JP2022500465A - ペプチドおよびその医学的使用 - Google Patents

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Abstract

本発明は、ペプチド、当該ペプチドを含む組成物、ならびに血管形成および／または血管新生の阻害剤としてのその使用に関する。さらに、本発明は、不適当な血管形成および／または血管新生と相関する病状の治療のための当該ペプチドおよび当該組成物の使用に関する。特に、本明細書において、ＶＥＧＦＲ１と相関する血管形成および／または血管新生について言及されている。

Description

本発明は、ペプチド、当該ペプチドを含む組成物、ならびに血管形成および／または血管新生の阻害剤としてのその使用に関する。さらに、本発明は、不適当な血管形成および／または血管新生と相関する病状の治療のための当該ペプチドおよび当該組成物の使用に関する。特に、本明細書において、ＶＥＧＦＲ１と相関する血管形成および／または血管新生について言及されている。
ＶＥＧＦＲ−１の活性化の阻害が適用され得る病状の重症度の高さおよび範囲の広さを考慮すると、ＶＥＧＦＲ−１に結合することができ、かつ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＰｌＧＦ、ＶＥＧＦ−ＢリガンドおよびＶＥＧＦ−Ａ／ＰｌＧＦヘテロ二量体と、ＶＥＧＦＲ−１との間の相互作用を妨害することができる合成化合物に対する強い需要があると考えられる。実際、有利なことに、合成化合物は、生物学的起源の汚染物質を本質的に含まず、組換え体起源の生物学的治療薬よりもかなり低コストで製造することもできる。
リガンドを中和するために、多くの治療アプローチでは、モノクローナル抗体が、高い特異性および親和性を特徴とする分子であるために使用される。しかしながら、合成分子も、製造がより容易で安価であり、より安定的かつより容易に送達できるという利点を有する。
この点について、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらは、最近、２００８年に、式（Ｒ−Ｇｌｕ）−（Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ））−（Ｓ−Ｃｈａ）を有するペプチド鎖が３つのリジンの「コア」上で四量体化されている、ペプチドライブラリーから選択された四量体トリペプチドを記載した（Ｔａｍ，Ｊ．Ｐ．１９８８．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５４０９-５４１３）。
この四量体ペプチドの構造は次の通りである。
Figure 2022500465
Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらによって報告された科学的証拠は、上記四量体ペプチドがＶＥＧＦＲ１に結合し、約１０μＭのＩＣ５０で、ＰｌＧＦ、ＶＥＧＦ−ＡおよびＶＥＧＦ−Ｂの相互作用をインビトロで阻害できることを示す。さらに、このペプチドはＶＥＧＦＲ−２には結合することができず、ＶＥＧＦ−Ａによるその活性化を妨害しない。
最後に、このペプチドは、
１）インビトロで抗血管形成活性を示し、ＰｌＧＦおよびＶＥＧＦ−Ａの血管新生促進活性を妨害し、
２）角膜内のＶＥＧＦ−Ａ−ｓＦｌｔ１結合に取って代わることができる（生理学的条件下では脈管化されない）ので、ＶＥＧＦ−Ａが含まれなくなり、血管新生を促進させることができ、
３）腹腔内投与されると、腫瘍増殖、血管形成、動脈新生および転移を減少させ、かつ
４）硝子体内投与されると、脈絡膜血管新生を減少させる（Ｃｉｃａｔｉｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．２０１５）。
このペプチドの抗血管形成活性は、新たな血管の形成の阻害と、血管新生部位での炎症細胞、好ましくは単球−マクロファージの動員を阻害する能力の両方に起因するものである。
抗動脈新生活性は、血管新生部位での平滑筋細胞の動員を阻害する能力に基づいている。
本発明の目的
本発明において、本発明の著者らは、驚くべきことに、化学基、特にチオールまたはチオエーテル基の立体障害に匹敵する立体障害を有する側鎖を特徴とするアミノ酸を、ペプチドのＣ末端に挿入することによって、分子の活性を大幅に改善することを見出した。
実際、上記修飾は、ＶＥＧＦＲ１との選択的結合、ならびにＶＥＧＦＲ１との結合においてＶＥＧＦ−Ａおよび／またはＰｌＧＦと用量依存的に競合する能力を損なうものではない。それどころか、これらの修飾は、１０００ｎＭ未満の濃度で、ＰｌＧＦまたはＶＥＧＦとＶＥＧＦＲ１との間の相互作用を５０％阻害する（ＩＣ５０）ことができる。これは、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらに報告されたペプチドのＶＥＧＦＲ１に対する親和性が１００００ｎＭ以上である（ＩＣ５０として表される）ことを考慮すると、まったく予想外の結果である。換言すると、本発明のペプチドは、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらに報告されたペプチドのものよりも約１桁大きい阻害能力を有する。
さらに、本発明の著者らは、驚くべきことに、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらに記載されているペプチドと、本発明のペプチドの両方が、経口投与または強制飼養により投与されると、脈絡膜血管新生を阻害する有意な能力を示すことを見出した。したがって、これらの分子は、血管形成、好ましくはＶＥＧＦＲ１依存的血管形成の改変と相関する、またはいずれにせよ引き起こされる病状を、好ましくは経口投与によって治療するのに治療上有効である。
以下の図および定義を参照する非限定的で例示的な例とともに、本発明の詳細な説明が続く。
ＶＥＧＦＲ−１のＰｌＧＦ誘導性リン酸化に関して、ｉＶＲ１およびｉＶＲ１−Ｃｙｓと、抗ＰｌＧＦモノクローナル抗体との阻害活性を示す。２０ｎｇ／ｍｌのＰｌＧＦで誘導されたＶＥＧＦＲ−１リン酸化の分析は、ウエスタンブロッティングによって２９３−ＶＥＧＦＲ−１細胞上で実施した。ｉＶＲ１−ＣｙｓとｉＶＲ１とを５μＭの濃度でＰｌＧＦに同時に添加した。ヒト抗ＰｌＧＦ中和モノクローナル抗体を、阻害対照として３．３ｎＭの濃度で使用した。ＰＢＳを陰性対照として使用した。 硝子体内投与されたｉＶＲＩ−Ｃｙｓが、レーザー誘発性脈絡膜血管新生を用量依存的に阻害することを示す。１０または５０μｇのｉＶＲＩ−Ｃｙｓの硝子体内注射は、ビヒクル（ＤＭＳＯ）の注射と比較して、４８．９％および７５．９％に等しい脈絡膜血管新生の用量依存的減少をもたらす。同量のｉＶＲ１は、３７．８％および７３．９％に等しいＣＮＶ阻害をもたらす。対照ペプチド（ＰＣ）は阻害能力を示さない。血管新生の量の定量化を、１０μｇおよび５０μｇのｉＶＲ１の場合はｎ＝１２および１５スポットで、１０μｇおよび５０μｇのｉＶＲ１−Ｃｙｓの場合はｎ＝１０および８スポットで、ＰＣの場合はｎ＝１５スポットで、およびＤＭＳＯの場合はｎ＝１４スポットで実行した。データは、対照と比較した平均±ＳＥＭとして表される。ＰＣおよびＤＭＳＯに対して、＃ｐ＜０．０５、*ｐ＞０．０００２、¶ｐ＜０．０２、§ｐ＞０．００２。下部には、ＣＮＶを表す画像がある。バーは１００μｍを表す。 経口投与されたｉＶＲＩ−Ｃｙｓがレーザー誘発性脈絡膜血管新生を阻害することを示す。ｉＶＲ１−Ｃｙｓを５０ｍｇ／Ｋｇで１日２回、７日間経口投与すると、ビヒクルと比較して、脈絡膜血管新生が４５．９％減少する。同量のｉＶＲ１は、同様のＣＮＶ阻害をもたらす（４９．７％）。血管新生の量の定量化は、ｉＶＲＩ−Ｃｙｓの場合はｎ＝１８スポットで、ｉＶＲＩの場合はｎ＝２０スポットで、およびビヒクルの場合はｎ＝１０スポットで実行した。データは、対照と比較した平均±ＳＥＭとして表される。ＤＭＳＯに対して、*ｐ＝０．００１および§ｐ＝０．００７。下部には、ＣＮＶを表す画像がある。バーは１００μｍを表す。
定義
本明細書において、「ＶＥＧＦ」という用語は、血管内皮増殖因子を意味する。ヒトには、５つの異なる遺伝子によってコードされる５つの異なる血管内皮増殖因子ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−ＤおよびＰｌＧＦが存在する。すべてがグリコシル化された二量体タンパク質である。
本明細書において、「ＶＥＧＦ−Ａ」という用語は、以前はＶＰＦ（血管透過性因子）としても知られていた血管内皮増殖因子−Ａを意味する。ＶＥＧＦ−Ａは、ＶＥＧＦファミリーの最も強力な因子であり、生理学的血管形成および病理学的血管形成の両方で決定的な役割を果たす。選択的スプライシングによって得られた少なくとも６つの異なるアイソフォームがヒトで報告されている。すべてがＶＥＧＦＲ−１およびＶＥＧＦＲ−２と呼ばれる２つの受容体と相互作用することができる。
本明細書において、「ＰｌＧＦ」という用語は、胎盤増殖因子を意味し、その役割は、病理的状態に関連する血管形成の状態に限定されている。４つの異なるアイソフォームがヒトで説明されている。すべてがＶＥＧＦＲ−１に特異的に結合することができる。ＶＥＧＦ−ＡおよびＰｌＧＦは、いずれもＶＥＧＦＲ−１と相互作用し、かつ、２つのそれぞれの遺伝子が同じ細胞で発現すると、ＶＥＧＦＲ−１と相互作用することができるか、またはＶＥＧＦＲ−１／ＶＥＧＦＲ−２ヘテロ二量体化を誘導することができるＶＥＧＦ−Ａ／ＰｌＧＦヘテロ二量体を生じさせることができるため、病理的状態で強力な相乗作用を示す。
本明細書において、「ＶＥＧＦＲ−１」という用語は、Ｆｌｔ−１としても知られるＶＥＧＦ受容体１を意味する。ＶＥＧＦＲ−１は細胞内チロシンキナーゼドメインを有するが、細胞外部分は７つのＩｇＧ様ドメインからなる。ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−ＢまたはＰｌＧＦは、受容体の二量体化をもたらし、その結果、チロシンキナーゼドメインの自己リン酸化による活性化をもたらす。内皮細胞で発現されることに加えて、ＶＥＧＦＲ−１は、平滑筋細胞、単球−マクロファージ、線維芽細胞および内皮前駆細胞を含む他の多くの種類の細胞で発現される。それは、血管形成に寄与するさまざまな種類の細胞を動員する上で基本的な役割を果たす。本明細書において、「可溶性ＶＥＧＦＲ−１」（ｓＶＥＧＦＲ−１）という用語は、ｓＦｌｔ−１としても知られる、可溶性形態のＶＥＧＦ受容体１を意味する。これは、ＶＥＧＦＲ−１の最初の６つのＩｇＧ様細胞外ドメインおよびテールからなり、選択的スプライシングによってＶＥＧＦＲ−１遺伝子から生成される。通常は、全長形態のＶＥＧＦＲ−１が発現しているのと同じ細胞で発現するが、角膜を無血管状態に維持するために、角膜では可溶性形態が優先的に発現している。全長および可溶性ヒトＶＥＧＦＲ１のメッセンジャー配列は、好ましくは、それぞれ、配列番号１および２であり、一方、全長ヒトＶＥＧＦＲ１のタンパク質配列は、それぞれ、配列番号３および４である。本明細書に記載の配列との同一性が８０〜９９．９％の範囲であることを特徴とする配列は、本明細書の一部と見なされなければならない。
本明細書において、「ＶＥＧＦＲ−２」という用語は、ヒトではＫＤＲおよびマウスではＦｌｋ−１としても知られるＶＥＧＦ受容体２を意味する。ＶＥＧＦＲ−２は、ＶＥＧＦ−Ａによって特異的に結合され、ドメイン内の組織化およびＶＥＧＦＲ−１について記載されたものと同様の活性化メカニズムを有する。受容体１とは異なり、本質的に内皮細胞で発現する。それは、内皮細胞の増殖、移動および分化を刺激する上で基本的な役割を有している。
本明細書において、「血管形成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）」という用語は、既存の血管から新たな血管が形成されるプロセスを意味する。本明細書において、血管形成は、好ましくは、以下から選択される、様々な種類の病理的状態に関連する新たな血管の形成のプロセスと呼ばれる：
−黄斑浮腫、加齢性黄斑変性症の湿性形態、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜中心静脈閉塞症、硝子体出血および網膜剥離、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される新生血管性眼疾患、ならびに／または
−固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移であって、前記腫瘍が、好ましくは、白血病およびリンパ腫、好ましくは急性リンパ球性白血病、急性非リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、ホジキン病、乳児もしくは成人固形腫瘍、脳腫瘍、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫および軟骨肉腫、肺腫瘍、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、尿路癌、膀胱癌、口腔腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚の黒色腫および腫瘍、胃の腫瘍、脳の腫瘍、甲状腺の腫瘍、喉頭の腫瘍、肝臓の腫瘍、睾丸の腫瘍から選択される、固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移、ならびに／または
−関節リウマチ、滑膜炎、軟骨および／もしくは骨破壊、骨髄炎、滑膜組織の肥大および／もしくは過形成、骨棘の形成、新生物および／もしくは転移、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される骨または関節の疾患、ならびに／または
−アテローム性動脈硬化症、血管腫、血管内皮腫、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される血管の病状、ならびに／または
−乾癬、いぼ、化膿性肉芽腫、発毛、カポジ肉腫、創傷のケロイド、アレルギー性浮腫、新生物、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される皮膚疾患、ならびに／または
−脂肪組織の病状、好ましくは肥満、で観察される血管形成、ならびに／または
−糖尿病および／もしくはその結果、好ましくは網膜症および／もしくは糖尿病性足、ならびに／または
−造血疾患、好ましくはエイズおよび／もしくはカポジ肉腫。
本明細書において、「血管新生」という用語は、新たな血管形成を意味し、好ましくは、血管が以前に存在しなかった組織における新たな血管の形成および／またはすでに脈管化された組織における血管の数の増加に関連した新たな血管形成を意味する。本明細書において、血管新生は、好ましくは、ＶＥＧＦＲ−１の活性に依存している。
本明細書において、「脈管化（ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）」という用語は、血管新生を意味し、すなわち、それらは同義語として使用される。
本明細書において、「血管新生化（ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）」という用語は、血管新生を意味し、好ましくはＶＥＧＦＲ−１の活性に依存する血管新生を意味する。
本明細書において、「動脈新生」という用語は、血管を平滑筋細胞で覆うことによる新たな血管の安定化のプロセスを意味する。
本明細書において、「阻害剤」は、受容体自体および／またはその可溶性リガンドに結合することによって受容体の活性に拮抗し、したがってそれらの相互作用を防ぐことができる化学的および／または生物学的実体を意味する。
本明細書において、「有効用量」という用語は、本発明に記載の活性物質の投与が所望の生物学的効果を決定することができる投与間隔を意味する。当業者に周知であるように、有効用量は、健康状態、治療を必要とする個体の体調、年齢、活性物質の処方、患者の世話をする医師の評価、効果的に応答する単一個体の身体（ｓｙｓｔｅｍ）の能力、所望される応答の程度、分類学的グループ（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、霊長類など）、および他の関連する要因に応じて変化し得る。本発明に記載される活性物質の有効量は、日常的な試験で決定されるのに十分に広い間隔内であることが期待される。一般的に、Ｒａｇａｎ−Ｓｈａｗら（ＦＡＳＥＢ Ｊ．２００８ Ｍａｒ；２２（３）：６５９−６１）によって報告されるように、したがってまた本明細書において、投与される有効用量は、好ましくは全身に、好ましくは経腸経路によって全身に、より好ましくは経口、舌下または直腸投与される場合、好ましくは１０〜２０００ｍｇ／用量の範囲である。あるいは、好ましくは硝子体内投与される場合、投与される有効用量は、１〜１００ｍｇ／用量の範囲である。あるいは、投与される有効用量は、好ましくは、０．１６〜３３．３ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。治療プログラムは、単回投与または複数回投与を提供する。
本発明の好ましい実施形態の詳細な説明
本発明の第１の態様はペプチドに関し、好ましくは、単離されて以下の一般式（ＩＩ）を特徴とする多量体ペプチドに関する。
｛｛｛［Ｙ１−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｃｈａ］２−Ｚ１｝ｉ−Ｚ２｝ｊ−Ｚ３｝ｚ−Ｙ２−Ｙ３ （式ＩＩ）
式中、
−Ｙ１は、ペプチド（ＮＨ2）のアミノ末端機能、または好ましくは表Ｉにおいて選択される少なくとも１つの化学基である。このリストには、立体障害および／または化学的特性を有する化学基、好ましくはアミノ酸、特に、表Ｉに列挙されている化学基、好ましくはアミノ酸のものを模倣し、かつ／または、好ましくは少なくとも７０％の類似性（この類似性は、当業者に既知の方法、例えば、限定的ではないが、Ｗｏｏｎｇ−Ｈｅｅ Ｓｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ２０１５，２０，１２８４１−１２８６２に記載される方法で決定される）を特徴とするアミノ酸の場合の側鎖も含まれると理解される。
本明細書において、本明細書の基に存在するキラル中心の絶対配置を定義するのに適したＤ／Ｌ表記は、当業者に知られているように、文献に報告された規則に従ったＲ／Ｓ表記と交換可能であることを明確にすべきである。
Figure 2022500465
−Ｇｌｕは、グルタミン酸、好ましくはアミノ酸のＣα上の絶対配置Ｒ（Ｒ−Ｇｌｕ）にあるグルタミン酸を示す。
−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）は、ベンジルシステイン、好ましくはアミノ酸の硫黄連結ベンジル基を含有するアミノ酸のＣα上の絶対配置Ｓにあるベンジルシステイン（Ｓ−ベンジル−システイン／Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）側鎖）を示す。
−Ｃｈａは、シクロヘキシルアラニン、好ましくはアミノ酸のＣα上の絶対配置Ｓにある、シクロヘキシルアラニン（Ｓ−シクロヘキシルアラニン／Ｓ−Ｃｈａ）を示す。
−Ｙ２は、好ましくは、
１．トリペプチドＲ−Ｇｌｕ−Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｓ−Ｃｈａ、ならびに
・グリシンまたは少なくとも１つのチオールまたはチオエーテル基を特徴とするα−アミノ酸から好ましくは選択されるα−アミノ酸（このα−アミノ酸は、好ましくは、表ＩＩに示されるものおよびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのチオールまたはチオエーテル基を特徴とする）
から選択される。
このリストはまた、立体障害および／または化学的性質を有する化学基、好ましくはアミノ酸、特に、表ＩＩに列挙される化学基、好ましくはアミノ酸のものを模倣し、かつ、好ましくは少なくとも７０％の類似性（この類似性は、当業者に既知の方法、例えば、限定的ではないが、Ｗｏｏｎｇ−Ｈｅｅ Ｓｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ２０１５，２０，１２８４１−１２８６２に記載される方法で決定される）を特徴とするアミノ酸の場合の側鎖も含まれると理解される。
Figure 2022500465
−Ｙ３は、好ましくはカルボキシル基、カルボキシアミド基、Ｎ−メチル置換カルボキシアミドまたは二置換Ｎ，Ｎ−ジメチル基、ヒドロキシル基および水素から選択される。
−Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、好ましくは下記式（ＩＩＩ）を特徴とする三官能基を示す。
Figure 2022500465
 式中、ｋは整数であり、好ましくは１〜４に含まれ、Ｂは好ましくはアミノ基またはヒドロキシル基である。この三官能性分子は、好ましくは、ＲまたはＳ絶対配置にある。
好ましくは、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、分岐構造を得るために使用される。実際、一般に、この種類の構造を使用して、この目的のための既知の方法に従ってペプチドを多量体化する。例えば、Ｂがアミノ基である場合、Ｔａｍら（Ｔａｍ Ｊ．Ｐ．,１９８８,ＰＮＡＳ,８５,５４０９−５４１３）によって記載される方法を使用することができる。
Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、好ましくは１、３または７個の三官能性分子を含有する、複数の基Ｚ１、Ｚ２およびＺ３を有する式（ＩＩ）の構造を得るように組み立てることができる。
本発明の好ましい実施形態によれば、Ｚ１および／またはＺ２および／またはＺ３は、分岐構造を形成するように、好ましくはアミド結合によって互いに結合されている。あるいは、例えば、Ｂが好ましくはヒドロキシル基である場合、それらはエステル結合によって互いに結合され得る。
−ｉは、好ましくは４、２または１である。
−ｊは、好ましくは２、１または０である。
−ｚは、好ましくは１または０である。
好ましい実施形態によれば、ｉ＝４、ｊ＝２およびｚ＝１の場合である。さらに好ましい実施形態によれば、ｉ＝２、ｊ＝１およびｚ＝０の場合である。
さらに好ましい実施形態によれば、ｉ＝１、ｊ＝ｚ＝０の場合である。
ｊ＝０の場合、Ｚ２基が省略され、ｚ＝０の場合、Ｚ３基が省略される。
本発明の目的のために、特に好ましい実施形態は、ｉが２に等しく、ｊが１に等しく、Ｚ２が０であるかまたは省略される（換言すると、Ｚ３が存在しない、すなわち不在である）ことを想定している。
本発明の特に好ましい実施形態では、Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、Ｒ−またはＳ−リジン（ｋ＝４）であり、ｉは、好ましくは２に等しい。
本発明の多量体ペプチドの好ましい式は、下記式で表される（図ＩＩａ）。
Figure 2022500465
本発明の特に好ましい実施形態によれば、ペプチドは、式（ＩＩｂ）を特徴とする四量体ペプチドである。
Figure 2022500465
式中、
−Ｙ１は水素原子であり、
−Ｙ２はＤ−システインであり、
−Ｙ３は非置換の第一級アミド基であり、
−Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は上記で定義された通りであり、
−ｉは２に等しく、
−ｊは１に等しく、かつ
−ｚはゼロに等しいか、存在しない。
便宜上、式ＩＩｂを特徴とするペプチドの特に好ましい実施形態を、以後、ｉＶＲ１−Ｃｙｓと呼ぶ。
上記ペプチドは、生物学的活性、好ましくは調節活性、より好ましくは血管形成および／または血管新生を阻害する活性を示し、この活性は、以下の実験結果（本明細書において、非限定的に説明するという目的を有する）で報告および説明されているように、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらによって記載されたペプチドの活性と比較して改善される。本明細書において言及されている血管形成および／または血管新生は、好ましくは、先に定義されたようにＶＥＧＦＲ１依存的である。
Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらに記載されているペプチドはまた、式（ＩＩｃ）を特徴とする四量体ペプチドである：
Figure 2022500465
式中、
−Ｙ１は水素原子であり、
−Ｙ２はグリシンであり、
−Ｙ３は非置換の第一級アミド基であり、
−Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は上記で定義された通りであり、
−ｉは２に等しく、
ｊは１に等しく、かつ
−ｚはゼロに等しい。
便宜上、式ＩＩｃを特徴とするペプチドの特に好ましい実施形態を、以後、ｉＶＲ１と呼ぶ。
本発明の著者は、驚くべきことに、特に末端カルボキシルにあるＩＶＲ１を修飾することにより、好ましくはＲ−Ｇｌｕ−Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｓ−Ｃｈａ基またはα−アミノ酸を挿入することにより、少なくとも１つのチオールまたはチオエーテル基を特徴とするα−アミノ酸（このα−アミノ酸は、好ましくは、表ＩＩに示されるものおよびそれらの組み合わせから選択される）から好ましくは選択され、好ましくは上記で定義された血管新生および／または血管新生を阻害することによって、生物学的活性が改善された、好ましくは調節能力が改善されたペプチドが得られることを見出した。
実際、実施例でより詳細に示され議論されているように、ｉＶＲ１−Ｃｙｓは、ｉＶＲ１と比較して、ＰｌＧＦおよびＶＥＧＦ−Ａの両方とＶＥＧＦＲ−１との相互作用を用量依存的に阻害する能力を示した。特に、ｉＶＲ１−ＣｙｓがＰｌＧＦとＶＥＧＦＲ−１との相互作用を５０％阻害できる濃度（ＩＣ５０）は１０００ｎＭ未満であるが、ＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１阻害のＩＣ５０は、ほぼ１０００ｎＭに近いか、それをわずかに上回っている。一方、ｉＶＲ１は、１００００ｎＭに近い濃度で、ＰｌＧＦとＶＥＧＦＲ−１との相互作用を５０％（ＩＣ５０）阻害することができる。同様に、ｉＶＲ１によるＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１阻害のＩＣ５０は、１００００ｎＭに近いか、それをわずかに上回っている。
したがって、ｉＶＲ１−Ｃｙｓは、ｉＶＲ１で報告されている阻害能力の１０倍の阻害能力を示す。
さらに、著者らは、インビボアッセイにおいて、ｉＶＲ１がビヒクルおよびＰＣと対比して脈絡膜血管新生を３７．８％および３９．３％阻害する（ｐ＜０．０５）が、一方、ｉＶＲ１−ＣｙｓはビヒクルおよびＰＣと対比して４８．９％および５１．０％阻害する（ｐ＜０．０２）ことを示した。したがって、ｉＶＲ１−Ｃｙｓは、血管新生をさらに約１９．３％減少させるので、ペプチドｉＶＲ１よりも優れた阻害効果を示す。
最後に、経口投与または強制飼養により投与すると、例として試験された両ペプチドは、ビヒクルと比較して血管新生の有意な阻害を誘導することができる。
後者の事実は重要である。なぜなら、ＰｏｎｔｉｃｅｌｌｉらおよびＣｉｃａｔｉｅｌｌｏら（２０１５）により、硝子体内注射によって脈絡膜血管形成および血管新生を阻害するｉＶＲ１の能力がすでに実証されていたとはいえ、特に強制飼養によって、異なる経路でペプチドを投与することで、とりわけ眼のような非常に複雑な器官、および、調節されていない、好ましくは増大された血管形成／血管新生によって引き起こされるか、またはいずれにせよ相関している、それに影響を与える病状の場合に、治療効果を維持または改善さえできることはまったく予想されていなかったからである。特に、言及されている新生血管性眼疾患は、好ましくは、黄斑浮腫、加齢性黄斑変性症の湿性形態、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜中心静脈閉塞症、硝子体出血および網膜剥離、ならびにそれらの組み合わせから選択される。
この証拠に照らして、経口経路を介した、または強制飼養による本発明のペプチドの投与が、例えば、一般に血管形成／血管新生と相関する癌などの病状の治療にも治療上有効であることは明らかである。言及されている血管形成または血管新生は、好ましくはＶＥＧＦＲ１依存的である。
本発明の一実施形態によれば、ペプチドは、好ましくはペグ化によって、または容器／シャトル／担体システム、好ましくはリポソーム、ミセル、カプセル、エマルジョン、マトリックス、ゲルなどを使用して、送達を促進または改善するために修飾され得る。
本発明のさらなる態様は、詳細に記載されたペプチドおよび少なくとも１つのさらなる薬学的に許容される成分を含む組成物に関する。
組成物は、好ましくは、式ＩＩａを特徴とする少なくとも１つのペプチド、より好ましくは、式ＩＩｂを特徴とするペプチド、すなわち、ｉＶＲ１−Ｃｙｓを含む。
本明細書において、薬学的に許容される成分は、賦形剤、希釈剤、担体、アジュバント、防腐剤、抗生物質、抗炎症剤、油、ビタミン、抗酸化剤、キレート剤、可溶化剤、粘性剤、不活性ガス、界面活性剤、乳化剤、緩衝物質、免疫抑制剤、抗腫瘍剤、およびそれらの組み合わせから選択される化合物を意味する。
例えば、一実施形態によれば、組成物は、少なくとも１つの抗血管形成／抗血管新生分子、ＰｌＧＦの作用を中和する抗体、少なくとも１つの抗ＶＥＧＦＲ−１、抗−ＶＥＧＦＲ−２、抗ＶＥＧＦＲ−３抗体、少なくとも１つの抗ＶＥＧＦ−Ａ、抗ＶＥＧＦ−Ｂ、抗ＶＥＧＦ−Ｃ、抗ＶＥＧＦ−Ｄ、抗ＶＥＧＦ−Ｅ抗体、およびそれらの組み合わせと組み合わせた本発明のペプチドを含む。
本発明のさらなる態様は、医薬として使用するための、上記ペプチド、好ましくは式ＩＩａを特徴とするペプチド、より好ましくは式ＩＩｂを特徴とするペプチド、すなわちｉＶＲ１−Ｃｙｓに関する。
本発明のさらなる態様は、不適当な血管形成／血管新生に関連する、またはそれによって引き起こされる病理的状態、すなわち、血管形成／血管新生が調節されていない病状の治療で使用するための、上記ペプチド、好ましくは式ＩＩａを特徴とするペプチド、より好ましくは式ＩＩｂを特徴とするペプチド、すなわちｉＶＲ１−Ｃｙｓ、または上記ペプチドを含む組成物に関する。この病状は、好ましくは増大しているので、阻害する必要がある。
この病状の治療に有用であることに加えて、上記ペプチド、好ましくは式ＩＩａを特徴とするペプチド、より好ましくは式ＩＩｂを特徴とするペプチド、すなわちｉＶＲ１−Ｃｙｓ、または上記ペプチドを含む組成物はまた、この病状に対するさらなる代替治療法のフォローアップにも使用できる。
すでに先に述べたように、血管形成／血管新生は、先に定義したように、ＶＥＧＦＲ１またはＶＥＧＦＲ１経路に依存する／によって誘導される／によって調節されることが好ましい。
この病状／状態は、好ましくは、以下から選択される：
−黄斑浮腫、加齢性黄斑変性症の湿性形態、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜中心静脈閉塞症、硝子体出血および網膜剥離、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される新生血管性眼疾患、ならびに／または
−固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移であって、この腫瘍が、好ましくは、白血病およびリンパ腫、好ましくは急性リンパ球性白血病、急性非リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、ホジキン病、乳児もしくは成人固形腫瘍、脳腫瘍、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫および軟骨肉腫、肺腫瘍、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、尿路癌、膀胱癌、口腔腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚の黒色腫および腫瘍、胃の腫瘍、脳の腫瘍、甲状腺の腫瘍、喉頭の腫瘍、肝臓の腫瘍、睾丸の腫瘍から選択される、固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移、ならびに／または
−関節リウマチ、滑膜炎、軟骨および／もしくは骨破壊、骨髄炎、滑膜組織の肥大および／もしくは過形成、骨棘の形成、新生物および／もしくは転移、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される骨または関節の疾患、ならびに／または
−アテローム性動脈硬化症、血管腫、血管内皮腫、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される血管の病状、ならびに／または
−乾癬、いぼ、化膿性肉芽腫、発毛、カポジ肉腫、創傷のケロイド、アレルギー性浮腫、新生物、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される皮膚疾患、ならびに／または
−脂肪組織の病状、好ましくは肥満、で観察される血管形成、ならびに／または
−糖尿病および／もしくはその結果、好ましくは網膜症および／もしくは糖尿病性足、ならびに／または
−造血疾患、好ましくはエイズおよび／もしくはカポジ肉腫。
上記医療目的のために、本発明のペプチドおよび組成物は、任意選択的に組み合わせることができ、または上記病状を治療するために使用される既知の薬物の前または後に使用することもできる。
さらに、本発明のペプチドまたは組成物は、上記病状を治療するために使用される外科的、放射線療法的または化学療法的な既知の治療と関連付けることができる。
本発明のペプチドまたは上記ペプチドを含む組成物は、任意の経路を介して投与されるように処方することができる。投与経路は、全身経路、好ましくは経口経路、強制飼養、舌下または直腸経路、局所、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、皮内および表皮内経路から好ましくは選択される。
本発明のペプチドまたは組成物は、固体として、例えば、ピル、錠剤、顆粒、可溶性顆粒、ペレット、ビーズ、ロゼンジなどとして処方することができる。あるいは、本発明のペプチドまたは組成物は、例えば、注射、吸入または噴霧によって投与される液体溶液として、または液滴またはスプレーとして処方することができる。
上記のような本発明のペプチドまたはこのペプチドを含む組成物は、ボーラスとして投与することができる。
上記のような本発明のペプチドまたはこのペプチドを含む組成物は、医療機器によって、例えば、ステント、ポンプまたはパッチによって投与することができる。
投与は、制御放出または一定放出によって、好ましくは眼用薬物送達のための装置を使用して、好ましくは連続的であり得る。
経口経路または強制飼養による投与が特に好ましい。実際、先に記載されたように、本発明のペプチド（ｉＶＲ１を含む）は、強制飼養によって投与される場合にも、血管形成／血管新生を阻害するのに有効であることが示されている。それらは、眼の血管形成／血管新生を阻害するためにも有効であることが示されている。換言すると、本発明のペプチド（ｉＶＲ１を含む）が、強制飼養によって投与されると、眼における血管形成／血管新生を阻害することが驚くべきことに観察された。言及されている血管形成／血管新生は、好ましくはＶＥＧＦＲ１依存的である。
この科学的証拠に照らして、本発明のさらなる態様は、不適当な、好ましくは増大した血管形成／血管新生（好ましくはＶＥＧＦＲ１依存的）によって引き起こされる、またはいずれにせよ関連する病状の治療に使用するための、本発明のペプチド、好ましくは図ＩＩａを特徴とする少なくとも１つのペプチド、より好ましくは式ＩＩｂを特徴とするペプチド、すなわちｉＶＲ１−Ｃｙｓ、および／または、式ＩＩｃを特徴とするペプチド、すなわちｉＶＲ１、または経口または強制飼養によって投与されるこれらのペプチドを含む組成物に関する。
この病状／状態は、好ましくは、以下から選択される：
−黄斑浮腫、加齢性黄斑変性症の湿性形態、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜中心静脈閉塞症、硝子体出血および網膜剥離、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される新生血管性眼疾患、ならびに／または
−固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移であって、腫瘍が、好ましくは、白血病およびリンパ腫、好ましくは急性リンパ球性白血病、急性非リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、ホジキン病、乳児もしくは成人固形腫瘍、脳腫瘍、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫および軟骨肉腫、肺腫瘍、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、尿路癌、膀胱癌、口腔腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚の黒色腫および腫瘍、胃の腫瘍、脳の腫瘍、甲状腺の腫瘍、喉頭の腫瘍、肝臓の腫瘍、睾丸の腫瘍から選択される、固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移、ならびに／または
−関節リウマチ、滑膜炎、軟骨および／もしくは骨破壊、骨髄炎、滑膜組織の肥大および／もしくは過形成、骨棘の形成、新生物および／もしくは転移、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される骨または関節の疾患、ならびに／または
−アテローム性動脈硬化症、血管腫、血管内皮腫、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される血管の病状、ならびに／または
−乾癬、いぼ、化膿性肉芽腫、発毛、カポジ肉腫、創傷のケロイド、アレルギー性浮腫、新生物、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される皮膚疾患、ならびに／または
−脂肪組織の病状、好ましくは肥満、で観察される血管形成、ならびに／または
−糖尿病および／もしくはその結果、好ましくは網膜症および／もしくは糖尿病性足、ならびに／または
−造血疾患、好ましくはエイズおよび／もしくはカポジ肉腫。
本発明のペプチドまたは組成物は、それを必要とする任意の動物、好ましくはＶＥＧＦＲ−１依存的血管新生を阻害する必要がある動物に投与される。
この動物は、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはそれはヒトである。
投与される上記のようなペプチドまたは組成物の有効量は、好ましくは以下の範囲である：
−好ましくは、全身に、好ましくは全身経腸経路により、より好ましくは経口、舌下または直腸投与される場合、１０〜２０００ｍｇ／回、または
−好ましくは硝子体内投与される場合、１〜１００ｍｇ／回。
あるいは、投与される有効用量は、好ましくは、０．１６〜３３．３ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。
治療プログラムは、好ましくは、単回投与または複数回投与を提供する。
本発明の配列は、国際規格ＷＩＰＯ ＳＴ．２５に従って注解されており、その説明は、プログラムＰａｔｅｎｔ−Ｉｎ３．５に示されている。配列の説明は本明細書に添付されている。
本明細書において、表ＩＩＩにおいて特定された配列および８０〜９９．９％の範囲の同一性を有する配列も記載されていると見なされるべきである。
Figure 2022500465
Figure 2022500465
Figure 2022500465
Figure 2022500465
Figure 2022500465
ＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ１およびＰｌＧＦ／ＶＥＧＦＲ−１相互作用の用量依存的阻害
ＰｌＧＦまたはＶＥＧＦ−ＡとＶＥＧＦＲ−１受容体との結合を試験するためのアッセイは、ＥＬＩＳＡ法に基づいており［Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，ＪＢＣ．２００８ Ｄｅｃ ５；２８３（４９）：３４２５０−９］、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから取得した試薬を使用して実行された。
ヒト組換え受容体ＶＥＧＦＲ−１、特にヒトＩｇＧのＦｃドメインに融合した受容体の７つの細胞外ドメインからなる形態（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号３２１−ＦＬ）を作成して、ＰＢＳ ｐＨ７．５（１００μｌ／ウェル）中０．５μｇ／ｍｌの濃度で、室温（ＲＴ）にて１６時間、９６ウェルマイクロプレートのウェルに付着させた。
３％のＢＳＡを含有するＰＢＳ ｐＨ７．５からなる緩衝液を使用してウェル内で非特異的結合部位をブロックした後、ＰＢＥＴ（ＰＢＳ ｐＨ７．５、ＢＳＡ ０．１％、ＥＤＴＡ ５ｍＭ、Ｔｗｅｅｎ ０．００４％）中のヒト由来の５ｎｇ／ｍｌの組換えＰｌＧＦ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号２６４−ＰＧ）または５ｎｇ／ｍｌの組換えＶＥＧＦ−Ａ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号２９３−ＶＥ）を、受容体が付着したウェルに添加した。
リガンド、すなわち、ＰｌＧＦまたはＶＥＧＦ−Ａと同時に、段階的な用量のｉＶＲ１、ｉＶＲ１−Ｃｙｓまたは対照ペプチド（ＰＣ−［ｉＶＲ１ペプチドの構造と同一の四量体構造を有する（Ｓ−Ｓｅｒ）−（Ｓ−Ａｌａ）−（Ｓ−Ｃｈａ）トリペプチド］）を７８０〜５００００ｎＭの濃度で添加した。結合反応は、３７℃で１時間、続いて室温で１時間行った。
結合および／または競合工程の最後に、抗ヒト−ＰｌＧＦビオチン化ポリクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＢＡＦ２６４）または抗ヒト−ＶＥＧＦ−Ａ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＢＡＦ２９３）をＰＢＥＴ中３００ｎｇ／ｍｌの濃度でウェルに添加した。３７°Ｃで１時間、続いて室温で１時間インキュベートした後、ＨＲＰ結合アビジン−ストレプトアビジンシステム（ＶｅｃｔａｓｔａｉｎエリートＡＢＣキット）およびＨＲＰ用基質（ｏ−フェニレンジアミン−Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｐ１５２６）をウェルに添加した。４９０ｎＭでの吸光度を測定することにより定量化を行った。
ペプチドの阻害活性は、四量体ペプチドの存在下での受容体へのＰｌＧＦまたはＶＥＧＦ−Ａの結合について得られたデータを、四量体ペプチドの非存在下でのデータと比較して、残留結合のパーセンテージで表した。ｉＶＲ１は、ＰｌＧＦ／ＶＥＧＦＲ−１またはＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１相互作用の阻害の陽性対照であった。
結果は、表ＩＶおよびＶに示されており、ｉＶＲ１−ＣｙｓがＰｌＧＦおよびＶＥＧＦ−Ａの両方とＶＥＧＦＲ−１との相互作用を用量依存的に阻害する能力を示したことを示している。
ｉＶＲ１−ＣｙｓがＰｌＧＦとＶＥＧＦＲ−１との相互作用を５０％阻害できる濃度（ＩＣ50）は１０００ｎＭ未満であるが、ＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１のＩＣ５０は１０００ｎＭに近いか、それをわずかに上回っている。
したがって、ｉＶＲ１−ＣｙｓはｉＶＲ１の約１０倍の阻害能力を有しているため、ｉＶＲ１で得られるのと同じ効果を得るために、血管形成／血管新生の阻害に関する同じインビトロおよびインビボ実験プロトコルにおいて、１０分の１の用量で使用できることが期待される。
ＰＣは阻害しない。
Figure 2022500465
Figure 2022500465
式（ＩＩ）を有するが、Ｄ−システインとは異なるＹ２を有する四量体ペプチドが、ＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１結合を阻害する能力を、上記結合アッセイで評価した。ペプチドのＹ２およびＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲ−１相互作用の阻害のそれぞれのＩＣ50を表ＶＩに示す。
Figure 2022500465
ＶＥＧＦＲ−１のＰｌＧＦ誘導性リン酸化の阻害
受容体ＶＥＧＦＲ−１のＰｌＧＦ誘導性リン酸化のアッセイを実施して、ペプチドｉＶＲ１−Ｃｙｓの阻害能力を評価し、その活性をｉＶＲ１の活性と比較した。
ＶＥＧＦＲ−１の活性化には、ＨＥＫ−２９３細胞からの安定したトランスフェクションによって得られた２９３−ＶＥＧＦＲ−１と呼ばれる受容体を過剰発現する細胞株を使用した（Ｅｒｒｉｃｏ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．２００４ ＪＢＣ，２７９：４３９２９−４３９３９）。
この目的のために、２９３−ＶＥＧＦＲ−１細胞をサブコンフルエンスに達するまで培養し、その後、細胞を無血清培地で少なくとも１６時間保持／インキュベートすることにより「飢餓」状態にした。
飢餓工程の最後に、培地を除去し、細胞単層を１００μＭのＮａ3ＶＯ4と５分間インキュベートして、内因性ホスファターゼの活性を阻害した。
次に、細胞を、（１）３７°Ｃで１０分間飢餓に使用した培地において２０ｎｇ／ｍｌのＰｌＧＦのみで刺激し、（２）５μＭの濃度のペプチドの存在下で刺激した。
抗ヒトＰｌＧＦ中和モノクローナル抗体（Ｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃｓ）を阻害対照として３．３ｎＭの濃度で使用した。ＰＢＳを陰性対照として使用した。
インキュベーションの最後に、１００μＭの冷Ｎａ3ＶＯ4で細胞を洗浄し、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８）、５ｍＭのＥＤＴＡ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、１０％グリセロール、１０ｍＭの酢酸亜鉛、１００μＭのＮａ3ＶＯ4およびプロテアーゼ阻害剤の混合物で構成されるバッファーで溶解し、穏やかに攪拌しながら４°Ｃで１時間インキュベートした。最後に、細胞溶解物を１２０００ｘｇで１５分間遠心分離して、細胞破片を除去した。抽出物の定量化は、Ｂｉｏ−Ｒａｄ試薬を使用したブラッドフォード法で行った。１００μｇのすべてのタンパク質抽出物をＳＤＳ−ＰＡＧＥにロードして８．５％に減らした後、タンパク質を分析するための標準的な方法をウエスタンブロッティングで行った。
１：５００に希釈された抗ｐ−ＶＥＧＦＲ−１抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＡＦ４１７０）を使用してリン酸化ＶＥＧＦＲ−１を検出し、一方、１：５００に希釈した抗ＶＥＧＦＲ−１抗体（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｖ４２６２）を使用して非リン酸化形態の受容体を検出することによって正規化を実施した。
図１に示すように、ペプチドｉＶＲ１−Ｃｙｓは、結合アッセイで決定されたＩＣ50の約５倍（５０００ｎＭ）の濃度で使用され（例１を参照）、受容体のリン酸化を強力に阻害する。この阻害は、中和抗体で得られたものと同様であり同じ濃度を使用してｉＶＲ１で得られたものよりも明らかに大きい。
ｉＶＲ１およびｉＶＲ１−Ｃｙｓの硝子体内および経口（強制飼養）投与による脈絡膜血管新生の阻害
レーザー誘発性脈絡膜血管新生の実験モデルでは、脈絡膜を網膜色素上皮（ＲＰＥ）から分離するブルッフ膜に損傷を与える必要がある。損傷はレーザー誘発燃焼によって引き起こされ、これがブルッフ膜の穿孔を引き起こし、脈絡網膜血管新生を活性化する。新たな血管の増殖は、脈絡膜から始まり、上にある網膜組織に侵入する。このマウスモデルは、ヒトの加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）の滲出形態の主な特徴をまとめたものであり、実際、ＡＭＤの前臨床モデルとして一般的に使用されている。これにより、目的の分子の抗血管形成活性の評価が可能になる。
マウスの眼底を視覚化し、レーザーで損傷を誘発できるようにするために、以下に記載される実験手順に従って、Ｍｉｃｒｏｎ ＩＶ統合システムを使用した。
まず、動物の瞳孔の拡張を、０．５％トロピカミド点眼薬を適用することによって誘発した。次に、ケタミンおよびキシラジン（それぞれ８０ｍｇ／Ｋｇおよび１０ｍｇ／Ｋｇ）の溶液の腹腔内注射によって動物を麻酔した。鎮静したら、動物をスタンドに載せ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース２．５％水溶液を両眼に適用した。Ｍｉｃｒｏｎ ＩＶのカメラレンズを溶液と接触させることによって（液浸対物レンズを使用した顕微鏡検査で使用される手順と同様の手順）、角膜の脱水を防ぎ、眼底の視覚化を改善するという二重の機能がある。
レーザーで損傷を誘発するために、まずレーザーポインターを作動させ、焦点を合わせて、ＲＰＥ層を基準としてレーザービームを照射する。レーザー光線が照射される領域は、出血の可能性を防ぐために、網膜の主要な血管から離れている必要がある。ブルッフ膜のレベルでの燃焼の効率は、レーザービームの照射直後の気泡の形成によって確認する。レーザービームの照射条件は、１００ミリ秒で２００ｍＷの出力であった。
文献に存在するデータから、Ｌａｍｂｅｒｔら（Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１３，８：２１９７）による論文に十分に要約されている。この実験モデルにおける最大の血管新生は、損傷から７日後に得られることが知られている。
Ｃ５７Ｂｌ６／Ｊマウスを使用した（１グループにつき、ｎ＝５）。レーザーによる損傷を誘発する手順の最後に、硝子体内注射を直ちに実施し、１μＬのＤＭＳＯ中１０および５０μｇのｉＶＲ１−ＣｙｓまたはｉＶＲ１および５０μｇのＰＣを、３２ｇ針を備えたハミルトン注射器を使用して投与した。対照として、ＤＭＳＯを単独で注射した。
７日後、動物を犠牲にし、眼を除核し、４％パラホルムアルデヒドで固定した。続いて、角膜、虹彩および結晶からなる眼の前部を実体顕微鏡下で除去した。強膜、脈絡膜、ＲＰＥおよび網膜からなる「アイカップ」または後部と定義される残りの部分を、０．７％ＦＩＴＣ-Ｇｒｉｆｆｏｎｉａ ｓｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａ Ｉｓｏｌｅｃｔｉｎ Ｂ４（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、カリフォルニア州バーリンゲーム）の存在下で１６時間インキュベートした。一連の洗浄の後、網膜を除去し、ＲＰＥ／脈絡膜に４つのカットを作成する。これにより、スライドに載置して蛍光顕微鏡で観察することができる。脈絡膜血管新生の定量化は、体積について実行する。すべてのスポットの体積を評価するために、一連の画像（Ｚ−Ｓａｔｃｋｓ、約２０〜２５枚の画像）を取得する。各画像の厚さは１μｍで、上面から最も深い焦点面まで、ＲＰＥ細胞レベルで取得する。蛍光の体積は、ＩｍａｇｅＪプログラム（ＮＩＨ、メリーランド州ベセスダ）を使用して測定し、すべての単一平面の蛍光面積の合計を取る。
１０μｇおよび５０μｇのｉＶＲ１の場合はｎ＝１２および１５スポットで、１０μｇおよび５０μｇのｉＶＲ１−Ｃｙｓの場合はｎ＝１０および８スポットで、ＰＣの場合はｎ＝１５スポットで、ＤＭＳＯの場合はｎ＝１４スポットで、ＣＮＶを定量化した。図２に示した結果は、両ペプチドが血管新生を用量依存的に阻害できることを示す。より高い用量（５０μｇ）では、強力で有意かつ同等の血管新生阻害能力が得られた：ビヒクルおよびＰＣに対してｉＶＲ１−Ｃｙｓ−７５．９％および−７４．６％（ｐ＞０．００２）、ビヒクルおよびＰＣに対してｉＶＲ１−７３．９％および−７６．５％（ｐ＞０．０００２）。
１０μｇの投与量では、ｉＶＲ１はビヒクルおよびＰＣに対して３７．８％および３９．３％の血管新生阻害をもたらすが（ｐ＜０．０５）、ｉＶＲ１−ＣｙｓはビヒクルおよびＰＣに対して４８．９％および５１．０％の阻害をもたらす（ｐ＜０．０２）。したがって、低濃度では、ペプチドｉＶＲ１−Ｃｙｓは、血管新生をさらに１９．３％減少させるので、ペプチドｉＶＲ１よりも優れた阻害効果を示す。したがって、より高い使用投与量で、ペプチドの阻害能力の最大閾値に到達した可能性がある。
経口投与（強制飼養）の実験では、前述の実験手順に従って、Ｃ５７Ｂｌ６／Ｊマウス（１グループにつき、ｎ＝５匹の動物）で脈絡膜血管新生を誘発した。ペプチドｉＶＲ１およびｉＶＲ１−Ｃｙｓならびにビヒクルの投与は、動物が麻酔から回復するとすぐに、実験プロトコルによって規定された７日間、１日２回、損傷誘発直後に開始した。ペプチドは、腹腔内投与されたペプチドｉＶＲ１に関して以前に得られたデータに基づいて（Ｃｉｃａｔｉｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．２０１５，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，６，１０５６３−１０５７６）、５０ｍｇ／Ｋｇで投与した。
経口投与を可能にするために、ペプチドをＤＭＳＯに溶解し、次にＮｕｔｉｌｉｓ食品増粘剤と混合して、９部のＮｕｔｉｌｉｓと１部のＤＭＳＯからなる最終混合物を得た。
物質を、２００μｌの９：１Ｎｕｔｉｌｉｓ／ＤＭＳＯ中物質混合物を１回の投与ごとに使用できるような濃度で調製し、２０ゲージの開口部を備えた強制飼養に適した針を使用して動物の胃に直接投与した。対照群では、２００μｌの９：１ Ｎｕｔｉｌｉｓ／ＤＭＳＯ混合物を投与した。
実験の終わりに、動物を犠牲にし、眼を摘出し、解剖して、ＲＰＥ脈絡膜を単離し、以下に記載されるように、免疫蛍光分析によってＣＮＶの体積を決定した。
ＣＮＶの量子化は、ｉＶＲ１−Ｃｙｓの場合はｎ＝１８スポットで、ｉＶＲ１の場合はｎ＝２０スポットで、ビヒクルの場合はｎ＝１０スポットで実行された。
結果は、図３に示されており、ペプチドｉＶＲ１−Ｃｙｓが、ｉＶＲ１で観察されたレベル（−４９．７％、ｐ＝０．００１）と同様のレベルで、ビヒクル（−４５．９％、ｐ＝０．００７）と比較して、血管新生の有意な阻害を誘導できることを示す。
ｉＶＲ１−Ｃｙｓの血清プロテアーゼ安定性。
１６８時間、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．３）中１０％血清（ウシ胎児血清、ＦＣＳ）におけるペプチドｉＶＲ１−Ｃｙｓの安定性は、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらによって記載されるＲＰ−ＨＰＬＣクロマトグラフィーに基づく方法［Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，ＪＢＣ．２００８ Ｄｅｃ ５；２８３（４９）：３４２５０−９］に依拠して、そこに記載されるように決定した。
参照曲線は、完全に溶解するために、０．１μｍｏｌ／Ｌ〜１０００μｍｏｌ／Ｌの濃度で化合物をＤＭＳＯに溶解することによって作成した。次に、１０μｍｏｌ／Ｌの初期濃度で１０％ＦＣＳと接触したままの分子の濃度を、時間ｔ＝０、その後、最初の１２時間は１時間ごと、次いで２４、７２、１２０および１６８時間で３つのアリコートを描画することによって決定した。アルブミンに結合したいずれかのペプチドを分離するために、アリコートを酢酸０．１Ｍで１：１に希釈し、遠心分離して沈殿物質を除去し、Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉらに報告された条件下でＲＰ−ＨＰＬＣによって分析した。アリコートにおいて検出された残留ペプチドの量は、初期量に対するパーセンテージとして表し、時間の関数としてプロットした。結果は、３回の測定の平均±標準偏差（ＳＤ）として表ＶＩＩに示されている。
Figure 2022500465

Claims (9)

  1. 下記式（ＩＩ）：
    ｛｛｛［Ｙ１−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｃｈａ］２−Ｚ１｝ｉ−Ｚ２｝ｊ−Ｚ３｝ｚ−Ｙ２−Ｙ３ （式ＩＩ）
    式中、
    −Ｙ１は、アミノ末端ペプチド機能（ＮＨ2）、またはＤ−アラニン、Ｄ−アスパラギン酸、Ｄ−バリン、Ｄ−グルタミン酸、Ｌ−シクロヘキシル−アラニン、Ｄ−フェニルアラニン、Ｄ−スレオニン、Ｄ−メチオニン、Ｄ−リジン、Ｄ−システイン（Ｓ−アセトアミドメチル）、Ｄ−チロシン、Ｄ−プロリン、Ｄ−ロイシン、Ｄ−アルギニン、Ｄ−アスパラギン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−アルギニン（ＮΓ−トシル）、Ｄ−セリン、Ｌ−システイン（Ｓ−ベンジル）、Ｌ−システイン（Ｓ−アセトアミドメチル）、Ｄ−ヒスチジン、Ｄ−グルタミン、Ｄ−トリプトファン、Ｌ−グルタミン−（β−アリル）酸、β−アラニン、Ｌ−システイン（Ｓ−ｐ−メチル−ベンジル）、Ｌ−システイン（Ｓ−ｔｅｒｔ−ブチル）、Ｌ−メチオニン−スルホン、Ｌ−メチオニン−スルホキシド、グリシン、およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの化学基であり、
    −Ｇｌｕは、グルタミン酸、好ましくは前記アミノ酸のＣα上の絶対配置Ｒ（Ｒ−Ｇｌｕ）にあるグルタミン酸を示し、
    −Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）は、ベンジルシステイン、好ましくは前記アミノ酸の硫黄連結ベンジル基を含有する前記アミノ酸の前記Ｃα上の絶対配置Ｓにある、ベンジルシステイン（Ｓ−ベンジル−システイン／Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）側鎖）を示し、
    −Ｃｈａは、シクロヘキシルアラニン、好ましくは前記アミノ酸の前記Ｃα上の絶対配置Ｓにある、シクロヘキシルアラニン（Ｓ−シクロヘキシルアラニン／Ｓ−Ｃｈａ）を示し、
    −Ｙ２は、
    ・Ｄ−システイン、Ｌ−システイン、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｄ−システイン−Ｓ−メチル、Ｌ−システイン−Ｓ−メチル、Ｄ−システイン−Ｓ−エチル、Ｌ−システイン−Ｓ−エチル、Ｌ−メチオニン、Ｄ−メチオニン、Ｄ−システイン−Ｓ−ベンジル、Ｌ−システイン−Ｓ−ベンジル、Ｌ−メチオニンスルホキシド、Ｄ−メチオニンスルホキシド、Ｌ−メチオニンスルホン、Ｄ−メチオニンスルホン、Ｄ−セリン、Ｌ−セリン、Ｄ−セリン−Ｏ−メチル、Ｌ−セリン−Ｏ−メチル、Ｄ−セリン−Ｏ−エチル、Ｌ−セリン−Ｏ−エチル、Ｄ−セリン−Ｏ−ベンジル、Ｌ−セリン−Ｏ−ベンジル、Ｄ−スレオニン、Ｌ−スレオニン、Ｄ−スレオニン−Ｏ−メチル、Ｌ−スレオニン−Ｏ−メチル、Ｄ−スレオニン−Ｏ−エチル、Ｌ−スレオニン−Ｏ−エチル、Ｄ−スレオニン−Ｏ−ベンジル、Ｌ−スレオニン−Ｏ−ベンジル、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される少なくとも１つのチオールまたはチオエーテル基を特徴とするα−アミノ酸、ならびに
    ・Ｒ−Ｇｌｕ−Ｓ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｓ−Ｃｈａトリペプチド
    から選択され、
    −Ｙ３は、カルボキシル基、カルボキシアミド基、Ｎ−メチル置換カルボキシアミドまたは二置換Ｎ，Ｎ−ジメチル基、ヒドロキシル基および水素から選択され、
    −Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は、三官能性分子を示し、
    −ｉは４、２、または１であり、かつ／または
    −ｊは２、１、または０であり、かつ／または
    −ｚは１または０であり、
    ただし、ｉ＝４、ｊ＝２およびｚ＝１の場合、ｉ＝２、ｊ＝１およびｚ＝０の場合、ｉ＝１、ｊ＝ｚ＝０の場合、ｊ＝０の場合、Ｚ２基が省略され、かつ、ｚ＝０の場合、Ｚ３基が省略される、
    を特徴とする単離ペプチド。
  2. 前記三官能性分子が、下記式（ＩＩＩ）：
    Figure 2022500465
     式中、
    ｋは整数であり、好ましくは１〜４に含まれ、Ｂは好ましくはアミノ基、好ましくはＳ−またはＲ−リジン、またはヒドロキシル基である、
    を特徴とする、請求項１に記載のペプチド。
  3. 分岐構造を形成するために、Ｚ１および／またはＺ２および／またはＺ３が、アミド結合またはエステル結合によって一緒に結合されている、請求項１または２に記載のペプチド。
  4. 式（ＩＩｂ）：
    Figure 2022500465
     式中、
    −Ｙ１は水素原子であり、
    −Ｙ２はＤ−システインであり、
    −Ｙ３は非置換の第一級アミド基であり、
    −Ｚ１、Ｚ２およびＺ３は上記で定義された通りであり、
    −ｉは２に等しく、
    −ｊは１に等しく、かつ
    −ｚはゼロに等しいか、存在しない、
    を特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載のペプチド。
  5. 請求項１〜４のいずれか一項に記載の少なくとも１つのペプチドと、少なくとも１つのさらなる薬学的に許容される成分とを含む、組成物。
  6. 医薬として使用するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチドまたは請求項５に記載の組成物。
  7. 調節されていない血管形成／血管新生、好ましくはＶＥＧＦＲ１依存的である血管形成／血管新生に関連する、またはそれによって引き起こされる病理的状態の治療に使用するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチドまたは請求項５に記載の組成物。
  8. 前記病理的状態が、
    −黄斑浮腫、加齢性黄斑変性症の湿性形態、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜中心静脈閉塞症、硝子体出血および網膜剥離、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される新生血管性眼疾患、ならびに／または
    −固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移であって、前記腫瘍が、好ましくは、白血病およびリンパ腫、好ましくは急性リンパ球性白血病、急性非リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、ホジキン病、乳児もしくは成人固形腫瘍、脳腫瘍、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫および軟骨肉腫、肺腫瘍、結腸直腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、尿路癌、膀胱癌、口腔腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚の黒色腫および腫瘍、胃の腫瘍、脳の腫瘍、甲状腺の腫瘍、喉頭の腫瘍、肝臓の腫瘍、睾丸の腫瘍から選択される、固形腫瘍および／もしくは腫瘍転移、ならびに／または
    −関節リウマチ、滑膜炎、軟骨および/もしくは骨破壊、骨髄炎、滑膜組織の肥大および/もしくは過形成、骨棘の形成、新生物および/もしくは転移、ならびにそれらの組み合わせから好ましくは選択される骨または関節の疾患、ならびに／または
    −アテローム性動脈硬化症、血管腫、血管内皮腫、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される血管の病状、ならびに／または
    −乾癬、いぼ、化膿性肉芽腫、発毛、カポジ肉腫、創傷のケロイド、アレルギー性浮腫、新生物、およびそれらの組み合わせから好ましくは選択される皮膚疾患、ならびに／または
    −脂肪組織の病状、好ましくは肥満、で観察される血管形成、ならびに／または
    −糖尿病および／もしくはその結果、好ましくは網膜症および／もしくは糖尿病性足、ならびに／または
    −造血疾患、好ましくはエイズおよび／もしくはカポジ肉腫
    から選択される、請求項７に記載の使用のためのペプチドまたは組成物。
  9. ＶＥＧＦＲ１の阻害剤として、好ましくはその活性化の阻害剤として使用するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチドまたは請求項５に記載の組成物。
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001085796A2 (en) * 2000-05-12 2001-11-15 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Use of inhibitors of placental growth factor for the treatment of pathological angiogenesis, pathological arteriogenesis, inflammation, tumour formation and/or vascular leakage

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995016702A1 (en) * 1993-12-15 1995-06-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Peptide inhibitors of cxc intercrine molecules
EP0987274A1 (en) * 1998-09-15 2000-03-22 Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH Factor VIIa Inhibitors
EP2283028A2 (en) * 2007-08-08 2011-02-16 The Board of Regents of The University of Texas System Vegfr-1/nrp-1 targeting peptides
AU2012273365A1 (en) * 2011-06-22 2014-01-16 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/glp-1 receptor co-agonists
KR20170122762A (ko) * 2015-03-02 2017-11-06 더 보오드 오브 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 일리노이즈 혈관신생 억제용 펩타이드
TWI589594B (zh) * 2015-04-27 2017-07-01 台灣基督長老教會馬偕醫療財團法人馬偕紀念醫院 用以治療和/或預防自體免疫疾病和發炎疾病的短合成胜肽

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001085796A2 (en) * 2000-05-12 2001-11-15 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Use of inhibitors of placental growth factor for the treatment of pathological angiogenesis, pathological arteriogenesis, inflammation, tumour formation and/or vascular leakage

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
S. PONTICELLI, ET AL., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 283, no. 49, JPN6023026818, 2008, pages 34250 - 34259, ISSN: 0005099183 *
V. CICATIELLO, ET AL., ONCOTARGET, vol. 6, no. 12, JPN6023026817, 2015, pages 10563 - 10576, ISSN: 0005099184 *

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