JP2019509738A5 - - Google Patents

Description

全般に、以下の特許請求の範囲において、使用された用語は、本明細書及び特許請求の範囲に開示されている特定の実施形態への特許請求の範囲に限定するものと解釈されるべきではないが、そのような特許請求の範囲が権利を与える等価物の完全な範囲と共に全ての可能な実施形態を含むものと解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は、本開示によって限定されない。
本発明の実施形態の例として、以下の項目が挙げられる。
（項目１）
ａ）１つ以上の修飾Ｔ細胞受容体アルファ（ＴＣＲα）対立遺伝子と、
ｂ）前記１つ以上の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入された、免疫力エンハンサーをコードするポリヌクレオチドを含む核酸と、を含む、細胞。
（項目２）
ａ）１つ以上の修飾Ｔ細胞受容体アルファ（ＴＣＲα）対立遺伝子と、
ｂ）前記１つ以上の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入された、免疫抑制シグナルダンパーをコードするポリヌクレオチドを含む核酸と、を含む、細胞。
（項目３）
ａ）１つ以上の修飾Ｔ細胞受容体アルファ（ＴＣＲα）対立遺伝子と、
ｂ）前記１つ以上の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入された、遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む核酸と、を含む、細胞。
（項目４）
ａ）１つ以上の修飾Ｔ細胞受容体アルファ（ＴＣＲα）対立遺伝子と、
ｂ）前記１つ以上の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入された、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、及び遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む核酸と、を含む、細胞。
（項目５）
前記修飾ＴＣＲαは、機能不全であるか、または実質的に低減された機能を有する、項目１〜４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６）
前記核酸は、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、項目１〜５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターは、短ＥＦ１αプロモーター、長ＥＦ１αプロモーター、ヒトＲＯＳＡ ２６遺伝子座、ユビキチンＣ（ＵＢＣ）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１（ＰＧＫ）プロモーター、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリβ−アクチン（ＣＡＧ）プロモーター、β−アクチンプロモーター、及び負の制御領域が欠失した骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサーのｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目６に記載の細胞。
（項目８）
前記核酸は、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結された自己切断型ウイルスペプチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドをさらに含む、項目１〜７のいずれか１項に記載の細胞。
（項目９）
前記自己切断型ウイルスペプチドは２Ａペプチドである、項目８に記載の細胞。
（項目１０）
前記自己切断型ペプチドは、口蹄疫ウイルス（ＦＭＤＶ）２Ａペプチド、ウマ鼻炎Ａウイルス（ＥＲＡＶ）２Ａペプチド、トセア・アシグナ（Ｔｈｏｓｅａ ａｓｉｇｎａ）ウイルス（ＴａＶ）２Ａペプチド、ブタテッショウウイルス−１（ＰＴＶ−１）２Ａペプチド、タイロウイルス２Ａペプチド、及び脳心筋炎ウイルス２Ａペプチドからなる群から選択される、項目８または項目９に記載の細胞。
（項目１１）
前記核酸は異種ポリアデニル化シグナルをさらに含む、項目１〜１０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１２）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、免疫抑制因子に対抗する酵素機能を含む、項目２、及び４〜１１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１３）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、キヌレニナーゼ活性を含む、項目１２に記載の細胞。
（項目１４）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインを含み、任意選択で、前記細胞外ドメインは、その抗体または抗原結合断片である、項目２、及び４〜１１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１５）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインと、膜貫通ドメインとを含む、項目２、及び４〜１１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１６）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインと、膜貫通ドメインと、免疫抑制シグナルを前記細胞に伝達不可能である修飾された細胞内ドメインとを含む、項目２、及び４〜１１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１７）
前記細胞外ドメインは、免疫受容体抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）及び／または免疫受容体チロシンスイッチモチーフ（ＩＴＳＭ）を含む受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目１４〜１６のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１８）
前記細胞外ドメインは、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）、プログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）、形質転換成長因子β（ＴＧＦβ）、マクロファージコロニー刺激因子１（Ｍ−ＣＳＦ１）、腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、ＳｉＳｏ細胞リガンド上で発現される受容体結合がん抗原（ＲＣＡＳ１）、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＣＤ４７、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、及びインターロイキン−１３（ＩＬ−１３）からなる群から選択される免疫抑制因子に結合する、項目１４〜１７のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１９）
前記細胞外ドメインは、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）、リンパ球活性化遺伝子３タンパク質（ＬＡＧ−３）、Ｔ細胞免疫グロブリンドメイン及びムチンドメインタンパク質３（ＴＩＭ−３）、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原−４（ＣＴＬＡ−４）、バンドＴリンパ球減弱因子（ＢＴＬＡ）、Ｔ細胞免疫グロブリン及び免疫受容体抑制性チロシン依存性モチーフドメイン（ＴＩＧＩＴ）、形質転換成長因子β受容体ＩＩ（ＴＧＦβＲＩＩ）、哺乳類コロニー刺激因子１受容体（Ｍ−ＣＳＦ１）、インターロイキン４受容体（ＩＬ４Ｒ）、インターロイキン６受容体（ＩＬ６Ｒ）、ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）受容体１（ＣＸＣＲ１）、ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）受容体２（ＣＸＣＲ２）、インターロイキン１０受容体サブユニットアルファ（ＩＬ１０Ｒ）、インターロイキン１３受容体サブユニットアルファ２（ＩＬ１３Ｒα２）、腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導受容体（ＴＲＡＩＬＲ１）、ＳｉＳｏ細胞上で発現される受容体結合がん抗原（ＲＣＡＳ１Ｒ）、及びＦａｓ細胞表面死受容体（ＦＡＳ）からなる群から選択される受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目１４〜１８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２０）
前記細胞外ドメインは、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＴＬＡ−４、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、及びＴＧＦβＲＩＩからなる群から選択される受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目１４〜１９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２１）
前記細胞外ドメインは、ＴＧＦβＲＩＩの細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目１４〜２０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２２）
前記免疫抑制シグナルダンパーは、優性ネガティブＴＧＦβＲＩＩ受容体である、項目１４〜２１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２３）
前記膜貫通ドメインは、前記Ｔ細胞受容体、ＣＤδ、ＣＤ３ε、ＣＤγ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１のアルファまたはベータ鎖からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目１５〜２２のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２４）
前記免疫抑制因子は、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＧＦβ、Ｍ−ＣＳＦ、ＴＲＡＩＬ、ＲＣＡＳ１、ＦａｓＬ、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、及びＩＬ−１３からなる群から選択される、項目１４〜２３の項目のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２５）
前記免疫力エンハンサーは、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー分子（ＢｉＴＥ）、免疫賦活因子、及びフリップ受容体からなる群から選択される、項目１及び４〜１１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２６）
前記ＢｉＴＥは、
ａ）アルファ葉酸受容体、５Ｔ４、αｖβ６インテグリン、ＢＣＭＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ６、ＣＡＩＸ、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ７０、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、ＣＳＰＧ４、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥＧＦＲｖＩＩＩを含むＥＧＦＲファミリー、ＥＧＰ２、ＥＧＰ４０、ＥＰＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐＣＡＭ、ＦＡＰ、胎児ＡｃｈＲ、ＦＲα、ＧＤ２、ＧＤ３、グリピカン−３（ＧＰＣ３）、ＨＬＡ−Ａ１ ^＋ ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ２ ^＋ ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ３ ^＋ ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ１ ^＋ ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ２ ^＋ ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ３ ^＋ ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１３Ｒα２、ラムダ、ルイス−Ｙ、カッパ、メソテリン、Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ１６、ＮＣＡＭ、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＳＳＸ、サバイビン、ＴＡＧ７２、ＴＥＭ、ＶＥＧＦＲ２、及びＷＴ−１からなる群から選択される抗原に結合する第１の結合ドメインと、
ｂ）リンカーと、
ｃ）ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ２７８からなる群から選択される免疫エフェクター細胞上の抗原に結合する第２の結合ドメインと、を含む、項目２５に記載の細胞。
（項目２７）
前記ＢｉＴＥは、
ａ）クラスＩ ＭＨＣ−ペプチド複合体及びクラスＩＩ ＭＨＣ−ペプチド複合体からなる群から選択される抗原に結合する第１の結合ドメインと、
ｂ）リンカーと、
ｃ）ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ２７８からなる群から選択される免疫エフェクター細胞上の抗原に結合する第２の結合ドメインと、を含む、項目２５に記載の細胞。
（項目２８）
前記免疫賦活因子は、サイトカイン、ケモカイン、細胞毒素、サイトカイン受容体、及びそれらのバリアントからなる群から選択される、項目２５に記載の細胞。
（項目２９）
前記サイトカインは、ＩＬ−２、インスリン、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−７、ＩＬ−２１、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される、項目２８に記載の細胞。
（項目３０）
前記ケモカインは、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−３、及びＲＡＮＴＥＳからなる群から選択される、項目２８に記載の細胞。
（項目３１）
前記細胞毒素は、パーフォリン、グランザイムＡ、及びグランザイムＢからなる群から選択される、項目２８に記載の細胞。
（項目３２）
前記サイトカイン受容体は、ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１５受容体、及びＩＬ−２１受容体からなる群から選択される、項目２８に記載の細胞。
（項目３３）
前記免疫賦活因子は、タンパク質不安定化ドメインを含む、項目２５〜３２のいずれかに記載の細胞。
（項目３４）
前記フリップ受容体は、免疫抑制サイトカインに結合する細胞外ドメインと、膜貫通と、細胞内ドメインとを含む、項目２５に記載の細胞。
（項目３５）
前記フリップ受容体は、
ａ）ＩＬ−４受容体、ＩＬ−６受容体、ＩＬ−８受容体、ＩＬ−１０受容体、ＩＬ−１３受容体、またはＴＧＦβＲＩＩからなる群から選択されるサイトカイン受容体の細胞外サイトカイン結合ドメインを含む細胞外ドメインと、
ｂ）ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ３ポリペプチド、ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１５受容体、またはＩＬ−２１受容体から単離された膜貫通ドメインと、
ｃ）ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１５受容体、またはＩＬ−２１受容体から単離された細胞内ドメインと、を含む、項目２６に記載の細胞。
（項目３６）
前記フリップ受容体は、
ａ）ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、またはＴＧＦβに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む細胞外ドメインと、
ｂ）ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ３ポリペプチド、ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１５受容体、またはＩＬ−２１受容体から単離された膜貫通ドメインと、
ｃ）ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１５受容体、またはＩＬ−２１受容体から単離された細胞内ドメインと、を含む、項目２６に記載の細胞。
（項目３７）
前記フリップ受容体は、免疫抑制因子に結合する細胞外ドメインと、膜貫通ドメインと、１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン及び／または主要シグナル伝達ドメインとを含む、項目２５に記載の細胞。
（項目３８）
前記細胞外ドメインは、ＩＴＩＭ及び／またはＩＴＳＭを含む受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目３７に記載の細胞。
（項目３９）
前記細胞外ドメインは、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＴＬＡ−４、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＴＧＦβＲＩＩ、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ６Ｒ、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＩＬ１０Ｒ、ＩＬ１３Ｒα２、ＴＲＡＩＬＲ１、ＲＣＡＳ１Ｒ、及びＦＡＳからなる群から選択される受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目３７または項目３８に記載の細胞。
（項目４０）
前記細胞外ドメインは、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＴＬＡ−４、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、及びＴＧＦβＲＩＩからなる群から選択される受容体の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目３７〜３９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４１）
前記細胞外ドメインは、ＴＧＦβＲＩＩまたはＰＤ−１の細胞外リガンド結合ドメインを含む、項目４０に記載の細胞。
（項目４２）
前記膜貫通ドメインは、前記Ｔ細胞受容体、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１のアルファまたはベータ鎖からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目３７〜４１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４３）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメイン及び／または主要シグナル伝達ドメインは、免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を含む、項目３７〜４２のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４４）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＣＡＲＤ１１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＮＫＤ２Ｃ、ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ、及びＺＡＰ７０からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目３７〜４３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４５）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ２７８からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目３７〜４４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４６）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８から単離される、項目３７〜４５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４７）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ１３４から単離される、項目３７〜４５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４８）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ１３７から単離される、項目３７〜４５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目４９）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７８から単離される、項目３７〜４５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５０）
前記１つ以上の主要シグナル伝達ドメインは、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目４０〜４９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５１）
前記１つ以上の主要シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζから単離される、項目３７〜５０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５２）
前記フリップ受容体は、ＴＧＦβＲＩＩ受容体の細胞外リガンド結合ドメイン、ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、またはＩＬ−１５受容体膜貫通ドメインと、ＩＬ−２受容体、ＩＬ−７受容体、ＩＬ−１２受容体、またはＩＬ−１５受容体から単離される細胞内ドメインとを含む、項目３７〜４１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５３）
前記フリップ受容体は、ＰＤ−１受容体の細胞外リガンド結合ドメイン、ＰＤ−１またはＣＤ２８膜貫通ドメイン膜貫通ドメインと、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ２７８からなる群から選択される１つ以上の細胞内共刺激及び／または主要シグナル伝達ドメインとを含む、項目３７〜４１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５４）
前記遺伝子操作された抗原受容体は、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＣＡＲ、Ｄａｒｉｃ、またはキメラサイトカイン受容体からなる群から選択される、項目３〜５３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５５）
前記核酸は、第１の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に統合された前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記アルファ鎖をコードするポリヌクレオチドとを含む、項目５４に記載の細胞。
（項目５６）
前記核酸は、第１の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に統合された前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記ベータ鎖をコードするポリヌクレオチドとを含む、項目５４または５５に記載の細胞。
（項目５７）
前記核酸は、５’から３’へと、第１の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記アルファ鎖をコードするポリヌクレオチドと、第２の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に統合された前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記ベータ鎖をコードするポリヌクレオチドとを含む、項目５４〜５６のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５８）
両方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子が機能不全である、項目５４〜５７のいずれか１項に記載の細胞。
（項目５９）
前記第１の修飾ＴＣＲα対立遺伝子は、第１の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記アルファ鎖をコードするポリヌクレオチドとを含む核酸を含み、前記第２の修飾ＴＣＲα対立遺伝子は、第２の自己切断型ウイルスペプチドをコードするポリヌクレオチドと、前記遺伝子操作されたＴＣＲの前記ベータ鎖をコードするポリヌクレオチドとを含む、項目５８に記載の細胞。
（項目６０）
前記遺伝子操作されたＴＣＲは、アルファ葉酸受容体、５Ｔ４、α _ｖ β _６ インテグリン、ＢＣＭＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ６、ＣＡＩＸ、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ７０、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、ＣＳＰＧ４、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥＧＦＲｖＩＩＩを含むＥＧＦＲファミリー、ＥＧＰ２、ＥＧＰ４０、ＥＰＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐＣＡＭ、ＦＡＰ、胎児ＡｃｈＲ、ＦＲα、ＧＤ２、ＧＤ３、グリピカン−３（ＧＰＣ３）、ＨＬＡ−Ａ１＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ１＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１３Ｒα２、ラムダ、ルイス−Ｙ、カッパ、メソテリン、Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ１６、ＮＣＡＭ、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＳＳＸ、サバイビン、ＴＡＧ７２、ＴＥＭ、ＶＥＧＦＲ２、及びＷＴ−１からなる群から選択される抗原に結合する、項目５４〜５９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６１）
前記ＣＡＲは、
ａ）アルファ葉酸受容体、５Ｔ４、α _ｖ β _６ インテグリン、ＢＣＭＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ６、ＣＡＩＸ、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ７０、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、ＣＳＰＧ４、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥＧＦＲｖＩＩＩを含むＥＧＦＲファミリー、ＥＧＰ２、ＥＧＰ４０、ＥＰＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐＣＡＭ、ＦＡＰ、胎児ＡｃｈＲ、ＦＲα、ＧＤ２、ＧＤ３、グリピカン−３（ＧＰＣ３）、ＨＬＡ−Ａ１＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ１＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１３Ｒα２、ラムダ、ルイス−Ｙ、カッパ、メソテリン、Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ１６、ＮＣＡＭ、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＳＳＸ、サバイビン、ＴＡＧ７２、ＴＥＭ、ＶＥＧＦＲ２、及びＷＴ−１からなる群から選択される抗原に結合する細胞外ドメインと、
ｂ）前記Ｔ細胞受容体、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１のアルファまたはベータ鎖からなる群から選択されるポリペプチドから単離された膜貫通ドメインと、
ｃ）ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＣＡＲＤ１１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＮＫＤ２Ｃ、ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ、及びＺＡＰ７０からなる群から選択されるポリペプチドから単離された１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインと、
ｄ）ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離されたシグナル伝達ドメインと、を含む、項目３〜６０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６２）
前記ＣＡＲは、
ａ）ＭＨＣ−ペプチド複合体、クラスＩ ＭＨＣ−ペプチド複合体、またはクラスＩＩ
ＭＨＣ−ペプチド複合体に結合する細胞外ドメインと、
ｂ）前記Ｔ細胞受容体、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１のアルファまたはベータ鎖からなる群から選択されるポリペプチドから単離された膜貫通ドメインと、
ｃ）ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＣＡＲＤ１１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＮＫＤ２Ｃ、ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ、及びＺＡＰ７０からなる群から選択されるポリペプチドから単離された１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインと、
ｄ）ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離されたシグナル伝達ドメインと、を含む、項目３〜６０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６３）
前記ＣＡＲは、
ａ）ＢＣＭＡ、ＣＤ１９、ＣＳＰＧ４、ＰＳＣＡ、ＲＯＲ１、及びＴＡＧ７２からなる群から選択される抗原に結合する細胞外ドメインと、
ｂ）ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１からなる群から選択されるポリペプチドから単離された膜貫通ドメインと、
ｃ）ＣＤ２８、ＣＤ１３４、及びＣＤ１３７からなる群から選択されるポリペプチドから単離された１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインと、
ｄ）ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離されたシグナル伝達ドメインと、を含む、項目３〜６０のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６４）
前記Ｄａｒｉｃ受容体は、
（ａ）第１の多量体化ドメイン、第１の膜貫通ドメイン、ならびに１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン及び／または主要シグナル伝達ドメインを含むシグナル伝達ポリペプチドと、
（ｂ）結合ドメイン、第２の多量体化ドメイン、及び任意選択で第２の膜貫通ドメインを含む結合ポリペプチドと、を含み、
架橋因子が、前記細胞表面上でのＤａｒｉｃ受容体複合体の形成を促進し、前記架橋因子は、前記シグナル伝達ポリペプチドの前記多量体化ドメインと前記結合ポリペプチドの前記多量体化ドメインとに会合し、それらの間に配置される、項目３〜６３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６５）
前記第１の及び第２の多量体化ドメインは、ラパマイシンまたはそのラパログ、クーママイシンまたはその誘導体、ジベレリンまたはその誘導体、アブシジン酸（ＡＢＡ）またはその誘導体、メトトレキサートまたはその誘導体、シクロスポリンＡまたはその誘導体、ＦＫＣｓＡまたはその誘導体、ＦＫＢＰに対するトリメトプリム（Ｔｍｐ）−合成リガンド（ＳＬＦ）またはその誘導体、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される架橋因子に会合する、項目６４に記載の細胞。
（項目６６）
前記第１の及び第２の多量体化ドメインは、ＦＫＢＰ及びＦＲＢ、ＦＫＢＰ及びカルシニューリン、ＦＫＢＰ及びシクロフィリン、ＦＫＢＰ及び細菌ＤＨＦＲ、カルシニューリン及びシクロフィリン、ＰＹＬ１及びＡＢＩ１、もしくはＧＩＢ１及びＧＡＩ、またはそれらのバリアントから選択される対である、項目６４または項目６５に記載の細胞。
（項目６７）
前記第１の多量体化ドメインはＦＲＢ Ｔ２０９８Ｌを含み、前記第２の多量体化ドメインはＦＫＢＰ１２を含み、前記架橋因子はラパログＡＰ２１９６７である、項目６４〜６６のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６８）
前記第１の多量体化ドメインはＦＲＢを含み、前記第２の多量体化ドメインはＦＫＢＰ１２を含み、前記架橋因子は、ラパマイシン、テムシロリムス、またはエベロリムスである、項目６４〜６６のいずれか１項に記載の細胞。
（項目６９）
前記結合ドメインはｓｃＦｖを含む、項目６４〜６８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７０）
前記結合ドメインは、アルファ葉酸受容体、５Ｔ４、α _ｖ β _６ インテグリン、ＢＣＭＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ６、ＣＡＩＸ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ７／８、ＣＤ７０、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ１７１、ＣＥＡ、ＣＳＰＧ４、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）、ＥＧＦＲｖＩＩＩを含むＥＧＦＲファミリー、ＥＧＰ２、ＥＧＰ４０、ＥＰＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐＣＡＭ、ＦＡＰ、胎児ＡｃｈＲ、ＦＲα、ＧＤ２、ＧＤ３、グリピカン−３（ＧＰＣ３）、ＨＬＡ−Ａ１＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＭＡＧＥ１、ＨＬＡ−Ａ１＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ２＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨＬＡ−Ａ３＋ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１３Ｒα２、ラムダ、ルイス−Ｙ、カッパ、メソテリン、Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ１６、ＮＣＡＭ、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＳＳＸ、サバイビン、ＴＡＧ７２、ＴＥＭ、ＶＥＧＦＲ２、及びＷＴ−１からなる群から選択される抗原に結合するｓｃＦｖを含む、項目６４〜６９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７１）
前記結合ドメインは、ＭＨＣ−ペプチド複合体、クラスＩ ＭＨＣ−ペプチド複合体、またはクラスＩＩ ＭＨＣ−ペプチド複合体に結合するｓｃＦｖを含む、項目６４〜６９のいずれか１項に記載の細胞；
（項目７２）
前記第１の及び第２の膜貫通ドメインは、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１からなる群から独立して選択されるポリペプチドから単離される、項目６４〜７１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７３）
前記第１の及び第２の膜貫通ドメインは、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、及びＣＤ８αからなる群から独立して選択されるポリペプチドから単離される、項目６４〜７２のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７４）
前記１つ以上の共刺激ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、及びＣＤ１３７からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目６４〜７３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７５）
前記１つ以上の主要シグナルドメインは、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目６４〜７４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７６）
前記シグナル伝達ポリペプチドは、ＦＲＢ Ｔ２０９８Ｌの第１の多量体化ドメイン、ＣＤ８膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激ドメイン、及びＣＤ３ζ主要シグナル伝達ドメインを含み、前記結合ポリペプチドは、ＣＤ１９に結合するｓｃＦｖ、ＦＫＢＰ１２の第２の多量体化ドメイン、及びＣＤ４膜貫通ドメインを含み、前記架橋因子はラパログＡＰ２１９６７である、項目６４〜７５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７７）
前記シグナル伝達ポリペプチドは、ＦＲＢの第１の多量体化ドメイン、ＣＤ８膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激ドメイン、及びＣＤ３ζ主要シグナル伝達ドメインを含み、前記結合ポリペプチドは、ＣＤ１９に結合するｓｃＦｖ、ＦＫＢＰ１２の第２の多量体化ドメイン、及びＣＤ４膜貫通ドメインを含み、前記架橋因子は、ラパマイシン、テムシロリムス、またはエベロリムスである、項目６４〜７５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７８）
一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子が、前記シグナル伝達ポリペプチド、ウイルス自己切断型２Ａペプチド、及び前記結合ポリペプチドをコードする核酸を含む、項目６４〜７７のいずれか１項に記載の細胞。
（項目７９）
前記キメラサイトカイン受容体は、免疫抑制サイトカインまたはそのサイトカイン受容体結合バリアント、リンカー、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、項目３〜６３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８０）
前記サイトカインまたはそのサイトカイン受容体結合バリアントは、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、及びインターロイキン−１３（ＩＬ−１３）からなる群から選択される、項目７９に記載の細胞。
（項目８１）
前記リンカーは、ＣＨ２ＣＨ３ドメインまたはヒンジドメインを含む、項目７９または項目８０に記載の細胞。
（項目８２）
前記リンカーは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、またはＩｇＤの前記ＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む、項目７９〜８１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８３）
前記リンカーは、ＣＤ８αまたはＣＤ４ヒンジドメインを含む、項目７９〜８１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８４）
前記膜貫通ドメインは、前記Ｔ細胞受容体、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４、及びＰＤ−１のアルファまたはベータ鎖からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目７９〜８３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８５）
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、ＩＴＡＭ含有主要シグナル伝達ドメイン及び／または共刺激ドメインからなる群から選択される、項目７９〜８４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８６）
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄからなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目７９〜８５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８７）
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＣＡＲＤ１１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＮＫＤ２Ｃ、ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ、及びＺＡＰ７０からなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目７９〜８５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８８）
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、及びＣＤ３ζからなる群から選択されるポリペプチドから単離される、項目７９〜８５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目８９）
両方のＴＣＲα対立遺伝子が修飾され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む第１の核酸が、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入される、項目５４〜８８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目９０）
両方のＴＣＲα対立遺伝子が機能不全であり、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１の核酸が、第１の機能不全ＴＣＲα対立遺伝子に挿入され、前記細胞は、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする第２のポリヌクレオチドをさらに含み、第２の機能不全ＴＣＲα対立遺伝子に挿入される、項目５４〜８８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目９１）
前記第１のポリヌクレオチド及び前記第２のポリヌクレオチドは異なる、項目９０に記載の細胞。
（項目９２）
前記第１のポリヌクレオチド及び前記第２のポリヌクレオチドは各々独立して、免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする、項目９０または項目９１に記載の細胞。
（項目９３）
前記第１のポリヌクレオチド及び前記第２のポリヌクレオチドは各々独立して、フリップ受容体をコードする、項目９０または項目９１に記載の細胞。
（項目９４）
両方のＴＣＲα対立遺伝子が修飾され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードするポリヌクレオチドを含む第１の核酸が、一方の機能不全ＴＣＲα対立遺伝子に挿入され、前記細胞は、遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、項目５４〜８８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目９５）
前記核酸は、阻害性ＲＮＡをコードするポリヌクレオチドをさらに含む、項目１〜９４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目９６）
前記阻害性ＲＮＡは、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｐｉＲＮＡ、またはリボザイムである、項目９５に記載の細胞。
（項目９７）
前記核酸は、前記阻害性ＲＮＡをコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターをさらに含む、項目９５または９６に記載の細胞。
（項目９８）
前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターは、ヒトまたはマウスＵ６ ｓｎＲＮＡプロモーター、ヒト及びマウスＨ１ ＲＮＡプロモーター、またはヒトｔＲＮＡ−ｖａｌプロモーターからなる群から選択される、項目９６に記載の細胞。
（項目９９）
前記細胞は造血細胞である、項目１〜９８のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１００）
前記細胞は免疫エフェクター細胞である、項目１〜９９のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０１）
前記細胞は、ＣＤ３ ^＋ 、ＣＤ４ ^＋ 、ＣＤ８ ^＋ 、またはそれらの組み合わせである、項目１〜１００のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０２）
前記細胞はＴ細胞である、項目１〜１０１のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０３）
前記細胞は、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目１〜１０２のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０４）
前記細胞の源は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺問題（ｉｓｓｕｅ）、感染部位由来組織、復水、胸水、脾臓組織、または腫瘍である、項目１〜１０３のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０５）
前記細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の存在下で活性化され、刺激される、項目１〜１０４のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０６）
前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の存在下で活性化され、刺激される前記細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の不在下で活性化され、刺激される細胞と比較して、ｉ）ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ１９７、及びＣＤ３８からなる群から選択される１つ以上のマーカー、またはｉｉ）前記マーカーＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ１９７、及びＣＤ３８の全ての増加した発現を有する、項目１０５に記載の細胞。
（項目１０７）
前記ＰＩ３Ｋの阻害剤の存在下で活性化され、刺激される前記細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の不在下で活性化され、刺激される細胞と比較して、ｉ）ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ２７、及びＣＤ８からなる群から選択される１つ以上のマーカー、またはｉｉ）前記マーカーＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ２７、及びＣＤ８の全ての増加した発現を有する、項目１０５に記載の細胞。
（項目１０８）
前記ＰＩ３Ｋ阻害剤はＺＳＴＫ４７４である、項目１０５〜１０７のいずれか１項に記載の細胞。
（項目１０９）
項目１〜１０８のいずれか１項に記載の細胞を含む組成物。
（項目１１０）
項目１〜１０８のいずれか１項に記載の細胞と、生理学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含む、組成物。
（項目１１１）
Ｔ細胞の集団においてＴＣＲα対立遺伝子を編集する方法であって、
ａ）Ｔ細胞の集団を活性化し、前記Ｔ細胞の集団を刺激して、増殖させること、
ｂ）遺伝子操作されたヌクレアーゼをコードするｍＲＮＡを前記Ｔ細胞の集団に導入すること、
ｃ）前記Ｔ細胞の集団に、ドナー修復テンプレートを含む１つ以上のウイルスベクターを形質導入すること、を含み、
前記遺伝子操作されたヌクレアーゼの発現が、前記ＴＣＲα対立遺伝子内の標的部位で２本鎖切断を作り出し、前記ドナー修復テンプレートは、前記２本鎖切断（ＤＳＢ）の前記部位での相同組換え修復（ＨＤＲ）によって前記ＴＣＲα対立遺伝子に組み込まれる、方法。
（項目１１２）
前記ドナー修復テンプレートは、前記ＤＳＢの前記ＴＣＲα配列５’に相同な５’相同アームと、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドと、前記ＤＳＢの前記ＴＣＲα配列３’に相同な３’相同アームと、を含む、項目１１１に記載の方法。
（項目１１３）
前記５’及び３’相同アームの長さは、約１００ｂｐ〜約２５００ｂｐから独立して選択される、項目１１２に記載の方法。
（項目１１４）
前記５’及び３’相同アームの前記長さは、約６００ｂｐ〜約１５００ｂｐから独立して選択される、項目１１２または項目１１３に記載の方法。
（項目１１５）
前記５’相同アームは約１５００ｂｐであり、前記３’相同アームは約１０００ｂｐである、項目１１２〜１１４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１６）
前記５’相同アームは約６００ｂｐであり、前記３’相同アームは約６００ｂｐである、項目１１２〜１１４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１７）
前記ウイルスベクターは、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）またはレトロウイルスである、項目１１２〜１１６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１８）
前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ２由来の１つ以上のＩＴＲを有する、項目１１７に記載の方法。
（項目１１９）
前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、及びＡＡＶ１０からなる群から選択される血清型を有する、項目１１７または項目１１８に記載の方法。
（項目１２０）
前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ６血清型を有する、項目１１９に記載の方法。
（項目１２１）
前記レトロウイルスはレンチウイルスである、項目１１７に記載の方法。
（項目１２２）
前記レンチウイルスはインテグラーゼ欠損レンチウイルスである、項目１２１に記載の方法。
（項目１２３）
前記遺伝子操作されたヌクレアーゼは、メガヌクレアーゼ、ｍｅｇａＴＡＬ、ＴＡＬＥＮ、ＺＦＮ、またはＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓヌクレアーゼからなる群から選択される、項目１１１〜１２２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２４）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＡａｂＭＩ、Ｉ−ＡａｅＭＩ、Ｉ−ＡｎｉＩ、Ｉ−ＡｐａＭＩ、Ｉ−ＣａｐＩＩＩ、Ｉ−ＣａｐＩＶ、Ｉ−ＣｋａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＶ、Ｉ−ＣｐａＭＶ、Ｉ−ＣｐａＶ、Ｉ−ＣｒａＭＩ、Ｉ−ＥｊｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｉＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＬｔｒＩＩ、Ｉ−ＬｔｒＩ、Ｉ−ＬｔｒＷＩ、Ｉ−ＭｐｅＭＩ、Ｉ−ＭｖｅＭＩ、Ｉ−ＮｃｒＩＩ、Ｉ−Ｎｃｒｌ、Ｉ−ＮｃｒＭＩ、Ｉ−ＯｈｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＶ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩＩ、Ｉ−ＰｎｏＭＩ、Ｉ−ＳｃｕＭＩ、Ｉ−ＳｍａＭＩ、Ｉ−ＳｓｃＭＩ、及びＩ−Ｖｄｉ１４１Ｉからなる群から選択されるＬＡＧＬＩＤＡＤＧホーミングエンドヌクレアーゼ（ＬＨＥ）から遺伝子操作される、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２５）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、及びＳｍａＭＩからなる群から選択されるＬＨＥから遺伝子操作される、項目１１１〜１２４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２６）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＯｎｕＩ ＬＨＥから遺伝子操作される、項目１１１〜１２５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２７）
前記ｍｅｇａＴＡＬは、ＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインと、遺伝子操作されたメガヌクレアーゼとを含む、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２８）
前記ＴＡＬＥ結合ドメインは、約９．５のＴＡＬＥ反復単位〜約１１．５のＴＡＬＥ反復単位を含む、項目１２７に記載の方法。
（項目１２９）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＡａｂＭＩ、Ｉ−ＡａｅＭＩ、Ｉ−ＡｎｉＩ、Ｉ−ＡｐａＭＩ、Ｉ−ＣａｐＩＩＩ、Ｉ−ＣａｐＩＶ、Ｉ−ＣｋａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＶ、Ｉ−ＣｐａＭＶ、Ｉ−ＣｐａＶ、Ｉ−ＣｒａＭＩ、Ｉ−ＥｊｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｉＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＬｔｒＩＩ、Ｉ−ＬｔｒＩ、Ｉ−ＬｔｒＷＩ、Ｉ−ＭｐｅＭＩ、Ｉ−ＭｖｅＭＩ、Ｉ−ＮｃｒＩＩ、Ｉ−Ｎｃｒｌ、Ｉ−ＮｃｒＭＩ、Ｉ−ＯｈｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＶ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩＩ、Ｉ−ＰｎｏＭＩ、Ｉ−ＳｃｕＭＩ、Ｉ−ＳｍａＭＩ、Ｉ−ＳｓｃＭＩ、及びＩ−Ｖｄｉ１４１Ｉからなる群から選択されるＬＨＥから遺伝子操作される、項目１２７または項目１２８に記載の方法。
（項目１３０）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、及びＳｍａＭＩからなる群から選択されるＬＨＥから遺伝子操作される、項目１２７〜１２９のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３１）
前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＯｎｕＩ ＬＨＥから遺伝子操作される、項目１２７〜１３０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３２）
前記ＴＡＬＥＮは、ＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインと、エンドヌクレアーゼドメインまたはハーフドメインとを含む、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３３）
前記ＴＡＬＥ結合ドメインは、約９．５のＴＡＬＥ反復単位〜約１１．５のＴＡＬＥ反復単位を含む、項目１３２に記載の方法。
（項目１３４）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、ＩＩ型制限エンドヌクレアーゼから単離される、項目１３２または項目１３３に記載の方法。
（項目１３５）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、Ａａｒ Ｉ、Ａｃｅ ＩＩＩ、Ａｃｉ Ｉ、Ａｌｏ Ｉ、Ａｌｗ２６ Ｉ、Ｂａｅ Ｉ、Ｂｂｒ７ Ｉ、Ｂｂｖ Ｉ、Ｂｂｖ ＩＩ、ＢｂｖＣ Ｉ、Ｂｃｃ Ｉ、Ｂｃｅ８３ Ｉ、ＢｃｅＡ Ｉ、Ｂｃｅｆ Ｉ、Ｂｃｇ Ｉ、ＢｃｉＶ Ｉ、Ｂｆｉ Ｉ、Ｂｉｎ Ｉ、Ｂｍｇ Ｉ、Ｂｐｕ１０ Ｉ、ＢｓａＸ Ｉ、Ｂｓｂ Ｉ、ＢｓｃＡ Ｉ、ＢｓｃＧ Ｉ、ＢｓｅＲ Ｉ、ＢｓｅＹ Ｉ、Ｂｓｉ Ｉ、Ｂｓｍ Ｉ、ＢｓｍＡ Ｉ、ＢｓｍＦ Ｉ、Ｂｓｐ２４ Ｉ、ＢｓｐＧ Ｉ、ＢｓｐＭ Ｉ、ＢｓｐＮＣ Ｉ、Ｂｓｒ Ｉ、ＢｓｒＢ Ｉ、ＢｓｒＤ Ｉ、ＢｓｔＦ５ Ｉ、Ｂｔｒ Ｉ、Ｂｔｓ Ｉ、Ｃｄｉ Ｉ、ＣｊｅＰ Ｉ、Ｄｒｄ ＩＩ、ＥａｒＩ、Ｅｃｉ Ｉ、Ｅｃｏ３１ Ｉ、Ｅｃｏ５７ Ｉ、Ｅｃｏ５７Ｍ Ｉ、Ｅｓｐ３ Ｉ、Ｆａｕ Ｉ、Ｆｉｎ Ｉ、Ｆｏｋ Ｉ、Ｇｄｉ ＩＩ、Ｇｓｕ Ｉ、Ｈｇａ Ｉ、Ｈｉｎ４ ＩＩ、Ｈｐｈ Ｉ、Ｋｓｐ６３２ Ｉ、Ｍｂｏ ＩＩ、Ｍｌｙ Ｉ、Ｍｍｅ Ｉ、Ｍｎｌ Ｉ、Ｐｆｌ１１０８、Ｉ Ｐｌｅ Ｉ、Ｐｐｉ Ｉ Ｐｓｒ Ｉ、ＲｌｅＡ Ｉ、Ｓａｐ Ｉ、ＳｆａＮ Ｉ、Ｓｉｍ Ｉ、ＳｓｐＤ５ Ｉ、Ｓｔｈ１３２ Ｉ、Ｓｔｓ Ｉ、ＴｓｐＤＴ Ｉ、ＴｓｐＧＷ Ｉ、Ｔｔｈ１１１ ＩＩ、ＵｂａＰ Ｉ、Ｂｓａ Ｉ、及びＢｓｍＢ Ｉからなる群から選択されるＩＩ型制限エンドヌクレアーゼから単離される、項目１３２〜１３４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３６）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、ＦｏｋＩから単離される、項目１３２〜１３５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３７）
前記ＺＦＮは、亜鉛フィンガーＤＮＡ結合ドメインと、エンドヌクレアーゼドメインまたはハーフドメインとを含む、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３８）
前記亜鉛フィンガーＤＮＡ結合ドメインは、２、３、４、５、６、７、または８つの亜鉛フィンガーモチーフを含む、項目１３７に記載の方法。
（項目１３９）
前記ＺＦＮはＴＡＬＥ結合ドメインを含む、項目１３７または項目１３８に記載の方法。
（項目１４０）
前記ＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインは、約９．５のＴＡＬＥ反復単位〜約１１．５のＴＡＬＥ反復単位を含む、項目１３９に記載の方法。
（項目１４１）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、ＩＩ型制限エンドヌクレアーゼから単離される、項目１３７〜１４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４２）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、Ａａｒ Ｉ、Ａｃｅ ＩＩＩ、Ａｃｉ Ｉ、Ａｌｏ Ｉ、Ａｌｗ２６ Ｉ、Ｂａｅ Ｉ、Ｂｂｒ７ Ｉ、Ｂｂｖ Ｉ、Ｂｂｖ ＩＩ、ＢｂｖＣ Ｉ、Ｂｃｃ Ｉ、Ｂｃｅ８３ Ｉ、ＢｃｅＡ Ｉ、Ｂｃｅｆ Ｉ、Ｂｃｇ Ｉ、ＢｃｉＶ Ｉ、Ｂｆｉ Ｉ、Ｂｉｎ Ｉ、Ｂｍｇ Ｉ、Ｂｐｕ１０ Ｉ、ＢｓａＸ Ｉ、Ｂｓｂ Ｉ、ＢｓｃＡ Ｉ、ＢｓｃＧ Ｉ、ＢｓｅＲ Ｉ、ＢｓｅＹ Ｉ、Ｂｓｉ Ｉ、Ｂｓｍ Ｉ、ＢｓｍＡ Ｉ、ＢｓｍＦ Ｉ、Ｂｓｐ２４ Ｉ、ＢｓｐＧ Ｉ、ＢｓｐＭ Ｉ、ＢｓｐＮＣ Ｉ、Ｂｓｒ Ｉ、ＢｓｒＢ Ｉ、ＢｓｒＤ Ｉ、ＢｓｔＦ５ Ｉ、Ｂｔｒ Ｉ、Ｂｔｓ Ｉ、Ｃｄｉ Ｉ、ＣｊｅＰ Ｉ、Ｄｒｄ ＩＩ、ＥａｒＩ、Ｅｃｉ Ｉ、Ｅｃｏ３１ Ｉ、Ｅｃｏ５７ Ｉ、Ｅｃｏ５７Ｍ Ｉ、Ｅｓｐ３ Ｉ、Ｆａｕ Ｉ、Ｆｉｎ Ｉ、Ｆｏｋ Ｉ、Ｇｄｉ ＩＩ、Ｇｓｕ Ｉ、Ｈｇａ Ｉ、Ｈｉｎ４ ＩＩ、Ｈｐｈ Ｉ、Ｋｓｐ６３２ Ｉ、Ｍｂｏ ＩＩ、Ｍｌｙ Ｉ、Ｍｍｅ Ｉ、Ｍｎｌ Ｉ、Ｐｆｌ１１０８、Ｉ Ｐｌｅ Ｉ、Ｐｐｉ Ｉ Ｐｓｒ Ｉ、ＲｌｅＡ Ｉ、Ｓａｐ Ｉ、ＳｆａＮ Ｉ、Ｓｉｍ Ｉ、ＳｓｐＤ５ Ｉ、Ｓｔｈ１３２ Ｉ、Ｓｔｓ Ｉ、ＴｓｐＤＴ Ｉ、ＴｓｐＧＷ Ｉ、Ｔｔｈ１１１ ＩＩ、ＵｂａＰ Ｉ、Ｂｓａ Ｉ、及びＢｓｍＢ Ｉからなる群から選択されるＩＩ型制限エンドヌクレアーゼから単離される、項目１３７〜１４１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４３）
前記エンドヌクレアーゼドメインは、ＦｏｋＩから単離される、項目１３７〜１４２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４４）
ＣａｓエンドヌクレアーゼをコードするｍＲＮＡ、ｔｒａｃｒＲＮＡ、及び前記ＴＣＲα遺伝子内のプロトスペーサーを標的とする１つ以上のｃｒＲＮＡが、前記Ｔ細胞の集団に導入される、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４５）
ＣａｓエンドヌクレアーゼをコードするｍＲＮＡ及び前記ＴＣＲα遺伝子内のプロトスペーサー配列を標的とする１つ以上のｓｇＲＮＡが、前記Ｔ細胞の集団に導入される、項目１１１〜１２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４６）
前記ＣａｓヌクレアーゼはＣａｓ９またはＣｐｆ１である、項目１４４または項目１４５に記載の方法。
（項目１４７）
前記Ｃａｓヌクレアーゼは１つ以上のＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインをさらに含む、項目１４４〜１４６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４８）
ＤＳＢが両方のＴＣＲα対立遺伝子内に生成され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１のドナーテンプレートが、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入される、項目１１１〜１４７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４９）
ＤＳＢが両方のＴＣＲα対立遺伝子内に生成され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１のドナーテンプレートが、第１の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする第２のポリヌクレオチドを含む第２のドナーテンプレートが、第２の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入される、項目１１１〜１１７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５０）
前記第１のドナーテンプレート及び前記第２のテンプレートは、異なるポリヌクレオチドを含む、項目１４９に記載の方法。
（項目１５１）
前記第１のポリヌクレオチド及び前記第２のポリヌクレオチドは各々独立して、免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする、項目１４９または項目１５０に記載の方法。
（項目１５２）
前記第１のポリヌクレオチド及び前記第２のポリヌクレオチドは各々独立して、フリップ受容体をコードする、項目１４９または項目１５０に記載の方法。
（項目１５３）
ＤＳＢが両方のＴＣＲα対立遺伝子内に生成され、項目１〜８８のいずれか１項に記載の免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１のドナーテンプレートが、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入され、前記細胞には、遺伝子操作された抗原受容体を含むレンチウイルスベクターがさらに形質導入される、項目１１１〜１４７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５４）
前記Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、項目１１１〜１５３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５５）
前記遺伝子操作されたヌクレアーゼをコードする前記ｍＲＮＡは、ウイルス自己切断型２Ａペプチド及びエンドプロセシング酵素をさらにコードする、項目１１１〜１５４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５６）
前記方法は、エンドプロセシング酵素をコードするｍＲＮＡを前記Ｔ細胞に導入することをさらに含む、項目１１１〜１５４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５７）
前記エンドプロセシング酵素は、５−３’エキソヌクレアーゼ、５−３’アルカリエキソヌクレアーゼ、３−５’エキソヌクレアーゼ、５’フラップエンドヌクレアーゼ、ヘリカーゼ、またはテンプレート非依存性ＤＮＡポリメラーゼ活性を呈する、項目１５５または項目１５６に記載の方法。
（項目１５８）
前記エンドプロセシング酵素は、Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片を含む、項目１４９〜１５１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５９）
前記Ｔ細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の存在下で活性化され、刺激される、項目１１１〜１５８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６０）
前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の存在下で活性化され、刺激される前記Ｔ細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の不在下で活性化され、刺激されるＴ細胞と比較して、ｉ）ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ１９７、及びＣＤ３８からなる群から選択される１つ以上のマーカー、またはｉｉ）前記マーカーＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ１９７、及びＣＤ３８の全ての増加した発現を有する、項目１５９に記載の方法。
（項目１６１）
前記ＰＩ３Ｋの阻害剤の存在下で活性化され、刺激される前記Ｔ細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の不在下で活性化され、刺激されるＴ細胞と比較して、ｉ）ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ２７、及びＣＤ８からなる群から選択される１つ以上のマーカー、またはｉｉ）前記マーカーＣＤ６２Ｌ、ＣＤ１２７、ＣＤ２７、及びＣＤ８の全ての増加した発現を有する、項目１５９に記載の方法。
（項目１６２）
前記ＰＩ３Ｋ阻害剤はＺＳＴＫ４７４である、項目１５９〜１６１のいずれか１項に記載の方法。

Claims (20)

1. Ｔ細胞の集団においてＴＣＲα対立遺伝子を編集する方法であって、
   （ａ）Ｔ細胞の集団を活性化し、前記Ｔ細胞の集団を刺激して、増殖させること、
   （ｂ）ｍｅｇａＴＡＬをコードするｍＲＮＡを前記Ｔ細胞の集団に導入すること、および
   （ｃ）前記Ｔ細胞の集団に、ドナー修復テンプレートを含む１つ以上のウイルスベクターを形質導入すること、を含み、
   前記遺伝子操作されたヌクレアーゼの発現が、前記ＴＣＲα対立遺伝子内の標的部位で２本鎖切断を作り出し、前記ドナー修復テンプレートは、前記２本鎖切断（ＤＳＢ）の前記部位での相同組換え修復（ＨＤＲ）によって前記ＴＣＲα対立遺伝子に組み込まれる、方法。
2. 前記ドナー修復テンプレートは、前記ＤＳＢの前記ＴＣＲα配列５’に相同な５’相同アームと、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドと、前記ＤＳＢの前記ＴＣＲα配列３’に相同な３’相同アームと、を含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記ポリヌクレオチドは、前記免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパー、または遺伝子操作された抗原受容体をコードする前記ポリヌクレオチドに作動可能に連結されたＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターをさらに含む、請求項２に記載の方法。
4. （ａ）前記５’及び３’相同アームの長さは、約１００ｂｐ〜約２５００ｂｐから独立して選択されるか；
   （ｂ）前記５’及び３’相同アームの長さは、約６００ｂｐ〜約１５００ｂｐから独立して選択されるか；
   （ｃ）前記５’相同アームは約１５００ｂｐであり、前記３’相同アームは約１０００ｂｐであるか；または
   （ｄ）前記５’相同アームは約６００ｂｐであり、前記３’相同アームは約６００ｂｐである、請求項２または３に記載の方法。
5. 前記ウイルスベクターは、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）またはレトロウイルスである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. （ａ）前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ２由来の１つ以上のＩＴＲを有するか；
   （ｂ）前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、及びＡＡＶ１０からなる群から選択される血清型を有するか；
   （ｃ）前記ｒＡＡＶは、ＡＡＶ６血清型を有するか；
   （ｄ）前記レトロウイルスはレンチウイルスであるか；または
   （ｅ）前記レンチウイルスはインテグラーゼ欠損レンチウイルスである、請求項５に記載の方法。
7. 前記ｍｅｇａＴＡＬは、ＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインと、遺伝子操作されたメガヌクレアーゼとを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
8. 前記ＴＡＬＥ結合ドメインは、約９．５のＴＡＬＥ反復単位〜約１１．５のＴＡＬＥ反復単位を含む、請求項７に記載の方法。
9. （ａ）前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＡａｂＭＩ、Ｉ−ＡａｅＭＩ、Ｉ−ＡｎｉＩ、Ｉ−ＡｐａＭＩ、Ｉ−ＣａｐＩＩＩ、Ｉ−ＣａｐＩＶ、Ｉ−ＣｋａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＩＩ、Ｉ−ＣｐａＭＩＶ、Ｉ−ＣｐａＭＶ、Ｉ−ＣｐａＶ、Ｉ−ＣｒａＭＩ、Ｉ−ＥｊｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｅＭＩ、Ｉ−ＧｐｉＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩ、Ｉ−ＧｚｅＭＩＩＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＬｔｒＩＩ、Ｉ−ＬｔｒＩ、Ｉ−ＬｔｒＷＩ、Ｉ−ＭｐｅＭＩ、Ｉ−ＭｖｅＭＩ、Ｉ−ＮｃｒＩＩ、Ｉ−Ｎｃｒｌ、Ｉ−ＮｃｒＭＩ、Ｉ−ＯｈｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＩＩ、Ｉ−ＯｓｏＭＩＶ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩＩＩ、Ｉ−ＰｎｏＭＩ、Ｉ−ＳｃｕＭＩ、Ｉ−ＳｍａＭＩ、Ｉ−ＳｓｃＭＩ、及びＩ−Ｖｄｉ１４１Ｉからなる群から選択されるＬＨＥから遺伝子操作されるか；
   （ｂ）前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＣｐａＭＩ、Ｉ−ＨｊｅＭＩ、Ｉ−ＯｎｕＩ、Ｉ−ＰａｎＭＩ、及びＳｍａＭＩからなる群から選択されるＬＨＥから遺伝子操作されるか；または
   （ｃ）前記メガヌクレアーゼは、Ｉ−ＯｎｕＩ ＬＨＥから遺伝子操作される、請求項７または請求項８に記載の方法。
10. ＤＳＢが両方のＴＣＲα対立遺伝子内に生成され、免疫力エンハンサーまたは免疫抑制シグナルダンパーをコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１のドナーテンプレートが、一方の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入され、前記細胞には、遺伝子操作された抗原受容体を含むレンチウイルスベクターがさらに形質導入される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
11. 前記Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、またはヘルパーＴ細胞である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
12. 前記遺伝子操作されたヌクレアーゼをコードする前記ｍＲＮＡは、ウイルス自己切断型２Ａペプチド及びエンドプロセシング酵素をさらにコードする、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
13. 前記方法は、エンドプロセシング酵素をコードするｍＲＮＡを前記Ｔ細胞に導入することをさらに含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
14. 前記エンドプロセシング酵素は、５−３’エキソヌクレアーゼ、５−３’アルカリエキソヌクレアーゼ、３−５’エキソヌクレアーゼ、５’フラップエンドヌクレアーゼ、ヘリカーゼ、またはテンプレート非依存性ＤＮＡポリメラーゼ活性を呈する、請求項１２または請求項１３に記載の方法。
15. 前記エンドプロセシング酵素は、Ｔｒｅｘ２またはその生物学的に活性な断片を含む、請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
16. 前記Ｔ細胞は、前記ＰＩ３Ｋ経路の阻害剤の存在下で活性化され、刺激される、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
17. 前記ドナー修復テンプレートは、
    キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、遺伝子操作されたＴＣＲ、ＤＡＲＩＣ、またはゼータカインからなる群から選択される遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
18. 請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法により改変されたＴ細胞の集団を含む組成物。
19. 請求項１８に記載のＴ細胞の集団と、生理学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含む、組成物。
20. （ａ）１つ以上の修飾Ｔ細胞受容体アルファ（ＴＣＲα）対立遺伝子と、
    （ｂ）前記１つ以上の修飾ＴＣＲα対立遺伝子に挿入された、免疫力エンハンサー、免疫抑制シグナルダンパーおよび／または遺伝子操作された抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む核酸と、を含む、細胞。