JP2022042716A - Agent for lowering extracellular moisture ratio - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、細胞外水分比抑制剤等に関する。 The present invention relates to an extracellular water ratio inhibitor and the like.
浮腫(むくみ)は、日常的に見られる状態であり、様々な原因、例えば加齢、炎症、疾患、外部刺激等によって引き起こされる状態である。浮腫は、放置すれば組織の線維化や皮膚の角化や、関節可動域の制限に繋がる可能性がある。また、主に外見的な理由から、QOL(Quality Of Life)を低下させる要因になり得る。 Edema (swelling) is a condition that is seen on a daily basis and is caused by various causes such as aging, inflammation, disease, and external stimuli. Edema, if left untreated, can lead to tissue fibrosis, skin keratinization, and limited range of motion. In addition, it can be a factor that lowers the QOL (Quality Of Life), mainly for external reasons.
浮腫は、組織間隙に過剰な水分の貯留した状態であると捉えることができ、細胞外水分量を体水分量(細胞外水分量+細胞内水分量)で除してなる細胞外水分比に表れる。すなわち、細胞外水分比が高いことは浮腫であること、或いは浮腫に近い又は引き起こし得る状態であることを意味する。 Edema can be regarded as a state in which excess water is accumulated in the tissue gap, and the extracellular water ratio is obtained by dividing the extracellular water content by the body water content (extracellular water content + intracellular water content). appear. That is, a high extracellular water ratio means that it is edema, or that it is close to or can cause edema.
ユーグレナは、ミドリムシ属(=ユーグレナ属)に属する微細藻類であり、食品材料として利用されている。また、ユーグレナ抽出物を皮膚に適用することも行われている(特許文献1)。 Euglena is a microalgae belonging to the genus Euglena (= genus Euglena) and is used as a food material. In addition, Euglena extract has also been applied to the skin (Patent Document 1).
本発明は、細胞外水分比抑制剤を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide an extracellular water ratio inhibitor.
本発明者は、上記課題に鑑みて鋭意研究した結果、ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、細胞外水分比抑制剤、であれば、上記課題を解決できることを見出した。この知見に基づいてさらに研究を進めた結果、本発明が完成した。即ち、本発明は、下記の態様を包含する。 As a result of diligent research in view of the above problems, the present inventor contains at least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed product, and β-1,3-glucan, and suppresses the extracellular water ratio. If it is an agent, it has been found that the above problem can be solved. As a result of further research based on this finding, the present invention was completed. That is, the present invention includes the following aspects.
項1. ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、細胞外水分比抑制剤。
項2. ユーグレナ、パラミロン、及びパラミロン加工物からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、項1に記載の細胞外水分比抑制剤。
項3. 前記ユーグレナを含有し、且つ前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスである、項1又は2に記載の細胞外水分比抑制剤。
項4. 前記ユーグレナを含有し、且つ前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスEOD-1株(受託番号FERM BP-11530)である、項1又は2に記載の細胞外水分比抑制剤。
項5. 浮腫の予防又は改善に用いるための、項1~4のいずれかに記載の細胞外水分比抑制剤。
項6. 前記浮腫が、細胞膜の機能低下に起因する浮腫、血流障害又は新陳代謝の低下に起因する浮腫、加齢に伴う浮腫、腎性浮腫、心性浮腫、肝性浮腫、内分泌性浮腫、栄養障害性浮腫、薬剤性浮腫、突発性浮腫、静脈性浮腫、リンパ性浮腫、炎症性浮腫、及び血管神経性浮腫からなる群より選択される少なくとも1種である、項5に記載の細胞外水分比抑制剤。
項7. 前記浮腫が、上半身における浮腫を含む、項5又は6に記載の細胞外水分比抑制剤。
項8. 食品組成物、栄養補助食品、食品添加剤、又は医薬である、項1~7のいずれかに記載の細胞外水分比抑制剤。
項9. 経口組成物である、項1~8のいずれかに記載の細胞外水分比抑制剤。
項10. ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、浮腫の予防又は改善剤。
Item 2. Item 2. The extracellular water ratio inhibitor according to
Item 3. Item 2. The extracellular water ratio inhibitor according to
Item 4. Item 2. The extracellular water ratio inhibitor according to
Item 5. Item 4. The extracellular water ratio inhibitor according to any one of
Item 6. The edema is edema caused by decreased function of cell membrane, edema caused by impaired blood flow or decreased metabolism, age-related edema, renal edema, cardiac edema, hepatic edema, endocrine edema, nutritionally impaired edema. Item 5. The extracellular water ratio inhibitor according to Item 5, which is at least one selected from the group consisting of drug-induced edema, idiopathic edema, venous edema, lymphatic edema, inflammatory edema, and vascular edema. ..
Item 7. Item 5. The extracellular water ratio inhibitor according to Item 5 or 6, wherein the edema includes edema in the upper body.
Item 8. Item 6. The extracellular water ratio inhibitor according to any one of
Item 9. Item 6. The extracellular water ratio inhibitor according to any one of
Item 10. An agent for preventing or ameliorating edema, which comprises at least one selected from the group consisting of euglena, paramylon, processed paramylon, and β-1,3-glucan.
本発明によれば、細胞外水分比抑制剤を提供すること、さらには浮腫の予防又は改善剤を提供することができる。 According to the present invention, it is possible to provide an extracellular water ratio inhibitor, and further to provide a preventive or ameliorating agent for edema.
本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。 In the present specification, the expressions "contains" and "contains" include the concepts of "contains", "contains", "substantially consists" and "consists of only".
本発明は、その一態様において、ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、細胞外水分比抑制剤又は浮腫の予防又は改善剤(本明細書において、「本発明の剤」と示すこともある。)に関する。以下に、これについて説明する。 The present invention, in one aspect thereof, comprises an extracellular water ratio inhibitor or prevention of edema, which comprises at least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed product, and β-1,3-glucan. It relates to an improving agent (in the present specification, it may be referred to as "the agent of the present invention"). This will be described below.
1.ユーグレナ
ユーグレナは、ミドリムシ属(=ユーグレナ属)に属する微細藻類であり、その限りにおいて特に制限されない。ユーグレナとして、具体的には、例えばEuglena gracilis(ユーグレナ・グラシリス)、Euglena longa、Euglena caudata、Euglena oxyuris、Euglena tripteris、Euglena proxima、Euglena viridis、Euglena sociabilis、Euglena ehrenbergii、Euglena deses、Euglena pisciformis、Euglena spirogyra、Euglena acus、Euglena geniculata、Euglena intermedia、Euglena mutabilis、Euglena sanguinea、Euglena stellata、Euglena terricola、Euglena klebsi、Euglena rubra、Euglena cyclopicolaなどが挙げられる。これらの中でも、本発明の効果をより確実に発揮できるという観点から、好ましくはユーグレナ・グラシリスが挙げられ、より好ましくはユーグレナ・グラシリスEOD-1株[2013年6月28日付で独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許生物寄託センター{NITE-IPOD(郵便番号292-0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室)}にブダペスト条約の規定下で、受託番号FERM BP-11530として国際寄託済み]が挙げられる。
1. 1. Euglena Euglena is a microalgae belonging to the genus Euglena (= genus Euglena), and is not particularly limited as long as it is. As Euglena, specifically, for example, Euglena gracilis , Euglena longa , Euglena caudata , Euglena oxyuris , Euglena tripteris , Euglena proxima , Euglena viridis , Euglena sociabilis , Euglena ehrenbergii , Euglena Euglena acus , Euglena geniculata , Euglena intermedia , Euglena mutabilis , Euglena sanguinea , Euglena stellata , Euglena terricola , Euglena klebsi , Euglena rubra , Euglena cyclopicola and the like. Among these, Euglena gracilis is preferably mentioned from the viewpoint that the effect of the present invention can be more reliably exerted, and more preferably Euglena gracilis EOD-1 strain [Product Evaluation by Incorporated Administrative Agency on June 28, 2013]. Technology Infrastructure Organization Patent Organism Depositary Center {NITE-IPOD (Postal code 292-0818, 2-5-8 Kazusakamatari, Kisarazu City, Chiba Prefecture, Japan, Room 120)} under the provisions of the Budapest Treaty, as the accession number FERM BP-11530 International deposit].
ユーグレナの形態は、ユーグレナの細胞体又はその成分の大半を含むものである限り、特に制限されない。ユーグレナの形態としては、例えばユーグレナの乾燥粉末形態、ユーグレナの懸濁液、ユーグレナエキス等が挙げられ、中でも、好ましくはユーグレナの乾燥粉末形態が挙げられる。 The morphology of Euglena is not particularly limited as long as it contains most of Euglena's cell body or its components. Examples of the form of Euglena include a dry powder form of Euglena, a suspension of Euglena, a Euglena extract and the like, and among them, a dry powder form of Euglena is preferable.
ユーグレナの乾燥状態におけるパラミロン含有率は、例えば50%以上、好ましくは60%以上、より好ましくは70%以上である。 The paramylon content of Euglena in a dry state is, for example, 50% or more, preferably 60% or more, and more preferably 70% or more.
ユーグレナは、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 Euglena may be a single species or a combination of two or more species.
2.β-1,3-グルカン、パラミロン
β-1,3-グルカンは、グルコースがβ1,3結合のみで連結してなる1本の糖鎖(又は糖鎖構造)を主鎖として有するものであれば特に制限されない。β-1,3-グルカンは、直鎖状のものに限らず、分枝鎖を有するものも包含する。
2. If β-1,3-glucan and paramylon β-1,3-glucan have one sugar chain (or sugar chain structure) in which glucose is linked only by β1,3 bonds as the main chain. There are no particular restrictions. β-1,3-glucan is not limited to linear ones, but also includes those having branched chains.
β-1,3-グルカン誘導体の重量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~2×106、好ましくは5×104~1×106、更に好ましくは1×105~1×106ある。なお、重量平均分子量は、GPC法により測定することができる。 The weight average molecular weight of the β-1,3-glucan derivative is not particularly limited, but is, for example, 1 × 10 4 to 2 × 10 6 , preferably 5 × 10 4 to 1 × 10 6 , and more preferably 1 × 10 5 to. There are 1 x 10 6 . The weight average molecular weight can be measured by the GPC method.
β-1,3-グルカンは、化学合成により得られたものであってもよいが、入手容易性等の観点から、各種生物が産生する天然β-1,3-グルカンが好ましい。天然β-1,3-グルカンとしては、例えばパラミロン、カードラン、ラミナラン、カロース、レンチナン、シゾフィラン等が挙げられる。これらの中でも、好ましくはパラミロンが挙げられる。以下、パラミロンについて説明する。 The β-1,3-glucan may be obtained by chemical synthesis, but from the viewpoint of availability and the like, natural β-1,3-glucan produced by various organisms is preferable. Examples of the natural β-1,3-glucan include paramylon, curdlan, laminarin, callose, lentinan, schizophyllan and the like. Among these, paramylon is preferably mentioned. Hereinafter, paramylon will be described.
パラミロンは、ユーグレナ由来のβ-1,3-グルカンであり、その限りにおいて特に制限されない。 Paramylon is a β-1,3-glucan derived from Euglena and is not particularly limited as long as it is.
パラミロンが由来するユーグレナについては、上記「1.ユーグレナ」における説明と同様である。 The Euglena from which paramylon is derived is the same as the explanation in "1. Euglena" above.
パラミロンの質量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~5×106、好ましくは2×104~1×106、より好ましくは5×104~1×106、さらに好ましくは1×105~5×105である。 The mass average molecular weight of paramylon is not particularly limited, but is, for example, 1 × 10 4 to 5 × 10 6 , preferably 2 × 10 4 to 1 × 10 6 , more preferably 5 × 10 4 to 1 × 10 6 , still more preferable. Is 1 × 10 5 to 5 × 10 5 .
なお、質量平均分子量は、SEC-MALS分析により、以下の条件で測定 することができる:
検出器:多角度散乱検出器(Wyatt Technology製DAWN HELEOS II)
示差屈折計検出器(Wyatt Technology製Optilab T-rEX)
使用カラム:TSKgel α-M 2本(東ソー製)
移動相:0.05M臭化カリウム添加DMSO
流 速:0.5 mL/min。
The mass average molecular weight can be measured by SEC-MALS analysis under the following conditions:
Detector: Multi-angle scattering detector (DAWN HELEOS II manufactured by Wyatt Technology)
Differential refractometer detector (Optilab T-rEX manufactured by Wyatt Technology)
Column used: 2 TSKgel α-M (manufactured by Tosoh)
Mobile phase: 0.05M potassium bromide added DMSO
Flow rate: 0.5 mL / min.
パラミロンは、ユーグレナの細胞内において、通常、β-1,3-グルカン鎖が形成する3重螺旋構造体が一定の規則性の基に高度に集積してなるパラミロン粒子として存在している。 Paramylon exists in Euglena cells as paramylon particles in which triple helical structures formed by β-1,3-glucan chains are usually highly integrated under a certain regularity.
パラミロン粒子の形状は、特に制限されないが、通常は、偏平な回転楕円体状である。 The shape of the paramylon particles is not particularly limited, but is usually a flat spheroid.
パラミロン粒子の粒子径分布は、特に制限されないが、例えば0.5~15μm、好ましくは1~6μmである。また、パラミロン粒子の平均粒子径も特に制限されないが、例えば1~10、好ましくは2~4μmである。 The particle size distribution of the paramylon particles is not particularly limited, but is, for example, 0.5 to 15 μm, preferably 1 to 6 μm. The average particle size of the paramylon particles is also not particularly limited, but is, for example, 1 to 10, preferably 2 to 4 μm.
パラミロンの形態は、パラミロンを含むものである限り、特に制限されない。ユーグレナの形態としては、例えばパラミロンの乾燥粉末形態、パラミロンの懸濁液等が挙げられ、中でも、好ましくはパラミロンの乾燥粉末形態が挙げられる。 The form of paramylon is not particularly limited as long as it contains paramylon. Examples of the form of Euglena include a dry powder form of paramylon, a suspension of paramylon, and the like, and among them, a dry powder form of paramylon is preferable.
パラミロンは、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 Paramylon may be used alone or in combination of two or more.
3.ユーグレナ及びパラミロンの製造方法
ユーグレナは、液体に含まれたユーグレナを培養する工程(培養工程)を含む方法により、大量に調製することが可能である。培養工程は、例えば公知の方法(例えば、特許第5883532号公報に記載の方法)に従って行うことができる。該培養工程では、典型的には、水と、ユーグレナと、ユーグレナが利用できる栄養素とを含む液体(培養液)を撹拌しつつ好気条件でユーグレナ属微細藻類を培養する。
3. 3. Method for Producing Euglena and Paramylon Euglena can be prepared in large quantities by a method including a step of culturing Euglena contained in a liquid (culture step). The culturing step can be performed, for example, according to a known method (for example, the method described in Japanese Patent No. 5883532). In the culturing step, Euglena microalgae are typically cultivated under aerobic conditions while stirring a liquid (culture solution) containing water, Euglena, and nutrients available to Euglena.
栄養素としては、糖類(グルコース(ブドウ糖)、フルクトース(果糖)などの単糖類)、ミネラル類(例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、鉄、亜鉛、モリブデン、銅、リン、窒素、硫黄、又は、ホウ素など)、ビタミンB類(例えばビタミンB1(チアミン)、ビタミンB2(リボフラビン)、ナイアシン、パントテン酸、ビタミンB6(ピリドキシン、ピリドキサール、又はピリドキサミン)、ビタミンB12(シアノコバラミン)、葉酸、ビオチンなど)などが挙げられる。培養液中の栄養素の濃度は、ユーグレナの生存、増殖等が可能な濃度である限り特に制限されない。 Nutrients include sugars (monosaccharides such as glucose (dextrose) and fructose (fruit sugar)) and minerals (eg sodium, potassium, magnesium, calcium, iron, zinc, molybdenum, copper, phosphorus, nitrogen, sulfur, or boron. Vitamin Bs (eg, vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), niacin, pantothenic acid, vitamin B6 (pyridoxine, pyridoxal, or pyridoxamine), vitamin B12 (cyanocobalamine), folic acid, biotin, etc.) Be done. The concentration of nutrients in the culture solution is not particularly limited as long as Euglena can survive, proliferate, and the like.
培養工程の光条件は特に制限されず、培養工程は明条件と暗条件のいずれで行われてもよい。従属栄養培養にて培養する際には暗条件で培養される。明条件としては、藻類を増殖させるための通常の光強度を採用することができる。暗条件としては、例えば10μmol/m2/s未満、好ましくは光が全く当たらない完全な暗所条件が挙げられる。 The light conditions of the culturing step are not particularly limited, and the culturing step may be carried out under either light or dark conditions. When culturing in heterotrophic culture, it is cultivated under dark conditions. As a bright condition, normal light intensity for growing algae can be adopted. Dark conditions include, for example, less than 10 μmol / m 2 / s, preferably complete dark conditions with no light.
培養工程における培養温度は、ユーグレナが増殖できる温度であれば、特に限定されない。該培養温度(培養液の温度)としては、例えば、20℃~35℃が採用される。 The culture temperature in the culture step is not particularly limited as long as it is a temperature at which Euglena can grow. As the culture temperature (temperature of the culture solution), for example, 20 ° C to 35 ° C is adopted.
培養工程における液体のpHは、ユーグレナが増殖できるpHであれば、特に限定されない。ユーグレナが増殖できるpHとしては、例えば3.0~5.5が採用される。 The pH of the liquid in the culturing step is not particularly limited as long as it is a pH at which Euglena can grow. For example, 3.0 to 5.5 is adopted as the pH at which Euglena can grow.
培養工程の後に、液体の遠心分離や重力分離などによってユーグレナを濃縮することが好ましい。得られたユーグレナは、所望の形態に応じて、追加の処理(例えば、液体への懸濁、水中又は油中への分散、エキス抽出、乾燥粉末化等)に供することができる。 After the culturing step, it is preferable to concentrate Euglena by centrifugation or gravity separation of the liquid. The resulting Euglena can be subjected to additional treatments (eg, suspension in liquid, dispersion in water or oil, extract extraction, dry powdering, etc.), depending on the desired form.
パラミロン粒子は、公知の方法(例えば特許第5883532号公報に記載の方法)に従って又は準じて、ミドリムシから分離、単離、又は精製することによって製造することができる。パラミロン粒子は、例えばミドリムシの細胞膜を破壊することによって得られる細胞内容成分を回収することによって、容易に得ることができる。また、必要に応じて、パラミロン粒子を精製してもよい。パラミロン粒子の精製については各種知られており(例えば、特許第5883532号公報)、それらの方法に従って行うことができる。精製工程としては、例えば、界面活性剤処理工程、洗浄工程などが挙げられる。得られたユーグレナは、所望の形態に応じて、追加の処理(例えば、液体への懸濁、水中又は油中への分散、乾燥粉末化等)に供することができる。 Paramylon particles can be produced by separation, isolation, or purification from Euglena according to or according to known methods (eg, the method described in Japanese Patent No. 5883532). Paramylon particles can be easily obtained, for example, by recovering the cell content component obtained by destroying the cell membrane of Euglena. In addition, paramylon particles may be purified as needed. Various types of purification of paramylon particles are known (for example, Japanese Patent No. 5883532), and these methods can be used. Examples of the purification step include a surfactant treatment step and a cleaning step. The resulting Euglena can be subjected to additional treatments (eg, suspension in liquid, dispersion in water or oil, dry powdering, etc.), depending on the desired form.
4.パラミロン加工物
パラミロン加工物は、パラミロンに対して加工処理、例えば物理処理、化学処理等することによって得られるものであり、その限りにおいて特に制限されない。パラミロン加工物としては、例えば、繊維化パラミロン、アモルファスパラミロン等が挙げられる。アモルファルパラミロンは、公知の方法に従って又は準じて、例えば特開2011-184592号公報に記載の方法を用いて化学的に処理することにより、得ることができる。
Four. Paramylon processed product The paramylon processed product is obtained by processing paramylon, for example, physical treatment, chemical treatment, or the like, and is not particularly limited as long as it is. Examples of the processed paramylon product include fibrous paramylon and amorphous paramylon. Amorphal paramylon can be obtained by chemically treating according to or in accordance with a known method, for example, using the method described in JP-A-2011-184592.
