JP2022513126A - 脱毛治療又は毛髪成長促進用の組成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、シルクタンパク質と血漿又は血清成分を含有する脱毛治療又は毛髪成長促進用の組成物に関し、本発明によれば、シルクタンパク質と血漿又は血清成分の相乗効果によって、より効率的な毛髪成長促進効果及び脱毛治療効果が期待できる。

Description

本発明は、シルクタンパク質と血漿又は血清成分を含有する脱毛治療又は毛髪成長促進用の組成物に関し、より詳細には、５～３００ｋＤａのシルクタンパク質と血漿成分を有効成分として含有する脱毛治療又は毛髪成長促進用の組成物に関する。

脱毛は、古くから男性や一部の女性を長い間悩ませてきた問題であり、男性における脱毛の最も一般的なタイプは、男性型脱毛症（ｍａｌｅ ｐａｔｔｅｒｎ ｂａｌｄｎｅｓｓ）又は脱毛症（ａｌｏｐｅｃｉａ）である。一般的な脱毛症の場合、脱毛は長年かけて徐々に起こり、頭の頭頂部で目立ち始まり、前頭部位に進行する。脱毛に苦しんでいる女性の場合では、脱毛は、毛髪が細くなりながら、男性の脱毛に比べてより分散して発生し、通常、閉経後に現れる。脱毛を緩和または治療するために、毛髪の成長を刺激したり、脱毛を抑えるための物質を開発するための努力が化粧料や製薬の産業分野で古くから続いてきた。

毛髪成長促進剤を生産しようとする従来の試みから多くの化合物が候補物質として開発された。医学、科学及び特許文献を含めて記録された文献は、特に人の頭皮上の毛髪と関連して脱毛を治療／又は予防し、毛髪成長を回復及び／又は促進するのに様々な努力があったことを示している。実際に、多くの様々な活性化合物が提示されており、代表例に、２，４－ジアミノ－６－ピペリジノピリミジン－３－オキシド（“ミノキシジル”とも呼ばれる。）又はＩＩ型還元酵素の特定抑制剤であるフィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）を挙げることができる（米国特許第４，１３９，６１９号及び米国特許第４，５９６，８１２号）。ミノキシジルを活性成分としている医薬がロゲイン（Ｒｏｇａｉｎｅ，Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏｍｐａｎｙの商標名）として市販されている。ロゲインは、男性型脱毛症を患っている男性において、１０％まで脱毛を減少させ、毛髪成長を促進するものとして提案されている。ロゲインは、頭皮部位に外部から直接適用する溶液であり、治療上の適用は、規則的に長期間にわたって持続しなければならないものと知られている。フィナステリドを活性成分として用いた医薬は、プロペシア（Ｐｒｏｐｅｃｉａ，Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．の商標名）として市販されている。プロペシアは、経口投与用の丸剤である。これも、持続的ながらも規則的な服用が必要である。

最近では、動物由来血清又は血漿が毛髪成長促進効果を示す可能性が提示された（韓国登録特許第０，６１７，６４４号）。他方では、薬草を含めて天然植物抽出物を基本とした多くの組成物が脱毛症の治療に利用可能であることが提示されている。毛髪成長組成物として通常知られている薬物の多くの抽出物が毛髪成長刺激剤又は促進剤として用いられている。しかしながら、実際に、それらの抽出物は、毛髪又は脱毛症の状態が個人ごとに異なるため、毛髪成長に肯定的な効果を発揮していないのが一般である。たとえ一部の毛髪成長用組成物がある程度効果を示すとしても、皮膚刺激、不快な臭いなどによって長期間にわたって持続使用することは困難である不具合があった。

他の脱毛症の治療法には毛髪移植がある。典型的に、この方法は、毛髪が成長している頭皮部位からハゲ部位に天然毛髪を植毛することを含む。しかしながら、毛髪移植体は一般に、植毛して約２～４週後に脱離する。たとえ大部分の移植体は３～４ケ月後に再成長するが、追加移植手術が必要な場合もある。したがって、このような移植法は費用と時間がかかり、苦痛であり、成功確率が制限される。したがって、より短期間で優れた脱毛症治療又は毛髪成長促進効果を奏しながらも副作用を伴わない方法及び毛髪成長組成物の開発が切実な現状である。

そこで、本発明者らは、優れた脱毛治療効果及び毛髪成長効果を有する組成物を開発するために鋭意努力した結果、動物から由来した血漿又は血清成分とシルクタンパク質を共に含む組成物が脱毛症患者の毛髪成長を誘導及び促進する活性を有するということを発見し、本発明を完成するに至った。

本発明の目的は、脱毛症患者の毛髪成長を誘導及び促進する活性を有し、且つ副作用を伴わない毛髪成長促進又は脱毛抑制用の組成物を提供することにある。

本発明の他の目的は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む脱毛症の治療又は予防方法を提供することにある。

本発明の他の目的は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む毛髪成長促進又は脱毛抑制方法を提供することにある。

本発明の他の目的は、毛髪成長促進又は脱毛抑制のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の用途を提供することにある。

本発明の他の目的は、毛髪成長促進又は脱毛抑制用薬剤の製造のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の使用を提供することにある。

上記の目的を達成するために、本発明は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を有効成分として含有する毛髪成長促進又は脱毛抑制用の医薬組成物を提供する。

本発明はまた、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を有効成分として含有する毛髪成長促進又は脱毛抑制用の化粧料組成物を提供する。

本発明はまた、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む脱毛症の治療又は予防方法を提供する。

本発明はまた、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む毛髪成長促進又は脱毛抑制方法を提供する。

本発明はまた、毛髪成長促進又は脱毛抑制のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の用途を提供する。

本発明はまた、毛髪成長促進剤又は脱毛抑制剤の製造のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の使用を提供する。

除毛された白鼠から血漿と組換えクモシルクタンパク質の毛髪成長促進効果を確認した結果を示す。

別に断らない限り、本明細書で使われる全ての技術的及び科学的用語は、本発明の属する技術の分野における熟練した専門家に通常理解されるのと同じ意味を有する。一般に、本明細書における命名法は、本技術分野によく知られており、通常用いられるものである。

本発明では、ヒト又は動物由来の血漿又は血清成分とシルクタンパク質を含有する組成物を除毛されたマウスに塗布する場合、優れた毛髪成長効果を示すことを確認し、ヒト又は動物由来の血漿又は血清とシルクタンパク質を含有するシャンプーを製造し、脱毛患者に適用したとき、脱毛抑制及び毛髪成長が促進されることを確認した。

したがって、本発明は、一観点において、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を有効成分として含有する毛髪成長促進又は脱毛抑制用の医薬組成物に関する。

本発明において、前記血漿又は血清は、ヒト又は家畜から由来したものであることを特徴とし得る。

本発明において、前記シルクタンパク質は、自然由来又は組換えシルクタンパク質であることを特徴とし、前記シルクタンパク質は、ドラグラインシルク（ｄｒａｇｌｉｎｅ ｓｉｌｋ）、エラスチン（ｅｌａｓｔｉｎ）、シルクフィブロイン（ｓｉｌｋ ｆｉｂｒｏｉｎ）、ビサス（ｂｙｓｓｕｓ）、セリシン（ｓｅｒｉｃｉｎ）、鞭毛状シルク（ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍ ｓｉｌｋ）及びコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ）からなる群から選ばれるタンパク質を構成する反復単位ペプチドであることを特徴とし得る。

本発明において、前記シルクタンパク質は、グリシン或いはセリン含有量が１％以上であるシルク反復単位ペプチドが１～１６０回反復されている構造を有することを特徴とし、前記シルクタンパク質は、５～３００ｋＤａの分子量を有することを特徴とし得る。

シルクタンパク質は、最近になって様々な生化学的及び医薬的用途への応用が活発に研究され、新しい生体材料として注目されており、本発明では、シルクタンパク質及びシルクペプチドは、保湿能に優れ、ケラチン（ｋｅｒａｔｉｎ）への吸着力が良いという点から、毛髪成長及び脱毛防止組成物に含有させる場合、髪が豊かに見える効果を奏することを確認した。

本発明の組成物は、シャンプー、クリーム、ローション、トニック、スプレー、エアゾール、オイル、溶液、懸濁液、ゲル及び軟膏からなる群から選ばれる剤形にすることができる。

他の観点において、本発明は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を有効成分として含有する毛髪成長促進又は脱毛抑制用の化粧料組成物に関する。

さらに他の観点において、本発明は、脱毛症を治療し、及び／又は毛髪成長を促進するための血漿又は血清の用途に関する。

さらに他の観点において、本発明は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む脱毛症の治療又は予防方法に関する。

さらに他の観点において、本発明は、血漿又は血清成分とシルクタンパク質を投与する段階を含む毛髪成長促進又は脱毛抑制方法に関する。

さらに他の観点において、本発明は、毛髪成長促進又は脱毛抑制のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の用途に関する。

さらに他の観点において、本発明はまた、毛髪成長促進剤又は脱毛抑制剤の製造のための血漿又は血清成分とシルクタンパク質の使用に関する。

本発明は、血漿又は血清を活性成分として含有した組成物を約１週～約８週間に頭皮の脱毛部位に局所適用することによって、毛髪成長を促進、誘導及び刺激し、及び／又は脱毛を減少させることを特徴とする。

本発明で使われる用語“脱毛抑制”とは、部分的又は完全脱毛を防止、抑剤、阻止及び減少させることを意味する。

本発明で使われる用語“毛髪成長”とは、哺乳動物において毛髪発生の維持、誘導、刺激、促進及び再生；欠損毛髪の成長；毛髪周期において成長期の延長；又は軟毛を成毛に転換させることを包括するものと定義される。

本発明で使われる用語“脱毛症”とは、毛髪成長の欠損、及び部分的又は全体的な毛髪の喪失を意味し、これらに限定されるものではないが、男性ホルモン性脱毛症又は男性型脱毛症、毒性脱毛症、円形脱毛症、休止期脱毛症、内分泌異常、代謝障害、栄養障害による脱毛症、薬剤性脱毛症、機械的脱毛症、皮膚疾患に伴う脱毛症、瘢痕性脱毛症、先天性脱毛症、毛髪抜去症が含まれる。脱毛症は、毛髪周期（ｐｉｌａｒ ｃｙｃｌｅ）が崩壊する時に発生する。頻度の最も高い現象は、細胞増殖の中止による毛髪成長又は成長期の短縮である。これは、退行期の早い開始による結果であり、結局としては多数の毛髪が休止期に入ることになってしまう。休止期においては毛嚢が真皮乳頭から脱離して毛髪が抜ける。脱毛症は、遺伝要因、老化、局所及び全身疾患、発熱症状、精神的ストレス、ホルモン問題及び薬物の副作用などを含む多くの病因を持つ。

本発明で使われる用語“脱毛症治療”とは、脱毛症状態に入るような動物から脱毛症を予防し、及び／又は脱毛症を抑剤、鈍化又は減少させ、及び／又は毛髪成長を促進し、及び／又は毛髪周期の成長期を延長させ、及び／又は軟毛を成毛に転換させることを意味する。成毛は、毛嚢根が真皮内に深く着床している、太くて、長くて、着色した毛髪である。一方、軟毛は、毛嚢根が真皮の表面に位置している、細くて、滑らかで、短くて、脱色した毛髪である。脱毛症が進行するにつれて、毛髪は成毛型から軟毛型に変わる。

本発明において活性成分として用いる血漿は、典型的に哺乳動物の血液中の有形成分、すなわち細胞及び細胞断片が分離された淡黄色の液体成分のことを指し、その成分及び組成はよく知られている（Ｐｈｉｌｉｐ Ｗｅｓｔｅｒｍａｎ，Ｐｌａｓｍａ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＶＩＩ－１ ｔｏ ＶＩＩ－１３，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ １７，２００２；及びＷｅｎｄｙ Ｙ．Ｃｒａｉｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｓｍａ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ，Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ－それらの文献の全体内容は、本願に参考によって組み込まれる。）。血清（ｓｅｒｕｍ）もよく定義されており、通常、血漿からフィブリノーゲンとその他凝固因子が除去されたものである。

本発明において血漿又は血清の供給源は、ヒト、非ヒト霊長類を含む哺乳動物の全ての種を含み、例えば、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウマ、イヌ、ウシなどを含む家畜、その他霊長類、齧歯類などが含まれる。

本発明において血漿又は血清はよく知られた通常の方法、例えば、遠心分離、沈降又は濾過方法によって血液から容易に分離可能である。遠心分離は、血漿から血液細胞を沈降させるのに適した条件下で行うことができる。例えば、約３，０００ｒｐｍで約１０分間遠心分離するが、これは、赤血球及び白血球だけでなく、実質的に全ての細胞断片（血小板）を沈殿させるのに十分である。

血漿を含有する上澄液は、標準技術によって沈降した細胞から容易に分離できる。濾過法は、血液を、血漿から血液細胞を分離するのに適したフィルターに通過させることによって行うことができる。フィルターは、タンパク質の良好な透過を提供する微細孔膜でよい。

血漿又は血清は、採血後に遠心分離又は沈殿させて得た新鮮液状血漿又は液状製剤の他、使用する前に様々な状態で保存していることが知られており、例えば、新鮮凍結製剤、凍結沈殿製剤、凍結乾燥製剤又は濃縮製剤を挙げることができる。このような全ての状態の血漿又は血清を本発明に用いることができる。新鮮凍結血漿は、血液から採血して６時間以内に約２８００ｒｐｍで約１５分間遠心分離して血液細胞と血漿成分を分離し、約－１８℃～－４０℃の温度で凍結させて製造したものであり、使用時には、約３０℃～３７℃の温水で解凍させて使用する。

凍結沈殿血漿は、新鮮凍結血漿１単位を約４℃で溶かし、この時に生じる白色沈殿物（ｃｏｌｄ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）（ＶＩＩＩ：Ｃ、フィブリノーゲン、ＸＩＩＩ、フィブロネクチンなどのような多量の因子を含む。）を分離して約－１８℃～－４０℃の温度で再凍結させたものである。凍結沈殿製剤は、１～６℃の冷蔵庫で一晩放置して解凍させたり、又は約４℃の水浴（ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ）でより速く解凍させて使用することができる。濃縮血漿は、血液から血漿を分離し、分離された血漿をデキストラノマ、セファデックス（ＳＥＰＨＡＤＥＸ）、デキストラミン、ポリアクリルアミド、バイオ－ゲル（ＢＩＯ－ＧＥＬ）Ｐ、シリカゲル、ゼオライト、デブリサン（ＤＥＢＲＩＳＡＮ）、架橋されたアガロース、澱粉又はアルギン酸ゲルのような濃縮剤と混合して濃縮させた後、濃縮物から濃縮剤を分離して得るものである。

本発明の一態様として、血漿又は血清は、商業的に販売していることを使用することができる。例えば、血液銀行から商業的に販売している粉末状製剤、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの液状製剤（例えば、Ｇｉｂｃｏ^ＴＭニワトリ血清、Ｇｉｂｃｏ^ＴＭヤギ血清、Ｇｉｂｃｏ^ＴＭヒツジ血清、Ｇｉｂｃｏ^ＴＭブタ血清、Ｇｉｂｃｏ^ＴＭウサギ血清）、又はＧｅｍｉｎｉ Ｂｉｏ－Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＣＡ ９５７７６，ＵＳＡ）の血清製剤（例えば、ニワトリ血清（Ｃａｔ．＃１００－１６１）、イヌ血清（Ｃａｔ．＃１００－１６０）、ドナーロバ血清（Ｄｏｎｏｒ Ｄｏｎｋｅｙ ｓｅｒｕｍ）（Ｃａｔ．＃１００－１５１）、ドナーヤギ血清（Ｄｏｎｏｒ Ｇｏａｔ ｓｅｒｕｍ）（Ｃａｔ．＃１００－１０９）、ドナーラット血清（Ｄｏｎｏｒ Ｒａｔ ｓｅｒｕｍ）（Ｃａｔ．＃１００－１５５）、ネコ血清（Ｆｅｌｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）（Ｃａｔ．１００－１５３）、ギニーピッグ血清（Ｃａｔ．＃１００－１３０）、サル血清（Ｃａｔ．＃１００－１５４）、マウス血清（Ｃａｔ＃１００－１１３）、ブタ血清（Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ）（Ｃａｔ．＃１００－１１５）、ウサギ血清（Ｃａｔ．＃１００－１１６）、ラット血清（Ｃａｔ．＃１００－１５０）、ヒツジ血清（Ｃａｔ．＃１００－１１７））を使用することができる。このような製品は、ヒトを含むその他動物起源の血漿単位から由来したものであり、様々な抗原抗体、例えば、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＣ型肝炎（ＨＣＶ）抗体に対して非反応性であり、ＨＩＶ－１及びＨＩＶ－２に対する抗体に対して陰性であることが試験結果から確認されたものである。このような製剤を製造するために用いられる全ての血漿単位は、病原性がないことが事前に検証されている。病原菌の潜伏的な伝播危険性を減らすために、製剤は、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎ウイルス及びＨＣＶのような外皮ウイルスを不活性化させるために考案されたトリ（ｎ－ブチル）／ホスフェート／ポリソルベート８０のような有機溶媒／洗浄剤混合物で処理することができる。また、ウイルスの除去は、ナノ濾過段階をさらに行うことによって強化することができる。

