JP2019533571A - 新規のクロマトグラフィー媒体 - Google Patents
新規のクロマトグラフィー媒体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019533571A JP2019533571A JP2019516687A JP2019516687A JP2019533571A JP 2019533571 A JP2019533571 A JP 2019533571A JP 2019516687 A JP2019516687 A JP 2019516687A JP 2019516687 A JP2019516687 A JP 2019516687A JP 2019533571 A JP2019533571 A JP 2019533571A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- medium
- imac
- pentadentate
- prototype
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
- B01J20/289—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers bonded via a spacer
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3804—Affinity chromatography
- B01D15/3828—Ligand exchange chromatography, e.g. complexation, chelation or metal interaction chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
- B01J20/28004—Sorbent size or size distribution, e.g. particle size
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
- B01J20/28009—Magnetic properties
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
- B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
- B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
- B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
- B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
- B01J20/3251—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising at least two different types of heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulphur
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3265—Non-macromolecular compounds with an organic functional group containing a metal, e.g. a metal affinity ligand
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3291—Characterised by the shape of the carrier, the coating or the obtained coated product
- B01J20/3293—Coatings on a core, the core being particle or fiber shaped, e.g. encapsulated particles, coated fibers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
Description
Qは直径30〜40μmのクロマトグラフィービーズであり、
Sはスペーサーであり、
Lはアミド結合であり、
XはCOOHであり、n=2〜3である。)
QB10%での動的結合容量(DBC)は、60μmよりも大きいビーズサイズを有するIMAC媒体と比較して2倍超であり、好ましくはQB10%は3倍超以上、例えば6倍以上である。
材料および方法
IMACプロトタイプ
1.Excel HPプロトタイプ
・Sepharose High Performanceに結合したLS018819 Excel配位子、アリル含有量170μmole/ml
・Sepharose High Performanceに結合したLS019382 Excel配位子、アリル含有量189μmole/ml
・参照カラム:HiTrap excel、1ml、GE Healthcare
2.デキストランコーティングプロトタイプ
・LS018835AデキストランコーティングIMAC Sepharose High Performance
・参照カラム:LS018835B NaOH処理エポキシ活性化IMAC Sepharose High Performance
HiTrapパッキング方法(GE Healthcare Bio−Sciences AB)に従って、1mlのHiTrapカラムにプロトタイプ樹脂をパッキングした。HiTrapカラムのパッキングには50〜60%のスラリー濃度を使用した。
精製ヒスチジンタグ付きマルトース結合タンパク質(MBP−His)および緑色蛍光タンパク質(GFP−His)をカラムに充填することによって、動的結合容量(DBC)を試験した。吸光度を記録し、試料吸光度の10%ブレークスルー(QB10%)での容量を計算した。
17%グリセロール、20mMリン酸ナトリウム、500mM NaCl、pH7.4中のヒスチジン(6)タグ付き緑色蛍光タンパク質(GFP−His)、濃度2.5mg/ml。
大腸菌、20mMリン酸ナトリウム、500mM NaCl、pH7.4中のヒスチジン(6)タグ付き緑色蛍光タンパク質(GFP−His)、濃度約3mg/ml。
結合緩衝液、A:20mMリン酸ナトリウム、500mM NaCl、pH7.4
溶出緩衝液、B:結合緩衝液中の500mMイミダゾール
クロマトグラフィー法
この実験では、Sepharose High Performance(GE Healthcare Bio−Sciences AB)(ビーズサイズ直径34μm)に、欧州特許第2164591B1号明細書に記載されている五座配位子(pentaligand)を結合させた。このビーズは、大きいビーズサイズを有する樹脂と比較して、結合のための表面積を増加させる小さいビーズサイズを有する。ビーズサイズを小さくすると、カラム内の繰り返し結合(オフ−オン事象)の数も増えるはずである。これは、試料適用中の標的タンパク質の漏出を減らすのに有益であり得る。従来のIMAC媒体と比較してわずかに大きい孔径のHigh Performance樹脂もまた、標的タンパク質への接近可能性を高め得る。
ガラスフィルター(p3、6GV)上で、120mlのSepharose HP樹脂を水で洗浄し、水に吸引させた。次いで、7.5mlの蒸留水とともに、120gの吸引された樹脂をジャケット付き反応器に移した。撹拌を開始し、12mlの50%NaOHをスラリーに加えた。スラリーを30分間撹拌し、次いで47℃に加熱し、60mlのAGEを加えた。約18時間後、撹拌を止め、スラリーをガラスフィルターに移した。その後、スラリーを水(1GV×3)、EtOH(1GV×3)、次いで水(1GV×6)で洗浄した。
100g/mlの吸引された乾燥アリル化ゲルを反応反応器に移し、続いて5分間撹拌しながら300mlの水および4.6gの酢酸ナトリウム三水和物を加えた。ゲルの色が濃い暗黄色になるまで、反応混合物に約5mlの臭素を加え、室温で5分間撹拌しながら反応を放置した。反応混合物に約7.8gのギ酸ナトリウムを加え、黄色が消えるまで15分間撹拌しながら反応を放置した。ガラスフィルター(P3)上でゲルを水(10×1GV)で洗浄した。
工程2から得られた100gの臭素化ゲルを反応反応器に移し、150mlのアンモニア溶液を加え、反応混合物を一晩45℃で放置した。ガラスフィルター(P3)上でゲルを10×1GVで洗浄した。
工程3から得られた100gのアミノ化ゲルをアセトン(6×1GV)で洗浄し、反応反応器に移し、100mlのアセトンを加えた。反応混合物に2.9gのDIPEAを加え、5分間撹拌しながら反応を放置した。反応混合物に5.3gのEDTAを加え、混合物を一晩24〜28℃で放置した。ゲルをアセトン(3×1GV)、続いて水(3×1GV)で洗浄した。吸引されたゲルを反応器に移し、2M NaOH(1GV)を加えて未反応のEDTAのアクセス(access)を加水分解した。ガラスフィルター(P3)上でゲルを6×1GVで洗浄した。
2つの異なる精製ヒスチジンタグ付きタンパク質(MBP−HisおよびGFP−His)を用いて動的結合容量、DBCを試験し、10%ブレークスルー、QB10%で計算した。弱結合MBP−Hisの損失は、市販のHisTrap excelからは、ほぼ即座に始まったのに対して、Excel HPプロトタイプLS018819では遅延が検出された(図1)。計算されたQB10%は、HisTrap excelについてはLS018819 MBP−His(約5mg)/樹脂(ml)であり、プロトタイプについてはMBP−His(約30mg)/樹脂(ml)であった(図2)。したがって、プロトタイプのQB10%は約6倍優れていた。
ヒスチジンタグ付きタンパク質に対する高容量はまた、1つまたは複数のヒスチジンを含む不純物に対する高容量をもたらし得る。大腸菌溶解物中のGFP−Hisの試料をカラムに加えることによって、最終純度を検討した。不純物が結合するための遊離配位部位を残すために低充填を使用した。イミダゾールを加えずに試料を適用し、イミダゾール勾配により溶出した。還元SDS−PAGEによって溶出ピークを分析した(図5)。図5のレーン1〜3の2つの主要なバンドの理由は、GFP−Hisの既知の切断(まだヒスチジンタグが残っている)によって説明することができると考えられる。2つの樹脂の最終純度は同等であった。
デキストランコーティングの目的は、ヒスチジンタグ付きタンパク質の結合を維持しながら、1つまたは複数のヒスチジンを含む不純物の多点結合を防ぐことであった。(New dextran−coated immobilized metal ion affinity chromatography matrices for prevention of undesired multipoint adsorptions,Journal of Chromatography A,915(2001)97−106.)この場合、四座のIMAC Sepharose High Performance(GE Healthcare Bio−Sciences AB)を使用したが、結果は五座樹脂にも当てはまるはずである。
ガラスフィルター上で、ゲル(IMAC Sepharose High Performance)のスラリー約100mlを水(5×1GV)で洗浄した。次いでゲルを吸引乾燥し、エポキシ活性化のために50gを250mlの三口フラスコに量り入れた。次いでフラスコに12mlの水を加え、撹拌しながら28℃に加熱し始めた。撹拌中に8mlの50%NaOHを加え、次いでスラリーを28℃で約10分間撹拌し、その後エピクロロヒドリン(12.5ml)を加え、次いで3.5時間撹拌した。次いで、ガラスフィルター上でゲルを水(6×1GV)で洗浄した。
約3時間回転撹拌しながら、35.2mlの水を入れたDuranフラスコ内で、8gのデキストランTF(10%Dx TF)を溶解した。次いで、上記から得られた40gの排出されたエポキシ活性化ゲルをフラスコに加え、その後スラリーを40℃に加熱し、60分間回転撹拌した。次いで、フラスコに4.8mlの50%NaOHおよび0.1gのNaBH4を加え、その後40℃で一晩回転撹拌した。ゲルを水(10×1GV)で洗浄した。
50mlのFalconチューブに、8.8mlの蒸留水とともに、上記から得られた10gの排出されたエポキシ活性化ゲルを加え、均一なスラリーになるまで振盪した。次いで、チューブに1.2mlの50%NaOHおよび0.05gのNaBH4を加えた。その後チューブを振盪台の上に置き、40℃に加熱し、一晩振盪した。
標準的な方法(120℃の乾燥温度)を用いて、プロトタイプの乾燥重量を測定した。
上記のように、エポキシ活性化IMAC Sepharose High Performanceに約10%のデキストラン層を加えた。試料は大腸菌溶解物中のGFP−Hisであり、イミダゾール勾配を用いて溶出を行った。クロマトグラムによると、参照では、280nmでの吸光度を有するプレピークが検出されたが、デキストランコーティングプロトタイプLS018835A(図示せず)では検出されなかった。プレピークは490nmでの吸光度(GFP−Hisに特異的)を欠き、これは混入物の含有を示すものであった。還元SDS−PAGEによって溶出試料を分析した(図6)。結果は、デキストランコーティング樹脂の方が純度が高いことを示しているが、エポキシ活性化樹脂LS018835Bも参照よりも高い純度を有した。したがって、両プロトタイプは、参照よりも明らかに優れた純度特性を有した。
Claims (13)
- 直径5〜60μmのクロマトグラフィービーズQに結合した五座配位子を含むIMAC(固定化金属アフィニティークロマトグラフィー)媒体。
- 請求項1に記載のIMAC媒体であって、前記配位子が五座であり、前記媒体が下記式を有し、
Qはクロマトグラフィービーズであり、
Sはスペーサーであり、
Lはアミド結合であり、
XはCOOHであり、
n=2〜3である。)
QB10%での動的結合容量(DBC)が、60μmよりも大きいビーズサイズを有するIMAC媒体と比較して2倍超であるIMAC媒体。 - 前記QB10%が少なくとも3倍以上である、請求項2に記載の媒体。
- Qが多孔質の天然または合成ポリマー、好ましくはアガロースである、請求項1または2に記載の媒体。
- Qがアガロースから製造され、Qの直径が30〜40μmである、請求項1乃至4のいずれか1項または複数の項に記載の媒体。
- Qがデキストランコーティングされている、請求項1乃至5のいずれか1項または複数の項に記載の媒体。
- nが2、すなわちエチレンであり、Sが好ましくは、少なくとも3個の原子を含むCおよびOの親水性鎖でなければならない、請求項2乃至6のいずれか1項または複数の項に記載の媒体。
- 前記Q吸着剤に、Cu2+、Ni2+、Zn2+、Co2+、Fe3+およびGa3+からなる群から選択される金属イオンを充填する、請求項1乃至7のいずれか1項または複数の項に記載の媒体。
- Qが磁性粒子を含む、請求項1乃至8のいずれか1項または複数の項に記載の媒体。
- 請求項1乃至9のいずれか1項または複数の項に記載の媒体上に試料を充填することを含む、IMAC媒体上の生体分子の精製方法であって、前記試料が、EDTAなどのキレート剤を含み、QB10%での動的結合容量が、従来のIMAC媒体と比較して2倍超である精製方法。
- 前記IMAC媒体が請求項2乃至8のいずれか1項または複数の項に記載の五座媒体であり、QB10%が3〜6倍である、請求項10に記載の方法。
- 前記生体分子が、少なくとも2つ、好ましくは少なくとも6つのHis残基で標識されている、請求項10または11に記載の方法。
- アガロースから製造され、デキストランの外層を含むクロマトグラフィービーズに結合した四座または五座配位子を含むIMAC媒体。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1616758.7A GB201616758D0 (en) | 2016-10-03 | 2016-10-03 | Novel chromatography media |
GB1616758.7 | 2016-10-03 | ||
PCT/EP2017/074459 WO2018065269A1 (en) | 2016-10-03 | 2017-09-27 | Novel chromatography media |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019533571A true JP2019533571A (ja) | 2019-11-21 |
JP7114150B2 JP7114150B2 (ja) | 2022-08-08 |
Family
ID=57571050
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019516687A Active JP7114150B2 (ja) | 2016-10-03 | 2017-09-27 | 新規のクロマトグラフィー媒体 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20200023338A1 (ja) |
EP (1) | EP3519088A1 (ja) |
JP (1) | JP7114150B2 (ja) |
CN (1) | CN109789385A (ja) |
CA (1) | CA3035273A1 (ja) |
GB (1) | GB201616758D0 (ja) |
WO (1) | WO2018065269A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113351191B (zh) * | 2021-05-10 | 2023-12-01 | 翌圣生物科技(上海)有限公司 | 多齿配体的新型imac色谱介质及其制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005112800A (ja) * | 2003-10-08 | 2005-04-28 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | Nmrによる膜蛋白質とリガンドの相互作用解析に用いる膜蛋白質再構成法 |
US20110003941A1 (en) * | 2007-07-09 | 2011-01-06 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Method for preparation of a biomolecule adsorbent |
US20130072638A1 (en) * | 2010-06-01 | 2013-03-21 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Novel chelator and use thereof |
JP2015028026A (ja) * | 2007-08-06 | 2015-02-12 | マックス−プランク−ゲゼルシャフト ツール フォーデルング デル ヴィッセンシャフテン エー.ヴェー. | 固定金属イオンクロマトグラフィー(imac)のためのキレート基の固定 |
