JP2013535439A - プレバイオティック組成物の製造のための大豆発酵抽出物の使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、動物の消化管内における有益な細菌を保護するためのプレバイオティック組成物としての大豆発酵抽出物の使用に関し、特に、本発明の大豆発酵抽出物は抗生物質投与下でもプレバイオティック活性を示すものであり、また、抗生物質単独の投与と比較したとき、抗生物質の有効用量の減少及び(または)抗生物質投与に起因する副作用の低減などの利点を提供できる、抗生物質と本発明の大豆発酵抽出物の併用も開示する。
【選択図】図1
Description
acidophilus CCRC(台湾食品工業発展研究所生物資源保存及び研究センター)10695及び(または)14026、14064、14065、14079、Lactobacillus
delbrueckii bulgaricus CCRC 10696及び(または)14007、14009、14010、14069、14071、14098、16054
、Lactobacillus lactis lactis CCRC 10791及び(または)12267、12306、12312、12315、12323、14016、14015、14117、Lactobacillus
kefir CCRC 14011及び(または)Lactobacillus kefiranofaciens CCRC 16059を含むがこれらに限らない。前記発酵に使用可能な酵母株は、Saccharomyces cerevisiae CCRC 20577及び(または)20578、20581、21494、21550、21797、21805、22138、22234、22337、22731、22728、及び(または)Candida kefyr CCRC 21269及び(または)21742、22057を含むがこれらに限らない。具体的に、前記発酵の後には滅菌、ろ過、濃縮、凍結乾燥またはこれらの任意の組み合わせなどの工程が続く。好ましくは、前記発酵の後に例えば加熱による滅菌が行われ、さらに選択的にろ過及び濃縮が行われる。より好ましくは、前記大豆発酵抽出物を例えば凍結乾燥により乾燥させて、粉末状の大豆発酵抽出物を得る。特定の実施形態において、本発明の大豆発酵抽出物は、(a)水様大豆抽出物を少なくとも1種の乳酸菌及び少なくとも1種の酵母と発酵させて発酵液を形成する工程、(b)前記発酵液を滅菌する工程、(c)滅菌済みの前記発酵液をろ過する工程、(d)ろ過済みの前記発酵液から水を除去し、濃縮大豆発酵抽出物を形成する工程を含むプロセスによって製造される。本発明で使用される大豆発酵抽出物は、米国特許第6855350号及び第6733801号に従って調製され、これらの文献はその全体を参照として本明細書に組み入れる。
rhamnosus、L. acidophilus、L. crispatus、L. fermentum、L. plantarum、L. casei、L. paracasei、L.
jensenii、L. gasseri、L. cellobiosis、L. brevis、L. delbrueckii、L. rogosae、L. bifidum)、ビフィドバクテリウム属(例:B.
bifidum、B. breve、B. adolescentis、B. infantis、B. pseudolongum、B. angulatum、B. catenulatum、B.
longumt)、エンテロコッカス属(例E. faecium及びE. thermophilus)、シュードモナス属(例:P. aeruginosa、P. putida、P.
cepacia、P. fluorescens)、スポロラクトバシラス属、ミクロモノスポラ属、マイクロコッカス属、ロドコッカス属、エシェリキア属(例:E. coli)を含む。
本発明の大豆発酵抽出物による有益な細菌の増殖促進
(材料)
米国特許第6855350号及び第6733801号に従って大豆発酵抽出物が調製され、これらの文献はその全体を参照として本明細書に組み入れる。簡潔に説明すると、大豆を蒸留水と混合し、この混合物を加熱・ろ過した。得られた水様大豆抽出物を少なくとも1種の乳酸菌及び少なくとも1種の酵母と発酵させ、発酵抽出物を滅菌、ろ過、濃縮して、濃縮された形態の大豆発酵抽出物を取得した。得られた大豆発酵抽出物のプレバイオティック活性について分析を行い、3つの市販のプレバイオティック製品(すなわち、Warcoing Industrie SAのイヌリン製品、及びWarcoing Industrie SAとTaiwan Sugar Corporationの2つのフラクトオリゴ糖製品)と比較した。
infantis )が0.05%のシステイン塩酸塩を含むMRS培地で培養され、B. lactis Bb−12及びB. longumがビフィドバクテリアヨード酢酸(Bifidobacteria Iodoacetate)培地−25(BIM−25)で培養された。
アッセイを実施するため、表1に示すように、前記大豆発酵抽出物と上述の3つの市販のプレバイオティック製品が希釈された。
infantis)の増殖を用量依存的に促進することを示す。
抗生物質投与下における本発明の大豆発酵抽出物による有益な細菌の増殖促進
(抗生物質がラクトバシラスの増殖を阻害する一方、大豆発酵抽出物が細菌の成長を促進)
3種のラクトバシラス菌株、L. rhamnosus BCRC10940、L. paracasei BCRC14001、L.
delbrueckii BCRC14008をFIRDIより購入し、MRS w/o型寒天培地(Difco)で培養して4℃で保管した。細菌を活性化させるため、細胞をMRS培地に濃度5%(v/v)で植菌し、37℃で24時間培養してから、3種の各ラクトバシラス菌株107cells/mlをMRS培地5mlに植菌し、一晩振とうさせた。
L. rhamnosus、L. paracasei、L. delbrueckiiをMRS培地に105cfu/ml含む24ウェルプレートの各ウェルに、終濃度5%の大豆発酵抽出物と共に抗生物質(AMPまたはAMO)を終濃度2μg/mlまたは5μg/mlになるように加えた。プレートを37℃で48時間培養した。表4と表5に測定された生存数を示す。
L. rhamnosus、L. paracasei、L. delbrueckiiをMRS培地に105cfu/ml含む24ウェルプレートの各ウェルに、終濃度5%まで大豆発酵抽出物を加えた。細胞を37℃で48時間前培養した。前培養後、プレートの各ウェルに抗生物質(AMPまたはAMO)を終濃度5μg/mlで加え、プレートをさらに24時間培養した。細胞集落をカウントした。図2に結果を示す。
rhamnosusにおいて比較的強いプレバイオティック活性を示している。
動物モデルにおける抗生物質と本発明の大豆発酵抽出物の併用
BSKマウス(約20g)をピロリ菌(H. pylori)に感染させ、ウレアーゼ試験でこれを確認した。これらのマウスは無作為に各群6匹ずつで5つの群に分けられた。次のようにマウスに本発明の大豆発酵抽出物ありとなし、及びプラセボのみでCAMとAMOを1日1回7日間連続で経口投与した。
グループI:CAM+AMO、各抗生物質200mg/kg/日(陽性対照)
グループII:CAM+AMO、各抗生物質20mg/kg/日、1%のFSEと併用
グループIII:CAM+AMO、各抗生物質20mg/kg/日、2%のFSEと併用
グループIV:CAM+AMO、各抗生物質20mg/kg/日
グループV:プラセボ(陰性対照)
Ayub. Med. Coll. Abbottabad. 15(4)、34〜36.(2003)またはWorld J. Gastroenterol. 16(23)、2926〜2930.(2010)、あるいはWorld J.
Gastroenterol. 11(3)、386〜388.(2005)などに記載されるように、ピロリ菌の存在を分析した。CLOテストでは、黄色が陰性、ピンク色が陽性として記録された。HpSAテストでは、光学濃度(OD)を450nmで測定し、そのうち0.14未満のOD値を陰性、0.14以上のOD値を陽性として定義した。表7に結果を示す。
「+」とはCLOテストのピンク色(<20%の感染)、またはHpSAテストのOD450で0.14〜0.3の範囲を意味する。
「++」とはCLOテストのピンク色(<20〜50%の感染)、またはHpSAテストのOD450で0.3〜0.64の範囲を意味する。
「+++」とはCLOテストのピンク色(>50%の感染)、またはHpSAテストのOD450で>0.64を意味する。
Claims (17)
- 必要としている動物の消化管内における有益な細菌の増殖または維持をサポートすることを目的とした薬剤製造のための大豆発酵抽出物の使用。
- 前記大豆発酵抽出物が、水様大豆抽出物と少なくとも1種の乳酸菌及び選択的に少なくとも1種の酵母の発酵により製造されることを特徴とする、請求項1に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記少なくとも1種の乳酸菌がラクトバシラス(Lactobacillus)種であり、前記酵母がサッカロミケス(Saccharomyces)種であることを特徴とする、請求項2に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記発酵に続いて、滅菌、ろ過、濃縮、凍結乾燥及びそれらの組み合わせを含む群から選択される1つ以上の工程が実施されることを特徴とする、請求項2に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記大豆発酵抽出物が、(a)水様大豆抽出物を少なくとも1種の乳酸菌及び少なくとも1種の酵母と共に発酵させて発酵液を形成する工程と、(b)前記発酵液を滅菌する工程と、(c)滅菌済みの前記発酵液をろ過する工程と、(d)ろ過済みの前記発酵液から水を除去し、濃縮大豆発酵抽出物を形成する工程を含むプロセスによって製造されることを特徴とする、請求項1に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記有益な細菌が乳酸菌またはビフィドバクテリアであることを特徴とする、請求項1に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記薬剤が経口投与用であることを特徴とする、請求項1に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記動物が抗生物質の投与を受けることを特徴とする、請求項1に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記抗生物質の投与が、β−ラクタム系抗生物質を動物に投与することを含むことを特徴とする、請求項8に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 前記抗生物質が、アンピシリン、アモキシシリン、及びそれらの組み合わせを含む群から選択されることを特徴とする、請求項9に記載の大豆発酵抽出物の使用。
- 大豆発酵抽出物と抗生物質を含むことを特徴とする、医薬組成物。
- 前記大豆発酵抽出物が、水様大豆抽出物と、少なくとも1種の乳酸菌及び選択的に少なくとも1種の酵母の発酵により製造されることを特徴とする、請求項11に記載の医薬組成物。
- 前記少なくとも1種の乳酸菌がラクトバシラス種であり、前記酵母がサッカロミケス種であることを特徴とする、請求項12に記載の医薬組成物。
- 前記発酵に続いて、滅菌、ろ過、濃縮、凍結乾燥及びそれらの組み合わせを含む群から選択される1つ以上の工程が実施されることを特徴とする、請求項12に記載の医薬組成物。
- 前記大豆発酵抽出物が、(a)水様大豆抽出物を少なくとも1種の乳酸菌及び少なくとも1種の酵母と共に発酵させて発酵液を形成する工程と、(b)前記発酵液を滅菌する工程と、(c)滅菌済みの前記発酵液をろ過する工程と、(d)ろ過済みの前記発酵液から水を除去し、濃縮大豆発酵抽出物を形成する工程を含むプロセスによって製造されることを特徴とする、請求項11に記載の医薬組成物。
- 前記抗生物質がβ−ラクタム系抗生物質であることを特徴とする、請求項11に記載の医薬組成物。
- 前記抗生物質が、アンピシリン、アモキシシリン、及びそれらの組み合わせを含む群から選択されることを特徴とする、請求項16に記載の医薬組成物。
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