JP2015124212A - 自己組織化ペプチドゲル - Google Patents
自己組織化ペプチドゲル Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015124212A JP2015124212A JP2013271539A JP2013271539A JP2015124212A JP 2015124212 A JP2015124212 A JP 2015124212A JP 2013271539 A JP2013271539 A JP 2013271539A JP 2013271539 A JP2013271539 A JP 2013271539A JP 2015124212 A JP2015124212 A JP 2015124212A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- self
- peptide
- gel
- assembling peptide
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
【解決手段】自己組織化ペプチドと水とを含み、該自己組織化ペプチドの自己組織化によって形成されたゲルであって、該自己組織化ペプチドと水とを泡状の気泡分散体になるまで混合し、次いで、脱泡することを含む製造方法によって調製された、ゲル。
【選択図】なし
Description
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドと水とが、内面に凹凸形状を有する容器内で自転公転撹拌装置を用いて混合される。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドと水とが、撹拌羽根を用いて混合される。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドと水とが、内面に凹凸形状を有する容器内で撹拌羽根を用いて混合される。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドの濃度が、0.1重量%〜10.0重量%である。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドを構成するアミノ酸残基のpH7.0における電荷の総和が、−3〜−1または+1〜+3である。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドが、繊維状の分子集合体を形成する。
本発明の別の局面によれば、ゲルの製造方法が提供される。該製造方法は、自己組織化ペプチドと水とを混合して、泡状の気泡分散体を得ること、該気泡分散体を脱泡して、自己組織化ペプチド溶液を得ること、該自己組織化ペプチド溶液を静置して、自己組織化ペプチドを自己組織化させること、を含む。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドと水との混合が、機械的せん断力を付与しながら行われる。
1つの実施形態において、上記自己組織化ペプチドと水との混合が、内面に凹凸形状を有する容器内で自転公転撹拌装置を用いて行われる。
本発明のゲルは、自己組織化ペプチドと水とを含み、該自己組織化ペプチドの自己組織化によって形成された自己組織化ペプチドゲルである。本明細書において、ゲルとは、粘性的な性質と弾性的な性質とを併せ持つ粘弾性物質を意味する。具体的には、動的粘弾性測定を行なって、貯蔵弾性率G’および損失弾性率G’’を測定したときに、「G’>G’’」となる物質をゲルということができる。
自己組織化ペプチドとしては、水溶液中においてペプチド分子同士の相互作用を介して自発的に集合してゲルを形成し得る任意の適切なペプチドが用いられ得る。より具体的には、水溶液中においてペプチド分子同士の相互作用を介して自発的に集合して繊維状の分子集合体を形成し、当該分子集合体間の相互作用により三次元網目構造を発達させてゲルを形成し得るペプチドが好ましく用いられ得る。ペプチド分子同士の相互作用としては、例えば、水素結合、イオン間相互作用、ファンデルワールス力等の静電的相互作用および疎水性相互作用が挙げられる。また、繊維状の分子集合体の形成は、顕微鏡観察により確認することができる。
a1b1c1b2a2b3db4a3b5c2b6a4 (I)
(上記アミノ酸配列中、a1〜a4は、塩基性アミノ酸残基であり;b1〜b6は、非電荷極性アミノ酸残基および/または疎水性アミノ酸残基であり、ただし、そのうちの少なくとも5個は、疎水性アミノ酸残基であり;c1およびc2は、酸性アミノ酸残基であり;dは、疎水性アミノ酸残基である。)
n−RLDLRLALRLDLR−c(配列番号1)
n−RLDLRLLLRLDLR−c(配列番号2)
n−RADLRLALRLDLR−c(配列番号3)
n−RLDLRLALRLDAR−c(配列番号4)
n−RADLRLLLRLDLR−c(配列番号5)
n−RADLRLLLRLDAR−c(配列番号6)
n−RLDLRALLRLDLR−c(配列番号7)
n−RLDLRLLARLDLR−c(配列番号8)
n−RASARADARASARADA−c(配列番号9)
n−RANARADARANARADA−c(配列番号10)
n−RAAARADARAAARADA−c(配列番号11)
n−RASARADARADARASA−c(配列番号12)
n−RADARASARASARADA−c(配列番号13)
n−RASARASARASARADA−c(配列番号14)
n−RASARADARASA−c (配列番号15)
n−KASAKAEAKASAKAEA−c(配列番号16)
n−SAEAKAEASAEAKAEA−c(配列番号17)
n−KLSLKLDLKLSL−c (配列番号18)
n−KLALKLDLKLAL−c (配列番号19)
水としては、イオン交換水、蒸留水等の精製された水が好ましく用いられ得る。
本発明のゲルは、必要に応じて任意の適切な添加物をさらに含み得る。添加物の具体例としては、pH調整剤;緩衝剤;等張化剤;塩類;アミノ酸類;ビタミン類;アルコール類;細胞培養用培地成分;蛋白質;薬物等が挙げられる。これらの添加物は、単独で用いられてもよく、二種以上を組み合わせて用いられてもよい。
本発明のゲルの製造方法は、代表的には、自己組織化ペプチドと水とを混合して、泡状の気泡分散体を得ること(混合工程)、得られた気泡分散体を脱泡して、自己組織化ペプチド溶液を得ること(脱泡工程)、および、得られた自己組織化ペプチド溶液を静置して、自己組織化ペプチドを自己組織化させること(ゲル化工程)を含む。
混合工程においては、自己組織化ペプチドと水と任意の添加物とを混合して、泡状の気泡分散体、好ましくは均一な細かい泡状(クリーム、ホイップ、メレンゲのような状態)の気泡分散体を得る。
脱泡工程においては、得られた気泡分散体を脱泡して、自己組織化ペプチド溶液を得る。なお、本発明において、脱泡は脱気を含み得る。
ゲル化工程においては、得られた自己組織化ペプチド溶液を静置して、自己組織化ペプチドを自己組織化させる。これにより、自己組織化ペプチドゲルが得られる。なお、静置は、自己組織化ペプチドが自己組織化し得る範囲であれば、完全な静置でなくてもよい。
本発明のゲルの製造方法は、必要に応じて任意の適切な他の工程を含み得る。当該他の工程としては、ろ過等の精製工程、高圧蒸気滅菌、放射線滅菌、乾熱滅菌等の滅菌工程、包装容器への分注工程等が挙げられる。
動的粘弾性測定装置である回転式レオメーター(TA instruments社製、製品名「ADVANCED RHEOMETER AR 1000」)を用いて、ゲルの貯蔵弾性率G’を測定した。具体的には、以下のとおりである。まず、試料に接触させるためのジオメトリー(アルミニウム製コーン、直径20mm、コーン角1°、ギャップ24μm)と試料台を一定の温度に保つための恒温槽とをレオメーターに取り付けた。次いで、温度:37℃、トルク:1μN・m、周波数:0.5rad/s〜100rad/sの測定条件下、以下の測定手順で1つの試料について3回測定し、1rad/sのときの値の平均値を貯蔵弾性率G’とした。
(1)ピペットを用いて55μLの試料をレオメーターの試料台に配置する。
(2)ジオメトリーを試料台から24μmのギャップまで移動させ、試料と接触させる。
(3)ジオメトリーをわずかに動かし、試料となじませる。
(4)ジオメトリーの動きを止めてから15秒後(この15秒の間に、試料からの溶媒の揮発を防止するためのソルベントトラップを取り付ける)に、測定を開始する。
pHは、ポータブルpHメーター(堀場製作所社製、製品番号「B−712」)を用いて測定した。
得られたゲルの外観を目視で観察し、以下の基準で評価した。
良好:気泡および白濁が認められず、透明である。
不良:気泡および/または白濁が認められる。
表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。具体的な手順は以下のとおりである。すなわち、自己組織化ペプチド(SPG−178:N末端がアセチル化され、C末端がアミド化された配列番号1のペプチド)およびトレハロース・二水和物を秤量し、図1に示すような側壁の内面に凹凸形状を有する容器(以下、「凹凸形状容器」と称する)に投入した。次いで、該容器に水を投入し、蓋をした。該容器を自転公転撹拌装置(株式会社シンキー製、製品番号「ARE−310」)にセットし、撹拌モードで30秒処理した。
表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。具体的な手順は以下のとおりである。すなわち、自己組織化ペプチド(SPG−178)およびスクロースを秤量し、遠沈管に投入した。次いで、水を投入し、超音波型ホモジナイザー(Sonic&Material,Inc.社製、製品番号「Vibra−Cell VC−505」)を用いて500Wの出力で5分処理して混合した。得られた混合液を目視で確認したところ、細かい泡が所々に混入しているものの、全体としてはほぼ透明の液体であった。
トレハロース・二水和物濃度を変更したこと以外は実施例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
自己組織化ペプチド濃度を変更し、トレハロース・二水和物を除いたこと以外は実施例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
自己組織化ペプチド濃度を変更し、トレハロース・二水和物を除いたこと以外は実施例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
スクロースの代わりにトレハロース・二水和物を用い、その濃度を変更したこと以外は比較例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
自己組織化ペプチド濃度を変更したこと以外は比較例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
自己組織化ペプチド濃度を変更したこと以外は比較例1と同様の手順で表1に示す組成の自己組織化ペプチドゲルを調製した。
実施例2で得られたゲルおよび比較例2で得られたゲルに関して、HATRサンプリングアクセサリーとセレン化亜鉛結晶からなるトラフプレートを設置したフーリエ変換赤外分光光度計(パーキンエルマー社製、製品名「Spectrum One」)を用いて全反射吸収法にて以下の条件でIR測定を行った。IR測定結果のグラフを図2に示す。
<IR測定条件>
scan number:32回
波数の範囲:400〜4000cm−1
分解能:4cm−1
scan range/cm−1:4000 650(400)
OPD velocity:0.2cm/sec
測定温度:室温
セレン化亜鉛結晶への赤外線入射角:45°
Claims (10)
- 自己組織化ペプチドと水とを含み、該自己組織化ペプチドの自己組織化によって形成されたゲルであって、
該自己組織化ペプチドと水とを泡状の気泡分散体になるまで混合し、次いで、脱泡することを含む製造方法によって調製された、ゲル。 - 前記自己組織化ペプチドと水とが、内面に凹凸形状を有する容器内で自転公転撹拌装置を用いて混合される、請求項1に記載のゲル。
- 前記自己組織化ペプチドと水とが、撹拌羽根を用いて混合される、請求項1に記載のゲル。
- 前記自己組織化ペプチドと水とが、内面に凹凸形状を有する容器内で撹拌羽根を用いて混合される、請求項1に記載のゲル。
- 前記自己組織化ペプチドの濃度が、0.1重量%〜10.0重量%である、請求項1から4のいずれかに記載のゲル。
- 前記自己組織化ペプチドを構成するアミノ酸残基のpH7.0における電荷の総和が、−3〜−1または+1〜+3である、請求項1から5のいずれかに記載のゲル。
- 前記自己組織化ペプチドが繊維状の分子集合体を形成する、請求項1から6のいずれかに記載のゲル。
- 自己組織化ペプチドと水とを混合して、泡状の気泡分散体を得ること、
該気泡分散体を脱泡して、自己組織化ペプチド溶液を得ること、および、
得られた自己組織化ペプチド溶液を静置して、自己組織化ペプチドを自己組織化させること
を含む、ゲルの製造方法。 - 前記自己組織化ペプチドと水との混合が、機械的せん断力を付与しながら行われる、請求項8に記載の製造方法。
- 前記自己組織化ペプチドと水との混合が、内面に凹凸形状を有する容器内で自転公転撹拌装置を用いて行われる、請求項8または9に記載の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013271539A JP6490897B2 (ja) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 自己組織化ペプチドゲル |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013271539A JP6490897B2 (ja) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 自己組織化ペプチドゲル |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015124212A true JP2015124212A (ja) | 2015-07-06 |
JP6490897B2 JP6490897B2 (ja) | 2019-03-27 |
Family
ID=53535180
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013271539A Active JP6490897B2 (ja) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 自己組織化ペプチドゲル |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6490897B2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018168393A1 (ja) * | 2017-03-16 | 2018-09-20 | 大王製紙株式会社 | セルロースナノファイバーフィルムの製造方法 |
WO2019142886A1 (ja) * | 2018-01-19 | 2019-07-25 | 株式会社メニコン | 免疫原性組成物 |
JP2020093221A (ja) * | 2018-12-13 | 2020-06-18 | 株式会社ビートセンシング | 粉砕装置用容器及びこれを備えた粉砕装置。 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10505106A (ja) * | 1995-04-01 | 1998-05-19 | ザ ユニバーシティ オブ リーズ | βシート形成ペプチドおよびそれらから形成されるゲル |
JP2008539257A (ja) * | 2005-04-25 | 2008-11-13 | マサチューセッツ・インスティテュート・オブ・テクノロジー | 止血および他の生理学的活性を促進するための組成物および方法 |
WO2010103887A1 (ja) * | 2009-03-09 | 2010-09-16 | 株式会社メニコン | 自己組織化ペプチドおよび高強度ペプチドゲル |
WO2012144609A1 (ja) * | 2011-04-22 | 2012-10-26 | 日産化学工業株式会社 | ヒドロゲル形成材料 |
-
2013
- 2013-12-27 JP JP2013271539A patent/JP6490897B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10505106A (ja) * | 1995-04-01 | 1998-05-19 | ザ ユニバーシティ オブ リーズ | βシート形成ペプチドおよびそれらから形成されるゲル |
JP2008539257A (ja) * | 2005-04-25 | 2008-11-13 | マサチューセッツ・インスティテュート・オブ・テクノロジー | 止血および他の生理学的活性を促進するための組成物および方法 |
WO2010103887A1 (ja) * | 2009-03-09 | 2010-09-16 | 株式会社メニコン | 自己組織化ペプチドおよび高強度ペプチドゲル |
WO2012144609A1 (ja) * | 2011-04-22 | 2012-10-26 | 日産化学工業株式会社 | ヒドロゲル形成材料 |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018168393A1 (ja) * | 2017-03-16 | 2018-09-20 | 大王製紙株式会社 | セルロースナノファイバーフィルムの製造方法 |
WO2019142886A1 (ja) * | 2018-01-19 | 2019-07-25 | 株式会社メニコン | 免疫原性組成物 |
CN111615401A (zh) * | 2018-01-19 | 2020-09-01 | 株式会社目立康 | 免疫原性组合物 |
JPWO2019142886A1 (ja) * | 2018-01-19 | 2021-01-07 | 株式会社メニコン | 免疫原性組成物 |
EP3741388A4 (en) * | 2018-01-19 | 2021-11-17 | Menicon Co., Ltd. | IMMUNOGENIC COMPOSITION |
US11472841B2 (en) | 2018-01-19 | 2022-10-18 | Menicon Co., Ltd. | Immunogenic composition |
CN111615401B (zh) * | 2018-01-19 | 2024-03-22 | 株式会社目立康 | 免疫原性组合物及其制造方法 |
JP2020093221A (ja) * | 2018-12-13 | 2020-06-18 | 株式会社ビートセンシング | 粉砕装置用容器及びこれを備えた粉砕装置。 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6490897B2 (ja) | 2019-03-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Yang et al. | Integration of human umbilical cord mesenchymal stem cells-derived exosomes with hydroxyapatite-embedded hyaluronic acid-alginate hydrogel for bone regeneration | |
JP6159359B2 (ja) | 自己組織化ペプチドおよび高強度ペプチドゲル | |
Sun et al. | Binary complex based on zein and propylene glycol alginate for delivery of quercetagetin | |
Liu et al. | Soy protein nanoparticle aggregates as pickering stabilizers for oil-in-water emulsions | |
Hu et al. | Biomaterials from ultrasonication-induced silk fibroin− hyaluronic acid hydrogels | |
Montembault et al. | Rheometric study of the gelation of chitosan in aqueous solution without cross-linking agent | |
Dai et al. | Formation and characterization of zein-propylene glycol alginate-surfactant ternary complexes: Effect of surfactant type | |
JP6490897B2 (ja) | 自己組織化ペプチドゲル | |
JPWO2006051950A1 (ja) | 架橋ヒアルロン酸ゲルの製造方法 | |
US20190046429A1 (en) | Dermal filler composed of macroporous chitosan microbeads and cross-linked hyaluronic acid | |
Nilsen-Nygaard et al. | Propylene glycol alginate (PGA) gelled foams: A systematic study of surface activity and gelling properties as a function of degree of esterification | |
EP3285781B1 (fr) | Solution aqueuse homogene de chitosane injectable presentant un ph proche du ph physiologique | |
JP6211680B2 (ja) | プルランゲルならびにその製造方法および利用 | |
Chegini et al. | Shear sensitive injectable hydrogels of cross-linked tragacanthic acid for ocular drug delivery: Rheological and biological evaluation | |
RU2477138C1 (ru) | Способ получения заполняющего материала для пластической хирургии и инструментальной косметологии, заполняющий материал и способ введения заполняющего материала в проблемную зону | |
WO2015098515A1 (ja) | 止血材 | |
Thi-Hiep et al. | Injectable in situ crosslinkable hyaluronan-polyvinyl phosphonic acid hydrogels for bone engineering | |
JP6081670B2 (ja) | 視認性確保材および視認性確保材吐出装置 | |
WO2024043282A1 (ja) | エステル化タンパク質及びその製造方法 | |
JP2008280408A (ja) | 球状ヒアルロン酸ゲル粒子の製造方法 | |
WO2022236168A1 (en) | Systems, kits, and methods for forming in situ silk fibroin fibers and/or aerosols | |
Xiao et al. | Optimized preparation of thiolated hyaluronic acid hydrogel with controllable degree of substitution |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20161004 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20171004 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20171122 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180205 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180207 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180801 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180927 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190219 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190228 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6490897 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |