JP2017526746A - 組織または器官の癒着を予防または治療するための組換え融合タンパク質 - Google Patents
組織または器官の癒着を予防または治療するための組換え融合タンパク質 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017526746A JP2017526746A JP2017530418A JP2017530418A JP2017526746A JP 2017526746 A JP2017526746 A JP 2017526746A JP 2017530418 A JP2017530418 A JP 2017530418A JP 2017530418 A JP2017530418 A JP 2017530418A JP 2017526746 A JP2017526746 A JP 2017526746A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fusion protein
- recombinant fusion
- adhesions
- protein according
- domain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/04—Macromolecular materials
- A61L31/043—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof
- A61L31/047—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L31/044 - A61L31/046
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/76—Albumins
- C07K14/765—Serum albumin, e.g. HSA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6402—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals
- C12N9/6418—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals from snakes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21074—Venombin A (3.4.21.74)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Surgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
高分子量の不活性な安定ドメインの線維素原溶解酵素との共役は、C末端および/またはN末端のいずれかで起こる。この場合、酵素の活性を維持するには、その酵素ドメインの構造が考慮されなければならない。任意選択的に、十分に長いリンカー配列がタンパク質間に挿入されなければならない。遊離のNまたはC末端が酵素の活性にとって必要とされる場合、可能なバリアントのうちの1つのみの酵素の活性が維持される。これは、既知の方法に従って、例えば、活性アッセイに基づいて不当な負担なしに専門家が決めることができる。この分子量の増加を達成するために、好ましいバリアントにおいて複数の安定ドメインを酵素ドメインのC末端またはN末端と結合させることができる。また、様々な安定ドメインの組合せ(例えば、組換え発現の産物として調製される)も可能である。この安定ドメインを線維素原溶解酵素と結合させることにより、その酵素の線維素原溶解特性は融合産物中でさえ保存され、したがって、得られる新規な組換え融合タンパク質は薬理学的に活性であると同時に前述の不利点を回避する。
これらの理由のため、本発明の組換え融合タンパク質は、それらが今日までにテストされた物質と比べて副作用を殆どまたは全くなくすため(その低い全身アベイラビリティにより)、治療用途の優れた候補である。さらに、本発明の物質は、その長い作用持続時間のために有意に良好な有効性を有し、したがって、それらは活性物質の長い作用持続時間を必要とする治療用途に広く適している。
本発明の構築物は、その産生後に既知のアッセイの1つでその生物活性に関して検証され、そこで融合タンパク質の線維素原溶解酵素活性が判定される。より具体的には、本発明は、十分な線維素原溶解活性の融合タンパク質を含む。生物活性を最適化するために、その共役の型および位置と、リンカーの構造および長さと、安定化ドメインの型および構造とを調整することが必要な場合がある。具体的には、安定ドメインの立体的障害は酵素活性に悪影響を与えるが、これはin vitroで利用できる手段を使用して当業者が容易に判定することができる。
腹部に投与され、予防または治療効果に必要とされる薬学的に有効な溶液の酵素活性は、創傷治療の全期間にわたって0.01〜10単位/mlの範囲である。好ましくは、0.1〜5単位/ml(単位/ml)の融合タンパク質の濃度が使用される。好ましくは、この組換え融合タンパク質は、浸透圧活性媒体(例えば、イコデキストリン溶液)中で使用されることになる。
本発明の組成物を生産するために、アンクロッドとヒトIgG1抗体の定常領域とからなる融合タンパク質が調製された。生物活性アンクロッドドメインと、IgG1−Fc抗体フラグメントによって形成される安定化ドメインとの間にグリシン−アラニンリンカーが挿入される。細胞培地中への分泌を向上させるために、かつ精製を容易にするためにヒト血清アルブミンのシグナルペプチドがN末端に付加される。
