JP2013515260A5

JP2013515260A5 -

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Publication number: JP2013515260A5
Application number: JP2012545903A
Authority: JP
Filing date: 2010-12-21
Publication date: 2013-12-12

Claims

溶液中の１種以上の化学種とフローセルの表面に固定化された標的との間の液体環境中での相互作用を特徴付ける方法であって、
（ａ）フローセルの表面を活性化し、標的を表面に固定化する段階と、
（ｂ）液体の流れ中に化学種の１種以上を用意する段階と、
（ｃ）固定化された標的を含むフローセルの表面に、化学種の１種以上を含有する液体の流れを通す段階と、
（ｄ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術を用いて１種以上の化学種と標的との間の相互作用の結果を検出する段階とを含む方法において、
段階（ａ）又は段階（ｂ）の少なくともいずれかにおいて、２種以上の液体溶液をインライン混合して混合溶液を生じさせておいてから、該混合溶液をフローセルの表面に通すことを含むことを特徴とする方法。
インライン混合が（１）統合流体カートリッジ（ＩＦＣ）内にマルチチャンバー式フローセルを配置する段階と、
（２）複合針及びチューブブロックを統合流体カートリッジに接続する段階であって、複合針及びチューブブロック内の針が、標準的なマルチウェルプレート内の別個の試薬ウェル、例えば９６ウェルプレート内のウェルなどに各針が届くことができるように間隔をおいて配置され、さらに、管路が、各針及び接続したチューブ、ＩＦＣのチャネル、並びにフローセルチャンバーの間に形成されている、段階と、
（３）ポンプ手段を用いて試薬容器から針の中に第１の液体溶液を吸引する段階と、
（４）気泡を導入せずに、異なる試薬容器から第２の液体溶液を吸引する段階と、
（５）段階（３）及び段階（４）を適宜繰り返す段階とを含み、第１及び第２の液体溶液の混合が、混合溶液がフローセルの表面に届く前に生じる、請求項１記載の方法。
各段階がコンピュータプログラムによって制御され、複合針及びチューブブロックが垂直に移動し、一方、試薬容器を搬送する試薬ブロックが水平に移動する、請求項２記載の方法。
混合溶液が１種以上の化学的に不安定な成分を含有する、請求項１記載の方法。
段階（ａ）において、抗体をフローセル表面にアミンカップリングするために、インライン混合を使用してＥＤＣ及びＮＨＳを混合する、請求項１記載の方法。
酸性化抗体を含有する溶液及び高ｐＨ溶液の段階（ｂ）中のインライン混合が、抗体を中和し、その後に抗体にフローセル表面上の標的との結合相互作用を受けさせる、請求項１記載の方法。
複合針及びチューブブロックが、９６ウェルプレート内のウェルの列の別個のウェルに各針が届くことができるように間隔をおいて配置される８本又は１２本の針を収容する、請求項２記載の方法。
ポンプ手段が蠕動ポンプ又はシリンジポンプである、請求項２記載の方法。
各吸引する段階が約０．１、０．２５又は０．５〜約４又は１０μｌの溶液を取り込み、フローセルを通る液体の流量が約１０〜約３０、６０又は１００μｌ／分である、請求項２記載の方法。
高濃縮された試料の化学種を分析する方法であって、化学種とフローセルの表面に固定化された標的との間の相互作用を特徴付けるためのＳＰＲ法を試料に受けさせることを含み、
（ａ）フローセルの表面を活性化し、標的を表面に固定化する段階と、
（ｂ）液体の流れ中に適切な濃度の化学種を用意する段階と、
（ｃ）固定化された標的を含むフローセルの表面に、化学種を含有する液体の流れを通す段階と、
（ｄ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術を用いて化学種と標的との間の相互作用の結果を検出する段階とを含む方法において、
コンピュータの制御下で高濃縮された試料の化学種と緩衝液をインライン混合して、段階（ｂ）の前に混合溶液を生じさせ、インライン混合が、
（１）統合流体カートリッジ（ＩＦＣ）内にマルチチャンバー式フローセルを配置する段階と、
（２）複合針及びチューブブロックを統合流体カートリッジに接続する段階であって、複合針及びチューブブロック内の針が、標準的なマルチウェルプレート内の別個の試薬ウェル、例えば９６ウェルプレート内のウェルなどに各針が届くことができるように間隔をおいて配置され、さらに、管路が、各針及び接続したチューブ、ＩＦＣのチャネル、並びにフローセルチャンバーの間に形成されている、段階と、
（３）ポンプ手段を用いて針の中に緩衝溶液を吸引する段階と、
（４）気泡を導入せずに、所望の量の高濃縮された試料を吸引する段階と、
（５）気泡を導入せずに、第２の容積の緩衝溶液を吸引する段階とを含み、
高濃縮された試料の希釈が、試料がフローセルの表面に届く前に管路内で生じる
を含むことを特徴とする方法。