パラミロン加工物としては、繊維化パラミロンが好ましい。以下に、繊維化パラミロンについて説明する。 As the processed paramylon product, fibrous paramylon is preferable. The fibrous paramylon will be described below.
繊維化パラミロンは、ユーグレナ由来のβ-1,3-グルカンであり、繊維状の形態のものである限りにおいて特に制限されない。これまで、パラミロン粒子を化学処理(アルカリ処理等)して得られたアモルファスパラミロンが報告されているが、これは、電子顕微鏡で観察すると繊維化であるとは認められず、形や大きさが不定形の塊であるため、繊維化パラミロンには包含されない。 The fibrous paramylon is a β-1,3-glucan derived from Euglena and is not particularly limited as long as it is in a fibrous form. Amorphous paramylon obtained by chemically treating paramylon particles (alkali treatment, etc.) has been reported so far, but this is not recognized as fibrosis when observed with an electron microscope, and its shape and size are Since it is an amorphous mass, it is not included in fibrous paramylon.
繊維化パラミロンの重量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~2×107、好ましくは1×105~5×105である。 The weight average molecular weight of the fibrous paramylon is not particularly limited, but is, for example, 1 × 10 4 to 2 × 10 7 , preferably 1 × 10 5 to 5 × 10 5 .
なお、重量平均分子量は、SEC-MALS分析により、以下の方法で測定することができる:SEC装置:LC-10ADvp system(Shimadzu Co.、日本)、使用カラム:KD-806M(shodex.、日本)、
MALS検出器:DAWN HELEOSII(wyatt Technologies.、U.S.A.)、溶離液:1%LiCl/DMI、
流速:0.5 mL/分。
The weight average molecular weight can be measured by the following method by SEC-MALS analysis: SEC device: LC-10ADvp system (Shimadzu Co., Japan), column used: KD-806M (shodex., Japan). ,
MALS detector: DAWN HELEOSII (wyatt Technologies., USA), eluent: 1% LiCl / DMI,
Flow rate: 0.5 mL / min.
繊維化パラミロンの繊維の直径は、特に制限されないが、例えば10~500 nm、好ましくは20~300 nm、より好ましくは50~200 nmである。繊維化パラミロンの繊維の直径は、通常、繊維化パラミロンの電子顕微鏡像に基づいて測定することができる。 The diameter of the fiber of the fibrous paramylon is not particularly limited, but is, for example, 10 to 500 nm, preferably 20 to 300 nm, and more preferably 50 to 200 nm. The diameter of the fibers of the fibrous paramylon can usually be measured based on the electron micrograph of the fibrous paramylon.
繊維化パラミロンの水中沈定体積は、特に制限されないが、例えば30~300 mL/g、好ましくは50~250 mL/g、より好ましくは70~200 mL/gである。 The settling volume of the fibrous paramylon in water is not particularly limited, but is, for example, 30 to 300 mL / g, preferably 50 to 250 mL / g, and more preferably 70 to 200 mL / g.
水中沈定体積は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
「日本食物繊維学会監修、日本食物繊維学会編集委員会編(2008)食物繊維 ‐基礎と応用‐ 第3版, p.111 第一出版, 東京」に記載されている方法に準じて測定を行う。具体的には、次の通りである。サンプルのスラリー状の試験試料を、25 mL容積のプラスチックチューブに、乾燥質量換算で125 mg計り取り、プラスチックチューブを手で激しく振って、内容物を撹拌する。その後、25 mL容積のメスシリンダーに内容物を移し、25 mLになるまで純水を加える。メスシリンダー内の液体を撹拌した後、37℃で24時間静置する。これによりサンプルが沈殿し、界面を介して分けられる2つの層(沈殿したサンプルを主に含む層(下層)、及び水を主に含む層(上層))が生じる。下層の体積をメスシリンダーの目盛から求め、得られた体積をサンプル質量(乾燥質量)で除して、水中沈定体積(mL/g)を算出する。試験は3回又は4回行い、平均値及び標準偏差を算出する。
The submerged volume can be measured according to or according to the following method:
Measure according to the method described in "Supervised by the Japanese Society of Dietary Fiber, edited by the Editorial Board of the Japanese Society of Dietary Fiber (2008) Dietary Fiber-Basics and Applications-Third Edition, p.111 First Publishing, Tokyo". .. Specifically, it is as follows. Weigh 125 mg of the sample slurry-like test sample into a 25 mL volume plastic tube in terms of dry mass, and shake the plastic tube vigorously by hand to stir the contents. Then transfer the contents to a graduated cylinder with a volume of 25 mL and add pure water until it reaches 25 mL. After stirring the liquid in the measuring cylinder, let it stand at 37 ° C for 24 hours. This causes the sample to precipitate, resulting in two layers separated across the interface: a layer predominantly containing the precipitated sample (lower layer) and a layer predominantly containing water (upper layer). The volume of the lower layer is obtained from the scale of the measuring cylinder, and the obtained volume is divided by the sample mass (dry mass) to calculate the submerged volume (mL / g). The test is performed 3 or 4 times and the mean and standard deviation are calculated.
繊維化パラミロンは、酵素による分解に対して、比較的高い耐性を有する。例えば、βグルカナーゼの分解により生成されるモノマー(グルコース)の量は、繊維化パラミロン1 g当たり、例えば0.1~50 mg、好ましくは1~10 mgである。 Fibrotic paramylon has a relatively high resistance to enzymatic degradation. For example, the amount of monomer (glucose) produced by the decomposition of β-glucanase is, for example, 0.1 to 50 mg, preferably 1 to 10 mg per 1 g of fibrous paramylon.
この量は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
反応液[被検物質30 mg(乾燥重量)、緩衝液(東京化成工業社製 B0156、フタル酸水素カリウム-水酸化ナトリウムバッファー (pH4.0))5 mL、酵素液(日本バイオコン社製 endo-1,3-β-Glucanase (酵素含有量:50 units/mL))0.1 mL、純水、反応液量 10 mL]を調製し、40℃で24時間、45 rpmで水平振盪する。振盪後、直ちに凍結保存し、濃縮のために凍結乾燥する。凍結乾燥後、各試料に純水を0.5 mLずつ加え、攪拌する(20倍濃縮)。遠心分離(10000G、5分間、4℃)し、上澄を回収する作業を2回繰り返す。回収した上澄中のグルコース濃度を、測定キット(和光純薬工業社製、グルコースCII-テストワコー)を用いて測定する。測定値に基づいて、被検物質1 g当たりのグルコース生成量(mg)を算出する。
This amount can be measured according to or according to the following method:
Reaction solution [Test substance 30 mg (dry weight), buffer solution (Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd. B0156, potassium hydrogen phthalate-sodium hydroxide buffer (pH 4.0)) 5 mL, enzyme solution (Nippon Biocon Co., Ltd. endo- 1,3-β-Glucanase (enzyme content: 50 units / mL)) 0.1 mL, pure water, reaction solution volume 10 mL] is prepared and shaken horizontally at 40 ° C for 24 hours at 45 rpm. Immediately after shaking, freeze and store and lyophilize for concentration. After lyophilization, add 0.5 mL of pure water to each sample and stir (concentrate 20 times). Centrifuge (10000G, 5 minutes, 4 ° C) and repeat the work of collecting the supernatant twice. The glucose concentration in the recovered supernatant is measured using a measurement kit (Glucose CII-Test Wako, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). Based on the measured values, the amount of glucose produced per 1 g of the test substance (mg) is calculated.
繊維化パラミロンは、アルカリ溶液への溶解性が、比較的低い。例えば、繊維化パラミロンは、0.1~0.3Mの水酸化ナトリウム水溶液に対して溶解しない。ここで、「溶解しない」とは、例えば、当該水溶液に繊維化パラミロンを懸濁した後(例えば、直後~1時間経過後)の溶液の吸光度(660 nm)が、例えば0.1以上、好ましくは1.0以上であることを意味する。 Fibrotic paramylon has relatively low solubility in alkaline solutions. For example, fibrous paramylon is insoluble in 0.1-0.3 M aqueous sodium hydroxide solution. Here, "insoluble" means that, for example, the absorbance (660 nm) of the solution after suspending the fibrous paramylon in the aqueous solution (for example, immediately after 1 hour has elapsed) is, for example, 0.1 or more, preferably 1.0. It means that it is the above.
溶解性は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
被検物質250 mg(乾燥重量)をバイアル中の試験液(純水、0.1M NaOH水溶液、0.3M NaOH水溶液)10 mLに懸濁する。バイアルを20秒間、手で激しく振った後、およびシェーカーで80 rpmで1時間振盪した後に、それぞれバイアル中の液の660 nmにおける吸光度を測定する。なお、吸光度の測定は、日本分光株式会社製分光光度計 V-730を用いて行う。
Solubility can be measured according to or according to the following method:
Suspend 250 mg (dry weight) of the test substance in 10 mL of the test solution (pure water, 0.1 M NaOH aqueous solution, 0.3 M NaOH aqueous solution) in the vial. After shaking the vial vigorously by hand for 20 seconds and shaking at 80 rpm for 1 hour in a shaker, measure the absorbance of the liquid in the vial at 660 nm, respectively. The absorbance is measured using a spectrophotometer V-730 manufactured by JASCO Corporation.
繊維化パラミロンの結晶化度の粒状パラミロンに対する相対値(繊維化パラミロンの結晶化度/粒状パラミロンの結晶化度)は、例えば0.60~0.90、好ましくは0.65~0.80である。 The relative value of the crystallinity of the fibrous paramylon with respect to the granular paramylon (crystallinity of the fibrous paramylon / crystallinity of the granular paramylon) is, for example, 0.60 to 0.90, preferably 0.65 to 0.80.
結晶化度は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
被検物質について、XRD測定する。条件は次のとおりである。機器:PANalytical X’Pert3 Powder、管電圧:45kV、管電流:40mA、測定範囲:5.005~50.018°、測定間隔:0.013°、解析ソフト:HighScore。結晶化度は2θ=5~80°における非晶質部の強度と結晶部の強度の比により解析する。解析は各測定テ一夕から装置によるバックグラウンドを除去(バックグラウンド設定Auto、ベンティングファクター0、粒状度100)した後に実施し、非晶質部は2θ=14、29°を通る接線で決定する。それぞれの非晶質部を決定するペンディングファクターと粒状度の条件は、0/20とする。
Crystallinity can be measured according to or according to the following method:
XRD measurement is performed on the test substance. The conditions are as follows. Equipment: PANalytical X'Pert3 Powder, tube voltage: 45kV, tube current: 40mA, measurement range: 5.005 to 50.018 °, measurement interval: 0.013 °, analysis software: High Score. The crystallinity is analyzed by the ratio of the strength of the amorphous part to the strength of the crystalline part at 2θ = 5 to 80 °. The analysis is performed after removing the background from each measurement device (background setting Auto, venting factor 0, granularity 100), and the amorphous part is determined by the tangent line passing through 2θ = 14, 29 °. do. The pending factor and granularity conditions that determine each amorphous part are 0/20.
繊維化パラミロンは、水などの溶媒に分散した形態であってもよいし、乾燥形態であってもよい。繊維化パラミロンは、乾燥形態であっても、水に再分散することが可能である。 The fibrous paramylon may be in a form dispersed in a solvent such as water, or may be in a dry form. The fibrous paramylon can be redispersed in water, even in dry form.
なお、本明細書において、「乾燥形態」とは、水分含量が15質量%以下、好ましくは10質量%以下、より好ましくは5質量%以下であることを示す。 In addition, in this specification, a "dry form" means a water content of 15% by mass or less, preferably 10% by mass or less, more preferably 5% by mass or less.
繊維化パラミロンとしては、好ましくはこのパラミロン粒子を物理的に解繊処理して得られる、パラミロン粒子の解繊物を用いることができる。また、この解繊処理をユーグレナに適用することによって得られる、ユーグレナの解繊処理物を、繊維化パラミロンとして用いることもできる。 As the fibrous paramylon, preferably, a defibrated product of paramylon particles obtained by physically defibrating the paramylon particles can be used. Further, the euglena defibrated product obtained by applying this defibration treatment to Euglena can also be used as a fibrous paramylon.
解繊処理は、パラミロン粒子中に存在するβ-1,3グルカンの水素結合をほとんど切断せずに(例えば、β-1,3グルカンの水素結合の10%以下、5%以下、2%以下、1%以下しか切断せずに)解繊することができる処理、又はパラミロン粒子中に存在するβ-1,3-グルカン鎖又はこれが形成する3重螺旋構造体の一部又は全部を解くことができる処理である限り特に制限されない。好ましくはパラミロン粒子中に存在するβ-1,3グルカンの水素結合をほとんど切断せずに解繊処理し、繊維状とすることが好ましい。パラミロン粒子の様な微粒子を摩砕(せん断)又は粉砕(好ましくは摩砕(せん断))することができる公知の処理を、解繊処理として採用することができる。 The defibration treatment hardly cleaves the hydrogen bonds of β-1,3 glucan present in the paramylon particles (for example, 10% or less, 5% or less, 2% or less of the hydrogen bonds of β-1,3 glucan). A process that can be defibrated (without cutting less than 1%), or unraveling some or all of the β-1,3-glucan chains present in the paramylon particles or the triple spiral structure they form. There are no particular restrictions as long as the processing can be performed. It is preferable to defibrate the β-1,3 glucan present in the paramylon particles with almost no breakage to form a fibrous form. A known treatment capable of grinding (shearing) or crushing (preferably grinding (shearing)) fine particles such as paramylon particles can be adopted as the defibration treatment.
解繊処理は、公知の摩砕機(せん断機)、粉砕機などの装置を用いて行うことができる。解繊処理に用いる装置としては、例えば石臼式摩砕機、ジェットミル、二軸混練機、高圧ホモジナイザー、高圧乳化機、二軸押し出し機、ビーズミルなどが挙げられる。これらの中でも、好ましくは石臼式摩砕機やビーズミルが挙げられる。 The defibration treatment can be performed using a device such as a known grinder (shearing machine) or crusher. Examples of the apparatus used for the defibration treatment include a stone mill type grinder, a jet mill, a twin-screw kneader, a high-pressure homogenizer, a high-pressure emulsifier, a twin-screw extruder, and a bead mill. Among these, a stone mill type grinder and a bead mill are preferable.
解繊処理は、湿式で行うことも、乾式で行うこともできる。湿式で解繊処理を行う方が、繊維化パラミロンをより効率的に溶液中に分散させることが可能となり、好ましい。湿式で行う場合の溶媒としては、繊維化パラミロンを分散可能な溶媒である限り特に制限されず、水を好適に用いることができる。 The defibration treatment can be performed by a wet method or a dry method. Wet defibration treatment is preferable because it enables more efficient dispersion of fibrous paramylon in the solution. The solvent used in a wet manner is not particularly limited as long as it is a solvent in which fibrous paramylon can be dispersed, and water can be preferably used.
解繊処理は、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。また、一部が解繊処理されたパラミロンであってもよく、解繊処理されたパラミロンを含む限り本発明の意図するものである。 The defibration treatment may be performed by one type alone or in combination of two or more types. Further, the paramylon may be partially defibrated, which is the intention of the present invention as long as the defibrated paramylon is contained.
5.用途
ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種(以下、「本発明の有効成分」と示すこともある。)は、細胞外水分比抑制作用、浮腫の予防又は改善作用を有する。このため、本発明の有効成分は、細胞外水分比抑制のために、及び/又は、浮腫の予防又は改善のために用いることができる。
Five. Use At least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed product, and β-1,3-glucan (hereinafter, may be referred to as "active ingredient of the present invention") has an extracellular water ratio. It has an inhibitory effect and a preventive or ameliorating effect on edema. Therefore, the active ingredient of the present invention can be used for suppressing the extracellular water ratio and / or for preventing or ameliorating edema.
なお、「抑制」とは、低下させることのみならず、増加基調にあるものの増加を抑える(増加幅を低下させる、増加させない)ことを包含する。また、「改善」とは、症状又は状態の好転又は緩和、症状又は状態の悪化の防止又は遅延、症状又は状態の進行の逆転、防止又は遅延をいう。 In addition, "suppression" includes not only decreasing but also suppressing an increase in what is on an increasing trend (decreasing or not increasing the amount of increase). Further, "improvement" means improvement or alleviation of symptom or condition, prevention or delay of deterioration of symptom or condition, reversal, prevention or delay of progression of symptom or condition.
細胞外水分比は、細胞外水分量を体水分量(細胞外水分量+細胞内水分量)で除してなる値であり、公知の方法に従って測定することができる。例えば、生体電気インピーダンス分析法により測定することができる。 The extracellular water content ratio is a value obtained by dividing the extracellular water content by the body water content (extracellular water content + intracellular water content), and can be measured according to a known method. For example, it can be measured by a bioelectrical impedance analysis method.
浮腫は、特に制限されず、種々の浮腫を包含する。浮腫としては、例えば細胞膜の機能低下に起因する浮腫、血流障害又は新陳代謝の低下に起因する浮腫、加齢に伴う浮腫、腎性浮腫(例えば急性糸球体腎炎、ネフローゼ症候群等を原因とする)、心性浮腫(例えばうっ血性心不全等を原因とする)、肝性浮腫(例えば肝硬変等を原因とする)、内分泌性浮腫(例えば甲状腺機能低下症・亢進症等を原因とする)、栄養障害性浮腫(例えば蛋白漏出性胃腸症等を原因とする)、薬剤性浮腫(例えばグリチルリチン、経口避妊薬等を原因とする)、突発性浮腫、静脈性浮腫(例えば上・下大静脈症候群、静脈瘤、四肢静脈血栓症、静脈弁不全等を原因とする)、リンパ性浮腫(例えば先天性家族性リンパ浮腫、癌転移、フィラリア症等を原因とする)、炎症性浮腫(例えば血管炎、アレルギー、炎症等を原因とする)、血管神経性浮腫(例えば遺伝性血管神経性浮腫、クインケ浮腫等)等が挙げられる。 Edema is not particularly limited and includes various types of edema. Edema includes, for example, edema caused by decreased function of cell membrane, edema caused by impaired blood flow or decreased metabolism, age-related edema, renal edema (eg, caused by acute glomerular nephritis, nephrosis syndrome, etc.). , Cardiac edema (eg caused by congestive heart failure, etc.), Liver edema (eg caused by liver cirrhosis, etc.), Endocrine edema (eg, caused by hypothyroidism / hyperactivity, etc.), Nutritional disorders Edema (eg, due to protein-losing gastroenteropathy, etc.), drug-induced edema (eg, due to glycyrrhizin, oral contraceptives, etc.), idiopathic edema, venous edema (eg, superior / inferior large vein syndrome, venous aneurysm) , Extremity vein thrombosis, venous valve insufficiency, etc.), Lymphatic edema (eg, congenital familial lymphedema, cancer metastasis, filariasis, etc.), Inflammatory edema (eg, vasculitis, allergies, etc.) (Caused by inflammation, etc.), vascular edema (eg, hereditary vascular edema, quinque edema, etc.) and the like.
本発明の一態様において、浮腫は、上半身(例えば体幹、腕等)における浮腫を含む。 In one aspect of the invention, edema includes edema in the upper body (eg, trunk, arms, etc.).
本発明の有効成分は、各種用途の内の複数(例えば2つ以上、3つ以上、4つ以上、5つ以上、6つ以上)の用途を含む包括的な用途に利用することができる。 The active ingredient of the present invention can be used for comprehensive purposes including a plurality of uses (for example, 2 or more, 3 or more, 4 or more, 5 or more, 6 or more) among various uses.
本発明の一態様において、本発明の剤の適用対象は、加齢性の浮腫が生じる可能性が高いより高年齢の人、例えば40歳以上、好ましくは50歳以上、より好ましくは60歳以上、さらに好ましくは65歳以上の人に適用することができる。また、別の分類の観点から、本発明の剤は、例えば中年の人、好ましくは高齢者に適用することができる。 さらには、本発明の有効成分は、以下に列挙する用途、目的、対象に用いることができる:
(a)筋肉の質を上げたい方に
(b)身体がむくんでいると感じる方に
(c)ちょっと太ったかなと思う方に
(d)顔がぱんぱんになる方に
(e)きゅっとスッキリ健康的なラインをめざす方に
(f) 塩分の取りすぎが気になる方に
(g)血流が滞っていると感じる方に
(h)ダイエット中の方に
(i)水太りを避けたい方に
(j)アルコールを飲みすぎた翌朝の顔が気になる方に。
In one aspect of the invention, the subject of the agent of the invention is an older person, eg, 40 years or older, preferably 50 years or older, more preferably 60 years or older, who is more likely to develop age-related edema. , More preferably it can be applied to people over the age of 65. Further, from the viewpoint of another classification, the agent of the present invention can be applied to, for example, middle-aged people, preferably elderly people. Furthermore, the active ingredient of the present invention can be used for the uses, purposes and objects listed below:
(A) For those who want to improve the quality of their muscles (b) For those who feel that their body is swollen (c) For those who think they are a little fat (d) For those who have a flat face (e) Clean and healthy For those who aim for the line (f) For those who are worried about taking too much salt (g) For those who feel that blood flow is stagnant (h) For those who are on a diet (i) For those who want to avoid fattening (i) j) For those who are worried about their face the next morning after drinking too much alcohol.
本発明の剤は、各種分野において、例えば食品組成物(健康食品、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)を包含する)、食品添加剤、化粧品、化粧品添加剤、医薬、試薬、飼料などとして用いることができる。本発明の剤は、好ましくは経口組成物である。 The agent of the present invention is used in various fields such as food compositions (including health foods, health enhancers, dietary supplements (supplements, etc.)), food additives, cosmetics, cosmetic additives, pharmaceuticals, reagents, feeds, etc. Can be used as. The agent of the present invention is preferably an oral composition.
本発明の剤の形態は、特に限定されず、用途に応じて、各用途において通常使用される形態をとることができる。 The form of the agent of the present invention is not particularly limited, and can take a form usually used in each use depending on the intended use.
本発明の剤の形態としては、用途が食品組成物の場合は、液状、ゲル状あるいは固形状の食品、例えばジュース、清涼飲料、茶、スープ、豆乳などの飲料、サラダ油、ドレッシング、ヨーグルト、ゼリー、プリン、ふりかけ、育児用粉乳、ケーキミックス、乳製品(例えば、粉末状、液状、ゲル状、固形状等)、パン、菓子(例えば、クッキー等)などが挙げられる。 As the form of the agent of the present invention, when the use is a food composition, liquid, gel or solid foods such as juices, soft drinks, teas, soups, soymilk and other beverages, salad oils, dressings, yogurts and jellies. , Pudding, sprinkle, milk powder for childcare, cake mix, dairy products (eg, powder, liquid, gel, solid, etc.), bread, confectionery (eg, cookies, etc.) and the like.
本発明の剤の形態としては、用途が化粧品である場合は、例えば乳液、化粧液、フェイスクリーム、ハンドクリーム、ローション、ボディソープ、シャンプー、リンス、化粧用ゲル、パック、ファンデーション、リップクリーム、洗顔剤等が挙げられる。 When the use of the agent of the present invention is cosmetics, for example, milky lotion, cosmetic liquid, face cream, hand cream, lotion, body soap, shampoo, conditioner, cosmetic gel, facial mask, foundation, lip balm, face wash. Agents and the like can be mentioned.
本発明の剤の形態としては、用途が医薬である場合は、例えば軟膏剤、外用液剤(リニメント剤、ローション剤等)、スプレー剤(外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤等)、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤(プラスター剤、硬膏剤等のテープ剤(リザーバー型、マトリックス型等)、パップ剤、パッチ剤、マイクロニードル等)、点眼剤、眼軟膏剤、点鼻剤、坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤等の非経口摂取に適した製剤形態(特に、外用製剤形態); 錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などの経口摂取に適した製剤形態(経口製剤形態)が挙げられる。 When the use of the agent of the present invention is pharmaceutical, for example, an ointment, an external liquid agent (liniment agent, lotion agent, etc.), a spray agent (external aerosol agent, pump spray agent, etc.), a cream agent, a gel agent, etc. , Patches (plasters, tapes such as plasters (reservoir type, matrix type, etc.), paps, patches, microneedles, etc.), eye drops, eye ointments, nasal drops, suppositories, half for rectal Pharmaceutical form suitable for parenteral ingestion of solids, enema, etc. (particularly, external formulation); tablets (including medially disintegrating tablets, chewable tablets, effervescent tablets, troches, jelly-like drops, etc.), Pharmaceutical form suitable for oral ingestion such as rounds, granules, fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquids (including drinks, suspensions and syrups), jelly (including drinks, suspensions and syrups) Oral formulation form).
本発明の剤の形態としては、用途が添加剤、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)などである場合は、例えば錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などが挙げられる。 As the form of the agent of the present invention, when the use is an additive, a health enhancer, a dietary supplement (supplement, etc.), for example, a tablet (intraoral disintegrating tablet, chewable tablet, effervescent tablet, troche agent, jelly) (Including pills and the like), pills, granules, fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquids (including suspending agents and syrups), jelly agents and the like.
本発明の剤は、必要に応じてさらに他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、食品組成物(健康食品、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)を包含する)、食品添加剤、化粧品、化粧品添加剤、医薬、試薬、飼料などに配合され得る成分である限り特に限定されるものではないが、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、着色料、香料、キレート剤などが挙げられる。 The agent of the present invention may further contain other components, if necessary. Other ingredients include ingredients that can be incorporated into food compositions (including health foods, health enhancers, dietary supplements (supplements, etc.)), food additives, cosmetics, cosmetic additives, pharmaceuticals, reagents, feeds, etc. As long as it is, the present invention is not particularly limited, but for example, a base, a carrier, a solvent, a dispersant, an emulsifier, a buffer, a stabilizer, an excipient, a binder, a disintegrant, a lubricant, a thickener, and a coloring agent. Examples include foodstuffs, fragrances, and chelating agents.
本発明の剤における有効成分の含有量は、用途、使用態様、適用対象の状態などに左右されるものであり、限定はされないが、例えば0.0001~100質量%、好ましくは0.001~50質量%とすることができる。 The content of the active ingredient in the agent of the present invention depends on the intended use, usage mode, state of application, etc., and is not limited, but is, for example, 0.0001 to 100% by mass, preferably 0.001 to 50% by mass. can do.
本発明の剤の適用(例えば、投与、摂取、接種など)量は、細胞外水分比抑制作用を発現する有効量であれば特に限定されず、通常は、有効成分の乾燥重量として、一般に1日あたり0.1~10000 mg/kg体重である。上記適用量は1日1回以上(例えば1~3回)に分けて適用するのが好ましく、年齢、病態、症状により適宜増減することもできる。 The amount of the agent of the present invention applied (for example, administration, ingestion, inoculation, etc.) is not particularly limited as long as it is an effective amount that exhibits an extracellular water ratio inhibitory effect, and is usually generally 1 as the dry weight of the active ingredient. The body weight is 0.1 to 10000 mg / kg per day. The above-mentioned application amount is preferably applied once or more once a day (for example, 1 to 3 times), and may be appropriately increased or decreased depending on the age, pathological condition, and symptom.
本発明の好ましい一態様において、ユーグレナ適用量(乾燥重量)は、1日あたり、好ましくは100~1000mg、より好ましくは250~750mg、さらに好ましくは400~600mgである。適用は1日1回とすることが好ましく、また毎日適用することが好ましい。適用期間は、好ましくは3日間以上、より好ましくは1週間以上、さらに好ましくは2週間以上、よりさらに好ましくは4週間以上、とりわけ好ましくは6週間以上、特に好ましくは8週間以上である。本発明の有効成分は天然由来であり安全性が高いので適用期間の上限は特に制限されないが、例えば3年間、1年間、6ヶ月間、3ヶ月間、又は2ヶ月間である。 In a preferred embodiment of the present invention, the amount of Euglena applied (dry weight) is preferably 100 to 1000 mg, more preferably 250 to 750 mg, still more preferably 400 to 600 mg per day. It is preferably applied once a day, and is preferably applied daily. The application period is preferably 3 days or longer, more preferably 1 week or longer, further preferably 2 weeks or longer, still more preferably 4 weeks or longer, particularly preferably 6 weeks or longer, and particularly preferably 8 weeks or longer. Since the active ingredient of the present invention is naturally derived and highly safe, the upper limit of the applicable period is not particularly limited, but is, for example, 3 years, 1 year, 6 months, 3 months, or 2 months.
以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in detail based on examples, but the present invention is not limited to these examples.
製造例1
ユーグレナ・グラシリスEOD-1株(独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許生物寄託センター(NITE-IPOD)の乾燥粉末(神鋼環境ソリューション製、パラミロン含有率70%以上)を下記配合でカプセル錠としたものを被験食とし、対照食としてコーンスターチを配合したカプセル錠を製造した。
Manufacturing example 1
Euglena Gracilis EOD-1 strain (NITE-IPOD, National Institute of Technology and Evaluation) dry powder (manufactured by Kobelco Eco-Solutions, paramylon content of 70% or more) in capsule tablets with the following composition Was used as a test meal, and a capsule tablet containing cornstarch as a control meal was produced.
試験例1
試験概要は以下のとおりである。
・試験食摂取期間 : 8週間
・試験食の摂取量 : 2カプセル/day
・被験者 : 30名(男性15名, 女性15名;68.9±3.1歳)(試験食15名、対照食15名) ※内1名(対照食)は試験途中で脱落のため、結果には反映させなかった。
Test Example 1
The outline of the test is as follows.
・ Test meal intake period: 8 weeks ・ Test meal intake: 2 capsules / day
・ Subjects: 30 (15 males, 15 females; 68.9 ± 3.1 years) (15 test meals, 15 control meals) * One of them (control meal) dropped out during the test, so it is reflected in the results. I didn't let you.
試験食は被験食と対照食(プラセボ)の2種類(製造例1)とし、被験食はユーグレナグラシリスEOD-1株含有食品、対照食(プラセボ)はユーグレナグラシリスEOD-1株非含有食品とした。 There were two types of test meals, a test meal and a control meal (placebo) (Production Example 1), the test meal was a food containing Euglena gracilis EOD-1 strain, and the control meal (placebo) was a food containing no Euglena gracilis EOD-1 strain. ..
試験食を1日1回夕食時に2カプセル(被験食においては、ユーグレナグラシリスEOD-1株500mg(ユーグレナグラシリスEOD-1株由来パラミロン350mg)含有)摂取させ、これを8週間継続させた。なお、夕食時に摂取できなかった場合はその日の就寝までに摂取させた。 Two capsules of the test meal were ingested once a day at dinner (in the test meal, 500 mg of Euglena gracilis EOD-1 strain (350 mg of paramylon derived from Euglena gracilis EOD-1 strain) was contained), and this was continued for 8 weeks. If it could not be taken at dinner, it was taken by bedtime on that day.
試験開始日(摂取開始前)、試験開始から4週間経過時、及び試験開始から8週間経過時(試験終了時)に、体成分分析装置(InBody、インボディ・ジャパン社製、BIA法(Bio-electrical Impedance Analysis法)による分析装置)を用いて、体幹及び右腕の細胞外水分比測定した。細胞外水分比は、測定された細胞外水分量(ECW: ExtraCellular Water)を、測定された体水分量(TBW: Total Body Water)(=細胞外水分量+細胞内水分量(ICW: IntraCelular Water))で除してなる値である。 At the start date of the test (before the start of ingestion), 4 weeks after the start of the test, and 8 weeks after the start of the test (at the end of the test), a body composition analyzer (InBody, manufactured by Inbody Japan, BIA method (Bio). -The extracellular water ratio of the trunk and right arm was measured using an analyzer) by the electrical impedance analysis method). The extracellular water ratio is the measured extracellular water content (ECW: ExtraCellular Water) and the measured body water content (TBW: Total Body Water) (= extracellular water content + intracellular water content (ICW: IntraCelular Water). )) Is the value divided by.
得られた結果について、IBM SPSS Statistics 25を使用して統計解析した。検定は、Mann-WhitneyのU検定で実施した。p値が0.1未満であれば、有意であることを示す。 The results obtained were statistically analyzed using IBM SPSS Statistics 25. The test was performed with the Mann-Whitney U test. A p-value less than 0.1 indicates significant.
結果を図1及び2に示す。体幹について、今回の試験では有意差は得られなかったものの、被験食群では、対照食群に比べて、細胞外水分比が低下する傾向であった。また右腕について、被験食群では、対照食群に比べて、細胞外水分比が有意に低下していた。これらの結果から、ユーグレナの摂取により、細胞外水分比を抑制できることが分かった。 The results are shown in FIGS. 1 and 2. Regarding the trunk, although no significant difference was obtained in this study, the extracellular water ratio tended to decrease in the test diet group as compared with the control diet group. Regarding the right arm, the extracellular water ratio was significantly lower in the test diet group than in the control diet group. From these results, it was found that the extracellular water ratio can be suppressed by ingesting Euglena.
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2020
- 2020-09-03 JP JP2020148271A patent/JP2022042716A/en active Pending
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