JP2017507995A

JP2017507995A - カボザンチニブ製剤の投与

Info

Publication number: JP2017507995A
Application number: JP2016558004A
Authority: JP
Inventors: ダナティー．アフタブ，; スリラムナガナサン，; ウェイシュー，; スティーブンレイシー，
Original assignee: エグゼリクシス，インコーポレイテッド
Priority date: 2014-03-17
Filing date: 2015-03-17
Publication date: 2017-03-23
Anticipated expiration: 2035-03-17
Also published as: US20200163954A1; CN106255499A; US20170087143A1; EA201691850A1; JP6666849B2; EP3119476A1; MA39735A; US10159666B2; US20190076420A1; WO2015142928A1

Abstract

本発明は、所望の薬物動態学的効果及び薬力学的効果を得るために、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤のＮ−（４−｛［６，７−ビス（メチルオキシ）キノリン−４−イル］オキシ｝フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド（カボザンチニブ）及びその代謝物の各種医薬製剤を投与することに関する。カボザンチニブのヒト代謝物には、本明細書に記載されているプロトコールを含め、投与及びモニタリングに関する臨床プロトコールに従って、カボザンチニブを摂取または使用した後に、ヒト対象の体内で形成されたカボザンチニブ代謝物が含まれる。

Description

優先権の主張
本願は、２０１４年３月１７日に提出した米国特許出願第６１／９５４，３５２号に基づく優先権を主張するものである。上記特許出願の内容の全体は、参照により本明細書に援用される。

本発明は、所望の薬物動態学的効果及び薬力学的効果を得るために、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤のＮ−（４−｛［６，７−ビス（メチルオキシ）キノリン−４−イル］オキシ｝フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド（カボザンチニブ）及びその代謝物の各種医薬製剤を投与することに関する。

従来、がん治療の劇的な進歩には、新たな機序によって作用する治療剤の同定が関わっている。がん治療で利用できる機序の１つは、タンパク質キナーゼ活性の調節である。タンパク質キナーゼの活性化を介したシグナル伝達が、腫瘍細胞の特徴の多くに関与しているからである。タンパク質キナーゼを介したシグナル伝達は、例えば、甲状腺がん、胃がん、頭頸部がん、肺がん、乳がん、前立腺がん及び結腸直腸がん、ならびに脳腫瘍細胞の成長及び増殖と特に関連性が高い。

タンパク質キナーゼは、受容体型または非受容体型に分類することができる。受容体型チロシンキナーゼは、多様な生物学的活性を持つ多数の膜貫通型受容体から構成されている。受容体型チロシンキナーゼの詳細な考察については、Ｐｌｏｗｍａｎｅｔａｌ．，ＤＮ＆Ｐ７（６）：３３４−３３９，１９９４を参照されたい。タンパク質キナーゼ及びそのリガンドは、各種の細胞活性において重要な役割を果たしているので、タンパク質キナーゼの酵素活性の調節異常は、がんに関連する無制御の細胞成長のような、細胞特性の変化を招くことがある。キナーゼシグナル伝達の変化は、がんの徴候に加えて、例えば免疫障害、心血管疾患、炎症性疾患及び変性疾患を含む数多くの他の病理学的疾患に関与する。したがって、タンパク質キナーゼは、低分子薬物の発見のために魅力的な標的である。血管新生阻害活性及び増殖抑制活性に関連する、低分子の調節に、特に魅力的な標的としては、受容体型チロシンキナーゼＲｅｔ、ｃ−Ｍｅｔ及びＶＥＧＦＲ２が挙げられる。

ｃ−Ｍｅｔキナーゼは、Ｍｅｔ、Ｒｏｎ及びＳｅａを含むヘテロダイマー受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）サブファミリーのプロトタイプメンバーである。ｃ−Ｍｅｔの内因性リガンドは、強力な血管新生誘導因子の肝細胞成長因子（ＨＧＦ）である。ＨＧＦがｃ−Ｍｅｔに結合すると、自己リン酸化によって、その受容体の活性化が誘導され、その結果、受容体依存性シグナル伝達が増加し、細胞の成長と浸潤が促進される。抗ＨＧＦ抗体またはＨＧＦアンタゴニストが、インビボで腫瘍の転移を抑制することが示されている（Ｍａｕｌｉｋｅｔａｌ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ＆ＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖｉｅｗｓ，２００２，１３，４１−５９を参照されたい）。乳房腫瘍、結腸腫瘍、腎腫瘍、肺腫瘍、扁平上皮細胞腫瘍、骨髄性白血病、血管腫、黒色腫、ならびに星状細胞系腫瘍（膠芽腫、巨細胞膠芽腫、神経膠肉腫及び乏突起膠腫成分を伴う膠芽腫を含む）を含む広範な腫瘍種で、ｃ−Ｍｅｔ、ＶＥＧＦＲ２及び／またはＲｅｔの過剰発現が示されている。Ｒｅｔタンパク質は、チロシンキナーゼ活性を有する膜貫通型受容体である。Ｒｅｔは、大半の家族性の甲状腺髄様がんにおいて変異している。これらの変異は、Ｒｅｔのキナーゼ機能を活性化させて、Ｒｅｔを発がん性形態に変換する。

したがって、特に上記のＲｅｔ、ｃ−Ｍｅｔ及びＶＥＧＦＲ２を含むキナーゼのシグナル伝達を特異的に阻害、調整及び／または調節する低分子化合物は、異常な細胞増殖及び血管新生に伴う病状を治療または予防する手段として特に望ましい。このような低分子の１つは、Ｎ−（４−｛［６，７−ビス（メチルオキシ）キノリン−４−イル］オキシ｝フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド、カボザンチニブ及びＣＯＭＥＴＲＩＱ^（商標）（カボザンチニブのＳ−リンゴ酸塩）としてさまざまに知られているＸＬ１８４である。カボザンチニブは、下記の化学構造を有する。
２０１２年１１月に、カボザンチニブは、米国において、進行転移性甲状腺髄様がんの治療用として薬事認可を得た。カボザンチニブのその他の臨床試験は、進行中である。
ＷＯ２００５／０３０１４０（参照により本明細書に援用される）には、カボザンチニブの合成（実施例４８）が説明されているとともに、キナーゼのシグナル伝達を阻害、調整及び／または調節する、この分子の治療活性（アッセイ、表４、エントリー２８９）も開示されている。実施例４８は、ＷＯ２００５／０３０１４０の段落番号［０３５３］に記載されている。
がん治療用のカボザンチニブの医薬製剤と投与スケジュールを同定するニーズが依然として存在する。

国際公開第２００５／０３０１４０号

Ｐｌｏｗｍａｎｅｔａｌ．，ＤＮ＆Ｐ７（６）：３３４−３３９，１９９４Ｍａｕｌｉｋｅｔａｌ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ＆ＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖｉｅｗｓ，２００２，１３，４１−５９

所望の薬物動態学的効果及び薬力学的効果を得るためのｃ−Ｍｅｔ阻害剤であるＮ−（４−｛［６，７−ビス（メチルオキシ）キノリン−４−イル］オキシ｝フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド（カボザンチニブ）と、その代謝物の各種医薬製剤に対するものである本発明によって、上記のニーズ及びその他のニーズは満たされる。

一態様においては、本発明は、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記医薬製剤を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となり、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記医薬製剤に関する。

別の態様では、本発明は、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記医薬製剤を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となり、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記医薬製剤に関する。

更なる態様では、本発明は、ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記方法に関する。

別の態様では、本発明は、ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となるような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記方法に関する。

これらの態様では、「代謝物」は、下記の式Ｉａ
の化合物であって、
ａ）Ｒ_１またはＲ_２の一方が、Ｈ、ＳＯ_３Ｈまたはグルクロン酸部分であり、もう一方がＭｅである、
ｂ）Ｒ_３が、ＯＨまたはＯＳＯ_３Ｈである、
ｃ）Ｒ_４がＯ⁻であり、Ｒ_４がＯ⁻である場合には、ＮがＮ^＋である、
ｄ）Ｒ_５が、ＯＨまたはＯＳＯ_３Ｈである、
ｅ）Ｒ_６が、ＯＨまたはＯＳＯ_３Ｈである
という属性の１つ以上を有する化合物を指す。

「代謝物」は、下記の式Ｉｂ
の化合物であって、
式中、
ａ）Ｒ_１若しくはＲ_２がＭｅであるか、またはＲ_１若しくはＲ_２の１つがＨ、ＳＯ_３Ｈ、若しくはグルクロン酸部分であり、その他がＭｅであり、
ｂ）Ｒ_３が、Ｈ、ＯＨ、またはＯＳＯ_３Ｈであり、
ｃ）Ｒ_４が存在しないかまたはＯ⁻であり、Ｒ_４がＯ⁻の場合には、ＮがＮ^＋であり、
ｄ）Ｒ_６が、ＨまたはＭｅである
化合物も指す。

「代謝物」は、下記の式Ｉｃ
の化合物であって、
式中、
ａ）Ｒ_５が、ＯＨまたはＯＳＯ_３Ｈであり、
ｂ）Ｒ_６が、ＯＨまたはＯＳＯ_３Ｈであり、
ｃ）Ｒ_７が、Ｈ、ＳＯ_３Ｈまたはグルクロン酸部分である
化合物も指す。

具体的には、代謝物には
が含まれ、
式中、ＧＡは、例えば
におけるように、グルクロン酸部分である。

本明細書に記載されている代謝物は、以下「ヒト代謝物」ということがある。カボザンチニブのヒト代謝物には、本明細書に記載されているプロトコールを含め、投与及びモニタリングに関する臨床プロトコールに従って、カボザンチニブを摂取または使用した後に、ヒト対象の体内で形成されたカボザンチニブ代謝物が含まれる。各種実施形態においては、この用語には、特定の試験でその分子種が検出または分析されるか否かに関わらず、インビボで形成される分子種が含まれる。異なる遺伝的構成と、代謝に関与するシトクロムＰ４５０及びＵＧＴ酵素を含む各種酵素の存在及び活性とを反映して、特定の個体に特有の代謝物もあることも考えられる。したがって、ヒト代謝物は、人体で形成されるこのような代謝物の全てを網羅する。

いくつかのヒト代謝物がスキーム１に示されている。これらのヒト代謝物は、カボザンチニブ（スキーム１では、化合物Ｉとして示されている）の臨床試験中に、代謝プロファイリングによって、特にヒトの血漿、尿及び便から同定されたものである。

本明細書に記載されているカボザンチニブ代謝物は、スキーム１に示されているものを含め、生体組織及び体液から単離し、ならびに／または当業者が利用可能な方法に従って、合成により調製する。組織及び体液サンプルで様々な分離プロセスを行って、核磁気共鳴法、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）及び質量分析法などの更なる分析用にサンプルを用意することができる。このようなサンプルでは、代謝物は、他の代謝物のいずれかの存在下では本質的にみられない組成物に含まれている。代謝物の存在は、放射性同位元素の原子核崩壊の測定、屈折率の測定、炎イオン化、磁場におけるイオン化及び偏向、紫外線（ＵＶ吸収）などのような物理的方法によって定量化できる。

ヒト代謝物は、純度がかなり高い結晶形態または溶液形態でもたらすことができる。それらの化合物を比較的純粋な形態で、例えば純度８０パーセント以上、９０パーセント以上、９５パーセント以上または９９パーセント以上で調製するには、有機合成経路が利用可能である。再結晶化及びその他の精製法を行って、本質的に純度１００パーセントの化合物をもたらすことができる。このような合成方法及び精製技法は、当該技術分野において既知である。

代謝物は、実質的に純粋な形態でもたらすことができる。「実質的に純粋な」とは、代謝物が、ＦＤＡの承認を得るのに十分に純粋であるとともに、汚染物質またはその他の物質を本質的に含まないことを意味する。あるいは、「実質的に純粋な」とは、安全性、有効性、安定性及びその他の所望の特性に関する、化合物の特性に悪影響または許容不能な影響を及ぼさない不純物レベルを意味する。

スキーム１に示されている単離代謝物には、
が含まれ、
式中、ＧＡはグルクロン酸である。

更に具体的には、上記の代謝物には、
が含まれる。

具体的には、上記の単離代謝物は、
またはその薬剤的に許容可能な塩である。

本発明において考えられる医薬製剤は、以下のうちの１つから選択できる。

本発明は、ＣＭｅｔを阻害するか、または他の有益な属性を有する１つ以上のカボザンチニブ単離代謝物を含む医薬製剤にも関する。その単離代謝物は、
またはその薬剤的に許容可能な塩と、少なくとも１つの薬剤的に許容可能な担体から選択する。

上記のように投与した場合、本発明の医薬製剤を用いて、がんを治療することができる。典型的な実施形態では、投与は、１日１回の経口投与であるが、状況によって必要とされるのに応じて調節することができる。異なる量のカボザンチニブを含む錠剤またはカプセル剤を組み合わせて、所望の投与量を実現させることができる。例えば、１４０ｍｇのカボザンチニブの投与には、カボザンチニブを８０ｍｇ含む錠剤またはカプセル剤を１錠と、カボザンチニブを２０ｍｇ含む錠剤またはカプセル剤を３錠投与することが必要となる。１４０ｍｇのカボザンチニブの投与には、カボザンチニブを８０ｍｇ含む錠剤またはカプセル剤を１錠と、カボザンチニブを２０ｍｇ含む錠剤またはカプセル剤を１錠投与することが必要となる。

したがって、更なる態様では、本発明は、ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記方法に関する。

別の態様では、本発明は、ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記方法に関する。

「がん」としては、乳房腫瘍、結腸腫瘍、腎腫瘍、肺腫瘍、扁平上皮細胞腫瘍、骨髄性白血病、血管腫、黒色腫、星状細胞腫及び膠芽腫を含む腫瘍種と、その他の細胞増殖性病状が挙げられ、そのような病状としては、[心臓]、すなわち肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫及び奇形腫と、[肺]、すなわち肺癌（扁平上皮細胞癌、未分化小細胞癌、未分化大細胞癌、腺癌）、細気管支肺胞上皮（細気管支）癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫と、[胃腸]、すなわち食道（扁平上皮細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポージ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）と、[尿生殖器管]、すなわち腎臓（腺癌、ウィルムス腫［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病、腎細胞癌）、膀胱及び尿道（扁平上皮細胞癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（前立腺の腺癌、肉腫、小細胞癌）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質細胞癌、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）と、[肝臓]、すなわちヘパトーマ（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫と、[骨]、すなわち骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、悪性巨細胞腫、脊索腫、骨軟骨腫（骨軟骨外骨腫症）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫及び巨細胞腫瘍と、［神経系］、すなわち頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性膠芽腫、希突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）と、［婦人科］、すなわち子宮（子宮内膜癌）、子宮頸（子宮頸癌、前腫瘍状態の子宮頸部形成異常）、卵巣（卵巣癌［漿液性嚢胞腺癌、ムチン性嚢胞腺癌、未分類癌］、顆粒膜−卵胞膜細胞腫、セルトリ−ライディヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰（扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、腟（明細胞癌、扁平上皮細胞癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫］、卵管（癌）と、［血液系］、すなわち血液（骨髄性白血病［急性及び慢性］、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］と、［皮膚］、すなわち悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、カポージ肉腫、ほくろ、形成異常母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬と、［副腎］、すなわち神経芽細胞腫と、甲状腺髄様がんを含む甲状腺がんが挙げられるが、これらに限らない。すなわち、本明細書に示されている「がん細胞」という用語には、上で定められている状態のうちのいずれか１つに罹患した細胞が含まれる。

一実施形態では、がんは、卵巣がん、前立腺がん、肺がん、甲状腺髄様がん、肝臓がん、消化器がん、膵臓がん、骨がん、血液がん、皮膚がん、腎臓がん、乳がん、結腸がん及び卵管がんから選択する。

別の実施形態では、疾患または障害は、卵巣がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、前立腺がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、肺がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、甲状腺髄様がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、肝臓がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、消化器がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、膵臓がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、骨がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、血液がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、皮膚がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、腎臓がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、乳がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、結腸がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、卵管がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、肝臓がんであり、この肝臓がんは、肝細胞癌、胆管癌、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫または血管腫である。

別の実施形態では、疾患または障害は、消化器がんであり、この消化器がんは、食道がん（扁平上皮細胞癌、腺癌若しくは平滑筋肉腫）、胃がん（癌若しくはリンパ腫）、膵臓がん（管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍若しくはビポーマ）、小腸がん（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポージ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫）、または大腸がん（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫若しくは平滑筋腫）である。

別の実施形態では、疾患または障害は、膵臓がんであり、この膵臓がんは、管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍またはビポーマである。

別の実施形態では、疾患または障害は、骨がんであり、この骨がんは、骨肉腫、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性細網肉腫、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫、脊索腫、骨軟骨外骨腫症、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫または類骨骨腫である。

別の実施形態では、疾患または障害は、血液がんであり、この血液がんは、骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫または骨髄異形成症候群である。

別の実施形態では、疾患または障害は、皮膚がんであり、この皮膚がんは、悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌またはカポージ肉腫である。

別の実施形態では、疾患または障害は、腎腫瘍または腎細胞癌である。

別の実施形態では、疾患または障害は、乳がんである。

別の実施形態では、疾患または障害は、結腸がん腫瘍である。

別の実施形態では、疾患または障害は、卵管癌である。

単離代謝物の調製
本明細書に開示されている単離代謝物は、熟練施術者に利用可能な方法に従って作製することができる。例えば、下記のスキーム２に示されているように、ペプチド化学を用いて、対応するアミン及びカルボン酸から、フェノールＣ−１及びＣ−２を作製できる。このような変換を実現させるには、様々なプロセスと試薬が利用可能であり、例えば、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ６１（２００５）１０８２７−１０８５２に記載されている。代表的な例がスキーム２に示されており、スキーム２では、活性化剤は、塩化チオニル、塩化オキサリルなどである。対応する酸塩化物が、それぞれ化合物ＡまたはＢと反応して、フェノールＣ−１またはＣ−２をもたらす。続いて、トリエチルアミン、アルカリ金属水酸化物などのような塩基の存在下で、フェノールＣ−１またはＣ−２を、クロロスルホン酸または三酸化硫黄−トリメチルアミン複合体のような硫酸化剤と反応させると、それぞれ、対応する水素サルフェート２ｂまたは２ａを得ることができる。

スキーム３に従って、化合物Ａを調製した。ハロゲン化ベンジルなど（ＢｎＸ、式中、ＸはＣｌ、Ｂｒ若しくはＩ、メタンスルホネート（ＯＭｓ）、トリフルオロメタンスルホネート（ＯＴｆ）またはトルエンスルホネート（ＯＴｓ）である）を用いて、Ａ−１をベンジル化すると、ベンジル保護物Ａ−２が得られる。硝酸と硫酸との混合物を用いてＡ−２をニトロ化すると、Ａ−３が得られる。Ａ−３のニトロ基を還元してアミンＡ−４を得ることは、鉄及びアンモニウムアセテートのような標準的なニトロ還元条件を用いて行ってよい。エチルフォーメートと、ナトリウムメトキシドのようなアルコキシドとを用いてＡ−４を環化すると、Ａ−５が得られる。オキシ塩化リンを用いて、Ａ−５を対応する塩化物に変換すると、Ａ−６が得られる。Ａ−６を４−アミノフェノールと反応させると、Ａ−７が得られ、メタンスルホン酸を用いてＡ−７を脱保護すると、化合物Ａが得られる。

同様に、スキーム４に従って、化合物Ｂを調製した。Ｂ−１を脱メチル化すると、Ｂ−２が得られる。ハロゲン化ベンジルなど（ＢｎＸ、式中Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ若しくはＩ、メタンスルホネート（ＯＭｓ）、トリフルオロメタンスルホネート（ＯＴｆ）またはトルエンスルホネート（ＯＴｓ）である）を用いて、Ｂ−２のベンジル化すること。硝酸と硫酸との混合物を用いてＢ−３をニトロ化すると、Ｂ−４が得られる。Ｂ−４のニトロ基を還元してアミンＢ−５を得ることは、鉄及びアンモニウムアセテートのような標準的なニトロ還元条件を用いて行うことができる。エチルフォーメートと、ナトリウムメトキシドのようなアルコキシドとを用いてＢ−５を環化すると、Ｂ−６が得られる。オキシ塩化リンを用いて、Ｂ−６を、対応する塩化物に変換すると、Ｂ−７が得られる。Ｂ−７を４−アミノフェノールと反応させると、Ｂ−８が得られ、メタンスルホン酸を用いてＢ−８を脱保護して、化合物Ｂを得た。

同様に、化合物７からフェノール１３及び１６を調製でき、化合物７の合成については、ＷＯ２００５／０３０１４０に実施例７３として開示されている。すなわち、スキーム５では、７を２−アミノ−５−フルオロフェノール（ＣＡＳ登録番号５３９８１−２４−１）とカップリングさせることによって
が得られる。７を５−アミノ−２−フルオロフェノール（ＣＡＳ登録番号１００３６７−４８−４）とカップリングさせると、
が得られる。

フェノール１３及び１６は、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムなどのような強い水酸化物の存在下で、例えば三酸化硫黄トリメチルアミン複合体のような硫酸化剤を用いるか、またはトリエチルアミンのようなアミン塩基の存在下で、クロロスルホン酸を用いて、スキーム１に示されている対応するサルフェート９及び１２に容易に変換できる。

フェノール１５ａ及び１５ｂは、ＷＯ２００５／０３０１４０に、実施例４３の調製に関して開示されている方法と同様の方法を用いることによって調製できる。すなわち、スキーム６では、フェノールＣ（ＷＯ２００５／０３０１４０の実施例３８）をトリフレートＤ（ＷＯ２００５／０３０１４０の実施例３３）または塩化物Ａ−６（ＷＯ２００５／０３０１４０の実施例３２）とカップリングさせることによってＥが得られ、続いて、Ｐｄ触媒による水素化分解条件下でＥを脱保護すると、化合物１５が得られる。同様に、フェノールＣをトリフレートＦまたは塩化物Ｂ−７を反応させるとＧが得られ、Ｇに対して、Ｏ−ベンジルの脱保護を行うと、化合物１５ｂが得られる。

Ｎ−オキシド１９は、カボザンチニブを、例えばペルオキシド、過酸などのような酸化剤と反応させることによって調製できる。一実施形態では、この酸化剤は、過ホウ酸ナトリウム四水和物である。

下記の非限定例は、本発明を例示することを意図したものである。

実施形態
実施形態１：生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記組成物を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となり、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記医薬製剤。

実施形態２：生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記医薬製剤を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となり、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記医薬製剤。

実施形態３：前記測定された代謝物が、
からなる群から選択したものであり、
式中、ＧＡがグルクロン酸部分である、実施形態１〜２に記載の医薬製剤。

実施形態４：前記測定された代謝物が、
のうちの１つ以上を含む、請求項１〜２に記載の医薬製剤。

実施形態５：ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記方法。

実施形態６：ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記方法。

実施形態７：前記測定された代謝物が、
からなる群から選択したものであり、
式中、ＧＡがグルクロン酸部分である、実施形態５〜６に記載の方法。

実施形態８：前記測定された代謝物が、
のうちの１つ以上を含む、実施形態５〜７に記載の方法。

実施形態９：前記がんを、卵巣がん、肺がん、甲状腺髄様がん、肝臓がん、消化器がん、膵臓がん、骨がん、血液がん、皮膚がん、腎臓がん、乳がん、結腸がん及び卵管がんから選択する、実施形態５〜８に記載の方法。

実施形態１０：前記投与が１日１回である、実施形態１〜４または請求項５〜９の実施形態に記載の医薬製剤。

カボザンチニブ代謝物の同定
この試験の目的は、ヒト血漿、尿及び便中のカボザンチニブ代謝物のプロファイリング及び同定であった。血漿、尿及び便サンプルは、カボザンチニブのマスバランス試験から、健常な男性対象に、［^１４Ｃ］−カボザンチニブ（１００μＣｉ）を含むカボザンチニブ（Ｌ−リンゴ酸塩）１７５ｍｇを１回経口投与後に採取した。

試験設計、ならびに血漿、尿及び便のサンプリング
この試験に参加したのは、８人の男性対象であり、各対象に、［^１４Ｃ］−カボザンチニブ（１００μＣｉ）を含むカボザンチニブ（Ｌ−リンゴ酸塩）１７５ｍｇを１回経口投与した。代謝物のプロファイリングのために、８人の対象から、血漿、尿及び便サンプルを採取した。
血漿サンプルは、投与前、投与後０．５時間、投与後１時間、投与後２時間、投与後３時間、投与後４時間、投与後５時間、投与後８時間、投与後１４時間、投与後２４時間、投与後７２時間、投与後１６８時間、投与後３３６時間、投与後５０４時間及び投与後６４８時間に採取し、尿サンプルは、投与前、投与後０〜８時間、投与後８〜２４時間、それ以降から４８０時間までは２４時間間隔、５０４〜１１５２時間では４８時間超の間隔で採取し、便サンプルは、投与前、投与後４８０時間までは２４時間間隔、投与後５０４〜１１５２時間では４８時間超の間隔で採取した。全てのサンプルをＱＰＳＬＬＣ（デラウェア州ニューアーク）に送り、−７０℃で保存した。十分なレベルの放射能を有するサンプルの代謝物をプロファイリング及び同定するために、ラジオフロースルー検出器（ＲＦＤ）と組み合わせたＨＰＬＣ／タンデムＭＳを用いた。

ＨＰＬＣによる画分の分取後、十分なレベルの放射能を有する血漿サンプルの放射能を測定するために、ＴｏｐＣｏｕｎｔＮＸＴ（商標）による計測を用いた。この試験では、３つのＨＰＬＣ法を用いて、カボザンチニブとその代謝物を分離した。ＨＰＬＣ法１は、それぞれ異なる時点に採取したプール尿サンプル、プール便サンプル及び個々の血漿サンプルの分析に用いた。ＨＰＬＣ法２は、カボザンチニブサルフェートと共溶出できる考えられ代謝物を調べるために、薬物間相互作用試験から得た血漿サンプルを分析に用いた。ＨＰＬＣ法３は、プール血漿サンプルに対して用いた。

６人の対象から得た血漿、尿及び便の特定のサンプルのカボザンチニブ及び代謝物について分析して報告した。

調査試験には、２人の対象から得たサンプルを用いた。

試験物
この試験の試験物は、［^１４Ｃ］カボザンチニブとカボザンチニブの混合物であった。アスタリスクは、［^１４Ｃ］標識の位置を示している。［^１４Ｃ］標識カボザンチニブは、非標識４−アミノフェノールの代わりに［^１４Ｃ］標識４−アミノフェノールを用いた以外は、ＷＯ２００５／０３０１４０に示されているように調製した。［^１４Ｃ］標識４−アミノフェノールは、塩酸塩として、例えばＨａｒｔｍａｎｎＡｎａｌｙｔｉｃ、ＡｍｅｒｉｃａｎＲａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄＣｈｅｍｉｃａｌｓまたはＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから市販されている。

一般的な化学物質及び参照標準物質
ギ酸とアンモニウムアセテートは、Ｓｉｇｍａ−ＡｌｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．（ミズーリ州セントルイス）から入手した。アセトニトリル（Ｂ＆Ｊブランド、カルボニル不含、微量のアルデヒド及びケトンに敏感な用途用）、水（Ｂ＆Ｊブランド、ＧＣ、ＨＰＬＣ及び分光光測用）及びメタノール（ＨＰＬＣグレード）は、ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ペンシルベニア州ピッツバーグ）から購入した。タイプＩの水は、ＥｌｇａｓｔａｔＵＨＱＰＳという水精製システムを用いて作製した。非放射性標識標準代謝物（フルオロアニリン切断生成物、カボザンチニブサルフェート及びカボザンチニブＮ−オキシド）は、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ，Ｉｎｃ．から得た。

生体サンプルの採取
血漿、尿及び便サンプルは、カボザンチニブのマスバランス試験から、健常な男性対象に、［^１４Ｃ］−カボザンチニブ（１００μＣｉ）を含むカボザンチニブ（Ｌ−リンゴ酸塩）１７５ｍｇを１回経口投与後に採取した。サンプルは、ドライアイス上で、Ｃｅｌｅｒｉｏｎ（ネブラスカ州リンカーン）からＱＰＳＬＬＣ（デラウェア州ニューアーク）に送り、分析まで−７０°Ｃで保存した。６人の対象から得たサンプルを代謝物のプロファイリング、同定及び放射能測定に用いた。共溶出代謝物の調査の一部としてのブリッジング試験では、２人の対象から得た血漿サンプルのみを用いた。

ヒト血漿のサンプル調製と放射能の回収
代謝物のプロファイリング、同定、及び放射能の測定のために、６人の対象において、投与後０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、８時間、１４時間、２４時間、７２時間、１６８時間及び３３６時間に採取した個々の放射性標識血漿サンプルを処理及び分析した。共溶出代謝物の調査のために、６人の対象の非放射性標識血漿サンプルをプールし、処理して、投与前、投与後１〜７時間、投与後８〜９６時間及び投与後１２０〜３３６時間に関して分析した。非放射性標識サンプルから得た代謝物データを、ヒトマスバランス試験から得た放射性標識血漿サンプルにブリッジングするために、６人のそれぞれの対象の投与後０〜１６８時間の［^１４Ｃ］血漿サンプルも、ハミルトンプール法を用いてプールし、処理し、放射能測定によって分析した。２人の対象の投与後１〜１６８時間の［^１４Ｃ］血漿サンプルをプールし（同体積）、処理し、分析した。

初期の血漿抽出及び回収方法
初期の抽出及び回収率を定めるために、１人の対象から得た２つの血漿サンプル（投与後４時間及び投与後７２時間）を用いた。マスバランス試験における各血漿サンプルの総放射能をＥｘｅｌｉｘｉｓ，Ｉｎｃ．から得て、１００％として定義した。サンプルをドラフト内で解凍した後、各血漿サンプルの２つの０．５ｍＬアリコートを３倍量（１．５ｍＬ）のＭｅＯＨ：ＡＣＮ（２０：８０、ｖ／ｖ）に加え、ボルテックスした（５分）。この混合物を２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、その上清を清浄なチューブに移した。追加の、３倍量のＭｅＯＨ：ＣＡＮ（２０：８０、ｖ／ｖ）２回分によって、ペレットを抽出した。その混合物を遠心分離し、上清を合わせた。アリコートを液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ）２９００ＴＲ（ＰａｃｋａｒｄＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、コネチカット州メリデン）によって分析した。以下のようにして抽出回収率を計算した。
抽出回収率（％）＝（上清中におけるＤＰＭ／血漿サンプルにおけるＤＰＭ）×１００

抽出物から得た上清を窒素気流下で、周囲水浴内で蒸発乾固した。続いて、残渣を０．３５〜０．５ｍＬのＭｅＯＨ：ＡＣＮ：水（１０：２０：７０、ｖ／ｖ／ｖ）に再溶解させた。その再溶解させたサンプルを１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、アリコートの再溶解回収率をＬＳＣによって分析した。
再溶解回収率（％）＝（再溶解液におけるＤＰＭ／上清におけるＤＰＭ）×１００

血漿サンプルの調製
放射性標識血漿サンプルと非放射性標識血漿サンプルは、同じ方法によって、利用可能な体積とサンプルの放射能レベルに応じて１．０〜２ｍＬの血漿サンプルを用いて抽出した。上清を窒素気流下で、周囲水浴内で蒸発乾固し、残渣を０．３５〜０．５ｍＬのＭｅＯＨ：ＡＣＮ：水（１０：２０：７０、ｖ／ｖ／ｖ）に再溶解させた。その再溶解させたサンプルを１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。分析のために、上清のアリコートをＨＰＬＣシステムに注入した。

ヒト尿のサンプル調製と放射能の回収
対象から得たプール尿サンプル（投与後０〜７２時間、投与後１６８〜１９２時間及び投与後３１２〜３３６時間）を３組（各４ｍＬ）、凍結乾燥し、残渣を１ｍＬの水：ＡＣＮ：ＦＡ（８０：２０：０．１、ｖ／ｖ／ｖ）に再溶解させた。ＬＳＣを用いて、プール尿と再溶解液における放射能を計測し、再溶解回収率を計算した。代謝物のプロファイリング、同定及び放射能測定について、６人のそれぞれの対象から得た投与前サンプルと３つのプール尿サンプル（投与後０〜７２時間、投与後１６８〜１９２時間及び投与後３１２〜３３６時間）を分析した。各プール尿サンプルを凍結乾燥し、残渣を水：ＡＣＮ：ＦＡ（８０：２０：０．１、ｖ／ｖ／ｖ）に再溶解させ、その再溶解させたサンプルを１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離してから分析した。

ヒト尿のサンプル調製と放射能の回収
便サンプルの抽出回収率を評価するために、対象から得た２つの便ホモジネートサンプルをドラフト内で解凍した。抽出用に、約５．５〜６ｇの便ホモジネートを正確に秤量した。１５ｍＬのＡＣＮ：ＭｅＯＨ（８０：２０）を便ホモジネートに加えた。その混合物を３分間ボルテックスし、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清を清浄なチューブに移した。この抽出手順を２回以上繰り返した。３つの全ての抽出物の上清を合わせた。合わせた上清における放射能をＬＳＣによって測定した。下記の式を用いて、抽出回収率を計算した。
抽出回収率（％）＝（上清におけるＤＰＭ／便ホモジネートにおけるＤＰＭ）×１００

上清を窒素流下で、周囲温度にて濃縮し、残渣をＭｅＯＨ：ＡＣＮ：水（１０：２０：７０）に再溶解させた。再溶解液のアリコートの再溶解回収率をＬＳＣで計測した。
再溶解回収（％）＝（再溶解液におけるＤＰＭ／上清におけるＤＰＭ）×１００
総回収率（％）＝抽出回収率（％）×再溶解回収（％）／１００

代謝物のプロファイリング、同定及び放射能の測定のために、抽出回収のための同じ手順を用いて、６人のそれぞれの対象から得た投与前サンプルと３つのプール便サンプル（投与後０〜７２時間、投与後１６８〜１９２時間及び投与後３１２〜３３６時間）を抽出した。上清を窒素流下で乾燥し、残渣を水：ＡＣＮ：ＦＡ（８０：２０：０．１、ｖ／ｖ／ｖ）に再溶解させた。その再溶解させたサンプルを１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離してから分析した。

ＨＰＬＣカラムによる回収
ＨＰＬＣ法１を用いて、カラムから全ての放射能成分が効果的に溶離されたことを示すために、ＨＰＬＣカラムによる回収を行った。尿サンプルのアリコート（対象１０４２、投与後２４〜４８時間）を、カラムありまたはカラムなしで、ＨＰＬＣシステムに注入し、０〜３０分の溶離液を清浄な５０ｍＬ遠心チューブに回収した。回収後、各注入物から得た溶離液の重量を測定し、ＬＳＣを用いて２組のアリコート（１ｍＬ）を計測した。計測値の平均値を用いて、カラムが設置されていたかまたは設置されていなかった場合の回収溶離液に含まれる総放射能を計算した。
カラム回収率（％）＝（カラムありの溶離液におけるＤＰＭ／カラムなしの溶離液におけるＤＰＭ）×１００

ＨＰＬＣ法３は、プール血漿に対してのみ使用し、利用可能なサンプル体積が限られていたため、カラムによる回収は行わなかった。

ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＲＦＤ及びＨＰＬＣ放射能分析システム
代謝物のプロファイリング及び同定のためのシステム（ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＲＦＤ）は、オートサンプラーＨＴＣＰＡＬ、ＳｕｒｖｅｙｏｒのＨＰＬＣポンプ、ＬＴＱのリニアイオントラップ質量分析計及びβ−ＲＡＭＭｏｄｅｌ３ＲＦＤから構成させた。質量分析法によって得られたデータをＸｃａｌｉｂｕｒというソフトウェアで、ＲＦＤによって得られたデータをＬａｕｒａＬｉｔｅ３というソフトウェアで処理した。ＨＰＬＣ溶離液をＲＦＤと質量分析計に３：１の比で分けた。下記の表は、ＨＰＬＣ、質量分析計及びＲＦＤの条件をまとめたものである。

高分解能ＭＳ用のＨＰＬＣ−ＭＳシステムは、ＭｉｃｈｒｏｍＢｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓＰａｒａｄｉｇｍＭＳ４ＢＨＰＬＣ及び質量分析計ＴｈｅｒｍｏＬＴＱＯｒｂｉｔｒａｐＤｉｓｃｏｖｅｒｙから構成させた。クロマトグラフィー条件とイオン源パラメーターは、ＬＴＱシステムのＨＰＬＣ法１と同じにした。セントロイドモードにおいて、分解能３００００でデータを得た。

血漿サンプルの放射能測定には、ＨＰＬＣ／ＴｏｐＣｏｕｎｔＮＸＴ（商標）システムを用いた。このシステムは、ＨＴＣＰＡＬオートサンプラー、２つのＳｈｉｍａｄｚｕ製ＨＰＬＣポンプ及びＦｏｘｙＪｒ．ＦｒａｃｔｉｏｎＣｏｌｌｅｃｔｏｒ（Ｉｓｃｏ、ネブラスカ州リンカーン）で構成させた。ＥＺ−２_ｐｌｕｓＰｅｒｓｏｎａｌＥｖａｐｏｒａｔｏｒ（Ｇｅｎｅｖａｃ、ニューヨーク州バレーコテージ）を用いて、９６ウェルプレートＬｕｍａＰｌａｔｅ（商標）に分取したＨＰＬＣ画分を乾燥し、ＴｏｐＣｏｕｎｔＮＸＴ（商標）ＭｉｃｒｏｐｌａｔｅＳｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ＆ＬｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＣｏｕｎｔｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ（登録商標））によって、その乾燥したサンプルを計測した。ＰｒｏＦＳＡ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ（登録商標））というソフトウェアを用いて、そのデータを処理した。ＨＰＬＣ法は、上記と同じであった。

代謝物の同定
以下のプロセスに従って、マトリックスにおいて総放射能の５％超または総ＡＵＣの５％超に相当する代謝物を同定した。Ｅｘｅｌｉｘｉｓ，Ｉｎｃ．から供給されているカボザンチニブ及びその標準代謝物の質量スペクトル（ＭＳ、ＭＳ／ＭＳ及びＭＳ／ＭＳ／ＭＳ）をイオントラップ質量分析計で得た。主要なフラグメントパターンを提示した。これらの代謝物の同定は、質量スペクトル（ＭＳ及びＭＳ／ＭＳ）と保持時間を、信頼できる参照標準物質と照合することによって確認した。他の未知の代謝物については、ＬＣ−ラジオクロマトグラムで見られた保持時間と同じ保持時間で、フルスキャンポジティブ及びネガティブイオン化モードで作動させたＬＣ／ＭＳクロマトグラムで、分子イオンを探した。続いて、対応する分子イオンに関して、プロダクトイオン質量スペクトルと高分解能質量スペクトルを得た。それらの質量フラグメントパターンの分析に基づき、推定される代謝物構造を提示した。

カボザンチニブ及びその代謝物の定量
それぞれ異なる時点または時間間隔における各マトリックスから、プールサンプルまたは個々のサンプルにおけるカボザンチニブ及びその代謝物を定量することは、ラジオクロマトグラムに見られる対応ピークの積分をベースとした。血漿サンプルに関しては、各時点における各ピークについて、サンプルにおける総放射能の割合（％）を計算し、ｎｇ／ｍＬに変換した。

血漿におけるカボザンチニブ及びその代謝物の定量は、以下のとおりである。
ｎｇ／ｍＬ＝（総放射能の割合（％））×（その時点における総ｎｇ当量／ｍＬ）／１００

総ｎｇ当量／ｍＬの値は、ヒトマスバランス試験の結果から得た。

プール尿サンプルに関しては、プールサンプルにおける各ピークの総放射能の割合（％）は、プールサンプルにおける全ての非親ピークに対する割合（％）として計算した。
プールサンプルにおける全ての非親ピークに対する割合（％）＝（そのピークの総放射能／非親ピークの総放射能）×１００

プール便サンプルに関しては、プールサンプルにおける各ピークの総放射能の割合（％）は、プールサンプルにおける全ての非親ピークと親ピークに対する割合（％）として計算した。
プールサンプルにおける全ての非親ピークと親ピークに対する割合（％）＝（そのピークの総放射能／親ピーク及び非親ピークの総放射能）×１００

プールサンプルにおける各ピークの総放射能の割合（％）は、プールサンプルにおける親ピークに対する割合（％）に変換した。
プールサンプルにおける親ピークに対する割合（％）＝（そのピークの総放射能／親ピークの総放射能）×１００

放射能検出器の定量限界は、ラジオクロマトグラムにおけるシグナルとノイズとの比（３：１）として定義した。定量の下限はそれぞれ、ＴｏｐＣｏｕｎｔでは１０ｄｐｍ、β−ＲＡＭラジオフロースルー検出器では５００ｄｐｍであった。

結果と考察
放射能の回収
投与後４時間及び７２時間に対象から採取した血漿サンプルを用いて、３倍量のＭｅＯＨ：ＡＣＮ（２０：８０）によって３回抽出し、初期抽出回収率を割り出した。４時間後のサンプルの平均抽出回収率は９８．４３％、７２時間後のサンプルの放射能の平均抽出回収率は９４．９９％であった。乾燥して、ＭｅＯＨ：ＡＣＮ液に再溶解させた後の再溶解回収率は、それぞれ９２．７３％と８５．９０％であった。総回収率は、それぞれ９１．２７％と８１．６０％であった。

対象から採取した投与後０〜８時間、投与後２４〜４８時間、投与後７２〜９６時間及び投与後１２０〜１４４時間のサンプルを用いて割り出した、尿の遠心回収率は、１０２％〜１０４％の範囲であった。対象から採取したプールサンプルを用いた場合の凍結乾燥後の尿の再溶解回収率は、９４．７％であった。

投与後０〜４８時間に採取したプール便サンプルでは、抽出回収率は９８．４８％、再溶解回収率は８８．８０％、総回収率は８７．３７％であった。投与後１２０〜１６８時間のプール便サンプルでは、抽出回収率は８５．８５％、再溶解回収率は８７．６９％、総回収率は７５．２４％であった。

尿サンプルにおけるＨＰＬＣカラムからの放射能回収率は９７．０５％であった。

回収率を考慮するために、血漿、尿及び便の放射能測定には、補正係数を適用しなかった。

代謝物のプロファイリング
対象では、カボザンチニブ、化合物９（カボザンチニブサルフェート）及び化合物１９（カボザンチニブＮ−オキシド）がラジオクロマトグラムにおける主要ピークであった。投与後７２時間の血漿サンプルにおいては、化合物２（脱ジメチル化及び硫酸化フルオロアニリン切断生成物）が、主要代謝物であった。代謝化合物７（フルオロアニリン切断生成物）が、マイナーピークの１つに対応するものであった。ＨＰＬＣ法１を用いたところ、代謝化合物７、３（デメチルカボザンチニブグルクロニドＢ）、９、及び１０（フルオロアニリン切断生成物のメチルエステル）が共溶出した。

投与後０〜７２時間、投与後１４４〜１９２時間及び投与後２８８〜３３６時間のヒト尿サンプルの代表的なヒト尿代謝物プロファイルのラジオクロマトグラム（ＨＰＬＣ法１を使用）を対象から得た。投与後０〜７２時間、投与後１４４〜１９２時間及び投与後２８８〜３３６時間のプール尿サンプルにおいては、代謝化合物６が主要代謝物であった。投与後０〜７２時間のプールサンプルでは、化合物６に加えて、代謝化合物１、４、５、７及び１９が観察された。投与後１４４〜１９２時間のプールサンプルでは、代謝化合物１、４、５及び７が観察された。投与後２８８〜３３６時間のプールサンプルでは、代謝化合物１及び５が検出された。尿サンプルでは、親化合物のカボザンチニブは、観察されなかった。

投与後０〜７２時間、投与後１４４〜１９２時間及び投与後２８８〜３３６時間のヒト便サンプルの代表的なヒト便代謝物プロファイルのラジオクロマトグラム（ＨＰＬＣ法１を使用）を対象から得た。投与後０〜７２時間のプールサンプルでは、親化合物のカボザンチニブ、ならびに代謝化合物４、７、１１及び１５（化合物１６を含む）が観察された。投与後１４４〜１９２時間のプールサンプルでは、代謝化合物４、７、１１、１５、１６及び１８が観察された。投与後２８８〜３３６時間のプールサンプルでは、代謝化合物４及び１１が観察された。

ＨＰＬＣ／ＭＳ分析を用いた代謝物の同定
ＨＰＬＣ法１を用いて、信頼できる標準物質のＨＰＬＣ／ＭＳ分析を行ったところ、カボザンチニブの保持時間は２０．３分であり、フルオロアニリン切断生成物（化合物７）の保持時間は１４．４分であり、サルフェート（化合物９）の保持時間は１６．５であり、Ｎ−オキシド（化合物１９）の保持時間は２３．１分であったことが示された。

次に、血漿、尿及び便サンプルをＨＯＰＬＣ／ＭＳによって分析し、プロトン化分子イオンとフラグメンテーションパターンに基づき、化合物を同定した。

ヒト血漿におけるカボザンチニブ及びその代謝物の代謝物同定
ＸＩＣの約１９．１分におけるピークの質量スペクトルでは、ｍ／ｚ５０２にプロトン化分子イオンが見られた。そのプロダクトイオンスペクトルでは、ｍ／ｚ３９１、３２３及び２９７に主要フラグメントが見られ、これは、標準物質のカボザンチニブのフラグメントと一致している。ＭＳデータは、表１及び２にまとめてある。

カボザンチニブ及び代謝物のＰＫパラメーター
カボザンチニブを１４０ｍｇ／日で投与した８人のヒト対象において、カボザンチニブと各種代謝物のＰＫパラメーターを測定した。観察された代謝物には、
が含まれていた。

測定したパラメーターとしては、ｎｇ／ｍＬとして測定した最高観察濃度（Ｃ_ｍａｘ）、時間０〜２４時間（ＡＵＣ_０−２４）、時間０〜７２時間（ＡＵＣ_０−７２）、時間０〜最後の測定可能濃度の時間（ＡＵＣ_０−ｔ）においてｈ．ｎｇ／ｍＬとして測定した濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）が挙げられる。ＡＵＣ比も、カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比を含め、計算した。結果は、下記の表３にまとめてある。

カボザンチニブ代謝物のキナーゼ活性
キナーゼ希釈液
ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒＳｅｒｖｉｃｅＡｓｓａｙＰｒｏｔｏｃｏｌｓＰｒｏｔｏｃｏｌＧｕｉｄｅＶｏｌｕｍｅ５７に従って、ＥＭＤＭｉｌｌｉｐｏｒｅが、キナーゼ活性の測定とプロファイリングを行った。その結果が表４にまとめられている。阻害度はＩＣ_５０として、Ａ＝ＩＣ_５０が５０ｎＭ未満、Ｂ＝ＩＣ_５０が５０ｎＭ超、５００ｎＭ未満、Ｃ＝ＩＣ_５０が５００ｎＭ超、５０００ｎＭ未満、及びＤ＝ＩＣ_５０が５，０００ｎＭ超という符号によって示されている。本発明の例示的化合物は、そのキナゾリンまたはキノリンに関する機能性に応じて、ｃ−Ｍｅｔ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｆｌｔ−３及びｆｌｔ−４のいずれか１つに対する選択性を示す。表３に列挙されている酵素の略称は、以下のように定義する。ｃ−Ｍｅｔは、肝細胞成長因子受容体キナーゼを指し、ＲＥＴは、ＲＥＴがん原遺伝子キナーゼを指し、ＫＤＲは、キナーゼ挿入ドメイン受容体チロシンキナーゼを指し、ｆｌｔ−１α、ｆｌｔ−３及びｆｌｔ−４は、フムス様チロシンキナーゼ（代表的なＦＬＫファミリーの受容体チロシンキナーゼ）であり、オーロラＢＭＰは、オーロラＢキナーゼを指す。ＩＣ_５０値の代わりに、パーセント値が列挙されている場合には、１μＭにおける阻害率を示している。表中の空白セルは、データ不足であることのみを示している。

代謝物の合成及び構造データ
６−デスメチル酸

容器内で、カボザンチニブ（１５．０ｇ、５３．３ミリモル）と炭酸カリウム（２９．５ｇ、２１３．３ミリモル、４当量）をＴＨＦ（２１０ｍＬ、１４ｖｏｌ）と水（９０ｍＬ、６ｖｏｌ）に２０℃で懸濁させた。別の容器内で、ナトリウム１−（メトキシカルボニル）シクロプロパンカルボキシレート（１７．７１ｇ、１０６．６ミリモル、２当量）をＴＨＦ（９０ｍＬ、６ｖｏｌ）に懸濁させた。ＤＭＦ（１２０μＬ、３モル％）を加え、１５℃未満まで冷却した。９０分かけて塩化オキサリル（９．３４ｍＬ、１０６．６ミリモル、２当量）を加え、反応を２時間、１０〜１５℃で熟成させた。２時間をかけて、この酸塩化物スラリーをカボザンチニブ懸濁液に２０〜２５℃で加え、少なくとも３時間熟成させたところ、ＨＰＬＣ分析によって、９９％超が、モノ及びビスカルボニル化物質の混合物に変換されたことが示された。この反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）でろ過し、ＴＨＦ（３０ｍＬ、２ｖｏｌ）で洗浄し、層を分離した。１ＭＮａＯＨ（１５０ｍＬ、１０ｖｏｌ）を上層のＴＨＦ層に加え、その混合物を４０℃で１時間加熱したところ、ＨＰＬＣ分析によって、９９％超のけん化物が示された。その混合物を２５℃まで冷却し、上層のＴＨＦ層を除去した。水層を１ＭＨＣｌによってｐＨ３〜４まで酸性化して生成物を沈殿させ、１時間熟成させた。その沈殿物をろ過し、水（９０ｍＬ、６ｖｏｌ）で洗浄し、真空下（２０ｐｓｉｇ超）で窒素流により５０℃で乾燥させて、灰色〜茶色の粉末を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ１０．８−１１．０（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．７（ｓ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｓ，１Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），２．４８−２．５３（ｍ，４Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｚ３９３［Ｍ−Ｈ］⁻．

６−水素サルフェート６−デスメチル酸

６−デスメチル酸（１２０ｍｇ、０．３０ミリモル）、水酸化カリウム（１１８ｍｇ、２．１ミリモル、７当量）及び三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（２９２ｍｇ、２．１ミリモル、７当量）を水（３ｍＬ、２５ｖｏｌ）に溶解させ、７０℃まで２時間加熱したところ、ＨＰＬＣによる分析によって、９９％超の変換が示された。続いて、この反応混合物を氷浴で冷却し、１ＮＨ_２ＳＯ_４水溶液を滴下することによって約ｐＨ１まで酸性化した。このスラリーを２５℃で１時間熟成させ、ろ過し、水（３ｍＬ、２５ｖｏｌ）で洗浄し、脱液した。続いて、そのウェットケーキをアセトン（３ｍＬ、２５ｖｏｌ）で洗浄し、３５℃で真空下（２０ｐｓｉｇ超）にて、窒素流により２４時間乾燥して、ベージュ色の粉末を得た。

上記の代わりに、６−デスメチル酸（１２０ｍｇ、０．３０ミリモル）をＭｅＣＮ（５０ｖｏｌ、６ｍＬ）に懸濁させ、トリエチルアミン（１．２７ｍＬ、９．１２ミリモル、３０当量）を加えてから、氷浴で冷却した。クロロスルホン酸（１０１μＬ、１．５２ミリモル、５当量）を滴下し、続いて、その反応物を７０℃まで１時間加熱したところ、ＨＰＬＣによる分析によって、９８パーセント超の変換が示された。続いて、その反応混合物を氷浴で２時間冷却したところ、沈殿物が形成された。この沈殿物をろ過によって除去し、冷ＭｅＣＮ（５０ｖｏｌ）でリンスした。続いて、このＭｅＣＮ溶液を約２０ｖｏｌ（約２ｍＬ）まで濃縮し、１００ｖｏｌの１ＮＨＣｌでクエンチし、氷浴で冷却して、微細な沈殿物を得、これをろ過し、５０ｖｏｌの水と５０ｖｏｌのアセトンで洗浄し、３５℃で真空下（２０ｐｓｉｇ超）にて、窒素流により２４時間乾燥して、ベージュ色の粉末を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ１０．８（ｓ，１Ｈ），８．８３（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），１．３９−１．４８（ｂｒｓ，４Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｚ４７３［Ｍ−Ｈ］⁻，２３６．

オルト−ヒドロキシ−カボザンチニブ

フラスコにカルボン酸（０．８４ｇ、２．１ミリモル）、ＴＨＦ（１．２ｍＬ）及びＤＭＦ（５μＬ）を入れ、１５℃まで冷却した。このスラリーに、塩化オキサリル（０．１７ｍＬ、２．１ミリモル）を約２０分かけて滴下した。２時間後、アニリン（０．２ｇ、１．６ミリモル）と炭酸カリウム（０．６３ｇ、４．６ミリモル）をＴＨＦ（２．８ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に攪拌懸濁させた液の入った別の容器に、この酸塩化物スラリーを約１５分かけて加えた。３時間後、ＨＰＬＣ分析によって、生成物に完全に変換されたことが示された。攪拌を停止し、下層の水層を除去し、水（３０ｍＬ）を加えて、生成物を沈殿させた。続いて、生成物をろ過によって回収し、１：１ＴＨＦ−水溶液（２×１０ｍＬ）で洗浄し、薄い灰色の固体を得た。続いて、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって、メタノール／ジクロロメタンを移動相として用いて、更に精製した。

上記の代わりに、カルボン酸（４．０８ｇ、１０ミリモル）、アニリン（１．５２ｇ、１２ミリモル）及びトリエチルアミン（２．７ｍＬ、２０ミリモル）をアセトニトリル（１００ｍＬ）に懸濁させた液をＥＤＡＣ（２．３０ｇ、１２ミリモル）とＨＯＢｔ（０．５ｇ、３ミリモル）で処理した。このスラリーを一晩室温で攪拌し、反応の進行をＨＰＬＣによってモニタリングした。反応の終了時に、１５０ｍＬの水を加え、沈殿生成物をろ過によって回収し、水で洗浄してから、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ１０．４６（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４７（ｄ，１Ｈ），７．９２（ｄｄ，１Ｈ），７．７３（ｄｄ，２Ｈ），７．５１（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ，２Ｈ），６．６８（ｄｄ，１Ｈ），６．６２（ｄｔ，１Ｈ），６．４５（ｄ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），１．６０−１．５５（ｍ，４Ｈ）．^１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，１００ＭＨｚ）δ１６９．８２，１６７．６７，１５９．９１，１５７．５１，１５２．５８，１４９．９７，１４９．３５，１４９．０９，１４８．９８，１４８．８６，１４６．４９，１３５．７２，１２３．００，１２２．９７，１２２．９１，１２２．４３，１２１．３０，１１５．１７，１０７．８６，１０５．１０，１０４．８７，１０３．１６，１０２．４３，１０２．１９，９９．０８，５５．７４，５５．７１，５５．６６，３０．０２，１６．５１．
ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ５１８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋，５００．３．

カボザンチニブ−ヒドロキシサルフェート

ヒドロキシ−カボザンチニブ（０．９５ｇ、１．９ミリモル）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に懸濁させた液をトリエチルアミン（５ｍＬ、３６ミリモル）に加え、５℃未満まで冷却した。温度を１０℃未満に保つようにして、クロロスルホン酸（１ｍＬ、１５ミリモル）を約１５分かけて滴下した。一晩室温で攪拌後、ＨＰＬＣ分析によって、約５パーセントの出発物質が残っていることが示された。反応混合物を１ＮＨＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で処理した。その沈殿生成物をろ過によって回収し、水（４×２５ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して、灰白色の固体を得た（９３７ｍｇ、粗収率８２パーセント）。ＡＮ−ＨＰＬＣによる分析によって、その生成物の純度が９０．８％であり、主な不純物が出発物質であることが示された。Ｃ１８カラムによる分取ＨＰＬＣによって、アンモニウムアセテート水溶液／アセトニトリル移動相システムを用いて、生成物を９９パーセント超（ＡＮ−ＨＰＬＣ）まで精製した。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６,４００ＭＨｚ)δ１０．３９（ｓ，１Ｈ)，９．６９（ｓ，１Ｈ)，８．８１（ｄ，１Ｈ)，７．９５（ｄｄ，１Ｈ)，７．８５（ｄ，２Ｈ)，７．７７（ｓ，１Ｈ)，７．５１（ｓ，１Ｈ)，７．１１（ｓ，１Ｈ)，７．０８（ｄｄ，１Ｈ)，６．９３（ｄｄ，１Ｈ)，６．４５（ｄ，１Ｈ)，４．０５（ｓ，３Ｈ)，４．０４（ｓ，３Ｈ)，１．５３（ｓ，４Ｈ)．ＭＳ（ＥＳＩ−)ｍ／ｚ５９６．０［Ｍ−Ｈ］⁻．

メタ−ヒドロキシ−カボザンチニブ

フラスコにカルボン酸（０．８４ｇ、２．１ミリモル）、ＴＨＦ（１．２ｍＬ）及びＤＭＦ（５μＬ）を入れ、１５℃まで冷却した。このスラリーに、塩化オキサリル（０．１７ｍＬ、２．１ミリモル）を約２０分かけて滴下した。２時間後、アニリン（０．２ｇ、１．６ミリモル）と炭酸カリウム（０．６３ｇ、４．６ミリモル）をＴＨＦ（２．８ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に攪拌懸濁させた液の入った別の容器に、この酸塩化物スラリーを約１５分かけて加えた。９０分後、ＨＰＬＣ分析によって、生成物に完全に変換されたことが示された。攪拌を停止し、下層の水層を除去し、エチルアセテート（１５ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、濃縮して、茶色の固体を得た。続いて、この固体をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって、エチルアセテート／ヘプタンを移動相として用いて、更に精製した。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６,４００ＭＨｚ)δ１０．１５（ｂｒｓ，１Ｈ) ９．９６（ｂｒｓ，１Ｈ)，９．８９（ｂｒｓ，１Ｈ)，８．４６（ｄ，１Ｈ)，７．７６（ｄ，１Ｈ)，７．５０（ｓ，１Ｈ)，７．４１（ｄ，２Ｈ)，７．３９（ｓ，１Ｈ)，７．２２（ｄ，２Ｈ)，７．０７−６．９８（ｍ，２Ｈ)，６．４２（ｄ，１Ｈ)，３．９４（ｓ，３Ｈ)，３．９３（ｓ，３Ｈ)，１．４６（ｂｒｓ，４Ｈ)．^１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６,１００ＭＨｚ)δ１６８．２７,１６７．９５,１６０．０２,１５２．５６,１４９．４８,１４９．３３,１４８．８６,１４８．５６,１４６．４６,１４６．２１,１４４．５２,１４４．３９,１３６．４５,１３５．３３,１３５．３１,１２２．２３,１２１．２２,１１５．６３,１１５．４４,１１５．１５,１１１．２９,１１１．２３,１１０．２６,１０７．８５,１０３．０４,９９．０８,５５．７３,５５．７１,３１．６６,１５．４０．ＭＳ（ＡＰＣＩ＋)ｍ／ｚ５１８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋,５０２．３．

カボザンチニブＮ−オキシド

フラスコにＮ−（４−｛［６，７−ビス（メチルオキシ）キノリン−４−イル］オキシ｝フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）シクロプロパン−１，１−ジカルボキサミド（３．２１ｇ、６．４ミリモル）、酢酸（３２．１ｍＬ）及び過ホウ酸ナトリウム四水和物（１．９８ｇ、１２．８ミリモル）を入れ、６５℃まで加熱し、一晩攪拌した。２４時間後、ＨＰＬＣ分析によって、出発物質：生成物が約３８：６２であることが示された。更なる酸化剤（１．９８ｇ、１２．８ミリモル）を加え、加熱を一晩続けた。溶媒を真空下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン−メタノールグラジエント（ジクロロメタンから１０％メタノール−ジクロロメタンへのグラジエント）を用いて精製して、０．９５ｇの生成物を白色の固体として得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６,４００ＭＨｚ)δ１０．２０（ｂｒｓ，１Ｈ)，１０．０８（ｂｒｓ，１Ｈ)，８．２８（ｄ，１Ｈ)，７．９０（ｓ，１Ｈ)，７．７４（ｄ，２Ｈ)，７．６４（ｄｄ，２Ｈ)，７．４８（ｓ，１Ｈ)，７．２３（ｄ，２Ｈ)，７．１５（ｔ，２Ｈ)，６．４５（ｄ，１Ｈ)，３．９７（ｓ，３Ｈ)，３．９４（ｓ，３Ｈ)，１．４７（ｂｒｓ，４Ｈ)．^１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６,１００ＭＨｚ)δ１７２．１１,１６８．１８,１６８．１３,１５９．４９,１５７．０９,１５３．３４,１５０．７２,１５０．５７,１４９．９８,１３７．４１,１３６．３２,１３５．２４,１３５．２１,１３４．０６,１２２．４４,１２２．３６,１２２．１９,１２０．６５,１１７．２３,１１．１７,１１４．９５,１０４．３７,１００．３４,９９．１２,５６．０９,５６．０３,３１．５９,１５．４２．ＭＳ（ＡＰＣＩ＋)ｍ／ｚ５１８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

１−[４−（６,７−ジメトキシ−キノリン−４−イルオキシ)−フェニルカルバモイル]−シクロプロパンカルボン酸

ＴＨＦ（３．５ｍＬ）中のシクロプロピルジカルボン酸（４４９ｍｇ、３．４５ミリモル）に、ＴＥＡ（４８５μＬ、３．４５ミリモル）を加えた。得られた溶液を室温で窒素雰囲気下にて４０分攪拌してから、塩化チオニル（２５０μＬ、３．４４ミリモル）を加えた。モノ酸塩化物の形成について、反応をＬＣＭＳによってモニタリングした（サンプルをＭｅＯＨでクエンチして、対応するモノメチルエステルを調べた）。３時間、室温で攪拌後、４−（６，７−ジメトキシ−キノリン−４−イルオキシ）−フェニルアミン（１．０２ｇ、３．４４ミリモル）を固体として加えてから、更にＴＨＦ（１．５ｍＬ）を加えた。反応を継続させて、室温で１６時間攪拌した。得られた濃厚なスラリーをＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈し、１ＮＮａＯＨで抽出した。その二相スラリーをろ過し、水相を濃塩酸によって、ｐＨ約６まで酸性化し、ろ過した。両方の固体を合わせ、ＥｔＯＡｃで洗浄してから、真空乾燥した。所望の生成物である１−［４−（６，７−ジメトキシ−キノリン−４−イルオキシ）−フェニルカルバモイル］−シクロプロパンカルボン酸を白色の固体として得た（９６２ｍｇ、収率６８．７パーセント、純度９７パーセント）。^１ＨＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ／ＮａＯＨ）：７．９７（ｄ，１Ｈ），７．１８（ｄ，２Ｈ），６．７６（ｍ，４Ｈ），６．０８（ｄ，１Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），１．１５（ｄ，４Ｈ）．

明確に理解を得る目的で、上記の開示内容について、例示及び実施例によって、かなり詳細に説明してきた。本発明について、各種の具体的及び好ましい実施形態及び技法を参照しながら説明してきた。しかしながら、本発明の趣旨及び範囲内から逸脱しなければ、多くの変更と修正を行えることを理解すべきである。添付の特許請求の範囲内で、変形形態と修正形態を実施できることは、当業者には明らかであろう。したがって、上記の説明は、実例のためのものとして意図されており、限定するものではないことを理解されたい。すなわち、本発明の範囲は、上記の説明を参照して判断すべきではなく、特許請求の範囲が権利を与えられる均等物の全範囲とともに、下記の添付の特許請求の範囲を参照して判断すべきである。別段の定めのない限り、本明細書で引用されている全ての参照特許は、参照により援用される。

Claims

生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記医薬製剤を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となり、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記医薬製剤。
生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤であって、前記医薬製剤を特定のヒト対象群に経口投与すると、前記特定のヒト対象群において、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となり、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記医薬製剤。
前記測定された代謝物が、
からなる群から選択したものであり、
式中、ＧＡがグルクロン酸部分である、請求項１〜２に記載の医薬製剤。
前記測定された代謝物が、
のうちの１つ以上を含む、請求項１〜２に記載の医薬製剤。
ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均血漿中カボザンチニブ曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも６０，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１４０ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１０００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．２５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、時間０から、最後の測定可能濃度の時間まで測定したものである前記方法。
ヒト患者のがんを治療する方法であって、
１００ｍｇのカボザンチニブを含む製剤を１日１回送達した場合、カボザンチニブの定常状態曲線下面積（平均ＡＵＣ）が、少なくとも３５，０００ｎｇ・ｈ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最高血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも２４００ｎｇ／ｍＬとなり、
１００ｍｇの用量のカボザンチニブを送達するごとに、平均最低血液血漿中カボザンチニブ濃度（平均Ｃ_ｍａｘ）が、少なくとも１１００ｎｇ／ｍＬとなり、
カボザンチニブと、測定されたカボザンチニブ代謝物とを合わせたもののＡＵＣに対するＡＵＣ（カボザンチニブ）の比率、すなわち
ＡＵＣ（カボザンチニブ）／ＡＵＣ（カボザンチニブ＋測定された代謝物）
が、少なくとも０．３５となる
ような速度で、生理的有効量のカボザンチニブを含む医薬製剤を前記患者に経口投与することを含み、
前記ＡＵＣが、２２日目に測定したものである前記方法。
前記測定された代謝物が、
からなる群から選択したものであり、
式中、ＧＡがグルクロン酸部分である、請求項５〜６に記載の方法。
前記測定された代謝物が、
のうちの１つ以上を含む前記方法。
前記がんを、卵巣がん、肺がん、甲状腺髄様がん、肝臓がん、消化器がん、膵臓がん、骨がん、血液がん、皮膚がん、腎臓がん、乳がん、結腸がん及び卵管がんから選択する、請求項５〜８に記載の方法。