更なる態様として、製剤は、独立した（従って剰余の）精製技術（すなわち、溶媒洗浄剤とナノ濾過）又は低温殺菌を用いて製造する。精製は、血液又は血漿状態で行うことができる。

生成された血漿又は血清分画は、加熱、凍結乾燥又はその他適切な乾燥技術によって粉末化できる。例えば、血漿又は血清を数日間（例えば、約７日間）－４０℃未満の温度で凍結乾燥させる。当業者に知られた通常の技術及び変数を用いることができる。

脱毛症を効果的に治療したり或いは毛髪成長を効果的に促進するためには、本発明の方法及び薬剤組成物に用いられた血漿又は血清が標的部位で容易に作用する必要がある。そのために、本発明によって好適に使用するための組成物は、本発明の活性成分として血漿又は血清を薬剤学的に許容される担体と配合して含有する製剤を含む。血漿又は血清は、組成物の重量を基準に０．００１％～９９．９９９％で存在する。他の方法として、担体と配合せず、血漿又は血清そのものを製剤として使用する。本願に使われる用語“薬剤学的に許容される”とは、製剤の他の成分と混和でき、被投与者に害を及ぼさないという意味である。

本発明において、前記組成物は、好ましくは、血漿成分を０．０１～１０％含有し、シルクタンパク質を０．００１～１０％含有でき、より好ましくは、血漿成分を０．１～２％含有し、シルクタンパク質を０．０１～１％含有でき、さらに好ましくは、血漿成分を０．２～１％含有し、シルクタンパク質を０．０２～０．１％含有することが好ましい。

前記組成物において、血漿を１０％以上含有すると、追加される量に比べて脱毛治療効果の向上が期待できず、血漿を０．０１％未満で含有すると、脱毛治療効果が期待できない。シルクタンパク質を１０％以上含有すると、追加される量に比べて脱毛治療効果の向上が期待できず、シルクタンパク質を０．００１％未満で含有すると、脱毛治療効果が期待できない。

本発明に係る血漿又は血清は、典型的に局所形態で投与される。局所投与に適した剤形には、ローション、エマルジョン、クリーム、軟膏、擦剤、スプレー、エアゾール、オイル、ペースト、ゲル、トニック、溶液又は懸濁液のような液状又は半液状製剤を含む。それらの毛髪成長製剤を製造するためには、製薬及び／又は化粧技術分野において通常用いられているか、よく知られている如何なる装置及び方法によっても様々な成分を混合溶解したり或いは混合物を捏ねて剤形化することができる［参考文献：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７５，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １８０４２（Ｃｈａｐｔｅｒ ８７：Ｂｌａｕｇ，Ｓｅｙｍｏｕｒ）］。好ましい剤形は、ゲル、軟膏、ローション、クリームである。

軟膏では、血漿又は血清は、例えば、下記成分のいずれか一つ以上の混合物中に懸濁又は溶解される：鉱油、パラフィン、鉱物油、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、グリセリン、ステアリルアルコール、乳化用ワックス、セタノール、ラウリル硫酸ナトリウム、エチル又はブチルパラオキシベンゾエート、塩水及び水。ローション又はクリームでは、血漿又は血清は、例えば、下記成分のいずれか一つ以上の混合物中に懸濁又は溶解される：鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、ワセリン、ラノリン、塩水、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水。前記成分の他に、本発明の製剤は、希釈剤、緩衝剤、風味剤、結合剤、界面活性剤、濃厚化剤、潤滑剤、保存剤、ｐＨ調整剤、殺菌剤、酸化防止剤、乳化剤、安定剤、香料、着色剤などの一つ以上の成分をさらに含むことができる。

本発明に係る血漿又は血清の容量は、性別、年齢、脱毛症状、毛髪状態などを考慮して適切に決定される必要がある。通常、成人に対する１回容量は、１日に約０．１～約５ｍｇ／ｃｍ^２であり、頭皮に適用される。

以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は単に本発明を例示するためのものであり、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されると解釈されないことは、当業界における通常の知識を有する者にとって明らかであろう。

