JP2019004701A - 乳または乳製品 - Google Patents
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Abstract
Description
硫酸抱合体からp−クレゾールを生成する酵素としてアリールスルファターゼ(アリール硫酸スルホヒドラーゼという場合もある)がある。この酵素は酵母やヒトを含むほとんどの生物に存在する。
このラクターゼは微生物も産生することが知られており、そのいくつかはラクターゼ製剤として製品化されている。ラクターゼ製剤に含まれるラクターゼは微生物の培養物を精製することによって、その純度を高めることができる。しかしながら、製造コストの観点から夾雑酵素を全て除去することは難しい。市販されているいくつかのラクターゼ製剤には、アリールスルファターゼが含まれている。
(2)p−クレゾールの総量と、環状糖類の総量との質量比が、1:2〜1:10000000の範囲に含まれることを特徴とする前記(1)に記載の乳。
(3)p−クレゾールの総量が0.1ppb以上1000ppm以下であることを特徴とする前記(1)または(2)に記載の乳。
(4)環状糖類の総量が、1ppb以上50000ppm以下であることを特徴とする前記(1)または(2)に記載の乳。
(5)ラクターゼを含むことを特徴とする前記(1)〜(4)のいずれかに記載の乳。
(6)中性ラクターゼ活性1単位当たり0.000002単位以上のアリールスルファターゼ活性を有する前記(1)〜(5)のいずれかに記載の乳。
(7)前記(1)〜(6)のいずれかに記載の乳を使用した乳製品。
(8)環状糖類と、ラクターゼと、を含み、ラクターゼ活性1NLU当たり0.000002単位以上のアリールスルファターゼ活性と、を有するラクターゼ製剤。
p−クレゾールの構造の全部又は一部を環状糖類の環状構造が包み込むことによって、環状糖類に包接されたp−クレゾールを生成する。この環状糖類に包接されたp−クレゾール(以下、「包接p−クレゾール」という場合がある)は、ファンデルワールス力または水素結合の少なくとも一方によってp−クレゾールと環状糖類の間が結びついているため、p−クレゾール単独の状態に比べ、より安定な状態にある。したがって、p−クレゾール単独に比べ、包接p−クレゾールは揮発しにくいことから、オフフレーバーを感じにくくなる。
クレゾールは、芳香族化合物に分類され、さらにフェノール類に分類される有機化合物である。p−クレゾールは、フェノールのパラ位の水素がメチル基に置換されたものである。水に溶解し、揮発性がある。
p−クレゾールの総量とは、乳中のp−クレゾール単独のものと、包接p−クレゾールを構成するp−クレゾールの和を意味する。
乳中のp−クレゾールは低いほど好ましい。乳中のp−クレゾールが5ppb程度で認識するヒトが存在し始め、30ppbで多くの人が検知することから、30ppb以下であることが好ましく、5ppb以下であることがさらに好ましい。
環状糖類は、環状構造を有する糖類であればよい。当該環状構造の内径または深さは、p−クレゾールの構造全体またはp−クレゾールの構造の一部が含まれることが好ましい。当該環状構造の内径または深さがp−クレゾールに比べて大きすぎても小さすぎても、環状構造の内部にp−クレゾールが包接されにくくなり、好ましくない。環状糖類の環状構造の内径または深さは0.5nm〜1.0nmの範囲内にあることが好ましく、0.7〜0.8nmの範囲内にあることがさらに好ましい。
環状糖類のうち、α−シクロデキストリン(内径:0.5〜0.6nm、深さ:0.7〜0.8nm、ブドウ糖分子数:6)、β−シクロデキストリン(内径:0.7〜0.8nm、深さ:0.7〜0.8nm、ブドウ糖分子数:7)、γ−シクロデキストリン(内径:0.9〜1.0nm、深さ:0.7〜0.8nm、ブドウ糖分子数:8)を使用することが好ましい。β−シクロデキストリンの内径及び深さは、フェノール基1個が包接されるサイズであるので、p−クレゾールを構成するフェノール基が包接されやすく好ましい。α−シクロデキストリンの内径及び深さは直鎖上につながった分子が包接されるサイズであり、γ−シクロデキストリンの内径及び深さは、フェノール基2個が包接されるサイズである。
環状糖類の総量が、1ppb以上50000ppm以下であることが好ましく、5ppb以上40000ppm以下であることが好ましく、10ppb以上30000ppm以下であることがより好ましい。
環状糖類の総量とは、乳中の環状糖類単独のものと、包接p−クレゾールを構成する環状糖類の和を意味する。
本発明においては、殺菌前のもの(例えば、ウシ等から絞った直後のもの)を原料乳といい、殺菌後のもの(例えば、最終消費者がスーパー等で購入することができるもの)を乳という。
環状糖類に乳の殺菌処理に伴う加熱を施しても、当該環状糖類はほとんど熱分解しない。
本発明の乳及び乳製品はラクターゼを含むことが好ましい。ラクターゼは、乳糖をガラクトースとグルコースに分解する作用を有する。ラクターゼは、β−ガラクトシダーゼと呼ばれることもある。ラクターゼは細菌由来のものと酵母由来のものとカビ由来のものがある。ラクターゼとしては、中性に至適pHがある中性ラクターゼ、酸性に至適pHがある酸性ラクターゼを使用することができる。ラクターゼは、ラクターゼ活性を有する市販のラクターゼ製剤を使用すればよい。
ラクターゼは単独で使用しても良いし、2以上を組み合わせて使用しても良い。中性ラクターゼを単独又は2以上、酸性ラクターゼを単独又は2以上使用することも可能である。ラクターゼとしては中性ラクターゼまたは酸性ラクターゼを使用することが好ましく、中性ラクターゼがより好ましい。
下限値未満、もしくは上限値以上であると、ラクターゼが失活しやすくなり、乳糖の分解が不十分な状態になるおそれがある。
下限値未満では十分な乳糖分解が得られにくく、上限値超では乳糖分解効率はさほど変わらないため、コスト高になりやすい。
その測定方法は以下の(1)〜(10)のとおりである。
(1)アリールスルファターゼの存在が予測される検体を、0.5M塩化カリウムを含む100mMリン酸カリウム緩衝液(pH6.5)で適宜希釈し、サンプルとする。
(2)4−メチルウンベリフェロンスルフェイトカリウムを2mM濃度で含有する水溶液を調製する。
(3)サンプルと4−メチルウンベリフェロンスルフェイトカリウム水溶液とを、1:1(容量基準)で混合し、37℃にて3時間反応させる。
(4)反応液に、反応液と同量(容量基準)の0.1N水酸化ナトリウム水溶液を添加し、反応を停止させ、測定用サンプルとする。
(5)励起波長360nm、蛍光波長450nmにて、蛍光強度を測定する。
(6)4−メチルウンベリフェロンを、0.5M塩化カリウムを含む100mMリン酸カリウム緩衝液(pH6.5)に溶解させ、適切な濃度の溶液とし、(4)と同様に0.1N水酸化ナトリウム水溶液を添加し、(5)と同様の条件で蛍光強度を測定する。
(7)(6)より、検量線を作成する。
(8)(5)で測定された蛍光強度と(7)で作成された検量線から、測定用サンプルの4−メチルウンベリフェロン濃度を算出し、それを3で割り、反応時間が1時間であった場合の4−メチルウンベリフェロン濃度を求める。さらに、反応液の容量から、1時間の反応中に生じた4−メチルウンベリフェロン量を算出する。
(9)こうして算出された4−メチルウンベリフェロン量は、(1)で調製したサンプルに含有されていた検体量に基づくものであるので、検体1g当たりの4−メチルウンベリフェロン量に換算する。
(10)基質と酵素との反応時間1時間あたりの4−メチルウンベリフェロン生成量が1nmoleであった場合を1ユニット(U)とし、単位は、検体1g当たりのユニット量、即ち「ユニット(U)/g」で表す。
上記の「検体」はラクターゼ製剤等の酵素製剤の他、乳や乳製品を使用することも可能である。
上記の他、ラクターゼ製剤には、ラクターゼその他のタンパク質の凝集を防ぐ凝集阻害剤を添加しても良い。凝集阻害剤は、(タイプ1)HLB12〜15の界面活性剤、(タイプ2)脂肪親和性界面活性剤、(タイプ3)ノニオン性脂肪親和性界面活性剤、(タイプ4)ノニオン性界面活性剤、(タイプ5)天然物系界面活性剤、である。
実施例1及び2においては、多数のサンプルを評価するためにガス検知管を使用した。ガス検知管はp−クレゾールの検出感度が低い欠点がある。この問題を補うために、乳に過剰量のp−クレゾールを添加して試験を行った。
50mLファルコンチューブへ50gの無脂肪牛乳(イオン株式会社製 商品名:トップバリュ ヘルシーアイ、pH6.69)を量りとり、各シクロデキストリンを終濃度が1%となるように添加しよく振り混ぜ溶解した(シクロデキストリンを添加しなかったものは表1中の「無添加」である)。シクロデキストリンを溶解したサンプルへ、終濃度が0.1%(1000ppm)となるようにp−クレゾールを添加した。添加後ファルコンチューブの蓋を閉め、室温にて3時間、40spmの条件で往復振とうした。容量約800mLのポリエチレン袋(アスクル株式会社製、商品名:8号ポリ規格袋、 製品コード885−324)へサンプルを全量入れ、袋内を空気で満たすように口を輪ゴムで縛った。サンプルを入れた袋を37℃に設定したウォーターバスで10分間インキュベートしたのち、その袋を20回振り混ぜた。ガステック検知管(型番61、クレゾール用、アズワン株式会社製)を用いて、2回吸引により気相中のp−クレゾール濃度を測定した。
得られた結果を表1に示した。表1の成分等の欄における「CD」はシクロデキストリンの略称である。
各シクロデキストリンを終濃度が1%、3%、5%となるように添加した以外は実施例1と同様にして、サンプルを作成した。
得られた結果を表2に示した。
実施例1及び2においては、過剰量のp−クレゾールを添加した系を評価系に用いた。実際の乳においてオフフレーバーの問題を生じるp−クレゾール量は、実施例1及び2の百万分の一〜三万分の一程度の量(5ppb〜30ppb)である。乳中のp−クレゾール量が5ppbであると、実施例1等で使用したガス検知管では検知することができないことから、ヒトによる官能試験を行った。
なお、ライテスIIは他のサンプルとボディ感を合わせる目的で添加しており、甘味およびp-クレゾール臭のマスキング効果がないことを確認した。
最初に、処理乳(オフフレーバー乳)を識別できるパネラーを選出した。選抜されたパネラーに対し、シクロデキストリンを添加したオフフレーバーマスキング乳のサンプル2点、シクロデキストリン無添加でライテスIIを添加したオフフレーバー乳(シクロデキストリンの代わりにライテスIIを添加した以外は、上述のシクロデキストリンを添加したサンプルと同じである)のオフフレーバー乳1点の中から、異なる試料(シクロデキストリン無添加試料が正答)を選択する方法で行った。正答率は100%(p<0.001)であり、選んだ試料が不快と感じた割合は75%であった。また、不快と感じたすべてのパネラーは、風味の悪さに関連するコメントをしていた。本結果より、β-シクロデキストリンはオフフレーバーを低減させる効果があると判断した。
Claims (8)
- p−クレゾールと、環状糖類と、環状糖類に包接されたp−クレゾールと、を含む乳。
- p−クレゾールの総量と、環状糖類の総量との質量比が、1:2〜1:10000000の範囲に含まれることを特徴とする請求項1に記載の乳。
- p−クレゾールの総量が0.1ppb以上1000ppm以下であることを特徴とする請求項1または2に記載の乳。
- 環状糖類の総量が、1ppb以上50000ppm以下であることを特徴とする請求項1または2に記載の乳。
- ラクターゼを含むことを特徴とする請求項1〜4いずれか一項に記載の乳。
- 中性ラクターゼ活性1単位当たり0.000002単位以上のアリールスルファターゼ活性を有する請求項1〜5いずれか一項に記載の乳。
- 請求項1〜6いずれか一項に記載の乳を使用した乳製品。
- 環状糖類と、ラクターゼと、を含み、ラクターゼ活性1NLU当たり0.000002単位以上のアリールスルファターゼ活性と、を有するラクターゼ製剤。
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