JP2021031408A

JP2021031408A - 糖代謝改善用組成物

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Publication number: JP2021031408A
Application number: JP2019149986A
Authority: JP
Inventors: 孝之利光; Takayuki Toshimitsu; 圭介古市; Keisuke Furuichi; 幸夫浅見; Yukio Asami
Original assignee: Meiji Co Ltd
Current assignee: Meiji Co Ltd
Priority date: 2019-08-19
Filing date: 2019-08-19
Publication date: 2021-03-01
Anticipated expiration: 2039-08-19
Also published as: JP2023175938A; JP7364390B2

Abstract

【課題】ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含む、ヒトの糖代謝改善用組成物を提供する。【解決手段】ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含む組成物をヒトに摂取させることにより、該ヒトにおける糖代謝を改善する。【選択図】なし

Description

本発明は、ヒトの糖代謝を改善するための組成物に関する。

肥満や、肥満と複合してメタボリックシンドロームを引き起こす糖尿病等の生活習慣病の患者の増加は、国民の健康水準の悪化や医療費の増大を招くことから、全世界で大きな問題となっている。メタボリックシンドロームの予防には適度な運動やバランスの良い食生活が重要であるが、メタボリックシンドロームの予防に有効な機能性成分を含む飲食品の摂取も有効であることが知られている（非特許文献１）。今日、メタボリックシンドロームの予防・改善機能を有する食品素材を含む様々な商品が存在するが、多くは脂肪の燃焼促進や吸収抑制等の対症療法としての作用を奏するに過ぎず、糖や脂質の代謝を正常化してメタボリックシンドロームを根本的に改善するものとは言い難い。

ところで、糖や脂質の代謝機能の低下の原因の一つとして、脂肪組織の慢性炎症が知られている。具体的には、単球走化性促進因子（Monocyte Chemotactic Protein-1: ＭＣＰ−１）やインターロイキン−６（ＩＬ−６）等の炎症性サイトカインが増加することにより、脂肪組織へのマクロファージの浸潤が亢進し、糖や脂質の正常な代謝に必要なホルモンの産生が減少することが知られている（非特許文献２および３）。

従来、特定の乳酸菌が、マウスにおいて糖や脂質の代謝を改善することが知られている（特許文献１、非特許文献４および５）。

しかしながら、健康増進の観点からは、ヒトにおいて糖の代謝を効果的に改善する手法が依然として求められている。また、生活習慣病の患者における炎症を抑制することは重要な課題である。

国際公開第２０１２／０１４９７１号

江川香他肥満者に対するケルセチン配糖体（酵素処理イソクエルシトリン）配合緑茶飲料の体脂肪低減作用および安全性の検証 Jpn Pharmacol Ther（薬理と治療） 40:495-03, 2012 Xu H et al. "Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the development of obesity-related insulin resistance" J Clin Invest, 112:1821-1830, 2003 Weisberg SP et al. "CCR2 modulates inflammatory and metabolic effects of high-fat feeding" J Clin Invest, 116:115-124, 2006 T. Toshimitsu et al. "Identification of Lactobacillus plantarum strain that meliorates chronic inflammation and metabolic disorders in obese and type 2 diabetic mice" J Dairy Sci, 99:933-946, 2016 Tohru Sakai et al. "Lactobacillus plantarum OLL2712 regulates glucose metabolism in C57BL/6 mice fed a high-fat diet" J Nutr Sci Vitaminol, 59, 144-147, 2013

本発明は、ヒトにおける糖代謝を効果的に改善するための組成物を提供することを一つの目的とする。

本発明者らは、鋭意検討の結果、ラクトバチルス属に属する乳酸菌が、ヒトにおいて、特定の炎症性サイトカインを顕著に低減する活性を有することを見出し、ヒトにおける糖の代謝を改善し得ることを見出した。本発明はこれらの知見に基づくものである。

本発明によれば、以下の発明が提供される。
［１］ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含むヒトの糖代謝改善用組成物。
［２］ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含むヒトの抗炎症用組成物。
［３］前記乳酸菌が、ヒトの血中における単球走化性促進因子（Monocyte Chemotactic Protein-1: ＭＣＰ−１）およびインターロイキン−６（ＩＬ−６）から選択される少なくとも１つの炎症性サイトカインの量を低減させる活性を有する乳酸菌である、［１］または［２］に記載の組成物。
［４］前記乳酸菌がラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）である、［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物。
［５］前記乳酸菌が乳酸菌の死菌体を含む、［１］〜［４］のいずれかに記載の組成物。
［６］前記乳酸菌が加熱処理死菌体を含む、［１］〜［５］のいずれかに記載の組成物。
［７］前記組成物が食品組成物である、［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］前記組成物が医薬組成物である、［１］〜［６］のいずれかに記載の組成物。
［９］前記乳酸菌が、配列番号１で表される塩基配列と９０％以上の相同性を有する１６ＳｒＲＮＡ遺伝子を有するものである、［１］〜［８］のいずれかに記載の組成物。
［１０］前記乳酸菌が、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１１２６２の下で寄託されたラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）ＯＬＬ２７１２株である、［１］〜［９］のいずれかに記載の組成物。

本発明によれば、ヒトにおいて、脂肪組織の慢性炎症および糖代謝の異常に関連する特定の炎症性サイトカインを顕著に低減し、その結果、糖の代謝を改善することができる。

発明の具体的説明

糖代謝改善用組成物
本発明の一つの実施態様によれば、ラクトバチルス属に属する乳酸菌（以下、「乳酸菌」ともいう）を含む、ヒトにおける糖代謝を改善するための組成物が提供される。

一つの実施態様によれば本発明の組成物に含有されるラクトバチルス属に属する乳酸菌は、ヒトにおいて、血中のＭＣＰ−１およびＩＬ−６から選択される少なくとも１つの炎症性サイトカインの量を低減させる活性を有する乳酸菌であることが好ましい。乳酸菌は、好ましくはこれらの炎症性サイトカインの少なくとも１つの血中量を選択的に低減させる活性を有する乳酸菌であり、より好ましくはこれらの炎症性サイトカインの両方の血中量を選択的に低減させる活性を有する乳酸菌である。また、ＭＣＰ−１およびＩＬ−６は脂肪組織の炎症を引き起こし、糖および脂質の代謝異常の原因となることが知られていることから、血中のＭＣＰ−１および／またはＩＬ−６の量を低減させる活性を有する乳酸菌を用いることにより、糖代謝の改善に加えて、炎症の抑制、特に脂肪組織の炎症の抑制、および脂質代謝の改善も可能となる。

本明細書において、炎症性サイトカインについて「低減する」とは、乳酸菌または乳酸菌を含む組成物の刺激によって、刺激を受けた対象における各炎症性サイトカインの血中量が、統計学的に有意に（すなわち、誤差の範囲を超えて）低下することを意味する。また、ＭＣＰ−１およびＩＬ−６について「選択的に低減する」とは、乳酸菌または乳酸菌を含む組成物の刺激によって、刺激を受けた対象において、他の炎症性サイトカインが有意に低減しないのに対し、ＭＣＰ−１および／またはＩＬ−６が有意に低減することを意味する。なお、統計学的な解析は、当業者に公知の統計学的解析手法を用いることができ、反復測定一元配置分散分析とボンフェローニ補正をした対応あるｔ検定とによって解析することができる。また、血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量に関して「低減させる活性」とは、血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量をそれぞれ有意に低減させることができる能力を意味する。血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量を低減させる活性の有無は、具体的には実施例に記載の方法により決定される。

本発明の糖代謝改善用組成物は、糖代謝が正常なヒトおよび糖代謝が異常なヒトのいずれにおいても糖代謝改善効果を奏するが、糖代謝が異常なヒトにおいて特に効果を奏することができる。また、本発明の糖代謝改善用組成物は、適用対象の血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量によらず糖代謝改善効果を奏することができる。すなわち血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量が低い（低炎症）対象、および血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量が高い（高炎症）対象のいずれにおいても糖代謝改善効果を奏するが、高炎症の対象において特に顕著な糖代謝改善効果を奏することができる。本発明の組成物を高炎症のヒトに適用することは、炎症の抑制と糖代謝の促進を両立して健康を増進する観点から、好ましい。本明細書において「低炎症」とは、血中ＭＣＰ−１濃度が５ｐｇ／ｍＬ未満であり、かつ／または血中ＩＬ−６濃度が０．５ｐｇ／ｍＬ未満である状態をいう。また、「高炎症」とは、血中ＭＣＰ−１濃度が５ｐｇ／ｍＬ以上であり、かつ／または血中ＩＬ−６濃度が０．５ｐｇ／ｍＬ以上である状態をいう。

本発明の組成物に含まれる乳酸菌は、ラクトバチルス属に属する乳酸菌であれば特に限定されることなく用いることができる。好ましくは、ラクトバチルス属に属する乳酸菌は、ヒトの血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６から選択される少なくとも１つの炎症性サイトカインの量を低減させる活性を有する乳酸菌である。ラクトバチルス属に属する乳酸菌としては、例えば、ラクトバチルス・デルブルエッキイ亜種ブルガリクス（Lactobacillus delbrueckii subsp. burgaricus）、ラクトバチルス・デルブルエッキイ亜種ラクティス（Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバチルス・ヘルベティクス（Lactobacillus helveticus）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）、ラクトバチルス・クリスパタス（Lactobacillus crispatus）、ラクトバチルス・アミロボラス（Lactobacillus amylovorus）、ラクトバチルス・ガリナルム（Lactobacillus gallinarum）、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）、ラクトバチルス・オリス（Lactobacillus oris）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、ラクトバチルス・ジョンソニイ（Lactobacillus johnsonii）、ラクトバチルス・フェルメンタム（Lactobacillus fermentum）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・ペントサス（Lactobacillus pentosus）、ラクトバチルス・パラプランタラム（Lactobacillus paraplantarum）、ラクトバチルス・パラコリノイデス（Lactobacillus paracollinoides）、ラクトバチルス・ハメシ（Lactobacillus hammesii）等が挙げられる。これらの乳酸菌のうち、好ましくはラクトバチルス・プランタラムであり、より好ましくはラクトバチルス・プランタラムＯＬＬ２７１２株である。

ラクトバチルス・プランタラムＯＬＬ２７１２株は、２０１０年７月２日付で独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に寄託され、その後、国際寄託に移管され受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１１２６２が付与されている。なお、Budapest Notification No. 282 (http://www.wipo.int/treaties/en/notifications/budapest/treaty_budapest_282.html)に記載されるとおり、独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＩＰＯＤ、ＮＩＴＥ）が独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（ＩＰＯＤ、ＡＩＳＴ）から特許微生物寄託業務を承継したため、ラクトバチルス・プランタラムＯＬＬ２７１２株は、現在は、独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＩＰＯＤ、ＮＩＴＥ）（千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８１２０号室）に受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１１２６２のもとで寄託されている。

本発明の組成物に含まれる乳酸菌としては、上記寄託菌株と実質的に同等の菌株を用いることもできる。実質的に同等の菌株とは、例えば、上述したラクトバチルス属に属する乳酸菌の菌株であって、その１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記寄託菌株の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列（配列番号１）と９０％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上の相同性を有し、かつ、好ましくは上記菌株と同一の菌学的性質を有する菌株を言う。同一の菌学的性質を有する菌株は、好ましくはヒトの血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６から選択される少なくとも１つの炎症性サイトカインの量を低減させる活性を有する点で、上記寄託菌株と同程度の活性を有する菌株である。さらに、本発明の組成物に含まれる乳酸菌としては、本発明の効果が奏される限り、寄託菌株またはそれと実質的に同等の菌株から、変異処理、遺伝子組み換え、自然変異株の選択等によって育種された菌株であってもよい。

本発明の組成物に含まれる乳酸菌としては、乳酸菌の菌体そのものの他に、例えば乳酸菌の菌体を含む培養物等が挙げられる。乳酸菌の菌体としては、生菌体および死菌体のいずれも用いることができるが、好ましくは死菌体であり、より好ましくは生菌体を加熱処理することにより得られる死菌体（加熱処理死菌体）である。すなわち、本発明の組成物に含まれる乳酸菌には、好ましくは死菌体、より好ましくは加熱処理死菌体が含まれる。また、乳酸菌の継代数は、本発明の効果が奏される限り特に限定されないが、例えば、１〜３０、好ましくは５〜１５、より好ましくは１１〜１３である。

乳酸菌の培養条件としては、本発明の効果が奏される限り特に限定されず、通常乳酸菌が培養される条件とすることができる。例えば、培地としては、ホエイ粉末、ホエイタンパク質濃縮物を滅菌水に溶解し、プロテアーゼＡにより消化した後、酵母抽出物、魚抽出物およびＭｎＳＯ_４を添加し、さらに各種栄養素（ビタミン、ミネラル、脂肪酸エステル）を添加し、ＮａＯＨによりｐＨを６．７に調整した後、オートクレーブにかけて滅菌して得られる培地を用いることができる。また、培養中のｐＨは４．８〜６．８とすることができる。ｐＨの調整にはＫ_２ＣＯ_３を用いることができる。培養中の温度は２９〜４０℃とすることができる。

加熱処理死菌体を得るための加熱処理は、本発明の効果が奏される限り特に限定されず、乳酸菌を殺菌するために通常用いられる条件で行われる。

乳酸菌としては、上記加熱処理の他に、例えば濃縮や希釈、凍結、乾燥、粉末化等の処理を行ったものを用いることもできる。

本発明の組成物に含まれる乳酸菌としては、上述した培養や各種処理によって調製したものを用いてもよく、乳酸菌を含有する市販の組成物を用いてもよい。

本発明の組成物において、組成物の質量当たりの乳酸菌の個数は、本発明の効果が奏される限り特に限定されないが、好ましくは１０^６〜１０^１４個／ｇ、より好ましくは１０^７〜１×１０^１３個／ｇ、より一層好ましくは１０^８〜１０^１２個／ｇ、特に好ましくは１０^８〜１０^１０個／ｇである。また、本発明の組成物において、組成物中の固形分の質量当たりの菌体乾燥質量は、好ましくは０．０１〜１００質量％、より好ましくは１〜８０質量％、より一層好ましくは１０〜４０質量％である。

本発明の組成物は、本願発明の効果を妨げない限り、乳酸菌以外の成分を含んでいてもよい。乳酸菌以外の成分としては、例えば、培地成分、経口経管摂取に適した添加物、水等の溶媒、糖質、タンパク質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、生体必須微量金属（硫酸マンガン、硫酸亜鉛、塩化マグネシウム、炭酸カリウム等）、香料、食品衛生上または薬学的に許容可能な担体、食品添加物等が挙げられる。

糖質としては、例えば、糖類、加工澱粉（デキストリン、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテル等）、食物繊維等が挙げられる。

タンパク質としては、例えば、全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、ホエイ粉、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、α−カゼイン、β−カゼイン、κ−カゼイン、β−ラクトグロブリン、α−ラクトアルブミン、ラクトフェリン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質等の動植物性タンパク質、これらの加水分解物、バター、乳性ミネラル、クリーム、ホエイ、非タンパク態窒素、シアル酸、リン脂質、乳糖等の各種乳由来成分等が挙げられる。

脂質としては、例えば、ラード、魚油等、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の動物性油脂、パーム油、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の植物性油脂等が挙げられる。

ビタミン類としては、例えば、ビタミンＡ、カロチン類、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ群、ビタミンＥ、ビタミンＫ群、ビタミンＰ、ビタミンＱ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸等が挙げられる。

ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレン等が挙げられる。

本発明の組成物は、ラクトバチルス属に属する乳酸菌の他に、上述の通り、薬学的に許容可能な担体および／または添加物、食品衛生上許容可能な担体および／または添加物等を配合することにより製造することができる。したがって、本発明の別の態様によれば、ラクトバチルス属に属する乳酸菌を配合する工程を含んでなる、糖代謝改善用組成物の製造方法が提供される。

本発明の一つの実施態様によれば、本発明の糖代謝改善用組成物を食品組成物として提供することができる。本発明の食品組成物は、血糖値の上昇抑制用、血糖値の低下促進用、正常血糖値の維持用、血中インスリン値の上昇抑制用、血中インスリン値の低下促進用、正常インスリン値の維持用、または糖尿病、肥満症、メタボリックシンドローム、脂質異常症の予防および／または治療用であってもよい。

本発明の食品組成物は、乳酸菌を含有し得る食品であればどのような形態のものであってもよく、溶液、懸濁液、乳濁液、粉末、ペースト、半固体成形物、固体成形物等、経口または経管摂取可能な形態であればよい。具体的な食品としては、例えば、牛乳、乳飲料、清涼飲料、発酵乳、乳酸菌飲料、乳性飲料、ヨーグルト、チーズ、アイスクリーム、氷菓、チョコレート、タブレット（錠菓）、グミ、キャンディー、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、液体ミルク、流動食、病者用食品、栄養食品、冷凍食品、加工食品、調味料その他の市販食品等が挙げられる。

本発明の食品組成物は、糖代謝改善用、ＭＣＰ−１産生抑制用、ＩＬ−６産生抑制用、炎症抑制用等の用途が表示された飲食品とすることができる。飲食品には、「糖代謝改善用」、「血糖値の上昇抑制用」、「血糖値低下用」、「正常血糖値の維持用」、「血中インスリン値の上昇抑制用」、「正常インスリン値の維持用」、「ＨｂＡ１ｃの低下用」、「インスリン抵抗性の改善用」、「糖尿病、肥満症、メタボリックシンドロームの予防用」、「血糖値を下げるホルモン（インスリン）の働きを助ける」、「ＭＣＰ−１産生抑制用」、「ＩＬ−６産生抑制用」、「炎症抑制用」、「抗炎症用」等の表示をすることができる。また、これらの以外の表示であっても、ＭＣＰ−１産生抑制および／またはＩＬ−６産生抑制によって生じる効果を表す文言であれば、同様に使用できる。

本明細書において「表示」とは、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為を意味し、上記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物及び媒体等の如何に拘わらず、すべて本発明の「表示」に該当する。しかしながら、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により表示することが好ましい。

表示としては、行政等によって許可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましい。例えば、健康食品、機能性食品、機能性表示食品、経腸栄養食品、特別用途食品、病者用食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示を例示することができ、その他厚生労働省によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示等を例示することができる。さらに詳細には、健康増進法施行規則（平成１５年４月３０日日本国厚生労働省令第８６号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、およびこれに類する表示等を例示することができる。

本発明の別の態様によれば、本発明の糖代謝改善用組成物を医薬組成物として提供することができる。本発明の医薬組成物は、血糖値の上昇抑制用、血糖値の低下促進用、正常血糖値の維持用、血中インスリン値の上昇抑制用、血中インスリン値の低下促進用、正常インスリン値の維持用、抗炎症用、または糖尿病、肥満症、メタボリックシンドローム、脂質異常症の予防および／または治療用であってもよい。本発明の医薬組成物は、乳酸菌を含有させる以外は、当該食品の通常の製造手順に従って製造することができる。ここで、医薬組成物とは、本発明の組成物を、常法に従って、経口製剤または非経口製剤として調製したものである。製剤化には、製剤化のために許容可能な添加剤を併用してもよい。製剤化のために許容可能な添加剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味料、着色料、香料、緩衝剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤等が挙げられる。医薬組成物が経口製剤の場合には、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、徐放剤等の固形製剤、溶液、懸濁液、乳濁液等の液状製剤の形態をとることができる。また、医薬組成物が非経口製剤の場合には、注射剤や座剤等の形態をとることができる。なお、摂取対象への摂取（投与）の簡易性の点からは、医薬組成物では、経口製剤であることが好ましい。

また、本発明の別の態様によれば、ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含む、ヒトにおけるＭＣＰ−１および／またはＩＬ−６を低減させるための組成物が提供される。

本発明の組成物の摂取量は、本発明の効果が奏される限り特に限定されず、摂取者の年齢、健康状態、体重等に応じて適宜調整することができる。典型的には、一日当たり０．０１〜１００００ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．５〜３００ｍｇ／ｋｇ体重、より一層好ましくは１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重である。また、乳酸菌の菌体乾燥質量として、好ましくは０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０５〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、より一層好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。また、乳酸菌の個数として、好ましくは１×１０^４〜１×１０^１２個／ｋｇ体重、より好ましくは１０^５〜１０^１１個／ｋｇ体重、より一層好ましくは１０^６〜１０^１０個／ｋｇ体重、特に好ましくは１０^６〜１０^８個／ｋｇ体重である。

本発明の組成物は、その効果をよりよく発揮させるために、長期間にわたって継続的に摂取（投与）することが好ましく、具体的には、３日以上継続的に摂取（投与）することが好ましく、１週間以上継続的に摂取（投与）することがより好ましい。摂取（投与）期間としては、例えば、１〜６週間、１〜１２週間、２〜１０週間、４〜１０週間、４〜１２週間等が挙げられる。本明細書において「継続的」とは、本発明の組成物を毎日決められた量摂取し続けることを意味する。

本発明の別の態様によれば、ラクトバチルス属に属する乳酸菌の有効量をヒトに摂取させることを含む、該ヒトにおける糖代謝を改善する方法が提供される。また、本発明の好ましい態様によれば、上記方法は、ヒトにおける炎症を改善するための方法である。

本発明の一つの実施態様によれば、「糖代謝改善」には、糖代謝の異常の改善、低い糖代謝の活性化や増進、正常な糖代謝の維持または低下防止等が包含される。糖代謝の異常または低下の原因は特に限定されないが、代表的な原因として生活習慣が挙げられる。本発明の組成物による糖代謝改善作用としては、例えば、血糖量の増大を抑制する作用、血糖量を低減させる作用、正常な血糖量を維持する作用、血中インスリン量の増大を抑制する作用、血中インスリン量を低減させる作用、正常な血中インスリン量を維持する作用等が挙げられる。なお、本明細書において「改善」とは、異常または疾患の進展または悪化を、医療行為により止める、緩和するまたは遅延させる「治療」の意味を含むだけでなく、異常または疾患の進展または悪化を、非医療行為により止める、緩和するまたは遅延させることも含む。さらに、「改善」には、異常または疾患の想定される悪化に対して事前に備え、異常または疾患の発生または再発を非医療行為または医療行為により未然に防ぐ「予防」の意味も包含される。

また、乳酸菌の接種対象であるヒトは、好ましくは高炎症者である。また、本明細書において、高炎症者における血中ＭＣＰ−１濃度は、通常５ｐｇ／ｍＬ以上であり、好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ以上、より好ましくは１５ｐｇ／ｍＬである。高炎症者における血中ＭＣＰ−１濃度は特に上限はないが、好ましくは１０００ｐｇ／ｍＬ以下、より好ましくは、５００ｐｇ／ｍＬ以下である。これらの上限値と下限値とは組み合わせることができる。また、高炎症者における血中ＩＬ−６濃度は、通常０．５ｐｇ／ｍＬ以上であり、好ましくは１．０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１．５ｐｇ／ｍＬ以上である。高炎症者における血中ＩＬ−６濃度は特に上限はないが、好ましくは１００ｐｇ／ｍＬ以下、より好ましくは５０ｐｇ／ｍＬ以下である。これらの上限値と下限値とは組み合わせることができる。

糖代謝を改善する方法において、上記乳酸菌の投与量および投与期間は、本発明の効果が奏される限り特に限定されず、投与対象の年齢、健康状態、体重等に応じて適宜調整することができる。典型的には、本発明の方法において、記乳酸菌の投与量および投与期間は、本発明の組成物における乳酸菌の投与量および投与期間と同様とされる。

また、本発明の別の態様によれば、ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含む組成物の有効量をヒトに摂取させることを含む、該ヒトにおける糖代謝の異常により引き起こされる疾患および／または障害を治療および／または予防する方法が提供される。

糖代謝の異常により引き起こされる疾患、障害としては、特に限定されないが、例えば、糖尿病、肥満症、メタボリックシンドローム等が挙げられる。

本発明の別の態様によれば、糖代謝改善のための、ラクトバチルス属に属する乳酸菌の使用が提供される。

本発明の別の態様によれば、糖代謝改善用組成物の製造のための、ラクトバチルス属に属する乳酸菌の使用が提供される。

以下の例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。

例１：乳酸菌を含有する組成物の糖代謝改善効果の確認
（１）被験者の選定（スクリーニング）
以下の選択基準Ａおよび除外基準Ｂに基づき、糖代謝改善効果の確認試験のための被験者を選定した。
Ａ：選択基準
・本試験の目的、内容について十分な説明を受け、同意能力があり、十分に理解した上で自由意思により志願し、文書で参加に同意した者
・３５歳以上６５歳以下の健康な男女
・スクリーニング検査時に空腹時血糖値が１０５ｍｇ／ｄＬ以上１３０ｍｇ／ｄＬ未満の者
Ｂ：除外基準
・薬物治療中または通院治療中の者
・試験結果に影響があると考えられる重篤な既往歴を有する者
・スクリーニング検査前３ヶ月間に、ヨーグルトや乳酸菌飲料を週２回以上摂取する習慣のあった者
・スクリーニング検査前３ヶ月間に、試験結果に影響する可能性がある医薬品、医薬部外品、健康食品、特定保健用食品を日常において服用・摂取していた者
・アルコール多飲用者（純アルコール換算で１日平均６０ｇを超える飲酒者）
・本試験への参加同意取得前１ヶ月以内に他の臨床試験に参加していた者、または本試験の参加同意取得後に他の臨床試験に参加する予定のある者
・その他、試験責任医師が被験者として不適当と判断した者

２２１名の志願者から、上記基準に基づいて３０名の被験者（男性：２２名、女性：８名）を選定した。被験者の年齢は５２．５±８．１歳（男性：５１．９±８．７歳、女性：５４．３±６．３歳）であった。

（２）組成物の調製
各原料（酸味料、甘味料、安定剤、果汁、香料、乳酸菌菌体、水）を混合して本発明の組成物（無色透明なグレープフルーツ風味の清涼飲料）を得、約１００ｍＬをボトル詰めした（以下「被験組成物」ともいう）。被験組成物における乳酸菌（加熱処理した乳酸菌ラクトバチルス・プランタラムＯＬＬ２７１２株（受託番号：ＦＥＲＭＢＰ−１１２６２）の菌体量は約１０^１０個／１００ｍＬであった。なお、乳酸菌の加熱処理は、菌体を上記濃度となるように濃縮した後、イオン交換水に懸濁し、９５℃で３分間加熱することにより行った。

（３）炎症性サイトカインに対する効果
以下の手順に従って、本発明の組成物が炎症性サイトカインの血中量に及ぼす影響について評価を行った。
まず、被験組成物を、毎日１回、１２週間にわたり自由な時間に摂取させた。摂取開始から０週、４週、８週および１２週の各時点において採血を行い、血清を用いて糖代謝に関連する以下のサイトカインの血中濃度をＢｉｏ−Ｐｌｅｘマルチプレックスシステムを用いて測定した。また、摂取開始から１２週後に被験組成物の摂取を中止し、摂取中止から４週の時点においても同様の測定を行った。
・単球走化性促進因子（ＭＣＰ−１）
・インターロイキン−６（ＩＬ−６）
・インターロイキン−８（ＩＬ−８）
・腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）
・インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）
・インターロイキン−１７（ＩＬ−１７）

各時点における各炎症性サイトカインについての測定値を、反復測定一元配置分散分析およびボンフェローニ補正をした対応のあるｔ検定により評価した。結果を表１に示す。なお、表中の数値の単位はいずれもｐｇ／ｍＬである。

表１に示すように、血中のＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量は、被験組成物の摂取開始後に摂取開始前に対して有意に減少した。具体的には、血中ＭＣＰ−１量は、被験組成物の摂取開始から４週後、８週後および１２週後のいずれの時点においても摂取開始前に対して有意に減少し、摂取中止から４週後においても摂取開始前に対して有意に減少した。また、血中ＩＬ−６量は、被験組成物の摂取開始から４週後に、摂取開始前に対して有意に減少した。一方、血中のＩＬ−８、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１βおよびＩＬ−１７の量は、摂取開始から４週後、８週後および１２週後のいずれの時点においても有意な変動は見られなかった。これらの結果から、本発明の組成物は、特定の炎症性サイトカイン（ＭＣＰ−１およびＩＬ−６）の量を選択的に低減することが示された。

また、被験組成物の摂取開始前に全被験者の炎症性サイトカイン（ＭＣＰ−１およびＩＬ−６）の血中濃度を測定し、これらの炎症性サイトカインの血中濃度のいずれかがが平均値以上の群（高炎症群、ｎ＝１９（男性：１４名、女性：５名）、ＭＣＰ−１の平均濃度：２３．９２±７．９５ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−６の平均濃度：２．８３±０．５６ｐｇ／ｍＬ）と、いずれも平均値未満の群（低炎症群、ｎ＝１１（男性：８名、女性：３名）、ＭＣＰ−１の平均濃度：０．０２±０．０２ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−６の平均濃度：０．２８±０．１８ｐｇ／ｍＬ）とに分けて、各群について空腹時血糖（ＦＰＧ）値およびインスリン抵抗性指数（ＨＯＭＡ−ＩＲ）の測定を行った。なお、高炎症群の被験者の多くで、被験組成物の開始前にインスリン抵抗性が認められた（ＨＯＭＡ−ＩＲ≧２．０）。空腹時血糖（ＦＰＧ）値およびインスリン抵抗性指数（ＨＯＭＡ−ＩＲ）についての結果をそれぞれ表２および３に示す。

表２および３に示すように、低炎症群および高炎症群のいずれにおいても、被験組成物の摂取開始後に、摂取開始前と比較して血中のＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量のいずれも維持または低減する傾向が見られた。特に、糖代謝の異常を引き起こしやすい高炎症群においては、血中ＭＣＰ−１量は、被験組成物の摂取開始から８週後および１２週後に、摂取開始前に対して有意に低減し、血中ＩＬ−６量は、被験組成物の摂取開始から８週後に、摂取開始前に対して有意に低減し、１２週後には摂取開始前に対して有意ではないものの低減した。これらの結果から、本発明の組成物は、ヒトにおいて特定の炎症性サイトカイン（ＭＣＰ−１およびＩＬ−６）の量を選択的に低減すること、特に、糖代謝の異常を引き起こしやすい高炎症状態のヒトにおいてはとりわけ顕著にこれらの炎症性サイトカインを選択的に低減することが示された。なお、上記結果に関連して、空腹時血糖値が正常型から糖尿病型に近づくにつれ炎症状態となる割合が高まり、炎症状態が悪化するに伴い加速度的に高炎症状態になることが知られている。従って、低炎症群に関し、血中のＭＣＰ−１およびＩＬ−６の量が、本発明の組成物の摂取によって維持されたことを示す表２および３の結果から、本発明の組成物が、低炎症状態のヒトにおいてＭＣＰ−１およびＩＬ−６の増大を抑制し、炎症状態の悪化、およびそれにより引き起こされる糖代謝の異常を抑制し得ることが示唆される。

（４）糖代謝改善効果の評価
上記（３）において記載したのと同様の方法で、本発明の組成物について、下記の指標に基づいて糖代謝改善効果の評価を行った。
・空腹時血糖（ＦＰＧ）値
・血中グリコアルブミン（ＧＡ）値
・血中ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値
・血中インスリン値
・インスリン抵抗性指数（ＨＯＭＡ−ＩＲ）
・量的インスリン感受性検査指数（ＱＵＩＣＫＩ）

具体的には、被験者から採取された各血液について、株式会社保健科学研究所において上記指標の測定を行った。すなわち、血漿におけるＦＰＧ値、血清におけるＧＡ値、および全血におけるＨｂＡ１ｃ値については、生化学自動分析装置を用いて酵素法により測定した。また、血清におけるインスリン値については、全自動化学発光免疫測定装置を用いてＣＬＩＡ法（化学発光免疫測定法）により測定した。また、ＨＯＭＡ−ＩＲおよびＱＵＩＣＫＩについては、それぞれ以下の計算式に基づき算出した。
ＨＯＭＡ−ＩＲ＝（空腹時血中インスリン濃度（μＵ／ｍＬ））×（空腹時血糖値（ｍｇ／ｄｌ））／４０５
ＱＵＩＣＫＩ＝１／［ｌｏｇ（空腹時血中インスリン濃度（μＵ／ｍＬ））＋ｌｏｇ（空腹時血糖値（ｍｇ／ｄＬ））］

各時点における各指標についての測定値を、反復測定一元配置分散分析およびボンフェローニ補正をした対応のあるｔ検定により評価した。結果を表４に示す。

表４に示すように、空腹時血糖値および血中グリコアルブミン値は、被験組成物の摂取開始から４週後および８週後に、摂取開始前に対して有意に改善（低下）した。また、インスリン抵抗性の指標であるＨＯＭＡ−ＩＲおよびＱＵＩＣＫＩの値は、被験組成物の摂取開始から１２週後に、摂取開始前に対して有意に改善した。血中ＨｂＡ１ｃ値については、摂取開始から４週後、８週後および１２週後のいずれの時点においても有意な変動は見られなかったが、多重比較解析を行った結果、摂取開始から１２週後に、摂取開始から４週後に対して有意に改善（低下）していた。なお、血中ＨｂＡ１ｃ値は測定時の１〜２ヶ月前からの平均血糖値を反映するものであることから、上述の血中ＨｂＡ１ｃ値の結果とその他の指標の結果とは矛盾するものではないと考えられる。これらの結果から、本発明の組成物は、ヒトにおける糖代謝を改善することが示された。

また、上記（３）において記載したのと同様の方法で、低炎症群および高炎症群の各群において空腹時血糖（ＦＰＧ）値およびインスリン抵抗性指数（ＨＯＭＡ−ＩＲ）の測定を行った。ＦＰＧ値およびＨＯＭＡ−ＩＲについての結果をそれぞれ表５および６に示す。

表５および６に示すように、低炎症群および高炎症群のいずれにおいても、被験組成物の摂取開始後に、摂取開始前に対して空腹時血糖値およびＨＯＭＡ−ＩＲ値のいずれも維持または低下する傾向が見られた。特に、糖代謝の異常を引き起こしやすい高炎症群においては、空腹時血糖値は、被験組成物の摂取開始から８週後および１２週後に、摂取開始前に対して有意に改善（低下）し、ＨＯＭＡ−ＩＲ値は、被験組成物の摂取開始から８週後に、摂取開始前に対して有意ではないものの改善（低下）し、１２週後には摂取開始前に対して有意に改善（低下）した。これらの結果から、本発明の組成物は、ヒトにおける糖代謝を維持または改善すること、特に、糖代謝の異常を引き起こしやすい高炎症状態のヒトにおいてはとりわけ顕著に糖代謝を改善することが示された。

これらの結果から、本発明の組成物を用いることにより、ヒトにおいて、糖代謝の異常を引き起こす特定の炎症性サイトカインを選択的に低減し、糖の代謝を改善できることが示された。

本発明によれば、ヒトにおいて、糖代謝の異常を引き起こす特定の炎症性サイトカインを顕著に低減し、糖の代謝を改善することができる。

Claims

ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含むヒトの糖代謝改善用組成物。
ラクトバチルス属に属する乳酸菌を含むヒトの抗炎症用組成物。
前記乳酸菌が、ヒトの血中におけるＭＣＰ−１およびＩＬ−６から選択される少なくとも１つの炎症性サイトカインの量を低減させる活性を有する乳酸菌である、請求項１または２に記載の組成物。
前記乳酸菌がラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
前記乳酸菌が乳酸菌の死菌体を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
前記乳酸菌が加熱処理死菌体を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
前記組成物が食品組成物である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
前記組成物が医薬組成物である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
前記乳酸菌が、配列番号１で表される塩基配列と９０％以上の相同性を有する１６ＳｒＲＮＡ遺伝子を有するものである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
前記乳酸菌が、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１１２６２の下で寄託されたラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）ＯＬＬ２７１２株である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。