産生のためにアンクロッドタンパク質の配列(受託番号:ABN13428.1)が、ヒトIgG1の定常領域(Uniprot受託番号:P01857−1、アミノ酸104〜330)のC末端に屈曲性のグリシン−アラニンリンカーを介して付加された。続いて、精製に必要なHSAシグナルペプチド(アミノ酸1〜18)が付加された。この融合タンパク質をコードするcDNAの合成のため、DNAコドンがヒト細胞中での発現のために最適化された。cDNAの5’末端にNotIおよびXbaIの制限部位が、また3’末端にBstXIおよびHindiIIの制限部位が付加された。これは、一過性の発現用および/または安定な細胞株の産生用の適切なベクター中にDNAをクローン化することを可能にする。得られたcDNA構築物は合成的に産生された。
この実施例では、アンクロッド、ヒト血清アルブミン(HSA)、ヒト血清アルブミンのシグナルペプチド、およびそれに続くHis−Tagからなるアンクロッド系融合タンパク質のさらなるバリアントを示す。生物活性ドメインとヒト血清アルブミンによって形成される安定ドメインとの間にグリシン/セリンリンカーが挿入される。
この産生のためにアンクロッドタンパク質の配列(受託番号:ABN13428.1)を、C末端でヒト血清アルブミン(HSA)(受託番号:P02768、アミノ酸25〜609)のN末端と融合させる。続いてHSAシグナルペプチド(アミノ酸1〜18)が付加される。このcDNAは上記のように処理され、そのタンパク質が発現した。
10mM Tris−HClおよび0.15M NaCl(pH7.4)中に溶解した基質としての線維素原(1mg/ml)を使用して融合タンパク質の活性試験を行った。ピペットで各500μlの線維素原溶液を取ってキュベットに入れた。2分後、100μlの試料または陽性対照(バトロキソビン)を加えた。その後、340nmにおける濁りの増加を光度測定によって1時間の期間にわたって測定し、曲線の最大勾配を確定した。曲線の最大勾配は酵素の活性に比例しており、較正曲線を使用して単位/mlに変換した。
哺乳動物(例えば、ヒトまたは実験動物)における予防または治療用途のために、発現後に単離および精製した本発明の組換え融合タンパク質または相当する用量のプラセボを、癒着を引き起こした術後の試験動物の腹部に直接施用した。最適の効果を達成するには0.01〜10U/mlの酵素活性が望ましい。この薬液は、0.1〜5U/mlの活性を有する融合タンパク質を含む。
この融合タンパク質の産生のためにアンクロッドタンパク質の配列(受託番号:ABN13428.1)を、C末端でヒト血清アルブミン(HSA)(受託番号:P02768、アミノ酸25〜609)のN末端と融合させる。融合タンパク質の酵素の活性は24U/mlである。
犬における薬物動態
3匹のビーグル犬に静脈中および腹膜内の留置カテーテルを入れた。カテーテル移植の1週間後、動物は試験物質の1回の腹膜内注射を受けた。0.5mlの腹水試料が、この物質の投与後、0、0.5、1、2、4、6および8時間の間隔で採取され、また静脈血試料が、0、0.5、1、2、4、6、8、16および24時間の時点でのクエン酸血漿を抽出するために採取された。血漿試料中の線維素原濃度をClaussによる方法による測光法で測定した。腹水中の酵素活性を、ヒト線維素原の添加後にカイネティック比濁法を使用して試料の遠心分離によって測定した。
Sprague−Dawleyラットが、短い吸入麻酔中に試験物質の腹膜内注射を受けた。同時に静脈血試料が採取された。その後、動物はケージに戻され、そこで動物は短時間後に覚醒した。この物質の投与の6時間後に動物を再度麻酔させ、クエン酸血の抽出のために腹水およびさらなる血液試料を取り出した。収集後、直ちに両方の試料を遠心分離機にかけ、−80℃に急速凍結し、その後、前述の方法で分析した。
(非特許文献3)Arung, W.; Meurisse, M.; Detry, O. (2011): Pathophysiology and prevention of postoperative peritoneal adhesions. In: World J Gastroenterol 17 (41), pp 4545-4553.
(非特許文献23)Ashby, E. C.; James, D. C.; Ellis, H. (1970): The effect of intraperitoneal Malayan pit-viper venom on adhesion formation and peritoneal healing. In: Br J Surg 57 (11), S. 863 ad.
(非特許文献20)Binda, M.M.; Hellebrekers, B.W.; Declerck, P.J.; Koninckx, P.R. (2009): Effect of Reteplase and PAI-1 antibodies on postoperative adhesion formation in a laparoscopic mouse model. In: Surgical Endoscopy 23 (5), pp 1018-1025.
(非特許文献18)Binneboesel, M.; Klink, C.; Serno, J.; Jansen, P.; Trotha, K. von; Neumann, U.; Young, K. (2011): Chronological evaluation of inflammatory mediators during peritoneal adhesion formation using a rat model. In: Langenbeck's Archives of Surgery 396 (3), pp 371-378.
(非特許文献7)Broek, R.P.G. ten; Issa, Y.; van Santbrink, E.J.P.; Bouvy, N.D.; Kruitwagen, R.F.P.M.; Jeekel, J.等 (2013A): Burden of adhesions in abdominal and pelvic surgery: systematic review and met-analysis. In: BMJ 347, p f5588.
(非特許文献13)Broek, RPG ten; Kok-Krant, N.; Bakkum, E.A.; Bleichrodt, R.P.; van Goor, H. (2013B): Different surgical techniques to reduce post-operative adhesion formation: a systematic review and meta-analysis. In: Hum Reprod Update 19 (1), pp 12-25.
Brokelman, W.J.A.; Lensvelt, M.; Borel Rinkes, I.H.M.; Klinkenbijl, J.H.G.; Reijnen, M.M.P.J. (2011): Peritoneal changes due to laparoscopic surgery. In: Surg Endosc 25 (1), pp 1-9.
(非特許文献8)Brummer, T.H.I.; Jalkanen, J.; Fraeser, J.; Heikkinen, A-M.; Kauko, M.; Maekinen, J.等 (2011): FINHYST, a prospective study of 5279 hysterectomies: complications and their risk factors. In: Hum Reprod 26 (7) pp 1741-1751.
(非特許文献24)Buckman, RFJr; Bordos, D.; Bell, W.R.; Cameron, J.L. (1975): Prevention of experimental postoperative adhesions by ancrod defibrinogenation. In: J Surg Res 18 (4), pp 377-384.
(非特許文献25)Chowdhury, S.M.; Hubbell, J.A. (1996): Adhesion prevention with ancrod released via a tissue-adherent hydrogel. In: J Surg Res 61 (1), pp 58-64.
Cohen, Z.; Senagore, A.J.; Dayton, M.T.; Koruda, M.J.; de Beck; Wolff, B.G.等 (2005): Prevention of postoperative abdominal adhesions by a novel, glycerol / sodium hyaluronate/carboxymethylcellulose-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, evaluator-blinded multicenter study. In: Diseases of the colon and rectum 48 (6), pp 1130-1139.
(非特許文献19)Diamond, M.P.; Kruger, M.; Saed, G.M. (2004): Effect of Tisseel on expression of plasminogen activator and plasminogen activator tissue inhibitor-1. In: Fertility and sterility 81 (6), pp 1657-1664.
(非特許文献4)Ellis, H.; Moran, B.J.; Thompson, J.N.; Parker, M. C; Wilson, M.S.; Menzies, D. 等 (1999): Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. In: Lancet 353 (9163), pp 1476-1480.
(非特許文献16)Fossum, G.T.; Silverberg, K.M.; Miller, C.E.; Diamond, M.P.; Holmdahl, L. (2011): Gynecologic use of Sepraspray Adhesion Barrier for reduction of adhesion development after laparoscopic myomectomy: a pilot study. In: Fertil Steril 96 (2), pp 487-491.
(非特許文献1)Hellebrekers, B.W.J.; Emeis, J.J.; Kooistra, T.; Trimbos, J.B.; Moore, N.R.; Zwinderman, K.H.; Trimbos-Kemper, TC (2005): A role for the fibrinolytic system in postsurgical adhesion formation. In: Fertil Steril 83 (1), pp 122-129.
(非特許文献22)Hellebrekers, B.W/; Trimbos-Kemper, T. C; Boesten, L; Jansen, F.W.; Kolkman, W.; Trimbos, J.B. 等 (2009): Preoperative predictors of postsurgical adhesion formation and the Prevention of Adhesions with Plasminogen Activator (PA-study): results of a clinical pilot study. In: Fertil Steril 91 (4), pp 1204-1214.
(非特許文献2)Hellebrekers, B.W.J.; Kooistra, T. (2011): Pathogenesis of postoperative adhesion formation. In: Br J Surg 98 (1 1), pp 1503-1516.
(非特許文献21)Hill-West, J.L.; Dunn, R.C.; Hubbell, J.A. (1995): Local release of fibrinolytic agents for adhesion prevention. In: J Surgical Research 59 (6), pp 759-763.
Klingler, P.J.; Floch, N. Ft.; Seelig, M.H.; Branton, S.A.; Wolfe, J.T.; Metzger, P.P. (1999): Seprafilm-induced peritoneal inflammation: a previously unknown complication. Report of a case. In: Diseases of the colon and rectum 42 (12), pp 1639-1643.
(非特許文献9)Koessi, J.; Salminen, P.; Rantala, A.; Laato, M. (2003): Population-based study of the surgical workload and economic impact of bowel obstruction caused by postoperative adhesions. In: Br J Surg 90 (11), pp 1441-1444.
(非特許文献5)Parker, M.C; Wilson, M.S.; Menzies, D.; Sunderland, G.; Clark, D.N.; Knight, A.D.; Crowe, A.M. (2005): The SCAR-3 study: 5-year adhesion-related readmission risk Following lower abdominal surgical procedures. In: Colorectal Dis 7 (6), pp 551-558.
(非特許文献6)Parker, M.C; Ellis, H.; Moran, B.J.; Thompson, J.N.; Wilson, M.S.; Menzies, D. 等 (2001): Postoperative adhesions: ten-year follow-up of 12,584 patients undergoing lower abdominal surgery. In: Dis Colon Rectum 44 (6), pp 822-830.
(非特許文献11)Ray, N.F.; Denton, W.G.; Thamer, M.; Henderson, S.C; Perry, S. (1998): Abdominal adhesiolysis: inpatient care and expenditures in the United States in 1994. J Am Surg Coli 186 (1), pp 1-9.
(非特許文献17)Saed, G.M.; Diamond, M.P. (2004): Molecular characterization of postoperative adhesions: the adhesion phenotype. In: The Journal of the American Association of Gynecologic Laparoscopists 11 (3), pp 307-314.
(非特許文献14)SCAR Group (2013): Pathogenesis, consequences, and control of peritoneal adhesions in gynaecologic surgery: a committee opinion. Fertil Steril 99 (6), pp 1550-1555.
(非特許文献12)Schnueriger, B.; Barmparas, G.; Branco, B.C; Lustenberger, T.; Inaba, K.; Demetriades, D. (2011): Prevention of postoperative peritoneal adhesions: a review of the literature. The American Journal of Surgery 201 (1), pp 111-121.
(非特許文献27)Schlapschy M, Binder U, Boerger C, 等 (2013) PASylation: a biological alternative to PEGylation for extending the plasma half-life of pharmaceutically active proteins. Protein Eng Des Sel. 26 (8): 489-501.
(非特許文献10)Sikirica, V.; Bapat, B.; Candrilli, S.D.; Davis, K.L; Wilson, M.; Johns, A. (2011): The inpatient burden of abdominal and gynaecological adhesiolysis in the US. BMC Surg 11, p.13.
(非特許文献15)Wallwiener, M.; Koninckx, P.R.; Hackethal, A.; Broelmann, H.; Lundorff, P.; Mara, M. 等 (2014): A European survey on awareness of post-surgical adhesions among gynaecological surgeons. In: Surg Gynecol 11 (2), pp 105-112.
Claims (15)
- アミノ酸配列を有する線維素原溶解酵素であって、50kDa超の分子量を有する少なくとも1個の高分子の不活性な安定ドメインのアミノ酸配列にC末端および/またはN末端で結合している線維素原溶解酵素を含む、組織または器官の癒着、具体的には外科的介入後の腹膜の癒着の予防または治療のための組換え融合タンパク質。
- 前記不活性な安定ドメインが前記線維素原溶解酵素にリンカーを介して結合していることを特徴とする、請求項1に記載の組換え融合タンパク質。
- 前記リンカーが、配列(GGGGGS)xを有するグリシン−セリンリンカーまたは配列(GGGGA)xRを有するグリシン−アラニンリンカー(式中、A=アラニン、G=グリシン、R=アルギニン、S=セリン、x=1を超える反復数である)であることを特徴とする、請求項2に記載の組換え融合タンパク質。
- 複数の不活性な安定ドメインが前記線維素原溶解酵素のC末端に結合していることを特徴とする、請求項1に記載の組換え融合タンパク質。
- 複数の不活性な安定ドメインが前記線維素原溶解酵素のN末端に結合していることを特徴とする、請求項1に記載の組換え融合タンパク質。
- 前記安定ドメインが50〜150kDaの分子量を有することを特徴とする、請求項1に記載の組換え融合タンパク質。
- 前記線維素原溶解酵素がトロンビン様セリンプロテアーゼであることを特徴とする、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質。
- 前記線維素原溶解酵素が、アンクロッドもしくはバトロキソビン、またはアンクロッドもしくはバトロキソビンの組換えバリアントであることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質。
- 前記高分子の不活性な安定ドメインが、タンパク質のまたはペプチドのドメイン、具体的には血清アルブミン、トランスフェリン、モノクローナルもしくはヒト化抗体、または抗体フラグメント、あるいは人工ドメイン、例えばPASまたはXTENであることを特徴とする、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質。
- ヒト血清アルブミンのアミノ酸配列、または50kDa超の分子量を有する前記配列の一部が、線維素原溶解酵素としてのアンクロッドまたはバトロキソビンのC末端またはN末端に不活性な安定化ドメインとして結合していることを特徴とする、請求項1に記載の組換え融合タンパク質。
- 配列番号2(N末端融合)もしくは配列番号4(C末端融合)で示されるアミノ酸配列、または前記配列の線維素原溶解に有効な部分を含むことを特徴とする、請求項10に記載の組換え融合タンパク質。
- 持続的腹膜内放出のための生分解性マトリックス中に埋め込まれることを特徴とする、請求項1〜11のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質。
- 組織または器官の癒着、具体的には外科的介入後の腹膜の癒着の予防または治療に使用される、請求項1〜12のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質を含む医薬組成物。
- 前記組換え融合タンパク質が浸透圧活性媒体、好ましくはイコデキストリン溶液中に存在することを特徴とする、請求項13に記載の医薬組成物。
- 組織または器官の癒着、具体的には外科的介入後の腹膜の癒着の予防または治療用の薬剤の製造のための、請求項1〜12のいずれか一項に記載の組換え融合タンパク質の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE102014112212.7 | 2014-08-26 | ||
DE102014112212.7A DE102014112212A1 (de) | 2014-08-26 | 2014-08-26 | Rekombinante Fusionsproteine zur Vorbeugung oder Behandlung von Adhäsionen bei Geweben oder Organen |
PCT/EP2015/069176 WO2016030278A1 (de) | 2014-08-26 | 2015-08-20 | Rekombinante fusionsproteine zur vorbeugung oder behandlung von adhäsionen bei geweben oder organen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017526746A true JP2017526746A (ja) | 2017-09-14 |
JP7025928B2 JP7025928B2 (ja) | 2022-02-25 |
Family
ID=53969360
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017530418A Active JP7025928B2 (ja) | 2014-08-26 | 2015-08-20 | 外科的介入後の腹膜の癒着を予防または治療するための医薬組成物および医薬組成物の使用 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10837007B2 (ja) |
EP (1) | EP3185891B1 (ja) |
JP (1) | JP7025928B2 (ja) |
CN (1) | CN107109387A (ja) |
CA (1) | CA2959198A1 (ja) |
DE (1) | DE102014112212A1 (ja) |
ES (1) | ES2799829T3 (ja) |
PL (1) | PL3185891T3 (ja) |
WO (1) | WO2016030278A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102014112212A1 (de) * | 2014-08-26 | 2016-03-03 | Akesion Gmbh | Rekombinante Fusionsproteine zur Vorbeugung oder Behandlung von Adhäsionen bei Geweben oder Organen |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0315389A (ja) * | 1989-04-26 | 1991-01-23 | Glaxo Inc | アンクロッド様ポリペプチドをコードする新規dna配列およびそれらの発現生成物より成る組成物 |
JP2012529297A (ja) * | 2009-06-08 | 2012-11-22 | アムニクス オペレーティング インコーポレイテッド | グルコース調節ポリペプチド並びにその作成及び使用方法 |
WO2013043070A2 (en) * | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Technophage, Investigação E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa | Anti-tumor necrosis factor-alpha agents and uses thereof |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3682754D1 (de) | 1985-12-16 | 1992-01-16 | Ethicon Inc | Hemmung von post-chirurgischer adhaesionsbildung durch topische verabreichung von gewebeplasminogenaktivator. |
KR0131330B1 (ko) | 1987-07-01 | 1998-04-17 | 맥스 디. 헨슬레이 | 피브린 침착 또는 유착을 방지하기 위한 방법 및 치료 조성물 |
DE3741149A1 (de) | 1987-12-04 | 1989-06-15 | Thomae Gmbh Dr K | Zubereitungsformen zur verhinderung von adhaesionen von organen und organteilen |
US5156969A (en) | 1988-09-02 | 1992-10-20 | Genentech Inc. | Tissue plasminogen activator variant with deletion of amino acids 466-470 having fibrin specific properties |
CA1335361C (en) | 1989-05-24 | 1995-04-25 | Andrei Z. Budzynski | Thrombus-targeted complexes of plasminogen activator and fibrin fragments |
US5468505A (en) | 1992-02-28 | 1995-11-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Local delivery of fibrinolysis enhancing agents |
US6461640B1 (en) | 1995-12-08 | 2002-10-08 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Local delivery of fibrinolysis enhancing agents |
SE9600216D0 (sv) | 1996-01-18 | 1996-01-18 | Hans Arne Hansson | Styrning av läkningsprocesser |
EP1037969A4 (en) * | 1997-12-09 | 2003-05-21 | Bristol Myers Squibb Co | FIBRINOGEN CONVERSING ENZYME HYBRID |
CA2330859A1 (en) * | 1998-05-08 | 1999-11-18 | University Of Southern California | Size enhanced fibrinolytic enzymes |
GB9810127D0 (en) * | 1998-05-13 | 1998-07-08 | Ml Lab Plc | Prevention of surgical adhesions |
US6818018B1 (en) * | 1998-08-14 | 2004-11-16 | Incept Llc | In situ polymerizable hydrogels |
WO2003066078A1 (en) | 2002-02-07 | 2003-08-14 | Delta Biotechnology Limited | Hiv inhibiting proteins |
US20050074865A1 (en) * | 2002-08-27 | 2005-04-07 | Compound Therapeutics, Inc. | Adzymes and uses thereof |
US20040224006A1 (en) | 2003-04-21 | 2004-11-11 | Samn Raffaniello | Ancrod irradiated, impregnated or coated sutures and other first aid or wound management bandaging materials for minimizing scarring and/or preventing excessive scar formation |
KR100785378B1 (ko) | 2005-09-05 | 2007-12-14 | 주식회사 바이오레인 | 다층구조의 유착방지제 |
CN101321863A (zh) * | 2005-10-03 | 2008-12-10 | 阿斯利康(瑞典)有限公司 | 具有受调控的血浆半衰期的融合蛋白 |
EP1816201A1 (en) * | 2006-02-06 | 2007-08-08 | CSL Behring GmbH | Modified coagulation factor VIIa with extended half-life |
NZ585715A (en) * | 2007-11-29 | 2011-11-25 | Talecris Biotherapeutics Inc | Recombinantly modified plasmin |
US8629314B2 (en) | 2007-12-18 | 2014-01-14 | Ethicon, Inc. | Surgical barriers having adhesion inhibiting properties |
CA2770609A1 (en) * | 2009-08-20 | 2011-02-24 | Csl Behring Gmbh | Albumin fused coagulation factors for non-intravenous administration in the therapy and prophylactic treatment of bleeding disorders |
US8557961B2 (en) | 2010-04-02 | 2013-10-15 | Amunix Operating Inc. | Alpha 1-antitrypsin compositions and methods of making and using same |
US9133270B2 (en) * | 2011-03-08 | 2015-09-15 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Antibody-like proteins for therapeutic and diagnostic use |
CN103159860B (zh) * | 2013-04-07 | 2014-09-24 | 旭华(上海)生物研发中心有限公司 | 重组组织型纤溶酶原激活剂及其制备方法与用途 |
DE102014112212A1 (de) * | 2014-08-26 | 2016-03-03 | Akesion Gmbh | Rekombinante Fusionsproteine zur Vorbeugung oder Behandlung von Adhäsionen bei Geweben oder Organen |
-
2014
- 2014-08-26 DE DE102014112212.7A patent/DE102014112212A1/de not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-08-20 PL PL15753942T patent/PL3185891T3/pl unknown
- 2015-08-20 US US15/506,558 patent/US10837007B2/en active Active
- 2015-08-20 JP JP2017530418A patent/JP7025928B2/ja active Active
- 2015-08-20 EP EP15753942.0A patent/EP3185891B1/de active Active
- 2015-08-20 CA CA2959198A patent/CA2959198A1/en active Pending
- 2015-08-20 ES ES15753942T patent/ES2799829T3/es active Active
- 2015-08-20 WO PCT/EP2015/069176 patent/WO2016030278A1/de active Application Filing
- 2015-08-20 CN CN201580058048.0A patent/CN107109387A/zh active Pending
-
2020
- 2020-11-13 US US17/098,098 patent/US20210189368A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0315389A (ja) * | 1989-04-26 | 1991-01-23 | Glaxo Inc | アンクロッド様ポリペプチドをコードする新規dna配列およびそれらの発現生成物より成る組成物 |
JP2012529297A (ja) * | 2009-06-08 | 2012-11-22 | アムニクス オペレーティング インコーポレイテッド | グルコース調節ポリペプチド並びにその作成及び使用方法 |
WO2013043070A2 (en) * | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Technophage, Investigação E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa | Anti-tumor necrosis factor-alpha agents and uses thereof |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
DRUG DELIVERY SYSTEM, vol. 22, no. 5, JPN6019010441, 2007, pages 522 - 529, ISSN: 0004390211 * |
JOURNAL OF SURGICAL RESEARCH, vol. 61, JPN6019010438, 1996, pages 58 - 64, ISSN: 0004390210 * |
TOXICON, vol. 20, no. 1, JPN6019010434, 1982, pages 265 - 273, ISSN: 0004390208 * |
薬剤学, vol. 74, no. 1, JPN6019010436, 1 July 2014 (2014-07-01), pages 27 - 32, ISSN: 0004390209 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2016030278A1 (de) | 2016-03-03 |
US20170253864A1 (en) | 2017-09-07 |
CN107109387A (zh) | 2017-08-29 |
EP3185891B1 (de) | 2020-04-08 |
JP7025928B2 (ja) | 2022-02-25 |
EP3185891A1 (de) | 2017-07-05 |
PL3185891T3 (pl) | 2020-09-07 |
DE102014112212A1 (de) | 2016-03-03 |
US10837007B2 (en) | 2020-11-17 |
ES2799829T3 (es) | 2020-12-21 |
CA2959198A1 (en) | 2016-03-03 |
US20210189368A1 (en) | 2021-06-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101884954B1 (ko) | 지혈 작용을 가진 조직인자를 함유하는 인지질이 풍부한 소포 및 그의 용도 | |
WO2017101868A1 (zh) | 一种预防和治疗糖尿病肾病的方法 | |
AU2008323947A1 (en) | Extracellular histones as biomarkers for prognosis and molecular targets for therapy | |
TWI734798B (zh) | 一種預防和治療肺纖維化的方法 | |
CN110167583A (zh) | 一种治疗冠状动脉粥样硬化及其并发症的方法 | |
TW201722467A (zh) | 一種預防和治療心血管病的新方法 | |
US20080293628A1 (en) | Methods and Compositions for the Inhibition of Thrombus Formation | |
JP2017532365A (ja) | コラーゲンivの置き換え | |
US20230285524A1 (en) | Use of elafin for disorders associated with elastase independent increase in troponin | |
WO2011107505A1 (en) | Novel uses of elafin | |
CN111465408B (zh) | 一种预防或治疗骨关节炎的方法和药物 | |
US20210189368A1 (en) | Recombinant fusion proteins for preventing or treating adhesions of tissues or organs | |
US20060252692A1 (en) | Inhibitors for use in hemostasis | |
JP2016506920A (ja) | 止血組成物 | |
CN106890324A (zh) | 一种预防和治疗糖尿病肾病的方法 | |
TW200529870A (en) | Therapeutic use of factor XI | |
CA2264570C (en) | Invasion-inducing agents and invasion-inhibitors for use in wound healing and cancer | |
US20090181057A1 (en) | Methods and Compositions for the Inhibition of Thrombus Formation | |
KR102533009B1 (ko) | 항섬유소용해 폴리펩티드 및 이를 포함하는 섬유소용해 억제제 조성물 | |
WO2011025957A2 (en) | Tg-aprotinin fusion proteins and matrices thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180517 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190326 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20190327 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190625 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190823 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190924 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200204 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200501 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200618 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201124 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210222 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210420 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210608 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211007 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20211007 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20211007 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20211105 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20211109 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211207 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220118 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220201 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220214 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7025928 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |