JP2019531282A

JP2019531282A - 抗フケ組成物

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Publication number: JP2019531282A
Application number: JP2019513069A
Authority: JP
Inventors: レベッカ・スーザン・ジンジャー; ジェニファー・エリザベス・ポープル
Original assignee: ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ
Priority date: 2016-10-13
Filing date: 2017-09-27
Publication date: 2019-10-31
Also published as: EA201990432A1; AU2017341225A1; WO2018069045A1; EP3525887B1; CA3038697A1; EP3525887A1; US20190231666A1; EA038875B1; BR112019007555A2

Abstract

頭皮及び/又は毛髪への局所適用用組成物における活性抗フケ剤としての、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の使用が開示されている。

Description

本発明は、とりわけ、抗フケ組成物、新規の、ある種の抗フケ剤を使用する方法、抗フケ組成物を製造する方法、フケを処置する、及び/又はフケを予防する方法に関連する。

ヘアトリートメント組成物は、よく知られており、長期間広く用いられてきた。基本的な洗浄機能の他に、ヘアトリートメント組成物は、組成物中に対応する機能性添加剤を含むことによって、コンディショニング、抗フケ、冷却等の利点をもたらすこともできる。しかし、いくつかの有益な作用剤が組成物に含まれるとき、その成分間の相互作用が極めて複雑になることがある。

フケは、一般的な皮膚の症状であり、その一切の原因がよく理解されていない。従来の意見の一致は、フケが、3つの主な影響因子:マラセチア真菌の定着、皮脂生成、及び個体の体質による、多因子性の症状であることである。抗フケ活性化合物を含んだ、シャンプー及び/又はコンディショナー等の、トリートメント製品を適用（塗布）することによって、症状を処置することが知られている。とりわけ、最も知られている活性抗フケ化合物は、ピリチオン亜鉛等のピリチオン金属、ケトコナゾール及びクリンバゾール等の抗真菌剤、並びに様々なセレン硫化物である。

米国特許第6048886号独国特許第2842472号国際公開第96/31188号パンフレット

Lambら、Science 2006、313、1929〜1935頁 Zhang 2008 BMC Bioinformatics、9、258頁 Cheng Pac. Symp. Biocomput. 2013、5〜16頁 Rho 2011 Gynecol. Oncol. 120、121〜127頁 Reka 2011 J. Thorac. Oncol. 6、1784〜92頁 Yeh 2012 Am J. Respir. Crit. Care Med. 186、1180〜1188頁 Babcock 2013 PLoS One. 8:e69513頁 Nygren 2013 J. Cancer Res. Oncol. 139、2133〜40頁 Juら、2015 Cell Death Dis. 6:e1801頁 Wenら 2011 PLoS One 6:e18278頁

しかし、抗フケトリートメントがその効力を失うことが知られていないわけではなく、且つある種の抗フケシャンプーは、妊娠中、又は授乳中の女性による使用を勧められない。したがって、とりわけ、安全な活性剤をベースにする場合、植物又は植物由来製品に自然に存在することが明らかな、代替的な抗フケトリートメントが必要である。しかし、フケを処置する、新規の、有効な手法を試み、特定することは全く挑戦的なことである。これは、フケが、皮膚、皮脂、及び皮膚常在菌に関係する因子の相互作用を含む、多因子性の症状であり、現在、これらの因子の相互作用、及びフケの発現をもたらす過程が完全には理解されていないためである。更に、いくつかのパラメーターが、健康な皮膚とフケ症の皮膚との間で異なることが知られているが、これらの違いが原因又は影響をもたらすかどうかは明らかではない。

第1の態様において、本発明は、フケの処置及び/又は予防に使用するための、頭皮又は毛髪への局所適用用組成物であって、活性抗フケ剤としてミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を含む、組成物を提供する。

第2の態様において、本発明は、頭皮及び/又は毛髪への局所適用用組成物における活性抗フケ剤としての、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の使用を提供する。

第3の態様において、本発明は、頭皮及び/又は毛髪への局所適用用抗フケ組成物を製造する方法であって、組成物が、活性抗フケ剤として、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を含み、方法が、
a)ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を、皮膚科学的に許容される希釈剤又は担体と混合する工程と、
b)好適な包装で、工程(a)から得られた混合物をパッケージングする工程と
を含む、方法を提供する。

本明細書において、「皮膚科学的に許容される」は、過度の毒性、アレルギー反応、炎症等を引き起こすことなく、ヒトの皮膚組織と接触するのに好適であることを意味する。

第4の態様において、本発明は、ヒト対象のフケを予防する、及び/又は処置する方法であって、対象の頭皮及び/又は毛髪に、フケを予防し、及び/又は処置するのに十分な、有効な量の、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を適用する工程を含む、方法を提供する。

好ましい一実施形態において、本発明の第4の態様の方法は、純粋に美容用である。

本発明において、「予防する」は、個体の頭皮の、又は毛髪の皮膚片の発生を予防するか、又は遅らせることを含む。「処置する」は、組成物を適用するときに、フケ症の個体の皮膚片形成を中止させることを意味し、個体の皮膚又は毛髪の、皮膚片の、平均の数及び/又は量を減らすことによって、少なくとも、検出可能な、症状の改善をもたらすことを意味する。

平均の皮膚片数又は皮膚片量は、例えば、対象の毛髪を、所定のストローク数でブラッシングするか、又は櫛でとかし、回収された皮膚片を集め、数えるか、又は精密な実験室用秤量天秤を用いて、その量を測定することによって確かめることができる。

第4の態様の方法は、典型的には、本発明の第1の態様の組成物を、対象の頭皮及び/又は毛髪に繰り返し適用することを要するであろう。組成物は、予防効果のために、好ましくは、少なくとも毎週処方することができ、とりわけ、活性フケを有する対象の処置には(すなわち、処置効果のために)、より頻繁に、例えば毎日用いることができる。

特に、本発明の第4の態様の方法は、典型的には、対象の皮膚及び/又は毛髪の表面で、約5μg/mlより高い、好ましくは約6μg/ml以上の、局所濃度に到達するように、十分な量のミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を、対象の頭皮及び/又は毛髪に適用する工程を含むことになる。望ましくは、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の局所濃度は、6.25μg/ml以上である。ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の局所濃度の上限は、皮膚科学的許容性の要件と両立したままで、成し遂げられるものであればよい。例示として、局所濃度は、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体10μg/mlまで、又は20μg/mlまで、又は40μg/mlまで、又は更に100μg/mlまでであってもよい。

本発明の組成物のミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の濃度は、好ましくは5μg/mlより高く、より好ましくは6μg/mlより高く、最も好ましくは6.25μg/mlより高くなるであろう。事によると、組成物の、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の濃度は、対象の皮膚及び/又は毛髪で好ましい局所濃度を得るために、これよりもより高くなる必要があるかもしれない。しかし、同様に、組成物を繰り返し適用した後、これらの物質が蓄積されるならば、より低濃度のミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を含む組成物を用いて、対象の皮膚及び/又は毛髪の、所望の局所濃度を得ることが可能である。

組成物は、好都合なことに、対象の頭皮及び/又は毛髪の局所適用用の、シャンプー及び/又はコンディショナー又はローションの形態をとる。

ミリセチンの構造を、図1に示す。ミリセチンは、果物(とりわけ液果類)、ある種の野菜、木の実、茶、及び赤ワインで見つかる天然化合物である。

本発明において、ミリセチン誘導体は、ミリセチンと同じ、基本的環構造を有するが、環構造に帰属したOH基の1つ又は複数の位置での置換を含む、化合物を意味する。

好適な置換基の例には、糖類(とりわけ、六炭糖又は五炭糖)、低級アルキル(C₁〜C₄、好ましくはC₁又はC₂)、及び置換低級アルキル基が挙げられる。好都合なことに、誘導体は、1つの位置のみが置換される。好ましい誘導体は、3位の置換を含む。

望ましくは、誘導体は、グルコシド、ガラクトシド、又はルチノシド等のグリコシドである。好ましくは、誘導体は、ミリセチン-3-グルコシド又はミリセチン-3-ガラクトシドである。

活性抗フケ剤である、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体は、典型的には、組成物中に、0.0001〜15.0w/w%の範囲の、好ましくは0.001〜10.0w/w%の範囲の、より好ましくは0.005〜10.0w/w%の範囲の、最も好ましくは0.01〜10w/w%の範囲の濃度で含まれる。典型的な好ましい濃度は、0.025〜5.0w/w%の範囲であり得る。ミリセチンと、1種又は複数のミリセチン誘導体との両方が組成物中に含まれる場合、その全体の合わせた濃度は、上記に示した好ましい範囲内にあると意図される。

簡潔に、例示として、本出願人によれば、フケ症の対象からのヒトの皮膚細胞の実験モデルの遺伝子発現パターンが、フケのない対象で観測されたパターンと異なり、意外なことに、ミリセチンをMCF7細胞(乳がん細胞株)へ添加したデータは、ミリセチンによって、健康な対象と比較して、フケ症の対象からの皮膚生検でみられる変化の、全く逆の、遺伝子発現変化のパターンを引き起こし得ることを示した。したがって、本出願人は、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体により、フケが、遺伝子発現パターンに関して引き起こす影響を後進させる、又は弱めることによって、フケの予防、及び/又は処置で活性剤として有効であると仮定する。

ミリセチンの構造式を示す図である。健康な頭皮と比較して、フケ症の対象で有意に上方制御される、様々な遺伝子の発現を示す棒グラフである。左側のy軸は、発現の増加量を示す(log倍率変化)。図2Aに示されたものと同様であるが、遺伝子の発現が、健康な頭皮と比較して、フケ症の頭皮で、有意に下方制御される遺伝子を示す棒グラフである。再び、左側のy軸は、図2Bでは負である、発現の変化量(log倍率変化)を示す。炎症性サイトカインのカクテル(IL-17、IL-22、TNFα)で刺激された後、陰性対照培養及び陽性対照培養で、及び様々な濃度のミリセチンが含まれる状態で培養された初代ヒト角化細胞から放出されたIL-8の量(タンパク質100μgあたりのIL8(pg))を示す棒グラフである。対照からのデータは、スチューデントt検定を用いた、ミリセチン処置からのデータとの統計的比較で用いた。

有利なことに、本発明の組成物は、20℃で液体又はゲルである。ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体は、典型的には、溶液の組成物中に含まれているが、代替的に、固体、コロイド、エマルジョン、又は任意の他の好都合な形態で含まれることもある。

前述したように、組成物は、典型的には、シャンプー及び/又はコンディショナー等の美容用組成物であるが、頭皮及び/又は毛髪への局所適用に好適な、任意の配合物であってもよい。

ミリセチンは、せいぜい、水中でやや難溶(25℃の溶解度約55mg/L)である。したがって、組成物が水性液体である場合、皮膚への局所適用に許容される、ミリセチン用の溶媒を含むことが有利であり得る。好適な溶媒には、エタノール、イソプロパノール、及びその混合液等のアルコール類が挙げられる。アルコール、又は他の、許容されるミリセチン溶媒は、配合物中に、0.1〜25v/v%、好ましくは0.5〜20v/v%、より好ましくは1〜10v/v%の範囲で含まれていてもよい。

組成物が、ミリセチン誘導体を含むが、実質的にミリセチンを含まない場合、誘導体の同一性に応じて、水中で十分な溶解度を有することがあるので、水以外の溶媒の使用を避けることが好ましい。例えば、ミリセチングリコシドは、一般に、ミリセチンよりも、水中でより大きな溶解度を有する。

組成物は、複数の様々なミリセチン誘導体を含んでもよく、又は1種のミリセチン誘導体を含んでもよい。1種又は複数のミリセチン誘導体は、ゾル抗フケ活性剤として含まれてもよく、又はミリセチン及び/若しくは他の既知の抗フケ剤と組み合わせて含まれてもよい。逆に、ミリセチンは、組成物中に、ゾル活性抗フケ剤として含まれてもよく、又は再び他の既知の抗フケ剤と組み合わせて含まれてもよい。

好ましくは、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体に加えて、組成物は、従来の既知の抗フケ活性剤を含むことができる。こうした従来の追加の作用剤には、抗微生物剤、とりわけ抗真菌剤が挙げられる。好ましい抗真菌剤は、典型的には、マラセチア属に対して最小発育阻止濃度約50mg/ml以下を示す。

好適な、追加の抗フケ剤には、アゾール系抗真菌剤、オクトピロックス、ピリチオン金属塩、セレン硫化物化合物、及びその混合物からなる群から選択される、1種又は複数の化合物が挙げられる。好ましいアゾール系抗真菌剤は、ケトコナゾール及びクリンバゾールであるが、他のアゾール化合物(例えば、クロトリマゾール、エコナゾール、イソコナゾール、及びミコナゾール)も好適であり得る。好ましいピリチオン金属塩は、ピリチオン亜鉛、ピリチオン銅、ピリチオン銀、及びピリチオンジルコニウムであり、その中で最も好ましいのは、ピリチオン亜鉛である。

好ましくは、組成物中に含まれ得る、他の抗フケ剤には、銅と結合しているか、又は結合していないトリペプチド1(すなわち、トリペプチドグリシン-ヒスチジン-リジン;GHK)(GHKトリペプチドは、CuIIイオンと高い親和性を有する);メラトニン(米国特許第6048886号参照)、及びジプロフィリン(ジフィリンとも称される)(独国特許第2842472号参照)の、1種又は複数が挙げられる。

好ましくは、任意の追加の抗フケ剤又は作用剤は、組成物の0.01〜10質量%で、より好ましくは組成物の0.1〜5.0質量%で含まれている。

追加の従来の抗フケ剤だけでなく、本発明の組成物は、それらに限定されないが、以下:水、洗浄界面活性剤、コンディショニング剤、懸濁化剤、香料、染料又は顔料、pH調整剤又はpH調節剤、真珠光沢剤又は乳白剤、粘度調整剤、及び保存剤等の、シャンプー配合物及び/又はコンディショナー配合物の、1種又は複数の従来の成分を更に含むことができる。一般に、これらの任意の成分はそれぞれ個々に、全組成物の約5w/w%の量まで含むことができる。

好適なアニオン性洗浄界面活性剤の例は、アルキル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルカリールスルホン酸塩、アルカノイルイセチオン酸塩、アルキルコハク酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルエーテルスルホコハク酸塩、N-アルキルサルコシン酸塩、アルキルリン酸塩、アルキルエーテルリン酸塩、並びにアルキルエーテルカルボン酸及びその塩、とりわけ、そのナトリウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩、並びにモノエタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、及びトリエタノールアミン塩である。アルキル基及びアシル基は、一般に8〜18個の、好ましくは10〜16個の炭素原子を含み、不飽和であってもよい。アルキルエーテル硫酸塩、アルキルエーテルスルホコハク酸塩、アルキルエーテルリン酸塩、並びにアルキルエーテルカルボン酸及びその塩は、1分子あたり1〜20個の、エチレンオキシド単位又はプロピレンオキシド単位を含むことができる。

本発明の組成物に用いられる、典型的なアニオン性洗浄界面活性剤には、オレイルコハク酸ナトリウム、ラウリルスルホコハク酸アンモニウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム、ラウリルエーテルスルホコハク酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリルエーテル硫酸アンモニウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸トリエタノールアミン、ココイルイセチオン酸ナトリウム、ラウリルイセチオン酸ナトリウム、ラウリルエーテルカルボン酸、及びN-ラウリルサルコシン酸ナトリウムが挙げられる。

好ましいアニオン性界面活性剤は、アルキル硫酸塩及びアルキルエーテル硫酸塩である。これらの材料は、それぞれの式R₂OSO₃M及びRiO(C₂H₄O)xSO₃M(式中、R₂は、8〜18個の炭素原子のアルキル又はアルケニルであり、xは、約1〜約10の値の整数であり、Mは、アンモニウム等のカチオン、トリエタノールアミン等のアルカノールアミン、ナトリウム及びカリウム等の一価の金属、並びにマグネシウム及びカルシウム等の多価金属である)を有する。最も好ましくは、R₂は、分枝鎖状よりもむしろ直鎖状の、12〜14個の炭素原子を有する。

好ましいアニオン性洗浄界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム及びラウリルエーテル硫酸ナトリウム(n)EO(但し、nは1〜3である)、より好ましくは、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム(n)EO、(但し、nは1〜3である)、最も好ましくは、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム(n)EO(但し、n=l)から選択される。

好ましくは、アルキルエーテル硫酸塩の濃度は、全組成物の0.5質量%〜25質量%、より好ましくは全組成物の3質量%〜18質量%、最も好ましくは全組成物の6質量%〜15質量%である。

本発明の組成物のアニオン性洗浄界面活性剤の全量は、一般に、0.5質量%〜45質量%の範囲、より好ましくは1.5質量%〜20質量%の範囲である。

本発明の組成物は、非イオン性界面活性剤を含むことができる。最も好ましくは、非イオン性界面活性剤は、0〜5質量%の範囲で含まれる。

本発明の組成物に含むことができる、非イオン性界面活性剤には、脂肪族(C8〜C18)の、第一級又は第二級の、直鎖状又は分枝鎖状の、アルコール又はフェノールと、アルキレンオキシド、通常、エチレンオキシドとの縮合生成物であって、一般に6〜30個のエチレンオキシド基を含む縮合生成物が挙げられる。アルキルエトキシレートが特に好ましい。最も好ましいのは、式R-(OCH₂CH₂)nOH(式中、Rは、C12〜C15のアルキル鎖であり、nは5〜9である)を有するアルキルエトキシレートである。

他の好適な非イオン性界面活性剤には、モノアルキルアルカノールアミド及びジアルキルアルカノールアミドが挙げられる。例には、ココモノエタノールアミド又はココジエタノールアミド、及びココモノイソプロパノールアミドが挙げられる。

更に、本発明の組成物に含むことができる非イオン性界面活性剤は、アルキルポリグリコシド(APG)である。典型的には、APGは、1個又は複数のグリコシル基のブロックに、(場合により、架橋基を介して)結合したアルキル基を含むものである。本発明で用いられる、好適なアルキルポリグリコシドは、市販されており、例えば、Oramix NS10 ex Seppic、Plantaren 1200、及びPlantaren 2000 ex Henkelで特定される材料が挙げられる。

両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤を、全組成物の0.5wt〜約8wt、好ましくは1wt〜4wtの範囲の量で含むことができる。

両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤の例には、アルキルアミンオキシド、アルキルベタイン、アルキルアミドプロピルベタイン、アルキルスルホベタイン(スルタイン)、アルキルグリシン酸塩、アルキルカルボキシグリシン酸塩、アルキルアンホ酢酸塩、アルキルアンホプロピオン酸塩、アルキルアンホグリシン酸塩、アルキルアミドプロピルヒドロキシスルタイン、アシルタウリン酸塩、及びアシルグルタミン酸塩が挙げられ、但し、アルキル基及びアシル基は、8〜19個の炭素原子を有する。本発明の組成物で用いられる、典型的な両性界面活性剤及び双性イオン性界面活性剤には、ラウリルアミンオキシド、ココジメチルスルホプロピルベタイン、ラウリルベタイン、コカミドプロピルベタイン、及びココアンホ酢酸ナトリウムが挙げられる。

特に好ましい両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤は、コカミドプロピルベタインである。

前述の両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤のいずれかの混合物もまた好適であり得る。好ましい混合物は、コカミドプロピルベタインと、上記のさらなる両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤との混合物である。好ましいさらなる両性界面活性剤又は双性イオン性界面活性剤は、ココアンホ酢酸ナトリウムである。

シャンプー及びコンディショナー等の、本発明の組成物は、好適には、シリコーンコンディショニング剤及び非シリコーンオイルコンディショニング剤等のコンディショニング剤を含む。

好適なシリコーンコンディショニング剤には、ポリジオルガノシロキサン、特に、CTFA呼称ジメチコンを有するポリジメチルシロキサンが挙げられる。また、本発明の組成物(特に、シャンプー及びコンディショナー)に用いるのに好適なものは、CTFA呼称ジメチコノールを有する、ヒドロキシル末端基を含むポリジメチルシロキサンである。また、本発明の組成物に用いるのに好適なものは、例えば、国際公開第96/31188号パンフレットに記載された、僅かな程度架橋しているシリコーンゴムである。これらの材料は、毛髪に、ボディ、ボリューム、及びスタイリング性、並びに良好なウェットコンディショニング及びドライコンディショニングを付与することができる。また好適なものは、官能化シリコーン、特にアミノ官能化シリコーンである。

好適な非シリコーンオイルコンディショニング剤は、炭化水素油、脂肪酸エステル、及びその混合物から選択される。

さらなるコンディショニング剤は、好適には、シャンプー又はコンディショナーの組成物中に、組成物の全質量に対して、さらなるコンディショニング剤の全質量で、0.05〜10%、好ましくは0.2〜5%、より好ましくは約0.5〜3%の濃度で含まれている。

好ましくは、本発明の組成物は、懸濁化剤を更に含む。好適な懸濁化剤は、ポリアクリル酸、アクリル酸の架橋ポリマー、アクリル酸と疎水性モノマーとのコポリマー、カルボン酸含有モノマーとアクリル酸エステルとのコポリマー、アクリル酸とアクリレートエステルとの架橋コポリマー、ヘテロ多糖類ガム、及び結晶性長鎖アシル誘導体から選択される。長鎖アシル誘導体は、望ましくは、ステアリン酸エチレングリコール、16〜22個の炭素原子を有する脂肪酸のアルカノールアミド、及びその混合物から選択される。ジステアリン酸エチレングリコール及びジステアリン酸ポリエチレングリコール3は、これらが組成物に真珠光沢性を付与するので、好ましい長鎖アシル誘導体である。ポリアクリル酸は、Carbopol420、Carbopol488、又はCarbopol493として市販されている。多官能性剤(polyfunctional agent)で架橋された、アクリル酸のポリマーも用いることができ、それらは、Carbopol910、Carbopol934、Carbopol941及びCarbopol980として市販されている。カルボン酸含有モノマーとアクリル酸エステルとの好適なコポリマーの例は、Carbopol1342である。全てのCarbopol(商標)材料は、Goodrich社より入手可能である。

アクリル酸とアクリレートエステルとの、好適な架橋ポリマーは、Pemulen TR1又はPemulen TR2である。好適なヘテロ多糖類ガムは、例えば、Kelzan muとして入手可能なキサンタンガムである。

上記の懸濁化剤のいずれかの混合物を用いることができる。好ましいものは、アクリル酸の架橋ポリマーと結晶性長鎖アシル誘導体との混合物である。

懸濁化剤は、含まれる場合、一般に、組成物の全質量に対して、懸濁化剤の全質量で、0.1〜10%、好ましくは0.5〜6%、より好ましくは0.9〜4%の濃度で本発明の組成物に含まれることになる。

組成物は、典型的には、組成物の質量で、水を少なくとも30%含み、全組成物の質量で、水を、より好ましくは、35〜95%、更により好ましくは45〜88%、また更により好ましくは55〜82%、最も好ましくは65〜80%含む。

本発明の組成物は、主に、フケの予防、及び/又は処置のための、洗い流す（リンスオフ）組成物、又は洗い流さない（リーブオン）組成物のいずれかで、個体の頭皮及び/又は毛髪の少なくとも一部に局所適用するものである。

好ましくは、組成物は、200000センチポアズ未満の粘度を有する。より好ましくは、組成物は、50000センチポアズ以下の粘度を有し、更により好ましくは20000センチポアズ以下の粘度を有し、最も好ましくは10000センチポアズ以下の粘度を有する。組成物は、少なくとも10センチポアズの粘度を有することが好ましい。より好ましくは、組成物は、少なくとも200センチポアズの粘度を、更により好ましくは少なくとも1000センチポアズの粘度を、また更により好ましくは少なくとも3000センチポアズの粘度を有する。本発明の粘度は、30℃で、Brookfield粘度計、スピンドル5を用いて、速度20rpmで測定される。

本発明は、例示的な実施例によって、且つ添付された図に関して、説明されることになる。

(実施例1)
基本的に、疾患及び美容状態の、新規の調節経路の特定を試みる。手法は、疾患及び生理的過程について、小分子治療の作用を試み、調和させる必要がある。これに取り組むのに開発された、1つの手法は、MITのブロード研究所によって開発されたConnectivity Mapである(Lambら、Science 2006、313、1929〜1935頁)。このプロジェクトの目的は、ゲノムシグネチャーに関して、全ての生物学的状態を表現し、シグネチャー及び遺伝子の、大きな公開データベースをつくり、これらのシグネチャーの類似性を検出するパターンマッチングツールを開発することを試みることによって、この課題を汎用的に解決することである。その手法は、哺乳類細胞培養モデルにおける摂動を用い、それによって、組織的及び生物学的に関連した、一般化される手法をもたらすことになる。小分子遺伝子発現シグネチャーを生成するために、様々な用量の、乳がん上皮細胞株MCF7、前立腺がん細胞株PC3、及び非上皮性白血病細胞株HL60のハイスループット処理を完了した。10mMの領域の、適度に高い用量を選択し、シグネチャーを、6〜12時間の、比較的早い時点で得た。初めの164分子のデータを、Affymetrix GeneChipマイクロアレイを用いて、1年かけて集めた。データベースは、1300の摂動因子(perturbagen)を超えて大きくなった。

Connectivity Mapでは、一般に、このデータ型と共に用いられる、階層的クラスタリングの、より慣習的な手法よりもむしろ、Kolmogorov-Smirnov統計量に基づいた、順序ベースのパターンマッチング戦略が用いられる。その手法は、「問合せシグネチャー」で開始し、データセットの参照発現プロファイルとの、その類似性を評価する。シグネチャーのそれぞれの遺伝子は、上方制御か、又は下方制御かを示す形跡を有する。Connectivity Mapの参照遺伝子発現プロファイルはまた、ノンパラメトリック様式で表される。それぞれのプロファイルを、その対応する、バッチ内ビヒクル処置対照と比較する。配列の遺伝子を、対照に対して、その異なる発現に応じて順序付けし、それぞれの処置インスタンスによって、22000遺伝子までの順位付けリストを生じる。次いで、問合せシグネチャーを、それぞれの順位付けリストと比較して、上方制御の問合せ遺伝子がリストの上位付近に現れ、下方制御の問合せ遺伝子がリストの下位付近に現れる傾向(「正の連結性」)があるか、又は逆(「負の連結性」)であるかを決定し、+1〜-1の範囲の連結性スコアを与える。データベースの全てのインスタンスは、その連結性スコアに従って順位付けされる。上位のものは、問合せシグネチャーと最も強く関連し、下部のものは最も強く関連しない。

他の研究者らは、統計解析の改良を提案するConnectivity Mapを構築した(Zhang 2008 BMC Bioinformatics、9、258頁、及びCheng Pac. Symp. Biocomput. 2013、5〜16頁)。多くの文献によって、PI3K/AKT経路の阻害剤であるチオリダジンを特定する(Rho 2011 Gynecol. Oncol. 120、121〜127頁)、上皮間葉移行の阻害剤を特定する(Reka 2011 J. Thorac. Oncol. 6、1784〜92頁)、抗精神病薬トリフルオペラジンにより、がん幹細胞成長が阻害されることを示す(Yeh 2012 Am J. Respir. Crit. Care Med. 186、1180〜1188頁)、新規のhERG阻害剤を予測する(Babcock 2013 PLoS One. 8:e69513頁)、結腸がんを治療するために、駆虫剤メベンダゾールを再提案する(Nygren 2013 J. Cancer Res. Oncol. 139、2133〜40頁)、及びヒトの結腸がん幹細胞を標的とする、新規の薬剤としてチオストレプトンを特定する(Juら、2015 Cell Death Dis. 6:e1801頁)等の例と共に、この手法の威力が示されてきた。

Connectivity Mapの適用は、医薬品を超えて広まっており、いくつかの文献は、美容分野において、例えば、従来の漢方薬配合物の分子メカニズムの特定(Wenら 2011 PLoS One 6:e18278頁)において、Connectivity Mapの使用を示している。

本発明者らは、健康な、フケに悩まされている対象(n=21)の頭皮から採取した皮膚生検4mmを用いて、高品質のトランスクリプトームデータセットを生成した。生検からの全RNAを、全ゲノムAgilentマイクロアレイ及びGene Springソフトウェアを用いて、抽出し、解析した。得られたデータセットを、Connectivity Map法を用いて解析して、新規の推定抗フケ剤を特定した。

Connectivity Map解析
健康な対象に対してフケ症対象を比較するとき、有意に異なって発現されるもの(p<0.05及び倍率変化>1.5に調節)として特定された遺伝子のリストを用いて、ブロード研究所のConnectivity Mapに問合せるための、問合せシグネチャーを生成した。Connectivity Mapデータベースによって要求される問合せシグネチャーは、上方制御プローブ及び下方制御プローブそれぞれを選択することを示す、上方タグリスト及び下方タグリスト(up- and down-tag list)で構成される。それぞれのタグリストは、とりわけ、Affymetrix HG-U133Aプローブ(Affymetrix GeneChip Human Genome U133A Array)のリストとして定義される。「フケ」対健康の研究を、Agilent whole human genome oligo microarray G4851Bを用いて実施した。したがって、この比較から異なって発現されたプローブを、AgilentからAffymetrixのフォーマットに変換しなければならなかった。これを、フケ(D1)対健康のシグネチャー注釈から、対応するEntrez Gene IDをマッピングすることによって実施した。

フケ対健康の遺伝子リストは、290の上方制御遺伝子及び266の下方制御遺伝子を含む、556のプローブを含む。AgilentからAffymetrix HG-U133Aプローブ識別子に変換した後、230の上方制御(79%)及び170の下方制御(64%)のAffymetrixプローブを特定し、問合せシグネチャー(上方タグリスト及び下方タグリスト)を構成した。

合わせて6100のインスタンス(すなわち、1つの処置及びビヒクルのペア)に関する、1309の摂動因子(薬物又は非薬物の生物活性化合物)による処置からのデータセットを、ブロード研究所のConnectivity Mapによって生成し、Connectivity Mapアルゴリズムを用いて、フケ遺伝子シグネチャーと共に調べた。

連結性マッピング結果
連結性スコアの平均及びインスタンスの数に基づいたフィルタリングプロセスに従って、21の摂動因子を特定した。それらは、フケ対健康の遺伝子リストで、最も負に関連した摂動因子を示す。ミリセチンは、摂動因子の、この「ヒットリスト(hit list)」内にあった。

ミリセチンは、天然物質であり、既に認識されている美容用成分である。したがって、抗フケトリートメント配合物に含むのに良い選択である。

図2A及び図2Bは、フケで示される遺伝子発現変化に対して、cマップデータベースのミリセチン誘起遺伝子発現変化の補完性を説明する。特に、フケで下方制御された遺伝子の多くが、ミリセチンin vitro処置によって、上方制御される。

図2Aにおいて、薄い色の棒は、健康な頭皮と比較して、フケ症の頭皮で有意に上方制御される、遺伝子発現の変化を示し、変化量(Log倍率変化)は、左側のy軸に示される。濃い色の棒は、これらの同じ遺伝子の発現が、DMSOビヒクル対照と比較して、ミリセチン13μMで処置された、培養されたMCF7細胞で変化したかどうかを示す。このin vitro実験での遺伝子発現の変化は、振幅で測定され、第2のy軸(右側)に示される。それぞれの遺伝子をx軸の1個の棒で表す。

図2Bは図2Aと同様であるが、この場合、図は、遺伝子発現が、健康な頭皮と比較して、フケ症の頭皮で有意に下方制御される遺伝子を示し、in vitro培養の同じ遺伝子の発現への、ミリセチンがもたらす影響(濃い色の棒)を示す。

これらの結果によれば、ミリセチン処置によって、健康な頭皮と比較して、フケ症の頭皮で観測される遺伝子発現変化のいくつかを逆行させることができる。遺伝子が、フケ症の皮膚でより高度に発現される場合、ミリセチンは、多くの場合、増加量を減らすことができ(図2Aの濃い色の棒)、ある場合には、実際にそれらの遺伝子発現の減少をもたらす。逆に、様々な遺伝子の発現が、健康な頭皮と比較して、フケ症の皮膚で阻害される場合(図2B)、ミリセチンは、多くの場合、実際に発現の増加をもたらすことができる(濃い色の棒)。したがって、ミリセチンにより、フケ症の対象において、健康な対象で見つかったものにより近づいた類似した遺伝子発現パターンを回復することができ、症状を予防し、及び/又は改善することができる。

(実施例2)
前述の仮定を試験するために、本発明者らは、フケ症の対象の皮膚に蔓延する炎症性症状のin vitroモデルを考えた。モデルは、正常なヒトの表皮性角化細胞(HEKa細胞)のin vitro組織培養を含む。細胞を、IL-17、TNFα、及びIL-22の組み合わせに暴露して、炎症型反応を刺激し、その反応を、角化細胞によるIL-8の生成によって、またその一般的な遺伝子発現プロファイルの解析によって測定した。

このモデルでは、角化細胞培養へミリセチンを添加すると、IL-8の生成の有意な減少によって示されるように、炎症反応が阻害された(図3参照)。多くの、他の潜在的に可能な作用剤を、モデルで試験したが、IL-8生成の濃度への、いずれの有意な影響は示さなかった。

手順及び材料
細胞
低通過(p3以下)で用いられる、成人の増殖するヒト表皮角化細胞(HEKa)(Thermo Fisher Scientific社製)。

培地
細胞を、bulletキットの全ての成分及びカルシウム70μMを含む、角化細胞維持培地KGM Gold(Lonza Group社)で培養した。アッセイのために、細胞を、カルシウム70μMを補い、ヒドロコルチゾン及びゲンタマイシンを除いた、bulletキットの全ての成分と共に、KGM Goldで培養した。

アッセイ
24ウェル組織培養プレートは、培養培地において、ウェルあたり20000の角化細胞で植え付け、細胞培養インキュベーターで、CO₂5%中、37℃で24時間、定着させ、分布させた。その後、培養培地を取り除き、16時間、試験培地に置き換えた。試験培地は、組換えサイトカインタンパク質カクテルIL-17を200ng/ml、IL-22を200ng/ml、及びTNFαを10ng/ml(Sigma Aldrich UK社)、並びに0.4μg/ml〜6.5μg/mlの範囲の用量で適用される、ジメチルスルホキシド(DMSO)中に再懸濁させた、対象の試験活性分であるミリセチン(Sigma Aldrich社)を含んだ。サイトカイン及び同等の量のDMSOを適用したが、ミリセチンを除いた負の対照も含まれた。16時間後、細胞培養培地を取り除き、角化細胞から放出されたIL-8サイトカインの量を、DuoSet IL-8 ELISAキット(R&D Systems Ltd社)を用いて定量化した。角化細胞をRIPA緩衝液に溶解させ、それぞれの試料のタンパク質の全量をPierce BCAタンパク質アッセイキット(Thermofisher Ltd社)を用いて定量化した。このタンパク質データを用いてIL-8サイトカインデータを規格化した。全ての処理を三度実行し、標準偏差値を計算し、結果を図3に示した。とりわけ、濃度6.5μg/mlでのミリセチンの含有によって、サイトカインへの炎症反応が著しく阻害されることが明らかである。この結果は、対応のあるスチューデントt検定(paired Student's t-test)による一元配置ANOVAを用いて解析されるとき、統計的に有意であった(p=0.0001)。

(実施例3)
本実施例は、本発明の組成物、及び/又は本発明の方法に用いるための組成物の、例示的な実施形態に関連する。

Claims

頭皮及び/又は毛髪への局所適用用組成物における活性抗フケ剤としての、ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体の使用。
前記組成物がシャンプー及び/又はコンディショナーである、請求項1に記載の使用。
前記組成物が、1種以上の追加の抗フケ剤を含む、請求項1又は2に記載の使用。
前記1種以上の追加の抗フケ剤が、ケトコナゾール;クリンバゾール;ピリチオン金属塩、好ましくは、ピリチオン亜鉛、ピリチオン銅、ピリチオン銀、又はピリチオンジルコニウム;ジプロフィリン;及びトリペプチドGHKからなる群から選択される、請求項3に記載の使用。
前記組成物が、シャンプー及び/又はコンディショナーであり、以下:水、洗浄界面活性剤、コンディショニング剤、懸濁化剤、香料、染料又は顔料、pH調整剤又はpH調節剤、真珠光沢剤又は乳白剤、粘度調整剤、及び保存剤の任意の組み合わせ又は全てを更に含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の使用。
前記ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体が、前記組成物中に、0.001〜10.0w/w%、好ましくは0.005〜10.0w/w%の範囲の濃度で存在する、請求項1〜5のいずれか一項に記載の使用。
前記ミリセチン及びミリセチン誘導体が、前記組成物中に、0.01〜10.0w/w%、好ましくは0.025〜5.0w/w%の範囲の濃度で存在する、請求項6に記載の使用。
前記ミリセチン誘導体が、1つの位置が置換されたミリセチンを含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用。
前記ミリセチン誘導体が、3位が置換されたミリセチンを含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の使用。
前記ミリセチン誘導体がミリセチングリコシドである、請求項1〜9のいずれか一項に記載の使用。
前記ミリセチン誘導体が、ミリセチン-3-グルコシド又はミリセチン-3-ガラクトシドである、請求項1〜10のいずれか一項に記載の使用。
フケの処置及び/又は予防に使用するための、ヒト対象の頭皮又は毛髪への局所適用用組成物であって、活性抗フケ剤としてミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を含む、組成物。
請求項1〜11のいずれか一項に記載の使用を行うように適合され且つ構成された、請求項12に記載の組成物。
頭皮及び/又は毛髪への局所適用用抗フケ組成物を製造する方法であって、組成物が、活性抗フケ剤としてミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を含み、方法が、
a)前記ミリセチン及び/又はミリセチン誘導体を、皮膚科学的に許容される希釈剤又は担体と混合する工程と、
b)工程(a)から得られた混合物を適切な包装にパッケージングする工程と
を含む、方法。
それを行うことによって、請求項1〜11のいずれか一項に記載の使用を行うように適合され且つ構成された包装済み組成物が製造される、請求項14に記載の方法。