JP2020525506A

JP2020525506A - 緑内障治療のための配列相同性を有するファミリー、メンバーａ５抗体の用途

Info

Publication number: JP2020525506A
Application number: JP2019572534A
Authority: JP
Inventors: キム，ボンチョル; シクキム，ドン; クォン，スン−グ
Original assignee: ニューラクルサイエンスカンパニーリミテッド
Priority date: 2017-06-27
Filing date: 2018-06-27
Publication date: 2020-08-27
Anticipated expiration: 2038-06-27
Also published as: EP3645044A1; KR20210114554A; KR102511122B1; KR102327698B1; KR102472683B1; CN110972463B; KR20220143768A; JP6904616B2; KR20190109575A; CN110972463A; WO2019003162A1; US20240182555A1; US11746149B2; US20200157202A1; EP3645044A4

Abstract

本発明は対象の緑内障を治療するためのＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する拮抗剤（例えば、抗体又はその抗原結合部分）の薬学的用途に関するものである。

Description

発明の詳細な説明

〔技術分野〕
（電子的方式で提出された配列リストの参照）
本出願とともに提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル形式の電子的方式で提出された配列リスト（ファイル名：３７６３．００６ＰＣ０２＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：１６６，９０６バイト；生成日：２０１８年６月２５日）の内容はその全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。

（技術分野）
本発明は配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する抗体、その抗原結合断片、又はこのような抗体又はその抗原結合断片を含む組成物を使って対象（例えば、ヒト）の緑内障を治療する方法を提供する。

〔背景技術〕
緑内障は視神経頭（ｏｐｔｉｃｎｅｒｖｅｈｅａｄ）の構造変化（例えば、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の進行性消失及び視神経乳頭陥凹）を特徴とする眼科疾患であり、結果的に視力が損傷される（Vohra et al., Surv Ophthalmol 58(4): 311-20 (2013)）。治療しないで放置すれば、緑内障は永久的な失明を引き起こすことができる。緑内障は一般的にお年寄り層にもっと大きな影響を及ぼすが、新生児を含めて全年齢の個体に影響を及ぼすことができる（Ram et al., Indian J Med Res 140(4): 472-474 (2014)）。２０２０年まで全世界的におよそ７９６０万名のヒトが緑内障を有することにより、このうち１１００万人を超えるヒトは緑内障によって両眼が失明されると推定される（Gupta et al., Am Fam Physician 93(8): 668-674 (2016)）。

緑内障の主要危険要因は眼内の増加した流体圧力によって上昇した眼内圧力（ＩＯＰ）であると推定される。よって、現在用いることができる大部分の治療オプション（例えば、（ｉ）点眼剤：プロスタグランジン、ベータ遮断剤、アルファアドレナリン作動剤、及び縮瞳性（ｍｉｏｔｉｃ）又はコリン作動剤；（ｉｉ）経口薬：炭酸脱水酵素阻害剤；又は（ｉｉｉ）手術：レーザー療法）は上昇した眼内圧を減少させることに主に重点を置いている（Harasymowycz et al., J Ophthalmol 2016: 6509809 (2016)）。しかし、このような治療オプションは、幾多の望まない副作用（例えば、不規則的な心拍数、異常血圧、かすみ目、インポテンツ、疲労、痛症及び／又は不便さ）を引き起こす。さらに、上昇した眼内圧が緑内障の危険要因ではあるが、多くの緑内障患者は正常眼内圧（すなわち、正常眼圧緑内障）を示すこともある（Sommer et al., Arch Ophthalmol 109(8): 1090-1095 (1991)）。よって、緑内障に対するより効果的で包括的な治療オプションが要求される。

最も有り勝ちな２種の緑内障は、（１）開放隅角緑内障（ＯＡＧ）及び（２）閉塞隅角緑内障であり、このうちＯＡＧがおよそ７倍有り勝ちである（Gupta et al., Am Fam Physician 93(8): 668-674 (2016)）。緑内障の正確な原因はいまだ充分に解明されなかったが、動物研究は緑内障に関連した構造的損傷（例えば、網膜神経節細胞の消失）と炎症間の強い連関性を明かした（Tezel et al., Invest Ophthalmol Vis Sci 42: 1787-1794 (2001); Wang et al., Invest Ophthalmol Vis Sci 49: 1916-1923 (2008)）。

ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤を使って対象の緑内障を治療する方法がこの明細書に開示される。特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は緑内障に関連した炎症を減少、緩和、又は阻害することによって対象を治療する。

〔発明の概要〕
〔課題を解決するための手段〕
対象の緑内障を治療するためのＦＡＭ１９Ａ５（ｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ１９、ｍｅｍｂｅｒＡ５）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）がこの明細書に開示される。また、対象の緑内障に関連した炎症を減少、緩和、又は阻害するためのＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤がこの明細書に開示される。

いくつかの具体例において、緑内障は開放隅角緑内障、閉鎖隅角緑内障、正常眼圧緑内障（“ＮＴＧ”）、先天性緑内障、二次性緑内障、色素性緑内障、偽落屑緑内障（ｐｓｅｕｄｏ−ｅｘｆｏｌｉａｔｉｖｅ）緑内障、外傷緑内障、新生血管緑内障、虹彩角膜内皮症侯群、及びブドウ膜炎緑内障からなる群から選択される。いくつかの具体例において、緑内障は、視神経損傷、網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）消失、及び高い眼内圧（“ＩＯＰ”）、損傷された血液網膜関門、及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での小膠細胞活性水準の増加に関連する。いくつかの具体例において、緑内障は視神経頭側の機械的損傷及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での炎症水準の増加によって引き起こされる。

いくつかの具体例において、本明細書に開示されるＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、（ｉ）対象網膜神経細胞変性の開示を遅延させるか；（ｉｉ）対象網膜及び／又は視神経内での炎症水準を減少させるか；（ｉｉｉ）対象網膜の神経節細胞層内での網膜神経節細胞の頻度を増加させるか又は網膜神経節細胞の消失を減少させるか又は網膜神経節細胞の数を回復させるか；又は（ｉｖ）これらの任意の組合せを遂行する。

いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ、又はそれを含むベクターである。

いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体（”抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）、又はその抗原結合部分である。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５を含む。他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８を含む。さらに他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２９、３０及び３１を含む。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３２、３３及び３４を含む。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、又はヒト化抗体である。

いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は硝子体内（ｉｎｔｒａｖｉｔｒｅａｌｌｙ）経路を介して投与される。いくつかの具体例において、対象はヒトである。

（具体例）
具体例１．配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の緑内障を治療する方法。

具体例２．配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（“ＦＡＭ１９Ａ５”）タンパク質に対する拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の緑内障に関連した炎症を減少、緩和、又は阻害する方法。

具体例３．緑内障は、開放隅角緑内障、閉鎖隅角緑内障、正常眼圧緑内障（“ＮＴＧ”）、先天性緑内障、二次性緑内障、色素性緑内障、偽落屑緑内障、外傷緑内障、新生血管緑内障、虹彩角膜内皮症侯群、及びブドウ膜炎緑内障からなる群から選択される、具体例１又は２の方法。

具体例４．緑内障は、視神経損傷、網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）消失、高い眼内圧（“ＩＯＰ”）、損傷された血液網膜関門、及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での小膠細胞活性水準の増加に関連する、具体例１〜３のいずれか一方法。

具体例５．緑内障は、視神経頭側の機械的損傷及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での炎症水準の増加によって引き起こされる、具体例１〜４のいずれか一方法。

具体例６．拮抗剤は、対象での網膜神経細胞変性の開示を遅延させる、具体例１〜５のいずれか一方法。

具体例７．拮抗剤は、対象の網膜及び／又は視神経内での炎症の水準を減少させる、具体例１〜６のいずれか一方法。

具体例８．拮抗剤は、対象の網膜の神経節細胞層内での網膜神経節細胞の頻度を増加させるか又は網膜神経節細胞の消失を減少させるか又は網膜神経節細胞の数を回復させる、具体例１〜７のいずれか一方法。

具体例９．拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ、又はそれを含むベクターである、具体例１〜８のいずれか一方法。

具体例１０．拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はそのポリヌクレオチドを含むベクターである、具体例１〜８のいずれか一方法。

具体例１１．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）で測定したとき、１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；
（ｂ）ＥＬＩＳＡで測定したとき、１ｎＭ以下のＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；及び
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両者から選択された特性を示す、具体例１０の方法。

具体例１２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープとの結合に対して重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅａｎｔｉｂｏｄｙ）と交差競合（ｃｒｏｓｓ−ｃｏｍｐｅｔｅ）し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例１０又は１１の方法。

具体例１３．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と同一のＦＡＭ１９Ａ５エピトープと特異的に結合し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例１０〜１２のいずれか一方法。

具体例１４．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱＩＤＮＯ：６又はＳＥＱＩＤＮＯ：９である、少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープと特異的に結合する、具体例１０〜１３のいずれか一方法。

具体例１５．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱＩＤＮＯ：６又はＳＥＱＩＤＮＯ：９人、ＦＡＭ１９Ａ５エピトープにのみ結合する、具体例１０〜１３のいずれか一の方法。

具体例１６．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープとさらに結合する、具体例４０〜１４のいずれか一方法。

具体例１７．追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープはＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される、具体例１６の方法。

具体例１８．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む、具体例１０〜１７のいずれか一方向。

具体例１９．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１９、又はＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含む、具体例１８の方法。

具体例２０．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、又はＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含む、具体例１８又は１９の方法。

具体例２１．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８、又はＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含む、具体例１８〜２０のいずれか一方法。

具体例２２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、又はＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含む、具体例１８〜２１のいずれか一方法。

具体例２３．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２４、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０、又はＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含む、具体例１８〜２２のいずれか一方法。

具体例２４．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３１、又はＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例１８〜２３のいずれか一方法。

具体例２５．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２９、３０及び３１を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３２、３３及び３４を含む、具体例１０〜２４のいずれか一方法。

具体例２６．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７、又はＳＥＱＩＤＮＯ：３８を含む重鎖可変領域及び／又はＳＥＱＩＤＮＯ：３９、ＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、又はＳＥＱＩＤＮＯ：４２を含む軽鎖可変領域を含む、具体例１０〜２５のいずれか一方法。

具体例２７．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５を含む重鎖可変領域及びＳＥＱＩＤＮＯ：３９を含む軽鎖可変領域を含む、具体例２６の方法。

具体例２８．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６を含む重鎖可変領域及びＳＥＱＩＤＮＯ：４０を含む軽鎖可変領域を含む、具体例２６の方法。

具体例２９．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７を含む重鎖可変領域及びＳＥＱＩＤＮＯ：４１を含む軽鎖可変領域を含む、具体例２６の方法。

具体例３０．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８を含む重鎖可変領域及びＳＥＱＩＤＮＯ：４２を含む軽鎖可変領域を含む、具体例２６の方法。

具体例３１．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜２５のいずれか一方法。

具体例３２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜２５のいずれか一方法。

具体例３３．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜２５のいずれか一方法。

具体例３４．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、又はヒト化抗体である、具体例１０〜３３のいずれか一方法。

具体例３５．その抗原結合部分はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、具体例１０〜３３のいずれか一方法。

具体例３６．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４及びこれらの変異体からなる群から選択される、具体例１０〜３５のいずれか一方法。

具体例３７．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＩｇＧ２、ＩｇＧ４、又はこれらの組合せである、具体例３６の方法。

具体例３８．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプ（ｉｓｏｔｙｐｅ）抗体を含む、具体例３６の方法。

具体例３９．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦｃ機能のない不変領域をさらに含む、具体例１０〜３８のいずれか一方法。

具体例４０．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は第２結合部分を有する分子に連結され、これにより二重特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）分子を形成する、具体例１０〜３９のいずれか一方法。

具体例４１．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は製剤に連結され、これにより免疫抱合体免疫抱合体を形成する、具体例１０〜４０のいずれか一方法。

具体例４２．ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の拮抗剤は薬学的に許容されるキャリアとともに製剤化される、具体例１〜４１のいずれか一方法。

具体例４３．ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の拮抗剤は硝子体内経路を介して投与される、具体例１〜４２のいずれか一方法。

具体例４４．対象はヒトである、具体例１〜４３のいずれか一方法。

〔図面の簡単な説明〕
〔図１〕元気な（すなわち、緑内障誘導がない）動物（“ナイーブ”）（ｎａｉｖｅ）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）で治療された緑内障誘導動物の眼内圧の比較を示す。眼内圧は、緑内障誘導後第０日目（“Ｄ０”）、第１４日目（“Ｄ１４”）、及び第２８日目（“Ｄ２８”）に測定された。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。

〔図２〕元気な動物（“ナイーブ”）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）で治療された緑内障誘導動物の網膜電図写真（ＥＲＧ）測定結果の比較を示す。緑内障誘導後２８日目に相異なる動物の網膜電位差がＡ−タイム（左側パネル）及び振動電位（ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｙｐｏｔｅｎｔｉａｌ）等級（右側パネル）を分析することによって評価した。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。棒上の“＊”はＩｇＧ１治療された動物と比較して統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。

〔図３ａ及び図３ｂ〕元気な動物（“ナイーブ”）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（“Ｇ４”）抗体で治療された緑内障誘導動物の網膜神経節細胞層で観察された網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）の数の比較を示す。図３ａはＲＧＣ細胞計数を絶対値（左側パネル）で、かつ観察された細胞の総数のパーセント（右側パネル）で示す。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。棒上の“＊”はＩｇＧ１治療された動物と比較して統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。図３ｂは各グループの代表動物から得た網膜神経節細胞層の蛍光イメージ（１００×倍率）を示す。

〔図４〕上強膜静脈焼灼術によって誘導された緑内障の兎モデルにおけるＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗炎症効果を示す。炎症に対するマーカーとして、緑内障誘導後２８日目（動物は毎週間隔で総４回抗体が投与される）に、ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“緑内障＋ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）又はヒトＩｇＧ１対照群抗体（“緑内障＋ヒトＩｇＧ”）で治療された緑内障誘導兎、又は全然治療されなかった兎（“ナイーブ”）（元気な動物対照群）でのＩｂａ−１発現が評価された。上部パネルは各グループから得た代表的な免疫組職化学イメージを示す。下部パネルは上部パネルのボックス領域をより高い倍率で示す。

〔発明を実施するための形態〕
本明細書はヒト配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質に特異的に結合する拮抗剤（例えば、分離されたモノクローナル抗体、又はその抗原結合部分）を対象に投与することによって緑内障を治療することができることを開示する。一つの可能な治療メカニズムは緑内障に関連した炎症を減少、緩和、又は阻害するものである。

この明細書に開示された多数の用語及び文句が定義される。これに関連して詳細な説明全般で追加的に定義される。

Ｉ．定義
本明細書全般で、用語“１個の”又は“ある”は１個以上を意味する；例えば“１個の抗体”は１個以上の抗体を示すものとして理解される。このように、用語“１個の”（又は“ある”）、“１個以上の”及び“少なくとも１個の”はこの明細書で互いに交換して使われることができる。

また、“及び／又は”は２個の明示した特徴又は成分のそれぞれが残りの１個とともに又は単独で具体的に開示されるものに解釈されなければならない。よって、“Ａ及び／又はＢ”は“Ａ及びＢ”、“Ａ又はＢ”、“Ａ”（単独）、及び“Ｂ”（単独）を含もうとするものである。また、“Ａ、Ｂ及び／又はＣ”はＡ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）の様態をそれぞれ含もうとするものである。

ある様態が“含む”として記述さた場合、“構成される”及び／又は“本質的に構成される”の観点で説明された他の類似した様態も提供されるものに理解される。

他に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は本発明の当業者に通常に理解されるものと同じ意味を有する。例えば、文献（the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; and the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press）はこの明細書で使用された大部分の用語に対する一般的な辞書的意味を当業者に提供する。

単位、接頭辞及び記号は国際単位系（ＳｙｓｔｅｍｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｄｅＵｎｉｔｅｓ（ＳＩ））で承認された形態に表示される。数値範囲はその範囲を限定する数字を包括的に含む。特別な言及がない限り、アミノ酸配列はアミノからカルボキシの配向に左側から右側に書かれる。開示された表題は本発明の多様な様態の制限ではなく、これらは全体的に明細書を参照したものであり得る。よって、以下で定義される用語はその全体が明細書を参照してより詳細に定義される。

用語“約”はおよそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、概略で（ｒｏｕｇｈｌｙ）、前後の（ａｒｏｕｎｄ）、又は付近の領域内を意味する。用語“約”が数値範囲とともに使われるとき、それは提示された数値の上下に境界を拡張させることによって該当範囲を変形する。一般的に、用語“約”は、例えば上に又は下に（より高く又はより低く）１０パーセントまで言及された値の上下に数値を変形することができる。

用語“緑内障”は網膜神経節細胞の進行性消失と視神経萎縮を特徴とする一群の眼関連疾患及び／又は障害を意味する。緑内障は、視神経損傷、網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）消失、高い眼内圧（“ＩＯＰ”）、損傷された血液網膜関門、及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での小膠細胞活性水準の増加に関連することができる。緑内障は無症状であるか、又は目に関連した次の症状：焼けるような感じ又は刺すような感じ、涙、乾燥、疲労、ぼやけた／曇った視野、トンネル視野、日光の下で見ることの難しさ、暗い場所で見ることの難しさ、光周辺の光ぼけ及び／又は失明のいずれかを有することができる（Lee et al., Arch Ophthalmol 116: 861-866 (1998)）。用語“緑内障”は緑内障の原因及び症状にかかわらず全種の緑内障を含む。

緑内障という用語は、これに制限されるものではないが、開放隅角緑内障、閉鎖隅角緑内障、正常眼圧緑内障（“ＮＴＧ”）、先天性緑内障、二次性緑内障、色素性緑内障、偽落屑緑内障、外傷緑内障、新生血管緑内障、虹彩角膜内皮症侯群、及び／又はブドウ膜炎緑内障を含む。危険要因の一部は、上昇した眼内圧、遺伝的素因（例えば、緑内障家族歴、特定の民族集団）、年齢、食餌、糖尿病、高血圧、及び／又は目の物理的障害を含む。

用語“炎症”は傷害及び／又は損傷部位で免疫細胞（例えば、小膠細胞）と血漿タンパク質の蓄積及び活性化を伴う血管化した組職での先天免疫システムの複合反応を意味する。元気な個体において、血液網膜関門は血液から網膜へ、かつ網膜から血液への物質の自由流動を防止する堅固な障壁を提供する。しかし、緑内障患者はこの障壁が損傷される。この血管調節障害は、網膜視神経頭側への血液流動を制限し、視神経頭に自由に移動することができる多様な炎症媒介因子（例えば、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、及び酸化窒素）を生成する。

用語“視神経損傷”は視神経の正常構造又は機能の変更を意味する。視神経の正常構造又は機能の変更は、緑内障を含む任意の疾患、障害、又は傷害の結果であり得る。視神経の正常機能の変更は、視神経が適切に機能する能力、例えば網膜から脳に視覚情報を伝達する能力の変更を含む。機能の変更は、例えば視力消失、損傷された中心視力、異常色覚などとして現れることができる。構造変更の例は、網膜の神経纎維消失、視神経乳頭陥凹、及び／又は網膜神経節細胞層からの細胞の消失を含む。“視神経損傷”は対象の片視神経又は両視神経に対する視神経損傷を含むことができる。

用語“網膜神経節細胞”（ＲＧＣ）は網膜の最内層（すなわち、神経節細胞層）付近に位置する特定のニューロンを意味する。この細胞は光受容器から集まった視覚情報を脳に運ぶのに重要な役割をする（Sanes et αl., Αnnu Rev Neurosci 38:221-46 (2015)）。ＲＧＣは大きさ、連結部、及び視覚刺激に対する反応の観点でよほど多様であり得るが、これはいずれも脳に延びる長い軸索を有するという本質的な特性を共有する。

用語“眼内圧”（ＩＯＰ）は眼の内部で維持される圧力を意味する。眼の前房は角膜、虹彩、瞳孔及び水晶体によって境界が決まる。この前房は角膜と水晶体に酸素と営養分を提供する水のような流体である水性体液で満たされる。水性体液は目の模様を維持するのに役立つ必須圧力を提供する。水性体液の正常分泌が妨げられるとき、眼内圧が影響される。

用語“小膠細胞”は網膜内に存在する神経校細胞の一種を意味する。この細胞はマクロファージのように挙動し、外来抗原及び／又は傷害に対して周辺の微細環境を倦まず弛まず点検する。変化が感知される場合、小膠細胞が活性化し、潜在的に有害な破片に対して食作用することにより損傷を制限し、炎症媒介因子を分泌し、そして他の免疫細胞と相互作用することにより効果的な免疫反応を生成して外来抗原及び／又は傷害に対して反応する（Kettenmann et al., Physiol Rev 91(2): 461-553 (2011)）。活性化した小膠細胞はＩｂａ−１の増加した表面発現によって休止状態にあるものなどと区別されることができる。また、小膠細胞は発生中の網膜でのプログラムされた細胞死滅に隋伴され、小膠細胞によって放出された神経成長因子（ＮＧＦ）は網膜の神経細胞死滅を誘導することができる（Ashwell et al., Visual Neuroscience 2(5): 437-448 (1989)）。

用語“治療する”、“治療する”及び“治療”は疾患と関連する症状、余病、状態又は生化学的指標の進行、発生、深刻性又は再発を反転、改善、緩和、阻害又は遅延させる目的で対象に対して遂行される任意の種類の介入又は過程、又は対象に活性剤を投与することを意味する。治療は疾患を有する対象又は疾患を持っていない対象に対して行われることができる（例えば、予防のため）。

用語“投与”は当業者に公知となった多様な方法及び送逹システム（ｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍｓ）のいずれかを使用して対象に治療剤又は治療剤を含む組成物を物理的に注入うすることを意味する。本明細書に開示される抗体用の相異なる投与経路は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、脊髄又は他の非経口投与経路、例えば注射（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）によるものを含む。用語“非経口投与”は一般的に注射による、腸内（ｅｎｔｅｒａｌ）及び局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与以外の投与方式を意味し、これに制限されるものではないが、硝子体内、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ内、病巣内、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）、眼窩内（ｉｎｔｒａｏｒｂｉｔａｌ）、心臓内、皮内、経気管（ｔｒａｎｓｔｒａｃｈｅａｌ）、肺、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脳室内、硝子体内、硬膜外、及び胸骨内胸骨内注射及び注入だけでなく、生体内電気穿孔を含む。もしくは、本明細書に開示される抗体は、非−非経口経路を介して、例えば局所、上皮又は粘膜投与経路を介して、例えば鼻腔内、経口、経膣、直腸、舌下又は局所経路を介して投与されることができる。また、投与は、例えば１回、多数回、及び／又は一回以上の延ばされた期間にかけて遂行されることができる。

用語“治療上有効量”は単独で又は他の治療剤と組み合わせて、対象の疾患又は障害を“治療するのに”効果的な、又は疾患又は障害（例えば、緑内障）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物の量を意味する。“治療上有効量”は疾患又は障害（例えば、緑内障）を持っているか有する危険がある対象に一部の改善や利益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。よって、“治療上有効量”は疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるか又は一部の緩和、軽減させ、及び／又は少なくとも１個の指標（例えば、増加した炎症）を減少させ、及び／又は疾患又は障害の少なくとも１個の臨床症状を減少させる量である。

用語“対象”は任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語“非ヒト動物”は全ての脊椎動物、例えば哺乳類及び非哺乳類、例えば非ヒトの霊長類、羊、犬、牛、ニワトリ、両生類、爬虫類などを含む。

用語“配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５”又は“ＦＡＭ１９Ａ５”は５個の高度の相同性のタンパク質のＴＡＦＡファミリ（ＦＡＭ１９ファミリとも知られている）に属し、脳と脊髄で主に発現するタンパク質を意味する（Tang T. Y. et al., Genomics 83(4):727-34 (2004)）。これらのタンパク質は固定位置に保存されたシステイン残期を含み、ＣＣ−ケモカインファミリのメンバーであるマクロファージ炎症タンパク質１−アルファ（ＭＩＰ−１−アルファ）に係わる。ＴＡＦＡタンパク質は脳と脊髄の特定領域で主に発現する。これらのタンパク質は神経発生過程で成人神経幹細胞によって発生して分配されると推定されれる。また、ＦＡＭ１９Ａ５はＴＡＦＡ５又はケモカイン類似タンパク質ＴＡＦＡ−５（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ−ｌｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎＴＡＦＡ−５）とも知られている。

ＦＡＭ１９Ａ５は脊椎動物の脳で主に発現し、完全な中枢神経系の発生、分化、形成に重要な役割をするものとして明かされた。また、ＦＡＭ１９Ａ５は多くの中枢神経系の損傷及び／又は退行性脳疾患（例えば、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳脊髓損傷、脳卒中及び脳腫瘍）の発病機序に有意な役割をする。中枢神経系の損傷時、神経幹細胞がＦＡＭ１９Ａ５を生成し、これは正常星状膠細胞の反応性星状膠細胞（ｒｅａｃｔｉｖｅａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ）への分化を誘導する。これらの反応性星状膠細胞は（小膠細胞とともに）広範囲なＥＣＭ（例えば、プロテオグリカン）を発現することができ、グリア性瘢痕（ｇｌｉａｌｓｃａｒｓ）の形成を誘導することができ、これは中枢神経系の損傷された領域を網のように取り囲んでニューロンの再生を妨げることができる。ＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体は中枢神経系傷害及び／又は疾患の予防及び／又は治療に使われることができる（アメリカ特許第９，５７９，３９８号参照）。

ヒトにおいて、ＦＡＭ１９Ａ５を暗号化する遺伝子は染色体２２に位置する。次のような３種のヒトＦＡＭ１９Ａ５（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７）アイソフォームがあり、これらは選択的スプライシングによって生成されると推定される：１３２個のアミノ酸からなるアイソフォーム１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１）；１２５個のアミノ酸からなるアイソフォーム２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２）；５３個のアミノ酸からなるアイソフォーム３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）。ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質は膜結合形態と可溶性（分泌された）形態として存在すると推定される。アイソフォーム１は１個の膜貫通領域を有する膜タンパク質であると推定される。アイソフォーム２は分泌されたタンパク質（可溶性）として文献（Tang T. Y. et al., Genomics 83(4):727-34 (2004)）に報告されており、アミノ酸位置１−２５にシグナルペプチドを含む。アイソフォーム３はＥＳＴデータに基づいて予想される。以下は３種の公知のヒトＦＡＭ１９Ａ５アイソフォームのアミノ酸配列である。

（Ｉ）アイソフォーム１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１、膜貫通タンパク質）：このアイソフォームが標準配列として選択された。

ＭＡＰＳＰＲＴＧＳＲＱＤＡＴＡＬＰＳＭＳＳＴＦＷＡＦＭＩＬＡＳＬＬＩＡＹＣＳＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）
（ＩＩ）アイソフォーム２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２、可溶性タンパク質）：
ＭＱＬＬＫＡＬＷＡＬＡＧＡＡＬＣＣＦＬＶＬＶＩＨＡＱＦＬＫＥＧＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）
（ＩＩＩ）アイソフォーム３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）：
ＭＹＨＨＲＥＷＰＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）
用語“ＦＡＭ１９Ａ５”は細胞によって自然に発現するＦＡＭ１９Ａ５の任意の変異体又はアイソフォームを含む。よって、本明細書に開示される抗体は同種の相異なるアイソフォーム（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５の相異なるアイソフォーム）と交差反応することができるか、又はヒト以外の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）と交差反応することができる。もしくは、抗体はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的であり得、他の種とは交差反応性を示すことができないこともある。ＦＡＭ１９Ａ５、又はその任意の変異体及びアイソフォームはこれらを自然に発現する細胞又は組職から分離されるか又は組み換えによって生成されることができる。ヒトＦＡＭ１９Ａ５を暗号化するポリヌクレオチドはＧｅｎＢａｎｋ受託番号Ｎｏ．ＢＣ０３９３９６を有し、次の配列を有する：

用語“ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤”はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現を抑制する全ての拮抗剤を意味する。このような拮抗剤は、ペプチド、核酸、又は化合物であり得る。より具体的に、拮抗剤はアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターであり得る。いくつかの具体例において、拮抗剤はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分であり得る。

用語“抗体”及び“抗体ら”は当該分野の用語であり、この明細書で相互交換して使用することができ、抗原に特異的に結合する抗原結合部位を有する分子を意味する。本明細書で使用される用語は全ての抗体及び任意の抗原結合断片（すなわち、“抗原結合部分”）又はこれらの単鎖を含む。一具体例において、“抗体”はジスルフィド結合によって相互連結された少なくとも２個の重鎖（Ｈ）と２個の軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質、又はその抗原結合部分を意味する。他の具体例において、“抗体”は単一可変領域、例えばＶＨＨドメインを含む単鎖抗体を意味する。各重鎖は重鎖可変領域（ＶＨと略記する）と重鎖不変領域からなる。特定の自然発生抗体において、重鎖不変領域は３個のドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなる。特定の自然発生抗体において、各軽鎖は軽鎖可変領域（ＶＬと略記する）と軽鎖不変領域からなる。軽鎖不変領域は１個のドメインＣＬからなる。

ＶＨ及びＶＬ領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と称する、より保存される領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する、超可変性領域にさらに細分されることができる。それぞれのＶＨ及びＶＬは３個のＣＤＲと４個のＦＲからなり、これらはＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順にアミノ末端からカルボキシ末端に向かって配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の不変領域は、免疫システムの多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び正統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組職又は因子と兔疫グロブリンの結合を媒介することができる。

用語“Ｋａｂａｔナンバリング”は当該分野に認められており、抗体、又はその抗原結合部分の重鎖及び軽鎖可変領域でアミノ酸残期をナンバリングするシステムを意味する。特定の様態で、抗体のＣＤＲはＫａｂａｔナンバリングシステムによって決定されることができる（例えば、Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 and Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使えば、抗体重鎖分子内でＣＤＲは典型的にアミノ酸位置３１〜３５（これは選択的に３５以後に１個又は２個の追加のアミノ酸を含むことができる；Ｋａｂａｔナンバリング方式で３５Ａ及び３５Ｂと言及される）（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜６５（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置９５〜１０２（ＣＤＲ３）に存在する。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使えば、抗体軽鎖分子内でＣＤＲは典型的にアミノ酸位置２４〜３４（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜５６（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置８９〜９７（ＣＤＲ３）に存在する。特定の具体例において、本明細書に開示される抗体のＣＤＲはＫａｂａｔナンバリング方式で決定された。

用語“Ｋａｂａｔでのアミノ酸位置ナンバリング” 及び“Ｋａｂａｔ位置”又は関連の変形用語は文献（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)）で抗体編成の重鎖可変領域又は軽鎖可変領域に対して使用されたナンバリングシステムを意味する。このナンバリングシステムを使えば、実際の線形アミノ酸配列はより少ない又は追加のアミノ酸を含むことができる。これは可変領域のＦＷ又はＣＤＲの短縮、又はＦＷ又はＣＤＲへの挿入に相当する。例えば、重鎖可変領域はＨ２の残期５２以後の単一アミノ酸挿入（Ｋａｂａｔによれば、残期５２ａ）及び重鎖ＦＷ残期８２以後の挿入された残期（Ｋａｂａｔによれば、残期８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃなど）を含むことができる（表１ｂ参照）。

残期のＫａｂａｔナンバリングは“標準”Ｋａｂａｔナンバリングされた配列と抗体の配列の相同性領域で整列によって特定の抗体に対して決定されることができる。Ｃｈｏｔｈｉａはその代わりに構造ループの位置を言及する（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）。ＣｈｏｔｈｉａＣＤＲ−Ｈ１ループの端部はＫａｂａｔナンバリング慣例を用いてナンバリングされたとき、ループの長さによってＨ３２〜Ｈ３４の範囲で変わる（これは、Ｋａｂａｔナンバリング方式がＨ３５ＡとＨ３５Ｂに挿入を位置させるからである；３５Ａも３５Ｂも存在しなければ、ループは３２で終わる；３５Ａのみ存在すれば、ループは３３で終わる；３５Ａと３５Ｂが共に存在すれば、ループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域はＫａｂａｔＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造ループ間の妥協点を表示し、ＯｘｆｏｒｄＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使われる。

ＩＭＧＴ（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ）もＣＤＲを含む兔疫グロブリン可変領域に対するナンバリングシステムを提供する。例えば、文献（Lefranc, M.P. et al, Dev. Comp. Immunol. 27: 55-77(2003)）を参考し、これはこの明細書に参照することにより組み込まれる。ＩＭＧＴナンバリングシステムは５，０００個を超える配列の整列、構造データ、及び超可変ループの特性化に基づいており、全ての種に対して可変領域とＣＤＲ領域を容易に比較する。ＩＭＧＴナンバリングスキーマによれば、ＶＨ−ＣＤＲ１は位置２６〜３５にあり、ＶＨ−ＣＤＲ２は位置５１〜５７にあり、ＶＨ−ＣＤＲ３は位置９３〜１０２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ１は位置２７〜３２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ２は位置５０〜５２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ３は位置８９〜９７にある。

本明細書に開示される全ての重鎖不変領域アミノ酸位置に対し、ナンバリングは配列化した最初のヒトＩｇＧ１である骨髄腫タンパク質ＥＵのアミノ酸配列を説明した文献（Edelman et al., 1969, Proc. Natl. Acad. Set USA 63(1):78-85）で最初に提示されたＥＵインデックスによる。また、ＥｄｅｌｍａｎらのＥＵインデックスは文献（Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda）にも提示されている。よって、用語“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックス”又は“ＫａｂａｔのＥＵインデックス”及び“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックスによる位置”及び関連の変形用語はＫａｂａｔ１９９１に提示されたもののようなＥｄｅｌｍａｎらのヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体に基づく残期ナンバリングシステムを意味する。

可変領域（重鎖及び軽鎖の両者）及び軽鎖不変領域アミノ酸配列に使用されるナンバリングシステムはＫａｂａｔ１９９１に提示されたものである。

抗体は兔疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ）、任意のクラス（例えば、ＩｇＤ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、又は任意のサブクラス（例えば、ヒトでＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４；及びマウスでＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３）を有することができる。兔疫グロブリン、例えばＩｇＧ１はいくつかのアロタイブとして存在し、これらは多くても少数のアミノ酸が互いに異なる。本明細書に開示される抗体は、通常知られたアイソタイプ、クラス、サブクラス、又はアロタイブのいずれかから由来することができる。特定の具体例において、本明細書に開示される抗体はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブクラス又はこれらの任意のハイブリッドである。特定の具体例において、抗体はヒトＩｇＧ１サブクラス又はヒトＩｇＧ２又はヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。

“抗体”は、例として、自然発生及び非自然発生抗体；モノクローナル及びポリクローナル抗体；キメラ及びヒト化抗体；ヒト及び非ヒト抗体、完全合成抗体；単鎖抗体；単一特異的抗体；多重特異的抗体（二重特異性抗体を含み）；２個の重鎖と２個の軽鎖分子を含む四量体抗体；抗体軽鎖モノマー；抗体重鎖モノマー；抗体軽鎖二量体；抗体重鎖二量体；抗体軽鎖−抗体重鎖対；細胞内抗体；ヘテロ結合抗体；１価抗体；ラクダ化抗体；アフィボディー；抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、抗抗Ｉｄ抗体を含み）、及び充分に抗原結合することができる単一モノマー可変抗体ドメイン（例えば、ＶＨドメイン又はＶＬドメイン）からなる結合分子を含む単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む（Harmen M. M. and Haard H. J. Appl Microbiol Biotechnol. 77(1): 13-22 (2007)）。

用語“抗体の抗原結合部分”は抗原（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する能力を保有した抗体の１個以上の断片を意味する。このような“断片”は、例えば、約８〜約１５００個のアミノ酸の長さ、適切には約８〜約７４５個のアミノ酸の長さ、適切には約８〜約３００個、約８〜約２００個のアミノ酸、又は約１０個〜約５０又は１００個のアミノ酸の長さである。抗体の抗原結合機能は全長抗体の断片によって遂行されることができるというのが明かされた。抗体、例えば、この明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の“抗原結合部分”に含まれる結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる１価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィドブリッジによって連結された２個のＦａｂ断片を含む２価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一腕のＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、及びジスルフィド連結されたＦｖｓ（ｓｄＦｖ）；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ward et ( a1l9.8, 9) Nature 341:544- 546）；及び（ｖｉ）分離された相補性決定領域（ＣＤＲ）又は（ｖｉｉ）合成リンカーによって選択的に連結されることができる２個以上の分離されたＣＤＲの組合せを含む。また、Ｆｖ断片の２個のドメインであるＶＬとＶＨは別個の遺伝子によってコーディングされるが、これらは合成リンカーによって、組み換え方法を使用して、連結されることができる。これにより、ＶＬとＶＨ領域が対を成して１価分子を形成した単一タンパク質鎖となることができる（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）と言う）（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426; and Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)参照）。このような単鎖抗体も抗体の“抗原結合部分”に含まれる。これらの抗体断片は当業者に公知となった従来の技術によって得られ、断片は無損傷抗体と同一の方式で有用にスクリーニングされる。抗原結合部分は組み換えＤＮＡ技術によって、又は無損傷兔疫グロブリンの酵素又は化学切断によって生成されることができる。

用語“可変領域”又は“可変ドメイン”は当該分野で通常に互いに交換して使われる。可変領域は典型的に抗体の一部分、一般的に軽鎖又は重鎖の一部分、典型的に成熟した重鎖においてアミノ末端約１１０〜１２０個のアミノ酸及び成熟した軽鎖において約９０〜１１５個のアミノ酸を意味し、抗体の中で配列が鉱範に異なり、特定の抗原に対する特定抗体の結合及び特異性に関連して使われる。配列変動性は相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる領域に集中し、可変領域でより高度に保存された領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。

軽鎖及び重鎖のＣＤＲは抗原と抗体の相互作用及び特異性を主に担当すると推定される。特定の具体例において、可変領域はヒト可変領域である。特定の具体例において、可変領域はげっ歯類又はネズミ科ＣＤＲとヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。特定の具体例において、可変領域は霊長類（例えば、非ヒトの霊長類）可変領域である。特定の具体例において、可変領域はげっ歯類又はネズミ科ＣＤＲと霊長類（例えば、非ヒトの霊長類）フレームワーク領域（ＦＲ）を含む。

用語“重鎖”は、抗体に関連して使われるとき、不変ドメインのアミノ酸配列に基づいて、任意の相異なるタイプ、例えばアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）及びミュー（μ）を意味することができ、これらはそれぞれＩｇＧのサブクラス、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含めて、抗体のＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭクラスを発生させる。

用語“軽鎖”は、抗体に関連して使われるとき、不変ドメインのアミノ酸配列に基づいて任意の相異なるタイプ、例えばカッパ（κ）及びラムダ（λ）を意味することができる。軽鎖アミノ酸配列は当該分野によく知られている。特定の具体例において、軽鎖はヒト軽鎖である。

用語“ＶＬ”及び“ＶＬドメイン”は互いに交換して使われ、抗体の軽鎖可変領域を意味する。

用語“ＶＨ”及び“ＶＨドメイン”は互いに交換して使われ、抗体の重鎖可変領域を意味する。

用語“不変領域”又は“不変ドメイン”は互いに交換することができ、当該分野での通常の意味を有する。不変ドメインは抗体部分であり、例えば抗体と抗原の結合には直接関与しないがＦｃ受容体との相互作用のような多様なエフェクター機能を示すことができる軽鎖及び／又は重鎖のカルボキシ末端部分である。兔疫グロブリン分子の不変領域は、一般的に兔疫グロブリン可変領域に比べてもっと保存されたアミノ酸配列を有する。

“Ｆｃ領域”（断片結晶化可能な領域）又は“Ｆｃドメイン”又は“Ｆｃ”は免疫システムの多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）上に位置するＦｃ受容体又は正統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）との結合を含み、宿主組職又は因子と兔疫グロブリンの結合を媒介する抗体の重鎖のＣ末端領域を意味する。よって、Ｆｃ領域は第１不変領域兔疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＬ）を除いた抗体の不変領域を含む。ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＤ抗体アイソタイプにおいて、Ｆｃ領域は抗体の２個の重鎖の第２（ＣＨ２）及び第３（ＣＨ３）不変ドメインから来由した２個の同じタンパク質断片を含む；ＩｇＭ及びＩｇＥＦｃ領域は、各ポリペプチド鎖に３個の重鎖不変ドメイン（ＣＨドメイン２〜４）を含む。ＩｇＧの場合、Ｆｃ領域は兔疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３とＣγ１とＣγ２間のヒンジを含む。兔疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は多様であるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は一般的に位置Ｃ２２６又はＰ２３０にあるアミノ酸残期（又はこれら２個のアミノ酸間のアミノ酸）から重鎖のカルボキシ末端まで延びるのように限定され、ここでナンバリングはＫａｂａｔでのようなＥＵインデックスによる。ヒトＩｇＧＦｃ領域のＣＨ２ドメインは約アミノ酸２３１から約アミノ酸３４０まで延び、ＣＨ３ドメインはＦｃ領域でＣｍドメインのＣ末端側に位置する。それはＩｇＧの約アミノ酸３４１から約アミノ酸４４７まで延びる。Ｆｃ領域は任意のアロタイブ変異体を含む自生配列Ｆｃ、又は変異体Ｆｃ（例えば、非自然発生Ｆｃ）であり得る。また、Ｆｃは分離された状態の領域を意味するか又は“Ｆｃ融合タンパク質”（例えば、抗体又は免疫付着（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ））とも言う、“Ｆｃ領域を含む結合タンパク質”のような、Ｆｃを含むタンパク質ポリペプチドに関連した領域を意味する。

“自生配列Ｆｃ領域”又は“自生配列Ｆｃ”は自然で発見されたＦｃ領域のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む。自生配列ヒトＦｃ領域は、自生配列ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ２Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ３Ｆｃ領域；及び自生配列ヒトＩｇＧ４Ｆｃ領域だけではなく、これらの自然発生変異体を含む。自生配列ＦｃはＦｅの多様なアロタイブを含む（例えば、Jefferis et al. (2009) mAbs 1:1; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。

“Ｆｃ受容体”又は“ＦｃＲ”は兔疫グロブリンのＦｃ領域に結合する受容体である。ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲはＦｃγファミリの受容体を含み、これら受容体の対立遺伝子変異及び他の方式でスプライスされた形態を含む。Ｆｃγファミリは３個の活性化受容体（マウスにおけるＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、及びＦｃγＲＩＶ；ヒトにおけるＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、及びＦｃγＲＩＩＩＡ）と１個の抑制性受容体（ＦｃγＲＩＩＢ）からなる。ヒトＩｇＧ１は大部分のヒトＦｃ受容体と結合し、最も強いＦｃエフェクター機能を導出する。ヒトＩＧＧ１が結合する活性化Ｆｃ受容体の種類に対してはネズミ科ＩｇＧ２ａと同等であると見なされる。一方、ヒトＩｇＧ４は最小限のＦｃエフェクター機能を導出する（Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520 (２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。

不変領域は、１個以上のエフェクター機能を除去するために、例えば組み換え技術によって操作可能である。“エフェクター機能”は抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体又はリガンドの相互作用、又はそれから生ずる生化学的イベントを意味する。例示的な“エフェクター機能”はＣ１ｑ結合、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、ＦｃγＲ−媒介エフェクター機能、例えばＡＤＣＣ及び抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、及び細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）のダウン調節を含む。このようなエフェクター機能は一般的にＦｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変領域）と組み換えられることを必要とする。よって、用語“Ｆｃ機能がない不変領域”はＦｃ領域によって媒介された１個以上のエフェクター機能が減少するかない不変領域を含む。

抗体のエフェクター機能は相異なる接近法によって減少又は回避することができる。抗体のエフェクター機能はＦｃ領域を欠いた抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂ）を使って減少するか回避することができる。もしくは、Ｆｃ領域の他の価値ある属性（例えば、延ばされた半減期及びヘテロ二量化）は保有しながら抗体のエフェクター機能を減少させるためにいわゆるアグリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）抗体がＦｃ領域で特定の残期に連結された糖を除去することによって生成されることができる。アグリコシル化抗体は、例えば糖が付着された残期を欠失又は変更して糖を酵素的に除去することにより、グリコシル化阻害剤の存在の下で培養された細胞で抗体を生成することにより、又はタンパク質をグリコシル化することができない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）で抗体を発現することにより生成されることができる（例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号参照）。他の接近法は、エフェクター機能が減少したＩｇＧサブクラスからのＦｃ領域を用いるものである。例えば、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３より低い水準のＦｃエフェクター機能を有することを特徴とする。Ｆｃ部分のＣＨ２ドメインでヒンジ領域に最も近くにある残期が抗体のエフェクター機能を担当し、それは先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対してかなり重畳した結合部位を含む（Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)）。よって、Ｆｃエフェクター機能が減少するかない抗体は、例えばＩｇＧ４アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域（例えば、Lau C. et al. J. Immunol. 191:4769-4777 (2013)参照）、又は変更されたＦｃエフェクター機能、例えばＦｃ機能が減少するかない突然変異を有するＦｃ領域を生成することによって製造できる。突然変異を有するこのようなＦｃ領域は当該分野に公知となっている。例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号とそれに引用されたアメリカ出願及びＰＣＴ出願と文献（An et al. mAbs 1:6, 572- 579 (2009)）を参照し、これらの開示はその全体をこの明細書に参照することにより組み込まれる。

“ヒンジ”、“ヒンジドメイン”又は“ヒンジ領域”又は“抗体ヒンジ領域”はＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに連結し、ヒンジの上部、中央、及び下部の部分を含む重鎖不変領域のドメインを意味する（Roux et al. J. Immunol. 1998 161:4083）。ヒンジは抗体の結合領域とエフェクター領域との間に可撓性の水準を変化させ、また２個の重鎖不変領域間に分子間ジスルフィド結合のための部位を提供する。本明細書で開示されるヒンジは全てのＩｇＧアイソタイプに対してＧｌｕ２１６から始まってＧｌｙ２３７で終わる（Roux et al 19., 98 J Immunol 161:4083）。野生型ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４ヒンジの配列が当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。

用語“ＣＨ１ドメイン”は重鎖不変ドメインで可変領域とヒンジを連結する重鎖不変領域を意味する。本明細書に開示されるＣＨ１ドメインはＡ１１８から始まってＶ２１５で終わる。用語“ＣＨ１ドメイン”は野生型ＣＨ１ドメインだけでなく、その自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ１ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et a (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ１ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ１ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。

用語“ＣＨ２ドメイン”は重鎖不変ドメインでヒンジとＣＨ３ドメインを連結する重鎖不変領域を意味する。本明細書に開示されるたＣＨ２ドメインはＰ２３８から始まってＫ３４０で終わる。用語“ＣＨ２ドメイン”は野生型ＣＨ２ドメインだけでなくその自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ２ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ２ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期及び／又は減少したＦｃエフェクター機能を変形する突然変異を有するＣＨ２ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。

用語“ＣＨ３ドメイン”は重鎖不変ドメインでＣＨ２ドメインに対してＣ末端である重鎖不変領域を意味する。本明細書に開示されたＣＨ３ドメインはＧ３４１から始まってＫ４４７で終わる。用語“ＣＨ３ドメイン”は野生型ＣＨ３ドメインだけでなくその自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ３ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ３ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ３ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。

用語“アイソタイプ”は重鎖不変領域遺伝子によって暗号化される抗体クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体）を意味する。

用語“アロタイブ”は少数のアミノ酸に違いがある特定のアイソタイプグループ内で自然発生した変異体を意味する（例えば、Jefferis et al. (2009) mAbs 1:1参照）。本明細書に開示される抗体は任意のアロタイブを有することができる。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のアロタイブは当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et a (l1.,991) supra; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)；及びLefranc MP, mAbs 1:4, 1- 7(2009)参照）。

用語“抗原を認識する抗体”及び“抗原に特異的な抗体”は用語“抗原に特異的に結合する抗体”とともにこの明細書で互いに交換して使われる。

用語“分離された抗体”は相異なる抗原特異性を有する他の抗体が実質的にない抗体を意味する。例えば、ＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する分離された抗体はＦＡＭ１９Ａ５以外の抗原に特異的に結合する抗体が実質的にない。しかし、ＦＡＭ１９Ａ５のエピトープに特異的に結合する分離された抗体は相異なる種からの他のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対して交差反応性を有することができる。

“結合親和性”は一般的に分子（例えば、抗体）の単一結合部位とそれの結合パートナー（例えば、抗原）間の非共有相互作用の合計強度を意味する。特別な言及がない限り、用語“結合親和性”は結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を意味する。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は一般的に解離定数（Ｋ_Ｄ）によって表示されることができる。親和性は、これに制限されるものではないが、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）、及び平衡結合定数（Ｋ_Ａ）を含む、当該分野に公知となっている多数の方式で測定及び／又は表示されることができる。Ｋ_Ｄはｋ_ｏｆｆ／ｋ_ｏｎの商から計算され、モル濃度（Ｍ）として表示され、Ｋ_Ａはｋ_ｏｎ／ｋ_ｏｆｆの商から計算される。ｋ_ｏｎは、例えば抗原に対する抗体の結合速度定数を意味し、ｋ_ｏｆｆは、例えば抗原に対する抗体の解離速度定数を意味する。ｋ_ｏｎ及びｋ_ｏｆｆは免疫分析（例えば、酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ））、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）又は結合平衡除外法（ＫＩＮＥＸＡ）のような、当業者に公知となった技術によって決定されることができる。

用語“特異的に結合する”、“特異的に認識する”、“特異的結合”、“選択的結合”及び“選択的に結合する”は抗体に関連して類似の用語で、抗原（例えば、エピトープ又は免疫複合体）に結合する分子（例えば、抗体）を意味し、このような結合は当業者によって理解される通りである。例えば、抗原に特異的に結合する分子は、例えば免疫分析、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、ＫＩＮＥＸＡ３０００機器（ＳａｐｉｄｙｎｅＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｂｏｉｓｅ、ＩＤ）、又は当該分野に公知となった他の分析によって決定されたとき、一般的にもっと低い親和性で他のペプチド又はポリペプチドに結合することができる。特定の具体例において、抗原に特異的に結合する分子は、この分子が他の抗原に結合するときのＫ_Ａより少なくとも２ｌｏｇｓ、２．５ｌｏｇｓ、３ｌｏｇｓ、４ｌｏｇｓ又はそれ以上大きなＫ_Ａでその抗原に結合する。

抗体は典型的に１０^−５〜１０^−１１Ｍ以下の解離定数によって反映される、高親和性で同族抗原に特異的に結合する。約１０^−４Ｍを超えるＫ_Ｄは一般的に非特異的結合を示すと見なされる。抗原と“特異的に結合する”抗体は高親和性で抗原及び実質的に同じ抗原に結合する抗体を意味し、これは、例えば決まった抗原を使って免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）又はＢＩＡＣＯＲＥ^ＴＭ２０００機器で表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術によって決定されたとき、１０^−７Ｍ以下、好ましくは１０^−８Ｍ以下、より好ましくは１０^−９Ｍ以下、及び最もましくは１０^−８Ｍ〜１０^−１０Ｍ以下のＫ_Ｄを有することを意味し、これは関係ない抗原には高親和性で結合しない。

