JP2020512448A

JP2020512448A - ポリ（オキサゾリン）安定化剤を含有する有機ポリマー粒子および有機ポリマー粒子の安定化のためのポリ（オキサゾリン）の使用

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Publication number: JP2020512448A
Application number: JP2019550744A
Authority: JP
Inventors: ライスケ・マイケ・ニコレ; トレーガー・アンヤ; シューベルト・ウルリヒ・ジグマー
Original assignee: フリードリヒ−シラー−ユニバーシタットイエナ
Priority date: 2017-03-14
Filing date: 2018-03-12
Publication date: 2020-04-23
Anticipated expiration: 2038-03-12
Also published as: WO2018166651A1; EP3595804A1; JP7193470B2; CA3061034A1; US20200122106A1; DE102017002454A1; CN110545904A; US11806355B2

Abstract

水溶性ポリ（オキサゾリン）と、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される有機ポリマー粒子とを含む組成物を記載する。水溶性ポリ（オキサゾリン）は、ポリマー粒子のための安定化剤として作用し、特に有利なのは、ポリマー水分散液のフリーズドライの際の安定化剤として用い得ることである。

Description

本発明は、ポリマー分散液、好ましくはナノ粒子状の粒子でできたポリマー分散液の製造および加工の分野ならびにポリマー分散液の加工によって得られるポリマー粉末に関する。本発明はとりわけ、ポリ（オキサゾリン）によって安定化された有機ポリマー粒子の製造および加工に関し、この有機ポリマー粒子は、好ましくは液体水中でもしくは水と混合可能な液体中で分散して存在しているか、またはこの液体からの液体除去によって得られた。これは、フリーズドライ（凍結乾燥）によって行えることが好ましい。

ポリマー分散液を、界面活性剤または保護コロイドのような界面活性物質によって安定化させることは公知である。ポリマー分散液は、選択された重合法、例えば乳化重合もしくは懸濁重合により、モノマーから直接的に生成することができ、または水および／もしくは水と混合可能な液体のような分散剤中でのポリマーの分散によっても生成することができる。このいわゆる二次分散液を製造するために、分散媒中のポリマー粒子が得られる。これは、例えば水添加によるポリマー溶液の沈殿によって、または転相が起こるまでのポリマー中での水の漸進的な分散によって、またはエネルギー入力、例えば超音波処理による溶解したポリマーの分散によって行うことができる。

従来技術からは、ポリマー粒子を製造する際、ポリマー粒子の安定化のために様々な補助物質を用い得ることが知られている。これに関し、このポリマー粒子の安定化を以下の領域に区分することができる。
ｉ）ポリマー分散液の調製および精製中のポリマー粒子の安定化（安定化補助物質は、しばしば「サーファクタント」または「界面活性剤」と呼ばれる）、
ｉｉ）ポリマー分散液の凍結乾燥および貯蔵中のポリマー粒子の安定化（安定化補助物質は、しばしば「凍結防止剤」と呼ばれる）、ならびに
ｉｉｉ）分散媒、例えば水性系の中で使用中のポリマー粒子の安定化。

ポリマー分散液の調製および精製中のポリマー粒子の安定化に関しては、以下の刊行物に言及することができる。

Ｃ．ＧｏｍｅｓらおよびＨ．Ｍｕｒａｋａｍｉらは、ポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）ナノ粒子を安定化するために、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）を利用した。それ故に製造中の粒子の安定化は既に、安定化のためにポリ（オキサゾリン）は用いていない。加えてＰＶＡは溶血特性を有しており、その割合を、生物に適用する前に強く減らさなければならない（Ｊ．ＦｏｏｄＳｃｉ．２０１１、７６、１６〜２４頁、Ｇｏｍｅｓ，Ｃ．、Ｍｏｒｅｉｒａ，Ｒ．Ｇ．、Ｃａｓｔｅｌｌ−Ｐｅｒｅｚ，Ｅ．Ｐｏｌｙ（ＤＬ−ｌａｃｔｉｄｅ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ）（ＰＬＧＡ）Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｉｔｈｅｎｔｒａｐｐｅｄｔｒａｎｓ−ｃｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅａｎｄｅｕｇｅｎｏｌｆｏｒａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｄｅｌｉｖｅｒｙａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（非特許文献１）およびＩｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１９９９、１８７、１４３〜１５２頁、Ｍｕｒａｋａｍｉ，Ｈ．、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｍ．、Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｈ．Ｋａｗａｓｈｉｍａ，Ｙ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙ（ＤＬ−ｌａｃｔｉｄｅ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ）ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｂｙｍｏｄｉｆｉｅｄｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｄｉｆｆｕｓｉｏｎｍｅｔｈｏｄ（非特許文献２））。

ＷＯ２０１５／２８６８５Ａ１（特許文献１）では、ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）を、インドメタシンのための安定化剤として、この物質の沈殿中に利用しており、この場合、ポリマー粒子は使用していない。ポリ（オキサゾリン）の利用は、結果として生じるインドメタシン粒子が、＜５００ｎｍのサイズ、および水または媒体中でのより良い溶解度を有すること、ならびにこの粒子を再分散し得ることを保証する。ポリ（オキサゾリン）によるポリマー粒子の安定化は記載されていない。

Ｃ．Ｇｉａｒｄｉらは、脂質・ポリ（オキサゾリン）コポリマーを、それからミセルを形成するために利用している。この場合、まずは脂質マクロ開始剤が製造され、この開始剤をもとに２−メチル−２−オキサゾリンのカチオン開環重合が行われた。ポリ（２−オキサゾリン）の鎖長を変化させた一連の様々なコポリマーが製造された。その後、合成したコポリマーが、生じたミセルの表面安定化に関して調べられた。製造されたコポリマーは、ポリマー界面活性剤として使用するために提案された。ここでは、非水溶性ブロック（脂質）を有するどちらかといえば両親媒性のブロックコポリマーが使用された。ポリ（オキサゾリン）によるポリマー粒子の安定化は記載されていない（Ｒｅａｃｔ．Ｆｕｎｃ．Ｐｏｌｙｍ．２００９、６９、６４３〜６４９頁、Ｇｉａｒｄｉ，Ｃ．、Ｌａｐｉｎｔｅ，Ｖ．、Ｃｈａｒｎａｙ，Ｃ．、Ｒｏｂｉｎ，Ｊ．Ｎｏｎｉｏｎｉｃｐｏｌｙ（ｏｘａｚｏｌｉｎ）ｅｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓｂａｓｅｄｏｎｒｅｎｅｗａｂｌｅｓｏｕｒｃｅ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｓｕｒｆａｃｅａｎｄｂｕｌｋｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（非特許文献３））。

Ｍ．Ｍｉｙａｍｏｔｏらは、ポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）およびポリ（プロピレンオキシド）からなるブロックコポリマーを、可能な非イオン性界面活性剤としてのその適性を検査するために製造した。ポリマーの表面張力を測定し、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８と比較した。測定したコポリマーの表面活性は、親水性ポリマーの割合が上昇するにつれて減少した。ポリ（オキサゾリン）によるポリマー粒子の安定化は記載されていない（ＰｏｌｙｍｅｒＪ．、１９９２、２４、４０５〜４０９頁、Ｍｉｙａｍｏｔｏ，Ｍ．、Ａｏｉ，Ｋ．、Ｙａｍａｎａｋａ，Ｈ．、Ｓａｅｇｕｓａ，Ｔ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｃｋｃｏｐｏｌｙｍｅｒｃｏｎｓｉｔｉｎｇｏｆｐｏｌｙ（２−ｍｅｔｈｙｌ−２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）ａｎｄｐｏｌｙ（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｏｘｉｄｅ）ｂｌｏｃｋｓ．Ａｎｅｗｎｏｎｉｏｎｉｃｓｕｒｆａｃｔａｎｔ（非特許文献４））。この書類から当業者は、親水性ポリ（オキサゾリン）は本来界面活性剤として適していないと推論する。

Ｓ．ＫｏｂａｙａｓｈｉおよびＨ．Ｕｙａｍａは、非イオン性界面活性剤を製造するために、疎水性（脂肪酸）セグメントおよび親水性（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）またはポリ（２−メチル−２−オキサゾリン））セグメントからなるコポリマーを利用した。界面活性剤特性を決定するため、表面張力の測定が実施された。ここでは、非水溶性の脂肪酸ブロックを有するどちらかといえば両親媒性のブロックコポリマーが使用された。微粒子化されたポリマーの、ポリ（オキサゾリン）による安定化は記載されていない（Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ１９９１、２４、５４７３〜５４７５頁、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｓ．、Ｕｙａｍａ，Ｈ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆａｎｏｎｉｏｎｉｃｐｏｌｙｍｅｒｉｃｓｕｒｆａｃｔａｎｔｆｒｏｍ２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅｈａｖｉｎｇａｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｓｔｈｅｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｇｒｏｕｐ（非特許文献５））。

Ｚ．ＡｍｊａｄおよびＤ．Ｍｏｒｇａｎは、ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）を水溶液中のヒドロキシアパタイトの安定化のための界面活性剤として利用した。ポリマー粒子の安定化は開示されていない（ＰｈｏｓｐｈｏｒｕｓＲｅｓｅａｒｃｈＢｕｌｌｅｔｉｎ２０１１、２５、３３〜３８頁、Ａｍｊａｄ，Ｚ．；Ｍｏｒｇａｎ，Ｄ．Ｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｄｉｓｐｅｒｓａｎｔｓｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ（非特許文献６））。

ポリマー分散液の凍結乾燥および貯蔵中のポリマー粒子の安定化に関しては、以下の刊行物に言及することができる。

ＵＳ２０１４／０１５８９３１Ａ１（特許文献２）は、ポリ（２−オキサゾリン）を金属ベースのナノ粒子のための安定化剤として記載している。この場合、出来上がった金属粒子を、水溶液中に懸濁し、事情によっては凍結乾燥している。その際に使用しているポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）の記載されているモル質量（Ｍ_ｎ）は５０，０００ｇｍｏｌ^−１である。有機ポリマー粒子の安定化は開示されていない。

ＣＮ１０２５５２１４６Ｂ（特許文献３）は、リポソームドキソルビシンおよびリポソームエピルビシンの調製および貯蔵を記載している。この場合、リポソームはリン脂質から構成され、界面活性剤または凍結防止剤を含有している。この関連では凍結防止剤としてなかでもポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）が、６０％までの総含有率で提示されている。有機ポリマー粒子の安定化は開示されていない。

Ａ．Ｔ．Ｐｒｅｓｓらは、粒子に予めポリマー１μｇを添加することにより、ポリビニルアルコールを凍結乾燥中の粒子安定化のために利用した。それ故に凍結乾燥中の粒子の安定化は既に公知であるが、ここではポリビニルアルコールが凍結防止剤として用いられている（Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０１４、（５）、５５６５〜５５７８頁、Ｐｒｅｓｓ，Ａ．Ｔ．、Ｔｒａｅｇｅｒ，Ａ．、Ｐｉｅｔｓｃｈ，Ｃ．、Ｍｏｓｉｇ，Ａ．、Ｗａｇｎｅｒ，Ｍ．、Ｃｌｅｍｅｎｓ，Ｍ．Ｇ．、Ｊｂｅｉｌｙ，Ｎ．、Ｋｏｃｈ，Ｎ．、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｄｔ，Ｍ．、Ｂｅｚｉｅｒｅ，Ｎ．、Ｅｒｍｏｌａｙｅｖ，Ｖ．、Ｎｔｚｉａｃｈｒｉｓｔｏｓ，Ｖ．、Ｐｏｐｐ，Ｊ．、Ｋｅｓｓｅｌｓ，Ｍ．Ｍ．、Ｑｕａｌｍａｎｎ，Ｂ．、Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，Ｕ．Ｓ．、Ｂａｕｅｒ，Ｍ．Ｃｅｌｌｔｙｐｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｓｈｏｒｔｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡｓｂｙｄｙｅ−ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｓｅｄｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ（非特許文献７））。

Ｐ．Ｆｏｎｔｅらは、ＰＬＧＡナノ粒子を凍結乾燥するために、ＰＬＧＡナノ粒子への添加物としてトレハロース、グルコース、スクロース、フルクトース、またはソルビトールを１０ｗ／ｖ％の濃度で利用した。それ故に凍結乾燥中の粒子の安定化は既に公知であるが、凍結防止剤として、選択された炭水化物を用いている（Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、２０１４、１５、３７５３〜３７６５頁、Ｆｏｎｔｅ，Ｐ．、Ｓｏａｒｅｄ，Ｓ．、Ｓｏｕｓａ，Ｆ．、Ｃｏｓｔａ，Ａ．、Ｓｅａｂｒａ，Ｖ．、Ｒｅｉｓ，Ｓ．、Ｓａｒｍｅｎｔｏ，Ｂ．Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｓｔｕｄｙｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇｕｓｉｎｇｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓｏｎｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｉｎｓｕｌｉｎｌｏａｄｅｄｉｎｔｏＰＬＧＡｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ（非特許文献８））。

分散媒の中で使用中のポリマー粒子の安定化に関しては、従来技術について以下の刊行物に言及することができる。

Ｄ．Ｋｅｄｒａｃｋｉらは既に、ＤＮＡの共有結合のために、修飾された疎水性ポリ（２−オキサゾリン）を利用していた。これに関してはチオール・エン反応により、モノマー単位の元々の二重結合が部分的にアミノ基へと変換された。その際に生じたコポリマーを、ＤＮＡを直接的にポリマーに結合し、コポリマーの疎水性側鎖により界面活性剤の特徴を達成するために利用した。水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用および有機ポリマー粒子の安定化は開示されていない（Ａｄｖ．Ｆｕｎｃ．Ｍａｔｅｒ．２０１３、２４、１１３３〜１１３９頁、Ｋｅｄｒａｃｋｉ，Ｄ．；Ｍａｒｏｎｉ，Ｐ．；Ｓｃｈｌａａｄ，Ｈ．Ｖｅｂｅｒｔ−Ｎａｒｄｉｎ，Ｃ．Ｐｏｌｙｍｅｒ−ａｐｔａｍｅｒｈｙｂｒｉｄｅｍｕｌｓｉｏｎｔｅｍｐｌａｔｉｎｇｙｉｅｌｄｓｂｉｏｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ（非特許文献９））。

ＷＯ２０１６／０８７５９８Ａ１（特許文献４）は、優れた貯蔵安定性をもつマイクロカプセルを開示している。このマイクロカプセルは、コア材料と、ポリビニルアルコールからなる内側のシェル層およびポリ（オキサゾリン）からなる外側のシェル層とから構成されている。コア材料として非水溶性物質が挙げられ、そのなかにはポリエステルと呼ばれる化合物もある。発明の説明からは、これがポリカルボン酸とＣ_４〜Ｃ_３０−アルコールのエステルを意味しており、有機ポリマー粒子を意味していないことが分かる。つまりこの書類は、有機ポリマー粒子とポリ（オキサゾリン）の組合せを開示していない。

従来技術で説明されているポリ（オキサゾリン）界面活性剤は大部分が、親水性構造単位、詳しくはオキサゾリンの重合に由来する構造単位と、疎水性構造単位、詳しくは疎水性モノマーの重合に由来する構造単位とを包含するコポリマーからなる。分子内でのこれらの構造単位の組合せにより、疎水性ポリマー粒子との相互作用も、親水性分散媒との相互作用も保証できる。これに加えてポリ（オキサゾリン）界面活性剤は、水性媒体中で固有のナノ構造またはマイクロ構造を形成することができる。これまでは、水溶液中での低分子物質のインドメタシン粒子の製造に関してのみ、ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）ホモポリマーが安定化剤として提案されていた。

ポリマーベース粒子系、例えばＰＬＧＡは、一般的には、調製および精製の際に、ポリビニルアルコールを添加することで安定化される。しかしながらポリビニルアルコールは細胞毒性を示し、その結果、製造した粒子を事後的に、例えば遠心分離によって精製しなければならない。

界面活性剤として水溶性ポリ（オキサゾリン）、例えばポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）またはポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）を用いた、有機ポリマー粒子、例えばポリマーベースのナノまたはマイクロ粒子の安定化は、これまで説明されてこなかった。これらポリ（オキサゾリン）は親水性ポリマーである。

さらに、凍結乾燥後の表面安定化および構造保持のための試薬（凍結防止剤）の利用は基本的に公知である。これに関し、標準的に利用されている試薬は糖（例えばトレハロース、グルコース、またはサッカロース）であり、これらの糖は、約５〜１０ｖ／ｗ％の比較的多い量で、凍結乾燥前に添加される。これら糖の使用は、粒子の非常に良好な再懸濁をもたらす。ただし、細胞表面の糖輸送体（ＧＬＵＴ輸送体）との相互作用により、この粒子の吸収メカニズムが影響を受けるかまたは変化する可能性がある。そのうえ糖は吸湿性であり、生成した粒子を貯蔵する際に問題を生じさせ得る。さらに糖は浸透圧活性であり、これはしばしば生体系にとって望ましくない要素である。凍結乾燥中の有機ポリマー粒子、とりわけナノ粒子をポリビニルアルコールによって安定化することもできる。しかしながらこれは細胞毒性を上昇させ得る。

凍結防止剤としてポリ（オキサゾリン）、例えばポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）またはポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）を用いた、有機ポリマー粒子、とりわけナノまたはマイクロ粒子の安定化は、これまで説明されてこなかった。

ＷＯ２０１５／２８６８５Ａ１ＵＳ２０１４／０１５８９３１Ａ１ＣＮ１０２５５２１４６ＢＷＯ２０１６／０８７５９８Ａ１

Ｊ．ＦｏｏｄＳｃｉ．２０１１、７６、１６〜２４頁、Ｇｏｍｅｓ，Ｃ．、Ｍｏｒｅｉｒａ，Ｒ．Ｇ．、Ｃａｓｔｅｌｌ−Ｐｅｒｅｚ，Ｅ．Ｐｏｌｙ（ＤＬ−ｌａｃｔｉｄｅ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ）（ＰＬＧＡ）Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｉｔｈｅｎｔｒａｐｐｅｄｔｒａｎｓ−ｃｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅａｎｄｅｕｇｅｎｏｌｆｏｒａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｄｅｌｉｖｅｒｙａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓＩｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１９９９、１８７、１４３〜１５２頁、Ｍｕｒａｋａｍｉ，Ｈ．、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｍ．、Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｈ．Ｋａｗａｓｈｉｍａ，Ｙ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙ（ＤＬ−ｌａｃｔｉｄｅ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ）ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｂｙｍｏｄｉｆｉｅｄｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｄｉｆｆｕｓｉｏｎｍｅｔｈｏｄＲｅａｃｔ．Ｆｕｎｃ．Ｐｏｌｙｍ．２００９、６９、６４３〜６４９頁、Ｇｉａｒｄｉ，Ｃ．、Ｌａｐｉｎｔｅ，Ｖ．、Ｃｈａｒｎａｙ，Ｃ．、Ｒｏｂｉｎ，Ｊ．Ｎｏｎｉｏｎｉｃｐｏｌｙ（ｏｘａｚｏｌｉｎ）ｅｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓｂａｓｅｄｏｎｒｅｎｅｗａｂｌｅｓｏｕｒｃｅ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｓｕｒｆａｃｅａｎｄｂｕｌｋｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓＰｏｌｙｍｅｒＪ．、１９９２、２４、４０５〜４０９頁、Ｍｉｙａｍｏｔｏ，Ｍ．、Ａｏｉ，Ｋ．、Ｙａｍａｎａｋａ，Ｈ．、Ｓａｅｇｕｓａ，Ｔ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｃｋｃｏｐｏｌｙｍｅｒｃｏｎｓｉｔｉｎｇｏｆｐｏｌｙ（２−ｍｅｔｈｙｌ−２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）ａｎｄｐｏｌｙ（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｏｘｉｄｅ）ｂｌｏｃｋｓ．ＡｎｅｗｎｏｎｉｏｎｉｃｓｕｒｆａｃｔａｎｔＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ１９９１、２４、５４７３〜５４７５頁、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｓ．、Ｕｙａｍａ，Ｈ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆａｎｏｎｉｏｎｉｃｐｏｌｙｍｅｒｉｃｓｕｒｆａｃｔａｎｔｆｒｏｍ２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅｈａｖｉｎｇａｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｓｔｈｅｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｇｒｏｕｐＰｈｏｓｐｈｏｒｕｓＲｅｓｅａｒｃｈＢｕｌｌｅｔｉｎ２０１１、２５、３３〜３８頁、Ａｍｊａｄ，Ｚ．；Ｍｏｒｇａｎ，Ｄ．ＥｆｆｉｃａｃｙｏｆｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｄｉｓｐｅｒｓａｎｔｓｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓＮａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０１４、（５）、５５６５〜５５７８頁、Ｐｒｅｓｓ，Ａ．Ｔ．、Ｔｒａｅｇｅｒ，Ａ．、Ｐｉｅｔｓｃｈ，Ｃ．、Ｍｏｓｉｇ，Ａ．、Ｗａｇｎｅｒ，Ｍ．、Ｃｌｅｍｅｎｓ，Ｍ．Ｇ．、Ｊｂｅｉｌｙ，Ｎ．、Ｋｏｃｈ，Ｎ．、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｄｔ，Ｍ．、Ｂｅｚｉｅｒｅ，Ｎ．、Ｅｒｍｏｌａｙｅｖ，Ｖ．、Ｎｔｚｉａｃｈｒｉｓｔｏｓ，Ｖ．、Ｐｏｐｐ，Ｊ．、Ｋｅｓｓｅｌｓ，Ｍ．Ｍ．、Ｑｕａｌｍａｎｎ，Ｂ．、Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，Ｕ．Ｓ．、Ｂａｕｅｒ，Ｍ．Ｃｅｌｌｔｙｐｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｓｈｏｒｔｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡｓｂｙｄｙｅ−ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｓｅｄｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＢｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、２０１４、１５、３７５３〜３７６５頁、Ｆｏｎｔｅ，Ｐ．、Ｓｏａｒｅｄ，Ｓ．、Ｓｏｕｓａ，Ｆ．、Ｃｏｓｔａ，Ａ．、Ｓｅａｂｒａ，Ｖ．、Ｒｅｉｓ，Ｓ．、Ｓａｒｍｅｎｔｏ，Ｂ．Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｓｔｕｄｙｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇｕｓｉｎｇｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓｏｎｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｉｎｓｕｌｉｎｌｏａｄｅｄｉｎｔｏＰＬＧＡｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＡｄｖ．Ｆｕｎｃ．Ｍａｔｅｒ．２０１３、２４、１１３３〜１１３９頁、Ｋｅｄｒａｃｋｉ，Ｄ．；Ｍａｒｏｎｉ，Ｐ．；Ｓｃｈｌａａｄ，Ｈ．Ｖｅｂｅｒｔ−Ｎａｒｄｉｎ，Ｃ．Ｐｏｌｙｍｅｒ−ａｐｔａｍｅｒｈｙｂｒｉｄｅｍｕｌｓｉｏｎｔｅｍｐｌａｔｉｎｇｙｉｅｌｄｓｂｉｏｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ

本発明の１つの課題は、親水性液体中で分散して存在でき、かつその分散液が秀でた安定性を特徴とする有機ポリマー粒子の提供にあった。

本発明のさらなる１つの課題は、粉末形態で存在でき、秀でた安定性を特徴とする有機ポリマー粒子の提供にあった。

本発明のさらなる１つの課題は、親水性液体中の有機ポリマー粒子の分散液の提供にあり、この分散液は、簡単に、および粒子サイズをさほど変化させずに精製することができ、ならびに／または例えばフリーズドライもしくは遠心分離もしくは濾過によって加工することができる。

本発明のさらなる１つの課題は、親水性液体中で分散して存在する有機ポリマー粒子のための凍結防止剤の提供にあった。

本発明は、水溶性ポリ（オキサゾリン）と、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される有機ポリマー粒子とを含む組成物に関する。

本明細書の枠内では「親水性液体」とは、水および／または水と混合可能な液体のことであり、例えば最高４個の炭素原子を有するアルコールもしくは２〜６個の炭素原子を有するケトンのことである。

本明細書の枠内では「ポリマー粒子」とは、粒子形態で存在している上で挙げた物質群のポリマーのことである。粒子は液体形態で、親水性液体中で分散して存在することができ、または粒子は好ましくは固体形態で、親水性液体中で分散してかもしくは粉末形態で存在している。粒子のサイズは視覚的な方法を用いて、例えば顕微鏡法によって算出でき、ナノ範囲の粒子サイズの場合、光散乱法または電子顕微鏡法を考慮に入れることができる。ポリマー粒子の形は任意であってよく、例えば球状、楕円体、または不規則であってよい。ポリマー粒子は、複数の一次粒子からなる凝集体を形成していてもよい。有機ポリマーからなる粒子は、ナノ粒子の形態で存在することが好ましい。粒子は、有機ポリマーだけでなく、さらなる構成要素、例えば作用物質または補助物質もしくは添加物質を含有することができる。

概念「粒子（Ｔｅｉｌｃｈｅｎ）」または「粒子（Ｐａｒｔｉｋｅｌ）」は、本明細書の枠内では同義的に使用されている。

「ナノ粒子」とは、本明細書の枠内では、直径が１μｍ未満であり、１つまたは複数の分子から構成され得る粒子のことである。ナノ粒子は、一般に非常に高い表面積対体積比を特徴とし、それにより非常に高い化学反応性を提供する。ナノ粒子は、ポリマーからなることができ、またはポリマーだけでなく、さらにほかの構成要素、例えば作用物質または補助物質もしくは添加物質を含有している。

「ポリマー」とは、本明細書の枠内では、特定の単位（モノマー単位または繰り返し単位）の繰り返しを特徴とする上で挙げた有機化合物のことである。ポリマーは、様々な繰り返し単位の１つまたは複数の種類からなることができる。ポリマーは、共有結合の形成を伴うモノマーの化学反応によって製造され（重合）、重合された単位の結びつきにより、いわゆるポリマー骨格を形成している。ポリマー骨格は側鎖を有することができ、この側鎖には官能基が存在し得る。ポリマーが部分的に疎水特性を有する場合、このポリマーは水性環境中で、ナノスケールの構造（例えばナノ粒子、ミセル、ベシクル）を形成できる。ホモポリマーは、１種だけのモノマー単位からなる。これに対してコポリマーは、少なくとも２種の異なるモノマー単位からなり、これらのモノマー単位は、統計的に、グラジエントとして、交互に、またはブロックとして配置され得る。

「凍結防止剤」とは、本明細書の枠内では、凍結乾燥（フリーズドライ）中の粒子の安定化に役立つ水溶性の物質または物質混合物のことである。凍結防止剤は、分散媒中で分散した粒子、例えば粒子懸濁液に、既に製造中にまたは後で（しかし凍結乾燥前に）添加することができる。さらに、この物質または物質混合物は粒子に共有結合していない。

「界面活性剤（Ｔｅｎｓｉｄｅｎ）」または「サーファクタント（Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ）」とは、本明細書の枠内では、水性媒体中での製造および貯蔵中の粒子の安定化に役立つ水溶性の物質または物質混合物のことである。界面活性剤またはサーファクタントは、通常は粒子の製造の際に分散媒、例えば水相に添加されるが、しかし粒子の製造後にも、得られた分散液の安定化のために添加することができる。

「水溶性化合物」または「水溶性ポリ（オキサゾリン）」とは、本明細書の枠内では、２５℃で、少なくとも５０ｇ／Ｌで水に溶ける化合物またはポリ（オキサゾリン）のことである。

「作用物質」とは、本明細書の枠内では、生物に所望の作用を及ぼす化合物または化合物の混合物のことである。これは、例えば医薬作用物質または農薬作用物質であり得る。作用物質は、低分子または高分子の有機化合物であることができる。好ましいのは、作用物質が低分子の医薬的に有効な物質または高分子の医薬的に有効な物質であることであり、これに関してはとりわけ、潜在的に治療に利用可能な核酸（例えばｓｉＲＮＡ、ショートヘアピン型ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、プラスミドＤＮＡ）または潜在的に利用可能なタンパク質（例えば抗体、インターフェロン、サイトカイン）からなる親水性作用物質を用いることができる。

概念「医薬作用物質」とは、本明細書の枠内では、薬理作用を有するあらゆる任意の無機または有機の分子、物質、または化合物のことである。概念「医薬作用物質」は、ここでは概念「医薬品」と同義的に使用されている。

この作用物質は、ナノ粒子またはリポソーム内への封入なしでは、低いバイオアベイラビリティしか有さないかもしくはまったく有さない、または低いｉｎｖｉｖｏ安定性しか有さないかもしくはまったく有さない、または生物の特定の細胞内でしか作用しない作用物質であり得る。

「補助物質および添加物質」とは、本明細書の枠内では、製剤に特定の追加的な特性を付与するためおよび／または製剤の加工を容易にするために、製剤に添加される物質のことである。補助物質および添加物質の例は、追跡子、造影剤、担持物質、充填物質、顔料、染料、香料、潤滑剤、ＵＶ安定剤、酸化防止剤、または界面活性剤である。「補助物質および添加物質」とはとりわけ、薬理的に適合するかまたは治療に有意義なあらゆる物質のことであり、この物質は、医薬作用物質ではないが、医薬組成物の質的特性に影響を及ぼすために、とりわけ改善するために、医薬作用物質と一緒に医薬組成物中に調合することができる。好ましいのは、補助物質および／または添加物質が、薬理作用をまったく発揮しないか、または意図した処置に対してさほど発揮しないか、または少なくとも望ましくない薬理作用は発揮しないことである。

好ましい本発明による組成物は、本発明に基づくナノ構造化された担体系と、少なくとも１種の医薬作用物質と、適切な補助物質および添加物質とを含有する医薬組成物に関する。

好ましい本発明による組成物は、平均直径Ｄ_５０が１０μｍ未満、とりわけ１μｍ未満の有機ポリマー粒子を含有している。これに関しＤ_５０は、５０体積％の粒子が、Ｄ_５０に関して提示された値より小さいことを意味する。Ｄ_５０値は、本明細書の目的のためには、光散乱法によって、または例えば透過型電子顕微鏡もしくは走査型電子顕微鏡を用いた顕微鏡法によって決定することができる。

特に好ましい本発明による組成物は、粒子径が５０〜９９９ｎｍの範囲内の有機ポリマー粒子を含む組成物である。この粒子径は一次粒子に関し、本明細書の目的のためには、（動的）光散乱法（（Ｄ）ＬＳ）によって、Ｎａｎｏｓｉｚｅ−Ｔｒａｃｋｉｎｇ−Ａｎａｌｙｓｉｓ（ＮＴＡ）によって、または例えば透過型電子顕微鏡もしくは走査型電子顕微鏡を用いた電子顕微鏡法によって決定することができる。

有機ポリマー粒子は、本発明による組成物中で粉末として固体形態で存在でき、または親水性溶媒中で分散して存在でき、この場合、分散媒中の粒子は液体形態もしくはとりわけ固体形態で存在している。

好ましい本発明による組成物中では、有機ポリマー粒子が、水および／または水と混合可能な化合物を含有する液体中の分散相を形成している。

特に好ましい本発明による組成物中では、有機ポリマー粒子が親水性液体中で分散している。

本発明による組成物のさらなる好ましい一実施形態では、微粒子化された有機ポリマーの粒子が固体形態で存在し、ポリ（オキサゾリン）によって包まれている。

本発明により用いられる有機ポリマーは、上で与えられた定義に基づく選択されたポリマーまたはそのようなポリマーの混合物である。

本発明により用いられるポリマーの骨格を形成し得る物質クラスの例は、エチレンおよび／もしくはプロピレンのようなα−オレフィンに由来するポリオレフィン、ならびに／またはスチレンのようなビニル芳香族に由来するポリビニル芳香族、ならびに／または酢酸ビニルのような脂肪族カルボン酸のビニルエステルに由来するポリビニルエステル、ならびに／または有機ジカルボン酸および有機ジオールに由来するおよび／もしくは有機ヒドロキシカルボン酸に由来するポリエステル、ポリカルボネート、有機ジカルボン酸および有機ジアミンに由来するおよび／もしくは有機アミノカルボン酸に由来するポリアミド、エチレン性不飽和カルボン酸および／もしくはそのエステルおよび／もしくはそのアミドに由来するポリマー、例えばポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリアクリルアミド、もしくはポリメタクリルアミド、飽和カルボン酸のビニルエステルに由来するポリマーもしくはその誘導体、例えばポリ酢酸ビニルもしくはポリビニルアルコール、イミド形成性のテトラカルボン酸およびジアミンに由来するポリイミド、エチレン性不飽和ニトリルに由来するポリニトリル、エチレン性不飽和有機スルホン酸に由来するポリスルホン酸、ジハロゲンアリールケトンもしくはジハロゲンアリールスルホンに由来するポリケトンもしくはポリスルホン、ポリアルキレングリコール、有機ジイソシアネートおよび有機ジオールに由来するポリウレタン、アルファ−アミノカルボン酸に由来するタンパク質、天然に存在するポリマー炭水化物およびその化学的に修飾されたポリマー誘導体、例えばセルロースもしくはセルロースエーテル、ならびに天然に存在するもしくは合成によって製造された核酸、例えばデオキシリボ核酸、リボ核酸、もしくはその化学的に修飾されたポリマー誘導体である。

本発明により用いられるポリマーは、直鎖状ポリマーとして存在でき、またはしかしグラフトポリマー、櫛形ポリマー、星形ポリマー、デンドリマー、ラダーポリマー、環状ポリマー、ポリカテナン、およびポリロタキサンであることができる。

本発明により用いられるポリマーの溶解度には、適切なモノマーとの共重合によっておよび／または官能化によって影響を及ぼすことができる。当業者にはそのような技術は公知である。

本発明により用いられる有機ポリマーは、広いモル質量範囲を含むことができる。典型的なモル質量（Ｍ_ｎ）は、２，０００〜５００，０００ｇ／ｍｏｌ、とりわけ５，０００〜４９，９００ｇ／ｍｏｌの範囲内を動く。このモル質量は、溶解したポリマーの^１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって決定できる。モル質量の決定には、とりわけ分析用超遠心またはクロマトグラフィー法、例えばサイズ排除クロマトグラフィーを用いることができる。

好ましく用いられる有機ポリマーは、^１Ｈ−ＮＭＲ分光法によってまたは分析用超遠心の使用によって算出された平均モル質量（数平均）が、５，０００〜２０，０００ｇ／ｍｏｌの範囲内にある。

本発明による組成物中の有機ポリマーの割合は、広い範囲を含むことができる。有機ポリマーが分散媒中で分散して存在している場合、有機ポリマーの割合は組成物全体に対して一般的には０．５〜２０重量％、好ましくは１〜５重量％である。有機ポリマーが粒子形態で、例えば粉末状固体として、ポリ（オキサゾリン）と一緒に存在している場合、有機ポリマーの割合は組成物全体に対して一般的には０．１〜３０重量％、好ましくは０．５〜１０重量％である。

本発明により用いられる有機ポリマーの製造は、通常の重合法によって行うことができる。これに関する例は、バルク重合、溶液重合、または乳化重合もしくは懸濁重合である。当業者にはこれらの手順は公知である。

ことに好ましく用いられる有機ポリマーに属しているのは、ポリエステルの群である。これは一般的には、脂肪族もしくは脂環式のジオールならびに脂肪族、脂環式、および／もしくは芳香族のジカルボン酸またはそのポリエステル形成性誘導体、例えばそのジアルキルエステルに由来する重縮合物である。脂肪族もしくは脂環式のヒドロキシモノカルボン酸またはそのポリエステル形成性誘導体、例えばヒドロキシモノカルボン酸アルキルエステルに由来する重縮合物であってもよい。

好ましく用いられるポリエステルに属しているのは、脂肪族ジオールおよび脂肪族ジカルボン酸または脂肪族ジカルボン酸アルキルエステルに由来するポリエステルならびに脂肪族ヒドロキシモノカルボン酸または脂肪族ヒドロキシモノカルボン酸アルキルエステルに由来するポリエステルである。

特に好ましく用いられるのはポリヒドロキシアルカノエートであり、そのうちことに好ましいのは乳酸ホモポリマー（ＰＬＡ）または乳酸コポリマーである。ことに好ましく用いられるポリエステルは、乳酸・グリコール酸コポリマー（ＰＬＧＡ）である。

さらなる非常に好ましい有機ポリマーは、エチレン性不飽和カルボン酸および／またはそのエステルおよび／またはそのアミドに由来するポリマーであり、とりわけポリアクリル酸エステルおよび／またはポリメタクリル酸エステルに由来するホモポリマーまたはコポリマーであり、ことに好ましいのはアクリル酸アルキルエステル・メチルアクリル酸アルキルエステルコポリマーである。

本発明による組成物は、１種または複数の水溶性ポリ（オキサゾリン）を含有している。本発明による組成物の総量に対するポリ（オキサゾリン）の量は、一般的には０．１〜３０重量％である。

ポリ（オキサゾリン）は公知の化合物である。ポリ（オキサゾリン）は通常、溶液中で、および開始剤の存在下で、オキサゾリン、好ましくは２−オキサゾリンのカチオン開環重合によって製造される。開始剤の例は、求電子剤、例えば芳香族のスルホン酸もしくはカルボン酸の塩もしくはエステルまたは脂肪族のスルホン酸もしくはカルボン酸の塩もしくはエステルまたは芳香族ハロゲン化合物である。多官能性求電子剤も開始剤として用いることができる。この場合、直鎖状ポリ（オキサゾリン）だけでなく、分枝状または星状の分子も生じ得る。好ましい開始剤の例は、アリールスルホン酸のエステル、例えばメチルトシレート、アルカンスルホン酸のエステル、例えばトリフルオロメタンスルホン酸、またはモノもしくはジブロモベンゼンである。重合は通常、非プロトン性極性溶媒、例えばアセトニトリル中で実施される。

