JP2022512372A - ヒトおよび動物における「プラークおよびタングル」の処置のための組成物および方法 - Google Patents

Abstract

対象における脳の「プラーク」および／または「タングル」を処置するための組成物および方法であって、本方法は、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含む治療的有効量の組成物を投与することを含む。【選択図】図１

Description

関連出願
この出願は、２０１８年１２月１２日に出願された米国仮出願６２／７７８，８７５号の優先的利益を主張し、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。
技術分野

本発明は、ブラック－カラント、ウンカリアトメントサ、およびウーロン茶の植物抽出物のブレンド組成物、ならびにヒトおよび動物（高齢のイヌおよびネコなど）のアミロイドーシスおよびタウオパチーにおいて老化した脳内に蓄積する「プラーク」および「タングル」を処置するためにそのような組成物を使用する方法に関する。さらに、本発明は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳震盪（ＴＢＩ）、頭部への単一の打撃および繰り返しの打撃（ほとんどのアスリートおよび軍隊／兵士において観察される）、ならびに慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）を予防するおよび治療するためのブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサの植物抽出物、およびウーロン茶抽出物の組み合わせからなる栄養補助食品ブレンド組成物の開発に関する。最後に、本発明は、ブレンドされた組成物が、ウンカリアトメントサおよびウーロン茶を含みかつブラックカラント抽出物を含まないブレンドされた組成物よりも溶解性が高いという驚くべき発見に関する。

アミロイドーシスおよび様々な障害の脳におけるベータアミロイドプラークの蓄積
アルツハイマー病は、細胞外アミロイドプラークとしておよび脳血管壁内にアミロイドとして存在する、線維状形態の、ベータアミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる３９～４３のアミノ酸ペプチドの蓄積を特徴とする。アルツハイマー病における線維性Ａβアミロイド沈着は、患者に有害であると考えられており、最終的には、アルツハイマー病の特徴的な特徴である毒性および神経細胞死を引き起こす。蓄積された証拠は、アミロイド、より具体的には、アルツハイマー病の病因の主要な原因因子として、Ａβフィブリルの形成、沈着、蓄積および／または持続を示唆している。さらに、アルツハイマー病に加えて、他の複数のアミロイド疾患は、ダウン症候群、これらに限定されないが、オランダ型の遺伝性脳出血などのコンゴ親和性血管障害を伴う障害、封入体筋炎、拳闘家認知症、脳β－アミロイド血管症、進行性核上麻痺に関連する認知症、皮質基底変性および軽度の認知障害に関連する認知症を含み、Ａβフィブリルの形成、沈着、蓄積および持続を伴う。

アミロイド疾患（アミロイドーシス）は、アミロイドタンパク質の種類および基礎疾患により分類される。アミロイド疾患は、固有のタイプのアミロイドタンパク質からなる各アミロイドを含む、複数の共通の特徴を有する。アミロイド疾患としては、これらに限定されないが、アルツハイマー病、ダウン症、イヌ機能障害症候群（ＣＤＳ）、イヌ認知機能障害（ＣＣＤ）に関連するアミロイド（イヌおよびネコなどの高齢の動物に見られるとおり）、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、拳闘家認知症、封入体筋炎（Ａｓｋａｎａｓら、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．４３：５２１－５６０，１９９３年）および軽度認知障害（特定のアミロイドは、ベータアミロイドタンパク質またはＡβと呼ばれる）、慢性炎症に関連するアミロイド、様々な形態の悪性腫瘍および家族性地中海熱（特定のアミロイドは、ＡＡアミロイドまたは炎症関連アミロイドーシスと呼ばれる）、多発性骨髄腫および他のＢ細胞性悪液質に関連するアミロイド（特定のアミロイドは、ＡＬアミロイドと呼ばれる）、２型糖尿病に関連するアミロイド（特定のアミロイドは、アミリンまたは膵島アミロイドポリペプチドまたはＩＡＰＰと呼ばれる）、クロイツフェルト・ヤコブ病などのプリオン病に関連するアミロイド、ゲルストマン・ストロスラー症候群、クールー病および動物のスクレイピー（特定のアミロイドは、ＰｒＰアミロイドと呼ばれる）、長期血液透析および手根管症候群に関連するアミロイド（特定のアミロイドは、α２－ミクログロブリンアミロイドと呼ばれる）、老人性心アミロイドーシスおよび家族性アミロイドーシス性多発神経障害に関連するアミロイド（特定のアミロイドは、トランスサイレチンまたはプレアルブミンと呼ばれる）、甲状腺髄様癌などの内分泌腫瘍に関連するアミロイド（特定のアミロイドは、プロカルシトニンのバリアントと呼ばれる）が挙げられる。さらに、アミロイド様フィブリルを形成し、コンゴレッドおよびチオフラビンＳ陽性（アミロイド原線維沈着を検出するために使用される特定の染色）である、α－シヌクレインタンパク質は、パーキンソン病、レビー小体病（Ｌｅｗｙ ｉｎ Ｈａｎｄｂｕｃｈ ｄｅｒ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｅ，Ｍ．Ｌｅｗａｎｄｏｗｓｋｉ編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｂｅｒｌｉｎ ｐｐ．９２０－９３３，１９１２年；Ｐｏｌｌａｎｅｎら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．５２：１８３－１９１，１９９３年；Ｓｐｉｌｌａｎｔｉｎｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：６４６９－６４７３，１９９８年；Ａｒａｉら、Ｎｅｕｒｏｓｃ．Ｌｅｔｔ．２５９：８３－８６，１９９９年）、多系統萎縮症（Ｗａｋａｂａｙａｓｈｉら、Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈ．９６：４４５－４５２，１９９８年）、レビー小体型認知症、およびレビー小体型のアルツハイマー病の患者の脳でレビー小体の一部として見られる。この開示の目的のために、パーキンソン病は、この疾患（コンゴーレッドおよびチオフラビンＳ陽性であり、優勢なベータプリーツシート二次構造を含む）の患者の脳でフィブリルが発生するという事実のため、現在、アミロイド疾患の特徴も示す疾患とみなされる。
アルツハイマー病の治療標的としてのアミロイド

アルツハイマー病は、ベータアミロイドタンパク質、Ａβまたはβ／Ａ４と呼ばれる３９～４３のアミノ酸ペプチドの沈着および蓄積を特徴とする（Ｇｌｅｎｎｅｒ ａｎｄ Ｗｏｎｇ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１２０：８８５－８９０，１９８４年；Ｍａｓｔｅｒｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：４２４５－４２４９，１９８５年；Ｈｕｓｂｙら、Ｂｕｌｌ．ＷＨＯ７１：１０５－１０８，１９９３年）。Ａβは、β－アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれるより大きい前駆体タンパク質からのプロテアーゼ切断により誘導され、ＡＰＰには、いくつかの選択的スプライシングバリアントがある。ＡＰＰの最も豊富な形態は、６９６、７５１、および７７０のアミノ酸からなるタンパク質を含む（Ｔａｎｚｉら、Ｎａｔｕｒｅ ３１：５２８－５３０，１９８０年）。

小さなＡβペプチドは、アルツハイマー病患者の脳でのアミロイド沈着物または「プラーク」を構成する主要な成分である。さらに、アルツハイマー病は、神経細胞質に異常に蓄積する、対になったらせん状フィラメントからなる多数の神経フィブリルの「タングル」の存在を特徴とする（Ｇｒｕｎｄｋｅ－Ｉｑｂａｌら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：４９１３－４９１７，１９８６年；Ｋｏｓｉｋら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：４０４４－４０４８，１９８６年；Ｌｅｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２５１：６７５－６７８，１９９１年）。したがって、アルツハイマー病の病理学的特徴は、「プラーク」および「タングル」の両方の存在であり、アミロイドがプラークの中心コアに沈着される。アルツハイマー病の脳に見られる他の主要なタイプの病変は、脳実質内および脳の外側にある中硬膜血管の壁の両方の血管壁でのアミロイドの蓄積である。血管壁に局在するアミロイド沈着物は、脳血管アミロイドまたはコンゴ親和性血管障害と呼ばれる（Ｍａｎｄｙｂｕｒ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．４５：７９－９０，１９８６年；Ｐａｒｄｒｉｄｇｅら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．４９：１３９４－１４０１，１９８７年）。

長年にわたり、アルツハイマー病における「アミロイド」の重要性、およびこの疾患に特徴的な「プラーク」および「タングル」が疾患の原因であるか、または単に疾患の結果であるかについて、科学的な議論が続いている。過去数年のうちに、研究は、アミロイドは確かにアルツハイマー病の原因因子であり、単なる無実の傍観者と見なされるべきではないことを示している。細胞培養におけるアルツハイマー病のＡβタンパク質は、短期間で神経細胞の変性を引き起こすことが示されている（Ｐｉｋｅら、Ｂｒ．Ｒｅｓ．５６３：３１１－３１４，１９９１年；Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．６４：２５３－２６５，１９９５年）。研究は、神経毒性作用の原因は、すべてのアミロイドに特徴的な線維構造（主なβプリーツシートの二次構造からなる）であることを示している。Ａβはまた、海馬のスライス培養において神経毒性であり（Ｈａｒｒｉｇａｎら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ１６：７７９－７８９，１９９５年）、トランスジェニックマウスにおいて神経細胞死を誘発することも見出されている（Ｇａｍｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ３７３：５２３－５２７，１９９５年；Ｈｓｉａｏら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２７２：９９－１０２，１９９６年）。アルツハイマー病のＡβをラットの脳に注射すると、記憶障害および神経機能障害も引き起こされる（Ｆｌｏｏｄら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：３３６３－３３６６，１９９１年；Ｆｌｏｏｄら、Ｂｒ．Ｒｅｓ．６６３：２７１－２７６，１９９４年）。

おそらく、Ａβアミロイドがアルツハイマー病の病因に直接関与しているという最も説得力のある証拠は、遺伝学的研究から来ている。Ａβの産生は、その前駆体であるβ－アミロイド前駆体タンパク質をコードする遺伝子の変異に起因し得ることが発見された（Ｖａｎ Ｂｒｏｅｃｋｈｏｖｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４８：１１２０－１１２２，１９９０年；Ｍｕｒｒｅｌｌら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５４：９７－９９，１９９１年；Ｈａａｓｓら、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．１：１２９１－１２９６，１９９５年）。早期発症型家族性アルツハイマー病を引き起こすベータアミロイド前駆体タンパク質遺伝子における変異の同定は、アミロイドがこの疾患の根底にある病原性プロセスの中心であるという最も強力な議論である。いくつかの報告された疾患を引き起こす突然変異が発見され、それらは家族性アルツハイマー病を引き起こすことにおけるＡβの重要性を示す（Ｈａｒｄｙ，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ．１：２２３－２３４，１９９２年におけるレビュー）。これらの研究はすべて、ヒトおよび動物の脳における線維性Ａβの形成、沈着、蓄積、および／または持続を低減する、排除する、かつ／または防止するための治療法、薬物、またはサプリメントを提供することが、効果的な治療法として十分に役立つことを示唆している。
高齢のヒトおよび動物の脳における「プラークおよびタングル」の蓄積

ヒトの脳は、万物において最も複雑な器官である。重量は、３ポンドのみであり、または体重の約２％である。それでも、それは消費カロリーの２０～３０％、呼吸する酸素の２０％、および身体内の血流の２５％を使用し、８５％の水で構成されている（Ｄａｎｉｅｌ Ｇ．Ａｍｅｎ，Ｍ．Ｄ．１２ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｃｒｅａｔｉｎｇ ａ ｂｒａｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｌｉｆｅ．出典：www.amenclinics.com/cybcyb/12-prescriptions-for-creating-a-brain-healthy-life/)。脳には約１，０００億個の神経細胞（すなわち、ニューロン）があり、シナプス（同上）と呼ばれる最大で４兆個の接続がある。ヒトの脳は、加齢と共に、１日あたり約８５，０００個、または１秒ごとに約１個の皮質ニューロンを喪失する（Ｄｅｅｐａｋ Ｃｈｏｐｒａ，Ｍ．Ｄ．ａｎｄ Ｒｕｄｏｌｐｈ Ｔａｎｚｉ，Ｐｈ．Ｄ．Ｓｕｐｅｒ Ｂｒａｉｎ．Ｕｎｌｅａｓｈｉｎｇ ｔｈｅ Ｅｘｐｌｏｓｉｖｅ Ｐｏｗｅｒ ｏｆ Ｙｏｕｒ Ｍｉｎｄ ｔｏ Ｍａｘｉｍｉｚｅ Ｈｅａｌｔｈ，ＨａｐｐｉｎｅｓｓおよびＳｐｉｒｉｔｕａｌ Ｗｅｌｌ Ｂｅｉｎｇ．参照///www.chopra.com/super-brain-by-deepak-chopra-rudolph-tanzi.)。脳の加齢と共に、２０歳代に始まる、２つの神経毒性タンパク質のゆっくりであるが周到な蓄積がある。１つ目は、「ベータアミロイドタンパク質」またはＡβとして公知である不溶性（凝集）特異的神経毒性タンパク質の脳内蓄積である。「プラーク」（顕微鏡下では脳中で「ミートボール」のように見える）の形態のベータアミロイドタンパク質沈着物は、海馬依存性の記憶および認知の低下につながる健康なニューロンを殺す際に助けとなることが示されている。Ｄｒ．Ａｌａｎ Ｓｎｏｗおよび共同発明者は、「試験管中のプラーク」（ヒトの脳に見られるものと同じ）を生成する特許取得済みの方法を開発し、これらの方法を使用して、天然の「プラークを減らす」栄養補助食品成分をスクリーニングし、特定した（米国特許第７，１４８，００１号、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。

加齢した脳に蓄積する第２の神経毒性タンパク質は、「タウタンパク質」として公知であり、「タングル」として公知であり、ねじれて対になったらせん状フィラメントを形成する。神経原線維のタングルは、ニューロンの内部に蓄積し、それがニューロンを死に至らしめ、顕微鏡下では「乾燥したスパゲッティストランド」のように見せる。Ｄｒ．Ｓｎｏｗの研究室は、試験管中で「タングル」を形成する独自の方法を開発し、次にこれらのアッセイを使用して、「タングルを阻害する」栄養補助食品成分を特定した（以下の例を参照のこと）。したがって、加齢する脳では、「プラークおよびタングル」の両方が蓄積し、ニューロンを死に至らしめ、神経細胞（シナプスと呼ばれる）間の接続を崩壊させ、記憶および認知を次第に衰退させる。「プラークおよびタングル」の蓄積を脱凝集させ減少させることができる化合物または剤は、記憶の改善および記憶の低下の減少をもたらすことが示されている（Ｋａｒｉｎｏｓｋｉら、Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｓ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｅｓ ｉｎ Ｔｇ２５７６ ｍｉｃｅ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃ．２９：４９６４－４９７１，２００９年；Ｖｅｌｌａｓら、Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｍｍｕｎｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ＡＮ１７９２：Ｒｅｄｕｃｅｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｄｅｃｌｉｎｅ ｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｒｅｓｐｏｎｄｅｒｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ａｌｚ．Ｒｅｓ．６：１４４－１５１，２００９年；Ｍｏｒｇａｎら、Ａβ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｍｅｍｏｒｙ ｌｏｓｓ ｉｎ ａｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ ４０８：９８２－９８５，２０００年；Ｃｈｅｎら、Ａ ｌｅａｒｎｉｎｇ ｄｅｆｉｃｉｔ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ａｇｅ ａｎｄ β－ａｍｙｌｏｉｄ ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ４０８：９７５－９７９，２０００年；Ｊａｎｕｓら、Ａβ ｐｅｐｔｉｄｅ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｒｅｄｕｃｅｓ ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ａｎｄ ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ ａ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ ４０８：９７９－９８５，２０００年；Ｓｃｈｅｎｋら、Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｍｙｌｏｉｄ－β ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ－ｄｉｓｅａｓｅ ｌｉｋｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｉｎ ＰＤＡＰＰ ｍｏｕｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ ４００：１７３－１７７，１９９９年；Ｙａｎａｍａｎｄｒａら、Ａｎｔｉ－ｔａｕ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｈａｔ ｂｌｏｃｋ ｔａｕ ａｇｇｒｅｇａｔｅ ｓｅｅｄｉｎｇ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｎｅｕｒｏｎ ８０：４０２－４１４，２０１３年；Ｄｕｍｏｎｔら、Ｂｅｚａｆｉｂｒａｔｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｄｅｆｉｃｉｔｓ ａｎｄ ｔａｕ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｐ３０１５ ｍｉｃｅ．Ｈｕｍａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ２１：５０９１－５１０５，２０１２年；Ｏｄｄｏら、Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ Ａｂｅｔａ ａｎｄ ｔａｕ，ｂｕｔ ｎｏｔ ｓｏｌｕｂｌｅ Ａｂｅｔａ ａｌｏｎｅ，ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｄｅｃｌｉｎｅ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ｐｌａｑｕｅｓ ａｎｄ ｔａｎｇｌｅｓ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：３９４１３－３９４２３，２００６年；Ｓａｎｔａｃｒｕｚら、Ｔａｕ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａ ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｍｅｍｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ３０９：４７６－４８１，２００５年）。

加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、および潜在的にアルツハイマー病につながる可能性のある老化した脳とそうでない脳の唯一の違いは、脳中の「プラークおよびタングル」の数である。アルツハイマー病の脳には、１平方ミリメートルあたり数万～数十万の「プラークおよびタングル」が負荷されており、これにより、ニューロンの死が著しく増加し、シナプス（ニューロン間の接続）の喪失をもたらし、同時に記憶喪失および認知機能低下をもたらす。

したがって、ベータアミロイドおよびタウは、老化する脳における２つの重要なタンパク質であり、これらは、不溶性の「プラークおよびタングル」として蓄積し、記憶喪失および認知機能低下に直接関連することが示されている。現在、脳中のベータアミロイドタンパク質「プラーク」およびタウタンパク質含有「タングル」の両方を減少させるおよび除去するために承認された医薬品はない。
高齢のイヌおよびネコの脳における「プラーク」の蓄積

イヌおよびネコもまた、加齢と共に脳に「プラーク」（および、程度は少ないが「タングル」）を蓄積し、これらは、記憶低下および認知機能障害に寄与すると考えられている。ヒトの脳に蓄積するのと同じベータアミロイドタンパク質（すなわち「プラーク」）およびタウタンパク質（「タングル」）が、高齢のイヌ（Ｐａｐｏｉａｎｎｏｕら、Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｏｆ ａｇｅｄ ｄｏｇｓ．Ｉ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ ｔａｎｇｌｅｓ ａｎｄ ｏｆ ４－ｈｙｄｒｏｘｙｎｏｎｅｎａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ，ａｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｄａｍａｇｅ ｐｒｏｄｕｃｔ，ｉｎ ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅｓ．Ａｍｙｌｏｉｄ ８：１１－２１，２００１；Ｕｃｈｉｄａら、Ａｍｙｌｏｉｄ ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ａｎｄ ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅ ｉｎ ａｇｅｄ ｄｏｇｓ．Ｎｉｈｏｎ Ｊｕｉｇａｋｕ Ｚａｓｓｈｉ５２：６０５－１１，１９９０年）およびネコ（Ｇｕｎｎ－Ｍｏｏｒｅら、Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ａｇｅｉｎｇ ｉｎ ｃａｔｓ．Ｊ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍ．Ｐｒａｃｔ．４８：５４６－５３，２００７年；Ｎａｋａｍｕｒａら、Ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ ｖｅｒｙ ａｇｅｄ ｃａｔｓ．Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈ．９１：４３７－９，１９９６年）においても蓄積する。

イヌの認知機能障害（ＣＣＤ）（認知機能障害症候群またはＣＤＳとしても公知である）は、イヌ（およびネコ）に蔓延している疾患であり、それはヒトに見られるような認知症またはアルツハイマー病の症状を呈する。ＣＣＤは、脳において病理学的変化を引き起こし、イヌ（およびネコ）の精神機能を低下させ、記憶、運動機能、および生涯の早い段階でのトレーニングから学んだ行動の喪失をもたらす。イヌおよびネコの脳では、その原因はここでも、脳中で「プラーク」を形成するベータアミロイドタンパク質またはＡβである。イヌの加齢と共に、ますます多くの「プラーク」が蓄積し、神経細胞が死滅する。障害の初期症状は軽度であるが、それらは時間の経過と共に徐々に悪化し、これは「認知機能低下」としても公知である。アミロイドの「プラーク」は、約５～７歳の老犬、および約１０歳のネコ（平均寿命１５～２０歳に比例）で発生する。実際に、認知機能障害症候群の臨床的兆候は、１１歳以上のイヌの５０％に見られ、１５歳までにイヌの６８％が少なくとも１つの兆候を示す。イヌは多くの場合、家のなじみのある場所で混乱し、家の１つの領域で長時間過ごし、電話または指令に応答せず、異常な睡眠パターンを経験する。

ベータアミロイドタンパク質を含む「プラーク」は、サル、クマ、ラクダ、およびウマを含む、他の高等哺乳動物の脳においても同定されている（Ｎａｋａｍｕｒａら、Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅｓ ａｎｄ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ ｉｎ ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ ｍｏｎｋｅｙｓ．Ｊ Ｍｅｄ Ｐｒｉｍａｔｏｌ．２７：２４４－５２，１９９８年；Ｃａｐｕｃｃｈｉｏら、ｓｔｕｄｉｅｓ．Ｊ Ｃｏｍｐ Ｐａｔｈｏｌ １４２：６１－７３，２０１０；Ｎａｋａｍｕｒａら、Ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅｓ ｉｎ ａｎ ａｇｅｄ ｔｗｏ－ｈｕｍｐｅｄ（Ｂａｃｔｒｉａｎ）ｃａｍｅｌ（Ｃａｍｅｌｕｓ ｂａｃｔｒｉａｎｕｓ），Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ ９０：４１５－８，１９９５年；Ｕｃｈｉｄａら、Ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｓｅｎｉｌｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｏｆ ａｎ ａｇｅｄ Ａｍｅｒｉｃａｎ ｂｌａｃｋ ｂｅａｒ，Ｖｅｔ．Ｐａｔｈｏｌ．３２：４１２－４，１９９５年）。
タウオパチーおよび「タングル」

タウは、１９７０年代半ばに微小管関連タンパク質として発見された（Ｗｅｉｎｇａｒｔｅｎ，１９７５年）。ニューロンおよび他の細胞での微小管の安定剤であることに加えて、それ以来、それは細胞の分化、分極、および軸索輸送において重要な役割を果たすことが見出されている。正常なタウは、微小管に結合した可溶性タンパク質であるが、現在タウオパチーとして公知である一連の神経変性疾患では、タウは、病原性の不溶性線維性タンパク質として蓄積する。これらのタウ封入体は、認知症の重症度およびこれらの神経変性疾患の臨床的特徴を調節するようである。タウオパチーとしては、アルツハイマー病、ピック病などのタウ封入体（ＦＴＬＤ－タウ）を伴う前頭側頭葉変性症、進行性核上性麻痺、および大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒性認知症、いくつかのプリオン病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソニズム－認知症複合体、慢性外傷性脳症、パーキンソン病のいくつかの遺伝的形態などの疾患が挙げられる（Ｖ．Ｍ．ら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４：１１２１－１１５９，２００１年；Ｂ．Ｏｍａｌｕら、Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ ６９（１）：１７３－８３，２０１１年；Ａ．Ｒａｊｐｕｔら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６７：１５０６－１５０８，２００６年；Ｇ．Ｓａｎｔｐｅｒｅ ａｎｄ Ｉ．Ｆｅｒｒｅｒ，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．１１７：２２７－２４６，２００９年）。

脳での線維性タウの増加の最も顕著な影響の１つは、短期記憶、すなわち、つい最近保存された記憶をすぐに思い出す能力の段階的な悪化である（Ｐ．Ｇｉａｎｎａｋｏｐｏｕｌｏｓら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６０：１４９５－１５００，２００３年）。これらの障害に対する治療はないため、この病原性タンパク質を標的とし、記憶障害を改善できる新規発明を見出すことが重要である。
「タングル」は外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳震盪、頭部外傷、および慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）において脳に蓄積する

タウタンパク質からなる脳の「タングル」はまた、脳震盪、頭部外傷、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、および爆風による外傷性脳損傷（１回の爆風により引き起こされた外傷性頭部外傷を有する兵士および軍人に見られる）など、頭部への打撃後に徐々に脳に蓄積する。映画「脳震盪」および／またはＮＦＬ Ｐｌａｙｅｒｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎはすべて、脳震盪および頭部への打撃（外傷性脳損傷またはＴＢＩとして公知である）を繰り返した後のアスリートにおいて見られる認知症型の行動について説明している。意識喪失は脳震盪の臨床的特徴であるが、診断を行うために必要とされない。他の症状としては、錯乱、見当識障害、不安定、めまい、頭痛、および視覚障害などが挙げられる。

外傷性脳損傷への長期的な影響は、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）と呼ばれ、タウオパチー（すなわち、脳においてタウタンパク質を含む「タングル」）の形態である。ＣＴＥは、進行性変性疾患であり、即時に症状を引き起こさない、頭部への脳震盪を起こさない程度（ｓｕｂ－ｃｏｎｃｕｓｓｉｖｅ）の打撃を含む、脳外傷を繰り返し受けたヒトにおいて見られる。この疾患は、ボクシング歴を有するヒトにおいて最初に発見されたため、以前は拳闘家認知症（ＤＰ、ｄｅｍｅｎｔｉａ ｐｕｇｉｌｉｓｔｉｃａ）、すなわち「パンチドランカー」と呼ばれていた。ＣＴＥは、現在、フットボール選手であるＮＦＬアスリート、アイスホッケー、ラグビー、スキー、スケートボード、スタントパフォーマンス、ブルライディング、ロデオなどの選手、および繰り返し脳外傷を経験する他のすべての接触スポーツを含む、頭の損傷を負いやすいアスリートを含むプロアスリートの脳で見出される。ＣＴＥの患者は、記憶喪失、攻撃性、錯乱、およびうつ病などの認知症の多くの兆候を示し、これらは、外傷から数年または数十年後に現れることがある。２０１５年９月、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｖｅｔｅｒａｎｓ ＡｆｆａｉｒｓおよびＢｏｓｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙの研究者は、調査したＮＦＬフットボール選手の９６％でおよび全フットボール選手の７９％でＣＴＥを特定したことを発表した（Ｊａｓｏｎ Ｂｒｅｓｌｏｗ，Ｎｅｗ：８７ ｄｅｃｅａｓｅｄ ＮＦＬ ｐｌａｙｅｒｓ ｔｅｓｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｏｒ ｂｒａｉｎ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｆｒｏｎｔｌｉｎｅ、２０１６年１月９日）。

顕微鏡下での神経病理学は明らかであり、アルツハイマー病患者の脳に見られる「タングル」と同様に、タウタンパク質からなる「タングル」の蓄積が主に存在する。若干のベータアミロイドタンパク質の沈着（すなわち「プラーク」）も存在するが、これは通常はまれであり、脳での「タングル」の蓄積ほど特徴的でない。これらの発見は、頭部への打撃がほぼ即時の脳の「タングル」の蓄積をもたらす可能性があり、それが記憶喪失および認知機能低下などの認知症様症状をもたらし得ることを示唆している。脳の「タングル」の減少および／または除去を助け得る栄養補助食品の特定は、あらゆる種類のアスリート、ＮＦＬプレーヤー、軍隊、およびその兵士が毎日摂取する特別なサプリメントであろう。

一態様で提供されるのは、治療有効量のブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物；ウーロン茶抽出物を含む組成物である。

いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約２５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ～約１００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～約１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ピル、錠剤、カプレット、ソフトもしくはハードゼラチンカプセル、ロゼンジ、サシェ、カシェ、ベジキャップ、液滴、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、飲料調製物、コールドもしくはホットティー飲料、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル、坐剤、滅菌注射液、または滅菌包装粉末として配合される。いくつかの実施形態では、組成物は、カプセルとして配合される。いくつかの実施形態では、カプセルは、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇである。

また、別の態様では、治療的有効量のブラックカラント抽出物を含む組成物が提供される。

いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約２５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ～約１００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～約１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、治療的有効量のウーロン茶抽出物をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、ピル、錠剤、カプレット、ソフトもしくはハードゼラチンカプセル、ロゼンジ、サシェ、カシェ、ベジキャップ、液滴、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、飲料調製物、コールドもしくはホットティー飲料、シロップ、ティーバッグ、エアロゾル、坐剤、滅菌注射液、または滅菌包装粉末として配合される。いくつかの実施形態では、組成物は、カプセルとして配合される。いくつかの実施形態では、カプセルは、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇである。実施形態では、組成物は、ウンカリアトメントサ抽出物、ウーロン茶抽出物を含み、かつブラックカラント抽出物を含まない組成物よりも溶解性が高い。

別の態様では、それを必要とする哺乳動物におけるアミロイドーシスの治療のための方法であって、それを必要とする哺乳動物に本明細書に記載の組成物のいずれか１つを投与することを含む、方法も提供される。

いくつかの実施形態では、アミロイドーシスは、アルツハイマー病、ダウン症候群、拳闘家認知症、認知機能障害症候群、イヌの認知機能障害、多系統萎縮症、封入体筋炎、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、ニーマンピック病Ｃ型、脳アミロイド血管症、皮質基底変性に関連する認知症、２型糖尿病のアミロイドーシス、慢性炎症のアミロイドーシス、悪性腫瘍および家族性地中海熱のアミロイドーシス、多発性骨髄腫およびＢ細胞悪液質のアミロイドーシス、プリオン病のアミロイドーシス、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロスラー症候群、クールー、スクレイピー、手根管症候群に関連するアミロイドーシス、老人性心アミロイドーシス、家族性アミロイド性多発神経障害、または内分泌腫瘍に関連するアミロイドーシスである。

別の態様では、アミロイドフィブリルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法が提供され、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりフィブリルを処置することを含む。

別の態様では、ベータアミロイド含有プラークの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりプラークを処置することを含む、方法が提供される。

別の態様では、それを必要とするヒトまたは哺乳動物におけるタウオパチーを治療するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つをそれを必要とするヒトまたは哺乳動物に投与することを含む、方法が提供される。

いくつかの実施形態では、タウオパチーは、アルツハイマー病、その封入を伴う前頭側頭葉変性症（ＦＬＴＤ－タウ）、ピック病、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒性認知症、プリオン病、グアムの筋萎縮性側索硬化症－パーキンソニズム－認知症複合体（リチコボディグ病とも呼ばれる）、パーキンソン病、タングル優位型認知症、ガングリオン、神経節膠腫、神経節細胞腫、髄膜腫症、亜急性硬化性全脳炎、鉛脳症、結節性硬化症、ハレルフォルデン‐スパッツ病、リポフスチン症、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、拳闘家認知症、脳震盪、頭部への１回または繰り返しの打撃、または心的外傷後ストレス障害である。

別の態様では、タウタンパク質を含むタングルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であり、本明細書に記載の組成物のいずれかによりタングルを処置することを含む。

別の態様では、タウタンパク質含有プラークの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりプラークを処置することを含む。

一態様では、それを必要とする対象における認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、本方法は、対象においてベータアミロイドタンパク質プラークまたはフィブリルの形成、沈着、蓄積または持続を低減するために本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む。

いくつかの実施形態では、対象は、アミロイド疾患に罹患している患者である。

また一態様では、それを必要とする対象における学習、記憶、認知、集中および／または専心性を改善するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

いくつかの実施形態では、対象は、加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、またはアルツハイマー病の患者である。

別の態様で提供されるのは、それを必要とする対象の脳においてタングルを阻害するか、防止するか、低減させるか、または治療するための方法であって、本方法は、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む。

いくつかの実施形態では、対象は、単一または複数の脳震盪、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、頭部への打撃、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、心的外傷後ストレス障害、脳老化、軽度認知障害またはアルツハイマー病を経験した患者である。

別の態様では、高齢のイヌまたはネコの脳におけるプラークおよびタングルを防止するか、低減するかまたは処置するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりプラークおよびタングルを処置することを含む、方法が提供される。

別の態様では、脳のプラークおよびタングルの形成、沈着、蓄積および／または持続の影響を受ける高齢のイヌまたはネコの認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、高齢のイヌまたはネコに本明細書に記載の組成物のいずれか１つを投与することを含む、方法が提供される。

別の態様では、脳中のタングルを阻害するかまたは低減することにより対象における運動能力を改善するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

ウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）およびＰＴＩ－００７０３（登録商標）とのインキュベーション後、チオフラビンＴ蛍光測定およびコンゴーレッド結合により測定されたＡβ１－４２凝集のグラフを示す。 コンゴーレッド、チオフラビンＳの代表的な画像、およびＡβフィブリル＋／－ＬＯＴＥおよびＰＴＩ－００７０３（登録商標）の電子顕微鏡写真を示す。 ＬＯＴＥおよびＰＴＩ－００７０３（登録商標）とのインキュベーション後、チオフラビンＴ蛍光測定およびコンゴーレッド結合により測定されたＡβ１－４０凝集のグラフを示す。 増加する濃度のＬＯＴＥおよびＰＴＩ－００７０３（登録商標）での処置後のＡβ１－４０の円二色性スペクトルを示す。 タウ凝集阻害剤のスクリーニングのためのタウＲＤフィブリルの特徴を明らかにするための様々な内部試験のデータを描写する。 茶抽出物とのインキュベーション後にチオフラビンＳ蛍光測定法により測定されたタウ凝集のグラフを示す。 ＬＯＴＥおよびＰＴＩ－００７０３（登録商標）とのインキュベーション後にチオフラビンＳ蛍光測定により測定されたタウ凝集のグラフを示す。 ＬＯＴＥにより治療後、円二色性分光法により測定されたタウの二次構造のグラフを示す。 ＰＴＩ－００７０３（登録商標）およびＬＯＴＥによるタウフィブリル形成の電子顕微鏡写真を示す。 ＰＴＩ－００７０３（登録商標）およびＬＯＴＥで治療された事前に形成されたタウフィブリルの電子顕微鏡写真を示す。 組成物１１．1；組成物１１．２；組成物１１．３；組成物１１．４、組成物１１．５、組成物１１．６、および組成物１１．７とのインキュベーション後にチオフラビンＴ蛍光測定法により測定されたＡβ１－４２凝集のグラフを示す。 組成物１８．１；組成物１８．２；組成物１８．３；組成物１８．４、組成物１８．５、組成物１８．６、および組成物１８．７とのインキュベーション後にチオフラビンＴ蛍光測定法により測定されたＡβ１－４２凝集のグラフを示す。 組成物１９．１；組成物１９．２；組成物１９．３；組成物１９．５、組成物１９．６、組成物１９．７、組成物１９．８、および組成物１９．９とのインキュベーション後にチオフラビンＴ蛍光測定法により測定されたＡβ１－４２凝集のグラフを示す。 組成物２１．１；組成物２１．２；組成物２１．３；組成物２１．５；組成物２１．６、および組成物２１．７とのインキュベーション後にチオフラビンＴ蛍光測定法により測定されたＡβ１－４２凝集のグラフを示す。 キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントカプセルと比較した、カプセル中のキャッツクロー／ウーロン茶抽出物を示す。 キャッツクロー／ウーロン茶抽出物を含むカプセルとキャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントを含むカプセルを含むコップ１杯の水を示す。 キャッツクロー／ウーロン茶の単一カプセルとキャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントのカプセルの水への最初の溶解（５秒以内）を比較する。図１７Ａは、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物の単一カプセルが数秒以内に水に溶解することを示す。図１７Ｂは、キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントの単一のカプセルが数秒以内に水に溶解することを示す。両方の溶液は最初に、コップ一杯の水の上部に塊を含むことに留意のこと。図１７Ｃは、１０～１５秒以内に、キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントの組み合わせが水に自己溶解し始めることを示す。 キャッツクロー／ウーロン茶抽出物の水への溶解を、ブラックカラントを含むキャッツクロー／ウーロン茶抽出物と比較する。図１８Ａは、ブラックカラントの添加は、キャッツクロー／ウーロン茶の抽出物をより水溶性にし、味がはるかに良好になるという驚くべき発見を示す。図１８Ｂは、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物は、ガラスの上部に浮いている水不溶性の物質を依然として多く含むことを示す。図１８Ｃは、ブラックカラントの添加は、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物をより水溶性にし、ガラスの上部に不溶性物質がほとんどまたはまったくないことを示す。

本明細書で一態様で提供されるのは、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含む組成物である。この組成物は、タウオパチー、アミロイド疾患、脳中の「プラークおよび／またはタングル」、ならびに外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳震盪（ほとんどのアスリートおよび軍隊／兵士において観察される）心的外傷後ストレス障害、頭部外傷、頭部への打撃（単一または繰り返しのいずれか）、および慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）を有するヒト対象を治療するために有用である。
いくつかの実施形態では、組成物は、アミロイドフィブリル形成を効果的に阻害し、アミロイドフィブリル成長を阻害し、かつ／または事前に形成されたアミロイドフィブリルの溶解および／または破壊を引き起こす。いくつかの実施形態では、組成物は、タウフィブリル形成を阻害し（初期から中期のタウオパチーの対象にとって重要である）、タウフィブリルの成長を阻害し（初期から中期のタウオパチーの対象にとって重要である）、かつ／または事前に形成されたタウフィブリルの溶解／破壊を引き起こす（後期タウオパチーにとって重要である）。いくつかの実施形態では、組成物は、ヒトにおいて脳の「プラークおよびタングル」を防止する、軽減させる、および／または除去するための認知および記憶サプリメントの開発に有用である。

本開示は、ブラックカラント抽出物中に存在するプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせの量が、本明細書に記載の活性にとって重要であることを認めている。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせ、好ましくは約２５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。この開示はまた、様々な植物抽出物が、同じ植物源由来であっても、ウーロン茶抽出物などのプラークおよびタングルを溶解するための異なる効果を有することを認識する。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、ＬＯＴＥである。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、ＭｅｍｏｒＴｅａ（登録商標）である。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、中国のＧｕａｎ Ｙｉｎ ｍｏｕｎｔａｉｎｓから得られ、ＡｕＮｕｔｒａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（Ｃｈｉｎｏ，ＣＡ）により提供される。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含む組成物は、他の植物抽出物または各抽出物のみと比較して、驚くべき予想外の活性を提供する。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物の組み合わせは、相乗的または補足的な効力を提供する。
定義

別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。本明細書で使用される場合、以下の用語は、特に明記されていない限り、以下でそれらに帰する意味を有する。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、本開示を限定することを意図するものではない。

本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他のことを示さない限り、複数形も含むことを意図している。

本明細書で使用される場合、数値または数値範囲を変更するために使用される場合の「約」という用語は、値または範囲より５％～１０％上および５％～１０％下の偏差が、記載された値または範囲の意図された意味の範囲内にとどまることを示す。

本明細書で使用される場合、「対照」は、比較の目的で実験において使用される代替サンプルである。対照は、「陽性」または「陰性」であり得る。例えば、実験の目的が特定のタイプの疾患の治療に対する治療剤の有効性の相関関係を決定することである場合、陽性対照（所望の治療効果を呈することが公知である組成物）および陰性対照（治療を受けない、またはプラセボを受ける対象またはサンプル）が典型的に使用される。

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、方法および組成物が記載された要素を含むが、他のものを除外しないことを意味するものとする。方法および組成物を定義するために使用される場合、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」は、述べられた目的のために、組み合わせにとってあらゆる本質的に重要な他の要素を除外することを意味するものとする。したがって、本明細書で定義される要素から本質的になる組成物は、単離および精製方法からの微量汚染物質、ならびにリン酸緩衝生理食塩水、防腐剤などの薬学的に許容される担体を除外しない。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」は、他の成分の微量元素および本発明の組成物を投与するための実質的な方法ステップまたは組成物を生成するかもしくは意図された結果を達成するためのプロセスステップ以外のものは除外することを意味するものとする。これらの移行用語および句のそれぞれによって定義される実施形態は、本発明の範囲内にある。

「治療的有効量」は一般に、疾患を治療するために対象または動物に投与されたときに、疾患の所望の治療の程度に影響を与えるのに十分な量を意味する。「治療的有効量」または「治療的有効投薬量」は、好ましくは、タウオパチーなどのこれらの状態に関連する疾患を、未治療の対象と比較して、少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも４０％、さらにより好ましくは少なくとも６０％、およびさらにより好ましくは少なくとも８０％、タウフィブリルの形成、沈着、蓄積および／または持続を阻害する、低減させる、破壊する、脱集合させる、または治療する。哺乳動物対象の治療のための本発明の化合物またはその組成物の有効量は、対象の体重の約０．１～約１０００ｍｇ／Ｋｇ／日、例えば、約１～約１００ｍｇ／Ｋｇ／日、特に約１０～約１００ｍｇ／Ｋｇ／日である。開示される広範囲の組成物の投薬量は、安全かつ効果的であると考えられる。

「アントシアニジン」は、アントシアニンの糖非含有対応物である。アントシアニジンの例としては、これらに限定されないが、シアニジン、デルフィニジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、マルビジン、およびペツニジンが挙げられる。

「アントシアニン」は、フェノール基に属する着色水溶性顔料である。アントシアニンは、フラビリウムイオンまたは２－フェニルクロメニリウムに基づく。アントシアニンの例としては、これらに限定されないが、シアニジン、デルフィニジン、マルビジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、およびペツニジンのグリコシドが挙げられる。そのような例としては、これらに限定されないが、デルフィニジン－３－Ｏ－グルコシド、デルフィニジン－３－Ｏ－ルチノシド、シアニジン－３－Ｏ－グルコシド、およびシアニジン－３－Ｏ－ルチノシドが挙げられる。

本発明の組成物による治療に好適な「アミロイド疾患」または「アミロイドーシス」は、アミロイドフィブリル、特に、ベータアミロイドタンパク質またはＡβ、ＡＡアミロイド、ＡＬアミロイド、ＩＡＰＰアミロイド、ＰｒＰアミロイド、α２－ミクログロブリンアミロイド、トランスサイレチン、プレアルブミン、およびプロカルシトニンからなる群から選択される、アミロイドタンパク質のフィブリル、特にＡβおよびＩＡＰＰアミロイドなどの形成、沈着、蓄積、および／または持続に関連する疾患である。好適なそのような疾患としては、アルツハイマー病、ダウン症候群、軽度認知障害（ＭＣＩ）、認知イヌ機能障害（ＣＤＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、脳震盪、頭部外傷、頭部への単一および複数の打撃、心的外傷後ストレス障害、拳闘家認知症、多系統萎縮症、封入体筋炎、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、ニーマンピック病Ｃ型、脳βアミロイドアンギオパチー、皮質基底変性に関連する認知症、２型糖尿病のアミロイドーシス、慢性炎症のアミロイドーシス、悪性腫瘍および家族性地中海熱のアミロイドーシス、多発性骨髄腫およびＢ細胞悪液質のアミロイドーシス、プリオン病のアミロイドーシス、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロスラー症候群、クールー、スクレイピー、手根管症候群に関連するアミロイドーシス、老人性心アミロイドーシス、家族性アミロイド性多発神経障害、および内分泌腫瘍に関連するアミロイドーシスが挙げられる。

「原線維形成（Ｆｉｂｒｉｌｌｏｇｅｎｅｓｉｓ）」は、タウフィブリル、フィラメント、封入体、沈着物、封入体などの形成、沈着、蓄積および／または持続を指す。

「原線維形成の阻害」は、そのようなアミロイド「プラーク」またはタウ「タングル」フィブリル様沈着物の形成、沈着、蓄積および／または持続の阻害を指す。

「フィブリルまたは原線維形成の破壊」は、通常、顕著なβシート二次構造で存在する、事前に形成されたベータアミロイドまたはタウフィブリルの破壊を指す。本発明の化合物によるそのような破壊は、この用途において提示される例により実証されるように、円二色性分光法、チオフラビンＳ蛍光測定法、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ／ウエスタンブロッティング、またはネガティブ染色電子顕微鏡法などの様々な方法により評価されるような、ベータアミロイドまたはタウフィブリルの顕著な減少または脱集合を含み得る。

「哺乳動物」としては、ヒトおよび非ヒトの、例えば、コンパニオンアニマル（イヌ、ネコなど）、実験動物（マウス、ラット、モルモットなど）および家畜（ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタなど）などの哺乳動物の両方が挙げられる。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、イヌまたはネコである。

「プラーク」は、脳の様々な領域（海馬、大脳皮質、前頭葉など）に見られるベータアミロイドタンパク質またはＡβからなるミートボール様「アミロイド沈着物」を指す。これは、脳の老化、軽度認知障害（ＭＣＩ）、アルツハイマー病の病理学的特徴であり、イヌ、ネコ（認知イヌ機能障害またはＣＤＤと呼ばれる）、サル、シロクマ、ウマなどの高齢哺乳動物に見られる。脳でのアミロイド「プラーク」の蓄積は、神経変性、シナプスとニューロン間の接続の喪失、認知機能の低下、記憶の低下および喪失、ならびに集中および専心性の喪失につながると考えられている。

「プロアントシアニジン」は、オリゴマーのフラボノイドである。プロアントシアニジンとしては、カテキンおよびエピカテキンの二量体またはオリゴマー、およびそれらの没食子酸エステルが挙げられる。

本明細書で使用される「対象」という用語は、治療、観察または実験の対象である動物を指す。一例として、対象は、これらに限定されないが、ヒト、ネコ、またはイヌなど、これらに限定されない哺乳動物であり得る。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、患者である。いくつかの実施形態では、対象は、ネコである。いくつかの実施形態では、対象は、イヌである。

「タングル」は、脳の様々な領域（海馬、大脳皮質、前頭皮質など）に見られるタウタンパク質からなる「乾燥した」スパゲッティ様「タングル沈着物」を指し、これは、脳の老化、軽度認知障害、アルツハイマー病、脳震盪、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、頭部への単一の打撃および繰り返しの打撃、心的外傷後ストレス障害、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）などの病理学的特徴である。

本発明の化合物による治療に好適な「タウオパチー」はまた、タウフィブリルの形成、沈着、蓄積、または持続に関連する疾患である。好適な疾患としては、アルツハイマー病、タウ封入体を伴う前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ－タウ）例えば、ピック病、進行性核上性麻痺、および大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒性認知症、いくつかのプリオン病、グアムの筋萎縮性側索硬化症／パーキンソニズム－認知症複合体（リチコボディグ病とも呼ばれる）、拳闘家認知症、慢性外傷性脳症、パーキンソン病、特にパーキンソン病のいくつかの遺伝的形態、タングル優位型認知症（アルツハイマー病に類似した神経原線維タングルを伴うが、アミロイドプラークは含まない）が挙げられる。

タウフィブリルは、すべて共通の形態学的特性、染色特性、およびＸ線回折スペクトルを有する、多様であるが特定の細胞内または細胞外タンパク質沈着物の群を指す一般的な用語である。

疾患を「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または疾患の「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、疾患が生じやすいが、まだ疾患の症状を経験していないかまたは呈さない哺乳動物において疾患が発生するのを防止することを含む（予防的治療）。治療はまた、事前に形成されたタウフィブリルの破壊などにより、疾患を阻害し（その発生を遅らせるか停止させる）、疾患の症状または副作用からの救済を提供し（緩和治療を含む）、疾患を緩和する（疾患の退行を引き起こす）ことを意味し得る。治療は、完全である必要はない。そのような防止的治療の１つは、軽度認知障害（ＭＣＩ）の治療のための開示された化合物の使用であり得る。
組成物

一態様では、治療的有効量のブラックカラント抽出物、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物、および治療的有効量のウーロン茶抽出物を含む組成物が提供される。

一態様では、治療的有効量のブラックカラント抽出物、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物、治療的有効量のウーロン茶抽出物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または担体からなる組成物が提供される。

一態様では、治療的有効量のブラックカラント抽出物、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物、治療的有効量のウーロン茶抽出物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または担体から本質的になる組成物が提供される。

別の態様では、治療的有効量のブラックカラント抽出物を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態では、組成物は、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、治療的有効量のウーロン茶抽出物をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、治療的有効量のウンカリアトメントサ抽出物および治療的有効量のウーロン茶抽出物をさらに含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、アミロイドーシスを有するヒト対象、および高齢の哺乳動物（加齢と共に脳にアミロイド「プラーク」を発症するイヌおよびネコなど）に利益をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、アミロイドーシスにおけるアミロイド沈着、蓄積、および／または持続の処置／阻害に有用である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、タウフィブリルの形成、沈着、蓄積、および／または持続の阻害に有用である。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抽出物を含む組成物は、抽出物のいずれか１つのみでタウフィブリル形成を阻害し、また、事前に形成されたタウフィブリルを迅速に脱凝集させる能力を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抽出物を含む組成物は、抽出物のいずれか１つのみでアミロイドフィブリル形成を阻害し、また、事前に形成されたアミロイドフィブリルを迅速に脱凝集させる能力を有する。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物フィブリル阻害活性または有効性は、約５０％超、約５５％超、約６０％超、約６５％超、約７０％超、約７５％超、約８０％超、約８５％超、約９０％超、約９５％超、または約９９％超である。

いくつかの実施形態では、組成物は、カプセルなどの、単一の剤形に配合される。いくつかの実施形態では、カプセルは、約１００ｍｇ～約２０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、カプセルは、約１００ｍｇ～約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、カプセルは、約２００ｍｇ～約２０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、カプセルは、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、カプセルは、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５７５ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６７０ｍｇ、約６７５ｍｇ、約７００ｍｇ、約７２５ｍｇ、約７５０ｍｇ、約７７５ｍｇ、約８００ｍｇ、約８２５ｍｇ、約８５０ｍｇ、約８７５ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２５ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１２５０ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１３５０ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１４５０ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１７００ｍｇ、約１８００ｍｇ、約１９００ｍｇ、または約２０００ｍｇである。
ブラック－カラント

そのベリーのために育てられる、ブラックカラント（Ｒｉｂｅｓ ｎｉｇｒｕｍ）は、スグリ科（Ｇｒｏｓｓｕｌａｒｉａｃｅａｅ）の木質の低木である。それは中央および北ヨーロッパ、ニュージーランド、および北アジアの温帯地域に自生し、商業的にも国内的にも広く栽培されている。ビタミンＣの含有量が高いことに加えて、ベリーはフラボノイドと、少なくとも１５種類のフェノール酸を含み、それらはアントシアニン、アントシアニジン、プロアントシアニジンを含む。ブラックカラントから同定された主要なアントシアニンとしては、デルフィニジン－３－Ｏ－グルコシド、デルフィニジン－３－Ｏ－ルチノシド、シアニジン－３－Ｏ－グルコシド、およびシアニジン－３－Ｏ－ルチノシドが挙げられる。

この開示は、ブラックカラント抽出物中に存在するアントシアニン、アントシアニジン、プロアントシアニジン、またはそれらの組み合わせの量が、活性にとって重要であることを認識する。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、１５％ｗ／ｗを超えるプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１５％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１５％～約３０％、約１５％～約２５％、約１５％～２０％、約２０％～約３５％、および約２０％～約３０ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニンまたはそれらの組み合わせのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％ｗ／ｗ、約１１％ｗ／ｗ、約１２％ｗ／ｗ、約１３％ｗ／ｗ、約１４％ｗ／ｗ、約１５％ｗ／ｗ、約１６％ｗ／ｗ、約１７％ｗ／ｗ、約１８％ｗ／ｗ、約１９％ｗ／ｗ、約２０％ｗ／ｗ、約２１％ｗ／ｗ、約２２％ｗ／ｗ、約２３％ｗ／ｗ、約２４％ｗ／ｗ、約２５％ｗ／ｗ、約２６％ｗ／ｗ、約２７％ｗ／ｗ、約２８％ｗ／ｗ、約２９％ｗ／ｗ、約３０％ｗ／ｗ、約３１％ｗ／ｗ、約３２％ｗ／ｗ、約３３％ｗ／ｗ、約３４％、または約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約２５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約２０％～約３０％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１５％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。

いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、アントシアニン、アントシアニジン、プロアントシアニジン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、アントシアニンを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、アントシアニジンを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、プロアントシアニジンを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、アントシアニン、アントシアニジン、および／またはプロアントシアニジンの組み合わせを含む。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ～約５００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ～約２５０ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ～約１００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約３０ｍｇ～約１００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、または約５００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む。

いくつかの実施形態では、組成物は、約０．１％～約３０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約０．１％～約２０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約０．１％～約１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～約３０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～約２０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１％～約１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。いくつかの実施形態では、本組成物は、約０．１％ｗ／ｗ、約０．２％ｗ／ｗ、約０．３％ｗ／ｗ、約０．４％ｗ／ｗ、約０．５％ｗ／ｗ、約０．６％ｗ／ｗ、約０．７％ｗ／ｗ、約０．８％ｗ／ｗ、約０．９％ｗ／ｗ、約１％ｗ／ｗ、約２％ｗ／ｗ、約３％ｗ／ｗ、約４％ｗ／ｗ、約５％ｗ／ｗ、約６％ｗ／ｗ、約７％ｗ／ｗ、約８％ｗ／ｗ、約９％ｗ／ｗ、約１０％ｗ／ｗ、約１１％ｗ／ｗ、約１２％ｗ／ｗ、約１３％ｗ／ｗ、約１４％ｗ／ｗ、約１５％ｗ／ｗ、約１６％ｗ／ｗ、約１７％ｗ／ｗ、約１８％ｗ／ｗ、約１９％ｗ／ｗ、約２０％ｗ／ｗ、約２１％ｗ／ｗ、約２２％ｗ／ｗ、約２３％ｗ／ｗ、約２４％ｗ／ｗ、約２５％ｗ／ｗ、約２６％ｗ／ｗ、約２７％ｗ／ｗ、約２８％ｗ／ｗ、約２９％ｗ／ｗ、または約３０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む。
キャッツクロー

「Ｕｎａｄｅ Ｇａｔｏ」（スペイン語）または「Ｃａｔ’ｓ ｃｌａｗ」（英語）としても知られる植物ウンカリアトメントサは、アマゾンの熱帯雨林の中で成長する木質のつる植物を指す。キャッツクローの他の名前としては、パラグアヨ（Ｐａｒａｇｕａｙｏ）、ガラバト（Ｇａｒａｂａｔｏ）、ガルバトカシャ（Ｇａｒｂａｔｏ ｃａｓｈａ）、タンボールワスカ（Ｔａｍｂｏｒ ｈｕａｓｃａ）、ウナデガビラン（Ｕｎａ ｄｅ ｇａｖｉｌａｎ）、ホーククロー（Ｈａｗｋ’ｓ ｃｌａｗ）、ネイルオブキャット（Ｎａｉｌ ｏｆ Ｃａ）、ネイルオブキャットシューラー（Ｎａｉｌ ｏｆ Ｃａｔ Ｓｃｈｕｌｅｒ）も挙げられる。この成長の遅いつる植物は、成熟に到達するまでに２０年を要し、それは付着して自生樹木の周りに巻き付くので、長さが１００フィートを超えて成長し得る。それは、標高２～８０００フィートの山麓の小丘に豊富に見られる。このつる植物は、その葉の付け根から突き出る独特の湾曲した爪様のそのとげのため、「キャッツクロー」と呼ばれる。ウンカリアトメントサは、免疫をサポートし、抗炎症、抗ウイルス、抗変異原性、抗酸化特性を有することが予想される。抗炎症特性は、例えば、関節炎、リウマチ、滑液包炎、および痛風の治療に有益であることが予想される。理論に拘束されることなく、関節炎の疼痛を治療する際に有益な効果は、部分的には、消化管を浄化し、身体から毒素を取り除くのを助けるその能力に起因する可能性があると考えられる。さらに、ウンカリアトメントサまたはキャッツクローは、疼痛を緩和すると予想され、例えば、化学療法、放射線治療、およびＡＺＴの使用などに関連する痛みの軽減に役立つと予想される。

ウンカリアトメントサまたはキャッツクローは、ウイルス感染を早い段階で停止させること、ＡＩＤｓ患者の日和見感染と戦うこと、およびいくらかの皮膚腫瘍および嚢胞の生存可能なサイズを縮小することに役立つと予想される。ウンカリアトメントサは、癌、ＡＩＤｓ、クローン病、呼吸器感染症、アレルギー、ヘルペス、前立腺の問題、狼瘡、エプスタインバーウイルス、慢性疲労症候群、ならびに様々な胃および腸の障害を含む、様々な疾病の治療にも使用できる。

ウンカリアトメントサに関する追加の詳細情報および背景については、本発明者らのＷＩＰＯ国際刊行物番号国際出願第９８／５１３０２号も参照されたい。これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明者らは以前に、１９９８年１１月１９日付けＷＩＰＯ国際公開第９８／５１３０２号、名称「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ Ａｍｙｌｏｉｄｏｓｅｓ」（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）において、天然に存在する植物製品、植物ウンカリアトメントサ、またはキャッツクロー（ＰＴＩ－００７０３（登録商標））からの内部樹皮および／または根を発見し開示した。本明細書に開示のとおり、この植物化合物は単独で、アミロイド沈着物および他の蓄積を破壊する、かつ／または溶解することにおいて驚くべき効力を有し、アルツハイマー病、２型糖尿病、および他のアミロイドーシスにおけるアミロイド形成の強力な阻害剤であると考えられている。

ウンカリアトメントサ抽出物ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、アミロイドーシスの治療的介入のために「７０３」または「ＰＴＩ－７０３」とも呼ばれる。ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、アマゾンの熱帯雨林で発見されたキャッツクローの樹皮に由来する。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物は、ＰＴＩ－００７０３である。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物は、内側の樹皮および／または根に由来する。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物は、アマゾンの熱帯雨林の内側の樹皮または根に由来する。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約３００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、本組成物は、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、または約５００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む。

いくつかの実施形態では、組成物は、約５％～約６０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約５％～約４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約６０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％ｗ／ｗ、約１１％ｗ／ｗ、約１２％ｗ／ｗ、約１３％ｗ／ｗ、約１４％ｗ／ｗ、約１５％ｗ／ｗ、約１６％ｗ／ｗ、約１７％ｗ／ｗ、約１８％ｗ／ｗ、約１９％ｗ／ｗ、約２０％ｗ／ｗ、約２１％ｗ／ｗ、約２２％ｗ／ｗ、約２３％ｗ／ｗ、約２４％ｗ／ｗ、約２５％ｗ／ｗ、約２６％ｗ／ｗ、約２７％ｗ／ｗ、約２８％ｗ／ｗ、約２９％ｗ／ｗ、約３０％ｗ／ｗ、約３１％ｗ／ｗ、約３２％ｗ／ｗ、約３３％ｗ／ｗ、約３４％ｗ／ｗ、約３５％ｗ／ｗ、約３６％ｗ／ｗ、約３７％ｗ／ｗ、約３８％ｗ／ｗ、約３９％ｗ／ｗ、約４０％ｗ／ｗ、約４１％ｗ／ｗ、約４２％ｗ／ｗ、約４３％ｗ／ｗ、約４４％ｗ／ｗ、約４５％ｗ／ｗ、約４６％ｗ／ｗ、約４７％ｗ／ｗ、約４８％ｗ／ｗ、約４９％ｗ／ｗ、約５０％ｗ／ｗ、約５１％ｗ／ｗ、約５２％ｗ／ｗ、約５３％ｗ／ｗ、約５４％ｗ／ｗ、約５５％ｗ／ｗ、約５６％ｗ／ｗ、約５７％ｗ／ｗ、約５８％ｗ／ｗ、約５９％ｗ／ｗ、または約６０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む。
ウーロン茶

ウーロン茶は、強力な太陽の下で植物を枯らし酸化させた後、縮らせてねじらせることを含むプロセスを介して生産される中国茶（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）である。本発明者らは、コーヒーおよびマテ茶の抽出物と共に茶の２５を超える抽出物を、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのアミロイドフィブリル凝集の阻害および脱凝集について、様々なアッセイを使用してスクリーニングした。本発明者らは、ウンカリアトメントサ抽出物と組み合わせたウーロン茶抽出物の使用が、アミロイドフィブリルの凝集の阻害および脱凝集を呈することを認識した。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、ＬＯＴＥである。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、ＭｅｍｏｒＴｅａ（登録商標）である。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、中国のＧｕａｎ Ｙｉｎ ｍｏｕｎｔａｉｎｓから得られ、ＡｕＮｕｔｒａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（Ｃｈｉｎｏ，ＣＡ）によって提供される。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍｇ～約３００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、本組成物は、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む。

いくつかの実施形態では、組成物は、約５％～約６０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約５％～約４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約６０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０％ｗ／ｗ、約１１％ｗ／ｗ、約１２％ｗ／ｗ、約１３％ｗ／ｗ、約１４％ｗ／ｗ、約１５％ｗ／ｗ、約１６％ｗ／ｗ、約１７％ｗ／ｗ、約１８％ｗ／ｗ、約１９％ｗ／ｗ、約２０％ｗ／ｗ、約２１％ｗ／ｗ、約２２％ｗ／ｗ、約２３％ｗ／ｗ、約２４％ｗ／ｗ、約２５％ｗ／ｗ、約２６％ｗ／ｗ、約２７％ｗ／ｗ、約２８％ｗ／ｗ、約２９％ｗ／ｗ、約３０％ｗ／ｗ、約３１％ｗ／ｗ、約３２％ｗ／ｗ、約３３％ｗ／ｗ、約３４％ｗ／ｗ、約３５％ｗ／ｗ、約３６％ｗ／ｗ、約３７％ｗ／ｗ、約３８％ｗ／ｗ、約３９％ｗ／ｗ、約４０％ｗ／ｗ、約４１％ｗ／ｗ、約４２％ｗ／ｗ、約４３％ｗ／ｗ、約４４％ｗ／ｗ、約４５％ｗ／ｗ、約４６％ｗ／ｗ、約４７％ｗ／ｗ、約４８％ｗ／ｗ、約４９％ｗ／ｗ、約５０％ｗ／ｗ、約５１％ｗ／ｗ、約５２％ｗ／ｗ、約５３％ｗ／ｗ、約５４％ｗ／ｗ、約５５％ｗ／ｗ、約５６％ｗ／ｗ、約５７％ｗ／ｗ、約５８％ｗ／ｗ、約５９％、または約６０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。

いくつかの例示的実施形態では、組成物は、２５％のアントシアニンを含む１％～２０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物、１０％～５０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物、および１０％～５０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの例示的実施形態では、組成物は、２５％のアントシアニンを含む１％～１５％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物、１０％～４５％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物、および１０％～４５％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの例示的実施形態では、組成物は、２５％のアントシアニンを含む１％～１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物、１０％～４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物、および１０％～４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。いくつかの例示的実施形態では、組成物は、２５％のアントシアニンを含む１％～１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物、２０％～４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物、および２０％～４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む。

いくつかの例示的実施形態では、組成物は、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含み、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物は、有効成分である。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物は、約２５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ブラックカラントは、組成物の約１％～２０％ｗ／ｗ、１％～１５％ｗ／ｗ、または１％～１０％ｗ／ｗの活性成分であり、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物は、組成物の有効成分である。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物は、組成物の約１０％～５０％ｗ／ｗ、１０％～４５％ｗ／ｗ、１０％～４０％ｗ／ｗ、または約２０％～４０％ｗ／ｗの活性成分であり、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物は、組成物の有効成分である。いくつかの実施形態では、ウーロン茶抽出物は、組成物の約１０％～５０％ｗ／ｗ、１０％～４５％ｗ／ｗ、１０％～４０％ｗ／ｗ、または約２０％～４０％ｗ／ｗの活性成分であり、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物は、組成物の有効成分である。

一態様では、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含むブレンド組成物であり、これは、活性剤としてウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物などの、ブラックカラント抽出物を有しないブレンド組成物よりも溶解性が高い（例えば、水溶性）。ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物を含むブレンド組成物では、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物からなる組成物などの、ブラックカラント抽出物を有しないブレンド組成物よりも溶解性が高い（例えば、水溶性）。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物へのブラックカラント抽出物の添加は、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物の水溶性を増加させる。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物へのブラックカラント抽出物の添加は、ウンカリアトメントサ抽出物および／またはウーロン茶抽出物の溶解性（例えば、水溶解性または水溶性）を、少なくとも１倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、または少なくとも５０倍、例えば１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、または１００倍増加させる。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物へのブラックカラント抽出物の添加は、ウンカリアトメントサ抽出物および／またはウーロン茶抽出物の溶解性（例えば、水溶解性または水溶性）を、少なくとも１倍～少なくとも５０倍、または少なくとも１倍～少なくとも２０倍、例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、または１００倍増加させる。いくつかの実施形態では、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物へのブラックカラント抽出物の添加は、ウンカリアトメントサ抽出物および／またはウーロン茶抽出物の溶解性（例えば、水溶解性または水溶性）を、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を唯一の活性剤として含む組成物などの、ブラックカラント抽出物を含まない組成物よりも、少なくとも１倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、または少なくとも５０倍、例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、または１００倍増加させる。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を含む組成物は、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物を唯一の活性剤として含む組成物などの、ブラックカラント抽出物を含まない組成物よりも、少なくとも１倍～少なくとも５０倍、または少なくとも１倍～少なくとも２０倍、例えば、約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、または１００倍増加した溶解性（例えば、水溶解性または水溶性）を有する。いくつかの実施形態では、溶解性（例えば、水溶解性または水溶性）は、１倍～５０倍、５倍～５０倍、５倍～４０倍、５倍～３０倍、５倍～２０倍、１０倍～５０倍、１０倍～４０倍、１０倍～３５倍、１０倍～３０倍、１０倍～２５倍、および１０倍～２０倍のいずれか分増加される。これは、ウンカリアトメントサ抽出物およびウーロン茶抽出物（特に、ウンカリアトメントサ抽出物）が非常に水不溶性であるという驚くべき発見である。第三の成分としてのブラックカラント抽出物の添加は、驚くべきことに、３つの成分すべてを含む結果として得られる組成物を非常に水溶性にし、この成分の味をはるかに良好にする（渋味および苦味が少ない）。ブラックカラントの添加により成分をより水溶性にすることはまた、提供される最終製品を、飲料、飲料ショット、および／またはピル、カプレット、錠剤、カプセルなどを飲み込むことができないヒトのための製品にすることもできる。
使用

一態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、ヒトにおいて脳の「プラークおよび／またはタングル」を阻害する、防止する、低減する、かつ／または除去するための認知および記憶サプリメントの開発のために有用である。

本明細書に記載の組成物はまた、脳の「プラーク」（および程度は少ないが「タングル」）を発症し、イヌ認知機能障害（ＣＣＤ）において定義される認知症を有する高齢のイヌおよびネコにも利益をもたらす。

別の態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、脳のアミロイド「プラーク」を減少させ、認知、記憶、短期記憶、集中および専心性を改善する、高齢のイヌ用のペット用食品サプリメントである。

別の態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、脳のアミロイド「プラーク」を阻害し、防止し、かつ／または減少させ、認知、記憶、短期記憶、集中および専心性を改善する、高齢のネコ用のペット用食品サプリメントである。

別の態様では、本明細書に記載の組成物は、タウオパチーにおいて生じるものなどの、タウフィブリルの形成、沈着、蓄積、および／または持続の処置のために使用される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、例えば、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳震盪（ほとんどのアスリートおよび軍隊／兵士において観察される）、心的外傷後ストレス障害、頭部外傷、頭部への打撃（単一または繰り返し）、および慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）を防止するかつ／または治療するためのタウオパチーを治療するために使用される。

別の態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳震盪（ほとんどのアスリートおよび軍隊／兵士に見られる）、心的外傷後ストレス障害、頭部外傷、頭部への打撃（単一または繰り返し）、および慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）を有するヒトに見られるものなどの、脳の「タングル」の効果的な阻害剤および／または減少剤である。

別の態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、アミロイドフィブリル形成を効果的に阻害するかつ／または防止する、および／またはアミロイドフィブリル成長の阻害を防止する、および／または事前に形成されたアミロイドフィブリルの溶解および／または破壊を引き起こす。

別の態様で提供される、本明細書に記載の組成物は、タウフィブリルの形成を防止するかつ／または阻害する（初期から中期のタウオパチーの対象にとって重要である）、タウフィブリルの成長を阻害する（初期から中期のタウオパチーの対象にとって重要である）、ならびに／または事前に形成されたタウフィブリルの溶解／破壊を引き起こす（後期タウオパチーにとって重要である）。

別の態様では、本明細書に記載の組成物は、タウフィブリル形成を阻害し、タフィブリル成長を阻害し、タウフィブリル－プロテオグリカン相互作用を阻害し、タウフィブリル－プロテオグリカンおよび／またはグリコサミノグリカン相互作用を阻害し、かつ事前に形成されたタウフィブリルの溶解および／または破壊を引き起こす。
方法

別の態様では、それを必要とする哺乳動物におけるアミロイドーシスの治療の方法であって、それを必要とする哺乳動物に本明細書に記載の組成物のいずれか１つを投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、アミロイドーシスは、アルツハイマー病、ダウン症候群、拳闘家認知症、認知機能障害症候群、イヌの認知機能障害、多系統萎縮症、封入体筋炎、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、ニーマンピック病Ｃ型、脳アミロイド血管症、皮質基底変性に関連する認知症、２型糖尿病のアミロイドーシス、慢性炎症のアミロイドーシス、悪性腫瘍および家族性地中海熱のアミロイドーシス、多発性骨髄腫およびＢ細胞悪液質のアミロイドーシス、プリオン病のアミロイドーシス、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロスラー症候群、クールー、スクレイピー、手根管症候群に関連するアミロイドーシス、老人性心アミロイドーシス、家族性アミロイド性多発神経障害、または内分泌腫瘍に関連するアミロイドーシスである。

一態様では、アミロイドフィブリルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりフィブリルを処置することを含む、方法も提供される。

別の態様では、ベータアミロイド含有プラークの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりプラークを処置することを含む、方法が提供される。

別の態様では、それを必要とするヒトまたは哺乳動物におけるタウオパチーの治療のための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを投与することを含む、それを必要とするヒトまたは哺乳動物に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、タウオパチーは、アルツハイマー病、その封入体を伴う前頭側頭葉変性症（ＦＬＴＤ－タウ）、ピック病、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒性認知症、プリオン病、グアムの筋萎縮性側索硬化症－パーキンソニズム－認知症複合体（リチコボディグ病とも呼ばれる）、パーキンソン病、タングル優位型認知症、ガングリオン、神経節膠腫、神経節細胞腫、髄膜腫症、亜急性硬化性全脳炎、鉛脳症、結節性硬化症、ハレルフォルデン‐スパッツ病、リポフスチン症、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、拳闘家認知症、脳震盪、頭部への１回または繰り返しの打撃、または心的外傷後ストレス障害である。

一態様では、タウタンパク質を含むタングルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりタングルを処置することを含む、方法が提供される。

一態様では、それを必要とする対象における認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、対象においてベータアミロイドタンパク質プラークまたはフィブリルの形成、沈着、蓄積または持続を低減するために本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

一態様では、アミロイド疾患に罹患している対象における認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、対象においてベータアミロイドタンパク質プラークまたは原線維の形成、沈着、蓄積または持続を低減するために本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

一態様では、それを必要とする対象における学習、記憶、認知、集中および／または専心性を改善するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

一態様で提供されるのは、加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）、またはアルツハイマー病を有する対象における学習、記憶、認知、集中および／または専心性を改善するための方法であり、本方法は、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む。

一態様で提供されるのは、それを必要とする対象の脳においてタングルを防止するか、低減させるか、または治療するための方法であって、本方法は、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む。

一態様では、単一または複数の脳震盪、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、頭部への打撃、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、心的外傷後ストレス障害、脳老化、軽度認知障害、またはアルツハイマー病を経験した対象の脳においてタングルを防止する、軽減する、または処置するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。

一態様で提供されるのは、それを必要とする対象の脳においてプラークを防止するか、低減させるか、または処置するための方法であって、本方法は、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む。

一態様では、高齢のイヌまたはネコの脳におけるプラークおよびタングルを防止するか、低減するかまたは処置するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つによりプラークおよびタングルを処置することを含む、方法が提供される。

一態様では、脳のプラークおよびタングルの形成、沈着、蓄積および／または持続の影響を受ける高齢のイヌまたはネコの認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、高齢のイヌまたはネコに本明細書に記載の組成物のいずれか１つを投与することを含む、方法が提供される。

一態様では、脳中のタングルを阻害するかまたは低減することにより対象における運動能力を改善するための方法であって、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、対象はアスリートである。
投薬量

いくつかの実施形態では、組成物は、対象の体重１ｋｇ当たり約０．１～約５００ｍｇ／の範囲の、より好ましくは対象の体重１ｋｇ当たり約１．０～約１００ｍｇの範囲の投薬量で、治療的有効量のブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびウンカリアトメントサ抽出物の組み合わせを有する。

しかし、投与される治療投薬量は、治療される臨床状態、タウフィブリル蓄積に影響を受けるまたは影響を受けることが疑われる器官または組織、選択される投与経路を含む、関連する状況に照らして医師により決定されることが理解されよう。したがって、上記の投薬量範囲は、いかなる方法でも本発明の範囲を制限することを意図するものではない。

「単位剤形」という用語は、ヒト対象および他の哺乳動物の単位投薬量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位は、好適な医薬担体と関連して、所望の治療効果を生み出すように計算された所定量の活物質を含む。
投与

一般に、本明細書に記載の組成物は、当技術分野において公知である通常の様態のいずれかによるものである。投与は、経口、局所、および全身（例えば、経皮、鼻腔内、または坐剤による）、または非経口（例えば、筋肉内、皮下、または静脈内注射）のいずれかの経路の１つによってでよい。いくつかの実施形態では、組成物は、経口カプセル、飲料調製物、飲料ショット、または任意の他の方法でなどの経口的に、もしくはエアロゾルスプレーにより、または非経口的に注射可能な形態もしくは注入形態で投与される。

いくつかの実施形態では、組成物は、飲料ショットの形態で経口投与される。本明細書で使用される飲料ショットは、少量の液体（約５０ｍＬなど）中に本明細書に記載の組成物のいずれか１つを含む飲料である。または換言すれば、飲料ショットは、濃縮飲料飲料である。
配合物

いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびウーロン茶抽出物は、単一剤形に配合される。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物ウンカリアトメントサ抽出物、ウーロン茶抽出物のいずれか２つは、単一剤形に配合される。いくつかの実施形態では、ブラックカラント抽出物ウンカリアトメントサ抽出物、ウーロン茶抽出物のいずれか１つは、単一剤形に配合される。

組成物は、錠剤、ピル、カプセル、半固体、粉末、徐放性製剤、溶液、飲料、飲料ショット、懸濁液、エリキシル剤、エアロザル、または任意の他の適切な組成物の形態をとってよく、また少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む。好適な賦形剤、担体および希釈剤は、当業者において公知である。組成物を配合する方法は、Ａｌｆｏｎｓｏ Ａ Ｒ：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５年）として標準的な参考文献に記載されている。特に注射可能な溶液に好適な液体担体としては、水、生理食塩水水溶液、デキストロース水溶液、およびグリコールが挙げられる。

特に、化合物（複数可）は、例えば、錠剤、トローチ（ｔｒｏｕｃｈ）、トローチ（ｌｏｚｅｎｇｅ）、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、溶解フィズ錠剤、乳濁液、ハードカプセルもしくはソフトカプセル、シロップまたはエリキシル剤として経口投与され得る。一実施形態では、ただ１つのそのような化合物が、任意の特定の剤形で投与される。経口使用を目的とする組成物は、栄養補助食品組成物を製造するための当技術分野において公知である任意の方法で調製することができ、そのような組成物は、栄養化を高めたすっきりとした口当たりの良い調製物を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤、および保存剤からなる群から選択される１つ以上の剤を含んでよい。

いくつかの実施形態では、組成物の成分は、任意の形態で商業的に入手され、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、でんぷん、アラビアガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、メチルおよびプロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油を含む、好適な担体、賦形剤および希釈剤を使用してさらに調節されてよい。配合物は、潤滑剤、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、保存剤、甘味剤または香味剤を追加で含んでよい。本発明の組成物は、対象への投与後に迅速であり、持続的なまたは遅延された有効成分の応答を提供するように配合され得る。

錠剤は、錠剤の製造に好適な非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合して本明細書に記載の抽出物を含む。これらの賦形剤としては、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤、例えば、トウモロコシデンプンまたはアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、ゼラチンまたはアカシアなどの結合剤、ならびに例えばステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸またはタルクなどの潤滑剤が挙げられる。錠剤は、コーティングされていないか、または既知の技術によりコーティングされて、胃腸管での崩壊および吸収を遅らせ、それにより、より長期間にわたり持続的な作用をもたらすことができる。例えば、グリセロールモノステアレートまたはグリセロールジステアレートなどの時間遅延材料を使用できる。経口使用のための製剤はまた、ハードゼラチンカプセルとしてまたはソフトゼラチンカプセルとして調製でき、ハードゼラチンカプセルでは、化合物が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合され、ソフトゼラチンカプセルでは、有効成分が水または油性媒体、例えば、ピーナッツオイル、液体パラフィンまたはオリーブオイルと混合される。

水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に好適な賦形剤と混合された化合物を含む。そのような賦形剤としては、例えば、懸濁剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガムおよびアカシアガム；天然に存在するホスファチドである分散剤および湿潤剤、例えば、レシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物；例えば、ポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、または、エチレンオキシドとヘキシトールなどの脂肪酸に由来する部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、または、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物からの部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエートが挙げられる。水性懸濁液はまた、１つ以上の防腐剤、例えば、エチルまたはｎ－プロピルｐ－ヒドロキシベンゾエート、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味剤、および／または１つ以上の甘味剤、例えば、スクロースまたはサッカリンを含み得る。

油性懸濁液は、抽出物を植物油、例えば、アラックス油、オリーブ油、ゴマ油、またはココナッツ油、または液体パラフィンなどの鉱油に懸濁することにより配合され得る。油性懸濁液は、例えば蜜蝋、パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含んでよい。以下に記載されるような甘味剤、および香味剤を添加して、口当たりの良い経口調製物を提供できる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加により保存できる。

水の添加による水性懸濁液の調製に好適な分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および１つ以上の防腐剤と混合された有効成分を提供する。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は、すでに上に記載したものにより例示される。追加の賦形剤、例えば甘味剤、香味剤および剤もまた存在し得る。

組成物はまた、水中油型エマルジョンの形態であり得る。植物油、例えば、オリーブ油またはアラキス油、または鉱油、例えば液体パラフィン、またはそれらの混合物の油相。好適な乳化剤は、天然に存在するガム、例えば、アラビアガムまたはトラガカンスガム、天然に存在するホスファチド、例えば、大豆、レシチン、ならびに脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル、例えば、エチレンオキシドを有するソルビタンエステル、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、および上記の部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。エマルジョンはまた、甘味剤および香味剤を含んでよい。シロップおよびエリキシル剤は、甘味料、例えば、グリセロール、ソルビトールまたはスクロースと配合されてよい。そのような配合物はまた、鎮痛薬、防腐剤、香味剤および着色剤を含んでよい。

以下の非限定的な例は、例示としてのみ与えられており、本開示の限定とは見なされず、その趣旨または範囲から逸脱することなく、その多くの明らかな変形が可能である。
実施例

本技術は、以下の実施例によってさらに説明されるが、これは決して限定的であると解釈されるべきではない。以下の実施例は、本明細書に記載の組成物の調製、特徴付け、および使用を実証する。
組成物－成分の調製

これらの研究のために、ウーロン茶抽出物を以下の手順に従って調製した。茶葉から茶抽出物を作製するために、２ｇの茶葉を、時々混合しながら１００℃の脱イオン水に２０分間抽出した。茶抽出物を、１０μｍを超えるカットオフフィルタを介してろ過して、大きい粒子を除去した。抽出物を、ドライアイス／エタノールで急速凍結し、次に凍結乾燥して、乾燥した濃縮粉末を得た。乾燥粉末を、秤量し、ＤＭＳＯに再懸濁して、濃縮した１００ｍｇ／ｍｌストック溶液を作製した。ストック溶液を、ＤＭＳＯ濃度が最終反応で０．２８％未満になるように、凝集反応物へと希釈した。

ウーロン茶抽出物を、Ｇｕａｎ Ｙｉｎ ｍｏｕｎｔａｉｎ（Ｃｈｉｎａ）から得たウーロン茶から調製した（ＭｅｍｏｒＴｅａ（登録商標）；ＡｕＮｕｔｒａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｉｎｃ．，Ｃｈｉｎｏ，Ｃａｌｉｆ．）。ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、アマゾンの熱帯雨林から得たウンカリアトメントサの内側の樹皮の水抽出物から作製された粉末抽出物である。ＰＴＩ－００７０３（登録商標）を調製するための方法は、例えば、国際公開第９８／５１３０２号に記載されている。２５％のアントシアニンを含むブラックカラント抽出物は、欧州のブラックカラント果実（カシス果実）から調製された粉末抽出物であり、Ｖｉｔａｑｕｅｓｔ（Ｗｅｓｔ Ｃａｌｄｗｅｌｌ，ＮＪ）から入手される。ブラックカラント、ウーロン茶、および／またはウンカリアトメントサのエタノール抽出物は、この開示の範囲内にある。

ウーロン茶抽出物、ウンカリアトメントサ抽出物、およびブラックカラント抽出物（２５％アントシアニン）を含む組成物Ａを、以下のように調製する。ウンカリアトメントサ抽出物（ＰＴＩ－００７０３（登録商標））を、最初に結合剤としてアカシアガムを使用して造粒して、２０６ｍｇの造粒ウンカリアトメントサ抽出物（１８７．５ｍｇのキャッツクロー）を提供した。次に等量のウーロン茶抽出物（１８７．５ｍｇ）を添加し、続いて５０ｍｇのブラックカラント抽出物（２５％アントシアニン）を添加して、試験組成物を提供した。
実施例１：アルツハイマー病のＡβフィブリルまたは凝集体の破壊／阻害

本明細書に記載の組成物は、Ａβタンパク質フィブリルまたは凝集体の強力な破壊剤／阻害剤であることが見出された。この実施例は、アルツハイマー病（すなわち、Ａβ１－４２からなる）の事前に形成されたアミロイドフィブリルの脱集合／破壊／脱凝集を引き起こす組成物の有効性を調査した。
パートＡ：チオフラビンＴ蛍光光度計

この研究では、チオフラビンＴ蛍光光度計を使用して、組成物の効果を決定した。チオフラビンＴは、線維性アミロイドに特異的に結合し、この結合は、形成されたアミロイドフィブリルの数に正比例する４８５ｎｍでの蛍光増強を生じる。蛍光が高いほど、より多くの数のアミロイドフィブリルが形成する（Ｎａｋａｉら、Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．６５：１０４－１１０，１９９１年；Ｌｅｖｉｎｅ ＩＩＩ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．２：４０４－４１０，１９９３年；Ａｍｙｌｏｉｄ：Ｉｎｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２：１－６，１９９５年）。

この研究では、４０μｌの１ｍｇ／ｍｌ溶液（蒸留水中）または前線維化ヒトＡβ１－４２（ｒＰｅｐｔｉｄｅ）を、単独で（対照）または本明細書に開示される組成物のいずれか１つの存在下で（Ａβ：試験組成物の重量比が１：１、１：０．１、１：０．０１、および１：０．００１で）、３７℃で３日間インキュベートした。反応中のＡβの最終濃度は、１００μｌの最終容量でリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ｐＨ７．４、および０．０２％アジ化ナトリウム中０．４ｍｇ／ｍｌ（８８μＭ）であった。３日間の共培養後に、１２．５μｌの各培養混合物を、３７．５μｌのＰＢＳおよび２００μｌのチオフラビンＴ溶液（すなわち、６２．５ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ６．８中の１２５μＭチオフラビンＴ）を含む９６ウェルマイクロタイタープレートに移した。発光蛍光を、ブランクとして、バッファのみまたは組成物のみで差し引いた後、ＥＬＩＳＡプレート蛍光光度計を使用して４８５ｎｍ（４４４ｎｍ励起波長）で読み取った。

第１の一連の研究では、次の組成物の試験を行った：

図１１は、以下の組成物との３日間のインキュベーションの結果を示す。組成物１１．１；組成物１１．２；組成物１１．３；組成物１１．４、組成物１１．５、組成物１１．６、および組成物１１．７。

１１．５（２５％アントシアニンを含むブラックカラント抽出物）とのＡβ１－４２のインキュベーションは、事前に形成されたＡβ１－４２フィブリルの用量依存的な破壊脱集合／脱凝集を引き起こした。崩壊率が１１．４（１５％のアントシアニンを含むブラックカラント抽出物）と比較して１１．５で有意に大きかったことも観察された。

第２の研究では、次の組成物の試験を行った：

図１２は、以下の組成物との３日間のインキュベーションの結果を示す。組成物１８．１；組成物１８．２；組成物１８．３；組成物１８．４、組成物１８．５、組成物１８．６、および組成物１８．７。

第３の研究では、次の組成物の試験を行った：

図１３は、以下の組成物との３日間のインキュベーションの結果を示す。組成物１９．１；組成物１９．２；組成物１９．３；組成物１９．５、組成物１９．６、組成物１９．７、組成物１９．８および組成物１９．９。

第４の研究では、次の組成物の試験を行った：

図１４は、以下の組成物との３日間のインキュベーションの結果を示す。組成物２１．１；組成物２１．２；組成物２１．３；組成物２１．５、組成物２１．６、および組成物２１．７。これらの結果は、ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａが、アルツハイマー病タイプＡβフィブリルの強力な破壊剤／阻害剤であり、用量依存的にその効果を発揮することを示した。

ウーロン茶抽出物およびキャッツクロー抽出物の組み合わせに関する別の研究では、４０μｌの１ｍｇ／ｍｌ溶液（蒸留水中）または前線維化ヒトＡβ１－４２（ｒＰｅｐｔｉｄｅ）を、単独（対照）で、またはＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の存在下（試験組成物：Ａβ重量比１：１および１：０．１）（「ＣｏｇｎｉｔｉｖｅＣｌａｒｉｔｙ（商標）」と呼ばれる）のいずれかで３７℃で３日間、インキュベートした。反応中のＡβの最終濃度は、１００μｌの最終容量でリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ｐＨ７．４＋０．０２％アジ化ナトリウム中０．４ｍｇ／ｍｌ（８８μＭ）であった。３日間の共培養後に、１２．５μｌの各培養混合物を、３７．５μｌのＰＢＳおよび２００μｌのチオフラビンＴ溶液（すなわち、６２．５ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ６．８中の１２５μＭチオフラビンＴ）を含む９６ウェルマイクロタイタープレートに移した。発光蛍光を、ブランクとして、バッファのみまたは組成物のみで差し引いた後、ＥＬＩＳＡプレート蛍光光度計を使用して４８５ｎｍ（４４４ｎｍ励起波長）で読み取った。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせについて、３日間のインキュベーションの結果を図１に示す。「Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｃｌａｒｉｔｙ」（すなわち、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の組み合わせ）とのＡβ１－４２のインキュベーションは、事前に形成されたＡβ１－４２フィブリルの用量依存的な破壊脱集合／脱凝集を引き起こした。試験組成物：Ａβ重量比０．１：１で、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３は、フィブリルを６２．８％阻害した。等しい重量当量（試験組成物：Ａβ重量比１：１）では、チオフラビンＴ蛍光の９３．６％阻害があった。この研究は、ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせが、アルツハイマー病タイプＡβフィブリルの強力な破壊剤／阻害剤であり、用量依存的にその効果を発揮することを示した。
パートＢ：コンゴーレッド

コンゴーレッド結合アッセイでは、コンゴーレッドへのβ－アミロイド結合を変化させる試験組成物の能力を定量化する。このアッセイでは、Ａβ１－４２（チオフラビンＴアッセイ用に調製）を、単独で（対照）または増加する量の試験組成物と３日間インキュベートし、次いで０．２μｍフィルタを介して真空ろ過する。フィルタに保持されたＡβ１－４２の量を次に、フィルタをコンゴーレッド（１２５μＭコンゴーレッド、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７）で染色後に定量する。フィルタを適切に洗浄した後、試験組成物の存在下でのフィルタ上のコンゴーレッド色の何らかの低下（試験組成物の非存在下でのアミロイドタンパク質のコンゴーレッド染色と比較して）は、凝集したコンゴーレッドＡβの量を減少させる／変更させる試験組成物の能力を示す。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、コンゴーレッドへのＡβの結合を阻害することが予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせについて、増加する量のＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の非存在下または存在下（試験組成物：Ａβ重量比１：１および０．１：１）でコンゴーレッドに結合するＡβフィブリルの能力を決定した。３日間のインキュベーションの結果を、図１に示す。ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、コンゴーレッドへのＡβ結合の用量依存的な阻害を引き起こした。試験組成物：Ａβ重量比０．１：１で、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、コンゴーレッド結合を２０．９％阻害した（ｐ＜０．００１）。等しい重量当量（試験組成物：Ａβ重量比１：１）では、コンゴーレッド結合の５８．６％（ｐ＜０．００１）阻害が存在した。

コンゴーレッド結合アッセイの結果と同様に、この研究は、特定のリードウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）とＰＴＩ－００７０３（登録商標）のこの組み合わせが、チオフラビンＴ蛍光測定アッセイにより評価されるように、Ａβフィブリルの強力な破壊剤／阻害剤であり、用量依存的にその効果を発揮することも示した（図１）。ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の組み合わせは、試験組成物：Ａβ重量比０．１：１で７０％（ｐ＜０．００１）（図１）の、および試験組成物：Ａβ重量比１：１で９５％（図１）のチオフラビンＴ結合の用量依存的な減少を引き起こした（Ａβフィブリルの破壊／減少を示す）。
パートＣ：スライドベースのコンゴーレッド結合、チオフラビンＳおよび電子顕微鏡

スライドベースのコンゴーレッドアッセイでは、コンゴーレッド色素をＡβ１－４２とインキュベートし、スライドに点在させ、偏光下で画像化する。コンゴーレッドに結合されたアミロイドフィブリルは、偏光下で特徴的な「アップルグリーン複屈折」を放出する。この研究では、試験組成物の有り無しで事前に線維化された０．４ｍｇ／ｍｌＡβ１－４２（チオフラビンＴアッセイ用に調製されたように）を、３日間インキュベートする。１０μｌのコンゴーレッド溶液（１Ｌ ｄＨ２０に溶解された２５０ｍｇのコンゴーレッド色素（純度５４％；Ｓｉｇｍａ））を、１０μｌのＡβ１－４２－／＋試験組成物に添加し、３０秒間ボルテックスにより混合する。サンプルを、コンゴーレッド溶液と室温で１０分間インキュベートする。サンプルを次に、２０００ｇで３分間遠心分離し、１０μｌの上清を除去する。２μｌのグリセロールをペレットに加え、１５回上下にピペッティングすることにより混合する。サンプルをボルテックスした後、１０μｌの染色タンパク質を、１８ウェル５ＭＭＨＴＣ（登録商標）オートクレーブ可能な青いスライド上に点在させる。サンプルを、小さい円形のカバースリップで覆い、直後に偏光下で画像化する。画像を、Ｑ－Ｉｍａｇｉｎｇ Ｒｅｔｉｇａ１３００デジタルカメラを搭載しＨＢＯ１００イルミネーターを備えたＺｅｉｓｓＡｘｉｏｓｃｏｐｅ ２Ｐｌｕｓ顕微鏡でキャプチャする。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、事前に形成されたＡβ１－４２の事前に形成されたフィブリルを減少させ、脱凝集／溶解するであろうことが予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせ（図２Ａ（左パネル））について、代表的な画像は、未処置のＡβ１－４２が、特徴的なアップルグリーン複屈折および視野全体に均一に分布される豊富なフィブリルタンパク質を有することを示す。図２Ａ（右パネル）では、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（Ａβ４２での重量比０．１：１）での処置は、大幅に少ないコンゴーレッド染色されたフィブリルをもたらし、この植物抽出物の組み合わせが、事前に形成されたＡβ１－４２の事前に形成されたフィブリルを減少させる、および脱凝集する／溶解することができることを示す。

チオフラビンＴと同様に、チオフラビンＳは、フィブリルアミロイドタンパク質に結合する関連する陰イオン染料であり、ガラス顕微鏡スライドに結合したフィブリルタンパク質を検出するために使用できる。この研究では、試験組成物の有り無しで事前に線維化されたＡβ１－４２（チオフラビンＴアッセイ用に調製されたように）を、３日間インキュベートする。４μｌの０．４ｍｇ／ｍｌＡβ１－４２－／＋試験組成物を、１８ウェル５ＭＭＨＴＣ（Ｒ）オートクレーブ可能な青いスライド上に点在させる。サンプルを、２時間風乾させる。１０μｌのチオフラビンＳ溶液（５０ｍＬのｄＨ２０に溶解された３１ｍｇのチオフラビンＳ）を、スライド上の乾燥タンパク質に静かに適用する。タンパク質を１分間染色した後、チオフラビン溶液を、ピペットにより除去する。４０μｌの７０％エタノール溶液を、染色したタンパク質に１分間静かにピペットで移して、すすぐ。この溶液を、ピペットにより静かに除去する。２μｌのＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ（Ｖｅｃｔｏｒ）封入剤を、染色したタンパク質に適用し、次いで円形のカバーガラスで覆う。画像を、蛍光灯の下で検分し、画像を、Ｑ－Ｉｍａｇｉｎｇ Ｒｅｔｉｇａ１３００デジタルカメラを搭載したＨＢＯ１００イルミネーターを備えたＺｅｉｓｓＡｘｉｏｓｃｏｐｅ ２Ｐｌｕｓ顕微鏡でキャプチャする。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、チオフラビンＳの蛍光フィブリルを大幅に減少させるであろうことが予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせ（図２Ｂ（左パネル）について、未処置のＡβ１－４２の代表的な画像は、視野全体に均一に分布された豊富なチオフラビンＳ蛍光フィブリルを示す。ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）（Ａβ１－４２との重量比０．１：１）と７２時間インキュベートした事前に形成されたＡβ１－４２フィブリルは、蛍光フィブリルの実質的な減少を示した（図２Ｂ、右パネル）。図２Ｂ（右パネル）で、代表的な画像は、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３処置により、チオフラビンＳ－蛍光フィブリルが消失したことを示す。

ネガティブ染色電子顕微鏡（ＥＭ）分析を、事前に形成されたＡβフィブリルを破壊するための様々な組成物の有効性を独立して監視するために使用する。これらの実験では、事前に形成されたＡβ１－４２フィブリル（チオフラビンＴアッセイ用に調製されたように）を、増加する濃度の試験組成物の非存在下（対照）または存在下でインキュベートする。３日間のインキュベーション後の、１０μｌのサンプルをグリッドにスポットし、２％酢酸ウラニルで染色し、ＪＥＯＬ１０１０透過型電子顕微鏡で８，０００倍～３０，０００倍の倍率で可視化する。ＥＭ分析は、ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａの処置が、凝集塊となったＡβフィブリルの数を大幅に減少させ、かつ溶解するであろうことが示されることが予想される。これらの研究はブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａが強力なＡβ破壊剤／阻害剤であることを実証するであろうことが、予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせ（図２Ｃ（下部パネル）について、ＥＭ分析は、処置なしでのＡβフィブリルの形成を確認した（すなわち図２Ｃ、対照）。処置なし（２Ｃ、左パネル）では、Ａβは、視野を均一に覆う大きな凝集塊フィブリルを形成した。これらのサンプルを、チオフラビンＴアッセイによっても試験し、チオフラビンＴ蛍光陽性フィブリルであることが確認された。ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の存在下（図２Ｃ、右パネル）では、凝集塊となったＡβフィブリルの数が大幅に減少し、溶解された。これらの結果は、処置によるチオフラビンＴ蛍光の減少を示したチオフラビンＴ蛍光測定データ、および処置によるコンゴーレッド結合の減少を示したコンゴーレッド結合データと十分に相関する。これらの独立した方法論を使用して、強力なＡβ破壊剤／阻害剤としてＰＴＩ－００７０３（登録商標）と組み合わせたリードウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）（すなわち、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標））を特定し、検証した。
実施例２：フィブリル構造を含むβシートへのＡβのＩｎ Ｖｉｔｒｏ変換の阻害／破壊
パートＡ：チオフラビンＴ蛍光光度計

本明細書に記載の組成物がＡβのβシート形成を阻害できるか否かを試験するために、実施例１に記載したものと同じチオフラビンＴアッセイを利用するが、基質として代わりにＡβ１～４０を使用する。Ａβ１－４２と同様に、Ａβ１－４０はチオフラビンＴ陽性凝集体を形成するが、３７℃で２４時間を超えるインキュベーションを必要とし、完全に線維化するために振盪する。Ａβ１－４０はアッセイの開始時に非フィブリル状態にあるため、このタンパク質は、凝集阻害を測定するために、組成物の存在下で凝集できる。凍結乾燥したヒトＡβ１－４０（ｒＰｅｐｔｉｄｅ）を、ｄＨ２Ｏ中で１ｍｇ／ｍＬ（２２０μＭ）に溶解する。別の試験管で、試験組成物ストックを、等量の試験組成物ストックおよびＡβ溶液を含む最終反応物が試験組成物：Ａβ重量比１：１、０．５：１、１：１、および０．２：１で最終Ａβ濃度０．５ｍｇ／ｍＬ（１１０μＭ）となるように、様々な濃度でＰＢＳ中で調製する。Ａβ＋試験組成物（またはＡβ凝集の対照としてＡβ＋ＰＢＳ）を含む反応物を次に、２日間インキュベートする。インキュベーション混合物を、１：１０～０．０５ｍｇ／ｍｌに希釈する。Ａβおよび各希釈インキュベーション混合物５０μＬを、２００μＬのチオフラビンＴ溶液（すなわち、６２．５ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ６．８中の１２５μＭチオフラビンＴ）を含む９６ウェルマイクロタイタープレートに移す。蛍光を、ブランクとして、ＰＢＳバッファのみまたは組成物のみで差し引いた後ＥＬＩＳＡプレート蛍光光度計を使用して４８５ｎｍ（４４４ｎｍ励起波長）で読み取る。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、Ａβのβシート形成を阻害することが予想される。具体的には、この研究は、組成物Ａが、チオフラビンＴ蛍光測定により評価されるように、βシートリッチＡβフィブリル形成の強力な阻害剤であり、かつ用量依存的にその効果を発揮し得ることを示すであろうことが、予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせについて、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）を、別の研究で評価した。図３に提示されたこの研究の結果は、本発明のＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）が、チオフラビンＴ蛍光測定により評価されるように、フィブリルの形成を防止するその能力により示されるように、Ａβ凝集を妨害することを示した。試験組成物：Ａβ重量比０．２：１で、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、フィブリルを１４．１％阻害し、０．５：１でＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、フィブリルを７３％阻害した（ｐ＜０．００１）。等しい重量当量（試験組成物：Ａβ重量比１：１）では、チオフラビンＴ蛍光の８９．３％（ｐ＜０．００１）阻害があった。この研究は、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）がチオフラビンＴ蛍光測定により評価されるように、βシートリッチ－Ａβフィブリル形成の強力な阻害剤であり、かつこの組み合わせが、用量依存的にその効果を発揮することを、示した。
パートＢ：コンゴーレッド

本明細書に記載の組成物がＡβのβシート形成を阻害できるか否かを試験するために、実施例１に記載したものと同じコンゴーレッドアッセイを利用するが、基質として代わりにＡβ１～４０を使用する。このアッセイでは、Ａβ１－４０（チオＴアッセイ用に調製されたように）および試験組成物を、２日間インキュベートした後、０．２μｍフィルタを介して真空ろ過した。フィルタに保持されたＡβ１－４０の量を次に、フィルタをコンゴーレッド（１２５μＭコンゴーレッド、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７）で染色後、定量する。フィルタを適切に洗浄した後、試験組成物の存在下でのフィルタ上のコンゴーレッド色の何らかの低下（試験組成物の非存在下でのアミロイドタンパク質のコンゴーレッド染色と比較して）は、凝集したコンゴーレッドＡβの量を減少させる／変更させる試験組成物の能力を示す。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、Ａβのβシート形成を阻害することが予想される。具体的には、この研究は組成物Ａがコンゴーレッドに結合するＡβフィブリルにより評価されるように、Ａβフィブリルの強力な阻害剤であり、かつ用量依存的にその効果を発揮し得ることを示すであろうことが、予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせに次いて、増加する量のＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）の非存在下または存在下（試験組成物：Ａβ重量比１：１、０．５：１および０．２：１）でコンゴーレッドに結合するＡβフィブリルの能力を、別の研究で決定した。２日間のインキュベーションの結果を、図３に示す。ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、コンゴーレッドへのＡβ結合の用量依存的な阻害を引き起こした。試験組成物：Ａβ重量比０．２：１で、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３は、コンゴーレッド結合を４１．７％阻害し、０．５：１ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、コンゴーレッド結合を６２．５％阻害した（ｐ＜０．００１）。等しい重量当量（試験組成物：Ａβ重量比１：１）では、コンゴーレッド結合の８３．３％（ｐ＜０．００１）の阻害が存在した。チオフラビンＴ蛍光測定アッセイの結果と同様に、この研究は、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）がコンゴーレッドに結合するＡβフィブリルにより評価されるように、Ａβフィブリルの強力な阻害剤であり、かつ用量依存的にその効果を発揮することも示した。
パートＣ：ＣＤ分光法

ＣＤ分光法を実施して、凝集しやすい条件下でＡβ１～４０βシートの二次構造の形成を阻害する、本明細書に記載の組成物の効力を決定する。βシート構造はＡβフィブリルの特徴であるため、タンパク質の二次構造を監視することは、凝集を阻害する組成物の有効性のさらなる証明を提供できる。増加する－／＋濃度の組成物とのＡβ１－４０サンプルのＣＤスペクトルを、ＪＡＳＣＯモデルＪ－８１０分光偏光計で２５℃にて分析する。ＣＤ分光法およびチオＴアッセイを、２つの独立したアッセイからの結果を相関させるために、同じサンプル調製物から並行して分析する。ＣＤスペクトル分析は、ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａが、Ａβの線維性βシート集合体への異常な集合を有意に阻害し、病原性の低い形態でＡβ１－４０を維持することを示すことが、予想される。

ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせについて、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）で処置されたＡβ１－４０のＣＤスペクトルを実行した。図４では、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）で処置されたＡβ１－４０のＣＤスペクトルは、フィブリルを含むβシートの用量依存的な阻害を示した。２１８ｎｍでの最小値は、βシート構造の存在を示す。２１８ｎｍでの楕円率の正のシフトは、βシート構造が少ないことを示す。試験組成物：Ａβ重量比０．２：１でＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）は、未処置より３０．９％少ないβシート構造を示し、０．５：１のＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）では、対照より５３．９％少ないβシート構造を示した。等しい重量当量（試験組成物：Ａβ重量比１：１）では、対照と比較して６４．８％少ないβシート構造があった。これらのデータは、ＬＯＴＥ＋ＰＴＩ－００７０３（登録商標）が、Ａβの線維性βシート集合体への異常な集合を阻害し、Ａβ１－４０をより病原性の低い形態に維持する重要な能力を有することを確認した。
実施例３：タウ凝集阻害剤のｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングのための組換えタウ反復ドメインの使用

タウ凝集阻害剤を同定するためのｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングに関する以前の研究において、本発明者らは、同じ実験条件下で、商業的に購入した全長タウタンパク質（Ｔａｕ４４１；ｒＰｅｐｔｉｄｅから）からの対のらせん状フィラメント（ＰＨＦ）の形成が、タウ反復ドメイン（タウＲＤ；Ｔａｕ４４１のＱ２４４－Ｅ３７２を含む）からのものよりもはるかに遅い（１１日を超える；データは示されない）（２４時間以上）ことを発見した（Ｓ．Ｂａｒｇｈｏｒｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２９９：３５－５１，２００５年）。

明らかに短いターンアラウンドタイムおよび一般的な凝集特性のため、タウＲＤを、タウ凝集阻害剤のｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングに使用した。タウＲＤタンパク質は市販されていなかったので、タウＲＤを、この手順の開示のために参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１６／０２５０２７３号にも記載される以下の手順に従って調製した。ヒトタウＲＤをコードするｃＤＮＡ断片を、細菌発現ベクターにクローニングし、コンストラクトを、大腸菌で発現させた。タウＲＤの高レベルの発現を示す細菌クローンを次に、タンパク質精製のために選択した。組換えタウＲＤタンパク質を次に、わずかな変更を加え説明されたとおり、熱安定性処理および陽イオン交換クロマトグラフィーにより精製した（Ｓ．Ｂａｒｇｈｏｒｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２９９：３５－５１，２００５年）。この方法を使用して、細菌培養物１リットルあたり２０ｍｇのタンパク質収量を得た。精製されたタウＲＤの凝集およびＰＨＦ形成を、チオフラビンＳ（チオＳ）蛍光測定、フィブリルに結合後に蛍光を発する色素、円二色性（ＣＤ）分光法、タンパク質の二次構造の変化を検出する方法、および電子顕微鏡を含む独立したアッセイにより評価し、検証した。結果は一貫して、タウＲＤ（１０μＭ）は、１日以上８００～１０００ｒｐｍで振盪しながら、等モルのヘパリン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）と３７℃でインキュベートされると、チオＳ陽性の、βシートを含むＰＨＦを形成できることを示す。

図５Ａでは、タウＲＤ（１５ｋＤａ）タンパク質を、大腸菌から精製し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ／銀染色により、９５％を超える標準純度で評価した。ＣＤ分光法を使用して、非凝集タンパク質および凝集タウＲＤタンパク質を評価した。図５Ｂ～図５Ｃは、非凝集タウＲＤタンパク質および凝集タウＲＤタンパク質のＣＤ分光法の例である。タウＲＤ凝集体を、２０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中の等モル（１０μＭ）比のタウＲＤおよびヘパリンの存在下で調製し、３７℃で、０～１２０時間振盪しながらインキュベートした。ヘパリンの非存在下では、非凝集タウＲＤのＣＤスペクトルは、１９５ｎｍで楕円率が最小のランダムコイルであった（図５Ｂ）。ヘパリンの存在下で、ＣＤスペクトルは、時間０でのランダムコイル（１９５ｎｍでの最小値）から２０～１２０時間でのβシート（２１８ｎｍの最小値）へと、タウＲＤタンパク質の時間依存的コンフォメーション変化を示した（図５Ｃ）。タウＲＤ凝集を、経時的なチオＳ蛍光測定により監視した（図５Ｄ）。結果は、２０時間のインキュベーション後のチオＳ陽性タウＲＤフィブリルの形成を示す。フィブリル形成のないヘパリン不在下で、タウＲＤチオＳシグナルは、すべての時点で２００未満の任意単位（Ａ．Ｕ．）の蛍光であった。タウフィブリル形成を、ネガティブ染色ＥＭ（図５Ｅ～図５Ｇ）により確認し、それはヘパリンとの４８時間のインキュベーション後にタウフィブリルの形成を示した。時間０でのタウＲＤモノマーを、図５Ｅに示す（バー＝２００ｎｍ）。４８時間でのタウＲＤフィブリルの形成を、図５Ｆ～図５Ｇ（バー＝５０ｎｍ）に示す。まっすぐなフィラメントおよび対のらせん状フィラメントの両方が見つかった。
実施例４：チオフラビンＳ蛍光測定スクリーニングによる新規タウ凝集阻害剤の同定

フィブリル形成を測定するための周知の方法は、チオフラビンＴ（チオＴ）蛍光測定法である（Ｈ．Ｎａｉｋｉら、Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．６５：１０４－１１０，１９９１年；Ｈ．Ｌｅｖｉｎｅ ＩＩＩ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．２：４０４－４１０，１９９３年；Ｈ．Ｌｅｖｉｎｅ ＩＩＩ，Ａｍｙｌｏｉｄ ２：１－６，１９９５年；Ｈ．Ｎａｉｋｉ ａｎｄ Ｋ．Ｎａｋａｋｕｋｉ，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．７４：３７４－３８３，１９９６年）。チオＴは、フィブリルタンパク質に結合することが知られており、蛍光の増加はフィブリル形成の増加と相関し、一方で蛍光の減少は、脱集合および／または破壊によるフィブリルの減少と相関する。アッセイを、チオＴを同様の特性を有する関連する陰イオン色素であるチオフラビンＳ（チオＳ）に置き換えることにより変更した。なぜなら後者は、タウＰＨＦの定量について感度が高く、再現性があることが示されているためである（データは示さず、Ｐ．Ｆｒｉｅｄｈｏｆｆら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３７（２８）：１０２２３－３０，１９９８年）。チオＳ蛍光測定を、上記の組成物がフィブリルの脱集合／破壊を引き起こすことができるか否かを評価するために使用する。

凝集したタウフィブリルを、２０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中、等モル比のタウＲＤおよびヘパリン（それぞれ１０μＭ）の存在下で調製する。反応混合物を、振盪（８００～１０００ｒｐｍ）しながら、３７℃で２４時間～７２時間インキュベートする。試験組成物を、ヘパリンを含む０．１４ｍｇ／ｍｌのタウＲＤと、様々な重量対重量濃度で試験する。同じ反応混合物（＋増加した濃度の試験組成物）が、タウＲＤを使用せずに並行して設定されて、バックグラウンド対照として機能する。

２４～７２時間の共インキュベート後に、各培養混合物５０μｌを、５０μｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）および２５μｌのチオフラビンＳ溶液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４中の５００ｍＭチオフラビンＳ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）の入った黒色の９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｄａｌｌａｓ，Ｔｅｘ．）に移す。ＥＬＩＳＡプレート蛍光光度計を使用して、蛍光を、バッファのみまたは組成物のみをブランクとして差し引いた後、４８５ｎｍ（４４４ｎｍ励起波長）で読み取る。

タウ凝集の５０％阻害であるＩＣ_５０を、Ｐｒｉｓｍバージョン５ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェア）を使用して非線形回帰［（対数［阻害剤］対正規化された応答；可変勾配）］により計算する。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、チオＳ陽性のタウ凝集体を大幅に減少させるであろうことが予想される。この研究は組成物Ａがタウオパチーの新規治療薬として使用できるタウ凝集／原線維形成の阻害剤であることを示すであろうことがまた、予想される。

別の研究で、２５を超える茶抽出物を、チオＳ陽性タウ凝集体の阻害について、試験した。茶の大部分は、ウーロン茶抽出物であった。図６は、いくつかのウーロン茶抽出物、カモミール茶、および緑茶の存在下で凝集したタウのチオＳ蛍光の例である。増加する濃度の抽出物を、０．１４ｍｇ／ｍｌ（１０μＭ）のタウＲＤおよび等モルのヘパリンと２４～７２時間、１０００ｒｐｍ、３７℃で振盪しながらインキュベートした。リードウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）は、他のウーロン茶、カモミール茶、または緑茶抽出物よりもタウ凝集体を抑制した。ＬＯＴＥは、タウに対する組成の０．２３：１（重量：重量）の比率でタウ凝集を５０％（ＩＣ_５０）阻害した。この実験は、ＬＯＴＥが他の組成物よりも優れた能力を有し、タウの繊維状の病原性集合体への異常な集合を阻害することを示す。

優れたタウ凝集阻害を有する茶抽出物を特定した後、タウ凝集阻害アッセイにおいて、リードウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）を、単独でまたはＰＴＩ－００７０３（登録商標）と組み合わせてインキュベートした。特定のウーロン茶とＰＴＩ－００７０３（登録商標）との組み合わせは、ＬＯＴＥまたはＰＴＩ－００７０３（登録商標）単独よりもチオＳ陽性タウ凝集体を阻害した（^＊対応のあるｔ検定により有意である、ｐ＜０．０５）（図７）。リードウーロン茶抽出物とＰＴＩ－００７０３（登録商標）のこの組み合わせは、タウオパチーの新規治療法として使用できるタウ凝集／原線維形成の強力な阻害剤である。
実施例５：円二色性（ＣＤ）分光法によるタンパク質二次構造の分析によるタウ凝集阻害の確認

ＣＤは、タンパク質の構造が変化したことを色素に依存せずに確認できる強力な方法である。ＣＤは、左回りと右回りの円偏光の吸収差を測定する。タンパク質は、楕円率の単位で測定される明確なＣＤ信号を呈する非対称の要素を含む。チオフラビンＳ蛍光、タウ凝集体は、βシートを含むタンパク質の特徴である、楕円率の最小値２１８ｎｍを有する。非凝集タウは、ランダムコイル構造を示す１９５ｎｍでの特徴的な最小値を有する楕円率を有する。ＣＤ分光法を、凝集しやすい条件下でタウＲＤでのβシート二次構造の形成を阻害する、本明細書に記載の組成物のいずれか１つの効力を決定するために実施する。ＣＤスペクトルを、＋／－タウＲＤと上昇する濃度の化合物を含むサンプルから得て、ＪＡＳＣＯモデルＪ－８１０分光偏光計で２５℃で分析する。ＣＤ分光法およびチオＳアッセイを、２つの独立したアッセイの結果を相関させるために、同じサンプル調製物から並行して分析する。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、タウの繊維状のβシート集合体への異常な集合を阻害し、非病原性の可溶性ランダムコイル形態でタウを維持することが予想される。

別の研究で、ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせを評価した。図８では、タウを、リードウーロン茶抽出物（ＬＯＴＥ）またはカモミール茶抽出物で４８時間処置した。ＬＯＴＥで処置されたタウは、βシートを含むフィブリルへの変換が用量依存的に阻害される。ＬＯＴＥ処置の最高濃度で、タウは、依然として最小約１９５ｎｍの可溶性のランダムコイルの形態である。逆に、カモミール茶抽出物による処置の最高濃度では、タウは依然として、未処置の対照と同様に、凝集した、βシート構造に変化する。これらのデータは、ＬＯＴＥが他の組成物よりも、フィブリル状のβシート集合体へのタウの異常な集合を阻害し、かつタウを非病原性の可溶性ランダムコイル形態で維持する重要な能力を有することを確認する。
実施例６：ネガティブ染色電子顕微鏡（ＥＭ）により決定されたタウタンパク質原線維形成の阻害および事前に形成されたタウフィブリルの脱凝集

ＥＭ分析を、タウ原線維形成を阻害するための本明細書に記載の組成物のいずれか１つの有効性を独立して監視するために使用する。これらの実験では、タウフィブリルを、等モル比のタウＲＤタンパク質およびヘパリン（各１０μＭ）を、増加する濃度の試験組成物の非存在下（対照）または存在下でインキュベートすることにより集合させる。２日間のインキュベーション後に、サンプルを、グリッドにスポットし、２％酢酸ウラニルで染色し、ＪＥＯＬ１０１０透過型電子顕微鏡で８，０００倍～３０，０００倍の倍率で可視化する。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、ＥＭ分析によりタウフィブリル形成を阻害することが予想される。組成物Ａの結果は、チオＳ蛍光測定およびＣＤ分析と十分に相関し、これは、チオＳ蛍光の減少およびβシート構造の減少を示すことが予想される。ＥＭ分析は、組成物Ａがタウ凝集を阻害し、また事前に形成されたタウフィブリルの脱凝集を行うことを示すであろうことも、予想される。これらの研究は、組成物Ａがタウ凝集／原線維形成の強力な阻害剤であることを示すことが、予想される。

別の研究では、ウーロン茶抽出物とキャッツクロー抽出物との組み合わせについて（図９左パネル）、ＥＭ分析は、処置の不在下でタウフィブリルの形成を確認した。処置なしで、タウはヒトのタウオパチーに見られるものと同様の対のまっすぐなフィラメントとらせん状のフィラメントとの混合物を形成した（Ｖ．Ｍ．Ｌｅｅら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４：１１２１－１５９，２００１年）。これらのサンプルを、チオＳアッセイおよびＣＤによっても試験されて、チオＳ蛍光陽性であり、かつβシートの構造であることが確認された。ＰＴＩ－００７０３（登録商標）およびＰＴＩ－００７０３（登録商標）＋ＬＯＴＥ（図９、中央および右のパネル）の存在下では、タウフィブリルは、短かくなり、まばらになり、タウフィブリル形成の阻害を示す。さらに少なくないフィブリルが、ＰＴＩ－００７０３（登録商標）およびＬＯＴＥの両方で処理されたタウサンプル中で明らかである。これらの結果は、チオＳ蛍光測定およびＣＤ分析と十分に相関し、これは、チオＳ蛍光の減少およびβシート構造の減少を示した。３つの独立した方法論を使用して、タウ凝集／原線維形成の強力な阻害剤としてＰＴＩ－００７０３＋リードウーロン茶抽出物を特定し、検証した。

ＥＭ分析を利用して、事前に形成されたタウフィブリルは、ＰＴＩ－００７０３（登録商標）およびＬＯＴＥの両方の存在下で、急速に脱凝集することが示された。タウＲＤを、等モルのヘパリンとインキュベートして、前のアッセイにおいて記載したとおりフィブリルを形成した。タウＲＤを、試験組成物の有り無しで希釈し、様々な時点について３７℃で振盪しながらインキュベートした。各時点で、タウＲＤ＋／－試験化合物を、チオＳ蛍光についてアッセイし、ＥＭ分析のために急速凍結した。処理を行わない図１０（左パネル）では、事前線維化タウは、依然として長いフィラメントであった。次のパネルでは、事前に繊維化されたタウが、ＰＴＩ－００７０３（登録商標）＋ＬＯＴＥの存在下で急速に脱凝集することが見出された。ＰＴＩ－００７０３（登録商標）＋ＬＯＴＥとの１５分間ほどのインキュベーションでは、タウフィブリルは無処置の場合よりも短く、まばらである。タウフィブリルの破壊は、チオＳアッセイによっても確認された（データは示していない）。これらのデータは、ＰＴＩ－００７０３（登録商標）＋ＬＯＴＥの組成物が、タウの凝集を阻害するのみでなく、事前に形成されたタウフィブリルを脱凝集できることを示す。
実施例７：ブラックカラント抽出物の添加によるキャッツクロー／ウーロン茶抽出物の溶解

次の実施例では、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物と、ブラックカラント抽出物を添加したキャッツクロー／ウーロン茶抽出物の溶解度を比較した。視覚的分析では、コップ１杯の水を使用して、キャッツクロー／ウーロン茶と５０ｍｇの欧州ブラックカラントを添加したキャッツクロー／ウーロン茶の溶解を観察した。驚いたことに、ブラックカラントの添加は、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物をはるかに水溶性にした。それはまた、ブラックカラントを加えたキャッツクロー／ウーロン茶抽出物の組成物をはるかに良好な味にした（より甘く、苦味が少なく、渋味が少ない）。

図１５は、コップ一杯の水（図の左側）の前にあるキャッツクロー／ウーロン茶抽出物のカプセルを示す。右側は、同じキャッツクロー／ウーロン茶抽出物に５０ｍｇの欧州ブラックカラント抽出物を加えたカプセルである。

図１６は、コップ一杯の水の前にある１つのカプセルを示す。左側は、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物であり、右側は、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物／ブラックカラントの組み合わせを含む。

図１７Ａは、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物の組み合わせの凝集塊（５秒以内）および水不溶性を示す。図１７Ｂは、キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントの組み合わせの凝集塊（５秒以内）を示す。図１７Ｃは、１０秒以内に、驚くべきことに、キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントの組み合わせが、水に自己溶解し始めることを示す。

図１８Ａは、スプーンで撹拌後、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物（左側）が、コップ一杯の水の上部に不溶性物質の塊で不溶性のままであることを示す。一方、水を濃い紫色に変化させるブラックカラント（右側）の追加はまた、混合物をはるかに水溶性にし、ガラスの上部に材料の塊がほとんどまたはまったくなくなる。図１８Ｂは、キャッツクロー／ウーロン茶抽出物を拡大したものであり、撹拌後にコップ一杯の水の上部にある不溶性物質に大きい塊があり、水に不溶性であることを示す。図１８Ｃは、キャッツクロー／ウーロン茶／ブラックカラントの組み合わせを拡大したものであり、撹拌後に水にほぼ溶解していることを示す。ブラックカラントの添加はまた、溶液の味をはるかに甘くする（苦味が少なく、渋味が少ない）。
実施例８：認知および記憶の改善についてのｉｎ ｖｉｖｏ試験

さらなるｉｎ ｖｉｖｏ研究を使用して、本明細書に記載の組成物のいずれか１つを、脳の「プラークおよびタングル」負荷の減少ならびに認知および記憶の改善におけるその有効性について、試験する。４０～６０名の男性および女性を、臨床試験のために選択する。対象は、加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）を患っており、６ヶ月の研究期間内に記憶喪失の症状が悪化することを予想するが、それ以外は良好な健康状態にある。

この研究はプラセボ群を含み、すなわち、対象を２つの群に分け、その１つは、カプセルとして配合された本明細書に記載の組成物のいずれか１つである試験組成物（例えば、食事、好ましくは昼食と共に組成物Ａを含む２つの３７５ｍｇまたは６７０ｍｇカプセル）、もう一方はプラセボ（研究製品の有効成分を含まないカプセルを含む２つのカプセル）を受ける。対象を、記憶、認知、集中、専心性、推論、および軽度認知障害（ＭＣＩ）に関連する他の症状に関してベンチマークする。試験群の対象は、治療用量の併用試験製品抽出物またはプラセボを６ヶ月間受け、短期記憶、認知、集中、および専心性についての分析を、治療０ヶ月、１ヶ月、３ヶ月、および６ヶ月の時点で検査する。記憶、集中、および専心性に関する正確な記録を、両方の群のベンチマーク症状に関して保持し、研究の終わりにこれらの結果を比較する。結果を、各群のメンバー間でも比較する。さらに、各対象の結果を、研究が始まる前に各対象により報告された症状と比較する。使用される試験組成物の活性を、典型的な認知機能低下、短期記憶、認知、集中および専心性の低下、ならびに／または加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）に関連する関連行動障害の減衰により示す。ブラックカラント抽出物、ウーロン茶抽出物、およびキャッツクロー抽出物の組み合わせである組成物Ａは、脳の「プラークおよびタングル」の負荷を軽減し、かつ／または認知および記憶を改善することが予想される。

本開示は、本出願に記載された特定の実施形態に関して限定されるべきではなく、これらは、本開示の個々の態様の単一の例示として意図されている。本開示のすべての様々な実施形態は、本明細書には記載されない。当業者には明らかであるように、本開示の多くの修正および変形は、その趣旨および範囲から逸脱することなく行うことができる。本明細書に列挙されたものに加えて、本開示の範囲内の機能的に同等の方法および装置は、前述の説明から当業者には明らかであろう。そのような修正および変形は、添付の特許請求の範囲内に入ることが意図されている。本開示は、添付の請求項の条件、およびそのような請求項が権利を与えられる同等物の全範囲によってのみ制限されるべきである。

本開示は、特定の用途、方法、試薬、化合物、組成物、または生物学的システムに限定されず、当然ながら変化し得ることを理解されたい。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではないことも理解されたい。

さらに、本開示の特徴または態様がマーカッシュ群に関して説明される場合、当業者は、それによって、本開示が、マーカッシュ群の任意の個々のメンバーまたはメンバーのサブグループに関しても説明されることを認識するであろう。

当業者によって理解されるように、任意のあらゆる目的のために、特に書面による説明を提供することに関して、本明細書に開示されるすべての範囲はまた、任意のあらゆる可能なサブレンジおよびそのサブレンジの組み合わせを包含する。列挙されている範囲は、同じ範囲を少なくとも等しい半分、３分の１、４分の１、５分の１、１０分の１などに十分に記述して有効にするものとして簡単に認識され得る。非限定的な例として、本明細書で論じられている各範囲は、下３分の１、中３分の１、および上３分の１などに容易に分解することができる。当業者にも理解されるように、「まで」、「少なくとも」、「より大きい」、「より小さい」などのすべての言語には、列挙された数を含み、上記のようにその後にサブ範囲に分解することができる範囲を指す。最後に、当業者によって理解されるとおり、範囲は、個々のメンバーを含む。したがって、例えば、１～３の構成部分を有する群は、１、２、または３の構成部分を有する群を指す。同様に、１～５の構成部分を有する群は、１、２、３、４、または５の構成部分を有する群を指す。

Claims (34)

1. 治療的有効量のブラックカラント抽出物、ブラックカラント抽出物、およびウーロン茶抽出物を含む組成物。
2. 前記ブラックカラント抽出物が、約１０％～約３５％ｗ／ｗのプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
3. 前記ブラックカラント抽出物が、約２５％のプロアントシアニジン、アントシアニジン、アントシアニン、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１または２に記載の組成物。
4. 前記組成物が、約１０ｍｇ～約１００ｍｇのブラックカラント抽出物を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 前記組成物が、約１％～約１０％ｗ／ｗのブラックカラント抽出物を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
6. 前記組成物が、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウンカリアトメントサ抽出物を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
7. 前記組成物が、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウンカリアトメントサ抽出物を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
8. 前記組成物が、約１００ｍｇ～約５００ｍｇのウーロン茶抽出物を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。
9. 前記組成物が、約１０％～約４０％ｗ／ｗのウーロン茶抽出物を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。
10. 前記組成物が、ピル、錠剤、カプレット、ソフトまたはハードゼラチンカプセル、ロゼンジ、サシェ、カシェ、ベジキャップ、液滴、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、飲料調製物、冷たいまたは熱い茶系飲料、シロップ、茶バッグ、エアロゾル、坐剤、滅菌注射液、または滅菌包装粉末として配合される、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。
11. 前記組成物が、カプセルとして配合される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
12. 前記カプセルが、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇである、請求項１１に記載の組成物。
13. 前記組成物が、飲料調製物として配合される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
14. 前記飲料調製物が、飲料ショットである、請求項１３に記載の組成物。
15. 前記組成物が、ウンカリアトメントサ抽出物、ウーロン茶抽出物を含み、かつブラックカラント抽出物を含まない組成物よりも溶解性が高い、請求項１～１４のいずれか一項に記載の組成物。
16. 請求項１～１２、または１５のいずれか一項に記載の組成物を含むカプセル。
17. 請求項１～１０、１３～１５のいずれか一項に記載の組成物を含む飲料調製物。
18. それを必要とする哺乳動物におけるアミロイドーシスの治療のための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物をそれを必要とする前記哺乳動物に投与することを含む、方法。
19. 前記アミロイドーシスは、アルツハイマー病、ダウン症候群、拳闘家認知症、認知機能障害症候群、イヌの認知機能障害、多系統萎縮症、封入体筋炎、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、ニーマンピック病Ｃ型、脳アミロイド血管症、皮質基底変性に関連する認知症、２型糖尿病のアミロイドーシス、慢性炎症のアミロイドーシス、悪性腫瘍および家族性地中海熱のアミロイドーシス、多発性骨髄腫およびＢ細胞悪液質のアミロイドーシス、プリオン病のアミロイドーシス、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロスラー症候群、クールー、スクレイピー、手根管症候群に関連するアミロイドーシス、老人性心アミロイドーシス、家族性アミロイド性多発神経障害、または内分泌腫瘍に関連するアミロイドーシスである、請求項１８に記載の方法。
20. アミロイドフィブリルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物で前記フィブリルを処置することを含む方法。
21. ベータアミロイド含有プラークの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物で前記プラークを処置することを含む方法。
22. それを必要とするヒトまたは哺乳動物におけるタウオパチーの治療のための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物をそれを必要とする前記ヒトまたは前記哺乳動物に投与することを含む、方法。
23. 前記タウオパチーは、アルツハイマー病、その封入体を伴う前頭側頭葉変性症（ＦＬＴＤ－タウ）、ピック病、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒性認知症、プリオン病、グアムの筋萎縮性側索硬化症－パーキンソニズム－認知症複合体（リチコボディグ病とも呼ばれる）、パーキンソン病、タングル優位型認知症、ガングリオン、神経節膠腫、神経節細胞腫、髄膜腫症、亜急性硬化性全脳炎、鉛脳症、結節性硬化症、ハレルフォルデン‐スパッツ病、リポフスチン症、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、拳闘家認知症、脳震盪、頭部への１回または繰り返しの打撃、または心的外傷後ストレス障害である、請求項２２に記載の方法。
24. タウタンパク質含有タングルの形成、沈着、蓄積、または持続を処置する方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物で前記タングルを処置することを含む方法。
25. それを必要とする対象の脳中のプラークを阻害する、防止する、低減させる、または処置するための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
26. それを必要とする対象における認知能力を改善するかつ／または認知低下を遅らせるための方法であって、対象におけるベータアミロイドタンパク質プラークまたはフィブリルの形成、沈着、蓄積または持続を低減するために請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
27. 前記対象は、アミロイド疾患罹患患者である、請求項２６に記載の方法。
28. それを必要とする対象における学習、記憶、認知、集中および／または専心性を改善するための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
29. 前記対象は、加齢関連性記憶障害（ＡＡＭＩ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）またはアルツハイマー病の患者である、請求項２８に記載の方法。
30. それを必要とする対象の脳中のタングルを阻害する、防止する、低減させる、または処置するための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
31. 前記対象は、単一または複数の脳震盪、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、頭部への打撃、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、心的外傷後ストレス障害、脳老化、軽度認知障害またはアルツハイマー病を経験した患者である、請求項３０に記載の方法。
32. 高齢のイヌまたはネコの脳中のプラークおよびタングルを予防する、低減するまたは処置するための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物で前記プラークおよびタングルを処置することを含む、方法。
33. 脳のプラークおよびタングルの形成、沈着、蓄積および／または持続に罹患している高齢のイヌまたはネコにおける認知能力を改善するおよび／または認知低下を遅らせるための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記高齢のイヌまたはネコに投与することを含む、方法。
34. 脳中のタングルを阻害することまたは減少させることにより対象における運動能力を改善するための方法であって、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

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