JP2017088526A - ３−ｏ−アルキルグリセリルアスコルビン酸及びその用途 - Google Patents

Abstract

【課題】
抗酸化作用等のアスコルビン酸が元来有する優れた機能を有するとともに、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少なく、また化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こさない新規なアスコルビン酸誘導体又はその塩を提供し、さらに該アスコルビン酸誘導体又はその塩の有効性について見出すことを課題とする。
【解決手段】
新規アスコルビン酸誘導体又はその塩を提供することにより、抗酸化作用等のアスコルビン酸が元来有する優れた機能を有するとともに、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少なく、また化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こさず、さらに、該アスコルビン酸誘導体又はその塩は優れた有効性を有することを提供する。
【選択図】なし

Description

本発明は、３−Ｏ−アルキルグリセリルアスコルビン酸又はその塩に関する。本発明は、又、前記アスコルビン酸誘導体の用途に関する。本発明は更に、前記アスコルビン酸誘導体又はその塩を配合した化粧料に関する。

アスコルビン酸は水溶性ビタミンＣの一種で、抗酸化作用、メラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用など多様な生理活性を有しており、優れた化粧品素材として広く認知されている。しかし、アスコルビン酸は優れた機能を有する反面、熱や光に対して不安定であり、化粧品分野での利用が妨げられてきた。

そこで、アスコルビン酸より経時安定性が向上したものとして、種々のアスコルビン酸誘導体又はその塩が提案されており、美白用の皮膚外用剤への配合（特許文献１、特許文献２）や、化粧料への配合（特許文献３）が提案されている。

しかしながら、前記のアスコルビン酸誘導体及びその塩の多くは、経時により着色や着臭し、化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こすなどの欠点を抱えておりその改善が望まれている。

特開昭６２−２２１６１１号公報 特開２００５−６０２３９号公報 特開平１−２２８９７８号公報

本発明は、抗酸化作用等のアスコルビン酸が元来有する優れた機能を有するとともに、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少なく、また化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こさない新規なアスコルビン酸誘導体又はその塩を提供し、さらに該アスコルビン酸誘導体又はその塩の有効性について見出すことを課題とする。

本発明者らは、上記実情に鑑みて鋭意検討した結果、下記式（Ｉ）で示される新規アスコルビン酸誘導体又はその塩は抗酸化作用等のアスコルビン酸が元来有する優れた機能を有するとともに、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少なく、また化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こさず、さらに、該アスコルビン酸誘導体又はその塩は優れた有効性を有することを見出した。本発明は、これらの知見に基づき完成されたものである。

本発明は、下記一般式（Ｉ）で表わされることを特徴とするアスコルビン酸誘導体又はその塩を提供する（請求項１）

［式中、Ｒ^１は、炭素数１０〜１４の炭化水素基を表す。］

請求項２の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れたセラミド産生促進作用を有しており、セラミド産生促進剤として提供するものである。

請求項３の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた抗酸化作用を有しており、抗酸化剤として提供するものである。

請求項４の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた抗炎症作用を有しており、抗炎症剤として提供するものである。

請求項５の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた敏感肌改善作用を有しており、敏感肌改善剤として提供するものである。

請求項６の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた抗酸化物質産生促進作用を有しており、抗酸化物質産生促進剤として提供するものである。

請求項７の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた美白作用を有しており、美白剤として提供するものである。

請求項８の発明は、前記一般式（Ｉ）中の、Ｒ^１が炭素数１０〜１４の炭化水素基である請求項１に記載のアスコルビン酸誘導体又はその塩が、優れた抗シワ作用を有しており、抗シワ剤として提供するものである。

本発明のアスコルビン酸誘導体又はその塩は、有効成分として化粧料に配合することができる（請求項９）。各種化粧料への配合量は、化粧料の用途により異なり特に限定できないが、通常、０．００１〜１０質量％の範囲が好ましい。０．００１質量％未満の場合は、本発明のアスコルビン酸誘導体又はその塩が有する効果を十分に示さない場合が多い。一方、１０質量％を超える場合は、配合量に見合った効果が望めない場合が多く、また皮膚刺激を示す場合がある。

本発明のアスコルビン酸誘導体又はその塩を含有した化粧料には、この必須成分の他に、通常含まれる添加剤が含まれている。

このような添加剤として、保湿成分、セラミド、油性成分、界面活性剤（陽イオン界面活性剤・陰イオン界面活性剤・非イオン界面活性剤・両性界面活性剤）、増粘・ゲル化剤、ｐＨ調整剤、金属イオン封鎖剤、紫外線吸収剤、防腐剤、香料等を配合することができる。

保湿成分としては、例えば、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の多価アルコール、
アルギニン、セリン、グリシン、グルタミン酸等のアミノ酸、
ハマメリス水、カモミラエキス、カンゾウエキス等の植物抽出成分、
ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸、乳酸ナトリウム等の天然保湿因子系成分等を挙げることができる。

セラミドとしては、セラミド１、セラミド２、セラミド３、ラウロイルグルタミン酸ジ（フィトステリル／オクチルドデシル）、ラウロイルグルタミン酸ジ（オクチルドデシル／フィトステリル／ベヘニル）等の擬似セラミド、
グルコシルセラミド等の糖セラミドを挙げることができる。

油性成分としては、オリーブ油、ツバキ油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ローズマリー油、ヒマシ油、ホホバ油、ヒマワリ油、ナタネ油、ゴマ油、綿実油、大豆油、落花生油、茶実油、卵黄油、牛脚脂、トリグリセリン等の天然液状油、
ヤシ油、パーム油、パーム核油、牛脂、豚脂、硬化油、硬化ヒマシ油、モクロウ、シアバター等の固形油脂、
ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン等のロウ類、
流動パラフィン、スクワラン、イソパラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素油、
オクタン酸セチル等のオクタン酸エステル、ラウリン酸ヘキシル等のラウリン酸エステル、ミリスチン酸イソプロピル、ミルスチン酸オクチルドデシル等のミリスチン酸エステル、パルミチン酸オクチル等のパルミチン酸エステル、ステアリン酸イソセチル等のステアリン酸エステル、イソステアリン酸イソプロピル等のイソステアリン酸エステル、イソパルミチン酸オクチル等のイソパルミチン酸エステル、オレイン酸イソデシル等のオレイン酸エステル、アジピン酸ジイソプロピル等のアジピン酸ジエステル、セバシン酸ジエチル等のセバシン酸ジエステル、リンゴ酸ジイソステアリル、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリル、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット、コハク酸−２−エチルヘキシル、トリオクタン酸グリセリン、テトラオクタン酸ペンタエリスリット、トリイソパルミチン酸グリセリン等のエステル油、
ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、メチルハイドロジェンポリシロキサン等の鎖状シリコーン、オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサン等の環状シリコーン等のシリコーン油、
ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）等の高級脂肪酸、
ラウリルアルコール、ステアリルアルコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール等の直鎖アルコール、モノステアリルグリセリンエーテル、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロール、オクチルドデカノール等の分枝鎖アルコール等の高級アルコールを挙げることができる。

界面活性剤としては、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム等の陽イオン界面活性剤、
脂肪酸塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸塩、アルキル硫酸エステル塩、アルキルリン酸エステル塩、アシル−Ｎ−メチルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩等の陰イオン界面活性剤、
ポリオキシエチレンアルキルエーテル、多価アルコール脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、アルキルグリコシド、アルキルポリグリコシド等の非イオン界面活性剤、
アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、アルキルアミドアミノ酢酸ベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシ−Ｎ−ヒドロキシイミダゾリニウムベタイン等の両性界面活性剤等を挙げることができる。

増粘・ゲル化剤としては、アラビアガム、グアーガム、キサンタンガム、ペクチン、寒天、デンプン、コラーゲン、ゼラチン、カゼイン、アルブミン、カルボキシメチルデンプン、メチルセルロース、エチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、セルロース硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルメチルエーテル、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリエチレンアクリレート、ポリアクリルアミド、カチオンポリマー等を挙げることができる。

ｐＨ調整剤としては、クエン酸、乳酸、グリコール酸、コハク酸、酒石酸、ｄｌ−リンゴ酸、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素アンモニウム等を挙げることができる。

金属イオン封鎖剤としては、リン酸、アラニン、エデト酸ナトリウム塩、エチドロン酸等を挙げることができる。

紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸等の安息香酸系紫外線吸収剤、アントラミル酸メチル等のアントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸オクチル、サリチル酸フェニル、サリチル酸ホモメチル等のサリチル酸系紫外線吸収剤、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、パラメトキシケイ皮酸−２−エチルヘキシル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル、［４−ビス（トリメチルシロキシ）メチルシリル−３−メチルブチル］−３，４，５−トリメトキシケイ皮酸エステル等のケイ皮酸系紫外線吸収剤、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸ナトリウム等のベンゾフェノン系紫外線吸収剤、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、２−フェニル−５−メチルベンゾキサゾール、２−（２’−ヒドロキシ−５’−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシベンゾイルメタン等を挙げることができる。

防腐剤として、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、安息香酸塩、フェノキシエタノール、四級アンモニウム塩等を挙げることができる。

本発明のアスコルビン酸誘導体又はその塩を配合した化粧料に、さらに、セラミド産生促進剤、抗酸化剤、抗炎症剤、敏感肌改善剤、抗酸化物質産生促進剤、美白剤、抗シワ剤等を同時に配合することができる（請求項１０）。

前記セラミド産生促進剤としては、例えば、アセチルヒドロキシプロリン、Ｌ−カルニチン、ニコチン酸アミド、ローズマリーおよびラベンダーなどの植物抽出成分を挙げることができる。

前記抗酸化剤としては、例えば、スーパーオキシドディスムターゼ、カタラーゼ等の生体内活性酸素分解酵素、トコフェロール、アスコルビン酸等のビタミン類及びその誘導体、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、ユビキノン、ルチン、オリザノールを挙げることができる。

前記抗炎症剤としては、例えば、酸化亜鉛、イオウ及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体またはその塩、アラントイン、各種微生物および動植物抽出成分を挙げることができる。

前記敏感肌改善剤としては、例えば、フキ、知母、シラカバ、ヨモギ等の植物抽出成分や、オイゲノール配糖体、イソオイゲノール配糖体、ラズベリーケトン配糖体等からなる神経成長因子生成抑制剤を挙げることができる。

前記抗酸化物質産生促進剤としては、例えば、グルタチオン産生促進作用等を有する植物抽出成分を挙げることができる。

前記美白剤としては、例えば、トラネキサム酸及びその誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノンおよびその誘導体、エラグ酸およびその誘導体、システイン、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、シャクヤク抽出物を挙げることができる。

抗シワ剤としては、例えば、レチノイン酸等のビタミン類およびその誘導体、コラーゲン産生促進作用や真皮コラーゲン繊維束再構築作用を有する植物抽出成分を挙げることができる。

本発明のアスコルビン酸誘導体又はその塩は、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少なく、また化粧品に配合した際には乳化破壊や粘度低下を引き起こさず、さらに、該新規アスコルビン酸誘導体又はその塩は優れた有効性を有する。

次に、本発明を実施するための具体的な形態について説明するが、本発明の範囲は以下の実施形態により限定されるものではない。

製造例１ ３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸の合成
アルゴン雰囲気下、アスコルビン酸（１００ｇ）にＤＭＦ２００ｍＬ中で撹拌し、ラウリルグリシジルエーテル（１６６ｇ）を加えた後、８０℃に加温し３６時間攪拌した後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下にて濃縮を行い、得られた残渣１８２ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付した。その後、クロロホルム／メタノール／水＝１０／１／０．１混液にて溶出し、減圧下にて濃縮を行い、生成物（４５．６ｇ）を得た。

得られた生成物について、^１Ｈ−ＮＭＲ、^１３Ｃ−ＮＭＲ測定を行い、この結果より、この生成物は化２で示される３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸であることが確認された。

なお、この式においては、炭素原子、及び各炭素原子に結合する水素原子は省略されている。例えば、この式における１〜４の位置は炭素原子であり、６、７、９の位置はＣＨ_２基であり、５、８の位置はＣＨ基である。

ＮＭＲ（核磁気共鳴分光法）による分析結果は以下のとおりであった。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ, ＣＤ_３ＯＤ）：
δ ｐｐｍ ０．９０（３Ｈ，ｔ），０．９２（３Ｈ，ｔ），１．３２（１２Ｈ，ｍ），１．３９（２Ｈ，ｍ），１．４８（２Ｈ，ｍ），１．５５（２Ｈ，ｍ），３．４７（４Ｈ，ｍ），３．６６（２Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｍ），３．９１（１Ｈ，ｍ），４．００（２Ｈ，ｍ），４，１６（１Ｈ，ｍ），４．３８（１Ｈ，ｍ），４．５５（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｂｒｓ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ, ＣＤ_３ＯＤ）：
δ ｐｐｍ １４．２９，１４．４５，２０．３３，２６．５５，２６．５８，３０．４４，３０．６６，３０．６９，３４．０１，６３．０９，６３．１９，６３．３８，７０．３０，７０．３８，７０．５５，７０．６１，７０．６４，７０．６９，７０．７４，７０．８８，７１．０１，７１．０４，７２．４１，７５．２０，７５.２４，７５．３２，７６．７７，７６．７９，７６．８１，７７．０８，７７．１１，１２２．７７，１２２．８５，１２２．８８，１５９．４５，１５９．４７，１５９．５０，１９．５２，１７２．１９

試験例１ ［安定性試験］
３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸又はアスコルビン酸を１％、エタノールを２５％配合し、ｐＨを５付近に調整した水溶液を表１に示す組成で調製した。なお、表中の数値は質量％を表し、残余とは配合量を計１００重量部とするために必要な量を意味する。

調製した水溶液を５０ｍＬのスクリュー管に入れ密栓し、５０℃にて４週間保管し、ＨＰＬＣ測定（東ソー社製液体クロマトグラフィーを用いた。）を行いピーク面積より残存率を求めた。残存率及び着色度の評価を、下記の方法、基準に基づき行った。結果を表２に示す。

残存率
◎： ＞８０％
○： ６０−８０％
△： ２０−６０％
×： ＜２０％

着色
１０人のパネラーにより、次の基準で評価した。
３： 調整直後と比較しほとんど変化なし。
２： 調整直後と比較し着色する。
１： 調整直後と比較し強く着色する。
この評価に基づき、下記の様に分類した。
◎： １０人の総合点が２５以上
○： １０人の総合点が１６−２４
△： １０人の総合点が１５以下

表２の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸が、アスコルビン酸と比較して、長期間の保存でも安定で、経時により着色や着臭等が少ないことを示している。

試験例２ ［セラミド合成律速酵素（ＳＰＴ）遺伝子発現評価試験］
セラミド産生促進に関する試験として、正常ヒト表皮角化細胞を用いたセラミド合成律速酵素（ＳＰＴ）遺伝子発現の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びアスコルビン酸について行った。

試験手順
正常ヒト表皮角化細胞を５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で４８穴プレートに播種した。サンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、２４時間培養した。各ウェルに過酸化水素処理を１時間行い、新鮮培地に交換後さらに６時間培養した。細胞からＲＮＡを抽出後、リアルタイムＰＣＲ（ライフテクノロジーズ社製）を用いてセラミド合成の律速酵素（ＳＰＴ）遺伝子の発現量を測定した。

セラミド合成の律速酵素（ＳＰＴ）遺伝子発現量をＣｏｎｔｒｏｌ群と比較し（コントロールを１００％としたときの％値）、下記のように評価した。その結果を表３に示す。
○： ＞１２０％
△： １００−１２０％
×： ＜１００％

表３の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸は、アスコルビン酸と比較して、セラミド合成律速酵素（ＳＰＴ）遺伝子発現作用に優れていることを示している。

試験例３ ［細胞内抗酸化活性評価試験］
抗酸化に関する試験として、正常ヒト表皮角化細胞を用いた抗酸化活性の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びアスコルビン酸について行った。

試験手順
正常ヒト表皮角化細胞を２×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で９６穴プレートに播種した。サンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、２４時間培養した。各ウェルに蛍光試薬である蛍光試薬（２，７−Ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎ ｄｉａｃｅｔａｔｅ）を添加し、３０分間反応させた。その後、過酸化水素処理を２時間行い、蛍光強度（励起波長：４８５ｎｍ、測定波長：５３０ｎｍ）を測定した。

蛍光強度をＣｏｎｔｒｏｌ群と比較し（コントロールを１００％としたときの％値）、下記のように評価した。その結果を表４に示す。
◎： ＜５０％
○： ５０−８０％
△： ８０−１００％
×： ＞１００％

表４の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸が、アスコルビン酸より優れた細胞内抗酸化活性を有していることを示している。

試験例４ ［抗炎症試験］
抗炎症に関する試験として、表５に示す３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸配合クリームを１日朝晩２回、顔面頬部に８週間連用した際の外観の評価を、下記の方法、基準に基づき行った。

１０人のパネラーにより、次の基準で評価した。
３： 連用前と比較し赤みが改善されている。
２： 連用前と比較し赤みに変化はない。
１： 連用前と比較し赤みが悪化している。
この評価に基づき、下記の様に分類した。その結果を表６に示す。
○： １０人の総合点が２５以上
△： １０人の総合点が１６−２４
×： １０人の総合点が１５以下

表６の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸が、優れた抗炎症効果を有していることを示している。

試験例５ ［敏感肌改善試験］
敏感肌改善に関する試験として、正常ヒト皮膚繊維芽細胞を用いた神経成長因子（ＮＧＦ）の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びアスコルビン酸について行った。

試験手順
正常ヒト表皮角化細胞を５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で４８穴プレートに播種した。サンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、２４時間培養した。過酸化水素処理を１時間行い、新鮮培地に交換後さらに６時間培養した。細胞からＲＮＡを抽出後、リアルタイムＰＣＲ（ライフテクノロジーズ社製）を用いてＮＧＦ遺伝子量を測定した。

神経成長因子（ＮＧＦ）のｍＲＮＡ発現量をＣｏｎｔｒｏｌ群と比較し（コントロールを１００％としたときの％値）、下記のように評価した。その結果を表７に示す。
◎： ＜５０％
○： ５０−８０％
△： ８０−１００％
×： ＞１００％

表７の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸は、アスコルビン酸と比較して、神経成長因子（ＮＧＦ）生成抑制作用を有しており、敏感肌改善に優れていることを示している。

試験例６ ［グルタチオン（ＧＳＨ）産生促進作用評価試験］
抗酸化物質産生促進に関する試験として、正常ヒト表皮角化細胞を用いたグルタチオン（ＧＳＨ）産生促進の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びアスコルビン酸について行った。

試験手順
正常ヒト表皮角化細胞を５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で４８穴プレートに播種した。サンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、２４時間培養した。細胞を溶解後、細胞中のＧＳＨ量をＤＴＮＢ−酵素サイクリング法によって測定した。

グルタチオン（ＧＳＨ）量をＣｏｎｔｒｏｌ群と比較し（コントロールを１００％としたときの％値）、下記のように評価した。その結果を表８に示す。
○： ＞１２０％
△： １００−１２０％
×： ＜１００％

表８の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸は、アスコルビン酸と比較して、グルタチオン（ＧＳＨ）産生促進作用を有しており、抗酸化物質産生促進に優れていることを示している。

試験例７ ［コラーゲン産生評価試験］
抗シワに関する試験として、正常ヒト皮膚繊維芽細胞を用いたコラーゲン産生促進作用の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸およびアスコルビン酸について行った。

試験手順
正常ヒト皮膚繊維芽細胞を、２．５×１０^４ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で９６穴プレートに播種した。サンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、７日間培養した。その後、遊離コラーゲン量をＳｉｒｃｏｌ ｃｏｌｌａｇｅｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｂｉｏｃｏｌｏｒ社製）を用いて測定した。

コラーゲン産生量をＣｏｎｔｒｏｌ群と比較し（コントロールを１００％としたときの％値）、下記のように評価した。その結果を表９に示す。
◎： ＞２００％
○： １５０−２００％
△： １００−１５０％
×： ＜１００％

表９の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸が、コラーゲン産生促進料として優れるアスコルビン酸と同等の、コラーゲン産生促進作用を有していることを示している。

試験例８ ［メラニン産生抑制試験］
美白効果の試験として、Ｂ１６メラノーマ４Ａ５細胞のテオフィリン誘発メラニン産生に対する作用の評価を、下記の手順により、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸およびアスコルビン酸について行った。結果を表１０に示す。

試験手順
Ｂ１６マウス メラノーマ４Ａ５株を、２．０×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で４８穴プレートに播種した。２４時間培養後、テオフィリン及びサンプルを添加し（サンプルを添加していないものをコントロールとした）、３日間培養した。細胞を破砕後、タンパク量を、ＢＣＡ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（ＰＩＥＲＣＥ社製）を用いて定量し、又、メラニンの生成量を、アルカリ可溶化法にて測定した。細胞破砕液に終濃度２ｍｏｌ／Ｌとなるように水酸化ナトリウムを添加して加熱溶解（６０℃、１５分）後、マイクロプレートリーダーを用いて４５０ｎｍの吸光度を測定した。メラニン量は、合成メラニン（ＳＩＧＭＡ）を標準品として作成した検量線から算出した。タンパク量でメラニン量を除することにより単位タンパクあたりのメラニン量を算出した。

