JP2017504346A - 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 - Google Patents
核酸を調製するための等温方法および関連組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017504346A JP2017504346A JP2016549245A JP2016549245A JP2017504346A JP 2017504346 A JP2017504346 A JP 2017504346A JP 2016549245 A JP2016549245 A JP 2016549245A JP 2016549245 A JP2016549245 A JP 2016549245A JP 2017504346 A JP2017504346 A JP 2017504346A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- rna
- nucleic acid
- template
- sequence
- dna
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
次世代配列決定技術の最近の進歩により、研究現場および臨床現場の両方における配列決定法および調製方法が急速に向上した。ハイスループット能力および高いカバレッジの深さは、次世代配列決定を分子診断にとって魅力的で有望な方向にする。全ゲノム配列決定の代わりに、遺伝子の特定のサブセットを調べることができ、複数の試料をプールして(例えば、多重化して)単一の配列決定ランにし(例えば、フローセルレーン)、したがって分析の全体的なコストを低減することができる。現在の方法は、依然として速度が限られており、改良法が望ましい。
増幅#1
未知の融合パートナーとの3’融合事象を増幅することに向けた第1のステップとして、第1の増幅反応を、ホルマリン固定組織試料から得たRNAを使用して実行した。
・精製RNA(50ng) 1μL
・3μΜ V3−FGFR GSP1 1μL
・5μΜ T7−N9ランダマー 1μL
・dH2O 2μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅反応#1からの2μL
・3μΜ V3−FGFR GSP1 1μL
・5μΜ T7−cRNA R2P 1μL
・dH2O 1μL 。
RNA精製を上記の通り実行し、10mM Tris−HCl pH8.0溶出緩衝液15μL中にRNAを溶出した。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅反応#2からの1μL
・3μΜ V3−FGFR GSP2 1μL
・5μΜ T7−cRNA R2P 1μL
・dH2O 2μL 。
RNA精製を上記の通り実行し、今回は、10mM Tris−HCl pH8.3溶出緩衝液6μL中にRNAを溶出した。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#3からの5μL
・10μΜ Ρ5 1μL
・10μΜ Ρ7 1μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
増幅#1
未知の融合パートナーとの5’融合事象を含有する遺伝子座を増幅することに向けた第1のステップは、標的/遺伝子特異的プライマー(複数可)を使用して得られた試料RNAに対して逆転写酵素事象を実行することである。
・精製RNA(50ng) 1μL
・3μΜ V3−FGFR GSP1 1μL
・5μΜ Τ7−Ν9ランダマー 1μL
・dH2O 2μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#1からの2μL
・3μΜ V3−FGFR GSP1 1μL
・5μΜ T7−cRNA R2P 1μL
・dH2O 1μL 。
RNA精製を上記の通り実行し、10mM Tris−HCl pH8.0溶出緩衝液15μL中にRNAを溶出した。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#2からの1μL
・3μΜ V3−FGFR GSP2 1μL
・5μM Τ7−cRΝΑ R2P 1μL
・dH2O 2μL 。
RNA精製を上記の通り実行し、今回は、10mM Tris−HCl pH8.3溶出緩衝液6μL中にRNAを溶出した。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#3からの5μL
・10μΜ P5 1μL
・10μΜ Ρ7 1μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
分析用の二本鎖ゲノムDNAの標的領域を調製するために、DNAをサイズで100〜600bpの間に最初に断片化した。
・断片化したDNA(50〜250ng) 10μL
・末端修復緩衝液 4μL
・末端修復ミックス 1μL
・Taqポリメラーゼ(Aテーリング)1μL
・2mM dNTP 1μL 。
・上記で調製したDNA 40μL
・MiSeqインデックス2アダプター 1μL
・ライゲーション緩衝液 4.9μL
・DNAリガーゼ 2μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記ライゲーション反応からの精製DNA 2μL
・プライマーT7−R2P cRNA 5μΜ 1μL
・GSP1 3μΜ 1μL
・dH2O 1μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#1からのRNA 2μL
・T7−R2P−cRNA 5uM 1μL
・GSP2 3uM 1μL
・dH2O 1μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#3からの5μL
・10μΜ Ρ5 1μL
・10μΜ Ρ7 1μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
増幅#1
未知の融合パートナーとの3’融合事象を増幅することに向けた第1のステップとして、第1の増幅反応を、ホルマリン固定組織試料から得たRNAを使用して実行した。
・精製RNA(50ng) 1μL
・5μΜ T7−N9ランダマー 1μL
・dH2O 3μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅反応#1からの2μL
・3μΜ GSP1(5’または3’方向性プライマー)1μL
・5μM R2P 1μL
・dH2O 1μL 。
RNA精製を上記の通り実行し、10mM Tris−HCl pH8.0溶出緩衝液15μL中にRNAを溶出した。
以下の反応物を室温で反応緩衝液とともに組み立てた。
・上記増幅#2からの5μL
・10μΜ Ρ5 1μL
・10μΜ P7 1μL 。
以下のものを上記反応物に添加した。
・AMPureビーズ 36μL 。
以下の表は、例えば、実施例1〜3に記載した、配列決定解析のための調製において核酸を増幅するための例示的なオリゴヌクレオチド配列を提供する。
Claims (49)
- 分析のための核酸を調製する方法であって、
(a)核酸鋳型から合成RNAを生成するステップと、
(b)等温反応で前記合成RNAを指数関数的に増幅するステップと、
(c)前記指数関数的に増幅された合成RNAからcDNAを作製するステップであって、前記cDNAは、少なくとも1つの非標的配列を含む、ステップと
を含む、方法。 - 核酸鋳型の配列を決定する方法であって、
(a)核酸鋳型から合成RNAを生成するステップと、
(b)等温反応で前記合成RNAを指数関数的に増幅するステップと、
(c)前記指数関数的に増幅された合成RNAからcDNAを作製するステップと、
(d)前記cDNAを配列決定するステップと
を含む、方法。 - 前記等温反応が、鋳型依存性伸長およびRNAポリメラーゼ転写の2つまたはそれ超のサイクルを含む、請求項1または2のいずれか一項に記載の方法。
- 各サイクル中の少なくとも1つの鋳型依存性伸長が、逆転写である、請求項3に記載の方法。
- 前記等温反応が、35℃〜45℃の範囲内の温度で実行される、請求項3または4に記載の方法。
- 前記等温反応が、45〜90分の持続時間にわたって実行される、請求項5に記載の方法。
- 前記等温反応が、前記合成RNAに相補的である第1のDNA鎖を合成する鋳型依存性伸長を含み、前記第1のDNA鎖と前記合成RNAとの間のRNA−DNAハイブリッドの形成をもたらす、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記等温反応が、前記RNA−DNAハイブリッドの前記合成RNA部分の分解をさらに含む、請求項7に記載の方法。
- 前記分解が、酵素的に媒介される分解である、請求項8に記載の方法。
- 前記分解が、RNAseHによって媒介される、請求項9に記載の方法。
- 前記等温反応が、前記第1のDNAに相補的である第2のDNA鎖を合成する鋳型依存性伸長をさらに含み、前記第1のDNA鎖および前記第2のDNA鎖を含む二本鎖DNAの形成をもたらす、請求項7から10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記等温反応が、前記二本鎖DNAから合成RNAを転写するRNAポリメラーゼ媒介転写反応をさらに含む、請求項11に記載の方法。
- ステップ(b)が繰り返される、請求項1から12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記増幅された合成RNAが、ステップ(b)のそれぞれ連続したラウンドの後に精製され、前記精製された合成RNAが、ステップ(b)の後続のラウンド(複数可)の出発材料として使用される、請求項13に記載の方法。
- 繰り返されるステップ(b)の前記等温反応の少なくとも2つが、前記鋳型合成RNAまたは第1のDNA鎖の入れ子配列と相補的であるハイブリダイゼーション配列を有するオリゴヌクレオチドによってプライミングされる鋳型依存性伸長を含む、請求項14に記載の方法。
- 繰り返されるステップ(b)の前記等温反応の少なくとも2つが、前記鋳型合成RNAまたは第1のDNA鎖と相補的であるハイブリダイゼーション配列、および追加の非相補的配列を有するオリゴヌクレオチドによってプライミングされる鋳型依存性伸長を含む、請求項14または15に記載の方法。
- 前記追加の非相補的配列が、バーコード配列、インデックス配列、またはアダプター配列のうちの1つまたは複数を含む、請求項16に記載の方法。
- 標的特異的ハイブリダイゼーション配列を含むオリゴヌクレオチドを使用して少なくとも1つの伸長反応を実行することによって前記核酸鋳型を生成するステップと、異なるハイブリダイゼーション配列の5’にある共通配列を共有する複数の異なるオリゴヌクレオチドを使用して少なくとも1つの伸長反応を実行するステップとをさらに含む、請求項1から17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記核酸鋳型が、標的領域および隣接領域を含む、請求項1から18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的特異的ハイブリダイゼーション配列が、前記標的領域と相補的であり、前記異なるハイブリダイゼーション配列の少なくとも1つが、前記隣接領域と相補的である、請求項19に記載の方法。
- 前記標的領域が、第1の遺伝子の配列を含み、前記隣接領域が、第2の遺伝子の配列を含む、請求項19または20に記載の方法。
- 前記第1の遺伝子が、RET、ROS1、またはALKである、請求項21に記載の方法。
- 前記核酸鋳型が、プロモーターを含む二本鎖DNAであり、前記合成RNAが、前記プロモーターに特異的に結合し、前記プロモーターの下流のDNAを転写するRNAポリメラーゼによって酵素的に生成される、請求項1から22のいずれか一項に記載の方法。
- 前記RNAポリメラーゼが、T3ポリメラーゼ、T7ポリメラーゼ、またはSP6ポリメラーゼである、請求項23に記載の方法。
- 前記合成RNAが、前記核酸鋳型から生成される中間体二本鎖DNAから転写され、前記核酸鋳型が、単離RNAである、請求項1から24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記単離RNAが、メッセンジャーRNA(mRNA)、マイクロRNA、リボソームRNA、トランスファーRNA、または非コードRNAである、請求項25に記載の方法。
- 前記mRNAが、遺伝子再構成を含む染色体セグメントからコードされる融合mRNAである、請求項26に記載の方法。
- 前記核酸鋳型が、遺伝子再構成の一部を含む染色体セグメントである、請求項27に記載の方法。
- 前記遺伝子再構成が、逆位、欠失、または転座である、請求項27または28に記載の方法。
- 前記cDNAが、配列決定反応をプライミングする配列決定プライマーのハイブリダイゼーション部位として働く非鋳型配列を含有する、請求項2から29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記cDNAが、異なる供給源を起源とする異なる核酸を含む多重反応において配列決定される、請求項2から29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記異なる供給源が、前記核酸鋳型が得られた異なる被験体である、請求項31に記載の方法。
- 前記異なる供給源が、前記核酸鋳型が得られた異なる組織である、請求項32に記載の方法。
- 核酸を配列決定するための方法であって、
標的領域および隣接領域を含む核酸鋳型から合成RNAを生成するステップと、
鋳型として前記合成RNAを使用して鋳型依存性伸長によって合成される第1の鎖、および鋳型として前記第1の鎖を使用して鋳型依存性伸長によって合成される第2の鎖を含む二本鎖核酸を生成するステップであって、前記二本鎖核酸は、前記核酸鋳型の前記標的領域および前記隣接領域を示す、ステップと、
前記二本鎖核酸を使用して配列決定反応を実行して、前記標的領域および前記隣接領域のヌクレオチド配列を決定するステップと
を含む、方法。 - 前記合成RNAを増幅するステップと、鋳型として前記増幅された合成RNAを使用して前記二本鎖核酸を生成するステップとをさらに含む、請求項34に記載の方法。
- 前記合成RNAが、等温増幅によって増幅される、請求項35に記載の方法。
- 前記合成RNAが、前記等温増幅によって指数関数的に増幅される、請求項36に記載の方法。
- 前記合成RNAが、ポリメラーゼ連鎖反応によって増幅される、請求項36または37に記載の方法。
- 前記二本鎖核酸を増幅するステップと、前記増幅された二本鎖核酸を配列決定するステップとをさらに含む、請求項34から38のいずれか一項に記載の方法。
- 前記二本鎖核酸の各鎖が、それが前記配列決定反応をプライミングする配列決定プライマーのハイブリダイゼーション部位として働く非鋳型配列を含有するように生成される、請求項34から39のいずれか一項に記載の方法。
- 前記二本鎖核酸が、異なる供給源を起源とする異なる核酸を含む多重反応において配列決定される、請求項34から40のいずれか一項に記載の方法。
- 前記異なる核酸が、供給源を特定するバーコード配列を含む、請求項41に記載の方法。
- ハイブリダイゼーション配列およびRNAポリメラーゼプロモーター配列を含む少なくとも1つのオリゴヌクレオチド、逆転写酵素、DNAポリメラーゼ、ならびにRNAポリメラーゼを含む凍結乾燥組成物を収容する容器
を含む、キット。 - 前記組成物が、RNAseHをさらに含む、請求項43に記載のキット。
- 前記逆転写酵素が、AMV逆転写酵素、RSV逆転写酵素、HIV−1逆転写酵素、HIV−2逆転写酵素、およびその他からなる群より選択される、請求項43または44に記載のキット。
- 前記DNAポリメラーゼが、Taqポリメラーゼ、Pheonix Taqポリメラーゼ、Phusionポリメラーゼ、T4ポリメラーゼ、T7ポリメラーゼ、Klenow断片、Klenow exo−、phi29ポリメラーゼ、VeraSeq ULtraポリメラーゼ、およびEnzScriptからなる群より選択される、請求項43から45のいずれか一項に記載のキット。
- 前記RNAポリメラーゼが、T3ポリメラーゼ、T7ポリメラーゼ、およびSP6ポリメラーゼからなる群より選択される、請求項43から46のいずれか一項に記載のキット。
- 前記少なくとも1つのオリゴヌクレオチドが、バーコード配列、インデックス配列、およびアダプター配列のうちの少なくとも1つをさらに含む、請求項43から47のいずれか一項に記載のキット。
- 前記容器が、マルチチャンバーカートリッジのチャンバーである、請求項43から47のいずれか一項に記載のキット。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021053293A JP2021094038A (ja) | 2014-01-27 | 2021-03-26 | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461931974P | 2014-01-27 | 2014-01-27 | |
US61/931,974 | 2014-01-27 | ||
PCT/US2015/012842 WO2015112949A2 (en) | 2014-01-27 | 2015-01-26 | Isothermal methods and related compositions for preparing nucleic acids |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021053293A Division JP2021094038A (ja) | 2014-01-27 | 2021-03-26 | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017504346A true JP2017504346A (ja) | 2017-02-09 |
Family
ID=53682134
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016549245A Pending JP2017504346A (ja) | 2014-01-27 | 2015-01-26 | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 |
JP2021053293A Withdrawn JP2021094038A (ja) | 2014-01-27 | 2021-03-26 | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021053293A Withdrawn JP2021094038A (ja) | 2014-01-27 | 2021-03-26 | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20150337364A1 (ja) |
EP (1) | EP3099819A4 (ja) |
JP (2) | JP2017504346A (ja) |
CN (2) | CN113388664A (ja) |
AU (2) | AU2015209103B2 (ja) |
CA (1) | CA2938141A1 (ja) |
WO (1) | WO2015112949A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20190132155A (ko) * | 2018-05-18 | 2019-11-27 | 주식회사 바이나리 | 등온핵산 증폭을 이용한 생체조직의 3차원 핵산영상 진단 방법 |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106192022B (zh) * | 2016-08-08 | 2018-07-03 | 中国科学院北京基因组研究所 | 16SrRNA多重测序文库的构建方法 |
CN106191045B (zh) * | 2016-08-08 | 2019-10-11 | 中国科学院北京基因组研究所 | 用于多重核酸测序的Index和引物 |
CA3037185A1 (en) | 2016-09-15 | 2018-03-22 | ArcherDX, Inc. | Methods of nucleic acid sample preparation |
AU2017328953B2 (en) | 2016-09-15 | 2023-09-14 | Archerdx, Llc | Methods of nucleic acid sample preparation for analysis of cell-free DNA |
CA3041645C (en) | 2016-10-24 | 2021-11-02 | Geneinfosec, Inc. | Concealing information present within nucleic acids |
CN111378724B (zh) * | 2018-12-27 | 2024-03-22 | 上海仁度生物科技股份有限公司 | 一种rna放大检测方法及检测试剂盒 |
GB201903391D0 (en) * | 2019-03-12 | 2019-04-24 | Cancer Research Tech Ltd | Nucleic acid amplification methods |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04500759A (ja) * | 1989-07-11 | 1992-02-13 | ジェン―プローブ インコーポレイテッド | 核酸配列増幅法 |
US5824518A (en) * | 1989-07-11 | 1998-10-20 | Gen-Probe Incorporated | Nucleic acid sequence amplification methods |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5556771A (en) * | 1995-02-10 | 1996-09-17 | Gen-Probe Incorporated | Stabilized compositions of reverse transcriptase and RNA polymerase for nucleic acid amplification |
AU4938497A (en) * | 1996-11-12 | 1998-06-03 | Visible Genetics Inc. | Method and kit for direct isothermal sequencing of nucleic acids |
US6197554B1 (en) | 1998-11-20 | 2001-03-06 | Shi-Lung Lin | Method for generating full-length cDNA library from single cells |
US20030022318A1 (en) | 2000-01-25 | 2003-01-30 | Epiclone, Inc. | Method for thermocycling amplification of nucleic acid sequences and the generation of related peptides thereof |
AR031640A1 (es) * | 2000-12-08 | 2003-09-24 | Applied Research Systems | Amplificacion isotermica de acidos nucleicos en un soporte solido |
US20030104432A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-06-05 | The Regents Of The University Of California | Methods of amplifying sense strand RNA |
EP2240606B1 (en) * | 2008-01-14 | 2016-10-12 | Applied Biosystems, LLC | Compositions, methods, and kits for detecting ribonucleic acid |
CN101270395A (zh) * | 2008-05-08 | 2008-09-24 | 重庆大学 | 柑桔衰退病毒一步法实时荧光反转录聚合酶链式反应固相化试剂盒及其检测方法 |
WO2010077288A2 (en) * | 2008-12-09 | 2010-07-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Methods for identifying differences in alternative splicing between two rna samples |
JP2010143860A (ja) * | 2008-12-19 | 2010-07-01 | Chisso Corp | タンパク質の安定化剤 |
AU2011204313A1 (en) * | 2010-01-08 | 2012-07-26 | Qiagen Gaithersburg, Inc. | Materials and methods for isothermal nucleic acid amplification |
GB201008125D0 (en) * | 2010-05-14 | 2010-06-30 | Biofortuna Ltd | Tissue typing assays and kits |
EP2964789A4 (en) * | 2013-03-06 | 2016-11-02 | Ohio State Innovation Foundation | ISOTHERMIC NUCLEIC ACID AMPLIFICATION AND LIBRARY GENERATION AND CLONING GENERATION IN SEQUENCING |
-
2015
- 2015-01-26 CN CN202110571327.4A patent/CN113388664A/zh not_active Withdrawn
- 2015-01-26 EP EP15739782.9A patent/EP3099819A4/en not_active Withdrawn
- 2015-01-26 US US14/605,030 patent/US20150337364A1/en not_active Abandoned
- 2015-01-26 JP JP2016549245A patent/JP2017504346A/ja active Pending
- 2015-01-26 CN CN201580016111.4A patent/CN107075566B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2015-01-26 WO PCT/US2015/012842 patent/WO2015112949A2/en active Application Filing
- 2015-01-26 CA CA2938141A patent/CA2938141A1/en not_active Abandoned
- 2015-01-26 AU AU2015209103A patent/AU2015209103B2/en not_active Ceased
-
2021
- 2021-03-26 JP JP2021053293A patent/JP2021094038A/ja not_active Withdrawn
- 2021-09-30 AU AU2021240263A patent/AU2021240263A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04500759A (ja) * | 1989-07-11 | 1992-02-13 | ジェン―プローブ インコーポレイテッド | 核酸配列増幅法 |
US5824518A (en) * | 1989-07-11 | 1998-10-20 | Gen-Probe Incorporated | Nucleic acid sequence amplification methods |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20190132155A (ko) * | 2018-05-18 | 2019-11-27 | 주식회사 바이나리 | 등온핵산 증폭을 이용한 생체조직의 3차원 핵산영상 진단 방법 |
KR102103719B1 (ko) | 2018-05-18 | 2020-04-23 | 주식회사 바이나리 | 등온핵산 증폭을 이용한 생체조직의 3차원 핵산영상 분석 방법 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2021240263A1 (en) | 2021-10-28 |
CN107075566B (zh) | 2021-06-15 |
JP2021094038A (ja) | 2021-06-24 |
CN113388664A (zh) | 2021-09-14 |
WO2015112949A2 (en) | 2015-07-30 |
US20150337364A1 (en) | 2015-11-26 |
CA2938141A1 (en) | 2015-07-30 |
EP3099819A4 (en) | 2018-01-10 |
AU2015209103A1 (en) | 2016-09-15 |
AU2015209103B2 (en) | 2021-07-01 |
WO2015112949A3 (en) | 2015-10-22 |
EP3099819A2 (en) | 2016-12-07 |
CN107075566A (zh) | 2017-08-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11591650B2 (en) | Massively multiplexed RNA sequencing | |
US20210071171A1 (en) | Compositions and methods for targeted nucleic acid sequence enrichment and high efficiency library generation | |
US10865410B2 (en) | Next-generation sequencing libraries | |
JP2021094038A (ja) | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 | |
AU2012304328B2 (en) | Methods for obtaining a sequence | |
JP6181751B2 (ja) | 望まれない核酸配列のネガティブ選択のための組成物および方法 | |
CN109689888B (zh) | 无细胞核酸标准品及其用途 | |
KR20190034164A (ko) | 단일 세포 전체 게놈 라이브러리 및 이의 제조를 위한 조합 인덱싱 방법 | |
KR20200016287A (ko) | 메틸화 서열결정을 위한 단일 세포 전체 게놈 라이브러리 | |
JP2020522243A (ja) | 核酸のマルチプレックス末端タギング増幅 | |
JP2015516814A (ja) | 標的化されたdnaの濃縮および配列決定 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180125 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190131 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190425 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190701 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190731 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191212 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200311 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200511 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200611 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20201126 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210326 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20210326 |
|
C11 | Written invitation by the commissioner to file amendments |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C11 Effective date: 20210405 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20210506 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20210506 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20210618 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20210621 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20210827 |
|
C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C211 Effective date: 20210831 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20211119 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20221021 |
|
C13 | Notice of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C13 Effective date: 20221202 |
|
C23 | Notice of termination of proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C23 Effective date: 20230329 |
|
C03 | Trial/appeal decision taken |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C03 Effective date: 20230428 |
|
C30A | Notification sent |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C3012 Effective date: 20230428 |