JP2013544069A - 効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法 - Google Patents
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Abstract
【選択図】なし
Description
本発明の目的は、iPS細胞の樹立効率を改善する手段を提供することであり、それを用いた効率的なiPS細胞の製造方法を提供することである。
[1]iPS細胞の樹立効率の改善方法であって、核初期化工程において、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子を体細胞に接触させることを含む、方法。
[2]前記タンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[1]記載の方法。
[3]サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される因子を含有してなる、iPS細胞の樹立効率改善剤。
[4]前記タンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[3]記載の剤。
[5]体細胞に核初期化物質と、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子とを接触させることを含む、iPS細胞の製造方法。
[6]核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Linファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、上記[5]記載の方法。
[7]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、上記[6]記載の方法。
[8]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[6]記載の方法。
[9]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[6]記載の方法。
[10]サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[5]〜[9]のいずれかに記載の方法。
[11]サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される因子と、核初期化物質とを含有してなる、体細胞からのiPS細胞誘導剤。
[12]核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Linファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、上記[11]記載の剤。
[13]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、上記[12]記載の剤。
[14]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[12]記載の剤。
[15]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[12]記載の剤。
[16]サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[11]〜[15]のいずれかに記載の剤。
[17]サイクリンD1、サイクリンD2又はサイクリンD3をコードする外来性核酸を含む、iPS細胞。
[18]外来性核酸がゲノムに組み込まれている、上記[17]記載のiPS細胞。
[19]上記[17]又は[18]記載のiPS細胞に対して分化誘導処理を行い、iPS細胞を体細胞に分化させることを含む、体細胞の製造方法。
[20]下記の工程:
(1)上記[5]〜[10]のいずれかに記載の方法によりiPS細胞を製造する工程、及び
(2)上記工程(1)で得られたiPS細胞に分化誘導処理を行い、iPS細胞を体細胞に分化させる工程、
を含む、体細胞の製造方法。
[21]iPS細胞の樹立効率改善のための、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子の使用。
[22]サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[21]記載の使用。
[23]iPS細胞の製造のための、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子の使用であって、該因子を核初期化物質とともに体細胞に接触させる、使用。
[24]核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Lin28ファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、上記[23]記載の使用。
[25]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、上記[24]記載の使用。
[26]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[24]記載の使用。
[27]核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、上記[24]記載の使用。
[28]サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、上記[23]〜[27]のいずれかに記載の使用。
[29]体細胞の製造における、上記[17]又は[18]記載のiPS細胞の使用。
[30]体細胞を製造するための細胞ソースとしての、上記[17]又は[18]記載のiPS細胞。
本発明は、iPS細胞の樹立効率の改善方法であって、体細胞の核初期化工程において、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子(以下、本発明の樹率効率改善因子ともいう)を体細胞に接触させることによる、方法を提供する。ここで、体細胞の核初期化は、体細胞に核初期化物質を導入することにより行われるので、本発明はまた、体細胞に上記因子と核初期化物質とを接触させることによる、iPS細胞の製造方法を提供する。尚、本明細書では、核初期化物質のみを単独で体細胞に導入してもiPS細胞が樹立できず、本発明の樹立効率改善因子とともに核初期化物質を体細胞に接触させることによりiPS細胞が樹立される場合も、「樹立効率の改善」に該当するものとして取り扱う。
本発明においてiPS細胞作製のための出発材料として用いることのできる細胞は、哺乳動物(例えば、ヒト、マウス、サル、ブタ、ラット等)由来の生殖細胞以外のいかなる細胞であってもよく、例えば、角質化する上皮細胞(例、角質化表皮細胞)、粘膜上皮細胞(例、舌表層の上皮細胞)、外分泌腺上皮細胞(例、乳腺細胞)、ホルモン分泌細胞(例、副腎髄質細胞)、代謝・貯蔵用の細胞(例、肝細胞)、境界面を構成する内腔上皮細胞(例、I型肺胞細胞)、内鎖管の内腔上皮細胞(例、血管内皮細胞)、運搬能をもつ繊毛のある細胞(例、気道上皮細胞)、細胞外マトリックス分泌用細胞(例、線維芽細胞)、収縮性細胞(例、平滑筋細胞)、血液と免疫系の細胞(例、Tリンパ球)、感覚に関する細胞(例、桿細胞)、自律神経系ニューロン(例、コリン作動性ニューロン)、感覚器と末梢ニューロンの支持細胞(例、随伴細胞)、中枢神経系の神経細胞とグリア細胞(例、星状グリア細胞)、色素細胞(例、網膜色素上皮細胞)、及びそれらの前駆細胞(組織前駆細胞)等が挙げられる。細胞の分化の程度や細胞を採取する動物の齢等に特に制限はなく、未分化な前駆細胞(体性幹細胞も含む)であっても、最終分化した成熟細胞であっても、同様に本発明における体細胞の起源として使用することができる。ここで未分化な前駆細胞としては、例えば神経幹細胞、造血幹細胞、間葉系幹細胞、歯髄幹細胞等の組織幹細胞(体性幹細胞)が挙げられる。
サイクリンDは、細胞周期の進行の制御に関与するサイクリンタンパク質ファミリーのメンバーである。サイクリンDの合成は、G1期の間に開始され、G1/S期移行を促進する。増殖細胞では、サイクリンD-CDK4/6複合体がRbをリン酸化し、これにより、S期への進行に重要なサイクリンE等の複数の遺伝子発現が誘導され得る。サイクリンDファミリーには、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3が含まれる。
本明細書において、「核初期化物質」には、本発明のiPS細胞樹立効率改善因子とともに体細胞に接触させると該体細胞からiPS細胞を誘導できる限り、タンパク性因子、それをコードする核酸(ベクターに組み込まれた形態を含む)、又は低分子化合物が含まれ得る。核初期化物質がタンパク性因子又はそれをコードする核酸の場合、好ましくは以下の組み合わせが例示される(以下においては、タンパク性因子の名称のみを記載する)。
(1) Oct3/4、Klf4、c-Myc
(2) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2(ここで、Sox2はSox1、Sox3、Sox15、Sox17又はSox18で置換可能である。また、Klf4はKlf1、Klf2又はKlf5で置換可能である。さらに、c-MycはT58A(活性型変異体)、N-Myc又はL-Mycで置換可能である。)
(3) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、Fbx15、Nanog、Eras、ECAT15-2、TclI、β-catenin (活性型変異体S33Y)
(4) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、TERT、SV40 Large T antigen(以下、SV40LT)
(5) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、TERT、HPV16 E6
(6) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、TERT、HPV16 E7
(7) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、TERT、HPV6 E6、HPV16 E7
(8) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、TERT、Bmil
(以上の因子の詳細についてはWO 2007/069666を参照(但し、上記(2)の組み合わせにおいて、Sox2からSox18への置換、Klf4からKlf1若しくはKlf5への置換については、Nature Biotechnology, 26, 101-106 (2008)を参照)。「Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2」の組み合わせについては、Cell, 126, 663-676 (2006)、Cell, 131, 861-872 (2007) 等も参照。「Oct3/4、Klf2(又はKlf5)、c-Myc、Sox2」の組み合わせについては、Nat. Cell Biol., 11, 197-203 (2009) も参照。「Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、hTERT、SV40LT」の組み合わせについては、Nature, 451, 141-146 (2008)も参照。)
(9) Oct3/4、Klf4、Sox2(Nature Biotechnology, 26, 101-106 (2008)を参照)
(10) Oct3/4、Sox2、Nanog、Lin28(Science, 318, 1917-1920 (2007)を参照)
(11) Oct3/4、Sox2、Nanog、Lin28、hTERT、SV40LT(Stem Cells, 26, 1998-2005 (2008)を参照)
(12) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、Nanog、Lin28(Cell Research (2008) 600-603を参照)
(13) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、SV40LT(Stem Cells, 26, 1998-2005 (2008)も参照)
(14) Oct3/4、Klf4(Nature 454:646-650 (2008)、Cell Stem Cell, 2:525-528(2008))を参照)
(15) Oct3/4、c-Myc(Nature 454:646-650 (2008)を参照)
(16) Oct3/4、Sox2 (Nature, 451, 141-146 (2008), WO2008/118820を参照)
(17) Oct3/4、Sox2、Nanog (WO2008/118820を参照)
(18) Oct3/4、Sox2、Lin28 (WO2008/118820を参照)
(19) Oct3/4、Sox2、c-Myc、Esrrb (ここで、EssrrbはEsrrgで置換可能である。Nat. Cell Biol., 11, 197-203 (2009) を参照)
(20) Oct3/4、Sox2、Esrrb (Nat. Cell Biol., 11, 197-203 (2009) を参照)
(21) Oct3/4、Klf4、L-Myc (Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 107, 14152-14157 (2010) を参照)
(22) Oct3/4、Nanog
(23) Oct3/4 (Cell 136: 411-419 (2009)、Nature, 08436, doi:10.1038 published online(2009))
(24) Oct3/4、Klf4、c-Myc、Sox2、Nanog、Lin28、SV40LT(Science, 324: 797-801 (2009)を参照)
遺伝子名 マウス ヒト
Lin28 NM_145833 NM_024674
Lin28b NM_001031772 NM_001004317
Esrrb NM_011934 NM_004452
Esrrg NM_011935 NM_001438
L-Myc NM_008506 NM_001033081
従来iPS細胞の樹立効率が低いために、近年、その効率を改善する物質が種々提案されている。これら他の樹立効率改善物質は、本発明の上記iPS細胞の樹立効率改善因子とともに体細胞に接触させた場合、iPS細胞の樹立効率をより高めることが期待できる。
体細胞の核初期化工程において低酸素条件下で細胞を培養することにより、iPS細胞の樹立効率をさらに改善することができる(Cell Stem Cell., 5(3): 237-241 (2009)、WO2010/013845)。本明細書において「低酸素条件」とは、細胞を培養する際の雰囲気中の酸素濃度が、大気中のそれよりも有意に低いことを意味する。具体的には、通常の細胞培養で一般的に使用される5-10% CO2/95-90%大気の雰囲気中の酸素濃度よりも低い酸素濃度の条件が挙げられ、例えば雰囲気中の酸素濃度が18%以下の条件が該当する。好ましくは、雰囲気中の酸素濃度は15%以下(例、14%以下、13%以下、12%以下、11%以下等)、10%以下(例、9%以下、8%以下、7%以下、6%以下等)、又は5%以下(例、4%以下、3%以下、2%以下等)である。また、雰囲気中の酸素濃度は、好ましくは0.1%以上(例、0.2%以上、0.3%以上、0.4%以上等)、0.5%以上(例、0.6%以上、0.7%以上、0.8%以上、0.9%以上等)、又は1%以上(例、1.1%以上、1.2%以上、1.3%以上、1.4%以上等)である。
核初期化物質と本発明のiPS細胞樹立効率改善因子(及び他のiPS細胞樹立効率改善因子)とを接触させた後、細胞を、例えばES細胞の培養に適した条件下で培養することができる。マウス細胞の場合、通常の培地に分化抑制因子としてLeukemia Inhibitory Factor(LIF)を添加して培養を行う。一方、ヒト細胞の場合には、LIFの代わりに塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)及び/又は幹細胞因子(SCF)を添加することが望ましい。また通常、細胞は、フィーダー細胞として、放射線や抗生物質で処理して細胞分裂を停止させたマウス胎仔由来の線維芽細胞(MEF)の共存下で培養される。MEFとしては、通常STO細胞等がよく使われるが、iPS細胞の誘導には、SNL細胞(McMahon, A. P. & Bradley, A. Cell 62, 1073-1085 (1990))等がよく使われている。フィーダー細胞との共培養は、核初期化物質と本発明のiPS細胞樹立効率改善因子との接触より前から開始してもよいし、該接触時から、或いは該接触より後(例えば1〜10日後)から開始してもよい。
このようにして樹立されたiPS細胞は、種々の目的で使用することができる。例えば、ES細胞で報告されている分化誘導法(例えば、神経幹細胞への分化誘導法としては、特開2002-291469、膵幹様細胞への分化誘導法としては、特開2004-121165、造血細胞への分化誘導法としては、特表2003-505006、胚葉体の形成による分化誘導法としては、特表2003-523766に記載の方法等を参照されたい)を利用して、iPS細胞から種々の細胞(例、心筋細胞、血液細胞、神経細胞、血管内皮細胞、インスリン分泌細胞等)への分化を誘導することができる。従って、患者本人やHLAの型が同一若しくは実質的に同一である他人から採取した体細胞を用いてiPS細胞を誘導すれば、そこから所望の細胞(即ち、該患者が罹病している臓器の細胞や疾患に対する治療効果を発揮する細胞等)に分化させて該患者に移植するという、自家移植又は同種移植による幹細胞療法が可能となる。さらに、iPS細胞から分化させた機能細胞(例、肝細胞)は、対応する既存の細胞株よりも実際の生体内での該機能細胞の状態をより反映していると考えられるので、医薬候補化合物の薬効や毒性のin vitroスクリーニング等にも好適に用いることができる。
p53-p21経路に存在する各種因子(PCNA、CDK2、サイクリンD1)がiPS細胞の樹立効率に影響を及ぼすか否かを調べた。
1) マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、DsRed
2) マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、PCNA
3)マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、CDK2
4)マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、サイクリンD1
実施例1と同様の実験を、4遺伝子ではなく3遺伝子(Oct3/4、Sox2、Klf4)にp53-p21経路の各遺伝子(PCNA、CDK2、サイクリンD1)を加えた組み合わせで行った。
サイクリンDファミリーに属する因子であるサイクリンD2及びサイクリンD3にも、サイクリンD1と同様のiPS細胞樹立効率上昇効果があるか否かを検討した。実験は実施例2と同様にして、3遺伝子(Oct3/4、Sox2、Klf4)にサイクリンDファミリーの各遺伝子(サイクリンD1、サイクリンD2、サイクリンD3)を加えた組み合わせで行った。
核初期化過程における内在性サイクリンD1の発現を検討した。Nanogレポーターマウスから得られたMEFに対して、実施例1と同様の手法により、以下の遺伝子をレトロウイルスで導入した。
(1) マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、DsRed
(2) マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc
(3) マウス由来のOct3/4、Sox2、Klf4、L-Myc
(4) マウス由来のc-Myc、DsRed
(5) マウス由来のL-Myc、DsRed
サイクリンD1がヒトiPS細胞の樹立に効果を及ぼすか否かを検討した。
1) ヒト由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、マウス由来の天然型サイクリンD1
2) ヒト由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、マウス由来のT156A サイクリンD1
3) ヒト由来のOct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc、マウス由来のT286A サイクリンD1
Claims (30)
- iPS細胞の樹立効率の改善方法であって、核初期化工程において、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子を体細胞に接触させることを含む、方法。
- 前記タンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項1記載の方法。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される因子を含有してなる、iPS細胞の樹立効率改善剤。
- 前記タンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項3記載の剤。
- 体細胞に核初期化物質と、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子とを接触させることを含む、iPS細胞の製造方法。
- 核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Linファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、請求項5記載の方法。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、請求項6記載の方法。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項6記載の方法。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項6記載の方法。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項5〜9のいずれか一項に記載の方法。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される因子と、核初期化物質とを含有してなる、体細胞からのiPS細胞誘導剤。
- 核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Linファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、請求項11記載の剤。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、請求項12記載の剤。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項12記載の剤。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項12記載の剤。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項11〜15のいずれか一項に記載の剤。
- サイクリンD1、サイクリンD2又はサイクリンD3をコードする外来性核酸を含む、iPS細胞。
- 外来性核酸がゲノムに組み込まれている、請求項17記載のiPS細胞。
- 請求項17又は18記載のiPS細胞に対して分化誘導処理を行い、iPS細胞を体細胞に分化させることを含む、体細胞の製造方法。
- 下記の工程:
(1)請求項5〜10のいずれか一項に記載の方法によりiPS細胞を製造する工程、及び
(2)上記工程(1)で得られたiPS細胞に分化誘導処理を行い、iPS細胞を体細胞に分化させる工程、
を含む、体細胞の製造方法。 - iPS細胞の樹立効率改善のための、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子の使用。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項21記載の使用。
- iPS細胞の製造のための、サイクリンDファミリーに属するタンパク質及びそれらをコードする核酸からなる群より選択される1以上の因子の使用であって、該因子を核初期化物質とともに体細胞に接触させる、使用。
- 核初期化物質が、Octファミリーのメンバー、Soxファミリーのメンバー、Klf4ファミリーのメンバー、Mycファミリーのメンバー、Lin28ファミリーのメンバー及びNanog、並びにそれらをコードする核酸からなる群より選択される、請求項23記載の使用。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2及びKlf4、又はそれらをコードする核酸である、請求項24記載の使用。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びc-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項24記載の使用。
- 核初期化物質が、Oct3/4、Sox2、Klf4及びL-Myc、又はそれらをコードする核酸である、請求項24記載の使用。
- サイクリンDファミリーに属するタンパク質が、サイクリンD1、サイクリンD2及びサイクリンD3である、請求項23〜27のいずれか一項に記載の使用。
- 体細胞の製造における、請求項17又は18記載のiPS細胞の使用。
- 体細胞を製造するための細胞ソースとしての、請求項17又は18記載のiPS細胞。
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Citations (3)
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Non-Patent Citations (8)
Title |
---|
CELL, vol. 79, JPN6015029995, 1994, pages 573 - 582, ISSN: 0003123036 * |
GENES DEV., vol. 11, JPN6015029994, 1997, pages 957 - 972, ISSN: 0003123035 * |
GENES DEV., vol. 14, JPN6015029992, 2000, pages 3102 - 3114, ISSN: 0003123034 * |
GENES DEV., vol. 24, JPN6015029991, March 2010 (2010-03-01), pages 561 - 573, ISSN: 0003123033 * |
ONCOGENE, vol. 18, JPN6015029996, 1999, pages 1983 - 1991, ISSN: 0003123037 * |
ONCOGENE, vol. 18, JPN6015029998, 1999, pages 1219 - 1226, ISSN: 0003123039 * |
PNAS, vol. 103, no. 10, JPN6015029999, 2006, pages 3645 - 3650, ISSN: 0003123040 * |
THE EMBO JOURNAL, vol. 28, JPN6015029997, 2009, pages 347 - 358, ISSN: 0003123038 * |
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