JP2018524391A - 血管形成および血管新生に付随する障害を処置するための方法 - Google Patents

Abstract

血管形成および血管新生に関連する疾患の処置のための方法および免疫コンジュゲート二量体組成物が本明細書に提示される。一態様では、本発明は、それを必要とする患者の眼における滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を処置するための方法に関する。方法は、患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を複数回の投薬セッションで投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。

Description

関連出願への相互参照
この出願は、２０１５年７月２２日に出願された米国仮出願第６２／１９５，７０９号（これは、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。

配列表に関する記述
本出願に付随する配列表は、紙コピーの代わりにテキスト形式で提供され、これによって参照により本明細書に組み込まれる。配列表を含むテキストファイルの名称は、ＩＣＴＨ＿００１＿０１ＷＯ．ｔｘｔである。テキストファイルは、２４ＫＢであり、２０１６年７月１８日に作成され、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出されている。

加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）とは、中心視覚の喪失がもたらされる、黄斑の慢性進行性変性病態を指す。Ｍａｃｕｌａ Ｖｉｓｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｙｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅによると、米国において１５，０００，０００名もの人々が何らかの形態のＡＭＤに罹患しており、ヨーロッパおよび他の国々でも同様の数である。新生血管ＡＭＤ（滲出型（ｅｘｕｄａｔｉｖｅ）または「滲出型（ｗｅｔ）」ＡＭＤとも称される）は、先進工業国において５０歳を超える高齢の患者の重症の視力喪失および失明の主な原因である。米国単独では、１，５００，０００名が滲出型ＡＭＤに罹患している。ＡＭＤ発生率および有病率は集団が高齢化するとともにさらに増加し、したがって、米国においておよび世界的に滲出型ＡＭＤの患者の数が有意に増加することが予想される。

組織因子（ＴＦ）は、血管内皮細胞上に存在するサイトカイン受容体である。ＴＦは、細胞内末端ドメイン、膜貫通ドメイン、および第ＶＩＩ因子（ＦＶＩＩ）および第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）に対する細胞外結合性ドメインを有する膜内在性糖タンパク質である。ＴＦは、血管形成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）のプロセスおよびサイトカイン放出の炎症カスケードに関係付けられており、これらのプロセスはどちらも、新生血管ＡＭＤおよびある特定のがんの病因におけるものである。

脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）は、眼の脈絡膜層において新しい血管が成長するプロセスであり、滲出型ＡＭＤに付随する。現在の滲出型ＡＭＤに対する臨床的ケアの標準は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を標的とする療法である。しかし、脈絡膜血管新生およびＡＭＤ病因の多面的側面に起因して、ＶＥＧＦを単独で標的とすることは、進行ＣＮＶ関連変性プロセスへの疾患の進行を停止させるには不十分である可能性が高い。

脈絡膜血管新生および加齢黄斑変性症に対する新しい治療戦略に関するまだ対処されていない医学的必要性が存在する。本発明は、この必要性および他の必要性に対処する。

一態様では、本発明は、それを必要とする患者の眼における滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を処置するための方法であって、患者に、それぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）断片結晶化可能（Ｆｃ）領域またはその一部とコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む単量体サブユニットを含む有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む医薬組成物を、複数回の投薬セッションを含む投薬レジメンで投与するステップを含む方法を提供する。一実施形態では、変異ヒトｆＶＩＩａタンパク質は、ヒトＩｇＧ１と、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介してコンジュゲートしている。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、ホモ二量体である。別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、ヘテロ二量体である。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号１、４、または５によってコードされる。

滲出型（ＡＭＤ）を処置するための方法の一実施形態では、各投薬セッションは、医薬組成物を眼内注射、例えば硝子体内注射することを含む。別の実施形態では、各投薬セッションは、医薬組成物を局所投与すること（例えば、点眼剤により）を含む。

一実施形態では、複数回の投薬セッションは、２回もしくはそれよりも多く、３回もしくはそれよりも多く、４回もしくはそれよりも多く、または５回もしくはそれよりも多くの投薬セッションを含む。さらなる実施形態では、各投薬セッション間の時間は、約１０日から約５０日まで、約１０日から約４０日まで、約１０日から約３０日までまたは約１０日から約２０日までである。さらなる実施形態では、複数回の投薬セッションは、医薬組成物を１４日毎に１回、２８日毎に１回、または３０日毎に１回、硝子体内注射することを含む。

一実施形態では、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を処置するための方法は、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む医薬組成物を投与するステップを含み、単量体サブユニットの一方または両方は、リシン−３４１のアラニンでの置換（例えば、配列番号２のタンパク質）またはセリン−３４４のアラニンでの置換（例えば、配列番号３のタンパク質）を有する変異ヒト第ＶＩＩａ因子を含む。

それを必要とする患者の眼における滲出型ＡＭＤを処置するための方法の一実施形態では、患者が、複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値の減少が複数回の投薬セッション前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１５文字未満であることによって測定される通り、実質的に視覚を維持する。さらなる実施形態では、ＢＣＶＡの１５文字未満の減少が、処置レジメンの終了後少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日または少なくとも１年にわたって持続する。別の実施形態では、患者が、複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値が複数回の投薬セッション前の患者のＢＣＶＡと比較して１５文字増加することによって測定される通り、視覚の改善を経験する。さらなる実施形態では、ＢＣＶＡの改善が、処置レジメンの終了後少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日または少なくとも１年にわたって持続する。

滲出型ＡＭＤを処置するための方法の一実施形態では、複数回の投薬セッションまたは投薬セッションのうちの１つまたは複数の後に、患者の眼において複数回の投薬セッションまたは投薬セッションのうちの１つまたは複数の前のＣＮＶ領域と比較してＣＮＶ領域が減少する（例えば、蛍光眼底撮影によって測定される）。さらなる実施形態では、ＣＮＶ領域が、複数回の投薬セッションまたは１つまたは複数の投薬セッションの前のＣＮＶ領域と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％または少なくとも約３０％、少なくとも約４０％または少なくとも約５０％減少する。

それを必要とする患者の眼における滲出型ＡＭＤを処置するための方法の一実施形態では、複数回の投薬セッションまたはそのサブセットの後に、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）によって測定して、患者の眼の網膜厚が、複数回の投薬セッションまたはそのサブセット（例えば、第１の投薬セッション、第１の投薬セッションおよび第２の投薬セッションなど）の前の眼の網膜厚と比較して減少する。一実施形態では、網膜厚が、少なくとも約５０μｍ、少なくとも約１００μｍ、少なくとも約１５０μｍ、少なくとも約１７５μｍ、少なくとも約２００μｍ、少なくとも約２２５μｍ、少なくとも約２５０μｍ、少なくとも約２７５μｍまたは少なくとも約３００μｍ減少する。一実施形態では、網膜厚が、複数回の投薬セッションまたはそのサブセットの前の眼の網膜厚と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％または少なくとも約３０％減少する。一実施形態では、網膜厚の減少は、中心領域網膜厚（ｃｅｎｔｒａｌ ｒｅｔｉｎａｌ ｓｕｂｆｉｅｌｄ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）（ＣＳＴ）の減少、中心点網膜厚（ｃｅｎｔｅｒ ｐｏｉｎｔ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）（ＣＰＴ）の減少、または中心窩網膜厚（ｃｅｎｔｒａｌ ｆｏｖｅａｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）（ＣＦＴ）の減少である。

一実施形態では、処置の間、または処置の完了時に、患者の眼の血管新生、例えば脈絡膜血管新生が逆転する。別の実施形態では、患者の眼の血管新生、例えば脈絡膜血管新生が、処置レジメンの間、または処置レジメンの終了後少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日にわたって阻害される。一実施形態では、処置を必要とする患者は、滲出型ＡＭＤまたは脈絡膜血管新生に対し、処置を以前に受けていない。しかし、別の実施形態では、患者は、脈絡膜血管新生（ｃｈｏｒｏｉｄａｌ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）または滲出型ＡＭＤに対し、処置を以前に受けている。さらなる実施形態では、患者は、以前の処置に対して非反応性であったまたは適正な反応性ではなかった。さらなる実施形態では、脈絡膜血管新生または滲出型ＡＭＤに対する以前の処置は、抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）治療、レーザー治療または外科手術を含む。

一実施形態では、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を処置するための方法は、血管新生阻害剤および／または血管形成阻害剤を患者にさらに投与するステップを含む。一実施形態では、血管新生阻害剤および／または血管形成阻害剤は、有効量の免疫コンジュゲート二量体と同じ組成物中に存在する。しかし、別の実施形態では、血管新生阻害剤および／または血管形成阻害剤は、有効量の免疫コンジュゲート二量体とは異なる組成物中に存在する。一実施形態では、血管新生阻害剤および／または血管形成阻害剤は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤、ＶＥＧＦ受容体阻害剤、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）阻害剤またはＰＤＧＦ受容体阻害剤である。

滲出型ＡＭＤを処置するための方法のさらに別の実施形態は、患者に、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）断片結晶化可能（Ｆｃ）領域またはその一部とコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む有効量の免疫コンジュゲートを含む医薬組成物を、複数の硝子体内投薬セッションを含む投薬レジメンで投与するステップ、および、各硝子体内注射の前後に、患者の眼における眼圧（ＩＯＰ）を、例えば眼圧測定によって測定するステップを含む。さらなる実施形態では、方法は、各硝子体内注射の約２０分後、約３０分後、約４０分後、約５０分後または約１時間後に、患者の眼におけるＩＯＰを測定するステップを含む。

別の態様では、本発明は、それを必要とする患者の眼における眼の血管新生を阻害する、予防するまたは逆転させるための方法であって、患者に、それぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）断片結晶化可能（Ｆｃ）領域またはその一部とコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む単量体サブユニットで構成される有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む医薬組成物を、複数回の投薬セッションを含む投薬レジメンで投与するステップを含む方法を提供する。この態様の一実施形態では、変異ヒト第ＶＩＩａ因子は、リシン−３４１のアラニンでの置換またはセリン−３４４のアラニンでの置換を含む（例えば、配列番号２の免疫コンジュゲート）。別の実施形態では、眼の血管新生は、増殖性糖尿病性網膜症、滲出型ＡＭＤ、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、または血管形成緑内障に付随する（またはそれに続発する）。さらなる実施形態では、眼の血管新生は、脈絡膜血管新生である。

方法の一実施形態では、医薬組成物の少なくとも１回の投薬セッション後、脈絡膜血管新生が、少なくとも１回の投薬セッション後少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日にわたって阻害される。

眼の血管新生を阻害する、予防するまたは逆転させるための方法では、組成物の複数回の投薬セッションを使用することができる。例えば、一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を含む医薬組成物を、それを必要とする患者に２回もしくはそれよりも多く、３回もしくはそれよりも多く、４回もしくはそれよりも多く、または５回もしくはそれよりも多く、投与する。さらなる実施形態では、各投薬セッション間の時間は、約１０日から約５０日まで、約１０日から約４０日まで、約１０日から約３０日までまたは約１０日から約２０日までである。さらなる実施形態では、複数回の投薬セッションは、医薬組成物を１４日毎に１回、２８日毎に１回、または３０日毎に１回、硝子体内注射することを含む。

一実施形態では、眼の血管新生を阻害する、予防するまたは逆転させるための方法は、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む医薬組成物を投与するステップを含み、ここで、変異ヒト第ＶＩＩａ因子は、リシン−３４１のアラニンでの置換（例えば、配列番号２のタンパク質）またはセリン−３４４のアラニンでの置換（例えば、配列番号３のタンパク質）を含む。一実施形態では、免疫コンジュゲートは、配列番号４または配列番号５を含むポリヌクレオチド配列によってコードされる。

眼の血管新生を阻害する、予防するまたは逆転させるための方法の一実施形態では、患者が、複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値の減少が処置（すなわち、少なくとも１回の投薬セッション）前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１５文字未満であることによって測定される通り、実質的に視覚を維持する。さらなる実施形態では、ＢＣＶＡの１５文字未満の減少が、処置レジメン（すなわち、少なくとも１回の投薬セッション）の終了後、少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日または少なくとも１年にわたって持続する。別の実施形態では、患者が、複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値が処置開始前の患者のＢＣＶＡと比較して１５文字増加することによって測定される通り、視覚の改善を経験する。さらなる実施形態では、ＢＣＶＡの改善が、処置レジメン（すなわち、少なくとも１回の投薬セッション）の終了後、少なくとも約１０日、少なくとも約２０日、少なくとも約３０日、少なくとも約４０日、少なくとも約５０日または少なくとも約１００日または少なくとも１年にわたって持続する。

眼の血管新生を阻害する、予防するまたは逆転させるための方法の別の実施形態では、医薬組成物の投与後に、蛍光眼底撮影によって測定して、患者の眼において処置開始前のＣＮＶ領域と比較してＣＮＶ領域が減少する。それを必要とする患者の眼における滲出型ＡＭＤを処置するための方法の一実施形態では、少なくとも１回の投薬セッションの後に、患者の眼の網膜厚が、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）によって測定して、医薬組成物を用いた処置開始前の網膜厚と比較して減少する。一実施形態では、網膜厚の減少は、中心領域網膜厚（ＣＳＴ）の減少、中心点網膜厚（ＣＰＴ）の減少、または中心窩網膜厚（ＣＦＴ）の減少である。

一部の実施形態では、免疫コンジュゲートを投与するステップは、静脈内投与または腫瘍内注射を含む。

一実施形態では、各投薬セッションは、約２００μｇから約４００μｇの間の免疫コンジュゲート二量体を投与することを含む。さらなる実施形態では、各投薬セッションは、約３００μｇの免疫コンジュゲート二量体を投与することを含む。

一実施形態では、それを必要とする患者の眼における滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の処置における使用であって、組成物を患者に複数回の投薬セッションで投与する使用のための、二量体の単量体サブユニットのそれぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む免疫コンジュゲート二量体を含む組成物。さらなる実施形態では、さらに、使用される組成物に関して、滲出型ＡＭＤを処置することは、処置を必要とする患者の眼における脈絡膜血管新生を予防する、阻害する、または逆転させることを含む。

一実施形態では、それを必要とする患者の眼における眼の血管新生の予防、阻害、または逆転における使用であって、組成物を患者に複数回の投薬セッションで投与する使用のための、二量体の単量体サブユニットのそれぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む免疫コンジュゲート二量体を含む組成物。

一実施形態では、それを必要とする患者における腫瘍血管新生の逆転における使用であって、組成物を患者に複数回の投薬セッションで投与する使用のための、二量体の単量体サブユニットのそれぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む免疫コンジュゲート二量体を含む組成物。

図１は、本発明の一般的な免疫コンジュゲート実施形態の非限定的な図である。

図２は、時間に応じた内在性第Ｘ因子活性化複合体（Ｆｘａｓｅ）加水分解（４０５ｎｍにおける吸光度の増大 − ｍＯＤ／分）の速度に関するグラフである。

図３は、正常プール血漿中の、時間に応じた、公知の凝固阻害剤である活性部位阻害ＦＶＩＩａ（ＦＶＩＩａｉ）によるトロンビン生成に関するグラフである。

図４は、正常プール血漿中の、時間に応じたｈＩ−ｃｏｎ１によるトロンビン生成に関するグラフである。

図５は、ＦＶＩＩ枯渇血漿中の、時間に応じたヒト第ＶＩＩａ因子およびｈＩ−ｃｏｎ１によるトロンビン生成に関するグラフである。

図６は、ウサギ血漿中の、時間に応じたｈＩ−ｃｏｎ１によるトロンビン生成に関するグラフである。

図７は、遠心分離したウサギ血漿中の、時間に応じたｈＩ−ｃｏｎ１またはＦＶＩＩａｉによるトロンビン生成に関するグラフである。

図８は、ブタにおけるｈＩ−ｃｏｎ１の硝子体内用量に応じたパーセントＣＮＶを示すグラフである。ｈＩ−ｃｏｎ１（０．２５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬおよび２．０ｍｇ／ｍＬ）の溶液の硝子体内注射（１００μＬ／眼）を１０日目にミニブタの両眼に注射した；対照動物は、製剤緩衝液１００μＬを受けた。１４日目に、動物を屠殺し、％ＣＮＶを決定した。

図９は、ｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤａの断片の硝子体内用量に応じたブタにおけるパーセントＣＮＶを示すグラフである。ｈＩ−ｃｏｎ１（０．２５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬおよび２．０ｍｇ／ｍＬ）の溶液の硝子体内注射（１００μＬ／眼）を１０日目にミニブタの両眼に注射した；対照動物は、製剤緩衝液１００μＬを受けた。１４日目に、動物を屠殺し、％ＣＮＶを決定した。

「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」という用語は、１つまたは複数のその実体を指し得る、すなわち、複数の指示対象を指し得る。そのように、「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」、「１つまたは複数の（ｏｎｅ ｏｒ ｍｏｒｅ）」および「少なくとも１つの（ａｔ ｌｅａｓｔ ｏｎｅ）」という用語は、本明細書では互換的に使用される。さらに、不定冠詞「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」による「１つの（ａｎ）要素」への言及は、文脈によりその要素がただ１つのみ存在することが明らかに必要とされている場合を除き、その要素が１つ超存在する可能性を排除するものではない。

本明細書全体を通して、「一実施形態」、「ある実施形態」、「１つの態様」、または「一態様」への言及は、実施形態に関連して記載されている特定の特徴、構造または特性が本開示の少なくとも１つの実施形態に包含されることを意味する。したがって、本明細書全体を通して各所における「一実施形態では」または「ある実施形態では」という句の出現は、必ずしも全てが同じ実施形態について言及しているのではない。さらに、特定の特徴、構造、または特性は、任意の適切な様式で組み合わせて１つまたは複数の実施形態にすることができる。

本明細書で使用される場合、特定の実施形態では、「約」または「およそ」という用語は、数値の前にある場合、プラスマイナス１０％範囲の値を示す。

本明細書で使用される場合、「古典的ＣＮＶ」とは、２０／２５０から２０／４００の間だが、２０／８００よりも悪い場合がある視覚をもたらす明確に規定されたＣＮＶ領域を意味する。

本明細書で使用される場合、「潜在性ＣＮＶ」とは、古典的ＣＮＶよりも漏出が少なく、２０／８０から２０／２００の間の視覚をもたらす、線引きが不十分なＣＮＶ領域を意味する。

血管形成
周囲組織内の血管に由来する既存の血管の成長の誘導である病的血管形成は、種々の疾患において観察され、一般には、血管内皮細胞に対して特異的な増殖因子の放出によって誘発される。病的血管形成により、血管新生、すなわち、新しい血管の創出がもたらされ、固形腫瘍の成長および転移が可能になり、眼の障害において視覚的な機能不全が引き起こされ、炎症性障害において白血球血管外遊出が促進され、かつ／または、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患の転帰に影響が及ぶ。

本発明の一態様では、がん、関節リウマチ、滲出型（ｅｘｕｄａｔｉｖｅ）（「滲出型（ｗｅｔ）」）の黄斑変性症、および／またはアテローム性動脈硬化症などの、血管新生および／または血管形成に関連する疾患を有する患者を処置する方法が提供される。本明細書に記載の通り、投与は、療法に関与する病態の型に応じて局部的または全身的であり得る。本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、ヒトおよび他の哺乳動物種を含めた他の種のどちらも包含する。したがって、本発明は、医学的適用および獣医学的適用のどちらも有する。獣医学的組成物および処置では、対応する種に由来するターゲティングドメインおよびエフェクタードメインを使用して免疫コンジュゲートを構築する。

本発明は、一部において、正常成体哺乳動物の脈管構造が、一般に、血管形成の活動的な状況にある、脈絡膜血管新生などのある特定の疾患の状況または成長している腫瘍において形成される新脈管構造とは対照的に、静止した状況にある（雌の生殖サイクルおよび創傷治癒などのある特定のプロセスを除いて）という観察に基づく。したがって、静止している血管内皮細胞と増殖している血管内皮細胞の間の分子の差異が、病的な脈管構造についての標的として機能し得る。静止している血管内皮細胞と増殖している血管内皮細胞の間の分子の差異の１つは、後者は、ＶＥＧＦがそのそれぞれの細胞表面受容体に結合すると組織因子を発現することである。組織因子は、血漿第ＶＩＩ／ＶＩＩａ因子に結合して血液凝固を開始させる膜貫通型受容体である。ＶＥＧＦが結合した血管内皮細胞のみが組織因子を発現するので、活性化脈管構造（例えば、腫瘍脈管構造）についての推定される標的は、内皮細胞上に発現する組織因子である。

本明細書において提示される態様では、患者を血管形成および／または血管新生に関連する疾患について処置する方法が提供される。一実施形態では、血管新生および／または血管形成に関連する疾患は、滲出型ＡＭＤである。別の実施形態では、血管新生および／または血管形成に関連する疾患は、がんである。

本明細書で使用される場合、「免疫コンジュゲート（複数可）」とは、ＩＣＯＮ−１などのコンジュゲートタンパク質を指す。一部の実施形態では、免疫コンジュゲートは、エフェクタードメインとして免疫グロブリンＦｃドメインを有し、前記エフェクタードメインは、ヒト第ＶＩＩ因子の変異体形態を含むターゲティングドメインとコンジュゲートしている。一部の実施形態では、免疫コンジュゲートは、Ｓ３４４Ａおよび／またはＫ３４１Ａから選択される１つまたは２つの変異を含む第ＶＩＩ因子の変異体形態を含むターゲティングドメインとコンジュゲートしたヒトＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃドメインを含み、免疫コンジュゲートタンパク質は、組織因子に結合する。一部の実施形態では、本開示の免疫コンジュゲートは、米国特許第７，８５８，０９２号；同第８，３８８，９７４号、同第８，０７１，１０４号；同第７，８８７，８０９号；および同第６，９２４，３５９号に記載されている免疫コンジュゲートを含む。

本明細書において提示される一態様では、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（エフェクタードメイン）とコンジュゲートした変異ＦＶＩＩタンパク質（ターゲティングドメイン）を含む融合タンパク質を含む組成物が提供される。図１は、本明細書において提示される方法によって投与することができる免疫コンジュゲートの一実施形態の一般化された構造を提供する。本明細書において提示される態様では、変異第ＶＩＩａ因子ドメイン（ＴＦターゲティングドメインとも称される）は、組織因子に高い親和性および特異性で結合するが、凝固を開始させないまたは通常は組織因子の結合に付随する凝固を最小限にする。ＩｇＧ１ Ｆｃドメイン（エフェクタードメインとも称される）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞および補体経路による、免疫コンジュゲートに結合する細胞に対する細胞溶解性応答を誘発する。一実施形態では、ＩｇＧ１ Ｆｃエフェクタードメインは、ＩｇＧ１ Ｆｃ領域のＣＨ２領域およびＣＨ３領域を両方含む。

ＦＶＩＩａとＴＦの間の反応は、種特異的である（Ｊａｎｓｏｎら、１９８４年；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒら、２００５年；Ｐｅｔｅｒｓｏｎら、２００５年）：マウスＦＶＩＩは、ウサギ、ブタおよびヒトを含めた多くの異種において活性であると思われるが、ヒトＦＶＩＩａは、ヒト、イヌ、ウサギおよびブタにおいてのみ、認識できる程度に活性である。逆に、ヒトＩｇＧ Ｆｃドメインは、ヒトおよびマウスのどちらにおいても活性である。したがって、患者に応じて、対応する種に由来するまたは患者において活性であることが公知の種に由来するターゲティングドメインおよびエフェクタードメインを使用して免疫コンジュゲートを構築する。例えば、本明細書において提示されるヒト処置方法では、変異組織因子ターゲティングドメインは、ヒトＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃ領域を含むエフェクタードメインとコンジュゲートしたヒト第ＶＩＩａ因子に由来する。例えば、一実施形態では、免疫コンジュゲートは、配列番号２のタンパク質である。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲートは、配列番号３のタンパク質である。一実施形態では、免疫コンジュゲートは、配列番号１、４、または５のｍＲＮＡ配列によってコードされる。

一実施形態では、本明細書に記載の免疫コンジュゲートは、２つのタンパク質鎖を含み、そのそれぞれが、リンカーまたはヒンジ領域を介してエフェクタードメインと繋がったターゲティングドメインを含む。さらなる実施形態では、リンカーまたはヒンジ領域は、天然に存在するものであり、一実施形態では、ヒト起源のものである。一実施形態では、ＩｇＧ１免疫グロブリンのヒンジ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１免疫グロブリンのヒンジ領域を使用してターゲティングドメインとエフェクタードメインを連結する。一実施形態では、ＩｇＧ１のヒンジ領域は、２つの単量体鎖間に１つまたは複数のジスルフィド結合を形成するシステインアミノ酸を含む（例えば、図１に示されている通り）。

一実施形態では、免疫コンジュゲートは、ホモ二量体である。しかし、別の実施形態では、免疫コンジュゲートは、ヘテロ二量体、例えば、それぞれが異なるアミノ酸配列のターゲティングドメイン、同じエフェクタードメインを有する２つの単量体を含む免疫コンジュゲートである。一実施形態では、２つのターゲティングドメインのアミノ酸配列は、１つのアミノ酸、２つもしくはそれよりも多くのアミノ酸、３つもしくはそれよりも多くのアミノ酸、または５つもしくはそれよりも多くのアミノ酸だけ異なる。一実施形態では、各単量体サブユニットは、免疫コンジュゲートのターゲティング領域とエフェクター領域を連結するＩｇＧ１ヒンジ領域を含み、免疫コンジュゲートヘテロ二量体または免疫コンジュゲートホモ二量体の単量体サブユニットは、ＩｇＧ１ヒンジ領域間のジスルフィド結合によって連結している。

一実施形態では、本明細書において提示される免疫コンジュゲートの分子量は、約１５０ｋＤａから約２００ｋＤａまでである。別の実施形態では、免疫コンジュゲートの分子量は、約１５７ｋＤａまたは１５７ｋＤａである。例えば、免疫コンジュゲートは、一実施形態では、本明細書では「ｈＩ−ｃｏｎ１」または「ＩＣＯＮ−１」とも称される、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を有する免疫コンジュゲートである。別の実施形態では、免疫コンジュゲートは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を有する。

全体を通して提示される通り、本明細書に記載の複数の実施形態では、変異第ＶＩＩａ因子ドメインを含む組織因子ターゲティングドメインを含む免疫コンジュゲートが提供される。ターゲティングドメインは、組織因子に対する結合親和性を低下させることなく、凝固経路の開始を阻害するように変異させた変異第ＶＩＩａ因子を含む。一実施形態では、第ＶＩＩａ因子の変異は、残基３４１における単一の点変異である。さらなる実施形態では、変異は、Ｌｙｓ３４１からＡｌａ３４１への点変異である。しかし、凝固経路を阻害する他の変異も本明細書において提示される免疫コンジュゲートに包含される。一実施形態では、本明細書において提示される免疫コンジュゲートのエフェクタードメインは、補体経路およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞細胞傷害性経路の両方を媒介する。

免疫コンジュゲート作製
一部の実施形態では、免疫コンジュゲートを作製する方法は、ＢＨＫ細胞などの哺乳動物細胞における発現を含む。さらなる実施形態では、細胞株は、ＨＥＫ２９３、ＣＨＯ、およびＳＰ２／０を含み得る。免疫コンジュゲートは、発現構築物の哺乳動物による発現によって生成することができる。一部の実施形態では、免疫コンジュゲートを、融合タンパク質（ＦＶＩＩ−Ｆｃ）として作製する、または化学コンジュゲートとして作製する。

一部の実施形態では、免疫コンジュゲートを翻訳後に修飾する。翻訳後修飾としては、ミリストイル化、グリコシルホスファチジルイノシトール付加（ｇｌｙｐｉａｔｉｏｎ）、パルミトイル化、プレニル化、リポイル化、アシル化、アルキル化、ブチル化（ｂｕｔｒｙｌａｔｉｏｎ）、ガンマ−カルボキシル化、グリコシル化（Ｎ−グリコシル化、Ｏ−グリコシル化、フコシル化、およびマンノシル化）、プロピオニル化、サクシニル化、および硫酸化が挙げられる。

免疫コンジュゲートの投与
本明細書において提示される方法に包含される投与方法としては、硝子体内注射、脈絡膜上注射、局所投与（例えば、点眼剤）、静脈内および腫瘍内投与が挙げられる。別の実施形態では、投与は、免疫コンジュゲート、または、免疫コンジュゲートの分泌形態をコードするｃＤＮＡを担持する複製欠損性アデノウイルスベクターもしくは他のウイルスベクターの静脈内注射、筋肉内注射、腫瘍内注射、皮下注射、滑液包内注射、眼内注射、プラーク内注射、または皮内注射によるものである。一実施形態では、処置を必要とする患者に、１つまたは複数の免疫コンジュゲート二量体を、１つまたは複数の免疫コンジュゲートタンパク質の硝子体内注射、静脈内注射もしくは腫瘍内注射、または他の部位への注射によって投与する。あるいは、一実施形態では、処置を必要とする患者に、１つまたは複数の免疫コンジュゲート二量体を、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つまたは複数の分泌形態をコードするｃＤＮＡを担持する１つまたは複数の発現ベクターの静脈内注射もしくは腫瘍内注射、または他の部位への注射によって投与する。一部の実施形態では、患者を、１つまたは複数の型の免疫コンジュゲートタンパク質の分泌形態をコードするｃＤＮＡを担持する有効量の１つもしくは複数の複製欠損性アデノウイルスベクターまたは１つもしくは複数のアデノ随伴ベクターを静脈内注射または腫瘍内注射することによって処置する。

