JP2019195328A - デングウイルスワクチンのための方法および組成物 - Google Patents

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DESILVA Aravinda
ヨーント，ボイド
Yount Boyd
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Abstract

【課題】本発明は、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパク質を含む組成物および使用方法の提供。【解決手段】デングウイルスＥ糖タンパク質骨格のデングウイルス血清型とは異なるデングウイルス血清型に関する抗体によって認識されるエピトープを導入するアミノ酸置換を含む組成物および使用方法で、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格はデングウイルス血清型１あるいは血清型３に由来し、抗体はデングウイルス血清型３あるいは血清型１と反応する。【選択図】図１Ａ−Ｂ

Description

［優先権に関する記載］
本出願は、合衆国法典第１１９条（ｅ）に基づき、その内容全体が参照により本明細書
の一部をなすものとする２０１３年６月２６日に出願された米国仮出願第６１／８３９，
６８７号の利益を主張する。
［政府の支援の記載］
本発明は、国立衛生研究所によって付与された助成金番号Ｕ５４ ＡＩ０５７１５７の
政府の支援を受けてなされた。米国政府は、本発明において一定の権利を有する。
本発明は、単一の供給源に由来する１つより多くのデングウイルス血清型に対する中和
抗体を誘導する、デングウイルスワクチンを対象とする。
デングは、空前の速度で蔓延し、５０ヶ国を超える国で重大な健康上および経済的な負
担に発展し続けている蚊媒介性フラビウイルスである。４種すべてのＤＥＮＶ血清型から
保護する現行のＤＥＮＶワクチンは、その血清型からの保護を与えることがそれぞれ意図
される４種のウイルスまたは４種の組換えタンパク質からなる「四価」製剤として送達さ
れなければならない。バランスのとれた抗体応答を達成するための四価カクテル中の血清
型の正確な混合比は公知ではなく、このことは、タイでの大規模な第２Ｂ相試験において
、最先端の四価の弱毒化キメラ生ウイルスが臨床的に意味のある保護を与えるのに最近失
敗したことによってはっきりと示されている（Ｓａｂｃｈａｒｅｏｎ Ａ，ｅｔ ａｌ．
，２０１２）。１つまたは複数のウイルス血清型が他者を打ち負かすウイルス干渉が、失
敗の一因となると考えられている。ＤＥＮＶ−１／３キメラウイルスおよびＤＥＮＶ３／
１キメラウイルスは、ＤＥＮＶ−１に免疫のある個体およびＤＥＮＶ−３に免疫のある個
体の両方に由来する中和抗体によって認識されるエピトープを提示する、単一ウイルスで
ある。このことから、単一ウイルスは、２種のウイルス（ＤＥＮＶ−１およびＤＥＮＶ−
３）を１種のウイルス（ＤＥＮＶ−１／３またはＤＥＮＶ−３／１）で置き換えることで
、２種の血清型を同時に標的とする中和抗体を誘導することができるはずであることが示
唆される。
本発明は、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパ
ク質であって、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格は、デングウイルスＥ糖タンパク質骨
格のデングウイルス血清型とは異なるデングウイルス血清型と反応する抗体によって認識
されるエピトープを導入するアミノ酸置換を含む、キメラデングウイルスＥ糖タンパク質
を提供する。１つの実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格はデングウイ
ルス血清型１に由来し、また、１つの実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質
骨格はデングウイルス血清型３に由来する。いくつかの実施形態において、抗体は、デン
グウイルス血清型３と反応し（例えば、モノクローナル抗体５Ｊ７）、また、他の実施形
態において、抗体は、デングウイルス血清型１と反応する（例えば、モノクローナル抗体
１Ｆ４）。
本発明はさらに、アミノ酸配列：
を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパク質も提供する。
また、アミノ酸配列：
を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパク質も、本明細書において提供される。
さらに、本発明のＥ糖タンパク質を含むフラビウイルス粒子またはウイルス様粒子（Ｖ
ＬＰ）も、本明細書において提供される。
本発明のＥ糖タンパク質をコードする単離核酸分子、ならびに本発明のフラビウイルス
粒子またはＶＬＰをコードする単離核酸分子もまた、本明細書において提供される。
また、本発明は、薬学的に許容される担体中に本発明のＥ糖タンパク質を含む組成物も
提供し、かつ薬学的に許容される担体中に本発明の核酸分子を含む組成物も提供する。
さらに、本発明は、対象（例えば、それを必要とする対象）においてデングウイルスに
対する免疫応答を生じさせる方法であって、有効量の本発明のＥ糖タンパク質、本発明の
フラビウイルス粒子、本発明の核酸分子、および／または本発明の組成物、ならびにそれ
らの任意の組合せを対象に投与するステップを含む方法も提供する。
また、本発明は、それを必要とする対象においてデングウイルス感染を治療する方法で
あって、有効量の本発明のＥ糖タンパク質、本発明のフラビウイルス粒子、本発明のいず
れかの核酸分子、および／または本発明の組成物、ならびにそれらの任意の組合せを対象
に投与するステップを含む方法も提供する。
さらに、対象（例えば、それを必要とする対象）においてデングウイルス感染を予防す
る方法であって、有効量の本発明のＥ糖タンパク質、本発明のフラビウイルス粒子、本発
明のいずれかの核酸分子、および／または本発明の組成物、ならびにそれらの任意の組合
せを対象に投与するステップを含む方法も本明細書において提供される。
また、デングウイルス感染の影響から対象（例えば、それを必要とする対象）を保護す
る方法であって、有効量の本発明のＥ糖タンパク質、本発明のフラビウイルス粒子、本発
明のいずれかの核酸分子、および／または本発明の組成物、ならびにそれらの任意の組合
せを対象に投与するステップを含む方法も本明細書において提供される。
本発明はさらに、対象においてデングウイルスに対する免疫応答を生じさせるための、
それを必要とする対象においてデングウイルス感染を治療するための、対象においてデン
グウイルス感染を予防するための、および／またはデングウイルス感染の影響から対象を
保護するための医薬品を製造する際に使用するための、本発明のＥ糖タンパク質、本発明
のフラビウイルス粒子、本発明の核酸分子、および／または本発明の組成物も提供する。
また、対象においてデングウイルスに対する免疫応答を生じさせる際、それを必要とす
る対象においてデングウイルス感染を治療する際、対象においてデングウイルス感染を予
防する際、および／またはデングウイルス感染の影響から対象を保護する際に使用するた
めの、本発明のＥ糖タンパク質、本発明のフラビウイルス粒子、本発明の核酸分子、およ
び／または本発明の組成物の使用も、本明細書において提供される。
ＤＥＮＶ−１／３変異体の場合、ＤＥＮＶ３に由来するＥＤＩ−ＩＩヒンジをＤＥＮＶ−１バックグラウンド、すなわちＷｅｓｔＰａｃ’７４中に移植して、ＤＥＮＶ−３／１ヒンジ変異体を作製した。ＥＤＩ−ＩＩヒンジは、ＤＥＮＶ３に特異的なヒトｍＡｂ−５Ｊ７を用いて定めた。Ａ）結果として生じるウイルスｒＤＥＮＶ−１／３を、モノクローナル抗体５Ｊ７に対して試験した。この図は、ＤＥＮＶ−１が５Ｊ７によって中和されないのに対して、ＤＥＮＶ−３は中和されることを示す。ＤＥＮＶ−３ ＥＤＩ／ＩＩヒンジのみを含むｒＤＥＮＶ−１／３は、ＤＥＮＶ−３を中和する濃度と同等の濃度で５Ｊ７によって中和される。これにより、ＤＥＮＶ−１中への５Ｊ７エピトープの移植の成功が実証される。Ｂ）このパネルは、ＤＥＮＶ−３はｍＡｂ−１Ｆ４によって中和されず、ＤＥＮＶ−１は１Ｆ４によって中和され、また、ｒＤＥＮＶ−１／３も中和されることを示し、１Ｆ４が依然としてキメラウイルスに結合し、中和できることが示される。 この図は、ＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−３、およびヒンジキメラウイルスＷｅｓｔＰａｃ−３００１ヒンジ（ｒＤＥＮＶ−１／３）に対して試験した、一次ＤＥＮＶ−１ヒト免疫血清および一次ＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清を示す。Ｙ軸は、組織培養において投入されたウイルスの５０％を中和するのに必要とされる免疫血清の希釈倍率を示す。値が大きいほど、血清が強力であることを示す。Ａ）ＤＥＮＶ−１一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を強力に中和するが、ＤＥＮＶ−３は中和しない。ｒＤＥＮＶ−１／３は、ＤＥＮＶ−１と同様の濃度でＤＥＮＶ−１免疫血清による中和に感受性であることから、親ＤＥＮＶ−３ウイルスとは対称的に、キメラウイルスはＤＥＮＶ−１免疫血清によって認識されるエピトープを提示することが示される。Ｂ）ＤＥＮＶ−３一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を中和しないが、ＤＥＮＶ−３を中和する。ｒＤＥＮＶ−１／３は、ＤＥＮＶ−３と同様の濃度でＤＥＮＶ−３一次免疫血清によって中和されることから、キメラウイルスｒＤＥＮＶ−１／３はＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清中のＤＥＮＶ−３抗体が標的とする不可欠なＤＥＮＶ−３エピトープを維持していることが示される。＊は、中和されないことを示す。 この図は、ＷｅｓｔＰａｃ’７４−３００１ヒンジが、アカゲザルへの感染後２８日、６０日、９０日、１２０日、および１８０日目に、広範囲に交差中和する抗体を誘導することを示す。Ｙ軸は、上記の中和抗体の力価を示す。Ｘ軸は、各ウイルス血清型を示す。プロットされた各点は、所与の血清型に対する一匹のアカゲザルの中和力価である。各々の点集団を通る中央の線は、各血清型に対する各サル群の中和力価の幾何平均である。ひげは、平均値の標準誤差を示す。各時点（２８日、３０日、６０日、９０日、１２０日、１８０日）は、４種すべての血清型に対して広範囲に交差中和する抗体応答を示す。 ＤＥＮＶ−３／１変異体の場合、ＤＥＮＶ１（ＷｅｓｔＰａｃ’７４）に由来する、モノクローナル抗体１Ｆ４フットプリントによって定めたＥＤＩ−ＩＩヒンジをＤＥＮＶ−３バックグラウンド（３００１）中に移植して、ＤＥＮＶ−１／３ヒンジ変異体を作製した。この移植は、各変種がより大きなエピトープ領域を示す、３種の異なるウイルス（１Ｆ４Ｓ、１Ｆ４Ｒ、および１Ｆ４Ｅ）に対して実行した。ｒＤＥＮＶ−３に由来するＥＤＩ−ＩＩヒンジを、組換えｒＤＥＮＶ−１ウイルス中に入れた。この図は、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）のデータを示しており、Ｙ軸に光学濃度（ＯＤ）を単位として抗体の相対的結合を表し、Ｘ軸に上昇する抗体濃度を表している。Ａ）３００１−１Ｆ４Ｓ、３００１−１Ｆ４Ｒ、および３００１−１Ｆ４Ｅに対するｍＡｂ−１Ｆ４の結合。ｍＡｂ−１Ｆ４に結合しない親３００１とは対照的に、キメラウイルスに対する曲線が上昇していることから、抗体結合が示される。Ｂ）親３００１、３００１−１Ｆ４Ｓ、３００１−１Ｆ４Ｒ、および３００１−１Ｆ４Ｅに対するｍＡｂ−５Ｊ７の結合。これらのウイルスにおいて５Ｊ７結合が維持されているのに対して、エピトープ供与体であるｉｃＷｅｓｔＰａｃ’７４は５Ｊ７に結合しない。 この図は、ＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−３、およびヒンジキメラウイルス３００１−１Ｆ４Ｅに対して試験した、一次ＤＥＮＶ−１ヒト免疫血清および一次ＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清を示す。Ｙ軸は、組織培養において投入ウイルスの５０％を中和するのに必要とされる免疫血清の希釈倍率を示す。値が大きいほど、血清が強力であることを示す。Ａ）ＤＥＮＶ−１一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を強力に中和するが、ＤＥＮＶ−３は中和しない。３００１−１Ｆ４Ｅは、ＤＥＮＶ−１と同様の濃度でＤＥＮＶ−１免疫血清による中和に感受性であることから、親ＤＥＮＶ−３ウイルスとは対称的に、キメラウイルスはＤＥＮＶ−１免疫血清によって認識されるエピトープを提示することが示される。Ｂ）ＤＥＮＶ−３一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を中和しないが、ＤＥＮＶ−３を中和する。３００１−１Ｆ４Ｅは、ＤＥＮＶ−３と同様の濃度でＤＥＮＶ−３一次免疫血清によって中和されることから、キメラウイルス３００１−１Ｆ４ＥはＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清中のＤＥＮＶ−３抗体が標的とする不可欠なＤＥＮＶ−３エピトープを維持していることが示される。 この図は、ＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−３、およびヒンジキメラウイルス３００１−１Ｆ４Ｅに対して試験した、一次ＤＥＮＶ−１ヒト免疫血清および一次ＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清を示す。Ｙ軸は、組織培養において投入ウイルスの５０％を中和するのに必要とされる免疫血清の希釈倍率を示す。値が大きいほど、血清が強力であることを示す。Ａ）ＤＥＮＶ−１一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を強力に中和するが、ＤＥＮＶ−３は中和しない。３００１−１Ｆ４Ｅは、ＤＥＮＶ−１と同様の濃度でＤＥＮＶ−１免疫血清による中和に感受性であることから、親ＤＥＮＶ−３ウイルスとは対称的に、キメラウイルスはＤＥＮＶ−１免疫血清によって認識されるエピトープを提示することが示される。Ｂ）ＤＥＮＶ−３一次免疫血清は、ＤＥＮＶ−１を中和しないが、ＤＥＮＶ−３を中和する。３００１−１Ｆ４Ｅは、ＤＥＮＶ−３と同様の濃度でＤＥＮＶ−３一次免疫血清によって中和されることから、キメラウイルス３００１−１Ｆ４ＥはＤＥＮＶ−３ヒト免疫血清中のＤＥＮＶ−３抗体が標的とする不可欠なＤＥＮＶ−３エピトープを維持していることが示される。 アカゲザルにおける３００１−１Ｆ４Ｅの免疫原性。１つの時点のみが提供され、広範囲に交差中和する抗体を示しており、これは、ＷｅｓｔＰａｃ−３００１ヒンジに関して判明したことと一致している。
本発明は、ＤＥＮＶ血清型を定めるエピトープ領域を異なるＤＥＮＶ血清型のタンパク
質骨格に移入して、両方の血清型に対する抗体標的を含み、それによって、単一供給源に
由来する２種の異なるＤＥＮＶ血清型に対する中和抗体を誘導できる二価ワクチンとして
機能するキメラ分子を作製することができるという予想外の発見に基づいている。したが
って、１つの実施形態において、本発明は、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格のデング
ウイルス血清型とは異なるデングウイルス血清型と反応する抗体によって認識されるエピ
トープを導入するアミノ酸置換を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパク質骨格を構築す
るためのプラットフォームを提供する。
いくつかの実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格は、デングウイルス
血清型１に由来する。いくつかの実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格
は、デングウイルス血清型２、デングウイルス血清型３、またはデングウイルス血清型４
に由来し得る。
いくつかの実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格のデングウイルス血
清型と異なるデングウイルス血清型と反応する抗体は、デングウイルス血清型３と反応す
る抗体である。このような抗体の非限定的な例は、モノクローナル抗体５Ｊ７である。
他の実施形態において、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格のデングウイルス血清型と
異なるデングウイルス血清型と反応する抗体は、デングウイルス血清型１、デングウイル
ス血清型２、またはデングウイルス血清型４と反応する抗体である。
第１のデングウイルス血清型および第２のデングウイルス血清型が異なる（すなわち、
同じ血清型ではない）ことを条件として、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格のための第
１のデングウイルス血清型とＥ糖タンパク質骨格中に導入されるエピトープを認識する抗
体の標的である第２のデングウイルス血清型との任意の組合せを使用できることが理解さ
れるであろう。
いくつかの実施形態において、本発明のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質は、アミ
ノ酸配列：
を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり得る。
いくつかの実施形態において、本発明のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質は、アミ
ノ酸配列：
を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり得る。
また、本発明は、本発明のキメラＥ糖タンパク質を含むフラビウイルス粒子またはウイ
ルス様粒子（ＶＬＰ）も提供する。
本発明のキメラの作製は、表１において特定されるアミノ酸置換のうちのいくつか（例
えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２
個、１３個、１４個、１５個など）またはすべてをデングウイルスＥ糖タンパク質骨格ま
たはフラビウイルスＥ糖タンパク質骨格中に導入することによって実施することができる
。本発明のキメラタンパク質を作製するために、表１において特定されるアミノ酸すべて
が置換される必要があるわけではない。例えば、いくつかの実施形態において、それぞれ
のエピトープ領域として表１において特定される連続したアミノ酸配列のいずれかの端に
おける約１個、２個、３個、４個、または５個のアミノ酸のさらなる置換および／または
置換の脱落が、本発明のキメラの作製に含まれてよい。所望の立体構造エピトープを作製
するのに必要な置換の数は、本明細書の教示に従って、また当技術分野において周知のプ
ロトコルに従って、当業者が容易に決定することができる。表１のアミノ酸位置の番号付
けは、本明細書において提供されるＷｅｓｔＰａｃ７４（ＤＥＮＶ−１）のアミノ酸配列
またはＵＮＣ−３００１（ＤＥＮＶ−３）のアミノ酸配列に基づいている。しかし、他の
デングウイルスＥ糖タンパク質アミノ酸配列または他のフラビウイルスＥ糖タンパク質ア
ミノ酸配列中の同等のアミノ酸位置が容易に同定され得、本発明のキメラタンパク質の作
製において使用され得ることが、当業者には容易に理解されるであろう。
表２は、ＤＥＮＶ−３と反応するモノクローナル抗体５Ｊ７によって認識されるエピト
ープを導入するために、ＤＥＮＶ−１のＥ糖タンパク質をコードするヌクレオチド配列に
対して施すことができる改変の一例を示す。これらの置換を含むヌクレオチド配列の翻訳
の結果として生じるアミノ酸配列は、
である。
表２において提供される改変が、上記のアミノ酸配列を得ることができる方法の一例を
提供すること、およびアミノ酸コドンの縮重があるため、ＤＥＮＶ−３のＥ糖タンパク質
をコードするヌクレオチド配列に多数の他の改変を施して、このアミノ酸配列を得ること
ができることが理解されるであろう。
表３は、５００，０００感染単位のウイルスに皮下感染させたアカゲザルにおいてＷｅ
ｓｔＰａｃ’７４−３００１ヒンジが感染性であることを示す。各日付の報告値は、イム
ノフォーカスアッセイによって定量した、形質転換されたサル血清ウイルスの力価の対数
である。
表４。アカゲザルにおける３００１−１Ｆ４Ｅの弱毒化。この表は、５００，０００感
染単位のウイルスに皮下感染させたアカゲザルにおいて３００１−１Ｆ４Ｅが感染性であ
ることを示す。しかし、このウイルスは、計量可能な検出レベル（５０感染性ウイルス／
ｍＬ血清）より少なかった。感度のより高いアッセイである遅延フォーカスアッセイは、
５０感染単位／ｍＬ未満のウイルスを検出することはできるが、存在する低レベルのウイ
ルスを定量することはできない。その結果として、本発明者らの感度の最も高いアッセイ
によってウイルスが検出された日は、「＋」を用いて陽性として記録している。感染日数
の合計を、左の列に示している。ウイルス血症が低レベルであることと、感染日数の平均
数が低いこと（２．２５日）は、サルにおけるウイルス弱毒化と一致している。
表５。キメラウイルスＤＥＮＶ１／３をさらに特徴付けるために、ＤＥＮＶ−１特異的
モノクローナル抗体１Ｆ４を用いてプローブした。１Ｆ４は血清型特異的であり、その標
的エピトープは、ＥＤＩ−ＩＩヒンジの中にある。移植されたＤＥＮＶ−３のＥＤＩ−Ｉ
Ｉヒンジが１Ｆ４エピトープを破壊する場合、１Ｆ４はキメラＷｅｓｔＰａｃ７４／３０
０１ウイルスをもはや中和しないはずである。
いくつかの実施形態において、本発明は、デングウイルスではないフラビウイルスに由
来するフラビウイルスＥ糖タンパク質にデングウイルスエピトープを導入するためにアミ
ノ酸置換が施された、キメラフラビウイルスＥ糖タンパク質を提供する。したがって、い
くつかの実施形態において、本発明は、デングウイルスＥ糖タンパク質骨格ではないフラ
ビウイルスＥ糖タンパク質骨格を含むキメラＥ糖タンパク質を含むフラビウイルスＥ糖タ
ンパク質であって、そのフラビウイルスＥ糖タンパク質骨格が、あるデングウイルスと反
応する抗体によって認識されるエピトープを導入するアミノ酸置換を含む、フラビウイル
スＥ糖タンパク質を提供する。
使用され得るフラビウイルスの非限定的な例は、黄熱病ウイルス（ＹＦＶ）（例えば、
ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）データベース受託番号ＪＸ５０３５２９）、日本脳炎ウイル
ス（ＪＥＶ）（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）データベース受託番号Ｕ１４１６３
）、西ナイルウイルス（ＷＮＶ）（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）データベース受
託番号ＤＱ２１１６５２）、および現在公知であるか、または後に同定される他の任意の
フラビウイルスを含む。
デングウイルスワクチンを作製しようとする多くの試みが、非中和性抗体を生じさせる
結果となり、自然感染またはワクチンに次に曝露された際の病変の可能性を増やす場合が
あることが、当技術分野において公知である。操作されたエピトープを提供するための別
のアプローチは、別のフラビウイルス粒子またはＶＬＰに組み込まれたデングウイルスＥ
タンパク質の全体または一部分を送達するものである。代表的な実施形態において、異種
フラビウイルスは、西ナイルウイルスまたは黄熱病ウイルスである。Ｅタンパク質の一部
分を異種フラビウイルス骨格のＥタンパク質に継ぎ合わせて、例えば、デングウイルスＥ
タンパク質および／または他のデングウイルス構造タンパク質中に存在する非中和性エピ
トープに対する非中和性デングウイルス抗体の生成を減少させることができる。
すなわち、キメラフラビウイルスまたはキメラフラビウイルスＶＬＰは、適切な立体構
造の四次構造デングウイルスエピトープ（ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒ
ｕｓ ｅｐｉｔｏｐｅ）を提示し、一方で、キメラフラビウイルスまたはキメラフラビウ
イルスＶＬＰにおいて提示されないデングウイルスのＥタンパク質の他の部分および／ま
たは他の構造タンパク質に対する非中和性抗体の生成を減少させることができる。
本発明のいくつかの実施形態において、フラビウイルスＥ糖タンパク質またはデングウ
イルスＥ糖タンパク質の個々の立体構造エピトープは、人工的な骨格または支持構造体の
内部のエピトープがＥ糖タンパク質、ウイルス粒子、またはＶＬＰの構造内部のエピトー
プの立体構造および配置を模倣するように、人工的な骨格または支持構造体の上に提示さ
れ得る。
本発明のさらに別の実施形態において、本発明は、本発明のＥ糖タンパク質の個々の立
体構造エピトープを模倣するペプチドミモトープ（ｍｉｍｉｔｏｐｅ）（Ｍｅｌｏｅｎ
ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．１３，３５２−３５９を参照
されたい）を提供する。ミモトープは、本発明のＥ糖タンパク質の個々の立体構造エピト
ープに対する１つまたは複数の抗体を用いて、表面刺激、ランダムペプチドライブラリー
、またはファージディスプレイライブラリーなど当技術分野において公知である任意の技
術を用いて同定することができる。
本発明はさらに、本発明のデングウイルスエピトープまたはポリペプチドをコードする
核酸（例えば、単離核酸）も提供する。
本発明はさらに、本発明のキメラフラビウイルスＶＬＰまたはキメラフラビウイルス粒
子（例えば、フラビウイルス粒子のウイルスコート）をコードする核酸（例えば、単離核
酸）も提供する。
また、本発明の核酸をコードするベクターも提供される。
また、本発明のベクター、核酸、デングウイルスエピトープ、ポリペプチド、キメラフ
ラビウイルスＶＬＰ、またはキメラフラビウイルス粒子を含む細胞も、提供される。
また、本発明は、本発明の細胞、ベクター、核酸、デングウイルスエピトープ、ポリペ
プチド、キメラフラビウイルスＶＬＰ、またはキメラフラビウイルス粒子を含む免疫原性
組成物も、提供する。実施形態において、免疫原性組成物は、一価である。実施形態にお
いて、免疫原性組成物は、デングウイルス血清型ＤＥＮ１、ＤＥＮ２、ＤＥＮ３、および
／またはＤＥＮ４に対して多価（例えば、四価）である。
本発明は、有効量の本発明のデングウイルスエピトープ、ポリペプチド、キメラフラビ
ウイルスＶＬＰもしくはキメラフラビウイルス粒子、核酸、ベクター、細胞、または免疫
原性組成物を対象に投与するステップを含む、対象においてデングウイルスに対する免疫
応答を生じさせる方法を包含する。
さらに、本発明は、有利なことに、ＤＥＮ１、ＤＥＮ２、ＤＥＮ３、およびＤＥＮ４の
内の１つ、２つ、３つ、または４つすべてに対する免疫応答を誘導するように実施するこ
とができる。有効かつ安全な多価デングワクチンは、血清型間の干渉という問題があるた
め、設計するのは難題であったことは、当技術分野において周知である。例えば、免疫応
答は、標的血清型の一部のみを主に対象とする場合がある。その場合、すべての血清型に
対する応答を達成しようとするには、複数回のワクチン接種が必要とされる。しかし、デ
ングウイルスの場合、既存の抗体を対象に反復投与すると、デング出血熱を招き得るため
、このアプローチは危険であり得る。
本発明のさらに別の態様は、有効量の本発明のデングウイルスエピトープ、ポリペプチ
ド、キメラフラビウイルスＶＬＰもしくはキメラフラビウイルス粒子、核酸、ベクター、
細胞、または免疫原性組成物を対象に投与するステップを含む、デングウイルス感染を治
療する方法である。
本発明のさらに別の態様は、有効量の本発明のデングウイルスエピトープ、ポリペプチ
ド、キメラフラビウイルスＶＬＰもしくはキメラフラビウイルス粒子、核酸、ベクター、
細胞、または免疫原性組成物を対象に投与するステップを含む、デングウイルス感染を予
防する方法である。
本発明のさらに別の態様は、有効量の本発明のデングウイルスエピトープ、ポリペプチ
ド、キメラフラビウイルスＶＬＰもしくはキメラフラビウイルス粒子、核酸、ベクター、
細胞、または免疫原性組成物を対象に投与するステップを含む、デングウイルス感染の影
響から対象を保護する方法である。
デングウイルスには四種類の血清型がある（ＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−
３、およびＤＥＮＶ−４）。各血清型に、いくつかの異なる株または遺伝子型が存在する
。本発明のデングウイルスの抗原およびエピトープは、現在公知であるか、または後に同
定されるすべての血清型、株、および遺伝子型を含めて、任意のデングウイルスに由来し
てよい。
本発明の実施形態において、デングウイルスは、ＵＮＣ１０１７株（ＤＥＮ１）、Ｗｅ
ｓｔ Ｐａｃｉｆｉｃ ７４株（ＤＥＮ１）、Ｓ１６８０３株（ＤＥＮ２）、ＵＮＣ２０
０５株（ＤＥＮ２）、ＵＮＣ３００１株（ＤＥＮ３）、ＵＮＣ３０４３（ＤＥＮ３、フィ
リピンに由来する株０５９．ＡＰ−２、１９８４年）、ＵＮＣ３００９株（ＤＥＮ３、Ｄ
２８６３、スリランカ １９８９年）、ＵＮＣ３０６６（ＤＥＮ３、プエルトリコ由来の
株１３４２ １９７７年）、ＣＨ５３４８９株（ＤＥＮ３）、ＵＮＣ４０１９株（ＤＥＮ
４）、またはＴＶＰ−３６０（ＤＥＮ４）である。
本発明の実施形態において、デングウイルスポリペプチド（例えば、Ｅタンパク質）の
「免疫原として活性な断片」は、少なくとも約６個、８個、１０個、１２個、１５個、２
０個、３０個、５０個、７５個、１００個、１２５個、１５０個、２００個、２５０個、
３００個、３５０個、４００個、もしくは４５０個以上のアミノ酸、場合によっては連続
したアミノ酸、および／または約４９５個、４７５個、４５０個、４２５個、４００個、
３５０個、３００個、２５０個、２００個、１５０個、１００個、７５個、もしくは５０
個未満のアミノ酸、場合によっては連続したアミノ酸を、下限が上限より小さい限りにお
いて前記の数の任意の組合せを含めて、含むか、それらから本質的になるか、またはそれ
らからなり、この「免疫原として活性な断片」は、宿主においてデングウイルスに対する
免疫応答（例えば、天然抗原と反応するＩｇＧおよび／またはＩｇＡ）、場合によっては
防御免疫応答を誘導し、また、本発明者らが新たに同定した四次構造デングウイルスエピ
トープに特異的に結合する抗体の産生を誘導する。
本明細書において使用される「エピトープ」という用語は、適切な立体構造で存在する
場合に、抗体（例えば、Ｂ細胞エピトープ）またはＴ細胞受容体（例えば、Ｔ細胞エピト
ープ）に対する反応部位を提供する、特異的アミノ酸配列を意味する。
Ｂ細胞エピトープを含む、所与のポリペプチドの部分は、当技術分野において公知であ
るいくつものエピトープマッピング技術を用いて、同定することができる。（例えば、Ｅ
ｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇｌｅｎｎ Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅ
ｄ．，１９９６，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．を参照されたい）
。例えば、直線状エピトープは、例えば、タンパク質分子の一部分に相当するペプチドを
多数、固体支持体上で同時に合成し、それらのペプチドが支持体に引き続き結合している
間に、それらのペプチドと抗体を反応させることによって、特定することができる。この
ような技術は当技術分野において公知であり、例えば、米国特許第４，７０８，８７１号
、Ｇｅｙｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ ８１：３９９８−４００２；Ｇｅｙｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９８６）Ｍｏｌｅｃ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：７０９−７１５において説明されている。
同様に、立体構造エピトープも、例えば、Ｘ線結晶解析および二次元核磁気共鳴などに
よってアミノ酸の空間的立体構造を決定することによって、容易に同定することができる
。また、タンパク質の抗原性領域は、例えば、Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒ
ｏｕｐから入手可能なソフトウェアプログラムＯｍｉｇａバージョン１．０を用いて計算
されるもののような、標準的な抗原性およびハイドロパシープロットを用いて同定するこ
ともできる。このコンピュータープログラムは、抗原性プロファイルを決定するためにホ
ップ／ウッズ（Ｈｏｐｐ／Ｗｏｏｄｓ）法（Ｈｏｐｐ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ（１９８１）７８：３８２４−３８２８）を、また、ハイ
ドロパシープロットのためにカイト・ドーリットル（Ｋｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ）手
法（Ｋｙｔｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９８２）１５７：１０５−１
３２）を用いる。
一般に、対象の免疫系の細胞アームを刺激するのに関与しているＴ細胞エピトープは、
約８〜２５アミノ酸の短いペプチドである。Ｔ細胞エピトープを同定するための一般的な
方法は、部分的に重なる合成ペプチドを使用し、関心対象の抗原に対して免疫性である動
物に由来するＴ細胞によって認識されるこれらのペプチドのプールまたは個々のペプチド
を、例えば、酵素結合イムノスポットアッセイ（ＥＬＩＳＰＯＴ）を用いて解析するもの
である。また、これらの部分的に重なるペプチドは、サイトカインの放出もしくは分泌の
刺激などの他のアッセイにおいて使用され得、またはそのペプチドを含む主要組織適合性
（ＭＨＣ）四量体を構築することによって評価され得る。また、このような免疫原として
活性な断片は、関心対象の抗原に由来する様々な断片による刺激に応答したリンパ球増殖
を促進する能力に基づいて同定することもできる。
本発明は、予防目的、治療目的、および／または診断目的のために実行することができ
る。さらに、本発明は、診断目的もしくは研究目的などの任意の目的のための、または別
の対象への移行による受動免疫化のための抗体を産生させるために実行することもできる
。
本発明はさらに、１つまたは複数の本発明の組成物を含むキットも提供する。当技術分
野において周知であると思われるように、本発明のキットは、適切な緩衝剤および／また
は希釈剤および／または他の溶液ならびにキットを使用するための指示と共に、キットの
試薬（例えば、抗体、抗原、核酸）を入れるための１つまたは複数の容器および／または
入れ物を含んでよいことが、当業者には十分に理解されると予想される。当技術分野にお
いて周知であるように、このようなキットは、アジュバントおよび／または他の免疫賦活
剤もしくは免疫調節剤もさらに含んでよい。
また、本発明の組成物およびキットは、他の医薬物質、薬学的物質、担体、希釈剤、免
疫賦活性サイトカインなども含んでよい。このような剤形を調製する実際の方法は、当業
者には公知であるか、または明らかになると予想される。
対象への投与は、当技術分野において公知である任意の経路によって行うことができる
。非限定的な例として、投与経路は、吸入（例えば、経口吸入および／または鼻吸入）、
経口、口腔内（例えば、舌下）、直腸、膣、局所（気道への投与を含む）、眼内、経皮、
非経口（例えば、筋肉内（例えば、骨格筋への投与）、静脈内、動脈内、および腹腔内な
ど）、皮下（足蹠中への投与を含む）、皮内、胸膜内、脳内、および／またはくも膜下腔
内の経路によることができる。
本発明のエピトープ、ポリペプチド、ＶＬＰ、およびウイルスベクターは、それ自体で
、またはそれをコードする核酸（例えば、ＤＮＡ）を送達することによって、送達するこ
とができる。
免疫調節性のケモカインおよびサイトカイン（好ましくは、ＣＴＬ誘導性サイトカイン
）などの免疫調節性化合物は、対象に同時に投与されてよい。
サイトカインは、当技術分野において公知である任意の方法によって投与されてよい。
外因性サイトカインが対象に投与されてもよく、あるいは、サイトカインをコードする核
酸が、適切なベクターを用いて対象に投与され、サイトカインがインビボで産生されても
よい。特定の実施形態において、ウイルスアジュバントはサイトカインを発現する。
本発明の実施形態において、複数回の投与量（例えば、２回または３回以上）の本発明
の組成物は、検出可能な病原性（例えば、デングショック症候群／デング出血熱）を伴わ
ずに投与することができる。
本発明の実施形態において、本発明の多価ワクチンは、免疫干渉をもたらさず、例えば
、提示されるあらゆる抗原に対して、バランスの取れた免疫応答が誘導される。本発明の
実施形態において、バランスの取れた応答は、ＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−
３、およびＤＥＮＶ−４に対する防御免疫をもたらす。
本発明の実施形態において、多価ワクチンは、抗デング移行抗体が存在する対象に投与
することができる。
本発明は、様々な形態で具体化することができ、本明細書において説明する実施形態に
限定されると解釈されるべきではないことが理解されると予想される。もっと正確に言え
ば、これらの実施形態は、本開示が詳細かつ完全となり、かつ本発明の範囲を当業者に十
分に伝えるように提供される。
他に規定されない限り、本明細書で使用される技術用語および科学用語はすべて、本発
明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書
の本発明の説明において使用される専門用語は、特定の実施形態を説明する目的のために
すぎず、本発明を限定することは意図しない。
本明細書において使用される場合、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、または「
その（ｔｈｅ）」は、１つまたは１つより多くを意味することができる。例えば、「１つ
の（ａ）」細胞は、単一の細胞または多数の細胞を意味することができる。
また、本明細書において使用される場合、「および／または」とは、関連する列挙され
た項目の内の１つまたは複数のありとあらゆる可能な組合せ、ならびに択一的に解釈され
る場合（「または」）は、組合せがないことを意味し、包含する。
用量の量（例えば、脂肪酸の量）などのような測定可能な値について述べる場合、本明
細書において使用される「約」という用語は、指定された量の±２０％、±１０％、±５
％、±１％、±０．５％、またはさらに±０．１％の変動を含むことが意図される。
本明細書において使用される場合、移行句「から本質的になる」は、特許請求の範囲が
、請求項で列挙された特定の材料またはステップ、さらに特許請求された発明の「基本的
かつ新規な特徴に重大な影響を及ぼさないもの」を包含すると解釈されるべきであること
を意味する。Ｉｎ ｒｅ Ｈｅｒｚ，５３７ Ｆ．２ｄ ５４９，５５１−５２，１９０
Ｕ．Ｓ．Ｐ．Ｑ．４６１，４６３（ＣＣＰＡ １９７６）（原文で強調されている）を
参照されたい。また、ＭＰＥＰ§２１１１．０３も参照されたい。したがって、本発明の
特許請求の範囲において使用される場合の「から本質的になる」という用語は、「含む」
に等しいと解釈されることを意図しない。
本明細書において使用される場合、「核酸」という用語は、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、
合成（例えば化学合成）ＤＮＡ、およびＲＮＡとＤＮＡのキメラを含めて、ＲＮＡとＤＮ
Ａの両方を包含する。核酸は、二本鎖でも一本鎖でもよい。核酸は、ヌクレオチドの類似
体または誘導体（例えば、イノシンヌクレオチドまたはホスホロチオアートヌクレオチド
）を用いて合成され得る。このようなヌクレオチドは、例えば、塩基対合能力が変化した
、またはヌクレアーゼに対する耐性が高くなった核酸を調製するのに使用することができ
る。
本明細書において使用される場合、「ポリペプチド」という用語は、別段の定めが無い
限り、ペプチドとタンパク質（融合タンパク質を含む）の両方を包含する。
「融合タンパク質」は、自然界では一つに融合して存在しない２つ（以上）の異なるポ
リペプチドをコードする２つの異種ヌクレオチド配列またはその断片が、正確な翻訳リー
ディングフレーム中で一つに融合している場合に産生されるポリペプチドである。
「組換え型の」核酸、ポリヌクレオチド、またはヌクレオチドの配列とは、遺伝子工学
技術によって作製されるものである。
「組換え」ポリペプチドは、組換え型の核酸、ポリペプチド、またはヌクレオチドの配
列から作製される。
本明細書において使用される場合、「単離」ポリヌクレオチド（例えば、「単離核酸」
または「単離ヌクレオチド配列」）とは、天然に存在する生物またはウイルスの他の構成
要素、例えば、細胞もしくはウイルスの構造構成要素または一般にポリヌクレオチドと一
緒に存在する他のポリペプチドもしくは核酸の少なくとも一部から少なくとも部分的に分
離されているポリヌクレオチドを意味する。場合によっては、ただし必ずしもそうではな
いが、「単離」ポリヌクレオチドは、出発原料と比べて高い濃度で存在する（すなわち、
濃縮されている）（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、１０倍、２０倍、５０倍、
１００倍、５００倍、１０００倍、または１００００倍以上の濃度）。代表的な実施形態
において、単離ポリヌクレオチドは、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％
、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％以上の純度である。
「単離」ポリペプチドとは、天然に存在する生物またはウイルスの他の構成要素、例え
ば、細胞もしくはウイルスの構造構成要素または一般にポリペプチドと一緒に存在する他
のポリペプチドもしくは核酸の少なくとも一部から少なくとも部分的に分離されているポ
リペプチドを意味する。場合によっては、ただし必ずしもそうではないが、「単離」ポリ
ペプチドは、出発原料と比べて高い濃度で存在する（すなわち、濃縮されている）（例え
ば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、５００倍、１
０００倍、または１００００倍以上の濃度）。代表的な実施形態において、単離ポリペプ
チドは、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、
７０％、８０％、９０％、または９５％以上の純度である。
さらに、「単離」細胞とは、自然界で通常は一緒に存在する他の構成要素から部分的に
または完全に分離された細胞である。例えば、単離細胞は、培養培地中の細胞および／ま
たは薬学的に許容される担体中の細胞であってよい。
「免疫原」および「抗原」という用語は本明細書において同義的に使用され、細胞性免
疫応答および／または体液性免疫応答が対象とすることができる任意の化合物（ポリペプ
チドを含む）を意味する。特定の実施形態において、免疫原または抗原は、デングウイル
ス感染の影響に対する防御免疫応答を誘導することができる。
本明細書において使用される「有効量」とは、治療的効果および／または有益な効果で
あり得る所望の効果をもたらすのに十分である、本発明のベクター、核酸、エピトープ、
ポリペプチド、細胞、粒子、ＶＬＰ、組成物、または製剤の量を意味する。有効量は、対
象の年齢、全身状態、治療される病態の重症度、投与される個々の作用物質、治療の継続
期間、任意の併用治療の性質、使用される薬学的に許容される担体、ならびに当業者の知
識および専門知識の範囲内の同様の因子によって変動する。必要に応じて、任意の個々の
事例における「有効量」は、適切な関連図書および文献を参照することにより、かつ／ま
たはごく普通の実験を用いることによって、当業者が決定することができる。
別段の定めが無い限り、本明細書において使用される「免疫原性量」または「有効免疫
量」という用語は、治療される対象において、免疫化されていない対象の生得的免疫より
大きな免疫応答（場合によっては、防御応答であり得る）を誘導するのに十分な量または
用量を意味する。任意の特定の状況における免疫原性量または有効免疫量は、当技術分野
において公知の方法を用いて、慣例的に決定することができる。
「ワクチン」、「ワクチン接種」、および「免疫化」という用語は、当技術分野におい
て十分に理解されており、本明細書において同義的に使用される。例えば、ワクチン、ワ
クチン接種、または免疫化という用語は、（例えば、活発な免疫応答を実現することによ
って）免疫原に対する対象の免疫反応を増大させ、したがって、感染に抵抗する、打ち勝
つ、および／または感染から回復する能力（すなわち、防御免疫応答）を増大させる、方
法または組成物であると理解されてよい。
「治療する」、「治療すること」、または「の治療」という用語（およびそれらの文法
的変形）は、対象の病態の重症度が軽減されるか、少なくとも部分的に改善されるか、ま
たは良くなること、および／あるいは少なくとも１つの臨床症状のいくらかの軽減、緩和
、もしくは減少が達成されるか、かつ／または疾患もしくは障害の進行が遅れることを意
味する。代表的な実施形態において、「治療する」、「治療すること」、または「の治療
」という用語（およびそれらの文法的変形）は、臨床疾患の他の徴候の有無に関わらず、
ウイルス血症の重症度を低下させることおよび／またはウイルス血症の進行を遅らせるこ
とを意味する。
本明細書において使用される「治療有効」量とは、対象を（本明細書において定義する
ように）治療するのに十分である量である。何らかの恩恵が対象に与えられる限り、治療
効果は完全である必要も治癒的である必要もないことが、当業者には理解されよう。
「予防する」、「予防すること」、または「の予防」という用語（およびそれらの文法
的変形）は、対象における疾患、障害、および／もしくは臨床症状の発症および／もしく
は進行を予防することおよび／もしくは遅らせること、ならびに／または本発明の方法を
用いない場合に起こると思われるものと比べて、疾患、障害、および／もしくは臨床症状
の発症および／もしくは進行の重症度を低下させることを意味する。代表的な実施形態に
おいて、「予防する」、「予防すること」、または「の予防」という用語（およびそれら
の文法的変形）は、臨床疾患の他の徴候の有無に関わらず、対象におけるウイルス血症の
発症および／または進行を予防することおよび／または遅らせることを意味する。予防は
、完璧な場合があり、例えば、疾患、障害、および／または臨床症状をまったくなくする
。また、予防は、部分的な場合もあり、その結果、対象における疾患、障害、および／も
しくは臨床症状の発生、ならびに／または発症および／もしくは進行の重症度が、本発明
を用いない場合に起こると思われるものよりも程度が低い。
本明細書において使用される「予防有効」量とは、対象において疾患、障害、および／
または臨床症状を（本明細書において定義するように）予防するのに十分である量である
。何らかの恩恵が対象に与えられる限り、予防レベルは完全である必要はないことが、当
業者には理解されよう。
本発明の方法によるデングウイルス感染の治療および／または予防の有効性は、当業者
には周知であるはずであるとおり、対象の症状および／または臨床的パラメーター（例え
ば、ウイルス血症）の変化によって示される臨床的改善を検出することによって、判定す
ることができる。
別段の定めが無い限り、「保護する」、「保護すること」、「保護」、および「防御的
な」という用語（ならびにそれらの文法的変形）は、デングウイルスの１つまたは複数の
株に対してであれ、遺伝子型に対してであれ、血清型に対してであれ、対象においてデン
グウイルス感染を予防する方法および治療する方法の両方を包含する。
本明細書において使用される「防御」免疫応答または「防御」免疫という用語は、その
免疫応答が、疾患または他の任意の感染徴候を予防するか、またはその発病率および／も
しくは重症度および／もしくは持続期間を低減するという点で、対象に何らかの恩恵を与
えることを示す。例えば、代表的な実施形態において、防御免疫応答または防御免疫によ
り、臨床疾患を伴うか否かを問わず、ウイルス血症が緩和される。あるいは、防御免疫応
答または防御免疫は、既にある疾患の治療的処置において有用である場合がある。
「能動免疫応答」または「能動免疫」は、「免疫原との遭遇後に宿主組織および宿主細
胞が関与する。これは、リンパ細網組織中の免疫担当細胞の分化および増殖を伴い、抗体
合成もしくは細胞媒介性の反応性の発達、または両方をもたらす。」Ｈｅｒｂｅｒｔ Ｂ
．Ｈｅｒｓｃｏｗｉｔｚ，Ｉｍｍｕｎｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ： Ｃｅｌｌ Ｆｕｎｃｔ
ｉｏｎ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ Ａｎｔｉｂｏｄ
ｙ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｉｎ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ： ＢＡＳＩＣ ＰＲＯＣＥＳＳ
ＥＳ １１７（Ｊｏｓｅｐｈ Ａ．Ｂｅｌｌａｎｔｉ ｅｄ．，１９８５）ことを特徴と
する。別の言い方をすると、能動免疫応答は、感染またはワクチン接種によって免疫原に
曝露された後に宿主によって開始される。能動免疫は、「能動的に免疫化された宿主から
免疫性のない宿主への前もって形成された物質（抗体、伝達因子、胸腺移植片、インター
ロイキン−２）の移動」を通じて獲得される受動免疫と対比することができる。前掲書。
本発明の「対象」は、デングウイルスに感染しやすい任意の動物を含む。通常、このよ
うな対象は、哺乳動物対象（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、霊長類など
の実験動物）、家畜もしくは商用動物（例えば、雌ウシ、ウマ、ヤギ、ロバ、ヒツジなど
）、または飼い慣らされた動物（例えば、ネコ、イヌ、フェレット、など）である。特定
の実施形態において、対象は、霊長類の対象、ヒト以外の霊長類対象（例えば、チンパン
ジー、ヒヒ、サル、ゴリラなど）、またはヒトである。本発明の対象は、デングウイルス
感染のリスクがあることが公知であるか、またはそう考えられている対象であってよい。
あるいは、本発明による対象は、デングウイルスに感染していることが前もって公知でも
疑われてもいなく、デングウイルス感染の治療の必要もない対象を含んでもよい。
対象は、任意の目的のために、例えば、その対象において防御免疫応答を誘発するか、
または抗体産生を誘発するために処置されてよく、それらの抗体は、採取し、例えば、研
究目的もしくは診断目的などの他の目的のために、または他の対象に投与してそこで受動
免疫を生じさせるために、使用することができる。
対象は、新生児、少年少女、十分成長した対象、および老齢の対象を含めて、任意の年
齢の男性および／または女性を含む。ヒト対象に関して、代表的な実施形態において、対
象は、乳児（例えば、約１２ヶ月未満、１０ヶ月未満、９ヶ月未満、８ヶ月未満、７ヶ月
未満、もしくは６ヶ月未満もしくはそれより若い）、幼児（例えば、少なくとも約１２ヶ
月、１８ヶ月、もしくは２４ヶ月、および／または約３６ヶ月未満、３０ヶ月未満、もし
くは２４ヶ月未満）、または小児（例えば、少なくとも約１歳、２歳、３歳、４歳、もし
くは５歳、および／または約１４歳未満、１２歳未満、１０歳未満、８歳未満、７歳未満
、６歳未満、５歳未満、もしくは４歳未満）であってよい。本発明の実施形態において、
対象は、約０〜３、４、５、６、９、１２、１５、１８、２４、３０、３６、４８、もし
くは６０ヶ月齢、約３〜６、９、１２、１５、１８、２４、３０、３６、４８、もしくは
６０ヶ月齢、約６〜９、１２、１５、１８、２４、３０、３６、４８、もしくは６０ヶ月
齢、約９〜１２、１５、１８、２４、３０、３６、４８、もしくは６０ヶ月齢、約１２〜
１８、２４、３６、４８、もしくは６０ヶ月齢、約１８〜２４、３０、３６、４８、もし
くは６０ヶ月齢、または約２４〜３０、３６、４８、もしくは６０ヶ月齢であるヒト対象
である。
本発明の実施形態において、対象は、デングウイルスに対する移行抗体を有する。
本発明の方法を「必要とする対象」は、デングウイルスに感染していることが公知であ
るか、もしくは疑われているか、またはデングウイルスに感染するリスクがある、対象で
あり得る。
また、本発明のデングウイルスエピトープ、ポリペプチド、キメラフラビウイルスＶＬ
Ｐ、またはキメラフラビウイルス粒子、核酸、ベクター、細胞、または組成物および薬学
的に許容される担体を含む薬学的製剤（例えば、免疫原性製剤）も提供され、公知の技術
に従って、薬学的担体中で投与用に製剤化され得る。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈ
ｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（最新版）を
参照されたい。本発明の実施形態に従って薬学的組成物を製造する際、典型的には、本発
明の組成物は、とりわけ、薬学的に許容される担体と混合される。「薬学的に許容される
担体」とは、薬学的組成物中の他の成分と共存でき、かつ対象にとって有害でも有毒でも
ない担体を意味する。担体は、固体もしくは液体、または両方であってよく、好ましくは
、単位用量の製剤、例えば、約０．０１重量％もしくは０．５重量％〜約９５重量％もし
くは９９重量％の組成物を含有し得る錠剤として、本発明の組成物と共に製剤化される。
薬学的組成物は、これらに限定されないが、１つまたは複数の補助成分を場合によっては
含む構成要素を混合することを含めて、周知の製薬技術のいずれかによって調製される。
特定の実施形態において、薬学的に許容される担体は無菌であり、担体を含む薬学的組成
物に関する規制ガイドラインに従って、ヒト対象に投与するのに適切とみなされると思わ
れる。
さらに、本発明による組成物の「薬学的に許容される」構成要素、例えば、塩、担体、
賦形剤、または希釈剤は、（ｉ）意図した目的に対して組成物を不適切にすることなく本
発明の組成物と混合され得るという点で、組成物の他の成分と共存でき、かつ（ｉｉ）過
度の有害副作用（毒性、刺激性、およびアレルギー応答など）を伴わずに、明細書におい
て提供される対象と共に使用するのに適している、構成要素である。副作用は、組成物に
よって提供される恩恵をそれらのリスクが上回る場合、「過度」である。薬学的に許容さ
れる構成要素の非限定的な例は、リン酸緩衝生理食塩水溶液、水、油／水エマルジョンの
ような乳濁液、マイクロエマルジョン、および様々な種類の湿潤剤などの標準的な薬学的
担体のいずれかを含む。
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、１つまたは１つより多くのアジュバ
ントをさらに含んでよい。本発明のアジュバントは、アミノ酸配列の形態、および／また
はアジュバントをコードする核酸の形態であってよい。核酸の形態である場合、アジュバ
ントは、ポリペプチドもしくは断片もしくはエピトープをコードする核酸の構成要素、お
よび／または本発明のポリペプチドもしくは断片もしくはエピトープをコードする核酸を
含む組成物の別個の構成要素であってよい。本発明によれば、アジュバントは、アジュバ
ントとして機能するペプチド、タンパク質断片、もしくは完全なタンパク質であるアミノ
酸配列であってもよく、かつ／またはアジュバントは、アジュバントとして機能するペプ
チド、タンパク質断片、もしくは完全なタンパク質をコードする核酸であってもよい。本
明細書において使用される場合、「アジュバント」とは、本発明の組成物と組み合わされ
て、対象における免疫応答を増強、改善、またはそうでなければ調節することができる、
任意の免疫調節物質であり得る物質を表す。
さらなる実施形態において、アジュバントは、免疫賦活性サイトカイン（ＧＭ／ＣＳＦ
、インターロイキン−２、インターロイキン−１２、インターフェロン−γ、インターロ
イキン−４、腫瘍壊死因子−α、インターロイキン−１、造血因子ｆｌｔ３Ｌ、ＣＤ４０
Ｌ、Ｂ７．１共刺激分子、およびＢ７．２共刺激分子を含むが、これらに限定されない）
、リン酸緩衝生理食塩水に溶かした５％（重量／体積）スクアレン（ＤＡＳＦ、Ｐａｒｓ
ｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）、２．５％プルロニックＬ１２１ポリマー（Ａｌｄｒｉｃｈ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ）、および０．２％ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ
８０、Ｓｉｇｍａ）から構成されるＳＹＮＴＥＸアジュバント製剤１（ＳＡＦ−１）で
あってよいが、これらに限定されない。また、適切なアジュバントは、水酸化アルミニウ
ムゲル（アルム）、リン酸アルミニウム、またはアルガンムリン（ａｌｇａｎｎｍｕｌｉ
ｎ）などのアルミニウム塩を含むが、カルシウム、鉄、もしくは亜鉛の塩であってもよく
、あるいはアシル化チロシン、またはアシル化糖、陽イオン性もしくは陰イオン性に誘導
体化された多糖類、またはポリホスファゼンの不溶性懸濁液であってよい。
他のアジュバントは、当技術分野において周知であり、ＭＦ５９、ＬＴ−Ｋ６３、ＬＴ
−Ｒ７２（Ｐａｌ ｅｔ ａｌ．，Ｖａｃｃｉｎｅ ２４（６）：７６６−７５（２００
５））、ＱＳ−２１、フロイントのアジュバント（完全および不完全）、水酸化アルミニ
ウム、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−トレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ
）、Ｎ−アセチル−ノルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン（ＣＧＰ １１６
３７、ｎｏｒ−ＭＤＰと呼ばれる）、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグ
ルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−
ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミン（ＣＧＰ１９８３５Ａ、ＭＴＰ−ＰＥと呼
ばれる）、ならびに２％スクアレン／Ｔｗｅｅｎ８０エマルジョン中に、細菌から抽出さ
れた３種類の構成要素、すなわちモノホスホリルリピドＡ、トレハロースジミコラート（
ｔｒｅａｌｏｓｅ ｄｉｍｙｃｏｌａｔｅ）、および細胞壁骨格（ＭＰＬ＋ＴＤＭ＋ＣＷ
Ｓ）を含有するＲＩＢＩを含むが、これらに限定されない。
さらなるアジュバントは、例えば、モノホスホリルリピドＡ、好ましくは３−Ｏ−脱ア
シル化モノホスホリルリピドＡ（３Ｄ−ＭＰＬ）とアルミニウム塩の組合せを含み得る。
強化されたアジュバントの系では、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／００１５３において開示さ
れているようなモノホスホリルリピドＡとサポニン誘導体の組合せ、具体的にはＱＳ２１
と３Ｄ−ＭＰＬの組合せ、またはＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／３３７３９において開示され
ているような、ＱＳ２１がコレステロールを用いて抑制されている、反応原性の低い組成
物を使用する。水中油型エマルジョン中にＱＳ２１、３Ｄ−ＭＰＬおよびトコフェロール
を含む特に強力なアジュバント製剤が、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９５／１７２１０において説
明されている。さらに、本発明の核酸組成物は、抗原をコードするヌクレオチド配列およ
びＣｐＧ配列などアジュバント機能を提供するヌクレオチド配列を含むことによって、ア
ジュバントを含むこともできる。このようなＣｐＧ配列またはモチーフは、当技術分野に
おいて周知である。
例えば免疫賦活性サイトカインなど、本発明と共に使用するためのアジュバントは、対
象に本発明の組成物を投与する前、投与と同時、ならびに／または投与する前および／も
しくは後の２〜３時間、数時間、および／もしくは１日、２日、３日、４日、５日、６日
、７日、８日、９日、および／もしくは１０日以内に、投与されてよい。
さらに、免疫賦活性サイトカインなどのアジュバントの任意の組合せは、本発明の免疫
原性組成物の投与の前、後、および／または同時に、対象に併用投与されてもよい。例え
ば、免疫賦活性サイトカインの組合せは、ＧＭ／ＣＳＦ、インターロイキン−２、インタ
ーロイキン−１２、インターフェロン−γ、インターロイキン−４、腫瘍壊死因子−α、
インターロイキン−１、造血因子ｆｌｔ３Ｌ、ＣＤ４０Ｌ、Ｂ７．１共刺激分子、および
Ｂ７．２共刺激分子などの２種以上の免疫賦活性サイトカインからなってよい。アジュバ
ントまたはアジュバントの組合せの有効性は、本明細書において説明し、また当技術分野
において公知であるように、標準的手順を用いて、アジュバントまたはアジュバントの組
合せがある場合およびない場合の、対象への本発明の組成物の投与に応答して生じる免疫
応答を測定することによって、判定することができる。
本発明の実施形態において、アジュバントは、例えば米国特許第７，８６２，８２９号
において記載されているようなアルファウイルスアジュバントを含む。
ブースト投与が、数日間、数週間、数ヶ月間、または数年間の時間経過の間、さらに投
与されてもよい。慢性感染の場合、最初の高用量とそれに続くブースト用量が、有利であ
る場合がある。
本発明の薬学的製剤は、他の医薬物質、薬学的物質、安定化剤、緩衝剤、担体、希釈剤
、塩、浸透圧調整剤、および湿潤剤など、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩
化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノ
ールアミンオレエートなどを場合によっては含んでよい。
注射の場合、典型的には担体は液体である。他の投与方法の場合、担体は、固体または
液体のいずれかでよい。吸入投与の場合、担体は、呼吸に適するものであり、典型的には
、固体粒子形態または液体粒子形態で存在する。
本発明の組成物は、公知の技術に従って、薬学的担体中で投与用に製剤化され得る。例
えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ
Ｐｈａｒｍａｃｙ（９ｔｈ Ｅｄ．１９９５）を参照されたい。本発明による薬学的組
成物を製造する際、典型的には、ＶＬＰは、とりわけ、許容される担体と混合される。担
体は、固体もしくは液体、または両方であってよく、単位用量の製剤、例えば錠剤として
、化合物と共に場合によっては製剤化される。様々な薬学的に許容される水性担体、例え
ば、水、緩衝水、０．９％生理食塩水、０．３％グリシン、ヒアルロン酸、パイロジェン
フリーの水、パイロジェンフリーのリン酸緩衝生理食塩水溶液、静菌水、またはＣｒｅｍ
ｏｐｈｏｒ ＥＬ（登録商標）（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）などが使
用され得る。これらの組成物は、従来の技術によって滅菌することができる。本発明の製
剤は、周知の製薬技術のいずれかによって調製することができる。
薬学的製剤は、そのままの状態で使用するために包装されても凍結乾燥されてもよく、
一般に、凍結乾燥された製剤は、投与前に滅菌済みの水溶液と混合される。さらに、これ
らの組成物は、単位投与用容器または多回投与用容器中に、例えば、密閉式のアンプルお
よびバイアル中に入れられてもよい。
薬学的製剤は、従来の製薬技術に従う当技術分野において公知である任意の方法によっ
て、投与用に製剤化することができる。例えば、組成物は、鼻腔内に、吸入（例えば、経
口吸入）によって、経口的に、口腔内に（例えば、舌下に）、直腸に、腟内に、局所的に
、くも膜下腔内に、眼内に、経皮的に、非経口投与によって（例えば、筋肉内［例えば、
骨格筋］、静脈内、皮下、皮内、胸膜腔内、脳内、および動脈内、くも膜下腔内）、また
は局所的に（例えば、気道表面を含めて、皮膚表面および粘膜表面の両方に）投与するた
めに、製剤化することができる。
鼻腔内投与または吸入投与のために、薬学的製剤は、エアロゾル剤（この用語は、液状
エアロゾル剤と乾燥粉末エアロゾル剤の両方を含む）として製剤化することができる。例
えば、薬学的製剤は、界面活性剤および噴射剤と共に微粉砕された形態で提供され得る。
組成物の典型的な比率は、０．０１〜２０重量％、好ましくは１〜１０％である。通常、
界面活性剤は、非毒性で、噴射剤に溶解できる。このような作用物質の代表例は、カプロ
ン酸、オクタン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸
、オレステリン酸（ｏｌｅｓｔｅｒｉｃ）、およびオレイン酸など６〜２２個の炭素原子
を含む脂肪酸と脂肪族多価アルコールまたはその環状無水物とのエステルまたは部分エス
テルである。混合グリセリドまたは天然グリセリドなどの混合エステルが使用されてもよ
い。界面活性剤は、組成物の０．１〜２０重量％、好ましくは０．２５〜５％を構成して
よい。普通は、組成物の残りの部分は、噴射剤である。また、所望の場合は、鼻腔内送達
用のレシチンのように、担体も含まれてよい。液状粒子のエアロゾル剤は、任意の適切な
手段によって、例えば、当業者に公知であるように、圧力によって動かされるエアロゾル
剤噴霧器または超音波噴霧器を用いて作製することができる。例えば、米国特許第４，５
０１，７２９号を参照されたい。同様に、固体粒子のエアロゾル剤も、薬学分野において
公知の技術によって、任意の固体微粒子医薬エアロゾル剤発生器を用いて作製することが
できる。また、鼻腔内投与は、鼻腔面への液滴投与によってもよい。
注射剤は、液状の液剤もしくは懸濁剤、注射前に液体中に溶解もしくは懸濁するのに適
した固形形態として、またはエマルジョンとして、従来の形態で調製することができる。
あるいは、例えば、デポー製剤または徐放性製剤において、全身的よりはむしろ局所的に
、薬学的製剤を投与することもできる。
用時溶解の注射用の液剤および懸濁剤は、既に説明した種類の無菌の散剤、顆粒剤、お
よび錠剤から調製することができる。例えば、密閉容器に入れられた、単位剤形の注射用
の安定な無菌の本発明の製剤が提供され得る。製剤は、凍結乾燥物の形態で提供されてよ
く、適切な薬学的に許容される担体を用いてこの凍結乾燥物を元に戻して、対象に注射す
るのに適した液体組成物を形成させることができる。単位剤形は、約１μｇ〜約１０ｇの
製剤であり得る。製剤が実質的に非水溶性である場合、薬学的に許容される十分な量の乳
化剤を、水性担体中で製剤を乳化するのに十分な量で含めてよい。１つのこのような有用
な乳化剤は、ホスファチジルコリンである。
経口投与に適した薬学的製剤は、カプセル剤、カシェ剤、ロゼンジ、もしくは錠剤など
個別の単位で、散剤もしくは顆粒剤として、水性液体もしくは非水性液体に溶かした液剤
もしくは懸濁剤として、または水中油型エマルジョンもしくは油中水型エマルジョンとし
て、提供されてよい。経口送達は、本発明の化合物と動物の腸内の消化酵素による分解に
耐えることができる担体との複合体を形成させることによって実施することができる。こ
のような担体の例は、当技術分野において公知であるように、プラスチックカプセル剤ま
たは錠剤を含む。このような製剤は、タンパク質と（上記の１つまたは複数の補助成分を
含み得る）適切な担体とを結合させるステップを含む、任意の適切な製薬方法によって調
製される。一般に、薬学的製剤は、化合物を液状担体もしくは微粉砕した固形担体または
両方と均一かつ密接に混合し、次いで、必要な場合には、得られた混合物を成形すること
によって、調製される。例えば、錠剤は、場合によっては１つまたは複数の補助成分と共
に粉末または顆粒を圧縮または成形することによって、調製することができる。圧縮錠剤
は、場合によっては、結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、および／または界面活性剤／分
散剤と混合された、粉末または顆粒など易流動性の形態の調合物を、適切な機械中で圧縮
することによって、調製される。成形錠剤は、不活性な液状結合剤で湿らせた粉末状タン
パク質を適切な機械中で成形することによって、製造される。
口腔内（舌下）投与に適した薬学的製剤は、風味付きの基剤、通常、スクロースおよび
アラビアゴムまたはトラガカントゴム中の化合物を含むロゼンジ、ならびにゼラチンおよ
びグリセリンまたはスクロースおよびアラビアゴムなどの不活性な基剤中のトローチを含
む。
非経口投与に適した薬学的製剤は、無菌の水性注射液剤および非水性注射液剤を含んで
よく、これらの製剤は、好ましくは、意図される受領者の血液と等張性である。これらの
製剤は、組成物を意図される受領者の血液と等張性にする、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、
および溶質を含有してよい。水性および非水性の無菌の懸濁剤、液剤、および乳剤は、懸
濁化剤および増粘剤を含んでよい。非水性溶剤の例は、プロピレングリコール、ポリエチ
レングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなど注射可能な有機
エステルである。水性担体は、生理食塩水および緩衝媒体を含めて、水、アルコール性／
水性溶液、乳濁液、または懸濁液を含む。非経口ビヒクルは、塩化ナトリウム溶液、リン
ゲルデキストロース、デキストロース、および塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル、または
不揮発性油を含む。静脈内用ビヒクルは、流動体および栄養素補充液、ならびに電解質補
充液（例えば、リンゲルデキストロースをベースとするもの）などを含む。また、例えば
、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなどの保存剤および他の添加剤も存
在してよい。
直腸投与に適した薬学的製剤は、場合によっては、単位用量の坐剤として提供される。
これらは、活性物質を１つまたは複数の従来の固形担体、例えばココアバターと混合し、
次いで、得られた混合物を成形することによって、調製することができる。
皮膚への局所適用に適した薬学的製剤は、好ましくは、軟膏剤、クリーム剤、ローショ
ン剤、パスタ剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤、またはオイル剤の形態をとる。使
用され得る担体は、これらに限定されないが、石油ゼリー、ラノリン、ポリエチレングリ
コール、アルコール、経皮浸透促進剤（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ ｅｎｈａｎｃｅｒ）、
およびそれらの２つ以上の組合せを含む。いくつかの実施形態において、例えば、局所送
達は、本発明の薬学的製剤を、皮膚中に通過することができる親油性試薬（例えば、ＤＭ
ＳＯ）と混合することによって実施することができる。
経皮投与に適した薬学的製剤は、長時間にわたって対象の表皮にじかに接触した状態の
ままであるように適合された個別の貼付剤の形態で存在してよい。また、経皮投与に適し
た製剤は、イオン導入法（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
３：３１８（１９８６）を参照されたい）によっても送達することができ、典型的には、
化合物の緩衝水溶液の形態をとる。適切な製剤は、クエン酸緩衝液またはビス／トリス緩
衝液（ｐＨ６）もしくはエタノール／水を含んでよく、また、０．１〜０．２Ｍの活性成
分を含有してよい。
本発明の実施形態において、本発明のウイルス粒子の投与量は、約１０４〜約１０７プ
ラーク形成単位（ＰＦＵ）の範囲であってよい。本発明の実施形態において、本発明のＶ
ＬＰの投与量は、約５００マイクログラム〜約５ミリグラムの範囲であってよい。本発明
の実施形態において、本発明のタンパク質の投与量は、約１００〜約１０４マイクログラ
ム＋／−アジュバントの範囲であってよい。
さらに、組成物は、リポソーム製剤として製剤化されてもよい。使用される脂質層は、
任意の従来の組成物からなってよく、コレステロールを含有してもよく、またはコレステ
ロールを含まなくてもよい。作製されるリポソームは、例えば、標準的な超音波処理技術
およびホモジナイゼーション技術を用いて、大きさを小さくすることができる。
リポソーム製剤を凍結乾燥して、水などの薬学的に許容される担体を用いて元に戻して
リポソーム懸濁液を再生することができる凍結乾燥物を作製することができる。
本発明の免疫原性製剤は、場合によっては無菌であってよく、またさらに、病原体を通
さない密閉式容器に入れて提供されてもよい。
合成生物学は、ウイルスゲノムのゲノム構造、発現、および編成に対する比類のない遺
伝的制御を提供する。デングウイルス（ＤＥＮＶ）複合体は、抗原性は類似しているが、
ヒト集団において複雑なパターンの交差反応性の中和抗体応答および促進抗体応答を誘導
する、ＤＥＮＶ血清型１〜４と呼ばれる４種の近縁ウイルスからなる。ＤＥＮＶ血清型間
の抗原性関係を研究するために、本発明者らは、安定なＤＥＮＶ１〜４分子クローンおよ
び継代回数の少ない臨床分離株に基づく組換えウイルスのパネルの構築および特徴付けに
ついて説明する。組換えウイルスは、野生型ウイルスのように複製し、適切なマーカー変
異をコードした。ＤＥＮＶ３における自然変異の役割を評価するために、遺伝学的および
地理学的に異なる４種のＤＥＮＶ−３遺伝子型に基づくＥ遺伝子により親エンベロープ（
Ｅ）糖タンパク質遺伝子を置換することによって、合成によって設計した４つの同質な遺
伝子構築物を作製した。組換えウイルスは、昆虫宿主および哺乳動物宿主における増殖に
関して評価したところ、生存能力があった。また、モノクローナル中和試験およびポリク
ローナル中和試験により、ＤＥＮ３中和の自然微小変異が交差中和の感受性のパターンに
影響することが実証される。所定のエピトープをマッピングするための組換えＤＮＡ技術
の使用を評価するために、本発明者らは、エスケープ変異およびエピトープマッピングを
用いて、いくつかのエピトープの座標をマッピングした。次いで、本発明者らは、株間で
これらのエピトープを交換した。組換えウイルスは生存能力があった。また、モノクロー
ナル血清およびポリクローナル血清を用いた機能獲得および機能喪失のアッセイにより、
ワクチン設計において重要な考慮すべき事柄を示す抗原性パターンが明らかになった。
抗デングウイルス（ＤＥＮＶ）ヒトモノクローナル抗体（ｍＡｂ）５Ｊ７は、ＤＥＮＶ
−３エンベロープ（Ｅ）糖タンパク質上のエピトープに結合することによって、ＤＥＮＶ
血清型３（ＤＥＮＶ−３）を強力に中和する。このエピトープは、ＥドメインＩ−ＩＩ（
ＥＤＩ−ＩＩ）ヒンジとして公知であるＥ領域にまたがっている。ＤＥＮＶ感染クローン
プラットフォームを用いて、ＤＥＮＶ−３ ５Ｊ７エピトープをＤＥＮＶ血清型１（ＤＥ
ＮＶ−１）Ｅ糖タンパク質に移植した。この移植により、組換えＤＥＮＶ−１／３ウイル
スは、ｍＡｂ−５Ｊ７による中和に対して感受性になる。意義あることだが、移植は、天
然のＤＥＮＶ−１抗原性構造を破壊せず、組換えウイルスは、ＤＥＮＶ−１ヒトポリクロ
ーナル血清とＤＥＮＶ−３ヒトポリクローナル血清の両方に対して感受性である。この感
受性から、ＤＥＮＶ−１／３キメラＥ糖タンパク質が、２種のウイルス血清型、すなわち
ＤＥＮＶ−１およびＤＥＮＶ−３に対する中和抗体を誘導できる二価ワクチンとして機能
し得ることが示される。
前述の内容は、本発明を例示するものであり、それを限定するものとして解釈されるべ
きではない。本発明は、以下の特許請求の範囲、およびその中に含まれ得る特許請求の範
囲の等価物によって、定義される。
本明細書に引用される刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献はすべて、参考文
献が提示される文章および／または段落に関連する教示のために、その全体が参照により
本明細書の一部をなすものとする。
＜配列＞
ＵＮＣ ３００１（ＤＥＮＶ−３）アミノ酸配列
ＷｅｓｔＰａｃ７４（ＤＥＮＶ−１）アミノ酸配列
ＷｅｓｔＰａｃ７４ヒンジ（ＤＥＮＶ１／３）アミノ酸配列
３００１−１Ｆ４Ｅ（ＤＥＮＶ３／１）アミノ酸配列
ｉｃデング（Ｄｅｎｇｕｅ）ＩＩＩ ＵＮＣ ３００１
ｉｃデングＩ ＷｅｓｔＰａｃ’７４

Claims (18)

  1. デングウイルスＥ糖タンパク質骨格を含むキメラデングウイルスＥ糖タンパク質であっ
    て、前記デングウイルスＥ糖タンパク質骨格は、前記デングウイルスＥ糖タンパク質骨格
