JP2018150272A - ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー - Google Patents
ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018150272A JP2018150272A JP2017047168A JP2017047168A JP2018150272A JP 2018150272 A JP2018150272 A JP 2018150272A JP 2017047168 A JP2017047168 A JP 2017047168A JP 2017047168 A JP2017047168 A JP 2017047168A JP 2018150272 A JP2018150272 A JP 2018150272A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- rage
- lupus nephritis
- aptamer
- subject
- urinary
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 title claims abstract description 183
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims abstract description 136
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 84
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 20
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 44
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 31
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 24
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 19
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 claims description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 30
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 7
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 64
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 48
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 30
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 27
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 24
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 16
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 15
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 15
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 101100339431 Arabidopsis thaliana HMGB2 gene Proteins 0.000 description 13
- 108700010013 HMGB1 Proteins 0.000 description 13
- 101150021904 HMGB1 gene Proteins 0.000 description 13
- 102100037907 High mobility group protein B1 Human genes 0.000 description 13
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 11
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 108010005094 Advanced Glycation End Products Proteins 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 7
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 101150071461 HAVCR1 gene Proteins 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 6
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- -1 etc.) Substances 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 4
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 230000005499 meniscus Effects 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 238000003380 quartz crystal microbalance Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- MNQZXJOMYWMBOU-VKHMYHEASA-N D-glyceraldehyde Chemical compound OC[C@@H](O)C=O MNQZXJOMYWMBOU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 3
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 3
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 3
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- RRUYWEMUWIRRNB-LURJTMIESA-N (2s)-6-amino-2-[carboxy(methyl)amino]hexanoic acid Chemical compound OC(=O)N(C)[C@H](C(O)=O)CCCCN RRUYWEMUWIRRNB-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 2
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 208000028208 end stage renal disease Diseases 0.000 description 2
- 201000000523 end stage renal failure Diseases 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000001434 glomerular Effects 0.000 description 2
- 210000001707 glomerular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 231100000853 glomerular lesion Toxicity 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 210000000557 podocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 210000000512 proximal kidney tubule Anatomy 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 11-cis-retinal Chemical compound O=C/C=C(\C)/C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2NC(=O)N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 108010082399 Autophagy-Related Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003954 Autophagy-Related Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251129 Galeocerdo Species 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 102000002268 Hexosaminidases Human genes 0.000 description 1
- 108010000540 Hexosaminidases Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047357 Luminescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006830 Luminescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 101150030875 RAB7A gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000005622 Receptor for Advanced Glycation End Products Human genes 0.000 description 1
- 108010045108 Receptor for Advanced Glycation End Products Proteins 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- 206010038468 Renal hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010061481 Renal injury Diseases 0.000 description 1
- 102000004330 Rhodopsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000820 Rhodopsin Proteins 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 1
- 206010053614 Type III immune complex mediated reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000008721 basement membrane thickening Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 238000012767 chemiluminescent enzyme immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000000585 glomerular basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016178 immune complex formation Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000008627 kidney hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000000670 ligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007347 lysosomal proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 description 1
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 108091008104 nucleic acid aptamers Proteins 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008529 pathological progression Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004054 semiconductor nanocrystal Substances 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
別の態様では、本願は、全身性エリテマトーデスの患者に投与するための、RAGEアプタマーを含む組成物を提供する。
別の態様では、本願は、RAGEを検出するための試薬を含む、ループス腎炎を診断するための組成物を提供する。
さらなる態様では、本願は、当該組成物を含む、ループス腎炎を診断するためのキットを提供する。
またさらなる態様では、本願は、ループス腎炎のバイオマーカーとしてのRAGEの使用を提供する。
CCTGATATGGTGTCACCGCCGCCTTAGTATTGGTGTCTAC (配列番号1)
TCTGTTCAGGTTGGTACGGTGGAAGGTGTGATTCACGAGG (配列番号2)
CTTGGGTTGTTTATGTCGACCGCCAGTTTTGTGTTCAGCA (配列番号3)
CATTCTTAGATTTTTGTCTCACTTAGGTGTAGATGGTGAT (配列番号4)
TTGGTTCTCTTGCCCTCTTCTATTTTGTACGATGTTTCCT (配列番号5)
TTCCACTGAGTGCCGCGGACTGTTGTTGGGAGGTGGTGTG (配列番号6)
ATGGGGAGGAGGGGTGTCGTGGGGGGTGGGGGAGTGGGGA (配列番号7)
CTGGGGATGACTCGGATAGGATGTACGAGTTTGATGTGTA (配列番号8)
TTTGATCGAGCTGCGCCCTCCTCGCCGTAGAAGAGTGTGT (配列番号9)
TTTGGGGTGGAGTTAGGGGTGGATCAAGCGGGATTGTGTA (配列番号10)
(A)対象がループス腎炎に罹患しているか否かを判定する。
(B)ループス腎炎発症のリスクを判定する。
(C)対象のループス腎炎のRAGEアプタマーによる処置または予防の効果を予測する。
(D)対象のループス腎炎をモニタリングする。
(1)対象から尿を採取する工程、および、
(2)当該尿におけるRAGE濃度を測定する工程、
を含む方法が提供される。
(3)測定された尿中RAGE濃度を指標値またはカットオフ値と比較する工程、
(4)測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも高い場合に、対象がループス腎炎に罹患していると判定し、測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも低い場合に、対象がループス腎炎に罹患していないと判定する工程、
を含み得る。
(1)対象から尿を採取する工程、および、
(2)当該尿におけるRAGE濃度を測定する工程、
を含む方法が提供される。
(3)測定された尿中RAGE濃度を指標値またはカットオフ値と比較する工程、
(4)測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも高い場合に、対象がループス腎炎を発症するリスクが高いと判定し、測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも低い場合に、対象がループス腎炎を発症するリスクが低いと判定する工程、
を含み得る。
(1)対象から尿を採取する工程、および、
(2)当該尿におけるRAGE濃度を測定する工程、
を含む方法が提供される。
(3)測定された尿中RAGE濃度を指標値またはカットオフ値と比較する工程、
(4)測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも高い場合に、対象のループス腎炎のRAGEアプタマーによる処置または予防は有効であると予測し、測定された尿中RAGE濃度が指標値またはカットオフ値よりも低い場合に、対象のループス腎炎のRAGEアプタマーによる処置または予防は有効ではないと予測する工程、
を含み得る。
(1)対象から少なくとも2つの時点で尿を採取する工程、
(2)当該尿におけるRAGE濃度を測定する工程、および、
(3)測定された尿中RAGE濃度を比較する工程、
を含む方法が提供される。
(4)対象の尿中RAGE濃度が増加した場合に、ループス腎炎が進行したと判定し、対象の尿中RAGE濃度が減少した場合に、ループス腎炎が改善されたと判定する工程、
を含み得る。
[1]RAGEアプタマーを含む、ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物。
[2]RAGEアプタマーが以下からなる群から選択される、第1項に記載の組成物:
(1)配列番号1〜10のいずれかの配列を含む、一本鎖DNA;
(2)配列番号1〜10のいずれかの配列と90%以上の配列同一性を有する配列を含み、RAGEに結合してRAGEとそのリガンドとの結合を阻害する、一本鎖DNA;および、
(3)配列番号1〜10のいずれかの配列において1、2、または3個の塩基が欠失、置換、または付加された配列を含み、RAGEに結合してRAGEとそのリガンドとの結合を阻害する、一本鎖DNA。
