JP2020059743A - 血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体 - Google Patents

血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体 Download PDF

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Abstract

【課題】血管内皮リパーゼ（Endothelial Lipase）の酵素活性を選択的に阻害するヒト化モノクローナル抗体もしくはその抗体断片またはこれを含有する医薬組成物の提供。【解決手段】ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３としてそれぞれ特定のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３としてそれぞれ別の特定のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する血管内皮リパーゼに対するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片（但し、該抗体断片は、血管内皮リパーゼに特異的な結合性を有する。）を含有する注射剤。【選択図】なし

Description

本発明は、血管内皮リパーゼ（Endothelial Lipase。以下、ＥＬと略すこともある。））の活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体又はその抗体断片に関する。具体的には、本発明はＥＬの酵素活性を選択的に阻害するヒト化モノクローナル抗体もしくはその抗体断片またはこれを含有する医薬組成物に関する。
ＥＬは、Triglyceride lipase（以下、ＴＧとする。）ファミリーに属するPhospholipaseである（非特許文献１）。ヒトＥＬは５００残基（ＮＣＢＩ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ． ＮＰ＿００６０２４．１、配列番号：１）のアミノ酸からなる。ヒト以外の哺乳動物のＥＬとしては、例えば、ウサギＥＬ（ＮＣＢＩ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ． ＮＰ＿００１１８２５６７．１）、カニクイザルＥＬ（ＮＣＢＩ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ． ＥＨＨ６１８０５．１）、ヒヒＥＬ（ＮＣＢＩ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ． ＸＰ＿００３９１４４２０．１）、マウスＥＬ（ＮＣＢＩ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ． ＮＰ＿０３４８５０．３）などが知られている。ＴＧファミリーには、Lipoprotein lipase（以下、ＬＰＬとする。）やHepatic lipase（以下、ＨＬとする。）が含まれる。
ＥＬは、その強いPhospholipase活性によりＨＤＬコレステロール（以下、ＨＤＬ−ｃとする。）の代謝に関与することがそのノックアウトマウスやトランスジェニックマウスの解析から明らかとなり、血中ＨＤＬ−ｃ量を規定する因子として注目されている（非特許文献２）。冠動脈疾患(以下、ＣＡＤとする。)と血中ＨＤＬ−ｃ量に負の相関関係が成立することは古くから知られている。ＨＤＬ−ｃは抗酸化作用・抗炎症作用・コレステロール逆転送作用などを介して抗動脈硬化作用を示すとされ、低ＨＤＬ−ｃ血症はＣＡＤのリスクファクターの一つと認識されている。したがって、ＥＬ阻害剤はＨＤＬ−ｃの上昇を介してＣＡＤ治療薬となり、実際にＥＬをノックアウトした病態マウスではＨＤＬ−ｃ上昇と動脈硬化病変部位の減少が報告されている（非特許文献３）。
これらの知見は、ＥＬの選択的阻害剤は脂質代謝異常症や動脈硬化症における治療薬としての有用性を示している。
ＥＬを選択的に阻害することが、脂質代謝異常症や動脈硬化症における治療薬として有用であるため、ＥＬの酵素活性を阻害するＥＬに対する抗体の作製は重要なアプローチの１つとなる。これまでに、ウサギから得たＥＬの酵素活性を阻害するポリクローナルの抗体を作製し、マウスにこの抗体を投与することで、血中ＨＤＬ−ｃ濃度が上昇したことが報告されている（非特許文献４）。
しかし、ＥＬの多様な部位を認識するポリクローナル抗体では、ＥＬに対する阻害の選択性は高くない。また、ＥＬが関与する脂質代謝異常症や動脈硬化症のような慢性疾患の治療薬は、長期間に渡って投薬する必要があるので、ヒトに対して抗原性の高いウサギポリクローナル抗体を医薬品として使用することは不可能である。しかも、抗原性を改善しようにも、ポリクローナル抗体ではそのようなことは困難である。
これらの事情により、ＥＬの酵素活性を選択的に阻害するモノクローナル抗体の作製が求められていた。
Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、１９９９年、第２１巻、４２４ページ ＴＣＭ、第１４巻、第５号、２００４年、ｐ．２０２−２０６ Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｖｏｌ．２７９， Ｎｏ．４３， ２２， ４５０８５−４５０９２， ２００４ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ、２００３年、第１１１巻第３号、３５７ページ
本発明が解決しようとする課題は、ＥＬの酵素活性を選択的に阻害するヒト化モノクローナル抗体もしくはその抗体断片またはこれを含有する医薬組成物を提供することである。
本発明者らは、鋭意研究の結果、ＥＬの酵素活性を選択的に阻害するヒト化モノクローナル抗体を見出すことによって本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、
（１）配列番号１で示されるアミノ酸配列の１位から１５７位を認識する、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（２）配列番号１で示されるアミノ酸配列の５０位から１００位を認識する、前記（１）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（３）配列番号１で示されるアミノ酸配列の５０位のアルギニン、５２位のアスパラギン、５４位のアルギニン、５８位のアスパラギン酸、６０位のグルタミン酸、６１位のヒスチジン、６３位のグリシン、６５位のチロシンまたは１００位のアスパラギンを認識する、前記（１）または（２）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（４）配列番号１で示されるアミノ酸配列の５０位のアルギニン、６０位のグルタミン酸、６１位のヒスチジン、６５位のチロシンまたは１００位のアスパラギンを認識する、前記（１）または（２）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（５）配列番号１で示されるアミノ酸配列の６５位のチロシンを認識する、前記（１）または（２）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片。
（６）配列番号１で示されるアミノ酸配列の２０２位から３０５位を認識する、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（７）配列番号１で示されるアミノ酸配列の２２０位から２７３位を認識する、前記（６）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（８）配列番号１で示されるアミノ酸配列の２２０位のヒスチジン、２２１位のトレオニン、２２２位のチロシン、２２３位のトレオニン、２２４位のアルギニン、２２６位のフェニルアラニン、２２７位のグリシン、２３１位のグリシン、２３２位のイソロイシン、２３３位のグルタミン、２３４位のメチオニン、２４０位のアスパラギン酸、２４２位のチロシン、２４３位のプロリン、２４４位のアスパラギン、２４６位のグリシン、２４９位のグルタミン、２５０位のプロリン、２５１位のグリシン、２５４位のロイシン、２５８位のロイシン、２６３位のチロシン、２６９位のバリンまたは２７３位のグルタミン酸を認識する、前記（６）または（７）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（９）配列番号１で示されるアミノ酸配列の２２０位のヒスチジン、２２１位のトレオニン、２４０位のアスパラギン酸、２４２位のチロシン、２４３位のプロリン、２４４位のアスパラギン、２４６位のグリシン、２４９位のグルタミン、２５０位のプロリンまたは２５１位のグリシンを認識する、前記（６）または（７）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（１０）配列番号１で示されるアミノ酸配列の２２０位のヒスチジン、２２１位のトレオニン、２４０位のアスパラギン酸、２４２位のチロシン、２４３位のプロリン、２４４位のアスパラギン、２４６位のグリシン、２４９位のグルタミン、２５０位のプロリンおよび２５１位を認識する、前記（６）または（７）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（１１）血管内皮リパーゼを、１０ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する、前記（１）から（１０）いずれかに記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（１２）血管内皮リパーゼを、５ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する、前記（１１）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（１３）血管内皮リパーゼを、２ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する、前記（１１）に記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（１４）１）配列番号２、配列番号３および配列番号４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２）配列番号２、配列番号３および配列番号４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３）配列番号２、配列番号３および配列番号４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４）配列番号２、配列番号３および配列番号４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２）配列番号２、配列番号３および配列番号８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１８）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１９）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２０）配列番号２、配列番号３および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２１）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２２）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２３）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２４）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２５）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２６）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２７）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２８）配列番号１１、配列番号１２および配列番号１０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５、配列番号６および配列番号９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２９）配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３０）配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３１）配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３２）配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３３）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３４）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３５）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３６）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３７）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３８）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３９）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４０）配列番号１９、配列番号１４および配列番号２０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４１）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４２）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４３）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４４）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４５）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４６）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４７）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４８）配列番号２２、配列番号２３および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４９）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５０）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５１）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５２）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５３）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５４）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５５）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５６）配列番号２５、配列番号１０６および配列番号２４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号１６、配列番号１７および配列番号２１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５７）配列番号２６、配列番号２７および配列番号２８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号２９、配列番号３０および配列番号３１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５８）配列番号２６、配列番号２７および配列番号２８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号２９、配列番号３０および配列番号３１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５９）配列番号２６、配列番号２７および配列番号２８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号２９、配列番号３０および配列番号３１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６０）配列番号２６、配列番号２７および配列番号２８のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号２９、配列番号３０および配列番号３１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６１）配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号３５、配列番号３６および配列番号３７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６２）配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号３５、配列番号３６および配列番号３７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６３）配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号３５、配列番号３６および配列番号３７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６４）配列番号３２、配列番号３３および配列番号３４のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号３５、配列番号３６および配列番号３７のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６５）配列番号３８、配列番号３９および配列番号４０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６６）配列番号３８、配列番号３９および配列番号４０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６７）配列番号３８、配列番号３９および配列番号４０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６８）配列番号３８、配列番号３９および配列番号４０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６９）配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７０）配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７１）配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７２）配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７３）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７４）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７５）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７６）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５０のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７７）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７８）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７９）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８０）配列番号４４、配列番号４５および配列番号５１のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８１）配列番号５２、配列番号４５および配列番号５３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８２）配列番号５２、配列番号４５および配列番号５３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８３）配列番号５２、配列番号４５および配列番号５３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８４）配列番号５２、配列番号４５および配列番号５３のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号４７、配列番号４８および配列番号４９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８５）配列番号５４、配列番号５５および配列番号５６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５７、配列番号５８および配列番号５９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８６）配列番号５４、配列番号５５および配列番号５６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５７、配列番号５８および配列番号５９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８７）配列番号５４、配列番号５５および配列番号５６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５７、配列番号５８および配列番号５９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８８）配列番号５４、配列番号５５および配列番号５６のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ならびに、
配列番号５７、配列番号５８および配列番号５９のアミノ酸配列を有する３つのＣＤＲのうち１つ以上のＣＤＲにおいて１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
からなる群から選ばれるヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片。
（１５）１）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３）配列番号６０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４）配列番号６０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１）配列番号６３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２）配列番号６３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５）配列番号６３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６）配列番号６３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１８）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１９）配列番号６５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２０）配列番号６５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２１）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２２）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２３）配列番号６５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２４）配列番号６５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２５）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２６）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２７）配列番号６６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２８）配列番号６６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２９）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３０）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３１）配列番号６６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３２）配列番号６６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３３）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３４）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３５）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３６）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３７）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３８）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３９）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４０）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４１）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４２）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号６９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４３）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４４）配列番号６２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号６９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４５）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４６）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４７）配列番号７０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４８）配列番号７０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４９）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５０）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５１）配列番号７２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５２）配列番号７２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５３）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５４）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５５）配列番号７２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５６）配列番号７２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５７）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５８）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５９）配列番号７４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６０）配列番号７４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６１）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６２）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６３）配列番号７４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６４）配列番号７４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６５）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６６）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６７）配列番号７５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６８）配列番号７５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６９）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７０）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７１）配列番号７５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７２）配列番号７５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７３）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７４）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７５）配列番号７０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７６）配列番号７０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７７）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７８）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７９）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８０）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８１）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８２）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８３）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８４）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８５）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８６）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８７）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８８）配列番号７７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８９）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９０）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９１）配列番号８１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９２）配列番号８１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９３）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９４）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９５）配列番号８１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９６）配列番号８１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号７８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９７）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９８）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９９）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１００）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０１）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０２）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０３）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０４）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０５）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０６）配列番号８２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０７）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０８）配列番号８２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０９）配列番号８６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１０）配列番号８６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１１）配列番号８６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１２）配列番号８６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１３）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１４）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１５）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１６）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１７）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１８）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号８９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１９）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２０）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号８９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２１）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２２）配列番号８７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２３）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２４）配列番号８７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９０のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２５）配列番号９１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２６）配列番号９１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２７）配列番号９１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２８）配列番号９１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２９）配列番号９３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３０）配列番号９３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３１）配列番号９３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３２）配列番号９３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３３）配列番号９１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３４）配列番号９１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３５）配列番号９１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３６）配列番号９１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３７）配列番号９３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３８）配列番号９３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３９）配列番号９３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４０）配列番号９３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４１）配列番号９５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４２）配列番号９５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４３）配列番号９５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４４）配列番号９５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４５）配列番号９７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４６）配列番号９７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４７）配列番号９７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４８）配列番号９７のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４９）配列番号９８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５０）配列番号９８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５１）配列番号９８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５２）配列番号９８のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５３）配列番号９９のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５４）配列番号９９のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５５）配列番号９９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５６）配列番号９９のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号９６のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５７）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５８）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５９）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６０）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０１のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６１）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６２）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６３）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６４）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０２のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６５）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号１０３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６６）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６７）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６８）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０３のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６９）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号１０４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７０）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７１）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７２）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０４のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７３）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号１０５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７４）配列番号１００のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７５）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７６）配列番号１００のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する重鎖可変領域、および
配列番号１０５のアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸を有する軽鎖可変領域を有し、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
からなる群から選ばれるヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片。
（１６）１）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
４）配列番号６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
５）配列番号６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
６）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
７）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
８）配列番号６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
９）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１０）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１１）配列番号６５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１２）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６７のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１３）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１４）配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号６９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１５）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１６）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１７）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１８）配列番号７０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
１９）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２０）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２１）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２２）配列番号７２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２３）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２４）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２５）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２６）配列番号７４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２７）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２８）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
２９）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３０）配列番号７５のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３１）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３２）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３３）配列番号７７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３４）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３５）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３６）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号７６のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３７）配列番号８１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３８）配列番号８６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８３のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
３９）配列番号８６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および、
配列番号８４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
からなる群から選ばれるヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片。
（１７）前記（１）から（１６）のいずれかに記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片を含有する、血管内皮リパーゼが関連する疾患の治療または予防のための医薬組成物、
（１８）血管内皮リパーゼが関連する疾患が脂質代謝異常症である、（１７）記載の医薬組成物。
（１９）血管内皮リパーゼが関連する疾患の治療または予防のための、前記（１）〜（１６）のいずれかに記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（２０）血管内皮リパーゼが関連する疾患が脂質代謝異常症である（１９）記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片、
（２１）前記（１）〜（１６）のいずれかに記載のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片を投与することを特徴とする、血管内皮リパーゼが関連する疾患の予防または治療方法、
（２１）血管内皮リパーゼが関連する疾患が脂質代謝異常症である（２１）記載の方法、
に関する。
本発明のヒト化モノクローナル抗体は、ＥＬの酵素活性を選択的に阻害する活性を有するので、本発明のヒト化モノクローナル抗体を含む医薬組成物は、医薬品、特に、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病、肥満および／またはシンドロームＸの治療および／または予防のための医薬として非常に有用である。
図１Ａは、５５Ａ１抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｂは、７Ｄ４抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｃは、１４Ａ１抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｄは、２Ｄ５抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｅは、５３Ａ１１抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｆは、１３Ｂ３抗体のカニクイザル、ヒヒ、ウサギ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｇは、２３Ｈ８抗体のカニクイザル、ヒヒ、ウサギおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｈは、１６Ｂ３抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬおよびヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｉは、１６Ｅ７抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬおよびヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｊは、１４Ｅ１抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬおよびヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図１Ｋは、１９Ｅ７抗体のカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬおよびヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ａは、５５Ａ１抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｂは、７Ｄ４抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｃは、１４Ａ１抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｄは、２Ｄ５抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｅは、５３Ａ１１抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｆは、１３Ｂ３抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｇは、２３Ｈ８抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｈは、１６Ｂ３抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｉは、１６Ｅ７抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｊは、１４Ｅ１抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｋは、１９Ｅ７抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図２Ｌは、１６Ｆ６抗体の、ヒトＨＬおよびヒトＬＰＬに対する酵素活性阻害能を測定した結果を示す。 図３Ａは、５５Ａ１抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｂは、７Ｄ４抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｃは、１４Ａ１抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｄは、２Ｄ５抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｅは、５３Ａ１１抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｆは、１３Ｂ３抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｇは、２３Ｈ８抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｈは、１６Ｂ３抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｉは、１６Ｅ７抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｊは、１４Ｅ１抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｋは、１９Ｅ７抗体の、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図３Ｌは、１６Ｆ６抗体の、ヒヒＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（１８７−５００）マウスキメラＥＬに対する結合性を測定した結果を示す。 図４Ａは、５５Ａ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｂは、７Ｄ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｃは、１４Ａ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｄは、２Ｄ５抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｅは、５３Ａ１１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｆは、１３Ｂ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｇは、２３Ｈ８抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｈは、１６Ｂ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｉは、１６Ｅ７抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｊは、１４Ｅ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｋは、１９Ｅ７抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図４Ｌは、１６Ｆ６抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図５Ａは、５５Ａ１抗体、７Ｄ４抗体、１４Ａ１抗体および２Ｄ５抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図５Ｂは、５５Ａ１抗体、７Ｄ４抗体、１４Ａ１抗体および２Ｄ５抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図５Ｃは、５３Ａ１１抗体、１３Ｂ３抗体および２３Ｈ８抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図５Ｄは、５３Ａ１１抗体、１３Ｂ３抗体および２３Ｈ８抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図６Ａは、１６Ｂ３抗体および１６Ｅ７抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図６Ｂは、１６Ｂ３抗体および１６Ｅ７抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図６Ｃは、１４Ｅ１抗体および１９Ｅ１抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図６Ｄは、１４Ｅ１抗体および１９Ｅ１抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図７Ａは、変異を導入したヒヒＥＬに対する５５Ａ１抗体の結合性を示す。 図７Ｂは、変異を導入したヒヒＥＬに対する７Ｄ４抗体の結合性を示す。 図７Ｃは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１４Ａ１抗体の結合性を示す。 図７Ｄは、変異を導入したヒヒＥＬに対する２Ｄ５抗体の結合性を示す。 図７Ｅは、変異を導入したヒヒＥＬに対する５３Ａ１１抗体の結合性を示す。 図７Ｆは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１３Ｂ３抗体の結合性を示す。 図７Ｇは、変異を導入したヒヒＥＬに対する２３Ｈ８抗体の結合性を示す。 図７Ｈは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１６Ｂ３抗体の結合性を示す。 図７Ｉは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１６Ｅ７抗体の結合性を示す。 図７Ｊは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１４Ｅ１抗体の結合性を示す。 図７Ｋは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１９Ｅ７抗体の結合性を示す。 図７Ｌは、変異を導入したヒヒＥＬに対する１６Ｆ６抗体の結合性を示す。 図８Ａは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ１〜Ｓ７抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図８Ｂは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ１〜Ｓ７抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図８Ｃは、ｈ１６Ｂ３−Ｆ１〜Ｆ３抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図８Ｃは、ｈ１６Ｂ３−Ｆ１〜Ｆ３抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図９Ａは、ｈ５５Ａ１−Ｓ１〜Ｓ７抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図９Ｂは、ｈ５５Ａ１−Ｓ１〜Ｓ７抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図９Ｃは、ｈ５５Ａ１−Ｆ１〜Ｆ６抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図９Ｄは、ｈ５５Ａ１−Ｆ１〜Ｆ６抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１０Ａは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１〜Ｓ４抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１０Ｂは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１〜Ｓ４抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１１Ａは、ｈ２３Ｈ８−Ｓ１〜Ｓ３抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１１Ｂは、ｈ２３Ｈ８−Ｓ１〜Ｓ３抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１２Ａは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ１〜Ｓ４抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１２Ｂは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ１〜Ｓ４抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１３Ａは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ１〜Ｓ４抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１３Ｂは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ１〜Ｓ４抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１４Ａは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ１〜Ｓ５抗体の重鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１４Ｂは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ１〜Ｓ５抗体の軽鎖の可変領域のアミノ酸配列のアライメントを示す。 図１５Ａは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｂは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｃは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｄは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｅは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ５抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｆは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ６抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｇは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ７抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｈは、ｈ１６Ｂ３−Ｓ８抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｉは、ｈ１６Ｂ３−Ｆ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｊは、ｈ１６Ｂ３−Ｆ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１５Ｋは、ｈ１６Ｂ３−Ｆ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ａは、ｈ５５Ａ１−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｂは、ｈ５５Ａ１−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｃは、ｈ５５Ａ１−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｄは、ｈ５５Ａ１−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｅは、ｈ５５Ａ１−Ｓ５抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｆは、ｈ５５Ａ１−Ｓ６抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｇは、ｈ５５Ａ１−Ｓ７抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｈは、ｈ５５Ａ１−Ｆ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｉは、ｈ５５Ａ１−Ｆ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｊは、ｈ５５Ａ１−Ｆ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｋは、ｈ５５Ａ１−Ｆ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｌは、ｈ５５Ａ１−Ｆ５抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１６Ｍは、ｈ５５Ａ１−Ｆ６抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１７Ａは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１７Ｂは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１７Ｃは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１７Ｄは、ｈ５３Ａ１１−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１８Ａは、ｈ２３Ｈ８−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１８Ｂは、ｈ２３Ｈ８−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１８Ｃは、ｈ２３Ｈ８−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１９Ａは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１９Ｂは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１９Ｃは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図１９Ｄは、ｈ１３Ｂ３−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２０Ａは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２０Ｂは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２０Ｃは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２０Ｄは、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２１Ａは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ１抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２１Ｂは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ２抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２１Ｃは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ３抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２１Ｄは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ４抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。 図２１Ｅは、ｈ１６Ｆ６−Ｓ５抗体の可変領域のアミノ酸配列を示す。
本発明は、血管内皮リパーゼの酵素活性を選択的に阻害することを特徴とするヒト化モノクローナル抗体を提供する。本発明の抗体は、血管内皮リパーゼの酵素活性を選択的に阻害する活性を有するので、動脈硬化やメタボリックシンドロームの予防・治療薬として有用である。
本発明のモノクローナル抗体を調製するために使用される抗原としては、配列番号１の１位から１５７位または２０２位から３０５位のアミノ酸配列を含む連続したアミノ酸残基を有するものであることが重要である。長さは特に限定されないが、免疫原性を有する長さである６残基以上であることが望ましい。このような抗原の具体例として、天然に、あるいは人工的に高発現する細胞株、その膜画分、あるいはその精製物、その他のタンパク質またはペプチド（例えば、ＦＬＡＧ−ｔａｇ、ＨＩＳ−ｔａｇ、ＧＳＴ−ｔａｇ、Ｃ２タグなどのタグタンパク質、ＧＦＰ、ＥＧＦＰなどの蛍光タンパク質など）との融合タンパク質、または化学的に合成されたペプチドなど何れのものも使用することができる（以下、これらを単に本発明の抗原と称することもある。）。なお、これら免疫原の調製法はいずれも当業者にとって公知である。
本発明のモノクローナル抗体は、既知の一般的な製造方法によって調製することができる。具体的には、本発明の抗原を、必要に応じてフロイントアジュバントとともに、哺乳動物、好ましくは、マウス、ラット、ハムスター、モルモットまたはウサギの皮下内、筋肉内、静脈内、フッドパッド内あるいは腹腔内に１乃至数回注射することにより免疫感作を施す。通常、初回免疫から約１〜２１日毎に１〜４回免疫を行って、最終免疫より約１〜１０日後に免疫感作された哺乳動物から抗体産生細胞を取得することができる。免疫を施す回数及び時間的インターバルは、使用する免疫原の性質などにより、適宜変更することができる。
モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマの調製は、ケーラー及びミルシュタインらの方法（Ｎａｔｕｒｅ、１９７５、ｖｏｌ．２５６、ｐ４９５〜４９７）及びそれに準じた方法に従って行うことができる。即ち、前述の如く免疫感作された哺乳動物から取得される脾臓、リンパ節、骨髄あるいは扁桃等、好ましくは脾臓に含まれる抗体産生細胞と、好ましくはマウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギまたはヒト等の哺乳動物、より好ましくはマウス、ラットまたはヒト由来の自己抗体産生能のないミエローマ細胞を細胞融合させることによってハイブリドーマを調製することができる。
細胞融合に用いられるミエローマ細胞としては、一般的にはマウスから得られた株化細胞、例えばＰ３−Ｕ１、ＮＳ−１、ＳＰ−２、６５３、Ｘ６３、ＡＰ−１などを使用することができる。
モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマクローンのスクリーニングは、ハイブリドーマを、例えばマイクロタイタープレート中で培養し、増殖の見られたウェルの培養上清の、前述のマウス免疫感作で用いた本発明の抗原に対する反応性を、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ、ＦＡＣＳ等の測定法によって測定し、当該抗原あるいはハプテンに対して特異的結合を示すモノクローナル抗体を産生するクローンを選択することによって行う。そして、通常は抗原を固相化しそこに結合する培養上清中の抗体を、放射性物質、蛍光物質、酵素などで標識した二次抗体で検出する方法が用いられる。また、抗原の発現細胞を用いる場合には、該細胞にハイブリドーマ培養上清を添加し、次に蛍光で標識した二次抗体を反応させた後、フローサイトメーター等の蛍光検出装置で該細胞の蛍光強度を測定することにより、該細胞膜上の本発明の抗原に結合できるモノクローナル抗体を検出することができる。
選択したハイブリドーマからのモノクローナル抗体の製造は、ハイブリドーマをインビトロで培養するか、またはマウス、ラット、モルモット、ハムスターまたはウサギ等、好ましくはマウスまたはラット、より好ましくはマウスの腹水中等で培養し、得られた培養上清、または哺乳動物の腹水から単離することにより行うことができる。インビトロで培養する場合には、培養する細胞種の特性、試験研究の目的及び培養方法等の種々条件に合わせて、ハイブリドーマを増殖、維持及び保存させ、培養上清中にモノクローナル抗体を産生させるために用いられるような既知栄養培地あるいは既知の基本培地から誘導調製されるあらゆる栄養培地を用いて実施することが可能である。
基本培地としては、例えば、Ｈａｍ’Ｆ１２培地、ＭＣＤＢ１５３培地あるいは低カルシウムＭＥＭ培地等の低カルシウム培地及びＭＣＤＢ１０４培地、ＭＥＭ培地、Ｄ−ＭＥＭ培地、ＲＰＭＩ１６４０培地、ＡＳＦ１０４培地あるいはＲＤ培地等の高カルシウム培地等が挙げられ、該基本培地は、目的に応じて、例えば血清、ホルモン、サイトカイン及び／または種々無機あるいは有機物質等を含有することができる。
モノクローナル抗体の単離、精製は、上述の培養上清あるいは腹水を、飽和硫酸アンモニウム、イオン交換クロマトグラフィー（ＤＥＡＥまたはＤＥ５２等）、抗イムノグロブリンカラムあるいはプロテインＡカラム等のアフィニティカラムクロマトグラフィーに供すること等により行うことができる。
また、本発明のモノクローナル抗体として、抗体遺伝子を抗体産生細胞、例えばハイブリドーマからクローニングし、適当なベクターに組み込んで、これを宿主に導入し、遺伝子組換え技術を用いて産生させた組換え型抗体を用いることができる（例えば、Ｃａｒｌら、ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ、１９９０年発行）。
具体的には、目的とする抗体を産生するハイブリドーマや抗体を産生する免疫細胞、例えば感作リンパ球等を癌遺伝子等により不死化させた細胞から、抗体の可変領域（Ｖ領域）をコードするｍＲＮＡを単離する。ｍＲＮＡの単離は、公知の方法、例えばグアニジン超遠心法（Ｃｈｉｒｇｗｉｎ、Ｊ．Ｍ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ(１９７９) １８、５２９４-５２９９)等により全ＲＮＡを調製し、ｍＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ(ファルマシア製）等を使用してｍＲＮＡを調製する。
得られたｍＲＮＡから逆転写酵素を用いて抗体Ｖ領域のｃＤＮＡを合成する。ｃＤＮＡの合成は、ＡＭＶ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ Ｆｉｒｓｔ−ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ等を用いて行うことができる。また、ｃＤＮＡの合成および増幅を行うには５’−Ａｍｐｌｉ ＦＩＮＤＥＲ ＲＡＣＥＫｉｔ (クローンテック製）およびＰＣＲを用いた５’−ＲＡＣＥ法（Ｆｒｏｈｍａｎ，Ｍ．Ａ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９８８年、第８５巻、 ８９９８ページなど)を使用することができる。得られたＰＣＲ産物から目的とするＤＮＡ断片を精製し、ベクターＤＮＡと連結する。さらに、これより組換えベクターを作製し、大腸菌等に導入してコロニーを選択して所望の組換えベクターを調製する。目的とするＤＮＡの塩基配列を公知の方法、例えば、デオキシ法により確認する。
目的とする抗体のＶ領域をコードするＤＮＡが得られれば、これを所望の抗体定常領域（Ｃ領域）をコードするＤＮＡと連結し、これを発現ベクターへ組み込む。または、抗体のＶ領域をコードするＤＮＡを、抗体Ｃ領域のＤＮＡを含む発現ベクターへ組み込んでもよい。本発明で使用される抗体を製造するには、抗体遺伝子を発現制御領域、例えば、エンハンサー／プロモーターの制御のもとで発現するよう発現ベクターに組み込む。次に、この発現ベクターにより宿主細胞を形質転換し、抗体を発現させることができる。
抗体遺伝子の発現は、抗体の重鎖（Ｈ鎖）または軽鎖（Ｌ鎖）を別々に発現ベクターに組み込んで宿主を同時形質転換させてもよいし、あるいはＨ鎖およびＬ鎖をコードするＤＮＡを単一の発現ベクターに組み込んで宿主を形質転換させてもよい（ＷＯ９４／１１５２３参照）。
上記以外の本発明のモノクローナル抗体の作製方法には、いわゆるファージディスプレイ技術（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３，１１０５（２００５））も用いることができる。具体的には、例えばヒトや動物（例えば、ウサギ、マウス、ラット、ハムスターなど）のＢリンパ球を材料として公知の方法により作製された抗体遺伝子ライブラリー、もしくはヒトや動物のＧｅｒｍ Ｌｉｎｅ配列から選別、および改変して完全合成した抗体遺伝子ライブラリーを、バクテリオファージ、大腸菌、酵母、動物細胞等の細胞表面やリボソーム上等に提示させる。このとき、細胞表面に提示させる抗体の形態としてはＩｇＧ分子、ＩｇＭ分子、Ｆａｂフラグメント、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント等が挙げられる。
こうして得たモノクローナル抗体フラグメント遺伝子は公知の方法によりＩｇＧ抗体遺伝子の対応領域と組替えることにより、抗体遺伝子を得ることができる。そして、このようにして得られた遺伝子を適当なベクターに組み込んで、これを宿主に導入し、遺伝子組換え技術を用いて抗体を産生することができる（例えば、Ｃａｒｌら、ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ、１９９０年発行）。
本発明のモノクローナル抗体は、血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害することが特徴である。以下、ＥＬの酵素活性阻害能の測定手順の一例を記す。
ＥＬをコードするＤＮＡをクローニングしたｐｃＤＮＡ３．１(インビトロジェン社製)をＦｒｅｅＳｔｙｌｅ ＨＥＫ２９３Ｆ細胞にトランスフェクションし、３７℃、８% ＣＯ２で２日間培養する。培養液を遠心し、細胞を回収して、２０U/mLのヘパリンを含むＰＢＳにて懸濁し、３７℃で４５分間インキュベーションし、その後、遠心により細胞を除去して得た上清をＥＬ酵素溶液として、阻害活性測定に使用する。２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、２mg/mLヒトＨＤＬ(Ａｔｈｅｎｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）で構成される反応溶液にモノクローナル抗体を添加した後に、ＥＬ酵素溶液を添加する。３７℃で２時間反応後、ＥＬ酵素によってＨＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標とする。抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、抗体の各濃度でのコントロール値に対する比活性を算出、その阻害曲線より抗体の５０％阻害濃度(ＩＣ５０値)を求めることができる。
ＥＬ酵素の阻害活性の阻害率が５０％を示す抗体の有効濃度（ＩＣ５０）は、しばしばＥＬ阻害活性を示す指標の一つとして用いられている。
本発明において、血管内皮リパーゼを、１０ｎＭ以下のＩＣで阻害するモノクローナル抗体またはその抗体断片とは、前記[００２８]の方法で測定したＩＣ５０が１０ｎＭ以下であるモノクローナル抗体またはその断片を意味する。測定で使用するＥＬは、哺乳動物由来のＥＬであれば、特に種は問わず、いずれかの種のＥＬを用いた場合に１０ｎＭ以下であれば、血管内皮リパーゼを、１０ｎＭ以下のＩＣで阻害するモノクローナル抗体またはその抗体断片に該当する。
また、本発明のモノクローナル抗体は、ＥＬ酵素を選択的に阻害することが特徴である。以下、ＥＬ酵素を選択的に阻害すること、言い換えれば、ＬＰＬおよびＨＬの酵素活性を阻害しないことの確認手順の一例を示す。
ＨＬをコードするＤＮＡをクローニングしたｐｃＤＮＡ３．１(インビトロジェン社製)をＦｒｅｅＳｔａｌｅ ＨＥＫ２９３Ｆ細胞にトランスフェクションし、３７℃、８%ＣＯ２で２日間培養する。培養液を遠心し、細胞を回収して、２０U/mLのヘパリンを含むＰＢＳにて懸濁し、３７℃で４５分間インキュベーションし、その後、遠心により細胞を除去して得た上清をＨＬ酵素溶液とする。同様の操作により、ＬＰＬ酵素溶液を調製する。２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、０．５mg/mLヒトＶＬＤＬ(ＩＮＴＲＡＣＥＬ社製）で構成される反応溶液に、モノクローナル抗体を添加した後に、ＨＬまたはＬＰＬ酵素溶液を添加する。３７℃で２時間反応後、ＨＬまたはＬＰＬ酵素によって、ＶＬＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標として、モノクローナル抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、コントロール値に対する比活性を算出する。
ＥＬ酵素に対して選択的な阻害活性を有するとは、ＥＬに対するＩＣ５０に相当する量のモノクローナル抗体を入れた際において、ＬＰＬおよびＨＬの酵素活性を３パーセント以上阻害しない場合を意味する。本発明のモノクローナル抗体は、ＬＰＬおよびＨＬの酵素活性を阻害せず、ＥＬ酵素を選択的に阻害することが特徴なので、エピトープ部位は、ＥＬがＬＰＬやＨＬと相同性を有しない領域であることが好ましい。
本発明のヒト化モノクローナル抗体は、上述した特徴を有するモノクローナル抗体のヒト化版である。ヒト化モノクローナル抗体は、ヒト以外の哺乳動物、例えばマウス抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ; ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ) をヒト抗体のフレームワーク領域（ＦＲ ; ｆｒａｍｅｗｏｒｋ ｒｅｇｉｏｎ)へ移植したものである。したがって、ヒト化モノクローナル抗体のＦＲは、ヒト由来のものである。適当なＦＲは、Ｋａｂａｔ Ｅ．Ａ．らの文献を参照すれば選択できる。この場合のＦＲとしては、ＣＤＲが良好な抗原結合部位を形成するものが選択される。必要に応じ、再構成したヒト化抗体のＣＤＲが適切な抗原結合部位を形成するように抗体の可変領域のＦＲのアミノ酸を置換してもよい（Ｓａｔｏ、Ｋ．ら, Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． １９９３年、第５３巻、８５１ページ)。置換されるＦＲのアミノ酸の割合は、全ＦＲ領域の０〜１５％、好ましくは０〜５％である。
ヒト化モノクローナル抗体の一般的な製造方法も知られている（例えば、ＷＯ９５／１４０４１号公報、ＷＯ９６／０２５７６号公報参照）。具体的には、まずマウス抗体のＣＤＲとヒト抗体のＦＲを連結するように設計した可変領域をコードするＤＮＡ配列を、末端部にオーバーラップする部分を有するように作製した数個のオリゴヌクレオチドからＰＣＲ法により合成する（ＷＯ９８／１３３８８号公報参照）。得られたＤＮＡを、ヒト抗体の定常領域をコードするＤＮＡと連結し、次いで発現ベクターに組み込む。または、抗体の可変領域をコードするＤＮＡを、抗体の定常領域のＤＮＡを含む発現ベクターへ組み込んでもよい。本発明で使用される抗体を製造するには、抗体遺伝子を発現制御領域、例えば、エンハンサー／プロモーターの制御のもとで発現するよう発現ベクターに組み込む。次に、この発現ベクターにより宿主細胞を形質転換し、抗体を発現させることができる。宿主細胞としては例えば、ＣＯＳ細胞やＣＨＯ細胞などの脊椎動物細胞、原核細胞、酵母などが挙げられる。
抗体遺伝子の発現は、抗体の重鎖（Ｈ鎖）または軽鎖（Ｌ鎖）を別々に発現ベクターに組み込んで宿主を同時形質転換させてもよいし、あるいはＨ鎖およびＬ鎖をコードするＤＮＡを単一の発現ベクターに組み込んで宿主を形質転換させてもよい（ＷＯ９４／１１５２３参照）。
上記で得られる所望の形質転換体は、当業者に周知の方法に従って培養することができ、該培養により、形質転換体細胞内または細胞外にＥＬのヒト化モノクローナル抗体が産生される。該培養に用いられる培地としては、採用した宿主細胞に応じて慣用される各種のものを適宜選択でき、例えば上記ＣＯＳ細胞の場合、ＲＰＭＩ−１６４０培地やダルベッコ修正イーグル最小必須培地（ＤＭＥＭ）などの培地に、必要に応じウシ胎児血清（ＦＢＳ）などの血清成分を添加したものを使用できる。該形質転換体の培養の際の培養温度は、細胞内のタンパク質合成能を著しく低下せしめない温度であればいずれでもよいが、好適には３２〜４２℃、最も好適には３７℃で培養することが好ましい。また必要に応じて、１〜１０％（ｖ／ｖ）の炭酸ガスを含む空気中で培養することができる。
上記により形質転換体の細胞内または細胞外に生産される本発明のＥＬのヒト化モノクローナル抗体を含む画分は、該タンパク質の物理的性質や化学的性質等を利用した各種公知の分離操作法により、分離・精製することができる。かかる方法としては、具体的には例えば通常のタンパク質沈澱剤による処理、限外濾過、分子ふるいクロマトグラフィー（ゲル濾過）、吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等の各種クロマトグラフィー、透析法、およびこれらの組み合わせ等を採用できる。
上記方法により、容易に高収率、高純度で所望のＥＬのヒト化モノクローナル抗体を製造できる。このようにして、マウスモノクローナル抗体（１６Ｂ３、５５Ａ１、５３Ａ１１、２３Ｈ８、１３Ｂ３、１２Ｂ１０および１６Ｆ６）をヒト化するために決定されたＣＤＲ配列全体およびＦＲ配列の一部のアミノ酸残基を、ヒト抗体へ移植することによって最適化された抗体の可変領域のアミノ酸配列を図１５〜図２１に示す。
これらのヒト化抗体は、ハイブリドーマにより産生されるマウス抗体（１６Ｂ３、５５Ａ１、５３Ａ１１、２３Ｈ８、１３Ｂ３、１２Ｂ１０および１６Ｆ６）と比較すると、同等の強いＥＬの酵素阻害活性能を有していた。抗体のヒト化において、通常、由来となった抗体の活性を維持したままヒト化を行うことは困難であるが、本発明においては、由来となったマウス抗体と同等の活性を有するヒト化抗体の取得に成功した。ヒト化抗体はヒト体内における抗原性が低下しているため、治療目的などでヒトに投与する場合に有用である。
本発明のヒト化モノクローナル抗体には、ヒト抗体の定常領域が使用される。好ましいヒト抗体の定常領域としては、重鎖としてはＣγが挙げられ、例えば、Ｃγ１，Ｃγ２，Ｃγ３，Ｃγ４を、軽鎖としてはＣκ、Ｃλを使用することができる。また、抗体またはその産生の安定性を改善するために、ヒト抗体のＣ領域を修飾してもよい。ヒト化の際
に用いられるヒト抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤなどいかなるアイソタイプのヒト抗体でもよいが、本発明においてはＩｇＧを用いることが好ましく、さらにIgＧ１又はＩｇＧ４が好ましい。
本発明のヒト化モノクローナル抗体は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、放射性物質、トキシン等の各種分子と結合したコンジュゲート抗体でもよい。このようなコンジュゲート抗体は、得られた抗体に化学的な修飾を施すことによって得ることができる。なお、抗体の修飾方法はこの分野においてすでに確立されている。本発明におけるヒト化モノクローナル抗体にはこれらのコンジュゲート抗体も包含される。
また本発明のヒト化モノクローナル抗体は、そのＮ末端あるいはＣ末端に他のタンパク質を融合してもよい（Clinical Cancer Research, 2004, 10, 1274-1281）。融合するタンパク質は当業者が適宜選択することができる。
本発明において「モノクローナル抗体の抗体断片」とは、前述する本発明のモノクローナル抗体の一部であって、当該モノクローナル抗体と同様に血管内皮リパーゼに特異的な結合性を有する断片、または当該モノクローナル抗体と同様に血管内皮リパーゼに特異的な結合性を有し、かつ血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害する作用を有する断片を意味する。
具体的には、前述するヒトＥＬに対して特異的結合性を有するＦａｂ (ｆｒａｇｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ｂｉｎｄｉｎｇ)、Ｆ(ａｂ')２、Ｆａｂ'、一本鎖抗体 （ｓｉｎｇｌｅ ｃｈａｉｎ Ｆｖ; 以下、ｓｃＦｖと表記する)、ジスルフィド安定化抗体(ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｆｖ; 以下、ｄｓＦｖと表記する)、２量化体Ｖ領域断片 (以下、Ｄｉａｂｏｄｙと表記する)、ＣＤＲを含むペプチド等を挙げることができる（エキスパート・オピニオン・オン・テラピューティック・パテンツ、第６巻、第５号、第４４１〜４５６頁、１９９６年）。
Ｆａｂは、ＩｇＧのヒンジ領域で２本のＨ鎖を架橋している２つのジスルフィド結合 (Ｓ−Ｓ結合) の上部のペプチド部分を酵素パパインで分解して得られる、Ｈ鎖のＮ末端側約半分とＬ鎖全体で構成される、分子量約５万の抗原結合活性を有する抗体断片である。本発明で使用されるＦａｂは、上記本発明のモノクローナル抗体をパパイン処理して得ることができる。または、上記本発明のモノクローナル抗体のＦａｂをコードするＤＮＡを細胞用発現ベクターに挿入し、該ベクターを細胞へ導入することにより発現させることによってもＦａｂを製造することができる。
Ｆ(ａｂ')２は、ＩｇＧのヒンジ領域の２個のＳ−Ｓ結合の下部を酵素ペプシンで分解して得られる、２つのＦａｂ’領域がヒンジ部分で結合して構成される、分子量約１０万の抗原結合活性を有する抗体断片である。本発明で使用されるＦ(ａｂ')２は、上記本発明のモノクローナル抗体をペプシン処理して得ることができる。または、当該モノクローナル抗体のＦ(ａｂ')２をコードするＤＮＡを細胞用発現ベクターに挿入し、該ベクターを大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入することにより発現させることによってもＦ(ａｂ')２を製造することができる。
Ｆａｂ'は、上記Ｆ(ａｂ')２のヒンジ間のＳ−Ｓ結合を切断した分子量約５万の抗原結合活性を有する抗体断片である。本発明で使用されるＦａｂ'は、上記本発明のモノクローナル抗体のＦ(ａｂ')２を還元剤ジチオスレイトール処理して得ることができる。または、当該モノクローナル抗体のＦａｂ'をコードするＤＮＡを細胞用発現ベクターに挿入し、該ベクターを大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入することにより発現させることによってもＦａｂ'を製造することができる。
ｓｃＦｖは、一本のＶＨと一本のＶＬとを適当なペプチドリンカー (以下、Ｐと表記する) を用いて連結した、ＶＨ−Ｐ−ＶＬないしはＶＬ−Ｐ−ＶＨポリペプチドであり、抗原活性を有する抗体断片である。本発明で使用されるｓｃＦｖに含まれるＶＨおよびＶＬは、上記本発明のモノクローナル抗体のものであればよい。本発明で使用されるｓｃＦｖは、本発明のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマよりＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、ｓｃＦｖ発現ベクターを構築し、大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入することにより発現させ製造することができる。
ｄｓＦｖは、ＶＨおよびＶＬ中のそれぞれ１アミノ酸残基をシステイン残基に置換したポリペプチドをＳ−Ｓ結合を介して結合させたものをいう。システイン残基に置換するアミノ酸残基はＲｅｉｔｅｒらにより示された方法 (Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、 ７、 ６９７ (１９９４)) に従って、抗体の立体構造予測に基づいて選択することができる。本発明で使用されるｄｓＦｖに含まれるＶＨあるいはＶＬは、本発明のモノクローナル抗体のものであればよい。本発明で使用されるｄｓＦｖは、本発明のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマよりＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、適当な発現ベクターに挿入してｄｓＦｖ発現ベクターを構築し、該発現ベクターを大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入し、発現させることにより製造することができる。
Ｄｉａｂｏｄｙは、抗原結合特異性が同じ、または異なるｓｃＦｖが２量体を形成した抗体断片であり、同じ抗原に対する２価の抗原結合活性、または異なる抗原に対する２種類の特異的な抗原結合活性を有する抗体断片である。例えば、本発明のモノクローナル抗体に特異的に反応する２価のＤｉａｂｏｄｙは、本発明のモノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得し、３〜１０残基のペプチドリンカーを有するｓｃＦｖをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを細胞用発現ベクターに挿入し、該発現ベクターを大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入することによりＤｉａｂｏｄｙを発現させることにより、製造することができる。
ＣＤＲを含むペプチドは、ＶＨまたはＶＬのＣＤＲの少なくとも１領域以上を含んで構成される。複数のＣＤＲは、直接または適当なペプチドリンカーを介して結合させることができる。本発明で使用されるＣＤＲを含むペプチドは、本発明のモノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬをコードするｃＤＮＡを取得した後、ＣＤＲをコードするＤＮＡを構築し、該ＤＮＡを動物細胞用発現ベクターに挿入し、該ベクターを大腸菌、酵母、あるいは動物細胞へ導入することにより発現させることにより、製造することができる。また、ＣＤＲを含むペプチドは、Ｆｍｏｃ法 (フルオレニルメチルオキシカルボニル法)、ｔＢｏｃ法 (ｔ−ブチルオキシカルボニル法) 等の化学合成法によって製造することもできる。
本発明のモノクローナル抗体又はその一部は、本発明に好適に使用され得るかぎり、その修飾物であってよい。修飾物として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ） 等の各種分子と結合した抗体を使用することができる。抗体になされる修飾とは、化学的結合を導入することによる修飾であってもよいし、抗体のアミノ酸配列になされる修飾であってもよい。本発明のモノクローナル抗体又はその一部にはこれらの抗体修飾物も包含される。このような抗体修飾物を得るには、得られた抗体に修飾を施すことによって得ることができる。これらの方法はこの分野においてすでに確立されている。
別の観点においては、本発明は、本発明のヒト化モノクローナル抗体の重鎖可変領域または軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを提供する。また、該ポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ本発明の抗体と同等の活性を有する抗体をコードするポリヌクレオチドも本発明の範囲内である。
本発明のポリヌクレオチドは、本発明の抗体をコードする限り、特に限定されず、複数のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）またはリボ核酸（ＲＮＡ）等のヌクレオチドからなる重合体である。天然以外の塩基を含んでいてよい。本発明のポリヌクレオチドは、抗体を遺伝子工学的な手法により製造するために使用することができる。また本発明の抗体と同等な機能を有する抗体をスクリーニングするために、プローブとして用いることもできる。即ち本発明の抗体をコードするポリヌクレオチド、またはその一部をプローブとして用い、ハイブリダイゼーション、遺伝子増幅技術（例えばＰＣＲ）等の技術により、該ポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ本発明の抗体と同等の活性を有する抗体をコードするＤＮＡを得ることができる。このようなＤＮＡも本発明のポリヌクレオチドに含まれる。
ハイブリダイゼーション技術（Sambrook,J et al., Molecular Cloning 2nd ed., 9.47-9.58, Cold Spring Harbor Lab. press, 1989）は当業者によく知られた技術である。ハイブリダイゼーションの条件としては、例えば、低ストリンジェントな条件が挙げられる。低ストリンジェントな条件とは、ハイブリダイゼーション後の洗浄において、例えば42℃、0.1×SSC、0.1％SDSの条件であり、好ましくは50℃、0.1×SSC 、0.1％SDSの条件で
ある。より好ましいハイブリダイゼーションの条件としては、高ストリンジェントな条件が挙げられる。高ストリンジェントな条件とは、例えば65℃、5×SSCおよび0.1％SDSの条件である。これらの条件において、温度を上げる程に高い相同性を有するポリヌクレオチドが効率的に得られることが期待できる。但し、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーに影響する要素としては温度や塩濃度など複数の要素が考えられ、当業者であればこれら要素を適宜選択することで同様のストリンジェンシーを実現することが可能である。
これらハイブリダイゼーション技術や遺伝子増幅技術により得られるポリヌクレオチドがコードする、本発明の抗体と機能的に同等な抗体は、通常、これら抗体とアミノ酸配列において高い相同性を有する。本発明の抗体には、本発明の抗体と機能的に同等であり、かつ該抗体のアミノ酸配列と高い相同性を有する抗体も含まれる。高い相同性とは、アミノ酸レベルにおいて、通常、少なくとも５０％以上の同一性、好ましくは７５％以上の同一性、さらに好ましくは８５％以上の同一性、さらに好ましくは95％以上の同一性を指す。ポリペプチドの相同性を決定するには、文献（Wilbur, W. J. and Lipman, D. J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1983) 80, 726-730）に記載のアルゴリズムにしたがえばよい。
本発明のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片は、配列番号１で示されるアミノ酸配列の１位から１５７位を認識するか、配列番号１で示されるアミノ酸配列の２０２位から３０５位を認識するかのいずれかを特徴とする。配列番号１で示されるアミノ酸配列の１位から１５７位を認識するとは、抗体がこの領域内にあるアミノ酸を認識することを意味する。
本発明のヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片は、医薬組成物として有用である。したがって本発明のヒト化モノクローナル抗体およびその抗体断片を含む医薬組成物は、経口的または非経口的に全身あるいは局所的に投与することができる。非経口的投与としては、例えば、点滴などの静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射、鼻腔内投与、吸入などを選択することができる。
また、本発明のヒト化モノクローナル抗体又はその抗体断片は、血管内皮リパーゼに対して特異的結合性を有するので、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病、肥満および／またはシンドロームＸの診断にも応用可能である。
本発明の医薬組成物の対象患者は動脈硬化やメタボリックシンドロームであることが想定される。有効投与量は、一回につき体重１kgあたり０．０１mgから１００mgの範囲から選ばれる。あるいは、患者あたり５〜５０００mg、好ましくは１０〜５００mgの投与量を選ぶことができる。しかしながら、本発明のモノクローナル抗体又はその抗体断片を含む医薬組成物はこれらの投与量に制限されるものではない。また、投与期間は、患者の年齢、症状により適宜選択することができる。本発明の医薬組成物は、投与経路次第で医薬的に許容される担体や添加物を共に含むものであってもよい。このような担体および添加物の例として、水、医薬的に許容される有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、カゼイン、ジグリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬添加物として許容される界面活性剤などが挙げられる。使用される添加物は、剤型に応じて上記の中から適宜あるいは組合せて選択されるが、これらに限定されるものではない。
（参考例１）
ヒヒＥＬ発現アデノウイルス調製
ｐＳｈｕｔｔｌｅベクター（クロンテック社製）に、ＰＣＲ法、制限酵素を用いた手法により、Ｃ２タグを付加したヒヒＥＬｃＤＮＡ配列をクローニングした。このサブクローンベクターと、アデノウイルス骨格遺伝子を有するベクターを、ＰＩ−ＳｃｅＩおよびＩ−ＣｅｕＩ酵素により消化した（Ａｄｅｎｏ−ｘ Ａｃｃｅｓｓｏｒｙ Ｋｉｔ, クロンテック社製）。消化断片のライゲーション反応を１６℃、３時間行い（ｌｉｇａｔｉｏｎ ｈｉｇｈ, 東洋紡社製）、ライゲーション産物を大腸菌株(ワンショットＳｔｂｌ３ケミカルコンピテントセル, インビトロジェン社製)にトランスフォームした。アンピシリン選択後、得られたクローンよりプラスミドを精製し（ＱＩＡｐｒｅｐ ｓｐｉｎ Ｍｉｎｉｐｒｅｐ Ｋｉｔ, ＱＩＡＧＥＮ社製）、次いでＰａｃＩ酵素（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ社製）処理による大腸菌生育領域の切り出しを行った。以上により、アデノウイルスベクター作製のためのプラスミドＤＮＡを得た。得られたプラスミドＤＮＡをＨＥＫ２９３細胞（ＡＴＣＣより入手）にＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００(インビトロジェン社製）を用いてトランスフェクションし、１０％ウシ血清含有ＤＭＥＭ培地中、３７℃、５% ＣＯ２下で培養した。トランスフェクション後は５日おきに培地交換を行い、細胞変性効果（ＣＰＥ）が確認されるまで培養を継続した。ＣＰＥの確認後、培養上清および細胞を回収した。回収した細胞は、ドライアイス・メタノール浴と温水浴を用い凍結融解を５回程度繰り返した後、３０００ｒｐｍにて１５分遠心して得られた上清を、細胞抽出液として回収した。この細胞抽出液と、培養上清を混合し、ウイルスベクター含有液とした。このウイルスベクター含有液をＨＥＫ２９３細胞に添加し、同様の操作を繰り返すことにより、ウイルスベクターの増幅を行った。増幅後、最終的に得られた細胞抽出液を、Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ（Ｍｅｒｃｋ−Ｎｏｖａｇｅｎ社製）で３７℃、３０分間処理後遠心し、得られた上清を、以下の密度勾配遠心によるウイルスベクター精製に用いた。１．５、１．３５、１．２５ｇ／ｃｍ３の塩化セシウムを含むＰＢＳ(Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ)を遠心管内に重層し、次いで上記上清を重層した。これを３５０００ｒｐｍ, １６℃で１時間遠心し、目視によって得られたウイルスベクターを回収した。回収したウイルスベクターは、１０％グリセロール含有ＰＢＳに対して透析を行い、精製アデノウイルスベクターとした。ウイルスベクターは一部をタイター測定（Ａｄｅｎｏ−Ｘ ｒａｐｉｄ ｔｉｔｅｒ ｋｉｔ, クロンテック社製）および自己増殖能獲得型出現判定に用い、異常のないもののみを以下の免疫に使用した。
（参考例２）
ヒヒＥＬ発現アデノウイルスベクター免疫
精製したヒヒＥＬ発現アデノウイルスベクター２×１０９ｉ.ｆ.ｕ.相当を、６週齢の雌マウス（Ａ／Ｊ Ｊｍｓ Ｓｌｃ種、日本エスエルシーより入手）の静脈内、皮下、または後肢筋肉内に投与した。投与後は、７日毎に尾静脈より血液を採取し、これより調製した血清を用いて抗体価の測定を行った。また、初回のアデノウイルスベクター投与に加えて、追加免疫として同量のアデノウイルスベクターを静脈内、皮下、又は後肢筋肉内に、投与した。抗体価の上昇を認めたマウスについて、最終免疫として、尾静脈よりブースター免疫を実施した。
（参考例３）
抗体産出ハイブリドーマの作製
最終免疫の３日後に、ヒヒＥＬに対する抗体価の上昇が認められた個体について開腹し、脾臓を摘出し、脾臓細胞を回収した。脾臓細胞とマウスミエローマ細胞（ｐ３×６３−Ａｇ８．Ｕ１、東京腫瘤研究所）を５０％のポリエチレングリコール４０００を用いて融合させ、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含む培地で選択した。
（参考例４）
ヒヒＥＬに結合する抗体を産出するハイブリドーマの選定
細胞融合１０日後に特異抗体産生細胞のスクリーニングを行った。スクリーニングに用いたＥＬＳＩＡは以下の通りである。３８４穴マイクロタイタープレート（ヌンク社製）の各ウェルに０．３５μgの抗マウスＩｇＧ−Ｆｃ抗体(Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ社製）を含むトリス緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）を３５μｌ加えて４℃、１６時間固定した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液（０．０１％ Ｔｗｅｅｎ２０を含む生理食塩水）で１回洗浄した後、ブロックエース（大日本製薬社製）を1００μｌ加えて室温で２時間放置して、ブロッキングを行った（抗マウスＩｇＧ−Ｆｃ抗体固相化プレート）。各ウェルを９０μｌの洗浄液で１回洗浄した後、１５μｌのハイブリドーマ培養上清を加えて２時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後、１５μｌのヒヒＥＬヘパリン抽出液を含むアッセイバッファー(４％ブロックエース、０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０、１５０ｍＭ ＮａＣｌを含む５０ｍＭトリス緩衝液ｐＨ７．４)を加えて、４℃で１６時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後、１５μｌのビオチン標識抗Ｃ２タグ抗体(Ｆａｂ)とＨＲＰ標識ストレプトアビジン(Ｔｈｅｒｍｏ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製)を含むアッセイバッファーを加え、室温で１時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後に、１５μｌのＴＭＢ＋−Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ−Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎ（ＤＡＫＯ社製）を添加して室温で３０分間発色させた後に、１５μｌの０．０５Ｍの硫酸を添加し反応を停止し、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。
スクリーニングの結果、ヒヒＥＬと結合したハイブリドーマのクローンを１１個（５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３、２３Ｈ８、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７）得た。５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３、２３Ｈ８、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７のクローンが産出する抗体を、それぞれ５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３、２３Ｈ８、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７抗体と命名した。マウスモノクローナル抗体アイソタイピングキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて、抗体のサブクラスを決定した。
抗体のサブクラスは、５５Ａ１抗体がＩｇＧ２ａ、７Ｄ４抗体がＩｇＧ１、１４Ａ１抗体がＩｇＧ１、２Ｄ５抗体がＩｇＧ２ａ、５３Ａ１１抗体がＩｇＧ２ａ、１３Ｂ３抗体がＩｇＧ２ａ、２３Ｈ８抗体がＩｇＧ２ａ、１６Ｂ３抗体がＩｇＧ２ａ、１６Ｅ７抗体がＩｇＧ１、１４Ｅ１抗体がＩｇＧ１、１９Ｅ７抗体がＩｇＧ２ａであった。
（参考例５）
各ＥＬ抗体のＥＬ酵素活性阻害能の測定
５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３、２３Ｈ８、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７の各抗体について、ヒヒＥＬ、カニクイザルＥＬ、ヒト（１-１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１-５３）マウスキメラＥＬ、ヒト（６１-１１１）マウスキメラＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬまたはヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに対するＥＬ活性阻害能を測定した。具体的な方法を以下に示す。
２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、２mg/mLヒトＨＤＬ(Ａｔｈｅｎｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）で構成される反応溶液にＥＬ抗体を添加した後に、ＥＬ酵素溶液を添加した(全量で１０μl )。３７℃で９０分の反応後、ＥＬ酵素によってＨＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標とした。ＥＬ抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、抗体の各濃度でのコントロール値に対する比活性を算出してプロットした（図１Ａ〜図１Ｋ）。図１Ａ〜図１Ｋの阻害曲線より、各抗体の５０％阻害濃度(ＩＣ５０値)を求めた。
（参考例６）
各ＥＬ抗体のＨＬおよびＬＰＬ酵素活性阻害能の測定
ヒトＨＬをコードするＤＮＡをクローニングしたｐｃＤＮＡ３．１(インビトロジェン社製)をＦｒｅｅＳｔｙｌｅ ＨＥＫ２９３Ｆ細胞にトランスフェクションし、３７℃、８%ＣＯ２で２日間培養した。培養液を遠心し、細胞を回収して、２０U/mLのヘパリンを含むＰＢＳにて懸濁し、３７℃で４５分間インキュベーションした。その後、遠心により細胞を除去して得た上清をヒトＨＬ酵素溶液とした。同様の操作により、ヒトＬＰＬ酵素溶液を調製した。２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、０．５mg/mLヒトＶＬＤＬ(ＩＮＴＲＡＣＥＬ社製）で構成される反応溶液にＥＬ抗体溶液を添加した後、ヒトＨＬ、またはヒトＬＰＬ酵素溶液を添加した(全量で１０μl)。３７℃で２時間反応後、ＨＬもしくはＬＰＬ酵素によって、ＶＬＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標とした。ＥＬ抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、コントロール値に対する比活性を算出した。比較のため、結果をカニクイザルＥＬの阻害曲線と並べて記載した（図２Ａ〜図２Ｋ)。
その結果、５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３、２３Ｈ８、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７抗体全てが、ＨＬとＬＰＬの酵素活性を阻害しないことがわかった。
（参考例７）
各ＥＬ抗体とＥＬとの結合能測定
抗マウスＩｇＧ−Ｆｃ抗体固相化プレートに、１５μｌのＥＬ抗体(１μg/mLから３倍希釈系列)を含むアッセイバッファー加えて２時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後、１５μｌのカニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ウサギＥＬ、マウスＥＬ、ヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬまたはヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬヘパリン抽出液を含むアッセイバッファーを加えて、４℃で１６時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後、１５μｌのビオチン標識抗Ｃ２タグ抗体(Ｆａｂ)とＨＲＰ標識ストレプトアビジンを含むアッセイバッファーを加え、室温で１時間放置した。これらのウェルを９０μｌの洗浄液で３回洗浄した後に、１５μｌのＴＭＢ＋−Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ−Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎ（ＤＡＫＯ社製）を添加して室温で３０分間発色させた後に、１５μｌの０．０５Ｍの硫酸を添加し反応を停止し、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。測定結果を、図３Ａ〜図３Ｋに示した。
５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３および２３Ｈ８抗体は、カニクイザル、ヒヒ、ヒト（１-１５７）マウスキメラＥＬに結合するが、マウスＥＬには結合しないことが示された。また、１３Ｂ３および２３Ｈ８抗体はウサギＥＬに結合するが、５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５および５３Ａ１１抗体はウサギＥＬに結合しないことが示された（図３Ａ〜図３Ｇ)。
一方、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７抗体は、カニクイザルＥＬ、ヒヒＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬおよびヒト（２０２−５００）マウスキメラＥＬに結合するが、マウスＥＬおよびヒト（１−１５７）マウスキメラＥＬに結合しないことが示された。また、１６Ｂ３、１４Ｅ１および１９Ｅ７抗体は、ウサギＥＬに結合するが、１６Ｅ７抗体はウサギＥＬに結合しないことが示された（図３Ｈ〜図３Ｋ）。
（参考例８）
各ＥＬ抗体の結合親和性測定
各ＥＬ抗体の結合親和性をＢｉａｃｏｒｅを用いて測定した。抗Ｃ２タグ抗体をＳｅｎｓｏｒ ｃｈｉｐ ＣＭ５（ＧＥ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ社製）にアミンカップリング法により固定化し、ＨＢＳ−Ｐ（ＧＥ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ社製）で希釈したヒヒＥＬヘパリン抽出液、カニクイザルＥＬ、もしくは、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬヘパリン抽出液を添加し、Ｓｅｎｓｏｒ ＣｈｉｐにＥＬをトラップした。その後、ＨＢＳ−Ｐで希釈したＥＬ抗体を添加し、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて、Ｂｉｖａｌｅｎｔ ｆｉｔｔｉｎｇにより結合親和性を算出した。各抗体のヒヒＥＬに対する結合親和性を表１に示し、カニクイザルＥＬに対する結合親和性を表２に示し、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬに対する結合親和性を表３に示した。

Figure 2020059743
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参考例５〜８で判明した各ＥＬ抗体の特徴を下記の表４にまとめた。

Figure 2020059743
（参考例９）
ヒトＥＬおよびマウスＥＬに結合する抗体作製
参考例１と同様の方法でマウスＥＬを発現するアデノウイルスを調製し、ＥＬノックアウトマウスに参考例２と同様の方法で免疫した。実施例３および４と同様の方法でヒトおよびマウスＥＬに結合する抗体(１６Ｆ６)を獲得した。マウスモノクローナル抗体アイソタイピングキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて、抗体のサブクラスを決定し、１６Ｆ６のサブクラスはＩｇＧ１であった。１６Ｆ６の中和活性と結合親和性を測定し、その結果を表５および６に示した。

Figure 2020059743
Figure 2020059743
（参考例１０）
ヒヒＥＬの変異体を利用したＥＬ抗体の結合に寄与する部位のマッピング
ＥＬ抗体の結合に重要なＥＬのアミノ酸残基を決定するために、ヒヒＥＬのアミノ酸残基に変異を加え、ＥＬ抗体の結合をＥＬＩＳＡにて調べた。具体的には、Ｑｕｉｋｃｈａｎｇｅ Ｓｉｔｅ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ（アジレント・テクノロジー株式会社）を用いてヒヒＥＬのｃＤＮＡに変異を加え、アラニンに置換した。ただし、ヒヒＥＬとマウスＥＬでアミノ酸残基が異なる場合は、マウスＥＬのアミノ酸残基に置換した。変異を導入したヒヒＥＬを発現するプラスミドＤＮＡを用いて、実施例２と同様の方法でヘパリン抽出液を調製し、実施例８と同様のＥＬＩＳＡ法で抗体との結合を調べた。ヒヒＥＬのアミノ酸残基の相対的な寄与率を評価するために、相対的な結合活性（［Ａ４５０が１．０となる抗体濃度＿変異型ＥＬ］／［Ａ４５０が１．０となる抗体濃度＿野生型ＥＬ］）を算出した。変異を導入したヒヒＥＬの、５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３および２３Ｈ８抗体に対する相対的な結合活性を図７Ａ−Ｇに示した。また、変異を導入したヒヒＥＬの、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１、１９Ｅ７および１６Ｆ６抗体に対する相対的な結合活性を図７Ｈ−Ｌに示した。
図７Ａ−Ｇを比較した結果、５５Ａ１、７Ｄ４、１４Ａ１、２Ｄ５、５３Ａ１１、１３Ｂ３および２３Ｈ８抗体のＥＬとの結合に重要なアミノ酸は、配列番号１で示されるアミノ酸配列の５０位のアルギニン、６０位のグルタミン酸、６１位のヒスチジン、６５位のチロシン、１００位のアスパラギンであることが判明した。
図７Ｈ−Ｋを比較した結果、１６Ｂ３、１６Ｅ７、１４Ｅ１および１９Ｅ７抗体の、ＥＬとの結合に重要なアミノ酸は、配列番号１で示されるアミノ酸配列の２２０位のヒスチジン、２２１位のトレオニン、２２２位のチロシン、２２３位のトレオニン、２２４位のアルギニン、２２６位のフェニルアラニン、２２７位のグリシン、２３１位のグリシン、２３２位のイソロイシン、２３３位のグルタミン、２３４位のメチオニン、２４０位のアスパラギン酸、２４２位のチロシン、２４３位のプロリン、２４４位のアスパラギン、２４６位のグリシン、２４９位のグルタミン、２５０位のプロリン、２５１位のグリシン、２５４位のロイシン、２５８位のロイシン、２６３位のチロシン、２６９位のバリン、２７３位のグルタミン酸であることが判明した。
（参考例１１）
各抗体の可変領域のアミノ酸配列決定
ＥＬ抗体について、常法を用いて可変領域の配列を決定し、図４Ａ−４Ｌに示した。
以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、抗体作製手法として、特に断らない限り、Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｉｎ Ｐｒａｃｔｉｃｅ （Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉａｔｉｏｎｓ）に記載されている方法を用いた。また、遺伝子操作的手法として、特に断らない限り、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に記載されている方法を用いた。
マウスモノクローナル抗体のヒト化
上記のように作製した１６Ｂ３、５５Ａ１、５３Ａ１１、２３Ｈ８、１３Ｂ３および１６F６のマウスモノクローナル抗体ならびにＷＯ２０１３／０５４８３０に記載されている１２Ｂ１０のマウスモノクローナル抗体の合計７個のモノクローナル抗体を基にして、ヒト化抗体の作製を行った。
具体的には、各マウスモノクローナル抗体のＣＤＲ残基をヒト抗体フレームワークに導入したヒト化可変領域をヒトκ定常ドメインおよびヒトγ１定常ドメインを含有するｐｃＤＮＡをもとにしたプラスミド誘導体に挿入することにより、ヒト化を行った。
上記の方法により、１６Ｂ３抗体を基にして、ｈ１６Ｂ３−Ｓ１、ｈ１６Ｂ３−Ｓ２、ｈ１６Ｂ３−Ｓ３、ｈ１６Ｂ３−Ｓ４、ｈ１６Ｂ３−Ｓ５、ｈ１６Ｂ３−Ｓ６、ｈ１６Ｂ３−Ｓ７、ｈ１６Ｂ３−Ｓ８、ｈ１６Ｂ３−F１、ｈ１６Ｂ３−F２およびｈ１６Ｂ３−F３の合計１１種類のヒト化抗体を作製した。これら１１種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃおよび図８Ｄに示した。
上記の方法により、５５Ａ１抗体を基にして、ｈ５５Ａ１−Ｓ１、ｈ５５Ａ１−Ｓ２、ｈ５５Ａ１−Ｓ３、ｈ５５Ａ１−Ｓ４、ｈ５５Ａ１−Ｓ５、ｈ５５Ａ１−Ｓ６、ｈ５５Ａ１−Ｓ７、ｈ５５Ａ１−Ｆ１、ｈ５５Ａ１−Ｆ２、ｈ５５Ａ１−Ｆ３、ｈ５５Ａ１−Ｆ４、ｈ５５Ａ１−Ｆ５およびｈ５５Ａ１−Ｆ６の合計１３種類のヒト化抗体を作製した。これら１３種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図９Ａ、図９Ｂ、図９Ｃおよび図９Ｄに示した。
上記の方法により、５３Ａ１１抗体を基にして、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１、ｈ５３Ａ１１−Ｓ２、ｈ５３Ａ１１−Ｓ３およびｈ５３Ａ１１−Ｓ４の合計４種類のヒト化抗体を作製した。４種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図１０Ａおよび図１０Ｂに示した。
上記の方法により、２３Ｈ８抗体を基にして、ｈ２３Ｈ８−Ｓ１、ｈ２３Ｈ８−Ｓ２およびｈ２３Ｈ８−Ｓ３の合計３種類のヒト化抗体を作製した。これら３種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図１１Ａおよび図１１Ｂに示した。
上記の方法により、１３Ｂ３抗体を基にして、ｈ１３Ｂ３−Ｓ１、ｈ１３Ｂ３−Ｓ２、ｈ１３Ｂ３−Ｓ３およびｈ１３Ｂ３−Ｓ４の合計４種類のヒト化抗体を作製した。これら４種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図１２Ａおよび図１２Ｂに示した。
上記の方法により、１２Ｂ１０抗体を基にして、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ１、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ２、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ３およびｈ１２Ｂ１０−Ｓ４の合計４種類のヒト化抗体を作製した。これら４種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図１３Ａおよび図１３Ｂに示した。
上記の方法により、１６Ｆ６抗体を基にして、ｈ１６Ｆ６−Ｓ１、ｈ１６Ｆ６−Ｓ２、ｈ１６Ｆ６−Ｓ３、ｈ１６Ｆ６−Ｓ４およびｈ１６Ｆ６−Ｓ５の合計５種類のヒト化抗体を作製した。これら５種類のヒト化抗体の可変領域のアライメントを図１４Ａおよび図１４Ｂに示した。
これらの４４種類のヒト化抗体の可変領域のアミノ酸配列の概要を表７−１および７−２にまとめ、これらのヒト化抗体の可変領域のアミノ酸配列を図１５〜図２１に示した。

Figure 2020059743

Figure 2020059743
ヒト化ＥＬ抗体のＥＬ酵素阻害活性の測定
実施例１で作製したプラスミドを用いて、ヒト化抗体のタンパク質を発現させて、ＰｒｏｔｅｉｎＡを用いて抗体を精製した。ヒト化抗体によるＥＬ酵素阻害活性は、以下の方法で実施した。
具体的には、２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、２mg/mLヒトＨＤＬ(Ａｔｈｅｎｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）で構成される反応溶液にＥＬ抗体を添加した後に、ＥＬ酵素溶液を添加した(全量で１０μl )。３７℃で９０分の反応後、ＥＬ酵素によってＨＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標とした。ＥＬ抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、抗体の各濃度でのコントロール値に対する比活性を算出し、ヒトＥＬ、ヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬ、ヒト（３３１−４５９）マウスキメラＥＬ、カニクイザルＥＬまたはマウスＥＬに対する各抗体の５０％阻害濃度(ＩＣ５０値)を表８−１１に示した。
１６Ｂ３抗体については、ｈ１６Ｂ３−Ｓ１、ｈ１６Ｂ３−Ｓ２、ｈ１６Ｂ３−Ｓ３、ｈ１６Ｂ３−Ｓ４、ｈ１６Ｂ３−Ｓ５、ｈ１６Ｂ３−Ｓ６、ｈ１６Ｂ３−Ｓ７、ｈ１６Ｂ３−Ｓ８、１６Ｂ３−Ｆ１、１６Ｂ３−Ｆ２および１６Ｂ３−Ｆ３のヒト化抗体は、基の１６Ｂ３抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。この結果から、重鎖９４番のアミノ酸はＫまたはＲが許容されると考えられ、重鎖の３１番のアミノ酸はＧまたはＡが許容されると考えられ、重鎖の５０番のアミノ酸はＥまたはＤが許容されると考えられ、重鎖９８番のアミノ酸はＲまたはＫが許容されると考えられ、重鎖１００番のアミノ酸はＨまたはＲが許容されると考えられ、重鎖１００Ｂ番のアミノ酸はＹまたはＦが許容されると考えられ、重鎖１０２番のアミノ酸はＶまたはＬが許容されると考えられ、軽鎖９３番のアミノ酸はＫまたはＲが許容されると考えられる。また、ヒト化抗体に用いられるｇｅｒｍｌｉｎｅ配列は軽鎖可変領域がＩＧＫＶ４−１＊０１、ＩＧＫＶ１−３９＊０１、ＩＧＫＶ３−１５＊０１またはＩＧＫＶ３−２０＊０１が許容されると考えられる。
５５Ａ１抗体については、ｈ５５Ａ１−Ｓ１、ｈ５５Ａ１−Ｓ２、ｈ５５Ａ１−Ｓ３、ｈ５５Ａ１−Ｓ４、ｈ５５Ａ１−Ｓ５、ｈ５５Ａ１−Ｓ６、ｈ５５Ａ１−Ｓ７、ｈ５５Ａ１−Ｆ１、ｈ５５Ａ１−Ｆ２、ｈ５５Ａ１−Ｆ３、ｈ５５Ａ１−Ｆ４、ｈ５５Ａ１−Ｆ５およびｈ５５Ａ１−Ｆ６のヒト化抗体は、基の５５Ａ１抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。この結果から、重鎖３３番のアミノ酸はＧまたはＡが許容されると考えられ、重鎖３４番のアミノ酸はＭまたはＬが許容されると考えられ、重鎖５７番目のアミノ酸はＰまたはＧが許容されると考えられ、重鎖６２番のアミノ酸はＤまたはＥが許容されると考えられ、重鎖９７番のアミノ酸はＹまたはＦが許容されると考えられ、重鎖１００Ｂ番のアミノ酸はＹまたはＦが許容されると考えられ、軽鎖９０番のアミノ酸はＱまたはＮが許容されると考えられる。また、ヒト化抗体に用いられるｇｅｒｍｌｉｎｅ配列は重鎖可変領域がＩＧＨＶ７−４−１＊０２、ＩＧＨＶ１−１８＊０１またはＩＧＨＶ１−４６＊０１が許容されると考えられ、軽鎖可変領域がＩＧＫＶ７−３＊０１、ＩＧＫＶ１−３３＊０１、ＩＧＫＶ１−３９＊０１、ＩＧＫＶ３−１５＊０１またはＩＧＫＶ３−２０＊０１が許容されると考えられる。
５３Ａ１１抗体については、ｈ５３Ａ１１−Ｓ４のヒト化抗体は、中和活性が減弱した。しかし、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１、ｈ５３Ａ１１−Ｓ２およびｈ５３Ａ１１−Ｓ３のヒト化抗体は、基の５３Ａ１１抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。この結果から、重鎖Ｒ９４Ｋおよび軽鎖Ｐ８Ｌの変異の組み合わせ、もしくは、重鎖のＲ９４Ｋと軽鎖Ｙ４９Ｋの変異の組み合わせは、ヒト化抗体の中和活性に望ましいと考えられる
２３Ｈ８抗体については、ｈ２３Ｈ８−Ｓ１のヒト化抗体は中和活性が減弱した。しかし、ｈ２３Ｈ８−Ｓ２およびｈ２３Ｈ８−Ｓ３のヒト化抗体は、基の２３Ｈ８抗体とほぼ同等もしくは増強された中和活性を示した。この結果から、軽鎖のＹ４９Ｓ、Ｐ８０Ｒの変異は、ヒト化抗体の中和活性に望ましいと考えられる。
１３Ｂ３抗体については、ｈ１３Ｂ３−Ｓ１、ｈ１３Ｂ３−Ｓ２、ｈ１３Ｂ３−Ｓ３およびｈ１３Ｂ３−Ｓ４のヒト化抗体は、基の１３Ｂ３抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。
１２Ｂ１０抗体については、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ１、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ２、ｈ１２Ｂ１０−Ｓ３およびｈ１２Ｂ１０−Ｓ４のヒト化抗体は、基の１２Ｂ１０抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。
１６Ｆ６抗体については、ｈ１６Ｆ６−Ｓ１、ｈ１６Ｆ６−Ｓ２、ｈ１６Ｆ６−Ｓ３、ｈ１６Ｆ６−Ｓ４およびｈ１６Ｆ６−Ｓ５のヒト化抗体は、基の１６Ｆ６抗体とほぼ同等もしくは増強した中和活性を示した。この結果から、重鎖Ｒ９４Ｖの変異、および軽鎖Ａ４３Ｓの変異はヒト化抗体の中和活性に望ましいと考えられ、軽鎖２０番目のアミノ酸はＴまたはＳが許容されると考えられ、軽鎖６３番目のアミノ酸はＳまたはＴが許容されると考えられ、軽鎖６７番目のアミノ酸はＳまたはＡが許容されると考えられ、軽鎖７３番目のアミノ酸はＬまたはＦが許容されると考えられる。

Figure 2020059743

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Figure 2020059743
ヒト化ＥＬ抗体のＨＬおよびＬＰＬ酵素活性阻害能の測定
ヒトＨＬをコードするＤＮＡをクローニングしたｐｃＤＮＡ３．１(インビトロジェン社製)をＦｒｅｅＳｔｙｌｅ ＨＥＫ２９３Ｆ細胞にトランスフェクションし、３７℃、８%ＣＯ２で２日間培養した。培養液を遠心し、細胞を回収して、２０U/mLのヘパリンを含むＰＢＳにて懸濁し、３７℃で４５分間インキュベーションした。その後、遠心により細胞を除去して得た上清をヒトＨＬ酵素溶液とした。同様の操作により、ヒトＬＰＬ酵素溶液を調製した。２０mM トリス塩酸緩衝液(ｐＨ７．５)、０．５％ウシ血清アルブミン、４mM 塩化カルシウム、１５０mM 塩化ナトリウム、０．５mg/mLヒトＶＬＤＬ(ＩＮＴＲＡＣＥＬ社製）で構成される反応溶液にＥＬ抗体溶液を添加した後、ヒトＨＬ、またはヒトＬＰＬ酵素溶液を添加した(全量で１０μl)。３７℃で２時間反応後、ＨＬもしくはＬＰＬ酵素によって、ＶＬＤＬから生成される遊離脂肪酸(ＮＥＦＡ)をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー(和光純薬工業社製)で測定し、そのＮＥＦＡ量を酵素活性指標とした。ＥＬ抗体を添加しない時の酵素活性をコントロール値とし、コントロール値に対する比活性を算出し、各抗体の５０％阻害濃度(ＩＣ５０値)を表１２に示した。
その結果、ｈ１６Ｂ３−Ｓ２、ｈ５５Ａ１−Ｓ１、ｈ５３Ａ１１−Ｓ１、ｈ２３Ｈ８−Ｓ２およびｈ１３Ｂ３−Ｓ１のヒト化抗体が、ＨＬとＬＰＬの酵素活性を阻害しないことがわかった。

Figure 2020059743
ヒト化ＥＬ抗体の結合親和性測定
各ヒト化ＥＬ抗体の結合親和性をＢｉａｃｏｒｅを用いて測定した。抗Ｃ２タグ抗体をＳｅｎｓｏｒ ｃｈｉｐ ＣＭ５（ＧＥ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ社製）にアミンカップリング法により固定化し、ＨＢＳ−Ｐ（ＧＥ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ社製）で希釈したヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬ、ヒト（３３１−４５９）マウスキメラＥＬ、カニクイザルＥＬまたはマウスＥＬヘパリン抽出液を添加し、Ｓｅｎｓｏｒ ＣｈｉｐにＥＬをトラップした。その後、ＨＢＳ−Ｐで希釈したＥＬ抗体を添加し、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて、Ｂｉｖａｌｅｎｔ ｆｉｔｔｉｎｇにより結合親和性を算出した。各抗体のヒト（１−３０５）マウスキメラＥＬ、ヒト（３３１−４５９）マウスキメラＥＬ、カニクイザルＥＬまたはマウスＥＬに対する結合親和性を表１３−１、表１３−２、表１４および表１５に示した。

Figure 2020059743
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本発明の血管内皮リパーゼの酵素活性を阻害するヒト化抗体は、血管内皮リパーゼに対して選択的な阻害活性を有しているので、脂質代謝異常症、高脂血症、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病、肥満および／またはシンドロームＸの治療および／または予防のための医薬として有用である。

Claims (5)

  1. ＣＤＲ１として配列番号２５、ＣＤＲ２として配列番号１０６およびＣＤＲ３として配列番号２４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに、
    ＣＤＲ１として配列番号１６、ＣＤＲ２として配列番号１７およびＣＤＲ３として配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
    を有する血管内皮リパーゼに対するヒト化モノクローナル抗体またはその抗体断片（但し、該抗体断片は、血管内皮リパーゼに特異的な結合性を有する。）を含有する注射剤。
  2. 該重鎖可変領域が、配列番号７５のアミノ酸配列を有し、
    該軽鎖可変領域が、配列番号７６のアミノ酸配列を有する、請求項１記載の注射剤。
  3. 該抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、一本鎖抗体、ジスルフィド安定化抗体、２量化体Ｖ領域断片である、請求項１又は２記載の注射剤。
  4. 血管内皮リパーゼが関連する疾患の治療または予防のための請求項１〜３のいずれかに記載の注射剤。
  5. 血管内皮リパーゼが関連する疾患が脂質代謝異常症である、請求項４記載の注射剤。
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