本発明により用いられるポリ（オキサゾリン）を製造するためのオキサゾリンとしては、炭素原子２と窒素原子の間でのＣ＝Ｎ二重結合を有する２−オキサゾリン（４，５−ジヒドロオキサゾール）を用いる。この２−オキサゾリン（４，５−ジヒドロオキサゾール）は、２位、４位、および／もしくは５位の炭素原子ならびに／または３位の窒素原子で、好ましくは２位の炭素原子および／または３位の窒素原子で置換されていてよい。

好ましいのは、２位に置換基を有する２−オキサゾリンを用いることである。このような置換基の例はメチルまたはエチルである。

本発明により用いられる水溶性ポリ（オキサゾリン）を製造する際には、２−オキサゾリンだけでなくさらに、２−オキサゾリンと共重合可能なさらなるモノマーを少量で用いることができる。

本発明により用いられる水溶性ポリ−（オキサゾリン）は、その総質量に対して一般的には少なくとも８０重量％、とりわけ少なくとも９０重量％、ことに好ましくは少なくとも９５重量％の、式Ｉおよび／または式ＩＩ
−ＮＲ^１−ＣＲ^３Ｈ−ＣＲ^４Ｈ−（Ｉ）、 −ＮＲ^１−ＣＲ^３Ｈ−ＣＲ^４Ｈ−ＣＲ^５Ｈ−（ＩＩ）
（式中、
Ｒ^１は、式−ＣＯ−Ｒ^２の残基を意味し、
Ｒ^３、Ｒ^４、およびＲ^５は互いに独立して、水素、メチル、エチル、プロピル、またはブチルを意味し、
Ｒ^２は、水素、メチル、エチル、−Ｃ_ｍＨ_２ｍ−Ｘ、または−（Ｃ_ｎＨ_２ｎ−Ｏ）_ｏ−（Ｃ_ｐＨ_２ｐ−Ｏ）_ｑ−Ｒ^６からなる群から選択され、
Ｒ^６は、水素もしくはＣ_１〜Ｃ_６−アルキル、とりわけメチル、またはことに好ましくは水素であり、
ｍは、１〜６の整数であり、
Ｘは、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、カルボキシル、カルボン酸エステル、スルホニル、スルホン酸エステル、またはカルバメートからなる群から選択され、
ｎおよびｐは互いに独立して、２〜４の整数であり、ｎとｐは異なり、ｎは好ましくは２であり、ｐは好ましくは３を意味し、ならびに
ｏおよびｑは独立して、０〜６０、とりわけ１〜２０、ことに好ましくは２〜１０の整数であり、ｏまたはｑの少なくとも一方は０ではない）
の繰り返し構造単位を有する。

本発明により好ましく用いられる水溶性ポリ（オキサゾリン）は、Ｒ^２が水素、メチル、もしくはエチルであり、Ｒ^３〜Ｒ^５が水素を意味する、またはＲ^２が水素、メチル、もしくはエチルであり、残基Ｒ^３〜Ｒ^５のうちの２つが水素であり、残基Ｒ^３〜Ｒ^５のうちの１つがメチルもしくはエチルである水溶性ポリ（オキサゾリン）である。

本発明により用いられるポリ（オキサゾリン）のモル質量は、一般的には５，０００〜５００，０００ｇ／ｍｏｌ、とりわけ５，０００〜２０，０００ｇ／ｍｏｌである。モル質量は、本明細書の目的のためには、^１Ｈ−ＮＭＲ分析によって決定される。

ことに好ましい本発明による組成物は、水溶性ポリ（オキサゾリン）の総質量に対して少なくとも９０重量％、とりわけ少なくとも９５重量％の、Ｒ^２がメチルまたはエチルを意味する式Ｉの繰り返し構造単位を有する水溶性ポリ（オキサゾリン）を含有している。

さらなる好ましい本発明による組成物は、微粒子化された有機ポリマーだけでなく、１種または複数の医薬作用物質を含有している。

本発明による組成物は、沈殿法、好ましくはナノ沈殿法によって製造することができる。このために、極性基の存在により親水性である本発明により使用される有機ポリマーを、水と混合不能な溶媒、例えばジクロロメタン中で、または水と混合可能な溶媒、例えばアセトンもしくは酢酸エチル中で溶解する。この溶液を、水溶性ポリ（オキサゾリン）を含有する親水性分散媒中に、好ましくは水溶性ポリ（２−オキサゾリン）を含有する水中にか、または水溶性ポリ（２−オキサゾリン）を含有し、水およびメタノールもしくはエタノールからなる混合物中に滴下する。これは、強い撹拌下で行われることが好ましい。それにより比較的小さな粒子の製造を促進できる。有機ポリマーは、分散媒中で微分散化した形態で析出される。

その代わりに本発明による組成物は、乳化法、好ましくはナノ乳化法によっても生成できる。このために、極性基の存在により親水性である本発明により使用される有機ポリマーを、水と混合不能な溶媒、例えばジクロロメタン中で、または水と混合可能な溶媒、例えばアセトンもしくは酢酸エチル中で溶解する。この溶液を、水溶性ポリ（オキサゾリン）を含有する親水性分散媒と、好ましくは水溶性ポリ（２−オキサゾリン）を含有する水とか、または水溶性ポリ（２−オキサゾリン）を含有し、水およびメタノールもしくはエタノールからなる混合物と組み合わせ、これにより好ましくは２つの液相が形成される。続いてこの混合物を、エネルギー入力、好ましくは超音波処理によって乳化する。

有機ポリマーの分散の際、分散媒中には、有機ポリマーに加えて１種もしくは複数の作用物質ならびに／または１種もしくは複数の補助物質および添加物質を添加することができる。その代わりに、これらの作用物質ならびに／または補助物質および添加物質を、親水性液体中での有機ポリマーの分散の後に加えることができる。

親水性液体中で分散した有機ポリマーを製造する場合、これまでは通常、ポリビニルアルコールまたはポリエチレン・ポリプロピレンブロックコポリマー、例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７もしくはＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８またはモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）８０を用いていた。本発明による組成物は、これら公知の組成物に比べて安定性が増していることを特徴とする。

親水性液体からのポリマー粒子およびポリ（オキサゾリン）安定化剤の分離は、様々なやり方で行うことができる。これに関する例は、遠心分離、限外濾過、または透析である。

特に好ましいのは、親水性液体からの、場合によっては追加的に作用物質ならびに／または補助物質および添加物質を含有し得るポリマー粒子と、ポリ（オキサゾリン）安定化剤との回収が、フリーズドライによって行われることである。これに関しては意外にも、ポリ（オキサゾリン）が凍結保護剤として作用することが分かった。これまで用いられていた糖ベースの凍結防止剤、例えばＨｅｐｅｓ緩衝されたグルコース（Ｇｌｕｃｏｓｅ）、グルコース（Ｇｌｕｋｏｓｅ）、またはサッカロースに比べて、ポリ（オキサゾリン）によって安定化された分散液では、フリーズドライ後に、例えば遠心分離によるさらなる回収ステップは必要なく、なぜなら本発明により得られる微粒子化されたポリマーでは、細胞毒性、溶血、またはそのほかの公知の免疫反応は引き起こされないからである。

本発明により製造されたポリマー分散液は、製造後にさらに精製することができる。一般に行われている方法は、透析、限外濾過、濾過、または遠心分離を用いた精製を含んでいる。

濾過を用いた精製により、例えば凝集体のような粒子を、しかし内毒素、カプセル化されていない作用物質もしくは補助物質、または細菌汚染も、分散液から分離できる。この場合、粒子濃度が変化し得る。

透析を用いた精製により、溶媒または溶解した分子を分散液から分離できる。この方法は、分散した粒子の粒子サイズにはほとんど左右されない。ただし透析を実施すると、分散した粒子の濃度が低下し、この方法は相対的に時間がかかる。

遠心分離を用いた精製によっても、溶媒または溶解した分子を分散液から分離できる。ただしこの方法でも、分散した粒子の濃度が低下する。そのうえ、比較的大きな直径、例えば１５０ｎｍ超のナノ粒子を有する分散液しか処理できず、この場合、粒子が損傷し得る。さらに、このやり方で得られた粒子の再分散は困難であり得る。

ポリマー分散液を精製する際のポリ（オキサゾリン）の本発明による使用の場合、意外にも、透析の際の、遠心分離の際の、および濾過器を用いた精製の際のこれまで公知の欠点が、かなり低減された程度でしか発生しないか、またはそれどころか完全に消えることが分かった。

本発明は、水および／または水と混合可能な化合物を含有する液体中での、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用にも関する。

さらに本発明は、フリーズドライの際の、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用に関する。

これに関して特に好ましいのは、親水性液体中で微分散化した有機ポリマーの懸濁液を用いることである。

そのうえ本発明は、親水性液体中での、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される有機ポリマー粒子の製造または回収の際の安定化剤としての、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用に関する。

これに関して特に好ましいのは、回収方法として透析、遠心分離、または濾過を用いることである。

最後に本発明は、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマーポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー炭水化物、核酸、またはこれらのポリマーの２種以上の混合物の群から選択される粉末状の有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用に関する。

以下の例は、本発明を限定することなく本発明を説明する。

例１：ポリ（２−オキサゾリン）（ＰＯ_ｘ）の製造
ポリ（２−オキサゾリン）の合成は、既に文献に記載されている（例えばＷｉｅｓｂｒｏｃｋ，Ｆ．らＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒＲａｐｉｄＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ２００４、２５、１８９５〜１８９９頁を参照）。よって本手順を、例として重合度（ＤＰ）６１のポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）（Ｐ（ＥｔＯｘ）_６１）に関して説明する。

マイクロ波反応器内で、不活性条件下で、２−エチル−２−オキサゾリン（６．０６ｍＬ、６０．０ｍｍｏｌ）と、メチルトシレート（０．１５ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）と、アセトニトリル（８．７９ｍＬ）とを混合した。その後、反応器を合成マイクロ波中で１４分間、１４０℃に加熱した。続いて脱イオン水０．５ｍＬの添加により反応を終わらせ、それから一晩中、室温で撹拌した。結果として生じる溶液を、ジクロロメタンで希釈し、その後、よく冷えた過剰なジエチルエーテル中で沈殿させて精製した。その後、沈殿したポリマーを濾別し、ジクロロメタン中で溶解した。続いて回転蒸発器で溶媒を除去し、それから完全に溶媒を含まなくなるまでポリマーを高真空で乾燥した。最終生成物は、結晶質の白い固体として存在した。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）：δ＝４．３４（０．１Ｈ，ｓ，ｂａｃｋｂｏｎｅ−ＯＨ）、３．４４（４．０Ｈ，ｓ，ｂａｃｋｂｏｎｅ）、３．０２（０．３Ｈ，ｓ，ＣＨ_３−ｂａｃｋｂｏｎｅ）、２．４（１．７Ｈ，ｍ，ＣＨ_２（ＥｔＯｘ））、１．１１（２．５Ｈ，ｓ，ＣＨ_３（ＥｔＯｘ））ｐｐｍ。

ＳＥＣ（溶離液：ＤＭＡｃ^１）、ＬｉＣｌ０．２１％、ＰＳ^２）スタンダード）：Ｍ_ｎ＝１１，２００ｇｍｏｌ^−１、Ｍ_ｗ＝１２，２００ｇｍｏｌ^−１、Ｄ＝１．０９。

図１は、Ｐ（ＥｔＯｘ）_６１の^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）のグラフを示している。

図２は、Ｐ（ＥｔＯｘ）_６１のサイズ排除クロマトグラフィーのグラフ（ＤＭＡｃ^１）、ＬｉＣｌ０．２１％、ＰＳ^２）較正）を示している。

^１）ＤＭＡｃ＝ジメチルアセトアミド
^２）ＰＳ＝ポリスチレン

例２：フリーズドライ実験
ＰＬＧＡ^３）ナノ粒子をナノ沈殿法によって製造し（例３を参照）、それから動的光散乱法により、サイズ（粒子径、ｚ平均）およびサイズ分布（ＰＤＩ）に関して特徴づけた。この特徴づけの後、ナノ粒子懸濁液に、特定の量の凍結保護剤を様々な濃度で添加した。懸濁液を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いてフリーズドライした（２４ｈ、−５６℃、０．０１ｍｂａｒ）。結果として生じる粉末約２ｍｇを超純水１ｍＬ中で再び再懸濁し、その後、改めて動的光散乱法により、粒子径（ｚ平均）およびＰＤＩに関して特徴づけた。凍結乾燥後に記録した値を、調製直後に決定した値で割ることで比を決定した。

例３ａ：ナノ沈殿法によるナノ粒子懸濁液の製造
ＰＬＧＡ^３）５ｍｇをアセトン２．５ｍＬ中で溶解し、続いてシリンジポンプにより規定の速度で、連続撹拌下で、Ｐ（ＥｔＯｘ）_６１水溶液４．５ｍＬを有する容器に入れた。その後、一晩中、連続撹拌下で有機溶媒を蒸発させ、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。

例３ｂ：ナノ乳化法によるナノ粒子懸濁液の製造
規定の量のＰ（ＥｔＯｘ）_６１を超純水１ｍＬ中で溶解した。ＰＬＧＡ^３）１０ｍｇを酢酸エチル０．５ｍＬ中で溶解し、慎重に界面活性剤溶液にピペッティングし、続いて超音波フィンガーで処理した（出力：４０Ｗ、サイクル：１００％、振幅：１００％、時間：１０秒）。続いて粒子懸濁液を超純水で１０倍に希釈し、それから有機溶媒を蒸発させるため一晩中、室温で撹拌し、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。

例４ａ：ナノ沈殿法による調製後のポリマーナノ粒子のサイズへのポリ（２−オキサゾリン）のＤＰの影響
ＰＬＧＡ^３）５ｍｇをアセトン２．５ｍＬ中で溶解し、続いてシリンジポンプにより規定の速度で、連続撹拌下で、Ｐ（ＥｔＯｘ）_ｎまたはＰ（ＭｅＯｘ）_ｎ水溶液４．５ｍＬを有する容器に入れた。その後、一晩中、連続撹拌下で有機溶媒を蒸発させ、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して動的光散乱法によって特徴づけた。懸濁液の一部を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、結果として生じる粉末約２ｍｇを超純水１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。

例４ｂ：ナノ乳化法による調製後のポリマーナノ粒子の粒子サイズへのポリ（２−オキサゾリン）のＤＰの影響
規定の量のＰ（ＥｔＯｘ）_ｎまたはＰ（ＭｅＯｘ）_ｎを超純水１ｍＬ中で溶解した。ＰＬＧＡ^３）１０ｍｇを酢酸エチル０．５ｍＬ中で溶解し、慎重にサーファクタント溶液にピペッティングし、続いて超音波フィンガーで処理した（出力：４０Ｗ、サイクル：１００％、振幅：１００％、時間：１０秒）。続いて粒子懸濁液を超純水で１０倍に希釈し、それから有機溶媒を蒸発させるため一晩中、室温で撹拌し、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。懸濁液の一部を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、粒子約２ｍｇを超純水１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。

