JP2021073225A

JP2021073225A - アデノシン誘導体を含む非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症の予防及び治療用薬学的組成物

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Publication number: JP2021073225A
Application number: JP2021006707A
Authority: JP
Inventors: サンクイ; Sang Koo Lee; チョンウパク; Cohng Woo Park
Original assignee: Future Medicine Co Ltd
Current assignee: Future Medicine Co Ltd
Priority date: 2016-10-31
Filing date: 2021-01-19
Publication date: 2021-05-13
Anticipated expiration: 2037-10-23
Also published as: EP3533452A1; WO2018080127A1; US20220143029A1; EP3533452A4; CA3042181A1; US20200046711A1; KR101709307B1; CN109906083B; AU2017349214A1; JP7175525B2; CN109906083A; TW201828949A; AU2017349214B2; JP6912562B2; TWI741055B; JP2019535659A; CA3042181C; US11266650B2; CN113616659A

Abstract

【課題】肝疾患の予防または治療用薬学的組成物を提供する。
【解決手段】下記構造式の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症からなる群から選択される少なくとも１種の肝疾患の予防または治療用薬学的組成物である。

[ＡはＳ；Ｒはハロゲンで置換されたベンジル；ＹはＨまたはハロゲン元素]
【選択図】図７

Description

本発明は、肝疾患の予防または治療、さらには、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維化及
び肝硬変症の予防または治療に有用に使われるアデノシン誘導体を含む薬学的組成物に関
する。

アデノシン（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）は、特殊な細胞膜の受容体を通じて多くの生理学的
機能を行う物質であって、細胞外に存在するアデノシンは、多くの生理学的体系で神経伝
達物質として作用するが、一般的に、与えられた器官の過多活動を補償し、ストレスの有
害な効果から保護する作用を行う（Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｋ．Ａ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｅ
ｄ．Ｃｈｅｍ．，３５，４０７−４２２，１９９２）。このような作用は、細胞内または
細胞外のＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）が分解されて生成さ
れたアデノシンによる細胞のエネルギー要求を減らし、酸素の供給を増加させようとする
部分的に生成された陰性フィードバックループ（ｎｅｇａｔｉｖｅｆｅｅｄｂａｃｋ
ｌｏｏｐ）によるものである。アデノシンは、脳、心臓、腎臓のような必須的な器官の恒
常性保持のために重要であり、例えば、脳に外部からアデノシンアゴニスト（ａｇｏｎｉ
ｓｔ）を投与すれば、神経保護作用があることが証明されており、疼痛、認知、運動また
は睡眠にもかかわっていることが知られている。

アデノシン受容体（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ）は、現在まで薬理学的研
究及び分子クローニングを通じて、それぞれＰ１とＰ２受容体とに分類される。Ｐ１受容
体は、アデノシンが基質として作用し、Ｐ２受容体は、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＵＴＰ及びＵＤ
Ｐが基質として作用して、生理活性を発現する。そのうちから、Ｐ１受容体は、４個の互
いに異なるサブタイプのアデノシン受容体が確認され、リガンド（ｌｉｇａｎｄ）に対す
る親和力、体内分布、作用経路などによって、Ａ_１、Ａ_２またはＡ_３に分類され、Ａ_２は
、再びＡ_２ＡとＡ_２Ｂとに分類される。これらアデノシン受容体は、Ｇタンパク質共役受
容体（Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ）群の一部類であって、
アデノシンＡ_１、Ａ_２Ａ及びＡ_２Ｂ受容体は、多くの選択的なリガンドを使用して薬理学
的に確認されているが、アデノシンＡ_３受容体は、１９９２年に最初に明らかになった受
容体（Ｚｈｏｕ，Ｑ．Ｙ，ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，Ｕ
ＳＡ，８９，７４３２−７４３６，１９９２）であって、この受容体の病態生理学的な機
能を確認するために多くの研究がなされている。

アデノシンＡ_１及びＡ_２受容体アゴニストは、主にアデノシンの誘導体であって、血圧
降下剤、精神病治療剤、不整脈治療剤、脂肪代謝抑制剤（糖尿病治療剤）、脳保護剤とし
て多く研究され、その拮抗剤（ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）は、キサンチン（ｘａｎｔｈｉｎ
ｅ）誘導体であるか、多様な二環式が接合されたものであって、喘息治療剤、抗うつ剤、
不整脈治療剤、腎臓保護剤、パーキンソン病治療剤、知能開発剤などとして開発されてい
る。それにも拘らず、現在商品化されたものは、上室性頻拍（ｓｕｐｒａｖｅｎｔｒｉｃ
ｕｌａｒｔａｃｈｙｃａｒｄｉａ）の治療目的として使用中であるアデノシン自体と心
臓手術後に来る血液凝固を防止するために、ワーファリン（ｗａｒｆａｒｉｎ）の補助剤
として使用中であるアデノシン運搬阻害剤であるジピリダモール（ｄｉｐｙｒｉｄａｍｏ
ｌｅ）だけである。このように商品化が円滑ではない理由は、アデノシン受容体が全身に
広がっており、受容体の活性化時に伴われる多様な薬理作用のためであり、すなわち、所
望の組織のアデノシン受容体のみを活性化させることができる化合物がないためである。

アデノシン受容体のうち、アデノシンＡ_３受容体は、広く知られたアデノシンＡ_１及び
Ａ_２の受容体とは異なって、最も最近に明らかになった受容体であって、その役割が多く
明らかになっておらず、選択的な受容体調節剤の開発のために多くの研究が進行中である
。アデノシンＡ_３受容体を薬理学的に研究するために、［^１２５Ｉ］ＡＢＡ（Ｎ^６−（４
−アミノ−３−［^１２５Ｉ］ヨードベンジル）−アデノシン、Ｎ^６−（４−ａｍｉｎｏ−
３−［^１２５Ｉ］ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）、［^１２５Ｉ］ＡＰＮ
ＥＡ（Ｎ^６−２−（４−アミノ−３−［^１２５Ｉ］ヨードフェニル）−エチルアデノシン
、Ｎ^６−２−（４−ａｍｉｎｏ−３−［^１２５Ｉ］ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）−ｅｔｈｙｌ
ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）または［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ（（Ｎ^６−（４−アミノ−３−
［^１２５Ｉ］ヨードベンジル）−アデノシン−５’−Ｎ−メチルカルボキサミド、Ｎ^６−
（４−ａｍｉｎｏ−３−［^１２５Ｉ］ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ−５
’−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）である３個の放射性標職されたリガンド
が用いられている。前記放射性標職されたリガンドを利用した薬理学的に研究を通じて、
アデノシンＡ_３受容体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣｈｉｎｅｓｅＨａｍｓｔｅｒ
Ｏｖａｒｙ、ＣＨＯ）細胞に発現させた時、Ａ_３受容体は、ＡＴＰからｃＡＭＰを生成
させる酵素であるアデニリルシクラーゼ（ａｄｅｎｙｌｙｌｃｙｃｌａｓｅ）の抑制作
用があり、Ａ_３受容体は、アゴニストによって活性化される時、脳でホスファチジルイノ
シトール（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ）を分解させて、イノシトール
リン酸（ｉｎｏｓｉｔｏｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ）とＤＡＧとを生成させる酵素であるＧ
ＴＰ−依存性ホスホリパーゼＣ（Ｇｕａｎｏｓｉｎｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｄｅ
ｐｅｎｄｅｎｔｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＣ）を活性化させるという事実が証明さ
れている（Ｒａｍｋｕｍａｒ，Ｖ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８，
１６８８７１−１６８８９０，１９９３；Ａｂｂｒａｃｃｈｉｏ，Ｍ．Ｐ．ｅｔａｌ．
，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４８，１０３８−１０４５，１９９５）。このような
発見は、脳虚血（ｂｒａｉｎｉｓｃｈｅｍｉａ）でのＡ_３受容体活性化作用による反応
経路の可能性を説明可能にするが、その理由は、このような２次伝達物質体系が脳虚血で
の神経傷害の反応経路を意味するためである。また、Ａ_３受容体のアゴニストは、炎症媒
介体である腫瘍壊死因子ＴＮＦ−α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ）の
放出を抑制し、やはり炎症媒介体であるＭＩＰ−１α、インターロイキン−１２（ｉｎｔ
ｅｒｌｅｕｋｉｎ−１２）及びインターフェロン−γ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−γ）の生
成を抑制し、癲癇のような脳疾患に対する保護効果だけでなく、心臓に対しても保護効果
があると知られている。一方、アデノシンＡ_３受容体の不活性化は、肥満細胞（ｍａｓｔ
ｃｅｌｌ）からヒスタミンのような炎症誘発因子の放出を引き起こせ、気管支を収縮す
る作用を行い、免疫細胞で細胞死（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）を引き起こせる。したがって、
アデノシンＡ_３拮抗剤は、消炎剤及び喘息治療剤としての開発可能性がある。したがって
、薬物学的選択性を有した化合物を開発することができるならば、喘息、炎症、脳虚血、
心臓疾患、癌など多様な疾病に対する新たな治療薬物の開発が可能であると考えられる。

現在まで研究開発された物質のうち、代表的なヒトアデノシンＡ_３アゴニストは、ヌク
レオシド系であるＮ^６−（３−ヨードベンジル）−５’−（Ｎ−メチルカルバモイル）−
アデノシン（Ｎ^６−（３−ｉｏｄｏｂｅｎｚｙｌ）−５’−（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂ
ａｍｏｙｌ）−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ；ＩＢ−ＭＥＣＡ）及びＮ^６−（３−ヨードベンジル
）−２−クロロ−５’−（Ｎ−メチルカルバモイル）−アデノシン（Ｎ^６−（３−ｉｏｄ
ｏｂｅｎｚｙｌ）−２−ｃｈｌｏｒｏ−５’−（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）
−ａｄｅｎｏｓｉｎｅ；ＣＩ−ＩＢ−ＭＥＣＡ）であって、アデノシンＡ_１及びＡ_２受容
体に比較して、Ａ_３受容体に対して高い親和力及び選択性を有する物質である。一方、高
い親和力及び選択性を示すアデノシンＡ_３拮抗剤は、ほとんどヌクレオシド骨格ではない
非プリン（ｎｏｎｐｕｒｉｎｅ）系の二環式化合物であって、ヒトの受容体では高い活性
を示しているが、ラットのＡ_３受容体に対しては活性が弱いか、ほとんどないので、臨床
適用が可能な薬物の開発のために必須的な動物実験が不可能であるという短所が指摘され
ている（Ｂａｒａｌｄｉ，Ｐ．Ｇ．ｅｔａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１２
，１３１９−１３２９，２００５）。しかし、非プリン系の二環式化合物に比べて、ヌク
レオシド系の化合物は、種間に関係なく、高い親和力と選択性とを示すために、動物実験
が容易な長所があるので、新薬としての開発可能性が非常に大きいと考えられ、したがっ
て、この系列の選択的Ａ_３拮抗剤の導出が至急な課題であると言える。

本発明者らは、多様な先行研究の分析を通じて、アデノシンＡ_３受容体のアゴニストと
して作用するためには、その代表物質であるＩＢ−ＭＥＣＡとＣＩ−ＩＢ−ＭＥＣＡとの
構造のうち、糖の５位のＮ−メチルカルバモイル基が必然的に存在しなければならず、塩
基部分は、プリンの６番位置がアリールアミノ基またはアルキルアミノ基で置換されてい
なければならないということが分かった。したがって、糖の５位のＮ−メチルカルバモイ
ル基は、水素結合を通じて受容体のアゴニスト作用に必須的な構造変化（ｃｏｎｆｏｒｍ
ａｔｉｏｎａｌｃｈａｎｇｅ）を起こすので（Ｋｉｍ，Ｓ−Ｋ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍ
ｏｌ．Ｇｒａｐｈ．Ｍｏｄｅｌ．，２５，５６２−５７７，２００６）、糖の５位のＮ−
メチルカルバモイル基を除去した物質を合成すれば、Ａ_３受容体拮抗剤として開発される
と考えられる。

一方、肝疾患（ｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ）のうち、非アルコール性脂肪肝炎（Ｎｏ
ｎａｌｃｈｏｌｉｃｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ；ＮＡＳＨまたはＮｏｎ−ａｌｃ
ｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ；ＮＡＦＬＤ）とは、飲酒では
ない肥満、糖尿病、高脂血症、薬物などから起因する疾患である。

非アルコール性脂肪肝炎は、肝細胞内に脂肪が蓄積されながら肝細胞の変性／壊死が発
生し、これによる炎症及び肝線維化（ｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ）によって肝硬化（
ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ）及び肝癌（ｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒ）に発展するために、全世界
的に深刻な疾患として認識されている。

これにより、本発明者らは、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症の予防及
び治療剤としてアデノシンＡ_３受容体拮抗剤を最初に研究して、肝組織の脂肪症（ｓｔｅ
ａｔｏｓｉｓ）、炎症（ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）及びバルーニング（ｂａｌｌｏｏｎ
ｉｎｇ）を抑制して、非アルコール性脂肪肝炎の緩和活性があり、肝組織の纎維化に対す
る抑制効能がある新規なアデノシン誘導体化合物を合成することにより、本発明を完成し
た。

本発明が解決しようとする課題は、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症、肝硬変症など
の肝疾患を予防または治療することができるアデノシンＡ_３受容体拮抗剤として作用する
アデノシン誘導体を含む薬学的組成物を提供するところにある。

本発明の課題は、前述した技術的課題に制限されず、言及されていないさらに他の技術
的課題は、下記の記載から当業者に明確に理解されるであろう。

前述した課題を解決するための本発明の一実施例による肝疾患の予防または治療用薬学
的組成物は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分
として含む。

（前記式において、

Ａは、Ｓであり、

Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ_６〜Ｃ_１０のア
リールで置換された直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_５のアルキル、非置換されるか、独立
して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_４のアルコキシ基が、
１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジル
であり、

Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。

前記肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症のうち１つ以上を含み
うる。

前記化学式１は、下記化学式Ａで表される化合物であり得る。

。

前述した課題を解決するための本発明の他の実施例による肝疾患の予防または治療用経
口投与剤は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む。

（前記式において、

Ａは、Ｓであり、

Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。

また、メチルセルロース（Ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ、ＭＣ）、ジメチルスル
ホキシド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ、ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコー
ル（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ、ＰＥＧ）、及び蒸留水からなる群から選
択される１つ以上を含む賦形剤をさらに含みうる。

前記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、粉末状にカプセル
剤内に充填されるものである。

前記肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎及び肝線維症のうち１つ以上を含みうる。

。

その他の実施例の具体的な事項は、詳細な説明及び図面に含まれている。

本発明のアデノシン誘導体は、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症を緩和
する効能を有するアデノシンＡ_３受容体拮抗剤として作用し、経口投与時に、薬物の吸収
に優れ、体内毒性がほとんどない生体親和的な物質であるために、肝疾患の予防及び治療
に非常に適した薬学的組成物として使われる。

本発明の実施例による効果は、以上で例示された内容によって制限されず、さらに多様
な効果が、本明細書内に含まれている。

アゴニストとしてＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡを処理したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞に対して、本発明の実施例４の化合物の拮抗効果を示す図面である。本発明の化合物（実施例２、実施例３及び実施例４）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。本発明の化合物（実施例１及び実施例６）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。本発明の化合物（実施例５、実施例７及び実施例８）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。本発明の化合物（実施例１５及び実施例１６）の動物実験による抗炎症活性を示す図面である。実験例９で実験動物の肝の脂肪症程度を数値化して示すグラフである。実験例９で実験動物の肝の炎症程度を数値化して示すグラフである。実験例９で実験動物の肝のバルーニング程度を数値化して示すグラフである。実験例９で実験動物の肝の脂肪症、炎症及びバルーニングに対する数値を総合して非アルコール性脂肪肝炎に対する活性を算出したグラフである。実験例９で実験動物の肝の纎維症発生程度を観察した顕微鏡写真（ｐｈｏｔｏｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ）である。実験例９で実験動物の肝の纎維症発生面積を示すグラフである。実験例１１（１１−１及び１１−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。実験例１２（１２−１及び１２−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。実験例１３の血中濃度−時間データから得たグラフである。実験例１４（１４−１、１４−２及び１４−３）の血中濃度−時間データから得たグラフである。実験例１５（１５−１及び１５−２）の血中濃度−時間データから得たグラフである。実験例１７でＡ_３ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ（Ａ_３ＡＲ）の発現をリアルタイム重合酵素連鎖反応（Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ、ｒｅａｌ−ｔｉｍｅＰＣＲ）を通じて確認した結果を示すグラフである。実験例１８でＴｉｍｐｌ、Ｃｏｌｌａｌ及びＡｃｔａ２（ｏｔＳＭＡ）の発現をリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ−ｔｉｍｅＰＣＲ）で分析した結果を示すグラフである。

本研究は、韓国保健福祉部の財源で韓国保健産業振興院の保健医療技術研究開発事業支
援によってなされたものである（課題固有番号：ＨＩ１７Ｃ−２２６２−０３００１７）
。

（Ｔｈｉｓｒｅｓｅａｒｃｈｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙａｇｒａｎｔ
ｏｆｔｈｅＫｏｒｅａＨｅａｌｔｈＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲ＆ＤＰｒｏｊｅ
ｃｔｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅＫｏｒｅａＨｅａｌｔｈＩｎｄｕｓｔｒｙＤｅｖ
ｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＫＨＩＤＩ）、ｆｕｎｄｅｄｂｙｔｈｅ
ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ＆Ｗｅｌｆａｒｅ、Ｒｅｐｕｂｌｉｃｏｆ
Ｋｏｒｅａ（ｇｒａｎｔｎｕｍｂｅｒ：ＨＩ１７Ｃ−２２６２−０３００１７））。

［本発明を支援した研究開発事業］

課題固有番号：ＨＩ１７Ｃ−２２６２−０３００１７

部署名：保健福祉部

研究管理専門機関：ピチュメディシン株式会社

研究事業名：保健医療技術研究開発事業

研究課題名：臨床１相ＩＮＤ承認のためのＣＭＣ、毒性及び薬動学を含んだ非臨床試験完
了

寄与率：１／１

主管機関：韓国漢陽大学校産学協力団

研究期間：２０１７．０８．２５−２０１８．１２．３１．

以下、本発明を詳しく説明する。

本発明は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分
として含有するアデノシン誘導体を提供する。

前記式において、

Ａは、ＯまたはＳであり、

Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である。

望ましくは、

前記Ａは、ＯまたはＳであり、

前記Ｒは、メチル、エチル、プロピル、ナフチルメチル、ベンジル、独立して、または
選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、及びＣ_１〜Ｃ_３のアルコキシ基からなる群から選択される
１または２以上の置換基で置換されたベンジル、またはトルイル酸（ｔｏｌｕｉｃａｃ
ｉｄ）であり、

前記Ｙは、ＨまたはＣｌである。

さらに望ましくは、

前記Ａは、ＯまたはＳであり、

前記Ｒは、メチル、エチル、１−ナフチルメチル、ベンジル、２−クロロベンジル、３
−フルオロベンジル、３−クロロベンジル、３−ブロモベンジル、３−ヨードベンジル、
２−メトキシ−５−クロロベンジル、２−メトキシベンジルまたは３−トルイル酸であり
、

前記Ｙは、ＨまたはＣｌである。

本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体の望ましい例は、次の通りであ
る。

１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミノ）
−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−
９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−
９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−
９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

５）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ）−
９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシベン
ジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ）
−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチルア
ミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

９）３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロキシテトラ
ヒドロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸；

１０）２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフ
ェン−３，４−ジオール；

１１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プ
リン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

１２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリ
ン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

１３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリ
ン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

１４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリ
ン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール；

１５）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ
−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール；及び

１６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）
−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオール。

本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体は、薬学的に許容可能な塩の形
態で使用することができる。前記塩としては、薬学的に許容される多様な有機酸または無
機酸によって形成された酸付加塩が有用である。適した有機酸としては、例えば、カルボ
ン酸、ホスホン酸、スルホン酸、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、グリコー
ル酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、リンゴ酸、酒石酸、シトロン酸、グルタ
ミン酸、アスパラギン酸、マイレン酸、安息香酸、サリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸
、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル
硫酸などを使用し、適した無機酸としては、例えば、塩酸、硫酸などのハロゲン酸または
リン酸などを使用することができる。

本発明による前記化学式１で表されるアデノシン誘導体は、薬学的に許容可能な塩だけ
ではなく、通常の方法によって製造可能なあらゆる塩、水化物及び溶媒化物をいずれも含
みうる。

また、本発明は、前記化学式１で表されるアデノシン誘導体を製造する方法を提供する
。

具体的に、下記の反応式１に示されたように、

化学式２の化合物を出発物質として、ルイス酸触媒の存在下でシリル化されたプリン化
合物と反応させて、化学式３のβ−アノマー化合物を得る段階（段階１）；前記段階１で
得た化学式３の化合物に塩酸を添加して、化学式４のジオール化合物を得る段階（段階２
）；及び前記段階２で得た化学式４のジオール化合物を塩基触媒下でアミン化合物と反応
させて、アデノシン誘導体を得る段階（段階３）；を含んでなる化学式１のアデノシン誘
導体の製造方法を提供する。

前記反応式１において、Ａ、Ｒ及びＹは、化学式１で定義したようである。

以下、本発明の製造方法を段階別に詳細に説明する。

本発明による段階１は、化学式２の化合物を出発物質として、ルイス酸触媒の存在下で
シリル化されたプリン化合物と反応させて、化学式３のβ−アノマー化合物を得る段階で
ある。

前記化学式３の化合物は、化学式２の化合物とシリル化されたプリン化合物とをルイス
酸存在下で反応させて得られるが、前記ルイス酸としては、トリメチルシリルトリフルオ
ロメタンスルホナート（ＴＭＳＯＴｆ）を使用することができる。また、前記段階１の溶
媒としては、ジクロロエタン、クロロホルム、アセトニトリル、ジクロロメタンなどを使
用することが望ましい。その中でも、ジクロロエタンがさらに望ましい。前記シリル化さ
れたプリン化合物は、化学式５のプリン化合物をヘキサメチルジシラザン（ＨＭＤＳ）及
び硫酸アンモニウム触媒下で反応させて得られる。

本発明による段階２は、前記段階１で得た化学式３の化合物に塩酸を添加して、化学式
４のジオール化合物を得る段階である。この際、塩酸の代わりに、酢酸、硫酸、ｐ−トル
エンスルホン酸を使用することができる。

本発明による段階３は、前記段階２で得た化学式４のジオール化合物を塩基触媒下でア
ミン化合物と反応させて、アデノシン誘導体を得る段階である。

前記塩基触媒としては、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジ
ン、１，４−ジオキサンなどを使用することが望ましく、その中でも、トリエチルアミン
がさらに望ましい。また、段階３の溶媒としては、メタノール及びエタノールのような低
級アルコールあるいは１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン及びクロロホルムのよう
な溶媒が望ましい。

本発明のアデノシン誘導体の製造方法において、出発物質である化学式２の化合物は、
置換基Ａの種類によって、下記の反応式２または反応式３の方法で製造可能である。

Ａが硫黄（Ｓ）である場合、下記の反応式２に示されたように、

化学式６のＤ−マンノース化合物を酸触媒下で２，２−ジメトキシプロパンと反応させ
て、化学式７のジアセトニド化合物を得る段階（段階ａ_１）；前記段階ａ_１で得た化学式
７の化合物を還元剤存在下に開環させて、化学式８のジオール化合物を得る段階（段階ａ
_２）；前記段階ａ_２で得た化学式８の化合物をメシル化して、化学式９のジメシル化合物
を得る段階（段階ａ_３）；前記段階ａ_３で得た化学式９の化合物を環化させて、化学式１
０のチオ糖化合物を得る段階（段階ａ_４）；前記段階ａ_４で得た化学式１０の化合物を選
択的に加水分解させて、化学式１１のジオール化合物を得る段階（段階ａ_５）；及び前記
段階ａ_５で得た化学式１１の化合物を触媒存在下に化学式２ａのアセテート化合物を得る
段階（段階ａ_６）；を含んでなる。

（前記反応式２において、化合物２ａは、化学式２の化合物である）。

以下、本発明の化学式２の化合物の製造方法を段階別に詳細に説明する。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_１は、化学式６のＤ−マンノー
ス化合物を酸触媒下で２，２−ジメトキシプロパンと反応させて、化学式７のジアセトニ
ド化合物を得る段階である。

前記化学式７の化合物は、化学式６のＤ−マンノースを酸触媒及び無水酢酸存在下に２
，２−ジメトキシプロパンと反応させて得られるが、この際、前記酸触媒としては、濃い
硫酸または塩酸ガスのような無機酸、ｐ−トルエンスルホン酸のような有機酸を使用する
ことができる。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_２は、前記段階ａ_１で得た化学
式７の化合物を還元剤存在下に開環させて、化学式８のジオール化合物を得る段階である
。

前記化学式８の化合物は、還元剤である水素化ホウ素ナトリウムと反応させて得られる
。前記水素化ホウ素ナトリウムの代わりに、水素化アルミニウムリチウムのようなメタル
ハイドライド、亜硫酸ナトリウムなどを使用することができる。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_３は、前記段階ａ_２で得た化学
式８の化合物をメシル化して、化学式９のジメシル化合物を得る段階である。

前記化学式９の化合物は、化学式８の化合物をメタンスルホニルクロリド（ＭｓＣｌ）
と反応させて得られるが、この際、反応溶媒としては、エチルエーテル、石油エーテル、
ジクロロメタン、テトラヒドロフラン及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような不活性
溶媒を使用することが望ましい。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_４は、前記段階ａ_３で得た化学
式９の化合物を環化させて、化学式１０のチオ糖化合物を得る段階である。

前記化学式１０の化合物は、化学式９の化合物を硫化ナトリウムと反応させて得られる
が、この際、硫化ナトリウムの代わりに、メチルチオアセテートなどのチオエステルと置
換反応後、ナトリウムアルコキシドなどを反応させて得られることもある。前記段階ａ_４
において、溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどを
使用することができる。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_５は、前記段階ａ_４で得た化学
式１０の化合物を選択的に加水分解させて、化学式１１のジオール化合物を得る段階であ
る。

前記化学式１１の化合物は、化学式１０の化合物を酢酸を用いて５，６−アセトニドを
選択的に加水分解して得られるが、この際、酢酸の代わりに、硫酸、塩酸、ｐ−トルエン
スルホン酸などを使用することもできる。

本発明の化学式２の化合物の製造方法による前記段階ａ_６は、前記段階ａ_５で得た化学
式１１の化合物を触媒存在下に化学式２ａのアセテート化合物を得る段階である。

前記化学式２ａの化合物は、化学式１１の化合物をレッドテトラアセテート（Ｐｄ（Ｏ
Ａｃ）_４）と反応させて得られる。

また、本発明による出発物質２において、Ａが酸素（Ｏ）である場合、下記の反応式３
に示されたように、

前記出発物質である化学式２の化合物は、下記の反応式３に示されたように、

化学式１２の化合物を還元剤と反応させて、化学式１３のラクトール化合物を得る段階
（段階ｂ_１）；及び前記段階ｂ_１で得た化学式１３の化合物を無水酢酸と反応させて、化
学式２ｂのアセテート化合物を得る段階（段階ｂ_２）；を含んでなる。

（前記反応式３において、化合物２ｂは、化学式２の化合物である）。

以下、本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法を段階別に詳細に説明する。

本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法による前記段階ｂ_１は、化学式１２の
化合物を還元剤と反応させて、化学式１３のラクトール化合物を得る段階である。

前記化学式１３の化合物は、容易に合成して得られる化学式１２の化合物を水素化ジイ
ソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ）触媒を用いて還元させて得られる。

本発明の化学式２の化合物のさらに他の製造方法による前記段階ｂ_２は、化学式１３の
化合物を無水酢酸と反応させて、化学式２ｂのアセテート化合物を得る段階である。

前記化学式２の化合物は、化学式１３のラクトール化合物を無水酢酸と反応させて得ら
れる。

また、本発明は、化学式１で表されるアデノシン誘導体またはその薬学的に許容可能な
塩を有効成分として含有するアデノシンＡ_３拮抗剤を提供する。

さらに、本発明は、化学式１で表されるアデノシン誘導体またはその薬学的に許容可能
な塩を有効成分として含有する炎症性疾患の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。

アデノシンＡ_３受容体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞に発現させた時、
Ａ_３受容体は、ＡＴＰからｃＡＭＰを生成させる酵素であるアデニリルシクラーゼの抑制
作用があり、Ａ_３受容体は、アゴニストによって活性化される時、脳でホスファチジルイ
ノシトールを分解させて、イノシトールリン酸とＤＡＧとを生成させる酵素であるＧＴＰ
−依存性ホスホリパーゼＣを活性化させるという事実が証明されている（Ｒａｍｋｕｍａ
ｒ，Ｖ．ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８，１６８８７１−１６８８９
０，１９９３；Ａｂｂｒａｃｃｈｉｏ，Ｍ．Ｐ．ｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌ．，４８，１０３８−１０４５，１９９５）。前記２次伝達物質体系が脳虚血での神
経傷害の反応経路を意味するので、このような発見は、脳虚血でのＡ_３受容体活性化作用
による反応経路を説明することができる。また、アデノシンＡ_３アゴニストは、炎症媒介
体である腫瘍壊死因子ＴＮＦ−αの放出を抑制し、やはり炎症媒介体であるＭＩＰ−１α
、インターロイキン−１２及びインターフェロン−γの生成を抑制し、癲癇のような脳疾
患に対する保護効果だけではなく、心臓に対しても保護効果があると知られている。また
、アデノシンＡ_３受容体の不活性化は、肥満細胞からヒスタミンのような炎症誘発因子の
放出を引き起こせ、気管支を収縮させる作用を行い、兔疫細胞で細胞死を引き起こせる。
したがって、アデノシンＡ_３拮抗剤は、消炎剤及び喘息治療剤としての開発可能性がある
。

本発明のアデノシン誘導体のヒトアデノシン受容体（ｈＡＲ）に対する結合親和力及び
選択性を評価するために行った受容体結合親和力（Ｂｉｎｄｉｎｇａｆｆｉｎｉｔｙ）
の測定実験において（実験例１参照）、本発明のアデノシン誘導体は、ヒトアデノシンＡ
_３（ｈＡ_３ＡＲ）受容体に対して高い結合親和力を示し、アデノシンＡ_１及びＡ_２Ａ受
容体に対しては低い親和力、すなわち、大きな選択性を示した。特に、本発明の実施例１
２の化合物は、ｈＡ_３受容体に対して、Ｋ_ｉ値が１．５０±０．４０ｎＭに最も高い親和
力を示し、その次に、実施例２の化合物（Ｋ_ｉ＝１．６６±０．９０ｎＭ）、実施例１４
の化合物（Ｋ_ｉ＝２．５０±１．００ｎＭ）、実施例１０の化合物（Ｋ_ｉ＝３．６９±０
．２５ｎＭ）及び実施例４の化合物（Ｋ_ｉ＝４．１６±０．５０ｎＭ）の順に結合親和力
が高く表われた。本発明の実施例４の化合物は、また、チャイニーズハムスター卵巣（Ｃ
ＨＯ）細胞から発現されたラットのアデノシンＡ_３受容体に対しても高い親和力（Ｋ_ｉ＝
３．８９±１．１５ｎＭ）を示した。また、４’−Ｏであるオキソヌクレオシド形態を帯
びるアデノシン誘導体である実施例１５及び実施例１６の化合物も、高い結合親和力と選
択性とを示した（表１参照）。

また、本発明のアデノシン誘導体の抗炎症活性を調査するために行った実験で（実験例
３〜実験例６参照）、対照群として用いられたヒドロコルチゾンに比べれば、少ない変化
であるが、本発明のアデノシン誘導体が、抗炎症活性を有するということが分かった。

実施例２〜実施例４の化合物をアセトンに希釈して処理した後、抗炎症活性を調査した
結果からＴＰＡによって誘導されたマウス耳浮腫が、化合物４の処理によって浮腫減少効
果があることを確認することができた（図２参照）。また、本発明の実施例１及び実施例
６の化合物をアセトンに希釈して処理した後、調査した抗炎症活性は、実施例２〜実施例
４の化合物よりも４倍以上格段に増加した阻害率を示すことが分かった（図３参照）。

蒸留水とアセトンとの混合溶媒（１：４）に０．５％に希釈した本発明の実施例５〜実
施例７の化合物を用いて調査した抗炎症活性は、それぞれ１７％、３４％及び５３％の炎
症阻害率を示した（図４参照）。そして、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）とアセトン
との混合溶媒（１：９）に０．５％に希釈した本発明の実施例１５及び実施例１６の化合
物を用いて調査した炎症阻害率は、それぞれ５９％及び７９％に観察されることにより（
図５参照）、本発明のアデノシン誘導体化合物が、抗炎症活性を有するということを確認
することができた。

したがって、本発明の化学式１で表されるアデノシン誘導体は、アデノシンＡ_３受容体
に対して高い結合親和力及び選択性を示すので、優れたアデノシンＡ_３拮抗剤として有用
に用いられうる。また、本発明のアデノシン誘導体は、アデノシンＡ_３受容体に対して拮
抗作用して抗炎症活性を示すので、炎症性疾患の予防及び治療剤として利用できる。

また、本発明による前記炎症性疾患としては、変質性炎症、滲出性炎症、化膿性炎症、
出血性炎症または増殖性炎症などの急性及び慢性炎症疾患を含む。

以下、本発明のアデノシン誘導体またはその薬学的に許容可能な塩の組成物において、
剤型方法及び賦形剤を説明するが、これら例のみで限定されるものではない。本発明の組
成物は、全身的または局部的に投与される。

本発明の誘導体を剤形化する場合には、通常の充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊
剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調剤することができる。経口投与の
ための固型剤型には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、このような
固型製剤は、１つ以上の化学式１の化合物に少なくとも１つ以上の賦形剤、例えば、澱粉
、炭酸カルシウム、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）またはラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）
、ゼラチンなどを混ぜて調剤することができる。また、単純な賦形剤の以外に、ステアリ
ン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も使用することができる。経口のための液状剤
型としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく使われる単純
希釈剤である水、流動パラフィンの以外に、さまざまな賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤
、芳香剤、保存剤などが含まれうる。

非経口投与のための剤型には、注射剤、乳剤、吸入剤、座剤などが含まれる。注射剤は
、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコー
ル、オリーブオイルのような植物性油、オレイン酸エチルのようなエステルなどの滅菌さ
れた水性溶剤、非水性溶剤及び懸濁剤が使われ、座剤の基剤としては、ウイテプゾール（
ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴ−ル、トウイーン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリ
ン脂、グリセロゼラチンなどが使われる。また、局所適用のためには、本発明の化合物を
軟膏やクリームで剤形化することができる。

本発明の組成物の望ましい投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投
与経路及び期間などの多数の因子によって異なるが、当業者によって適切に選択されうる
。望ましくは、本発明の化合物を１日０．００１〜１００ｍｇ／体重ｋｇで、より望まし
くは、０．０１〜３０ｍｇ／体重ｋｇで投与する。投与は、一日に一回投与することもで
き、数回に分けて投与することができる。組成物で本発明の化合物は、全体組成物総重量
に対して０．０００１〜１０重量％、望ましくは、０．００１〜１重量％の量で存在しな
ければならない。また、投与経路は、患者の状態及びその重症度によって変化することが
できる。

本発明は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩を含
むアデノシン誘導体を有効成分として含有する肝疾患の予防及び／または治療用薬学的組
成物を提供する。

肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨまたはＮＡＦＬＤ）、肝線維症（ｌｉｖ
ｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ）及び肝硬変症（ｌｉｖｅｒｃｉｒｒｈｏｓｉｓ）を含むあら
ゆる疾病、疾患、症状などを含みうる。

前記化学式１で表されるアデノシン誘導体の望ましい例は、下記化学式Ａで表される化
合物である（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールであり得る。

。

本発明の肝疾患の予防及び／または治療用薬学的組成物は、経口投与剤で剤形化される
。

経口投与剤は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩
と賦形剤とを含みうる。賦形剤は、メチルセルロース（ＭＣ）、ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、蒸留水（Ｄｉｓｔｉｌｌｅｄｗａｔ
ｅｒ、ＤＷ）、カプセル剤などからなる群から選択される１つ以上を含みうる。賦形剤の
望ましい例は、０．５ｗｔ％のメチルセルロースであり得る。

経口投与剤は、前記化学式１で表される化合物及び／またはその薬学的に許容可能な塩
が粉末状または賦形剤に溶解された溶液状にカプセル剤内に充填されたものである。

本発明の肝疾患の予防及び／または治療用薬学的組成物は、患者に経口投与される。望
ましい投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間など多
数の因子を考慮して適切に選択されうる。

本発明のアデノシン誘導体は、投与量依存的に非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び
肝硬化症を緩和する効能を有するアデノシンＡ_３拮抗剤として作用し（実験例９参照）、
経口投与時の血中濃度及び安定性に優れ（実験例１０）、体内毒性がほとんどない生体親
和的な物質であるために（実験例１１〜実験例１６参照）、肝疾患の予防及び／または治
療に非常に適した薬学的組成物として使われる。

出発物質の製造

＜製造例１＞
（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１
，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造

段階ａ_１．（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（２，２−ジメチル−１，３−ジオ
キソラン−４−イル）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］
ジオキソール−４−オールの製造

アセトン（５０ml）に、Ｄ−マンノース（１．７４ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）と２，２−
ジメトキシプロパン（２．４５ml、１９．５５ｍｍｏｌ）とを添加した後、攪拌混合し、
０℃に冷却した。これに濃い硫酸（０．４５ｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混
合物は、室温で２４時間撹拌した。その混合物にトリエチルアミンを添加して中和させ、
減圧濃縮した。濃縮後、得た混合物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１：１、
ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、白色
固体の目的化合物（１．６１ｇ、９５％）を得た。

ｍｐ１２０．３−１２０．５℃；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ５．３４（ｓ、１Ｈ）、４．７６−４．７９（ｍ、１Ｈ
）、４．５８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．３４−４．３９（ｍ、１Ｈ）、４．１
５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、７．２Ｈｚ）、４．００−４．０８（ｍ、２Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ１１．７１（ｃ０．１１、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２６１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階ａ_２．（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｒ
，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−
イル）メタノールの製造

エタノール（２５ml）に、前記段階ａ_１で製造した（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−
６−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチル−テト
ラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（１．５０ｇ、５．７
６ｍｍｏｌ）を気をつけて分配して添加し、０℃に冷却した。これに水素化ホウ素ナトリ
ウム（ＮａＨＢ_４、４４０ｍｇ、１１．５３ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２時間撹拌した
。その反応混合物を酢酸で中和した後、減圧濃縮した。その混合物を酢酸エチルと水とを
用いて抽出した後、有機層を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）で乾燥し、濾過した後
、再び減圧濃縮した。濃縮後、得た混合物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１
：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って
、シロップ形態の目的化合物（１．３８ｇ、９２％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ４．３３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．６、７．２Ｈｚ）、４
．２４−４．２８（ｍ、１Ｈ）、４．０６−４．１３（ｍ、２Ｈ）、３．９２−３．９７
（ｍ、１Ｈ）、３．７６−３．８５（ｍ、２Ｈ）、３．５９−３．６１（ｍ、１Ｈ）、１
．４８（ｓ、３Ｈ）、１．３８（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３
Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ−３．８８（ｃ０．４４、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２６３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階ａ_３．（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）（（４
Ｓ，５Ｓ）−２，２−ジメチル−５−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１，３−
ジオキソラン−４−イル）メチルメタンスルホン酸の製造

ジクロロメタン（３００ml）とトリエチルアミン（１６３．７５ml、１．１７ｍｏｌ）
との混合物に、前記段階ａ_２で製造した（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキ
ソラン−４−イル）（（４Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチル−
１，３−ジオキソラン−４−イル）メタノール（３８．５２ｇ、１４６．８５ｍｍｏｌ）
と４−ジメチルアミノピリジン（４−ＤＭＡＰ、５．３８ｍｇ、４４．０６ｍｍｏｌ）と
を添加した後、混合し、０℃に冷却した。これにジメタンスルホニルクロリド（４７．５
９ml、５８７．４２ｍｍｏｌ）を気をつけて滴加した。１時間室温で撹拌した後に、その
反応混合物をジクロロメタンで抽出し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ_３）水
溶液で洗浄した。有機層を集める間に無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）で乾燥し、濾
過した後、再び減圧濃縮した。濃縮後、得た褐色シロップ形態のジメシル化合物に対して
、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（５：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目的化合物（５７．８３ｇ、９４
％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ４．７５（ｐｓｅｕｄｏｔ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）
、４．３３−４．４５（ｍ、４Ｈ）、４．０６−４．２０（ｍ、３Ｈ）、３．１２（ｓ、
３Ｈ）、３．０７（ｓ、３Ｈ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３
７（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ３８．３２（ｃ０．２９、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４１９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階ａ_４．（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−４−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラ
ン−４−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキ
ソールの製造

ＤＭＦ（５０ml）に、前記段階ａ_３で製造した（１Ｒ）−（２，２−ジメチル−１，３
−ジオキソラン−４−イル）（（４Ｓ，５Ｓ）−２，２−ジメチル−５−（（メチルスル
ホニルオキシ）メチル）−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチルメタンスルホン酸（
９９３．８０ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を溶解させ、これに硫化ナトリウム（３４８．３０
ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）を添加した後、その混合物を８０℃で夜から朝まで還流撹拌した
。反応完了後、減圧で溶媒を除去し、その残留物を酢酸エチルと水とを用いて抽出した。
有機層を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）で乾燥し、濾過した後、再び減圧濃縮した
。濃縮後、得た残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（８：１、ｖ／ｖ）を展
開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロップ形態の目
的化合物（４５３．０ｍｇ、７８％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ４．９２（ｄｔ、１Ｈ、Ｊ＝１．８、５．６Ｈｚ）、４
．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０、６．０Ｈｚ）、４．２６−４．３０（ｍ、１Ｈ）、４
．０４（ｓ、１Ｈ）、３．７９（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝３．８Ｈｚ）、３．３１−３．３２（ｍ
、１Ｈ）、３．１９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．４、１２．０Ｈｚ）、２．８４（ｄｄ、１Ｈ
、Ｊ＝１．６、１２．０Ｈｚ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３
２（ｄｄ、６Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９６．０４（ｃ０．２０、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２６１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階ａ_５．１−（（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［
３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）エタン−１，２−ジオールの製造

６０％酢酸水溶液（２５０ml）に、前記段階ａ_４で製造した（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）
−４−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２，２−ジメチルテト
ラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール（２１．７８ｇ、８３．６６ｍｍ
ｏｌ）を溶解させ、室温で２時間撹拌した。その反応混合物を減圧で濃縮し、得た残留物
に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（１：２、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用した
シリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、白色固体の目的化合物（１４．８５ｇ、
８１％）を得た。

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２６１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階ａ_６．（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４
−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造

酢酸エチル（３００ml）に、前記段階ａ_５で製造した１−（（３ａＲ，４Ｓ，６ａＳ）
−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イ
ル）エタン−１，２−ジオール（１４．８５ｇ、６７．４１ｍｍｏｌ）を溶解させ、０℃
に冷却した。これにレッドテトラアアセテート（Ｐｂ（ＯＡｃ）_４、１５７．３１ｇ、３
３７．０６ｍｍｏｌ）を添加した後、室温で夜から朝まで撹拌した。その反応混合物をセ
ライトで濾過し、その濾液を酢酸エチルで希釈した。その有機層をジクロロメタンで希釈
し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ_３）水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネ
シウムで乾燥し、減圧濃縮した。濃縮後、得た残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混
合溶媒（８：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーを行って、シロップ形態の目的化合物（８．８２ｇ、６０％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ５．０３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６、９．６Ｈｚ）、４
．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６、８．８Ｈｚ）、３．２１−３．２７（ｍ、２Ｈ）、３
．０１（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝０．８、１２．８Ｈｚ）、２．０５（ｓ、３Ｈ）、１．５０（
ｓ、３Ｈ）、１．３１（ｓ、３Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ−２５８．１５（ｃ０．１８、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２１８［Ｍ］^＋。

＜製造例２＞
（３ａＳ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，
３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造

段階ｂ_１．（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４
−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オールの製造

トルエン（２０ml）に、２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリスロノラクトン（２
，３−Ｏ−ｉｓｏｐｒｏｐｙｌｉｄｅｎｅ−Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅ、１
．０４ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を溶解させた後、１Ｍの水素化ジイソブチルアルミニウム
（ＤＩＢＡＬ）／ＴＨＦ溶液を−７８℃で添加した。その反応混合物を同じ温度で３０分
間撹拌した後、メタノールを徐々に添加して反応を終結させた。その懸濁液をセライトで
濾過し、酢酸エチルと水とで抽出した後、それに対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒
（３：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行
って、シロップ形態の目的化合物（１．９４ｇ、９６％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ５．３９（ｓ、１Ｈ）、４．８２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３
．６、６．０Ｈｚ）、４．５５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．０５（ｄｄ、１Ｈ、
Ｊ＝３．６、１０．２Ｈｚ）、４．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ）、１．４５（ｓ
、３Ｈ）、１．３０（ｓ、３Ｈ）。

段階ｂ_２．（３ａＳ，４Ｓ，６ａＳ）−２，２−ジメチル−テトラヒドロフロ［３，４
−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテートの製造

ピリジン（１０ｍｌ）に、前記製造例２の段階ｂ_１で製造したラクトール化合物（８７
５．９ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を溶解させた後、無水酢酸（０．６７ml、６．５６ｍｍ
ｏｌ）を０℃で添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した後、減圧濃縮した。濃
縮後、残留物を酢酸エチルと水とで抽出した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥さ
せ、再び減圧濃縮した。その残留物に対して、ヘキサン：酢酸エチル混合溶媒（８：１、
ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、シロ
ップ形態の目的化合物（７０２．１ｍｇ、６５％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ６．１６（ｓ、１Ｈ）、４．８６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３
．６、６．０Ｈｚ）、４．６６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ
＝６．４Ｈｚ）、３．９９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０．８Ｈｚ）、２．０５（ｓ、
３Ｈ）、１．４８（ｓ、３Ｈ）、１．３３（ｓ、３Ｈ）。

