JP2018502145A - 転移性疾患を処置するためのrankl特異的薬剤 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、血液中の前転移性病変(leasons)を防ぐまたは減少させるためにがん患者を処置することにおける使用のためのヒト血小板発現核内因子κB活性化受容体リガンド(pRANKL)を認識するRANKL特異的アンタゴニスト剤を提供する。特に、医学的使用は、がん細胞を有する血小板の前転移性循環細胞凝集物の予防または減少を含む。かかる凝集物は、pRANKLを発現する活性化血小板としての血小板を特に含む。特に、RANKL特異的アンタゴニスト剤は、血液中のかかる前転移性循環細胞凝集物の形成時に転移を促進するRANK−RANKL相互作用時にシグナルの伝達を防ぐ、または血液中のかかる前転移性循環細胞凝集物の形成を防ぐ有効量で使用される。
a)前転移性腫瘍細胞の内転移を阻害し、
b)pRANKLを発現するまたはRANK−RANKLシグナル伝達を誘発する血小板および/もしくはがん(または腫瘍)細胞の活性化を阻害し、それによって、細胞がプロ転移性になる形質転換を阻害し、ならびに/または
c)場合により、転移形成が後に続く血行性(haematogeneous)伝播を発症するリスクを阻害する。
特に、がん細胞は、RANK陽性がん細胞から生じる。がん細胞は、RANK陽性腫瘍形成がん細胞または腫瘍細胞、特に、固形腫瘍細胞、または血液および造血器官に関わるRANK陽性がん細胞、例えば、白血病とすることができる。特に、前転移性病変は、ニッチを形成し、それによって、例えば、遠隔器官もしくは骨転移におけるがん転移を促進するまたは転移を発症するリスクを増加させる循環前転移性細胞集団と考えられる活性化血小板−がん細胞凝集物を決定することによって同定される。活性化血小板と相互作用すると、がん細胞は、前転移性病変のさらなる特徴であるRANKL陽性がん細胞に形質転換され得る。かかる血小板−がん細胞凝集物は、血液由来であるので、転移性リスクまたは潜在性も血液由来または血行性と称される。
特に、薬剤は、pRANKL単量体、または血小板の表面上で相互作用しているRANKL分子の多量体などの多量体に結合し、例えば、ここで、1つまたは複数のpRANKL分子は、互いに相互作用している、かつ/または血小板に結合していない1つまたは複数のRANKL分子、もしくはsRANKLと相互作用している血小板の表面上で結合している。かかる多量体は、二量体、または三量体、またはより高い多量体とすることができ、血小板表面結合pRANKLおよび/もしくは血小板表面から切断されたpRANKL、ならびに/またはsRANKL、および/またはmRANKLと複合体を好ましくは形成する。したがって、結合は、例えば、血小板の表面上で、血小板とがん細胞間の微小環境中で、または血小板表面からのpRANKLの切断時に循環中で起こり得る。
特定の態様によれば、処置は、腫瘍の少なくとも部分を除去するための外科的介入と組み合わせられる、かつ/または放射線療法と組み合わせられ、薬剤は、ネオアジュバントまたはアジュバント療法のために投与される。したがって、患者は、特に、外科的介入および/もしくは放射線療法の準備をしているまたはこれらを受けている、または外科的介入および/もしくは放射線療法によって処置され、外科手術前または後に本発明による薬剤でさらに処置される。特定の例によれば、かかる処置は、外科手術前1から30日、または外科手術中、または外科手術後1から30日以内に開始し得、薬剤は、連続した期間、例えば、1から12カ月間、またはさらに長く投与され得、ここで、薬剤は、定期的間隔で投与される。外科的介入は、例えば、腫瘍塊の治療的除去、または生検である。外科手術は、それによって、血小板−腫瘍細胞凝集物形成を誘発する、血流中へ腫瘍細胞を播種する特定のリスク因子と考えられる。同様に、放射線療法は、腫瘍細胞の血行性伝播をトリガーし得る。したがって、本発明の方法は、固形腫瘍細胞を潜在的に播種する外科手術および/または放射線療法との組合せで特に示される。
デノスマブを用いる先行技術の療法は、皮下処置に典型的に関わる。本発明は、RANKLを発現する活性化循環血小板、または循環血小板−がん細胞凝集物を標的にする。したがって、静脈内経路が特に好ましい。
本発明は、固形腫瘍の少なくとも部分を除去するための外科的介入および/もしくは放射線療法の準備をしているまたはこれらを受けている、またはかかる外科的介入および/もしくは放射線療法を受けた患者などのがん患者における前転移性病変、または微小残存疾患および/もしくは転移性疾患の再発を防ぐまたは処置するのに効果的であるリード候補薬剤を同定するための方法であって、
a)がん細胞培養物を提供するステップ;
b)試験薬剤を有する反応混合物中で細胞培養物をヒト血液血小板と接触させるステップ;および
c)試験薬剤が
i)pRANKLによるRANKシグナル伝達を阻害する;かつ/もしくは
ii)がん細胞への血小板結合のレベルを低下させる
かどうかを検出するステップ
を含む細胞に基づくアッセイにおいて1つまたは複数の試験薬剤をスクリーニングし、それによって、前転移性病変を防ぐまたは処置するリード候補薬剤、ならびに場合により、がん患者における微小残存疾患および/または転移性疾患の再発を防ぐまたは処置するその潜在性を同定するステップを含む方法をさらに提供する。
i)pRANKLによるRANKシグナル伝達を阻害する;かつ
ii)がん細胞への血小板結合のレベルを低下させる
かどうかの両方を試験することに関わる。
a)末梢血または血小板含有血液画分の試料を提供するステップ;
b)前記試料中のpRANKL発現を決定し、前転移性病変と遠隔転移の発症の可能性増加との指標となる発現差異を基準値と比較するステップ
を含む方法をさらに提供する。
「ネオアジュバント」という用語は、本明細書では、例えば、改善された療法のための外科的介入および/または放射線療法前のがんの処置を表すべきである。
抗体に関して使用される「キメラの」という用語は、重および軽鎖のアミノ酸配列のそれぞれの1つの部分が特定の種由来のまたは特定のクラスに属する抗体における相当する配列と相同である一方、鎖の残りのセグメントが別の種またはクラスにおける相当する配列と相同である抗体を表す。典型的に、軽と重鎖の両方の可変領域は、哺乳動物の1つの種に由来する抗体の可変領域を模倣する一方、定常部分は、別のものに由来する抗体の配列と相同である。例えば、可変領域は、例えば、ヒト細胞調製物由来の定常領域と組み合わせた非ヒト宿主生物からの容易に利用可能なB−細胞またはハイブリドーマを使用した現在既知の供給源に由来し得る。
抗体に関して使用される「ヒト化」という用語は、非ヒト種からの免疫グロブリンに実質的に由来する抗原結合部位を有する分子を表し、ここで、分子の残りの免疫グロブリン構造は、ヒト免疫グロブリンの構造および/または配列に基づく。抗原結合部位は、定常ドメイン上に融合した完全な可変ドメインまたは可変ドメインにおける適切なフレームワーク領域(FR)上に移植された相補性決定領域(CDR)のみを含み得る。抗原−結合部位は、野生型とすることができるまたは例えば、1つまたは複数のアミノ酸置換によって修飾されてい得る、好ましくはヒト免疫グロブリンにより綿密に似るように修飾されてい得る。ヒト化抗体の一部の形は、全てのCDR配列(例えば、マウス抗体からの6つ全てのCDRを含有するヒト化マウス抗体)を保存する。他の形は、本来の抗体に対して改変されている1つまたは複数のCDRを有する。
抗体に関して使用される「ヒト」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来の可変および定常領域を有する抗体を含むと理解される。本発明のヒト抗体は、例えば、CDRにおけるヒト生殖系列免疫グロブリン配列(例えば、in vitroでのランダムまたは部位特異的突然変異誘発によってまたはin vivoでの体細胞変異によって導入された変異)によってコードされないアミノ酸残基を含み得る。ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリンライブラリーからまたは1つもしくは複数のヒト免疫グロブリンに関してトランスジェニックな動物から単離された抗体を含む。
典型的な抗体は、例えば、lgG2または任意の他の免疫グロブリン型もしくは亜型のフレームワークに組み込まれた、デノスマブ、またはその機能的変異体もしくは抗原結合性断片である。例えば、デノスマブ抗原−結合部位またはCDR配列は、Fcエフェクター機能を有するまたは有さないlgG1抗体中に組み込まれ得る。
a)抗体の生物学的に活性な断片であり、断片は、分子の配列の少なくとも50%、好ましくは少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、または少なくとも95%、最も好ましくは少なくとも97%、98%または99%を含み;
b)少なくとも1つのアミノ酸置換、付加および/または欠失によって抗体に由来し、ここで、機能的に活性な変異体は、少なくとも50%の配列同一性、好ましくは少なくとも60%、より好ましくは少なくとも70%、より好ましくは少なくとも80%、さらにより好ましくは少なくとも90%、さらにより好ましくは少なくとも95%および最も好ましくは少なくとも97%、98%または99%の抗体などの分子またはその部分との配列同一性を有し;かつ/または
c)ポリペプチドまたはヌクレオチド配列に異種性の抗体またはその機能的に活性な変異体および追加的に、少なくとも1つのアミノ酸またはヌクレオチドからなる。
「中性」アミノ酸は、それらのそれぞれの3つの文字および単一文字コードおよび極性とともに以下に示されている:
アラニン:(Ala、A)非極性、中性;
アスパラギン:(Asn、N)極性、中性;
システイン:(Cys、C)非極性、中性;
グルタミン:(Gin、Q)極性、中性;
グリシン:(Gly、G)非極性、中性;
イソロイシン:(Ile、I)非極性、中性;
ロイシン:(Leu、L)非極性、中性;
メチオニン:(Met、M)非極性、中性;
フェニルアラニン:(Phe、F)非極性、中性;
プロリン:(Pro、P)非極性、中性;
セリン:(Ser、S)極性、中性;
トレオニン:(Thr、T)極性、中性;
トリプトファン:(Trp、W)非極性、中性;
チロシン:(Tyr、Y)極性、中性;
バリン:(Val、V)非極性、中性;および
ヒスチジン:(His、H)極性、正(10%)中性(90%)。
「正に」荷電したアミノ酸は、以下である:
アルギニン:(Arg、R)極性、正;および
リシン:(Lys、K)極性、正。
「負に」荷電したアミノ酸は、以下である:
アスパラギン酸:(Asp、D)極性、負;および
グルタミン酸:(Glu、E)極性、負。
原発性中胚葉および/または外胚葉腫瘍の中には、それぞれ、メラノーマおよび/またはアメロブラストーマならびに肺の原始神経外胚葉性腫瘍がある。
特定の重要なRANK陽性腫瘍疾患は、乳がん、膵がん、胃がん、食道がん、腎細胞癌、肺癌、結腸/直腸/大腸がん、メラノーマ、前立腺がん、頭頸部がん、またはRANK陽性腫瘍実体と関連している他の疾患である。
白血病に罹患している患者は、本明細書に記載の抗RANKL処置から特に利益を得る可能性があるが、これは、白血病細胞中へのRANKシグナル伝達は、例えば、それらの増殖性潜在性を増強し得るかつ/または例えば、化学療法および/またはキナーゼ阻害剤での抗がん治療介入に対するそれらの耐性を改変し得るからである。
本明細書に記載の使用のための薬剤を含む医薬組成物の投与は、特に、全身的経路によるまたは非経口投与による、例えば、静脈内、筋肉内または皮下経路によるだけでなく、経口、鼻腔内、耳内、経皮、粘膜、局所(例えば、ゲル、軟膏、ローション、クリームなど)、腹腔内、筋肉内、肺内、経膣、非経口、直腸または眼内である。非経口投与に使用される代表的な製剤は、例えば、無菌溶液または懸濁液としての静脈内、筋肉内、または皮下注射に適したものを含む。
本明細書に記載のアンタゴニスト剤の「有効量」または「十分な量」という用語のいずれかと互換的に本明細書で使用される「治療有効量」という用語は、対象に投与された場合、臨床結果を含めた有益なまたは望ましい結果をもたらすのに十分な量または活性であり、そのように、有効量またはそのシノニムは、それが適用される文脈に依存する。疾患の文脈では、薬剤の治療有効量は、例えば、転移性疾患を防ぐまたは処置するために、前転移性病変、血小板−がん細胞凝集物、またはプロ転移性腫瘍細胞凝集物の下方制御または減少から利益を得る疾患または状態を処置する、調節する、減弱する、反転させる、影響を及ぼすために使用され得る。有効量は、かかる疾患または障害を処置する、防ぐまたは阻害するために十分である化合物の量を意味することが意図されている。かかる量に相当することになるアンタゴニスト剤の量は、所与の薬物または化合物、医薬製剤、投与の経路、疾患または障害の型、対象の同一性または処置される宿主などの様々な因子に依存して変動することになるが、それにもかかわらず、当業者によって常法に従って決定され得る。
代わりに、アンタゴニスト剤は、標準的な処置、例えば、悪性疾患を処置するための化学療法薬を含むが、これらに限定されない1つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて投与される。
アンタゴニスト剤の生物学的特性は、細胞、組織、および生物全体実験においてex vivoで特徴付けられ得る。当技術分野で既知のように、薬物は、疾患または疾患モデルに対する処置に関する薬物の有効性を測定するために、または薬物の薬物動態、薬力学的性質、毒性、および他の特性を測定するために、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、およびサルを含むが、これらに限定されない動物においてin vivoでしばしば試験される。動物は、疾患モデルと称され得る。治療用物質は、ヌードマウス、SCIDマウス、異種移植マウス、およびトランスジェニックマウス(ノックインおよびノックアウトを含めた)を含むが、これらに限定されないマウスにおいてしばしば試験される。かかる実験法は、薬物が適切な半減期、エフェクター機能、アポトーシス活性およびIgG阻害活性を有する治療用物質として使用される潜在性の決定に関する意味あるデータを提供し得る。任意の生物、好ましくは哺乳動物が試験に使用され得る。例えば、ヒトとのそれらの遺伝的類似性のために、霊長類、サルは、適した治療的モデルとすることができ、したがって、薬剤の有効性、毒性、薬物動態、薬力学的性質、半減期、または他の特性を試験するために使用され得る。ヒトにおける物質の試験は、薬物としての承認に最終的に必要であり、これらの実験が本明細書で企図される。したがって、本発明のアンタゴニスト剤は、それらの治療的有効性、毒性、免疫原性、薬物動態、および/または他の臨床特性を決定するために動物モデルにおいてまたはヒトにおいて試験され得る。デノスマブは、確立された生物学的特性を有する市販の生成物であるが、栓球とのがん細胞の相互作用を阻害する抗pRANKL効果は、驚異的であることが判明した。
ヒトRANKLをトランスフェクトされたマウスメラノーマB16−F10細胞または親細胞株を肺転移のマウスモデルにおいて使用した。トランスフェクト、RANKL陽性細胞の適用は、親細胞(対照)と比較して動物の肺における大幅に増強された転移性(metastastic)負荷をもたらした(図1)。ヒトRANKLがマウスRANKを刺激し得ることが既知であるので、これらのデータは、RANKL陽性腫瘍細胞を投与されたマウスにおける増加した転移性(metastastatic)負荷が腫瘍細胞への増強されたRANKシグナル伝達によると示唆している。これは、パラ−および/またはオートクリン刺激時のRANK陽性腫瘍細胞の増強された転移を示すJonesら(2006)からの研究とも一致している。この実験は、通常の環境下で利用可能なレベルを超えたRANK刺激のためにRANKLを提供すると、転移能が増強されることを明らかにする。腫瘍細胞へのpRANKLの寄与/移動を、それへのRANKLのトランスフェクションは模倣する。
血小板は、腫瘍転移を促進することが既知であるので、血小板上での潜在的RANKL表面発現の分析を行った。低レベルのRANKLが休止血小板上で検出される一方、重大なRANKL表面発現がトロンビンでの血小板活性化後に得られた(図2)。したがって、腫瘍細胞との凝集物の形成時にも生じる血小板の活性化は、RANKL発現の急速な上方制御をもたらす。次いで、上方制御されたRANKLは、腫瘍細胞上のRANKと相互作用し、これを刺激するために容易に利用可能となってしまう。
ヒト受容体RANKおよびヒト免疫グロブリンG(hlgG1)の細胞外画分を含有する免疫受容体−Fc融合タンパク質を調製した(図3)。融合タンパク質は、生理学的条件下でのCD16へのFc部分の結合を阻害するlgG1部分におけるアミノ酸交換によるFc受容体(FcyRllla、CD16)への著しく減少した親和性を示す(233P/L234V/L235A/ΔG236/A327G/A330S、Armourら,1999,Schmiedelら,2013)。この構築物は、デノスマブとは対照的に、ヒトとマウスRANKLの両方への結合を示し、したがって、RANKL中和のマウスモデルにおける利用に有利である(Bossenら 2006,J Biol Chem 281 (2):13964−71;Kostenuikら 2009,J Bone Miner Res 24(2):182−95)。
in vivoでの活性化(例えば、血流における循環性腫瘍細胞のコーティング後)時に発現されるpRANKLの役割を試験するために、メラノーマ肺転移モデルを適用した。親メラノーマ細胞を使用して、このモデルにおける生理学的マウスpRANKLの役割を特徴付けた。転移の数は、血小板枯渇時に大幅に減少し、これは、前の報告とも一致している。興味深いことに、RANK−Fc−KO融合タンパク質を使用したマウスRANKLの中和は、血小板枯渇において得られた結果と比較可能であるより少ない数の転移をもたらした(図4)。これらのデータは、転移がpRANKLによって媒介され、その中和が転移形成を防ぎ得るという事実を指摘している。
第1のステップとして、本発明者らは、定量的リアルタイムPCRを用いて、EMT分析のための古典的モデルであるMCF10A細胞自体がRANKLを発現することを除外した。これは、腫瘍発現RANKの刺激が血小板とは独立してオートクリン/パラクリン様式で起こらなかったことを確認するのに役立った。その後、以前報告されたように、MCF10A細胞をヒト血小板でインキュベートして、血液中の腫瘍細胞の血小板−コーティングを模倣した(Koppら 2009,Cancer Res 69(19):7775−83;Plackeら 2012,Cancer Res 72(2):440−8;およびPlackeら 2012,189(1):154−60)。共培養をデノスマブの存在または非存在下で追加で行って、血小板由来RANKLを中和した。ZEBおよびNカドヘリンmRNAの誘発の定量的リアルタイムPCR分析は、血小板の存在がMCF10A細胞における2つのプロ転移性遺伝子の発現を誘発したことを実証した。これは、デノスマブでRANKLをブロッキングすることによって大幅に減少し、それによって、実際、pRANKLが凝集物の形成時に腫瘍細胞に及ぼす血小板のプロ転移性効果を媒介し、pRANKLの中和が腫瘍細胞の転移能を限定するのに役立ち得るという明らかな証拠を提供している。
悪性細胞の遊走潜在性は、それらが転移を形成する能力に重要であるので、本発明者らは、血小板由来RANKLも腫瘍細胞遊走に影響するかどうかを研究した。この目的を達成するために、MCF10A細胞をトランスウェルアッセイ系において用いた。MCF10A細胞をヒト血小板でインキュベートして、トランスウェルシステムの上部チャンバーにおいてアイソタイプ対照またはデノスマブの存在または非存在下で上記のように血液中の腫瘍細胞の血小板−コーティングを模倣した。48h後、EGF勾配に従って下部チャンバーへ遊走した細胞の数を決定した。本発明者らは、血小板の存在が遊走した細胞の数を明白に増強し、これは、血小板由来RANKLがデノスマブの存在によって中和された場合、大きく減少したことを観察した。これは、pRANKLが凝集物の形成時に悪性細胞の遊走潜在性、したがって、それらのプロ転移性表現型を増強し、pRANKLの中和が腫瘍細胞の転移能を限定するのに役立ち得ることを実証している(図7)。
in vivoでのpRANKLの役割をさらに試験するために、B16−F10メラノーマ肺転移モデルを用いた。血小板発現RANKLの役割を特に評価するために、RANKLがフロックス部位(以下、RANKL fl/flと称される)を含有する129−Tnfsf11tm1.1 Caob/Jマウスおよび巨核球(megakariocte)/血小板(platetelet)特異的リコンビナーゼ(以下、Pf4creと称される)を含有するC57BL/6−Tg(Pf4−cre)Q3Rsko/Jマウスを繁殖させて、RANKLが巨核球(megakariocytes)/血小板(platetel)において特異的にノックアウトされているRANKL fl/fl Pf4 cre/+ノックアウト(ko)マウスを作製した。血小板発現RANKLの効果の決定のために、B16−F10メラノーマ細胞(マウスあたり75,000)をRANKL fl/fl Pf4 cre/+ノックアウト(ko)マウスまたはC57BL/6対照マウス(ctrl)における尾静脈を通して注入した。血小板におけるRANKLの欠如は、ctrl群と比較して、koにおける肺転移の実質的に減少した数をもたらした(図8)。これらのデータは、in vivoでの転移形成におけるpRANKLの特定の関与をさらに確かめ、pRANKLの中和が転移を防ぐのに役立ち得るという本発明者らの手法を支持している。
不死化MCF10A細胞で得られた結果を確かめ、拡張するために、本発明者らは、悪性メラノーマ細胞株SK−Mel(ATCC)を用いた。フローサイトメトリー分析は、悪性細胞自体がRANKLを発現したことを除外して、腫瘍発現RANKの刺激がオートクリン/パラクリン様式で起こらず、むしろ、血小板に依存していたことを確認した(図9A)。図9Bにおいて示された実験では、SK−Mel細胞をヒト血小板でインキュベートして、前に記載されたように血液中の腫瘍細胞の血小板−コーティングを模倣した。共培養をデノスマブ(5μg/ml)の存在または非存在下で行って、血小板由来RANKLを中和した。24h後、ZEB mRNAの誘発の定量的リアルタイムPCR分析は、MCF10A細胞と同様に、血小板の存在がこのプロ転移性遺伝子の発現を誘発し、これは、デノスマブで血小板由来RANKLをブロッキングすることによって大きく減少したことを実証した。類似した効果が転移形成/EMTに関わる2つのさらなる遺伝子であるTwistおよびビメンチンの発現レベルの分析でも観察された。これらの分析は、図5において記載されたMCF10A細胞で得られた本発明者らの知見を確かめかつ拡張し、実際、pRANKLが、凝集物の形成時に腫瘍細胞に及ぼす血小板のプロ転移性効果を媒介し、pRANKLの中和が腫瘍細胞の転移能を限定するのに役立ち得るというさらなる証拠を提供する。
Claims (15)
- がん患者の処置に使用して血液中の前転移性病変を防ぐまたは減少させるための、ヒト血小板発現核内因子κB活性化受容体リガンド(pRANKL)を認識するRANKL特異的アンタゴニスト剤。
- 交差反応性であり、pRANKLと、可溶性核内因子κB活性化受容体リガンド(sRANKL)および膜結合型核内因子κB活性化リガンド(mRANKL)の少なくとも一方とを認識する、請求項1に記載の剤。
- pRANKLに結合し、それによって、pRANKLが播種性がん細胞上のその受容体の活性化を阻害する、請求項1または2に記載の剤。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の剤であって、前記剤がpRANKL単量体または多量体に結合し、好ましくは血小板表面結合pRANKLまたは血小板表面から切断されたpRANKLと複合体を形成する、前記剤。
- 前転移性病変が血行性であり、場合により活性化血小板−がん細胞凝集物の循環によって判定される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の剤。
- がん患者が微小残存疾患および/または転移性疾患の再発のリスクがあるか、またはこれらに罹患しており、場合により患者が血液試料中に検出可能なレベルの循環性腫瘍細胞を有する、請求項1〜5のいずれか1項に記載の剤。
- 患者が上皮性腫瘍および間葉腫瘍からなる群から選択される固形腫瘍、または内胚葉、中胚葉および/もしくは外胚葉起源の腫瘍、または白血病などの血液由来がんに罹患している、請求項1〜6のいずれか1項に記載の剤。
- 患者が乳がん、膵がん、胃がん、食道がん、腎細胞癌、肺癌、結腸/直腸/大腸がん、メラノーマ、前立腺がん、頭頸部がん、または白血病に罹患している、請求項1〜7のいずれか1項に記載の剤。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載の剤であって、患者が腫瘍の少なくとも一部を除去するための外科的介入および/または照射を受けており、前記剤がネオアジュバントまたはアジュバント療法のために投与される、前記剤。
- 前記剤が、抗体、抗体断片、受容体−融合タンパク質、ペプチド、小分子およびアプタマーからなる群から選択される、請求項1〜9のいずれか1項に記載の剤。
- 前記剤が、ヒト抗体もしくはヒト化抗体、その抗原結合性断片、またはRANK−Fc融合タンパク質である、請求項1〜10のいずれか1項に記載の剤。
- 全身投与によって、好ましくは、静脈内注入またはボーラス注入によって治療有効量が患者に投与される、請求項1〜11のいずれか1項に記載の剤。
- アジュバントもしくはネオアジュバント併用療法、好ましくは化学療法、キナーゼ阻害剤を用いる療法および/または免疫療法と組み合わせて患者に投与される、請求項1〜12のいずれか1項に記載の剤。
- がん患者における前転移性病変を防ぐまたは処置するのに効果的であるリード候補薬剤を同定するための方法であって、
a)がん細胞培養物を提供するステップ;
b)試験薬剤を有する反応混合物中で細胞培養物をヒト血液血小板と接触させるステップ;ならびに
c)試験薬剤が
i)pRANKLによるRANKシグナル伝達を阻害する、および/または
ii)がん細胞への血小板結合のレベルを低下させる
かどうかを検出するステップ;
を含む細胞に基づくアッセイにおいて1つまたは複数の試験薬剤をスクリーニングし、それによって、前転移性病変を防ぐまたは処置するためのリード候補薬剤を同定するステップを含む、前記方法。 - がん患者における転移能を予測する方法であって、
a)末梢血またはその血小板含有血液画分の試料を提供するステップ;
b)前記試料中のpRANKL発現を決定し、前転移性病変と遠隔転移の発症の可能性増大との指標となる発現差異を、基準値と比較するステップ、
を含む、前記方法。
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