[3]RAGEアプタマーが、配列番号1〜10のいずれかの配列を含む、第1項または第2項に記載の組成物。
[4]RAGEアプタマーが、配列番号1〜10のいずれかの配列からなる、第1項〜第3項のいずれかに記載の組成物。
[5]全身性エリテマトーデスの患者に投与するための、第1項〜第4項のいずれかに記載の組成物。
[6]ループス腎炎を処置するための、第1項〜第5項のいずれかに記載の組成物。
[7]ループス腎炎を予防するための、第1項〜第5項のいずれかに記載の組成物。
[8]全身性エリテマトーデスの患者に投与するための、RAGEアプタマーを含む医薬組成物。
[9]対象から採取された尿におけるRAGE濃度を測定することを含む、ループス腎炎の診断方法。
[10]対象がループス腎炎に罹患しているか否かを判定するための、第9項に記載の方法。
[11]ループス腎炎発症のリスクを判定するための、第9項に記載の方法。
[12]対象のループス腎炎のRAGEアプタマーによる処置または予防の効果を予測するための、第9項に記載の方法。
[13]対象のループス腎炎をモニタリングするための、第9項に記載の方法。
[14]対象が全身性エリテマトーデスの患者である、第9項ないし第13項のいずれかに記載の方法。
[15]RAGEを検出するための試薬を含む、ループス腎炎を診断するための組成物。
[16]RAGEを検出するための試薬が、抗RAGE抗体、RAGEアプタマーまたはRAGEリガンドである、第15項に記載の組成物。
[17]RAGEを検出するための試薬が抗RAGE抗体である、第15項または第16項に記載の組成物。
[18]第15項ないし第17項のいずれかに記載の組成物を含む、ループス腎炎を診断するためのキット。
[19]ループス腎炎のバイオマーカーとしてのRAGEの使用。
全身性エリテマトーデスのモデルであり、ループス腎炎を自然発症するMRL/MpJ−Faslpr/J(MRL/lpr)マウスを使用した(The Jackson Laboratoryより購入)。MRL/lprマウスは、通常、約16週齢で免疫複合体による糸球体腎炎を発症し、20週程度で約50%が腎不全死へ至る(Arthritis Rheum. 2006 Jan;54(1):325-35)。対照として、C57BL6/JマウスまたはMRL/MPJマウスを使用した。MRL/MPJマウスは、MRL/lprマウスとバックグラウンドが同じマウスであり、MRL/lprマウスの対照として汎用されている。
8、12、16および18週齢の雌MRL/lprマウスから腎組織を採取し、糸球体、近位尿細管および遠位尿細管を、組織中の多糖類を染色する過ヨウ素酸シッフ試薬(PAS)で染色した。結果を図1に示す。
8、12、16および18週齢の雌MRL/lprマウスおよびMRL/MPJマウスから腎組織を採取し、糸球体および尿細管間質を蛍光抗体法にて染色した。1次抗体として抗RAGE抗体(金沢大学山本靖彦先生より供与)を、2次抗体としてAlexa Fluor 488 標識抗マウス抗体を使用した。蛍光強度を共焦点顕微鏡により測定し、RAGE陽性面積を測定し、対照の測定値を1として各測定値の相対値を算出した。結果を図2に示す。糸球体では時間依存的にRAGE発現が増加した(図2A)。尿細管では早期にRAGE発現が増加し、それが維持された(図2B)。
MRL/lprマウス尿細管のどの細胞でRAGE発現が増加しているかを調べるために、8週齢雌MRL/lprマウスおよびMRL/MPJマウスの尿細管を抗RAGE抗体で免疫染色した。結果を図3に示す。また、RAGEとNCX(遠位尿細管マーカー)を蛍光抗体法で二重染色した。1次抗体として抗RAGE抗体および抗NCX抗体を、2次抗体として各々Alexa Fluor488およびAlexa Fluor標識抗体を使用した。RAGEとNCXは有意に共染色された。これは、ループス腎炎の早期に遠位尿細管でRAGE発現が増加することを示す。
定常状態ではRAGEは主に細胞膜に局在するが、図3において、遠位尿細管のRAGEは細胞内で粒状に局在した。このRAGEの細胞内局在を調べた。蛍光抗体法によりRAGEと各種マーカーを共染色し、共焦点顕微鏡で観察した。結果を図4に示す。RAGEは晩期エンドサイトーシス膜表面蛋白であるRab7(上段)およびライソゾーム酵素であるカテプシンD(中段)と共染色された。しかしながら、オートファジー関連蛋白であるLC3とは全く共染色されなかった(下段)。これらの結果は、RAGEはオートファジーに関与せず、エンドサイトーシスおよびライソゾームでの蛋白分解に関与することを示唆する。
MRL/lprマウス糸球体におけるRAGEの過剰発現の部位を調べた。18週齢雌MRL/lprマウスの糸球体において、蛍光抗体法によりRAGEと各種マーカーを共染色し、共焦点顕微鏡で観察した。結果を図5に示す。RAEGは血管内皮細胞マーカーであるCD34と共染色された(上段)。ポドサイト(糸球体上皮細胞)のマーカーであり、細胞質に局在するWT1とは共染色されず、その周囲にRAGEが見られた(下段)。ポドサイトではRAGEが主に細胞膜に局在する(定常状態である)ことが示された。
8、12、14、16および18週齢雌MRL/lprマウス(n=5)および9週齢MRL/MPJマウス(n=5)(対照)の尿を採取し、尿中RAGE排泄量をELISAにより測定した。対照の尿中RAGE排泄量を1として、尿中RAGE排泄量を相対的に比較した。尿蛋白量を尿中クレアチニン補正により測定した。結果を図6に示す。MRL/lprマウスでは8週齢から尿中RAGE排泄量が増加していた(図6上)。尿蛋白量には全研究期間内で有意差はなかった(図6下)。これらの結果は、SLEマウスでは尿中RAGE濃度が高いことを示す。
実験6と同じサンプルを用いて、尿中RAGE排泄量と、尿細管障害マーカーである尿中NAG(N−アセチル−β−D−グルコサミニダーゼ)排泄量との関連性を調べた。尿中NAG排泄量の測定は株式会社SRLに委託し、ELISAまたはEIA法にて実施した。結果を図7に示す。MRL/lprマウスの尿中NAG排泄量は18週齢で増加した(図7上)。すべての週齢のサンプルについて、MRL/lprマウスの尿中NAG排泄量(NAG/Cre比)を横軸に、尿中RAGE排泄量(RAGE/Cre比)を縦軸にプロットすると、強い正の相関関係が見られた(図7下)。これらの結果は、腎炎の進行に伴って、尿中RAGE排泄量が増加することを示す。