メラニン生成抑制率を下記のように表記した。なお、測定はＮ＝４で行った。
◎： ７０−１００％
○： ４０−７０％
△： ２０−４０％
×： ＜２０％

表１０の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸が、アスコルビン酸より優れたメラニン産生抑制作用を有していることを示している。

試験例９ ［クリーム］
３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸およびアスコルビン酸を１％、界面活性剤を５％配合し、ｐＨを５付近に調整したクリームを表１１に示した組成で調製した。なお、表中の数値は質量％を表し、残余とは配合量を計１００重量部とするために必要な量を意味する。

調製したクリームの直後及び５０℃で２４時間保存した際の外観の評価を、下記の方法、基準に基づき行った。

外観
１０人のパネラーにより、次の基準で評価した。
３： 均一な層となっている。
２： 水又は油の粒が確認される。
１： 二層に分離している。
この評価に基づき、下記の様に分類した。その結果を表１２に示す。
○： １０人の総合点が２５以上
△： １０人の総合点が１６−２４
×： １０人の総合点が１５以下

表１２の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸は、アスコルビン酸と比較して、乳化破壊を引き起こしにくいことを示している。

試験例１０ ジェル
３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸およびアスコルビン酸を１％、カルボキシビニルポリマーを１％配合し、ｐＨを５付近に調整したジェルを表１３に示した組成で調製した。なお、表中の数値は質量％を表し、残余とは配合量を計１００重量部とするために必要な量を意味する。

調製したジェルの直後及び５０℃で２４時間保存した際の外観の評価を、下記の方法、基準に基づき行った。

外観
１０人のパネラーにより、次の基準で評価した。
３： ヨーグルト状となっている。
２： ヨーグルト状ではあるが、流動性がある。
１： 液体状である。
この評価に基づき、下記の様に分類した。その結果を表１４に示す。
○： １０人の総合点が２５以上
△： １０人の総合点が１６−２４
×： １０人の総合点が１５以下

表１４の結果は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸は、アスコルビン酸と比較して、ジェル製剤の粘度低下を引き起こしにくいことを示している。

試験例１１ ［化粧水］
表１５に示す（１）〜（８）の原料を、よく撹拌しながら混合することにより化粧水を調製することができる。この化粧水は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びローズマリーエキスを配合しているので、セラミド産生促進効果に優れた化粧料に好適であると考えられる。

試験例１２ ［クリーム］
表１６に示す（１）〜（１０）の油相部及び（１１）〜（１２）の水相部をそれぞれ７０℃に加温溶解する。水相部に油相部を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よく撹拌しながら室温まで冷却することにより、クリームを調製することができる。このクリームは、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びトコフェロールを配合しているので、抗酸化効果に優れた化粧料に好適であると考えられる。

試験例１３ ［乳液］
表１７に示す（１）〜（７）の油相部及び（８）〜（１５）の水相部をそれぞれ７０℃に加温溶解する。水相部に油相部を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よく撹拌しながら室温まで冷却することにより、乳液を調製することができる。この乳液は、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びグリチルリチン酸を配合しているので、抗酸化効果に優れた化粧料に好適であると考えられる。

試験例１４ ［ジェル］
表１８に示す（１）〜（１０）の原料を、よく撹拌しながら混合することによりジェルを調製することができる。このジェルは、３−Ｏ−ラウリルグリセリルアスコルビン酸及びコウジ酸を配合しているので、美白効果に優れた化粧料に好適であると考えられる。

Claims (10)

1. 下記の一般式（Ｉ）で表わされるアスコルビン酸誘導体及びその塩。
   ［式中、Ｒ^１は、炭素数１０〜１４の炭化水素基を表す。］
2. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とするセラミド産生促進剤。
3. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする抗酸化剤。
4. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする抗炎症剤。
5. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする敏感肌改善剤。
6. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする抗酸化物質産生促進剤。
7. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする美白剤。
8. 請求項１で表わされるアスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分とする抗シワ剤。
9. 請求項２〜８のいずれか１項に記載の有効成分を０．００１〜１０質量％配合することを特徴とする皮膚外用剤又は化粧料。
10. 前記皮膚外用剤及び化粧料に、さらに、セラミド産生促進剤、抗酸化剤、抗炎症剤、敏感肌改善剤、抗酸化物質産生促進剤、美白剤、抗シワ剤から選ばれる１種以上を配合することを特徴とする請求項９記載の化粧料。