JP2018016594A - 動物用皮膚外用剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 塗布後速やかに皮膚の角質層に浸透し、角質水分量を増加させることができるバイオサーファクタントを含有した動物用皮膚外用剤を提供することを目的とする。【解決手段】バイオサーファクタントを含有することを特徴とする動物用皮膚外用剤。【選択図】なし

Description

本発明は、塗布後速やかに皮膚の角質層に浸透し、角質水分量を増加させることができるバイオサーファクタントを含有した動物用皮膚外用剤に関する。

人同様に、イヌやネコといった動物においても肌あれが起こる。このような肌あれは、環境の湿度が低いことによる乾燥や、紫外線、洗剤等に起因する、コレステロール、セラミド、脂肪酸等の角質細胞間脂質の溶出、および、角質細胞の変性や表皮細胞の増殖・角化バランスの崩壊による角層バリア機能の形成不全等によって発生する。肌あれが起こると、動物が患部を舐める、掻く、噛むことにより細菌や酵母などの二次感染が引き起こされ、皮膚状態がより健全ではなくなる。

このような肌あれを抱えている動物は多く、イヌやネコといった動物において、肌トラブルは動物病院を受診する理由の上位に入る。獣医師からは、皮膚状態を健全に保つために、洗うことが薦められるが、実際には洗うことにより角層の水分保持能が低下し、逆に症状が悪化することも認められている。

人の場合、肌あれを予防または緩やかに治癒するために、角質細胞間脂質成分又はそれに類似の構造物質を肌に塗布するなどの検討が行われている。例えば、特許文献１において、角質層の保湿効果、肌荒れの予防・改善効果、シワ形成の予防・改善効果等の皮膚老化防止効果に優れたバイオサーファクタントであるマンノシルエリスリトールリピッド（以下「ＭＥＬ」と示すことがある）を含有した皮膚外用剤や、特許文献２、３において、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを有するＭＥＬを含有する化粧品組成物が報告されている。

一方、イヌやネコといった動物において、バイオサーファクタントを含有した皮膚外用剤や化粧品組成物が、人同様に優れた効果を発現するかどうかは検討されていない。さらに、動物の場合、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動があることから、塗布後速やかにバイオサーファクタントが角質層の細胞間脂質へ浸透することが必要となる。

特開２０１１−１３２１３４号公報 特開２００９−１６７１５９号公報 特開２００７−３２９６０３号公報

本発明は、塗布後速やかに皮膚の角質層に浸透し、角質水分量を増加させることができるバイオサーファクタントを含有した動物用皮膚外用剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、人の角質層の保湿効果、肌荒れの予防・改善効果に優れたバイオサーファクタントを動物の皮膚に塗布すると、角質層の水分量が増加すること、かつ、バイオサーファクタントが塗布後速やかに角質層へ浸透することから、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動がある動物に対しても保湿効果、肌荒れの予防・改善効果が得られることに想到し、本発明を完成させた。

本発明は以下の代表的な発明を提供する。
［１］ バイオサーファクタントを含有することを特徴とする動物用皮膚外用剤。
［２］ バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする［１］に記載の動物用皮膚外用剤。
［３］ バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする［１］または［２］に記載の動物用皮膚外用剤。
［４］ マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする［３］に記載の動物用皮膚外用剤。
［５］ MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL-A）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL-B）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL-C）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL-D）、MEL-Aのトリアシル体、MEL-Bのトリアシル体、MEL-Cのトリアシル体及びMEL-Dのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする［４］に記載の動物用皮膚外用剤。
［６］ バイオサーファクタントと保湿剤を少なくとも含有することを特徴とする［１］〜［５］のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
［７］ バイオサーファクタントと抗菌剤を少なくとも含有することを特徴とする［１］〜［６］のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
［８］ バイオサーファクタントと次の成分（Ａ）を含有することを特徴とする［１］〜［７］のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
（Ａ）ステロール類、ミコナゾール硝酸塩、クロルヘキシジングルコン酸塩、チオストレプトン、ナイスタチン、フラジオマイシン硫酸塩、トリアムシノロンアセトニド、チアントール、ブレドニゾロン、塩酸ジフェンヒドラミン、サリチル酸、ジフェンヒドラミン、イオウ、ステアリン酸、トリエタノールアミン、パラオキシ安息香酸プロピル、酢酸クロルヘキシジン、ピロクトンオラミン、マクロゴール、ウンデシレン酸、アミノ安息香酸エチルベンダザック、インドメタシン、ブフェキサマック、ウフェナマート、イブプロフェンピコノール、スプロフェン、フルフェナム酸ブチル、ビタミンＡ油、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸イソチペンジル、ジフェニルイミダゾール、硫酸クレミゾール、クロタミトン、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸二カリウム、サリチル酸メチル、サリチル酸グリコール、アラントイン、グアイアズレン、ジクロフェナクナトリウム、イブプロフェン、ザルトプロフェン、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、アンピロキシカム、リシプフェン、テノキシカム、フェルビナク及びオルセノンから選ばれる１種又は２種以上
［９］ 化粧料、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである［１］〜［８］のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。

本発明の動物用皮膚外用剤によれば、バイオサーファクタントが塗布後速やかに角質層へ浸透し、角質層の水分量を増加させることができることから、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動がある動物に対しても保湿効果、肌荒れの予防・改善効果が得られる。

（バイオサーファクタント）
「バイオサーファクタント」とは、生物によって生み出される界面活性物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、さまざまな生理作用を有していることから、合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。バイオサーファクタントとしては、微生物が生産する界面活性物質が代表的なものとして挙げられる。現在、上述した微生物が生産する界面活性物質としては、糖型、アシルペプチド型、リン脂質型、脂肪酸型及び高分子化合物型の５つに大別されている。

本発明に用いられるバイオサーファクタントは、マンノース骨格を有するバイオサーファクタントであることが好ましい。より好ましくは、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合しているバイオサーファクタントである。具体的には、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、ＭＥＬ以外のマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）としては、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）などが挙げられ、中でも、ＭＥＬが好ましい。

（ＭＥＬ）
ＭＥＬは、ウスチラゴ ヌーダ（Ustilago nuda）とシゾネラ メラノグラマ（Shizonella melanogramma）から発見された物質である。その後、イタコン酸生産の変異株であるキャンデダ属酵母、シュードザイマ アンタークチカ（Pseudozyma antarctica）、クルツマノマイセス（Kurtzmanomyces）属等の酵母らによっても生産されることが報告されている。

ＭＥＬの構造を一般式（１）に示す。一般式（１）中、置換基Ｒ１は、同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基である。ＭＥＬは、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無に基づいて、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ及びＭＥＬ−Ｄの４種類に分類される。

具体的には、ＭＥＬ−Ａは、一般式（１）中、置換基Ｒ２およびＲ３がともにアセチル基である。ＭＥＬ−Ｂは、一般式（１）中、置換基Ｒ２はアセチル基であり、置換基Ｒ３は水素である。ＭＥＬ−Ｃは、一般式（１）中、置換基Ｒ２が水素であり、置換基Ｒ３はアセチル基である。ＭＥＬ−Ｄは、一般式（１）中、置換基Ｒ２及びＲ３がともに水素である。

上記ＭＥＬ−Ａ〜ＭＥＬ−Ｄにおける置換基Ｒ１の炭素数は、ＭＥＬ生産培地に含有させる油脂類であるトリグリセリドを構成する脂肪酸の炭素数および、使用するＭＥＬ生産菌の脂肪酸の資化の程度によって変化する。また、上記、トリグリセリドが不飽和脂肪酸残基を有する場合、ＭＥＬ生産菌が上記不飽和脂肪酸の二重結合部分まで資化しなければ、置換基Ｒ１として不飽和脂肪酸残基を含ませることも可能である。以上の説明から明らかなように、得られるＭＥＬは、通常、置換基Ｒ１の脂肪酸残基部分が異なる化合物の混合物の形態である。

本発明の組成物には一般式（２）または一般式（３）に示されている構造を有するマンノシルエリスリトールリピッドが含まれている。尚、一般式（２）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。また、一般式（３）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。置換基Ｒ１の炭素数は上記範囲内であれば特に限定されないが、８個〜１４個であることがさらに好ましい。

また、上記一般式（２）及び一般式（３）中の置換基Ｒ１は、飽和脂肪族アシル基であっても不飽和脂肪族アシル基であってもよく、特に限定されるものではない。不飽和結合を有している場合、例えば、複数の二重結合を有していても良い。炭素鎖は直鎖であっても分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数及び位置は特に限定されない。

ＭＥＬ以外のＭＡＬ（マンノシルアルジトールリピッド）の構造は一般式（４）に示す（式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である）。エリスリトール以外の糖アルコール（アルジトール）としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトールが付加している(n=４：マンニトール、ソルビトール、n=２：アラビトール、リビトール)。一般式（４）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有する（式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である）。

式中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。好ましくは、式中、置換基Ｒ２のどちらもアセチル基である化合物である。

本発明に好ましく用いられるバイオサーファクタントは、上述で示されるＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃである。

なお、バイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。

バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばＭＥＬ(ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ)の培養生産は常法に従って、Pseudozyma antarctica(NBRC 1073)により生産することができ、微生物としてはPseudozyma antarctica、Pseudozyma sp.等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬＢ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 及びPseudozyma tsukubaensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensis、Pseudozyma graminicola等が知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。

本発明の動物用皮膚外用剤は、バイオサーファクタントとは別に保湿剤を含有することができる。保湿剤としては、親水性保湿剤および／または親油性保湿剤であればよく、親水性保湿剤として、アミノ酸、ペプチド、蛋白質、高級アルコール及びこれらの誘導体、親油性保湿剤として、リン脂質、糖脂質、ステロイド類を用いてもよい。

保湿剤として、ピリドンカルボン酸ナトリウム、グリコール、グリセリン、グルコース、マルトース、マルチトール、ショ糖、フラクトース、キシリトール、ソルビトール、マルトトリオース、スレイトール、エリスリトール、デンプン分解糖還元アルコール、ソルビトール、多価アルコール類としては、エチレングリコール、１，４−ブチレングリコール、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−プロパンジオール、その他セリン、グリシン、スレオニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸またはそのエステル類、エイコサペンタエン酸またはそのエステル類、ペクチン、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物またはその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ−オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマ、ピロリドンカルボン酸、トマトエキス、ツバキ油、大豆リン脂質、ヒアルロン酸、トレオニン、グリコール酸アンモニウム、アルギン酸メチルシラノール、ヨクイニン、トウキエキス、トウキ根エキス、ダイズエキス、アスパラガスエキス、ＤＮＡ−Ｎａ、ＰＣＡ−Ｎａ、ＲＮＡ−Ｎａ、アシタバエキス、アスパラギン酸、アマチヤエキス、アラニン、アルギニン、アルギン酸Ｎａ、アルテアエキス、アロエベラエキスー、オイスタエキス、オオムギバクガエキス、カキ葉、加水分解ケラチン、加水分解コラーゲン、加水分解コンキオリン、加水分解卵殻膜、加水分解卵白、加水分解シルク、加水分解ダイズタンパク、褐藻エキス、カリンエキス、キイチゴエキス、キシリトール、キトサン、キュウリエキス、キュウリ果実エキス、グアバ菓エキス、クインスシードエキス、グリセリン、グルコース、グレープフルーツエキス、グレープフルーツ果実エキス、クレマティスエキス、ゴボウエキス、コメ発酵液、コンドロイチン硫酸Na、魚コラ一ゲノ、サンザシエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、グリセリン、シスチン、システイン、スギナエキス、ゼニアオイエキス、セリン、ソルビトール、ダイズタンパク、トマトエキス、乳酸Na、乳酸桿菌、ダイズ発酵エキス、尿素仰／ノバラエキス・アーモンド浬、コーン油、ハチミツ、ヒアルロン酸Ｎａ、フクノエキス、ベタイン、ヘチマエキス、マルチトール、マルトース、マンニトール、ユリエキス、ラクトフェリン、リシン、リンゴエキス、レンゲソウエキス、ローヤルゼリー、ラノリン脂肪酸ポリエチレングリコール１０００、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソブチル、ヘキシルデカノール、乳酸ミリスチル、ラノリン脂肪酸、トリカプリルグリセリル、オレイルアルコール、オレイン酸オクチルドデシル、オレイン酸デシル、還元ラノリン、オクチルドデカノール、アーモンド油、アボカド油、オリーブ油、オレイン酸、オレンジラフイー油、カカオ脂、カロットエキス、ゴマ油、サザンカ油、サフラワー油、ジヒドロコレステロール、スクワラン、ステアリン酸コレステリル、セラミド２、月見草油、ヒマシ油、ヒマワリ油、セフニド３、ヒマワリ種子油ハイブリッドヒマワリ油、フィトスフィンゴシン、ブドウ種子油、ホホバ油、ホホバ種子油、ミネラルオイル、ミンク油、マカデミアナッツ油、メドウフォーム油、ユーリ油、ユーカリ葉油、ラノリン、リノール酸、ローズヒップ油、ワセリン及びポリグルタミン酸、リピジュア、セラミド類等が例示される。これらの保湿剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

本発明の動物用皮膚外用剤は、更に抗菌剤を含有することができる。抗菌剤が、有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であってもよい。

例えば抗菌剤として、オウバク抽出液、ハロカルバン、クロロフェネシン、塩化リゾチーム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、ヘキサクロロフェン、ベルベリン、チオキソロン、サリチル酸およびそれらの誘導体、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、パラクロルメタクレゾール、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール、石炭酸、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ヘキサクロロフェン、塩化クロルヘキシジン、トリクロロカルバニリド、感光素、ビス（２−ピリジルチオ−１−オキシド）亜鉛、チアントール、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、モノニトログアヤコールナトリウム、ウイキョウエキス、サンショウエキス、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム及びウンデシレン酸誘導体などが例示される。これらの抗菌剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

本発明の動物用皮膚外用剤は、更に動物の皮膚疾患に薬効を示す化合物（成分（Ａ））を含有することができる。成分（Ａ）としては、動物の皮膚疾患を治療するために使用される成分であれば、特に制限されないが、ステロール類、ミコナゾール硝酸塩、クロルヘキシジングルコン酸塩、チオストレプトン、ナイスタチン、フラジオマイシン硫酸塩、トリアムシノロンアセトニド、チアントール、ブレドニゾロン、塩酸ジフェンヒドラミン、サリチル酸、ジフェンヒドラミン、イオウ、ステアリン酸、トリエタノールアミン、パラオキシ安息香酸プロピル、酢酸クロルヘキシジン、ピロクトンオラミン、マクロゴール、ウンデシレン酸、アミノ安息香酸エチルベンダザック、インドメタシン、ブフェキサマック、ウフェナマート、イブプロフェンピコノール、スプロフェン、フルフェナム酸ブチル、ビタミンＡ油、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸イソチペンジル、ジフェニルイミダゾール、硫酸クレミゾール、クロタミトン、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸二カリウム、サリチル酸メチル、サリチル酸グリコール、アラントイン、グアイアズレン、ジクロフェナクナトリウム、イブプロフェン、ザルトプロフェン、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、アンピロキシカム、リシプフェン、テノキシカム、フェルビナク及びオルセノンから選ばれる１種又は２種以上が挙げられる。

本発明の皮膚外用剤中のバイオサーファクタントの含有量は、０．００１〜１０質量％、特に０．００５〜５質量％、更に０．０１〜３質量％であるのが好ましい。

本発明の動物用皮膚外用剤には、上記成分以外に、通常の人の皮膚外用剤で使用される成分、例えばキシリトール、トレハロース、尿素、アミノ酸等の保湿剤；キサンタンガム、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルグアガム等の水溶性増粘剤；アラントイン、酢酸トコフェロール等の薬効剤；セルロースパウダー、ナイロンパウダー、架橋型シリコーン末、架橋型メチルポリシロキサン、多孔質セルロースパウダー、多孔質ナイロンパウダー等の有機粉体；無水シリカ、酸化亜鉛、酸化チタン等の無機粉体；ｐＨ緩衝剤、酸化防止剤、防腐剤、香料、殺菌剤、色素などを含有させることができる。

本発明の動物用皮膚外用剤は、化粧料、医薬品、入浴剤、清拭剤、毛髪ケア剤として使用するのが好ましい。剤形は限定されず、液剤、ゲル、気泡、乳液、クリーム、軟膏、シート、ムース、浴用剤など多様なものとすることができる。

バイオサーファクタントを含有した動物用皮膚外用剤を動物に塗布すると、バイオサーファクタントを含有させていない前記の動物用皮膚外用剤を塗布した場合より、皮膚の角質水分量を増加させることができる。更に、本発明の動物用皮膚外用剤は塗布後速やかに皮膚の角質層に浸透することから、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動がある動物に対して特に有効である。

更に別の効果として、本発明の動物用皮膚外用剤は、動物に塗布することにより、被毛に「柔軟性」、「平滑性」、「しっとり感」、「しなやかさ」を付与することができる。

以下に製造例を挙げて本発明をより具体的に説明する。以下において、含有量ないし使用量を表す「％」は、特記しないかぎり質量基準である。

（製造例１〜３）
表１に記載の組成に従い、バイオサーファクタント、保湿剤を含む動物用皮膚外用剤を製造した。コントロールとして、バイオサーファクタントを含まない動物用皮膚外用剤も製造した。

（製造例４〜６）
表２に記載の組成に従い、バイオサーファクタント、保湿剤、抗菌剤を含む動物用皮膚外用剤を製造した。コントロールとして、バイオサーファクタントを含まない動物用皮膚外用剤も製造した。

（製造例７〜１２）
表３に記載の組成に従い、バイオサーファクタント、保湿剤、抗菌剤、成分（Ａ）を含む動物用皮膚外用剤を製造した。コントロールとして、バイオサーファクタントを含まない動物用皮膚外用剤も製造した。

（実施例１）
製造例１〜１２に示した組成の動物用皮膚外用剤をイヌの皮膚に塗布し、イヌの皮膚の角質水分量を測定した。具体的には、測定前日に腹部の被毛を剃ったイヌ５頭（ミニチュアダックスフント２頭、柴犬２頭、パピヨン１頭）を用い、２０℃、５０％ＲＨ環境にて３０分間安静にさせた後、Corneometer CM825（Courage+Khazaka社）を用いて、腹部の塗布前の角質水分量を測定した。その後、動物用皮膚外用剤２０μＬを腹部２０ｃｍ^２に塗布し、３０分間放置後、塗布後の角質水分量を測定した。塗布後の角質水分量から塗布前の角質水分量を減法し、角質水分量の増加量を算出した。角質水分量の増加量のイヌ５頭の平均値を次の基準に従って判定した。結果を表４に示す。
判定基準
◎：１５より多い
○：１０〜１５
△：５〜９
×：０〜４

（実施例２）
製造例１〜１２に示した組成の動物用皮膚外用剤をイヌの皮膚に塗布し、塗布３分後のイヌの皮膚の角質層に浸透したバイオサーファクタント量を評価した。具体的には、測定前日に腹部の被毛を剃ったイヌ５頭（ミニチュアダックスフント２頭、柴犬２頭、パピヨン１頭）を用い、２０℃、５０％ＲＨ環境にて３０分間安静にさせた後、動物用皮膚外用剤２０μLを腹部７．５ｃｍ^２に塗布した。塗布３分後の皮膚をキムタオル（日本製紙クレシア製）でふき取り、ポリイミドテープ（中興化成工業製）７．５ｃｍ^２を貼り付け、はがした。さらにポリイミドテープ７．５ｃｍ^２を貼り付け、はがすことを４回繰り返した。５枚のポリイミドテープのうち、３〜５回目のポリイミドテープ３枚をアセトニトリルに浸漬し、３時間超音波にかけてポリイミドテープから抽出を行った。得られた抽出液を濃縮、固相抽出カートリッジ（ＯＤＳ／アセトニトリル）にて精製し、精製液を穏やかに乾固させ、水／アセトニトリル＝１／１ ２５０μＬに溶解させ、ＬＣ／ＭＳ分析を行った。ＬＣ条件として、装置はＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（日本ウォーターズ製）、カラムはＢＥＨ−Ｃ１８ ２．１ｍｍ１５０ｍｍ（日本ウォーターズ製）、移動相はＡ：０．１ｗｔ％ギ酸、Ｂ：アセトニトリル、０分（５５％Ｂ）−２５分（９８％Ｂ）−３５分（９８％Ｂ）、流速は０．２ｍｌ／分、カラム温度は４０℃である。ＭＳ条件として、装置はｍｉｃｒＯＴＯＦ（ＢＲＵＫＥＲ ＤＡＬＴＯＮＩＣＳ製）、イオン化法はＥＳＩポジティブである。イヌ５頭それぞれについて、バイオサーファクタントが検出されれば○、検出されなければ×で判定した。結果を表４に示す。

表４から明らかなように、本発明の動物用皮膚外用剤は塗布後速やかに皮膚の角質層に浸透し、角質水分量を増加できることから、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動がある動物に対しても保湿効果、肌荒れの予防・改善効果が得られる。

本発明のバイオサーファクタントを含有する動物用皮膚外用剤により、皮膚外用剤を塗布した患部を舐める、掻く、噛む等の行動がある動物に対しても保湿効果、肌荒れの予防・改善効果を有する化粧料、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することができ、動物の皮膚を健常に保つことに大きく寄与することが期待される。

Claims (9)

1. バイオサーファクタントを含有することを特徴とする動物用皮膚外用剤。
2. バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする請求項１に記載の動物用皮膚外用剤。
3. バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする請求項１または２に記載の動物用皮膚外用剤。
4. マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（MEL）、マンノシルマンニトールリピッド（MML）、マンノシルソルビトールリピッド（MSL）、マンノシルアラビトールリピッド（MAraL）及び／又はマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする請求項３に記載の動物用皮膚外用剤。
5. MELが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（MEL-A）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（MEL-B）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（MEL-C）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（MEL-D）、MEL-Aのトリアシル体、MEL-Bのトリアシル体、MEL-Cのトリアシル体及びMEL-Dのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の動物用皮膚外用剤。
6. バイオサーファクタントと保湿剤を少なくとも含有することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
7. バイオサーファクタントと抗菌剤を少なくとも含有することを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
8. バイオサーファクタントと次の成分（Ａ）を含有することを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。
   （Ａ）ステロール類、ミコナゾール硝酸塩、クロルヘキシジングルコン酸塩、チオストレプトン、ナイスタチン、フラジオマイシン硫酸塩、トリアムシノロンアセトニド、チアントール、ブレドニゾロン、塩酸ジフェンヒドラミン、サリチル酸、ジフェンヒドラミン、イオウ、ステアリン酸、トリエタノールアミン、パラオキシ安息香酸プロピル、酢酸クロルヘキシジン、ピロクトンオラミン、マクロゴール、ウンデシレン酸、アミノ安息香酸エチルベンダザック、インドメタシン、ブフェキサマック、ウフェナマート、イブプロフェンピコノール、スプロフェン、フルフェナム酸ブチル、ビタミンＡ油、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸イソチペンジル、ジフェニルイミダゾール、硫酸クレミゾール、クロタミトン、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸二カリウム、サリチル酸メチル、サリチル酸グリコール、アラントイン、グアイアズレン、ジクロフェナクナトリウム、イブプロフェン、ザルトプロフェン、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、アンピロキシカム、リシプフェン、テノキシカム、フェルビナク及びオルセノンから選ばれる１種又は２種以上
9. 化粧料、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである請求項１〜８のいずれかに記載の動物用皮膚外用剤。