JP2016519579A - 細胞、羊水回収及び細胞の単離のための方法及び機器 - Google Patents
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Abstract
Description
本願で提供されるある実施形態の次の記載において、参照は、本願の一部分を形成する図表に伴って作成され、これは、本願発明が実施され得る特別な実施形態の実例の方法によって表される。他の実施形態は、使用されることができ得、構造的な変更は、本発明の要旨を逸脱しないでなされ得るものと理解されるべきものである。
A.定義
B.羊水回収装置
C.羊水の回収、並びに、細胞の単離、培養、再プログラミング及び分化
妊娠の後期または臨月での羊水の回収
羊水回収
羊水由来細胞の単離、培養、二次培養、再プログラミング、及び分化
D.羊水由来の胎児細胞及び幼児細胞
E.細胞の使用
実施例1:羊水細胞の単離
実施例2:デノボ(de-novo)立体配位状態を保持する羊水サーファクタント分画の単離
実施例3:臨月羊水から細胞の単離
表1 細胞表面マーカーの発現
実施例4:羊水由来細胞の二次培養および拡大
実施例5:羊水由来細胞の多能性状態への再プログラミングおよび心筋細胞への分化
実施例6:臨月羊水からの細胞の単離
実施例7:羊水由来細胞の二次培養および拡大
実施例8:羊水由来幹細胞の特性化
実施例9:臨月羊水幹細胞の再プログラミング
実施例10:臨月AFSC由来iPS細胞株の分化可能性
Claims (57)
- 回収チャンバと、
該回収チャンバに接続する回収チャンバアウトレットバルブと、
該回収チャンバに接続する回収チャンバインレットバルブと、
該回収チャンバインレットバルブに接続する近位液体抽出チューブ、該近位液体抽出チューブは医薬品等級の材料を含む、と、
該近位液体抽出チューブに接続する遠位液体抽出チューブ、該遠位液体抽出チューブは移送部位及びインレットを含む、と
を含む羊水回収装置であって、
該インレットは、主インレット、貫通する先端、及び1つ以上の側面インレットを含む羊水回収装置。 - CD73及びCD90からなる群より選択されるマーカーの表面発現を含む単離された胎児細胞又は幼児細胞であって、
該細胞の表面が、CD105発現に関して陰性であり、又は
該細胞の表面が、CD34を発現する
ことを特徴とする単離された胎児細胞又は幼児細胞。 - 請求項2に記載の単離された細胞であって、該細胞がCD73及びCD90の表面発現を含むことを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2又は3に記載の単離された細胞であって、該細胞表面が、CD105発現に関して陰性であり、かつCD34を発現することを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜4の何れか1項に記載の単離された細胞であって、該細胞が、転写因子Oct−4を発現することを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜5の何れか1項に記載の単離された細胞であって、該細胞表面が、CD45表面発現に関して陰性であることを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜6の何れか1項に記載の単離された細胞であって、該細胞が接着性であることを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜7の何れか1項に記載の単離された細胞であって、該細胞が、繊維芽細胞様形態を有することを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜8の何れか1項に記載の単離された細胞であって、該細胞が、多能性(pluripotent)であるか又はマルチ多能性(multipotent)であることを特徴とする単離された細胞。
- 請求項2〜9の何れか1項に記載の単離された細胞であって、
該細胞が、連続培養において、少なくとも50日間成長することが可能であり、又は、
該細胞が、培養において、少なくとも30回の集団倍化で増殖をすることが可能であり、又は、
該細胞が、連続培養において、少なくとも1,000,000倍に拡張することが可能であることを特徴とする単離された細胞。 - 請求項2〜10の何れかに記載の胎児細胞又は幼児細胞を含む組成物。
- 複数の胎児細胞又は幼児細胞を含む組成物であって、少なくとも10%の細胞が、CD90、CD73、及びCD34の表面発現を有し、そして、
5%未満の細胞が、CD105の表面発現を有することを特徴とする組成物。 - 請求項12に記載の組成物であって、少なくとも50%の細胞が、転写因子Oct−4を発現することを特徴とする組成物。
- 請求項12又は13に記載の組成物であって、5%未満の細胞が、CD45表面発現を有することを特徴とする組成物。
- 請求項12〜14の何れか1項に記載の組成物であって、少なくとも50%の細胞が接着性であることを特徴とする組成物。
- 請求項12〜15の何れか1項に記載の組成物であって、少なくとも50%の細胞が繊維芽細胞様形態を有することを特徴とする組成物。
- 請求項12〜16の何れか1項に記載の組成物であって、少なくとも50%の細胞が多能性(pluripotent)であるか又はマルチ多能性(multipotent)であることを特徴とする組成物。
- 請求項12〜14の何れか1項に記載の組成物であって、
少なくとも50%の細胞が、連続培養において、少なくとも50日間成長することが可能であり、又は、
複数の細胞が、培養において、少なくとも30回の集団倍化で増殖をすることが可能であり、又は、
複数の細胞が、連続培養において、少なくとも1,000,000倍に拡張することが可能であることを特徴とする組成物。 - 請求項11〜18の何れか1項に記載の組成物であって、羊水を更に含むことを特徴とする組成物。
- 請求項19に記載の組成物であって、該細胞が、1リッター当たり、少なくとも100万の細胞濃度で存在することを特徴とする組成物。
- 胎児細胞又は幼児細胞を単離する方法であって、(a)羊水を、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、又は39週より長い妊娠段階で獲得すること、及び
(b)該羊水から胎児細胞又は幼児細胞を回収すること、
を含む方法。 - 請求項21に記載の方法であって、ステップ(a)における獲得が、帝王切開によって羊水を回収することを含むことを特徴とする方法。
- 請求項21又は22に記載の方法であって、ステップ(b)における回収が、該羊水から粒状物質を除くことを含むことを特徴とする方法。
- 請求項23に記載の方法であって、ステップ(b)における回収が、勾配遠心分離を行うことを更に含むことを特徴とする方法。
- 請求項21〜24の何れか1項に記載の方法であって、回収された細胞を、細胞が増殖する条件下で培養することを更に含むことを特徴とする方法。
- 請求項21〜25の何れか1項に記載の方法であって、ステップ(b)において回収された細胞が、ステップ(a)において獲得された羊水1リッター当たり少なくとも100万の細胞を含むことを特徴とする方法。
- 請求項21〜26の何れか1項に記載の方法であって、ステップ(a)において獲得された羊水の量が、少なくとも又はおよそ、10mL、20mL、30mL、40mL、50mL、60mL、70mL、80mL、90mL、100mL、200mL、300mL、400mL、500mL、600mL、700mL、800mL、900mL、又は1000mLであることを特徴とする方法。
- 請求項21〜27の何れか1項に記載の方法であって、当該羊水が臨月の羊水であることを特徴とする方法。
- 請求項21〜28の何れか1項に記載の方法であって、当該胎児細胞又は幼児細胞が、請求項2〜10の何れかに記載の細胞を含むことを特徴とする方法。
- 請求項21〜28の何れか1項に記載の方法であって、該胎児細胞又は幼児細胞が、CD73及びCD90からなる群より選択されるマーカーの表面発現に関して陽性である細胞を含み、該細胞が、CD105発現の表面発現に関して陰性であり、又はCD34の表面発現に関して陽性であることを特徴とする方法。
- 請求項30に記載の方法であって、該細胞が、CD73及びCD90の表面発現に関して陽性であることを特徴とする方法。
- 請求項30又は31に記載の方法であって、該細胞が、CD105の表面発現に関して陰性であり、かつCD34の表面発現に関して陽性であることを特徴とする方法。
- 請求項30〜32の何れか1項に記載の方法であって、該細胞が、転写因子Oct−4を発現することを特徴とする方法。
- 請求項30〜33の何れか1項に記載の方法であって、該細胞が、CD45表面発現に関して陰性であることを特徴とする方法。
- 請求項30〜34の何れか1項に記載の方法であって、該細胞が接着性であることを特徴とする方法。
- 請求項30〜35の何れか1項に記載の方法であって、該細胞が繊維芽細胞様形態を有することを特徴とする方法。
- 請求項30〜36の何れか1項に記載の方法であって、該細胞が、多能性(pluripotent)であるか又はマルチ多能性(multipotent)であることを特徴とする方法。
- 請求項30〜37の何れか1項に記載の方法であって、
該細胞が、連続培養において、少なくとも50日間成長することが可能であり、又は、
該細胞が、培養において、少なくとも30回の集団倍化で増殖をすることが可能であり、又は、
該細胞が、連続培養において、少なくとも1,000,000倍に拡張することが可能であることを特徴とする方法。 - 請求項21〜38の何れか1項に記載の方法であって、該方法が、回収された細胞を再プログラミングすることを更に含み、それにより、マルチ多能性(multipotent)であるか又は多能性(pluripotent)である細胞を生ずることを特徴とする方法。
- 請求項39に記載の方法であって、該再プログラミングが、iPSCを行うことを含むことを特徴とする方法。
- 請求項21〜40の何れか1項に記載の方法であって、該方法が、該細胞を所望の細胞又は組織タイプに分化させることを更に含むことを特徴とする方法。
- 請求項41の方法であって、該所望の細胞又は組織タイプが、造血細胞、神経細胞、内胚葉細胞、外胚葉細胞、及び中胚葉細胞からなる群より選択されることを特徴とする方法。
- 請求項11〜18の何れかに記載の組成物を患者に投与することを含む処置の方法。
- 細胞を預けるための方法であって、
(a)一以上のサンプルを獲得すること、そのそれぞれは、請求項2〜10の何れかに記載の細胞を含み、
(b)該サンプルを、サンプル中の少なくともいくつかの細胞の生存性を保つ状態下で保存すること、及び、
(c)該サンプルが獲得された対象のアイデンティティに関するデータを保存すること
を含むことを特徴とする方法。 - 請求項44に記載の方法であって、該保存が、該サンプルを1以上の凍結防止剤で処置することを含むことを特徴とする方法。
- 請求項44又は45に記載の方法であって、ステップ(a)が、複数のサンプルを獲得することを含み、そのそれぞれが、異なった対象から獲得されることを特徴とする方法。
- (a)複数のサンプル、そのそれぞれが、請求項2〜10の何れかに記載の細胞又は請求項11〜20の何れかに記載の組成物を含み、及び、
(b)該サンプルの個々の識別及び回収(retrieval)に関するデータを含むデータベース
を含む細胞バンク。 - 請求項47に記載の細胞バンクであって、複数のサンプルのそれぞれが、個々の対象由来であることを特徴とする細胞バンク。
- 請求項47又は48に記載の細胞バンクであって、該データが、個々のサンプルが由来した対象のアイデンティティのついての情報を含むことを特徴とする細胞バンク。
- (a)対象の子宮壁における切り口を介して羊水回収装置を挿入すること、
(b)該対象の羊膜を貫通すること、及び
(c)該対象の羊膜嚢から羊水を回収することを含む、羊水を回収する方法であって、該対象が、少なくとも妊娠30週の段階の妊婦であることを特徴とする方法。 - 請求項50に記載の方法であって、該対象が、妊娠の臨月段階であることを特徴とする方法。
- 請求項50又は51に記載の方法であって、該羊水回収装置は、請求項1に記載の装置であることを特徴とする方法。
- 請求項50〜52の何れか1項に記載の方法であって、ステップ(b)が、慢性膜(chronic menbrane)[絨毛膜、chorionic membraneの誤記]を貫通することを更に含むことを特徴とする方法。
- 請求項50〜53の何れか1項に記載の方法であって、ステップ(c)の回収が、
(i)羊水回収装置のインレットバルブを開口することによって羊水を該羊水回収装置の回収チャンバに移送するためにサイホンを開始すること、
(ii)該羊水回収装置のインレットの下に該羊水回収装置の回収チャンバを配置させること、
(iii)負圧ソースを該羊水回収装置のアウトレットに接続し該羊水の移送を開始させること、そして、
(iv)該羊水回収装置のインレットを再配置させ、実質的に全ての利用できる羊水を回収すること、の1つ以上を含むことを特徴とする方法。 - 請求項50〜54の何れか1項に記載の方法であって、該羊水回収装置を取り除くステップ(d)を更に含むことを特徴とする方法。
- 請求項50〜55の何れか1項に記載の方法であって、切り口が、該羊水回収装置により作られることを特徴とする方法。
- 請求項50〜56の何れか1項に記載の方法であって、該方法が約10分、約9分、約8分、約7分、約6分、約5分、約4分、約3分、約2分、又は約1分未満で行われることを特徴とする方法。
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