JP2020505942A5 - - Google Patents
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Description
米国における全ての目的のために、本開示に引用されたありとあらゆる刊行物および特許文献は、そのような刊行物または文献の各々が、参照により本明細書に組み込まれることが具体的および個別に示されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。刊行物および特許文献の引用は、任意のそのような文献が関連する先行技術であることを示すものとして意図するものでも、またはその内容もしくは日付に関する承認となるものでもない。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
配列番号４、６、８、１０、および／または１２の少なくとも１つに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む操作されたポリペプチドであって、前記アミノ酸配列のアミノ酸位置が、配列番号２のアミノ酸配列を参照して番号付けされる、操作されたポリペプチド。
(項目２)
１６、１６／１５０、４４／５６、４４／５６／１０２／２３９／２８５／４６９／４７０／４９５、４４／２３９、４４／２３９／２８５／４６９／４９５、４４／２３９／２８５／４７０、４４／２３９／４６９／４７０、４４／２３９／４７０／５４６、４４／２３９／４９５、４４／２３９／４９５／５４６、４４／４６９／４７０、１０２、１０２／４７０、１６２、１６５、１８８、２３９／２８５、２３９／２８５／４６９、２３９／４６９／４７０／４９５、２６４、２６７、２８５／４６９／４７０／４９５、２８５／４７０、２８５／４７０／４９５、３６４、４５５、４６９／４７０、４７２、および４８２から選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目３)
１６、２６４、３６４、４７２、４８２、および／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換を含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目４)
４４／４７／２０４／２０９／２８５、４４／４７／３６４／４７０／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／２８５／３６４／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／４７０／４９５、４４／５４／２８５／４７０、４４／１０２／２８５／３６４、４４／２０４／２０９／２８５、４４／２０４／２８５／３６４／４７０／４９５、４４／２０９／２８５／４６０／４９５、４４／２８５／３６４、４７／５４／２０９、４７／２０４／２０９／２３９／２８５／４９５、４７／２０４／２８５／３６４／４９５、４７／２０９／２３９／３６４、４７／２３９／２８５／３６４、４７／４７０、５４、５４／５６、５４／５６／２０４／２０９／４７０、５４／５６／２０４／２０９／４９５、５４／５６／２０４／４９５、５４／５６／２０９／５６２、５４／５６／２８５／３６４／４７０、５４／５６／２８５／４７０、５４／１６５／２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、５４／２３９／４９５、５４／２８５／４７０、５４／４７０、５６、１６５、２０４、２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、２０４／２０９／３６４、２０４／２０９／３６４／４９５、２０４／２３９、２０４／２３９／２８５、２０４／３６４、２０４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０／４９５、２０９／３６４、２０９／３６４／４９５、２０９／４７０、２３９／３６４、２８５／３６４、２８５／３６４／４９５、３６４、３６４／４７０、４７０、および４９５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号８を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目５)
１６、１６／１５０、１６２、１８８、２６４、２６７、３９８、４３４、４７２、および４８２、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目６)
５４／５６／１６２／２０４／２８５、５４／５６／１６２／２０４／３９８、５４／５６／２０４／２８５、５４／５６／２０４／３９８、５４／５６／２０４／３９８／４７２、５４／５６／２８５、５４／５６／３９８、５４／５６／３９８／４７２、５４／１６２／２０４／３９８、５４／１６２／３９８、５４／２０４／２８５／３９８／４７２、５４／２０４／３９８、５４／２８５／３９８、５４／２８５／３９８／４７２、５６／１６２／３９８、５６／２０４／２８５、５６／２０４／３９８、５６／２０４／３９８／４６０、５６／２０４／３９８／４７２、５６／２８５、５６／２８５／３９８／４７２、５６／３９８、５６／３９８／４７２、および２０１／２０４／３９８、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目７)
１６、１８、３９、４７、５４、５９、７３、９１、２０９、２１４、２８５、２９０、３０５、３０７、３６４、４０７、４５０、４７０、５０３、５２１、５２４、および５６５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目８)
１５／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／１９／２１４／４０７、１６／１８／２３／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４３／４４／５９／２０９／５０３／５６５、１６／１８／３９／４５／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／４９／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３１３／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５０３、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／９８／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／２０９／２１４／４０７／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５９／７３／９１／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５９／２１４／５０３／５６５、１６／１８／３９／４７／９１／２９０／４０７、１６／１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１０／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／７３／９８／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／９１／５０３／５２１、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５９／２８５／４０７／４５０／５６５、１６／１８／４７／７３／９１／２０９／２８５／２９０／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／４７／７３／２１４／３０７／５０３、１６／１８／４７／７３／２９０／４０７／４５０、１６／１８／４７／２０９、１６／１８／４７／２８５／３６４／５０３／５２１、１６／１８／４７／３６４／４０７、１６／１８／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／１８／５４／５９／２９０／４０７／４５０／５０３／５２４、１６／１８／５４／７３／９１／２１４／２８５／２９０／４０７／５６１、１６／１８／５４／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／５４／４０７、１６／１８／５５／２０９／２８５／３０５、１６／１８／５９／２０９／４５０／５０３／５２４、１６／１８／７３／２０９／２１４／４５０、１６／１８／９１／２０９／４０７／５０３、１６／１８／９１／２１４／４０７／５２１／５２４／５６５、１６／１８／２０９／４５０／５０３、１６／１８／２１４／４０７／４５０／５０３、１６／１８／２８５／２９０／４７０、１６／１８／５０３、１６／２２／２１４／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２８５／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／３０７／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／２１４／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２
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０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、１８／３９／５４／７３／９１／９８／２８５／２９０／３０５／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３、１８／３９／５４／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５５／４０７／４７０／５０３、１８／３９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／２１４／３６４／４０７／４７０／５０３、１８／３９／２１４／３６４／４５０／４７０／５２１／５２４、１８／４３／３０５／３６４／４１６／４５０、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４８５／５０３／５２４／５６５、１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／４７／５９／９７／９８／４０７／５０３、１８／４７／５９／２１４／２８５／５６５、１８／４７／５９／２１４／３６２／４０７、１８／４７／５９／２１４／４５０／５２１、１８／４７／７３／９１／３６４／４０７／５０３、１８／４７／９７／９８／１８２／２０９／３６４／４０７／５０３、１８／４７／２０９／２９０／３６４／４７０、１８／４７／２０９／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１８／４７／２０９／４０７／４５０／５０３、１８／４７／２１４／２８５／２８７／２９０／４７０／５０３、１８／４７／２１４／４０７／５２４／５６５、１８／４７／３６４／４７０、１８／４７／３６４／５０３、１８／４７／３６４／５０３／５６５、１８／４７／４５０／４７０、１８／４７／５２１／５６５、１８／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／５４／７３／２１４／３０７、１８／５９／９１／２０９／２１４／３６４、１８／５９／９１／５６５、１８／５９／２０９、１８／５９／３０５／３６４／４７０／５６５、１８／５９／４０７／４５０、１８／５９／５０３／５２４、１８／７３／９１／１８２／２８７／４０７／４５０／５０３、１８／７３／２８５／３６４／４０７／４７０、１８／７３／２８５／５２１／５２４、１８／７３／３６４／４５０／５６５、１８／７３／４０７、１８／９１／２０９／３６４／４０７、１８／９１／２１４、１８／９１／２１４／４０７／５２４／５６５、１８／９１／３６４／４０７、１８／９１／３６４／４０７／４５０、１８／９１／３６４／４５０／５６５、１８／９１／４０７／４７０／５２１／５２４、１８／９１／４０７／５０３、１８／２０９、１８／２０９／３６４／４０７／５２１／５６５、１８／２１４／３６４／４０７／４７０／５０３／５２４、１８／２１４／４０７、１８／２９０／５６５、１８／３６４／４５０／５２１／５２４／５６５、１８／３６４／５０３、１８／４０７／４５０／５０３／５６５、１８／４５０／５０３、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４１２／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／９１／２０９／２１４／２８５／３０５／３０７／４０７／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５９／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０３／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、３９／４７／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／９１／２１４、３９／４７／２８５／５０３、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４７０／５０３／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／４０７／４５０／５０３／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、３９／５４／５９／７３／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３、３９／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５６５、３９／５４／５９／７３／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／９１／９８／２０９／２８７／２９０／２９１／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４、３９／５４／５９／９１／９８／２８５／２９０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／
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(項目９)
配列番号２、４、６、８、１０、および／もしくは１２、またはその機能的断片に対して、少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１０)
項目１〜８のいずれかに記載された操作されたポリペプチドを含む、操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１１)
配列番号２、４、６、８、１０、および／もしくは１２、またはその機能的断片に対して、少なくとも約９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目９および／または１０に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１２)
表６．１、表７．１、表８．１、表９．１、表１０．１、表１４．１、および／または表１５．１のいずれかに記載されたバリアントフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドである、項目９〜１１のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１３)
Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓバリアント酵素である、項目９〜１２のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１４)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより熱安定性である、項目９〜１３のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１５)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼよりタンパク質分解に耐性を示す、項目９〜１４のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１６)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、少なくとも１つの消化管酵素によるタンパク質分解に耐性を示す、項目１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１７)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、キモトリプシン、トリプシン、カルボキシペプチダーゼ、および／またはエラスターゼによるタンパク質分解に耐性を示す、項目１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１８)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより酸安定性である、項目９〜１７のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１９)
精製されている、項目１〜８のいずれかに記載の操作されたポリペプチド、または項目９〜１８のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目２０)
項目１〜８、もしくは１９に記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチド、および／または項目９〜１９のいずれか一項に記載のフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２１)
制御配列に作動可能に連結されている、項目２０に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２２)
前記ポリヌクレオチドがコドン最適化されている、項目２０および／または２１に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２３)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチド配列、および少なくとも１つの制御配を含む、発現ベクター。
(項目２４)
前記制御配列がプロモーターを含む、項目２３に記載の発現ベクター。
(項目２５)
前記プロモーターが異種プロモーターである、項目２４に記載の発現ベクター。
(項目２６)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、および／または項目２３〜２５のいずれかに記載の発現ベクターで形質転換された宿主細胞。
(項目２７)
前記宿主細胞がＥ．ｃｏｌｉである、項目２６に記載の宿主細胞。
(項目２８)
宿主細胞において操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを生成する方法であって、項目１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／もしくはフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする少なくとも１つのポリヌクレオチド、ならびに／または項目２０〜２２に記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、ならびに／または項目２３〜２５のいずれかに記載の少なくとも１つの発現ベクターを含む宿主細胞を、少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドが生成されるように、適切な培養条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目２９)
培養物および／または宿主細胞から少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを回収するステップをさらに含む、項目２８に記載の方法。
(項目３０)
前記少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを精製するステップをさらに含む、項目２９に記載の方法。
(項目３１)
項目１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／または操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを含む、組成物。
(項目３２)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含む、組成物。
(項目３３)
医薬組成物である、項目３１および／または３２に記載の組成物。
(項目３４)
少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤および／または担体をさらに含む、項目３２および／または３３に記載の組成物。
(項目３５)
フェニルケトン尿症の処置に適している、項目３１〜３４のいずれかに記載の組成物。
(項目３６)
上昇した血中フェニルアラニンの処置に適している、項目３１〜３５のいずれかに記載の組成物。
(項目３７)
チロシン血症の処置に適している、項目３１〜３６のいずれかに記載の組成物。
(項目３８)
上昇した血中チロシンの処置に適している、項目３１〜３７のいずれかに記載の組成物。
(項目３９)
遺伝子治療における使用に適している、項目３１に記載の組成物。
(項目４０)
フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するための遺伝子治療における使用に適している、項目３９に記載の組成物。
(項目４１)
ｍＲＮＡ治療における使用に適している、項目３１に記載の組成物。
(項目４２)
フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するためのｍＲＮＡ治療における使用に適している、項目４１に記載の組成物。
(項目４３)
ヒトへの経口投与に適している、項目３１〜４２のいずれかに記載の組成物。
(項目４４)
丸剤、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ、液体、またはエマルジョンの形態である、項目３１〜３８、および／または４３のいずれかに記載の組成物。
(項目４５)
前記丸剤、錠剤、カプセル剤、またはゲルキャップが、腸溶コーティングをさらに含む、項目４４に記載の組成物。
(項目４６)
ヒトへの非経口注射に適している、項目３１〜４３のいずれかに記載の組成物。
(項目４７)
少なくとも１つの追加の治療有効化合物と共に投与される、項目３１〜４６のいずれかに記載の組成物。
(項目４８)
少なくとも１つの追加の治療有効化合物を含む、項目４７に記載の組成物。
(項目４９)
対象におけるフェニルケトン尿症の症状を処置および／または防止する方法であって、フェニルケトン尿症を有する対象を提供するステップと、項目３１〜４８のいずれかに記載の組成物を前記対象に提供するステップとを含む、方法。
(項目５０)
前記対象の血液中のフェニルアラニン濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると低減する、項目４９に記載の方法。
(項目５１)
前記対象の血液中のケイ皮酸濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると増加する、項目４９および／または５０に記載の方法。
(項目５２)
フェニルケトン尿症の前記症状が改善される、項目４９〜５１のいずれかに記載の方法。
(項目５３)
前記対象が、項目１〜１９に記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／またはフェニルアラニンアンモニアリアーゼを含む少なくとも１つの医薬組成物を提供されていない対象に必要とされる食事よりフェニルアラニン含量が少なく制限された食事を摂ることができる、項目４９〜５２のいずれかに記載の方法。
(項目５４)
前記対象が、乳児、小児、若年成人、または成人である、項目４９〜５３のいずれかに記載の方法。
(項目５５)
項目３１〜４８のいずれかに記載された組成物の使用。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
配列番号４、６、８、１０、および／または１２の少なくとも１つに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む操作されたポリペプチドであって、前記アミノ酸配列のアミノ酸位置が、配列番号２のアミノ酸配列を参照して番号付けされる、操作されたポリペプチド。
(項目２)
１６、１６／１５０、４４／５６、４４／５６／１０２／２３９／２８５／４６９／４７０／４９５、４４／２３９、４４／２３９／２８５／４６９／４９５、４４／２３９／２８５／４７０、４４／２３９／４６９／４７０、４４／２３９／４７０／５４６、４４／２３９／４９５、４４／２３９／４９５／５４６、４４／４６９／４７０、１０２、１０２／４７０、１６２、１６５、１８８、２３９／２８５、２３９／２８５／４６９、２３９／４６９／４７０／４９５、２６４、２６７、２８５／４６９／４７０／４９５、２８５／４７０、２８５／４７０／４９５、３６４、４５５、４６９／４７０、４７２、および４８２から選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目３)
１６、２６４、３６４、４７２、４８２、および／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換を含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目４)
４４／４７／２０４／２０９／２８５、４４／４７／３６４／４７０／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／２８５／３６４／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／４７０／４９５、４４／５４／２８５／４７０、４４／１０２／２８５／３６４、４４／２０４／２０９／２８５、４４／２０４／２８５／３６４／４７０／４９５、４４／２０９／２８５／４６０／４９５、４４／２８５／３６４、４７／５４／２０９、４７／２０４／２０９／２３９／２８５／４９５、４７／２０４／２８５／３６４／４９５、４７／２０９／２３９／３６４、４７／２３９／２８５／３６４、４７／４７０、５４、５４／５６、５４／５６／２０４／２０９／４７０、５４／５６／２０４／２０９／４９５、５４／５６／２０４／４９５、５４／５６／２０９／５６２、５４／５６／２８５／３６４／４７０、５４／５６／２８５／４７０、５４／１６５／２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、５４／２３９／４９５、５４／２８５／４７０、５４／４７０、５６、１６５、２０４、２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、２０４／２０９／３６４、２０４／２０９／３６４／４９５、２０４／２３９、２０４／２３９／２８５、２０４／３６４、２０４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０／４９５、２０９／３６４、２０９／３６４／４９５、２０９／４７０、２３９／３６４、２８５／３６４、２８５／３６４／４９５、３６４、３６４／４７０、４７０、および４９５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号８を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目５)
１６、１６／１５０、１６２、１８８、２６４、２６７、３９８、４３４、４７２、および４８２、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目６)
５４／５６／１６２／２０４／２８５、５４／５６／１６２／２０４／３９８、５４／５６／２０４／２８５、５４／５６／２０４／３９８、５４／５６／２０４／３９８／４７２、５４／５６／２８５、５４／５６／３９８、５４／５６／３９８／４７２、５４／１６２／２０４／３９８、５４／１６２／３９８、５４／２０４／２８５／３９８／４７２、５４／２０４／３９８、５４／２８５／３９８、５４／２８５／３９８／４７２、５６／１６２／３９８、５６／２０４／２８５、５６／２０４／３９８、５６／２０４／３９８／４６０、５６／２０４／３９８／４７２、５６／２８５、５６／２８５／３９８／４７２、５６／３９８、５６／３９８／４７２、および２０１／２０４／３９８、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目７)
１６、１８、３９、４７、５４、５９、７３、９１、２０９、２１４、２８５、２９０、３０５、３０７、３６４、４０７、４５０、４７０、５０３、５２１、５２４、および５６５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、項目１に記載の操作されたポリペプチド。
(項目８)
１５／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／１９／２１４／４０７、１６／１８／２３／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４３／４４／５９／２０９／５０３／５６５、１６／１８／３９／４５／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／４９／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３１３／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５０３、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／９８／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／２０９／２１４／４０７／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５９／７３／９１／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５９／２１４／５０３／５６５、１６／１８／３９／４７／９１／２９０／４０７、１６／１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１０／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／７３／９８／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／９１／５０３／５２１、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５９／２８５／４０７／４５０／５６５、１６／１８／４７／７３／９１／２０９／２８５／２９０／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／４７／７３／２１４／３０７／５０３、１６／１８／４７／７３／２９０／４０７／４５０、１６／１８／４７／２０９、１６／１８／４７／２８５／３６４／５０３／５２１、１６／１８／４７／３６４／４０７、１６／１８／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／１８／５４／５９／２９０／４０７／４５０／５０３／５２４、１６／１８／５４／７３／９１／２１４／２８５／２９０／４０７／５６１、１６／１８／５４／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／５４／４０７、１６／１８／５５／２０９／２８５／３０５、１６／１８／５９／２０９／４５０／５０３／５２４、１６／１８／７３／２０９／２１４／４５０、１６／１８／９１／２０９／４０７／５０３、１６／１８／９１／２１４／４０７／５２１／５２４／５６５、１６／１８／２０９／４５０／５０３、１６／１８／２１４／４０７／４５０／５０３、１６／１８／２８５／２９０／４７０、１６／１８／５０３、１６／２２／２１４／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２８５／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／３０７／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／２１４／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２
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０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／５９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、１８／３９／５４／７３／９１／９８／２８５／２９０／３０５／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３、１８／３９／５４／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４、１８／３９／５５／４０７／４７０／５０３、１８／３９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／３９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／３９／２１４／３６４／４０７／４７０／５０３、１８／３９／２１４／３６４／４５０／４７０／５２１／５２４、１８／４３／３０５／３６４／４１６／４５０、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４８５／５０３／５２４／５６５、１