下記のRAGEアプタマー(RAGE−apt)およびコントロールアプタマー(Ctr−apt)を使用した。
18週齢のサンプルの血中尿素窒素(BUN)をUV法にて測定した。腎組織のマッソントリクローム染色(免疫複合体の沈着が赤く染まる染色)を行い、糸球体における染色陽性の面積を測定した。18週齢サンプルの血中の抗ds−DNA抗体をELISA法(レビス)により測定した。18週齢サンプルの血中IgG濃度をCLEIAにより測定した。18週齢サンプルの血中C3濃度を免疫比濁法により測定した。18週齢サンプルの血中Na濃度を電極法により測定した。18週齢のサンプルの尿アルブミン排泄量を免疫比濁法により測定した。結果を図8および下表に示す。
データは平均±SEMである。
*は、P < 0.05 vs. MRL/MPJを示す。#は、P < 0.05 vs. MRL/lpr + Ctrl-aptを示す。
**は、P=0.051 vs. MRL/MPJを示す。##は、P=0.055 vs. MRL/lpr + Ctrl-aptを示す。
略号;
BP:血圧、HR:心拍数、KW:腎臓重量、BW:体重、BUN:血中尿素窒素、UAE:尿アルブミン排泄量
腎組織に存在するRAGEの量をウェスタンブロッティング法にて解析した。また、腎組織からmRNAを抽出し、リアルタイムRT−PCRにて腎組織におけるRAGE発現量を測定した。結果を図9に示す。ウェスタンブロッティング法では、RAGEアプタマー投与群と対照群で、RAGEの量に有意差は見られなかった(上段)。一方、リアルタイムRT−PCRにより測定したRAGE発現量は、RAGEアプタマー投与群で有意に低かった(下段)。この結果は、RAGEアプタマー投与群において腎臓におけるRAGEの発現が抑制されたことを示す。ウェスタンブロッティング法では、血流由来のRAGEもサンプルに含まれるため、有意差が見られなかったと考えられる。
HMGB1は、SLEに関連するRAGEリガンドの代表格である。腎組織におけるHMGB1の沈着の程度を、免疫染色にて解析した。腎組織全体のHMGB1含有量をウェスタンブロッティング法にて解析した。血漿中HMGB1量をELISAにて測定した。結果を図10に示す。RAGEアプタマー投与群と対照群で、腎組織全体(9割は尿細管)のHMGB1含有量(上段、右)および血漿中HMGB1量(下段)に有意差は見られなかったものの、糸球体においてHMGB1の沈着が抑制された(上段、左)。つまりRAGEリガンドであるHMGB1を細胞内へ取り込む役割を担っていると考えられるRAGEを阻害することで組織への沈着は抑制されるが、流血中や尿中へ存在するHMGB1の量は変わらないために腎臓および血中のHMGB1濃度は変わらなかったと考えられる。
腎臓、肝臓、脾臓および肺組織からmRNAを抽出し、リアルタイムRT−PCRにて炎症性サイトカインであるIL−6およびTNFαの発現量を測定した。また、炎症性サイトカインであるMCP−1について、腎臓における発現量を測定した。結果を図11〜13に示す。興味深いことに、RAGEアプタマー投与群のIL−6およびTNFaのmRNA量は、腎臓のみで約1/10まで低下し、MCP−1のmRNA量は、腎臓で有意に低下していた。この結果から、RAGEが腎臓において特有の役割を有すること、および、RAGEの阻害により炎症が抑制され、腎保護効果がもたらされることが示唆される。
急性腎障害マーカーでありアポトーシスに関与するKim1の発現を、腎皮質免疫染色により解析した。結果を図14に示す。RAGEアプタマー投与群では、対照群と比較して、明らかにKim1発現が低かった。一般的に、炎症プロセスでアポトーシスへ誘導された腎臓の細胞(血管内皮細胞、尿細管細胞)はKim1を発現し、T細胞による貪食を受ける。上記のRAGEアプタマーの投与による腎組織における炎症性サイトカイン発現の低下を考慮すると、RAGEアプタマーにより炎症プロセスが抑制され、Kim1の発現も抑制されたと考えられる。
糸球体病変に対するRAGEアプタマーの効果を調べた。糸球体における半月体の形成を、PAS染色にて観察した。糸球体におけるワイヤーループ病変の形成を、マッソントリクローム染色にて観察した。マクロファージマーカーである抗CD68抗体および抗RAGE抗体を用いる蛍光抗体法により、糸球体におけるマクロファージの浸潤を観察した。結果を図15〜17に示す。MRL/lprマウスにおいて、RAGEアプタマーの投与は、半月体形成および糸球体内皮細胞の腫大を抑制し(図15)、ワイヤーループ病変の形成を減少させた(図16)。また、コントロールアプタマーを投与したマウスの糸球体では、マクロファージの浸潤が見られ、RAGEと共局在していたが、RAGEアプタマーを投与されたマウスの糸球体ではマクロファージの浸潤は有意に少なく、RAGEとの共局在は見られなかった(図17)。このことは、RAGEアプタマーにより、糸球体内へのマクロファージの浸潤が抑制されたことを示唆する。
自然発症SLEのモデルであるMRL/lprマウスは、生後24週前後で約50%が腎炎に起因する腎不全で死亡することが報告されている。上記の実験により、MRL/lprマウスの腎組織において、週齢を追ってRAGEの発現が増加することが明らかとなった。また尿中のRAGEも、MRL/lprマウスで対照マウスと比較して有意に増加し、尿中の尿細管障害マーカーであるNAG/Cre比とRAGE/Cre比に強い相関関係が認められた。
配列番号2:アプタマー
配列番号3:アプタマー
配列番号4:アプタマー
配列番号5:アプタマー
配列番号6:アプタマー
配列番号7:アプタマー
配列番号8:アプタマー
配列番号9:アプタマー
配列番号10:アプタマー
配列番号11:アプタマー
Claims (15)
- RAGEアプタマーを含む、ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物。
- RAGEアプタマーが以下からなる群から選択される、請求項1に記載の組成物:
(1)配列番号1〜10のいずれかの配列を含む、一本鎖DNA;
(2)配列番号1〜10のいずれかの配列と90%以上の配列同一性を有する配列を含み、RAGEに結合してRAGEとそのリガンドとの結合を阻害する、一本鎖DNA;および、
(3)配列番号1〜10のいずれかの配列において1、2、または3個の塩基が欠失、置換、または付加された配列を含み、RAGEに結合してRAGEとそのリガンドとの結合を阻害する、一本鎖DNA。 - RAGEアプタマーが、配列番号1〜10のいずれかの配列を含む、請求項1または2に記載の組成物。
- RAGEアプタマーが、配列番号1〜10のいずれかの配列からなる、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 全身性エリテマトーデスの患者に投与するための、請求項1〜4のいずれかに記載の組成物。
- ループス腎炎を処置するための、請求項1〜5のいずれかに記載の組成物。
- ループス腎炎を予防するための、請求項1〜5のいずれかに記載の組成物。
- 全身性エリテマトーデスの患者に投与するための、RAGEアプタマーを含む医薬組成物。
- 対象から採取された尿におけるRAGE濃度を測定することを含む、ループス腎炎の診断方法。
- 対象が全身性エリテマトーデスの患者である、請求項9に記載の方法。
- RAGEを検出するための試薬を含む、ループス腎炎を診断するための組成物。
- RAGEを検出するための試薬が、抗RAGE抗体、RAGEアプタマーまたはRAGEリガンドである、請求項11に記載の組成物。
- RAGEを検出するための試薬が抗RAGE抗体である、請求項11または請求項12に記載の組成物。
- 請求項11ないし請求項13のいずれかに記載の組成物を含む、ループス腎炎を診断するためのキット。
- ループス腎炎のバイオマーカーとしてのRAGEの使用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017047168A JP6964322B2 (ja) | 2017-03-13 | 2017-03-13 | ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017047168A JP6964322B2 (ja) | 2017-03-13 | 2017-03-13 | ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018150272A true JP2018150272A (ja) | 2018-09-27 |
JP6964322B2 JP6964322B2 (ja) | 2021-11-10 |
Family
ID=63679495
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017047168A Active JP6964322B2 (ja) | 2017-03-13 | 2017-03-13 | ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6964322B2 (ja) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009517404A (ja) * | 2005-11-28 | 2009-04-30 | メディミューン,エルエルシー | Hmgb1および/またはrageのアンタゴニストならびにその使用方法 |
KR20130083861A (ko) * | 2012-01-13 | 2013-07-23 | 연세대학교 산학협력단 | 용해성 rage를 유효성분으로 포함하는 루푸스 신염의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 |
JP2015146809A (ja) * | 2007-06-14 | 2015-08-20 | ギャラクティカ ファーマシューティカルズ, インク. | Rage融合タンパク質 |
JP2016079184A (ja) * | 2014-10-21 | 2016-05-16 | 学校法人 久留米大学 | Rageアプタマーおよびその用途 |
-
2017
- 2017-03-13 JP JP2017047168A patent/JP6964322B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009517404A (ja) * | 2005-11-28 | 2009-04-30 | メディミューン,エルエルシー | Hmgb1および/またはrageのアンタゴニストならびにその使用方法 |
JP2015146809A (ja) * | 2007-06-14 | 2015-08-20 | ギャラクティカ ファーマシューティカルズ, インク. | Rage融合タンパク質 |
KR20130083861A (ko) * | 2012-01-13 | 2013-07-23 | 연세대학교 산학협력단 | 용해성 rage를 유효성분으로 포함하는 루푸스 신염의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 |
JP2016079184A (ja) * | 2014-10-21 | 2016-05-16 | 学校法人 久留米大学 | Rageアプタマーおよびその用途 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS ANHUI, 2015, VOL.50 NO.4, P.533-537, JPN6020033448, ISSN: 0004467528 * |
ARTHRITIS & RHEUMATISM, 2011, VOL.63, P.S1020(ABSTRACT NO.2597), JPN6020033451, ISSN: 0004467529 * |
CURR OPIN NEPHROL HYPERTENS., 2015, VOL.24 NO.1, P.54-60, JPN6020033447, ISSN: 0004467527 * |
NAT IMMUNOL., 2007, VOL.8 NO.5, P.487-496, JPN6020033454, ISSN: 0004467530 * |
NAT REV NEPHROL., 2010, VOL.6, P.352-360, JPN6020033443, ISSN: 0004467526 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6964322B2 (ja) | 2021-11-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5901046B2 (ja) | OATP1B3mRNAの新規な選択的スプライシングバリアント | |
AU2011250588C1 (en) | Method for the diagnosis of epithelial cancers by the detection of EpICD polypeptide | |
EP2523687B1 (en) | Methods for diagnosis and treatment of cutaneous T cell lymphomas using the NKp46 receptor | |
CN105392800A (zh) | 抗cxcl1、cxcl7和cxcl8抗体及其应用 | |
JP2008523816A (ja) | 妊娠合併症の診断および処置に有用な核酸およびポリペプチド | |
JP2006526992A (ja) | 癌を検出し、癌の進行をモニタリングする方法 | |
JP2017505428A (ja) | 診断及び治療の方法 | |
CN106461681B (zh) | 用于诊断血管疾病的生物标志物及其用途 | |
JP2012506245A (ja) | 鉱質コルチコイドレセプターの活性化のバイオマーカー | |
KR20140108718A (ko) | 가와사키 질환용 바이오마커 | |
EP3346270A1 (en) | Composition for diagnosing infectious diseases or infectious complications by using tryptophanyl-trna synthetase and method for detecting diagnostic marker | |
Brown et al. | Evaluation of expression based markers for the detection of breast cancer cells | |
JP7175526B2 (ja) | 細胞遊走調節に関する疾患の予防・治療剤および肺間質の疾患の疾患活動性判定・予後評価 | |
US20130052207A1 (en) | Prognostic Method for Pulmonary Adenocarcinoma, Pulmonary Adenocarcinoma Detection Kit, and Pharmaceutical Composition for Treating Pulmonary Adenocarcinoma | |
JP2013213774A (ja) | 結核検査用バイオマーカー | |
US20210095293A1 (en) | Methods of treating cancers with gpr132 inhibitors | |
CN112626207A (zh) | 一种用于区分非侵袭性和侵袭性无功能垂体腺瘤的基因组合 | |
JP6964322B2 (ja) | ループス腎炎を処置または予防するための医薬組成物およびループス腎炎のバイオマーカー | |
JP2021522478A (ja) | 選択された患者の心血管疾患を治療するための組成物および方法 | |
CN106947818B (zh) | 一种诊治结肠腺癌的分子标志物 | |
CN110799544A (zh) | 用于鉴别并治疗白血病中对于cta4拮抗剂的耐药性的组合物和方法 | |
JP6531306B2 (ja) | 炎症性筋疾患鑑別マーカー及びそれを用いた炎症性筋疾患と非炎症性筋疾患の鑑別方法 | |
KR102055350B1 (ko) | 대장암의 항암제 내성 진단용 바이오마커 및 이의 용도 | |
US20200103397A1 (en) | Compositions and methods for detecting and treating pathological fibroblast cells | |
WO2022153907A1 (ja) | ネフローゼ症候群の診断を補助するためのマーカー及びその使用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A80 | Written request to apply exceptions to lack of novelty of invention |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A80 Effective date: 20170330 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190926 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200908 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201029 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210323 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210519 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210715 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20211005 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20211012 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6964322 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |