JP2017169521A - ブタの初乳作出法 - Google Patents
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Abstract
Description
哺乳動物の分娩後24時間以内に射乳された乳である初乳には(非特許文献1)、多くの免疫グロブリンが含まれており、生まれたばかりの哺乳動物は、初乳から免疫グロブリンを取得して、獲得免疫を確立していく。
しかしながら、現在のところ、人為的なブタの初乳の作出方法は、見出されていない。
すなわち、本発明は、ブタの初乳を人為的に作出する方法の提供を目的とする。
(1)偽妊娠を誘起したブタに、乳腺発達を促すための処置をし、黄体退行に必要な処置をした後、乳を採取する、初乳の作出方法。
(2)前記乳腺発達を促すための処置が、エストラジオールE2のプロドラッグを投与することである、上記(1)に記載の初乳の作出方法。
(3)前記エストラジオールE2のプロドラッグが、エストラジオールプロピオン酸エステル、安息香酸エストラジオール、吉草酸エストラジオールなどからなるグループから選択されることを特徴とする上記(2)に記載の初乳の作出方法。
(4)前記黄体退行に必要な処置が、PGF2αの投与であることを特徴とする上記(1)ないし(3)のいずれかに記載の初乳の作出方法。
(5)前記エストラジオールE2のプロドラッグの投与後、PGF2αを2回投与することを特徴とする上記(4)に記載の初乳の作出方法。
(6)前記偽妊娠がエストラジオールE2のプロドラッグを投与することで誘起されることを特徴とする、上記(1)ないし(5)のいずれかに記載の初乳の作出方法。
(7)偽妊娠を誘起したブタであって、該ブタに乳腺発達を促すための処置をし、黄体退行に必要な処置をして、乳の射出が可能となったブタ。
(8)前記乳腺発達を促すための処置が、エストラジオールE2のプロドラッグを投与することである、上記(7)に記載のブタ。
(9)前記エストラジオールE2のプロドラッグが、エストラジオールプロピオン酸エステル、安息香酸エストラジオール、吉草酸エストラジオールからなるグループから選択されることを特徴とする、上記(8)に記載のブタ。
(10)前記黄体退行に必要な処置が、PGF2αの投与であることを特徴とする上記(7)ないし(9)のいずれかに記載のブタ。
(11)前記エストラジオールE2のプロドラッグの投与後、PGF2αを2回投与することを特徴とする上記(10)に記載のブタ。
(12)前記偽妊娠がエストラジオールE2のプロドラッグを投与することで誘起されることを特徴とする、上記(7)ないし(11)のいずれかに記載のブタ。
(13)上記(1)ないし(6)のいずれかに記載の方法によって作出される初乳。
本明細書において、「偽妊娠」とは、受精および子宮内での胎仔の発育は認めないが、卵巣の機能性黄体が退行せず、発情周期を営まない状態をいう。あるいは、より具体的には、雌ブタに、持続性エストロジェン、例えば、エストラジオールE2のプロドラッグの投与後(複数回投与する場合には、初回投与後)、少なくとも24日以上(Geisert et al., J. Reprod. Fert. 79, 163-172, 1987:Noguchi et al., J. Reprod. Dev., 56, 421-427, 2010:Noguchi et al., Reprod Biol Endocrinol. 9, 157, 2011. Doi: 10.1186/1477-7827-9-157:Noguchi et al., Theriogenology. 75, 343-348, 2013)雄ブタを許容せず、末梢血中プロジェステロン濃度が、5 ng/ml (Noguchi et al., Reproduction. 139, 153-161, 2010)以上で推移している個体の状態ということができる。
エストラジオールE2のプロドラッグとしては、限定はしないが、例えば、エストラジオールプロピオン酸エステル、安息香酸エストラジオール、吉草酸エストラジオールなどを挙げることができる。
ブタの偽妊娠を誘起するために投与するエストラジオールE2のプロドラッグの投与回数および1回あたりの投与量は、偽妊娠を誘起するブタの種類等によって異なるが、当業者であれば、予備的な試行により、適切な投与回数および投与量を決定することができる。
限定はしないが、例えば、家畜ブタあるいはミニブタにエストラジオールプロピオン酸エステルを投与する場合、投与回数1〜3回で、1回の投与量は、体重1 kgあたり0.15 mg〜0.25 mg程度投与することができる。
なお、本発明の実施形態の対象となる「ブタ」(Sus scrofa domesticus)は、特に限定はしないが、ブタ亜種に分類される、家畜ブタやミニブタのことである。また、偽妊娠を誘起するブタは、初回発情(春機発動)後かつ卵巣上に機能性黄体を保有するブタである必要がある。
黄体退行に必要な処置としては、例えば、プロスタグランジンF2αを有効量投与する方法を挙げることができる。黄体を退行させるために投与するプロスタグランジンF2αの投与回数および投与量は、偽妊娠を誘起するブタの種類等によって異なるが、当業者であれば、予備的な試行により、適切な投与回数および投与量を決定することができる。
なお、黄体退行効果を有する薬剤は複数市販されており(例えば、パナセランHi、明治製菓ファルマ株式会社(天然型))、天然型プロスタグランジンF2αを含有するか、あるいは、合成型プロスタグランジンF2αを含有するかにより、投与量は異なるため、薬剤に添付されている使用説明書に記載されている投与量に従うことが望ましい。
本発明の第2の実施形態に係るブタは、受胎することなく、乳(初乳)を射出することが可能な点に特徴を有している。
また、本発明の実施形態には、第1の実施形態によって作出される初乳も含まれる。
1−1.試動物
偽妊娠ブタ4頭(ランドレース種,6.8 ± 2.8産,平均±標準偏差)、妊娠ブタ3頭(ランドレース種,5.3 ± 3.1産)
1−2.実験方法
排卵確認後10.3 ± 1.0日目にEDP(エストラジオールプロピオン酸エステル)(オバホルモンデポー 5 mg,あすか製薬株式会社)30 mgを単回筋肉内投与し、偽妊娠を誘起した。EDP投与後25.5 ± 1.7日目にPGF2α 15 mg(パナセランHi,明治製菓ファルマ株式会社)を筋肉内投与し、その12時間後に同量のPGF2αを再度筋肉内投与した。なお、初回PGF2α投与前5日あるいは10日にEDP 5 mgあるいは10 mgを筋肉内投与している(それぞれ1頭)。
偽妊娠ブタは、初回PGF2α投与後24時間目から、12時間間隔で156時間目まで搾乳を行った。妊娠豚は分娩開始直後に搾乳を行った。得られた全ての乳は、ガーゼでろ過した後、測定まで−30℃で保存した。
乳汁中のIgG濃度は、ブタIgG測定キット(Porcine IgG Quantitation kit, Bethyl Laboratories, Inc.)を用いて酵素免疫定量法により測定した。測定内および測定間変動係数は、それぞれ6.6%および7.0%であった。
偽妊娠ブタの初乳と妊娠ブタの初乳中のIgG濃度の測定結果を表1に示す。
Claims (13)
- 偽妊娠を誘起したブタに、乳腺発達を促すための処置をし、黄体退行に必要な処置をした後、乳を採取する、初乳の作出方法。
- 前記乳腺発達を促すための処置が、エストラジオールE2のプロドラッグを投与することである、請求項1に記載の初乳の作出方法。
- 前記エストラジオールE2のプロドラッグが、エストラジオールプロピオン酸エステル、安息香酸エストラジオール、吉草酸エストラジオールからなるグループから選択されることを特徴とする請求項2に記載の初乳の作出方法。
- 前記黄体退行に必要な処置が、PGF2αの投与であることを特徴とする請求項1ないし3のいずれかに記載の初乳の作出方法。
- 前記エストラジオールE2のプロドラッグの投与後、PGF2αを2回投与することを特徴とする請求項4に記載の初乳の作出方法。
- 前記偽妊娠がエストラジオールE2のプロドラッグを投与することで誘起されることを特徴とする、請求項1ないし5のいずれかに記載の初乳の作出方法。
- 偽妊娠を誘起したブタであって、該ブタに乳腺発達を促すための処置をし、黄体退行に必要な処置をして、乳の射出が可能となったブタ。
- 前記乳腺発達を促すための処置が、エストラジオールE2のプロドラッグを投与することである、請求項7に記載のブタ。
- 前記エストラジオールE2のプロドラッグが、エストラジオールプロピオン酸エステル、安息香酸エストラジオール、吉草酸エストラジオールなどからなるグロープから選択されることを特徴とする、請求項8に記載のブタ。
- 前記黄体退行に必要な処置が、PGF2αの投与であることを特徴とする請求項7ないし9のいずれかに記載のブタ。
- 前記エストラジオールE2のプロドラッグの投与後、PGF2αを2回投与することを特徴とする請求項10に記載のブタ。
- 前記偽妊娠がエストラジオールE2のプロドラッグを投与することで誘起されることを特徴とする、請求項7ないし11のいずれかに記載のブタ。
- 請求項1ないし6のいずれかに記載の方法によって作出される初乳。
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