ポリペプチドを発現し、ＣＤ２０＋又はＣＤ１９＋腫瘍細胞などの標的細胞に結合すると、ＩＬ－２、ＴＦＮ及び／又はＴＮＦを産生する。いくつかの実施形態において、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、キメラ受容体ポリペプチドを発現し、標的細胞に結合すると、抗原特異的標的細胞を溶解する。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、免疫細胞（例えば、免疫エフェクター細胞）は、造血幹細胞、多能性幹細胞、ｉＰＳ又は胚性幹細胞などの幹細胞から分化される。
操作された免疫細胞（例えば、免疫エフェクター細胞）は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び／又はさらなるＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）のいずれかをＴ細胞などの免疫細胞に導入することによって調製される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び／又はさらなるＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）は、単離された核酸のいずれか１つ又は本明細書に記載のベクターのいずれか１つをトランスフェクトすることによって免疫細胞（例えば、Ｔ細胞などの免疫エフェクター細胞）に導入される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸及びＣＡＲ／操作されたＴＣＲをコードする核酸は、別個のベクター上にある。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸及びＣＡＲ／操作されたＴＣＲをコードする核酸は、同じベクター上にある。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸及びＣＡＲ／操作されたＴＣＲをコードする核酸は、異なるプロモーター下で調節される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをコードする核酸及びＣＡＲ／操作されたＴＣＲをコードする核酸は、同じプロモーター下で調節される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び／又はさらなるＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）は、ＣＥＬＬ ＳＱＵＥＥＺＥ（登録商標）などのマイクロ流体システムに細胞を通過させながら、タンパク質を細胞膜に挿入することによって免疫細胞（例えば、Ｔ細胞などの免疫エフェクター細胞）に導入される（例えば、米国特許出願公開第２０１４０２８７５０９号明細書を参照されたい）。
遺伝子を細胞に導入及び発現する方法は、当技術分野で知られている。発現ベクターに関連して、ベクターは、当技術分野における任意の方法により、宿主細胞、例えば哺乳動物、細菌、酵母又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的手段によって宿主細胞に移すことができる。
医薬組成物が複数の操作された哺乳動物免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む場合、操作された哺乳動物免疫細胞は、免疫細胞型の特定の亜集団、免疫細胞型の亜集団の組み合わせ又は２つ以上の免疫細胞タイプの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、同種細胞集団に存在する。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、免疫細胞が濃縮された異種細胞集団に存在する。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、リンパ球である。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、リンパ球でない。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、養子免疫療法に適している。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、ＰＢＭＣである。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、ＰＢＭＣに由来する免疫細胞である。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、操作された哺乳動物細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。
いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ及びＣＤ３δなど、キメラ受容体ポリペプチドが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。遺伝子発現を破壊するための細胞の改変には、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ又はＴＡＬＥＮベースの遺伝子ノックアウト）などを含む、当技術分野で知られている任意のそのような技術が含まれる。
本明細書に記載の免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、キメラ受容体ポリペプチドをコードする任意の数（１、２、３、４、５、１０、５０、１００、１０００又はそれを超える数のいずれかなど）の核酸を含み得る。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、核酸の単一のコピーを含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、核酸の複数のコピーを含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上の核酸を含み、それぞれが異なるキメラ受容体ポリペプチドをコードする。異なるキメラ受容体ポリペプチドは、同じＴＣＲ複合体に存在し得る。代替的に、異なるキメラ受容体ポリペプチドは、それぞれ異なるＴＣＲ複合体に組み込まれる。
本明細書に記載の核酸は、１つ以上のタンパク質コード配列及び任意選択により１つ以上のプロモーターを含む異種遺伝子発現カセットに存在し得る。いくつかの実施形態において、異種遺伝子発現カセットは、単一のタンパク質コード配列を含む。いくつかの実施形態において、異種遺伝子発現カセットは、単一のプロモーターによって駆動される２つ以上のタンパク質コード配列を含む（即ちポリシストロン性）。いくつかの実施形態において、異種遺伝子発現カセットは、１つ以上の調節配列（５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、エンハンサー配列、ＩＲＥＳ、転写終結配列など）、組換え部位、１つ以上の選択マーカー（抗生物質耐性遺伝子、レポーター遺伝子など）、シグナル配列又はそれらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸は、分泌のためのシグナル配列（例えば、シグナルペプチド）のコード配列をさらに含む。
核酸は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）に一過性に又は安定的に組み込まれ得る。いくつかの実施形態において、核酸は、免疫細胞において一過性に発現される。例えば、核酸は、異種遺伝子発現カセットを含む染色体外アレイの免疫細胞の核に存在し得る。異種核酸は、ウイルス又は非ウイルス法を含む、当技術分野で知られている任意のトランスフェクション又は形質導入法を使用して免疫細胞に導入され得る。例示的な非ウイルス性トランスフェクション法には、リン酸カルシウム、デンドリマー、リポソーム又はカチオン性ポリマー（例えば、ＤＥＡＥ－デキストラン又はポリエチレンイミン）を使用するなどの化学ベースのトランスフェクション；エレクトロポレーション、細胞圧搾、ソノポレーション、光トランスフェクション、インペールフェクション、プロトプラスト融合、流体力学的送達又はトランスポゾンなどの非化学的方法；遺伝子銃、マグネクトフェクション又はマグネットアシストトランスフェクション、粒子衝突などの粒子ベースの方法；及びヌクレオフェクションなどのハイブリッド法が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、核酸は、ＤＮＡである。いくつかの実施形態において、核酸は、ＲＮＡである。いくつかの実施形態において、核酸は、直鎖状である。いくつかの実施形態において、核酸は、環状である。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の核酸は、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）のゲノムに存在する。例えば、核酸は、ウイルス性の組み込み、ランダムな組み込み、相同組換え法並びに部位特異的リコンビナーゼ又はインテグラーゼ、トランスポザーゼ、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ（登録商標））、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９及びジンクフィンガーヌクレアーゼの使用などの部位特異的組み込み法を含むが、これらに限定されない、当技術分野で知られている任意の方法によって免疫細胞のゲノムに組み込まれ得る。いくつかの実施形態において、核酸は、免疫細胞のゲノムの特異的に設計された遺伝子座に組み込まれる。いくつかの実施形態において、核酸は、免疫細胞のゲノムの組み込みホットスポットに組み込まれる。いくつかの実施形態において、核酸は、免疫細胞のゲノムのランダムな遺伝子座に組み込まれる。核酸の複数のコピーが単一の免疫細胞に存在する場合、核酸は、免疫細胞のゲノムの複数の遺伝子座に組み込まれ得る。
いくつかの実施形態において、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。異なるキメラ受容体ポリペプチドは、以下のドメイン：ａ）細胞外標的結合ドメイン；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）膜貫通ドメイン；及びｄ）細胞内ドメインの１つ以上において互いに異なり得る。異なるキメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインに接続する任意選択によるリンカーにおいて互いに異なることもでき、任意選択によるリンカーは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外標的結合ドメインのＣ末端にある場合には細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）を膜貫通ドメイン、任意選択により存在するＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン又は任意選択により存在するヒンジ領域と接続する。２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、単一のＴＣＲ複合体に組み込まれるか、又はそれぞれが独立して異なるＴＣＲ複合体に組み込まれ得る。
例えば、いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかをその表面上に発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、核酸から発現され、免疫細胞表面に局在化される。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）膜貫通ドメイン、及びｄ）ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；及びｃ）ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインであって、ＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から選択される、膜貫通ドメイン、及びｄ）細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）；ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ若しくはｓｄＡｂ又は抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３γである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３δである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲαである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδであり、且つ／又は第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない。いくつかの実施形態において、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、第１及び／又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域上のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接するヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合する標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＴＣＲサブユニットに特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン（例えば、ＣＤ３ε又はＴＣＲの細胞外ドメインなどのＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン）；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含み（又はそれらから本質的にからなるか若しくはそれらからなり）、ここで、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかのアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３εの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合する抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３γの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲαの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲβの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲγの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）細胞外標的結合ドメイン（例えば、ＢＣＭＡなどの標的抗原を認識するｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態に
おいて、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＴＣＲγ／δ（例えば、ＴＣＲγ／δの定常領域）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接するヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。
おいて、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＴＣＲγ／δ（例えば、ＴＣＲγ／δの定常領域）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外領域のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接するヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３ε（又はＣＤ３γ又はＣＤ３δ）の膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３ε（又はＣＤ３γ又はＣＤ３δ）の細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＣＤ３ε（又はＣＤ３γ又はＣＤ３δ）の膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＣＤ３ε（又はＣＤ３γ又はＣＤ３δ）の細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ又はＣＤ３δの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、その表面上にキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲα（又はＴＣＲβ、又はＴＣＲγ、又はＴＣＲδ）の膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲα（又はＴＣＲβ、又はＴＣＲγ、又はＴＣＲδ）の細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む免疫細胞が提供され、ここで、キメラ受容体ポリペプチドは、ａ）標的抗原（ＢＣＭＡなど）にそれぞれ特異的に結合する２つ以上（２つなど）の標的抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎなど）を含む細胞外標的結合ドメイン；ｂ）ＣＤ３（ＣＤ３ε、例えばＣＤ３εのＮ末端など）又はＴＣＲ（ＴＣＲγ／δ、例えばＴＣＲγ／δの定常領域など）に特異的に結合するＴＣＲ抗原結合ドメイン（ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂなど）を含む細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；ｃ）ＴＣＲα（又はＴＣＲβ、又はＴＣＲγ、又はＴＣＲδ）の膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及びｄ）ＴＣＲα（又はＴＣＲβ、又はＴＣＲγ、又はＴＣＲδ）の細胞内ドメインを含む細胞内ドメインを含む（又はそれらから本質的になるか若しくはそれらからなる）。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ又はＴＣＲδの細胞外ドメインの可変領域を含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ又はＴＣＲδの細胞外ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原又は抗原上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じ抗原（ＢＣＭＡなど）上の異なるエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる抗原に結合する。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、同じである。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメインは、異なる。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞内共刺激ドメインを含まない。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である。いくつかの実施形態において、細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、キメラ受容体ポリペプチドのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメインと細胞外ＴＣＲ結合ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン（又は細胞外ＴＣＲ結合ドメイン）と膜貫通ドメインとの間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又はＤＡＲＰｉｎ）は、タンデムに配置される。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外標的結合ドメイン内の２つ以上の標的抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、ＤＡＲＰｉｎ）間のリンカーを含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドは、細胞外側のキメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインに隣接するヒンジ領域（例えば、ＣＤ８ヒンジ領域）をさらに含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、２つ以上（２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える数など）のキメラ受容体ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドは、互いに異なる。いくつかの実施形態において、標的抗原結合ドメインは、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１６／０９４４０８号明細書及びＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０９６９３８号明細書に開示される抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂのいずれかなど、ＢＣＭＡに特異的に結合するｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、配列番号２６のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＣＤ３ε（例えば、ＣＤ３εのＮ末端）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２２又は２３のアミノ酸配列のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む抗ＣＤ３ ｓｄＡｂである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＣＤ３ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ）は、ＴＣＲγ／δ（例えば、ＴＣＲγ／δの定常領域）に特異的に結合する。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、ＴＣＲ抗原結合ドメインは、配列番号２７のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１～３及びＬＣ－ＣＤＲ１～３を含む抗ＴＣＲ ｓｃＦｖである。
キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞の調製
一態様における本発明は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（リンパ球、例えばＴ細胞など）を提供する。キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）を調製する例示的な方法が本明細書に提供される。
一態様における本発明は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（リンパ球、例えばＴ細胞など）を提供する。キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）を調製する例示的な方法が本明細書に提供される。
いくつかの実施形態において、キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞は、標的抗原（疾患関連抗原など）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチド（本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかなど）をコードする１つ以上の核酸（例えば、レンチウイルスベクターを含む）を免疫細胞へ導入することによって生成することができる。免疫細胞への１つ以上の核酸の導入は、当技術分野で知られている技術を使用して達成することができる。いくつかの実施形態において、本発明の免疫細胞（Ｔ細胞など）は、インビボで複製することができ、標的抗原の発現に関連する疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）の持続的制御を導くことができる長期間持続をもたらす。
いくつかの実施形態において、本発明は、リンパ球注入を使用した、例えば癌又はウイルス感染を含む、標的抗原の発現に関連する疾患及び／又は障害（本明細書では「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも称される）を有するか又はそれを発症するリスクのある患者の処置のために本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する遺伝子改変免疫細胞（Ｔ細胞など）を投与することに関する。いくつかの実施形態において、処置において自己リンパ球注入が使用される。自己ＰＢＭＣは、処置を必要とする患者から収集され、Ｔ細胞は、本明細書に記載され、当技術分野で知られている方法を使用して活性化及び増殖され、次いで患者に注入されて戻される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現するＴ細胞（本明細書において「操作されたＴ細胞」とも称される）が提供される。本発明の操作されたＴ細胞は、強いインビボＴ細胞増殖を起こすことができ、血液及び骨髄中で長期間にわたり高レベルで持続する標的抗原特異的メモリー細胞を樹立することができる。いくつかの実施形態において、患者に注入された本発明の操作されたＴ細胞は、標的抗原関連疾患を有する患者においてインビボで標的抗原提示癌又はウイルス感染細胞などの標的抗原提示細胞を排除することができる。いくつかの実施形態において、患者に注入された本発明の操作されたＴ細胞は、少なくとも１つの従来の処置に抵抗性である標的抗原関連疾患を有する患者においてインビボで標的抗原提示癌又はウイルス感染細胞などの標的抗原提示細胞を排除することができる。
Ｔ細胞の拡大及び遺伝的修飾前にＴ細胞の供給源を対象から得る。Ｔ細胞は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位の組織、腹水、胸水液、脾臓組織及び腫瘍を含む多くの供給源から得ることができる。本発明のいくつかの実施形態において、当技術分野で入手可能な任意の数のＴ細胞株を使用し得る。本発明のいくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離法などの当業者に公知の任意の数の手法を用いて対象から採取した１単位の血液から得ることができる。いくつかの実施形態において、個体の循環する血液由来の細胞は、アフェレーシスによって得られる。アフェレーシス生成物は、典型的に、Ｔ細胞、単核球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球、赤血球及び血小板を含むリンパ球を含有する。いくつかの実施形態において、アフェレーシスによって採取された細胞は、次の処理工程のために、血漿画分を除去するために洗浄され、適切な緩衝液又は培地に入れられ得る。いくつかの実施形態において、細胞は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態において、洗浄溶液は、カルシウムを欠いており、マグネシウムを欠き得るか、又は全てではないにしても多くの二価カチオンを欠き得る。洗浄工程は、半自動化「フロースルー」遠心分離（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１ ｃｅｌｌ ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ、Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅ又はＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）を製造者の説明書に従って用いることによるなど、当技術分野で公知の方法によって達成され得ることが当業者に容易に理解されるであろう。洗浄後、細胞は、Ｃａ２＋を含有せず、Ｍｇ２＋を含有しないＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａなどの様々な生体適合性緩衝液又は緩衝液を含む若しくは含まない他の生理食塩水溶液中で再懸濁され得る。代替的に、アフェレーシスサンプルの望ましくない成分は、除去され得、細胞は、培養液中に直接再懸濁される。
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、赤血球を溶解し、単球を枯渇させることにより、例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離又は対向流遠心溶出法（ｃｏｕｎｔｅｒｆｌｏｗ ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｅｌｕｔｒｉａｔｉｏｎ）により、末梢血リンパ球から単離される。ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞などのＴ細胞の特異的亜集団は、正の選択又は負の選択手法によってさらに単離され得る。例えば、いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、望ましいＴ細胞の正の選択に十分な時間期間中、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ＣＤ３／ＣＤ２８Ｔなどの抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（即ち３×２８）共役ビーズとインキュベーションすることによって単離される。いくつかの実施形態において、時間期間は、約３０分である。いくつかの実施形態において、期間は、３０分～３６時間以上の範囲である（これらの値の間の全ての範囲を含む）。いくつかの実施形態において、期間は、少なくとも１、２、３、４、５又は６時間である。いくつかの実施形態において、時間期間は、１０～２４時間である。いくつかの実施形態において、インキュベーション時間期間は、２４時間である。白血病患者からのＴ細胞の単離に関して、２４時間などのより長いインキュベーション時間を使用すると、細胞収率が増大し得る。腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を腫瘍組織又は免疫不全の個体から単離するときなど、他の細胞の種類と比較してＴ細胞が少ない任意の状況において、より長いインキュベーション時間を使用してＴ細胞を単離し得る。さらに、より長いインキュベーション時間の使用により、ＣＤ８＋Ｔ細胞捕獲の効率を高めることができる。したがって、Ｔ細胞がＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合することができる時間を単純に短くするか若しくは長くすることにより、且つ／又はビーズのＴ細胞に対する比を大きくするか若しくは小さくすることにより、培養開始において又は処理中の他の時間点においてＴ細胞の亜集団を優先的に選択するか又はしないことができる。さらに、ビーズ又は他の表面上の抗ＣＤ３抗体及び／又は抗ＣＤ２８抗体の割合を大きくするか又は小さくすることにより、培養開始において又は他の望ましい時間点においてＴ細胞の亜集団を優先的に選択するか又はしないことができる。本発明に関連して、複数回の選択も使用できることが当業者に認識されるであろう。いくつかの実施形態において、選択手順を実行し、活性化及び拡大プロセスにおいて、「選択されない」細胞を使用することが望ましい場合がある。「選択されない」細胞は、さらなる回数の選択に供され得る。
負の選択によるＴ細胞集団の濃縮は、負に選択される細胞に特有の表面マーカーを対象とする抗体の組み合わせで達成することができる。一方法は、負に選択される細胞上に存在する細胞表面マーカーを対象とするモノクローナル抗体の混合物を使用する、陰性磁気免疫接着又はフローサイトメトリーによる細胞の選別及び／又は選択である。例えば、負の選択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するためには、モノクローナル抗体混合物は、典型的に、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ及びＣＤ８に対する抗体を含む。いくつかの実施形態において、典型的には、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋及びＦｏｘＰ３＋を発現する調節性Ｔ細胞のために、濃縮又は正の選択をすることが望ましい場合がある。代替的に、いくつかの実施形態において、Ｔ調節性細胞は、抗ＣＤ２５共役ビーズ又は他の類似の選択法によって枯渇される。
正又は負の選択による望ましい細胞集団の単離に関して、細胞及び表面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度は、変動し得る。いくつかの実施形態において、細胞及びビーズの接触を確実に最大にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合されている体積を著しく減少させる（即ち細胞の濃度を増大させる）ことが望ましい場合がある。例えば、いくつかの実施形態において、約２０億細胞／ｍｌの濃度が用いられる。いくつかの実施形態において、約１０億細胞／ｍｌの濃度が用いられる。いくつかの実施形態において、約１億細胞／ｍｌ超が使用される。いくつかの実施形態において、約１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００万又は５０００万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が用いられる。いくつかの実施形態において、約７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万又は１億細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が用いられる。いくつかの実施形態において、約１億２５００万又は約１億５０００万細胞／ｍｌの濃度が用いられる。高濃度を用いると、細胞収率、細胞活性化及び細胞拡大の増大をもたらし得る。さらに、高い細胞濃度を用いると、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞など、関心対象の標的抗原を弱く発現している場合がある細胞又は多くの腫瘍細胞が存在するサンプル（即ち白血病血液、腫瘍組織など）からの細胞をより効率的に捕獲することが可能になる。このような細胞集団は、治療的価値を有する場合があり、得ることが望ましいであろう。例えば、高濃度の細胞を用いると、通常ではより弱いＣＤ２８発現を有するＣＤ８＋Ｔ細胞をより効率的に選択することができる。
本発明のいくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、処置後、直接患者から得られる。この関連で、ある特定の癌処置、特に免疫系を損傷する薬物による処置後、処置直後に患者がその処置から正常に回復している期間中、得られるＴ細胞の質は、エクスビボで拡大する能力に関して最適であるか又は向上している場合があることが観察された。同様に、本明細書で説明される方法を用いたエクスビボ操作後、これらの細胞は、生着の向上及びインビボでの拡大に関して好ましい状態である場合がある。したがって、本発明に関連して、この回復段階中、Ｔ細胞、樹状細胞又は造血系の他の細胞を含む血液細胞を採取することが企図される。さらに、いくつかの実施形態において、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）及び前処置レジメンを用いて、特定の細胞タイプの再増殖、再循環、再生及び／又は拡大が好ましい状態を特に療法後の規定された期間中に対象において作り出すことができる。例証的な細胞タイプとしては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞及び免疫系の他の細胞が挙げられる。
所望のキメラ受容体ポリペプチドを発現するためのＴ細胞の遺伝子改変前であっても後であっても、Ｔ細胞は、一般に、例えば米国特許第６，３５２，６９４号明細書に記載される方法を使用して活性化及び増殖することができる。
いくつかの実施形態において、本発明のキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）は、免疫細胞（本明細書に記載の方法によって調製されたＴ細胞など）に、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードするウイルスベクターを形質導入することによって生成される。ウイルスベクター送達システムには、免疫細胞への送達後にエピソームゲノム又は統合ゲノムのいずれかを有するＤＮＡ及びＲＮＡウイルスが含まれる。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターであり、免疫細胞は、免疫細胞ゲノムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含む。
濃縮
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の改変／操作された免疫細胞のいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）のための異種細胞集団を濃縮する方法が提供される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の改変／操作された免疫細胞のいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）のための異種細胞集団を濃縮する方法が提供される。
標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（Ｔ細胞など）の特定の亜集団は、ポジティブ選択技術によって濃縮することができる。例えば、いくつかの実施形態において、操作された免疫細胞（Ｔ細胞など）は、所望の操作された免疫細胞のポジティブ選択に十分な時間、標的抗原コンジュゲートビーズとのインキュベーションによって濃縮される。異種細胞集団に低レベルで存在する修飾免疫細胞を単離するために、２４時間などのより長いインキュベーション時間を使用して、細胞収量を増加させることができる。本発明に関連して、複数回の選択も使用できることが当業者に認識されるであろう。
ポジティブ選択による望ましい改変免疫細胞集団の単離に関して、細胞及び表面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度は、変動し得る。いくつかの実施形態において、細胞及びビーズの接触を確実に最大にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合されている体積を著しく減少させる（即ち細胞の濃度を増大させる）ことが望ましい場合がある。
本明細書に記載のいずれかのそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、最小限の改変免疫細胞の枯渇をもたらすか又は実質的にもたらさない。例えば、いくつかの実施形態において、濃縮は、改変免疫細胞の約５０％未満（例えば、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％のいずれか未満）が枯渇する結果をもたらす。免疫細胞の枯渇は、本明細書に記載の任意の手段を含む、当技術分野で知られている任意の手段によって決定することができる。
本明細書に記載のいずれかのそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、最小限の改変免疫細胞の最終分化をもたらすか又は実質的にもたらさない。例えば、いくつかの実施形態において、濃縮は、改変免疫細胞の約５０％未満（例えば、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％のいずれか未満）が最終分化する結果をもたらす。免疫細胞の分化は、本明細書に記載の任意の手段を含む、当技術分野で知られている任意の手段によって決定することができる。
本明細書に記載のそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、最小限の改変免疫細胞上のキメラ受容体ポリペプチドの内在化をもたらすか又は実質的にもたらさない。例えば、いくつかの実施形態において、濃縮は、改変免疫細胞上のキメラ受容体ポリペプチドの約５０％未満（例えば、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％のいずれか未満）が内在化する結果をもたらす。改変された免疫細胞上のキメラ受容体ポリペプチドの内在化は、本明細書に記載の任意の手段を含む、当技術分野で知られている任意の手段によって決定することができる。
したがって、いくつかの実施形態において、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の異種細胞集団を濃縮する方法であって、ａ）異種細胞集団を、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドと接触させて、リガンドに結合した免疫細胞を含む複合体を形成すること；及びｂ）複合体を異種細胞集団から分離し、それによりキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞が濃縮された細胞集団を生成することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、リガンドは、固体支持体に固定化される。いくつかの実施形態において、固体支持体は、粒子状（ビーズなど）である。いくつかの実施形態において、固体支持体は、表面（ウェルの底など）である。いくつかの実施形態において、リガンドは、タグで標識されている。いくつかの実施形態において、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。いくつかの実施形態において、方法は、リガンドから免疫細胞を溶出し、溶出液を回収することをさらに含む。
ライブラリスクリーニング
標的抗原に特異的なキメラ受容体ポリペプチド候補を同定するために、キメラ受容体ポリペプチドライブラリー、例えば複数のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸のライブラリーを発現する細胞を、標的抗原又は標的細胞が含有する１つ以上のエピトープを含むリガンドに曝露し、続いてリガンドに特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーの単離を行い得る。いくつかの実施形態において、リガンドは、固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態において、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、イムノチューブ又はそのような目的に有用な当技術分野で知られている任意の材料の表面であり得る。いくつかの実施形態において、相互作用は、タグ付けされたリガンド標的（例えば、ビオチン化リガンド）上において溶液中で発生する。いくつかの実施形態において、手順は、非特異的で非反応性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄ステップ（パンニング）を含む。いくつかの実施形態において、溶液中の複合体を精製するために、それらは、固定化又は遠心分離のいずれかによって捕捉される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、可溶性ビオチン化リガンド上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上に親和性複合体（親和性メンバー及びリガンド）が固定化される。いくつかの実施形態において、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態において、ビーズは、例えば、磁性ビーズ、非磁性ビーズ、単分散ビーズ及び多分散ビーズを含む。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、ポジティブ選択によって精製される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、不要なライブラリーメンバーを除去するためのネガティブ選択によって精製される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、ポジティブ及びネガティブ選択ステップの両方によって精製される。
標的抗原に特異的なキメラ受容体ポリペプチド候補を同定するために、キメラ受容体ポリペプチドライブラリー、例えば複数のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸のライブラリーを発現する細胞を、標的抗原又は標的細胞が含有する１つ以上のエピトープを含むリガンドに曝露し、続いてリガンドに特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーの単離を行い得る。いくつかの実施形態において、リガンドは、固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態において、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、イムノチューブ又はそのような目的に有用な当技術分野で知られている任意の材料の表面であり得る。いくつかの実施形態において、相互作用は、タグ付けされたリガンド標的（例えば、ビオチン化リガンド）上において溶液中で発生する。いくつかの実施形態において、手順は、非特異的で非反応性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄ステップ（パンニング）を含む。いくつかの実施形態において、溶液中の複合体を精製するために、それらは、固定化又は遠心分離のいずれかによって捕捉される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、可溶性ビオチン化リガンド上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上に親和性複合体（親和性メンバー及びリガンド）が固定化される。いくつかの実施形態において、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態において、ビーズは、例えば、磁性ビーズ、非磁性ビーズ、単分散ビーズ及び多分散ビーズを含む。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、ポジティブ選択によって精製される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、不要なライブラリーメンバーを除去するためのネガティブ選択によって精製される。いくつかの実施形態において、親和性メンバーは、ポジティブ及びネガティブ選択ステップの両方によって精製される。
一般に、ライブラリー構築物を調製するために使用される技術は、既知の遺伝子操作技術に基づく。これに関して、ライブラリーで発現されるキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸配列は、使用される発現システムのタイプに適切な発現ベクターに組み込まれる。ＣＤ３＋細胞などの細胞での提示における使用のための適切な発現ベクターは、よく知られており、当技術分野で説明されている。例えば、いくつかの実施形態において、発現ベクターは、レンチウイルスベクターなどのウイルスベクターである。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つによる、複数のキメラ受容体ポリペプチドをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態において、核酸ライブラリーは、複数のキメラ受容体ポリペプチドをコードするウイルスベクターを含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
いくつかの実施形態において、標的抗原に特異的なキメラ受容体ポリペプチドをコードする配列について、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、ａ）キメラ受容体ポリペプチドが複数の細胞の表面で発現するように、核酸ライブラリーを複数の細胞に導入すること；ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートすること；ｃ）リガンドに結合した細胞を収集すること；及びｄ）ステップｃ）で収集された細胞からキメラ受容体ポリペプチドをコードする配列を単離し、それにより標的抗原に特異的なキメラ受容体ポリペプチドを同定することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、方法は、１つ以上の洗浄ステップをさらに含む。いくつかの実施形態において、１つ以上の洗浄ステップは、ステップｂ）及びｃ）間で実行される。いくつかの実施形態において、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。いくつかの実施形態において、複数の細胞は、複数のＴＣＲ＋細胞である。いくつかの実施形態において、リガンドは、固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態において、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態において、リガンドに結合した細胞を収集することは、固体支持体に結合したリガンドから細胞を溶出し、溶出液を収集することを含む。いくつかの実施形態において、リガンドは、タグで標識されている。いくつかの実施形態において、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。いくつかの実施形態において、リガンドに結合した細胞を収集することは、細胞及び標識されたリガンドを含む単離複合体を含む。いくつかの実施形態において、細胞は、複合体から解離される。
医薬組成物
また、本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチド、本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（又はそのベクター）又は本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）及び任意選択により薬学的に許容される賦形剤を含む組成物（本明細書では製剤とも称される医薬組成物など）が提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをその表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）を含む免疫細胞組成物（医薬組成物など）である。
また、本明細書では、本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチド、本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸（又はそのベクター）又は本明細書に記載の実施形態のいずれかによるキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）及び任意選択により薬学的に許容される賦形剤を含む組成物（本明細書では製剤とも称される医薬組成物など）が提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをその表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）を含む免疫細胞組成物（医薬組成物など）である。
組成物は、同じ細胞型の免疫細胞を含み、同じキメラ受容体ポリペプチドを発現する同種細胞集団又は異なる細胞型の免疫細胞を含み、且つ／又は異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する複数の免疫細胞集団を含む異種細胞集団を含み得る。組成物は、免疫細胞ではない細胞をさらに含み得る。
したがって、いくつかの実施形態において、同じ細胞型の免疫細胞（Ｔ細胞など）の同種細胞集団を含み、同じキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
いくつかの実施形態において、異なる細胞型の免疫細胞を含み、且つ／又は異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する複数の免疫細胞集団を含む異種細胞集団を含む免疫細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。いくつかの実施形態において、組成物中の全ての免疫細胞は、同じ細胞型である（例えば、全ての免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞である）。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる細胞型である（例えば、免疫細胞の１つの集団は、細胞傷害性Ｔ細胞からなり、免疫細胞の他の集団は、天然のキラーＴ細胞からなる）。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団が、異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する場合、免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原（例えば、各標的抗原は、乳癌などの癌に関連する）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞集団を含む免疫細胞組成物が提供され、ここで、組成物中の全ての免疫細胞は、同じ細胞型であり（例えば、全ての免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞であり）、ここで、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する場合、免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原（例えば、各標的抗原は、乳癌などの癌に関連する）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞組成物は、免疫細胞医薬組成物である。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞集団を含む組成物が提供され、ここで、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞の集団の全ては、異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団が、異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する場合、免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原（例えば、各標的抗原は、乳癌などの癌に関連する）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
組成物の調製中の様々な時点で細胞を凍結保存することが必要又は有益であり得る。「凍結された／凍結」及び「凍結保存された／凍結保存」という用語は、同じ意味で使用できる。凍結は、凍結乾燥を含む。
凍結保存に供される細胞への損傷は、（ａ）凍結保護剤の使用、（ｂ）凍結速度の制御、及び／又は（ｃ）分解反応を最小限に抑えるのに十分な低温での保存によって回避できる。例示的な凍結保護剤には、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、グリセロール、ポリビニルピロリジン、ポリエチレングリコール、アルブミン、デキストラン、スクロース、エチレングリコール、ｉ－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イノシトール、Ｄ－ラクトース、塩化コリン、アミノ酸、メタノール、アセトアミド、一酢酸グリセロール及び無機塩が含まれる。特定の実施形態において、ＤＭＳＯを使用することができる。血漿の添加（例えば、２０～２５％の濃度）により、ＤＭＳＯの保護効果を増強することができる。ＤＭＳＯの添加後、１％のＤＭＳＯ濃度は、４℃を超える温度で毒性を示し得るため、細胞は、凍結するまで０℃に保つことができる。
細胞の凍結保存では、緩徐に制御された冷却速度が重要であり、異なる凍結保護剤であり得る。水が氷になる融解熱は最小限に抑えるべきである。冷却手順は、例えば、プログラム可能な凍結装置又はメタノール浴の手順を使用することによって実施することができる。プログラム可能な凍結装置は、最適な冷却速度の決定を可能にし、標準的な再現可能な冷却を容易にする。
特定の実施形態において、ＤＭＳＯ処置された細胞は、氷上で予冷され、冷却されたメタノールを含むトレイに移すことができ、これは、次に、－８０℃の機械式冷蔵庫（例えば、Ｈａｒｒｉｓ又はＲｅｖｃｏ）内に入れられる。メタノール浴及びサンプルの熱電対測定は、１℃～３℃／分の冷却速度が好ましい可能性があることを示す。少なくとも２時間後、試験片は、－８０℃の温度に達し得、液体窒素（－１９６℃）中に直接入れることができる。
完全に凍結した後、細胞は、長期の極低温保存容器に迅速に移すことができる。好ましい実施形態において、サンプルは、液体窒素（－１９６℃）又は蒸気（－１℃）中に極低温で保管することができる。このような保管は、高効率の液体窒素冷蔵庫が利用できることで容易になる。
凍結保存後、凍結細胞は、当業者に知られている方法に従って使用のために解凍することができる。凍結した細胞は、好ましくは、迅速に解凍され、解凍後直ちに冷却される。特定の実施形態において、凍結細胞を含有するバイアルは、その首部まで温水浴に浸漬することができる。穏やかに回旋することで、解凍するにつれて細胞懸濁液が確実に混合され、温水から内部の氷塊への熱伝達が向上する。氷が完全に溶解すると直ちにバイアルを氷上に置くことができる。
特定の実施形態において、方法は、解凍中の細胞の凝集を防ぐために使用することができる。例示的な方法には、ＤＮａｓｅ、低分子量デキストラン及びクエン酸塩、ヒドロキシエチルデンプンの凍結前及び／又は凍結後の添加が含まれる。当業者によって理解されるように、ヒトに毒性のある凍結保護剤が使用される場合、それは、治療的使用前に除去されるべきである。ＤＭＳＯは、重大な毒性を有しない。
例示的な担体及び細胞の投与様式は、米国特許出願公開第２０１０／０１８３５６４号明細書の第１４～１５頁に記載されている。追加の薬学的担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｄａｖｉｄ Ｂ．Ｔｒｏｙ，ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載されている。
特定の実施形態において、細胞は、培養培地から回収され、洗浄され、治療有効量で担体中に濃縮され得る。例示的な担体には、食塩水、緩衝食塩水、生理食塩水、水、ハンクス液、リンゲル液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、Ｐｌａｓｍａ－Ｌｙｔｅ Ａ（登録商標）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｍｏｒｔｏｎ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ）、グリセロール、エタノール及びそれらの組み合わせが含まれる。
特定の実施形態において、担体は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）又は他のヒト血清成分又はウシ胎児血清で補充することができる。特定の実施形態において、注入用の担体には、５％ＨＡＳ又はデキストロースを含む緩衝生理食塩水が含まれる。さらなる等張化剤としては、グリセリン、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール又はマンニトールなどの三価以上の糖アルコール類を含む多価糖アルコール類が挙げられる。
担体には、クエン酸塩緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、酒石酸塩緩衝剤、フマル酸塩緩衝剤、グルコン酸塩緩衝剤、シュウ酸塩緩衝剤、乳酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤及び／又はトリメチルアミン塩などの緩衝剤が含まれ得る。
安定化剤は、充填剤から、細胞が容器壁に付着するのを防ぐのに役立つ添加剤までの機能に及び得る賦形剤の幅広いカテゴリーを指す。典型的な安定化剤としては、多価糖アルコール；アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミン酸及びスレオニンなどのアミノ酸；ラクトース、トレハロース、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオイニシトール、ガラクチトール、グリセロール及びシクリトール類（イノシトールなど）などの有機糖又は糖アルコール；ＰＥＧ；アミノ酸ポリマー；尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、アルファ－モノチオグリセロール及びチオ硫酸ナトリウムなどの含硫還元剤；低分子ポリペプチド（即ち残基１０未満）；ＨＳＡ、ウシ血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；キシロース、マンノース、フルクトース及びグルコースなどの単糖類；ラクトース、マルトース及びスクロースなどの二糖類；ラフィノースなどの三糖類並びにデキストランなどの多糖類を挙げることができる。
必要又は有益な場合、組成物は、注射部位の痛みを和らげるためにリドカインなどの局所麻酔剤を含み得る。
例示的な防腐剤には、フェノール、ベンジルアルコール、メタクレゾール、メチルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ベンザルコニウムハライド、ヘキサメトニウムクロリド、メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール及び３－ペンタノールが含まれる。
組成物内の治療有効量の細胞は、１０２細胞超、１０３細胞超、１０４細胞超、１０５細胞超、１０６細胞超、１０７細胞超、１０８細胞超、１０９細胞超、１０１０細胞超又は１０１１細胞超であり得る。
本明細書に開示される組成物及び製剤において、細胞は、一般に、１リットル以下、５００ｍｌ以下、２５０ｍｌ以下又は１００ｍｌ以下の体積である。したがって、投与される細胞の密度は、典型的には、１０４細胞／ｍｌ、１０７細胞／ｍｌ又は１０８細胞／ｍｌより高い。
本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸のいずれかを含む核酸組成物（本明細書では製剤とも称される医薬組成物など）も本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、核酸組成物は、医薬組成物である。いくつかの実施形態において、核酸組成物は、等張化剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定化剤、緩衝剤及び／又は防腐剤；及び／又は精製水、水性糖溶液、緩衝液、生理食塩水、水性ポリマー溶液、ＲＮａｓｅフリー水などの水性ビヒクルのいずれかをさらに含む。
本明細書に開示される組成物及び製剤は、例えば、注射、注入、灌流又は洗浄による投与のために調製することができる。組成物及び製剤は、骨髄、静脈内、皮内、動脈内、結節内、リンパ管内、腹腔内、病変内、前立腺内、膣内、直腸内、局所、髄腔内、腫瘍内、筋肉内、小胞内及び／又は皮下注射用にさらに製剤化することができる。
インビボ投与に使用される製剤は、無菌でなければならない。これは、例えば、無菌ろ過膜を通したろ過によって容易に達成される。
キメラ受容体ポリペプチドを発現する細胞を使用する処置方法
本発明のキメラ受容体ポリペプチド及び／又は組成物（医薬組成物など）は、例えば、癌、感染症（ウイルス感染など）及び自己免疫疾患を含む、標的抗原（ＴＡ）発現（本明細書では「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも称される）に関連する疾患及び／又は障害を処置するために使用することができる。したがって、本出願は、いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する有効量の免疫細胞組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む、個体（例えば、ヒト）における標的抗原陽性疾患（癌、ウイルス感染、自己免疫疾患など）を処置するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、癌は、例えば、副腎皮質癌腫、膀胱癌、乳癌、子宮頸部癌、胆管癌、結腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌腫、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる。いくつかの実施形態において、自己免疫疾患は、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ）から選択される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞組成物（医薬組成物など）は、静脈内、腫瘍内又は皮下に投与される。
本発明のキメラ受容体ポリペプチド及び／又は組成物（医薬組成物など）は、例えば、癌、感染症（ウイルス感染など）及び自己免疫疾患を含む、標的抗原（ＴＡ）発現（本明細書では「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも称される）に関連する疾患及び／又は障害を処置するために使用することができる。したがって、本出願は、いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する有効量の免疫細胞組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む、個体（例えば、ヒト）における標的抗原陽性疾患（癌、ウイルス感染、自己免疫疾患など）を処置するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、癌は、例えば、副腎皮質癌腫、膀胱癌、乳癌、子宮頸部癌、胆管癌、結腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌腫、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる。いくつかの実施形態において、自己免疫疾患は、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ）から選択される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞組成物（医薬組成物など）は、静脈内、腫瘍内又は皮下に投与される。
例えば、いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチドのいずれか１つによる、キメラ受容体ポリペプチドをその表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、標的抗原関連疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供される。
また、本明細書に記載の異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する複数の免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物を個体（例えば、ヒト）に投与することを含む、標的抗原関連疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）を、それを必要とする個体において処置する方法も企図される。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の個体における標的抗原関連疾患を処置するための方法のいずれかによれば、組成物は、本明細書に記載の異種免疫細胞組成物である。
例えば、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞集団を含む有効量の異種免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、標的抗原関連疾患（癌、ウイルス感染又は自己免疫疾患など）を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供され、ここで、組成物中の全ての免疫細胞は、同じ細胞型であり、ここで、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現し、ここで、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、異なる標的抗原（又はエピトープ）に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する場合、異なる標的抗原（又はエピトープ）は、それぞれ標的抗原関連疾患に関連している。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞集団を含む有効量の異種免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、標的抗原関連疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供され、ここで、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる細胞型のものであり、ここで、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の集団の全ては、異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、同じキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、異なる標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの免疫細胞の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する場合、異なる標的抗原は、それぞれ標的抗原関連疾患に関連している。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞集団を含む有効量の異種免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、複数の標的抗原（例えば、癌、自己免疫疾患、ウイルス感染）に関連する疾患を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供され、ここで、組成物中の全ての免疫細胞は、同じ細胞型であり（例えば、全ての免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞であり）、ここで、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現し、ここで、複数の標的抗原の各標的抗原について、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる複数の免疫細胞を含む有効量の免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、複数の標的抗原（例えば、癌、自己免疫疾患、ウイルス感染）に関連する疾患を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供され、ここで、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、他のものと異なる細胞型のものであり、ここで、複数の標的抗原の各標的抗原について、少なくとも１つの免疫細胞の集団は、標的抗原に特異的に結合するキメラ受容体ポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態において、免疫細胞の集団の全ては、異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。いくつかの実施形態において、免疫細胞の各集団は、他のものと異なるキメラ受容体ポリペプチドを発現する。
いくつかの実施形態において、個体は、哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。いくつかの実施形態において、個体は、ヒトである。いくつかの実施形態において、個体は、臨床患者、臨床試験ボランティア、実験動物などである。いくつかの実施形態において、個体は、約６０歳よりも若年（例えば、約５０、４０、３０、２５、２０、１５又は１０歳のいずれかよりも若年を含む）である。いくつかの実施形態において、個体は、約６０歳よりも年長（例えば、約７０、８０、９０又は１００歳のいずれかよりも年長を含む）である。いくつかの実施形態において、個体は、本明細書に記載の疾患又は障害（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）の１つ以上であると診断されるか、又は環境的又は遺伝的にその傾向がある。いくつかの実施形態において、個体は、本明細書に記載の１つ以上の疾患又は障害に関連する１つ以上の危険因子を有する。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる、キメラ受容体ポリペプチドをコードする核酸を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、標的抗原関連疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）を、それを必要とする個体（例えば、ヒト）において処置する方法が提供される。
癌処置は、例えば、癌細胞の死滅、腫瘍の退縮、腫瘍の重量又はサイズの縮小、進行までの時間、末梢Ｔ細胞の再分布の誘導（例えば、腫瘍抗原を発現する組織又は腫瘍へのＴ細胞の動員）、腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）の阻害、生存期間、無増悪生存期間、全奏効率、奏効期間、癌を有する個体の１つ以上の症状の緩和、生活の質、タンパク質の発現及び／又は活性、癌の再発の予防、阻害又は可能性の低下によって評価できる。例えば、放射線画像による応答の測定を含む、治療の有効性を決定するためのアプローチを採用することができる。
いくつかの実施形態において、処置の有効性は、式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）を使用して計算された腫瘍増殖阻害のパーセンテージ（％ＴＧＩ）として測定され、ここで、Ｔは、処置された腫瘍の平均相対腫瘍体積であり、Ｃは、未処置の腫瘍の平均相対腫瘍体積である。いくつかの実施形態において、％ＴＧＩは、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％又は９５％超である。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを縮小する方法は、腫瘍サイズの少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％を含む）縮小することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移の少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％を含む）阻害することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８若しくは２４ヶ月又はそれを超える期間のいずれかで延長することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物によって媒介される癌進行までの時間を延長する方法は、癌進行までの時間を、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１若しくは１２週間又はそれを超える期間のいずれかで延長することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えばＣＤ８＋及び／又はＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することにより、対象の免疫応答又は機能を増加、増強又は刺激することができる。いくつかの実施形態において、個体のＣＤ４及び／又はＣＤ８ Ｔ細胞は、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（任意選択により追加のＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）又はその医薬組成物の投与前と比較して、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／又は細胞溶解活性が増加又は増強されている。
ウイルス感染処置は、例えば、ウイルス量、生存期間、生活の質、タンパク質の発現及び／又は活性によって評価することができる。
自己免疫疾患の処置は、例えば、自己抗体検出により、例えば免疫拡散、イムノブロッティング技術、免疫蛍光、酵素イムノアッセイ又はマルチプレックスビーズベースのアッセイのためのフローサイトメトリーを使用して評価することができる。
疾患
いくつかの実施形態において本明細書に記載される操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に関連する癌を処置するために有用であり得る。本明細書に記載の方法のいずれかを使用して処置され得る癌には、血管新生されていないか又は依然として実質的に血管新生されていない腫瘍及び血管新生された腫瘍が含まれる。癌は、非固形腫瘍（例えば、白血病及びリンパ腫などの血液腫瘍）を含み得るか又は固形腫瘍を含み得る。本発明の免疫細胞で処置される癌のタイプには、癌腫、芽細胞腫及び肉腫並びに特定の白血病又はリンパ性悪性腫瘍、良性及び悪性（ｍａｌｉｇｎａｎｔ）腫瘍並びに悪性腫瘍（ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ）、例えば肉腫、癌腫及び黒色腫が含まれるが、これらに限定されない。成人の腫瘍／癌及び小児の腫瘍／癌も含まれる。
いくつかの実施形態において本明細書に記載される操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ）に関連する癌を処置するために有用であり得る。本明細書に記載の方法のいずれかを使用して処置され得る癌には、血管新生されていないか又は依然として実質的に血管新生されていない腫瘍及び血管新生された腫瘍が含まれる。癌は、非固形腫瘍（例えば、白血病及びリンパ腫などの血液腫瘍）を含み得るか又は固形腫瘍を含み得る。本発明の免疫細胞で処置される癌のタイプには、癌腫、芽細胞腫及び肉腫並びに特定の白血病又はリンパ性悪性腫瘍、良性及び悪性（ｍａｌｉｇｎａｎｔ）腫瘍並びに悪性腫瘍（ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ）、例えば肉腫、癌腫及び黒色腫が含まれるが、これらに限定されない。成人の腫瘍／癌及び小児の腫瘍／癌も含まれる。
血液癌は、血液又は骨髄の癌である。血液（又は血行性）癌の例には、急性白血病（急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性、前骨髄性、骨髄単球性、単球性及び赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病など）、真性赤血球増加症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（緩徐進行性及び高悪性度）、多発性骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンストレーム型マクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、有毛細胞白血病及び骨髄異形成を含む白血病が含まれる。
固形腫瘍は、通常、嚢胞又は液体領域を含まない異常な組織塊である。固形腫瘍は、良性又は悪性であり得る。異なる種類の固形腫瘍は、それらを形成する細胞の種類（肉腫、癌腫、リンパ腫など）によって名付けられている。肉腫や癌腫などの固形腫瘍の例には、副腎皮質癌腫、胆管癌腫、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫及び他の肉腫、滑膜肉腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌腫、胃癌、リンパ系悪性腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌腫、扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、腺癌、汗腺癌腫、甲状腺癌（例えば、甲状腺髄様癌腫及び甲状腺乳頭癌腫）、褐色細胞腫脂腺癌腫、乳頭癌腫、乳頭腺癌、髄質癌腫、気管支原性癌腫、腎細胞癌腫、肝細胞癌、胆管癌腫、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌（例えば、子宮頸癌腫及び浸潤前子宮頸部異形成）、結腸直腸癌、肛門癌、肛門管又は肛門直腸癌、膣癌、外陰癌（例えば、扁平上皮癌腫、上皮内癌腫、腺癌及び線維肉腫）、陰茎癌、中咽頭癌、食道癌、頭部癌（例えば、扁平上皮癌腫）、頸部癌（例えば、扁平上皮癌腫）、精巣腫瘍（例えば、精上皮腫、奇形腫、胚性癌腫、奇形癌腫、絨毛癌、肉腫、レイディグ細胞腫瘍、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫瘍及び脂肪腫）、膀胱癌腫、腎臓癌、黒色腫、子宮癌（例えば、子宮内膜癌腫）、尿路上皮癌（例えば、扁平上皮癌腫、移行上皮癌腫、腺癌、尿管癌、膀胱癌）並びにＣＮＳ腫瘍（神経膠腫（脳幹神経膠腫及び混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形性神経膠芽腫としても知られる）星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、神経鞘腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫瘍、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫及び脳転移など）が含まれる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞によって処置される癌は、例えば、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）であり得る。
他の実施形態における操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、病原体関連（ウイルスにコードされているものなど）抗原を標的とすることによって感染症を処置するために有用であり得る。予防又は処置される感染症は、例えば、ウイルス、細菌、原生動物又は寄生虫によって引き起こされ得る。標的抗原は、病原体によって引き起こされる疾患の原因であるか、又は病原体に感染した宿主において免疫応答を誘導することができる病原性タンパク質、ポリペプチド又はペプチドであり得る。免疫細胞が標的とすることができる病原性抗原には、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アナプラズマ（Ａｎａｐｌａｓｍａ）属、アナプラズマ・ファゴサイトフィルム（Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ）、ブラジル鉤虫（Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ）、ズビニ鉤虫（Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ）、アルカノバクテリウム・ヘモリティクム（Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ）、ヒト回虫（Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、アストロウイルス科（Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ）、バベシア（Ｂａｂｅｓｉａ）属、バチルス・アントラシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バルトネラ・ヘンセラエ（Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ）、ＢＫウイルス、ヒトブラストシスチス（Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ）、ブラストミセス・デルマチチジス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、ボレリア（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）属、ボレリア（Ｂｏｒｒｅｌｉａ）種、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）属、マレー糸状虫（Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ）、ブニヤウイルス科（Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ）ファミリー、バークホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ）及び他のバークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）種、バークホルデリア・マレイ（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ）、類鼻疽菌（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ）、カリシウイルス科（Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ）ファミリー、カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）属、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）種、トラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、肺炎クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、オウム病クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ）、ＣＪＤプリオン、肝吸虫（Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、ディフィシル菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）種、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ）、コクシジオイデス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ）種、コロナウイルス（ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、コクシエラ・バーネッティイ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ）、クリミヤコンゴ出血熱ウイルス（Ｃｒｉｍｅａｎ－Ｃｏｎｇｏ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）、クリプトコックス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、クリプトスポリジウム（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）属、サイトメガロウイルス（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）（ＣＭＶ）、デングウイルス（Ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ）（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３及びＤＥＮ－４）、二核アメーバ（Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ）、エボラウイルス（Ｅｂｏｌａｖｉｒｕｓ）（ＥＢＯＶ）、エキノコックス（Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ）属、エールリキア・シャフィンシス（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ）、エールリキア・エウィンギイ（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ）、エールリキア（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ）属、赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、エンテロウイルス（Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ）属、エンテロウイルス（Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ）、主にコクサッキーＡ（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ａ）ウイルス及びエンテロウイルス７１（Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１）（ＥＶ７１）、エピデルモフィトン（Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ）種、エプスタイン・バーウイルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ Ｖｉｒｕｓ）（ＥＢＶ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１及びＯ１０４：Ｈ４、肝蛭（Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａ）及び巨大肝蛭（Ｆａｓｃｉｏｌａ ｇｉｇａｎｔｉｃａ）、ＦＦＩプリオン、フィラリア上科（Ｆｉｌａｒｉｏｉｄｅａ）スーパーファミリー、フラビウイルス（Ｆｌａｖｉｖｉｒｕｓ）、フランシセラ・ツラレンシス（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ゲオトリクム・カンジダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）、ランブル鞭毛虫（Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、顎口虫（Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ）種、ＧＳＳプリオン、ガナリトウイルス（Ｇｕａｎａｒｉｔｏ ｖｉｒｕｓ）、軟性下疳菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ）、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）、へニパウイルス（Ｈｅｎｉｐａｖｉｒｕｓ）（ヘンドラウイルス（Ｈｅｎｄｒａ ｖｉｒｕｓ）、ニパウイルス（Ｎｉｐａｈ ｖｉｒｕｓ））、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（Ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ）１及び２（ＨＳＶ－１及びＨＳＶ－２）、ヒストプラズマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、ホルタエア・ウェルネキイ（Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ）、ヒトボカウイルス（Ｈｕｍａｎ ｂｏｃａｖｉｒｕｓ）（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（Ｈｕｍａｎ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ ６）（ＨＨＶ－６）及びヒトヘルペスウイルス７（Ｈｕｍａｎ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ ７）（ＨＨＶ－７）、ヒトメタニューモウイルス（Ｈｕｍａｎ ｍｅｔａｐｎｅｕｍｏｖｉｒｕｓ）（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（Ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ）（ＨＰＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（Ｈｕｍａｎ ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ）（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（Ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ １）（ＨＴＬＶ－１）、日本脳炎ウイルス（Ｊａｐａｎｅｓｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、ＪＣウイルス、フニンウイルス（Ｊｕｎｉｎ ｖｉｒｕｓ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（Ｋａｐｏｓｉ’ｓ Ｓａｒｃｏｍａ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ）（ＫＳＨＶ）、キンゲラ・キンガエ（Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ）、クレブシエラ・グラニュロマティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ）、Ｋｕｒｕプリオン、ラッサウイルス（Ｌａｓｓａ ｖｉｒｕｓ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）属、レプトスピラ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）属、リステリア・モノサイトゲネス（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｃｈｏｒｉｏｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）（ＬＣＭＶ）、マチュポウイルス（Ｍａｃｈｕｐｏ ｖｉｒｕｓ）、マラセチア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）属、マーブルグウイルス（Ｍａｒｂｕｒｇ ｖｉｒｕｓ）、麻疹ウイルス（Ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ）、横川吸虫（Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋｏｇａｗａｉ）、微胞子虫（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ）門伝染性軟属腫ウイルス（Ｍｏｌｌｕｓｃｕｍ ｃｏｎｔａｇｉｏｓｕｍ ｖｉｒｕｓ）（ＭＣＶ）、ムンプスウイルス（Ｍｕｍｐｓ ｖｉｒｕｓ）、マイコバクテリウム・レプラエ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ）及びマイコバクテリウム・レプロマトシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリウム・アルセランス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ）、肺炎マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ネグレリア・フォーレリ（Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ）、アメリカ鉤虫（Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、ノカルディア・アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）種、回旋糸状虫（Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ）、オリエンティア・ツツガムシ（Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ）、オルソミクソウイルス科（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）ファミリー（インフルエンザ（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ））、パラコクシディオイデス・ブラジリエンシス（Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）パラゴニムス（Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ）種、ウエステルマン肺吸虫（Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ）、パルボウイルス（Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ）Ｂ１９、パスツレラ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）属、プラスモジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属、ニューモシスチス・イロベジイ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ）、ポリオウイルス（Ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓ）、狂犬病ウイルス（Ｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ）、呼吸器合胞体ウイルス（Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ）（ＲＳＶ）、ライノウイルス（Ｒｈｉｎｏｖｉｒｕｓ）、ライノウイルス、リケッチア・アカリ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ）、リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）属、発疹チフスリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ）、リケッチア・リケッチイ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ）、発疹熱リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ）、リフトバレー熱ウイルス（Ｒｉｆｔ Ｖａｌｌｅｙ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）、ロタウイルス（Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ）、風疹ウイルス（Ｒｕｂｅｌｌａ ｖｉｒｕｓ）、サビアウイルス（Ｓａｂｉａ ｖｉｒｕｓ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属、ヒゼンダニ（Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ）、ＳＡＲＳコロナウイルス（ＳＡＲＳ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）、住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ）属、赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）属、シンノンブレウイルス（Ｓｉｎ Ｎｏｍｂｒｅ ｖｉｒｕｓ）、ハンタウイルス（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）、スポロトリックス・シェンキイ（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ）、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属、ストレプトコッカス・アガラクティアエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、化膿レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ヒト糞線虫（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏ
ｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ）、条虫（Ｔａｅｎｉａ）属、有鉤条虫（Ｔａｅｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ）、ダニ媒介脳炎ウイルス（Ｔｉｃｋ－ｂｏｒｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）（ＴＢＥＶ）、犬回虫（Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ）又は猫回虫（Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ）、トキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ）、旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ）、膣トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）種、ヒト鞭虫（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ）、ブルセイトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ）、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）、ウレアプラズマ・ウレアリティカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）、水痘帯状疱疹ウイルス（Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ）（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ）（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹（Ｖａｒｉｏｌａ ｍａｊｏｒ）又は天然痘帯状疱疹（Ｖａｒｉｏｌａ ｍｉｎｏｒ）、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（Ｖｅｎｅｚｕｅｌａｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）、ウエストナイルウイルス（Ｗｅｓｔ Ｎｉｌｅ ｖｉｒｕｓ）、西部ウマ脳炎ウイルス（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、バンクロフト糸状虫（Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔｉ）、黄熱ウイルス（Ｙｅｌｌｏｗ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）、腸炎エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）、ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ）及び仮性結核菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に由来する抗原が含まれるが、これらに限定されない。
ｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ）、条虫（Ｔａｅｎｉａ）属、有鉤条虫（Ｔａｅｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ）、ダニ媒介脳炎ウイルス（Ｔｉｃｋ－ｂｏｒｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）（ＴＢＥＶ）、犬回虫（Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ）又は猫回虫（Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ）、トキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ）、旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ）、膣トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ）種、ヒト鞭虫（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ）、ブルセイトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ）、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）、ウレアプラズマ・ウレアリティカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）、水痘帯状疱疹ウイルス（Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ）（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ）（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹（Ｖａｒｉｏｌａ ｍａｊｏｒ）又は天然痘帯状疱疹（Ｖａｒｉｏｌａ ｍｉｎｏｒ）、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（Ｖｅｎｅｚｕｅｌａｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）、ウエストナイルウイルス（Ｗｅｓｔ Ｎｉｌｅ ｖｉｒｕｓ）、西部ウマ脳炎ウイルス（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｅｑｕｉｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、バンクロフト糸状虫（Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔｉ）、黄熱ウイルス（Ｙｅｌｌｏｗ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ）、腸炎エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）、ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ）及び仮性結核菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に由来する抗原が含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、発癌性ウイルスによる感染などの発癌性感染症の処置に使用される。発癌性ウイルスには、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１及びＨＣＶが含まれるが、これらに限定されない。キメラ受容体ポリペプチドの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３ Ａ、ＥＢＮＡ３ Ｃ及びＥＢＮＡ ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、ＲＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８及びそのフラグメントを含むが、これらに限定されない腫瘍性タンパク質であり得る。Ａｈｕｊａ，Ｒｉｃｈａ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｓｃｉ．，２０１４を参照されたい。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する操作された免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）は、自己免疫疾患を処置するのに適している。自己免疫疾患又は自己免疫は、生物が自らの構成要素（サブ分子レベルまで）を「自己」として認識できないことであり、その結果、自らの細胞及び組織に対する免疫応答が生じる。このような異常な免疫応答に起因する疾患は、自己免疫疾患と呼ばれる。顕著な例としては、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ）を含む。
製造品及びキット
本発明のいくつかの実施形態において、癌（例えば、副腎皮質癌腫、膀胱癌、乳癌、子宮頸部癌、胆管癌、結腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌腫、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌又は甲状腺癌）、ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１又はＨＣＶ）又は自己免疫疾患（例えば、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ））など、標的抗原陽性疾患の処置に有用な物質を含有する製品が提供される。製造品は、容器及び容器に付けられた又は関連付けられたラベル又はパッケージ挿入物を含み得る。好適な容器としては、例えば、瓶、バイアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラス又は合成樹脂などの様々な材料から形成され得る。一般に、容器は、本明細書に記載の疾病又は疾患を処置するのに有効な組成物（例えば、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する操作された免疫細胞組成物）を保持し、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、静注溶液バッグ又は皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、その表面に本発明のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を提示する免疫細胞である。ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物が特定の状態を処置するために使用されることを示す。ラベル又はパッケージ挿入物は、対象への免疫細胞組成物の投与のための説明書をさらに含む。本明細書に記載の組み合わせ療法を含む製造品及びキットも企図される。
本発明のいくつかの実施形態において、癌（例えば、副腎皮質癌腫、膀胱癌、乳癌、子宮頸部癌、胆管癌、結腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌腫、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌又は甲状腺癌）、ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１又はＨＣＶ）又は自己免疫疾患（例えば、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ））など、標的抗原陽性疾患の処置に有用な物質を含有する製品が提供される。製造品は、容器及び容器に付けられた又は関連付けられたラベル又はパッケージ挿入物を含み得る。好適な容器としては、例えば、瓶、バイアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラス又は合成樹脂などの様々な材料から形成され得る。一般に、容器は、本明細書に記載の疾病又は疾患を処置するのに有効な組成物（例えば、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する操作された免疫細胞組成物）を保持し、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、静注溶液バッグ又は皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、その表面に本発明のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を提示する免疫細胞である。ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物が特定の状態を処置するために使用されることを示す。ラベル又はパッケージ挿入物は、対象への免疫細胞組成物の投与のための説明書をさらに含む。本明細書に記載の組み合わせ療法を含む製造品及びキットも企図される。
パッケージ挿入物は、治療用製品の商用パッケージに習慣的に含まれる説明書を指し、説明書は、適応症、用法、用量、投与、禁忌及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告についての情報を含む。いくつかの実施形態において、パッケージ挿入物は、組成物が標的抗原陽性癌（副腎皮質癌腫、膀胱癌、乳癌、子宮頸部癌、胆管癌、結腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌腫、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌又は甲状腺癌など）を処置するために使用されることを示す。他の実施形態において、パッケージ挿入物は、組成物が標的抗原陽性ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１又はＨＣＶ）を処置するために使用されることを示す。他の実施形態において、パッケージ挿入物は、組成物が標的抗原陽性自己免疫疾患（例えば、セリアック病、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、多発性硬化症（ＭＳ）、橋本甲状腺炎、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ（ＲＡ））を処置するために使用されることを示す。他の実施形態において、パッケージ挿入物は、組成物が、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される癌を処置するために使用されることを示す。
さらに、製造品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液などの医薬的に許容される緩衝液を含む第２の容器をさらに含み得る。製造品は、他の緩衝液、希釈液、フィルター、針及びシリンジを含む、商業及び使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含み得る。
様々な目的のために、例えば、本明細書に記載の標的抗原陽性の疾患又は障害の処置のために、任意選択により製造品と組み合わせた有用なキットも提供される。本発明のキットは、免疫細胞組成物（又は単位剤形及び／又は製造品）を含む１つ以上の容器を含み、いくつかの実施形態において、別の薬剤（本明細書に記載の薬剤など）及び／又は本明細書に記載の方法のいずれかに従う使用のための説明書をさらに含む。キットは、処置に適した個体の選択の説明をさらに含み得る。本発明のキットで提供される説明書は、典型的には、ラベル又はパッケージ挿入物（例えば、キットに含まれる紙のシート）に書かれた説明書であるが、機械可読の説明書（例えば、磁気又は光学記憶ディスクで運ばれる指示）も許容される。
例えば、いくつかの実施形態において、キットは、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をその表面上に提示する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物（例えば、医薬組成物）を含む。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をその表面上に提示する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物（例えば、医薬組成物）、及びｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤を含む。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をその表面上に提示する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物（例えば、医薬組成物）、及びｂ）標的抗原陽性疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）の処置のために、免疫細胞組成物を個体に投与することのための説明書を含む。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をその表面上に提示する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物（例えば、医薬組成物）、ｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤、及びｃ）標的抗原陽性疾患（癌、自己免疫疾患又はウイルス感染など）の処置のために、免疫細胞組成物及び他の薬剤を個体に投与することのための説明書を含む。免疫細胞組成物及び他の薬剤は、別個の容器又は単一の容器に存在し得る。例えば、キットは、１つの別個の組成物又は１つの組成物が免疫細胞を含み、別の組成物が他の薬剤を含む２つ以上の組成物を含み得る。
いくつかの実施形態において、キットは、本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をコードする核酸（又は核酸のセット）を含む。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をコードする核酸（又は核酸のセット）、及びｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）本明細書に記載のキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をコードする核酸（又は核酸のセット）、並びにｂ）ｉ）免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）においてキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現すること、ｉｉ）キメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞を含む組成物を調製すること、及びｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（癌、自己免疫疾患、ウイルス感染など）の処置のために、キメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞を含む組成物を個体に投与することのための説明書を含む。いくつかの実施形態において、免疫細胞は、処置される個体に由来する。いくつかの実施形態において、キットは、ａ）キメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）をコードする核酸（又は核酸のセット）、ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための免疫細胞（Ｔ細胞など）、並びにｃ）ｉ）宿主細胞においてキメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現すること、ｉｉ）キメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞を含む組成物を調製すること、及びｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（癌、自己免疫疾患、ウイルス感染など）の処置のために、キメラ受容体ポリペプチド（及び任意選択によりＣＡＲ／操作されたＴＣＲ）を発現する免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む組成物を個体に投与することのための説明書を含む。
本発明のキットは、適切なパッケージに入っている。好適なパッケージとしては、バイアル、瓶、広口瓶、可撓性パッケージ（例えば、密閉マイラー又は合成樹脂袋）などが挙げられるが、これらに限定されない。キットは、任意選択により、緩衝剤及び説明情報などのさらなる構成品を提供し得る。したがって、本出願は、製造品も提供し、製造品は、バイアル（密閉バイアルなど）、瓶、広口瓶、可撓性パッケージなどを含む。
免疫細胞組成物の使用に関する説明書は、一般に、意図された処置のための投与量、投与スケジュール及び投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量、バルクパッケージ（例えば、複数用量パッケージ）又はサブユニット用量であり得る。例えば、１週間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月又はそれを超える期間のいずれかなどの長期間にわたって個体に効果的な処置を提供するための、本明細書に開示されるような免疫細胞組成物の十分な投与量を含有するキットが提供され得る。キットは、複数の単位用量の医薬組成物及び使用説明書も含み得、薬局（例えば、病院薬局及び調剤薬局）での保管及び使用に十分な量でパッケージされ得る。
当業者は、本発明の範囲及び精神の範囲内でいくつかの実施形態が可能であることを認識するであろう。次に、以下の非限定的な例を参照することにより、本発明をより詳細に説明する。以下の例は、本発明をさらに説明するが、当然のことながら、決してその範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
例示的実施形態
実施形態１．
ａ）細胞外標的結合ドメイン；
ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；
ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及び
ｄ）任意選択により、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメイン
を含むキメラ受容体ポリペプチドであって、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される、キメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１．
ａ）細胞外標的結合ドメイン；
ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；
ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及び
ｄ）任意選択により、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメイン
を含むキメラ受容体ポリペプチドであって、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される、キメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２．細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットを特異的に認識するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む、実施形態１のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３．ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＣＤ３ε又はＴＣＲγ／δを特異的に認識する、実施形態２のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４．ＴＣＲ抗原結合ドメインは、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又は単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である、実施形態２又は３のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５．細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインを含む、実施形態１～４のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態６．第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択され、キメラ受容体ポリペプチドは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの可変領域を含まない、実施形態１～５のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態７．ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδのいずれの細胞外ドメインの可変領域も含まない、実施形態６のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態８．第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない、実施形態１～７のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態９．いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない、実施形態８のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１０．細胞内共刺激ドメインを含まない、実施形態１～９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１１．第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、異なる、実施形態１～１０のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１２．第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである、実施形態１～１１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１３．第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである、実施形態１～１１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１４．第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットは、同じである、実施形態１～１０のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１５．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１６．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１７．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１８．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態１９．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２０．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２１．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインは、ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含み、キメラ受容体ポリペプチドの細胞内ドメインは、ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む、実施形態１４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２２．細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である、実施形態１～２１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２３．細胞外標的結合ドメインは、細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である、実施形態１～２１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２４．細胞外標的結合ドメインは、標的抗原を特異的に認識する標的抗原結合ドメインを含む、実施形態１～２３のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２５．標的抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又は設計アンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）である、実施形態２４のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２６．細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメインを含む、実施形態２４又は２５のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２７．２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ同じ標的抗原上の同じエピトープを特異的に認識する、実施形態２６のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２８．２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ同じ標的抗原上の異なるエピトープを特異的に認識する、実施形態２６のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態２９．２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ異なる標的抗原を特異的に認識する、実施形態２６のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３０．標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＡＦＰ、ＣＤ４、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＥＡ、ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｖＩＩＩなど）、ＧＤ２、ＧＰＣ－２、ＧＰＣ３、ＨＥＲ２、ＬＩＬＲＢ４、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＧＦ１Ｒ、メソテリン、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＷＴ１、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ１、ＴＧＦａＲＩＩ、ＴＧＦｂＲＩＩ、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ４、ＨＰＶ関連抗原及びＥＢＶ関連抗原（ＬＭＰ１及びＬＭＰ２など）からなる群から選択される、実施形態１～２９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３１．標的抗原は、ＢＣＭＡである、実施形態３０のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３２．ＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニットは、第１のＴＣＲサブユニット及び第２のＴＣＲサブユニットと同じである、実施形態１４～３１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３３．ＴＣＲ抗原結合ドメインによって認識されるＴＣＲサブユニットは、第１のＴＣＲサブユニット又は第２のＴＣＲサブユニットと異なる、実施形態１～３１のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３４．細胞外標的結合ドメインを細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む、実施形態１～３３のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３５．細胞外標的結合ドメイン及び／又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む、実施形態１～３４のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３６．第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである、実施形態３４又は３５のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３７．細胞外標的結合ドメイン又は細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端にシグナルペプチドをさらに含む、実施形態１～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３８．キメラ受容体ポリペプチドの膜貫通ドメインのＮ末端にヒンジ領域をさらに含む、実施形態１～３７のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態３９．ヒンジ領域は、ＣＤ８のヒンジ領域を含む、実施形態３９のキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４０．Ｎ末端からＣ末端まで、ａ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメイン；又はｂ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメインを含む、実施形態１～３９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４１．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３εシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３εを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４２．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３γシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３γを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４３．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ３δシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３δを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４４．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－ＣＤ３ε膜貫通ドメイン－ＣＤ３ε細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４５．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－－ＣＤ３γ膜貫通ドメイン－ＣＤ３γ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４６．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＣＤ８ヒンジ領域－ＣＤ３δ膜貫通ドメイン－ＣＤ３δ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４７．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４８．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態４９．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５０．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５１．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５２．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５３．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５４．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５５．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５６．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５７．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５８．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態５９．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択によるシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第２のリンカー－抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第３のリンカー－ＣＤ３εシグナルペプチドを含まない全長ＣＤ３εを含む、実施形態１及び３４～３６のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態６０．第１、第２及び／又は第３のリンカーは、配列番号１～２１、６７及び６８のいずれかの配列を含む、実施形態３４～５９のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチド。
実施形態６１．実施形態１～６０のいずれか１つのキメラ受容体ポリペプチドをコードする単離された核酸。
実施形態６２．実施形態６１の１つ以上の核酸を含む核酸ベクター。
実施形態６３．１つ以上の連結配列を介して接続された２つ以上の前記核酸を含む、実施形態６２の核酸ベクター。
実施形態６４．連結配列は、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ、ＢｍＣＰＶ ２Ａ及びＢｍＩＦＶ ２Ａをコードする核酸並びに内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）の配列からなる群から選択される、実施形態６３の核酸ベクター。
実施形態６５．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα定常領域－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲβ定常領域－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインをコードする核酸を含む、実施形態６２～６４のいずれか１つの核酸ベクター。
実施形態６６．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む、実施形態６２～６４のいずれか１つの核酸ベクター。
実施形態６７．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲα膜貫通ドメイン－ＴＣＲα細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲβ膜貫通ドメイン－ＴＣＲβ細胞内ドメインをコードする核酸を含む、実施形態６２～６４のいずれか１つの核酸ベクター。
実施形態６８．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＣＤ３ε ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む、実施形態６２～６４のいずれか１つの核酸ベクター。
実施形態６９．Ｎ末端からＣ末端まで、任意選択による第１のシグナルペプチド－第１の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第１のリンカー－第１の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第２のリンカー－ＴＣＲγ定常領域－ＴＣＲγ膜貫通ドメイン－ＴＣＲγ細胞内ドメイン－Ｐ２Ａ－任意選択による第２のシグナルペプチド－第２の抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ－第３のリンカー－第２の抗ＴＣＲ ｓｃＦｖ－第４のリンカー－ＴＣＲδ定常領域－ＴＣＲδ膜貫通ドメイン－ＴＣＲδ細胞内ドメインをコードする核酸を含む、実施形態６２～６４のいずれか１つの核酸ベクター。
実施形態７０．実施形態１～６０のいずれか１つの１つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む単離された免疫細胞。
実施形態７１．２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む、実施形態７０の単離された免疫細胞。
実施形態７２．実施形態６１の核酸又は実施形態６２～６９のいずれか１つの核酸ベクターを含む単離された免疫細胞。
実施形態７３．Ｔαβ細胞、Ｔγδ細胞、エフェクターＴ細胞、メモリーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）からなる群から選択される、実施形態７０～７２のいずれか１つの単離された免疫細胞。
実施形態７４．Ｔ細胞である、実施形態７３の単離された免疫細胞。
実施形態７５．キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、実施形態７０～７４のいずれか１つの単離された免疫細胞。
実施形態７６．操作されたＴＣＲをさらに含む、実施形態７０～７５のいずれか１つの単離された免疫細胞。
実施形態７７．実施形態７０～７６のいずれか１つの単離された免疫細胞及び任意選択による薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
実施形態７８．個体の疾患を処置する方法であって、実施形態７０～７６のいずれか１つの有効量の免疫細胞又は実施形態７７の医薬組成物を個体に投与することを含む方法。
実施形態７９．医薬組成物は、静脈内、腫瘍内又は皮下に投与される、実施形態７８の方法。
実施形態８０．疾患は、癌である、実施形態７８又は７９の方法。
実施形態８１．癌は、急性白血病、慢性白血病、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される、実施形態８０の方法。
実施形態８２．急性白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）からなる群から選択される、実施形態８１の方法。
実施形態８３．慢性白血病は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である、実施形態８１の方法。
実施例１．キメラ受容体ポリペプチドを発現する免疫細胞の調製及び特性評価
キメラ受容体ポリペプチド構築物の構築
Ｎ’からＣ’まで以下を含むキメラ受容体ポリペプチド：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）及びＣＤ３ε（配列番号２８）から選択されたＴＣＲサブユニットの全鎖（細胞外、膜貫通及び細胞内ドメインを含む）、ＣＤ３γ（配列番号２９）及びＣＤ３δ（配列番号３０）を設計及び構築した（以下ではそれぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ」（配列番号４３）、「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｇ」（配列番号４４）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｄ」（配列番号４５）と称する）。実施例として、図１６Ａを参照されたい。ＢＣＭＡを認識するタンデムｓｄＡｂ（配列番号２６）を有するキメラ受容体ポリペプチドも構築され、以下では「タンデムｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ」（配列番号６１）と呼ばれ、Ｎ’からＣ’まで以下を含む：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号１）、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第３のＧＳリンカー（配列番号３）及びＣＤ３εの全鎖（配列番号２８）。ＴＣＲサブユニットＣＤ３ε、ＣＤ３γ又はＣＤ３δの細胞外ドメインを除去するために、Ｎ’からＣ’まで以下を含むキメラ受容体ポリペプチドの第２のセットを構築した：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識するシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号１）、ＣＤ８ヒンジ領域（配列番号３１）及びＣＤ３ε（即ち「ｓｅ」（配列番号４０））、ＣＤ３γ（即ち「ｓｇ」（配列番号４１））及びＣＤ３δ（即ち「ｓｄ」（配列番号４２））から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン。以下では、それぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｅ」（配列番号４６）、「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｇ」（配列番号４７）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄ」（配列番号４８）と称する）。実施例として、図１６Ｂを参照されたい。
キメラ受容体ポリペプチド構築物の構築
Ｎ’からＣ’まで以下を含むキメラ受容体ポリペプチド：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）及びＣＤ３ε（配列番号２８）から選択されたＴＣＲサブユニットの全鎖（細胞外、膜貫通及び細胞内ドメインを含む）、ＣＤ３γ（配列番号２９）及びＣＤ３δ（配列番号３０）を設計及び構築した（以下ではそれぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ」（配列番号４３）、「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｇ」（配列番号４４）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｄ」（配列番号４５）と称する）。実施例として、図１６Ａを参照されたい。ＢＣＭＡを認識するタンデムｓｄＡｂ（配列番号２６）を有するキメラ受容体ポリペプチドも構築され、以下では「タンデムｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ」（配列番号６１）と呼ばれ、Ｎ’からＣ’まで以下を含む：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号１）、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第３のＧＳリンカー（配列番号３）及びＣＤ３εの全鎖（配列番号２８）。ＴＣＲサブユニットＣＤ３ε、ＣＤ３γ又はＣＤ３δの細胞外ドメインを除去するために、Ｎ’からＣ’まで以下を含むキメラ受容体ポリペプチドの第２のセットを構築した：シグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識するシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号３）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号１）、ＣＤ８ヒンジ領域（配列番号３１）及びＣＤ３ε（即ち「ｓｅ」（配列番号４０））、ＣＤ３γ（即ち「ｓｇ」（配列番号４１））及びＣＤ３δ（即ち「ｓｄ」（配列番号４２））から選択されるＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン。以下では、それぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｅ」（配列番号４６）、「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｇ」（配列番号４７）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄ」（配列番号４８）と称する）。実施例として、図１６Ｂを参照されたい。
対応する可変領域が欠損したＴＣＲα／β／γ／δサブユニットをＮ’からＣ’まで構築する：対応するＴＣＲサブユニットの定常領域－対応するＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン－対応するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン、以下ではそれぞれ「ｔａＣ」（配列番号３２）、「ｔｂＣ」（配列番号３３）、「ｔｇＣ」（配列番号３６）及び「ｔｄＣ」（配列番号３７）と称する。ＢＣＭＡを認識するｓｄＡｂ（配列番号２６）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識するｓｃＦｖ（配列番号２４）及びｔａＣ（配列番号３２）並びにｔｂＣ（配列番号３３）又はｔｇＣ（配列番号３６）及びｔｄＣ（配列番号３７）を含むキメラ受容体ポリペプチドをコード化する核酸構築物を設計及び構築した（以下ではそれぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ／ｔｂＣ」（配列番号４９）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｇＣ／ｔｄＣ」（配列番号５０）と称する）。簡単に説明すると、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ／ｔｂＣ（配列番号４９）は、Ｎ’からＣ’まで、［第１のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第１のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔａＣ（配列番号３２）］－Ｐ２Ａ（配列番号６６）－［第２のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第３のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第２のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第４のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔｂＣ（配列番号３３）］を含む。ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ／ｔｂＣ（配列番号５０）は、Ｎ’からＣ’まで、［第１のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第１のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔｇＣ（配列番号３６）］－Ｐ２Ａ（配列番号６６）－［第２のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第３のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第２のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第４のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔｄＣ（配列番号３７）］を含む。
対応する細胞外ドメインが欠損したＴＣＲα／β／γ／δサブユニットをＮ’からＣ’まで構築する：対応するＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン－対応するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン、以下ではそれぞれ「ｓｔａ」（配列番号３４）、「ｓｔｂ」（配列番号３５）、「ｓｔｇ」（配列番号３８）及び「ｓｔｄ」（配列番号３９）と称する。上記と類似の構造を有するが、ＴＣＲαβ又はＴＣＲγδサブユニットの細胞外ドメインが欠損するキメラ受容体ポリペプチドの第２のセットをコード化する核酸構築物も作製された（以下ではそれぞれ「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ／ｓｔｂ」（配列番号５９）及び「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｇ／ｓｔｄ」（配列番号６０）と称する）。簡単に説明すると、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ／ｓｔｂ（配列番号５９）は、Ｎ’からＣ’まで、［第１のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第１のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ｓｔａ（配列番号３４）］－Ｐ２Ａ（配列番号６６）－［第２のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第３のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第２のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第４のＧＳリンカー（配列番号３）、ｓｔｂ（配列番号３５）］を含む。ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｇ／ｓｔｄ（配列番号６０）は、Ｎ’からＣ’まで、［第１のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第１のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ｓｔｇ（配列番号３８）］－Ｐ２Ａ（配列番号６６）－［第２のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第３のＧＳリンカー（配列番号６７）、ＣＤ３（ＵＣＨＴ－１）を認識する第２のｓｃＦｖ（配列番号２４）、第４のＧＳリンカー（配列番号３）、ｓｔｄ（配列番号３９）］を含む。実施例として、図１６Ｄを参照されたい。
ＢＣＭＡを認識するｓｄＡｂ（配列番号２６）、ＴＣＲ定常ドメインを認識するＴＣＲ ｓｃＦｖ（Ｂ１．１モノクローナル抗ＴＣＲγ／δＡｂ；配列番号２７）及びｔｇＣ（配列番号３６）並びにｔｄＣ（配列番号３７）を含むキメラ受容体ポリペプチドをコード化する核酸構築物を設計及び構築した。以下では、「ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ／ｔｄＣ」（Ｓ配列番号６４）と称する。簡単に説明すると、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ／ｔｄＣ（配列番号６４）は、Ｎ’からＣ’まで、［第１のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第１のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第１のＧＳリンカー（配列番号４）、ＴＣＲ定常ドメインを認識する第１のＴＣＲ抗体（配列番号２７）、第２のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔｇＣ（配列番号３６）］－Ｐ２Ａ（配列番号６６）－［第２のシグナルペプチド、ＢＣＭＡを認識する第２のｓｄＡｂ（配列番号２６）、第３のＧＳリンカー（配列番号４）、ＴＣＲ定常ドメインを認識する第２のＴＣＲ抗体（配列番号２７）、第４のＧＳリンカー（配列番号３）、ｔｄＣ（配列番号３７）］を含む。実施例として、図１６Ｃを参照されたい。
上記のキメラ受容体ポリペプチドをコード化する核酸は、社内で生成されたＥＦ１αプロモーター（ｐＬＶＸ－ＥＦ１Ａ）の管理下でレンチウイルスベクターにクローン化された。簡単に説明すると、Ｈ１Ｖ－１ベースのレンチウイルスベクターｐＬＶＸ－Ｐｕｒｏ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ ＃６３２１６４）のマルチプルクローニングサイト（ＭＣＳ）及びピューロマイシン耐性遺伝子の直接上流に位置する構成的に活性なヒトサイトメガロウイルス前初期プロモーター（ＰＣＭＶ ＩＥ）をＥｃｏＲＩ及びＢａｍＨＩによりヒト伸長因子１αプロモーター（ｈＥＦ１α）に置き換え、以下ではｐＬＶＸ－ＥＦ１Ａレンチウイルスベクターと称する。
レンチウイルスベクターのパッケージング
ｐＭＤＬｇ／ｐＲＲＥ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５１）、ｐＲＳＶ－Ｒｅｖ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５３）及びｐＭＤ２．Ｇ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５９）を含むレンチウイルスパッケージングプラスミド混合物を、上記キメラ受容体ポリペプチドをコード化する対応する核酸を保有するｐＬＶＸ－ＥＦ１Ａレンチウイルスベクターとポリエーテルイミド（ＰＥＩ）で予め最適化された比率で予め混合し、次に適切に混合し、室温で５分間インキュベートした。次に、トランスフェクションミックスは、２９３－Ｔ細胞に滴下し、穏やかに混合する。次に、細胞を３７℃及び５％ＣＯ２細胞インキュベーターで一晩インキュベートした。翌日、４℃、５００ｇで１０分間の遠心分離後、上清を回収した。
ｐＭＤＬｇ／ｐＲＲＥ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５１）、ｐＲＳＶ－Ｒｅｖ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５３）及びｐＭＤ２．Ｇ（Ａｄｄｇｅｎｅ＃１２２５９）を含むレンチウイルスパッケージングプラスミド混合物を、上記キメラ受容体ポリペプチドをコード化する対応する核酸を保有するｐＬＶＸ－ＥＦ１Ａレンチウイルスベクターとポリエーテルイミド（ＰＥＩ）で予め最適化された比率で予め混合し、次に適切に混合し、室温で５分間インキュベートした。次に、トランスフェクションミックスは、２９３－Ｔ細胞に滴下し、穏やかに混合する。次に、細胞を３７℃及び５％ＣＯ２細胞インキュベーターで一晩インキュベートした。翌日、４℃、５００ｇで１０分間の遠心分離後、上清を回収した。
上清を０．４５μｍＰＥＳフィルターでろ過し、超遠心分離で濃縮した。超遠心分離後、上清を慎重に廃棄し、ウイルスペレットを事前に冷却したＤＰＢＳで慎重にすすいだ。次に、ウイルスの濃度を測定した。ウイルスは、適切にアリコートされ、直ちに－８０℃で保存された。ウイルス力価は、Ｔ細胞株での機能的形質導入によって決定された。
Ｔ細胞の調製
Ｒ１０培地から白血球を回収し、次に０．９％ＮａＣｌ溶液と１：１（ｖ／ｖ）の比率で混合した。３ｍＬのリンパプレップ（ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ）培地を１５ｍＬの遠心分離管に加え、次に６ｍＬの希釈リンパ球混合物をゆっくりとリンパプレップ（ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ）の上の層に加えた。リンパ球混合物を、ブレーキをかけず、８００ｇで３０分間、２０℃で遠心分離した。次に、リンパ球バフィーコートを２００μＬのピペットで回収した。回収した画分を少なくとも６倍の０．９％ＮａＣｌ又はＲ１０で希釈して、溶液の密度を下げた。次に、回収した画分を２５０ｇで１０分間、２０℃で遠心分離した。上清を完全に吸引し、１０ｍＬのＲ１０を細胞ペレットに加えた。混合物をさらに２５０ｇで１０分間、２０℃で遠心分離した。次に、上清を吸引した。１００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を含む２ｍＬの３７℃予熱Ｒ１０を細胞ペレットに添加し、細胞ペレットを穏やかに再懸濁した。次に、細胞の数を数え、ＰＢＭＣサンプルを後の実験に備えた。
Ｒ１０培地から白血球を回収し、次に０．９％ＮａＣｌ溶液と１：１（ｖ／ｖ）の比率で混合した。３ｍＬのリンパプレップ（ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ）培地を１５ｍＬの遠心分離管に加え、次に６ｍＬの希釈リンパ球混合物をゆっくりとリンパプレップ（ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ）の上の層に加えた。リンパ球混合物を、ブレーキをかけず、８００ｇで３０分間、２０℃で遠心分離した。次に、リンパ球バフィーコートを２００μＬのピペットで回収した。回収した画分を少なくとも６倍の０．９％ＮａＣｌ又はＲ１０で希釈して、溶液の密度を下げた。次に、回収した画分を２５０ｇで１０分間、２０℃で遠心分離した。上清を完全に吸引し、１０ｍＬのＲ１０を細胞ペレットに加えた。混合物をさらに２５０ｇで１０分間、２０℃で遠心分離した。次に、上清を吸引した。１００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を含む２ｍＬの３７℃予熱Ｒ１０を細胞ペレットに添加し、細胞ペレットを穏やかに再懸濁した。次に、細胞の数を数え、ＰＢＭＣサンプルを後の実験に備えた。
ヒトＴ細胞を、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｐａｎ Ｔ細胞分離キット（カタログ番号１３０－０９６－５３５）を使用して、マニュアルプロトコルに従ってＰＢＭＣから精製した。続いて、調製したＴ細胞をヒトＴ細胞活性化／拡張キット（Ｍｉｌｔｅｎｙ＃１３０－０９１－４４１）で４８時間前活性化した。Ｔ細胞の最適な活性化は、２つの細胞ごとに１つの充填された抗ビオチンＭＡＣＳｉＢｅａｄ粒子を使用することによって達成される（ビーズと細胞の比率１：２）。
Ｔ細胞トランスフェクション
事前に活性化されたＴ細胞を回収し、最終濃度３００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を含む１６４０培地に懸濁／再懸濁した。レンチウイルスを同じ培地でＭＯＩ＝５に希釈した。１Ｅ＋０６で事前に活性化されたＴ細胞に、８μｇ／ｍｌポリブレンを有する希釈レンチウイルスを１０００ｇ、３２℃で１時間遠心分離して形質導入した。次に、形質導入された細胞を適切な条件下で導入遺伝子発現のために細胞培養インキュベーターに移した。翌日、形質導入された細胞を遠心分離し、新鮮な１６４０培地（３００ＩＵ ｍＬ ＩＬ－２を補充）と交換し、細胞濃度を２日ごとに測定し、新鮮な１６４０培地（３００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を補充）をＴ細胞の増殖を継続するために追加した。キメラ受容体ポリペプチドを発現するＴ細胞は、「ＳＴＳ－Ｔ細胞」と称する。
事前に活性化されたＴ細胞を回収し、最終濃度３００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を含む１６４０培地に懸濁／再懸濁した。レンチウイルスを同じ培地でＭＯＩ＝５に希釈した。１Ｅ＋０６で事前に活性化されたＴ細胞に、８μｇ／ｍｌポリブレンを有する希釈レンチウイルスを１０００ｇ、３２℃で１時間遠心分離して形質導入した。次に、形質導入された細胞を適切な条件下で導入遺伝子発現のために細胞培養インキュベーターに移した。翌日、形質導入された細胞を遠心分離し、新鮮な１６４０培地（３００ＩＵ ｍＬ ＩＬ－２を補充）と交換し、細胞濃度を２日ごとに測定し、新鮮な１６４０培地（３００ＩＵ／ｍＬ ＩＬ－２を補充）をＴ細胞の増殖を継続するために追加した。キメラ受容体ポリペプチドを発現するＴ細胞は、「ＳＴＳ－Ｔ細胞」と称する。
細胞傷害性アッセイ－乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）アッセイ
ＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性を６～２４時間の共培養アッセイで測定した。実験では、ＳＴＳ－Ｔ細胞又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）を遠心分離によって回収し、１．２５％熱不活化ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を有する１６４０フェノールレッドフリー培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）により目的の濃度に希釈した。ＣＨＯ－Ｋ１／ＢＣＭＡ細胞（完全長のヒトＢＣＭＡタンパク質を構成的に発現している社内で操作されたＣＨＯ細胞株）又はＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＭ－ＣＣＬ－１５５、Ｌｏｔ＃６３９９００４６）、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞（骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ－９０６８、Ｌｏｔ＃６１６８５２７３）など、標的抗原（即ちＢＣＭＡ）を強く発現を示す標的細胞を使用した。ＳＴＳ－Ｔ細胞及び標的細胞を９６ウェルプレートで６～２４時間、３７℃において異なるエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）で共培養した。追加のウェルには、アッセイバッファー単独（１．２５％ｈｉＦＢＳを加えた１６４０フェノールレッド不含培地）、標的細胞単独（Ｔ）、エフェクター細胞単独（Ｅ）及び標的細胞の最大放出（ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００の１％溶液を有する標的細胞）が含まれていた。各条件を３回実施し、標的細胞に対するＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性をＬＤＨアッセイキット（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号１１６４４７９３００１）で検出した。６～２４時間の共培養後、アッセイプレートを遠心分離し、上清を新しい９６ウェルプレートに移した。製造元のマニュアルに従い、上清を含む各ウェルに等量のＬＤＨアッセイ試薬を添加した。反応物を１５℃～２５℃で約３０分間インキュベートした。次に、ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（登録商標）リーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して、４９２ｎｍ及び６５０ｎｍでの吸光度を測定した。腫瘍細胞溶解率を、次の式を使用して計算した。
標的細胞溶解％＝（ＯＤＥ：Ｔ－ＯＤＴ－ＯＤＥ＋ＯＤアッセイバッファー）／（ＯＤ最大放出－ＯＤＴ）＊１００。
ＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性を６～２４時間の共培養アッセイで測定した。実験では、ＳＴＳ－Ｔ細胞又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）を遠心分離によって回収し、１．２５％熱不活化ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を有する１６４０フェノールレッドフリー培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）により目的の濃度に希釈した。ＣＨＯ－Ｋ１／ＢＣＭＡ細胞（完全長のヒトＢＣＭＡタンパク質を構成的に発現している社内で操作されたＣＨＯ細胞株）又はＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＭ－ＣＣＬ－１５５、Ｌｏｔ＃６３９９００４６）、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞（骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ－９０６８、Ｌｏｔ＃６１６８５２７３）など、標的抗原（即ちＢＣＭＡ）を強く発現を示す標的細胞を使用した。ＳＴＳ－Ｔ細胞及び標的細胞を９６ウェルプレートで６～２４時間、３７℃において異なるエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）で共培養した。追加のウェルには、アッセイバッファー単独（１．２５％ｈｉＦＢＳを加えた１６４０フェノールレッド不含培地）、標的細胞単独（Ｔ）、エフェクター細胞単独（Ｅ）及び標的細胞の最大放出（ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００の１％溶液を有する標的細胞）が含まれていた。各条件を３回実施し、標的細胞に対するＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性をＬＤＨアッセイキット（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号１１６４４７９３００１）で検出した。６～２４時間の共培養後、アッセイプレートを遠心分離し、上清を新しい９６ウェルプレートに移した。製造元のマニュアルに従い、上清を含む各ウェルに等量のＬＤＨアッセイ試薬を添加した。反応物を１５℃～２５℃で約３０分間インキュベートした。次に、ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（登録商標）リーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して、４９２ｎｍ及び６５０ｎｍでの吸光度を測定した。腫瘍細胞溶解率を、次の式を使用して計算した。
標的細胞溶解％＝（ＯＤＥ：Ｔ－ＯＤＴ－ＯＤＥ＋ＯＤアッセイバッファー）／（ＯＤ最大放出－ＯＤＴ）＊１００。
細胞傷害性アッセイ－ルシフェラーゼアッセイ
ＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性を６～２４時間の共培養アッセイで測定した。実験では、ＳＴＳ－Ｔ細胞又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）を遠心分離によって回収し、その後、１．２５％熱不活化ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を有する１６４０フェノールレッドフリー培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）により目的の濃度に希釈した。ＮＣＩ－Ｈ９２９－Ｌｕｃ細胞（骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ－９０６８、Ｌｏｔ＃６１６８５２７３）など、ＢＣＭＡ及びルシフェラーゼが強く発現している腫瘍細胞を使用した。ＳＴＳ－Ｔ細胞及び標的細胞を９６ウェルプレートで６～２４時間、３７℃において異なるエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）で共培養した。追加のウェルには、標的細胞単独（Ｔ）及び標的細胞の最大放出（１％ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００溶液を含む標的細胞）を充填した。各条件を３回実施し、標的細胞に対するＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性をＯｎｅ－Ｇｌｏアッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｅ６１１０）で検出した。
ＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性を６～２４時間の共培養アッセイで測定した。実験では、ＳＴＳ－Ｔ細胞又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）を遠心分離によって回収し、その後、１．２５％熱不活化ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を有する１６４０フェノールレッドフリー培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）により目的の濃度に希釈した。ＮＣＩ－Ｈ９２９－Ｌｕｃ細胞（骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ－９０６８、Ｌｏｔ＃６１６８５２７３）など、ＢＣＭＡ及びルシフェラーゼが強く発現している腫瘍細胞を使用した。ＳＴＳ－Ｔ細胞及び標的細胞を９６ウェルプレートで６～２４時間、３７℃において異なるエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）で共培養した。追加のウェルには、標的細胞単独（Ｔ）及び標的細胞の最大放出（１％ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００溶液を含む標的細胞）を充填した。各条件を３回実施し、標的細胞に対するＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性をＯｎｅ－Ｇｌｏアッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｅ６１１０）で検出した。
共培養後、アッセイプレートを短時間遠心分離し（上清を除去）、次に製造元のマニュアルに従い、細胞を含む各ウェルに、等量（培地に等量）のＯｎｅ－Ｇｌｏアッセイ試薬を添加した。プレートを室温で約３分間インキュベートした。次に、ＰＨＥＲＡｓｔａｒ（登録商標）プラスリーダー（ＢＭＧ ｌａｂｔｅｃｈ）を使用して、ルシフェラーゼシグナルを測定した。腫瘍細胞溶解率を、次の式を使用して計算した。
標的細胞溶解％＝（１－（ＲＬＵＥ：Ｔ－ＲＬＵ最大放出）／（ＲＬＵＴ－ＲＬＵ最大放出））＊１００。
標的細胞溶解％＝（１－（ＲＬＵＥ：Ｔ－ＲＬＵ最大放出）／（ＲＬＵＴ－ＲＬＵ最大放出））＊１００。
サイトカイン放出の検出
細胞傷害性アッセイでアッセイプレートから移された上清をサイトカイン放出分析のために収集した。上清を新しい９６ウェルプレートに移し、次にＨＴＲＦ（登録商標）試薬（ヒトＩＦＮガンマキット、Ｃｉｓｂｉｏ、カタログ番号６２ＨＩＦＮＧＰＥＨ）を各ウェルに加えてＩＮＦγの放出を検出した。ＩＦＮγ標準物質（ＩＦＮガンマキットより）を使用して、ＩＦＮγの量を決定した。ＨＴＲＦドナー及びアクセプターで標識された抗体は、事前に混合され、単一の予製ステップで追加された。
細胞傷害性アッセイでアッセイプレートから移された上清をサイトカイン放出分析のために収集した。上清を新しい９６ウェルプレートに移し、次にＨＴＲＦ（登録商標）試薬（ヒトＩＦＮガンマキット、Ｃｉｓｂｉｏ、カタログ番号６２ＨＩＦＮＧＰＥＨ）を各ウェルに加えてＩＮＦγの放出を検出した。ＩＦＮγ標準物質（ＩＦＮガンマキットより）を使用して、ＩＦＮγの量を決定した。ＨＴＲＦドナー及びアクセプターで標識された抗体は、事前に混合され、単一の予製ステップで追加された。
ＥＬＩＳＡ標準曲線に適合させるために、４パラメーターロジスティック（４ＰＬ）曲線が一般的に推奨される。この回帰により、線形分析よりも広い範囲の濃度で未知のサンプルを正確に測定できるため、サイトカイン放出などの生体系の分析に最適である。
実施例２．ＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞傷害性及びサイトカイン放出アッセイ
実施例１に記載のＳＴＳ－Ｔ細胞（又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）、対照）及び標的細胞を遠心分離により回収した後、アッセイバッファー（１６４０フェノールレッド不含培地＋１．２５％ ｈｉＦＢＳ）で所望の濃度に希釈した。次に、ＳＴＳ－Ｔ細胞（又は対照ＵｎＴ）及びＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株）を９６ウェルプレートで１．２５のＥ：Ｔ、３７℃において２０時間共培養した。共培養後の上清をＬＤＨ放出及びＩＦＮγ分泌の検出のために各ウェルから移した。詳細な方法を実施例１に記載する。
実施例１に記載のＳＴＳ－Ｔ細胞（又はトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）、対照）及び標的細胞を遠心分離により回収した後、アッセイバッファー（１６４０フェノールレッド不含培地＋１．２５％ ｈｉＦＢＳ）で所望の濃度に希釈した。次に、ＳＴＳ－Ｔ細胞（又は対照ＵｎＴ）及びＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株）を９６ウェルプレートで１．２５のＥ：Ｔ、３７℃において２０時間共培養した。共培養後の上清をＬＤＨ放出及びＩＦＮγ分泌の検出のために各ウェルから移した。詳細な方法を実施例１に記載する。
図１０Ａ及び図１０Ｂは、ＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＭ－ＣＣＬ－１５５、Ｌｏｔ＃６３９９００４６）に対する様々なＳＴＳ－Ｔ細胞の死滅細胞アッセイ結果を示しており、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｇ及びｓｄＡｂ ＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｄを発現するＳＴＳ－Ｔ細胞が含まれる。図１０Ａ及び図１０Ｂに示すように、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｇ及びｓｄＡｂＢＣＭＡ－ａｎｔｉ－ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｄは、いずれもＲＰＭＩ－８２２６細胞（多発性骨髄腫細胞株、ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＭ－ＣＣＬ－１５５、Ｌｏｔ＃６３９９００４６）に対して、トランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）と比較して顕著な細胞傷害性を示し、その中でも、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅは、最も強い細胞傷害性（図１０Ａ）及びＩＦＮγ放出（図１０Ｂ）を示した。
図１１Ａ及び図１１Ｂは、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｅ、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｇ及びｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄを発現するＳＴＳ－Ｔ細胞を含む、ＲＰＭＩ－８２２６細胞に対する様々なＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞死滅アッセイ結果を提供する。図１１Ａ及び図１１Ｂに示すように、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｅ、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｇ及びｓｄＡｂＢＣＭＡ－ａｎｔｉ－ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄは、いずれもトランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）と比較してＲＰＭＩ－８２２６細胞に対して顕著な細胞傷害性を示し、ＩＦＮγ放出の強い誘導を示した。
これらの結果から、ＣＤ３ε／ＣＤ３γ／ＣＤ３δの細胞外ドメインを伴う又は伴わないキメラ受容体ポリペプチドは、いずれも標的腫瘍細胞に対する細胞傷害性及びサイトカイン放出を誘発する効果があることが明らかになった。
図１３は、ＮＣＩ－Ｈ９２９－Ｌｕｃ細胞（ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞にルシフェラーゼを発現させた自社製安定細胞株）に対するｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ／ｔｄＣを発現させたＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞死滅アッセイの結果を示す。図１３に示すように、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ／ｔｄＣは、トランスフェクトされていないＴ細胞と比較して標的腫瘍細胞に対して顕著な細胞傷害性を示した。
図１４は、ＣＨＯ－Ｋ１／ＢＣＭＡ細胞（完全長ヒトＢＣＭＡタンパク質を構成的に発現する社内で操作されたＣＨＯ細胞株）上でｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ／ｓｔｂを発現するＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞死滅アッセイ結果を示す。図１４に示すように、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ／ｓｔｂは、トランスフェクトされていないＴ細胞と比較して標的腫瘍細胞に対して顕著な細胞傷害性を示す。
これらの結果は、ＴＣＲα／β／γ／δの定常ドメインを伴う又は伴わないキメラ受容体ポリペプチドが両方とも標的腫瘍細胞に対する細胞傷害性を誘導するのに有効であることを示す。
図１５は、ＣＨＯ－Ｋ１／ＢＣＭＡ細胞（完全長ヒトＢＣＭＡタンパク質を構成的に発現する社内で操作されたＣＨＯ細胞株）に対して、タンデムｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅを発現させたＳＴＳ－Ｔ細胞の細胞死滅アッセイの結果を示す。図１５に示すように、タンデムｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅは、トランスフェクトされていないＴ細胞と比較して標的腫瘍細胞に対して顕著な細胞傷害性を示す。
実施例３．ＳＴＳ－Ｔ細胞におけるＴＣＲ及びＣＤ３発現
実施例１からのｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄ（配列番号４８）を構築し、Ｔ細胞で発現させた。形質導入後５日目に、Ｔ細胞を回収し、外因性受容体発現を検出するために、ＢＣＭＡタンパク質（ヒトＢＣＭＡ タンパク質 Ｆｃ Ｔａｇ、ＡＣＲＯ、カタログ番号ＢＣ７－Ｈ５２５４）、内因性ＴＣＲの発現のために、抗ＴＣＲα／β（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３０６７１０）、内因性ＣＤ３の発現のために、抗ＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３００４３９）を用いて染色した。図１２に示すように、トランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）と比較して、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄは、トランスフェクトされていないＴ細胞と同様に、内因性ＴＣＲα／β及び内因性ＣＤ３の発現レベルを維持した。これは、本発明のキメラ受容体ポリペプチドが内因性ＴＣＲの発現及び／又は機能に影響を及ぼさなかったことを示している。
実施例１からのｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄ（配列番号４８）を構築し、Ｔ細胞で発現させた。形質導入後５日目に、Ｔ細胞を回収し、外因性受容体発現を検出するために、ＢＣＭＡタンパク質（ヒトＢＣＭＡ タンパク質 Ｆｃ Ｔａｇ、ＡＣＲＯ、カタログ番号ＢＣ７－Ｈ５２５４）、内因性ＴＣＲの発現のために、抗ＴＣＲα／β（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３０６７１０）、内因性ＣＤ３の発現のために、抗ＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３００４３９）を用いて染色した。図１２に示すように、トランスフェクトされていないＴ細胞（ＵｎＴ）と比較して、ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄは、トランスフェクトされていないＴ細胞と同様に、内因性ＴＣＲα／β及び内因性ＣＤ３の発現レベルを維持した。これは、本発明のキメラ受容体ポリペプチドが内因性ＴＣＲの発現及び／又は機能に影響を及ぼさなかったことを示している。
配列表
配列番号１（リンカー）
ＧＧＧＧＳ
配列番号２（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号３（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号４（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号５（リンカー）
ＧＧＳＧＧＳ
配列番号６（リンカー）
ＳＧＧＧＧＳ
配列番号７（リンカー）
ＧＲＡＧＧＧＧＡＧＧＧＧ
配列番号８（リンカー）
ＧＲＡＧＧＧ
配列番号９（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（Ｇ）ｎ
配列番号１０（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＳ）ｎ
配列番号１１（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＳＧＧＳ）ｎ
配列番号１２（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＧＧＳ）ｎ
配列番号１３（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＧＧＧＳ）ｎ
配列番号１４（リンカー）
ＧＧ
配列番号１５（リンカー）
ＧＧＳＧ
配列番号１６（リンカー）
ＧＧＳＧＧ
配列番号１７（リンカー）
ＧＳＧＳＧ
配列番号１８（リンカー）
ＧＳＧＧＧ
配列番号１９（リンカー）
ＧＧＧＳＧ
配列番号２０（リンカー）
ＧＳＳＳＧ
配列番号２１（ＩｇＧ４－Ｆｃリンカー）
配列番号２２（抗ＣＤ３ ｓｄＡｂ）
配列番号２３（抗ＣＤ３ ｓｄＡｂ）
配列番号２４（抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ（ＵＣＨＴ１））
配列番号２５（ＭＭＰ配列）
ＰＬＧＬＡＧ
配列番号２６（抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）
配列番号２７（抗ＴＣＲγ／δ Ａｂ）
配列番号２８（ＣＤ３ε；ＣＤ３ε細胞外ドメインは、下線部であり；シグナルペプチドは、影付きである）
配列番号２９（ＣＤ３γ；ＣＤ３γ細胞外ドメインは、下線部であり；シグナルペプチドは、影付きである）
配列番号３０（ＣＤ３δ；ＣＤ３δ細胞外ドメインは、下線部であり；シグナルペプチドは、影付きである）
配列番号３１（ＣＤ８ヒンジ）
ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤ
配列番号３２（ｔａＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
配列番号３３（ｔｂＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
配列番号３４（ｓｔａ；ＴＣＲαの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＶＩＧＦＲＩＬＬＬＫＶＡＧＦＮＬＬＭＴＬＲＬＷＳＳ
配列番号３５（ｓｔｂ；ＴＣＲαの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＩＬＬＧＫＡＴＬＹＡＶＬＶＳＡＬＶＬＭＡＭＶＫＲＫＤＦ
配列番号３６（ｔｇＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
配列番号３７（ｔｄＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
配列番号３８（ｓｔｇ；ＴＣＲγの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＹＹＭＹＬＬＬＬＬＫＳＶＶＹＦＡＩＩＴＣＣＬＬＲＲＴＡＦＣＣＮＧＥＫＳ
配列番号３９（ｓｔｄ；ＴＣＲδの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＬＧＬＲＭＬＦＡＫＴＶＡＶＮＦＬＬＴＡＫＬＦＦＬ
配列番号４０（ｓｅ；細胞外ドメインを含まないＣＤ３ε）
配列番号４１（ｓｇ；細胞外ドメインを含まないＣＤ３γ）
配列番号４２（ｓｄ；細胞外ドメインを含まないＣＤ３δ）
配列番号４３（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ＣＤ３εは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号４４（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｇ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ＣＤ３γは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号４５（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｄ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ＣＤ３δは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号４６（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｅ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｅは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；ＣＤ８ヒンジは、枠付きである）
配列番号４７（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｇ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｇは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；ＣＤ８ヒンジは、枠付きである）
配列番号４８（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｄ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｄは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；ＣＤ８ヒンジは、枠付きである）
配列番号４９（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ／ｔｂＣ；Ｐ２Ａ配列は、下線部であり；シグナルペプチド配列は、太字であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ配列は、イタリック体であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｂＣ配列は、影付きである）
配列番号５０（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｇＣ／ｔｄＣ；Ｐ２Ａ配列は、下線部であり；シグナルペプチド配列は、太字であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｇＣ配列は、イタリック体であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｄＣ配列は、影付きである）
配列番号５１（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔａＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｔａＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５２（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｂＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｔｂＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５３（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｇＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｔｇＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５４（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｔｄＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｔｄＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５５（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｔａは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５６（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｂ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｔｂは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５７（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｇ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｔｇは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５８（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｄ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ｓｔｄは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号５９（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ／ｓｔｂ；Ｐ２Ａ配列は、下線部であり；シグナルペプチド配列は、太字であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔａ配列は、イタリック体であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｂ配列は、影付きである）
配列番号６０（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｇ／ｓｔｄ；Ｐ２Ａ配列は、下線部であり；シグナルペプチド配列は、太字であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｇ配列は、イタリック体であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｓｔｄ配列は、影付きである）
配列番号６１（タンデムｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ｅ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ＣＤ３εは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号６２（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＴＣＲ Ａｂは、太字であり；ｔｇＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号６３（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｄＣ；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＴＣＲ Ａｂは、太字であり；ｔｄＣは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号６４（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ／ｔｄＣ；Ｐ２Ａ配列は、下線部であり；シグナルペプチド配列は、太字であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｇＣ配列は、イタリック体であり；ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＴＣＲ Ａｂ－ｔｄＣ配列は、影付きである）
配列番号６５（ｓｄＡｂＢＣＭＡ－抗ＣＤ３ ｓｃＦｖ－ＣＤ４；ＢＣＭＡ ｓｄＡｂは、下線部であり；抗ＣＤ３ ｓｃＦｖは、太字であり；ＣＤ４膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、イタリック体であり；シグナルペプチド配列は、影付きであり；リンカーは、枠付きである）
配列番号６６（Ｐ２Ａアミノ酸配列）
ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ
配列番号６７（リンカー）
ＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号６８（リンカー）
ＧＧＧＧＳＳ
配列番号１（リンカー）
ＧＧＧＧＳ
配列番号２（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号３（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号４（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号５（リンカー）
ＧＧＳＧＧＳ
配列番号６（リンカー）
ＳＧＧＧＧＳ
配列番号７（リンカー）
ＧＲＡＧＧＧＧＡＧＧＧＧ
配列番号８（リンカー）
ＧＲＡＧＧＧ
配列番号９（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（Ｇ）ｎ
配列番号１０（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＳ）ｎ
配列番号１１（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＳＧＧＳ）ｎ
配列番号１２（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＧＧＳ）ｎ
配列番号１３（リンカー；ｎは、少なくとも１の整数である）
（ＧＧＧＧＳ）ｎ
配列番号１４（リンカー）
ＧＧ
配列番号１５（リンカー）
ＧＧＳＧ
配列番号１６（リンカー）
ＧＧＳＧＧ
配列番号１７（リンカー）
ＧＳＧＳＧ
配列番号１８（リンカー）
ＧＳＧＧＧ
配列番号１９（リンカー）
ＧＧＧＳＧ
配列番号２０（リンカー）
ＧＳＳＳＧ
配列番号２１（ＩｇＧ４－Ｆｃリンカー）
ＰＬＧＬＡＧ
配列番号２６（抗ＢＣＭＡ ｓｄＡｂ）
ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤ
配列番号３２（ｔａＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
ＶＩＧＦＲＩＬＬＬＫＶＡＧＦＮＬＬＭＴＬＲＬＷＳＳ
配列番号３５（ｓｔｂ；ＴＣＲαの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＩＬＬＧＫＡＴＬＹＡＶＬＶＳＡＬＶＬＭＡＭＶＫＲＫＤＦ
配列番号３６（ｔｇＣ；膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインは、太字である）
ＹＹＭＹＬＬＬＬＬＫＳＶＶＹＦＡＩＩＴＣＣＬＬＲＲＴＡＦＣＣＮＧＥＫＳ
配列番号３９（ｓｔｄ；ＴＣＲδの膜貫通ドメイン及び細胞内ドメイン）
ＬＧＬＲＭＬＦＡＫＴＶＡＶＮＦＬＬＴＡＫＬＦＦＬ
配列番号４０（ｓｅ；細胞外ドメインを含まないＣＤ３ε）
ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ
配列番号６７（リンカー）
ＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号６８（リンカー）
ＧＧＧＧＳＳ
Claims (46)
- ａ）細胞外標的結合ドメイン；
ｂ）細胞外ＴＣＲ結合ドメイン；
ｃ）第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメイン；及び
ｄ）任意選択により、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインを含む細胞内ドメイン
を含むキメラ受容体ポリペプチドであって、前記第１のＴＣＲサブユニット及び前記第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ及びＴＣＲδからなる群から両方とも選択される、キメラ受容体ポリペプチド。 - 前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ及びＣＤ３ζからなる群から選択されるＴＣＲサブユニットを特異的に認識するＴＣＲ抗原結合ドメインを含む、請求項１に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記ＴＣＲ抗原結合ドメインは、ＣＤ３複合体の細胞外ドメイン又はＴＣＲγ／δを特異的に認識する、請求項２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記ＴＣＲ抗原結合ドメインは、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又は単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である、請求項２又は３に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上のＴＣＲ抗原結合ドメインを含む、請求項１～４のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第１のＴＣＲサブユニット又は前記第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインを含まない、請求項１～５のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- いかなるＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインも含まない、請求項６に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 細胞内共刺激ドメインを含まない、請求項１～７のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第１のＴＣＲサブユニット及び前記第２のＴＣＲサブユニットは、異なる、請求項１～８のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第１のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである、請求項１～９のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第２のＴＣＲサブユニットは、ＣＤ３εである、請求項１～９のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第１のＴＣＲサブユニット及び前記第２のＴＣＲサブユニットは、同じである、請求項１～８のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＣＤ３εの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＣＤ３εの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＣＤ３γの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＣＤ３γの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＣＤ３δの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＣＤ３δの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＴＣＲαの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＴＣＲαの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＴＣＲβの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＴＣＲβの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＴＣＲγの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＴＣＲγの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記キメラ受容体ポリペプチドの前記膜貫通ドメインは、ＴＣＲδの膜貫通ドメインを含み、前記キメラ受容体ポリペプチドの前記細胞内ドメインは、ＴＣＲδの細胞内ドメインを含む、請求項１２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメインは、前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＮ末端である、請求項１～１９のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメインは、前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインのＣ末端である、請求項１～１９のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメインは、標的抗原を特異的に認識する標的抗原結合ドメインを含む、請求項１～２１のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記標的抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ又は設計アンキリンリピートタンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）である、請求項２２に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメインは、タンデムに配置された２つ以上の標的抗原結合ドメインを含む、請求項２２又は２３に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ同じ標的抗原を特異的に認識する、請求項２４に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記２つ以上の標的抗原結合ドメインは、それぞれ異なる標的抗原を特異的に認識する、請求項２４に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＧＥ－Ａ３、ＡＦＰ、ＣＤ４、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ７０、ＣＤ１２３、ＣＥＡ、ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｖＩＩＩなど）、ＧＤ２、ＧＰＣ－２、ＧＰＣ－３、ＨＥＲ２、ＬＩＬＲＢ４、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＧＦ１Ｒ、メソテリン、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＷＴ１、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ１、ＴＧＦａＲＩＩ、ＴＧＦｂＲＩＩ、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ４、ＨＰＶ関連抗原及びＥＢＶ関連抗原（ＬＭＰ１及びＬＭＰ２など）からなる群から選択される、請求項１～２６のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記標的抗原は、ＢＣＭＡである、請求項２７に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメインを前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインと接続する第１のリンカーをさらに含む、請求項１～２８のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記細胞外標的結合ドメイン及び／又は前記細胞外ＴＣＲ結合ドメインを前記膜貫通ドメインと接続する第２のリンカーをさらに含む、請求項１～２９のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記第１のリンカー及び／又は前記第２のリンカーは、ＧＳリンカー、αヘリックスリンカー、グリシン－アラニンポリマーリンカー、アラニン－セリンポリマーリンカー又はＩｇＧ４－Ｆｃリンカーである、請求項２９又は３０に記載のキメラ受容体ポリペプチド。
- 前記Ｎ末端から前記Ｃ末端まで、
ａ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメイン；又は
ｂ）任意選択によるシグナルペプチド－細胞外ＴＣＲ結合ドメイン－任意選択による第１のリンカー－細胞外標的結合ドメイン－任意選択による第２のリンカー－任意選択によるヒンジ領域－膜貫通ドメイン－細胞内ドメイン
を含む、請求項１～３１のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチド。 - 請求項１～３２のいずれか一項に記載のキメラ受容体ポリペプチドをコードする単離された核酸。
- 請求項３３に記載の１つ以上の核酸を含む核酸ベクター。
- 請求項１～３２のいずれか一項に記載の１つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む単離された免疫細胞。
- ２つ以上のキメラ受容体ポリペプチドを含む、請求項３５に記載の単離された免疫細胞。
- 請求項３３に記載の核酸又は請求項３４に記載の核酸ベクターを含む単離された免疫細胞。
- Ｔαβ細胞、Ｔγδ細胞、エフェクターＴ細胞、メモリーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）からなる群から選択される、請求項３５～３７のいずれか一項に記載の単離された免疫細胞。
- Ｔ細胞である、請求項３８に記載の単離された免疫細胞。
- キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、請求項３５～３９のいずれか一項に記載の単離された免疫細胞。
- 操作されたＴＣＲをさらに含む、請求項３５～４０のいずれか一項に記載の単離された免疫細胞。
- 請求項３５～４１のいずれか一項に記載の単離された免疫細胞及び任意選択による薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
- 個体の疾患を処置する方法であって、有効量の、請求項３５～４１のいずれか一項に記載の免疫細胞又は請求項４２に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む方法。
- 前記医薬組成物は、静脈内、腫瘍内又は皮下に投与される、請求項４３に記載の方法。
- 前記疾患は、癌である、請求項４３又は４４に記載の方法。
- 前記癌は、急性白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含むが、これらに限定されない）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物（ＢＰＤＣＮ）からなる群から選択される、請求項４５に記載の方法。
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