JP2020130077A - 窒素ガスを主成分とする気体のファインバブル・ウルトラファインバブルを培養液に含有させる機構を備えた嫌気性菌培養装置、およびこの嫌気性菌培養装置を用いた嫌気性菌培養方法 - Google Patents
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Abstract
Description
1)培養槽内を洗浄する工程
2)培養槽内に培養液を供給する工程
3)高温高圧の水蒸気を用いて、培養槽内等を滅菌処理する工程
4)水蒸気の液化による減圧分を補い培養槽内を陽圧に保つと共に、培養液の溶存酸素濃度を低下させるために、窒素ガスを培養槽内に供給する工程
5)培養液に嫌気性菌を接種し、撹拌機で嫌気性菌培養液を撹拌しながら培養を行う工程
まず、従来の嫌気性菌培養装置および方法について、図6も参照しながら説明する。
本発明の培養装置および培養方法は、培養液1&3に、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させる機構(I)(以下、単に「機構(I)」ともいう。)を用いることを主たる特徴とするものである。
本発明の「ファインバブル・ウルトラファインバブル(微細気泡)」とは、「ファインバブル」および/または「ウルトラファインバブル」を意味する。「通常の気泡」は水中を急速に上昇して表面で破裂して消えるのに対し、「ファインバブル」といわれる直径100μm未満の微小気泡は、水中で縮小していって消滅し、この際に、フリーラジカルと共に、直径1μm未満の極微小気泡である「ウルトラファインバブル」を発生し、この「ウルトラファインバブル」はある程度の長時間水中に残存する。本発明においては、ISO(国際標準化機構)により規格化されているように、個数平均直径が100μm未満の気泡を「ファインバブル」といい、個数平均直径が1μm未満の気泡を「ウルトラファインバブル」という。ファインバブルの気泡径を測定する方法としては、画像解析法、レーザー回折散乱法、電気的検知帯法、共振式質量測定法、光ファイバープローブ法等が一般に用いられ、ウルトラファインバブルの気泡径を測定する方法としては、動的光散乱法、ブラウン運動トラッキング法、電気的検知帯法、共振式質量測定法等が一般に用いられている。
本発明の微細気泡の形態で用いられる窒素ガス主成分の気体は、酸素ガスの含有率が0体積%に限りなく近く、窒素ガスの含有率が90体積%以上、好ましくは99体積%以上、さらに好ましくは100体積%に限りなく近い高純度のものである。窒素ガスは、空気から簡単かつ経済的に得られる不活性ガスであるので、この観点からは、窒素ガス主成分の気体の窒素ガス含有率を100体積%に限りなく近くするのが好ましい。
図1に、本発明の培養装置の第1実施形態を示す。
第1実施形態の培養装置は、図6に示す従来の嫌気性菌培養装置に、機構(I)として、培養液1&3中に配置された焼結金属、多孔質ガラス等の多孔体7に、窒素ガス供給源5から供給される窒素ガス主成分気体の圧力をコンプレッサー6で高圧とし、窒素含有ガス供給経路Aを通じて供給することにより、培養液1&3に、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させる機構を備えたものである。
1)培養槽2内を洗浄し、培養液供給経路Cを通じて培養槽2内に培養液1を供給し、高温高圧の水蒸気を用いて培養槽内等を滅菌処理した後、多孔体7から培養液1に窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させる。
2)培養液1の溶存酸素濃度が、嫌気性菌にストレス・ダメージを与えない程度に十分に低下した段階で、培養液1に嫌気性菌を接種し、撹拌機4で嫌気性菌培養液3を撹拌しながら培養を開始する。
4)培養中に、多孔体7から嫌気性菌培養液3に窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させる。
図2に、本発明の培養装置の第2実施形態を示す。
第2実施形態の培養装置は、図6に示す従来の嫌気性菌培養装置に、機構(I)として、循環ポンプ8を用いて培養液1&3を培養槽2から抜き出し、培養液循環経路Bを通じて微細気泡発生装置9aに供給して、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に還流する機構を設けたものである。微細気泡発生装置9aには、培養液循環経路Bを通じて培養液1&3が供給されると共に、図1の第1実施形態と同様に、窒素含有ガス供給経路Aを通じて、窒素ガス供給源5から供給されコンプレッサー6で高圧とされた窒素ガス主成分気体が供給され、窒素ガス主成分気体の微細気泡が形成される。
1)培養槽2内を洗浄し、培養液供給経路Cを通じて培養槽2内に培養液1を供給し、高温高圧の水蒸気を用いて培養槽内等を滅菌処理した後、循環ポンプ8を用いて培養液1を培養槽2から抜き出し、培養液循環経路Bを通じて微細気泡発生装置9aに供給して窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に還流する。
2)培養液1の溶存酸素濃度が、嫌気性菌にストレス・ダメージを与えない程度に十分に低下した段階で、培養液1に嫌気性菌を接種し、撹拌機4で嫌気性菌培養液3を撹拌しながら培養を開始する。
3)培養中に、循環ポンプ8を用いて嫌気性菌培養液3を培養槽2から抜き出し、培養液循環経路Bを通じて微細気泡発生装置9aに供給して窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に還流する。
図3に、本発明の培養装置の第3実施形態を示す。
第3実施形態の培養装置は、図2に示す機構(I)を備える第2実施形態の培養装置に、さらに機構(II)として、培養液供給経路Cを通じて培養液1を微細気泡発生装置9bに供給し、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に供給する機構を設けたものである。
図4に、本発明の培養装置の第4実施形態を示す。
第4実施形態の培養装置は、第3実施形態の培養装置の機構(I)と機構(II)とを統合し構造を簡素化したものである。第4実施形態の培養装置では、次のような工程で、培養液1&3に、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させる。
1)培養槽内を洗浄した後、バルブ10を開、バルブ11を閉とした状態で、培養液供給経路Cを通じて培養液1を微細気泡発生装置9aに供給し、窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に供給する。
2)高温高圧の水蒸気を用いて培養槽内等を滅菌処理した後、バルブ10を閉、バルブ11を開とした状態で、循環ポンプ8を用いて培養液1を培養槽2から抜き出し、培養液循環経路Bを通じて微細気泡発生装置9aに供給して窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に還流する。
3)培養液1の溶存酸素濃度が、嫌気性菌にストレス・ダメージを与えない程度に十分に低下した段階で、培養液1に嫌気性菌を接種し、撹拌機4で嫌気性菌培養液3を撹拌しながら培養を開始する。
4)培養中に、バルブ10を閉、バルブ11を開とした状態で、循環ポンプ8を用いて嫌気性菌培養液3を培養槽2から抜き出し、培養液循環経路Bを通じて微細気泡発生装置9aに供給して窒素ガス主成分気体の微細気泡を吹き込み含有させた後、培養槽2に還流する。
本発明において用いられる微細気泡発生装置(9aおよび9b)としては、公知あるいは市販されている装置を用いることができ、例えば、ある程度の高圧で十分な量の気体を水中に溶解させた後、その圧力を解放してやることで溶解した気体の過飽和条件を作り出す「加圧溶解型ファインバブル発生装置」や、水流を起こして液体と気体からなる混合流体をループ状の流れとして撹拌混合し、水流によって発生した乱流により気泡が細分化する現象を利用した「ループ流式バブル発生ノズル」等を用いることができる。また、ウルトラファインバブル発生装置としては、例えば、特開2007−312690号公報、特開2006−289183号公報、特開2005−245817号公報、特開2007−136255号公報、特開2009−39600号公報に記載されるような公知のものを用いることもできる。
本発明の培養方法は、本発明の培養装置を用いて、嫌気性菌の培養を行うことにより、
培養開始前における培養液の溶存酸素濃度を効率良く低下させることができると共に、培養中における嫌気性菌培養液の溶存酸素濃度を継続して低く維持でき、嫌気性菌の培養を経済的・効率的に行うことができる。
2 培養槽
3 嫌気性菌培養液
4 撹拌機
4a 電動機
4b 回転軸
4c シール部
4d 撹拌翼
5 窒素ガス供給源
6 コンプレッサー
7 焼結金属、多孔質ガラス等の多孔体
8 循環ポンプ
9a,9b 微細気泡(ファインバブル・ウルトラファインバブル)発生装置
10 バルブ
11 バルブ
A 窒素含有ガス供給経路
B 培養液循環経路
C 培養液供給経路
20 微細気泡(ファインバブル・ウルトラファインバブル)発生装置
21 入口部
22 のど部
23 吸引部
24 気体入口
25 出口部
D 流体(培養開始前に培養槽2から抜き出された培養液1、培養中に培養槽2から抜き出された嫌気性菌培養液3、または培養開始前に培養槽2に供給される培養液1)
E 窒素ガス主成分気体(窒素ガスを主成分とする気体)
F 窒素ガス主成分気体の微細気泡を含有する流体
Claims (7)
- 培養槽に培養液および嫌気性菌を収容して、嫌気性菌を培養する嫌気性菌培養装置において、
上記培養液に、窒素ガスを90体積%以上含有する気体のファインバブル・ウルトラファインバブルを含有させる機構(I)を備えることを特徴とする嫌気性菌培養装置。 - 前記機構(I)が、前記培養液中に配置された多孔体に、窒素ガスを90体積%以上含有する気体を、高圧で供給するものであることを特徴とする、請求項1に記載の嫌気性菌培養装置。
- 前記機構(I)が、前記培養液を前記培養槽から抜き出し、窒素ガスを90体積%以上含有する気体のファインバブル・ウルトラファインバブルを含有させた後、前記培養槽に還流するものであることを特徴とする、請求項1に記載の嫌気性菌培養装置。
- 前記機構(I)と共に、前記培養槽に供給される培養液に、窒素ガスを90体積%以上含有する気体のファインバブル・ウルトラファインバブルを含有させる機構(II)を備えることを特徴とする、請求項1〜3のいずれかに記載の嫌気性菌培養装置。
- 前記窒素ガスを90体積%以上含有する気体が、窒素ガスのみからなることを特徴とする、請求項1〜4のいずれかに記載の嫌気性菌培養装置。
- 前記窒素ガスを90体積%以上含有する気体が、窒素ガスと、水素ガスおよび/または炭酸ガスとの混合気体であることを特徴とする、請求項1〜4のいずれかに記載の嫌気性菌培養装置。
- 前記請求項1〜6のいずれかに記載された嫌気性菌培養装置を用いて、嫌気性菌の培養を行うことを特徴とする、嫌気性菌培養方法。
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