JP2018151206A - プロテオグリカン分析方法 - Google Patents
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Abstract
Description
−30℃で冷凍保管したシロサケの頭部から摘出した鼻軟骨を400 g用意し、出発原料とした。4重量%の酢酸水溶液2000 gに出発原料を投入し、撹拌しながら72時間抽出した。
この溶出液をステンレススチールメッシュ(150 μm)でろ過し、不溶物を除去した。ろ液を透析膜にて十分に透析し、得られた液にデキストリンを加えて噴霧乾燥し、プロテオグリカン20%調製したプロテオグリカン含有サケ鼻軟骨抽出末20 gを得た。
前記プロテオグリカン含有サケ鼻軟骨抽出末25 mgに精製水を加えて50 mL容量に調製し、この調製液10 mLをビバスピンturbo15 100,000 MWCO(ザルトリウス社製)に量り取り、遠心分離(3000rpm、10分)した。さらに上清に精製水10 mLを加えて遠心分離し、この水洗を3回行なった。水洗した上清のプロテオグリカン濃縮液を試料1とし、分子量分画を行わなかったプロテオグリカン溶液を試料2とした。
プロテオグリカンの標準品(和光純薬工業製)2 mgを精密に量り、リン酸緩衝液(pH6.8)を加えて10 mL容量に調製した(A液)。A液5 mLを取り、リン酸緩衝液(pH6.8)を加えて10 mL容量に調製したもの、A液2 mLを取り、リン酸緩衝液(pH6.8)を加えて10 mL容量に調製したもの及びA液をそれぞれ検量線作成用標準液とする。検液及び標準液について0.45 μmのメンブレンフィルターを通した後、次の操作条件で液体クロマトグラフィーを行い、得られた検量線からプロテオグリカン量を求めた。なお、標準品:プロテオグリカン,サケ鼻軟骨由来(和光純薬工業製)は、室温減圧デシケーター(シリカゲル)で3時間乾燥してから採取した。
カラム :TSKgel G5000PWXL(東ソー社製)
カラム温度:40℃
試料注入量:50 μL
移動相 :リン酸緩衝液(pH6.8)
流量 :0.5 mL/min
検出器 :UV検出器(SPD−20A 島津製作所社製) 検出波長=215 nm
及び、示差屈折率検出器(RID−10A 島津製作所製)
試料1の濃縮液を回収し、リン酸緩衝液(pH6.8)に溶かし、10 mL容量に調整した。試料2は、5 mgをリン酸緩衝液(pH6.8)に溶かし、10 mL容量に調製し、各々0.45 μmメンブレンフィルターを通した後、以下操作条件でHPLCを行い標準品の検量線からプロテオグリカン量を求めた。
カラム :TSKgel G5000PWXL(東ソー社製)
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及び、示差屈折率検出器(RID−10A 島津製作所製)
試料1と試料2を比較すると(図1)、分子量分画を行った試料1はシャープなピークが標準品のピーク溶出時間と同じ位置で検出し、プロテオグリカン以外の不純物を除外することができた。また、標準品の検量線は図2のようになり、この検量線を利用して試料1のプロテオグリカンを定量すると図5の結果となった。
1,9−ジメチルメチレンブルー16 mgをエタノール5 mL、2 mLのTween20に溶かし、これをギ酸2 mL、ギ酸ナトリウム2 gを加えた後、さらに精製水を加え1000 mLにメスアップし比色溶液を調整した。
実施例1で得た試料1の1mL溶液に対し、調製した比色溶液5 mLを加え、攪拌しこの溶液の523 nmの吸光度を測定した。プロテオグリカン標準液は、標準品:プロテオグリカン,サケ鼻軟骨由来(和光純薬工業製)5 mgを精密に量り、精製水を加えて50 mL容量に調製した。適宜希釈し、0 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mLに調製した。各標準液1mL溶液に対し、調製した比色溶液5mLを加え、攪拌しこの溶液の523 nmの吸光度を測定した。
標準品の検量線は図3のようになり、この検量線を利用して試料1のプロテオグリカンを定量すると図5の結果となり、実施例1による結果とほぼ一致し、前記の比色溶液によりプロテオグリカンが定量可能であることを確認した。
A:ホウ砂1.90685 gを適量の精製水に加温溶解し、硫酸を加えながらpH 8.4に調製後、20 mL容量に調製し1 Mホウ酸緩衝液を調製した。
B:スルファミン酸アンモニウム4.5648 gを10 mLの精製水に溶解し、4 Mスルファミン酸溶液を調製した。
C:カルバゾール20 mgをエタノール10 mLに溶解し、0.2%カルバゾール溶液を調製した。
共栓試験管に実施例1で得た試料1の0.8 mLと1Mホウ酸緩衝液0.1 mLと4 Mスルファミン酸0.1 mLを加えて十分に混合した後、氷水中で5 mL濃硫酸を加えた。次に0.2%カルバゾール溶液0.2 mLを加えて十分に混合した後、100℃で10分間加熱した。加熱後、室温まで冷却し、525 nmの吸光度を測定した。同時に標準品のプロテオグリカン,サケ鼻軟骨由来(和光純薬工業製)2 mgを精密に量り、精製水を加えて10 mL容量に調製した(200 μg/mL)。適宜希釈し、50 μg/mL、100 μg/mLに調製した。各標準液0.8 mLと1 Mホウ酸緩衝液0.1 mLと4Mスルファミン酸0.1 mLを加えて十分に混合した後、氷水中で5 mL濃硫酸を加えた。次に0.2%カルバゾール溶液0.2 mLを加えて十分に混合した後、100℃で10分間加熱した。加熱後、室温まで冷却し、525 nmの吸光度を測定した。
標準品の検量線は図4のようになり、この検量線を利用して試料1のプロテオグリカンを定量すると図5の結果となり、実施例1、実施例2による結果とほぼ一致し、前記の比色溶液によりプロテオグリカンが定量可能であることを確認した。
ソフトカプセル(プロテオグリカン20 μg/粒配合、甘草抽出物、及びトリグリセリド配合品)1粒を解体し、内容物をクロロホルム10 mLで抽出した。次に5%エタノール溶液20 mLを加えて、振とう抽出した後、上清を回収した。さらに5%エタノール溶液20 mLを加えて、同様の抽出操作を5回行った。得られた上清液をろ過し、濃縮乾固により有機溶媒を除去した。乾固物に精製水を加えてプロテオグリカン含有抽出液100 gを得た。
試料3の1 mL溶液に対し、実施例2で調製した溶液と同様の比色溶液5 mLを加え、攪拌しこの溶液の523 nmの吸光度を測定した。
試料3のプロテオグリカン量を算出し、19.3μg/粒の結果となり、食品組成物中のプロテオグリカン定量も可能となったことを確認した。
Claims (7)
- 下記工程により軟骨または軟骨抽出物を含む組成物中のプロテオグリカンを定量する方法。
1)プロテオグリカンを含む軟骨または軟骨抽出物を含む組成物中から水または水溶液で抽出し抽出物を回収する工程、
2)分子量分画膜を有する中空状容器にて遠心分離を行い、濃縮物を回収する工程、
3)比色試薬を加え、比色定量する工程。 - 分子量分画膜を有する中空状容器が分子量5万〜10万で篩い可能な容器であって、濃縮物中にコンドロイチン硫酸を含まない請求項1記載の定量方法。
- 比色試薬が、界面活性剤オクチルフェノールエトキシトレート、1,9−ジメチルメチレンブルー、エタノール、ギ酸、ギ酸ナトリウムからなる事を特徴とする、請求項1または請求項2記載の定量方法。
- 比色試薬が、ホウ酸緩衝液、スルファミン酸アンモニウム、カルバゾール からなる事を特徴とする、請求項1または請求項2記載の定量方法。
- 界面活性剤オクチルフェノールエトキシトレート、1,9−ジメチルメチレンブルー、エタノール、ギ酸、ギ酸ナトリウムの試薬からなる群、またはホウ酸緩衝液、スルファミン酸アンモニウム、カルバゾールの試薬からなる群のいずれか一つ以上からなるサケ鼻軟骨またはサケ鼻軟骨抽出物を含む組成物中のプロテオグリカン定量用キット。
- 分析対象のプロテオグリカンの分子量が10万〜200万である、請求項1〜5いずれか記載の定量方法または定量用キット。
- プロテオグリカンと植物抽出物、動物抽出物、魚類抽出物、脂質類、アミノ酸類、ミネラル類、ビタミン類、菌類を1種類または2種類以上含む食品中のプロテオグリカンを定量する方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2020165937A (ja) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの測定方法、評価方法および測定用キット |
Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995022765A1 (fr) * | 1994-02-19 | 1995-08-24 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Procede de dosage de l'aglycane normal, trousse de dosage et procede d'evaluation des informations relatives aux articulations |
JP2000065837A (ja) * | 1998-08-24 | 2000-03-03 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | グリコサミノグリカン又はグリコサミノグリカン結合性分子の測定方法及びその測定用キット |
WO2004083257A1 (ja) * | 2003-03-20 | 2004-09-30 | Hosokawa Micron Corporation | 軟骨魚類から単離されたプロテオグリカンおよびその製造方法 |
US20050238536A1 (en) * | 2004-04-21 | 2005-10-27 | Striepeke Steven K | Device and method for measuring glycosaminoglycans in body fluids |
JP4219974B2 (ja) * | 2006-02-14 | 2009-02-04 | 財団法人釧路根室圏産業技術振興センター | プロテオグリカンの製造方法 |
KR20090080175A (ko) * | 2008-01-21 | 2009-07-24 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 반월상 연골 치환용 다공성 생분해성 중합 이식물 |
JP2012020999A (ja) * | 2010-07-16 | 2012-02-02 | Dacy Tech Pty Ltd | 軟骨の劣化の治療のための医薬 |
WO2012099216A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの大量調製法 |
JP2014009164A (ja) * | 2012-06-27 | 2014-01-20 | Nihon Yakuhin Kk | プロテオグリカンの製造方法 |
JP2014141580A (ja) * | 2013-01-24 | 2014-08-07 | Aomori Prefectural Industrial Technology Research Center | プロテオグリカン及び化粧料 |
JP2014198695A (ja) * | 2013-03-29 | 2014-10-23 | 北川 裕之 | ヘパラナーゼ阻害剤及びヘパラナーゼ阻害剤のスクリーニング方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8664127B2 (en) * | 2010-10-15 | 2014-03-04 | Applied Materials, Inc. | Two silicon-containing precursors for gapfill enhancing dielectric liner |
-
2017
- 2017-03-10 JP JP2017046294A patent/JP2018151206A/ja active Pending
-
2022
- 2022-08-24 JP JP2022133326A patent/JP2023003418A/ja active Pending
Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995022765A1 (fr) * | 1994-02-19 | 1995-08-24 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Procede de dosage de l'aglycane normal, trousse de dosage et procede d'evaluation des informations relatives aux articulations |
JP2000065837A (ja) * | 1998-08-24 | 2000-03-03 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | グリコサミノグリカン又はグリコサミノグリカン結合性分子の測定方法及びその測定用キット |
WO2004083257A1 (ja) * | 2003-03-20 | 2004-09-30 | Hosokawa Micron Corporation | 軟骨魚類から単離されたプロテオグリカンおよびその製造方法 |
US20050238536A1 (en) * | 2004-04-21 | 2005-10-27 | Striepeke Steven K | Device and method for measuring glycosaminoglycans in body fluids |
JP4219974B2 (ja) * | 2006-02-14 | 2009-02-04 | 財団法人釧路根室圏産業技術振興センター | プロテオグリカンの製造方法 |
KR20090080175A (ko) * | 2008-01-21 | 2009-07-24 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 반월상 연골 치환용 다공성 생분해성 중합 이식물 |
JP2012020999A (ja) * | 2010-07-16 | 2012-02-02 | Dacy Tech Pty Ltd | 軟骨の劣化の治療のための医薬 |
WO2012099216A1 (ja) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの大量調製法 |
JP2014009164A (ja) * | 2012-06-27 | 2014-01-20 | Nihon Yakuhin Kk | プロテオグリカンの製造方法 |
JP2014141580A (ja) * | 2013-01-24 | 2014-08-07 | Aomori Prefectural Industrial Technology Research Center | プロテオグリカン及び化粧料 |
JP2014198695A (ja) * | 2013-03-29 | 2014-10-23 | 北川 裕之 | ヘパラナーゼ阻害剤及びヘパラナーゼ阻害剤のスクリーニング方法 |
Non-Patent Citations (10)
Title |
---|
BLYSCAN GLYCOSAMINOGLYCAN ASSAY KIT, JPN6020047558, 6 December 2016 (2016-12-06), ISSN: 0004596741 * |
DAVID BERRY ET.AL., BIOCHEM J, vol. 373, JPN6020047555, 2003, pages 241 - 249, ISSN: 0004596739 * |
GALAMBOS, J. T.: "The reaction of carbazole with carbohydrates: I. Effect of borate and sulfamate on the carbazole col", ANALYTICAL BIOCHEMISTRY, vol. 19, JPN6021036233, April 1967 (1967-04-01), pages 119 - 132, XP024827097, ISSN: 0004791567, DOI: 10.1016/0003-2697(67)90141-8 * |
JONSON, MARY: "Detergents : Triton X-100, Tween 20, and More", MATERIALS AND METHODS, vol. 3, JPN6020047559, 18 January 2013 (2013-01-18), ISSN: 0004596742 * |
LUO, J. ET AL.: "Development and Characterization of Acellular Porcine Pulmonary Valve Scaffolds for Tissue Engineeri", TISSUE ENG. PART A, vol. 20, JPN6020047553, 2014, pages 2963 - 2974, ISSN: 0004596738 * |
PALPANT, N.J. ET AL.: "Cardiac disease in mucopolysaccharidosis type I attributed to catecholaminergic and hemodynamic defi", AM. J. PHYSIOL. HEART CIRC. PHYSIOL., vol. 300, JPN6021036232, 12 November 2010 (2010-11-12), pages 356 - 365, ISSN: 0004791566 * |
THERMO SCIENTIFIC PIERCE ワークフローシリーズ:サンプル調製からウェスタンブロッティングまで, JPN6020047551, 2015, pages 20, ISSN: 0004791565 * |
WAKO BIOWINDOW, JPN6020047550, October 2006 (2006-10-01), pages 20 - 22, ISSN: 0004791564 * |
ポール・限外ろ過デバイス, JPN6020047548, 10 August 2011 (2011-08-10), pages 4 - 11, ISSN: 0004791563 * |
岡本ら: "機能性食品含有プロテオグリカンおよびグリコサミノグリカンの分別定量", 日本薬学会第136年会, JPN6020047556, 2016, ISSN: 0004596740 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2020165937A (ja) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | 国立大学法人弘前大学 | プロテオグリカンの測定方法、評価方法および測定用キット |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2023003418A (ja) | 2023-01-11 |
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