JP2023143788A - GABA production promoter - Google Patents
GABA production promoter Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023143788A JP2023143788A JP2023038820A JP2023038820A JP2023143788A JP 2023143788 A JP2023143788 A JP 2023143788A JP 2023038820 A JP2023038820 A JP 2023038820A JP 2023038820 A JP2023038820 A JP 2023038820A JP 2023143788 A JP2023143788 A JP 2023143788A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- paramylon
- euglena
- production promoter
- gaba production
- improves
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 title claims abstract description 42
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 229920002984 Paramylon Polymers 0.000 claims abstract description 121
- 241000195620 Euglena Species 0.000 claims abstract description 68
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 claims abstract description 25
- 241000195619 Euglena gracilis Species 0.000 claims description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 claims description 6
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 5
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 5
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 4
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 4
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims description 4
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 4
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 claims description 4
- 230000004630 mental health Effects 0.000 claims description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 4
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 claims description 4
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 description 26
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 23
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 21
- 102000008214 Glutamate decarboxylase Human genes 0.000 description 16
- 108091022930 Glutamate decarboxylase Proteins 0.000 description 16
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- -1 twin-screw extruders Substances 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 5
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 5
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 5
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 5
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 4
- 101150045461 gad gene Proteins 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 4
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 3
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000034628 Celiac artery compression syndrome Diseases 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 206010061592 cardiac fibrillation Diseases 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000007910 chewable tablet Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000000490 cosmetic additive Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M cyanocobalamin Chemical compound N#C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000007938 effervescent tablet Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 2
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 2
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000006191 orally-disintegrating tablet Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- NHZMQXZHNVQTQA-UHFFFAOYSA-N pyridoxamine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CN)=C1O NHZMQXZHNVQTQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 2
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 2
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 2
- WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N (2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N 0.000 description 1
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000018 Callose Polymers 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 229920002558 Curdlan Polymers 0.000 description 1
- 239000001879 Curdlan Substances 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 241000936932 Euglena deses Species 0.000 description 1
- 241001595357 Euglena deses var. intermedia Species 0.000 description 1
- 241001517206 Euglena geniculata Species 0.000 description 1
- 241000195621 Euglena longa Species 0.000 description 1
- 241001517208 Euglena mutabilis Species 0.000 description 1
- 241001517063 Euglena pisciformis Species 0.000 description 1
- 241000845733 Euglena rubra Species 0.000 description 1
- 241000886681 Euglena sanguinea Species 0.000 description 1
- 241000845747 Euglena sociabilis Species 0.000 description 1
- 241001517061 Euglena stellata Species 0.000 description 1
- 241000412807 Euglena terricola Species 0.000 description 1
- 241000195629 Euglena viridis Species 0.000 description 1
- 241001223004 Euglenaformis proxima Species 0.000 description 1
- 241000845734 Euglenaria caudata Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 108010022769 Glucan 1,3-beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N L-methionine sulfone Chemical compound CS(=O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulfone Natural products CS(=O)(=O)CCC(N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 229920001543 Laminarin Polymers 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 241001208438 Lepocinclis acus Species 0.000 description 1
- 241001543773 Lepocinclis oxyuris Species 0.000 description 1
- 241001208436 Lepocinclis spirogyroides Species 0.000 description 1
- 241000948815 Lepocinclis tripteris Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019914 Mental Fatigue Diseases 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920002305 Schizophyllan Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003471 Vitamin B2 Natural products 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N bakuchiol Chemical compound CC(C)=CCC[C@@](C)(C=C)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000012839 cake mixes Nutrition 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N camphorsulfonic acid Chemical compound C1CC2(CS(O)(=O)=O)C(=O)CC1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229940068682 chewable tablet Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940078035 curdlan Drugs 0.000 description 1
- 235000019316 curdlan Nutrition 0.000 description 1
- 235000000639 cyanocobalamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011666 cyanocobalamin Substances 0.000 description 1
- 229960002104 cyanocobalamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 235000015071 dressings Nutrition 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000003885 eye ointment Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000008269 hand cream Substances 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-VPNXCSTESA-N laminarin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)OC1O[C@@H]1[C@@H](O)C(O[C@H]2[C@@H]([C@@H](CO)OC(O)[C@@H]2O)O)O[C@H](CO)[C@H]1O DBTMGCOVALSLOR-VPNXCSTESA-N 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 239000007934 lip balm Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013227 male C57BL/6J mice Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- QTYWBJZOZDYCGB-UHFFFAOYSA-L potassium;sodium;2-carboxybenzoate;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].[K+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O QTYWBJZOZDYCGB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000011962 puddings Nutrition 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- 235000008151 pyridoxamine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011699 pyridoxamine Substances 0.000 description 1
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 108010034467 ribosomal protein P0 Proteins 0.000 description 1
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 230000006403 short-term memory Effects 0.000 description 1
- 230000036559 skin health Effects 0.000 description 1
- 230000003860 sleep quality Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000013022 venting Methods 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019164 vitamin B2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011716 vitamin B2 Substances 0.000 description 1
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 1
- 230000003936 working memory Effects 0.000 description 1
- 235000020138 yakult Nutrition 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本発明は、GABA産生促進剤等に関する。 The present invention relates to a GABA production promoter and the like.
GABA(gamma-Aminobutyric acid(γ-アミノ酪酸))は、各種食物に含まれているアミノ酸の一種である。GABAは神経伝達物質として作用することが知られており、また、GABAは、種々の有用作用、例えば脂質代謝向上、血圧改善、ストレス緩和等を有することが報告されている。このため、これらの作用を期待したGABA高含有食品が、各種市販されている。 GABA (gamma-Aminobutyric acid) is a type of amino acid found in various foods. GABA is known to act as a neurotransmitter, and it has also been reported that GABA has various useful effects, such as improving lipid metabolism, improving blood pressure, and alleviating stress. For this reason, various GABA-rich foods that are expected to have these effects are commercially available.
ユーグレナは、ミドリムシ属(=ユーグレナ属)に属する微細藻類であり、食品材料として利用されている。また、ユーグレナ抽出物を皮膚に適用することも行われている(特許文献1)。また、パラミロンは、ミドリムシが産生するβ-1,3-グルカンであり、創傷治療やアレルギー抑制などに有用であることが報告されている。しかしながら、ユーグレナやβ-1,3-グルカンとGABAとの関連については未だしられていない。 Euglena is a microalgae belonging to the genus Euglena (genus Euglena) and is used as a food material. Moreover, applying Euglena extract to the skin has also been practiced (Patent Document 1). Furthermore, paramylon is a β-1,3-glucan produced by Euglena, and has been reported to be useful for wound treatment, allergy suppression, etc. However, the relationship between Euglena and β-1,3-glucan and GABA is still unknown.
本発明は、GABA産生促進剤を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide a GABA production promoter.
本発明者は、上記課題に鑑みて鋭意研究した結果、ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、GABA産生促進剤、であれば、上記課題を解決できることを見出した。また、上記成分が、GABA合成酵素であるGAD(glutamic acid decarboxylase、グルタミン酸脱炭酸酵素)を活性化することも見出した。これらの知見に基づいてさらに研究を進めた結果、本発明が完成した。即ち、本発明は、下記の態様を包含する。 As a result of intensive research in view of the above problems, the present inventors have discovered a GABA production promoter containing at least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed products, and β-1,3-glucan; If so, we have found that the above problem can be solved. It was also discovered that the above component activates GAD (glutamic acid decarboxylase), a GABA synthase. As a result of further research based on these findings, the present invention was completed. That is, the present invention includes the following aspects.
項1. ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、GABA産生促進剤。
項2. ユーグレナ、パラミロン、及びパラミロン加工物からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、項1に記載のGABA産生促進剤。
Item 2. Item 2. The GABA production promoter according to
項3. ユーグレナ及び/又はパラミロンを含有し、且つ
前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスである且つ/或いは前記パラミロンがユーグレナ・グラシリス由来のパラミロンである、
項1又は2に記載のGABA産生促進剤。
Item 3. containing Euglena and/or Paramylon, and the Euglena is Euglena gracilis and/or the paramylon is a paramylon derived from Euglena gracilis,
Item 2. The GABA production promoter according to
項4. 前記ユーグレナ及び/又はパラミロンを含有し、且つ
前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスEOD-1株(受託番号FERM BP-11530)である且つ/或いは前記パラミロンがユーグレナ・グラシリスEOD-1株(受託番号FERM BP-11530)由来のパラミロンである、
項1又は2に記載のGABA産生促進剤。
Item 4. contains the Euglena and/or Paramylon, and the Euglena is Euglena gracilis EOD-1 strain (accession number FERM BP-11530), and/or the paramylon is Euglena gracilis EOD-1 strain (Accession number FERM BP- 11530) is a paramylon derived from
Item 2. The GABA production promoter according to
項5. 脂質代謝向上、血圧改善、ストレス緩和、疲労感の軽減、睡眠の改善、肌弾力の改善、認知機能の改善、リラクゼーション誘導、α波放出促進、成長ホルモン分泌促進、筋肉量の増加、活力の改善、及び心の健康の改善からなる群より選択される少なくとも1種に用いるための、項1~4のいずれかに記載のGABA産生促進剤。
Item 5. Improves lipid metabolism, improves blood pressure, relieves stress, reduces fatigue, improves sleep, improves skin elasticity, improves cognitive function, induces relaxation, promotes alpha wave release, promotes growth hormone secretion, increases muscle mass, improves vitality. 5. The GABA production promoter according to any one of
項6. 食品組成物、栄養補助食品、食品添加剤、又は医薬である、項1~5のいずれかに記載のGABA産生促進剤。
Item 6. Item 5. The GABA production promoter according to any one of
項7. 経口組成物である、項1~6のいずれかに記載のGABA産生促進剤。
Section 7. Item 7. The GABA production promoter according to any one of
項8. ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、GAD活性化剤。 Section 8. A GAD activator containing at least one member selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed products, and β-1,3-glucan.
本発明によれば、GABA産生促進剤及びGAD活性化剤を提供することができる。 According to the present invention, a GABA production promoter and a GAD activator can be provided.
本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。 In this specification, the expressions "contain" and "including" include the concepts of "containing", "comprising", "consisting essentially" and "consisting only".
本発明は、その一態様において、ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種を含有する、GABA産生促進剤/GAD活性化剤(本明細書において、「本発明の剤」と示すこともある。)に関する。以下に、これについて説明する。 In one aspect, the present invention provides a GABA production promoter/GAD activator (this invention) containing at least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, paramylon processed products, and β-1,3-glucan. In the specification, it may also be referred to as "the agent of the present invention"). This will be explained below.
1.ユーグレナ
ユーグレナは、ミドリムシ属(=ユーグレナ属)に属する微細藻類であり、その限りにおいて特に制限されない。ユーグレナとして、具体的には、例えばEuglena gracilis(ユーグレナ・グラシリス)、Euglena longa、Euglena caudata、Euglena oxyuris、Euglena tripteris、Euglena proxima、Euglena viridis、Euglena sociabilis、Euglena ehrenbergii、Euglena deses、Euglena pisciformis、Euglena spirogyra、Euglena acus、Euglena geniculata、Euglena intermedia、Euglena mutabilis、Euglena sanguinea、Euglena stellata、Euglena terricola、Euglena klebsi、Euglena rubra、Euglena cyclopicolaなどが挙げられる。これらの中でも、本発明の効果をより確実に発揮できるという観点から、好ましくはユーグレナ・グラシリスが挙げられ、より好ましくはユーグレナ・グラシリスEOD-1株[2013年6月28日付で独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許生物寄託センター{NITE-IPOD(郵便番号292-0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室)}にブダペスト条約の規定下で、受託番号FERM BP-11530として国際寄託済み]が挙げられる。
1. Euglena Euglena is a microalgae belonging to the genus Euglena (=genus Euglena), and is not particularly limited as far as it is concerned. Specifically, examples of Euglena include Euglena gracilis , Euglena longa , Euglena caudata , Euglena oxyuris , Euglena tripteris , Euglena proxima , Euglena viridis , Euglena sociabilis , Euglena ehrenbergii , Euglena deses , Euglena pisciformis , Euglena spirogyra , Euglena acus , Euglena geniculata , Euglena intermedia , Euglena mutabilis , Euglena sanguinea , Euglena stellata , Euglena terricola , Euglena klebsi , Euglena rubra , Euglena cyclopicola and the like. Among these, Euglena gracilis is preferred from the viewpoint of more reliably exerting the effects of the present invention, and more preferably Euglena gracilis EOD-1 strain [Independent Administrative Agency Product Evaluation as of June 28, 2013] The National Institute of Technology and Technology, Patent Organism Depositary Center {NITE-IPOD (Room 120, 2-5-8 Kazusa Kamatari, Kisarazu City, Chiba Prefecture, Japan 292-0818)} under the provisions of the Budapest Treaty, with accession number FERM BP-11530. Internationally deposited].
ユーグレナの形態は、ユーグレナの細胞体又はその成分の大半を含むものである限り、特に制限されない。ユーグレナの形態としては、例えばユーグレナの乾燥粉末形態、ユーグレナの懸濁液、ユーグレナエキス等が挙げられ、中でも、好ましくはユーグレナの乾燥粉末形態が挙げられる。 The form of Euglena is not particularly limited as long as it contains the cell body of Euglena or most of its components. Examples of the form of Euglena include a dry powder form of Euglena, a suspension of Euglena, and an extract of Euglena, and among them, a dry powder form of Euglena is preferred.
ユーグレナの乾燥状態におけるパラミロン含有率は、例えば50%以上、好ましくは60%以上、より好ましくは70%以上である。 The paramylon content of Euglena in a dry state is, for example, 50% or more, preferably 60% or more, and more preferably 70% or more.
ユーグレナは、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 Euglena may be used alone or in combination of two or more.
2.β-1,3-グルカン、パラミロン
β-1,3-グルカンは、グルコースがβ1,3結合のみで連結してなる1本の糖鎖(又は糖鎖構造)を主鎖として有するものであれば特に制限されない。β-1,3-グルカンは、直鎖状のものに限らず、分枝鎖を有するものも包含する。
2. β-1,3-glucan, paramylon β-1,3-glucan is a substance that has one sugar chain (or sugar chain structure) consisting of glucose linked only by β1,3 bonds as its main chain. There are no particular restrictions. β-1,3-glucans are not limited to linear ones, but also include those with branched chains.
β-1,3-グルカン誘導体の重量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~2×106、好ましくは5×104~1×106、更に好ましくは1×105~1×106ある。なお、重量平均分子量は、GPC法により測定することができる。 The weight average molecular weight of the β-1,3-glucan derivative is not particularly limited, but is, for example, 1×10 4 to 2×10 6 , preferably 5×10 4 to 1×10 6 , more preferably 1×10 5 to There are 1×10 6 . Note that the weight average molecular weight can be measured by the GPC method.
β-1,3-グルカンは、化学合成により得られたものであってもよいが、入手容易性等の観点から、各種生物が産生する天然β-1,3-グルカンが好ましい。天然β-1,3-グルカンとしては、例えばパラミロン、カードラン、ラミナラン、カロース、レンチナン、シゾフィラン等が挙げられる。これらの中でも、特に好ましくはパラミロンが挙げられる。以下、パラミロンについて説明する。 β-1,3-glucan may be obtained by chemical synthesis, but natural β-1,3-glucan produced by various organisms is preferable from the viewpoint of availability. Examples of natural β-1,3-glucans include paramylon, curdlan, laminaran, callose, lentinan, and schizophyllan. Among these, paramylon is particularly preferred. Paramylon will be explained below.
パラミロンは、ユーグレナ由来のβ-1,3-グルカンであり、その限りにおいて特に制限されない。 Paramylon is β-1,3-glucan derived from Euglena, and is not particularly limited.
パラミロンが由来するユーグレナについては、上記「1.ユーグレナ」における説明と同様である。 Regarding Euglena, from which Paramylon is derived, the explanation is the same as in "1. Euglena" above.
パラミロンの質量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~5×106、好ましくは2×104~1×106、より好ましくは5×104~1×106、さらに好ましくは1×105~5×105である。 The mass average molecular weight of paramylon is not particularly limited, but is, for example, 1×10 4 to 5×10 6 , preferably 2×10 4 to 1×10 6 , more preferably 5×10 4 to 1×10 6 , even more preferably is 1×10 5 to 5×10 5 .
なお、質量平均分子量は、SEC-MALS分析により、以下の条件で測定 することができる:
検出器:多角度散乱検出器(Wyatt Technology製DAWN HELEOS II)
示差屈折計検出器(Wyatt Technology製Optilab T-rEX)
使用カラム:TSKgel α-M 2本(東ソー製)
移動相:0.05M臭化カリウム添加DMSO
流 速:0.5 mL/min。
The mass average molecular weight can be measured by SEC-MALS analysis under the following conditions:
Detector: Multi-angle scattering detector (DAWN HELEOS II manufactured by Wyatt Technology)
Differential refractometer detector (Optilab T-rEX manufactured by Wyatt Technology)
Columns used: 2 TSKgel α-M (manufactured by Tosoh)
Mobile phase: DMSO with 0.05M potassium bromide
Flow rate: 0.5 mL/min.
パラミロンは、ユーグレナの細胞内において、通常、β-1,3-グルカン鎖が形成する3重螺旋構造体が一定の規則性の基に高度に集積してなるパラミロン粒子として存在している。 Paramylon normally exists in Euglena cells as paramylon particles, which are highly regularized triple helical structures formed by β-1,3-glucan chains.
パラミロン粒子の形状は、特に制限されないが、通常は、偏平な回転楕円体状である。 Although the shape of the paramylon particles is not particularly limited, it is usually a flat spheroid shape.
パラミロン粒子の粒子径分布は、特に制限されないが、例えば0.5~15μm、好ましくは1~6μmである。また、パラミロン粒子の平均粒子径も特に制限されないが、例えば1~10、好ましくは2~4μmである。 The particle size distribution of paramylon particles is not particularly limited, but is, for example, 0.5 to 15 μm, preferably 1 to 6 μm. Further, the average particle diameter of the paramylon particles is also not particularly limited, but is, for example, 1 to 10 μm, preferably 2 to 4 μm.
パラミロンの形態は、パラミロンを含むものである限り、特に制限されない。ユーグレナの形態としては、例えばパラミロンの乾燥粉末形態、パラミロンの懸濁液等が挙げられ、中でも、好ましくはパラミロンの乾燥粉末形態が挙げられる。 The form of paramylon is not particularly limited as long as it contains paramylon. Examples of the form of Euglena include a dry powder form of paramylon, a suspension of paramylon, and the like, and among them, a dry powder form of paramylon is preferable.
本発明の剤は、その一態様において、精製パラミロンを含有することが好ましい。 In one embodiment, the agent of the present invention preferably contains purified paramylon.
パラミロンは、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。 Paramylon may be used alone or in combination of two or more.
3.ユーグレナ及びパラミロンの製造方法
ユーグレナは、液体に含まれたユーグレナを培養する工程(培養工程)を含む方法により、大量に調製することが可能である。培養工程は、例えば公知の方法(例えば、特許第5883532号公報に記載の方法)に従って行うことができる。該培養工程では、典型的には、水と、ユーグレナと、ユーグレナが利用できる栄養素とを含む液体(培養液)を撹拌しつつ好気条件でユーグレナ属微細藻類を培養する。
3. Method for producing Euglena and Paramylon Euglena can be prepared in large quantities by a method that includes a step of culturing Euglena contained in a liquid (culture step). The culturing step can be performed, for example, according to a known method (for example, the method described in Japanese Patent No. 5883532). In the culturing step, microalgae belonging to the genus Euglena are typically cultured under aerobic conditions while stirring a liquid (culture solution) containing water, Euglena, and nutrients available to Euglena.
栄養素としては、糖類(グルコース(ブドウ糖)、フルクトース(果糖)などの単糖類)、ミネラル類(例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、鉄、亜鉛、モリブデン、銅、リン、窒素、硫黄、又は、ホウ素など)、ビタミンB類(例えばビタミンB1(チアミン)、ビタミンB2(リボフラビン)、ナイアシン、パントテン酸、ビタミンB6(ピリドキシン、ピリドキサール、又はピリドキサミン)、ビタミンB12(シアノコバラミン)、葉酸、ビオチンなど)などが挙げられる。培養液中の栄養素の濃度は、ユーグレナの生存、増殖等が可能な濃度である限り特に制限されない。 Nutrients include sugars (monosaccharides such as glucose and fructose), minerals (such as sodium, potassium, magnesium, calcium, iron, zinc, molybdenum, copper, phosphorus, nitrogen, sulfur, or boron). ), B vitamins (e.g. vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), niacin, pantothenic acid, vitamin B6 (pyridoxine, pyridoxal, or pyridoxamine), vitamin B12 (cyanocobalamin), folic acid, biotin, etc.). It will be done. The concentration of nutrients in the culture solution is not particularly limited as long as the concentration allows survival, proliferation, etc. of Euglena.
培養工程の光条件は特に制限されず、培養工程は明条件と暗条件のいずれで行われてもよい。従属栄養培養にて培養する際には暗条件で培養される。明条件としては、藻類を増殖させるための通常の光強度を採用することができる。暗条件としては、例えば10μmol/m2/s未満、好ましくは光が全く当たらない完全な暗所条件が挙げられる。 The light conditions for the culturing process are not particularly limited, and the culturing process may be performed under either bright or dark conditions. When culturing by heterotrophic culture, it is cultured under dark conditions. As the light condition, a normal light intensity for growing algae can be adopted. The dark conditions include, for example, less than 10 μmol/m 2 /s, preferably complete dark conditions with no light.
培養工程における培養温度は、ユーグレナが増殖できる温度であれば、特に限定されない。該培養温度(培養液の温度)としては、例えば、20℃~35℃が採用される。 The culture temperature in the culture step is not particularly limited as long as it is a temperature at which Euglena can proliferate. The culture temperature (temperature of the culture solution) is, for example, 20°C to 35°C.
培養工程における液体のpHは、ユーグレナが増殖できるpHであれば、特に限定されない。ユーグレナが増殖できるpHとしては、例えば3.0~5.5が採用される。 The pH of the liquid in the culture step is not particularly limited as long as it allows Euglena to proliferate. The pH at which Euglena can grow is, for example, 3.0 to 5.5.
培養工程の後に、液体の遠心分離や重力分離などによってユーグレナを濃縮することが好ましい。得られたユーグレナは、所望の形態に応じて、追加の処理(例えば、液体への懸濁、水中又は油中への分散、エキス抽出、乾燥粉末化等)に供することができる。 After the culturing step, it is preferable to concentrate Euglena by liquid centrifugation, gravity separation, or the like. The obtained Euglena can be subjected to additional treatments (eg, suspension in liquid, dispersion in water or oil, extraction, dry powdering, etc.) depending on the desired form.
パラミロン粒子は、公知の方法(例えば特許第5883532号公報に記載の方法)に従って又は準じて、ミドリムシから分離、単離、又は精製することによって製造することができる。パラミロン粒子は、例えばミドリムシの細胞膜を破壊することによって得られる細胞内容成分を回収することによって、容易に得ることができる。また、必要に応じて、パラミロン粒子を精製してもよい。パラミロン粒子の精製については各種知られており(例えば、特許第5883532号公報)、それらの方法に従って行うことができる。精製工程としては、例えば、界面活性剤処理工程、洗浄工程などが挙げられる。得られたユーグレナは、所望の形態に応じて、追加の処理(例えば、液体への懸濁、水中又は油中への分散、乾燥粉末化等)に供することができる。 Paramylon particles can be produced by separating, isolating, or purifying Euglena from Euglena according to or in accordance with a known method (for example, the method described in Japanese Patent No. 5883532). Paramylon particles can be easily obtained, for example, by recovering cellular components obtained by disrupting the cell membrane of Euglena. Furthermore, the paramylon particles may be purified if necessary. Various methods are known for purifying paramylon particles (for example, Japanese Patent No. 5883532), and purification can be performed according to those methods. Examples of the purification process include a surfactant treatment process and a washing process. The obtained Euglena can be subjected to additional treatments (eg, suspension in liquid, dispersion in water or oil, dry powdering, etc.) depending on the desired form.
4.パラミロン加工物
パラミロン加工物は、パラミロンに対して加工処理、例えば物理処理、化学処理等することによって得られるものであり、その限りにおいて特に制限されない。パラミロン加工物としては、例えば、繊維化パラミロン、アモルファスパラミロン等が挙げられる。アモルファスパラミロンは、公知の方法に従って又は準じて、例えば特開2011-184592号公報に記載の方法を用いて化学的に処理することにより、得ることができる。
Four. Paramylon-processed product Paramylon-processed product is obtained by processing paramylon, for example, physical treatment, chemical treatment, etc., and is not particularly limited as far as it is concerned. Examples of paramylon processed products include fibrous paramylon, amorphous paramylon, and the like. Amorphous paramylon can be obtained by chemical treatment according to or analogously to a known method, for example, using the method described in JP-A No. 2011-184592.
パラミロン加工物としては、繊維化パラミロンが好ましい。以下に、繊維化パラミロンについて説明する。 As the paramylon processed product, fibrous paramylon is preferable. The fiberized paramylon will be explained below.
繊維化パラミロンは、ユーグレナ由来のβ-1,3-グルカンであり、繊維状の形態のものである限りにおいて特に制限されない。これまで、パラミロン粒子を化学処理(アルカリ処理等)して得られたアモルファスパラミロンが報告されているが、これは、電子顕微鏡で観察すると繊維化であるとは認められず、形や大きさが不定形の塊であるため、繊維化パラミロンには包含されない。 Fibrillated paramylon is β-1,3-glucan derived from Euglena, and is not particularly limited as long as it is in a fibrous form. Until now, amorphous paramylon obtained by chemically treating paramylon particles (alkali treatment, etc.) has been reported, but when observed with an electron microscope, it was not recognized that it was fibrous, and the shape and size were Since it is an amorphous lump, it is not included in fibrous paramylon.
繊維化パラミロンの重量平均分子量は、特に限定されないが、例えば1×104~2×107、好ましくは1×105~5×105である。 The weight average molecular weight of the fibrous paramylon is not particularly limited, but is, for example, 1×10 4 to 2×10 7 , preferably 1×10 5 to 5×10 5 .
なお、重量平均分子量は、SEC-MALS分析により、以下の方法で測定することができる:検出器:多角度散乱検出器(Wyatt Technology製DAWN HELEOS II)
示差屈折計検出器(Wyatt Technology製Optilab T-rEX)
使用カラム:TSKgel α-M 2本(東ソー製)
移動相:0.05M臭化カリウム添加DMSO
流 速:0.5 mL/min。
The weight average molecular weight can be measured by SEC-MALS analysis using the following method: Detector: Multi-angle scattering detector (DAWN HELEOS II manufactured by Wyatt Technology)
Differential refractometer detector (Optilab T-rEX manufactured by Wyatt Technology)
Columns used: 2 TSKgel α-M (manufactured by Tosoh)
Mobile phase: DMSO with 0.05M potassium bromide
Flow rate: 0.5 mL/min.
繊維化パラミロンの繊維の直径は、特に制限されないが、例えば10~500 nm、好ましくは20~300 nm、より好ましくは50~200 nmである。繊維化パラミロンの繊維の直径は、通常、繊維化パラミロンの電子顕微鏡像に基づいて測定することができる。 The fiber diameter of the fiberized paramylon is not particularly limited, but is, for example, 10 to 500 nm, preferably 20 to 300 nm, more preferably 50 to 200 nm. The fiber diameter of fibrous paramylon can usually be measured based on an electron microscope image of fibrous paramylon.
繊維化パラミロンの水中沈定体積は、特に制限されないが、例えば30~300 mL/g、好ましくは50~250 mL/g、より好ましくは70~200 mL/gである。 The settling volume of the fibrous paramylon in water is not particularly limited, but is, for example, 30 to 300 mL/g, preferably 50 to 250 mL/g, and more preferably 70 to 200 mL/g.
水中沈定体積は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
「日本食物繊維学会監修、日本食物繊維学会編集委員会編(2008)食物繊維 ‐基礎と応用‐ 第3版, p.111 第一出版, 東京」に記載されている方法に準じて測定を行う。具体的には、次の通りである。サンプルのスラリー状の試験試料を、25 mL容積のプラスチックチューブに、乾燥質量換算で125 mg計り取り、プラスチックチューブを手で激しく振って、内容物を撹拌する。その後、25 mL容積のメスシリンダーに内容物を移し、25 mLになるまで純水を加える。メスシリンダー内の液体を撹拌した後、37℃で24時間静置する。これによりサンプルが沈殿し、界面を介して分けられる2つの層(沈殿したサンプルを主に含む層(下層)、及び水を主に含む層(上層))が生じる。下層の体積をメスシリンダーの目盛から求め、得られた体積をサンプル質量(乾燥質量)で除して、水中沈定体積(mL/g)を算出する。試験は3回又は4回行い、平均値及び標準偏差を算出する。
The submerged volume can be measured according to or analogously to the following method:
Measurement is carried out according to the method described in "Dietary Fiber - Basics and Applications - 3rd edition, p. 111, Daiichi Publishing, Tokyo" (2008), supervised by the Japanese Dietary Fiber Society, edited by the Editorial Committee of the Japanese Dietary Fiber Society. . Specifically, it is as follows. Weigh 125 mg of the sample slurry test sample into a 25 mL plastic tube in terms of dry mass, and shake the plastic tube vigorously by hand to stir the contents. Then, transfer the contents to a 25 mL graduated cylinder and add pure water until the volume reaches 25 mL. After stirring the liquid in the graduated cylinder, let it stand at 37°C for 24 hours. This causes the sample to precipitate, resulting in two layers that are separated via an interface: a layer containing mainly the precipitated sample (lower layer), and a layer containing mainly water (upper layer). Determine the volume of the lower layer from the scale of the graduated cylinder, and divide the obtained volume by the sample mass (dry mass) to calculate the submerged volume (mL/g). The test is performed 3 or 4 times, and the average value and standard deviation are calculated.
繊維化パラミロンは、酵素による分解に対して、比較的高い耐性を有する。例えば、βグルカナーゼの分解により生成されるモノマー(グルコース)の量は、繊維化パラミロン1 g当たり、例えば0.1~50 mg、好ましくは1~10 mgである。 Fibrillated paramylon has a relatively high resistance to enzymatic degradation. For example, the amount of monomer (glucose) produced by the degradation of β-glucanase is, for example, 0.1 to 50 mg, preferably 1 to 10 mg, per gram of fibrillated paramylon.
この量は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
反応液[被検物質30 mg(乾燥重量)、緩衝液(東京化成工業社製 B0156、フタル酸水素カリウム-水酸化ナトリウムバッファー (pH4.0))5 mL、酵素液(日本バイオコン社製 endo-1,3-β-Glucanase (酵素含有量:50 units/mL))0.1 mL、純水、反応液量 10 mL]を調製し、40℃で24時間、45 rpmで水平振盪する。振盪後、直ちに凍結保存し、濃縮のために凍結乾燥する。凍結乾燥後、各試料に純水を0.5 mLずつ加え、攪拌する(20倍濃縮)。遠心分離(10000G、5分間、4℃)し、上澄を回収する作業を2回繰り返す。回収した上澄中のグルコース濃度を、測定キット(和光純薬工業社製、グルコースCII-テストワコー)を用いて測定する。測定値に基づいて、被検物質1 g当たりのグルコース生成量(mg)を算出する。
This amount can be measured according to or analogously to the following method:
Reaction solution [test substance 30 mg (dry weight), buffer solution (Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd. B0156, potassium hydrogen phthalate-sodium hydroxide buffer (pH4.0)) 5 mL, enzyme solution (Nippon Biocon Co., Ltd. endo- Prepare 0.1 mL of 1,3-β-Glucanase (enzyme content: 50 units/mL), pure water, reaction volume 10 mL] and shake horizontally at 45 rpm at 40°C for 24 hours. After shaking, immediately store frozen and lyophilize for concentration. After freeze-drying, add 0.5 mL of pure water to each sample and stir (concentrate 20 times). Repeat the process of centrifuging (10,000G, 5 minutes, 4℃) and collecting the supernatant twice. The glucose concentration in the collected supernatant is measured using a measurement kit (Glucose CII-Test Wako, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). Based on the measured values, calculate the amount of glucose produced (mg) per 1 g of the test substance.
繊維化パラミロンは、アルカリ溶液への溶解性が、比較的低い。例えば、繊維化パラミロンは、0.1~0.3Mの水酸化ナトリウム水溶液に対して溶解しない。ここで、「溶解しない」とは、例えば、当該水溶液に繊維化パラミロンを懸濁した後(例えば、直後~1時間経過後)の溶液の吸光度(660 nm)が、例えば0.1以上、好ましくは1.0以上であることを意味する。 Fiberized paramylon has relatively low solubility in alkaline solutions. For example, fibrous paramylon does not dissolve in a 0.1-0.3M aqueous sodium hydroxide solution. Here, "does not dissolve" means, for example, that the absorbance (660 nm) of the solution after suspending the fibrous paramylon in the aqueous solution (for example, immediately after to 1 hour) is, for example, 0.1 or more, preferably 1.0. It means the above.
溶解性は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
被検物質250 mg(乾燥重量)をバイアル中の試験液(純水、0.1M NaOH水溶液、0.3M NaOH水溶液)10 mLに懸濁する。バイアルを20秒間、手で激しく振った後、およびシェーカーで80 rpmで1時間振盪した後に、それぞれバイアル中の液の660 nmにおける吸光度を測定する。なお、吸光度の測定は、日本分光株式会社製分光光度計 V-730を用いて行う。
Solubility can be measured according to or analogously to the following method:
Suspend 250 mg (dry weight) of the test substance in 10 mL of the test solution (pure water, 0.1M NaOH aqueous solution, 0.3M NaOH aqueous solution) in a vial. The absorbance of the liquid in the vial is measured at 660 nm after shaking the vial vigorously by hand for 20 seconds and after shaking for 1 hour at 80 rpm on a shaker, respectively. The absorbance is measured using a spectrophotometer V-730 manufactured by JASCO Corporation.
繊維化パラミロンの結晶化度の粒状パラミロンに対する相対値(繊維化パラミロンの結晶化度/粒状パラミロンの結晶化度)は、例えば0.60~0.90、好ましくは0.65~0.80である。 The relative value of the crystallinity of fibrous paramylon to granular paramylon (crystallinity of fibrous paramylon/crystallinity of granular paramylon) is, for example, 0.60 to 0.90, preferably 0.65 to 0.80.
結晶化度は以下の方法に従って又は準じて測定することができる:
被検物質について、XRD測定する。条件は次のとおりである。機器:PANalytical X’Pert3 Powder、管電圧:45kV、管電流:40mA、測定範囲:5.005~50.018°、測定間隔:0.013°、解析ソフト:HighScore。結晶化度は2θ=5~80°における非晶質部の強度と結晶部の強度の比により解析する。解析は各測定テ一夕から装置によるバックグラウンドを除去(バックグラウンド設定Auto、ベンティングファクター0、粒状度100)した後に実施し、非晶質部は2θ=14、29°を通る接線で決定する。それぞれの非晶質部を決定するペンディングファクターと粒状度の条件は、0/20とする。
Crystallinity can be measured according to or analogously to the following method:
Perform XRD measurements on the test substance. The conditions are as follows. Equipment: PANalytical X'Pert3 Powder, tube voltage: 45kV, tube current: 40mA, measurement range: 5.005 to 50.018°, measurement interval: 0.013°, analysis software: HighScore. The degree of crystallinity is analyzed by the ratio of the strength of the amorphous part to the strength of the crystalline part at 2θ=5 to 80°. The analysis was performed after removing the background caused by the device from each measurement (background setting Auto, venting
繊維化パラミロンは、水などの溶媒に分散した形態であってもよいし、乾燥形態であってもよい。繊維化パラミロンは、乾燥形態であっても、水に再分散することが可能である。 The fibrous paramylon may be in a form dispersed in a solvent such as water, or may be in a dried form. Fiberized paramylon, even in dry form, can be redispersed in water.
なお、本明細書において、「乾燥形態」とは、水分含量が15質量%以下、好ましくは10質量%以下、より好ましくは5質量%以下であることを示す。 In addition, in this specification, "dry form" indicates that the moisture content is 15% by mass or less, preferably 10% by mass or less, and more preferably 5% by mass or less.
繊維化パラミロンとしては、好ましくはこのパラミロン粒子を物理的に解繊処理して得られる、パラミロン粒子の解繊物を用いることができる。また、この解繊処理をユーグレナに適用することによって得られる、ユーグレナの解繊処理物を、繊維化パラミロンとして用いることもできる。 As the fiberized paramylon, it is preferable to use a defibrated product of paramylon particles obtained by physically defibrating the paramylon particles. Further, a defibrated product of Euglena obtained by applying this defibration treatment to Euglena can also be used as fiberized paramylon.
解繊処理は、パラミロン粒子中に存在するβ-1,3グルカンの水素結合をほとんど切断せずに(例えば、β-1,3グルカンの水素結合の10%以下、5%以下、2%以下、1%以下しか切断せずに)解繊することができる処理、又はパラミロン粒子中に存在するβ-1,3-グルカン鎖又はこれが形成する3重螺旋構造体の一部又は全部を解くことができる処理である限り特に制限されない。好ましくはパラミロン粒子中に存在するβ-1,3グルカンの水素結合をほとんど切断せずに解繊処理し、繊維状とすることが好ましい。パラミロン粒子の様な微粒子を摩砕(せん断)又は粉砕(好ましくは摩砕(せん断))することができる公知の処理を、解繊処理として採用することができる。 The defibration treatment hardly breaks the hydrogen bonds of β-1,3 glucan present in paramylon particles (for example, 10% or less, 5% or less, 2% or less of the hydrogen bonds of β-1,3 glucan). , a treatment that can defibrate (with less than 1% cleavage), or unravel part or all of the β-1,3-glucan chains present in the paramylon particles or the triple helical structure formed by the β-1,3-glucan chains. There is no particular restriction as long as the processing can be performed. Preferably, it is preferable to defibrate the β-1,3 glucan present in the paramylon particles without breaking most of the hydrogen bonds, thereby forming the paramylon particles into a fibrous form. Any known process capable of grinding (shearing) or pulverizing (preferably grinding (shearing)) fine particles such as paramylon particles can be employed as the fibrillation process.
解繊処理は、公知の摩砕機(せん断機)、粉砕機などの装置を用いて行うことができる。解繊処理に用いる装置としては、例えば石臼式摩砕機、ジェットミル、二軸混練機、高圧ホモジナイザー、高圧乳化機、二軸押し出し機、ビーズミルなどが挙げられる。これらの中でも、好ましくは石臼式摩砕機やビーズミルが挙げられる。 The defibration treatment can be performed using a known device such as a mill (shear) or a crusher. Examples of devices used for the fibrillation treatment include stone mill mills, jet mills, twin-screw kneaders, high-pressure homogenizers, high-pressure emulsifiers, twin-screw extruders, and bead mills. Among these, stone mill type mills and bead mills are preferred.
解繊処理は、湿式で行うことも、乾式で行うこともできる。湿式で解繊処理を行う方が、繊維化パラミロンをより効率的に溶液中に分散させることが可能となり、好ましい。湿式で行う場合の溶媒としては、繊維化パラミロンを分散可能な溶媒である限り特に制限されず、水を好適に用いることができる。 The defibration treatment can be performed wet or dry. It is preferable to perform the defibration treatment in a wet manner because it allows the fiberized paramylon to be more efficiently dispersed in the solution. The solvent used in the wet process is not particularly limited as long as it is a solvent in which the fibrous paramylon can be dispersed, and water can be suitably used.
解繊処理は、1種単独であってもよいし、2種以上の組み合わせであってもよい。また、一部が解繊処理されたパラミロンであってもよく、解繊処理されたパラミロンを含む限り本発明の意図するものである。 The defibration treatment may be carried out by one type alone or by a combination of two or more types. Further, a part of the paramylon may be defibrated, and as long as the paramylon includes defibrated paramylon, it is within the scope of the present invention.
5.用途
ユーグレナ、パラミロン、パラミロン加工物、及びβ-1,3-グルカンからなる群より選択される少なくとも1種(以下、「本発明の有効成分」と示すこともある。)は、GABA産生促進作用、GAD活性化作用を有することから、GABA産生促進剤、GAD活性化剤の有効成分として利用することができる。
Five. Uses At least one selected from the group consisting of Euglena, paramylon, processed paramylon, and β-1,3-glucan (hereinafter sometimes referred to as "active ingredient of the present invention") has a GABA production promoting effect. Since it has a GAD activating effect, it can be used as an active ingredient of a GABA production promoter or a GAD activator.
「GABA産生促進」とは、体内でのGABA産生を促進することであり、これにより例えば体内(例えば血中)のGABA量を増加させることができる。 "GABA production promotion" refers to promoting GABA production in the body, and thereby, for example, the amount of GABA in the body (eg, blood) can be increased.
「GAD活性化」とは、体内でのGAD活性を促進することであり、具体的には例えばGAD発現/産生促進を包含する。これにより、体内(例えば腸(好ましくは小腸(空腸、回腸等)))のGAD量を増加させることができ、GABA産生促進効果を得ることができる。 "GAD activation" refers to promoting GAD activity in the body, and specifically includes, for example, promoting GAD expression/production. Thereby, the amount of GAD in the body (for example, the intestine (preferably the small intestine (jejunum, ileum, etc.)) can be increased, and the effect of promoting GABA production can be obtained.
本発明の有効成分は、上記作用に基づいて、脂質代謝向上(例えば、(血中の)中性脂肪抑制、(血中の)遊離脂肪酸抑制等)、血圧改善(具体的には、血圧抑制)、ストレス緩和、疲労感の軽減、睡眠の改善、肌弾力の改善、認知機能の改善、リラクゼーション誘導、α波放出促進、成長ホルモン分泌促進、筋肉量の増加、活力の改善、心の健康の改善等に利用することができる。 Based on the above-mentioned effects, the active ingredient of the present invention improves lipid metabolism (e.g., suppresses neutral fats (in the blood), suppresses free fatty acids (in the blood), etc.), improves blood pressure (specifically, suppresses blood pressure). ), relieve stress, reduce fatigue, improve sleep, improve skin elasticity, improve cognitive function, induce relaxation, promote alpha wave release, promote growth hormone secretion, increase muscle mass, improve vitality, improve mental health. It can be used for improvements etc.
本発明の有効成分は、好ましくは、上記の用途の内の複数(2つ以上、より好ましくは3つ以上、さらに好ましくは4つ以上、よりさらに好ましくは5つ以上、よりさらに好ましくは6つ以上)の用途を含む包括的な用途に利用することができる。 The active ingredient of the present invention preferably has multiple uses (two or more, more preferably three or more, even more preferably four or more, even more preferably five or more, even more preferably six) of the above uses. It can be used for a comprehensive range of applications, including those listed above.
なお、「改善」とは、症状又は状態の好転又は緩和、症状又は状態の悪化の防止又は遅延、症状又は状態の進行の逆転、防止又は遅延をいう。
また、「抑制」とは、低下させることのみならず、増加又は悪化基調にあるものの増加又は悪化を抑える(増加幅又は悪化の程度を低下させる、増加又は悪化させない)ことを包含する。 さらに、「促進」とは、増加させることのみならず、低下基調にあるものの低下を抑える(低下幅の程度を低下させる、低下させない)ことを包含する。
Note that "improvement" refers to improvement or alleviation of symptoms or conditions, prevention or delay of deterioration of symptoms or conditions, and reversal, prevention, or delay of progression of symptoms or conditions.
In addition, "suppression" includes not only reducing, but also suppressing the increase or deterioration of something that is on the rise or deterioration (reducing the width of increase or degree of deterioration, or preventing increase or deterioration). Furthermore, "promotion" includes not only increasing but also suppressing the decline of something that is on the decline (reducing the extent of the decline or not reducing it).
さらには、本発明の有効成分は、以下に列挙する用途、目的、対象:
(a)中性脂肪を低下させる・改善する
(b)中性脂肪が高めの方に
(c)遊離脂肪酸を減らす
(d)血圧を下げる・改善する
(e)血圧が高めな方に
(f)事務作業を伴うストレスを緩和する
(g)ストレス改善
(h)デスクワークなどに伴う疲労感を軽減する
(i)精神的疲労感を軽減する
(j)睡眠の質を改善する・高める
(k)眠りの深さを改善する
(l)すっきりとした目覚めに
(m)睡眠サポート
(n)肌の弾力を維持する
(o)肌の健康を守るのを助ける
(p)加齢に伴って低下する認知機能を維持・改善する
(q)記憶力、空間認知力、論理的思考力、持続的注意力、ワーキングメモリ―(作業記憶)を維持・改善する
(r)見たり聞いたりしたことを思い出す力を維持・改善する
(s)物の位置、形、向きなどを正確に把握する力を維持・改善する
(t)筋道を立てて物事を考え、答えを導き出す力を維持・改善する
(u)注意を持続させながら、作業を続ける力を維持・改善する
(v)作業に必要な情報を整理し、短期的に記憶する力を維持・改善する
(w)成長ホルモンの分泌を促す
(x)加齢に伴って低下する筋肉量を維持する、増加させる
(y)活力を維持・改善する
(z)心の健康を維持・改善する
(aa)リラックス作用があります
等に利用することもできる。
Furthermore, the active ingredient of the present invention has the following uses, purposes, and targets:
(a) Lower/improve triglycerides (b) For those with high neutral fats (c) Reduce free fatty acids (d) Lower/improve blood pressure (e) For those with high blood pressure (f ) Relieve stress associated with office work (g) Improve stress (h) Reduce fatigue associated with desk work, etc. (i) Reduce mental fatigue (j) Improve/enhance sleep quality (k) Improves sleep depth (l) Wakes up refreshed (m) Sleep support (n) Maintains skin elasticity (o) Helps protect skin health (p) Decreases with age Maintaining and improving cognitive function (q) Maintaining and improving memory, spatial cognition, logical thinking, sustained attention, and working memory (r) Ability to recall what is seen and heard (s) Maintain and improve the ability to accurately grasp the position, shape, orientation, etc. of objects (t) Maintain and improve the ability to think about things logically and derive answers (u) Maintain and improve the ability to continue working while sustaining attention (v) Maintain and improve the ability to organize information necessary for work and short-term memory (w) Stimulate the secretion of growth hormone (x) It can also be used to maintain or increase muscle mass, which decreases with age (y) to maintain and improve vitality, (z) to maintain and improve mental health, (aa) to have a relaxing effect, etc.
本発明の剤は、各種分野において、例えば食品組成物(健康食品、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)を包含する)、食品添加剤、化粧品、化粧品添加剤、医薬、試薬、飼料などとして用いることができる。本発明の剤は、好ましくは経口組成物である。 The agent of the present invention can be used in various fields, such as food compositions (including health foods, health promoters, nutritional supplements (supplements, etc.)), food additives, cosmetics, cosmetic additives, medicines, reagents, feeds, etc. It can be used as The agent of the present invention is preferably an oral composition.
本発明の剤の形態は、特に限定されず、用途に応じて、各用途において通常使用される形態をとることができる。 The form of the agent of the present invention is not particularly limited, and depending on the application, it can take any form commonly used in each application.
本発明の剤の形態としては、用途が食品組成物の場合は、液状、ゲル状あるいは固形状の食品、例えばジュース、清涼飲料、茶、スープ、豆乳などの飲料、サラダ油、ドレッシング、ヨーグルト、ゼリー、プリン、ふりかけ、育児用粉乳、ケーキミックス、乳製品(例えば、粉末状、液状、ゲル状、固形状等)、パン、菓子(例えば、クッキー等)などが挙げられる。 When the agent of the present invention is used as a food composition, liquid, gel, or solid foods such as juice, soft drinks, tea, soup, soy milk, salad oil, dressing, yogurt, jelly, etc. , pudding, furikake, powdered milk for infants, cake mixes, dairy products (e.g., powder, liquid, gel, solid, etc.), bread, confectionery (e.g., cookies, etc.), and the like.
本発明の剤の形態としては、用途が化粧品である場合は、例えば乳液、化粧液、フェイスクリーム、ハンドクリーム、ローション、ボディソープ、シャンプー、リンス、化粧用ゲル、パック、ファンデーション、リップクリーム、洗顔剤等が挙げられる。 When the agent of the present invention is used as a cosmetic, for example, emulsion, lotion, face cream, hand cream, lotion, body soap, shampoo, conditioner, cosmetic gel, pack, foundation, lip balm, face wash, etc. agents, etc.
本発明の剤の形態としては、用途が医薬である場合は、例えば軟膏剤、外用液剤(リニメント剤、ローション剤等)、スプレー剤(外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤等)、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤(プラスター剤、硬膏剤等のテープ剤(リザーバー型、マトリックス型等)、パップ剤、パッチ剤、マイクロニードル等)、点眼剤、眼軟膏剤、点鼻剤、坐剤、直腸用半固形剤、注腸剤等の非経口摂取に適した製剤形態(特に、外用製剤形態); 錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などの経口摂取に適した製剤形態(経口製剤形態)が挙げられる。 When the agent of the present invention is used as a medicine, examples include ointments, external liquids (liniments, lotions, etc.), sprays (external aerosols, pump sprays, etc.), creams, and gels. , patches (plasters, plasters, tapes (reservoir type, matrix type, etc.), poultices, patches, microneedles, etc.), eye drops, eye ointments, nasal drops, suppositories, rectal semi-prescription Pharmaceutical forms suitable for parenteral ingestion such as solid preparations and enema preparations (especially external preparation forms); Tablets (including orally disintegrating tablets, chewable tablets, effervescent tablets, troches, jelly drops, etc.); Pharmaceutical forms suitable for oral ingestion such as pills, granules, fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquids (including drinks, suspensions, and syrups), and jellies ( oral preparation form).
本発明の剤の形態としては、用途が添加剤、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)などである場合は、例えば錠剤(口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む)、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤(懸濁剤、シロップ剤を含む)、ゼリー剤などが挙げられる。 The form of the agent of the present invention may be, for example, a tablet (orally disintegrating tablet, chewable tablet, effervescent tablet, troche, jelly, etc.) when the application is an additive, a health promoter, a nutritional supplement, etc. (including drop formulations), pills, granules, fine granules, powders, hard capsules, soft capsules, dry syrups, liquid formulations (including suspensions and syrups), and jelly formulations.
本発明の剤は、必要に応じてさらに他の成分を含んでいてもよい。他の成分としては、食品組成物(健康食品、健康増進剤、栄養補助食品(サプリメントなど)を包含する)、食品添加剤、化粧品、化粧品添加剤、医薬、試薬、飼料などに配合され得る成分である限り特に限定されるものではないが、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、着色料、香料、キレート剤などが挙げられる。 The agent of the present invention may further contain other components as necessary. Other ingredients include ingredients that can be incorporated into food compositions (including health foods, health promoters, nutritional supplements (supplements, etc.)), food additives, cosmetics, cosmetic additives, medicines, reagents, feeds, etc. Examples include bases, carriers, solvents, dispersants, emulsifiers, buffers, stabilizers, excipients, binders, disintegrants, lubricants, thickeners, coloring agents, fragrances, chelating agents, etc.
本発明の剤における有効成分の含有量は、用途、使用態様、適用対象の状態などに左右されるものであり、限定はされないが、例えば0.0001~100質量%、好ましくは0.001~50質量%とすることができる。 The content of the active ingredient in the agent of the present invention depends on the purpose, mode of use, condition of the subject, etc., and is not limited to, for example, 0.0001 to 100% by mass, preferably 0.001 to 50% by mass. can do.
本発明の剤の適用(例えば、投与、摂取、接種など)量は、GABA産生促進作用を発現する有効量であれば特に限定されず、通常は、有効成分の乾燥重量として、一般に1日あたり0.1~10000 mg/kg体重である。上記適用量は1日1回以上(例えば1~3回)に分けて適用するのが好ましく、年齢、病態、症状により適宜増減することもできる。 The amount of application (for example, administration, ingestion, inoculation, etc.) of the agent of the present invention is not particularly limited as long as it is an effective amount that expresses the GABA production promoting effect, and is generally expressed as the dry weight of the active ingredient per day. 0.1-10000 mg/kg body weight. It is preferable to apply the above-mentioned amount in divided doses at least once a day (for example, 1 to 3 times), and it can be increased or decreased as appropriate depending on age, pathological condition, and symptoms.
本発明の好ましい一態様において、ユーグレナ又はパラミロン適用量(乾燥重量)は、1日あたり、好ましくは100~10000mg、より好ましくは1000~7000mg、さらに好ましくは2000~5000mgである。適用期間は、好ましくは1週間以上、より好ましくは4週間以上、さらに好ましくは8週間以上である、さらに長期間(10週間以上、15週間以上、又は20週間以上)適用することも可能である。本発明の有効成分は天然由来であり安全性が高いので適用期間の上限は特に制限されないが、例えば3年間、1年間、6ヶ月間、4ヶ月間である。 In a preferred embodiment of the present invention, the application amount (dry weight) of Euglena or Paramylon is preferably 100 to 10,000 mg, more preferably 1,000 to 7,000 mg, and even more preferably 2,000 to 5,000 mg per day. The application period is preferably 1 week or more, more preferably 4 weeks or more, and even more preferably 8 weeks or more, and it is also possible to apply for a longer period of time (10 weeks or more, 15 weeks or more, or 20 weeks or more). . Since the active ingredient of the present invention is naturally derived and highly safe, the upper limit of the application period is not particularly limited, and is, for example, 3 years, 1 year, 6 months, or 4 months.
以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。 The present invention will be described in detail below based on Examples, but the present invention is not limited to these Examples.
参考例1
ユーグレナとして、ユーグレナ・グラシリスEOD-1株(独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許生物寄託センター(NITE-IPOD)の乾燥粉末(神鋼環境ソリューション製、パラミロン含有率70%以上)を準備した。
Reference example 1
As Euglena, dry powder of Euglena gracilis EOD-1 strain (National Institute of Technology and Evaluation, Patent Organism Depositary (NITE-IPOD) (manufactured by Kobelco Eco-Solutions, paramylon content of 70% or more) was prepared.
参考例2
パラミロン粒子を以下のようにして調製した。
Reference example 2
Paramylon particles were prepared as follows.
準備したユーグレナ・グラシリスEOD-1株(培養後、乾燥前の状態のもの)を、5フラスコ分の液体を集め、集めた液体を遠心管内で遠心分離(500×g、4分間、室温)した。遠心管内の上澄み液をいったん取り除いて回収した。回収した上澄み液を遠心管に入れて遠心管内の沈殿物を分散させ、100 mL容積のメスシリンダーに全て移した。さらに、メスシリンダーに、回収した上澄み液を加えて、90 mLにメスアップした。 The prepared Euglena gracilis EOD-1 strain (after culture but before drying) was collected in 5 flasks of liquid, and the collected liquid was centrifuged in a centrifuge tube (500 x g, 4 minutes, room temperature). . The supernatant in the centrifuge tube was once removed and collected. The collected supernatant liquid was placed in a centrifuge tube to disperse the precipitate in the centrifuge tube, and the entire solution was transferred to a 100 mL graduated cylinder. Furthermore, the collected supernatant liquid was added to the graduated cylinder to make up the volume to 90 mL.
[酵素処理工程]
90 mLにメスアップした液体を200 mLビーカーに移し、撹拌しながら塩酸水溶液を添加することによって液体のpHを3に調整した。タンパク質分解酵素(酸性プロテアーゼ 製品名「プロテアーゼYP-SS」ヤクルト薬品工業社製 至適pH2.5~3.0)を5 g/L濃度となるように液体に添加した。液体を撹拌しつつ50℃にて2時間、酵素処理を施した。
[Enzyme treatment process]
The liquid was diluted to 90 mL and transferred to a 200 mL beaker, and the pH of the liquid was adjusted to 3 by adding an aqueous hydrochloric acid solution while stirring. A proteolytic enzyme (acidic protease, product name "Protease YP-SS" manufactured by Yakult Pharmaceutical Co., Ltd., optimum pH 2.5 to 3.0) was added to the liquid at a concentration of 5 g/L. Enzyme treatment was performed at 50°C for 2 hours while stirring the liquid.
[界面活性剤処理工程]
ドデシル硫酸ナトリウムの濃度が3.0質量/容量(w/v)%となるように、酵素処理工程を経た液体に、ドデシル硫酸ナトリウムの水溶液を加えた。ドデシル硫酸ナトリウムを含む液体を撹拌しつつ、塩酸水溶液の添加によって液体のpHを3に調整した。さらに、液体をプロペラ撹拌機(回転速度200 rpm)で60℃にて30分間撹拌した。
[Surfactant treatment process]
An aqueous solution of sodium dodecyl sulfate was added to the liquid that had undergone the enzyme treatment step so that the concentration of sodium dodecyl sulfate was 3.0% by mass/volume (w/v). While stirring the liquid containing sodium dodecyl sulfate, the pH of the liquid was adjusted to 3 by adding an aqueous hydrochloric acid solution. Furthermore, the liquid was stirred for 30 minutes at 60°C with a propeller stirrer (rotation speed 200 rpm).
[分離工程]
遠心分離(1000×g、2分間、室温)によってパラミロンを沈殿させ、界面活性剤処理工程を経た液体から、パラミロンを分離した。ドデシル硫酸ナトリウムの濃度が1.0質量/容量%となるように変更した点、pHを調整しなかった点以外は、同様にしてさらに界面活性剤処理工程を行った。その後、上記と同様にして分離工程を行った。このようにして、界面活性剤処理工程及び分離工程をそれぞれ3回ずつ行った。
[Separation process]
Paramylon was precipitated by centrifugation (1000 x g, 2 minutes, room temperature), and paramylon was separated from the liquid that had undergone the surfactant treatment step. A further surfactant treatment step was carried out in the same manner except that the concentration of sodium dodecyl sulfate was changed to 1.0% by mass/volume and the pH was not adjusted. Thereafter, a separation step was performed in the same manner as above. In this way, the surfactant treatment step and separation step were each performed three times.
[洗浄工程]
分離工程において遠心分離によって沈殿したパラミロンを、純水によって懸濁させ、40℃にて10分間静置した。次に、遠心分離(1000×g、2分間、室温)によってパラミロンを沈殿させた。このような操作を合計3回行った。
[Washing process]
Paramylon precipitated by centrifugation in the separation step was suspended in pure water and allowed to stand at 40°C for 10 minutes. Paramylon was then precipitated by centrifugation (1000 x g, 2 min, room temperature). Such operations were performed three times in total.
[乾燥工程]
洗浄工程において遠心分離によって沈殿したパラミロンを、50℃にて乾燥させて、パラミロン粒子を得た。得られたパラミロン粒子を、以下の試験例でパラミロン(精製パラミロン)として用いた。
[Drying process]
Paramylon precipitated by centrifugation in the washing step was dried at 50°C to obtain paramylon particles. The obtained paramylon particles were used as paramylon (purified paramylon) in the following test examples.
試験例1.GABAに対する影響の解析
マウスを、パラミロン(参考例2)を含む飼料を餌として飼育し、血中のGABA量を測定した。具体的には以下のようにして行った。
Test example 1. Analysis of effects on GABA Mice were raised on a diet containing paramylon (Reference Example 2), and the amount of GABA in the blood was measured. Specifically, it was performed as follows.
<1-1.試験方法>
4週齢の雄C57BL/6Jマウス(日本チャールズ・リバー社製)を用いた。固形飼料(NMF、オリエンタル酵母工業社製)で1週間の予備飼育後、体重が均一になるように、1群10匹ずつ、2群分けした。
<1-1. Test method>
Four-week-old male C57BL/6J mice (manufactured by Charles River Japan) were used. After preliminarily rearing for one week on solid feed (NMF, manufactured by Oriental Yeast Industry Co., Ltd.), the mice were divided into two groups of 10 mice per group so that the weight was uniform.
試験に用いた飼料については次のとおりである。対照群及び試験群の飼料には、脂肪エネルギー比が50%になるようにラードを20%添加した。対照群の飼料には、食物繊維重量割合が5%になるようにセルロースを添加し、試験群の飼料には、食物繊維重量割合が5%になるようにパラミロンを添加した。各群の飼料組成を表1に示す。表1中の数値は、飼料1kg中の各成分重量(g)である。 The feed used in the test is as follows. 20% lard was added to the feeds of the control group and the test group so that the fat/energy ratio was 50%. Cellulose was added to the control group's feed so that the dietary fiber weight percentage was 5%, and paramylon was added to the test group feed so that the dietary fiber weight percentage was 5%. Table 1 shows the feed composition of each group. The values in Table 1 are the weight (g) of each component in 1 kg of feed.
試験において、マウスには上記飼料と水を12週間自由摂取させた。なお、飼育環境は、温度22±1℃、湿度50±5%、12時間の明暗サイクル(明期:8時→20時、暗期:20時→8時)とした。試験最終日に、マウスより門脈血を採取し、当該門脈血から血清を得て、-80℃で凍結させた。 In the test, mice were given ad libitum access to the above feed and water for 12 weeks. The breeding environment was a temperature of 22±1°C, a humidity of 50±5%, and a 12-hour light/dark cycle (light period: 8:00 to 20:00, dark period: 8:00 to 8:00). On the final day of the test, portal vein blood was collected from the mice, and serum was obtained from the portal vein blood and frozen at -80°C.
解凍後の血清をCE-TOFMSに供し、血清中のGABA量を測定した。具体的には以下のようにして行った。 The thawed serum was subjected to CE-TOFMS, and the amount of GABA in the serum was measured. Specifically, it was performed as follows.
<前処理>
内部標準物質(Cation mode:L-Methionine Sulfone, Anion mode:D-Camphor-10-sulfonic acid)の濃度が20μMとなるように調製した200μLのメタノール溶液に、50μLのマウス門脈血の血清を添加して撹拌した。これに150μLのMilli-Q水を加えて撹拌し、限外ろ過チューブ(ウルトラフリーMC PLHCC, HMT, 遠心式フィルターユニット 5kDa)に300μL移し取った。これを遠心(9,100 × g, 4℃, 120分)し、限外ろ過処理を行った。ろ液を乾固させ、再び50μLのMilli-Q水に溶解して測定に供した。
<Pretreatment>
Add 50 μL of mouse portal blood serum to 200 μL of methanol solution prepared so that the concentration of internal standard substance (Cation mode: L-Methionine Sulfone, Anion mode: D-Camphor-10-sulfonic acid) is 20 μM. and stirred. 150 μL of Milli-Q water was added to this, stirred, and 300 μL was transferred to an ultrafiltration tube (Ultrafree MC PLHCC, HMT, centrifugal filter unit 5kDa). This was centrifuged (9,100 x g, 4°C, 120 minutes) and subjected to ultrafiltration. The filtrate was dried, dissolved again in 50 μL of Milli-Q water, and used for measurement.
<測定>
本試験ではカチオンモード、アニオンモードの測定を以下に示す条件で行った。得られたピーク強度、形状から判断して、測定にはカチオン1倍、アニオン5倍希釈にて測定を行った。
<Measurement>
In this test, measurements in cation mode and anion mode were conducted under the conditions shown below. Judging from the obtained peak intensities and shapes, measurements were performed with 1-fold dilution for cations and 5-fold dilution for anions.
陽イオン性代謝物質(カチオンモード)
装置
Agilent CE-TOFMS system(Agilent Technologies 社) 6号機Capillary: Fused silica capillary i.d. 50μm × 80 cm 測定条件
Run buffer: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)Rinse buffer: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)Sample injection: Pressure injection 50 mbar, 10 secCE voltage: Positive, 30 kV
MS ionization: ESI Positive
MS capillary voltage: 4,000 V
MS scan range: m/z 50-1,000
Sheath liquid: HMT Sheath Liquid (p/n : H3301-1020) 陰イオン性代謝物質(アニオンモード)
装置
Agilent CE-TOFMS system(Agilent Technologies 社) 12号機Capillary: Fused silica capillary i.d. 50μm × 80 cm 測定条件
Run buffer: Anion Buffer Solution (p/n : I3302-1023)Rinse buffer: Anion Buffer Solution (p/n : I3302-1023)Sample injection: Pressure injection 50 mbar, 10 secCE voltage: Positive, 30 kV
MS ionization: ESI Negative
MS capillary voltage: 3,500 V
MS scan range: m/z 50-1,000
Sheath liquid: HMT Sheath Liquid (p/n : H3301-1020)。
Cationic metabolites (cation mode)
Device
Agilent CE-TOFMS system (Agilent Technologies) Unit 6 Capillary: Fused silica capillary id 50μm × 80 cm Measurement conditions
Run buffer: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)Rinse buffer: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)Sample injection: Pressure injection 50 mbar, 10 secCE voltage: Positive, 30 kV
MS ionization: ESI Positive
MS capillary voltage: 4,000V
MS scan range: m/z 50-1,000
Sheath liquid: HMT Sheath Liquid (p/n : H3301-1020) Anionic metabolite (anion mode)
Device
Agilent CE-TOFMS system (Agilent Technologies) Unit 12 Capillary: Fused silica capillary id 50μm × 80 cm Measurement conditions
Run buffer: Anion Buffer Solution (p/n : I3302-1023)Rinse buffer: Anion Buffer Solution (p/n : I3302-1023)Sample injection: Pressure injection 50 mbar, 10 secCE voltage: Positive, 30 kV
MS ionization: ESI Negative
MS capillary voltage: 3,500V
MS scan range: m/z 50-1,000
Sheath liquid: HMT Sheath Liquid (p/n: H3301-1020).
<データ処理>
CE-TOFMSで検出されたピークは、自動積分ソフトウェアのMasterHands ver.2.18.0.1(慶應義塾大学開発)を用いて、シグナル/ノイズ (S/N) 比が3以上のピークを自動抽出し、質量電荷比 (m/z)、ピーク面積値、泳動時間 (Migration time: MT) を得た。得られたピーク面積値は相対面積値に変換した。変換式は次のとおりである:相対面積値=目的ピークの面積値/(内部標準物質の面積値×試料量)。また、これらのデータにはNa+やK+などのアダクトイオン及び、脱水、脱アンモニウムなどのフラグメントイオンが含まれているので、これらの分子量関連イオンを削除した。しかし、物質特異的なアダクトやフラグメントも存在するため、すべてを精査することはできなかった。精査したピークについて、m/zとMTの値をもとに、各試料間のピークの照合・整列化を行った。
<Data processing>
For peaks detected by CE-TOFMS, peaks with a signal/noise (S/N) ratio of 3 or higher are automatically extracted using automatic integration software MasterHands ver.2.18.0.1 (developed by Keio University), and the mass Charge ratio (m/z), peak area value, and migration time (MT) were obtained. The obtained peak area values were converted into relative area values. The conversion formula is as follows: relative area value = area value of target peak/(area value of internal standard substance x sample amount). Furthermore, since these data include adduct ions such as Na+ and K+, and fragment ions such as dehydration and deammonium, these molecular weight-related ions were deleted. However, because there are also substance-specific adducts and fragments, it was not possible to examine all of them closely. Regarding the scrutinized peaks, we compared and aligned the peaks between each sample based on the m/z and MT values.
<1-2.結果>
結果を図1に示す。パラミロン摂取により血中のGABA量が大きく増加したことから、パラミロン及びこれを含むユーグレナはGABA産生促進作用を有することが分かった。
<1-2. Results>
The results are shown in Figure 1. Paramylon intake significantly increased the amount of GABA in the blood, indicating that paramylon and Euglena containing it have a GABA production promoting effect.
試験例2.GADに対する影響の解析
マウスを、パラミロン(参考例1)を含む飼料を餌として飼育し、GABA合成酵素(GAD)遺伝子の発現量を測定した。具体的には以下のようにして行った。
Test example 2. Analysis of effects on GAD Mice were raised on a diet containing paramylon (Reference Example 1), and the expression level of the GABA synthase (GAD) gene was measured. Specifically, it was performed as follows.
<2-1.試験方法>
対照群及び試験群の飼料の自由摂取期間を83日間とする以外は試験例1と同様にして、飼育した。試験最終日に8時間絶食させ、イソフルラン/炭酸ガスにて安楽死させた。空腸を摘出し、RNA later(キアゲン社)にて保存し、RNA抽出用試料とした。
<2-1. Test method>
The animals were raised in the same manner as in Test Example 1, except that the control group and test group had free access to feed for 83 days. On the final day of the test, the animals were fasted for 8 hours and euthanized with isoflurane/carbon dioxide gas. The jejunum was removed, stored in RNA later (Qiagen), and used as a sample for RNA extraction.
空腸より、RNeasy mini kit(キアゲン社)を用いてRNAを抽出後、GAD遺伝子(glutamic acid decarboxylase 2、NCBI Gene ID:14417) mRNA発現量を、マイクロアレイ法(アレイ:SurePrint G3 Mouse GE 8x60K(Agilent)、機器:GeneChi Scanner 3000 7Gシステム(Thermo Fisher Scientific)、解析ソフト:Transcriptome Viewer(クラボウ))により測定した。また、同様にして、コントロールとして、36B4遺伝子(acidic ribosomal phosphoprotein P0)のmRNA発現量も測定した。 After extracting RNA from the jejunum using the RNeasy mini kit (Qiagen), the expression level of GAD gene (glutamic acid decarboxylase 2, NCBI Gene ID: 14417) mRNA was measured using a microarray method (array: SurePrint G3 Mouse GE 8x60K (Agilent)). , equipment: GeneChi Scanner 3000 7G system (Thermo Fisher Scientific), analysis software: Transcriptome Viewer (Kurabo Industries)). Similarly, as a control, the mRNA expression level of the 36B4 gene (acidic ribosomal phosphoprotein P0) was also measured.
<2-2.結果>
結果を図2に示す。パラミロン摂取により空腸におけるGAD遺伝子の発現が増加した。このことから、パラミロン及びこれを含むユーグレナはGAD活性化作用、GAD発現促進作用を有することが分かった。
<2-2. Results>
The results are shown in Figure 2. Paramylon intake increased GAD gene expression in the jejunum. From this, it was found that paramylon and Euglena containing it have a GAD activating effect and a GAD expression promoting effect.
Claims (8)
前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスである且つ/或いは前記パラミロンがユーグレナ・グラシリス由来のパラミロンである、
請求項1に記載のGABA産生促進剤。 containing Euglena and/or Paramylon, and the Euglena is Euglena gracilis and/or the paramylon is a paramylon derived from Euglena gracilis,
The GABA production promoter according to claim 1.
前記ユーグレナがユーグレナ・グラシリスEOD-1株(受託番号FERM BP-11530)である且つ/或いは前記パラミロンがユーグレナ・グラシリスEOD-1株(受託番号FERM BP-11530)由来のパラミロンである、
請求項1に記載のGABA産生促進剤。 contains the Euglena and/or Paramylon, and the Euglena is Euglena gracilis EOD-1 strain (accession number FERM BP-11530), and/or the paramylon is Euglena gracilis EOD-1 strain (Accession number FERM BP- 11530) is a paramylon derived from
The GABA production promoter according to claim 1.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022050885 | 2022-03-25 | ||
JP2022050885 | 2022-03-25 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2023143788A true JP2023143788A (en) | 2023-10-06 |
Family
ID=88219678
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023038820A Pending JP2023143788A (en) | 2022-03-25 | 2023-03-13 | GABA production promoter |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2023143788A (en) |
-
2023
- 2023-03-13 JP JP2023038820A patent/JP2023143788A/en active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Barsanti et al. | Paramylon (β-1, 3-glucan) content in wild type and WZSL mutant of Euglena gracilis. Effects of growth conditions | |
KR100450097B1 (en) | Compositions of plant carbohydrates as dietary supplements | |
US20090285850A1 (en) | Oral Carotenoid Supplementation Methods for Improving the Health and Appearance of Skin | |
US20150290140A1 (en) | Compositions comprising microparticles and probiotics to deliver a synergistic immune effect | |
US20070167396A1 (en) | Methods and compositions for cholesterol reduction in mammals | |
US20070191303A1 (en) | Polysaccharide compositions and methods of producing, screening, and formulating polysaccharide compositions | |
US8927522B2 (en) | Microalgal polysaccharide compositions | |
TWI808074B (en) | Sugar and/or lipid metabolism improving agent | |
WO2010111710A1 (en) | Microalgal polysaccharide compositions | |
JP2020127398A (en) | Sirtuin expression level enhancer | |
US20150071891A1 (en) | Pre-fermented symbiotic matrix based on a cereal suspension with encapsulated probiotics, manufacture process and corresponding utilization | |
JP2005145885A (en) | Immunologic mechanism activator comprising alginic acid oligomer | |
JP2023143788A (en) | GABA production promoter | |
JP2021193956A (en) | Acetaldehyde metabolism promoter | |
TW201825668A (en) | Culturing medium and method for producing [beta]-glucan, a culture of Aureobasidium pullulans and a composition comprising the same | |
JP2003210136A (en) | Method for producing health nutritive food | |
JP2019213518A (en) | Testosterone secretion promoter | |
JP2023143445A (en) | Uric acid synthesis inhibitor | |
JP2022159061A (en) | Chylomicron production-related gene expression regulator | |
JP2022087401A (en) | Aquaporin expression enhancer | |
CN112708648A (en) | Preparation method and application of pharmaceutical-grade sparassis crispa polysaccharide for enhancing immunity | |
JP2022042716A (en) | Agent for lowering extracellular moisture ratio | |
CN104171838A (en) | Wheat aleurone layer content extracted by adopting pure physical dry process | |
JP2022135281A (en) | Saliva secretion promoter | |
JP7229829B2 (en) | macrophage activator |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
AA64 | Notification of invalidation of claim of internal priority (with term) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A241764 Effective date: 20230411 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230406 |