JP2019510753A - マイクロrna遺伝子を介した新規な組織工学的な神経構築及びその神経欠陥修復における使用 - Google Patents
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Abstract
Description
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1.1;動物実験及びグループ分け
ラットを、組織工学的神経群(実験群、実施例2に記載の組織工学的神経6)、自家神経群、キトサンマイクロスフェアカテーテル群(陰性対照群)、偽手術群(正常群)の4群(1群15匹)にランダムに分けた。
文献Kawadkar J,Chauhan M K.I Intra−articular delivery of genipin cross−linked chitosan microspheres of flurbiprofen:preparation,characterization,in vitro and in vivo studies.[J].European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics,2012,81(3):563−572.を参照し、濃度30g/Lのキトサン酢酸水溶液3mlを20g/L span−80を含む液体パラフィン40mlに滴下し、室温条件で磁気撹拌して安定したW/O型乳化系とした。生物架橋剤であるジェニピンを70体積%のエタノール溶液2mlで溶解させ、乳化液に滴下し架橋硬化を行った。反応が完了した後、遠心分離して分散させ、得られたキトサンマイクロスフェアを収集した。実施例1に記載のLet−7d阻害剤、miR−98阻害剤、並びにmiR−21模倣物及びmiR−222の模倣物を生理食塩水に溶解させ、Let−7d阻害剤、miR−98阻害剤、並びにmiR−21模倣物及びmiR−222模倣物の含有濃度が250ng/mLの溶液を形成した。次にそれを上記マイクロスフェア溶液に加え、4℃で十分に撹拌混合し、2時間インキュベートして、最後にLet−7d阻害剤、miR−98阻害剤、並びにmiR−21模倣物及びmiR−222模倣物を担持したキトサンナノスフェア分散液を形成し、使用に備えた。
動物を麻酔薬混合物(0.2〜0.3ml/100g体重)で腹腔内注射して麻酔した。麻酔後、左大腿骨部の手術領域について、従来のように毛除去、消毒、巾敷きを行った。左大腿の後正中部に口を切り開き、皮膚と筋膜を順次切開し、坐骨神経を遊離して十分に暴露させ、大腿骨の中部から坐骨神経を切り10mm欠損させた。組織工学的神経群(nTENG)及びシルクフィブロインカテーテル群(Scaffold)では、両側神経切断端をカテーテル内に1mmそれぞれ入れ、無損傷縫合糸で神経外膜を縫合し固定し、自家神経群では、切った坐骨神経を回転した後に縫合した。従来のように切開部を閉鎖した。モデル作成及び次の飼育観察はいずれもSPFレベルバリアシステム内で行われた。
2.1;電気生理機能の検出
手術12w後、室温でラットに電気生理機能検出を行った。ラットの体重を量り、麻酔薬混合物(100グラム体重当たりのラットに0.2〜0.3ml)を腹腔内注射し、麻酔後、坐骨神経を暴露させ、ガラス分離針で坐骨神経を慎重に分離し、複合筋活動電位(compound muscle action potentials、CMAPs)を記録した。記録電極を腓腹筋の筋腹に刺し、干渉電極をラット膝での皮膚表面に置き、刺激電極を挟みによりけがをした近、遠位坐骨神経幹に置き、神経を刺激し、CMAPsを記録し、CMAPs振幅、潜伏期間を測定した。同じ方法で、正常側CMAPsの振幅と潜伏期間を記録した。CMAPsは神経線維が支配した標的筋の神経線維と比例し、これによりCMAPsを測定し、末梢神経の伝達機能の回復に重要なパラメータを提供した。式recovery index=手術側CMAPs最大振幅/正常側CMAPs最大振幅によりCMAPs回復指数(recovery index)を計算した。
2.3.1;灌流固定
手術4w、12w後、麻酔薬混合物で麻酔したラット胸を開き、心臓を暴露させ、右心耳を突き刺し、針の先を左心室に刺して、肝臓の色が浅くなるまで生理食塩水で灌注し(灌注量が約動物体重の2倍である)、同時に腸間膜血管内液が赤色からほぼ無色になった後、等量の4%パラホルムアルデヒドを注入した。
1群ごとに3匹のラットを灌流固定し、再生坐骨神経幹を取り、予冷されたグルタルアルデヒド固定液に浸漬させ、樹脂包埋及び電子顕微鏡観察に備えた。
2.4.1;電子顕微鏡サンプルの処理
それぞれ手術4w及び12w後、グルタルアルデヒドで坐骨神経及び腓腹筋サンプルを固定し、1%オスミン酸で後固定し、酢酸ウラニルで急速染色し、エタノールで勾配脱水した後、Epon812エポキシ樹脂で包埋した。
それぞれ手術4w及び12w後、腓腹筋をスクロース溶液に入れ底部に沈下させた後、5%スクロース(0.1M PB調製)で包埋して、切片を凍結させて、10μm横に切った。組織付着のために、切片を室温で約24時間放置した。以下のステップに従いマッソントリクローム染色を行い、コラーゲン線維は青色、肌線維は赤色、細胞核は濃紺色になった。
(1)harrisヘマトキシリン:0.5gのヘマトキシリン染料を5mlの無水エタノールに加えて溶解させ、10gの硫酸アルミニウムカリウムを100m1の二重蒸留水に加えて溶解させ、2種の溶液を均一に混合させた後に、沸騰するまで加熱すると、0.25gの黄色酸化水銀を加えた。溶解後に氷水で冷却させた。濾過後、5mlの氷酢酸を加えた。(2)三色液:0.3gのファストグリーンFCF、0.6gのクロモトロープ2R及び0.6gのリンタングステン酸を100m1の二重蒸留水に順次加え溶解させ、更に2m1の氷酢酸を加え、pH値を3.4に調整した。該染色液は室温で二週間保存でき、保存時間が長すぎ又はpH値が変わった場合、染色は紫がかる。緑色が浅くなる。(3)0.3%の氷酢酸溶液は使用時に調製した。
本実験はグループ設計であり、形態計量分析のデータについてSTATA7統計分析ソフトウェアで一元配置分散分析(one−way ANOVA)を行ったところ、グループ間の差が統計的に有意である場合、更にTurkey’s法で二つずつ比較した。得られた結果は平均値±標準偏差(X±SD)を示し、p<0.05は差が統計的に有意であることを示す。
