JP2014527801A5 - - Google Patents
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Claims (15)
- 核酸ライブラリーから安定かつバイオアベイラブルなペプチド(複数も可)をコードする1つ以上の核酸を選択することを含む、核酸のライブラリーから1つ以上の安定かつバイオアベイラブルなペプチドをコードする1つ以上の核酸を選択するための方法であって、核酸ライブラリーの1つ以上のメンバーが、1つ以上の非天然アミノ酸および/または天然のコグネイトtRNAを欠くコドンを含有する方法。
- 核酸がRNAおよび/またはライブラリーがRNAライブラリーであり、
任意に、該RNAおよび/または該mRNAを含むRNAライブラリーの1つ以上のメンバーが直鎖状または環状である、請求項1に記載の方法。 - 終止コドンを抑制するために、アミノ酸を含む1つ以上のtRNAをライブラリーに補足することを、さらに含む、請求項1または2に記載の方法。
- さらに、以下の工程を含む、請求項1記載の方法:
a.予め決定された特異性に関して選択されたペプチドのライブラリーを、安定性を付加するアミノ酸が組み込まれるように変異させること;
b.1つ以上の終止コドンを組み込むこと;
c.終止コドンを抑制するために所望のアミノ酸がチャージされたtRNAを補足すること;
d.核ライブラリーの個々の配列の1つ以上を環化すること;
e.プロテアーゼ耐性に関してライブラリーの個々の配列を選択すること
を含み、それによって、1つ以上のペプチドをコードする1つ以上の核酸に関して選択する方法。 - 核酸ライブラリーがDNAライブラリーまたはRNAライブラリーである、請求項1または4に記載の方法。
- 1つ以上の核酸をペプチドに翻訳することをさらに含む、請求項1〜5のいずれか1項記載の方法。
- ペプチドをビオチン分子またはビオチンアナログに結合を介してコンジュゲートすることをさらに含む、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
- ビオチン分子またはビオチンアナログが、還元可能なビオチン分子;ペプチドのリジンの側鎖上のビオチン;アミド結合またはエステル結合を介してペプチドに連結されたビオチン、チオエステル結合またはエステル結合を介してペプチドに連結されたビオチンの1つ以上である、請求項7に記載の方法。
- ペプチドをコードする核酸を単離することをさらに含む、請求項6から8のいずれか1項記載の方法。
- 前記選択が細胞表面タンパク質、哺乳動物細胞培養または組織、および/または精製タンパク質ターゲットからなる群より選択されるいずれかに対して行われ、該精製タンパク質ターゲットは任意にSUPRターゲットである、請求項4〜9のいずれか1項記載の方法。
- インビボ治療有用性に関してペプチドをスクリーニングすることをさらに含み、該インビボ治療有用性が、任意にがん細胞の成長を阻害するかがん細胞を殺す能力、前がん細胞を阻害するか殺す能力、および所望のターゲット受容体を発現する細胞に結合する能力からなる群より選択される1つ以上である、請求項6〜10のいずれか1項記載の方法。
- 請求項4に記載の方法によって調製される単離RNAライブラリー。
- 請求項6に記載の方法によって調製される単離ペプチドライブラリー。
- 請求項6〜10のいずれか1項記載の方法によって調製される単離ペプチド。
- 請求項12記載の単離RNAライブラリー、請求項13記載の単離ペプチドライブラリー、または請求項14記載の単離ペプチドの1つ以上と、担体とを含む組成物。
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