例５：様々なシェルポリマーからなるナノ粒子
Ｐ（ＥｔＯｘ）_ｎまたはＰ（ＭｅＯｘ）_ｎ１００ｍｇを超純水１ｍＬ中で溶解した。シェルポリマー１０ｍｇを酢酸エチル０．５ｍＬ中で溶解し、慎重に界面活性剤溶液にピペッティングし、続いて超音波フィンガーで処理した（出力：４０Ｗ、サイクル：１００％、振幅：１００％、時間：１０秒）。続いて粒子懸濁液を超純水で１０倍に希釈し、それから有機溶媒を蒸発させるため一晩中、室温で撹拌し、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。表に記載しているように、ナノ粒子に異なる精製を施した。その後、結果として生じるすべての粒子懸濁液を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、粉末約２ｍｇを超純水１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。

例６：ナノ粒子のサイズへの精製の影響
ＰＬＧＡ^３）５ｍｇをアセトン２．５ｍＬ中で溶解し、続いてシリンジポンプにより規定の速度で、連続撹拌下で、Ｐ（ＥｔＯｘ）_６１水溶液４．５ｍＬを有する容器に入れた。その後、一晩中、連続撹拌下で有機溶媒を蒸発させ、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。表に記載しているように、ナノ粒子に異なる精製を施した。その後、結果として生じるすべての粒子懸濁液を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、粉末約２ｍｇを超純水１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。

例７：ナイルレッドのカプセル化
ＰＬＧＡ^３）１０ｍｇおよびアセトン中１ｍｇｍＬ^−１ストック溶液からのナイルレッド０．１ｍｇから、例３でのようにナノ粒子をナノ沈殿法またはナノ乳化法によって製造した。（水溶液中に存在する場合には）界面活性剤濃度として、ナノ乳化法に関しては１％およびナノ沈殿法に関しては０．３％の最終濃度を目標とした。

表に記載しているように、ナノ粒子に異なる精製を施した。その後、結果として生じるすべての粒子懸濁液を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、粉末約２ｍｇを超純水１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。結果として生じるナノ粒子の一部をＤＭＦ^６）中で溶解し、それから作用物質のカプセル化効率を、ＵＶ／ＶＩＳ分光法によりＵＶ／ＶＩＳの吸収を介して決定した。

例８：ＰＫＣ４１２^７）のカプセル化
ＰＬＧＡ^３）１０ｍｇをアセトン１ｍＬ中で溶解した。ＰＫＣ４１２^７）０．３ｍｇをＤＭＳＯ^８）３０μＬ中で溶解し、ＰＬＧＡ^３）溶液に加えた。その後、このポリマー・作用物質溶液をシリンジポンプにより規定の速度で、連続撹拌下で、場合によっては界面活性剤を含有する水溶液１０ｍＬを有する容器に入れた。その後、一晩中、連続撹拌下で有機溶媒を蒸発させ、それからナノ粒子をその粒子径およびＰＤＩに関して特徴づけた。その後、結果として生じるすべての粒子懸濁液を−８０℃の冷凍庫内で凍結し、続いて一晩中、凍結乾燥した。その後、粒子約２ｍｇを超純水または対応するポリ（２−オキサゾリン）の０．５％溶液１ｍＬ中に再懸濁し、改めて特徴づけた。

値の比は、凍結乾燥後の対応する測定値を調製後の測定値で割ることによって求めた。結果として生じるナノ粒子の一部をＤＭＳＯ^８）中で溶解し、それから作用物質のカプセル化効率を、ＵＶ／ＶＩＳ分光法によりＵＶ／ＶＩＳの吸収を介して決定した。

Claims

水溶性ポリ（オキサゾリン）と、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマー性ポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー性炭水化物、核酸の群またはこれらのポリマーの２種以上の混合物から選択される有機ポリマー粒子とを含む組成物。
有機ポリマー粒子の平均直径Ｄ_５０が１０μｍ未満であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
有機ポリマー粒子の平均直径Ｄ_５０が１μｍ未満であることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
有機ポリマー粒子が、５０〜９９９ｎｍの範囲内の直径を有することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一つに記載の組成物。
有機ポリマー粒子が、親水性液体中の分散相を形成していることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一つに記載の組成物。
有機ポリマー粒子が、親水性液体中に懸濁していることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。
有機ポリマー粒子が固体形態で存在し、ポリ（オキサゾリン）によって包まれていることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一つに記載の組成物。
有機ポリマー粒子が、ポリエステルを含有していることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一つに記載の組成物。
ポリエステルが、ポリヒドロキシアルカノエートであることを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
ポリヒドロキシアルカノエートが、乳酸ホモポリマーまたは乳酸コポリマーであることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
水溶性ポリ（オキサゾリン）が、その総質量を基準として少なくとも８０重量％の、式Ｉおよび／または式ＩＩ
−ＮＲ^１−ＣＲ^３Ｈ−ＣＲ^４Ｈ−（Ｉ）、 −ＮＲ^１−ＣＲ^３Ｈ−ＣＲ^４Ｈ−ＣＲ^５Ｈ−（ＩＩ）
［式中、
Ｒ^１は、式−ＣＯ−Ｒ^２の残基を意味し、
Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は互いに独立して、水素、メチル、エチル、プロピルまたはブチルを意味し、
Ｒ^２は、水素、メチル、エチル、−Ｃ_ｍＨ_２ｍ−Ｘまたは−（Ｃ_ｎＨ_２ｎ−Ｏ）_ｏ−（Ｃ_ｐＨ_２ｐ−Ｏ）_ｑ−Ｒ^６からなる群から選択され、
Ｒ^６は、水素またはＣ_１〜Ｃ_６−アルキルであり、
ｍは、１〜６の整数であり、
Ｘは、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ、カルボキシル、カルボン酸エステル、スルホニル、スルホン酸エステルまたはカルバメートからなる群から選択され、
ｎおよびｐは互いに独立して、２〜４の整数であり、ｎとｐは異なり、ならびに
ｏおよびｑは独立して、０〜６０の整数であり、ｏまたはｑの少なくとも一方は０ではない］
の繰り返し構造単位を有することを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の組成物。
Ｒ^２が水素、メチルもしくはエチルであり、Ｒ^３〜Ｒ^５が水素を意味するか、またはＲ^２が水素、メチルもしくはエチルであり、残基Ｒ^３〜Ｒ^５のうちの２つが水素であり、残基Ｒ^３〜Ｒ^５のうちの１つがメチルもしくはエチルであることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。
水溶性ポリ（オキサゾリン）が、その総質量を基準として少なくとも９０重量％の、Ｒ^２がメチルまたはエチルを意味する式Ｉの繰り返し構造単位を有することを特徴とする、請求項１１または１２に記載の組成物。
有機ポリマー粒子が、１種または複数の医薬作用物質を含有していることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一つに記載の組成物。
親水性液体中での、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマー性ポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー性炭水化物、核酸の群またはこれらのポリマーの２種以上の混合物から選択される有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用。
フリーズドライの際の、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマー性ポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー性炭水化物、核酸の群またはこれらのポリマーの２種以上の混合物から選択される有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用。
親水性液体中での、ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマー性ポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー性炭水化物、核酸の群またはこれらのポリマーの２種以上の混合物から選択される有機ポリマー粒子の製造または回収の際の安定化剤としての、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用。
ポリオレフィン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリエステル、ポリアミド、ポリイミド、ポリカルボン酸、ポリカルボン酸エステル、ポリカルボン酸アミド、ポリニトリル、ポリスルホン酸、ポリケトン、ポリスルホン、ポリマー性ポリオール、ポリウレタン、タンパク質、ポリマー性炭水化物、核酸の群またはこれらのポリマーの２種以上の混合物から選択される粉末状の有機ポリマー粒子の安定化のための、水溶性ポリ（オキサゾリン）の使用。