Claims (10)
- 組織工学的神経構築及び末梢神経欠損修復におけるマイクロRNA遺伝子の使用であって、前記マイクロRNA遺伝子がLet−7ファミリーmiRNA、miR−21、又はmiR−222のうちの1種又は複数種であることを特徴とする、使用。
- 前記マイクロRNA遺伝子の発現を制御することにより、前記末梢神経再生及び組織工学的神経構築を促進することを特徴とする、請求項1に記載の使用。
- 前記Let−7ファミリーmiRNA阻害剤、あるいはmiR−21若しくはmiR−222又はその模倣物を末梢神経再生促進成分として、組織工学的神経移植片の外及び/若しくは内表面又は空隙内部に被覆又は吸着させることを特徴とする、請求項1に記載の使用。
- 前記Let−7ファミリーmiRNA阻害剤、あるいはmiR−21若しくはmiR−222又はその模倣物の組織工学的神経ステント材料での用量が、10μg/g〜10mg/gであることを特徴とする、請求項3に記載の使用。
- ナノスフィア技術により、前記Let−7ファミリーmiRNA阻害剤、あるいはmiR−21若しくはmiR−222又はその模倣物をナノスフィアに包埋することを特徴とする、請求項1に記載の使用。
- 前記マイクロスフェアは、前記Let−7ファミリーmiRNA阻害剤又はmiR−21若しくはmiR−222の模倣物を担持した、生体適合性のフィブロネクチンとヘパリンから構成される高分子材料ナノスフィアであることを特徴とする、請求項5に記載の使用。
- 前記フィブロネクチンとヘパリンとの質量比は1:10〜1:1であることを特徴とする、請求項6に記載の使用。
- 前記Let−7ファミリーmiRNA阻害剤、miR−21模倣物、又はmiR−222模倣物は、
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であることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか1項に記載の使用。 - 組織工学的神経移植片において、外及び/若しくは内表面又は空隙内部にLet−7ファミリーmiRNA阻害剤、あるいはmiR−21若しくはmiR−222又はその模倣物のうちの1種又は複数種が被覆又は吸着されることを特徴とする、組織工学的神経移植片。
- 前記組織工学的神経移植片の外及び/若しくは内表面又は空隙内部にLet−7ファミリーmiRNA阻害剤、あるいはmiR−21若しくはmiR−222又はその模倣物を担持した、生体適合性のフィブロネクチンとヘパリンから構成される高分子材料ナノスフィアが被覆又は吸着されることを特徴とする、請求項9に記載の組織工学的神経移植片。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
CN106474549B (zh) * | 2016-11-21 | 2019-05-03 | 南通大学 | MicroRNA基因介导的新型组织工程化神经的构建及其在修复神经缺损的应用 |
WO2018232191A1 (en) * | 2017-06-14 | 2018-12-20 | Children's Medical Center Corporation | Enhanced organogenesis through manipulation of lin28/let-7/dis3l2 |
CN109694882B (zh) * | 2018-12-27 | 2020-10-16 | 吉林大学 | 包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用 |
CN110791528B (zh) * | 2019-08-15 | 2023-11-24 | 西南大学 | 一种提高蚕丝产量和优化家蚕品种的microRNA基因编辑方法 |
CN110684835A (zh) * | 2019-10-12 | 2020-01-14 | 山东大学齐鲁医院 | miR-21在诊治蛛网膜下腔出血中的应用 |
CN111944893B (zh) * | 2020-08-24 | 2023-03-31 | 中国医科大学附属盛京医院 | 与唇腭裂产前无创诊断相关的miRNA分子标志物及其应用 |
CN113430171B (zh) * | 2021-06-23 | 2022-09-09 | 重庆医科大学附属口腔医院 | 一种转染miRNA的细胞膜片及其应用 |
CN113599390A (zh) * | 2021-08-30 | 2021-11-05 | 山东第一医科大学附属青岛眼科医院(山东省眼科研究所、青岛眼科医院) | 一种促进miR-21表达的试剂在制备预防和/或治疗糖尿病角膜病变的药物中的应用 |
CN113750294B (zh) * | 2021-08-31 | 2022-08-16 | 四川大学 | 负载多种基因载体微球的神经修复支架及制备方法 |
CN114533953B (zh) * | 2022-01-24 | 2022-12-16 | 华南理工大学 | 一种纳米颗粒复合水凝胶神经导管及其制备方法 |
CN116004618A (zh) * | 2022-08-22 | 2023-04-25 | 集美大学 | 一种具有抗过敏活性的miRNA及其应用 |
CN116196473B (zh) * | 2023-03-01 | 2024-08-13 | 北京大学人民医院 | 一种降解周期精准可控的三维多孔透过性周围神经套管及其制备方法 |
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CN1293924C (zh) * | 2003-09-02 | 2007-01-10 | 中国人民解放军第四军医大学口腔医学院 | 用于修复周围神经缺损的组织工程化周围神经及制备方法 |
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CN106474549B (zh) * | 2016-11-21 | 2019-05-03 | 南通大学 | MicroRNA基因介导的新型组织工程化神经的构建及其在修复神经缺损的应用 |
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