    のデングウイルス血清型とは異なるデングウイルス血清型と反応する抗体によって認識さ
    れるエピトープを導入するアミノ酸置換を含む、キメラデングウイルスＥ糖タンパク質。
  2. 前記デングウイルスＥ糖タンパク質骨格がデングウイルス血清型１に由来する、請求項
    １に記載のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質。
  3. 前記デングウイルスＥ糖タンパク質骨格がデングウイルス血清型３に由来する、請求項
    １に記載のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質。
  4. 前記抗体がデングウイルス血清型３と反応する、請求項１または２に記載のキメラデン
    グウイルスＥ糖タンパク質。
  5. 前記抗体がデングウイルス血清型１と反応する、請求項１または３に記載のキメラデン
    グウイルスＥ糖タンパク質。
  6. 前記抗体がモノクローナル抗体５Ｊ７である、請求項４に記載のキメラデングウイルス
    Ｅ糖タンパク質。
  7. 前記抗体がモノクローナル抗体１Ｆ４である、請求項５に記載のキメラデングウイルス
    Ｅ糖タンパク質。
  8. アミノ酸配列：
    を含む、請求項１に記載のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質。
  9. アミノ酸配列：
    を含む、請求項１に記載のキメラデングウイルスＥ糖タンパク質。
  10. 請求項１から９のいずれか１項に記載のＥ糖タンパク質を含む、フラビウイルス粒子ま
    たはウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
  11. 請求項１〜９のいずれか１項に記載のＥ糖タンパク質をコードする、単離核酸分子。
  12. 請求項１０に記載のフラビウイルス粒子またはＶＬＰをコードする、単離核酸分子。
  13. 薬学的に許容される担体中に請求項１〜９のいずれか１項に記載のＥ糖タンパク質を含
    む、組成物。
  14. 薬学的に許容される担体中に請求項１１または１２に記載の核酸分子を含む、組成物。
  15. 対象においてデングウイルスに対する免疫応答を生じさせる方法であって、有効量の請
    求項１〜９のいずれか１項に記載のＥ糖タンパク質、請求項１０に記載のフラビウイルス
    粒子、請求項１１もしくは１２に記載の核酸分子、および／または請求項１３もしくは１
    ４に記載の組成物、ならびにそれらの任意の組合せを前記対象に投与するステップを含む
    、方法。
  16. 対象においてデングウイルス感染を治療する方法であって、有効量の請求項１〜９のい
    ずれか１項に記載のＥ糖タンパク質、請求項１０に記載のフラビウイルス粒子、請求項１
    １もしくは１２に記載の核酸分子、および／または請求項１３もしくは１４に記載の組成
    物、ならびにそれらの任意の組合せを前記対象に投与するステップを含む、方法。
  17. 対象においてデングウイルス感染を予防する方法であって、有効量の請求項１〜９のい
    ずれか１項に記載のＥ糖タンパク質、請求項１０に記載のフラビウイルス粒子、請求項１
    １もしくは１２に記載の核酸分子、および／または請求項１３もしくは１４に記載の組成
    物、ならびにそれらの任意の組合せを前記対象に投与するステップを含む、方法。
  18. デングウイルス感染の影響から対象を保護する方法であって、有効量の請求項１〜９の
    いずれか１項に記載のＥ糖タンパク質、請求項１０に記載のフラビウイルス粒子、請求項
    １１もしくは１２に記載の核酸分子、および／または請求項１３もしくは１４に記載の組
    成物、ならびにそれらの任意の組合せを前記対象に投与するステップを含む、方法。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10398768B2 (en) 2014-11-02 2019-09-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for recombinant dengue viruses for vaccine and diagnostic development
TWI769185B (zh) 2016-10-27 2022-07-01 海樂源有限公司 登革熱類病毒顆粒、抗登革熱病毒抗體、及含其之組合物
US11241491B2 (en) 2017-05-23 2022-02-08 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for dengue virus serotype 4 epitopes
WO2018231974A1 (en) * 2017-06-14 2018-12-20 Thomas Jefferson University Composition and administration of chimeric glycoprotein lyssavirus vaccines for coverage against rabies
WO2023056335A1 (en) * 2021-09-30 2023-04-06 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for recombinant dengue viruses for vaccine and diagnostic development

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4501729A (en) 1982-12-13 1985-02-26 Research Corporation Aerosolized amiloride treatment of retained pulmonary secretions
CA1247080A (en) 1983-03-08 1988-12-20 Commonwealth Serum Laboratories Commission Antigenically active amino acid sequences
JP3755890B2 (ja) 1992-06-25 2006-03-15 スミスクライン・ビーチャム・バイオロジカルス（ソシエテ・アノニム） アジュバント含有ワクチン組成物
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
CU22683A1 (es) * 1997-01-15 2001-07-20 Inst De Medicina Tropical Pedro Kouri Epítopes de la proteína pre-m/m del virus del dengue, péptidos sintéticos, proteínas quiméricas y sus usos
US6432411B1 (en) * 1999-07-13 2002-08-13 Hawaii Biotechnology Group Recombinant envelope vaccine against flavivirus infection
AU2005327198B2 (en) 2004-07-09 2011-03-31 University Of North Carolina At Chapel Hill Viral adjuvants
CA2576798C (en) 2004-07-27 2014-09-09 Gwong-Jen J. Chang Localization and characterization of flavivirus envelope glycoprotein cross-reactive epitopes and methods for their use
AU2005295438B2 (en) * 2004-10-20 2012-07-05 Sanofi Pasteur Biologics, Llc Vaccines against Japanese encephalitis virus and West Nile virus
CU23586A1 (es) * 2005-11-22 2010-10-30 Ct Ingenieria Genetica Biotech Métodos y proteínas para el tratamiento profiláctico y/o terapéutico de los cuatro serotipos del virus de dengue y otros flavivirus
BR112012024224A2 (pt) * 2010-03-24 2016-11-29 Arbovax Inc mutações da faixa de hospedeiro de flavivírus e seu uso.
CN102906266A (zh) * 2010-05-21 2013-01-30 高等教育联邦系统-匹兹堡大学 登革病毒通用序列及其使用方法
WO2012027473A2 (en) 2010-08-24 2012-03-01 The University Of North Carolina At Chapel Hill Immunogenic compositions comprising alphavirus vectored dengue virus e protein antigens
EA201390874A1 (ru) * 2010-12-14 2013-12-30 Нэшнл Юниверсити Оф Сингапур Моноклональное антитело человека со специфичностью к белку e вируса денге серотипа 1 и его применение
EP3269728B1 (en) 2011-10-20 2020-12-16 The Government of The United States of America as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Dengue virus e-glycoprotein polypeptides containing mutations that eliminate immunodominant cross-reactive epitopes
WO2013151764A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for dengue virus epitopes

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY, vol. 78, JPN6018015670, 1997, pages 2723 - 2733, ISSN: 0004454303 *

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