JP2021515761A - 遺伝性血管浮腫の治療 - Google Patents

Abstract

血漿で高度に選択的なカリクレイン阻害剤を含み、血管浮腫の治療のために有用な組成物が本明細書に記載されている。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本願は、２０１８年２月２８日に出願された米国仮出願第６２／６３６，８０９号および２０１８年３月９日に出願された米国仮出願第６２／６４１，１４４号の利益を主張し、これらはそれぞれ、参照により本願の開示に組み込まれる。

血管系に関連する疾患および障害の有効な治療についての必要性が医薬分野において存在している。そのような疾患および障害には、血管浮腫、黄斑浮腫、および脳浮腫が含まれるが、これらに限定されない。

一態様では、人体または動物の体の治療方法における使用のための、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩が本明細書で提供される。

別の態様では、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物の投与を含む、治療を必要とする患者において血管浮腫を治療する方法が本明細書で提供される。

いくつかの実施形態において、血管浮腫は遺伝性血管浮腫である。

いくつかの実施形態において、組成物は毎日投与される。いくつかの実施形態において、組成物は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、１日２回投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、１日１回投与される。

いくつかの実施形態において、組成物は経口投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００ｍｇ／日から約８００ｍｇ／日までの量で投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００ｍｇ／日、約３５０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約５００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約５５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約６００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約６５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約７００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約７５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約８００ｍｇ／日の量で投与される。

いくつかの実施形態において、組成物は即時放出のために製剤化される。

いくつかの実施形態において、組成物は錠剤またはカプセルとして製剤化される。

いくつかの実施形態において、組成物は少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。

参照による援用
本明細書に言及されているすべての刊行物、特許、および特許出願は、個々の刊行物、特許、または特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示された場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）およびＣ１−ＩＮＨ経路に固有の治療オプションの概要を示すフローチャートである。 他のセリンプロテアーゼに対する、化合物Ａの選択性を実証する表である。 生化学的阻害（図３Ａ）および接触活性化（図３Ｂ）アッセイにおける血漿カリクレインを阻害する際の化合物ＡおよびＣ１−ＩＮＨの効力のグラフ表示である。 生化学的阻害（図３Ａ）および接触活性化（図３Ｂ）アッセイにおける血漿カリクレインを阻害する際の化合物ＡおよびＣ１−ＩＮＨの効力のグラフ表示である。 サルにおける１５ｍｇ／ｋｇでの単回経口投与した後の化合物Ａの薬物動態学的曝露（血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ））のグラフ描写である。^＊約５０ｍｇ／動物（４００ｍｇのヒト等価用量）。^＊＊接触活性化アッセイ阻害に由来するＥＣ_５０およびＥＣ_９０。 サルにおける１５ｍｇ／ｋｇでの化合物Ａの単回経口投与後の平均±Ｓ．Ｄ．血漿濃度のグラフ描写である。 シトクロムＰ４５０阻害−シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）阻害に要求される薬物濃度を実証する表である。 化合物Ａの単回経口投与の代謝および薬物動態の結果を示す表である。代謝研究は放射性標識［^１４Ｃ］化合物Ａを用いて実施された。 ２８日目のサル毒性研究（ＮＯＡＥＬ（１００ｍｇ／ｋｇ／日））における２８日間の反復曝露のグラフ表示である。 ラットおよびサルにおける化合物Ａの単回投与の安全性薬理学を示す表である。 化合物Ａの毒性学／遺伝毒性を示す表である。 投与後０〜４８時間の化合物Ａの平均±Ｓ．Ｄ．血漿濃度−絶食集団（ｎ＝３６）のグラフ描写である。 Ｌｎ用量による化合物ＡのＬｎ ＡＵＣ_ｉｎｆ−絶食集団（ｎ＝３６、各用量コホート中６）。 Ｌｎ用量による化合物ＡのＬｎ Ｃ_ｍａｘ−絶食集団（ｎ＝３６、各用量コホート中６）。

詳細な説明
定義
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「薬剤」への言及は、複数のそのような薬剤を含み、「細胞」への言及は、１つ以上の細胞（または複数の細胞）および当業者に知られているその同等物への言及を含む、などである。分子量などの物理的特性、または化学式などの化学的特性のために範囲が本明細書で使用される場合、範囲のすべての組み合わせおよび下位の組み合わせ、ならびにその中の特定の実施形態が含まれることが意図される。数値または数値範囲を指す場合の「約」という用語は、参照される数値または数値範囲が実験的変動内（または統計的実験誤差内）の近似値であることを意味し、したがって、場合によっては、数値または数値範囲は記載されている数値または数値範囲の１％から１５％の間で変動する。「含む」という用語（および「含む」または「含む」または「有する」または「含有する」などの関連用語）は、他の特定の実施形態、例えば、任意の物質の組成物の実施形態、組成物、方法、またはプロセスなどを除外することを意図せず、本明細書に記載された特徴「からなる」か、または「本質的にからなる」。本明細書で使用される略語は、化学および生物学の分野の中にある従来の意味を有する。本明細書に記載の化学構造および化学式は、化学の技術分野で知られている化学原子価の標準規則に従って構築されている。

「薬学的に許容される塩」には、酸付加塩と塩基付加塩の両方が含まれる。本明細書に記載のカリクレイン阻害化合物のいずれか１つの薬学的に許容される塩は、任意のおよびすべての薬学的に適切な塩形態を包含することを意図している。本明細書に記載の化合物の好ましい薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される酸付加塩および薬学的に許容される塩基付加塩である。

「薬学的に許容される酸付加塩」とは、遊離塩基の生物学的有効性および特性を保持し、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、亜リン酸などの無機酸で形成される塩を指す。脂肪族モノカルボン酸およびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、アルカン二酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸などの有機酸で形成される塩も含まれ、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などが含まれる。したがって、例示的な塩には、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、硝酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、カプリル酸塩、イソ酪酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、フタル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩などが含まれる。アルギン酸塩、グルコン酸塩、ガラクツロン酸塩などのアミノ酸の塩も企図されている（例えば、Ｂｅｒｇｅ Ｓ．Ｍ．ら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６：１−１９（１９９７）を参照）。塩基性化合物の酸付加塩は、いくつかの実施形態において、当業者が精通している方法および技術に従って、遊離塩基型を十分な量の所望の酸と接触させて塩を生成することによって調製される。

「薬学的に許容される塩基付加塩」は、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものではない、遊離酸の生物学的有効性および特性を保持する塩を指す。これらの塩は、遊離酸への無機塩基または有機塩基の付加から調製される。薬学的に許容される塩基付加塩は、いくつかの実施形態において、アルカリおよびアルカリ土類金属または有機アミンなどの金属またはアミンで形成される。無機塩基に由来する塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などが含まれるが、これらに限定されない。有機塩基に由来する塩には、一級、二級、および三級アミンの塩、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、エチレンジアニリン、Ｎ−メチルグルカミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等が含まれるがこれらに限定されない。Ｂｅｒｇｅら、前出を参照のこと。

本明細書で使用される場合、「治療」もしくは「治療すること」、または「緩和」もしくは「改善」は交換可能に使用される。これらの用語は、治療的利益および／または予防的利益を含むがこれらに限定されない、有益なまたは望ましい結果を得るためのアプローチを指す。「治療的利益」とは、治療されている根底にある障害の根絶または改善を意味する。また、治療的利益は、患者が依然として根底にある障害に苦しんでいるにもかかわらず、患者において改善が観察されるように、根底にある障害に関連する１つ以上の生理学的症状の根絶または改善に伴って達成される。予防的利益については、組成物は、いくつかの実施形態において、特定の疾患を発症するリスクのある患者、または疾患の診断がされていない場合でも、疾患の生理学的症状の１つ以上を報告している患者に投与される。

カリクレイン−キニン系
血管透過性の調節は、血管と周囲の組織との間の小分子または血球の通過を調節する上で重要である。血管透過性は、炎症中、血圧の変化、イオンおよび栄養素の勾配の変動など、組織の生理学的状態に依存する。血管を裏打ちする内皮細胞間の結合は、血管透過性の直接の制御因子である。これらの接合部の強度は、ポリペプチドおよび酵素のキニン−カリクレイン系によって厳密に制御されている。キニン−カリクレイン系の異常は、血管浮腫、黄斑浮腫、および脳浮腫などのさまざまな病状を引き起こす。血管浮腫は、顔、胃腸管、四肢、生殖器、上気道に発生する可能性のある腫れを特徴とする、致命的な可能性のある血液疾患である。遺伝子による遺伝性血管浮腫発作は、血管透過性の制御されていない増加を伴うカリクレイン系の調節されない活性化に起因する。現在、血管浮腫の治療に有用な薬剤および血漿カリクレインを阻害する薬剤が必要とされている。

カリクレイン−キニン系は、活性化されると血管作用性キニンの放出を引き起こす代謝カスケードを表す。キニン−カリクレイン系（ＫＫＳ）は、主としてブラジキニンおよびＬｙｓ−ブラジキニン（カリジン）であるキニンの生成に関与するセリンプロテアーゼで構成されている。ＫＫＳは、炎症、血圧制御、凝固を含むさまざまな生理学的プロセスに寄与している。この系の活性化は、ブラジキニンが血管透過性を高め、腸、大動脈、子宮、および尿道の動脈および静脈の血管拡張を引き起こす能力に起因して、血圧調節および炎症反応において特に重要である。接触系とも呼ばれるキニン−カリクレイン系は、３つのセリンプロ酵素（第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）またはハーゲマン因子、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）、およびプレカリクレイン）、およびキニン前駆体高分子量キニン（ＨＫ）からなる。接触活性化は、ＦＸＩＩが負に帯電した表面に結合することによって引き起こされ、自己触媒作用を介したα−ＦＸＩＩａの形成を含む。結合したα−ＦＸＩＩａは、プレカリクレインをカリクレインに変換する。カリクレインは、Ｒ３３４−Ｎ３３５における追加の切断により、α−ＦＸＩＩａをβ−ＦＸＩＩａにさらに変換でき、これは、下流のプロセスを駆動するために十分なカリクレインの生成をもたらす正のフィードバックメカニズムである。α−ＦＸＩＩａはジスルフィド結合した重鎖および軽鎖からなるのに対して、β−ＦＸＩＩａは重鎖を欠いており、負に荷電した表面に結合する能力を失っている（Ｓｔａｖｒｏｕ Ｅ、Ｓｃｈｍａｉｅｒ ＡＨ．、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１０，１２５（３）ｐｐ．２１０−２１５）。ＦＸＩＩのＮ末端領域（α−ＦＸＩＩａ重鎖）は、組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）と強い相同性を示し、Ｉ型フィブロネクチン、上皮成長因子、およびクリングルドメインが存在する（Ｎｙら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９８４，８１（１７）ｐｐ．５３５５−５３５９；Ｃｏｏｌ ＤＥ、ＭａｃＧｉｌｌｉｖｒａｙ ＲＴ，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８７，２６２（２８）ｐｐ．１３６６２−１３６７３）。カリクレインは、高分子量キニン（ＨＫ）を切断してブラジキニンを生成するトリプシン様セリンプロテアーゼ酵素である。次に、ブラジキニンは、内皮細胞上のブラジキニン２Ｒ受容体（ＢＫ２Ｒ）に結合し、血管透過性の増加を引き起こす。

プロテアーゼ阻害剤は、接触系の活性化を調節する。血漿のいくつかの既知のセルピンは、Ｃ１阻害剤（Ｃ１ＩＮＨ）、アンチトロンビンＩＩＩ、α２−マクログロブリン、α１−プロテアーゼ阻害剤、およびα２−アンチプラスミンである（Ｋａｐｌａｎら、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９７（６６）ｐｐ．２２５−７２；Ｐｉｘｌｅｙら、Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８５，２６０（３）ｐｐ．１７２３−９）。しかし、Ｃ１ＩＮＨは内因性システムの主要な調節因子であり、第ＸＩＩａ因子およびカリクレインの活性を妨害する（Ｃｕｇｎｏら、Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９３，１２１（１）ｐｐ．３８−４３）。Ｃ１ＩＮＨとα２−マクログロブリンの両方が、血漿のカリクレイン阻害活性の９０％以上を占めている。したがって、ＦＸＩＩ依存性カリクレイン−キニン系はＣＩＮＨによって厳密に調節されており、ＦＸＩＩ依存性カリクレイン−キニン系の調節が失敗した場合、対照は、無効化浮腫発作（ｉｎｖａｌｉｄａｔｉｎｇ ｅｄｅｍａ ａｔｔａｃｋｓ）によって特徴付けられる、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）に苦しんでいると考えられる。

血管浮腫は、顔、胃腸管、四肢、生殖器、および上気道に発生する可能性のある腫れを特徴とする、致命的な可能性のある血液障害である。血管浮腫の発作は、皮膚と粘膜のより深い層で始まり、局所的な血管拡張および透過性の増加を伴う。この疾患の症状は、血管から周囲の組織への血漿の漏出から生じる。遺伝子による遺伝性血管浮腫発作は、カリクレイン系の制御されない活性化と、その結果としてのブラジキニンの過剰産生および血管透過性の制御されない増加から生じる。血管透過性が正常を超えて上昇すると、血漿が血管系から周囲の組織に漏出し、腫れを引き起こす（Ｍｅｈｔａ ＤおよびＭａｌｉｋ ＡＢ，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．，８６（１），２７９−３６７，２００６；Ｓａｎｄｏｖａｌ Ｒ ら、Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，５３３（ｐｔ ２），４３３−４５，２００１；Ｋａｐｌａｎ ＡＰおよびＧｒｅａｖｅｓ ＭＷ，Ａｎｇｉｏｅｄｅｍａ．Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２００５）。

ＨＡＥは、凝固および炎症経路の要素をコードする遺伝子の突然変異から生じる。ＨＡＥの３つの型は、血漿カリクレインの活性を阻害する血中のＣ１−エステラーゼ阻害剤（Ｃ１ＩＮＨ、セルピンペプチダーゼ阻害剤、クレードＧ、メンバー１）タンパク質の根底にある原因およびレベルによって区別される。Ｉ型では、患者は機能的なＣ１ＩＮＨのレベルが不十分であるが、ＩＩ型患者は機能不全のＣ１ＩＮＨを有している。Ｉ型およびＩＩ型は、男性と女性に同じ割合で影響を及ぼすが、ＩＩＩ型は主に女性に影響を及ぼし、凝固因子ＸＩＩ（ハーゲマン因子；ＨＡＥ−ＦＸＩＩ）の突然変異から生じる。Ｉ型およびＩＩ型ＨＡＥの根底にある原因は、第１１染色体（１１ｑ１２−ｑ１３．１）のＣ１ＩＮＨ遺伝子（ＳＥＲＰＩＮＧ１遺伝子）の常染色体優性突然変異である。

Ｃ１ＩＮＨは、ＦＸＩＩａの阻害の９０％および血漿カリクレインの阻害の５０％を占める（Ｐｉｘｌｅｙ ＲＡら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６０，１７２３−９，１９８５；Ｓｃｈａｐｉｒａ Ｍら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０，２７３８−４３，１９８１）。さらに、Ｃ１ＩＮＨはプレカリクレインも不活性化する（Ｃｏｌｍａｎ ＲＷら、Ｂｌｏｏｄ，６５，３１１−８，１９８５）。Ｃ１ＩＮＨレベルが正常である場合、その活動はＦＸＩＩａがプレカリクレインからカリクレインに変換することをブロックし、カリクレインがＨＫに変換することをブロックし、これにより、ブラジキニンの生成および浮腫エピソードが防止される。Ｃ１ＩＮＨレベルが低い場合，または機能不全のＣ１ＩＮＨのレベルが高い場合，この阻害は失敗し，病原性プロセスが起こる。

ＨＡＥに加えて、血漿カリクレインはまた、非遺伝性血管浮腫、高所脳浮腫、細胞毒性脳浮腫、浸透圧性脳浮腫、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、臨床的に重大な黄斑浮腫、嚢胞性黄斑浮腫（ＣＭＥ，Ｇａｏ ＢＢ，Ｎａｔ Ｍｅｄ．，１３（２），１８１−８，２００７）、網膜浮腫、放射線誘発浮腫、リンパ浮腫、神経膠腫関連浮腫、アレルギー性浮腫、例えば、慢性アレルギー性副鼻腔炎または通年性鼻炎における気流閉塞にも寄与する。血漿カリクレイン系の他の障害には、例えば、組織および／または臓器移植に関連する様々な状況における、網膜症および糖尿病性網膜症（Ｌｉｕ ＪおよびＦｅｅｎｅｒ ＥＰ、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３９４（３），３１９−２８，２０１３），増殖性および非増殖性網膜症（Ｌｉｕ Ｊら、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．，５４（２），２０１３）、白内障摘出後のＣＭＥ、凍結療法によって誘発されたＣＭＥ、ブドウ膜炎によって誘発されたＣＭＥ、血管閉塞後のＣＭＥ（例えば、中心網膜静脈閉塞、分枝網膜静脈閉塞または半網膜静脈閉塞）、糖尿病性網膜症における白内障手術に関連する合併症、高血圧性網膜症（ＪＡ Ｐｈｉｌｌｉｐｓら、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，５３，１７５−１８１，２００９）、網膜外傷、乾性および湿性加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、虚血再灌流障害（Ｃ Ｓｔｏｒｏｎｉら、ＪＰＥＴ，３８１，８４９−９５４，２００６）が挙げられる。

血管浮腫の現在の治療、および開発中の治療は、ＨＡＥ経路のさまざまな要素を対象としている。３つのクラスの治療法、（ａ）Ｃ１ＩＮＨ濃縮物による補充療法（例えば、Ｃｉｎｒｙｚｅ，Ｂｅｒｉｎｅｒｔ）、（ｂ）選択的カリクレイン阻害剤（例えば、Ｅｃａｌｌａｎｔｉｄｅ）の投与、および（ｃ）ブラジキニン受容体拮抗薬（例えば、Ｆｉｒａｚｙｒ）が現在利用可能である。

補充療法は、喉頭浮腫などの緊急事態を含む急性発作（Ｂｏｒｋ Ｋら，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，４５，１７７４−１７８４，２００５；Ｂｏｒｋ ＫおよびＢａｒｎｓｔｅｄｔ ＳＥ，Ａｒｃｈ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，１６１．．７１４−７１８，２００１）と予防の両方に有用であることが証明されている。選択的Ｃ１ＩＮＨ阻害剤は、カリクレインの産生を触媒するＨＡＥ経路の初期に活性なα−ＦＸＩＩａ分子とβ−ＦＸＩＩａ分子の両方を不活性化する（ＭｕｌｌｅｒＦおよびＲｅｎｎｅＴ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｈｅｍａｔｏｌ．，１５，５１６-２１，２００８；Ｃｕｇｎｏ Ｍら，ＴｒｅｎｄｓＭｏｌ．Ｍｅｄ．１５（２）：６９−７８，２００９）。ＨＡＥに加えて、血漿カリクレイン阻害剤は、黄斑浮腫および脳浮腫などの他の浮腫、ならびに網膜症、例えば、糖尿病および／または高血圧に関連する網膜症の治療において有用であると考えられている。血漿カリクレイン阻害剤はまた、疾患における浮腫形成、例えば、虚血性再灌流傷害に関連する浮腫形成の治療においても有効であるという証拠がある。ブラジキニン受容体拮抗剤は、ブラジキニンが血管透過性経路を活性化するのを防ぎ、腫れの開始を止める。

カリクレイン阻害剤
カリクレイン阻害剤Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、別名ＡＴＮ−２４９（本明細書では化合物Ａとも呼ばれる）が本明細書で提供される。化合物Ａは、ＷＯ２０１６／０１１２０９およびＷＯ２０１５／１０３３１７に開示されている。化合物Ａの構造を以下に提供する。

一実施形態は、酵素をＮ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドと接触させることを含む、カリクレイン酵素を阻害する方法を提供する。

一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物を対象に投与することを含む、対象における血漿カリクレインを阻害する方法を提供する。

＜治療の方法＞
血漿カリクレインの阻害が示される疾患または障害を治療する方法が本明細書に開示される。そのような疾患および障害には、遺伝性および非遺伝性を含む血管浮腫が含まれるが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、血管浮腫の治療のために有用である。いくつかの実施形態において、血管浮腫は遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）である。一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド）、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物の投与を含む、それを必要とする患者の血管浮腫を治療する方法を提供する。別の実施形態は、血管浮腫が遺伝性血管浮腫である方法を提供する。

一実施形態は、人体または動物の体の治療方法における使用のための、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を提供する。

一実施形態は、血管浮腫の治療方法における使用のための、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を提供する。別の実施形態は、血管浮腫が遺伝性血管浮腫である使用のための化合物を提供する。

一実施形態は、血管浮腫の治療のための薬剤の製造における、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。別の実施形態は、血管浮腫が遺伝性血管浮腫である使用を提供する。

一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物を投与することを含む、治療を必要とする患者における血管浮腫を治療する方法を提供する。別の実施形態は、血管浮腫が遺伝性血管浮腫である方法を提供する。

薬学的組成物
特定の実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、純粋な化学物質として投与される。他の実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ，２１ｓｔ Ｅｄ．Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（２００５））に記載されているように、選択された投与経路および標準的な製薬慣行に基づいて選択される、薬学的に適切なまたは許容可能な担体（本明細書では、例えば、薬学的に適切な（または許容される）賦形剤、生理学的に適切な（または許容される）賦形剤、または生理学的に適切な（または許容される）担体とも呼ばれる）と組み合わせられる。

Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはそれらの立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、またはＮ−オキシド、および１種以上の薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物が本明細書に提供される。１種または複数の担体（または１種または複数の賦形剤）は、担体が組成物の他の成分と適合性があり、組成物のレシピエント（すなわち、対象）に有害ではない場合に、許容可能かまたは適切である。

一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。

特定の実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩は、合成方法の１つまたは複数の工程において、未反応の中間体や作製された合成副産物などの、他の有機小分子が約５％未満、約１％未満、または約０．１％未満含んでいるという点で、実質的に純粋である。

適切な経口剤形には、例えば、メチルセルロース、または消化管に容易に溶解する別の適切な材料の錠剤、丸薬、サシェ剤、またはハードもしくソフトゼラチンのカプセル、メチルセルロースまたは消化管に容易に溶解する別の適切な材料が含まれる。いくつかの実施形態において、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどを含む適切な非毒性固体担体が使用される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ．２１^ｓｔＥｄ．ＭａｃｋＰｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（２００５）を参照）。

Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドを含む組成物の用量は、患者（例えば、ヒト）の状態、つまり、病気の段階、一般的な健康状態、年齢、およびその他の要因に依存して異なる。

薬学的組成物は、治療される（または予防される）疾患に対して適切な様式で投与される。適切な用量ならびに適切な投与期間および頻度は、患者の状態、患者の疾患の型および重症度、有効成分の特定の形態、ならびに投与方法などの要因によって決定される。一般に、適切な用量および治療レジメンは、治療的および／または予防的利益（例えば、より頻繁な完全または部分的寛解、またはより長い無病および／もしくは全生存期間、または症状の重症度の軽減などの改善された臨床転帰）を提供するために十分な量の組成物を提供する。最適な用量は、通常、実験モデルおよび／または臨床試験を使用して決定される。最適な投与量は、患者の体重、重量、または血液量に依存する。

経口用量は、典型的には、１日あたり約１．０ｍｇから約１０００ｍｇ、１回から４回、またはそれ以上の範囲である。

一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドまたはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。

一実施形態は、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドまたはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物を調製する方法を提供する。

一態様では、人体または動物の体の治療の方法における使用のための、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドまたはその薬学的に許容される塩が本明細書で提供される。

別の態様では、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドまたはその薬学的に許容される塩を含む組成物の投与を含む、治療を必要とする患者における血管浮腫を治療する方法が本明細書で提供される。

いくつかの実施形態において、血管浮腫は遺伝性血管浮腫である。

いくつかの実施形態において、組成物は毎日投与される。いくつかの実施形態において、組成物は、１日１回または２回投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、１日２回投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、１日１回投与される。

いくつかの実施形態において、組成物は経口投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約１００ｍｇ／日から約８００ｍｇ／日までの量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００ｍｇ／日から約８００ｍｇ／日までの量で投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約１００ｍｇ／日、約１５０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２５０ｍｇ／日、約３００ｍｇ／日、約３５０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００、約３５０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約５００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約５５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約６００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約６５０ｍｇの量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約７００ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約７５０ｍｇ／日の量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約８００ｍｇ／日の量で投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される。。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約４００ｍｇ／日の量で投与される。

いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００ｍｇの量で投与される。いくつかの実施形態において、Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドは、約３００ｍｇの量で、１日２回投与される。

いくつかの実施形態において、組成物は、即時放出のために製剤化される。

いくつかの実施形態において、組成物は、錠剤またはカプセルとして製剤化される。
。

いくつかの実施形態において、組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。

他の実施形態および使用は、本開示に照らして当業者には明らかである。以下の実施例は、単に様々な実施形態の例示として提供されており、いかなる場合においても本発明を限定するものと解釈されるべきではない。

本開示の好ましい実施形態が本明細書に示され、説明されてきたが、そのような実施形態が例示としてのみ提供されることは当業者には明らかである。多数のバリエーション、変更、および置換が、本発明から逸脱することなく行われることが今や当業者に明らかである。本明細書に記載の実施形態の様々な代替を本発明の実施に使用できることが理解されるべきである。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を規定すること、ならびにこれらの特許請求の範囲内の方法および構造、およびそれらの同等物がそれによってカバーされることが意図される。

実施例１．Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、遺伝性血管浮腫に対する新規な経口カリクレイン阻害剤の選択性、効力、および曝露評価
遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）は、急性の皮膚および粘膜の浮腫を特徴とする、まれな、生命を脅かす可能性のある疾患である。ＨＡＥは、再発性の皮膚の腫れ、腹痛、喉頭浮腫、非紅斑性発疹、うずき感、不安、気分の変化、または消耗を引き起こす可能性がある。ＨＡＥは、Ｃ１阻害剤（Ｃ１−ＩＮＨ）の欠乏によって引き起こされ、これは、血漿カリクレインのレベルの上昇を導く。血漿カリクレインのレベルが上昇すると、ブラジキニンのレベルの上昇を導き、血管拡張、炎症、および浮腫を引き起こす。現在、血漿カリクレイン活性を制御し、ＨＡＥ発作を予防し、忍容性の高い経口投与療法に対する必要性は満たされていない。

化合物Ａは、カリクレインを介したブラジキニンの産生を遮断することによってＨＡＥを潜在的に治療する、新規な経口投与される血漿カリクレイン阻害剤である（図１）。

目的
この前臨床試験の目的は、Ｃ１阻害剤（Ｃ１−ＩＮＨ）と比較した、化合物Ａの選択性、ならびに化合物Ａの効力、薬物動態学的曝露、および安全性を評価することであった。

材料および方法
選択性は、組織カリクレイン５、プラスミン、第Ｘａ因子、第ＶＩＩａ因子、トロンビン、および組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）を含む、他のセリンプロテアーゼと比較した血漿カリクレインに対する生化学的阻害によって評価された。効力は生化学的阻害およびヒト血漿中の接触活性化アッセイによって評価された。化合物Ａを１５ｍｇ／ｋｇで単回経口投与した後、サルにおける薬物動態学的曝露を評価した。無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は、１４日間の非ＧＬＰラットおよびサルの毒性試験で評価され、動物は１００または３００ｍｇ／ｋｇの１日用量を与えられた。

結果
化合物Ａは、組織カリクレイン５、プラスミン、第Ｘａ因子、第ＶＩＩａ因子、トロンビン、および組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）を含む他の密接に関連するセリンプロテアーゼに対して、血漿カリクレインの阻害において＞２０００倍選択性が高かった（図２）。

化合物Ａは、生化学的阻害と接触活性化アッセイ（臨床薬理学を厳密に表すエキソビボアッセイ）の両方において、血漿カリクレインを阻害する際にＣ１−ＩＮＨよりも９〜１１倍より強力であった。生化学的阻害において、化合物Ａは、Ｃ１−ＩＮＨの２５．４ｎＭに対して、２．７ｎＭのＩＣ_５０を有し（図３Ａ）、接触活性化アッセイでは、ＥＣ_５０はそれぞれ８．２ｎＭ対９２．４ｎＭであった（図３Ｂ）。薬物動態学的曝露研究は、サルにおいて、１５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａの単回経口投与が、ＥＣ_５０よりも３０倍高い２４時間曝露（Ｃ_２４）を提供したことを示した（図４）。最高用量（３００ｍｇ／ｋｇ）で有害事象は観察されず、３００ｍｇ／ｋｇの無毒性量（ＮＯＡＥＬ）が設定された。

化合物Ａは、他の密接に関連するセリンプロテアーゼと比較して、血漿カリクレイン阻害において高度に選択的であった。化合物Ａは、生化学的阻害と接触活性化アッセイ−臨床薬理学を密接に表すエキソビボアッセイの両方において、Ｃ１−ＩＮＨと比較して約１０倍高い血漿カリクレイン阻害を実証した。単回投与後、１５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａは、ＥＣ_５０よりも３０倍高く、無毒性量（ＮＯＡＥＬ）の２０倍下である２４時間曝露を提供した。これらの結果は、広い治療域および１日１回の投与の可能性を示唆している。化合物Ａは、ＨＡＥの治療のための強力で安全な経口投与血漿カリクレイン阻害剤である可能性がある。

実施例２．化合物Ａの前臨床安全性試験
患者の生活の質、利便性、および予防効力を改善した、効果的で忍容性が高く安全な経口療法に対する強い必要性が満たされていない。ＨＡＥを治療するための救急治療および予防的な静脈注射および皮下療法もまた望ましい。

主な目的
化合物Ａは、化学構造、血漿カリクレインの選択性、およびカリクレイン阻害に基づいて研究のために選択された。

本研究の目的は以下の通りであった。
（１）血漿カリクレインの阻害を介してＣ１−ＩＮＨと比較した化合物Ａの効力を評価すること、
（２）他の密接に関連するセリンプロテアーゼと比較した血漿カリクレインの生化学的阻害に対する化合物Ａの選択性を評価すること、および
（３）化合物Ａの一般的な毒性、安全性薬理学、および遺伝毒性プロファイルを評価すること。

効力
化合物Ａは、生化学的阻害アッセイにおいて血漿カリクレインを阻害する際に、Ｃ１−ＩＮＨよりも９倍強力であった（図３Ａ）。化合物Ａは、接触活性化アッセイにおいて血漿カリクレインを阻害する際に、Ｃ１−ＩＮＨよりも１１倍強力であった（図３Ｂ）。

選択性
化合物Ａは、他の密接に関連するセリンプロテアーゼに対して、血漿カリクレインを阻害する際に＞２０００倍選択性が高かった（図２）。

安全性
薬物動態学的曝露研究は、１５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａの単回経口投与がサルにおいてＣ_ｍａｘ曝露＞１８０ｘおよび２４時間曝露（Ｃ_２４）３０倍＞ＥＣ_５０を提供することを示した（図５）。

化合物Ａは、Ｐ４５０酵素を有意に阻害しないことが見出された（図６）。

単回経口投与／投薬の代謝および薬物動態研究において、化合物Ａは、すべての種において良好な生物学的利用能および放射性標識化合物Ａの包括的な回収を実証した（図７）。

一般毒性化合物Ａの２８日間の反復投与試験をラットおよびサルで実施した（図８）。無毒性量（ＮＯＡＥＬ）の用量で、化合物Ａは２８日目にＣ_ｍａｘ曝露＞４５００ｘおよび２４時間曝露（Ｃ_２４）１５０ｘ＞ＥＣ_５０を提供した。

ラットにおいては、３００ｍｇ／ｋｇ／日、高用量レベルのＮＯＡＥＬが体重と摂餌量の減少を生じ、３００ｍｇ／ｋｇ／日レベルは有害とは見なされなかった。サルにおいては、ＮＯＡＥＬは１００ｍｇ／ｋｇ／日、中用量レベルであった。サルにおける３００ｍｇ／ｋｇ／日の高用量レベルの有害所見は、１５０ｍｇ／ｋｇ／日の用量減少の際に逆転した。

化合物Ａの単回投与のラットおよびサルの安全性薬理学研究では、中枢神経系、呼吸器、および心血管機能に対する死亡または有害作用は観察されなかった（図９）。化合物Ａの毒性学および遺伝毒性の研究では、広範囲の研究で遺伝毒性または凝固の問題は認められなかった（図１０）。

遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）の治療のために経口投与された血漿カリクレイン阻害剤である化合物Ａを評価した安全性試験の結果はポジティブであった。強力な安全性、高い効力、および高い選択性の結果は、化合物Ａの１日１回投与の可能性がある広い治療域を示唆している。前臨床毒性学および安全性薬理学研究では、化合物Ａは一般に安全で忍容性が良好であった。さらに、薬物動態研究は、化合物Ａの反復経口投与後の高い２４時間曝露および包括的な薬物回復を示した。このデータは、患者の生活の質および予防効果を改善した忍容性が高く安全な経口療法の満たされていない必要性に取り組むために、化合物Ａが、良好な安全性プロファイルおよび１日１回の投与計画を有することを示している。

研究には、血漿カリクレインの阻害を介したＣ１−ＩＮＨと比較した化合物Ａの効力、他の密接に関連するセリンプロテアーゼと比較した血漿カリクレインの生化学的阻害に対する化合物Ａの選択性、ならびに化合物Ａの薬物動態、一般毒性、安全性薬理学、および遺伝毒性のプロファイルの評価が含まれた。

安全性
無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は、サルでは１００ｍｇ／ｋｇ／日、中用量レベルで確立された。

安全性薬理試験では、中枢神経系、呼吸器、および心血管機能に死亡または有害作用は観察されなかった。

幅広い研究で遺伝毒性や凝固の問題は認められなかった。

ＤＭＰＫ
高い２４時間曝露、包括的な薬物回収、Ｐ４５０易罹病性なし。

１００ｍｇ／ｋｇ／日のＮＯＡＥＬ用量での反復投与後、２８日目で、化合物Ａは＞６００倍のＣ_ｍａｘ曝露およびＥＣ_９０よりも２０倍高い２４時間曝露を提供した。

３０ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後、化合物Ａは、ラット、イヌ、サルにおいて、４０％を超える生物学的利用能を示した。

サルにおける１５ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後、化合物Ａは、２５倍高いＣｍａｘ曝露、およびＥＣ９０より４倍高い２４時間曝露を提供し、単回経口投与後のインタクトラットおよび胆管カニューレ挿入ラットにおいて９９％の回復を実証した。

化合物ＡはＰ４５０酵素を有意に阻害しない。

効力
化合物Ａは、生化学的阻害と接触活性化アッセイ−臨床薬理学を厳密に表すエキソビボアッセイの両方で、Ｃ１−ＩＮＨと比較して約１０倍大きい血漿カリクレイン阻害を示した。生化学的阻害では、化合物ＡのＩＣ_５０は２．７ｎＭ、ＩＣ_９０は１６．２ｎＭであったのに対して、Ｃ１−ＩＮＨについては、それぞれ２５．４ｎＭおよび１５６．９ｎＭであった。

接触活性化アッセイでは、化合物ＡのＥＣ_５０およびＥＣ_９０は８．２ｎＭおよび６１．６ｎＭであったのに対して、Ｃ１−ＩＮＨについては、それぞれ対９２．４ｎＭおよびＮ／Ａであった。

選択性
化合物Ａは、組織カリクレイン５、組織カリクレイン７、組織カリクレイン１４、プラスミン、第Ｘａ因子、第ＶＩＩａ因子、トロンビン、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）を含む、他の密接に関連するセリンプロテアーゼに対して、血漿カリクレインを阻害する際に＞２０００倍選択性が高かった。

生化学的アッセイと接触活性化アッセイの両方の研究は、化合物Ａが血漿カリクレイン阻害において非常に選択的かつ強力であることを実証している。化合物Ａは、複数の種におけるいくつかの薬物動態学的研究および毒物学的研究で評価されている。観察された広い治療域および１日１回の投与の可能性を考えると、これらの結果は、化合物ＡがＨＡＥの治療のための強力で安全な経口投与血漿カリクレイン阻害剤である可能性があることを示唆している。

実施例３．健常ボランティアにおけるＮ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドの安全性、忍容性、薬物動態および食物効果
健康な男性参加者における化合物Ａの安全性、忍容性、薬物動態、および食物効果を決定するための、無作為化、二重盲検、プラセボ対照を有する、単回上昇用量および双方向クロスオーバー食物効果研究。

この最初のヒトでの研究の主な目的は、化合物Ａの安全性および忍容性、ならびに空腹時と高脂肪食後の薬物動態を調べることである。第２の目的は、接触経路活性化に関連する化合物Ａの薬力学を調べることである。この二重盲検試験では、２４人までの参加者がそれぞれ８人の参加者からなる３つのコホートに採用される。

コホート１の参加者は、５０ｍｇ（１×５０ｍｇカプセル）の化合物Ａ（６人の参加者）またはプラセボ（２人の参加者）のいずれかの経口投与を受けるようにランダム化される。２人のセンチネル参加者（１人はプラセボに割り当てられ、もう１人は化合物Ａに割り当てられる）が最初に投与される。これらのセンチネル参加者の投与が２４時間にわたって臨床的に重大な有害事象（ＡＥ）なしに進行する場合（ＳＭＣによって判定される）、残りの６人の参加者が投与される。参加者は、少なくとも１０時間の一晩の絶食後に投与される。

コホート２は、２つの治療期間を有するクロスオーバーデザインの対象となる。参加者は、１００ｍｇ（２×５０ｍｇカプセル）の化合物Ａ（６人の参加者）またはプラセボ（２人の参加者）のいずれかを受け取るようにランダム化される。投薬は、第１の治療期間に少なくとも１０時間一晩絶食した後に行われ、そして第２の治療期間に高脂肪食が与えられる。治療間のウォッシュアウト期間は少なくとも７日である。コホート１と同様に、２人のセンチネル参加者（１人はプラセボに割り当てられ、もう１人は化合物Ａに割り当てられる）は、第１の治療期間中に最初に投与される。コホート２の計画された研究手順は、これらのセンチネル参加者の投薬が臨床的に有意なＡＥなしで進行する場合に進行する。

コホート３は、研究手順の点でコホート１に類似している。用量レベルは、先行するコホートの安全性およびＰＫデータの評価に続いて確立される。

主要な結果の測定
（１）化合物Ａの安全性と忍容性、時点（１）最後の投与から７日まで
（２）絶食状態の化合物Ａの血漿中濃度および薬物動態パラメータ。時点（２）最後の投与から４８時間まで
（３）高脂肪食摂取後の化合物Ａの血漿中濃度および薬物動態パラメータ。時点（３）最後の投与から４８時間まで

二次転帰測定：接触経路活性化に対する化合物Ａの薬力学、時点：最後の投与から２４時間まで。

主要な選択基準
１）１８歳から５５歳までの男性の健常ボランティア、上限と下限を含む。
２）参加者は、一般的な健康状態が良好で、重大な病歴がなく、スクリーニング時および／または治験薬の初回投与前の身体検査で臨床的に重大な異常がない必要がある。
３）参加者は、１８．０〜３０．０ｋｇ／ｍ^２の肥満度指数（ＢＭＩ）、上限と下限を含む、を有する必要がある。
４）参加者は、治験責任医師または代表者によって臨床的に重要でないと見なされない限り、検査室によって指定された正常範囲内の臨床検査値を有する必要がある。
５）参加者は非喫煙者である必要があり、スクリーニング前の６か月以内にいかなるタバコ製品も使用してはならない。
６）参加者は、関連する食事制限がなく、提供された標準食を進んで摂取する必要がある。
７）不妊手術を受けていない参加者は、パートナー（妊娠の可能性がある場合）が投与から投与後７日までの期間に非常に効果的な避妊を使用することを保証することを約束する必要があり（許容される避妊の形態は経口、注射、または埋め込みホルモン法、または子宮内避妊器具または子宮内システムの配置、または禁欲である）、これらの措置に加えて、男性の参加者は、この期間中の性交のためにコンドームを使用するべきである。この要件は、同性間関係の参加者には適用されない。
８）参加者は、研究センターへの必要な訪問に出席する能力と意欲を持っている必要がある。
９）研究に入る前に署名された書面によるインフォームドコンセント。

主要な除外基準
１）治験責任医師（または代理人）の意見で、参加者の安全に悪影響を与える可能性のある、過去または現在の病状、病歴、身体所見、または検査室レベルでの異常。
２）精神的または法的に無能力であり、スクリーニング訪問時に重大な感情的問題を抱えているかもしくは研究の実施中に予想され、または過去５年以内に臨床的に重大な精神障害の病歴がある。注記：状況に応じたうつ病を患った参加者は、治験責任医師または代表者の裁量で研究に登録することができる。
３）スクリーニング前の２週間以内の発熱（体温＞３８℃）または症候性のウイルスもしくは細菌感染。
４）重度のアレルギー反応またはアナフィラキシー反応の病歴。
５）スクリーニング時または−１日目の安静時血圧＞１４０／９０ｍｍ Ｈｇ、安静時心拍数＞９０拍／分、または安静時心拍数＜５０拍／分（反復測定は、安静時心拍数＜５０拍／分を除き、治験責任医師の裁量で許可される）。
６）アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）および／またはアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）＞１．５×スクリーニング時の正常上限。治験責任医師または代理人による承認後、範囲外の値については、スクリーニングでの反復試験が許容される。
７）スクリーニング時または−１日目の血清カリウム＜３．７ｍｍｏｌ／Ｌまたは＞５．５ｍｍｏｌ／Ｌ。
８）スクリーニング時のＣ型肝炎抗体、Ｂ型肝炎表面抗原、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）抗体の陽性検査。
９）毒性スクリーニングパネルが陽性の参加者（バルビツール酸、テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）、アンフェタミン、ベンゾジアゼピン、アヘン剤、コカインの定性的同定を含む尿検査）。
１０）過去数年間に薬物乱用もしくは依存症の病歴または娯楽用静脈内（ＩＶ）薬物使用の病歴がある参加者（自己申告による）。
１１）１週間あたり＞２１アルコール単位と定義されている通常のアルコール消費量（１単位＝２８４ｍＬのビール、２５ｍｌの４０％スピリット、または１２５ｍｌのグラスワイン）。参加者は、ＣＲＵへの入院の４８時間前から始めて、フォローアップ訪問までアルコールを控えることを望んでいない。
１２）参加者は、以前の心筋梗塞（ＭＩ）、左心室肥大（ＬＶＨ）、平坦なＴ波（特に下側誘導）またはマイナーな非特異的ＳＴ−Ｔ波の変化または：
ａ．ＱＲＳ＞１１０ミリ秒（ｍｓｅｃ）、
ｂ．Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａの式（ＱＴｃＦ）＞４４０ｍｓｅｃ（男性および女性）を使用して修正されたＱＴ間隔、
ｃ．ＰＲ間隔＞２２０ｍｓｅｃ
ｄ．心拍数が＜５０ＢＰＭまたは＞９０ＢＰＭ
ｅ．完全な右脚ブロックまたは左脚ブロック
の証拠を含む、ＥＣＧ分析を妨げる可能性のある重大なＥＣＧ異常を有する。
１３）冠状動脈疾患（ＭＩ、狭心症を含む）、心不整脈、ＱＴ延長症候群（自己または家族）、弁膜症、心不全、高血圧または低血圧を含む心疾患または脳血管疾患の病歴。
１４）遺伝性血管浮腫の家族歴。
１５）主任研究者および／または医療モニターの意見において、投薬が参加者の安全を危うくしたり、研究手順またはデータの有効性を妨害したりしない限り、治験薬投与前の７日または５半減期（いずれか長い方）以内での任意の処方薬、市販薬、ハーブ製品、ビタミンまたはミネラルの使用。
１６）主任研究者および／または医療モニターの意見において、投薬が参加者の安全を危うくしたり、研究手順またはデータの有効性を妨害したりしない限り、治験薬投与前の１４日または５半減期（いずれか長い方）以内でのシトクロムＰ４５０［ＣＹＰ］３Ａ４またはＰ糖タンパク質［Ｐ ｇｐ］［例えば、セントジョンズワート、リファンピン、シクロスポリン、またはリトナビル］の任意の潜在的な誘導物質または阻害物質の使用。
１７）パラセタモール／アセトアミノフェンまたは非ステロイド性抗炎症薬（例えば、イブプロフェン、ナプロキセンなど）の１週間あたり１〜２回の治療用量を除いて、研究参加中の処方薬または市販薬の予想される使用。
１８）参加者は、ＣＲＵへの入院の７日前から研究全体からの退出までを通じて、激しい運動を控えることを望まない。
１９）参加者は、各研究期間の最終的な薬物動態（ＰＫ）サンプルが収集されるまで、各研究期間のためのＣＲＵへの入院の９６時間前から開始して、カフェインまたはキサンチン含有製品（例えば、お茶、コーヒー、チョコレート、コーラなど）の摂取を控えることを望んでいない。
２０）参加者は、ＣＲＵへの入院前１４日以内にグレープフルーツおよび／またはグレープフルーツジュースを消費しており、研究が終了するまでグレープフルーツおよび／またはグレープフルーツジュースの消費を控えることを望んでいない。
２１）参加者は、各研究期間のＣＲＵへの入院前４８時間以内に他の果物またはフルーツジュースを消費し、各研究期間の最終ＰＫサンプルが収集されるまで、各研究期間の入院前４８時間にこれらの品目を控えることを望まない。
２２）研究プロトコルに準拠する可能性が低い、または研究者の意見では、研究への参加に適した候補者ではない参加者。

被験者がランダム化される順番を生成するために使用される方法（順番生成）：ＳＡＳ ＥＧ７．１２ソフトウェアパッケージを使用して作成されたランダム化テーブルを使用した単純なランダム化である。

治療を受けている個人、治療を施す個人、および、結果を評価する個人は盲検化／マスクされる。

その他の設計機能：コホート１および３は並列設計に従い、コホート２はクロスオーバー設計に従う。

安全性分析セット：任意の量の治験薬を投与されたすべての参加者。ＰＫ分析セット：治験薬（化合物Ａ）を投与され、分析のために十分なＰＫデータを有するすべての参加者。

実施例４．遺伝性血管浮腫に対する新規な経口血漿カリクレイン阻害剤である化合物Ａの薬物動態および安全性
目的：単回漸増用量（ＳＡＤ）研究の健康な男性参加者における化合物Ａの安全性、忍容性、および薬物動態（ＰＫ）（食物効果を含む）を評価する。

材料および方法
ランダム化、二重盲検、プラセボ対照の単回上昇用量およびクロスオーバー食物効果試験

４８人の健康な男性参加者（６つの用量コホートのそれぞれにおける６人のアクティブ：２人のプラセボ）は、化合物Ａ ５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、４００ｍｇ、または８００ｍｇの単回用量を１日１回受容した。１００ｍｇ用量コホートの被験者は、期間１に絶食状態で化合物Ａの初回投与を受け、７日間のウォッシュアウト後、期間２に高脂肪高カロリーの食事を開始してから３０分後に第２の用量を受けた。時間ゼロから無限大までの曲線下面積（ＡＵＣ）（ＡＵＣ_ｉｎｆ）、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）、最大濃度の時間（Ｔ_ｍａｘ）、および半減期を含むＰＫパラメータを計算するために、連続採血が収集された。治療に起因する有害事象（ＴＥＡＥ）を含む安全対策を評価した。

結果
・参加者の人口統計は、コホートによって十分にバランスが取れていた（表１）。
・図１１および表２において見ることができるように、化合物Ａの血漿濃度は、用量依存的な様式で増加した。
・ＡＵＣ_ｉｎｆおよびＣ_ｍａｘは、用量に比例して増加した（図１２および１３、表３および４）。
・１００ｍｇの投与後、最小限の食物効果が観察された（表４）。
・化合物Ａは一般的に安全であり、６つの用量コホートすべてで忍容性が良好であった。
・２９のＴＥＡＥが観察され、すべてのＴＥＡＥは軽度であった（グレード１）。
・上位３つの最も一般的なＴＥＡＥは、頭痛、上気道感染症、および立ちくらみであった（各ＴＥＡＥでそれぞれ２回発生）。
・薬物関連のＴＥＡＥなし、深刻なＡＥ（ＳＡＥ）なし。
・ＴＥＡＥはすべてのコホートに均等に分散された。

化合物Ａの全身曝露は用量依存的な様式で増加し、用量にほぼ比例していた。ＰＫの結果は、被験者間のばらつきが低から中程度であることを示した。高脂肪、高カロリーの食事後の化合物Ａ ＰＫは、空腹時の状態と同様であった。化合物Ａの１日１回の投与は、中等度または重度のＴＥＡＥがなく、薬物関連ＴＥＡＥがなく、ＳＡＥがなく、そして用量制限毒性がなく、一般に忍容性が良好であった。結果は、予測されたようなＰＫプロファイル、および化合物Ａが遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）の予防的治療のための強力で安全な経口血漿カリクレイン阻害剤であることを実証した。

本発明は、上記の実施例を参照して説明されてきたが、修正および変形は、本発明の技術思想および範囲内に包含されることが理解される。したがって、本発明は、以下の特許請求の範囲によってのみ限定される。

Claims (23)

1. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物を患者に投与することを含む、治療を必要とする患者の血管浮腫を治療する方法。
2. 血管浮腫が遺伝性血管浮腫である、請求項１に記載の方法。
3. 組成物が毎日投与される、請求項１または２に記載の方法。
4. 組成物が１日１回または２回投与される、請求項３に記載の方法。
5. 組成物が経口投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約３００ｍｇ／日から約８００ｍｇ／日までの量で投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
7. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約３００ｍｇ／日、約３５０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される、請求項６に記載の方法。
8. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約３００ｍｇの量で投与される、請求項６に記載の方法。
9. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、１日あたり２回投与される、請求項８に記載の方法。
10. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約４００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約５５０ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日、約６５０ｍｇ／日、約７００ｍｇ／日、約７５０ｍｇ／日、または約８００ｍｇ／日の量で投与される、請求項６に記載の方法。
11. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約４００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
12. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約４５０ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
13. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約５００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
14. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約５５０ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
15. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約６００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
16. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約６５０ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
17. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約７００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
18. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約７５０ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
19. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、約８００ｍｇ／日の量で投与される、請求項１０に記載の方法。
20. Ｎ−（（６−アミノ−２，４−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（（３−クロロキノリン）−６−イル）メチル）イソニコチンアミドが、１日あたり１回投与される、請求項１０〜１８のいずれか一項に記載の方法。
21. 組成物が即時放出のために製剤化される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 組成物が錠剤またはカプセルとして製剤化される、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 組成物が少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。

Images