実施例１：ウシ血漿及び血清を含む軟膏剤の製造
ウシ胎児血清（ＦＢＳ，Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ； Ｂｉｏｆｌｕｉｄｓ．Ｉｎｃ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）を冷凍乾燥用の試料瓶に５００ｍｌ入れ、－８０℃冷凍機（Ｆｏｒｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．Ｏｈｉｏ，ＵＳＡ）で６時間冷凍させた。この時、ＦＢＳは、耐毒素容量が０．１ｎｇ／ｍｌ以下であり、ヘモグロビン容量が３０ｎｇ／１００ｍｌ以下であるものを使用した。冷凍したＦＢＳが入っている試料瓶を冷凍乾燥／シェル冷凍システム（Ｌａｂｃｏｎｃｏ，Ｃｏ．Ｋａｎｓａｓ Ｃｉｔｙ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ．ＵＳＡ）に装着後にシステムを作動し、－４８℃で７日間冷凍乾燥させて粉末剤を製造した。このとき、全過程を無菌的な条件で行った。

上記製造した粉末５ｇを、水溶性軟膏基剤である半ベースクリーム（サマ製薬）９５ｇと混合した後、ここに適当量の生理食塩水を添加して混合し、１Ｎ ＨＣｌ（塩酸）又は１Ｎ ＮａＯＨ（水酸化ナトリウム）を添加して撹拌しながらｐＨ測定機（Ｏｒｉｏｎ）でｐＨを測定してｐＨを５．５に調節した軟膏剤を製造した。

実施例２：ウシ血漿又は血清及びシルクタンパク質を含むゲル剤の製造
実施例１で製造した粉末（５重量部）を、９５重量部の成分（Ｃａｒｂｏｐｏｌ ＥＴＤ２０２０ ３８ｍｇ、グリセリン１１６ｍｇ、プロピレングリコール３８ｍｇ、トリエタノールアミン１９２ｍｇ及び適当量の精製水）と混合してｐＨ５．８～６．０の澄明なゲル剤を得た。Ｃａｒｂｏｐｏｌ ＥＴＤ ２０２０は、Ｃ_{１０－３０}アルキルアクリレート交差重合体を有するアクリレートである。

組換えシルクタンパク質は、既存の特許（韓国登録特許１０－１３１７４２０Ｂ１）に記載された方法にしたがって製造した。

下記の配列番号１の配列を持つペプチドが４８回反復されている構造を有する高分子量の組換えシルク又はシルク様タンパク質を使用した。

配列番号１：ＮＨ２－ＳＧＲＧＧＬＧＧＱＧＡＧＭＡＡＡＡＡＭＧＧＡＧＱＧＧＹＧＧＬＧＳＱＧＴ－ＣＯＯＨ

生産のために流加式発酵を行い、透析手法を用いて目的タンパク質を抽出した。

血漿及び血清が２．５％（２５ｇ／Ｌ）混合されているエッセンスに、４ｇ／Ｌ濃度の組換えシルクタンパク質を１ｘ ＰＢＳバッファー８０ｍｌに溶かして５％のストック（ｓｔｏｃｋ）を作り、そのストックを最終０．０５％となるように混合してゲルを製造した。

実施例３：ウシ血漿及び血清と組換えシルクタンパク質の毛髪成長促進効果比較
５週齢の白鼠（４００～５００ｇ，Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ系）８匹の背部位を完全に除毛するために、毛を剃った後、除毛剤（Ｍｏｕｓｅ ｒｅｍｏｖａｌ ｃｒｅａｍ；Ｖｅｅｔ）を１匹当たり２０～３０ｇを塗り、５分後に除毛クリームを拭き取って毛を完全に除去した。毛の除去された部位にテストステロン４０ｍｇ／ゲルを２ｇ／匹で毎日３週間に朝と夕方に２回ずつ塗りながら、３週後に毛が生えなかった４匹を選択して除毛を再反復した。

実験白鼠４匹に、それぞれ、対照群ゲル、血漿（２．５％）を含むゲル（Ｐｌａｓｍａ ｏｎｌｙ）、組換えクモシルクタンパク質（０．０５％）だけを含むゲル（ＳＳ ｏｎｌｙ）、そして血漿（２．５％）と組換えクモシルクタンパク質（０．０５％）を含むゲル（Ｐｌａｓｍａ＋ＳＳ）を、脱毛部位に３ｇ／匹／日で１週間処理した。

８日後、実験動物を取って観察した結果、図１に見られるように、対照群に比べて血漿と組換えクモシルクタンパク質を含むゲルを塗った部位で自然発生的に育った毛髪の厚さ及び数が顕著に厚くて多いことが確認された。また、ウシ血漿だけが含まれた軟膏とシルクタンパク質だけが含まれた軟膏を塗った部位で育った毛髪は、血漿とシルクタンパク質の両方を含む軟膏を塗った部位に比べてより減少した毛髪の厚さ及び数が確認できた。

実施例４：ウシ血清及びセリシンペプチドの毛髪成長促進効果比較
実施例３と同じ方法で準備した実験用白鼠４匹に、それぞれ、対照群ゲル、血漿及び血清を含むゲル、セリシンタンパク質（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）だけを含むゲル、及び血漿粉とセリシンタンパク質を含むゲルを、脱毛部位に３ｇ／匹／日で１週間処理した。

８日後に実験動物を取って観察した結果、対照群に比べて、血漿及び血清とセリシンタンパク質を含むゲルを塗った部位で自然発生的に育った毛髪の厚さ及び数が顕著に厚くて多いことが観察された。また、ウシ血清だけが含まれた軟膏とシルクタンパク質だけが含まれた軟膏を塗った部位で育った毛髪は、これら両方を含む軟膏を塗った部位に比べてより少ない毛髪の厚さ及び数が確認できた。

実施例５：ウシ血清及びシルクタンパク質含有シャンプーの脱毛防止効果確認用シャンプーの製造
実施例２で製造したウシ血清粉末５ｇ、組換えクモシルクタンパク質５０ｇ、界面活性剤であるオリベム（登録商標）（Ｓｏｄｉｕｍ ＰＥＧ－７ ｏｌｉｖｅ ｏｉｌ Ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）１５０ｇ、アミノ酸（Ａｃｍｉｎｏ Ａｃｉｄ）１５０ｇ、ハバスベタイン（Ｂａｂａｓｓｕａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ Ｂｅｔａｉｎｅ）１５０ｇ添加物であるビュープレックス（Ｂｅａｕｐｌｅｘ Ｖｉｔａｍｅｎ）３０ｇ、パンテノール（ＤＬ－ｐａｎｔｈｅｎｏｌ）４５ｇ、フィチン酸（Ｐｈｙｔｉｃ Ａｃｉｄ）２４ｇ、プロポリス（Ｐｒｏｐｏｌｉｓ Ｅｘｔｒａｃｔ）３０ｇ、マルチナチュロティックス（ＭｕｌｔｉＥｘ Ｎａｔｕｒｏｔｉｃｓ）６０ｇ、クエン酸（Ｃｉｔｒｉｃ Ａｃｉｄ）６ｇを撹拌機に入れて約２５ｒｐｍの速度で撹拌し、シャンプー１を３０００ｇ製造した。

実施例２で製造したウシ血清粉末５ｇ、界面活性剤であるオリベム（登録商標）（Ｓｏｄｉｕｍ ＰＥＧ－７ ｏｌｉｖｅ ｏｉｌ Ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）１５０ｇ、アミノ酸（Ａｃｍｉｎｏ Ａｃｉｄ）１５０ｇ、ハバスベタイン（Ｂａｂａｓｓｕａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ Ｂｅｔａｉｎｅ）１５０ｇ添加物であるビュープレックス（Ｂｅａｕｐｌｅｘ Ｖｉｔａｍｉｎ）３０ｇ、パンテノール（ＤＬ－ｐａｎｔｈｅｎｏｌ）４５ｇ、フィチン酸（Ｐｈｙｔｉｃ Ａｃｉｄ）２４ｇ、プロポリス（Ｐｒｏｐｏｌｉｓ Ｅｘｔｒａｃｔ）３０ｇ、マルチナチュロティックス（ＭｕｌｔｉＥｘ Ｎａｔｕｒｏｔｉｃｓ）６０ｇ、クエン酸（Ｃｉｔｒｉｃ Ａｃｉｄ）６ｇを攪拌機に入れて約２５ｒｐｍの速度で撹拌し、シャンプー２を３０００ｇ製造した。

シルクタンパク質５０ｇ、界面活性剤であるオリベム（登録商標）（Ｓｏｄｉｕｍ ＰＥＧ－７ｏｌｉｖｅ ｏｉｌ Ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）１５０ｇ、アミノ酸（Ａｃｍｉｎｏ Ａｃｉｄ）１５０ｇ、ハバスベタイン（Ｂａｂａｓｓｕａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ Ｂｅｔａｉｎｅ）１５０ｇ添加物であるビュープレックス（Ｂｅａｕｐｌｅｘ Ｖｉｔａｍｉｎ）３０ｇ、パンテノール（ＤＬ－ｐａｎｔｈｅｎｏｌ）４５ｇ、フィチン酸（Ｐｈｙｔｉｃ Ａｃｉｄ）２４ｇ、プロポリス（Ｐｒｏｐｏｌｉｓ Ｅｘｔｒａｃｔ）３０ｇ、マルチナチュロティックス（ＭｕｌｔｉＥｘ Ｎａｔｕｒｏｔｉｃｓ）６０ｇ、クエン酸（Ｃｉｔｒｉｃ Ａｃｉｄ）６ｇを攪拌機に入れて約２５ｒｐｍの速度で撹拌し、シャンプー３を３０００ｇ製造した。

前記シャンプー１～３及び陽性対照シャンプー（Ｔｓ（登録商標）シャンプー、脱毛ドットコム）を、各２０名ずつ総８０名に対して使用したが、２０～６０代の男子６０名、女子２０名のうち、既に脱毛した１０名、脱毛が進行中である３０名が含まれた。各グループの被験者たちは、それぞれのシャンプーを３０日間に１日１回使用した。

その結果、ウシ血清とシルクタンパク質が含まれたシャンプー１で有意に優れた脱毛防止及び発毛効果を示した。

本発明によれば、シルクタンパク質と血漿又は血清成分の相乗効果によって、より効率的な毛髪成長促進効果及び脱毛治療効果が期待できる。

以上、本発明内容の特定の部分を詳細に記述したところ、当業界における通常の知識を有する者にとって、それらの具体的記述は単に好ましい実施の態様であるだけで、それらによって本発明の範囲が制限されないという点が明らかであろう。したがって、本発明の実質的な範囲は、添付する請求項及びそれらの等価物によって定義されるといえよう。

Claims (13)

1. 血漿又は血清成分とシルクタンパク質とを有効成分として含有する、毛髪成長促進又は脱毛抑制用の医薬組成物。
2. 前記血漿又は血清は、ヒト又は家畜から由来したものであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
3. 前記シルクタンパク質は、自然由来又は組換えシルクタンパク質から由来したものであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
4. 前記シルクタンパク質は、ドラグラインシルク（ｄｒａｇｌｉｎｅ ｓｉｌｋ）、エラスチン（ｅｌａｓｔｉｎ）、シルクフィブロイン（ｓｉｌｋ ｆｉｂｒｏｉｎ）、ビサス（ｂｙｓｓｕｓ）、セリシン（ｓｅｒｉｃｉｎ）、鞭毛状シルク（ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍ ｓｉｌｋ）及びコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ）からなる群から選ばれるタンパク質を構成する反復単位ペプチドであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
5. 前記シルクタンパク質は、グリシン或いはセリン含有量が１％以上であるペプチドが１～１６０回反復されている構造を有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
6. 前記シルクタンパク質は、５～３００ｋＤａの分子量を有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
7. シャンプー、クリーム、ローション、トニック、スプレー、エアゾール、オイル、溶液、懸濁液、ゲル及び軟膏からなる群から選ばれる剤形であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
8. 血漿又は血清成分とシルクタンパク質とを有効成分として含有する毛髪成長促進又は脱毛抑制用の化粧料組成物。
9. 前記血漿又は血清は、ヒト又は家畜から由来したものであることを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
10. 前記シルクタンパク質は、自然由来又は組換えシルクタンパク質から由来したものであることを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
11. 前記シルクタンパク質は、ドラグラインシルク（ｄｒａｇｌｉｎｅ ｓｉｌｋ）、エラスチン（ｅｌａｓｔｉｎ）、シルクフィブロイン（ｓｉｌｋ ｆｉｂｒｏｉｎ）、ビサス（ｂｙｓｓｕｓ）、セリシン（ｓｅｒｉｃｉｎ）、鞭毛状シルク（ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍ ｓｉｌｋ）及びコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ）からなる群から選ばれるタンパク質を構成する反復単位ペプチドであることを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
12. 前記シルクタンパク質は、グリシン或いはセリン含有量が１％以上であるペプチドが１～１６０回反復されている構造を有することを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
13. 前記シルクタンパク質は、５～３００ｋＤａの分子量を有することを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
    

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