本明細書で使用される場合、「有効量」または「治療有効量」とは、本開示の状態または疾患を処置するために必要な治療剤のレベルもしくは量、または、治療剤が投与された被験体において治療応答または所望の効果を生じる治療剤のレベルもしくは量を意味し、ここで、治療剤は、本開示の免疫コンジュゲートである。したがって、本開示の免疫コンジュゲートなどの治療剤の治療有効量は、血管形成および／または血管新生、ならびに様々な形態のＡＭＤの１つまたは複数の症状の低減において有効な量である。

本明細書で使用される場合、「医薬組成物」とは、治療剤を含む組成物を意味する。

本明細書で使用される場合、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」などは、以下の作用を意味する：（ｉ）特定の疾患もしくは障害の素因がある可能性があるが今のところはまだそれを有すると診断されていない被験体において、その疾患もしくは障害が生じるのを予防すること；（ｉｉ）疾患を治癒させる、処置する、もしくは阻害する、すなわち、その発生を阻止すること；または（ｉｉｉ）症状、状態を低減もしくは排除することによって、かつ／もしくは疾患の退縮を引き起こすことによって疾患を好転させること。

一実施形態では、硝子体内注射の方法を使用する。さらなる実施形態では、注射用の免疫コンジュゲート二量体を調製する場合、例えば、滅菌手袋、滅菌ドレープおよび滅菌開瞼器（ｅｙｅｌｉｄ ｓｐｅｃｕｌｕｍ）（または等価物）を使用することによる、無菌技法を使用する。一実施形態では、注射前に患者を麻酔および広域スペクトルの殺微生物剤に供する。

一実施形態では、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つまたは複数、例えば、配列番号２の免疫コンジュゲート二量体の硝子体内注射剤を、免疫コンジュゲート二量体組成物溶液であるバイアルの中身を、１ｃｃのツベルクリンシリンジに取り付けた５ミクロン、１９ゲージのフィルターニードルを通して抜き取ることによって調製する。さらなる実施形態では、次いで、フィルターニードルを廃棄し、硝子体内注射用の滅菌された３０ゲージ×１／２インチのニードルと交換する。プランジャーの先端が送達に適した用量を示すシリンジ上の線と並ぶまでバイアルの中身を排出する。

眼への注射、例えば、硝子体内注射または脈絡膜上注射の１つの方法では、注射前および／または注射後に、患者を眼圧（ＩＯＰ）の上昇についてモニターする。例えば、一実施形態では、眼への注射前および／または眼への注射後に、患者を、ＩＯＰの上昇について眼圧測定を使用してモニターする。別の実施形態では、患者を、注射直後に視神経乳頭の灌流を確認することによってＩＯＰの上昇についてモニターする。一実施形態では、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つの眼への注射前、例えば、眼への注射の約２０分前、約３０分前、約４０分前、約５０分前または約１時間前に、患者をＩＯＰの上昇についてモニターする。別の実施形態では、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つの眼への注射後、例えば、眼内注射の約１０分後、約２０分後、約３０分後、約４０分後、約５０分後または約１時間後に、患者をＩＯＰの上昇についてモニターする。一実施形態では、患者のＩＯＰは、免疫コンジュゲート二量体の眼内注射前と免疫コンジュゲート二量体の眼内注射後を比較して実質的に同じである。一実施形態では、患者のＩＯＰは、眼内注射後に、眼内注射（例えば、硝子体内注射）前と比較して１０％以下、２０％以下、または３０％以下しか変動しない。

一実施形態では、本明細書において提示される処置方法は、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つ（例えば、配列番号２または３の免疫コンジュゲート）の単回投与を含む。しかし、別の実施形態では、本明細書において提示される処置方法は、複数回の投薬セッションを含む。さらなる実施形態では、複数回の投薬セッションは、本明細書に記載の免疫コンジュゲート二量体の１つの複数回の眼内注射を含む。一実施形態では、複数回の投薬セッションは、２回もしくはそれよりも多く、３回もしくはそれよりも多く、４回もしくはそれよりも多く、または５回もしくはそれよりも多くの投薬セッションを含む。さらなる実施形態では、各投薬セッションは、本明細書に記載の免疫コンジュゲートの１つの眼内注射、または本明細書に記載の免疫コンジュゲートの１つの腫瘍内注射（すなわち、発現されたタンパク質としてまたは可溶性免疫コンジュゲートをコードするベクターによってのいずれかで）を含む。

一実施形態では、約２回から約２４回までの投薬セッション、例えば、約２回から約２４回までの眼内投薬セッション（例えば、硝子体内注射または脈絡膜上注射）を使用する。さらなる実施形態では、約３回から約３０回まで、または約５回から約３０回まで、または約７回から約３０回まで、または約９回から約３０回まで、または約１０回から約３０回まで、または約１２回から約３０回まで、または約１２回から約２４回までの投薬セッションを使用する。

一実施形態では、複数回の投薬セッションを使用する場合、投薬セッション間に、約１０日から約６０日まで、または約１０日から約５０日まで、または約１０日から約４０日まで、または約１０日から約３０日まで、または約１０日から約２０日までの間隔を置く。別の実施形態では、複数回の投薬セッションを使用する場合、投薬セッション間に、約２０日から約６０日まで、または約２０日から約５０日まで、または約２０日から約４０日まで、または約２０日から約３０日までの間隔を置く。さらに別の実施形態では、複数回の投薬セッションは、隔週（例えば、約１４日ごと）、毎月（例えば、約３０日ごと）、または隔月（例えば、約６０日ごと）である。さらに別の実施形態では、投薬セッション間に、約２８日の間隔を置く。

一実施形態では、複数回の投薬セッションは、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、１５回、１６回、１７回、１８回、１９回、２０回、２１回、２２回、２３回、２４回、２５回、２６回、２７回、２８回、２９回、３０回、３１回、３２回、３３回、３４回、３５回、３６回、３７回、３８回、３９回、４０回、４１回、４２回、４３回、４４回、４５回、４６回、４７回、４８回、４９回、または５０回の投薬セッションを含み、投薬セッション間に、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、３０日、３５日、４０日、４５日、５０日、５５日、または６０日の間隔を置く。

本明細書において提示される免疫コンジュゲートは、血管形成および／または血管新生が関係する任意の疾患または障害における使用に適用できる。例えば、一態様では、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体を、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の処置を必要とする患者の眼に投与する。一実施形態では、処置は、免疫コンジュゲート二量体の複数回の投薬セッションを含む。全体を通して提示される通り、免疫コンジュゲート二量体は、それぞれがヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む、単量体サブユニットを含む。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。

一実施形態では、滲出型ＡＭＤを処置する方法は、処置を必要とする患者の眼における脈絡膜血管新生を予防する、阻害する、または逆転させることを含む。さらなる実施形態では、脈絡膜血管新生が、処置後に、処置前の患者の患っている眼に存在した脈絡膜血管新生と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％または少なくとも約４０％逆転する。

本明細書において提示される免疫コンジュゲートおよび方法を用いて、眼の血管新生に関連する他の眼の障害を処置することができる。一実施形態では、眼の血管新生は、脈絡膜血管新生である。別の実施形態では、眼の血管新生は、網膜血管新生である。さらに別の実施形態では、眼の血管新生は、角膜血管新生である。したがって、一実施形態では、脈絡膜血管新生、網膜血管新生または角膜血管新生に関連する眼の障害を本明細書において提示される方法の１つまたは複数によって処置することができる。さらなる実施形態では、方法は、それを必要とする患者の眼に、本明細書に記載の免疫コンジュゲート二量体の１つを投与するステップを含む。さらなる実施形態では、処置は、免疫コンジュゲート二量体の複数回の投薬セッションを含む。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。

例えば、一実施形態では、増殖性糖尿病性網膜症、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、または血管形成緑内障の処置を必要とする患者を、本明細書において提示される免疫コンジュゲートの１つを用いて、例えば、罹患眼内への免疫コンジュゲートの硝子体内注射、脈絡膜上注射または局所投与（例えば、点眼剤による）によって処置する。一実施形態では、処置は、複数回の投薬セッションにわたって行われる。上述の障害に関して、眼の血管新生は、それぞれの障害に「付随する」または「続発する」と言える。

一実施形態では、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）後の黄斑浮腫の処置を必要とする患者を本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つによって処置する。一実施形態では、方法は、患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。さらなる実施形態では、変異ｆＶＩＩａタンパク質は、ヒト変異ｆＶＩＩａタンパク質であり、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介して連結している。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を、患者に、複数回の投薬セッションにわたって、例えば、各投薬セッションにおける硝子体内投与によって投与する。

別の実施形態では、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）の処置を必要とする患者を本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体の１つによって処置する。一実施形態では、方法は、患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。さらなる実施形態では、変異ｆＶＩＩａタンパク質は、ヒト変異ｆＶＩＩａタンパク質であり、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介して連結している。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を患者に複数回の投薬セッションにわたって投与する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を各投薬セッションにおいて硝子体内に投与する。

さらに別の実施形態では、それを必要とする患者、例えば、ＤＭＥの患者における糖尿病性網膜症を、本明細書において提示される免疫コンジュゲートの１つによって処置する。一実施形態では、方法は、患者、例えば、ＤＭＥ患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。さらなる実施形態では、変異ｆＶＩＩａタンパク質は、ヒト変異ｆＶＩＩａタンパク質であり、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介して連結している。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を患者に複数回の投薬セッションにわたって投与する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を、患者に、複数回の投薬セッションにわたって、例えば、各投薬セッションにおける硝子体内投与によって投与する。

本発明の一実施形態では、それを必要とする患者、例えば、がん患者における腫瘍血管新生に関連する疾患または障害を処置する方法に、本明細書において提示される免疫コンジュゲートの１つまたは複数を使用する。一実施形態では、方法は、患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を、例えば腫瘍内または静脈内注射によって投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。さらなる実施形態では、変異ｆＶＩＩａタンパク質は、ヒト変異ｆＶＩＩａタンパク質であり、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介して連結している。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を患者に複数回の投薬セッションにわたって投与する。

がんの処置では、黒色腫、腎臓がん、前立腺がん、乳がん、卵巣がん、脳がん、神経芽細胞腫、頭頸部がん、膵臓がん、膀胱がん、子宮内膜がんおよび肺がんを含めた様々ながん、特に、原発性または転移性固形腫瘍を処置するために、免疫コンジュゲート二量体を使用する。一実施形態では、がんは、婦人科のがんである。さらなる実施形態では、婦人科のがんは、漿液性、明細胞、類内膜または未分化卵巣がんである。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を使用して、腫瘍脈管構造、特に、血管内皮細胞、および／または腫瘍細胞を標的とする。理論に束縛されることを望むものではないが、腫瘍脈管構造を標的とすることにより、以下の通り、本明細書に記載の免疫コンジュゲート二量体の１つまたは複数を用いたがん免疫療法に関して有利な点がいくつかもたらされる：（ｉ）組織因子を含めた血管標的の一部は全ての腫瘍に関して同じはずである；（ｉｉ）脈管構造にターゲティングされる免疫コンジュゲートは、それらの標的に到達するために腫瘍塊に浸潤する必要がない；（ｉｉｉ）各血管により、生存能力が血管の機能的完全性に依存する複数の腫瘍細胞が育成されるので、腫瘍脈管構造を標的とすることにより、増幅された治療応答が生じるはずである；および（ｉｖ）脈管構造が免疫コンジュゲートに対する抵抗性を生じるには、血管を裏打ちする内皮層全体が改変される必要があるので、抵抗性が生じる可能性は低い。以前に記載されている、新しい血管の成長を阻害する抗血管形成方法とは異なり、本明細書において提示される免疫コンジュゲート二量体は、新脈管構造に対する細胞溶解性応答を誘発する。

別の実施形態では、アテローム性動脈硬化症または関節リウマチを処置するための方法に、本明細書に記載の免疫コンジュゲートの１つまたは複数を使用する。一実施形態では、方法は、処置を必要とする患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を投与するステップを含み、二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む。さらなる実施形態では、変異ｆＶＩＩａタンパク質は、ヒト変異ｆＶＩＩａタンパク質であり、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと、ＩｇＧ１のヒンジ領域を介して連結している。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２または３のアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号２のアミノ酸配列を有する。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート二量体は、配列番号３のアミノ酸配列を有する。一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を患者に複数回の投薬セッションにわたって投与する。

免疫コンジュゲート二量体を用いて眼の障害を処置するための方法、例えば、滲出型ＡＭＤ、糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑浮腫、または滲出型ＡＭＤなどの眼の障害に続発する脈絡膜血管新生を処置するための方法の一実施形態では、処置方法に供された患者は、処置（例えば、単一の投薬セッションまたは複数回の投薬セッション）後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値の減少が処置を受ける前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１５文字未満であることによって測定される通り、実質的に視覚を維持する。さらなる実施形態では、患者のＢＣＶＡ測定値の減少は、処置を受ける前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１０文字未満、８文字未満、６文字未満または５文字未満である。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者のＢＣＶＡ測定値の減少は、処置を受ける前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１０文字未満、９文字未満、８文字未満、７文字未満、６文字未満、または５文字未満である。一部の実施形態では、患者のＢＣＶＡ測定値の減少は、処置を受ける前の患者のＢＣＶＡ測定値と比較して約１０文字未満、約９文字未満、約８文字未満、約７文字未満、約６文字未満、または約５文字未満である。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者のＢＣＶＡ測定値の減少は、１５〜５文字未満、１５〜６文字未満、１５〜７文字未満、１５〜８文字未満、１５〜９文字未満、１５〜１０文字未満、１０〜５文字未満、１０〜６文字未満、１０〜７文字未満、１０〜８文字未満、１０〜９文字未満、９〜５文字未満、９〜６文字未満、９〜７文字未満、９〜８文字未満、８〜５文字未満、８〜６文字未満、８〜７文字未満、７〜５文字未満、７〜６文字未満、または６〜５文字未満である。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者のＢＣＶＡ測定値の減少は、約１５〜約５文字未満、約１５〜約６文字未満、約１５〜約７文字未満、約１５〜約８文字未満、約１５〜約９文字未満、約１５〜約１０文字未満、約１０〜約５文字未満、約１０〜約６文字未満、約１０〜約７文字未満、約１０〜約８文字未満、約１０〜約９文字未満、約９〜約５文字未満、約９〜約６文字未満、約９〜約７文字未満、約９〜約８文字未満、約８〜約５文字未満、約８〜約６文字未満、約８〜約７文字未満、約７〜約５文字未満、約７〜約６文字未満、または約６〜約５文字未満である。

免疫コンジュゲート二量体を用いて眼の障害を処置するための方法、例えば、滲出型ＡＭＤ、糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑浮腫、または滲出型ＡＭＤなどの眼の障害に続発する脈絡膜血管新生を処置するための方法の別の実施形態では、処置方法に供された患者は、処置（例えば、単一の投薬セッションまたは複数回の投薬セッション）後に、ＢＣＶＡ測定によって測定される通り、実質的に視覚を維持する。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者は、処置後の最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値が処置前の患者のＢＣＶＡと比較して５文字、６文字、７文字、８文字、９文字、１０文字、１５文字、２０文字、または２５文字またはそれよりも多く増加することによって測定される通り、視覚を回復する。一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者は、処置後の最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値が処置前の患者のＢＣＶＡと比較して約５文字、約６文字、約７文字、約８文字、約９文字、約１０文字、約１５文字、約２０文字、または約２５文字またはそれよりも多く増加することによって測定される通り、視覚を回復する。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者は、処置後に、ＢＣＶＡ測定値が処置前の患者のＢＣＶＡと比較して５〜２５文字超、５〜２０文字超、５〜１５文字超、５〜１０文字超、５〜９文字超、５〜８文字超、５〜７文字超、５〜６文字超、６〜２５文字超、６〜２０文字超、６〜１５文字超、６〜１０文字超、６〜９文字超、６〜８文字超、６〜７文字超、７〜２５文字超、７〜２０文字超、７〜１５文字超、７〜１０文字超、７〜９文字超、７〜８文字超、８〜２５文字超、８〜２０文字超、８〜１５文字超、８〜１０文字超、８〜９文字超、９〜２５文字超、９〜２０文字超、９〜１５文字超、９〜１０文字超、１０〜２５文字超、１０〜２０文字超、１０〜１５文字超、１５〜２５文字超、１５〜２０文字超、または２０〜２５文字超またはそれよりも多く増加することによって測定される通り、視覚を回復する。

一部の実施形態では、本発明の免疫コンジュゲートを投与された患者は、処置後に、ＢＣＶＡ測定値が処置前の患者のＢＣＶＡと比較して約５〜約２５文字超、約５〜約２０文字超、約５〜約１５文字超、約５〜約１０文字超、約５〜約９文字超、約５〜約８文字超、約５〜約７文字超、約５〜約６文字超、約６〜約２５文字超、約６〜約２０文字超、約６〜約１５文字超、約６〜約１０文字超、約６〜約９文字超、約６〜約８文字超、約６〜約７文字超、約７〜約２５文字超、約７〜約２０文字超、約７〜約１５文字超、約７〜約１０文字超、約７〜約９文字超、約７〜約８文字超、約８〜約２５文字超、約８〜約２０文字超、約８〜約１５文字超、約８〜約１０文字超、約８〜約９文字超、約９〜約２５文字超、約９〜約２０文字超、約９〜約１５文字超、約９〜約１０文字超、約１０〜約２５文字超、約１０〜約２０文字超、約１０〜約１５文字超、約１５〜約２５文字超、約１５〜約２０文字超、または約２０〜約２５文字超またはそれよりも多く増加することによって測定される通り、視覚を回復する。

免疫コンジュゲート二量体を用いて眼の障害を処置するための方法、例えば、滲出型ＡＭＤ、糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑浮腫、または滲出型ＡＭＤなどの眼の障害に続発する脈絡膜血管新生を処置するための方法の一実施形態では、眼の血管新生領域、例えば、脈絡膜血管新生領域が、患者の眼において処置前の眼の血管新生領域（例えば、ＣＮＶ領域）と比較して減少する。本明細書において提示される通り、処置は、１回の投薬セッションまたは複数回の投薬セッションを含んでよく、一実施形態では、眼の血管新生領域（例えば、ＣＮＶ領域）の減少を個々の投薬セッションまたは複数回の投薬セッション後に評価する。さらなる実施形態では、眼の血管新生領域（例えば、ＣＮＶ領域）が、蛍光眼底撮影によって測定して、少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約１５％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約２５％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約３５％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％減少する。

免疫コンジュゲート二量体を用いて眼の障害を処置するための方法、例えば、滲出型ＡＭＤ、糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑浮腫、または滲出型ＡＭＤなどの眼の障害に続発する脈絡膜血管新生を処置するための方法の一実施形態では、処置を受けた眼の網膜厚が、患者の眼において光干渉断層撮影（ＯＣＴ）によって測定して、処置前の網膜厚と比較して減少する。本明細書において提示される通り、処置は、１回の投薬セッションまたは複数回の投薬セッションを含んでよく、一実施形態では、網膜厚の減少を個々の投薬セッションまたは複数回の投薬セッション後に評価する。さらなる実施形態では、網膜厚が、ＯＣＴによって測定して、少なくとも約５％、または少なくとも約１０％、または少なくとも約１５％、または少なくとも約２０％、または少なくとも約２５％、または少なくとも約３０％、または少なくとも約３５％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％減少する。さらなる実施形態では、網膜厚の減少は、中心領域網膜厚（ＣＳＴ）の減少、中心点網膜厚（ＣＰＴ）の減少、または中心窩網膜厚（ＣＦＴ）の減少である。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を溶液または懸濁物として投与する。一実施形態では、免疫コンジュゲート組成物は、アルギニンまたはプロテインＡを含む。さらなる実施形態では、免疫コンジュゲート組成物は、アルギニンを含む。さらに別の実施形態では、アルギニンは、組成物中に約２０ｍＭから約４０ｍＭまで、例えば、２５ｍＭで存在する。一実施形態では、組成物の他の成分として、ＨＥＰＥＳ、塩化ナトリウム、ポリソルベート−８０、塩化カルシウム、またはこれらの組合せが挙げられる。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を１０μｇから５００μｇの間、１０μｇから４００μｇの間、１０μｇから３００μｇの間、１０μｇから２００μｇの間、１０μｇから１００μｇの間、１０μｇから５０μｇの間、５０μｇから５００μｇの間、５０μｇから４００μｇの間、５０μｇから３００μｇの間、５０μｇから２００μｇの間、５０μｇから１００μｇの間、１００μｇから５００μｇの間、１００μｇから４００μｇの間、１００μｇから３００μｇの間、１００μｇから２００μｇの間、２００μｇから５００μｇの間、２００μｇから４００μｇの間、２００μｇから３００μｇの間、３００μｇから５００μｇの間、３００μｇから４００μｇの間、または４００μｇから５００μｇの間の用量で投与する。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を約１０μｇから約５００μｇの間、約１０μｇから約４００μｇの間、約１０μｇから約３００μｇの間、約１０μｇから約２００μｇの間、約１０μｇから約１００μｇの間、約１０μｇから約５０μｇの間、約５０μｇから約５００μｇの間、約５０μｇから約４００μｇの間、約５０μｇから約３００μｇの間、約５０μｇから約２００μｇの間、約５０μｇから約１００μｇの間、約１００μｇから約５００μｇの間、約１００μｇから約４００μｇの間、約１００μｇから約３００μｇの間、約１００μｇから約２００μｇの間、約２００μｇから約５００μｇの間、約２００μｇから約４００μｇの間、約２００μｇから約３００μｇの間、約３００μｇから約５００μｇの間、約３００μｇから約４００μｇの間、または約４００μｇから約５００μｇの間の用量で投与する。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を約１０μｇ、約２０μｇ、約３０μｇ、約４０μｇ、約５０μｇ、約６０μｇ、約７０μｇ、約８０μｇ、約９０μｇ、約１００μｇ、約１２５μｇ、約１５０μｇ、約１７５μｇ、約２００μｇ、約２２５μｇ、約２５０μｇ、約２７５μｇ、約３００μｇ、約３２５μｇ、約３５０μｇ、約３７５μｇ、約４００μｇ、約４２５μｇ、約４５０μｇ、約４７５μｇ、約５００μｇ、約５２５μｇ、約５５０μｇ、約５７５μｇ、約６００μｇ、約６２５μｇ、約６５０μｇ、約６７５μｇ、または約７００μｇからなる用量で投与する。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を１０μＬから２００μＬの間、１０μＬから１８０μＬの間、１０μＬから１６０μＬの間、１０μＬから１４０μＬの間、１０μＬから１２０μＬの間、１０μＬから１００μＬの間、１０μＬから８０μＬの間、１０μＬから６０μＬの間、１０μＬから４０μＬの間、１０μＬから２０μＬの間、１０μＬから１５μＬの間、２０μＬから２００μＬの間、２０μＬから１８０μＬの間、２０μＬから１６０μＬの間、２０μＬから１４０μＬの間、２０μＬから１２０μＬの間、２０μＬから１００μＬの間、２０μＬから８０μＬの間、２０μＬから６０μＬの間、２０μＬから４０μＬの間、４０μＬから２００μＬの間、４０μＬから１８０μＬの間、４０μＬから１６０μＬの間、４０μＬから１４０μＬの間、４０μＬから１２０μＬの間、４０μＬから１００μＬの間、４０μＬから８０μＬの間、４０μＬから６０μＬの間、６０μＬから２００μＬの間、６０μＬから１８０μＬの間、６０μＬから１６０μＬの間、６０μＬから１４０μＬの間、６０μＬから１２０μＬの間、６０μＬから１００μＬの間、６０μＬから８０μＬの間、８０μＬから２００μＬの間、８０μＬから１８０μＬの間、８０μＬから１６０μＬの間、８０μＬから１４０μＬの間、８０μＬから１２０μＬの間、８０μＬから１００μＬの間、１００μＬから２００μＬの間、１００μＬから１８０μＬの間、１００μＬから１６０μＬの間、１００μＬから１４０μＬの間、１００μＬから１２０μＬの間、１２０μＬから２００μＬの間、１２０μＬから１８０μＬの間、１２０μＬから１６０μＬの間、１２０μＬから１４０μＬの間、１４０μＬから２００μＬの間、１４０μＬから１８０μＬの間、１４０μＬから１６０μＬの間、１６０μＬから２００μＬの間、１６０μＬから１８０μＬの間、または１８０μＬから２００μＬの間の溶質体積で投与する。

一実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を約１０μＬ、約１５μＬ、約２０μＬ、約２５μＬ、約３０μＬ、約３５μＬ、約４０μＬ、約４５μＬ、約５０μＬ、約５５μＬ、約６０μＬ、約６５μＬ、約７０μＬ、約７５μＬ、約８０μＬ、約８５μＬ、約９０μＬ、約９５μＬ、または約１００μＬからなる溶質体積で投与する。

本発明の例示的な組成物の１つを以下の表２に提示する。

併用治療投与（ｃｏ−ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）
一実施形態では、患者を上述の疾患または障害の１つについて処置するため、例えば、滲出型ＡＭＤまたは血管形成もしくは血管新生に関連する別の眼の疾患を処置するために、本明細書に記載の免疫コンジュゲート二量体を併用治療レジメンで投与する。一実施形態では、第２の活性薬剤を、免疫コンジュゲート二量体と同じ組成物で投与する。しかし、別の実施形態では、免疫コンジュゲート二量体を別の組成物で投与する。一実施形態では、第２の活性薬剤は、血管新生阻害剤または血管形成阻害剤である。

一実施形態では、血管形成または血管新生阻害剤は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤、ＶＥＧＦ受容体阻害剤、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）阻害剤またはＰＤＧＦ受容体阻害剤である。

別の実施形態では、血管新生阻害剤は、インテグリンアンタゴニスト、セレクチンアンタゴニスト、接着分子アンタゴニスト（例えば、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３、血小板内皮接着分子（ＰＣＡＭ）、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ））、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ−１）のアンタゴニスト）、塩基性線維芽細胞増殖因子アンタゴニスト、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）モジュレーター、または血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）モジュレーター（例えば、ＰＤＧＦアンタゴニスト）である。被験体がインテグリンアンタゴニストに反応する可能性があるかどうかの決定の一実施形態では、インテグリンアンタゴニストは、小分子インテグリンアンタゴニスト、例えば、Ｐａｏｌｉｌｌｏら（Ｍｉｎｉ Ｒｅｖ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ、２００９年、１２巻、１４３９〜１４４６頁、その全体が参照により組み込まれる）に記載されているアンタゴニスト、または、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，５２４，５８１号に記載されている、白血球接着誘導性サイトカインまたは増殖因子アンタゴニスト（例えば、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）、単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ））である。

別の実施形態では、血管新生阻害剤は、以下の血管形成阻害剤のうちの１つまたは複数である：インターフェロンガンマ１β、ピルフェニドンを伴うインターフェロンガンマ１β（Ａｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標））、ＡＣＵＨＴＲ０２８、αＶβ５、アミノ安息香酸カリウム、アミロイドＰ、ＡＮＧ１１２２、ＡＮＧ１１７０、ＡＮＧ３０６２、ＡＮＧ３２８１、ＡＮＧ３２９８、ＡＮＧ４０１１、抗ＣＴＧＦ ＲＮＡｉ、Ａｐｌｉｄｉｎ、ｓａｌｖｉａおよびｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓを含むａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ抽出物、アテローム性動脈硬化プラーク遮断薬、Ａｚｏｌ、ＡＺＸ１００、ＢＢ３、結合組織増殖因子抗体、ＣＴ１４０、ダナゾール、Ｅｓｂｒｉｅｔ、ＥＸＣ００１、ＥＸＣ００２、ＥＸＣ００３、ＥＸＣ００４、ＥＸＣ００５、Ｆ６４７、ＦＧ３０１９、Ｆｉｂｒｏｃｏｒｉｎ、Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ、ＦＴ０１１、ガレクチン−３阻害剤、ＧＫＴ１３７８３１、ＧＭＣＴ０１、ＧＭＣＴ０２、ＧＲＭＤ０１、ＧＲＭＤ０２、ＧＲＮ５１０、Ｈｅｂｅｒｏｎ Ａｌｆａ Ｒ、インターフェロンα−２β、ＩＴＭＮ５２０、ＪＫＢ１１９、ＪＫＢ１２１、ＪＫＢ１２２、ＫＲＸ１６８、ＬＰＡ１受容体アンタゴニスト、ＭＧＮ４２２０、ＭＩＡ２、マイクロＲＮＡ ２９ａオリゴヌクレオチド、ＭＭＩ０１００、ノスカピン、ＰＢＩ４０５０、ＰＢＩ４４１９、ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＰＦ−０６４７３８７１、ＰＧＮ００５２、Ｐｉｒｅｓｐａ、Ｐｉｒｆｅｎｅｘ、ピルフェニドン、プリチデプシン（ｐｌｉｔｉｄｅｐｓｉｎ）、ＰＲＭ１５１、Ｐｘ１０２、ＰＹＮ１７、ＰＹＮ１７を伴うＰＹＮ２２、Ｒｅｌｉｖｅｒｇｅｎ、ｒｈＰＴＸ２融合タンパク質、ＲＸＩ１０９、セクレチン、ＳＴＸ１００、ＴＧＦ−β阻害剤、形質転換増殖因子、β−受容体２オリゴヌクレオチド、ＶＡ９９９２６０、ＸＶ６１５、またはこれらの組合せ。

別の実施形態では、血管新生阻害剤は、内因性血管形成阻害剤である。さらなる実施形態では、内因性血管形成阻害剤は、エンドスタチン、ＸＶＩＩＩ型コラーゲンに由来する２０ｋＤａのＣ末端断片、アンジオスタチン（プラスミンの３８ｋＤａの断片）、またはトロンボスポンジン（ＴＳＰ）ファミリータンパク質のメンバーである。さらなる実施形態では、血管形成阻害剤は、ＴＳＰ−１、ＴＳＰ−２、ＴＳＰ−３、ＴＳＰ−４およびＴＳＰ−５である。以下の血管形成阻害剤のうちの１つまたは複数に対する応答の可能性を決定するための方法も提供される：可溶性ＶＥＧＦ受容体、例えば、可溶性ＶＥＧＦＲ−１およびニューロピリン１（ＮＰＲ１）、アンジオポエチン−１、アンジオポエチン−２、バソスタチン、カルレティキュリン、血小板因子−４、組織メタロプロテアーゼ阻害物質（ＴＩＭＰ）（例えば、ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３、ＴＩＭＰ４）、軟骨由来血管形成阻害剤（例えば、ペプチドトロポニンＩおよびコンドロモジュリンＩ（ｃｈｒｏｎｄｏｍｏｄｕｌｉｎ Ｉ））、トロンボスポンジンモチーフ１を伴うディスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼ、インターフェロン（ＩＦＮ）（例えば、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ）、ケモカイン、例えば、Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフを有するケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ１０、インターフェロンガンマ誘導タンパク質１０または低分子誘導性サイトカインＢ１０としても公知）、インターロイキンサイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８）、プロトロンビン、アンチトロンビンＩＩＩ断片、プロラクチン、ＴＮＦＳＦ１５遺伝子によってコードされるタンパク質、オステオポンチン、マスピン、カンスタチン（ｃａｎｓｔａｔｉｎ）、プロリフェリン（ｐｒｏｌｉｆｅｒｉｎ）関連タンパク質。

一実施形態では、以下の血管新生阻害剤のうちの１つまたは複数を、本明細書に記載の免疫コンジュゲートと共に投与する：アンジオポエチン−１、アンジオポエチン−２、アンジオスタチン、エンドスタチン、バソスタチン、トロンボスポンジン、カルレティキュリン、血小板因子−４、ＴＩＭＰ、ＣＤＡＩ、インターフェロンα、インターフェロンβ、血管内皮増殖因子阻害剤（ＶＥＧＩ）ｍｅｔｈ−１、ｍｅｔｈ−２、プロラクチン、ＶＥＧＩ、ＳＰＡＲＣ、オステオポンチン、マスピン、カンスタチン、プロリフェリン関連タンパク質（ＰＲＰ）、レスチン（ｒｅｓｔｉｎ）、ＴＳＰ−１、ＴＳＰ−２、インターフェロンガンマ１β、ＡＣＵＨＴＲ０２８、αＶβ５、アミノ安息香酸カリウム、アミロイドＰ、ＡＮＧ１１２２、ＡＮＧ１１７０、ＡＮＧ３０６２、ＡＮＧ３２８１、ＡＮＧ３２９８、ＡＮＧ４０１１、抗ＣＴＧＦ ＲＮＡｉ、Ａｐｌｉｄｉｎ、ｓａｌｖｉａおよびｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓを含むａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ抽出物、アテローム性動脈硬化プラーク遮断薬、Ａｚｏｌ、ＡＺＸ１００、ＢＢ３、結合組織増殖因子抗体、ＣＴ１４０、ダナゾール、Ｅｓｂｒｉｅｔ、ＥＸＣ００１、ＥＸＣ００２、ＥＸＣ００３、ＥＸＣ００４、ＥＸＣ００５、Ｆ６４７、ＦＧ３０１９、Ｆｉｂｒｏｃｏｒｉｎ、Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ、ＦＴ０１１、ガレクチン−３阻害剤、ＧＫＴ１３７８３１、ＧＭＣＴ０１、ＧＭＣＴ０２、ＧＲＭＤ０１、ＧＲＭＤ０２、ＧＲＮ５１０、Ｈｅｂｅｒｏｎ Ａｌｆａ Ｒ、インターフェロンα−２β、ＩＴＭＮ５２０、ＪＫＢ１１９、ＪＫＢ１２１、ＪＫＢ１２２、ＫＲＸ１６８、ＬＰＡ１受容体アンタゴニスト、ＭＧＮ４２２０、ＭＩＡ２、マイクロＲＮＡ ２９ａオリゴヌクレオチド、ＭＭＩ０１００、ノスカピン、ＰＢＩ４０５０、ＰＢＩ４４１９、ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＰＦ−０６４７３８７１、ＰＧＮ００５２、Ｐｉｒｅｓｐａ、Ｐｉｒｆｅｎｅｘ、ピルフェニドン、プリチデプシン、ＰＲＭ１５１、Ｐｘ１０２、ＰＹＮ１７、ＰＹＮ１７を伴うＰＹＮ２２、Ｒｅｌｉｖｅｒｇｅｎ、ｒｈＰＴＸ２融合タンパク質、ＲＸＩ１０９、セクレチン、ＳＴＸ１００、ＴＧＦ−β阻害剤、形質転換増殖因子、β−受容体２オリゴヌクレオチド、ＶＡ９９９２６０、ＸＶ６１５またはこれらの組合せ。

さらに別の併用療法実施形態は、本明細書に記載の免疫コンジュゲートの１つを、以下のうちの１つまたは複数と共に投与することを含む：パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ）、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ）、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ）、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ）、ポナチニブ（Ｉｃｌｕｓｉｇ）、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ）、カボザンチニブ（Ｃｏｍｅｔｒｉｇ）、ベバシズマブ（アバスチン）、ラムシルマブ（Ｃｙｒａｍｚａ）、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇａ）、ｚｉｖ−アフリバーセプト（Ｚａｌｔｒａｐ）、またはこれらの組合せ。さらに別の実施形態では、血管形成阻害剤は、ＶＥＧＦ阻害剤である。さらなる実施形態では、ＶＥＧＦ阻害剤は、アキシチニブ、カボザンチニブ、アフリバーセプト、ブリバニブ、ティボザニブ、ラムシルマブまたはモテサニブである。

一実施形態では、血管形成阻害剤は、ラニビズマブまたはベバシズマブである。さらなる実施形態では、血管形成阻害剤は、ラニビズマブである。さらに別の実施形態では、ラニビズマブを投薬セッション当たり０．５ｍｇまたは０．３ｍｇの投与量で投与し、また、ＬＵＣＥＮＴＩＳに関する処方情報に示されている通り投与する。

一実施形態では、併用療法は、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）ファミリーのメンバーのアンタゴニスト、例えば、ＰＤＧＦ受容体（ＰＤＧＦＲ）のシグナル伝達および／または活性を阻害、低減または調節する薬物を投与することを含む。例えば、一実施形態では、ＰＤＧＦアンタゴニストは、抗ＰＤＧＦアプタマー、抗ＰＤＧＦ抗体もしくはその断片、抗ＰＤＧＦＲ抗体もしくはその断片、または小分子アンタゴニストである。一実施形態では、ＰＤＧＦアンタゴニストは、ＰＤＧＦＲ−αまたはＰＤＧＦＲ−βのアンタゴニストである。一実施形態では、ＰＤＧＦアンタゴニストは、抗ＰＤＧＦ−βアプタマーＥ１００３０、スニチニブ、アキシチニブ、ソラフェニブ（ｓｏｒｅｆｅｎｉｂ）、イマチニブ、メシル酸イマチニブ、ニンテダニブ、パゾパニブＨＣｌ、ポナチニブ、ＭＫ−２４６１、ドビチニブ、パゾパニブ、クレノラニブ（ｃｒｅｎｏｌａｎｉｂ）、ＰＰ−１２１、テラチニブ（ｔｅｌａｔｉｎｉｂ）、イマチニブ、ＫＲＮ ６３３、ＣＰ ６７３４５１、ＴＳＵ−６８、Ｋｉ８７５１、アムバチニブ（ａｍｕｖａｔｉｎｉｂ）、ティボザニブ、マシチニブ（ｍａｓｉｔｉｎｉｂ）、モテサニブ二リン酸塩、ドビチニブ二乳酸、リニファニブ（ＡＢＴ−８６９）である。

処置転帰
一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けした患者または患者の集団においてＢＣＶＡ文字スコアを決定する。一部の実施形態では、ＢＣＶＡ文字スコアを０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で繰り返す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、評価ＢＶＣＡ文字スコアの決定は、最終観察繰越（ｌａｓｔ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｃａｒｒｉｅｄ ｆｏｒｗａｒｄ）（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者のＢＣＶＡ文字スコアは、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、５文字超、１０文字超、１５文字超、２０文字超、２５文字超、３０文字超、３５文字超、または４０文字超増加する。一部の実施形態では、患者のＢＣＶＡ文字スコアは、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、約５文字超、約１０文字超、約１５文字超、約２０文字超、約２５文字超、約３０文字超、約３５文字超または約４０文字超増加する。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、眼の中心領域網膜厚（ｃｅｎｔｒａｌ ｓｕｂｆｉｅｌｄ ｒｅｔｉｎａｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）を決定する。一部の実施形態では、中心領域網膜厚の決定を０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で繰り返す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、中心領域網膜厚の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。一実施形態では、中心領域網膜厚の決定を、ｓｄＯＣＴを利用して行う。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域網膜厚の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の増加または減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域網膜厚の、少なくとも５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の増加または減少を示す。

一実施形態では、患者は、少なくとも約１０μｍ、約２０μｍ、約３０μｍ、約４０μｍ、約５０μｍ、約６０μｍ、約７０μｍ、約８０μｍ、約９０μｍ、約１００μｍ、約１２５μｍ、約１５０μｍ、約１７５μｍ、約２００μｍ、約２２５μｍ、約２５０μｍ、約２７５μｍ、約３００μｍ、約３２５μｍ、約３５０μｍ、約３７５μｍ、約４００μｍ、約４２５μｍ、約４５０μｍ、約４７５μｍ、約５００μｍ、約５２５μｍ、約５５０μｍ、約５７５μｍ、約６００μｍ、約６２５μｍ、約６５０μｍ、約６７５μｍ、または約７００μｍの増加または減少である、本明細書において提示される眼の組織および／または領域の中心領域網膜厚の増加または減少を示す。

一実施形態では、本明細書において提示される眼の組織および／または領域の厚さの測定は、少なくとも１０μｍ、２０μｍ、３０μｍ、４０μｍ、５０μｍ、６０μｍ、７０μｍ、８０μｍ、９０μｍ、１００μｍ、１２５μｍ、１５０μｍ、１７５μｍ、２００μｍ、２２５μｍ、２５０μｍ、２７５μｍ、３００μｍ、３２５μｍ、３５０μｍ、３７５μｍ、４００μｍ、４２５μｍ、４５０μｍ、４７５μｍ、５００μｍ、５２５μｍ、５５０μｍ、５７５μｍ、６００μｍ、６２５μｍ、６５０μｍ、６７５μｍ、または７００μｍの増加または減少である。

一実施形態では、ＣＮＶ領域の測定を、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において行う。一部の実施形態では、ＣＮＶ領域の決定を０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で繰り返す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、ＣＮＶ領域の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、ＣＮＶ領域の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、ＣＮＶ領域の、少なくとも少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、漏出ＣＮＶの領域の測定を、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において行う。一部の実施形態では、ＣＮＶ漏出の領域を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で決定する。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、漏出ＣＮＶの領域の測定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、漏出ＣＮＶの領域の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、漏出ＣＮＶの領域の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、網膜下液の体積の測定を、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において行う。一部の実施形態では、網膜下液の体積の測定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で決定する。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、網膜下液の体積の測定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、網膜下液の体積の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少または増加を示す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、網膜下液の体積の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少または増加を示す。

一実施形態では、中心領域網膜下高反射体（ｈｙｐｅｒ−ｒｅｆｌｅｃｔｉｖｅ ｍａｔｅｒｉａｌ）の厚さの測定を、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において行う。一部の実施形態では、中心領域網膜下高反射体の厚さの測定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で決定する。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、中心領域網膜下高反射体の厚さの測定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域網膜下高反射体の厚さの、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少または増加を示す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域網膜下高反射体の厚さの、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少または増加を示す。

一実施形態では、網膜下高反射体の総体積の測定を、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において行う。一部の実施形態では、網膜下高反射体の総体積の測定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で決定する。一部の実施形態では、中心窩下（ｓｕｂｆｏｖｅａｌ）と非中心窩下（ｎｏｎ−ｓｕｂｆｏｖｅａｌ）の区別を行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、網膜下高反射体の総体積の測定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、網膜下高反射体の総体積の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少または増加を示す。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一部の実施形態では、中心窩下と非中心窩下の区別を行う。

一部の実施形態では、患者は、網膜下高反射体の総体積の、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少または増加を示す。一部の実施形態では、中心窩下と非中心窩下の区別を行う。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、（１）網膜内液、（２）網膜下液、（３）網膜色素上皮下液（ｓｕｂｒｅｔｉｎａｌ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ ｆｌｕｉｄ）について存在または不在の同定を行う。一部の実施形態では、前記眼の位置における液の存在または不在の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、前記眼の位置の液の存在または不在の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、（１）網膜内液、（２）網膜下液、および／または（３）網膜色素上皮下液の存在または不在を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、（１）網膜内液、（２）網膜下液、および／または（３）網膜色素上皮下液の存在または不在を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、中心窩下嚢胞（ｓｕｂｆｏｖｅａｌ ｃｙｓｔ）または非中心窩下嚢胞（ｎｏｎ−ｓｕｂｆｏｖｅａｌ ｃｙｓｔ）の存在または不在の同定を行う。一部の実施形態では、中心窩下嚢胞または非中心窩下嚢胞の存在または不在の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、前記嚢胞の存在または不在の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心窩下嚢胞または非中心窩下嚢胞の存在または不在を示す。一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心窩下嚢胞または非中心窩下嚢胞の存在の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心窩下嚢胞または非中心窩下嚢胞の存在または不在を示す。一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心窩下嚢胞または非中心窩下嚢胞の存在の減少を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、眼についての萎縮および／または線維症の同定を行う。一部の実施形態では、萎縮および／または線維症の同定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で決定する。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、萎縮および／もしくは線維症の存在の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の萎縮および／または線維症の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の萎縮および／または線維症の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、自発蛍光減少の総面積を決定する。一部の実施形態では、自発蛍光減少の領域の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、自発蛍光減少の総面積の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の自発蛍光減少の総面積の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の自発蛍光減少の総面積の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団について、眼における不連続自発蛍光の総面積を決定する。一部の実施形態では、不連続自発蛍光の総面積の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、不連続自発蛍光の総面積の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の不連続自発蛍光の総面積の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の不連続自発蛍光の総面積の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団において、中心領域色素上皮剥離の体積の測定値を決定する。一部の実施形態では、中心領域色素上皮剥離の体積の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、中心領域色素上皮剥離の体積は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域色素上皮剥離の体積の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の減少を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、中心領域色素上皮剥離の体積の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の減少を示す。

一実施形態では、（１）ＩＣＯＮ−１単独療法処置群、（２）ラニビズマブ単独療法処置群、または（３）ＩＣＯＮ−１およびラニビズマブ療法処置群に群分けされた患者または患者の集団について、眼の（１）外顆粒層、（２）外境界膜、（３）エリプソイドゾーン、および（４）中心窩下網膜色素上皮の完全性の決定を行う。一部の実施形態では、（１）〜（４）の完全性の決定を処置開始後０カ月、１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で行う。一部の実施形態では、ＣＮＶは、古典的ＣＮＶである。他の実施形態では、ＣＮＶは、潜在性ＣＮＶである。一実施形態では、（１）〜（４）の完全性の決定は、最終観察繰越（ＬＯＣＦ）法として行われる。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の（１）外顆粒層、（２）外境界膜、（３）エリプソイドゾーン、および（４）中心窩下網膜色素上皮の完全性の、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の増加を示す。

一部の実施形態では、患者は、処置開始後１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、または６カ月の時点で、眼の（１）外顆粒層、（２）外境界膜、（３）エリプソイドゾーン、および（４）中心窩下網膜色素上皮の完全性の、少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％の増加を示す。

以下の実施例を参照することにより、本発明をさらに例示する。しかし、これらの実施例は、上記の実施形態と同じく、例示的なものであり、本発明の範囲をいかなる形でも制限するものとは解釈されないことに留意するべきである。

（実施例１ ｉｎ ｖｉｔｒｏトロンビン生成アッセイにおけるｈＩ−ｃｏｎ１の評価）
血漿におけるトロンビン生成アッセイにおいてｈＩ−ｃｏｎ１（配列番号２）の効果を試験した。具体的には、トロンボグラム（ＣＡＴ様）アッセイ（Ｈｅｍｋｅｒら、２００２年、Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌ． Ｈａｅｍｏｓｔ． Ｔｈｒｏｍｂ．、３２巻、２４９〜２５３頁；Ｍａｎｎら、２００７年、Ｊ． Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．、５巻、２０５５〜２０６１頁、そのそれぞれの全体があらゆる目的に関して参照により本明細書に組み込まれる）を使用した、組織因子により開始される反応における、血漿中のトロンビン生成に対するｈＩ−ｃｏｎ１の効果を評価した。ＣＡＴ様アッセイのために、健康な個体由来のマルチドナーヒトクエン酸血漿、ヒトＦＶＩＩ欠損血漿および正常ウサギクエン酸血漿を使用した。トロンビン（第ＩＩａ因子、または活性化血液凝固因子ＩＩとも称される）生成を、ヒト再脂質付加ＴＦを用いて（ヒト血漿において）またはウサギ再脂質付加ＴＦを用いて（ウサギ血漿において）開始した。

ｈＩ−ｃｏｎ１を使用するまで−７０℃で凍結させて維持した。各試料は、製剤緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）中、１ｍＬ当たり３．０ｍｇのｈＩ−ｃｏｎ１を含むものであった。

５０％グリセロール中ヒト血漿ＦＶＩＩａをＨａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、５７ Ｒｉｖｅｒ Ｒｏａｄ、Ｅｓｓｅｘ Ｊｕｎｃｔｉｏｎ、ＶＴ ０５４５２から購入した。これを、使用するまで−２０℃で保管した。使用前に、製剤緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）中１０ｎＭまで希釈した。

Ｓｐｅｃｔｒｏｚｙｍｅ ＦＸａ（＃２２２）、脂質付加組換えヒトＴＦ試薬（カタログ番号４５００Ｌ）および脂質付加組換えウサギＴＦをＡｍｅｒｉｃａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ，Ｉｎｃ．（Ｓｔａｍｆｏｒｄ、ＣＴ）から購入し、プールした正常ヒト血漿（Ｌｏｔ＃ＩＲ１１−０２０７１１）およびウサギ血漿（Ｌｏｔ＃２６７３１）をＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｎｏｖｉ、ＭＩ４８３７７）から購入し、先天性ＦＶＩＩ欠損血漿（カタログ番号０７００）をＧｅｏｒｇｅ Ｋｉｎｇ Ｂｉｏ−Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．（Ｏｖｅｒｌａｎｄ Ｐａｒｋ、ＫＳ）から購入し、ヒト第Ｘ因子（ｈＦＸ）（＃ＨＣＸ−００５０）およびＰｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−クロロメチルケトン（ＦＰＲｃｋ；カタログ番号ＦＰＲＣＫ−０１）、トウモロコシトリプシン阻害剤（ＣＴＩ；カタログ番号ＣＴＩ−０１）をＨａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ（Ｅｓｓｅｘ Ｊｕｎｃｔｉｏｎ、ＶＴ、ＵＳＡ）から購入した。蛍光発生基質Ｚ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ・ＨＣｌをＢａｃｈｅｍ（Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）から購入し、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム塩二水和物（ＥＤＴＡ；＃Ｅ５１３４）、ＮａＣｌ（＃Ｓ７６５３）およびＨＥＰＥＳ（＃Ｈ３３７５）をＳｉｇｍａ（Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から購入した。ＨＢＳ緩衝液、ｐＨ７．４は、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのＣａＣｈおよび２０ｍＭのＨＥＰＥＳを含有するものであった。

活性部位阻害ＦＶＩＩａ（ＦＶＩＩａｉ）を所内で作製した。１、２−ジオレオイル（Ｄｉｏｌｅｏｌｙｌ）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ＰＳ；＃８４００３５）および１、２−ジオレオイル（ＤｉｏｌｅｏｙＪ）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＣ；＃８５０３７５）をＡｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ａｌａｂａｓｔｅｒ、ＡＬ、ＵＳＡ）から購入した。２５％のＰＳと７５％のＰＣとで構成されるリン脂質小胞（ＰＣＰＳ）を、その全体があらゆる目的に関して参照により本明細書に組み込まれるＨｉｇｇｉｎｓおよびＭａｎｎ、１９８３年に記載されている通り調製した。

外因性ＦＸａｓｅ
脂質付加組換えヒトＴＦ（０．１ｎＭ）を、５ｎＭの血漿ＦＶＩＩａまたは５ｎＭのｈＩ−ｃｏｎ１または両方の混合物（それぞれ５ｎＭ）のいずれかおよび１００μＭのＰＣＰＳと一緒に３７℃で１０分インキュベートした。ＦＸ（４μＭ）を添加し、選択された時点（０〜５分）で、反応混合物の１０μＬのアリコートをＨＢＳ−０．１％ＰＥＧ−２０ｍＭのＥＤＴＡ１７０μＬ中に入れてクエンチした。Ｓｐｅｃｔｒｏｚｙｍｅ ＦＸａ（０．２ｍＭ）２０μＬを添加し、基質加水分解の速度を４０５ｎｍにおける吸光度の増大（ｍＯＤ／分）として測定した。

トロンビン生成（ＣＡＴ様）アッセイ
トウモロコシトリプシン阻害剤（ＣＴＩ）を最終濃度０．１ｍｇ／ｍＬでクエン酸血漿に添加し、この血漿８０μＬをＩｍｍｕｌｏｎ（登録商標）９６ウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｃｏ．、Ｗａｌｔｈａｍ ＭＡ）に移した。望ましい場合、ｈＩ−ｃｏｎ１、血漿ＦＶＩＩａおよびＦＶＩＩａｉを選択された濃度で添加した。５ｐＭのＴＦと２０μＭのＰＣＰＳの混合物（どちらも最終濃度）２０μＬをＣＴＩ−血漿に添加し、３分間インキュベートした。０．１ＭのＣａＣｌ_２を含有するＨＢＳ中２．５ｍＭのＺＧｌｙ−Ｇｌｙ−ＡｒｇＡＭＣ・ＨＣｌ２０μＬを添加することによってトロンビン生成を開始した。基質の最終濃度は４１６μＭであり、ＣａＣｌ_２の最終濃度は１５ｍＭであった。Ｔｈｒｏｍｂｉｎｏｓｃｏｐｅ ＢＹソフトウェアを使用してトロンビン生成曲線を生成した。

結果
外因性ＦＸａｓｅにおけるｈＩ−ｃｏｎ１と血漿ＦＶＩＩａの比較
ＦＶＩＩａの２つの形態およびそれらの混合物のＦＸａ生成効率を発色アッセイにおいて決定した。ｈＩ−ｃｏｎ１は血漿ＦＶＩＩａよりも活性が低かった。ｈＩ−ｃｏｎ１の活性は、血漿ＦＶＩＩａについて観察された活性の１８％であった。両方のタンパク質を等モル（５ｎＭ）濃度で添加した場合、ＦＸａ生成の速度は個々のタンパク質について観察された速度の中間であり、これにより、ｈＩ−ｃｏｎ１が、限られた量のＴＦについて血漿ＦＶＩＩａと競合することが示される（図２）。これらのデータから、ｈＩ−ｃｏｎ１がＴＦに対して血漿ＦＶＩＩａと同様の親和性を有することも示唆される。

正常ヒト血漿におけるトロンビン生成：ＦＶＩＩａｉの効果
外因性ＦＸａｓｅにおけるｈＩ−ｃｏｎ１組織因子（ＴＦ）複合体の活性が低いことに起因して、ｈＩ−ｃｏｎ１は、ＴＦに結合して非効率的複合体にし、血漿ＦＶＩＩａとＴＦの間の効率的な複合体の形成を妨げることによって阻害剤としての機能を果たし得ると仮定した。この仮説を検定するために、公知の凝固阻害剤、すなわち、活性部位阻害ＦＶＩＩａ（Ｋｊａｌｋｅら、１９９７年）の、正常ヒト血漿におけるトロンビン生成に対する効果を評価した。１ｎＭの濃度のＦＶＩＩａｉでは、脂質付加ヒトＴＦにより開始されるトロンビン生成に対する効果はなかった（図３）。しかし、１０ｎＭのＦＶＩＩａｉでは、トロンビン生成の遅滞期が延長され、トロンビン生成の最大速度および産生されるトロンビンの最大レベルの両方が有意に抑制された。ＴＦの非存在下ではトロンビン生成は観察されなかった。

正常ヒト血漿におけるトロンビン生成：ｈＩ−ｃｏｎ１の効果
トロンビンを生成するようにＴＦを用いて開始した正常ヒト血漿におけるｈＩ−ｃｏｎ１の力価測定を行った。種々の濃度のｈＩ−ｃｏｎ１を使用したが、非常に高いｈＩ−ｃｏｎ１濃度（１μＭ）であっても、トロンビン生成の阻害は観察されなかった（図４）。

先天性ＦＶＩＩ欠損ヒト血漿におけるトロンビン生成
脂質付加ヒトＴＦを先天性ＦＶＩＩ欠損血漿に添加した際にトロンビン生成は観察されず、これにより、その血漿中に検出可能な機能的ＦＶＩＩａが存在しなかったことが示される（図５）。０．１ｎＭの血漿ＦＶＩＩａをＴＦと共に添加することにより、正常ヒト血漿において観察されたものよりもわずかに低いトロンビン生成プロファイルが生じた。ＴＦの存在下、０．１ｎＭのｈＩ−ｃｏｎ１を単独で添加することにより、トロンビン生成の開始がもたらされたが、プロセスは有意に遅延し抑制されたものであった（図５）。この結果は、外因性ＦＸａｓｅにおける低ｈＩ−ｃｏｎ１活性の観察と一致した。血漿ＦＶＩＩａおよびｈＩ−ｃｏｎ１の両方を等モル濃度（０．１ｎＭ）で添加することは、血漿ＦＶＩＩａ単独により開始されるトロンビン生成を損なわなかった。

正常ウサギ血漿におけるトロンビン生成
ウサギ血漿におけるトロンビン生成を、脂質付加ウサギＴＦを用いて開始した。この血漿に１ｎＭのｈＩ−ｃｏｎ１を添加することには、トロンビン生成に対する明白な効果はなかった（図６）。同様に、１０ｎＭのＦＶＩＩａｉを添加した場合にも明白な効果は観察されなかった。より高いｈＩ−ｃｏｎ１濃度（１０〜１０００ｎＭ）では、トロンビン生成のいくらかの抑制が観察された。しかし、ＴＦを添加しない対照実験ではトロンビン生成が導かれ、これにより、ＴＦが内因的に存在することが示唆される。

遠心分離したウサギ血漿におけるトロンビン生成
ウサギ血漿の遠心分離後、内因性トロンビン生成活性は完全には消失しなかったが、有意に低下した（図７）。１０ｎＭのＦＶＩＩａｉを添加した場合、ＴＦに誘発されるトロンビン生成の抑制は観察されなかった。同様に、１〜１００ｎＭのｈＩ−ｃｏｎ１を添加した場合にも抑制は観察されず、高濃度（１μＭ）のｈＩ−ｃｏｎ１を添加した場合には、トロンビン生成の限られた減少のみが観察された（図７）。これらのデータから、生理的に関連する濃度では、ｈＩ−ｃｏｎ１はウサギＴＦについてウサギＦＶＩＩａと競合しないことが示される。

結論
ｈＩ−ｃｏｎ１は、クエン酸血漿環境では血漿ＦＶＩＩａとＴＦについて競合しない。ｈＩ−ｃｏｎ１は、ヒト血漿においてヒトＴＦにより開始されるトロンビン生成またはウサギ血漿においてウサギＴＦにより開始されるトロンビン生成のいずれに対しても明白な（あったとしても）効果を有さない。ｈＩ−ｃｏｎ１により出血または血栓性合併症が引き起こされる可能性は低い。

（実施例２ ブタにおける脈絡膜血管新生に対するｈＩ−ｃｏｎ１を用いた処置の効果）
この試験では、ブタ滲出型ＡＭＤモデル（Ｋｉｉｌｇａａｒｄら、２００５年、Ａｃｔａ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． Ｓｃａｎｄ．、８３巻、６９７〜７０４頁、その全体があらゆる目的に関して参照により本明細書に組み込まれる）におけるｈＩ−ｃｏｎ１活性および活性のための最適な用量を調査した。さらに、硝子体内注射により投与した場合のｈＩ−ｃｏｎ１の安全性を決定した。

この試験では、ｈＩ−ｃｏｎ１の硝子体内注射により、このブタモデルにおける確立されたレーザー誘起ＣＮＶの破壊がもたらされることが実証された。ｈＩ−ｃｏｎ１の注射は、良好に耐容され、効果は用量に関連し、ＥＤ_５０は１３．５μｇ／用量であった。ｈＩ−ｃｏｎ１の主要な分解生成物（１００ｋＤａ）を試験し、同様に良好に耐容され、１６．２μｇ／用量のＥＤ_５０を有し、有効であった。

試験品
ｈＩ−ｃｏｎ１
ｈＩ−ｃｏｎ１は、Ｌａｕｒｅａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｉｎｃ．、２０１ Ｅ．Ｃｏｌｌｅｇｅ Ａｖｅ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、ＮＪ、０８５４０から提供された。ｈＩ−ｃｏｎ１を使用するまで−７０℃で凍結させて維持した：Ｌｏｔ ＰＵＲＩＣ１ ０８０４０２（ＳＥＣ Ｆｒ １０−１４）、それぞれが製剤緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）中２．０ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬおよび０．２５ｍｇ／ｍＬで２００μＬを含有する２つのバイアル。

ｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤ断片
以下の、ｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤ断片の試料がＬａｕｒｅａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｉｎｃ．２０１ Ｅ．Ｃｏｌｌｅｇｅ Ａｖｅ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、ＮＪ、０８５４０から提供された。断片を使用するまで−７０℃で凍結させて維持した：Ｌｏｔ ＰＵＲＩＣ１ ０８０４０２（ＳＥＣ Ｆｒ １５）、それぞれが製剤緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）中２．０ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬおよび０．２５ｍｇ／ｍＬで２００μＬを含有する２つのバイアル。

対照品
製剤緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）をビヒクル対照として使用した。

試験動物
２つの試験を、それぞれ５つの群（試験品ごとに１つの群）を用いて行った。ユカタンミニブタ（Ｓｕｓ ｓｃｒｏｆａ）、１０〜１２週齢、それぞれ体重およそ２０キログラムをＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｂｒｏｗｎｓｔｏｗｎ、ＩＮ、ＵＳＡ）から購入した。

畜産
各ブタを、ブタ４匹を収容した共同環境の中、別々のケージ内で維持した。照明はコンピュータ制御し、６ａｍ〜６ｐｍサイクルに設定した。平均温度は７０〜７２°Ｆにし、＋／−１程度の変動を伴った。湿度は３０％から７０％の間で維持し、平均湿度は３３％と同等であった。動物を、到着時に大型動物畜産監督者および免許を受けた獣医技師が評価し、かつ、安楽死させるまで週１回、免許を受けた獣医技師が評価した。獣医師が動物を評価して、あらゆる異常または懸念がないかどうか決定した。動物を実験前に約１週間にわたって検疫した。

飼料および水
毎日の飼料および水をミニブタに供給した。干し草を寝床とし、それらは飼料の補充物としての機能を果たした。飼料は、Ｐｕｒｉｎａ Ｍｉｌｌｓ、ＬＬＣ、５５５ Ｍａｒｙｖｉｌｌｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｄｒｉｖｅ、Ｓｕｉｔｅ ５００、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ ６３１４１により製造されたＰｕｒｉｎａ＃５０８４、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｇｒｏｗｅｒ Ｄｉｅｔであり、１日当たり体重の２％を供給した。水は０．５ミクロンで濾過した水道水であった。水は、水道会社によるものおよび報告書が年１回精査される以外は、夾雑物について日常的な分析は行わなかった。

種の正当化
ｈＩ−ｃｏｎ１の異種間の活性は限られており、ブタは、ｈＩ−ｃｏｎ１が活性であるわずかな実験動物種のうちの１つである。ブタの硝子体腔はおよそ３ｍＬであり、妥当な体積の試験品を硝子体内注射することが可能である。ブタの眼は、ヒト黄斑と類似した網膜のいくつかの錐体優性領域に加えて、ヒトとの網膜血管類似性を有する。

方法
レーザー誘起脈絡膜血管新生
全身麻酔下で、１％トロピカミドおよび２．５％フェニレフリンを用いて動物の瞳孔を散大させた。二重周波数ＹＡＧレーザー（５３２ｎｍ）を用いる間接的な検眼鏡を使用し、２．２Ｄレンズおよび以下のレーザーパラメータ：レーザーパワー１０００〜１５００ｍＷ、持続時間０．１秒、および反復率５００ミリ秒を使用して眼当たり７４スポットを送達した。レーザー処置は、ブルッフ膜の微小断裂が生じ、それにより、２週間以内にレーザースポットの６０〜７０％でＣＮＶが生じるように設計した（Ｂｏｒａら、２００３年、その全体があらゆる目的に関して参照により本明細書に組み込まれる）。
試験デザイン

試験デザインを下の表３に要約する。

０日目に、ブタ５匹の２つの群の両眼に脈絡膜血管新生を誘導した。表３に示されている通り、１０日目に、０．２５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬまたは２．０ｍｇ／ｍＬのｈＩ−ｃｏｎ１（試験１）またはその１００ｋＤ断片（試験２）の溶液１００μＬを硝子体内注射によってブタの両眼に投与した。１０日目に、製剤緩衝液１００μＬを硝子体内注射によって対照ブタの両眼に投与した。

試験品および対照品の投与
動物を、塩酸ケタミン（４０ｍｇ／ｋｇ）と塩酸キシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）の混合物を用いて麻酔した。瞼を５％ポビドン−ヨウ素溶液で洗浄し、領域を滅菌アイドレープで覆うことを伴う厳密な滅菌技法を使用して注射を行った。滅菌開瞼器（ｌｉｄ ｓｐｅｃｕｌｕｍ）を使用して注射部位の露出を維持した。注射は全て、１ｍＬのツベルクリンシリンジで３０ゲージの針を使用して、縁から毛様体輪を通って２ｍｍで実施した。注射後、２％シクロペントレートおよび抗生物質軟膏剤の液滴を眼に入れた。動物を毎日、結膜充血、眼圧の上昇、前部ぶどう膜炎、硝子体炎、または眼内炎の徴候について検査し、１４日目に屠殺した。

最終手順
１４日目に、ブタをケタミンとキシラジンの８：１混合物で麻酔し、耳静脈に、３ｍｇ／ｍＬの平均分子量２×１０^６のフルオレセイン標識デキストランを含有するＰＢＳ １０ｍＬを灌流した（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）。眼から眼球を摘出し、毛様体輪に４つの刺入創を作り、その後、４％パラホルムアルデヒド中に４℃で１２時間にわたって固定した。角膜および水晶体を取り除き、神経感覚網膜を眼杯から解離させ、眼杯の縁から赤道まで４つの放射状の切れ目を作った。脈絡膜−網膜色素上皮（ＲＰＥ）複合体を強膜から分離し、内部表面（ＲＰＥ）を上向きにしてＡｑｕａｍｏｕｎｔ中、ガラススライド上のフラットマウントとした。フラットマウントをエラスチンに対するモノクローナル抗体（Ｓｉｇｍａ）およびＣｙ３とコンジュゲートした二次抗体（Ｓｉｇｍａ）で染色し、共焦点顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ ＬＳＭ５１０、Ｔｈｏｒｎｗｏｏｄ、ＮＹ、ＵＳＡ）で検査した。デキストランとコンジュゲートしたフルオレセインで満たされた脈管構造は緑色に染色され、ブルッフ膜内のエラスチンは赤色に染色された。ブルッフ膜のレベルを、レーザースポットおよびその周囲で収集した一連のｚスタック画像内の強い赤色シグナルを使用して共焦点顕微鏡によって決定した。ＣＮＶの存在はブルッフ膜の平面を超える分枝した直線的な緑色シグナルによって示された。ＣＮＶの不在は、非常にストリンジェントな基準の下で、スポットにおける血管中の緑色蛍光の完全な不在として定義された（Ｔｅｚｅｌら、２００７年、Ｏｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｎｆｌａｍｍ、１５巻、３〜１０頁を参照されたい）。

統計解析
異なる用量のｈＩ−ｃｏｎ１またはその１００ｋＤ断片での、ＣＮＶを有するレーザースポットの百分率をカイ二乗検定によって対比較した。結果をｈＩ−ｃｏｎ１用量に対してプロットして、最良適合曲線を導出し、それを使用して、ＣＮＶを有するレーザースポットの割合を５０％減少させるｈＩ−ｃｏｎ１の用量（ＥＤ_５０）を算出した。信頼水準ｐ＜０．０５を統計的に有意であるとみなした。

結果
ｈＩ−ｃｏｎ１を用いた硝子体内処置のＣＮＶに対する効果
対照眼におけるレーザースポットの７１．９±５．８％において脈絡膜血管新生が発生した。１０日目にブタの眼にｈＩ−ｃｏｎ１を単回硝子体内注射すること（各用量でｎ＝２）により、１４日目に、試験した全ての用量、すなわち、２５〜２００μｇで網膜下ＣＮＶが有意に減少した（表４；図８）。ｈＩ−ｃｏｎ１の阻害効果は、５パラメータＳ字ワイブル曲線に良好にフィッティングする。ＣＮＶの収率の５０％減少を引き起こす用量（ＥＤ_５０）は１３．５μｇであった。

ｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤ断片を用いた硝子体内処置のＣＮＶに対する効果
対照眼におけるレーザースポットの８５．６±４．１％において脈絡膜血管新生が発生した。１０日目にブタの眼にｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤａの断片を単回硝子体内注射すること（各用量でｎ＝２）により、１４日目に、試験した全ての用量、すなわち、２５〜２００μｇで網膜下ＣＮＶが有意に減少した（表４、図９）。ｈＩ−ｃｏｎ１の阻害効果は、５パラメータＳ字ワイブル曲線に良好にフィッティングする。ＣＮＶの収率の５０％減少を引き起こす用量（ＥＤ_５０）は１６．２μｇであった。

ｈＩ−ｃｏｎ１およびその１００ｋＤ断片を２５〜２００μｇの用量で硝子体内注射することにより、注射を行った４日後に、既存のレーザー誘起ＣＮＶの有意な退縮が引き起こされた。病変の注射に対する応答は、明白に用量に関連し、ＥＤ_５０用量はそれぞれ１３．５μｇおよび１６．２μｇであった。これらの結果から、ｈＩ−ｃｏｎ１の１００ｋＤ断片の比活性がインタクトな分子の比活性と同様であることが示される。１００μｇを超える用量によるＣＮＶの追加的な減少はほんのわずかであり、したがって、このモデルにおいて効果的な用量は、１００μｇ以下である。

（実施例３ 正常ヒト組織を用いたｈＩ−ｃｏｎ１の組織交差反応性試験）
この試験では、ｈＩ−ｃｏｎ１の正常ヒト組織への結合を、標準の組織交差反応性（ＴＣＲ）試験において標準の免疫組織化学（ＩＨＣ）技法を使用して評価した。正常ヒト組織、ならびに陽性対照ヒト組織および陰性対照ヒト組織のＩＨＣ染色のためにビオチン化ｈＩ−ｃｏｎ１の単一のバッチを利用して試験を実施した。陽性染色結果から、ｈＩ−ｃｏｎ１のヒトｉｎ ｖｉｖｏへの投与に付随する潜在的な毒性が示される。

このモデルでは、陽性対照結腸癌腫瘍においてのみ組織染色が観察された。他の正常ヒト組織は全て免疫反応性を示さなかった。これらの所見から、ｈＩ−ｃｏｎ１結合が異常な組織に特異的であり、正常組織への結合は観察されないことが示される。

（実施例４ ｈＩ−ｃｏｎ１の脂質付加組織因子への結合の評価）
種交差比較を可能にするために、ｈＩ−ｃｏｎ１およびｈＦＶＩＩａのヒト脂質（ｌａｐｉｄａｔｅ）付加ＴＦ（ｈＴＦ）およびウサギ脂質付加ＴＦ（ｒＴＦ）への結合の動態のＢｉａｃｏｒｅ試験を行った。

下に詳細に記載されている通り、ｈＩ−ｃｏｎ１およびｈＦＶＩＩａはどちらも高くほぼ同等の親和性で脂質付加ｈＴＦに結合した。

材料および方法
脂質付加ウサギ組織因子（ｒＴＦ；製品＃４５２０Ｌ；Ｌｏｔ＃０５１０１７）はＡｍｅｒｉｃａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａから購入した。脂質付加ヒト組織因子（ｈＴＦ；Ｌｏｔ ＦＩＬ１０５ＨＯ１）は、Ｍａｒｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、３７８ Ｂｅｌ Ｍａｒｉｎ Ｋｅｙｓ、Ｎｏｖａｔｏ、ＣＡ ９４９４９から供給された。

ｈＩ−ｃｏｎ１；１ｍｌ；１００μｇ／ｍｌ；ＭＷ１５７ｋＤａ

ヒトＦＶＩＩａ；Ｌｏｔ＃Ａ０９０５０５２５（Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ）；１．０１ｍｇ／ｍｌ；４０μＬ／バイアル；ＭＷ５０ｋＤａ

機器：Ｂｉａｃｏｒｅ３０００；ＣＭ５センサーチップ
プロテオリポソーム固定化（アミンカップリング）プロトコールに関するＧＥ手順を使用してＰＳ／ＰＣ／ｒＴＦをフローセル２に、およびＰＳ／ＰＣ／ｈＴＦをフローセル３にコーティングした。フローセルを、ランニング緩衝液（１５ｍＭのＨｅｐｅｓ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）を毎分５μＬの流量で用いて平衡化した。動態の解析を、３７℃で、ランニング緩衝液（１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、２５ｍＭのアルギニン、０．０１％Ｔｗｅｅｎ８０、ｐＨ７．４）中各検体を漸増濃度（０〜１０ｎＭ）でセンサーチップ上に５分間継続的に流し、その後、並行して毎分３０μＬの流量で１０分間の解離期間を置くことによって実施した。

検体の脂質付加ＴＦへの結合を、参照フローセル１で認められたＲＵ値をフローセル２および３から引くことによって決定した。検体のＴＦへの結合をリアルタイムでモニターして、結合速度（ｋａ）および解離速度（ｋｄ）を得た。観察されたｋａおよびｋｄから平衡解離定数（ＫＤ）を算出した。

チップを、ＨＥＰＥＳ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．４）中１０ｍＭのＥＤＴＡで３分間パルスすることで再生させた。

ｒＴＦのチップへの捕捉−フローセル２にウサギＴＦ（＞レゾナンスユニット［ＲＵ］１０，０００）をアミンカップリングによってコーティングした。フローセル３にヒトＴＦ（＞ＲＵ８，０００）をアミンカップリングによってコーティングした。

チップに捕捉される試験リガンドの量（ＲＬ）の決定
本実験では、リガンド−検体相互作用の測定のために望ましいＲ_Ｍａｘのレベルは、１０，０００レゾナンスユニット（「ＲＵ」）で捕捉されたｒＴＦにより、Ｒ_Ｍａｘが１５ＲＵでのｈＩ−ｃｏｎ１の結合が示され、８，０００ＲＵで捕捉されたｈＴＦにより、Ｒ_Ｍａｘが１０ＲＵでのｈＩ−ｃｏｎ１の結合が示された以前の実験によって決定された値に基づくものであった。チップ上に捕捉される検体の量は相互作用タンパク質の分子量に依存する。これは、次式：

Ｒ_Ｍａｘ＝ＭＷ_Ａ／ＭＷ_Ｌ・Ｒ_Ｌ
によって決定される。

ＭＷ_Ａは、検体の分子量（ｈＩ−ｃｏｎ１について１５７ｋＤａ、ｈＦＶＩＩａについて５０ｋＤａ、およびＩｇＧ１について１５０ｋＤａ）である。

ＭＷ_Ｌは、リガンドの分子量であり、このアッセイでは、非常に大きい（３５ｋＤａの倍数）ことが予想される。
抗体溶液の流量

リガンドを捕捉するために使用した流量は毎分１０μＬであった。

動態解析のためには、毎分３０μＬの流量を使用した。

動態の解析
検体の飽和濃度に基づいて、ウサギＴＦについて０〜５００ｎＭおよびヒトＴＦについて０〜５０ｎＭの飽和検体濃度を使用して結合解析を実施した。実際のセンサーグラムと算出された結合速度および解離速度の間でカイ二乗（χ^２）解析を行って解析の精度を決定した。

２までのχ^２値が有意（精度が高い）であるとみなされ、および１未満が高度に有意（極めて精度が高い）であるとみなされる。

結果
Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ結果を以下の表６に提示する。

以下の表７に示されている通り、ｈＩ−ｃｏｎ１およびｈＦＶＩＩａはどちらも高くほぼ同等の親和性で脂質付加ｈＴＦに結合した。どちらのリガンドも、脂質付加ｒＴＦにもおよそ１０分の１の親和性で結合した。

（実施例５ 加齢黄斑変性症に続発するＣＮＶを有する患者においてｈＩ−ｃｏｎ１を評価するランダム化、二重盲検、多施設、実対照試験）
この試験では、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）に続発する脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）を有する患者において、単独療法としてまたはラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ）と組み合わせて投与されたｈＩ−ｃｏｎ１の硝子体内注射の安全性をラニビズマブ単独療法と比較して評価する。

さらに、単独療法としてまたはラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ）と組み合わせて投与されたｈＩ−ｃｏｎ１の生物学的活性および薬力学的効果をラニビズマブ単独療法と比較して評価する。

本実施例において示される試験は、ランダム化、二重盲検、多施設、実対照試験である。この試験に登録された患者は、ＣＮＶに対する処置に関してナイーブである。患者を、選択された試験眼における以下の３つの処置アームのうちの１つに１：１：１の比でランダムに割り当てる：
・ｈＩ−ｃｏｎ１単独療法（０．３ｍｇ）＋偽注射
・ラニビズマブ単独療法（０．５ｍｇ）＋偽注射
・ｈＩ−ｃｏｎ１（０．３ｍｇ）＋ラニビズマブ（０．５ｍｇ）併用療法

ランダム化を、試験眼におけるベースラインでの最高矯正視力（ＢＣＶＡ）文字スコア（≦５４文字対≧５５文字）によって、および試験場所によって層別化する。

患者は、各注射来診時に最大２回の硝子体内注射を受ける。処置アームの間で試験盲検性（ｓｔｕｄｙ ｍａｓｋ）を維持するために、単独療法を受ける患者に偽注射を使用する。

患者に、４週間ごとに１回、０カ月、１カ月および２カ月の時点で試験眼に硝子体内注射を行う。３カ月以後（３カ月、４カ月および５カ月）、患者を、割り当てられた処置アームに応じて、個々の観察された処置応答に基づいて再処置する。盲検化された研究者が、以下の再処置基準を使用して（個々の患者の応答のカテゴリーに基づいて）、これらの来診時に処置が必要であるかどうかを決定する：
・前の予定来診と比較してＡＭＤに起因するＢＣＶＡの５文字以上の減少。
・前の予定来診と比較して、ＢＣＶＡ変化とは独立したＣＮＶ活性の上昇の任意の解剖学的エビデンス（例えば、新しいまたは増加した液および／または漏出、出血）。
・ベースライン（来診２）と比較してＢＣＶＡに変化がないが、持続的なＣＮＶ活性（例えば、ベースラインと比較して同じ持続的な液およびＣＳＴ）の解剖学的エビデンスが存在すること。

６カ月の処置中および経過観察期間中の任意の時点で、以下の条件のいずれかが生じた場合に付加療法として試験眼にラニビズマブ０．５ｍｇを用いたレスキュー処置を行う：
・ベースライン（来診２）と比較して、ＡＭＤに起因するＢＣＶＡの１５文字以上の減少。
・２回の連続した来診時に確認される、ベースライン（来診２）から１０文字以上のＡＭＤに起因するＢＣＶＡの減少。ベースラインと比較して１０文字以上減少した患者は、予定されていない来診での追加的な経過観察のために７日以内にまたはできるだけ早く戻るよう求められる。

盲検化された医師により、上記の基準に応じてレスキュー処置が必要かどうかの決定がなされる。

予定注射来診の間に試験眼にレスキュー処置を行う場合、試験盲検性の維持を確実にするために、非盲検化された医師がレスキュー処置を行い、患者の予定試験処置／再処置は以下の通りである。
・ｈＩ−ｃｏｎ１単独療法アーム：ｈＩ−ｃｏｎ１（０．３ｍｇ）＋レスキュー療法（ラニビズマブ０．５ｍｇ）。
・ラニビズマブ単独療法アーム：ラニビズマブ（０．５ｍｇ）＋偽注射。
・併用療法：ｈＩ−ｃｏｎ１（０．３ｍｇ）＋ラニビズマブ（０．５ｍｇ）。

予定されていない来診時に試験眼にレスキュー処置を行う場合、非盲検化された医師が要望に応じてレスキュー処置を行う。

試験眼にレスキュー処置を行う場合、患者は、次の来診についてプロトコールに従って試験来診スケジュールを継続し、割り当てられたランダム化アームに応じて試験処置を受け続ける。

有害事象の追跡、臨床検査（血清化学、血液学および凝固）、バイタルサイン測定、簡易身体検査、細隙灯生体顕微鏡検査、眼圧（ＩＯＰ）ならびに拡張型検眼鏡検査によって安全性を評価する。薬力学的活性および生物学的活性を、ＥＴＤＲＳ視力表によるＢＣＶＡの平均、スペクトルドメイン光干渉断層撮影（ｓｄＯＣＴ）、カラー眼底撮影（ＣＦＰ）、蛍光眼底撮影（ＦＡ）、眼底自発蛍光（ＦＡＦ）、対比感度、および微小視野計測（ｍｉｃｒｏｐｅｒｉｍｅｔｒｙ）によって測定する。薬物動態（ＰＫ）および免疫原性をｈＩ−ｃｏｎ１および抗薬物抗体の血漿濃度を測定することによって評価する。

記載されている発明はその特定の実施形態を参照して説明されているが、当業者は、本発明の真の主旨および範囲から逸脱することなく、種々の変化を行うことができ、また均等物で代用することができることが理解されるべきである。さらに、特定の状況、材料、物質の組成物、プロセス、プロセスの１つまたは複数のステップが、記載されている発明の目的の主旨および範囲に適合するように多くの改変を行うことができる。そのような改変は全て、添付されている特許請求の範囲の範囲内にあるものとする。

本明細書において参照されている特許、特許出願、特許出願公開、学術論文およびプロトコールは、それらの全体があらゆる目的に関して参照により組み込まれる。

Claims (54)

1. 滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の処置を必要とする患者の眼における滲出型ＡＭＤを処置するための方法であって、前記患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を複数回の投薬セッションで投与するステップを含み、前記二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む、方法。
2. 前記滲出型ＡＭＤを処置することが、処置を必要とする前記患者の眼における脈絡膜血管新生を予防する、阻害する、または逆転させることを含む、請求項１に記載の方法。
3. 眼の血管新生の予防、阻害、または逆転を必要とする患者の眼における眼の血管新生を予防する、阻害する、または逆転させるための方法であって、前記患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を複数回の投薬セッションで投与するステップを含み、前記二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む、方法。
4. 腫瘍血管新生の逆転を必要とする患者における腫瘍血管新生を逆転させるための方法であって、前記患者に、有効量の免疫コンジュゲート二量体を含む組成物を複数回の投薬セッションで投与するステップを含み、前記二量体の単量体サブユニットのそれぞれが、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）Ｆｃドメインとコンジュゲートした変異ヒト第ＶＩＩａ因子（ｆＶＩＩａ）タンパク質を含む、方法。
5. 前記免疫コンジュゲート二量体が、ホモ二量体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記免疫コンジュゲート二量体が、ヘテロ二量体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記免疫コンジュゲートの前記単量体サブユニットの少なくとも一方が、Ｌｙｓ３４１またはＳｅｒ３４４における単一の点変異を含む変異ヒトｆＶＩＩａドメインを含む、請求項５または６に記載の方法。
8. 前記単一の点変異が、Ａｌａ残基への点変異である、請求項７に記載の方法。
9. 前記単一の点変異が、Ｌｙｓ３４１からＡｌａ３４１への点変異である、請求項８に記載の方法。
10. 前記単一の点変異が、Ｓｅｒ３４４からＡｌａ３４４への点変異である、請求項８に記載の方法。
11. 前記眼の血管新生が、増殖性糖尿病性網膜症、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、または血管形成緑内障に付随するものである、請求項３および５から１０に記載の方法。
12. 前記眼の血管新生が、増殖性糖尿病性網膜症、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、または血管形成緑内障に続発するものである、請求項３および５から１０のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記眼の血管新生が、脈絡膜血管新生である、請求項３および５から１０のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記患者が、眼において滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を有すると以前に診断されている、請求項１３に記載の方法。
15. 前記脈絡膜血管新生が、滲出型ＡＭＤに続発するものである、請求項１３に記載の方法。
16. 前記患者の眼が、脈絡膜血管新生または滲出型ＡＭＤについて、処置を以前に受けていない、請求項１４または１５に記載の方法。
17. 前記患者が、脈絡膜血管新生について、抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）治療、レーザー治療または外科手術を用いた処置を以前に受けている、請求項１４または１５に記載の方法。
18. 投与するステップが、各投薬セッションにおいて前記組成物を硝子体内注射することを含む、請求項１から３および５から１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 投与するステップが、各投薬セッションにおいて前記組成物を脈絡膜上注射することを含む、請求項１から３および５から１７のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記複数回の投薬セッションが、２回もしくはそれよりも多く、３回もしくはそれよりも多く、４回もしくはそれよりも多く、または５回もしくはそれよりも多くの投薬セッションを含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 各投薬セッション間に、約２０日から約５０日まで、または約２０日から約４０日まで、または約２０日から約３０日までの間隔を置く、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記複数回の投薬セッションが、１２〜２４回の投薬セッションを含む、請求項２０または２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 投与するステップが、前記組成物を前記患者の眼に２８日毎に１回、３０日毎に１回または３５日毎に１回、硝子体内注射することを含む、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法。
24. 前記免疫コンジュゲートが、配列番号２または３のアミノ酸配列を含む、請求項１から５および７から２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記免疫コンジュゲートが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項２４に記載の方法。
26. 前記免疫コンジュゲートが、配列番号３のアミノ酸配列を含む、請求項２４に記載の方法。
27. 前記免疫コンジュゲートが、配列番号４を含むポリヌクレオチド配列によってコードされる、請求項２４に記載の方法。
28. 前記免疫コンジュゲートが、配列番号５を含むポリヌクレオチド配列によってコードされる、請求項２４に記載の方法。
29. 投与するステップが、静脈内投与を含む、請求項４から１０および２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 投与するステップが、腫瘍内注射を含む、請求項４から１０および２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
31. 前記患者が、前記複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値の減少が前記複数回の投薬セッション前の前記患者のＢＣＶＡ測定値と比較して１５文字未満であることによって測定される通り、実質的に視覚を維持する、請求項１から３および５から２８のいずれか一項に記載の方法。
32. 前記患者が、前記複数回の投薬セッション後に、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）測定値が前記複数回の投薬セッション前の前記患者のＢＣＶＡと比較して１５文字増加することによって測定される通り、視覚の改善を経験する、請求項１から３および５から２８のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記複数回の投薬セッションまたは前記投薬セッションのうちの１つまたは複数の後に、蛍光眼底撮影または光干渉断層撮影によって測定して、前記患者の眼においてＣＮＶ領域が処置開始前のＣＮＶ領域と比較して減少する、請求項１から３、５から２８、および３１から３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 前記ＣＮＶ領域が、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％または少なくとも約５０％減少する、請求項３３に記載の方法。
35. 前記複数回の投薬セッションまたはそのサブセットの後に、前記患者の眼において前記患者の眼の網膜厚が、処置開始前の眼の網膜厚と比較して減少する、請求項１から３、５から２８、および３１から３４のいずれか一項に記載の方法。
36. 前記網膜厚が、少なくとも約５０μｍ、少なくとも約１００μｍ、少なくとも約１５０μｍ、少なくとも約１７５μｍ、少なくとも約２００μｍ、少なくとも約２２５μｍまたは少なくとも約２５０μｍ減少する、請求項３４に記載の方法。
37. 前記網膜厚が、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％または少なくとも約５０％減少する、請求項３４に記載の方法。
38. 前記網膜厚の減少が、中心領域網膜厚（ＣＳＴ）の減少、中心点網膜厚（ＣＰＴ）の減少、または中心窩網膜厚（ＣＦＴ）の減少である、請求項３５から３７のいずれか一項に記載の方法。
39. 各硝子体内注射または脈絡膜上注射の前に前記患者の眼における眼圧（ＩＯＰ）を測定するステップをさらに含む、請求項１８から２８および３１から３８のいずれか一項に記載の方法。
40. 各硝子体内注射または脈絡膜上注射の約２０分後、約３０分後、約４０分後、約５０分後または約１時間後に前記患者の眼におけるＩＯＰを測定するステップをさらに含む、請求項１８から２８および３１から３９のいずれか一項に記載の方法。
41. 各硝子体内注射または脈絡膜上注射の約２０分前、約３０分前、約４０分前、約５０分前または約１時間前に前記患者の眼におけるＩＯＰを測定するステップを含む、請求項３９に記載の方法。
42. 前記ＩＯＰが眼圧測定によって測定される、請求項３９から４１のいずれか一項に記載の方法。
43. 有効量の血管新生阻害剤または血管形成阻害剤を前記患者に投与するステップをさらに含む、請求項１から４２のいずれか一項に記載の方法。
44. 前記血管新生阻害剤または前記血管形成阻害剤が、前記有効量の前記免疫コンジュゲートと同じ組成物中に存在する、請求項４３に記載の方法。
45. 前記血管新生阻害剤または前記血管形成阻害剤が、前記有効量の前記免疫コンジュゲートとは異なる組成物中に存在する、請求項４３に記載の方法。
46. 前記血管新生阻害剤が、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤、ＶＥＧＦ受容体阻害剤、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）阻害剤またはＰＤＧＦ受容体阻害剤である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の方法。
47. 前記血管新生阻害剤が、ラニビズマブである、請求項４６に記載の方法。
48. ラニビズマブの投与量が、約０．２ｍｇから約１ｍｇまでである、請求項４７に記載の方法。
49. ラニビズマブの投与量が、０．３ｍｇまたは０．５ｍｇである、請求項４７または４８に記載の方法。
50. ラニビズマブが、前記患者の眼に硝子体内注射によって投与される、請求項７から４９のいずれか一項に記載の方法。
51. 前記有効量の前記血管新生阻害剤または前記血管形成阻害剤を含む前記組成物が、前記患者の眼に硝子体内注射によって投与される、請求項４３から５０のいずれか一項に記載の方法。
52. 前記有効量の前記血管新生阻害剤を含む前記組成物が、前記複数回の投薬セッションのそれぞれにおいて投与される、請求項５１に記載の方法。
53. 各投薬セッションが、約２００μｇから約４００μｇの間の前記免疫コンジュゲート二量体を投与することを含む、請求項１８から２２のいずれか一項に記載の方法。
54. 前記投与が、約３００μｇの前記免疫コンジュゲート二量体の投与である、請求項５３に記載の方法。