JP2016214210A - 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート - Google Patents
細胞培養担体及びこれを備える細胞シート Download PDFInfo
- Publication number
- JP2016214210A JP2016214210A JP2015106567A JP2015106567A JP2016214210A JP 2016214210 A JP2016214210 A JP 2016214210A JP 2015106567 A JP2015106567 A JP 2015106567A JP 2015106567 A JP2015106567 A JP 2015106567A JP 2016214210 A JP2016214210 A JP 2016214210A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell culture
- resin film
- cells
- porous resin
- culture carrier
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
【解決手段】本発明の一態様に係る細胞培養担体は、多孔質樹脂膜を備える細胞培養担体であって、上記多孔質樹脂膜が、複数のノードとこれらのノード間の少なくとも一部を接続する多数のフィブリルとを有し、上記フィブリルの数密度が、0.01本/μm2以下である。上記多孔質樹脂膜の表面粗さRaとしては、1.1μm以上が好ましい。ノードの平均間隔としては、1μm以上100μm以下が好ましい。多孔質樹脂膜の主ポリマーとしては、フッ素樹脂が好ましく、ポリテトラフルオロエチレンが特に好ましい。本発明の一態様に係る細胞シートは、細胞培養担体とこの細胞培養担体上で培養された細胞とを備える。
【選択図】図1
Description
本発明の一態様に係る細胞培養担体は、多孔質樹脂膜を備える細胞培養担体であって、上記多孔質樹脂膜が、複数のノード(結節)と、これらのノード間に接続する多数のフィブリルとを有し、上記多孔質樹脂膜の最表面に存在するフィブリルの数密度が、0.01本/μm2以下である。
以下、本発明の実施形態に係る細胞培養担体及び細胞シートについて、図面を参照しつつ説明する。
図1に示す細胞培養担体1は、多孔質樹脂膜2を備える。
複数のノード3は、それぞれ棒状である。ここで、棒状とは、多孔質樹脂膜2を平面視した状態において、幅(Wn)よりも長さ(Ln)が長い形状であることをいい、柱状であってもよいし、偏平した帯状であってもよい。また、棒状とは、直線状であっても曲線状であってもよい。ノード3の幅(Wn)に対する長さ(Ln)の比(Ln/Wn)の下限としては、例えば3であり、5が好ましく、10がより好ましい。この比(Ln/Wn)の上限としては、特に制限されないが、例えば500であり、100が好ましく、30がより好ましい。
多数のフィブリル4は、線状であり、ノード3同士を連結している。フィブリル4は、所定方向に沿って配設されている。具体的なフィブリル4の配設方向は、複数のノード3の配設方向(軸方向)と平面視で略垂直方向(図1において略上下方向)である。ここで配設方向が略垂直方向とは、例えば複数のフィブリル4の少なくとも70%が±30°内の範囲で垂直方向に配設していることをいい、少なくとも70%が±10°内の範囲で垂直方向に配向していることが好ましい。
多孔質樹脂膜2の表面粗さRaの下限としては、1.1μmが好ましく、4.5μmがより好ましい。多孔質樹脂膜2の表面をこのように粗い面とすることにより、細胞の接着性をさらに高め、細胞をより効率的に培養することができる。なお、多孔質樹脂膜2の表面粗さRaの上限としては、特に限定されないが、例えば20μmとすることができ、10μmが好ましい。
多孔質樹脂膜2の主ポリマー(多孔質樹脂膜2の形成樹脂)としては特に限定されず、フッ素樹脂、シリコーン樹脂、ポリカーボネート、ポリオレフィン、ナイロン、ポリイミド、ポリアミドイミド、ポリアミド、液晶ポリマー、生分解性ポリマー等が挙げられるが、フッ素樹脂が好ましい。フッ素樹脂を主ポリマーとすることにより、多孔質樹脂膜2の耐久性等を高めることができる。なお、主ポリマーとは質量基準で最も含有量が多いポリマー(樹脂)をいう。多孔質樹脂膜2中の主ポリマーの含有量の下限としては、例えば50質量%であり、90質量%が好ましい。
多孔質樹脂膜2における多孔質構造を形成する方法としては、造孔法、相分離法、溶媒抽出法、レーザー照射法、エッチング等を挙げることができる。これらの中でも、均一な孔径分布の多孔質樹脂膜2を得ることができるなどの点から延伸法が好ましい。
多孔質樹脂膜2は、表面(ノード3及びフィブリル4の表面)が親水化処理されていることが好ましい。親水化処理されていることにより、細胞培養液の浸透性が高まり、ひいては培養効率が高まる。親水化処理は、通常、親水性樹脂溶液を多孔質樹脂膜2に含浸させ、次いで親水性樹脂を架橋させることにより行われる。これにより、親水性樹脂が多孔質樹脂膜表面にコーティングされる。なお、親水性樹脂溶液の含浸は、浸漬や塗布等により行うことができる。
細胞培養担体1は、細胞培養において細胞が接着する担体として用いられる。細胞(通常、接着細胞)は、多孔質樹脂膜2の主にノード3に接着し、伸長、増殖する。培養方法は、特に限定されず公知の方法により行えばよい。
本発明の一態様に係る細胞シートは、細胞培養担体と、この細胞培養担体上で培養された細胞とを備える。細胞培養担体は、上述した図1の細胞培養担体1が用いられる。培養された細胞(培養されている細胞)としては、上記の細胞培養担体の使用方法において例示したものを挙げることができる。細胞は、細胞培養担体の外面に接着しており、好ましくは膜状に略均等に接着している。なお、細胞の少なくとも一部は、通常、細胞培養担体のノードに絡みつくように接着している。
今回開示された実施の形態は全ての点で例示であって制限的なものでないと考えられるべきである。本発明の範囲は、上記実施形態の構成に限定されるものではなく、特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味及び範囲内での全ての変更が含まれることが意図される。
まず、公知の方法で培養されたiPS細胞由来の心筋細胞のコロニーを単一細胞に分散させた。分散させた心筋細胞をmTeSR1培養液に懸濁させ、この心筋細胞を膜C及び膜C’にそれぞれ播種した。2週間後の細胞の接着状態を観察した。なお、mTeSR1培養液は毎日交換した。培養開始から後の培養細胞の写真を図5〜図6に示す。図5は膜Cの2週間後の状態、図6は膜C’の2週間後の状態である。なお、いずれも膜に対してラミニンをコーティングして行った。
2 多孔質樹脂膜
3 ノード
4 フィブリル
Claims (7)
- 多孔質樹脂膜を備える細胞培養担体であって、
上記多孔質樹脂膜が、複数のノードと、これらのノード間の少なくとも一部を接続する多数のフィブリルとを有し、
上記多孔質樹脂膜の最表面に存在するフィブリルの数密度が、0.01本/μm2以下である細胞培養担体。 - 上記多孔質樹脂膜の表面粗さRaが、1.1μm以上である請求項1の細胞培養担体。
- 上記ノードの平均間隔が、1μm以上100μm以下である請求項1又は請求項2に記載の細胞培養担体。
- 上記多孔質樹脂膜の主ポリマーが、フッ素樹脂である請求項1、請求項2又は請求項3に記載の細胞培養担体。
- 上記フッ素樹脂が、ポリテトラフルオロエチレンである請求項4に記載の細胞培養担体。
- 上記多孔質樹脂膜が、樹脂フィルムの延伸及び焼成により形成されている請求項4又は請求項5に記載の細胞培養担体。
- 請求項1から請求項6のいずれか1項に記載の細胞培養担体と、
この細胞培養担体上で培養された細胞と
を備える細胞シート。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015106567A JP6671865B2 (ja) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015106567A JP6671865B2 (ja) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016214210A true JP2016214210A (ja) | 2016-12-22 |
JP6671865B2 JP6671865B2 (ja) | 2020-03-25 |
Family
ID=57577642
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015106567A Active JP6671865B2 (ja) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6671865B2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021006242A1 (ja) | 2019-07-05 | 2021-01-14 | 学校法人近畿大学 | 細胞培養足場、その製造方法と足場製造キット及び細胞培養物の作製方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05237141A (ja) * | 1992-02-27 | 1993-09-17 | Jinkou Ketsukan Gijutsu Kenkyu Center:Kk | 人工血管およびその製造方法 |
JP2008306977A (ja) * | 2007-06-14 | 2008-12-25 | Nitto Denko Corp | 細胞培養基材 |
-
2015
- 2015-05-26 JP JP2015106567A patent/JP6671865B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05237141A (ja) * | 1992-02-27 | 1993-09-17 | Jinkou Ketsukan Gijutsu Kenkyu Center:Kk | 人工血管およびその製造方法 |
JP2008306977A (ja) * | 2007-06-14 | 2008-12-25 | Nitto Denko Corp | 細胞培養基材 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
APPLIED SURFACE SCIENCE, vol. 314, JPN6018040256, 2014, pages 670 - 678, ISSN: 0003897164 * |
BIOMATERIALS, vol. 12, JPN6018040253, 1991, pages 130 - 138, ISSN: 0003897163 * |
NEW. ENGL. BIOENG. CONF., vol. 6, JPN6018040252, 1978, pages 313 - 316, ISSN: 0003897162 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021006242A1 (ja) | 2019-07-05 | 2021-01-14 | 学校法人近畿大学 | 細胞培養足場、その製造方法と足場製造キット及び細胞培養物の作製方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6671865B2 (ja) | 2020-03-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kim et al. | Highly porous 3D nanofiber scaffold using an electrospinning technique | |
Akkineni et al. | A versatile method for combining different biopolymers in a core/shell fashion by 3D plotting to achieve mechanically robust constructs | |
US10350329B2 (en) | Graphene-based ink compositions for three-dimensional printing applications | |
JP2022103203A (ja) | 構造スペーサを有する細胞カプセル化デバイス | |
CN106730026B (zh) | 一种组织工程软骨复合支架及制备方法 | |
US11813377B2 (en) | Microfiber structures and methods of synthesis and use thereof | |
US9242024B2 (en) | Three-dimensional nanofiber scaffold for tissue repair and preparation method thereof | |
US10369252B2 (en) | Electrospun three-dimensional nanofibrous scaffolds with interconnected and hierarchically structured pores | |
Ko et al. | Preparation of novel collagen sponges using an ice particulate template | |
Gang et al. | Highly porous three-dimensional poly (lactide-co-glycolide)(PLGA) microfibrous scaffold prepared by electrospinning method: A comparison study with other PLGA type scaffolds on its biological evaluation | |
JP6602047B2 (ja) | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート | |
KR20130120572A (ko) | 세포가 포함된 다공성 3차원 구조체 및 이의 제조방법 | |
JP6671865B2 (ja) | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート | |
Ginestra et al. | Hybrid multi-layered scaffolds produced via grain extrusion and electrospinning for 3D cell culture tests | |
JP6530638B2 (ja) | 細胞培養担体及びこれを備える細胞シート | |
Zhou et al. | Generation of 3D nanofiber structure by divergence electrospinning for tissue engineering scaffold | |
US7534610B1 (en) | 3D tissue constructs on the basis of colloidal crystals surface modified by sequential layering | |
JP4437227B2 (ja) | 人工血管 | |
KR101723193B1 (ko) | 전기방사를 이용한 수화젤 스캐폴드의 제조방법 및 이에 의해 제조된 수화젤 스캐폴드 | |
KR20110128990A (ko) | 폴리비닐알코올 및 젤라틴을 함유하는 생체 적합성 섬유 복합체 및 그 제조 방법 | |
KR101449645B1 (ko) | 두께 조절이 가능한 다공성 전기방사 섬유, 이의 제조방법 및 이를 이용한 4차원 조직재생용 지지체 | |
WO2013071062A1 (en) | Multilayered collagen tubular scaffold | |
KR20160133061A (ko) | 수용성 고분자를 이용한 세포 배양 지지체 | |
JP7371929B2 (ja) | 細胞足場材料 | |
Mo et al. | PCL-PGLA composite tubular scaffold preparation and biocompatibility investigation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20171122 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20171122 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171129 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20180912 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181016 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181211 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190521 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190712 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200204 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200303 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200304 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6671865 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |