JP2020534856A - 微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651、並びにこれらの使用 - Google Patents
微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651、並びにこれらの使用 Download PDFInfo
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Abstract
Description
微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651は、(サイレージ添加剤の使用なしに)エストニアで、自然にサイロ貯蔵された高品質のトウモロコシ(Zea mays L.)サイレージから単離された。サイレージサンプル中の乳酸杆菌の定量的な含量を決定するために、ペプトン水(Sigma−Aldrich,France)中で少数希釈法を使用して溶液の懸濁液(濃度を漸減させて)を作製し、MRS(de Man Rogosa Sharp)寒天(Biolife Italy)に植え付け、これを微好気性環境(10% CO2)で、37℃で48時間インキュベートした(サーモスタット「MCO−18AIC UV」三洋電機(株)、日本)。発生したコロニーを記述し、計数し、微生物総数を決定した。微生物の形態を描写するために、グラム染色法を使用して標本を作製し、顕微鏡検査を行った。乳酸桿菌種(Lactobacillus spp)に特有なコロニーおよび細胞の形態に基づいて、微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650株及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株は単離された。続いて、暫定的および詳細な同定をしたが、これは後述される。
MRS培養液(48〜72時間)は、微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650を、微好気性下又は嫌気性下で培養するのに好適であり、その後、均質な混濁増殖(turbid growth)が起こる。微好気性環境(10%のCO2)又は、嫌気性環境(CO2/N2/H2:5/90/5%)における37℃で48時間の培養後、コロニーは、灰白色であり、1.5〜2mmで、平坦であり、光沢を有し、透明で、表面がざらざらし、突起物がある。
DSMZの住所:Inhoffenstr.7B,D−38124 Braunschweig,Germany
DSMZの住所:Inhoffenstr.7B,D−38124 Braunschweig,Germany
方法:ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651の抗生物質に対する感受性を、嫌気性条件下(CO2/N2/H2:5/90/5%)、+37度、48時間、VetMIC Lact−1、VetMIC Lact−2プレート(SVA National Veterinary Institute, Uppsala, Sweden)で、ISO10932:2010基準に従って分析した。最小阻害濃度(MIC)を、EFSAにより報告されているMICカットオフ値と比較した。
感受性(S):特定の抗微生物のカットオフ値に等しいかまたはそれより低い濃度(S≦xmg/L)のいずれかでその増殖が阻害される場合は、細菌株は感受性があると定義される。
(多様な糖の存在下における増殖)
この実験の目的は、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株について、多様な糖の存在下の成長能力、および、培地の酸性化能力を調査することである。
n=logN1−logN0/log2、ここで、N1は与えられた時間の細胞濃度、N0は初期細胞濃度。
V=logN1−logN0/0.301xt、w、N1は与えられた時間の細胞濃度、N0は初期細胞濃度、tは特定の時期の時間(h)。
この実験の目的は、微好気性下及び嫌気性下の培養中におけるラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株の有機酸及びアルコールのプロファイルを決定することである。
この実験の目的は、植物材料発酵中におけるラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株の有機酸及びアルコールのプロファイルを決定することである。
この実験の目的は、25度、微好気性下及び嫌気性下の培養中におけるラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株の腸病原菌に対する抗微生物活性をテストすることである。
この実験の目的は、寒天ウェル-拡散(ディフュージョン)法を使用して、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株上精のトーウモロコシサイレージ由来の酵母に対する効果を評価することである。
この実験の目的は、植物材料の発酵中におけるラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651株の効果を評価することである。
収率=logN1−logN0、ここで、N1は与えられた時間の細胞濃度、N0は初期細胞濃度。
n=logN1−logN0/log2、ここで、N1は与えられた時間の細胞濃度、N0は初期細胞濃度。
V=logN1−logN0/0.301xt、w、N1は与えられた時間の細胞濃度、N0は初期細胞濃度、tは特定の時期の時間(h)。
サイレージ添加剤、L.ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、L.ブフネリ BioCC 228 DSM32651の容易に発酵する新鮮な材料に対する効果の探索
好気性下の安定性に対する2つのテストが行われた。最初のテストは、2回のエアーストレス(28日目と42日目に:24時間)を有する49日の貯蔵期間後に行われた。好気性下の安定性に対するテストは、約20度の温度制御された室内で行われた。温度は、PS−ES Data loggingシステムで4時間毎に記録された。
新鮮な材料の化学組成は、表8に示す。
サイレージ添加剤、L.ブフネリ BioCC 203 DSM32650及び、L.ブフネリ BioCC 228 DSM32651の発酵が困難な新鮮な材料に対する効果の探索
Honig (Honig, H.,1990:Evaluation of the aerobic stability. In: Proceedings of the Eurobac Conference, Swedish University of Agriculture Sciences, Uppsala/Sweden, Special Issue)に記載の方法に従って、90日の保存後、サイレージの好気性下安定性をテストした。サイレージは、幾何中心で測定された温度が、周囲温度を3度超えると好気的に不安定になると考えられる。温度の長期間変化は、9日(217時間)にわたり測定された。周囲温度及び、テストサイレージ、Comet温度データLogger S0141装置を使用して、1時間おきに記録した。サイレージサンプルは、良く確立された方法(AOAC, 2005. Official methods of analysis of AOAC International, 18th ed. Association of Official Analytical Chemists International, Gaithersburg, MD, USA)を使用して、分析した。
Claims (14)
- 単離された微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 203 DSM32650。
- 単離された微生物株ラクトバチルス・ブフネリ BioCC 228 DSM32651。
- 凍結乾燥形態の請求項1又は2に記載の前記微生物株。
- 請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物株を1又は複数含む組成物。
- 請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物株を含む飼料。
- 例えば、サイレージといった、発酵飼料である請求項5に記載の飼料。
- 飼料添加剤としての請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物の使用。
- サイレージの好気性下の安定性をサポートする請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物の使用。
- サイレージが低乾燥物含有量(≦20%)の飼料から作られたものである請求項8に記載の使用。
- 飼料の発酵における請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物の使用。
- 請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物を1又は複数含む組成物であって、
飼料の発酵を加速させ、
飼料中の乳酸及び酢酸の濃度を増加させ、
pHを低下させて、および、それにより、
飼料中の栄養素の損失を減少させる、組成物。 - 発酵されるべき飼料に請求項1〜3の何れか一項に記載の前記微生物を添加することによって、病原微生物の作用を抑制させ、且つ酵母の成長を阻害するための請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物の使用。
- 病原微生物が腸病原菌である請求項12に記載の使用。
- 請求項1〜3の何れか一項に記載の微生物が、発酵されるべき飼料に添加される、飼料の保存を長くする方法。
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