WO2017069254A1 (ja) * | 2015-10-23 | 2017-04-27 | 富士フイルム株式会社 | アフィニティクロマトグラフィ担体および生体物質の精製方法 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007139470A1 (en) * | 2006-05-30 | 2007-12-06 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | A method of preparing an immobilised metal ion chromatography adsorbent and methods of purifying proteins, peptides or polynucleotides. |
US9433922B2 (en) * | 2007-08-14 | 2016-09-06 | Emd Millipore Corporation | Media for membrane ion exchange chromatography based on polymeric primary amines, sorption device containing that media, and chromatography scheme and purification method using the same |
CN103122029B (zh) * | 2011-11-18 | 2015-10-28 | 复旦大学 | Klk14蛋白亲和层析纯化人重组spink6蛋白的方法 |
AU2013326897A1 (en) * | 2012-10-04 | 2015-05-07 | Immunogen, Inc. | Use of an ion exchange membrane to remove impurities from cell-binding agent cytotoxic agent conjugates |
JP6652554B2 (ja) * | 2014-09-02 | 2020-02-26 | イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン | ナノフィブリル化表面特徴を有する高表面積繊維媒体 |
-
2016
- 2016-10-03 GB GBGB1616758.7A patent/GB201616758D0/en not_active Ceased
-
2017
- 2017-09-27 EP EP17772714.6A patent/EP3519088A1/en not_active Ceased
- 2017-09-27 JP JP2019516687A patent/JP7114150B2/ja active Active
- 2017-09-27 WO PCT/EP2017/074459 patent/WO2018065269A1/en active Application Filing
- 2017-09-27 US US16/337,236 patent/US20200023338A1/en not_active Abandoned
- 2017-09-27 CN CN201780061282.8A patent/CN109789385A/zh active Pending
- 2017-09-27 CA CA3035273A patent/CA3035273A1/en active Pending
-
2022
- 2022-05-03 US US17/735,882 patent/US20220258130A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005112800A (ja) * | 2003-10-08 | 2005-04-28 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | Nmrによる膜蛋白質とリガンドの相互作用解析に用いる膜蛋白質再構成法 |
US20110003941A1 (en) * | 2007-07-09 | 2011-01-06 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Method for preparation of a biomolecule adsorbent |
JP2015028026A (ja) * | 2007-08-06 | 2015-02-12 | マックス−プランク−ゲゼルシャフト ツール フォーデルング デル ヴィッセンシャフテン エー.ヴェー. | 固定金属イオンクロマトグラフィー(imac)のためのキレート基の固定 |
US20130072638A1 (en) * | 2010-06-01 | 2013-03-21 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Novel chelator and use thereof |
WO2017069254A1 (ja) * | 2015-10-23 | 2017-04-27 | 富士フイルム株式会社 | アフィニティクロマトグラフィ担体および生体物質の精製方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
CESAR MATEO ET AL.: "Affinity chromatography of polyhistidine tagged enzymes New dextran-coated immobilized metal ion aff", JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A, vol. 915, JPN6021026284, 2001, pages 97 - 106, XP004233627, ISSN: 0004549655, DOI: 10.1016/S0021-9673(01)00626-4 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20220258130A1 (en) | 2022-08-18 |
EP3519088A1 (en) | 2019-08-07 |
CA3035273A1 (en) | 2018-04-12 |
JP7114150B2 (ja) | 2022-08-08 |
CN109789385A (zh) | 2019-05-21 |
GB201616758D0 (en) | 2016-11-16 |
WO2018065269A1 (en) | 2018-04-12 |
US20200023338A1 (en) | 2020-01-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Porath et al. | Immobilized metal affinity adsorption and immobilized metal affinity chromatography of biomaterials. Serum protein affinities for gel-immobilized iron and nickel ions | |
US4423158A (en) | Ion adsorbent for metals having a coordination number greater than two | |
US8999157B2 (en) | Method for preparation of a biomolecule adsorbent | |
JP5999899B2 (ja) | 抗体のクロマトグラフィー精製法 | |
US20060027501A1 (en) | Method of generating metal chelating affinity ligands | |
JP2008156617A (ja) | クロマトグラフ用樹脂およびその使用方法 | |
EP2021093B1 (en) | A method for generating metal chelating affinity ligands | |
Heebøll-Nielsen et al. | Fractionation of whey proteins with high-capacity superparamagnetic ion-exchangers | |
US20100016564A1 (en) | Method of preparing an immobilised metal ion chromatography adsorbent and methods of purifying proteins, peptides or polynucleotides | |
CN101119797A (zh) | 液相色谱法 | |
US20220258130A1 (en) | Chromatography Media | |
Zachariou et al. | High-performance liquid chromatography of amino acids, peptides and proteins: CXXI. 8-Hydroxyquinoline-metal chelate chromatographic support: an additional mode of selectivity in immobilized-metal affinity chromatography | |
JPH0337976B2 (ja) | ||
CN113351191B (zh) | 多齿配体的新型imac色谱介质及其制备方法 | |
CN107652352B (zh) | 一种用于组氨酸标签蛋白纯化的亲和层析介质 | |
CA2055869A1 (en) | Optical isomer separating agents | |
WO2022244890A1 (ja) | ボロン酸アフィニティクロマトグラフィー用分離剤担体、カラム及びそれを用いた測定方法 | |
BO et al. | Preparation of Immobilized Metal Affinity Chromatographic Packings Based on Monodisperse Hydrophilic Non‐porous Beads and Their Application | |
JP2005281399A (ja) | 分子鋳型材料の製造方法、分子鋳型材料および標的物質の分離・精製方法 | |
WO2004087284A1 (en) | Preparation of a metal chelating separation medium | |
JPH05246898A (ja) | 光学異性体用分離剤 | |
Wu et al. | Noncovalent linking of a chiral selector to unmodified silica gel through amine functional groups | |
Grinberg et al. | Chiral Separations |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190527 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20190521 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20190527 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200715 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210625 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210712 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210927 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211129 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220209 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220627 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220721 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7114150 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |