JP2013538555A5

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Publication number: JP2013538555A5
Application number: JP2013519216A
Authority: JP
Filing date: 2011-07-14
Publication date: 2014-08-28

Claims

主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）自己抗原性ペプチドとを含む、単離された複合体であって、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドが、配列番号１４によって示されるコアアミノ酸配列（ＧＡＤ５５６〜５６５、ＦＦＲＭＶＩＳＮＰＡ）を含み、かつ、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドが前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖に共有結合により結合させられる、単離された複合体。
前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドはそのＣ末端において前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインのＮ末端に共有結合により結合される、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドは前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインのアミノ酸１〜６の間に共有結合により埋め込まれる、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドは前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の成熟型ポリペプチドの３番目のアミノ酸と４番目のアミノ酸との間において前記ベータ鎖に共有結合により結合される、請求項１に記載の単離された複合体。
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）自己抗原性ペプチドとから構成される複合体と特異的に結合することができる抗原結合ドメインを含む、単離された抗体であって、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドの非存在下での前記ＭＨＣクラスＩＩには結合せず、かつ、前記ＭＨＣクラスＩＩの非存在下での前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドには結合しない、単離された抗体。
前記抗原結合ドメインは、前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドとから構成される複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる、請求項５に記載の単離された抗体。
請求項１に記載の複合体によって単離可能である、抗原結合ドメインを含む単離された高親和性実体。
請求項１に記載の単離された複合体に特異的に結合することができる、抗原結合ドメインを含む単離された高親和性実体。
前記抗原結合ドメインは、前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドとから構成される複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる、請求項５に記載の単離された抗体。
配列番号４３〜配列番号４８および配列番号３７〜配列番号４２によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ３Ｈ８の重鎖および軽鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）、または、配列番号５５〜配列番号６０および配列番号４９〜配列番号５４によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ１Ｈ１２の重鎖および軽鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）を含む、単離された抗体。
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）自己抗原性ペプチドとから構成される複合体に特異的に結合する高親和性実体を単離する方法であって、
（ａ）複数の高親和性実体を含むライブラリーを、請求項１に記載の単離された複合体によりスクリーニングすること、および
（ｂ）請求項１に記載の単離された複合体に特異的に結合し、かつ、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドの非存在下での前記ＭＨＣクラスＩＩ、または、前記ＭＨＣクラスＩＩの非存在下での前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドには結合しない少なくとも１つの高親和性実体を単離し、
それにより、前記ＭＨＣクラスＩＩと前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドとの前記複合体に特異的に結合する前記高親和性実体を単離すること
を含む方法。
前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドはそのＣ末端にリンカーペプチドが配置される、請求項１に記載の単離された複合体。
ＧＡＤ自己抗原性ペプチドは前記ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインに翻訳融合される、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＭＨＣクラスＩＩの前記ベータ鎖は、真核生物細胞における発現のとき、前記ＭＨＣクラスＩＩのアルファ鎖に含まれる結合対の第２のメンバーに結合する前記結合対の第１のメンバーを含み、ただし、前記ベータ鎖および前記アルファ鎖により、前記ＭＨＣクラスＩＩが形成される、請求項２に記載の単離された複合体。
前記ＭＨＣクラスＩＩと、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドとから構成される複合体の天然型立体配座に特異的に結合することができる、抗原結合ドメインを含む抗体の単離を可能にする構造的立体配座を有する、請求項１に記載の単離された複合体。
前記天然型立体配座は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に提示されるときの、前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドと前記ＭＨＣクラスＩＩとの前記複合体の構造的立体配座を含む、請求項１５に記載の単離された複合体。
前記ＧＡＤ自己抗原は最大でも３０個のアミノ酸を含む、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＧＡＤ自己抗原は配列番号２２によって示される（ＮＦＦＲＭＶＩＳＮＰＡＡＴ、ＧＡＤ_{５５５〜５６７}）、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＭＨＣクラスＩＩは、ＨＬＡ−ＤＭ、ＨＬＡ−ＤＯ、ＨＬＡ−ＤＰ、ＨＬＡ−ＤＱおよびＨＬＡ−ＤＲからなる群から選択される、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＭＨＣクラスＩＩの前記ベータ鎖はＤＲ−Ｂ１^＊０４０１である、請求項１に記載の単離された複合体。
前記ＭＨＣクラスＩＩの前記アルファ鎖はＤＲ−Ａ１^＊０１０１である、請求項１に記載の単離された複合体。
前記抗原結合ドメインは、配列番号４３〜配列番号４８および配列番号３７〜配列番号４２によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ３Ｈ８の重鎖および軽鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）、または、配列番号５５〜配列番号６０および配列番号４９〜配列番号５４によって示される相補性決定領域（ＣＤＲ）（Ｇ１Ｈ１２の重鎖および軽鎖のＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）を含む、請求項５に記載の単離された抗体。
請求項５に記載の単離された抗体を含む分子であって、治療成分または検出可能成分にコンジュゲートされる分子。
請求項５に記載の抗体の多価形態または抗体フラグメントの多価形態を含む、単離された抗体。
有効成分として、請求項５に記載の単離された抗体を含み、かつ、医薬的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）を対象において診断する方法であって、前記対象の細胞を、免疫複合体の形成を許す条件のもと、請求項５に記載の抗体と接触させることを含み、ただし、前記免疫複合体の所定の閾値を超える前記細胞の内部または表面での存在またはレベルが前記対象における前記１型糖尿病を示している方法。
１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）を処置するために同定される医薬の製造における請求項５に記載の抗体の使用。
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩと、ＧＡＤ自己抗原性ペプチドとを含む複合体の存在および／またはレベルを検出するためのキットであって、請求項５に記載の抗体を含むキット。
前記抗体は前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドの非存在下での前記ＭＨＣクラスＩＩには結合せず、かつ、前記抗体は前記ＭＨＣクラスＩＩの非存在下での前記ＧＡＤ自己抗原性ペプチドには結合しない、請求項１５に記載の単離された複合体。
単離された複合体は、複合体に結合した異種の免疫グロブリンを含まない、請求項１に記載の単離された複合体。
ＭＨＣクラスＩＩのベータ鎖の細胞外ドメインをコードする第１の核酸配列と、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）自己抗原性ペプチドをコードする第２の核酸配列とを含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記第２の核酸配列が前記第１の核酸配列の上流に翻訳融合されるか、または、前記細胞外ドメインのアミノ酸１〜６をコードする核酸配列の間に翻訳融合される、単離されたポリヌクレオチド。