JP2016056116A - Composition for promoting collagen production - Google Patents

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充 荒川
Mitsuru Arakawa
充 荒川
和真 荻原
Kazuma Ogiwara
和真 荻原
健太郎 内藤
Kentaro Naito
健太郎 内藤
正彦 旭
Masahiko Asahi
正彦 旭
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a composition having a significant collagen production promoting ability by searching for a component involved in collagen production promotion.SOLUTION: The invention provides a collagen production-promoting composition containing (A) one or more kinds selected from the group consisting of berberine, berberine analogs, and their salts, as well as a plant extract containing berberine, in order to promote secretion of collagen from inside to outside out of cells, and (B) a collagen synthesis promoter for promoting synthesis of collagen within cells.SELECTED DRAWING: None

Description

本発明は、皮膚外用剤、飲食品、医薬品等に好適なコラーゲン産生促進用組成物に関する。   The present invention relates to a composition for promoting collagen production that is suitable for external preparations for skin, foods and drinks, pharmaceuticals, and the like.

コラーゲンは、真皮、骨、軟骨、腱などを構成する主要なタンパク質であり、ヒトの体の総タンパク質量の約30%を占める。コラーゲンは、結合組織の主な構造成分であり、実質臓器の間質組織中でみられ、臓器や組織の形態維持に関与している。加えて、コラーゲンは、接する細胞に対して、増殖、分化シグナルを与える、情報伝達の働きも担っていることがわかってきている。コラーゲンはこのような機能を持つことから、老化等によりコラーゲンが減少することで、生体に不調をきたすことがある。例えば、角膜障害、関節障害、炎症性疾患等である。   Collagen is a major protein constituting dermis, bone, cartilage, tendon, etc., and occupies about 30% of the total protein content of the human body. Collagen is the main structural component of connective tissue, is found in the interstitial tissue of the parenchymal organ, and is involved in maintaining the morphology of the organ and tissue. In addition, it has been found that collagen plays a role in information transmission that gives proliferation and differentiation signals to cells in contact. Since collagen has such a function, it may cause a malfunction in the living body due to a decrease in collagen due to aging or the like. For example, corneal disorders, joint disorders, inflammatory diseases and the like.

また、皮膚においては、皮膚乾燥重量の約70%がコラーゲンであり、真皮中でコラーゲン細線維が集まり束となって、コラーゲン線維束を形成している。これを網目状に張り巡らせることで組織形態を維持している。また、コラーゲンは水分保持機能に優れていることが知られている。これらの機能を持つコラーゲンは、皮膚の弾力性や強度に大きく寄与している。多くの若年者の皮膚に適度なハリがあるのはこのためである。しかし、老年者の皮膚にはハリがなく、シワやタルミが多く見られる。これは自然老化や光老化等により、コラーゲンが減少していくことが一因と考えられている。   In the skin, about 70% of the dry weight of the skin is collagen, and collagen fibers are gathered and bundled in the dermis to form a collagen fiber bundle. The organization form is maintained by stretching this in a mesh shape. Moreover, it is known that collagen is excellent in moisture retention function. Collagen having these functions greatly contributes to the elasticity and strength of the skin. This is why many young people have moderate elasticity on their skin. However, the skin of the elderly has no firmness and many wrinkles and tarmi are seen. This is thought to be due to a decrease in collagen due to natural aging, photoaging, and the like.

上記のようなコラーゲンの減少による生体現象を改善するために、コラーゲン産生促進物質の開発が進められており、これまでに、種々のコラーゲン産生促進物質が見いだされている。例えば、レチノイン酸(非特許文献1)、グリシン及びプロリン及びアラニンからなる3種アミノ酸(特許文献1)、カンゾウ、ソウハクヒ、アロエ、スギナ、キンギンカ、オウバク、ガイヨウ又はゲンチアナ等の植物抽出物(特許文献2)、TGF−β、アスコルビン酸類などが知られている。   In order to improve the biological phenomenon due to the decrease in collagen as described above, development of collagen production promoting substances has been promoted, and various collagen production promoting substances have been found so far. For example, plant extracts such as retinoic acid (Non-Patent Document 1), glycine, proline and alanine (Patent Document 1), licorice, Sakuhakuhi, Aloe, horsetail, goldfish, grasshopper, gaiyou or gentian (Patent Document) 2) TGF-β, ascorbic acids and the like are known.

このように様々なコラーゲン産生促進物質が開発されてきたが、更に、それらと組み合わせることでコラーゲン産生促進能を増強する成分もいくつか見いだされている。例えば、コラーゲン産生促進物質であるL−アスコルビン酸2−グルコシドのその機能を増強する、ローヤルゼリー(特許文献3)、コラーゲン産生促進物質であるアスコルビン酸類のその機能を増強する、トリメチルグリシン(特許文献4)などが知られている。   As described above, various collagen production promoting substances have been developed, and some components that enhance the ability to promote collagen production by combining them have been found. For example, L-ascorbic acid 2-glucoside, which is a collagen production promoting substance, enhances its function of royal jelly (Patent Document 3), trimethylglycine (Patent Document 4), which enhances the function of ascorbic acids, which are collagen production promoting substances. ) Etc. are known.

R.Marksら,British Journal of Dermatology,122,91−98,1990R. Marks et al., British Journal of Dermatology, 122, 91-98, 1990. 特開平7−194375号公報JP-A-7-194375 特開2001−206835号公報JP 2001-206835 A 特許第4456796号公報Japanese Patent No. 4456796 特許第5241054号公報Japanese Patent No. 5241054

上記のように、生体においてコラーゲンが果たす役割が重要であることから、コラーゲンの産生促進に関与する更なる成分の探索、そして、顕著なコラーゲン産生促進能を有する組成物の開発が望まれている。   As described above, since the role of collagen in the living body is important, it is desired to search for further components involved in the promotion of collagen production and to develop a composition having a remarkable ability to promote collagen production. .

従来のコラーゲン産生促進物質の探索においては、細胞内外のコラーゲンを問わず、細胞内又は細胞外のいずれかのコラーゲン量を増加させるものとして、コラーゲン産生促進能が評価されてきた。しかし、コラーゲンは細胞外において架橋されて線維構造を形成し、前述のような様々な生体機能を持つために、細胞内で合成されたコラーゲンの細胞からの分泌を促して、細胞外コラーゲン量を増加させることが重要である。   In the conventional search for collagen production promoting substances, the ability to promote collagen production has been evaluated as increasing the amount of collagen inside or outside the cell, regardless of whether the collagen is inside or outside the cell. However, collagen is cross-linked extracellularly to form a fibrous structure and has various biological functions as described above. Therefore, it promotes the secretion of collagen synthesized inside the cell and reduces the amount of extracellular collagen. It is important to increase.

本発明は、上記の現状を鑑み、細胞内で合成されたコラーゲンの細胞からの分泌を促進し、細胞外のコラーゲン量を増加させることのできる成分を探索し、当該成分を利用した顕著なコラーゲン産生促進能を有する組成物を提供することを目的とする。   In view of the above-mentioned present situation, the present invention searches for a component capable of promoting the secretion of collagen synthesized intracellularly from cells and increasing the amount of collagen outside the cell. It aims at providing the composition which has a production promotion ability.

本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意検討した結果、オウレン(Coptis japonica)抽出物が、細胞からのコラーゲンの分泌を促進する作用を有することを見出し、更に、その活性成分がベルベリンであることを明らかにした。コラーゲンは、細胞内で合成された後に、細胞外へと分泌されて、凝集して線維状となり、細胞外マトリクスの形成に関与する。そのため、生体において、細胞内で合成されたコラーゲンを、細胞外へと分泌させる作用は重要である。ベルベリンが、コラーゲンの産生促進に関与することについては従来から報告がなされていたが、上記のように、細胞内で合成されたコラーゲンを細胞外へ積極的に分泌させる作用を有することについては、これまでに知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。   As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have found that an extract of Coptis japonica has an action of promoting the secretion of collagen from cells. Clarified that it is Berberine. Collagen is synthesized inside the cell, then secreted outside the cell, aggregates and becomes fibrous, and participates in the formation of the extracellular matrix. Therefore, in the living body, the action of secreting collagen synthesized intracellularly to the outside of the cell is important. It has been reported that berberine is involved in promoting the production of collagen, but as described above, it has an action of actively secreting collagen synthesized inside the cell to the outside. This is a new finding by the present inventors that has not been known so far.

更に、本発明者らは、上記のベルベリンと、細胞内でのコラーゲン合成を促進する作用を有する物質とを組み合わせることで、それぞれを単独で用いるよりも、コラーゲン産生促進能を相乗的に増強することができることを見出した。そして、細胞内でのコラーゲン合成を促進する作用を有する様々な物質の中でも、特に、トランスフォーミング増殖因子−β(TGF−β)及び/又はTGF−β様作用を有する成分を、上記のベルベリンと組み合わせることで、顕著なコラーゲン産生促進能が見られることを見出した。ベルベリンとTGF−β等とを組み合わせることで、コラーゲン産生促進能が顕著に増強することはこれまでに知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。これらの知見を基に、本発明の完成に至った。   Furthermore, the present inventors synergistically enhance the ability to promote collagen production by combining the above-described berberine and a substance having an action of promoting intracellular collagen synthesis, rather than using each of them alone. I found that I can do it. Among various substances having an action of promoting intracellular collagen synthesis, in particular, a component having a transforming growth factor-β (TGF-β) and / or a TGF-β-like action is combined with the above berberine. It has been found that a remarkable ability to promote collagen production can be seen by combining them. It has not been known so far that combining berberine with TGF-β and the like significantly enhances the ability to promote collagen production, which is a new finding by the present inventors. Based on these findings, the present invention has been completed.

すなわち、本発明は、(A)細胞内から細胞外へのコラーゲンの分泌を促進するための、ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上と、(B)細胞内でのコラーゲンの合成を促進するための、コラーゲン合成促進剤とを含有する、コラーゲン産生促進用組成物に関する。   That is, the present invention is selected from the group consisting of (A) berberine, berberine analogs and salts thereof, and a plant extract containing berberine for promoting the secretion of collagen from the inside of the cell to the outside of the cell. And (B) a collagen synthesis promoter for promoting collagen synthesis in cells.

本発明は、別の側面において、前記コラーゲン産生促進用組成物を含有する皮膚外用剤、飲食品、又は医薬品に関する。   In another aspect, the present invention relates to a skin external preparation, food or drink, or pharmaceutical product containing the composition for promoting collagen production.

本発明は、また別の側面において、ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上を含有する、細胞内から細胞外へのコラーゲンの分泌を促進するための、コラーゲン分泌促進剤に関する。   In another aspect, the present invention provides an intracellular to extracellular mixture containing one or more selected from the group consisting of berberine, berberine analogs, and salts thereof, and plant extracts containing berberine. The present invention relates to a collagen secretion promoter for promoting collagen secretion.

本発明によれば、上記の課題を解決することができ、顕著なコラーゲン産生促進能を有するコラーゲン産生促進用組成物、並びにこれを利用した、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品を提供することができる。   According to the present invention, there can be provided a composition for promoting collagen production that can solve the above-mentioned problems and has a remarkable ability to promote collagen production, and a skin external preparation, food and drink, and pharmaceuticals using the same. Can do.

正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に各種抽出物を添加した場合の、細胞外(培養上清中)コラーゲン量の変化を示したグラフである。It is the graph which showed the change of the amount of extracellular (in culture supernatant) collagen when various extracts are added to the culture solution of a normal human skin fibroblast (NHDF). 正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に各種抽出物を添加した場合の、細胞内コラーゲン量の変化を示したグラフである。It is the graph which showed the change of the amount of intracellular collagen when various extracts are added to the culture solution of a normal human skin fibroblast (NHDF). 正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に、ベルベリン及び/又はコラーゲン合成促進剤(TGF−β、IGF−1、又はクルクミン)を単独で又は組み合わせて添加した場合の、細胞外(培養上清中)コラーゲン量の変化を示したグラフである。When cultured with normal human skin fibroblasts (NHDF), berberine and / or collagen synthesis promoter (TGF-β, IGF-1, or curcumin) alone or in combination is added to the extracellular (in culture) It is the graph which showed the change of the amount of collagen. 正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に、ベルベリン及び/又はコラーゲン合成促進剤(TGF−β、IGF−1、又はクルクミン)を単独で又は組み合わせて添加した場合の、細胞内コラーゲン量の変化を示したグラフである。When the berberine and / or collagen synthesis promoter (TGF-β, IGF-1, or curcumin) is added alone or in combination to a culture solution of normal human skin fibroblasts (NHDF), It is the graph which showed the change. 正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に、ベルベリン及び/又はコラーゲン合成促進剤(ホエイタンパク又はイラクサ抽出物)を単独で又は組み合わせて添加した場合の、細胞外(培養上清中)コラーゲン量の変化を示したグラフである。Extracellular (in culture supernatant) collagen when berberine and / or collagen synthesis promoter (whey protein or nettle extract) is added alone or in combination to normal human skin fibroblast (NHDF) culture It is the graph which showed the change of quantity. 正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)の培養液に、ベルベリン及び/又はコラーゲン合成促進剤(ホエイタンパク又はイラクサ抽出物)を単独で又は組み合わせて添加した場合の、細胞内コラーゲン量の変化を示したグラフである。Changes in the amount of intracellular collagen when berberine and / or collagen synthesis promoter (whey protein or nettle extract) was added alone or in combination to the culture medium of normal human skin fibroblasts (NHDF) It is a graph.

[コラーゲン産生促進用組成物]
本発明に係るコラーゲン産生促進用組成物は、(A)ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上(本明細書中において、「ベルベリン類」と称することがある)と、(B)コラーゲン合成促進剤とを含有する。
[Composition for promoting collagen production]
The composition for promoting collagen production according to the present invention comprises (A) at least one selected from the group consisting of berberine, berberine analogs, and salts thereof, and a plant extract containing berberine (in the present specification, , Sometimes referred to as “berberine”) and (B) a collagen synthesis promoter.

なお、従来の文献中では、コラーゲンについての「合成」と「産生」との語は同義に使用されることも多いが、本明細書中では、文脈にもよるが、原則としてこれらの語を区別して使用する。すなわち、本明細書において、コラーゲンの「合成促進」とは、線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞等のコラーゲンを産生する細胞の内部において行われるコラーゲン合成を促進させる作用を指すものとし、これは、例えば、後述する実施例で示すように、コラーゲンを産生する細胞に、対象となる物質を作用させた際の、細胞内コラーゲンの増加量を検出することによって確認することができる。一方、本明細書において、コラーゲンの「産生促進」とは、細胞内におけるコラーゲンの合成のみならず、その後の細胞外へのコラーゲンの分泌をも含めた一連の過程のいずれかに関与することによって、最終的に細胞外に存在するコラーゲン量を増加させる作用を指すものとし、これは、例えば、後述する実施例で示すように、コラーゲンを産生する細胞に、対象となる物質を作用させた際の、細胞外に分泌されたコラーゲン(培養上清中に存在するコラーゲン)の増加量を検出することによって確認することができる。なお、細胞内又は細胞外におけるコラーゲンの増加量は、各々常法により検出することができるが、例えば、対象となる物質を作用させる前と後のそれぞれにおいて、細胞内又は細胞外におけるタンパク質レベルでのコラーゲン量を、抗体を用いて測定し、それらの測定量の差によって検出することができる。最終的には、細胞間で細胞外マトリクスとして機能するコラーゲンの量を増加させることが望ましいことから、本発明においては、細胞内におけるコラーゲンの「合成促進」に加え、細胞外への分泌をも含めたコラーゲンの「産生促進」を、主な目的とする。   In the conventional literature, the terms “synthesis” and “production” for collagen are often used synonymously. However, in the present specification, these terms are used in principle, although depending on the context. Differentiate and use. That is, in this specification, “synthesis promotion” of collagen refers to the action of promoting collagen synthesis performed in cells producing collagen such as fibroblasts, osteoblasts, chondrocytes, etc. This can be confirmed, for example, by detecting an increase in intracellular collagen when a target substance is allowed to act on cells that produce collagen, as shown in the Examples described later. On the other hand, in this specification, “production promotion” of collagen refers to not only the synthesis of collagen in cells but also the involvement of any of a series of processes including the subsequent secretion of collagen outside the cells. This refers to the action of finally increasing the amount of collagen present outside the cell. This is, for example, when a target substance is allowed to act on cells that produce collagen, as shown in the examples described later. This can be confirmed by detecting the increased amount of collagen secreted extracellularly (collagen present in the culture supernatant). The increased amount of collagen inside or outside the cell can be detected by a conventional method, for example, at the protein level inside or outside the cell before and after acting the target substance. The amount of collagen can be measured using an antibody and detected by the difference between the measured amounts. Ultimately, it is desirable to increase the amount of collagen that functions as an extracellular matrix between cells. Therefore, in the present invention, in addition to “stimulation of synthesis” of collagen in the cell, secretion outside the cell is also performed. The main purpose is to “promote production” of the included collagen.

また、本明細書において、「コラーゲン」とは、その生合成過程におけるいずれの段階のものであってもよい。すなわち、コラーゲンは、コラーゲンを産生する細胞内で1本鎖のプロα鎖として合成され、それらが3本寄り集まって3本鎖のプロコラーゲンとして細胞外へ分泌される。その後、酵素分解により末端の一部のアミノ酸が切断されてトロポコラーゲンとなり、凝集して線維状となって、更に架橋が行われて成熟コラーゲン線維となる。本明細書においては、これらのいずれの段階のものも「コラーゲン」に含まれる。   In the present specification, “collagen” may be at any stage in the biosynthesis process. That is, collagen is synthesized as single-chain pro-α chains in cells that produce collagen, and these three are gathered together and secreted outside the cell as three-chain procollagen. Thereafter, some amino acids at the end are cleaved by enzymatic degradation to form tropocollagen, aggregate to form fibers, and are further crosslinked to form mature collagen fibers. In this specification, those in any of these stages are included in “collagen”.

(A)ベルベリン類
ベルベリン類は、コラーゲンを産生する細胞に作用させて、当該細胞内で合成されたコラーゲンの、細胞外への分泌を促進させる目的でコラーゲン産生促進用組成物に配合される。ベルベリン類は、細胞内のコラーゲン量を減少させる一方で、細胞外のコラーゲン量を増加させる。そのため、ベルベリン類をコラーゲン産生促進用組成物中に配合することで、細胞内で合成されたコラーゲンを細胞外に効率よく分泌させ、細胞間で実際に機能するコラーゲン線維を増やすことが可能となると考えられる。
(A) Berberine Berberine is blended in a composition for promoting collagen production for the purpose of promoting the secretion of collagen synthesized inside the cell by acting on the cell producing collagen. Berberines increase the amount of collagen outside the cell while decreasing the amount of collagen inside the cell. Therefore, by incorporating berberine into the composition for promoting collagen production, it is possible to efficiently secrete the collagen synthesized inside the cell and increase the number of collagen fibers that actually function between cells. Conceivable.

ベルベリン類としては、ベルベリン、ベルベリン類縁体、ベルベリン又はベルベリン類縁体の塩、ベルベリンを含有する植物抽出物が挙げられ、これらは医薬品、医薬部外品、化粧品、又は食品の分野において使用され得るものであれば、特に制限なく使用することができる。ベルベリン類縁体としては、塩化ベルベリン、硫酸ベルベリン、タンニン酸ベルベリン、パルマチン、コプチシン、ウォレニン、ジャトロリジン、サンギナリンなどが挙げられる。ベルベリン又はベルベリン類縁体の塩としては、ナトリウムやカリウム等のアルカリ金属塩、カルシウムやマグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエタノールアミンやトリエチルアミン等の有機アミン塩、リジンやアルギニン等の塩基性アミノ酸塩などが挙げられる。ベルベリンを含有する植物抽出物としては、オウレン(Coptis japonica)抽出物、オウバク(キハダ(Phellodendron amurense)の樹皮)抽出物などが挙げられる。オウレン抽出物については、特に根茎からの抽出物が好ましい。これらは1種単独で又は2種以上を組み合わせて使用することができる。   Examples of berberines include berberine, berberine analogs, berberine or a salt of berberine analogs, and plant extracts containing berberine, which can be used in the fields of pharmaceuticals, quasi drugs, cosmetics, or foods. If it is, it can be used without particular limitation. Examples of berberine analogs include berberine chloride, berberine sulfate, berberine tannate, palmatin, coptisine, wollenin, jatrolidine, and sanguinarine. Examples of berberine or berberine analog salts include alkali metal salts such as sodium and potassium, alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium, ammonium salts, organic amine salts such as triethanolamine and triethylamine, and bases such as lysine and arginine. Amino acid salts and the like. Examples of plant extracts containing berberine include an extract of Coptis japonica, an extract of agron (Phrodendron amurense bark), and the like. As for the oren extract, an extract from a rhizome is particularly preferable. These can be used individually by 1 type or in combination of 2 or more types.

ベルベリンを含有する植物抽出物は、例えば、上記の植物から常法に応じて抽出することにより得ることができる。例えば、上記の植物から、水、グリセリン、プロピレングリコール、エタノール、ブチレングリコール等の水溶性溶剤、又はそれらの混合液などで、常温または加温処理により、抽出、精製することにより得ることができる。得られた抽出液はそのまま使用してもよいし、不活性な夾雑物を除去し使用してもよい。或いは、濃縮・乾固物を、水や極性溶媒に再度溶解して使用してもよい。更には、所望の程度の分泌促進作用を損なわない範囲で、抽出液に対し、脱色、脱臭、脱塩の精製処理を行ったり、カラムクログラフィーによる分画抽出を行ったりした後で使用することもできる。また、ベルベリンを含有する植物抽出物としては、市販品を使用することもでき、例えば、オウレン抽出液−J(丸善製薬社製)等が挙げられる。   The plant extract containing berberine can be obtained, for example, by extracting from the above plant according to a conventional method. For example, it can be obtained by extracting and purifying from the above plant with water, glycerin, propylene glycol, ethanol, butylene glycol, or a water-soluble solvent, or a mixture thereof, at room temperature or by heating treatment. The obtained extract may be used as it is, or may be used after removing inactive impurities. Alternatively, the concentrated / dried product may be dissolved again in water or a polar solvent and used. Furthermore, it should be used after subjecting the extract to purification of decolorization, deodorization, and desalting, and fractional extraction by column chromatography within a range that does not impair the desired level of secretion promoting action. You can also. Moreover, as a plant extract containing berberine, a commercial item can also be used, for example, Ouren extract-J (made by Maruzen Pharmaceutical Co., Ltd.) etc. are mentioned.

コラーゲン産生促進用組成物中のベルベリン類の含有量は、特に制限なく、目的に応じて適宜選択することができるが、有効成分であるベルベリン(類縁体、塩を含む)の量として、通常、0.0001〜50質量%であり、0.01〜5質量%が好ましく、0.025〜0.5質量%がより好ましい。ベルベリン類の含有量が好ましい範囲内であると、コラーゲン分泌促進作用の観点や、多量のベルベリン類による組成物の着色等に起因する問題を防ぐ観点から、有利である。   The content of berberine in the composition for promoting collagen production is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. However, as the amount of berberine (including analogs and salts) as an active ingredient, It is 0.0001-50 mass%, 0.01-5 mass% is preferable, and 0.025-0.5 mass% is more preferable. When the content of berberine is within a preferable range, it is advantageous from the viewpoint of promoting collagen secretion and preventing problems caused by coloring of the composition with a large amount of berberine.

(B)コラーゲン合成促進剤
コラーゲン合成促進剤は、上記のベルベリン類と組み合わせることで、全体として相乗的なコラーゲン産生促進効果を奏する目的で、コラーゲン産生促進用組成物に配合される。ベルベリン類とコラーゲン合成促進剤との組み合わせが、顕著なコラーゲン産生促進効果を奏する理由としては、特にそのメカニズムに限定されるものではないが、コラーゲン合成促進剤の作用によって増加した細胞内のコラーゲンを、上記のベルベリン類の作用により細胞外に積極的に分泌することで、全体として、細胞外に存在するコラーゲン量を効率的に増やすことが可能となるためと考えられる。
(B) Collagen synthesis promoter A collagen synthesis promoter is blended with the above-described berberine to blend in a composition for promoting collagen production for the purpose of producing a synergistic collagen production promoting effect as a whole. The reason why the combination of berberines and a collagen synthesis promoter has a remarkable collagen production promotion effect is not particularly limited to the mechanism, but the increased intracellular collagen by the action of the collagen synthesis promoter is not limited. It is considered that the amount of collagen existing outside the cell can be efficiently increased as a whole by actively secreting it outside the cell by the action of the above berberines.

コラーゲン合成促進剤としては、少なくとも細胞内でのコラーゲンの合成を促進させる作用を有し、医薬品、医薬部外品、化粧品、又は食品の分野において使用され得るものであれば、特に制限なく使用することができ、例えば、ウマスギゴケ、オオスギゴケ、サウスレア・インボルクラタ、クスノハガシワ、ハイビスカス、破布樹、竜利葉、霧水葛、アントセファラス・インディカス、アナファリス ブスア、鋪地草、キヨスミイトゴケ、ジンギバーカッサムナー、回心草、蓮子草、オオタマゴケ、黄皮の葉、オニイチゴ、セイロンマツリ、クロレラ、サキシマフヨウ、ホソバオキナゴケ、オオシラガゴケ、五斂子、ツルゲンゲ、ハス胚芽、センネンケン、月桃、水ナス、五指毛桃、アメリカハリブキ、チャングバット、土貝母、アモールセコ、コエロスポンディアス・アクシラリス、ネムノキ、ノゲイトウ、ローマンカモミール、バショウ、オオズキンカブリタケ、ヒトリシズカ、パッションフルーツ、大花紅景天、茎地紅景天、カンゾウ、ソウハクヒ、アロエ、スギナ、キンギンカ、オウバク、ガイヨウ又はゲンチアナ等の植物抽出物、レチノイン酸、グリシン及びプロリン及びアラニンからなる3種アミノ酸、TGF−β、IGF−1、アスコルビン酸類、ブラシノライド、エピブラシノライド、メナキノン−7、ホスファチジン酸などが挙げられる。これらは1種単独で又は2種以上を組み合わせて使用することができる。   The collagen synthesis promoter is used without particular limitation as long as it has an action of promoting collagen synthesis in cells at least and can be used in the field of pharmaceuticals, quasi drugs, cosmetics, or foods. For example, swordfish, giant moss, south rare involcata, coxnohagashi, hibiscus, broken tree, dragon leaf, kirimizukuzu, anthecephalus indicas, anaphalis busua, blue grass, kiyosumi moss, gentian bark Sumner, Convertible Grass, Lotus Flower, Gossa, Yellow Skin Leaves, Oni Strawberry, Ceylon Matsuri, Chlorella, Saximakhuyo, Hosobaokinagoke, Oshiragagoke, Pyramid, Vulgaris, Lotus Germ, Sennenken, Moon Peach, Water Eggplant, Five Finger Peach, America Halibutki, Chang Bat, Dokai Mother, Amor Co, Coelospondius axillaris, Nemunoki, Nogateto, Roman Chamomile, Bush, Ozukinkaburitake, Hitorishizuka, Passionfruit, Big Flower Scenic, Sekiji Kagetenten, Daylily, Sakuhakuhi, Aloe, Sugina, Kinginga, Oubakaku , Plant extracts such as gayyo or gentian, retinoic acid, glycine, proline and alanine, three amino acids, TGF-β, IGF-1, ascorbic acid, brassinolide, epibrassinolide, menaquinone-7, phosphatidic acid Etc. These can be used individually by 1 type or in combination of 2 or more types.

中でも、コラーゲン合成促進剤としては、TGF−β(トランスフォーミング増殖因子−β)を使用することが好ましい。TGF−βは、自然に存在する多くの機能を持つ増殖因子であり、細胞外マトリックスタンパク質の産生、沈着や、上皮系細胞の増殖抑制、免疫細胞の機能抑制等、細胞の増殖や分化において重要な役割を果たすことが知られている。TGF−βは、線維芽細胞等の標的細胞の表面に存在するTGF−β受容体に結合し、情報伝達を担うタンパク質であるSmad2、Smad3をリン酸化させることによって、標的遺伝子の転写発現を誘導し、細胞外マトリックスタンパク質であるコラーゲンの合成を導く。このように、TGF−βによりコラーゲンの合成が促進されることは一般に知られているが、上記のベルベリン類と組み合わせて使用した際に、特に顕著なコラーゲン産生促進効果を奏することは、これまでに知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。   Among them, it is preferable to use TGF-β (transforming growth factor-β) as a collagen synthesis promoter. TGF-β is a naturally occurring growth factor with many functions, and is important for cell growth and differentiation, including extracellular matrix protein production and deposition, epithelial cell growth inhibition, immune cell function inhibition, etc. It is known to play a role. TGF-β induces transcriptional expression of target genes by binding to TGF-β receptors existing on the surface of target cells such as fibroblasts and phosphorylating Smad2 and Smad3, which are proteins responsible for signal transmission And leads to the synthesis of collagen, an extracellular matrix protein. As described above, it is generally known that TGF-β promotes the synthesis of collagen. However, when used in combination with the above-described berberines, it has so far been effective in promoting collagen production. This is a new finding by the present inventors.

上記のようなTGF−βの作用機序を考慮すると、TGF−βと同様に、TGF−β様の作用を有する成分(例えば、TGF−βの産生を促進する物質や、TGF−β以外の、TGF−β情報伝達経路を活性化させる物質等が含まれる)にも、コラーゲン合成を促進する作用が期待できる。すなわち、このようなTGF−β様作用を有する成分も、本発明におけるコラーゲン合成促進剤として好ましく使用できる。TGF−β様作用を有する成分としては、例えば、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質の断片、イラクサ抽出物、シカクマメ抽出物、ダイフウシ抽出物、アロエベラ抽出物、クルクミン、フコキサンチン、フコキサンチノール、キチン、β−1,4−マンノビオースなどが挙げられる。中でも、TGF−β様作用を有する成分としては、ホエイタンパク質及び/又はホエイタンパク質の断片が好ましい。   Considering the mechanism of action of TGF-β as described above, as with TGF-β, a component having a TGF-β-like action (for example, a substance that promotes production of TGF-β, other than TGF-β, And substances that activate the TGF-β signal transduction pathway) are also expected to have an effect of promoting collagen synthesis. That is, a component having such a TGF-β-like action can also be preferably used as a collagen synthesis promoter in the present invention. Examples of components having a TGF-β-like action include whey protein, whey protein fragment, nettle extract, winged bean extract, daifu cow extract, aloe vera extract, curcumin, fucoxanthin, fucoxanthinol, chitin, β -1,4-mannobiose and the like. Among these, as a component having a TGF-β-like action, whey protein and / or a whey protein fragment are preferable.

ホエイタンパク質は、ウシ、ヒツジ、ヒト等の生乳から、カゼインと乳脂肪を取り除いた乳清(ホエイ)に含まれるタンパク質の総称である。主なホエイタンパク質としては、例えば、β−ラクトグロブリン、α−ラクトアルブミン、免疫グロブリン、グリコマクロペプチド、ラクトフェリンなどが挙げられる。ホエイタンパク質としては、好ましくはウシのβ−ラクトグロブリン(配列番号6)が使用される。また、ホエイタンパク質としては、βラクトグロブリンを高濃度に含有するように調製されたホエイタンパク質を使用することも好ましい。また、ホエイタンパク質の低分子画分(1〜30kDa)を濃縮させたCBP(Concentrated Bovine milk whey active Protein;濃縮乳清活性タンパク質)を使用することもできる。   Whey protein is a general term for proteins contained in whey obtained by removing casein and milk fat from raw milk such as cows, sheep and humans. Examples of main whey proteins include β-lactoglobulin, α-lactalbumin, immunoglobulin, glycomacropeptide, and lactoferrin. As the whey protein, bovine β-lactoglobulin (SEQ ID NO: 6) is preferably used. Further, as the whey protein, it is also preferable to use a whey protein prepared so as to contain β-lactoglobulin in a high concentration. Moreover, CBP (Concentrated Bovine milk active protein; Concentrated whey active protein) which concentrated the low molecular weight fraction (1-30 kDa) of whey protein can also be used.

ホエイタンパク質の断片としては、好ましくはβ−ラクトグロブリンの断片が使用され、特に好ましくは、β−ラクトグロブリンの102〜105番目のアミノ酸配列であるTyr−Leu−Leu−Phe(配列番号1)、β−ラクトグロブリンの142〜145番目のアミノ酸配列であるAla−Leu−Pro−Met(配列番号2)、β−ラクトグロブリンの146〜149番目のアミノ酸配列であるHis−Ile−Arg−Leu(配列番号3)、β−ラクトグロブリンの11〜19番目のアミノ酸配列であるAsp−Ile−Gln−Lys−Val−Ala−Gly−Thr−Trp(配列番号4)、及び、β−ラクトグロブリンの150〜162番目のアミノ酸配列であるSer−Phe−Asn−Pro−Thr−Gln−Leu−Glu−Glu−Gln−Cys−His−Ile(配列番号5)からなる群から選択される1以上のペプチド断片を使用することができる。   As the whey protein fragment, a β-lactoglobulin fragment is preferably used, and particularly preferably, Tyr-Leu-Leu-Phe (SEQ ID NO: 1), which is the amino acid sequence at positions 102 to 105 of β-lactoglobulin, Ala-Leu-Pro-Met (SEQ ID NO: 2) which is amino acid sequence 142-145 of β-lactoglobulin, His-Ile-Arg-Leu (sequence) which is amino acid sequence 146-149 of β-lactoglobulin No. 3), Asp-Ile-Gln-Lys-Val-Ala-Gly-Thr-Trp (SEQ ID NO: 4), which is the 11th to 19th amino acid sequence of β-lactoglobulin, and 150- Ser-Phe-Asn-Pro-Thr-Gln- which is the 162nd amino acid sequence It is possible to use one or more peptide fragments selected from the group consisting of eu-Glu-Glu-Gln-Cys-His-Ile (SEQ ID NO: 5).

ホエイタンパク質は、例えば、ウシの生乳からの抽出、限外濾過、電気透析、エバポレーション、逆浸透などによって得ることができる。或いは、微生物を用いて生合成したものや、有機合成化学的に人工合成したものを使用してもよい。また、ホエイタンパク質の断片は、ホエイタンパク質を加水分解することにより得ることができる。或いは、微生物を用いて生合成したものや、有機合成化学的に人工合成したものを使用してもよい。また、ホエイタンパク質及びホエイタンパク質の断片は、N末端及び/又はC末端が修飾されることにより誘導体化されていてもよい。   Whey protein can be obtained, for example, by extraction from raw bovine milk, ultrafiltration, electrodialysis, evaporation, reverse osmosis and the like. Or what was biosynthesized using microorganisms and what was artificially synthesized by organic synthetic chemistry may be used. Moreover, the whey protein fragment can be obtained by hydrolyzing the whey protein. Or what was biosynthesized using microorganisms and what was artificially synthesized by organic synthetic chemistry may be used. Moreover, the whey protein and the whey protein fragment may be derivatized by modifying the N-terminus and / or the C-terminus.

コラーゲン産生促進用組成物中のコラーゲン合成促進剤の含有量は、特に制限なく、目的に応じて適宜選択することができるが、通常、0.0000001〜50質量%であり、0.000001〜10質量%が好ましく、0.000001〜1.2質量%がより好ましい。コラーゲン合成促進剤の含有量が好ましい範囲内であると、コラーゲン合成促進作用の観点や、多量のコラーゲン合成促進剤による色や性状等の品質への望ましくない影響を防ぐ観点から、有利である。   The content of the collagen synthesis promoter in the composition for promoting collagen production is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose, but is usually 0.0000001 to 50% by mass, and 0.000001 to 10%. % By mass is preferable, and 0.000001 to 1.2% by mass is more preferable. When the content of the collagen synthesis accelerator is within the preferred range, it is advantageous from the viewpoint of promoting collagen synthesis and preventing undesirable effects on the quality such as color and properties by a large amount of collagen synthesis accelerator.

コラーゲン産生促進用組成物中の、ベルベリン類とコラーゲン合成促進剤との含有量比は、通常、コラーゲン合成促進剤100質量部に対して、ベルベリン類が(有効成分であるベルベリン(類縁体、塩を含む)の量として)0.05質量部以上であり、0.05〜20000000質量部となることが好ましく、0.125〜50000質量部となることがより好ましい。含有量比が好ましい範囲内であると、コラーゲン産生促進作用の点で有利である。   In the composition for promoting collagen production, the content ratio of the berberine to the collagen synthesis promoter is usually berberine (the active ingredient berberine (analogue, salt) relative to 100 parts by mass of the collagen synthesis promoter. Inclusive) is 0.05 parts by mass or more, preferably 0.05 to 20000000 parts by mass, and more preferably 0.125 to 50000 parts by mass. When the content ratio is within the preferred range, it is advantageous in terms of promoting collagen production.

コラーゲン産生促進用組成物は、上記の二成分(ベルベリン類、及び、コラーゲン合成促進剤)のみからなるものであってもよいが、必要に応じて、通常の医薬品、医薬部外品、化粧品又は食品に使用され得る各種の任意成分、例えば、油剤、粉体、界面活性剤、粘剤、樹脂、アミノ酸類、糖類、有機系紫外線吸収剤、天然系の植物抽出成分、溶媒、防腐剤、金属イオン封鎖剤、抗炎症成分、薬効成分等を適宜含有することができる。これらは1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。また、組成物中のこれらの任意成分の含有量は、本発明の効果を損なわない範囲内で適宜選択することができる。   The composition for promoting collagen production may consist of only the above two components (berberine and collagen synthesis promoter), but if necessary, a normal pharmaceutical, quasi-drug, cosmetic or Various optional ingredients that can be used in foods, such as oils, powders, surfactants, adhesives, resins, amino acids, sugars, organic UV absorbers, natural plant extract ingredients, solvents, preservatives, metals An ion sequestering agent, an anti-inflammatory component, a medicinal component, and the like can be appropriately contained. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together. Moreover, content of these arbitrary components in a composition can be suitably selected within the range which does not impair the effect of this invention.

本発明に係るコラーゲン産生促進用組成物は、優れたコラーゲン産生促進能を有することから、例えば、コラーゲンの減少や変性等に起因する美容上の問題や各種障害を予防又は治療するための組成物、具体的には、シワ又はタルミ、ハリの低下の予防及び/又は改善のための組成物や、角膜障害、関節障害、炎症性疾患等の予防及び/又は治療用の組成物などとして、有益に使用することができる。なお、コラーゲン産生促進用組成物の適用対象となる生体は、主にヒトであるが、ヒト以外の動物にも適用が可能である。また、コラーゲン産生促進用組成物は、培養線維芽細胞等の生体外のコラーゲン産生細胞において、コラーゲンの産生を促進させるために使用することも可能である。   Since the composition for promoting collagen production according to the present invention has an excellent ability to promote collagen production, for example, a composition for preventing or treating cosmetic problems and various disorders caused by collagen reduction or denaturation. In particular, it is useful as a composition for preventing and / or improving wrinkle or tarmi, reduction of elasticity, and a composition for preventing and / or treating corneal disorders, joint disorders, inflammatory diseases, etc. Can be used for In addition, the living body to which the composition for promoting collagen production is applied is mainly human, but it can also be applied to animals other than humans. The composition for promoting collagen production can also be used to promote collagen production in in vitro collagen-producing cells such as cultured fibroblasts.

コラーゲン産生促進用組成物の使用方法としても、特に制限はなく、生体内又は生体外におけるコラーゲンを産生する細胞に対して、有効成分(ベルベリン類、及び、コラーゲン合成促進剤)を作用させることができればよい。例えば、対象となる生体に、組成物を経口的又は非経口的(例えば、経皮的)に摂取させることができる。また、対象が生体外の細胞である場合には、組成物を細胞の培養液に対して添加することができる。生体における組成物の摂取量、又は生体外の細胞に対する組成物の添加量にも、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で適宜選択することができる。   The method of using the composition for promoting collagen production is not particularly limited, and the active ingredients (berberine and collagen synthesis promoter) can be allowed to act on cells that produce collagen in vivo or in vitro. I can do it. For example, the target living body can take the composition orally or parenterally (for example, transdermally). In addition, when the target is an ex vivo cell, the composition can be added to the cell culture medium. There is no restriction | limiting in particular also in the intake amount of the composition in a biological body, or the addition amount of the composition with respect to the cell outside a living body, and it can select suitably in the range which does not impair the effect of this invention.

[皮膚外用剤、飲食品、医薬品]
本発明は、上記のコラーゲン産生促進用組成物を含む、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品にも関する。これらは、ベルベリン類とコラーゲン合成促進剤との組合せに基づく優れたコラーゲン産生促進能を有することから、例えば、コラーゲンの減少や変性等に起因する、シワやタルミの予防又は改善、角膜障害、関節障害、炎症性疾患等の疾患の予防又は治療などのために好適に利用可能である。
[External preparation for skin, food and drink, pharmaceutical]
The present invention also relates to an external preparation for skin, a food and drink, and a pharmaceutical comprising the above-described composition for promoting collagen production. These have an excellent ability to promote collagen production based on a combination of berberine and a collagen synthesis promoter, so that for example, prevention or improvement of wrinkles and tarmi caused by reduction or degeneration of collagen, corneal disorders, joints, etc. It can be suitably used for the prevention or treatment of diseases such as disorders and inflammatory diseases.

皮膚外用剤としては、医薬部外品や化粧品であってよく、例えば、ローション、乳剤、クリーム、軟膏等の形態の医薬部外品、化粧水、乳液、クリーム、化粧油等のスキンケア化粧品、ファンデーション、パウダー、口紅、頬紅、アイシャドウ、ネイルエナメル等のメークアップ化粧品、エアゾール式、ポンプ式、押出し式等の機構で噴射する化粧品、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等の形態の入浴剤などが挙げられる。皮膚外用剤は、少なくともベルベリン類、及びコラーゲン合成促進剤を含有し、更に任意の、医薬部外品や化粧品に配合され得る成分を含有し、常法に応じて任意の剤型に製造することができる。   The topical skin preparation may be a quasi-drug or cosmetic, for example, a quasi-drug in the form of a lotion, emulsion, cream, ointment, skin care cosmetics such as lotion, emulsion, cream, cosmetic oil, foundation, etc. , Powder, lipstick, blusher, eyeshadow, nail enamel makeup cosmetics, aerosols, pumps, extrusions, and other cosmetics, tablets, capsules, granules, powders, liquids, etc. Agents and the like. The external preparation for skin contains at least berberine and a collagen synthesis promoter, and further contains optional ingredients that can be blended into quasi-drugs and cosmetics, and is manufactured in an arbitrary dosage form according to a conventional method. Can do.

飲食品としては、例えば、パン類、菓子類、麺類、乳製品、粉類、飲料類、各種加工品等の一般加工食品や、ビタミン剤等の栄養補助食品、栄養補助飲料、動物用健康食品、特定保健用食品、栄養機能食品、保健機能食品などが挙げられる。飲食品は、少なくともベルベリン類、及びコラーゲン合成促進剤を含有し、更に任意の、飲食品に配合され得る成分を含有し、常法に応じて任意の剤型に製造することができる。   Examples of food and drink include general processed foods such as breads, confectionery, noodles, dairy products, powders, beverages, various processed products, nutritional supplements such as vitamins, nutritional supplements, and animal health foods. Specific health foods, nutritional functional foods, health functional foods, and the like. The food or drink contains at least a berberine and a collagen synthesis accelerator, and further contains any component that can be blended in the food or drink, and can be produced in any dosage form according to a conventional method.

医薬品としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形組成物からなる経口用医薬品、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液体組成物からなる経口用医薬品、注射剤、経皮吸収剤、外用剤等の非経口用医薬品などが挙げられる。医薬品は、少なくともベルベリン類、及びコラーゲン合成促進剤を含有し、更に任意の、医薬品に配合され得る成分を含有し、常法に応じて任意の剤型に製造することができる。   Examples of pharmaceuticals include oral pharmaceuticals comprising solid compositions such as tablets, granules, powders, powders, capsules, etc., oral pharmaceuticals comprising liquid compositions such as normal solutions, suspensions and emulsions, and injections. And parenteral drugs such as transdermal absorption agents and external preparations. The pharmaceutical contains at least berberine and a collagen synthesis promoter, and further contains any component that can be blended with the pharmaceutical, and can be produced in any dosage form according to a conventional method.

皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品中の、有効成分(ベルベリン類及びコラーゲン合成促進剤)の含有量としては、特に制限はなく、所望のコラーゲン産生促進作用の程度や、使用する有効成分の種類、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品の剤型等、目的に応じてそれぞれ適宜選択することができる。例えば、ベルベリン類としてベルベリンを含有する植物抽出物を使用する場合、その植物抽出物中のベルベリン類の含有量にもよるが、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品中に0.001〜30質量%の範囲内で含有させることができる。また、例えば、コラーゲン合成促進剤としてホエイタンパク質を使用する場合、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品中に0.0025〜30質量%の範囲内で含有させることができる。また、皮膚外用剤、飲食品、及び医薬品中の上記二成分の含有量比としては、例えば、質量比で、ベルベリンを含有する植物抽出物:ホエイタンパク質=20:1〜1:200とすることができる。   The content of active ingredients (berberine and collagen synthesis promoter) in external preparations for skin, foods and beverages, and pharmaceuticals is not particularly limited, and the desired degree of collagen production promoting action and the type of active ingredient used. , External preparations for skin, foods and drinks, pharmaceutical dosage forms, etc., can be appropriately selected according to the purpose. For example, when using a plant extract containing berberine as the berberine, depending on the content of the berberine in the plant extract, 0.001 to 30 mass in the skin external preparation, food and drink, and pharmaceutical products % Can be included. For example, when using whey protein as a collagen synthesis promoter, it can be contained in the range of 0.0025-30 mass% in skin external preparation, food-drinks, and a pharmaceutical. Moreover, as content ratio of the said 2 component in skin external preparation, food-drinks, and a pharmaceutical, for example, it is set as mass ratio, it is set as the plant extract containing berberine: whey protein = 20: 1-1: 200. Can do.

[コラーゲン分泌促進剤]
また、本発明は、ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上を含有する、コラーゲン分泌促進剤にも関する。コラーゲン分泌促進剤としては、上記のベルベリン類を、単独で使用してもよいし、他の任意成分と共に使用してもよい。また、コラーゲン分泌促進剤中のベルベリン類の含有量や剤型に特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。本発明に係るコラーゲン分泌促進剤は、細胞内で合成されたコラーゲンを細胞外に効率的に分泌させる作用を有することから、例えば、生体外において培養線維芽細胞等のコラーゲンを産生する細胞に対してコラーゲンの分泌を促進させる目的で、また、生体内において細胞間のコラーゲン減少に起因する美容上や健康上の問題を予防又は改善する目的で、有益に使用することができる。
[Collagen secretion promoter]
The present invention also relates to a collagen secretion promoter containing at least one selected from the group consisting of berberine, berberine analogs and salts thereof, and a plant extract containing berberine. As a collagen secretion promoter, the above berberines may be used alone or in combination with other optional components. Moreover, there is no restriction | limiting in particular in content and dosage form of berberine in a collagen secretion promoter, According to the objective, it can select suitably. The collagen secretagogue according to the present invention has an action of efficiently secreting collagen synthesized in the cell to the outside of the cell. Therefore, for example, for cells that produce collagen such as cultured fibroblasts in vitro. Thus, it can be beneficially used for the purpose of promoting the secretion of collagen and for the purpose of preventing or improving cosmetic and health problems caused by the decrease in collagen between cells in the living body.

以下に実施例及び製剤例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例及び製剤例に何ら限定されるものではない。   The present invention will be described in more detail with reference to Examples and Formulation Examples below, but the present invention is not limited to these Examples and Formulation Examples.

[試験例1:皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン分泌促進能を有する成分のスクリーニング]
皮膚線維芽細胞を用いて、コラーゲンを細胞内から培養上清中へと分泌促進する成分のスクリーニングを行った。具体的には、植物抽出物をはじめとした各種成分を培養液に添加した場合の、細胞内及び細胞外(培養上清中)のコラーゲン量の変化をそれぞれ測定し、細胞内におけるコラーゲンの合成、及び、細胞外へのコラーゲンの分泌に対する各種成分の作用を以下のように試験した。なお、各種成分として、ホエイタンパクとしては、βラクトグロブリン高含有ホエイタンパク質(Seperex Nutritional社製)を使用した。βラクトグロブリン高含有ホエイタンパク質は、Seperex Nutritional社の所有する専売工程により調製されたものであり、工程の概略は以下の通りである。ウシ由来の生乳を脱脂処理、低温殺菌、限外濾過、噴霧乾燥を行った。得られた濃縮物を希釈し、ディアフィルトレーション(30kDa膜)によって主要な非ホエイタンパク質を除去した。さらに、得られた浸透液について限外濾過/ディアフィルトレーション(1kDa膜)を行い、低分子を除去した。得られたホエイタンパクは1〜30kDaのタンパク質を含有し、特にβラクトグロブリンを高濃度で含有する。植物抽出物としては、アセンヤク抽出液(アセンヤク抽出液、丸善製薬社製)、ダイズ抽出液(ファイトポリアミン−S、東洋紡社製)、オウレン抽出液(オウレン抽出液−J、丸善製薬社製)、アルファルファ抽出液(ビタノール、シラブ社製)を使用した。
[Test Example 1: Screening for a component capable of promoting collagen secretion in dermal fibroblasts]
Skin fibroblasts were used to screen for components that promoted secretion of collagen from the cell into the culture supernatant. Specifically, when various components such as plant extracts are added to the culture solution, changes in the amount of collagen inside and outside the cell (in the culture supernatant) are measured to synthesize collagen in the cell. And the effect | action of the various components with respect to the secretion of collagen outside a cell was tested as follows. In addition, as various components, β-lactoglobulin-rich whey protein (Seperex Nutritional) was used as the whey protein. The β-lactoglobulin-rich whey protein was prepared by a proprietary process owned by Seperex Nutritional, and the outline of the process is as follows. Cattle-derived raw milk was degreased, pasteurized, ultrafiltered, and spray-dried. The resulting concentrate was diluted and major non-whey protein was removed by diafiltration (30 kDa membrane). Furthermore, the obtained permeate was subjected to ultrafiltration / diafiltration (1 kDa membrane) to remove low molecules. The obtained whey protein contains a protein of 1 to 30 kDa, and particularly contains β-lactoglobulin at a high concentration. As plant extracts, Asenyaku extract (Asenyaku extract, manufactured by Maruzen Pharmaceutical Co., Ltd.), soybean extract (Phytopolyamine-S, manufactured by Toyobo Co., Ltd.), Ouren extract (Ouren extract-J, manufactured by Maruzen Pharmaceutical Co., Ltd.), Alfalfa extract (vitanol, manufactured by Shirabu) was used.

正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)を、12ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、8.0×10細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガス及び95%空気の環境下で24時間培養した。培養液には、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)に牛胎児血清(FBS)を2質量%の濃度で含有した培地を各ウェル1mLずつ使用した。次いで、ホエイタンパクは200μg/mL、その他の抽出液は0.25質量%になるように添加し、培養終了後、培養上清中のコラーゲン量をELISA(Human Collagen Type I ELISA kit;株式会社エーセル製)にて測定した。結果を図1に示す。なお、ホエイタンパク質又はその他の抽出液をいずれも添加しない場合の培養上清中のコラーゲン量を100としてコラーゲン量を比較した。 Normal human skin fibroblasts (NHDF) were cultured in 12-well culture plates. More specifically, the cells were seeded at a density of 8.0 × 10 4 cells / well and cultured at 37 ° C. in an environment of 5% carbon dioxide gas and 95% air for 24 hours. As a culture solution, a medium containing 2% by mass of fetal bovine serum (FBS) in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) was used at 1 mL per well. Subsequently, whey protein was added at 200 μg / mL, and other extracts were added at 0.25% by mass. After completion of the culture, the amount of collagen in the culture supernatant was determined by ELISA (Human Collagen Type I ELISA kit; Manufactured). The results are shown in FIG. In addition, the amount of collagen was compared with the amount of collagen in the culture supernatant when no whey protein or other extract was added as 100.

図1の結果から、オウレン抽出液を添加した培養液で培養した細胞では、その他の培養液で培養した細胞と比べて、培養上清中のコラーゲン量が最も増加した。   From the results shown in FIG. 1, the amount of collagen in the culture supernatant was most increased in the cells cultured in the culture solution to which the aurene extract was added, compared to the cells cultured in other culture solutions.

続いて、細胞内のコラーゲン量の変化を確認するために、細胞内のコラーゲン量を検出した。まず培養上清回収後の細胞をPBS(−)で洗浄し、RIPAバッファーを添加した。その後、SDSサンプルバッファーを加えて加熱還元処理した。これをSDS−PAGEし、ウェスタンブロッティングにて細胞内のコラーゲンを抗体(Anti−Collagen Type I Antibody;メルクミリポア社製)を用いて検出した。結果を図2に示す。なお、ホエイタンパク質又はその他の抽出液をいずれも添加しない場合の細胞内のコラーゲン量を100としてコラーゲン量を比較した。   Subsequently, in order to confirm a change in the amount of collagen in the cell, the amount of collagen in the cell was detected. First, the cells after collection of the culture supernatant were washed with PBS (−), and RIPA buffer was added. After that, SDS sample buffer was added and heat reduction treatment was performed. This was subjected to SDS-PAGE, and intracellular collagen was detected by Western blotting using an antibody (Anti-Collagen Type I Antibody; manufactured by Merck Millipore). The results are shown in FIG. The amount of collagen in the cells when no whey protein or other extract was added was taken as 100, and the amount of collagen was compared.

図2の結果から、オウレン抽出液を添加した培養液で培養した細胞では、その他の培養液の場合と比較して、細胞内のコラーゲン量が大きく減少した。   From the results shown in FIG. 2, the amount of collagen in the cells was greatly reduced in the cells cultured in the culture solution to which the aurene extract was added as compared with the other culture solutions.

図1及び図2の結果から、オウレン抽出液は細胞内のコラーゲン量を減少させ、培養上清中のコラーゲン量を増加させることがわかった。このことから、オウレン抽出液は細胞内から培養上清中へのコラーゲンの分泌を促進していることが示唆された。オウレン抽出液の主要成分はベルベリンであることが知られており、ベルベリンが、コラーゲンの細胞内から細胞外への分泌を促進する作用を有しているものと考えられる。   From the results of FIG. 1 and FIG. 2, it was found that the auren extract decreases the amount of collagen in the cells and increases the amount of collagen in the culture supernatant. From this, it was suggested that the auren extract promotes the secretion of collagen from the cell to the culture supernatant. It is known that the main component of the auren extract is berberine, and it is considered that berberine has an action of promoting secretion of collagen from the inside of the cell to the outside of the cell.

[実施例1:皮膚線維芽細胞におけるベルベリン及びコラーゲン合成促進剤(化合物)の共刺激時のコラーゲン産生]
上記の試験例1において、コラーゲン分泌促進作用が示されたオウレン抽出液の主要成分であるベルベリンと、コラーゲン合成促進作用を有する化合物(TGF−β、IGF−1、又はクルクミン)とを組み合わせて添加した場合の、細胞内におけるコラーゲンの合成、及び、細胞外へのコラーゲンの分泌に対する促進作用について以下のように試験した。なお、ベルベリンとしては塩化ベルベリン(和光純薬社製)を使用し、TGF−βとしてはTransforming Growth Factor−β1 human(シグマ アルドリッチ社製)、IGF−1としてはInsulin−like Growth Factor−I human(シグマ アルドリッチ社製)、クルクミンとしてはクルクミン(和光純薬社製)を使用した。
[Example 1: Collagen production upon costimulation of berberine and a collagen synthesis promoter (compound) in dermal fibroblasts]
In Test Example 1 above, berberine, which is a major component of the auren extract that has been shown to promote collagen secretion, and a compound (TGF-β, IGF-1, or curcumin) that has a collagen synthesis promoting effect are added in combination. In this case, the effect of promoting the synthesis of collagen in cells and the secretion of collagen outside the cells was tested as follows. In addition, berberine chloride (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) is used as berberine, transforming growth factor-β1 human (manufactured by Sigma Aldrich) as TGF-β, and Insulin-like Growth Factor-I human (manufactured by Sigma Aldrich). Sigma Aldrich) and curcumin were curcumin (Wako Pure Chemical Industries).

正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)を、12ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、8.0×10細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガス及び95%空気の環境下で24時間培養した。培養液には、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)に牛胎児血清(FBS)を2質量%の濃度で含有した培地を各ウェル1mLずつ使用した。次いで、ベルベリンを1μg/mL、コラーゲン合成促進剤(TGF−β、IGF−1、又はクルクミン)を10ng/mLになるように、単独で又は双方を添加し、培養終了後、培養上清中のコラーゲン量をELISA(Human Collagen Type I ELISA kit;株式会社エーセル製)にて測定した。測定結果はベルベリン又はコラーゲン合成促進剤をいずれも添加しない場合(図中、「−」)のコラーゲン量を100とし、図3に相対値で示す。 Normal human skin fibroblasts (NHDF) were cultured in 12-well culture plates. More specifically, the cells were seeded at a density of 8.0 × 10 4 cells / well and cultured at 37 ° C. in an environment of 5% carbon dioxide gas and 95% air for 24 hours. As a culture solution, a medium containing 2% by mass of fetal bovine serum (FBS) in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) was used at 1 mL per well. Subsequently, berberine was added at 1 μg / mL, and collagen synthesis promoter (TGF-β, IGF-1, or curcumin) was added at 10 ng / mL, either alone or both. The amount of collagen was measured by ELISA (Human Collagen Type I ELISA kit; manufactured by Acer Corporation). The measurement results are shown as relative values in FIG. 3, with the amount of collagen when no berberine or collagen synthesis promoter is added (“−” in the figure) being 100.

培養上清中のコラーゲン量を調べた図3の結果から、ベルベリン及びコラーゲン合成促進剤の双方を添加した培養液で培養した細胞では、それぞれを単独の培養液で培養するよりも、コラーゲン量が増加した。このことからベルベリンとコラーゲン合成促進剤とを組み合わせることで、細胞外へのコラーゲン分泌が顕著に増強されることが認められた。また、一定質量のコラーゲン合成促進剤とベルベリンとを組み合わせた際に、TGF−βとベルベリンとの組み合わせが最も細胞外へのコラーゲン分泌を促進した。TGF−βは試験した3種のコラーゲン合成促進剤の中で最も分子量が大きく、添加した分子数は少なかったことから、一定の物質量にて比較した場合でも、TGF−βは他の化合物よりも、ベルベリンと組み合わせた際の培養上清中へのコラーゲン分泌が最も顕著であったと言える。   From the results shown in FIG. 3 in which the amount of collagen in the culture supernatant was examined, the cells cultured in a culture solution to which both berberine and a collagen synthesis promoter were added had a higher collagen content than those cultured in a single culture solution. Increased. From this, it was confirmed that collagen secretion to the outside of the cell was remarkably enhanced by combining berberine and a collagen synthesis promoter. Further, when a certain amount of collagen synthesis promoter and berberine were combined, the combination of TGF-β and berberine most promoted the secretion of collagen to the outside of the cell. TGF-β has the largest molecular weight among the three types of collagen synthesis promoters tested, and the number of molecules added was small. Therefore, even when compared with a certain amount of substance, TGF-β is higher than other compounds. Also, it can be said that collagen secretion into the culture supernatant when combined with berberine was most prominent.

続いて、細胞内コラーゲン量の変化を検出した。培養上清回収後の細胞をPBS(−)で洗浄し、RIPAバッファーを添加した。その後、SDSサンプルバッファーを加えて加熱還元処理した。これをSDS−PAGEし、ウェスタンブロッティングにて細胞内のコラーゲンを抗体(Anti−Collagen Type I Antibody;メルクミリポア社製)を用いて検出した。測定結果はベルベリン又はコラーゲン合成促進剤をいずれも添加しない場合のコラーゲン量を100とし、図4に相対値で示す。   Subsequently, a change in the amount of intracellular collagen was detected. The cells after collection of the culture supernatant were washed with PBS (−), and RIPA buffer was added. After that, SDS sample buffer was added and heat reduction treatment was performed. This was subjected to SDS-PAGE, and intracellular collagen was detected by Western blotting using an antibody (Anti-Collagen Type I Antibody; manufactured by Merck Millipore). The measurement results are shown as relative values in FIG. 4, with the amount of collagen when no berberine or collagen synthesis promoter is added being taken as 100.

細胞内のコラーゲン量を調べた図4の結果から、コラーゲン合成促進剤を単独で添加した培養液で培養した細胞の細胞内のコラーゲン量は増加し、有効なコラーゲン合成促進能を示した。その一方で、ベルベリンと組み合わせたときには、コラーゲン合成促進剤を単独で使用したときよりもコラーゲン量は減少し、ベルベリンが細胞外へコラーゲンを分泌促進していることが示唆された。   From the results shown in FIG. 4 in which the amount of collagen in the cells was examined, the amount of collagen in the cells cultured in the culture solution to which the collagen synthesis promoter was added alone increased, indicating an effective collagen synthesis promoting ability. On the other hand, when combined with berberine, the amount of collagen decreased compared to when the collagen synthesis promoter was used alone, suggesting that berberine promotes secretion of collagen out of the cell.

図3及び図4の結果から、ベルベリンとコラーゲン合成促進剤との共刺激時では、単独刺激時よりも細胞内コラーゲン量は減少し、培養上清中のコラーゲン量は顕著に増加した。これらのことから、ベルベリンと、TGF−β等のコラーゲン合成促進剤とを組み合わせることにより、細胞外に分泌されるコラーゲン量を顕著に増加させて、全体としてのコラーゲン産生を促進できることが示された。   From the results of FIGS. 3 and 4, the amount of intracellular collagen decreased and the amount of collagen in the culture supernatant significantly increased when co-stimulated with berberine and a collagen synthesis promoter than when stimulated alone. From these results, it was shown that by combining berberine and a collagen synthesis promoter such as TGF-β, the amount of collagen secreted to the outside of the cell can be remarkably increased and the production of collagen as a whole can be promoted. .

[実施例2:皮膚線維芽細胞におけるベルベリン及びコラーゲン合成促進剤(抽出物)の共刺激時のコラーゲン産生]
ベルベリンと、コラーゲン合成促進作用を有する抽出物(ホエイタンパク又はイラクサ抽出物)とを組み合わせて添加した場合の、細胞内におけるコラーゲンの合成、及び、細胞外へのコラーゲンの分泌に対する促進作用について以下のように試験した。なお、ベルベリンとしては塩化ベルベリン(和光純薬社製)を使用し、ホエイタンパクとしては上記の試験例1で使用したものと同様のβラクトグロブリン高含有ホエイタンパク質(Seperex Nutritional社製)を使用した。イラクサ抽出物としてはイラクサ抽出液BG(丸善製薬社製)を使用した。
[Example 2: Collagen production during costimulation of berberine and collagen synthesis promoter (extract) in dermal fibroblasts]
When berberine and an extract having a collagen synthesis promoting action (whey protein or nettle extract) are added in combination, collagen synthesis in the cell and promotion of collagen secretion outside the cell are as follows. Were tested as follows. As berberine, berberine chloride (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used, and as whey protein, the same β-lactoglobulin-rich whey protein (manufactured by Seperex Nutritional) as used in Test Example 1 was used. . As the nettle extract, nettle extract BG (manufactured by Maruzen Pharmaceutical Co., Ltd.) was used.

正常ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)を、12ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、8.0×10細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガス及び95%空気の環境下で24時間培養した。培養液には、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)に牛胎児血清(FBS)を2質量%の濃度で含有した培地を各ウェル1mLずつ使用した。次いで、ベルベリンを1μg/mL、コラーゲン合成促進剤(ホエイタンパク又はイラクサ抽出物)を固形分換算で25μg/mLになるように、単独で又は双方を添加し、培養終了後、培養上清中のコラーゲン量をELISA(Human Collagen Type I ELISA kit;株式会社エーセル製)にて測定した。測定結果はベルベリン又はコラーゲン合成促進剤をいずれも添加しない場合(図中、「−」)のコラーゲン量を100とし、図5に相対値で示す。 Normal human skin fibroblasts (NHDF) were cultured in 12-well culture plates. More specifically, the cells were seeded at a density of 8.0 × 10 4 cells / well and cultured at 37 ° C. in an environment of 5% carbon dioxide gas and 95% air for 24 hours. As a culture solution, a medium containing 2% by mass of fetal bovine serum (FBS) in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) was used at 1 mL per well. Subsequently, berberine is added at 1 μg / mL, and a collagen synthesis promoter (whey protein or nettle extract) is added alone or both so that the solid content is 25 μg / mL. The amount of collagen was measured by ELISA (Human Collagen Type I ELISA kit; manufactured by Acer Corporation). The measurement results are shown as relative values in FIG. 5, where the amount of collagen when no berberine or collagen synthesis promoter is added (“−” in the figure) is 100.

図5の結果から、ベルベリン及びコラーゲン合成促進剤の双方を添加した培養液で培養した細胞では、それぞれ単独の培養液で培養した細胞よりも、培養上清中のコラーゲン量が増加した。このことから、ベルベリンとコラーゲン合成促進剤とを組み合わせることで、細胞外へのコラーゲン分泌が顕著に増強されることが認められた。また、一定量のコラーゲン合成促進剤とベルベリンとを組み合わせたときは、ホエイタンパクとの組み合わせが、最も細胞外へのコラーゲン分泌を増強した。   From the result of FIG. 5, the amount of collagen in the culture supernatant increased in the cells cultured in the culture solution to which both berberine and the collagen synthesis promoter were added, compared to the cells cultured in the single culture solution. From this, it was recognized that the combination of berberine and a collagen synthesis promoter significantly enhances the secretion of collagen to the outside of the cell. When a certain amount of collagen synthesis promoter and berberine were combined, the combination with whey protein enhanced the secretion of collagen most extracellularly.

続いて、細胞内のコラーゲン量の変化を確認するために、細胞内のコラーゲン量を検出した。培養上清回収後の細胞をPBS(−)で洗浄し、RIPAバッファーを添加した。その後、SDSサンプルバッファーを加えて加熱還元処理した。これをSDS−PAGEし、ウェスタンブロッティングにて細胞内のコラーゲンを抗体(Anti−Collagen Type I Antibody;メルクミリポア社製)を用いて検出した。測定結果はベルベリン又はコラーゲン合成促進剤をいずれも添加しない場合のコラーゲン量を100とし、図6に相対値で示す。   Subsequently, in order to confirm a change in the amount of collagen in the cell, the amount of collagen in the cell was detected. The cells after collection of the culture supernatant were washed with PBS (−), and RIPA buffer was added. After that, SDS sample buffer was added and heat reduction treatment was performed. This was subjected to SDS-PAGE, and intracellular collagen was detected by Western blotting using an antibody (Anti-Collagen Type I Antibody; manufactured by Merck Millipore). The measurement results are shown as relative values in FIG. 6 with the amount of collagen when no berberine or collagen synthesis promoter is added being 100.

図6の結果から、コラーゲン合成促進剤を単独で添加した培養液で培養した細胞の細胞内のコラーゲン量は増加した。その一方で、ベルベリンと組み合わせたときには、コラーゲン合成促進剤単独のときよりもコラーゲン量は減少した。これらの結果は、細胞外へのコラーゲンの分泌をベルベリンが促進していることを示唆している。   From the result of FIG. 6, the amount of collagen in the cells of the cells cultured in the culture solution to which the collagen synthesis promoter was added alone increased. On the other hand, when combined with berberine, the amount of collagen decreased compared to the case of the collagen synthesis promoter alone. These results suggest that berberine promotes extracellular secretion of collagen.

上記の実施例1及び実施例2の結果から、ベルベリンと、様々なコラーゲン合成促進剤とを組み合わせることで、細胞外に分泌されるコラーゲン量を顕著に増加させ、結果としてコラーゲン産生を効果的に促進できることを見出した。また、コラーゲン合成促進剤の中でも、特にTGF−βやホエイタンパクと、ベルベリン類とを組み合わせることで、より高いコラーゲン産生促進効果が奏されるという知見を得た。   From the results of Example 1 and Example 2 above, by combining berberine and various collagen synthesis promoters, the amount of collagen secreted outside the cell is remarkably increased, and as a result, collagen production is effectively improved. I found that it can be promoted. In addition, among the collagen synthesis promoters, it has been found that a higher collagen production promoting effect can be achieved by combining TGF-β or whey protein with berberine.

[製剤例1:化粧水]
以下に示す組成の化粧水を次のように調製した。成分(1)〜(7)を成分(8)に加え、混合した。
(成分) (質量%)
(1)オウレン根エキス 0.01
(2)ホエイタンパク 0.10
(3)PEG−50水添ヒマシ油 0.20
(4)グリセリン 5.00
(5)BG 5.00
(6)pH調整剤 適量
(7)防腐剤 適量
(8)精製水 残余
計 100
[Formulation Example 1: Lotion]
A lotion having the composition shown below was prepared as follows. Ingredients (1) to (7) were added to ingredient (8) and mixed.
(Ingredient) (mass%)
(1) Ouren root extract 0.01
(2) Whey protein 0.10
(3) PEG-50 hydrogenated castor oil 0.20
(4) Glycerin 5.00
(5) BG 5.00
(6) pH adjuster appropriate amount (7) preservative appropriate amount
(8) Purified water balance 100

[製剤例2:乳液]
以下に示す組成の乳液を次のように調製した。成分(3)〜(7)を約80℃に加熱混合した。これに、約80℃に加熱混合した成分(8)、(9)、(12)、(13)を加え、室温まで冷却した。成分(10)、(11)を順次添加し、成分(1)、(2)を最後に添加した。
(成分) (質量%)
(1)オウレン根エキス 0.10
(2)ホエイタンパク 1.00
(3)スクワラン 0.50
(4)ジメチコン 0.50
(5)ポリソルベート80 0.50
(6)ステアリン酸グリセリル 1.00
(7)ベヘニルアルコール 1.00
(8)グリセリン 5.00
(9)BG 8.00
(10)カルボマー 0.20
(11)水酸化Na 0.06
(12)防腐剤 適量
(13)精製水 残余
計 100
[Formulation Example 2: Emulsion]
An emulsion having the composition shown below was prepared as follows. Ingredients (3) to (7) were heated and mixed at about 80 ° C. To this, components (8), (9), (12) and (13) heated and mixed at about 80 ° C. were added and cooled to room temperature. Components (10) and (11) were added sequentially, and components (1) and (2) were added last.
(Ingredient) (mass%)
(1) Ouren root extract 0.10
(2) Whey protein 1.00
(3) Squalane 0.50
(4) Dimethicone 0.50
(5) Polysorbate 80 0.50
(6) Glyceryl stearate 1.00
(7) Behenyl alcohol 1.00
(8) Glycerin 5.00
(9) BG 8.00
(10) Carbomer 0.20
(11) Na hydroxide 0.06
(12) Preservative appropriate amount
(13) Purified water balance 100

[製剤例3:クリーム]
以下に示す組成のクリームを次のように調製した。成分(3)〜(9)を約80℃に加熱混合した。これに、約80℃に加熱混合した成分(10)、(11)、(14)、(15)を加え、室温まで冷却した。成分(12)、(13)を順次添加し、成分(1)、(2)を最後に添加した。
(成分) (質量%)
(1)オウレン根エキス 0.10
(2)ホエイタンパク 1.00
(3)スクワラン 0.70
(4)ジメチコン 1.00
(5)ステアリン酸 5.50
(6)ステアリン酸PEG−40 1.20
(7)ステアリン酸PEG−25 0.40
(8)ベヘニルアルコール 3.50
(9)エチルヘキサン酸セチル 4.60
(10)グリセリン 2.00
(11)BG 3.00
(12)カルボマー 0.25
(13)水酸化Na 0.08
(14)防腐剤 適量
(15)精製水 残余
計 100
[Formulation Example 3: Cream]
A cream having the following composition was prepared as follows. Components (3) to (9) were heated and mixed at about 80 ° C. To this, components (10), (11), (14) and (15) heated and mixed at about 80 ° C. were added and cooled to room temperature. Components (12) and (13) were added sequentially, and components (1) and (2) were added last.
(Ingredient) (mass%)
(1) Ouren root extract 0.10
(2) Whey protein 1.00
(3) Squalane 0.70
(4) Dimethicone 1.00
(5) Stearic acid 5.50
(6) PEG-40 stearate 1.20
(7) PEG-25 stearate 0.40
(8) Behenyl alcohol 3.50
(9) Cetyl ethylhexanoate 4.60
(10) Glycerin 2.00
(11) BG 3.00
(12) Carbomer 0.25
(13) Na hydroxide 0.08
(14) Preservative appropriate amount
(15) Purified water balance 100

[製剤例4:ハードカプセル]
以下に示す組成のハードカプセルを次のように調製した。成分(1)〜(6)を混合してカプセルに充填し、ハードカプセルとした。
(成分) (質量%)
(1)オウレン根エキス 10.00
(2)ホエイタンパク 10.00
(3)アスコルビン酸ナトリウム 18.00
(4)デキストリン 24.00
(5)グリセリン脂肪酸エステル 0.50
(6)粉糖 残余
計 100
[Formulation Example 4: Hard capsule]
Hard capsules having the composition shown below were prepared as follows. Components (1) to (6) were mixed and filled into capsules to obtain hard capsules.
(Ingredient) (mass%)
(1) Ouren root extract 10.00
(2) Whey protein 10.00
(3) Sodium ascorbate 18.00
(4) Dextrin 24.00
(5) Glycerin fatty acid ester 0.50
(6) Powdered sugar Total remaining 100

本発明に係るコラーゲン産生促進用組成物は、優れたコラーゲン産生促進能を有するため、例えば、抗シワ用組成物、抗タルミ用組成物、角膜障害、関節障害、炎症性疾患等の予防又は治療用組成物などとして好適に利用可能である。   Since the composition for promoting collagen production according to the present invention has an excellent ability to promote collagen production, for example, prevention or treatment of an anti-wrinkle composition, an anti-tarmi composition, a corneal disorder, a joint disorder, an inflammatory disease, etc. It can be suitably used as a composition for use.

Claims (8)

(A)細胞内から細胞外へのコラーゲンの分泌を促進するための、ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上と、
(B)細胞内でのコラーゲンの合成を促進するための、コラーゲン合成促進剤と
を含有する、コラーゲン産生促進用組成物。
(A) one or more selected from the group consisting of berberine, berberine analogs and salts thereof, and a plant extract containing berberine for promoting the secretion of collagen from the inside of the cell to the outside of the cell;
(B) A composition for promoting collagen production, comprising a collagen synthesis promoter for promoting the synthesis of collagen in cells.
前記成分(B)が、TGF−β及び/又はTGF−β様作用を有する成分である、請求項1に記載のコラーゲン産生促進用組成物。   The composition for promoting collagen production according to claim 1, wherein the component (B) is a component having a TGF-β and / or TGF-β-like action. 前記成分(B)が、TGF−β、ホエイタンパク質、及びホエイタンパク質の断片からなる群から選択される1種以上である、請求項1に記載のコラーゲン産生促進用組成物。   The composition for promoting collagen production according to claim 1, wherein the component (B) is at least one selected from the group consisting of TGF-β, whey protein, and whey protein fragments. 前記成分(B)100質量部に対して、前記成分(A)0.05質量部以上を含有する、請求項1〜3のいずれかに記載のコラーゲン産生促進用組成物。   The composition for promoting collagen production according to any one of claims 1 to 3, comprising 0.05 part by mass or more of the component (A) with respect to 100 parts by mass of the component (B). 請求項1〜4のいずれかに記載のコラーゲン産生促進用組成物を含有する、皮膚外用剤。   A skin external preparation containing the composition for promoting collagen production according to any one of claims 1 to 4. 請求項1〜4のいずれかに記載のコラーゲン産生促進用組成物を含有する、飲食品。   Food / beverage products containing the composition for a collagen production promotion in any one of Claims 1-4. 請求項1〜4のいずれかに記載のコラーゲン産生促進用組成物を含有する、医薬品。   The pharmaceutical containing the composition for collagen production promotion in any one of Claims 1-4. ベルベリン、ベルベリン類縁体、及びそれらの塩、並びにベルベリンを含有する植物抽出物からなる群から選択される1種以上を含有する、細胞内から細胞外へのコラーゲンの分泌を促進するための、コラーゲン分泌促進剤。   Collagen for promoting secretion of collagen from inside to outside of cell, comprising at least one selected from the group consisting of berberine, berberine analogs and salts thereof, and plant extract containing berberine Secretagogue.
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