用語“抗原”は任意の天然又は合成免疫原性物質、例えばタンパク質、ペプチド又はハブテンを意味する。抗原はＦＡＭ１９Ａ５又はその断片であり得る。

用語“エピトープ”は当該分野の用語であり、抗体が特異的に結合することができる抗原の局所領域を意味する。エピトープは、例えばポリペプチドの連続（ｃｏｎｔｉｇｕｏｕｓ）アミノ酸（線形又は連続エピトープ）であり得るか、又はエピトープは、例えばポリペプチド又はポリペプチドらの２個以上の非連続領域が合わせられたもの（立体構造、非線形、不連続、又は非連続エピトープ）であり得る。連続アミノ酸から形成されたエピトープは、いつもそうではないが、典型的に変性溶媒に露出されるときに保有され、３次フォルディングによって形成されたエピトープは典型的に変性溶媒で処理するときに消失される。エピトープは典型的に独特な空間立体構造で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は２０個のアミノ酸を含む。エピトープが特定の抗体によって結合されたことを決定する方法（すなわち、エピトープマッピング）は当該分野によく知られており、これは、例えば免疫ブロッティング及び免疫沈降分析を含み、例えば、ＦＭＡＭ１９Ａ５からの重畳又は連続ペプチドが特定の抗体（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）との反応性に対して試験される。エピトープの空間的立体形態を決定する方法は当該分野の技術及びこの明細書に開示されるものなどを含み、例えばＸ線結晶学、２次元核磁気共鳴及びＨＤＸ−ＭＳを含む（例えば、Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66, G. E. Morris, Ed. (1996)参照）。

特定の具体例において、抗体が結合したエピトープは、例えばＮＭＲ分光法、Ｘ線回折結晶学研究、ＥＬＩＳＡ分析、質量分光法と結合された水素／重水素交換（例えば、液体クロマトグラフィーエレクトロスプレイ質量分析法）、アレイ基盤オリゴペプチド走査分析、及び／又は突然変異誘発マッピング（例えば、部位特異的突然変異誘発マッピング）によって決定されることができる。Ｘ線結晶学の場合、結晶化は当該分野に公知となった方法のいずれかを使って達成されることができる（例えば、Giege R et a (l1.9, 94) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350; McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269- 1274; McPherson A (1976) J Biol Chem 251 : 6300-6303）。抗体：抗原結晶は知られているＸ線回折技術を使って研究されることができ、Ｘ−ＰＬＯＲ（Yale University, 1992, distributed by Molecular Simulations, Inc.; see, e.g., Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; アメリカ特許公開第２００４／００１４１９４号参照), and BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, ed Carter CW; Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323)のようなコンピュータソフトウェアを使って研究されることができる。突然変異誘発マッピング研究は当業者に公知となった任意の方法を使って遂行されることができる。アラニン走査突然変異誘発技術を含む突然変異誘発技術についての説明は、例えば文献（Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 and Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081- 1085）を参考する。

用語“エピトープマッピング”は抗体−抗原認識に対する分子決定基の確認過程を意味する。

２個以上の抗体に関連して、用語“同じエピトープに結合する”は特定の方法によって決定されたとき、抗体がアミノ酸残期の同じセグメントに結合することを意味する。抗体がこの明細書に開示される抗体と“ＦＡＭ１９Ａ５上の同じエピトープ”に結合するかを決定する技術は、エピトープマッピング法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）を含む。他の方法は抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングし、ここで抗原配列内でアミノ酸残期の変形による結合の損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる。これに加え、エピトープマッピング用コンピュータ組合せ方法も使われることができる。これらの方法は組み換えファージディスプレイペプチドライブラリから特定の短いペプチドを親和性分離することができる該当抗体の能力に依存する。同じＶＨ及びＶＬ又は同じＣＤＲ１、２及び３配列を有する抗体は同じエピトープに結合すると予想される。

“標的との結合に対して他の抗体と競合する”抗体は他の抗体と標的の結合を（部分的に又は完全に）阻害する抗体を意味する。２個の抗体が標的との結合に対して互いに競合するか、すなわち１個の抗体が他の抗体と標的の結合を阻害するか否かと阻害する程度は公知となった競合実験によって決定されることができる。特定の具体例において、抗体は他の抗体と標的の結合に対して競合し、この結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％まで阻害する。阻害又は競合の水準は、抗体が“遮断抗体”（すなわち、標的と先にインキュベーションされた低温抗体）であるかによって違うことができる。競合分析は、例えばEd Harlow and David Lane, Cold Spring Harb Protoc; 2006; doi: 10.1101/pdb.prot4277 or in Chapter 11 of "Using Antibodies" by Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, USA 1999）の第１１章に説明された通りに遂行されることができる。競合抗体は同じエピトープ、重畳エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害によって証明された通りに）に結合する。

他の競合結合分析は、固相直接又は間接放射性免疫測定（ＲＩＡ）、固相直接又は間接酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、サンドイッチ競合分析（Stahli et al., Methods in Enzymology 9:242 (1983)参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Kirkland et al., J. Immunol. 137:3614 (1986)参照）；固相直接標識分析、固相直接標識サンドイッチ分析（Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988)参照）；１−１２５標識を使った固相直接標識ＲＩＡ（Morel et αΙ., ΜοΙ. Immunol. 25(1):7 (1988)参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Cheung et al, Virology 176:546 (1990)参照）；及び直接標識ＲＩＡ（Moldenhauer et al, Scand. J. Immunol. 32:77 (1990)参照）を含む。

“二重特異性”又は“二元機能抗体”は２個の相異なる重鎖／軽鎖対と２個の相異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体である。二重特異性抗体はハイブリドーマの融合又はＦａｂ’断片の連結を含むさまざまな方法によって生成されることができる（例えば、Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. Immunol. 79:315-321 (1990); Kostelny et al., J. Immunol. 148, 1547-1553 (1992)参照）。

用語“モノクローナル抗体”は特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体又は全ての抗体が特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体の組成物を意味する。よって、用語“ヒトモノクローナル抗体”は単一結合特異性を示し、ヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由した可変及び選択的不変領域を有する抗体又は抗体組成物を意味する。一具体例において、ヒトモノクローナル抗体はトランスジェニック非ヒト動物、例えば不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子と軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって生成される。

用語“組み換えヒト抗体”は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に対して導入遺伝子又はトランス染色体性（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）である動物（例えば、マウス）から分離された抗体又はそれから製造されたハイブリドーマ、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）から分離された抗体、（ｃ）組み換え、組合ヒト抗体ライブラリから分離された抗体、及び（ｄ）他のＤＮＡ配列に対するヒト兔疫グロブリン遺伝子配列をスプライシングを伴う任意の他の手段によって製造、発現、生成又は分離された抗体のような、組み換え手段によって製造、発現、生成又は分離された全てのヒト抗体を含む。このような組み換えヒト抗体は生殖細胞遺伝子によって暗号化されるが、例えば抗体成熟化中に発生する後続再配列及び突然変異を含む特定のヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列を用いる可変及び不変領域を含む。当該分野に公知となったように（例えば、Lonberg (2005) Nature Biotech. 23(9): 1117- 1125参照）、可変領域は外来抗原に対して特異的な抗体を形成するように再配列した多様な遺伝子によって暗号化された、抗原結合ドメインを含む。再配列に加え、可変領域は外来抗原に対する抗体の親和性を増加させるために多数の単一アミノ酸変化（体細胞突然変異又は超突然変異ともいう）によってさらに変形されることができる。不変領域は抗原に対する追加の反応（すなわち、アイソタイプスイッチ）によって変わるであろう。よって、抗原に反応して軽鎖及び重鎖兔疫グロブリンポリペプチドを暗号化する再配列されて体細胞突然変異された核酸分子は元の核酸分子と配列同一性を有することができないが、実質的に同一であるかほぼ同一であろう（すなわち、少なくとも８０％の同一性を有する）。

用語“ヒト抗体（ＨｕＭＡｂ）”はフレームワークとＣＤＲ領域の両者がヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由した可変領域を有する抗体を意味する。また、この抗体が不変領域を含めば、不変領域もヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由する。本明細書に開示される抗体は、ヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列（例えば、試験管内無作為又は部位特異的突然変異の誘発によって又は生体内体細胞突然変異によって導入した突然変異）によって暗号化されないアミノ酸残期を含むことができる。しかし、この明細書に開示される用語“ヒト抗体”はマウスのような他の哺乳類種の生殖細胞から来由したＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体は含まない。用語“ヒト抗体”と“完全なヒト抗体”は同義語として使われる。

用語“ヒト化抗体”は非ヒト抗体のＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト兔疫グロブリンから来由した相応するアミノ酸に置換された抗体を意味する。抗体のヒト化形態の一具体例において、ＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト兔疫グロブリンからのアミノ酸に置換され、１個以上のＣＤＲ領域内のアミノ酸の一部、大部分又は全部はそのまま残る。アミノ酸の小さな添加、欠失、挿入、置換又は変形は、抗体が特定抗原に結合する能力を無くさない限り、許容される。“ヒト化抗体”は元の抗体と類似した抗原特異性を保有する。

“キメラ抗体”は１個の種から可変領域が来由し、他の種から不変領域が来由した抗体、例えばマウス抗体から可変領域が来由し、ヒト抗体から不変領域が来由した抗体を意味する。

本明細書で使用される用語“交差反応する”は相異なる種からのＦＡＭ１９Ａ５に結合するこの明細書に開示される抗体の能力を意味する。例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するこの明細書に開示される抗体も他の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）にも結合することができる。交差反応性は結合分析（例えば、ＳＰＲ、ＥＬＩＳＡ）で精製された抗原との特異的反応性を検出することにより、又はＦＡＭ１９Ａ５を生理学的に発現する細胞との結合、又は機能的相互作用を検出することにより測定されることができる。交差反応性を決定する方法は、この明細書に開示される標準結合分析、例えばＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）２０００ＳＰＲ機器（ＢｉａｃｏｒｅＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使ったＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析、又はフローサイトメトリー技術を含む。

用語“自然発生”は自然で発見されることができることを意味する。例えば、自然の出処から分離されることができ、実験室でヒトによって意図的に変形されなかった有機体に存在するポリペプチド又はポリヌクレオチド配列は自然発生的である。

用語“ポリペプチド”は少なくとも２個の連続的に連結されたアミノ酸残期を含む鎖を意味し、鎖の長さに上限はない。タンパク質における１個以上のアミノ酸残期は、これに制限されるものではないが、グリコシル化、リン酸化又はジスルフィド結合形成のような変形を含むことができる。“タンパク質”は１個以上のポリペプチドを含むことができる。

“核酸分子”はＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を含む。核酸分子は一本鎖又は二本鎖であり得、ｃＤＮＡであり得る。

用語“ベクター”はそれが連結された他の核酸を輸送することができる核酸分子を意味する。一種類のベクターは“プラスミド”であり、これは追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされることができる円形の二重本ＤＮＡループを意味する。他の種類のベクターは追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノムにライゲーションされることができるウイルスベクターである。特定のベクター（例えば、バクテリア複製起源を有するバクテリアベクター及びエピソーム哺乳類ベクター）はこれらが導入された宿主細胞で自己複製することができる。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳類ベクター）は、宿主細胞に導入されるとき、宿主細胞のゲノムに統合することができ、これにより宿主ゲノムとともに複製される。また、特定のベクターはこれらが作動可能に連結された遺伝子の発現を指示することができる。このようなベクターはこの明細書で“組み換え発現ベクター”（又は簡単に“発現ベクター”）と言及される。一般的に、組み換えＤＮＡ技術で有用性を有する発現ベクターは主にプラスミド形態である。本明細書で、“プラスミド”と“ベクター”はプラスミドがベクターの最もよく使われる形態であるから互いに交換して使われることができる。しかし、ウイルス（例えば、複製結合レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ関連ウイルス）ベクターのような他の形態の発現ベクターも含まれ、これらは同等な機能をする。

用語“組み換え宿主細胞”（又は簡単に“宿主細胞”）は細胞に自然に存在しない核酸を含む細胞を意味し、組み換え発現ベクターが導入された細胞であり得る。このような用語は特定の該当細胞だけではなく、このような細胞の子孫も言及することが理解されなければならない。突然変異又は環境的影響によって後続世代では特定の変形が起こることができるから、このような子孫は実際に母細胞と同一であることはできないが、依然として用語“宿主細胞”の範囲内に含まれる。

用語“連結される”は２個以上の分子の会合を意味する。連結は共有連結又は非共有連結であり得る。また、連結は遺伝子連結（すなわち、組み換えによって融合する）であり得る。このような連結は化学的結合及び組み換えタンパク質生成のような当該分野に知られているさまざまな技術を使って達成されることができる。

用語“治療上有効量”は単独で又は他の治療剤と組み合わせて、対象の疾患又は障害を“治療”するのに効果的な、あるいは疾患又は障害（例えば、緑内障）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物の量を意味する。“治療上有効量”は疾患又は障害（例えば、緑内障）を持っているか有する危険がある対象に一部の改善又は利益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。よって、“治療上有効”量は疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるか又は一部の緩和、軽減させ、及び／又は少なくとも１個の指標（例えば、緑内障に関連する増加した炎症）を減少させ、及び／又は疾患又は障害（少なくとも、緑内障）の少なくとも１個の臨床症状を減少させる量である。

ＩＩ．緑内障の治療方法
ＦＡＭ１９Ａ５に対する拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の緑内障を治療する方法が開示される。一具体例において、拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はそのポリヌクレオチドを含むベクターである。一具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に結合してＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させる。一具体例において、減少したＦＡＭ１９Ａ５活性は緑内障に関連した炎症を減少、緩和、又は阻害する。

抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、緑内障患者で観察された網膜神経節細胞の消失を減少及び／又は防止することができる（実施例８参照）。緑内障に対して現在用いることができる大部分の治療オプションとは違い、一具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は上昇した眼内圧を減少させることに対する効果はないことがあり得る（実施例６参照）。その代わり、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は小膠細胞細胞の活性化を調節することにより、網膜の視神経頭周辺で炎症を抑制することが現れた（実施例９参照）。よって、この明細書に開示される方法は視神経頭内での網膜神経節細胞の消失を減少、緩和又は予防することによって緑内障を治療することができる。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は網膜内での小膠細胞細胞の活性を調節し、これにより対象で生成された炎症媒介因子の水準を減少させることによって緑内障を治療する。

一具体例において、緑内障は、開放隅角緑内障、閉鎖隅角緑内障、正常眼圧緑内障（“ＮＴＧ”）、先天性緑内障、二次性緑内障、色素性緑内障、偽落屑緑内障、外傷緑内障、新生血管緑内障、虹彩角膜内皮症侯群、及びブドウ膜炎緑内障からなる群から選択される。一具体例において、緑内障は、視神経損傷、網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）消失、高い眼内圧（“ＩＯＰ”）、損傷された血液網膜関門、及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での小膠細胞活性水準の増加に関連する。

一具体例において、本方法で治療される対象は、兎又はマウスのような非ヒト動物である。一具体例において、本方法で治療される対象はヒトである。

いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子又は免疫抱合体、又はその組成物は、静脈内、経口、非経口、髄腔内、脳室内、肺、筋肉内、皮下、硝子体内、又は心室内経路を介して投与される。

例えば、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の投与に対し、投薬量は約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲である。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分、又はその組成物は緑内障を治療するための１個以上の追加の製剤（例えば、（ｉ）プロスタグランジン類似体、例えばＸＡＬＡＴＡＮ（登録商標）、ＬＵＭＩＧＡＮ（登録商標）、ＴＲＡＶＡＴＡＮＺ（登録商標）；（ｉｉ）アルファ作動剤、例えばＡＬＰＨＡＧＡＮ（登録商標）Ｐ及びＩＯＰＩＤＩＮＥ（登録商標）；及び（ｉｉｉ）炭酸脱水酵素阻害剤、例えばＴＲＵＳＯＰＴ（登録商標）及びＡＺＯＰＴ（登録商標））と組み合わせて投与されることができる。１種以上の追加の治療薬物の容量及び投与は当該分野に公知となっており、例えば各薬物の製品ラベルに指示される。

ＩＩＩ．ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤
一具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターである。他の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はこれらのポリヌクレオチドを含むベクターである。

本明細書に開示される方法に有用な抗体は、特定の機能的特性を特徴とするモノクローナル抗体を含む。例えば、抗体は、可溶性ＦＡＭ１９Ａ５及び膜結合ＦＡＭ１９Ａ５を含むヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。可溶性及び／又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合することに加え、また、本明細書に開示される抗体は（ａ）１０ｎＭ以下のＫ_Ｄで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するか；（ｂ）１ｎＭ以下のＫ_Ｄで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するか；又は（ａ）と（ｂ）の両者を示す。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば１０^−７Ｍ以下、１０^−８Ｍ以下、１０^−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０^−１０Ｍ（０．１ｎＭ）以下、１０^−１１Ｍ以下、又は１０^−１２Ｍ（１ｐＭ）以下、例えば１０^−１２Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１１Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１０Ｍ〜１０^−７Ｍ、又は１０^−９Ｍ〜１０^−７Ｍ、例えば１０^−１２Ｍ、５×１０^−１２Ｍ、１０^−１１Ｍ、５×１０^−１１Ｍ、１０^−１０Ｍ、５×１０^−１０Ｍ、１０^−９Ｍ、５×１０^−９Ｍ、１０^−８Ｍ、５×１０^−８Ｍ、１０^−７Ｍ又は５×１０^−７ＭのＫ_Ｄの高親和性で可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。多様な種のヒトＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体の結合能力を評価する標準分析は当該分野に公知となっている。例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロッティング及びＲＩＡを含む。適切な分析が実施例に詳細に説明される。抗体の結合キネティクス（例えば、結合親和性）もＥＬＩＳＡ、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析又はＫＩＮＸＡのような当該分野に公知となった標準分析によって評価されることができる。ＦＡＭ１９Ａ５の機能的特性（例えば、リガンド結合）に対する抗体の効果を評価する分析が以下でかつ実施例により詳細に説明される。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０^−７Ｍ以下、１０^−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０^−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０^−１０Ｍ以下、１０^−１２Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１１Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１０Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−９Ｍ〜１０^−７Ｍ、又は１０^−８Ｍ〜１０^−７ＭのＫ_Ｄで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ、又は５〜１０ｎＭのＫ_Ｄで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭのＫ_Ｄで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０^−７Ｍ以下、１０^−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０^−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０^−１０Ｍ以下、１０^−１２Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１１Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−１０Ｍ〜１０^−７Ｍ、１０^−９Ｍ〜１０^−７Ｍ、又は１０^−８Ｍ〜１０^−７ＭのＫ_Ｄで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ又は５〜１０ｎＭのＫ_Ｄで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。

特定の具体例において、本明細書に開示される方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープとの結合についてこの明細書に開示されるＣＤＲ又は可変領域を含む抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体と交差競合する（又は結合を阻害する）。

特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体の結合を阻害する。ここで、（ｉ）基準抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２及びＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、基準抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４及びＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むか；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９４のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１００のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含むか；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含むか；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含むか；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。

いくつかの具体例において、基準抗体は、（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。

特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、このような基準抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％又は９０％又は１００％まで阻害する。競合抗体は同じエピトープ、重畳エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害によって証明）と結合する。２個の抗体が標的との結合に対して互いに競合するか否かはＲＩＡ及びＥＩＡのような当該分野に公知となった競合実験によって決定されることができる。

特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むこの明細書に開示される基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。ここで、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むか；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９４のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１００のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含むか；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含むか；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含むか；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱＩＤＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱＩＤＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱＩＤＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。

２個の抗体が同じエピトープに結合するか否かを決定する技術は、例えばエピトープマッピング方法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原抗体複合体結晶のＸ線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）、抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングする方法（ここで、抗原配列内でアミノ酸残期の変形による結合は損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる）、エピトープマッピングのためのコンピュータ組合方法を含む。

本明細書に開示される方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の断片の結合によって決定されるとき、成熟したヒトＦＡＭ１９Ａ５の少なくとも１個のエピトープと結合することができる。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６又はＳＥＱＩＤＮＯ：２のアミノ酸残期４２〜６１）のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱＩＤＮＯ：６の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープと結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：２のアミノ酸残期４６〜５１（すなわち、ＤＳＳＱＰＲ）、例えばアミノ酸残期４６、５０及び５２（すなわち、Ｄ−−−Ｐ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期４６、４７、４８及び５０（すなわち、ＤＳＳ−Ｐ）に相当する１個以上のアミノ酸でＳＥＱＩＤＮＯ：６に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：９又はＳＥＱＩＤＮＯ：２のアミノ酸残基９０〜１０９）のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱＩＤＮＯ：９の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープと結合する。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：４の１個以上のアミノ酸残期９９〜１０７（すなわち、ＥＧＣＤＬＬＩＮＲ）、例えばアミノ酸残期１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期９９、１００、１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＥＧ−ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期９９、１００及び１０７（すなわち、ＥＧ−−−−−−Ｒ）でＳＥＱＩＤＮＯ：９に結合する。

いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０、又はＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープである、ヒトＦＡＭ１９Ａ５にのみ結合する。

いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６又はその断片と天然立体配座（すなわち、未変性）状態で結合する。いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱＩＤＮＯ：９又はその断片と天然立体配座（すなわち未変性）状態で結合する。他の具体例において、少なくとも１個のエピトープはＳＥＱＩＤＮＯ：５と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は少なくとも約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。エピトープはＳＥＱＩＤＮＯ：１０と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は少なくとも約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はグリコシル化及び非グリコシル化ヒトＦＡＭ１９Ａ５の両者と結合する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープとさらに結合する。よって、特定の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６のエピトープと追加のエピトープ又はＳＥＱＩＤＮＯ：９のエピトープと追加のエピトープに結合する。他の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：５のエピトープ、ＳＥＱＩＤＮＯ：９のエピトープ及び追加のエピトープに結合することができる。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６のエピトープ、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のエピトープ及び追加のエピトープに結合する。いくつかの具体例において、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５、エピトープＦ１）、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６、エピトープＦ２）、ＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７、エピトープＦ３）、ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱＩＤＮＯ：８、エピトープＦ４）、ＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：９、エピトープＦ５）、又はＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、エピトープＦ６）、又はＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０又はこれらの任意の組合せのアミノ酸配列内に位置する断片から選択される。ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９又はＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列内に位置する断片は、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９又はＳＥＱＩＤＮＯ：１０のいずれかの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有する断片を含む。いくつかの具体例において、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０、又はＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱＩＤＮＯ：５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有する断片、又はこれらの任意の組合せから選択される。いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１個以上の追加のエピトープに天然立体配座（すなわち、未変性）状態で結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープのグリコシル化及び非グリコシル化形態の両者に結合する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ２、ＥＰ４及び／又はＥＰ８として確認された少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ２はアミノ酸ＤＳＳＱＰ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６６）を含み、ＥＰ４はアミノ酸ＡＲＣＡＣＲＫ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６８）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７２）を含む。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＥＰ２、ＥＰ４又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、単にＥＰ２にのみ結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ４及びＥＰ８に結合する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８として確認された少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ６はアミノ酸ＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７０）を含み、ＥＰ７はアミノ酸ＧＣＤＬＬＩＮＲ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７１）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱＩＤＮＯ：７２）を含む。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８と少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は単にＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８にのみ結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７及びＥＰ８に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７及びＥＰ８に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７に結合する。

いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６、ＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９、ＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される１個以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。

特定の具体例において、例えば免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）、表面プラズモン共鳴、又は結合平衡除外法によって測定されるとき、ＦＡＭ１９Ａファミリの他のタンパク質より２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はそれより高い親和性でＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）と結合する抗体又はその抗原結合部分が開示される。特定の具体例において、例えば免疫分析によって測定されるとき、ＦＡＭ１９Ａファミリの他のタンパク質との交差反応性なしにＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に結合する抗体又はその抗原結合部分が開示される。

特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は自生抗体ではないか又は自然発生抗体ではない。例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、より多いか、例えばより少ないか、又は相異なるタイプの翻訳後修飾（ｐｏｓｔ−ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を有することにより、自然発生の抗体のものとは異なる翻訳後修飾を有する。

ＩＶ．例示的な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体
本明細書に開示される方法に使われることができる特定の抗体はこの明細書に開示されるＣＤＲ及び／又は可変領域配列を有する抗体、例えばモノクローナル抗体だけでなくこれらの可変領域又はＣＤＲ配列と少なくとも８０％同一性（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％同一性）を有する抗体である。本発明の相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列がそれぞれ表４及び５に提供される。

重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５からなる群から選択される重鎖可変領域のＣＤＲを含む。

また、重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６からなる群から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。

特定の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５からなる群から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ及びＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６からなる群から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。

また、重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、（ｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：４２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６６のアミノ酸配列を含み；（ｖｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含み；（ｉｘ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含み；（ｘ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み；（ｘｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６４のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み；及び（ｘｖ）重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１６５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含む。

重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。、ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

また、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

また、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

いくつかの具体例において、本発明は分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分を提供する。これは、
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｇ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｈ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｊ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｋ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｌ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｍ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｎ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は
（ｏ）ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列
を含む。

特定の具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、（ｉ）２−１３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は２−１３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉ）３−２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は３−２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉｉ）１−６５の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−６５の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｖ）１−２８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−２８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖ）Ｐ２−Ｃ１２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｃ１２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉ）１３Ｂ４の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｂ４の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉ）１３Ｆ７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｆ７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉｉ）１５Ａ９の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１５Ａ９の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｘ）Ｐ１−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘ）Ｐ１−Ａ０８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉ）Ｐ１−Ｆ０２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ｆ０２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉ）Ｐ２−Ａ０１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉｉ）Ｐ２−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｖ）Ｐ２−Ｆ０７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ０７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；又は（ｘｖ）Ｐ２−Ｆ１１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ１１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せを含む。本明細書に開示される相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列が表２に提供されている。本明細書に開示される相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列は表３に提供されている。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
を含む。

特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＨＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＬＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱＩＤＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱＩＤＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３
を含む。

特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は前記ＣＤＲの１個、２個、３個、４個、５個又は６個を含む。

本明細書に開示されるＶＨドメイン、又はその１個以上のＣＤＲは重鎖、例えば全長重鎖を形成するために不変ドメインに連結されることができる。同様に、本明細書に開示されるＶＬドメイン、又はその１個以上のＣＤＲは軽鎖、例えば全長軽鎖を形成するために不変ドメインに連結されることができる。全長重鎖と全長軽鎖は組み合せられて全長抗体を形成することができる。

特定の具体例において、抗体軽鎖及び重鎖、例えば分離された軽鎖及び重鎖を含む抗体が開示される。軽鎖に関連して、特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はカッパ軽鎖である。他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はラムダ軽鎖である。さらに他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はヒトカッパ軽鎖又はヒトラムダ軽鎖である。特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本明細書に開示される抗体は任意のＶＬ又はＶＬＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の不変領域はヒトカッパ軽鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はＶＬ又はＶＬＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の不変領域はヒトラムダ軽鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。ヒト不変領域配列の非制限的例は当該分野に公知となっている（例えば、アメリカ特許第５，６９３，７８０号及びKabat EA et al, (1991)（上記）を参照）。

重鎖に関連して、いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗体の重鎖は、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖であり得る。他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の重鎖は、ヒトアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖を含むことができる。一具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、抗体はこの明細書に開示されるＶＨ又はＶＨＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の不変領域はヒトガンマ（γ）重鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はＶＨ又はＶＨＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の不変領域はこの明細書に開示されるとか当該分野に公知となったヒト重鎖のアミノ酸配列を含む。ヒト不変領域配列の非制限的例は当該分野に公知となっている（例えば、アメリカ特許第５，６９３，７８０号及びKabat EA et al., (1991)（上記）を参照）。

いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、抗体はこの明細書に開示されるＶＨ又はＶＨＣＤＲ及びＶＬ又はＶＬＣＤＲを含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、不変領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子、又はヒトＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子の不変領域のアミノ酸配列を含む。他の特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体は任意のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、不変領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子、兔疫グロブリン分子の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）の不変領域のアミノ酸配列を含む。いくつかの具体例において、不変領域はサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）及びアロタイブ（例えば、Ｇ１ｍ、Ｇ２ｍ、Ｇ３ｍ及びｎＧ４ｍ）及びこれらの変異体を含む、自然発生のヒトＩｇＧの不変領域のアミノ酸配列を含む（例えば、Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520（２０１４年１０月２０日オンライン公開）及びJefferis R. and Lefranc MP, mAbs 1:4, 1-7(2009)参照）。いくつかの具体例において、不変領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４、又はこれらの変異体の不変領域のアミノ酸配列を含む。

特定の具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦｃエフェクター機能、例えば補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び／又は抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を持っていない。エフェクター機能はＦｃ領域によって媒介され、先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対してかなり重畳した結合部位を含むので、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインでヒンジ領域に最も近くにある残期が抗体のエフェクター機能を担当する。また、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３抗体より低い水準のＦｃエフェクター機能を有する。抗体のエフェクター機能は次のように当該分野に公知となった相異なる接近法によって減少するか回避されることができる：（１）Ｆｃ領域を欠いた抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂ）の使用；（２）糖が付着された残期の欠失又は変更、酵素的に糖の除去、グリコシル化阻害剤の存在の下で培養された細胞で抗体の生成、又はタンパク質をグリコシル化することができない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）での抗体の発現（アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号参照）によって生成されることができる、アグリコシル化抗体の生成；（３）エフェクター機能が減少したＩｇＧサブクラスからのＦｃ領域（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＦｃ領域又はＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＣＨ２ドメインを含むキメラＦｃ領域）の利用（アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びLau C. et al. J. Immunol. 191:4769- 4777 (2013)参照）；及び（４）Ｆｃ機能が減少するかない突然変異を有するＦｃ領域の生成（アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ出願及びＰＣＴ出願とAn et al. mAbs 1:6, 572-579 (2009)を参照）。

いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂである。このような抗体断片は当該分野によく知られており、以上で説明されている。

いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域を含む。いくつかの具体例において、不変領域は、ヒトＩｇＧ２又はＩｇＧ４のＦｃ領域のアミノ酸配列を含む。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプのものである。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ４アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域、又は減少するかないＦｃ機能をもたらす突然変異を有するＦｃ領域を含む。Ｆｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域は当該分野に公知となったものを含む（例えば、Lau C. et al. J. Immunol. 191:4769-4777 (2013)；An et al., mAbs 1:6, 572-579 (2009)；及びアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許と特許公開及びＰＣＴ公開を参照）。また、Ｆｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域は当業者によって易しく作られることができる。

Ｖ．核酸分子
本発明の他の様態はこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分のいずれか１個を暗号化する１個以上の核酸分子に関するものである。核酸は、全体細胞に、細胞溶解物に、又は部分的に精製された形態又は実質的に純粋な形態に存在することができる。核酸はアルカリ性／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、制限酵素、アガロースゲル電気泳動及び当該分野によく公知となった他の技術を含む標準技術によって、他の細胞成分又は他の汚染物、例えば他の細胞核酸（例えば、他の染色体ＤＮＡ、例えば自然で分離されたＤＮＡに連結された染色体ＤＮＡ）又はタンパク質から精製されたとき、“分離されるか”又は“実質的に純粋である”（F. Ausubel, et al. , ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York参照）。本明細書に開示される核酸は、例えばＤＮＡ又はＲＮＡであり得、イントロン配列を含むことも含まないこともできる。特定の具体例において、核酸はｃＤＮＡ分子である。

本明細書に開示される核酸は標準分子生物学技術によって得られることができる。ハイブリドーマ（例えば、以下で詳述するヒト兔疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスから製造されたハイブリドーマ）によって発現した抗体の場合、このハイブリドーマによって製造された抗体の軽鎖及び重鎖を暗号化するｃＤＮＡは標準ＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング技術によって得られることができる。兔疫グロブリン遺伝子ライブラリ（例えば、ファージディスプレイ技術を使用）から得られた抗体の場合、この抗体を暗号化する核酸がライブラリから回収されることができる。

本明細書に開示される特定の核酸分子は本発明の多様な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬ配列を暗号化するものである。このような抗体のＶＨ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列がＳＥＱＩＤＮＯｓ：４３−４６及び１７７に提示される。このような抗体のＶＬ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列はＳＥＱＩＤＮＯｓ：４７−５０及び１７８に提示される。

本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の製造方法は、シグナルペプチドとともに重鎖及び軽鎖を暗号化するヌクレオチド配列、例えばそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：４３及び４７、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４４及び４８、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４５及び４９、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：４６及び５０、ＳＥＱＩＤＮＯｓ：１７７及び１７８を含む細胞株で抗体の関連重鎖及び軽鎖を発現することを含むことができる。これらのヌクレオチド配列を含む宿主細胞は本発明に含まれる。

ＶＨ及びＶＬセグメントを暗号化するＤＮＡ断片が得られた後、これらのＤＮＡ断片は、例えば可変領域遺伝子を全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に転換するために、標準組み換えＤＮＡ技術によってさらに操作されることができる。これらの操作において、ＶＬ又はＶＨ暗号化ＤＮＡ断片は抗体不変領域又は可撓性リンカーのような他のタンパク質を暗号化する他のＤＮＡ断片に作動可能に連結される。用語“作動可能に連結される”は２個のＤＮＡ断片によって暗号化されたアミノ酸配列がインフレーム（ｉｎ−ｆｒａｍｅ）を維持するように２個のＤＮＡ断片が連結されることを意味する。

ＶＨ領域を暗号化する分離されたＤＮＡはＶＨ暗号化ＤＮＡを重鎖不変領域（ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２及び／又はＣＨ３）を暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することにより全長重鎖遺伝子に転換されることができる。ヒト重鎖不変領域遺伝子の配列は当該分野に公知となっており（例えば、Kabat, E. A., et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片が標準ＰＣＲ増幅によって得られることができる。重鎖不変領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ不変領域、例えばＩｇＧ２及び／又はＩｇＧ４不変領域であり得る。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子の場合、ＶＨ暗号化ＤＮＡは単に重鎖ＣＨ１不変領域のみを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結されることができる。

ＶＬ領域を暗号化する分離されたＤＮＡはＶＬ暗号化ＤＮＡを軽鎖不変領域ＣＬを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することにより、全長軽鎖遺伝子に転換されることができる。ヒト軽鎖不変領域遺伝子の配列は当該分野に公知となっており（例えば、Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片が標準ＰＣＲ増幅によって得られることができる。軽鎖不変領域はカッパ又はラムダ不変領域であり得る。

ｓｃＦｖ遺伝子を生成するために、ＶＨ及びＶＬ暗号化ＤＮＡ断片が可撓性リンカーを暗号化する、例えばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３を暗号化する他の断片に作動可能に連結され、これによりＶＬとＶＨ領域が可撓性リンカーによって連結された状態でＶＨ及びＶＬ配列が連続単鎖タンパク質として発現することができる（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554参照）。

いくつかの具体例において、本発明は抗体又はその抗原結合部分を暗号化するヌクレオチド配列を含む分離された核酸分子を含むベクターを提供する。他の具体例において、ベクターは遺伝子療法に使われることができる。

本発明に適切なベクターは、発現ベクター、ウイルスベクター、及びプラスミドベクターを含む。一具体例において、ベクターはウイルスベクターである。

発現ベクターは、適切な宿主細胞に導入されたとき、挿入されたコーディング配列の転写及び翻訳のための必須要素、又はＲＮＡウイルスベクターの場合、複製及び翻訳のための必須要素を含む任意の核酸構成物である。発現ベクターは、プラスミド、ファージミド、ウイルス、及びこれらの誘導体を含むことができる。

本発明の発現ベクターは、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチドを含むことができる。一具体例において、抗体又はその抗原結合部分に対するコーディング配列は発現制御配列に作動可能に連結される。２個の核酸配列は、これらが各成分核酸配列がその機能性を保有するように許容する方式で共有連結されるとき、作動可能に連結されるものである。コーディング配列及び遺伝子発現制御配列は、コーディング配列の発現又は転写及び／又は翻訳が遺伝子発現制御配列の影響又は制御下の方式でこれらが共有連結されるとき、作動可能に連結されたものである。２個のＤＮＡ配列は５’遺伝子発現配列でプローモーターの誘導がコーディング配列の転写をもたらし、２個のＤＮＡ配列の連結の本質が（１）フレームシフト突然変異の導入をもたらすか、（２）コーディング配列の転写を指示するプローモーター領域の能力を妨げるか、又は（３）タンパク質に翻訳される対応ＲＮＡ転写体の能力を妨げなければ、作動可能に連結されたものである。よって、遺伝子発現配列は、この遺伝子発現配列がコーディング核酸配列の転写を行うことができれば、コーディング核酸配列に作動可能に連結されたものであり、これによって転写体は所望の抗体又はその抗原結合部分に翻訳される。

ウイルスベクターは、これに制限されるものではないが、レトロウイルス、例えばＭｏｌｏｎｅｙネズミ科白血病ウイルス、Ｈａｒｖｅｙネズミ科肉腫ウイルス、ネズミ科乳房腫瘍ウイルス、及びＲｏｕｓ肉腫ウイルス；レンチウイルス；アデノウイルス；アデノ関連ウイルス；ＳＶ４０タイプウイルス；ポリオーマバイロス；エプスタインバーウイルス；乳頭種ウイルス；ヘルペスウイルス；ワクシニアウイルス；ポリオウイルス；及びＲＮＡウイルス、例えばレトロウイルスからの核酸配列を含む。当該分野に公知となった他のベクターも易しく用いることができる。特定のウイルスベクターは非必須遺伝子が関心遺伝子に置換された非細胞変性（ｎｏｎ−ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ）真核生物ウイルスに基づく。非細胞変性ウイルスはレトロウイルスを含み、そのライフサイクルはゲノムウイルスＲＮＡのＤＮＡへの逆転写と後続の宿主細胞ＤＮＡへのプロウイルス組み込みを伴う。レトロウイルスはヒト遺伝子療法試験のために承認された。複製欠損性（すなわち、所望のタンパク質の合成を指示することができるが感染性粒子は製造することができない）があるレトロウイルスが最も有用である。このような遺伝子操作されたレトロウイルス発現ベクターは生体内遺伝子の高効能形質導入（ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ）で有用性を有する。複製欠損性レトロウイルスを生成する標準プロトコル（プラスミドへの外来遺伝子物質の統合、プラスミドによるパッケージング細胞株のトランスフェクション、パッケージング細胞株による組み換えレトロウイルスの生成、組職培地からウイルス粒子の収集、及びウイルス粒子による標的細胞の感染段階を含む）は文献（Kriegler, M., Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, W.H. Freeman Co., New York (1990) and Murry, E. J., Methods in Molecular Biology, Vol. 7, Humana Press, Inc., Cliffton, N.J. (1991)に開示されている。

一具体例において、ウイルスは二本鎖ＤＮＡウイルスであるアデノ関連ウイルスである。アデノ関連ウイルスは複製欠損になるように操作されることができ、広範囲な細胞タイプ及び種を感染させることができる。また、アデノ関連ウイルスは熱及び脂質溶媒安全性；造血細胞を含む多様な系統の細胞での高い形質導入頻度；及び重複感染阻害の欠如のような利点を有し、これにより多くの一連の形質導入が可能である。報道によれば、アデノ関連ウイルスは部位特異的方式でヒト細胞ＤＮＡに統合されることができ、これにより挿入突然変異誘発の確率及びレトロウイルス感染の挿入された遺伝子発現特徴の変動性を最小化する。これに加え、野生型アデノ関連ウイルス感染が選択圧の不在の下で１００代継代以上の間に組職培養物で追跡された。これはアデノ関連ウイルスゲノム統合が相対的に安定したイベントであることを示唆する。また、アデノ関連ウイルスは染色体外方式で機能することができる。

他の具体例において、ベクターはレンチウイルスから来由する。特定の具体例において、ベクターは非分裂細胞を感染させることができる組み換えレンチウイルスのベクターである。

レンチウイルスゲノム及びプロウイルスＤＮＡは典型的にレトロウイルスで発見される３個の遺伝子ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖを有し、これらの側面には２個の長い末端反復（ＬＴＲ）配列がある。ｇａｇ遺伝子は内部構造（基質、カプシド及びヌクレオカプシド）タンパク質を暗号化し、ｐｏｌ遺伝子はＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ（逆転写酵素）、プロテアーゼ及びインテグラーゼを暗号化し、ｅｎｖ遺伝子はウイルス外被糖タンパク質を暗号化する。５’及び３’ＬＴＲはビリオンＲＮＡの転写及びポリアデニル化を促進する作用をする。ＬＴＲは、ウイルス複製に必要な他のシス作用配列を全部含む。レンチウイルスは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｔａｔ、ｒｅｖ、ｖｐｕ、ｎｅｆ及びｖｐｘ（ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２及び／又はＳＩＶで）を含む追加の遺伝子を有する。

５’ＬＴＲに隣接してゲノム（ｔＲＮＡプライマー結合部位）の逆転写に必要な配列があり、これは粒子（Ｐｓｉ部位）へのウイルスＲＮＡのキャプシド形成（ｅｎｃａｐｓｉｄａｔｉｏｎ）に効果的である。キャプシド形成（又は感染性ビリオンへのレトロウイルスＲＮＡのパッケージング）に必須な配列がウイルスゲノムから抜ける場合、このシス欠陷はゲノムＤＮＡのキャプシド形成を防止する。

しかし、突然変異は全てのビリオンタンパク質の合成を依然として指示することができる。本発明はパッケージング機能を有する２個以上のベクター、すなわちｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖだけでなくｒｅｖ及びｔａｔに適切な宿主細胞をトランスフェクションすることを含む非分裂細胞を感染させることができる組み換えレンチウイルスの生成方法を提供する。以下で開示するように、機能的ｔａｔ遺伝子を欠いたベクターは特定の用途に好ましい。したがって、例えば、第１ベクターはウイルスｇａｇとウイルスｐｏｌを暗号化する核酸を提供することができ、他のベクターはウイルスｅｎｖを暗号化する核酸を提供することができ、これによりパッケージング細胞が生成される。パッケージング細胞に、移植ベクターとして確認された、異種遺伝子を提供するベクターを導入することは該当外来遺伝子を有する感染性ウイルス粒子を放出する生産細胞（ｐｒｏｄｕｃｅｒｃｅｌｌ）を提供する。

ベクター及び外来遺伝子の構成形態によって、第２ベクターはウイルス外被（ｅｎｖ）遺伝子を暗号化する核酸を提供することができる。ｅｎｖ遺伝子はレトロウイルスを含む、ほとんど全ての適切なウイルスから来由することができる。いくつかの具体例において、ｅｎｖタンパク質はヒト及び他の種の細胞の形質導入を許容する両種性外膜タンパク質である。

レトロウイルス来由ｅｎｖ遺伝子の例は、これに制限されるものではないが、Ｍｏｌｏｎｅｙネズミ科白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ又はＭＭＬＶ）、Ｈａｒｖｅｙネズミ科肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ又はＨＳＶ）、ネズミ科乳房腫瘍ウイルス（ＭｕＭＴＶ又はＭＭＴＶ）、ギボン（ｇｉｂｂｏｎ）猿白血病ウイルス（ＧａＬＶ又はＧＡＬＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）及びＲｏｕｓ肉腫ウイルス（ＲＳＶ）を含む。他のｅｎｖ遺伝子、例えば水泡性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）タンパク質Ｇ（ＶＳＶＧ）、肝炎ウイルス及びインフルエンザのものも使われることができる。

ウイルスｅｎｖ核酸配列を提供するベクターは調節配列と作動可能に会合される。

特定の具体例において、ベクターは非分裂細胞を形質導入するベクターの能力を損傷させなく、ＨＩＶ毒性遺伝子ｅｎｖ、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ及びｎｅｆが欠失されたレンチウイルスベクターを含む。

いくつかの具体例において、ベクターは３’ＬＴＲのＵ３領域の欠失を含むレンチウイルスベクターを含む。Ｕ３領域の欠失は完全欠失又は部分欠失であり得る。

いくつかの具体例において、本明細書に開示されるＦＶＩＩＩヌクレオチド配列を含むレンチウイルスベクターは、細胞において、（ａ）ｇａｇ、ｐｏｌ、又はｇａｇ及びｐｏｌ遺伝子を含む第１ヌクレオチド配列及び（ｂ）異種ｅｎｖ遺伝子を含む第２ヌクレオチド配列でトランスフェクションされることができる。ここで、レンチウイルスベクターは機能的ｔａｔ遺伝子を欠いている。他の具体例において、細胞はｒｅｖ遺伝子を含む第４ヌクレオチド配列でさらにトランスフェクションされる。特定の具体例において、レンチウイルスベクターは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ及びｎｅｆ、又はこれらの任意の組合せから選択された機能的遺伝子を欠いている。

特定の具体例において、レンチウイルスベクターは、ｇａｇタンパク質、Ｒｅｖ反応要素、中心ポリプリントラック（ｃＰＰＴ）、又はこれらの任意の組合せを暗号化する１個以上のヌクレオチド配列を含む。

レンチウイルスベクターの例は、ＷＯ９９３１２５１、Ｗ０９７１２６２２、Ｗ０９８１７８１５、Ｗ０９８１７８１６及びＷＯ９８１８９３４に開示され、これらはその全体がこの明細書に参照することにより組み込まれる。

他のベクターはプラスミドベクターを含む。プラスミドベクターは公知となっている（例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989参照）。プラスミドベクターは、宿主ゲノム内で複製することも統合されることもできない特性のため、生体内で細胞に遺伝子を送逹するのに特に有益なものと判明された。しかし、宿主細胞と両立するプローモーターを有するこのプラスミドはプラスミド内で作動可能に暗号化された遺伝子からペプチドを発現することができる。商業的供給者から入手可能なプラスミドは、ｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、多様なｐｃＤＮＡプラスミド、ｐＲＣ／ＣＭＶ、多様なｐＣＭＶプラスミド、ｐＳＶ４０、及びｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔを含む。特定のプラスミドの追加の例は、ｐｃＤＮＡ３．１、カタログ番号Ｖ７９０２０；ｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ、カタログ番号Ｖ８７０２０；ｐｃＤＮＡ４／ｍｙｃ−Ｈｉｓ、カタログ番号Ｖ８６３２０；及びｐＢｕｄＣＥ４．１、カタログ番号Ｖ５３２２０を含み、これはいずれもＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ．）の製品である。他のプラスミドも当業者によく公知となっている。また、プラスミドはＤＮＡの特定の断片を除去及び／又は付加するために標準分子生物学技術を使って注文設計可能である。

ＶＩ．抗体生成
ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に免疫特異的に結合する抗体又はその断片は、抗体の合成のための当該分野に公知となった任意の方法によって、例えば化学的合成又は組み換え発現技術によって生成されることができる。本明細書に開示される方法は、特別な言及がない限り、分子生物学、微生物学、遺伝子分析、組み換えＤＮＡ、有機化学、生化学、ＰＣＲ、オリゴヌクレオチド合成及び変形、核酸雑種形成、及び当該分野技術範囲内の関連分野の従来の技術を用いる。これら技術はこの明細書に引用された参照資料に詳細に記述されている（例えば、Maniatis T et al., (1982) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook J et al., (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook J et al., (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel FM et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren B et al., (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Pressを参照）。

特定の具体例において、本明細書に開示される抗体は、例えば合成、ＤＮＡ配列の遺伝子組み換えによる生成を伴う任意の手段によって製造、発現、生成又は分離された抗体（例えば、組み換え抗体）である。特定の具体例において、このような抗体は生体内動物又は哺乳類（例えば、ヒト）の抗体生殖細胞レパートリー内に自然に存在しない配列（例えば、ＤＮＡ配列又はアミノ酸配列）を含む。

ＶＩＩ．医薬組成物
生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤（Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA）の中で所望程度の純度を有するこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分を含む組成物が開示される。許容される担体、賦形剤又は安定剤は用いられた投薬量及び濃度で受恵者に非毒性であり、バッファー、例えばリン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０個残期未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は兔疫グロブリン；親水性重合体、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリシン；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばスクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎタンパク質複合体）；及び／又は非イオン界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。

特定の具体例において、医薬組成物は、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又は免疫抱合体、及び選択的に１種以上の追加の予防又は治療剤を、薬学的に許容される担体内に含む。特定の具体例において、医薬組成物はこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分の有効量、及び選択的に１種以上の追加の予防又は治療剤を、薬学的に許容される担体内に含む。いくつかの具体例において、抗体は医薬組成物に含まれた唯一の活性成分である。本明細書に開示される医薬組成物はＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させるのに有用であり、これにより緑内障のような眼疾患、障害又は状態を治療することができる。

非経口剤に使用された薬学的に許容される担体は水性ビークル、非水性ビークル、抗菌剤、等張剤、バッファー、抗酸化剤、局所痲酔剤、懸濁及び分散剤、乳化剤、金属イオン封鎖又はキレート剤及び他の薬学的に許容される物質を含む。水性ビークルの例は、塩化ナトリウム注射液、リンガー注射液、等張デキストロース注射液、滅菌水注射液、デキストロース及びラクテートリンガー注射液を含む。非水性非経口ビークルは、植物起源の固定油、綿実油、トウモロコシ油、胡麻油及びピーナッツ油を含む。静菌又は静真菌濃度の抗菌剤が複数回容器にパッケージされた非経口剤に添加されることができ、これらは、フェノール又はクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチル及びプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル（ｐｒｏｐｙｌｐ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄｅｓｔｅｒ）、チメロサール、塩化ベンザルコニウム及び塩化ベンゼトニウムを含む。等張剤は、塩化ナトリウム及びデキストロースを含む。バッファーは、リン酸塩及びクエン酸を含む。抗酸化剤は、重硫酸ナトリウムを含む。局所痲酔剤は、塩酸プロカインを含む。懸濁及び分散剤は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドンを含む。乳化剤は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）を含む。金属イオン封鎖又はキレート剤は、ＥＤＴＡを含む。また、薬学的担体は水混和性ビークル用エタノール、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコールを含み、ｐＨ調整用水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸又は乳酸を含む。

医薬組成物は、対象に対する任意の投与経路に合うように製剤化されることができる。投与経路の具体的な例は、鼻腔内、経口、非経口、髄腔内、脳室内、肺、皮下、又は心室内経路を含む。皮下、筋肉内又は静脈内注射を特徴とする非経口投与も考慮される。注射可能物質が従来の形態に、液体溶液又は懸濁液、注射前に液体中で溶液又は懸濁液になるのに適した固体形態、又はエマルジョンに製造されることができる。また、注射可能物質、溶液及びエマルジョンは１種以上の賦形剤を含む。適切な賦形剤は、例えば水、食塩水、デキストロース、グリセロール又はエタノールである。また、必要に応じて、投与される医薬組成物は少量の非毒性補助物質、例えば湿潤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、溶解度増進剤、及び他のこの種の製剤、例えば酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、オレイン酸トリエタノールアミン及びシクロデキストリンを含むことができる。

抗体の非経口投与用製剤は、直ぐ注射可能な滅菌溶液、皮下注射用錠剤を含む使用直前に溶媒と直ぐ合わせられることができる滅菌乾燥可溶性製品、例えば凍結乾燥された粉末、すぐ注射可能な滅菌懸濁液、使用直前にビークルと直ぐ合わせられることができる滅菌乾燥不溶性製品及び滅菌エマルジョンを含む。溶液は水性又は非水性であり得る。

静脈内投与される場合、適切な担体は、生理学的食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、及び増粘及び溶解剤を含む溶液、例えばグルコース、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール及びこれらの混合物を含む。

抗体を含む局所用混合物は局所及び全身投与について説明したように製造される。得られた混合物は、溶液、懸濁液、エマルジョンなどであり得、クリーム、ゲル、軟膏、エマルジョン、溶液、エリクサー、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト、フォーム、エアロゾル、灌注剤、スプレー、座薬、包帯、皮膚パッチ又は局所投与に適した任意の他の剤形として製剤化されることができる。

本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分は、例えば吸入による、局所投与用エアロゾルとして製剤化されることができる（例えば、アメリカ特許第４，０４４，１２６号、同第４，４１４，２０９号及び同第４，３６４，９２３号参照、この特許等は炎症性疾患、特に喘息の治療に有用なステロイドの送逹のためのエアロゾルを開示する）。気道投与用のこの製剤は噴霧器用のエアロゾル又は溶液の形態であるか、又は吸入剤用の超微粒粉末であり得、単独で使われるか又はラクトースのような非活性担体と組み合わせて使われる。この場合、製剤の粒子は、５０ミクロン未満、具体的に１０ミクロン未満の直径を有する。

本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分は局部又は局所適用、例えば皮膚及び粘膜に局所適用、例えば目に局所適用のために、ゲル、クリーム及びローションに製剤化されることができ、目に適用又は嚢内又は髄腔内適用のために製剤化されることができる。局所投与は経皮送逹のために考慮され、また眼又は粘膜投与、又は吸入療法用として考慮される。他の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて又は単独で抗体の点鼻液も投与されることができる。

イオン泳動及び電気泳動装置を含む経皮パッチが当業者に公知となっており、抗体投与用として使われることができる。例えば、このようなパッチは、アメリカ特許第６，２６７，９８３号、同第６，２６１，５９５号、同第６，２５６，５３３号、同第６，１６７，３０１号、同第６，０２４，９７５号、同第６，０１０，７１５号、同第５，９８５，３１７号、同第５，９８３，１３４号、同第５，９４８，４３３号及び同第５，８６０，９５７号に開示されている。

特定の具体例において、本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分を含む医薬組成物は凍結乾燥された粉末であり、これは、溶液、エマルジョン及び他の混合物として投与用に再構成できる。また、凍結乾燥された粉末は固体又はゲルとして復元及び製剤化できる。凍結乾燥された粉末は、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、又はその薬学的に許容される誘導体を適切な溶媒に溶解することにより製造される。いくつかの具体例において、凍結乾燥された粉末は滅菌状態である。溶媒は粉末又は粉末から製造された再構成溶液の安全性又は他の薬理学的成分を改善する賦形剤を含むことができる。使用可能な賦形剤は、これに制限されるものではないが、デキストロース、ソルビトール、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロース又は他の適切な製剤を含む。また、溶媒は、一具体例において、ｐＨが弱中性のバッファー、例えばクエン酸塩、リン酸ナトリウム又はカリウムリン又は当業者に知られた他のバッファーを含むことができる。溶液を後続の滅菌濾過した後、当業者に公知となった標準条件下の凍結乾燥は所望の製剤を提供する。一具体例において、得られた溶液は凍結乾燥用バイアルに配分されることができる。各バイアルは化合物の単回投与量又は複数回投与量を含むことができる。凍結乾燥された粉末は適切な条件の下で、例えば約４℃〜室温で保管されることができる。

注射用水によるこの凍結乾燥された粉末の再構成は非経口投与に使うための用製剤を提供する。再構成のために、凍結乾燥された粉末が滅菌水又は他の適切な担体に添加される。正確な量は選択された化合物による。このような量は経験で決定されることができる。

また、本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又は免疫抱合体及びこの明細書に開示される他の組成物は、治療対象の特定の組職、受容体、又は他の身体領域に標的化するように製剤化されることができる。多くの標的化方法が当業者によく公知となっている。このような全ての標的化方法を本組成物に使うことが考慮される。標的化方法の非制限的例は、例えばアメリカ特許第６，３１６，６５２号、同第６，２７４，５５２号、同第６，２７１，３５９号、同第６，２５３，８７２号、同第６，１３９，８６５号、同第６，１３１，５７０号、同第６，１２０，７５１号、同第６，０７１，４９５号、同第６，０６０，０８２号、同第６，０４８，７３６号、同第６，０３９，９７５号、同第６，００４，５３４号、同第５，９８５，３０７号、同第５，９７２，３６６号、同第５，９００，２５２号、同第５，８４０，６７４号、同第５，７５９，５４２号及び第５，７０９，８７４号を参考する。特定の具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は緑内障を治療し、及び／又は緑内障に関連した炎症を減少、緩和又は阻害するために使われることができる。

生体内投与に使われる組成物は滅菌されることができる。例えば、滅菌濾過膜を用いる濾過によって易しく滅菌されることができる。

ＶＩＩＩ．キット
本明細書に開示される１個以上の抗体、又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又はその免疫抱合体を含むキットが開示される。特定の具体例において、本明細書に開示される１個以上の抗体又はその抗原結合部分のような医薬組成物の成分の１種以上で満たされた１個以上の容器、選択的な使用指示を含む薬学的パック又はキットがに開示される。いくつかの具体例において、キットはこの明細書に開示される医薬組成物及び任意の予防又は治療剤を含む。

（実施例）
以下の実施例に基づいて次の実験方法を詳細に説明する。

（実施例１：ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現及び精製）
組み換えヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を後述するように生成して精製し、この精製されたタンパク質を結合親和性分析に基づく抗体スクリーニング分析に使った。まず、ＦＡＭ１９Ａ５遺伝子を発現する含むＬＰＳ−ｈＴプラスミドをバクテリアに形質転換してタンパク質過剰発現を誘導した。生成されたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質をＮｉ−ＮＴＡ親和性クロマトグラフィー（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って精製した。イミダゾールを徐々に高い濃度にしてＮｉカラムからＨｉｓタグされたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を除去した。溶液中のタンパク質発現をクマシーブリリアントブルー（ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢｒｉｌｌｉａｎｔＢｌｕｅ）Ｒ−２５０染料を使って測定した。ＦＡＭ１９Ａ５イミダゾール含有溶液のみ取り、ＰＢＳを使ってＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を濃縮した。濃縮が完了したとき、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の純度及び濃度をウェスタンブロッティング分析で測定した。ついで、濃縮されたタンパク質を使ってＦＡＭ１９Ａ５特異的抗体に対してスクリーニングした。

（実施例２：抗体ライブラリＦＡＭ１９Ａ５の生成）
１．免疫化
ＦＡＭ１９Ａ５ペプチドを合成し、Ｃ末端の端部でＫＬＨ（Ａｎｙｇｅｎ）にコンジュゲートしてニワトリの免疫化のための抗原として使った。合成ペプチドＫＬＨコンジュゲート（ＫＬＨ−ＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：ＸＸ）５０μｇを７５０μＬリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に混合し、３０分間３７℃でインキュベーションした。その後、２％スクアレン内毒素ＭＰＬ（モノホスホリレート脂質Ａ種）で毒素を除去し、油中水エマルジョンアジュバント（ＲＩＢＩ＋ＭＰＬ＋ＴＤＭ＋ＣＷＳアジュバント、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ，ＵＳＡ）を含むＴＤＷ及びＣＷＳの細胞壁成分のミコバクテリアをエマルジョン化し、これを後で３匹のニワトリに皮下注射した。ニワトリは免疫化の間におよそ２−３週の間隔で総３回免疫化した。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を過剰発現したＨＥＫ２９３Ｔ細胞の細胞溶解物を用い、免疫化したニワトリから得られた抗体の力価を免疫ブロッティングで測定した。３回免疫化されたニワトリの血清を１次抗体として使った。使用された２次抗体はＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）（兎抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）−ＨＲＰ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉａ，ＭＡ，ＵＳＡ）にコンジュゲートされた抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）ポリクローナル抗体であった。

２．免疫化したニワトリから単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）ライブラリの製造
ＴＲＩ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏ−ｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使い、前述した免疫化したニワトリの脾臓、骨髄及び滑液嚢からＲＮＡを抽出した。Ｏｌｉｇｏ−ｄＴプライマーとＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ^ＴＭＩＩＩＦｉｒｓｔ−ＳｔｒａｎｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓＳｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使って第１本ｃＤＮＡを合成した。ニワトリの免疫システムから得られたｃＤＮＡに対し、ＥｘｐａｎｄＨｉｇｈＦｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲＳｙｓｔｅｍ（ＲｏｃｈｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｙｓｔｅｍｓ，ＩＮ，ＵＳＡ）を使って単鎖可変領域ライブラリを生成した。各反応で、ｃＤＮＡ１μＬ、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０×反応バッファー溶液１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭｄＮＴＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）、及びＴａｑＤＮＡポリメラーゼ０．５８μＬを水と混合した。最終体積は１００μＬであった。ＰＣＲ反応を次の条件の下で遂行した：３０サイクル、（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で９０秒、その後７２℃で１０分間の最終拡張。約３５０ｂｐの長さを有する断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後、ＱＩＡＧＥＮＧｅｌＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使ってヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ２６０ｎｍで判読して定量した（１ユニットＯＤ＝５０μｇ／ｍＬ）。

２次ＰＣＲからの２個のＶＨ及びＶＬ第１生成物を重畳拡張ＰＣＲ（ＯｖｅｒｌａｐｅｘｔｅｎｓｉｏｎＰＣＲ）によって無作為に連結した。各ＰＣＲ反応物を１００ｎｇの精製されたＶＬ及びＶＨ生成物、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０×反応バッファー１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭｄＮＴＰ、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ０．５μＬ及び水と１００μＬの最終体積で混合した。ＰＣＲを次の条件の下で遂行した：２５サイクル、（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で２分、その後７２℃で１０分間の最終拡張。約７００ｂｐの長さを有する単鎖可変領域断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後、ＱＩＡＧＥＮＧｅｌＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ）を使ってヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ２６０ｎｍで判読して定量した（１ユニットＯＤ＝５００．５μｇ／ｍＬ）。

３．ライブラリ、ライゲーション（ｌｉｇａｔｉｏｎ）及び形質転換
ＰＣＲ生成物のｓｃＦｖ断片とベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳ（ＴｈｅＳｃｒｉｐｐｓＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣＡ、ＵＳＡ）をＳｆｉＩ制限酵素で切断（ｄｉｇｅｓｔ）した。精製された重畳ＰＣＴ生成物１００．５μｇをＳｆｉＩ３０ユニット（１６ユニット当たりμｇＤＮＡ、ＲｏｃｈｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｙｓｔｅｍｓ，Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ，ＣＡ，ＵＳＡ）、１０×反応バッファー２０μＬ及び水と最終体積２００μＬで混合した。ｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳベクター２０μｇをＳｆｉＩ１２０ユニット（６ユニット当たりμｇＤＮＡ）、１０×反応バッファー２０μＬ及び水と最終体積２００μＬで混合した。混合物を８時間の間に５０℃で切断した。その後、ｓｃＦｖ断片（約７００ｂｐ）及びベクター（約３４００ｂｐ）を含む切断された生成物を１％アガロースゲル上にローディングし、ゲル抽出キットＩＩＱＩＡＧＥＮ（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って精製した。ＳｆｉＩ制限されたｐＣｏｍｂ３Ｘベクター１４００ｎｇと切断されたｓｃＦｖ断片７００ｎｇを５×リガーゼバッファー、１０μＬのＴ４ＤＮＡリガーゼ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び水と最終体積２００μＬで混合した。混合物を１６時間の間に１６℃でインキュベーションしてライゲーションを遂行した。

エタノールで沈澱した後、ＤＮＡペレットを水１５μＬに溶解した。ライブラリを生成するために、ライゲーションサンプルを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）菌株ＥＲ２７３８（ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＢｉｏｌａｂｓＩｎｃ．，Ｈｉｔｃｈｉｎ，Ｈｅｒｔｆｏｒｄｓｈｉｎｅ，ＳＧ４ＯＴＹ，Ｅｎｇｌａｎｄ，ＵＫ）にバイブレーター遺伝子（遺伝子パルサー：Ｂｉｏ−ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って電気穿孔によって形質転換した。細胞をスーパーブロス（ＳＢ）培地５ｍＬと混合し、３７℃で１時間の間に２５０ｒｐｍで撹拌しながらインキュベーションした。その後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン３μＬをＳＢ培地１０ｍＬに添加した。ライブラリサイズを決定するために、培養物サンプル０．１μＬ、１μＬ及び１０μＬを５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含むルリアブロス（ＬＢ）寒天板上に擦って塗った。１時間の撹拌後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン４．５μＬをＬＢ培養物に添加し、さらに１時間撹拌した。その後、水中のＶＣＭ１３ヘルパーファージ２ｍＬ（＞１０^１１ｃｆｕ／ｍＬ）を１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン９２．５μＬを含む予熱されたＬＢ（１８３ｍＬ）とともにＬＢ培地に添加した。この混合物をさらに２時間の間に３７℃で２５０ｒｐｍで撹拌した。その後、カナマイシン２８０μＬ（５０ｍｇ／ｍＬ）を培養物に添加し、３７℃でひと晩撹拌した。翌日、バクテリアペレットを高速遠心分離機（Ｂｅｃｋｍａｎ、ＪＡ−１０ローター）を使い、４℃、３，０００ｇで遠心分離した。その後、バクテリアペレットを使ってファージミドＤＮＡを抽出し、上澄み液は滅菌遠心分離瓶に移した。その後、ポリエチレングリコール−８０００（ＰＥＧ−８０００、Ｓｉｇｍａ）８ｇと塩化ナトリウム６ｇを上澄み液に添加した後、氷内で３０分間維持した。その後、上澄み液を４℃、１５，０００ｇで１５分間遠心分離した。ついで、上澄み液を捨て、ファージペレットを緩衝食塩水（ＴＢＳ）で懸濁した。

（実施例３：免疫化された抗原に対するライブラリパニング（バイオパニング）（ｂｉｏ−ｐａｎｎｉｎｇ））
磁気ビード（ＤｙｎａｂｅａｄｓＭ−２７０Ｅｐｏｘｙ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使ってバイオパニングを遂行した。およそ１×１０^７ビードを室温で２０時間の間にタンパク質とともに回転撹拌することにより、組み換えＦＡＭ１９Ａ５タンパク質５μｇでコーティングした。コーティングが完了すれば、ビードをリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で４回洗浄し、室温で３％ＢＳＡを含むＰＢＳ内で１時間遮断した。その後、コーティングされたビードを前述したファージディスプレイされたｓｃＦｖとともに室温で２時間培養した。抗原コーティングされたビードに結合されなかったファージを除去するために、ビードを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳで洗浄した。その後、結合されたファージを５０μＬの０．１Ｍグリシン／塩化水素（０．１Ｍグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．２）で溶出し、塩化水素とともに２ＭＴｒｉｓ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ９．１）３μＬで中和させた。このファージ含有上澄み液を使って大腸菌ＥＲ２７３８細胞を感染させ、ＶＣＳＭ１３ヘルパーファージを使用してひと晩増幅して救済した。また、５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含むＬＢ寒天板上にファージ感染された培養物をブロッティングすることにより、ファージ感染された培養物からのファージ力価によって投入（インプット）及び生成（アウトプット）を決定した。翌日、ＰＥＧ−８０００とＮａＣｌを使ってファージを沈澱させ、ついでこれをバイオパニングに使った。バイオパニングは前記過程を繰り返して総５回遂行した。各増幅で、ファージをすクリーニンし、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する高親和性に対して選択した。

（実施例４：ファージＥＬＩＳＡによるクローンの選択）
バイオパニングから選択されたクローンを分析するために、ファージディスプレイされたｓｃＦｖから個別クローンを無作為に選択し、ＥＬＩＳＡを使ってクローンがＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質に結合することを確認した。ＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質を０．１ＭＮａＨＣＯ３バッファーに希釈し、タンパク質をウェル当たり１００ｎｇ使い、１６時間の間に４℃で９６ウェルマイクロタイタープレートをコーティングした。翌日、プレートを１時間の間に３７℃で３％ＢＳＡ／ＰＢＳで遮断した。その後、ファージ上澄み液を６％ＢＳＡ／ＰＢＳと混合し、３７℃で２時間培養した。その後、上澄み液を含むプレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳで洗浄した。ＨＲＰコンジュゲートされたＭ１３抗体（ａ−Ｍ１３−ＨＲＰ，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）を１／５０００に希釈した。希釈された抗体５０μＬをプレートに添加し、３７℃で１時間インキュベーションした。インキュベーション及び洗浄の後、色展開のために、プレートに０．０５Ｍクエン酸緩衝液、１μｇ／ｍＬの２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリル−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ，Ａｍｒｅｓｃｏ，Ｓｏｌｏｎ，ＯＨ，ＵＳＡ）、及び０．１％Ｈ_２Ｏ_２を添加した。各ウェルに対する吸光度を４０５ｎｍで測定した。

総合すれば、ＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質に結合するとともに高吸光度を示す２４個クローンを分析し、２４個のクローンから独特の配列を有する１３個のｓｃＦｖクローンを得た。クローンの追加選択後、最高の親和性を有するクローン１−６５、２−１３及び３−２を得た。

（実施例５：抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体の生成）
１．哺乳類発現ベクターに抗ＦＡＭ１９Ａ５ｓｃＦｖのサブクローニング
ＦＡＭ１９Ａ５ｓｃＦｖ遺伝子配列で、ヒトＣκ遺伝子を軽鎖可変領域に連結し、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３遺伝子のヒト兔疫グロブリンアイソタイプＩｇＧ２／４を重鎖可変領域に連結した。制限部位（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ，ＵＳＡ）を添加することにより、各軽鎖と各重鎖を有する抗体を合成した。クローニングを容易にするために、合成された遺伝子を変形された制限部位を有する哺乳類細胞発現ベクターに挿入した。まず、軽鎖遺伝子をＨｉｎｄＩＩＩ及びＸｂａＩ（ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＢｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を使ってベクターに挿入した後、ＮｈｅＩ及びＢａｍＨＩ（ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＢｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を使ってベクターに重鎖遺伝子を添加した。

２．抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の精製
抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体を発現及び精製するために、哺乳類細胞トランスフェクション及び過剰発現注射システムを使った。細胞培養体積の１／１０に相応する１５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ、Ｍｅｒｃｋ）内で２μｇ／ｍＬの哺乳類発現ベクターと４μｇのポリエチレンイミン（ＰＥＩ，Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）を混合した。混合物を室温で１５分間放置した。混合物をＨＥＫ２９３Ｆ細胞（２×１０^６細胞／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加えた後、これを７％ＣＯ_２及び３７℃で６日間１３５ｒｐｍの撹拌条件で１００Ｕ／ｍＬペニシリン及びストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含むＦｒｅｅｓｔｙｌｅ^ＴＭ２９３発現培地でインキュベーションした。細胞培養上澄み液から発現した抗ＦＡＭ１９Ａ５ＩｇＧ２／４抗体を精製するために、タンパク質Ａビード（ＲｅｐｌｉＧｅｎ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）親和性ゲルクロマトグラフィーを使った。タンパク質Ａクロマトグラフィー精製された抗体は４−１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ勾配ゲル電気泳動上で展開された。タンパク質の大きさ及び収率をクマシーブリリアントブルー染色で確認した。

（実施例６：抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の眼内圧の評価）
生体内ＦＡＭ１９Ａ５活性の中和が緑内障に主に関連した上昇した眼内圧を緩和することができるかを評価するために、緑内障の兎モデルを使った。簡単に言えば、ニュージーランド白兎（雄性、体重２−２．５ｋｇ）（Hanlim Experiment Animal Research Institute, Kyonggi-Do, South Korea）をＺｏｌｅｔｉｌ５０（ＶＩＲＢＡＣ、Ｆｒａｎｃｅ）とキシラジン（Ｒｏｍｐｕｎ、ＢａｙｅｒＡＧ、Ｇｅｒｍａｎｙ）で痲酔させた。その後、眼窩から兎の眼を持ち上げて眼窩を露出させた。各眼に対し、露出された眼の上下に位置する上強膜静脈を、強膜及び他の隣接した血管に影響せずに上強膜静脈を閉塞するのに十分な深みに電気焼灼器で焼灼した。

緑内障誘導（第０日）後およそ２週目に、兎は正常ヒトＩｇＧ兔疫グロブリン（対照群）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を硝子体内注射を介して各眼に投与された（５０μＬの体積で１００μｇ／眼）。動物は総４週間週１回抗体が投与された。ナイーブ（緑内障がなくて抗体注射を受けなかった）兎を追加対照群として使った。緑内障誘導後０日目、１４日目及び２８日目にＴｏｎｏＶｅｔ（登録商標）を使って眼内圧を測定した。図１に示したように、測定された全時間で、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は兎の眼内圧に効果がなかった。ＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された兎は、ナイーブ動物に比べ、同様に上昇した眼内圧を示した。

（実施例７：抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の網膜電位差の評価）
網膜電図写真（ＥＲＧ）は、光受容器（桿体及び錐体）、内部網膜細胞（双極及び無軸索細胞）及び神経節細胞を含む網膜の多様な細胞によって発生した電気活性を測定する診断試験である。一般に、明るい光がきらめくとき、元気な目のＥＲＧは最初には陰性波（“Ａ波”）があり、ついでＢ波が従う複合波形を示すことになり、上昇は次第に急になり、ピークはもっと速くなる。このとき、“振動電位”（ＯＰ）と知られた重畳した高周波振動が現れる。Ａ波は桿体の総合的反応によって統制され、暗順応のＢ波は桿体双極ニューロンの反応によって統制される。ＯＰは双極細胞、無軸索細胞及び神経節細胞が相互作用する内網状層内で発生する（Wilsey et al., Curr Opin Ophthalmol 27(2): 118-124 (2016)）。この値を評価することにより、網膜内の相異なる細胞の健康を評価することができる。

実施例６で詳細に説明したように、ニュージーランド白兎に緑内障を誘導し、動物の各眼にヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を注射した。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の最初投与後４週目に次の値を測定して動物の眼での電気活性（すなわち、“網膜電位差”）を評価した：（ｉ）Ａ波に対する反応時間（時間対ピーク振幅）（“Ａ−タイム”）及び（ｉｉ）振動電位。

図２に示したように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された動物において、Ａ−タイムは対照群抗体が投与された動物と比較するとき、著しい改善があった（左側パネル）。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された動物に対するＡ−タイムはナイーブ（元気な）動物のＡ−タイムにもっと似ていた。同様に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与は、緑内障誘導された兎で測定された振動電位を有意に改善した（右側パネル）。ＩｇＧ対照群抗体が投与された動物では検出可能な振動電位が測定されなかった。一方、ＦＡＭ１９Ａ５特異的抗体が投与された動物において振動電位はナイーブ動物のそれと類似していた。総合すれば、この結果は緑内障誘導された兎に抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を投与すれば緑内障に関連した網膜損傷を改善することができることを示唆する。

（実施例８：抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与後の網膜神経節細胞頻度の評価）
前記ＥＲＧ分析からの結果を確認するために、実施例６で説明したようにニュージーランド白兎に緑内障をまた誘導し、動物の各眼にヒトＩｇＧ対照群抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を注射した。その後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の最初投与後４週目に動物を殺した。各動物から両眼を収去し、１０％中性緩衝されたホルマリン溶液におよそ２４時間固定した。その後、眼をＰＢＳで洗浄した後、角膜、水晶体及び硝子体膜を分離した。その後、眼をコップ状にし、５０％メタノールに３０分間固定した。その後、眼を滅菌蒸溜水で洗浄し、各眼を１２ウェルプレートのウェルに入れた。０．１％エチジウムブロマイドのおよそ０．５ｍＬを各ウェルに添加し、この溶液で３０分間の間に眼をインキュベーションした。インキュベーションの後、眼を滅菌蒸溜水で洗浄し、６０ｍｍのトレイ上に装着させた。蛍光顕微鏡を使って網膜神経節細胞層の細胞数を測定した。

図３ａ及び図３ｂに示したように、ＩｇＧ対照群抗体が投与された緑内障誘導された兎で、網膜神経節細胞の数はナイーブ対照群の兎の細胞数より有意に低かった（絶対値及び網膜神経節細胞層の総細胞のパーセントの両方で）。しかし、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された動物では、網膜神経節細胞層で観察された網膜神経節細胞の数が著しく増加した。このような結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が緑内障で観察された網膜神経節細胞の消失を減少させ、内網状層と網膜神経細胞の神経連結部を保護することができることを示唆する。

（実施例９：抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の生体内投与の抗炎症効果）
緑内障の正確な原因はいまだ充分に明かされなかったが、動物研究は緑内障に関連した構造損傷（例えば、網膜神経節細胞の消失）と炎症の強い連関性を確認した（Tezel et al., Invest Ophthalmol Vis Sci 42: 1787-1794 (2001); Wang et al., Invest Ophthalmol Vis Sci 49: 1916-1923 (2008)）。

実施例３で観察された増加した網膜神経節細胞頻度が抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗炎特性によるものであるかを評価するために、前記実施例で説明したようにニュージーランド白兎に緑内障を誘導した。緑内障誘導後約２週目に、動物は硝子体内注射を介して各眼にヒトＩｇＧ（対照群）又はＦＡＭ１９Ａ５特異的抗体１００μｇが投与された。動物は総４週間毎週１回抗体が投与された。最後の抗体投与の後、兎を殺し、眼を節制し、４％パラホルムアルデヒド（ｐＨ７．４）に固定した。眼をＯＣＴ低温保持装置切片化媒質で包埋し、準備となるまで−８０℃で保管した。準備が完了すれば、眼を５μｍ厚さの切片に切断した後、これを染色のためにガラススライド上に装着した。

小膠細胞の活性化時に特異的に発現するカルシウム結合タンパク質であるＩｂａ−１に対して染色することによって抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗炎特性を評価した（Bosco et al., J Comp Neurol 519(4): 599-620 (2011)）。簡単に言えば、パラフィン除去後、組職切片を１０％正常ウマ血清（Ｖｅｃｔｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃａｔ＃Ｓ−２０００，Ｌｏｔ＃ＺＣ０６２１）でおよそ１時間遮断した。その後、組職切片を０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００と３％正常ウマ血清を含むバッファー（“希釈バッファー”）中に１：２５０濃度の兎抗Ｉｂａ−１抗体（Ｗａｋｏ，Ｃａｔ＃０１９−１９７４１，Ｌｏｔ＃ＬＫＧ５７３２）（“一次抗体”）で４℃でひと晩染色した。翌日の朝に組職切片を洗浄し、希釈バッファー中に１：５００濃度でバイオチン化ヤギ抗兎ＩｇＧ（Ｖｅｃｔｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃａｔ＃ＢＡ−１０００，Ｌｏｔ＃ＺＢ０３１８）でおよそ１時間染色した。その後、組職切片を洗浄し、さらに１時間の間にアビジン−バイオチンペルオキシダーゼ複合溶液（Ｖｅｃｔｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃａｔ＃６２００）で処理した。その後、組職切片を洗浄し、ＤＡＢ基質溶液で処理した（ＤＡＢバッファー１ｍＬごとにＤＡＢクロモゲン１滴）（Ｖｅｃｔｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃａｔ＃ＳＫ−４１００，Ｌｏｔ＃ＺＣ１２１４）。所望の色強度が達成されれば（およそ１分）、組職切片を洗浄し、明視野光顕微鏡で分析した。

図４に示したように、ナイーブ動物に比べ、緑内障誘導された動物（ＩｇＧ対照群グループ及び抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体グループの両方）は視神経頭領域内で有意に高い水準のＩｂａ−１発現を示した。しかし、２個の抗体治療群のうち、ＦＡＭ１９Ａ５抗体治療された動物はＩｇＧ対照群抗体が投与された動物よりＩｂａ−１陽性染色が有意に少なかった。この結果は、ＦＡＭ１９Ａ５抗体が視神経頭内での小膠細胞の炎症媒介活性化を抑制することによって緑内障を治療することを示唆する。

概要及び要約部分を含む詳細な説明部分は請求範囲を解釈するために使用されるようにすることが認められなければならない。概要及び要約部分は本発明者（ら）によって考察されたように、本発明の全部ではないが、１個以上の例示的な具体例を提示することができ、よって本発明と添付の請求項を決して制限しようとするものではない。

本発明は明示された機能と及びその関係の実施を例示する機能的構成要素の助けにより以上で開示された。この機能的構成要素の境界は説明の便宜のためにこの明細書で任意に定義された。明示された機能とこの関係が適切に遂行される限り、代替の境界も定義されることができる。

特定の具体例についての前述した説明は本発明の一般的な性質を充分に明らかにするものであり、第３者は当該分野の知識を適用することにより、本発明の一般的な概念から逸脱しなくて過度な実験なしに、このような特定の具体例を多様な用途に合わせて易しく変形及び／又は改造することができる。よって、このような改造及び変形はこの明細書に提示された教示及び指針に基づいて開示された具体例の等価物の意味及び範囲内にあるであろう。本明細書で使用される文句又は用語は制限するためのものではなくて説明のためのものであることが理解されなければならなく、本明細書の用語又は文句は教示及び指針を考慮して当業者によって解釈されなければならない。

本発明の範囲及び領域は前述された例示の具体例のいずれかによって制限されてはいけなく、請求項及びその等価物によってのみ限定されなければならない。

本明細書で引用された全ての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト及び受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチドとポリペプチド配列の両者を含み）はそれぞれの個別刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト又は受託番号／データベース配列が参考として含まれるように具体的にかつ個別的に指示されたものと同じ程度に全ての目的のためにその全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。

このＰＣＴ出願は２０１７年６月２７日付で提出されたアメリカ仮出願第６２／５２５，６３９号及び２０１７年１１月７日付で提出された同第６２／５８２，８８９号の優先権の利益を主張し、その全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。

元気な（すなわち、緑内障誘導がない）動物（“ナイーブ”）（ｎａｉｖｅ）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）で治療された緑内障誘導動物の眼内圧の比較を示す。眼内圧は、緑内障誘導後第０日目（“Ｄ０”）、第１４日目（“Ｄ１４”）、及び第２８日目（“Ｄ２８”）に測定された。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。元気な動物（“ナイーブ”）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）で治療された緑内障誘導動物の網膜電図写真（ＥＲＧ）測定結果の比較を示す。緑内障誘導後２８日目に相異なる動物の網膜電位差がＡ−タイム（左側パネル）及び振動電位（ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｙｐｏｔｅｎｔｉａｌ）等級（右側パネル）を分析することによって評価した。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。棒上の“＊”はＩｇＧ１治療された動物と比較して統計的に有意な差（ｐ＜０．００１）を示す。元気な動物（“ナイーブ”）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（“Ｇ４”）抗体で治療された緑内障誘導動物の網膜神経節細胞層で観察された網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）の数の比較を示す。図３ａはＲＧＣ細胞計数を絶対値（左側パネル）で、かつ観察された細胞の総数のパーセント（右側パネル）で示す。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される。棒上の“＊”はＩｇＧ１治療された動物と比較して統計的に有意な差（ｐ＜０．０５）を示す。元気な動物（“ナイーブ”）に対するヒトＩｇＧ１（“ｈＩｇＧ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５（“Ｇ４”）抗体で治療された緑内障誘導動物の網膜神経節細胞層で観察された網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）の数の比較を示す。図３ｂは各グループの代表動物から得た網膜神経節細胞層の蛍光イメージ（１００×倍率）を示す。上強膜静脈焼灼術によって誘導された緑内障の兎モデルにおけるＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗炎症効果を示す。炎症に対するマーカーとして、緑内障誘導後２８日目（動物は毎週間隔で総４回抗体が投与される）に、ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“緑内障＋ＦＡＭ１９Ａ５Ａｂ”）又はヒトＩｇＧ１対照群抗体（“緑内障＋ヒトＩｇＧ”）で治療された緑内障誘導兎、又は全然治療されなかった兎（“ナイーブ”）（元気な動物対照群）でのＩｂａ−１発現が評価された。上部パネルは各グループから得た代表的な免疫組職化学イメージを示す。下部パネルは上部パネルのボックス領域をより高い倍率で示す。

Claims

対象の緑内障を治療するためのＦＡＭ１９Ａ５（ｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ１９、ｍｅｍｂｅｒＡ５）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）。
対象の緑内障に関連した炎症を減少させるか、緩和させるか、又は阻害するためのＦＡＭ１９Ａ５（ｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ１９、ｍｅｍｂｅｒＡ５）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）。
緑内障は、開放隅角緑内障、閉鎖隅角緑内障、正常眼圧緑内障（“ＮＴＧ”）、先天性緑内障、二次性緑内障、色素性緑内障、偽落屑緑内障、外傷緑内障、新生血管緑内障、虹彩角膜内皮症侯群、及びブドウ膜炎緑内障からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１又は２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
緑内障は、視神経損傷、網膜神経節細胞（“ＲＧＣ”）消失、高い眼内圧（“ＩＯＰ”）、損傷された血液網膜関門、及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での小膠細胞活性水準の増加に関連することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
緑内障は、視神経頭に対する機械的損傷及び／又は対象の網膜及び／又は視神経内での炎症水準の増加によって引き起こされることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
拮抗剤は、（ｉ）対象の網膜神経細胞変性の開示を遅延させるか；（ｉｉ）対象の網膜及び／又は視神経内での炎症の水準を減少させるか；（ｉｉｉ）対象の網膜の神経節細胞層内での網膜神経節細胞の頻度を増加させるか又は網膜神経節細胞の消失を減少させるか又は網膜神経節細胞の数を回復させるか；又は（ｉｖ）これらの任意の組合せを行うことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ、又はそれを含むベクターであることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）であることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２３、２４及び２５を含むことを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２６、２７及び２８を含むことを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２９、３０及び３１を含むことを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱＩＤＮＯｓ：３２、３３及び３４を含むことを特徴とする、請求項８に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ここで重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含むことを特徴とする、請求項８〜１２のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項８〜１３のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、硝子体内に投与されることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
対象はヒトであることを特徴とする、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。