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１８／４７／５９／９７／９８／４０７／５０３、１８／４７／５９／２１４／２８５／５６５、１８／４７／５９／２１４／３６２／４０７、１８／４７／５９／２１４／４５０／５２１、１８／４７／７３／９１／３６４／４０７／５０３、１８／４７／９７／９８／１８２／２０９／３６４／４０７／５０３、１８／４７／２０９／２９０／３６４／４７０、１８／４７／２０９／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１８／４７／２０９／４０７／４５０／５０３、１８／４７／２１４／２８５／２８７／２９０／４７０／５０３、１８／４７／２１４／４０７／５２４／５６５、１８／４７／３６４／４７０、１８／４７／３６４／５０３、１８／４７／３６４／５０３／５６５、１８／４７／４５０／４７０、１８／４７／５２１／５６５、１８／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１８／５４／７３／２１４／３０７、１８／５９／９１／２０９／２１４／３６４、１８／５９／９１／５６５、１８／５９／２０９、１８／５９／３０５／３６４／４７０／５６５、１８／５９／４０７／４５０、１８／５９／５０３／５２４、１８／７３／９１／１８２／２８７／４０７／４５０／５０３、１８／７３／２８５／３６４／４０７／４７０、１８／７３／２８５／５２１／５２４、１８／７３／３６４／４５０／５６５、１８／７３／４０７、１８／９１／２０９／３６４／４０７、１８／９１／２１４、１８／９１／２１４／４０７／５２４／５６５、１８／９１／３６４／４０７、１８／９１／３６４／４０７／４５０、１８／９１／３６４／４５０／５６５、１８／９１／４０７／４７０／５２１／５２４、１８／９１／４０７／５０３、１８／２０９、１８／２０９／３６４／４０７／５２１／５６５、１８／２１４／３６４／４０７／４７０／５０３／５２４、１８／２１４／４０７、１８／２９０／５６５、１８／３６４／４５０／５２１／５２４／５６５、１８／３６４／５０３、１８／４０７／４５０／５０３／５６５、１８／４５０／５０３、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４１２／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／５９／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、３９／４７／５４／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／９１／２０９／２１４／２８５／３０５／３０７／４０７／５０３／５２１／５６５、３９／４７／５４／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／５９／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０３／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、３９／４７／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、３９／４７／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／４７／９１／２１４、３９／４７／２８５／５０３、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４７０／５０３／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／４０７／４５０／５０３／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４、３９／５４／５９／７３／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３、３９／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５６５、３９／５４／５９／７３／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／９１／９８／２０９／２８７／２９０／２９１／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４、３９／５４／５９／９１／９８／２８５／２９０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／
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(項目９)
配列番号２、４、６、８、１０、および／もしくは１２、またはその機能的断片に対して、少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１０)
項目１〜８のいずれかに記載された操作されたポリペプチドを含む、操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１１)
配列番号２、４、６、８、１０、および／もしくは１２、またはその機能的断片に対して、少なくとも約９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目９および／または１０に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１２)
表６．１、表７．１、表８．１、表９．１、表１０．１、表１４．１、および／または表１５．１のいずれかに記載されたバリアントフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドである、項目９〜１１のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１３)
Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓバリアント酵素である、項目９〜１２のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１４)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより熱安定性である、項目９〜１３のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１５)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼよりタンパク質分解に耐性を示す、項目９〜１４のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１６)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、少なくとも１つの消化管酵素によるタンパク質分解に耐性を示す、項目１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１７)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、キモトリプシン、トリプシン、カルボキシペプチダーゼ、および／またはエラスターゼによるタンパク質分解に耐性を示す、項目１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１８)
野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより酸安定性である、項目９〜１７のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目１９)
精製されている、項目１〜８のいずれかに記載の操作されたポリペプチド、または項目９〜１８のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
(項目２０)
項目１〜８、もしくは１９に記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチド、および／または項目９〜１９のいずれか一項に記載のフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２１)
制御配列に作動可能に連結されている、項目２０に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２２)
前記ポリヌクレオチドがコドン最適化されている、項目２０および／または２１に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
(項目２３)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチド配列、および少なくとも１つの制御配を含む、発現ベクター。
(項目２４)
前記制御配列がプロモーターを含む、項目２３に記載の発現ベクター。
(項目２５)
前記プロモーターが異種プロモーターである、項目２４に記載の発現ベクター。
(項目２６)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、および／または項目２３〜２５のいずれかに記載の発現ベクターで形質転換された宿主細胞。
(項目２７)
前記宿主細胞がＥ．ｃｏｌｉである、項目２６に記載の宿主細胞。
(項目２８)
宿主細胞において操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを生成する方法であって、項目１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／もしくはフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする少なくとも１つのポリヌクレオチド、ならびに／または項目２０〜２２に記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、ならびに／または項目２３〜２５のいずれかに記載の少なくとも１つの発現ベクターを含む宿主細胞を、少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドが生成されるように、適切な培養条件下で培養するステップを含む、方法。
(項目２９)
培養物および／または宿主細胞から少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを回収するステップをさらに含む、項目２８に記載の方法。
(項目３０)
前記少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを精製するステップをさらに含む、項目２９に記載の方法。
(項目３１)
項目１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／または操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを含む、組成物。
(項目３２)
項目２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含む、組成物。
(項目３３)
医薬組成物である、項目３１および／または３２に記載の組成物。
(項目３４)
少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤および／または担体をさらに含む、項目３２および／または３３に記載の組成物。
(項目３５)
フェニルケトン尿症の処置に適している、項目３１〜３４のいずれかに記載の組成物。
(項目３６)
上昇した血中フェニルアラニンの処置に適している、項目３１〜３５のいずれかに記載の組成物。
(項目３７)
チロシン血症の処置に適している、項目３１〜３６のいずれかに記載の組成物。
(項目３８)
上昇した血中チロシンの処置に適している、項目３１〜３７のいずれかに記載の組成物。
(項目３９)
遺伝子治療における使用に適している、項目３１に記載の組成物。
(項目４０)
フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するための遺伝子治療における使用に適している、項目３９に記載の組成物。
(項目４１)
ｍＲＮＡ治療における使用に適している、項目３１に記載の組成物。
(項目４２)
フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するためのｍＲＮＡ治療における使用に適している、項目４１に記載の組成物。
(項目４３)
ヒトへの経口投与に適している、項目３１〜４２のいずれかに記載の組成物。
(項目４４)
丸剤、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ、液体、またはエマルジョンの形態である、項目３１〜３８、および／または４３のいずれかに記載の組成物。
(項目４５)
前記丸剤、錠剤、カプセル剤、またはゲルキャップが、腸溶コーティングをさらに含む、項目４４に記載の組成物。
(項目４６)
ヒトへの非経口注射に適している、項目３１〜４３のいずれかに記載の組成物。
(項目４７)
少なくとも１つの追加の治療有効化合物と共に投与される、項目３１〜４６のいずれかに記載の組成物。
(項目４８)
少なくとも１つの追加の治療有効化合物を含む、項目４７に記載の組成物。
(項目４９)
対象におけるフェニルケトン尿症の症状を処置および／または防止する方法であって、フェニルケトン尿症を有する対象を提供するステップと、項目３１〜４８のいずれかに記載の組成物を前記対象に提供するステップとを含む、方法。
(項目５０)
前記対象の血液中のフェニルアラニン濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると低減する、項目４９に記載の方法。
(項目５１)
前記対象の血液中のケイ皮酸濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると増加する、項目４９および／または５０に記載の方法。
(項目５２)
フェニルケトン尿症の前記症状が改善される、項目４９〜５１のいずれかに記載の方法。
(項目５３)
前記対象が、項目１〜１９に記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／またはフェニルアラニンアンモニアリアーゼを含む少なくとも１つの医薬組成物を提供されていない対象に必要とされる食事よりフェニルアラニン含量が少なく制限された食事を摂ることができる、項目４９〜５２のいずれかに記載の方法。
(項目５４)
前記対象が、乳児、小児、若年成人、または成人である、項目４９〜５３のいずれかに記載の方法。
(項目５５)
項目３１〜４８のいずれかに記載された組成物の使用。
Claims (55)
- 配列番号４、６、８、１０、および／または１２の少なくとも１つに対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む操作されたポリペプチドであって、前記アミノ酸配列のアミノ酸位置が、配列番号２のアミノ酸配列を参照して番号付けされる、操作されたポリペプチド。
- １６、１６／１５０、４４／５６、４４／５６／１０２／２３９／２８５／４６９／４７０／４９５、４４／２３９、４４／２３９／２８５／４６９／４９５、４４／２３９／２８５／４７０、４４／２３９／４６９／４７０、４４／２３９／４７０／５４６、４４／２３９／４９５、４４／２３９／４９５／５４６、４４／４６９／４７０、１０２、１０２／４７０、１６２、１６５、１８８、２３９／２８５、２３９／２８５／４６９、２３９／４６９／４７０／４９５、２６４、２６７、２８５／４６９／４７０／４９５、２８５／４７０、２８５／４７０／４９５、３６４、４５５、４６９／４７０、４７２、および４８２から選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
- １６、２６４、３６４、４７２、４８２、および／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換を含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
- ４４／４７／２０４／２０９／２８５、４４／４７／３６４／４７０／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／２８５／３６４／４９５、４４／５４／５６／２０４／２３９／４７０／４９５、４４／５４／２８５／４７０、４４／１０２／２８５／３６４、４４／２０４／２０９／２８５、４４／２０４／２８５／３６４／４７０／４９５、４４／２０９／２８５／４６０／４９５、４４／２８５／３６４、４７／５４／２０９、４７／２０４／２０９／２３９／２８５／４９５、４７／２０４／２８５／３６４／４９５、４７／２０９／２３９／３６４、４７／２３９／２８５／３６４、４７／４７０、５４、５４／５６、５４／５６／２０４／２０９／４７０、５４／５６／２０４／２０９／４９５、５４／５６／２０４／４９５、５４／５６／２０９／５６２、５４／５６／２８５／３６４／４７０、５４／５６／２８５／４７０、５４／１６５／２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、５４／２３９／４９５、５４／２８５／４７０、５４／４７０、５６、１６５、２０４、２０４／２０９／２３９／２８５／４７０／４９５、２０４／２０９／３６４、２０４／２０９／３６４／４９５、２０４／２３９、２０４／２３９／２８５、２０４／３６４、２０４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０、２０９／２８５／３６４／４７０／４９５、２０９／３６４、２０９／３６４／４９５、２０９／４７０、２３９／３６４、２８５／３６４、２８５／３６４／４９５、３６４、３６４／４７０、４７０、および４９５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号８を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
- １６、１６／１５０、１６２、１８８、２６４、２６７、３９８、４３４、４７２、および４８２、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号６を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
- ５４／５６／１６２／２０４／２８５、５４／５６／１６２／２０４／３９８、５４／５６／２０４／２８５、５４／５６／２０４／３９８、５４／５６／２０４／３９８／４７２、５４／５６／２８５、５４／５６／３９８、５４／５６／３９８／４７２、５４／１６２／２０４／３９８、５４／１６２／３９８、５４／２０４／２８５／３９８／４７２、５４／２０４／３９８、５４／２８５／３９８、５４／２８５／３９８／４７２、５６／１６２／３９８、５６／２０４／２８５、５６／２０４／３９８、５６／２０４／３９８／４６０、５６／２０４／３９８／４７２、５６／２８５、５６／２８５／３９８／４７２、５６／３９８、５６／３９８／４７２、および２０１／２０４／３９８、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
- １６、１８、３９、４７、５４、５９、７３、９１、２０９、２１４、２８５、２９０、３０５、３０７、３６４、４０７、４５０、４７０、５０３、５２１、５２４、および５６５、ならびに／またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のアミノ酸位置に、少なくとも１個の置換または置換のセットを含み、前記アミノ酸位置が配列番号１２を参照して番号付けされる、請求項１に記載の操作されたポリペプチド。
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１５／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／１９／２１４／４０７、１６／１８／２３／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４３／４４／５９／２０９／５０３／５６５、１６／１８／３９／４５／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／４９／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３１３／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／５０３、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／９８／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／５９／９１／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／４７／５４／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５４／２０９／２１４／４０７／５０３／５２４／５６５、１６／１８／３９／４７／５９／７３／９１／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１、１６／１８／３９／４７／５９／２１４／５０３／５６５、１６／１８／３９／４７／９１／２９０／４０７、１６／１８／３９／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２０９／２１４／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／５９／７３／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１０／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／５４／７３／９８／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／３９／５４／９１／２１４／２８５／２９０／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／３９／９１／５０３／５２１、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２８５／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／５９／７３／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５４／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／４７／５９／２８５／４０７／４５０／５６５、１６／１８／４７／７３／９１／２０９／２８５／２９０／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／１８／４７／７３／２１４／３０７／５０３、１６／１８／４７／７３／２９０／４０７／４５０、１６／１８／４７／２０９、１６／１８／４７／２８５／３６４／５０３／５２１、１６／１８／４７／３６４／４０７、１６／１８／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／１８／５４／５９／２９０／４０７／４５０／５０３／５２４、１６／１８／５４／７３／９１／２１４／２８５／２９０／４０７／５６１、１６／１８／５４／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／１８／５４／４０７、１６／１８／５５／２０９／２８５／３０５、１６／１８／５９／２０９／４５０／５０３／５２４、１６／１８／７３／２０９／２１４／４５０、１６／１８／９１／２０９／４０７／５０３、１６／１８／９１／２１４／４０７／５２１／５２４／５６５、１６／１８／２０９／４５０／５０３、１６／１８／２１４／４０７／４５０／５０３、１６／１８／２８５／２９０／４７０、１６／１８／５０３、１６／２２／２１４／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／９８／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２１４／２９０／３０５／４０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２０９／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０７／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／４５０／４７０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０５／３６４／４０７／４５０／５０３／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２８５／２９０／３０７／３６４／４０７／４５０／５０３／５２１／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９１／２１４／２９０／３６４／４０７／４５０／４７０／５２４／５６５、１６／３９／４７／５４／５９／７３／９８／２０９／２８５／３０５／３０７／４０７／４５０／４７０／５０３／５２４、１６／３９／４７／５４／５９／７３／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０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２８７／２９０／２９１／３０７／３６４／４０７／４５０／４７０／５２１／５２４、３９／５４／５９／９１／９８／２８５／２９０／５０３／５２１／５２４／５６５、３９／５４／５９／９１／２０９／２１４／２８５／２９０／３０５／３０７／３６４／４０
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- 請求項１〜８のいずれかに記載された操作されたポリペプチドを含む、操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 配列番号２、４、６、８、１０、および／もしくは１２、またはその機能的断片に対して、少なくとも約９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項９および／または１０に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 表６．１、表７．１、表８．１、表９．１、表１０．１、表１４．１、および／または表１５．１のいずれかに記載されたバリアントフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドである、請求項９〜１１のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓバリアント酵素である、請求項９〜１２のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより熱安定性である、請求項９〜１３のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼよりタンパク質分解に耐性を示す、請求項９〜１４のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、少なくとも１つの消化管酵素によるタンパク質分解に耐性を示す、請求項１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより、キモトリプシン、トリプシン、カルボキシペプチダーゼ、および／またはエラスターゼによるタンパク質分解に耐性を示す、請求項１５に記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 野生型Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓフェニルアラニンアンモニアリアーゼより酸安定性である、請求項９〜１７のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 精製されている、請求項１〜８のいずれかに記載の操作されたポリペプチド、または請求項９〜１８のいずれかに記載の操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド。
- 請求項１〜８、もしくは１９に記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチド、および／または請求項９〜１９のいずれか一項に記載のフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする操作されたポリヌクレオチド配列。
- 制御配列に作動可能に連結されている、請求項２０に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
- 前記ポリヌクレオチドがコドン最適化されている、請求項２０および／または２１に記載の操作されたポリヌクレオチド配列。
- 請求項２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチド配列、および少なくとも１つの制御配列を含む、発現ベクター。
- 前記制御配列がプロモーターを含む、請求項２３に記載の発現ベクター。
- 前記プロモーターが異種プロモーターである、請求項２４に記載の発現ベクター。
- 請求項２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、および／または請求項２３〜２５のいずれかに記載の発現ベクターで形質転換された宿主細胞。
- 前記宿主細胞がＥ．ｃｏｌｉである、請求項２６に記載の宿主細胞。
- 宿主細胞において操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを生成する方法であって、請求項１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／もしくはフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドをコードする少なくとも１つのポリヌクレオチド、ならびに／または請求項２０〜２２に記載の少なくとも１つのポリヌクレオチド配列、ならびに／または請求項２３〜２５のいずれかに記載の少なくとも１つの発現ベクターを含む宿主細胞を、少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドが生成されるように、適切な培養条件下で培養するステップを含む、方法。
- 培養物および／または宿主細胞から少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを回収するステップをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを精製するステップをさらに含む、請求項２９に記載の方法。
- 請求項１〜１９のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリペプチドおよび／または操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチドを含む、組成物。
- 請求項２０〜２２のいずれかに記載の少なくとも１つの操作されたポリヌクレオチドを含む、組成物。
- 医薬組成物である、請求項３１および／または３２に記載の組成物。
- 少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤および／または担体をさらに含む、請求項３２および／または３３に記載の組成物。
- フェニルケトン尿症の処置に適している、請求項３１〜３４のいずれかに記載の組成物。
- 上昇した血中フェニルアラニンの処置に適している、請求項３１〜３５のいずれかに記載の組成物。
- チロシン血症の処置に適している、請求項３１〜３６のいずれかに記載の組成物。
- 上昇した血中チロシンの処置に適している、請求項３１〜３７のいずれかに記載の組成物。
- 遺伝子治療における使用に適している、請求項３１に記載の組成物。
- フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するための遺伝子治療における使用に適している、請求項３９に記載の組成物。
- ｍＲＮＡ治療における使用に適している、請求項３１に記載の組成物。
- フェニルケトン尿症、上昇した血中フェニルアラニン、チロシン血症、および／または上昇した血中チロシン血症を処置するためのｍＲＮＡ治療における使用に適している、請求項４１に記載の組成物。
- ヒトへの経口投与に適している、請求項３１〜４２のいずれかに記載の組成物。
- 丸剤、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ、液体、またはエマルジョンの形態である、請求項３１〜３８、および／または４３のいずれかに記載の組成物。
- 前記丸剤、錠剤、カプセル剤、またはゲルキャップが、腸溶コーティングをさらに含む、請求項４４に記載の組成物。
- ヒトへの非経口注射に適している、請求項３１〜４３のいずれかに記載の組成物。
- 少なくとも１つの追加の治療有効化合物と共に投与される、請求項３１〜４６のいずれかに記載の組成物。
- 少なくとも１つの追加の治療有効化合物を含む、請求項４７に記載の組成物。
- 対象におけるフェニルケトン尿症の症状を処置および／または防止するための、請求項３１〜４８のいずれかに記載の組成物。
- 前記対象の血液中のフェニルアラニン濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると低減する、請求項４９に記載の組成物。
- 前記対象の血液中のケイ皮酸濃度が、前記組成物を前記対象に提供すると増加する、請求項４９および／または５０に記載の組成物。
- フェニルケトン尿症の前記症状が改善される、請求項４９〜５１のいずれかに記載の組成物。
- 前記対象が、前記組成物を提供されていない対象に必要とされる食事よりフェニルアラニン含量が少なく制限された食事を摂ることができる、請求項４９〜５２のいずれかに記載の組成物。
- 前記対象が、乳児、小児、若年成人、または成人である、請求項４９〜５３のいずれかに記載の組成物。
- 請求項３１〜４８のいずれかに記載された組成物の使用。
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