JP2020503254A5 - - Google Patents
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Description
(参考文献)
本件出願は、以下の態様の発明を提供する。
（態様１）
治療活性ペイロードの標的化送達のための送達システムであって：
・アビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンからなるアビジンコア；
・抗体単鎖可変断片(scFv)及びアプタマーからなる群から選択される少なくとも1つの標的化分子；並びに
・タンパク質、ペプチド、及び治療活性核酸からなる群から選択される少なくとも1つの治療活性ペイロードを含み、
・該少なくとも1つの標的化分子及び該少なくとも1つの治療活性ペイロードが、該アビジンコアと結合しており；
・該抗体単鎖可変断片が、以下の構造を有するコンストラクト中に含まれており：
抗体単鎖可変断片―BAP；又は
抗体単鎖可変断片―リンカー―BAP；かつ
・このコンストラクトが、BAPでモノビオチン化されている、前記送達システム。
（態様２）
a. 1つの抗体単鎖可変断片及び3つの治療活性核酸、又は
b. 2つの抗体単鎖可変断片及び2つの治療活性核酸、又は
c. 3つの抗体単鎖可変断片及び1つの治療活性核酸、
を含む、態様1記載の送達システム。
（態様３）
前記抗体単鎖可変断片が、scFv(AM1)(配列番号：1)、scFv(h-AM-1)(配列番号：2)、及びscFv(MR1.1)(配列番号：3又は配列番号：4)から選択される、態様1又は2記載の送達システム。
（態様４）
前記BAPが、
（化１）
(ここで、X 1 ＝任意のアミノ酸；及び
X 2 ＝L、V、I、W、F、又はYを除く任意のアミノ酸である)；
（化２）
からなる群から選択される、態様1〜3のいずれか1項記載の送達システム。
（態様５）
前記リンカーペプチドが：
・2つのアミノ酸、例えばGS；
・6つのアミノ酸；及び
・10個のアミノ酸、例えば
（化３）
のアミノ酸配列を有するc-mycタグ
からなる群から選択される、態様1〜4のいずれか1項記載の送達システム。
（態様６）
前記治療活性ペイロードが、CpGオリゴヌクレオチド、ssDNA、dsDNA、ssRNA、又はdsRNA、好ましくはdsRNAからなる群から選択される治療活性核酸、態様1〜5のいずれか1項記載の送達システム。
（態様７）
前記治療活性ペイロード、好ましくは治療活性核酸が、ビオチン化されている、態様1〜6のいずれか1項記載の送達システム。
（態様８）
前記治療活性核酸が、グリコデンドリマーを含む担体中に含まれているsiRNAである、態様1〜7のいずれか1項記載の送達システム。
（態様９）
前記グリコデンドリマーが、トランスフェクション不能なヌクレオチド担体であり、該グリコデンドリマーが、siRNAと複合体形成する際に1つのビオチン分子を含む、好適にはmal19-PPIに基づくマルトース-ポリプロピレン-イミン(mal-PPI)デンドリマーを含む、態様8記載の送達システム。
（態様１０）
少なくとも1つの抗体単鎖断片を介して、癌細胞の細胞膜に又はその中に特異的に発現する表面抗原と結合する、態様1〜9のいずれか1項記載の送達システム。
（態様１１）
a) scFv-BAP-ビオチンコンジュゲートを調製する工程；
b) 該scFv-BAP-ビオチンコンジュゲートをアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンからなる前記アビジンコアとともにインキュベートする工程であって、scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体が形成される、前記工程；及び
c) 治療活性核酸-ビオチンコンジュゲートを加え、かつ該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体をビオチン化治療活性核酸とともにインキュベートする工程；及び
d) 該ビオチン化治療活性核酸を該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体のアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンと結合させることにより、前記送達システムを形成させる工程、を含む態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムの組立て方法。
（態様１２）
前記治療活性成分がsiRNAであり、かつ該siRNAを予め形成されたscFv-BAP-アビジン/ニュートラビジン/ストレプトアビジン複合体とコンジュゲートさせる、態様11記載の方法であって：
a) マルトース-PPI-ビオチンコンジュゲートを調製する工程；
b) 該マルトース-PPI-ビオチンコンジュゲートを該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体とともにインキュベートする工程であって、該マルトース-PPIが陽イオン電荷を有する、前記工程；
c) 該マルトース-PPI-ビオチン複合体を該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体のアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンと結合させる工程；
d) 別個に、マルトース-PPIをsiRNAとともにインキュベートする工程であって、弱い陰イオン電荷を有するマルトース-PPI-siRNAデンドリマーが形成される、前記工程；
e) 工程c)から得られる複合体を工程d)の該マルトース-PPI-siRNAデンドリマーとともにインキュベートする工程；及び
f) アビジン/ニュートラビジンコアと結合したscFv-BAP,マルトース-PPI-ビオチン/マルトース-PPI-siRNAデンドリマーを含む、腫瘍標的化多要素集合体を形成させる工程、を含む、前記方法。
（態様１３）
・チロシンキナーゼ阻害剤又はモノクローナル抗体；
・ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、及びオシメルチニブ及びセツキシマブ；並びに
・CimaVax-EGF
から選択されるEGF受容体阻害剤を任意にさらに含む、態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムを含む医薬組成物。
（態様１４）
家族性高コレステロール血症などの代謝性疾患、ウイルス感染症、及び多形神経膠芽腫(GBM)のような原発性腫瘍又は転移性癌などの増殖性疾患の治療における使用のための態様1〜10のいずれか1項記載の送達システム又は態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムを含む医薬組成物。
（態様１）
治療活性ペイロードの標的化送達のための送達システムであって：
・アビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンからなるアビジンコア；
・抗体単鎖可変断片(scFv)及びアプタマーからなる群から選択される少なくとも1つの標的化分子；並びに
・タンパク質、ペプチド、及び治療活性核酸からなる群から選択される少なくとも1つの治療活性ペイロードを含み、
・該少なくとも1つの標的化分子及び該少なくとも1つの治療活性ペイロードが、該アビジンコアと結合しており；
・該抗体単鎖可変断片が、以下の構造を有するコンストラクト中に含まれており：
抗体単鎖可変断片―BAP；又は
抗体単鎖可変断片―リンカー―BAP；かつ
・このコンストラクトが、BAPでモノビオチン化されている、前記送達システム。
（態様２）
a. 1つの抗体単鎖可変断片及び3つの治療活性核酸、又は
b. 2つの抗体単鎖可変断片及び2つの治療活性核酸、又は
c. 3つの抗体単鎖可変断片及び1つの治療活性核酸、
を含む、態様1記載の送達システム。
（態様３）
前記抗体単鎖可変断片が、scFv(AM1)(配列番号：1)、scFv(h-AM-1)(配列番号：2)、及びscFv(MR1.1)(配列番号：3又は配列番号：4)から選択される、態様1又は2記載の送達システム。
（態様４）
前記BAPが、
（化１）
X 2 ＝L、V、I、W、F、又はYを除く任意のアミノ酸である)；
（化２）
（態様５）
前記リンカーペプチドが：
・2つのアミノ酸、例えばGS；
・6つのアミノ酸；及び
・10個のアミノ酸、例えば
（化３）
からなる群から選択される、態様1〜4のいずれか1項記載の送達システム。
（態様６）
前記治療活性ペイロードが、CpGオリゴヌクレオチド、ssDNA、dsDNA、ssRNA、又はdsRNA、好ましくはdsRNAからなる群から選択される治療活性核酸、態様1〜5のいずれか1項記載の送達システム。
（態様７）
前記治療活性ペイロード、好ましくは治療活性核酸が、ビオチン化されている、態様1〜6のいずれか1項記載の送達システム。
（態様８）
前記治療活性核酸が、グリコデンドリマーを含む担体中に含まれているsiRNAである、態様1〜7のいずれか1項記載の送達システム。
（態様９）
前記グリコデンドリマーが、トランスフェクション不能なヌクレオチド担体であり、該グリコデンドリマーが、siRNAと複合体形成する際に1つのビオチン分子を含む、好適にはmal19-PPIに基づくマルトース-ポリプロピレン-イミン(mal-PPI)デンドリマーを含む、態様8記載の送達システム。
（態様１０）
少なくとも1つの抗体単鎖断片を介して、癌細胞の細胞膜に又はその中に特異的に発現する表面抗原と結合する、態様1〜9のいずれか1項記載の送達システム。
（態様１１）
a) scFv-BAP-ビオチンコンジュゲートを調製する工程；
b) 該scFv-BAP-ビオチンコンジュゲートをアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンからなる前記アビジンコアとともにインキュベートする工程であって、scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体が形成される、前記工程；及び
c) 治療活性核酸-ビオチンコンジュゲートを加え、かつ該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体をビオチン化治療活性核酸とともにインキュベートする工程；及び
d) 該ビオチン化治療活性核酸を該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体のアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンと結合させることにより、前記送達システムを形成させる工程、を含む態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムの組立て方法。
（態様１２）
前記治療活性成分がsiRNAであり、かつ該siRNAを予め形成されたscFv-BAP-アビジン/ニュートラビジン/ストレプトアビジン複合体とコンジュゲートさせる、態様11記載の方法であって：
a) マルトース-PPI-ビオチンコンジュゲートを調製する工程；
b) 該マルトース-PPI-ビオチンコンジュゲートを該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体とともにインキュベートする工程であって、該マルトース-PPIが陽イオン電荷を有する、前記工程；
c) 該マルトース-PPI-ビオチン複合体を該scFv-BAP-アビジン又はscFv-BAP-ニュートラビジン又はscFv-BAP-ストレプトアビジン複合体のアビジン、ニュートラビジン、又はストレプトアビジンと結合させる工程；
d) 別個に、マルトース-PPIをsiRNAとともにインキュベートする工程であって、弱い陰イオン電荷を有するマルトース-PPI-siRNAデンドリマーが形成される、前記工程；
e) 工程c)から得られる複合体を工程d)の該マルトース-PPI-siRNAデンドリマーとともにインキュベートする工程；及び
f) アビジン/ニュートラビジンコアと結合したscFv-BAP,マルトース-PPI-ビオチン/マルトース-PPI-siRNAデンドリマーを含む、腫瘍標的化多要素集合体を形成させる工程、を含む、前記方法。
（態様１３）
・チロシンキナーゼ阻害剤又はモノクローナル抗体；
・ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、及びオシメルチニブ及びセツキシマブ；並びに
・CimaVax-EGF
から選択されるEGF受容体阻害剤を任意にさらに含む、態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムを含む医薬組成物。
（態様１４）
家族性高コレステロール血症などの代謝性疾患、ウイルス感染症、及び多形神経膠芽腫(GBM)のような原発性腫瘍又は転移性癌などの増殖性疾患の治療における使用のための態様1〜10のいずれか1項記載の送達システム又は態様1〜10のいずれか1項記載の送達システムを含む医薬組成物。
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