＜実施例１＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９
Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテト
ラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製
造

ヘキサメチルジシラザン（ＨＭＤＳ、５０ml）に、２，６−ジクロロプリン（２．２９
ｇ、２２．１２ｍｍｏｌ）と硫酸アンモニウム（４３８ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）とを溶
解させた後、不活性の乾燥された条件で夜から朝まで還流させた。その反応混合物を減圧
で濃縮した後、得た固体混合物を冷たい１，２−ジクロロエタン（２０ml）に再び溶解さ
せた。前記製造例１で得た（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチ
エノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イルアセテート（１．４１ｇ、１１．
０６ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（２０ml）に溶解させて、前記溶液に再び滴加
した。その混合物にトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ、４
．０ml、２２．１２ｍｍｏｌ）を滴加し、０℃で３０分間撹拌した後、室温で１時間撹拌
した後、８０℃に加熱して、２時間撹拌した。反応混合物を冷却した後、ジクロロメタン
で希釈し、飽和された重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ_３）水溶液で洗浄した。その有機層
を無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）で乾燥した後、減圧濃縮して、黄色のシロップ形
態の残留物を得た。その残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合溶媒（５０：
１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って、
泡（ｆｏａｍ）状の目的化合物（３．０３ｇ、７９％）を得た。

ＵＶ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）λ_ｍａｘ２７５．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）δ８．１７（ｓ、１Ｈ）、５．８７（ｓ、１Ｈ）、５．３
２（ｐｓｅｕｄｏｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、５．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．６Ｈｚ
）、３．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１２．８Ｈｚ）、３．２６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１
３．２Ｈｚ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｓ、３Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ−４２．０４（ｃ０．１６、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３４７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）
テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

テトラヒドロフラン（２０ml）に、前記段階１で製造した２，６−ジクロロ−９−（（
３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３
］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンを溶解させた後、２Ｎの塩酸を添加し、夜か
ら朝まで室温で撹拌した。その混合物を１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液で中和させた後、
気をつけて減圧で濃縮した。濃縮後、残留物に対して、ジクロロメタン：メタノール混合
溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーを行って、白色固体の目的化合物（１．９４ｇ、９６％）を得た。

ｍｐ１９８．３−２００．３℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７５．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．８７（ｓ、１Ｈ）、６．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．
８Ｈｚ）、４．６９（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．２Ｈｚ）、４．４８（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈ
ｚ）、３．５６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１１．２Ｈｚ）、２．９７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ
＝３．４、１１．２Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−５０．４３（ｃ０．１２、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３０７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−フルオロベンジルアミ
ノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２
，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール
（１当量）と３−フルオロベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混
合物を２〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジク
ロロメタン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１０ｇ、８０％）を得た。

ｍｐ１８３．２−１８３．５℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７５．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９１（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、８
．５１（ｓ、１Ｈ）、７．３３−７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．１８（ｍ、２Ｈ
）、７．０６（ｄｔ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１１．６Ｈｚ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７
．２Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ
、Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．６５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．６０（ｍ、１Ｈ）、
４．３３−４．３５（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）
、２．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９６．２１（ｃ０．１２、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３９６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例２＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

前記実施例１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。

前記実施例１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−クロロベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−クロロベンジルアミンを使用して、前記
実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、８３％）を得た
。

ｍｐ１６３．３−１６５．３℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．４１（ｓ、１Ｈ）、７．２
４−７．３４（ｍ、３Ｈ）、５．９４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．７５（ｂｒｓ
、２Ｈ）、４．６１（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝３．２Ｈｚ）、４．４５（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈ
ｚ）、３．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．８、１１．２Ｈｚ）、２．９５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ
＝３．６、１０．８Ｈｚ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４１１［Ｍ］^＋。

＜実施例３＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ブロモベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ブロモベンジルアミンを使用して、前記
実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８３％）を得た
。

ｍｐ１８４．０−１８５．０℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９１（ｂｒｓ、１Ｈ−ＮＨ）、８．５１（ｓ、
１Ｈ）、７．５５（ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．３３−７
．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２６−７．３０（ｍ、１Ｈ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３８（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、
Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６０−４．６３（ｍ、３Ｈ）、４．３４（ｓ、１Ｈ）、３．４１
（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．４、１１．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０
．８Ｈｚ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４５６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例４＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（３−ヨードベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記
実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１４ｇ、８４％）を得た
。

ｍｐ１９８．７−１９９．９℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９０（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、８
．５１（ｓ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、
７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１３（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、５．
８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３７
（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６０（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．３４（ｂ
ｒｓ、１Ｈ）、３．３８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、
１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−７８．９１（ｃ０．１３、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ５０４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例５＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−クロロベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、２−クロロベンジルアミンを使用して、前記
実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、８１％）を得た
。

ｍｐ１９８．７−１９９．７℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７３．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．３５（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．４５−７．４７（ｍ、
１Ｈ）、７．３９−７．４３（ｍ、１Ｈ）、７．２５−７．２９（ｍ、２Ｈ）、５．９５
（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．６０−４．６３（ｍ、１Ｈ）、４．４５（ｄｄ、１
Ｈ、Ｊ＝３．６、８．０Ｈｚ）、３．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．８、１０．８Ｈｚ）、
２．９５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９６．２１（ｃ０．１２、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４１２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例６＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシベンジル
アミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（５−クロロ−２−メトキシ
ベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオー
ルの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、５−クロロ−２−メトキシベンジルアミンを
使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、
７８％）を得た。

ｍｐ１８８．８−１８９．８℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７５．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．６４（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８
．５１（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、７．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８５−６．８９（ｍ、１Ｈ）、
５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）
、５．３７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６１−４．６３（ｍ、２Ｈ）、４
．３５（ｍ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０
．４Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．４、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９６．１０（ｃ０．２１、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４４２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例７＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ＞−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ）−９
Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テ
トラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（２−メトキシベンジルアミノ
）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、２−メトキシベンジルアミンを使用して、前記
実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８８％）を得た
。

ｍｐ１８８．０℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７６．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．６５（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８
．５１（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、７．００（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８５−６．８９（ｍ、１Ｈ）、
５．８３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５．５８（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）
、５．３９（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）、４．６２−４．６４（ｍ、２Ｈ）、４
．３５（ｓ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、１Ｈ）、３．４２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、１０
．４Ｈｚ）、２．７９−２．８２（ｍ、１Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ−９３．５３（ｃ０．１７、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４０７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例８＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチルベンジ
ルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製
造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（２−クロロ−６−（ナフタレン−１−イルメチ
ルベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオ
ールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、ナフタレン−１−イルメチルベンジルアミン
を使用して、前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１３ｇ
、９０％）を得た。

ｍｐ２２６．３℃（ｄｅｃｏｍｐ）；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２８１．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９６（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８
．５１（ｓ、１Ｈ）、８．２５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．９５−７．９７（ｍ
、１Ｈ）、７．８３−７．８５（ｍ、１Ｈ）、７．５３−７．６１（ｍ、２Ｈ）、７．４
３−７．４６（ｍ、２Ｈ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５６（ｄ、１
Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、５．１２（ｄ、１Ｈ、
Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．５９−４．６１（ｍ、１Ｈ）、４．３４−４．３５（ｍ、１Ｈ）
、３．４０−３．４４（ｍ、１Ｈ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．４、６．８Ｈｚ）
；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４２８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例９＞
３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロキシテトラヒド
ロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸の製造

段階３．３−（（２−クロロ−９−（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロキシテ
トラヒドロチオフェン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）メチル）安息香酸
の製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−（アミノメチル）安息香酸を使用して、
前記実施例１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８４％）を
得た。

ｍｐ２５４．０−２５６．９℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７５．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９５（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８
．５２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．４３（ｄ、１Ｈ、Ｊ
＝８．０Ｈｚ）、５．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．５７（ｂｒｓ、１Ｈ）、
５．３８（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．７１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．６０（ｂｒｓ
、１Ｈ）、４．３４（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈ
ｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９４．５５（ｃ０．１１、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４２２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１０＞
２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−テ
トラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．２−（２−クロロ−６−メチルアミノ−プリン−９−イル）（２Ｒ，３Ｓ，４
Ｒ）−テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、メチルアミンを使用して、前記実施例１の段
階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．８９ｇ、９０％）を得た。

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２６９．５ｎｍ（ｐＨ７）；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ２．９９（１Ｈ、ｄｄ、４’−ＣＨ、Ｊ＝４．４、１０
．８Ｈｚ）、３．１２（３Ｈ、ｂｒｓ、ＮＨ−ＣＨ_３）、３．４４（１Ｈ、ｄｄ、４’−
ＣＨ、Ｊ＝４、１０．８Ｈｚ）、４．４１（１Ｈ、ｍ、２’−ＣＨ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、
４．４７（１Ｈ、ｍ、３’−ＣＨ）、５．８９（１Ｈ、ｄ、１’−ＣＨ、Ｊ＝５．６Ｈｚ
）、８．４０（ｓ、１Ｈ、８−ＣＨ）；

［α］^２５ _Ｄ−３４．８（ｃ０．１１５、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３０２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１１＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−
９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階１．６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチルテトラヒド
ロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造

２，６−クロロプリンの代わりに、６−クロロプリン（２．２９ｇ、２２．１２ｍｍｏ
ｌ）を使用して、前記実施例１の段階１と同じ条件で合成を行って、泡状の目的化合物（
１．８４ｇ、９１％）を得た。

ＵＶ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）λ_ｍａｘ２６５．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ８．６７（ｐｓｅｕｄｏｔ、１Ｈ、Ｊ＝１．４Ｈｚ）
、８．２３（ｓ、１Ｈ）、５．８８（ｓ、１Ｈ）、５．２３（ｍ、２Ｈ）、３．６９（ｄ
ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１３．２Ｈｚ）、３．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ）、１
．５２（ｓ、３Ｈ）、１．２９（ｓ、３Ｈ）；

^１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１５２．０５、１５１．３９、１５１．０９、１４４
．３４、１３２．５６、１１１．９０、８９．６０、８４．３１、７０．３０、４０．７
６、２６．４０、２４．６３；

［α］^２５ _Ｄ−１５７．６４（ｃ０．１５、ＭｅＯＨ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階２．（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラ
ヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

前記段階１で製造した６−クロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−ジメチ
ルテトラヒドロチエノ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリ
ン（１．８４ｇ、５．８８ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例１の段階２と同じ条件で合
成を行って、白色固体の目的化合物（１．２７ｇ、７９％）を得た。

ｍｐ１９２．３−１９２．８℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２６４．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ９．０２（ｓ、１Ｈ）、８．８２（ｓ、１Ｈ）、６
．０２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．６２（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、
５．４３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．７０−４．７４（ｍ、１Ｈ）、４．
３６−４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．４７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３
．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、２．８４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１１．２Ｈ
ｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−１０９．１５（ｃ０．１６、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２７３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−フルオロベンジルアミノ）−９Ｈ−
プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（６
−クロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオール（１当
量）と３−フルオロベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混合物を
２〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジクロロメ
タン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１１ｇ、８２％）を得た。

ｍｐ１８０．５−１８０．７℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７３．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７
．３１−７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．１２−７．１８（ｍ、２Ｈ）、７．０１−７．０５
（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ
＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６７−４．７１（
ｍ、２Ｈ）、４．３５−４．３７（ｍ、１Ｈ）、３．３９−３．４３（ｍ、１Ｈ）、３．
１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．２、１１．２Ｈｚ
）；

［α］^２５ _Ｄ−１４１．２（ｃ０．１１、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３６２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１２＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９
−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

前記実施例１１の段階１と同じ方法によって、泡状の目的化合物を得た。

前記実施例１１の段階２と同じ方法によって、白色固体の目的化合物を得た。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−クロロベンジルアミノ）−９Ｈ−プ
リン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−クロロベンジルアミンを使用して、前記
実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、８５％）を得
た。

ｍｐ１６５．０−１６５．３℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．４７（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７
．３９（ｓ、１Ｈ）、７．２６−７．３５（ｍ、３Ｈ）、５．９１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、
Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３３−４．３７（ｍ、１Ｈ）
、３．４０−３．４８（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．２、１０．４Ｈｚ
）；

［α］^２５ _Ｄ−１６２．５（ｃ０．１０、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３７８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１３＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９
−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−９Ｈ−プ
リン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ブロモベンジルアミンを使用して、前記
実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１１ｇ、７０％）を得
た。

ｍｐ１８３．０−１８４．０℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７０．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７
．５３（ｓ、１Ｈ）、７．３９−７．４２（ｍ、１Ｈ）、７．３４−７．３５（ｍ、１Ｈ
）、７．２４−７．２８（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．５
３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）
、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３５−４．３７（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｄｄ
、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３．０６（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．８
０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−１００．７２（ｃ０．１４、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４２２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１４＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プリン−９
−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−９Ｈ−プ
リン−９−イル）テトラヒドロチオフェン−３，４−ジオールの製造

３−フルオロベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記
実施例１１の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１２ｇ、７２％）を得
た。

ｍｐ１９８．８−１９９．８℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７１．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．４６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７
．７２（ｓ、１Ｈ）、７．５６−７．５９（ｍ、１Ｈ）、７．３５−７．３６（ｄ、１Ｈ
、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．０１−７．１２（ｍ、１Ｈ）、５．９０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、５．５３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．３５（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、
Ｊ＝４．４Ｈｚ）、４．６７−４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．３４−４．３８（ｍ、１Ｈ）
、３．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．０、１０．８Ｈｚ）、３．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
２Ｈｚ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、１０．８Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−９７．０８（ｃ０．１４、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４７０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１５＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロフラン−３，４−ジオールの製造

段階１．２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチルテト
ラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）−９Ｈ−プリンの製造

前記製造例２で得た（３ａＲ，４Ｒ，６ａＲ）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［
３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（７０２．１ｇ、３．４７２ｍｍｏｌ
）を使用して、前記実施例１の段階１と同じ条件で合成を行って、泡状の目的化合物（７
９３．０ｍｇ、６９％）を得た。

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７６．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ８．１５（ｓ、１Ｈ）、６．０７（ｓ、１Ｈ）、５．４
１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．２６−５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．２５−４．３
１（ｍ、２Ｈ）、１．５７（ｓ、３Ｈ）、１．４１（ｓ、３Ｈ）；

［α］^２５ _Ｄ−２１．００（ｃ０．１０、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３３１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階２．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（２，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）
テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造

前記段階１で製造した２，６−ジクロロ−９−（（３ａＲ，４Ｒ，６ａＳ）−２，２−
リン（９００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を使用して、前記段階２と同じ条件で合成を行っ
て、白色固体の目的化合物（０．４６ｇ、８０％）を得た。

ｍｐ１２２．７−１２３．４℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７６．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９８（ｓ、１Ｈ）、５．９６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝
６．４Ｈｚ）、５．５７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、５．３２（ｄ、１Ｈ−Ｏ
Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．６９−４．７４（ｍ、１Ｈ）、４．４１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝
３．６、９．２Ｈｚ）、４．２９−４．３２（ｍ、１Ｈ）、３．８７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝
２．０、９．６Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−６８．０９（ｃ０．１４、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２９１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ブロモベンジルアミノ）−２−クロ
ロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造

室温でエタノール（５ml）に、前記段階２で製造した（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−（２
，６−ジクロロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオール（１当
量）と３−ブロモベンジルアミン（１．５当量）とを溶解させた後、その反応混合物を２
〜３時間室温で撹拌した。反応完了後、減圧濃縮して得た残留物に対して、ジクロロメタ
ン：メタノール混合溶媒（２０：１、ｖ／ｖ）を展開溶媒として使用したシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーを行って、目的化合物（０．１２ｇ、８２％）を得た。

ｍｐ１８１．５−１８１．７℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．５ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９２（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８
．４３（Ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｓ、１Ｈ）、７．４４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、
７．３３−７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２６−７．３０（ｍ、１Ｈ）、５．８１（ｄ、１
Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．４７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．２２（ｄ、１Ｈ、
Ｊ＝４，０Ｈｚ）、４．６６−４．６９（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｓ，２Ｈ）、４．３２
（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６、９．２Ｈｚ）、４．２５（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．８０（ｄｄ
、１Ｈ、Ｊ＝１．６、９．２Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−６２．７５（ｃ０．１０、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４４０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実施例１６＞
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−２−クロロ−９Ｈ
−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造

前記実施例１５の段階１と同じ方法によって、シロップ形態の泡状の目的化合物を得た
。

前記実施例１５の段階２と同じ方法によって、シロップ形態の白色固体の目的化合物を
得た。

段階３．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−（６−（３−ヨードベンジルアミノ）−２−クロ
ロ−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロフロ−３，４−ジオールの製造

３−ブロモベンジルアミンの代わりに、３−ヨードベンジルアミンを使用して、前記実
施例１５の段階３と同じ条件で合成を行って、目的化合物（０．１３ｇ、７８％）を得た
。

ｍｐ１９５．５−１９５．８℃；

ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_ｍａｘ２７４．０ｎｍ；

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．９１（ｔ、１Ｈ−ＮＨ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、８
．４４（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、
７．３６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１３（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、５．
８１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５．４７（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、５
．２３（ｄ、１Ｈ−ＯＨ、Ｊ＝４．０Ｈｚ）、４．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４、１０
．８Ｈｚ）、４．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．３４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．
６、９．２Ｈｚ）、３．８１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．２、９．２Ｈｚ）；

［α］^２５ _Ｄ−６８．０７（ｃ０．１２、ＤＭＳＯ）；

ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ４８８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

＜実験例１＞アデノシン受容体に対する結合親和力の評価

本発明の誘導体のヒトアデノシン受容体（ｈＡＲ）中のＡ_１、Ａ_２Ａ及びＡ_３受容体に
対する親和力及び選択性を評価するために、下記のような実験を行った。

アデノシンＡ_１及びＡ_３受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ、ＡＴ
ＣＣ；米国細胞株銀行Ｎｏ．ＣＣＬ−６１）細胞は、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）とペ
ニシリン／ストレプトマイシン（１００ユニット／mlと１００μg／ml）とを含むＦ−１
２（Ｇｉｂｃｏ社、米国）培地で３７℃、５％二酸化炭素の条件下で培養されて使われた
。５０／１０／１緩衝溶液を試験管に入れ、適したｈＡＲが発現されたＣＨＯ細胞一定量
と各アデノシンＡ_１及びＡ_３受容体に選択的に結合する標識リガンド（１ｎＭ［^３Ｈ］Ｃ
ＣＰＡ及び０．５ｎＭ［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ）とを混合させた。多様な濃度の本発
明の誘導体をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に先に溶解させた後、緩衝溶液と希釈さ
れるが、ＤＭＳＯの最終濃度は、１％を超過しないように注意し、３７℃の恒温槽で１時
間培養させた後、細胞収集器（ＴＯＭＴＥＣ社、米国）を使用して、迅速に減圧濾過した
。次いで、試験管は、３ml緩衝液で３回洗浄した後、放射性をγ−カウンターを使用して
決定した。非特異的結合（Ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｂｉｎｄｉｎｇ）は、全体結合を測
定するための条件と同じ条件で、非標識リガンドである５’−Ｎ−エチルカルボキサミド
アデノシン（ＮＥＣＡ）の１０μＭ存在下で決定され、平衡定数であるＫ_ｉ値は、［^１２
^５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡのＫ_ｄ値が１．４８ｎＭであるという仮定下でチェンプルソフ（Ｃ
ｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ）方程式に基づいて決定した。特異的結合は、全体結合で非特
異的結合を減算して算出した。このように測定された特異的結合からさまざまな受容体に
対するそれぞれの試料の結合親和力を求めた。

また、ＨＥＫ２９３細胞（ヒト腎臓内皮細胞株）から発現されたＡ_２Ａ受容体と標識リ
ガンド、［^３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０（２−（（（４−（２−カルボキシエチル）フェニ
ル）エチルアミノ）−５’−Ｎ−エチルカルバモイル）アデノシン）の結合測定は、次の
ように行われるが、アデノシンデアミナーゼ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ
）は、脳膜を３０℃で３０分間培養する時と放射性リガンドを入れ、培養する間に共に入
れ、少なくとも６回の異なる濃度でそれぞれの実施例の化合物に対するＩＣ_５０値を定め
、この数値をプロットプログラムを用いてＫ_ｉ値を決定した。本発明による実施例の化合
物の構造、置換基及び結合親和力の測定結果、得たＫ_ｉ値を表１に共に示した。

表１に示されたように、本発明の実施例の化合物は、ヒトアデノシンＡ_３受容体に対し
て高い結合親和力を示し、アデノシンＡ_１及びＡ_２Ａ受容体に対しては低い親和力、すな
わち、大きな選択性を示した。特に、本発明の実施例１２の化合物は、ｈＡ_３受容体に対
して、親和力定数、Ｋ_ｉ値が１．５０±０．４０ｎＭに最も高い親和力を示し、その次に
、実施例２の化合物（Ｋ_ｉ＝１．６６±０．９０ｎＭ）、実施例１４の化合物（Ｋ_ｉ＝２
．５０±１．００ｎＭ）、実施例１０の化合物（Ｋ_ｉ＝３．６９±０．２５ｎＭ）及び実
施例４の化合物（Ｋ_ｉ＝４．１６±０．５０ｎＭ）の順に結合親和力が高く表われた。本
発明の実施例４の化合物は、また、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から発現
されたラットのアデノシンＡ_３受容体に対しても、高い親和力（Ｋ_ｉ＝３．８９±１．１
５ｎＭ）を示し、ヒトアデノシンＡ_２Ｂ受容体に対しては、アゴニストまたは拮抗剤とし
て活性を示さななかった。

また、ハロベンジル置換基を有する実施例の化合物で結合親和力は、Ｃｌ＞Ｉ＞Ｆ＞Ｂ
ｒの順序に従うが、３−クロロベンジルを有する実施例２の化合物は、２−クロロベンジ
ルを有する実施例５の化合物（Ｋ_ｉ＝２５．８±６．３ｎｍ）よりもｈＡ_３アデノシン受
容体に対してさらに高い親和力を示した。また、ヒトアデノシンＡ_３受容体は、結合親和
力において、ベンゼン環の３−位置が置換された実施例の化合物を２−または４−置換さ
れた化合物または２，５−二置換された化合物よりもさらに好むものと表われた。そして
、４’−Ｏであるオキソヌクレオシド形態を帯びるアデノシン誘導体である実施例１５及
び実施例１６の化合物も、高い結合親和力と選択性とを示したが、それに相応する４’−
Ｓであるチオヌクレオシド形態を帯びるアデノシン誘導体、実施例３及び実施例４の化合
物よりもさらに良いものではなく、プリン塩基の２位のクロロ基を水素で置換した実施例
１０〜実施例１４の化合物は、２−クロロである化合物よりも親和力及び選択性に優れる
と確認された。

＜実験例２＞本発明の誘導体によるアデノシンＡ_３受容体に対する拮抗効果及びｃＡＭ
Ｐ抑制実験

本発明の誘導体が、ヒトアデノシンＡ_３受容体に対して拮抗剤として効果があるかを調
べるために、ＣＨＯ細胞に実施例４の化合物及びＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡを共に処理して、
本発明の誘導体の拮抗効果及びｃＡＭＰ抑制実験を行った。

図１に示されたように、ヒトアデノシンＡ_３受容体に対して、本発明の実施例４の化合
物を濃度を異ならせて処理したＣＨＯ細胞で１００％純粋アゴニストであるＣｌ−ＩＢ−
ＭＥＣＡのアゴニスト効果は、実施例４の化合物の濃度に依存して阻害されると確認され
た。これは、本発明の化合物とＣｌ−ＩＢ−ＭＥＣＡとが受容体の同じ結合部位に互いに
競争的に作用するものであることを示す結果である。また、ＣＨＯ細胞でヒトアデノシン
Ａ_３受容体を媒介とするｃＡＭＰ抑制実験結果、本発明の実施例の化合物は、１００％純
粋アデノシンＡ_３拮抗剤であるということが分かる。したがって、本発明から合成された
化合物は、Ｓｃｈｉｌｄ分析によって測定した解離定数Ｋ_Ｂ値は１．９２ｎＭであった。

＜実験例３〜実験例６＞本発明の誘導体による抗炎症活性の測定

本発明の誘導体の抗炎症活性を調べるために、下記のような動物実験を行った。生後７
週齢の雄ＩＣＲマウスは、右側耳にＴＰＡ（１２−Ｏ−ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈ
ｏｒｂｏｌ１３−ａｃｅｔａｔｅ、２０μｌ）が処理された。１５分以内に本発明の実
施例１〜実施例１６の化合物をアセトン（２０μｌ）または蒸留水あるいはＤＭＳＯとア
セトンとを混合した混合溶媒（その組成は、表２〜表５に示す）に０．５％の濃度で希釈
してマウスに投与した。対照群で炎症治療剤として用いられるヒドロコルチゾン（ｈｙｄ
ｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）を同じ濃度で処理して、同じ実験を行った。

引き続き、ＴＰＡ処理から６時間後に、本発明のアデノシン誘導体化合物を二番目に処
理した。再びＴＰＡ処理から２４時間後に、実験動物を首脱臼方法（ｃｅｒｖｉｃａｌ
ｄｉｓｌｏｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ）を用いて安楽死させた。次いで、６ｍｍ直径の
パンチを用いて右側耳のサンプルを得た。その活性は、微量天秤を用いて重量を測定する
ことで確認することができた。阻害率（％）は、下記数式１を用いて計算された。実験例
３〜実験例６の処理組成及び処理量は、表２〜表５に示し、その抗炎症活性の測定結果を
図２〜図５に示した。

図２に示されたように、対照群として用いられたヒドロコルチゾンに比べれば、極めて
少ない変化であるが、実施例２、実施例３及び実施例４の化合物をアセトンに希釈して処
理した後、抗炎症活性を調査した結果、ＴＰＡによって誘導されたマウスの耳浮腫が少量
減少することを確認することができた。

図３に示されたように、本発明の実施例１及び実施例６の化合物をアセトンに希釈して
処理した後、調査した抗炎症活性は、図２示された実施例２〜実施例４の化合物よりも４
倍以上格段に増加した阻害率を示すことが分かった。

図４に示されたように、蒸留水とアセトンとの混合溶媒（１：４）に０．５％に希釈し
た本発明の実施例５、実施例６及び実施例７の化合物を用いて調査した抗炎症活性は、そ
れぞれ１７％、３４％及び５３％の炎症阻害率を示した。

図５に示されたように、ＤＭＳＯとアセトンとの混合溶媒（１：９）に０．５％に希釈
した本発明の実施例１５及び実施例１６の化合物を用いて調査した炎症阻害率は、それぞ
れ５９％及び７９％であって、前記化合物が抗炎症活性を有するということが分かった。

＜実験例８＞毒性試験

本発明の実施例の化合物の毒性を試験するために、動物実験を行った。２５±５ｇのＩ
ＣＲ系マウス（中央実験動物）と２３５±１０ｇの特定の病院部材（ＳＰＦ）スプラグ−
ダウリー（ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ、中央実験動物）ラットとをそれぞれ３匹ずつ
３群に分けて、本発明の実施例２の化合物をそれぞれ２０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、
１ｍｇ／ｋｇの容量で腹腔投与した後、２４時間毒性の有無を観察した。

実験の結果、３郡いずれもで死亡した例を全く観察することができず、体重増加、飼料
摂取量などで外見上対照群と何らの症状が見られず、したがって、本発明の誘導体化合物
が、安全な薬物であることを確認することができた。

本発明のアデノシン誘導体化合物は、下記のような剤型で投与し、下記の製剤例は、本
発明を例示するものであり、これにより、本発明の内容が限定されるものではない。

＜製剤例１＞散剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物５００ｍｇ

トウモロコシ澱粉１００ｍｇ

乳糖１００ｍｇ

タルク１０ｍｇ

前記の成分を混合し、気密布に充填して散剤を製造した。

＜製剤例２＞錠剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物１００ｍｇ

トウモロコシ澱粉１００ｍｇ

乳糖１００ｍｇ

ステアリン酸マグネシウム２ｍｇ

前記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法によって、打錠して錠剤を製造した。

＜製剤例３＞カプセル剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物５０ｍｇ

乳糖５０ｍｇ

ステアリン酸マグネシウム１ｍｇ

前記の成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法によって、打錠してゼラチンカ
プセルに充填して製造した。

＜製剤例４＞注射剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物１０ｍｇ

注射用滅菌蒸留水適量

ｐＨ調節剤適量

通常の注射剤の製造方法によって、活性成分を注射用蒸留水に溶解し、ｐＨを約７．５
に調節した後、全体を注射用蒸留水で２ml容量のアンプルに充填して滅菌させて、注射剤
を製造した。

＜製剤例５＞液剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物１ｇ

異性化糖１０ｇ

ショ糖１０ｇ

レモン香適量

精製水適量

通常の液剤の製造方法によって、精製水にそれぞれの成分を加え、溶解させ、レモン香
を適量加えた後、精製水を加えて、全体を１００mlに調節した後、褐色瓶に充填して滅菌
させて、液剤を製造した。

＜製剤例６＞経口投与剤の製造

本発明のアデノシン誘導体化合物適量

０．５ｗｔ％メチルセルロース（ＭＣ）適量

本発明のアデノシン誘導体化合物を０．５ｗｔ％メチルセルロース（ＷａｋｏＰｕｒｅ
ＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ、Ｊａｐａｎ）に懸濁させて調剤した。

＜実験例９＞本発明のアデノシン誘導体の非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬化
症に対する効能確認の実験

本発明のアデノシン誘導体の非アルコール性脂肪肝炎及び肝線維症に対する効能を確認
するために、下記のような動物実験を行った。

非アルコール性脂肪肝炎が誘発されたｍｉｃｅ２４匹（下記の各実験例の別に８匹）に６
週齢から１０週齢間、表６のように実施例２の化合物を賦形剤（０．５％メチルセルロー
ス）と共に毎日１回経口投与した。

比較群として正常ｍｉｃｅ８匹に１０週齢まで何らの処理はせず、陽性対照群（ｐｏｓ
ｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ）として非アルコール性脂肪肝炎が誘発されたｍｉｃｅ８匹
に６週齢から１０週齢間、高血圧治療剤であるテルミサルタン（ｔｅｌｍｉｓａｒｔａｎ
）１０ｍｇ／ｋｇを毎日１回経口投与し、陰性対照群（ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏ
ｌ）として非アルコール性脂肪肝炎が誘発されたｍｉｃｅ８匹に６週齢から１０週齢間、
賦形剤である０．５％メチルセルロース１０ｍＬ／ｋｇのみを毎日１回経口投与した。

引き続き、１０週齢になった実験動物の肝（ｌｉｖｅｒ）に対して、ＨＥ染色を用いて脂
肪症、炎症及びバルーニング程度を測定し、シリウスレッド（Ｓｉｒｉｕｓｒｅｄ）染
色を用いて纎維症（ｆｉｂｒｏｓｉｓ）発生面積を観察及び測定し、その結果をＢｏｎｆ
ｅｒｒｏｎｉＭｕｌｔｉｐｌｅＣｏｍｐａｒｉｓｏｎＴｅｓｔで数値化（ｓｃｏｒ
ｉｎｇ）して、図６〜図１１に示した。

図６〜図１１において、Ｌｏｗ、Ｍｅｄｉｕｍ、及びＨｉｇｈｄｏｓｅｇｒｏｕｐ
は、それぞれ実験例９−１、実験例９−２及び実験例９−３を示し、Ｎｏｒｍａｌ、Ｖｅ
ｈｉｃｌｅ及びＴｅｌｍｉｓａｒｔａｎは、それぞれ比較群、陰性対照群及び陽性対照群
を示す。

図６は、実験動物の肝の脂肪症程度を数値化して示すグラフである。図６に示されたよ
うに、本発明のアデノシン誘導体を投与した実験例９のｍｉｃｅ及び陽性対照群ｍｉｃｅ
で陰性対照群と比較して、脂肪症の有意な減少が確認されていない。

図７は、実験動物の肝の炎症程度を数値化して示すグラフである。図７に示されたよう
に、本発明のアデノシン誘導体を投与したｍｉｃｅで、前記誘導体の投与量に依存的な抗
炎症活性があったことを確認することができる。

図８は、実験動物の肝のバルーニング程度を数値化して示すグラフである。図８に示さ
れたように、本発明のアデノシン誘導体を投与したｍｉｃｅで、前記誘導体の投与量に依
存的なバルーニング減少効果があり、本発明のアデノシン誘導体を低容量で投与した実験
例９−１のｍｉｃｅでも、バルーニングの確実な減少があったことを確認することができ
る。

図９は、実験動物の肝の脂肪症、炎症及びバルーニングに対する数値を総合して、非ア
ルコール性脂肪肝炎に対する活性を算出したグラフである。図９に示されたように、本発
明のアデノシン誘導体は、投与量依存的に非アルコール性脂肪肝炎の緩和に対する有意な
活性があったことを確認することができる。

図１０は、実験動物の肝の纎維症発生程度を観察した顕微鏡写真であり、図１１は、纎
維症発生面積を示すグラフである。図１０において、赤色で染色された部分が纎維症発生
部位である。図１０及び図１１に示されたように、本発明のアデノシン誘導体を投与した
ｍｉｃｅで、前記誘導体の投与量に依存的な纎維症抑制活性があり、本発明のアデノシン
誘導体を低容量で投与した実験例９−１のｍｉｃｅでも、纎維症発生面積の確実な減少が
あったことを確認することができる。

＜実験例１０＞本発明のアデノシン誘導体の物理化学的特性の試験

本発明のアデノシン誘導体の物理化学的特性を試験するために、生体外（ｉｎｖｉｔ
ｒｏ）で実施例２の化合物に対する実験を実施し、その結果を表７に示した。血しょう（
ｐｌａｓｍａ）安定性（ｓｔａｂｉｌｉｔｙ）及びタンパク質結合度（ｐｒｏｔｅｉｎ
ｂｉｎｄｉｎｇ）は、Ｒａｔとヒトとの血しょうを用いて測定した。

表７に示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、経口製剤による経口投与に適し
た吸収、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）の特性値を有するという点を確認することがで
きる。

＜実験例１１＞本発明のアデノシン誘導体の経口投与に対する薬動力学試験

本発明のアデノシン誘導体の経口投与後の吸収、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）の特
性を試験するために、生体内（ｉｎｖｉｖｏ）で実施例２の化合物のＰＫ（Ｐｈａｒｍ
ａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ）特性を測定した。

表８のように、実験動物に実施例２の化合物を投与方法を異ならせて投与した。静脈投
与は、大腿静脈に挿入したチューブ（ｔｕｂｅ）を通じて投与し、経口投与は、強制経口
投与（ｏｒａｌｇａｖａｇｅ）を用いて口腔に投入する方式で行った。

投与後、２４時間所定時間間隔で採血して血液を遠心分離した後、血しょうを分離し、
適正有機溶媒を使用して血しょう試料を前処理した後、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳで濃度を分析し
た。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、ＵＳＡ）を用いて実施例２の化合物の血
中濃度−時間データを分析し、これについてのグラフを図１２〜図１６に示し、これより
算出したｎｏｎｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒ
ａｍｅｔｅｒに対する結果を表９〜表１３に示した。図１２〜図１６において、Ｉ．Ｖ．
は、静脈投与群、Ｐ．Ｏ．は、口腔投与群を示し、表９〜表１３の各パラメータに対する
定義は、表１４に示した。

図１２と表９は、実験例１１（１１−１及び１１−２）の血中濃度−時間データから得
たグラフ及びパラメータ値であり、図１３と表１０は、実験例１２（１２−１及び１２−
２）の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ値である。図１２及び図１３
と表９及び表１０とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、半減期（Ｔ_１／２
）が最大３．３４時間以上に長期間露出され、静脈投与と比較する時、生体利用率（Ｆ_ｔ
）が最大９９．９％以上に経口投与に適した特性を有するということを確認することがで
きる。

図１４と表１１は、実験例１３の血中濃度−時間データから得たグラフ及びパラメータ
値である。図１４と表１１とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、ｍｉｃｅ
でも半減期（Ｔ_１／２）が３．６１時間程度に長期間露出されて、経口投与に適した特性
を有するという点を確認することができる。

図１５と表１２は、実験例１４（１４−１、１４−２及び１４−３）の血中濃度−時間
データから得たグラフ及びパラメータ値である。図１５において、Ｇ２及びＧ３は、それ
ぞれ溶媒に溶解させて経口投与した場合と、カプセル内粉末状に経口投与した場合と、を
示す。図１５と表１２とに示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、ｄｏｇで半減
期（Ｔ_１／２）が最大５．５３時間以上にｒａｔやｍｉｃｅよりも長期間露出されて、経
口投与に適した特性を有し、特に、カプセル内に粉末状に充填して投与した場合、半減期
（Ｔ_１／２）及び生体利用率（Ｆ_ｔ）などの特性がより向上するという点を確認すること
ができる。

図１６と表１３は、実験例１５（１５−１及び１５−２）の血中濃度−時間データから
得たグラフ及びパラメータ値である。図１６と表１３とに示されたように、本発明のアデ
ノシン誘導体は、経口投与において、メチルセルロース（ＭＣ）と共に投与されることが
従来の賦形剤であるジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥ
Ｇ）、蒸留水（Ｄ．Ｗ．）などと共に投与されることよりも優れた特性を有するという点
を確認することができる。

＜実験例１６＞本発明のアデノシン誘導体の毒性試験

本発明のアデノシン誘導体の毒性を試験するために、実施例２の化合物に対して、細胞
毒性（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）、心臓毒性（ｈＥＲＧｌｉｇａｎｄｂｉｎｄｉｎ
ｇａｓｓａｙ）、遺伝毒性及び単回毒性を評価した。

まず、実施例２の化合物の細胞毒性を試験するために、ＣｙｔｏＸ^ＴＭｃｅｌｌ
ｖｉａｂｉｌｉｔｙａｓｓａｙｋｉｔを利用した。試験の結果、実施例２の化合物に
よるＩＣ_５０が、それぞれの細胞株で１０μＭ以上であって、一般細胞毒性に対して安全
であると評価された。

実施例２の化合物の心臓毒性を試験するために、ｒｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｈ
ＥＲＧｃｈａｎｎｅｌｌｉｇａｎｄｔｒａｃｅｒのｈＥＲＧｃｈａｎｎｅｌｐ
ｒｏｔｅｉｎ結合程度による蛍光偏光（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｐｏｌａｒｉｚａｔ
ｉｏｎ）評価を通じて心臓安定性を評価するｎｏｎ−ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇ
ｉｃａｌ試験法を使用した。試験の結果、実施例２の化合物１０μＭに対する阻害率は、
基準値である５０％以下であって、心臓毒性に対して安全であると評価された。

実施例２の化合物の遺伝毒性を試験するために、ヒスチジン要求性サルモネラ菌（ＴＡ
９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５及びＴＡ１５３７菌株）及びトリプトファン要求性大腸
菌（ＷＰ２ｕｖｒＡ（ｐＫＭ１０１）菌株）を用いて代謝活性化非存在下及び存在下のそ
れぞれの場合に対して、実施例２の化合物の遺伝子突然変異誘発性を評価した。評価の結
果、実施例２の化合物は、代謝活性化の有無に関係なく、各菌株のあらゆる容量で復帰変
異コロニー数が陰性対照群の２倍を超過せず、容量依存的な増加も観察されず、陽性対照
群では、各菌株に対する復帰変異コロニー数が陰性対照群と比較して、２倍以上確実に増
加した。以上の結果から、実施例２の化合物は、遺伝毒性に対して安全であると評価され
た。

実施例２の化合物の単回毒性を試験するために、ｍａｌｅｒａｔとｆｅｍａｌｅｒ
ａｔの５匹のそれぞれに実施例２の化合物２，０００ｍｇ／ｋｇを単回投与した。試験の
結果、死亡した実験動物はなく、前記結果によって、実施例２の化合物は、単回毒性に対
して安全であると評価された。

表１５は、以上の本発明のアデノシン誘導体に対する毒性試験の結果を整理したもので
ある。表１５に示されたように、本発明のアデノシン誘導体は、細胞毒性、心臓毒性、遺
伝毒性及び単回毒性に対して安全であるという点を確認することができる。

＜実験例１７＞肝の主要構成細胞群でＡ_３ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒの発
現分析

マウスの肝に、ｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ、ｐ
ｒｏｔｅｉｎａｓｅ）を直接灌流（ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）を通じて肝に存在する結合組織
を分解した後、単細胞（ｓｉｎｇｌｅｃｅｌｌ）状態で作った後、肝細胞（ｈｅｐａｔ
ｏｃｙｔｅｓ）、クッパー細胞（Ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓ）及び肝星状細胞（ｈｅｐ
ａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ）を分離した。肝星状細胞の分離は、Ｎｙｃｏ
ｄｅｎｚを利用した密度勾配遠心法（ｄｅｎｓｉｔｙｇｒａｄｉｅｎｔｃｅｎｔｒｉ
ｆｕｇａｔｉｏｎ）を用いて特定の比重を有したｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃ
ｅｌｌ−ｅｎｒｉｃｈｅｄｆｒａｃｔｉｏｎを分離した。最終的にｍａｇｎｅｔｉｃ
ｂｅａｄ−ｂａｓｅｄｎｅｇａｔｉｖｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎを行うことにより、肝星
状細胞を分離して培養した。分離した細胞群別にＡ_３ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐ
ｔｏｒ（Ａ_３ＡＲ）の発現をリアルタイム重合酵素連鎖反応（ｒｅａｌ−ｔｉｍｅＰ
ＣＲ）を通じて確認し、図１７は、その結果を示すグラフである。図１７において、ＨＳ
Ｃｓは、肝星状細胞を意味し、ＫＣｓは、クッパー細胞を意味する。

Ａ_３ＡＲｍＲＮＡ発現は、肝細胞、クッパー細胞及び肝星状細胞でいずれも発現さ
れるが、図１７に示されたように、クッパー細胞で特に多くの発現が確認され、肝星状細
胞も、有意な発現が確認されることが分かる。

＜実験例１８＞本発明のアデノシン誘導体の肝星状細胞に対する抗繊維化作用分析

肝星状細胞を培養して、非活性化状態（Ｄａｙ１）及び活性化状態（Ｄａｙ３）で
実施例２の化合物の抗繊維化効能を分析した。実施例２の化合物を濃度別（２、４及び８
ｐＭ）に処理した後、肝星状細胞の代表的な肝繊維化活性因子であるＴｉｍｐｌ、Ｃｏｌ
ｌａｌ及びＡｃｔａ２（ｏｔＳＭＡ）の発現をリアルタイムＰＣＲで分析し、図１８は、
その結果を示すグラフである。

図１８を参照すれば、マトリックスメタロプロテアーゼ（Ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌ
ｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ；ＭＭＰｓ）の抑制を通じて纎維化を誘導すると知られたＴｉ
ｍｐｌの肝星状細胞での発現が、実施例２の化合物によって濃度依存的に減少したことが
分かり（図１８のＡ）、活性化された肝星状細胞から生産される代表的な細胞外マトリッ
クス（ＥｘｔｒａＣｅｌｌｕｌａｒＭａｔｒｉｘ；ＥＣＭ）であるコラーゲン（Ｃｏ
ｌｌａｇｅｎ）の発現も、実施例２の化合物によって減少したことが分かり（図１８のＢ
）、また、活性化された肝星状細胞の代表的なマーカーであるＡｃｔａ２（ａｌｐｈａ
ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ）の発現も、実施例２の化合物によって濃度依
存的に減少したことが分かる（図１８のＣ）。

図１８に示されたように、実施例２の化合物の抗繊維化効果は、肝星状細胞の肝繊維化
活性に直接に作用することが分かる。

以上、本発明の実施例を説明したが、当業者ならば、本発明のその技術的思想や必須的
な特徴を変更せずとも、他の具体的な形態で実施可能であることを理解できるであろう。
したがって、前述した実施例は、あらゆる面で例示的なものであり、限定的ではないとい
うことを理解せねばならない。

Claims

下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む
肝疾患の予防または治療用薬学的組成物。

（前記式において、
Ａは、Ｓであり、
Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ_６〜Ｃ_１０のア
リールで置換された直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_５のアルキル、非置換されるか、独立
して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_４のアルコキシ基が、
１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジル
であり、
Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。
前記肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎、肝線維症及び肝硬変症のうち１つ以上を含む
請求項１に記載の肝疾患の予防または治療用薬学的組成物。
前記化学式１は、下記化学式Ａで表される化合物である請求項１に記載の肝疾患の予防
または治療用薬学的組成物。

。
下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む肝疾患の予防ま
たは治療用経口投与剤。

（前記式において、
Ａは、Ｓであり、
Ｒは、非置換されるか、独立して、または選択的に１または２以上のＣ_６〜Ｃ_１０のア
リールで置換された直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_５のアルキル、非置換されるか、独立
して、または選択的にハロゲン及び直鎖状または測鎖状のＣ_１〜Ｃ_４のアルコキシ基が、
１または２以上に置換されたベンジルまたはヒドロキシカルボニルで置換されたベンジル
であり、
Ｙは、Ｈまたはハロゲン元素である）。
メチルセルロース（ＭＣ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコ
ール（ＰＥＧ）、及び蒸留水からなる群から選択される１つ以上を含む賦形剤をさらに含
む請求項４に記載の肝疾患の予防または治療用経口投与剤。
前記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、粉末状にカプセル
剤内に充填される請求項４に記載の肝疾患の予防または治療用経口投与剤。
前記肝疾患は、非アルコール性脂肪肝炎及び肝線維症のうち１つ以上を含む請求項４に
記載の肝疾患の予防または治療用経口投与剤。
前記化学式１は、下記化学式Ａで表される化合物である請求項４に記載の肝疾患の予防
または治療用経口投与剤。

。