JP2013510094A - がんのバイオマーカーとしてプレクチン−1を検出するための組成物および方法 - Google Patents
がんのバイオマーカーとしてプレクチン−1を検出するための組成物および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013510094A JP2013510094A JP2012537233A JP2012537233A JP2013510094A JP 2013510094 A JP2013510094 A JP 2013510094A JP 2012537233 A JP2012537233 A JP 2012537233A JP 2012537233 A JP2012537233 A JP 2012537233A JP 2013510094 A JP2013510094 A JP 2013510094A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cancer
- peptide
- plectin
- agent
- ligand complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/0474—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
- A61K51/0482—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group chelates from cyclic ligands, e.g. DOTA
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/06—Macromolecular compounds, carriers being organic macromolecular compounds, i.e. organic oligomeric, polymeric, dendrimeric molecules
- A61K51/065—Macromolecular compounds, carriers being organic macromolecular compounds, i.e. organic oligomeric, polymeric, dendrimeric molecules conjugates with carriers being macromolecules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/60—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4724—Lectins
Abstract
Description
本願は、2009年11月5日に出願された米国仮特許出願第61/258242号に基づく米国特許法第119条(e)項による優先権を主張する権利を有する。
本発明は、米国国立衛生研究所によって給付された助成金番号NIH-P50-CA86355およびPO1-CA117969-01による米国政府の支援をうけてなされた。米国政府は本発明に一定の権利を有する。
[背景技術]
膵がん(pancreatic cancer)(PDAC)は、米国および他の工業国では、4番目に多いがん関連死の原因である[1]。多大な努力にもかかわらず、膵がんは今なお破壊的な疾患であり、その5年生存率は5%未満、平均生存期間中央値は1年未満である[1]。この厳しい予後は、主として、その初期診断(initial diagnosis)が治療不可能な進行期になってからと遅くなりがちであり、しばしば転移後であることによる。
本発明は、プレクチン-1(Plectin-1)を標的とする本明細書に記載の新規分岐(branched)多量体型(multimeric)ペプチドイメージング複合体に基づき、その複合体を使って得られた驚くべき結果にも基づいている。
配列番号2−βAKTLLPTP
配列番号3−βAKTLLPTPGGS
配列番号4−KTLLPTPGGS
配列番号9−ATLLPTP
配列番号10−KALLPTP
配列番号11−KTALPTP
配列番号12−KTLAPTP
配列番号13−KTLLATP
配列番号14−KTLLPAP
配列番号15−KTLLPTA
配列番号16−βAATLLPTPGGS
配列番号17−βAKALLPTPGGS
配列番号18−βAKTALPTPGGS
配列番号19−βAKTLAPTPGGS
配列番号20−βAKTLLATPGGS
配列番号21−βAKTLLPAPGGS
配列番号22−βAKTLLPTAGGS(配列番号22)。
略号および頭字語
βA−ベータアラニン
CP−慢性膵炎
DOTA−1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸
ncPTP−陰性対照PTP
NIR−近赤外
NIRF−近赤外蛍光色素
Panc27ペプチド−KTLLPTP(配列番号1)
PanIN−膵上皮内新生物
PanIN I−腺腫
PanIN II−異形成を伴う腺腫
PanIN III−上皮内癌
PDAC−膵管腺癌
Plec1−プレクチン-1
PTP−プレクチン-1標的ペプチド
SPECT−単光子放射型コンピュータ断層撮影
tPTP−四量体型プレクチン-1標的ペプチド、四量体型合成ペプチドともいう(これはプレクチン-1を標的とする)
本発明の説明と特許請求の範囲では、以下に述べる定義に従って次の術語を使用する。
I.小さい脂肪族非極性または弱極性残基:
Ala、Ser、Thr、Pro、Gly;
II.極性負電荷残基およびそれらのアミド:
Asp、Asn、Glu、Gln;
III.極性正電荷残基:
His、Arg、Lys;
IV.大きい脂肪族非極性残基:
Met Leu、Ile、Val、Cys
V.大きい芳香族残基:
Phe、Tyr、Trp
配列番号1−KTLLPTP(配列番号1)(Lys-Thr-Leu-Leu-Pro-Thr-Proともいう)
配列番号2−βAKTLLPTP(配列番号2)
配列番号3−βAKTLLPTPGGS(配列番号3)
配列番号4−KTLLPTPGGS(配列番号4)
配列番号5−KHVMSKQ(配列番号5)
配列番号6−KHVMSKQGGS(配列番号6)
配列番号7−βAKHVMSKQ(配列番号7)
配列番号8−βAKHVMSKQGGS(配列番号8)
配列番号9−ATLLPTP(配列番号9)
配列番号10−KALLPTP(配列番号10)
配列番号11−KTALPTP(配列番号11)
配列番号12−KTLAPTP(配列番号12)
配列番号13−KTLLATP(配列番号13)
配列番号14−KTLLPAP(配列番号14)
配列番号15−KTLLPTA(配列番号15)
配列番号16−βAATLLPTPGGS(配列番号16)
配列番号17−βAKALLPTPGGS(配列番号17)
配列番号18−βAKTALPTPGGS(配列番号18)
配列番号19−βAKTLAPTPGGS(配列番号19)
配列番号20−βAKTLLATPGGS(配列番号20)
配列番号21−βAKTLLPAPGGS(配列番号21)
配列番号22−βAKTLLPTAGGS(配列番号22)
配列番号23−KKKK(配列番号23)
βAはベータアラニンであり、配列表ではXaaとして特定される。
本発明は、プレクチン-1を発現するがんまたは任意の細胞を診断、検出、監視、およびイメージングするのに役立つ多量体型ペプチドリガンド複合体を提供する。これらのペプチドは、イメージング、診断、腫瘍局在などに役立つ複合体の形で使用される。多量体型ペプチドを製造するための方法、およびそれらの活性を、対応する単量体型ペプチドと比較するための方法は、PEG化(pegylation)を含めて、本明細書に記載されているか、当技術分野において見いだすことができる(Li, 2007, J. Nuc. Med., 48:7:1162-1171「64Cu-labeled tetrameric and octameric RGD peptides for small-animal PET of tumor αvβ3 integrin expression」;総説がChoeおよびLee, 2007, Current Pharmaceutical Design, 13:17-31にある;Chenら, 2004, Mol. Imaging Biol. 6:350-9「MicroPET imaging of breast cancer alphav-integrin expression with 64Cu-labeled dimeric RGD peptides」;Janssen, 2002, Cancer Biother. Radiopharm., 17:641-6「Comparison of monomeric and dimeric radiolabeled RGD-peptide for tumor targeting」;Poethko, 2004, J. Nucl. Med. 45:892-902;Chen, 2004, Bioconjugate Chem., 15:41-9;Chen, 2004, Nucl. Med. Biol., 31:11-19「Pharmacokinetics and tumor retention of 125I-labeled RGD peptide are improved by PEGylation」;Li et al., 2009, Mol. Cancer Ther., 8:5:1239-1249;米国特許第7,666,979号(米国特許出願第10/661,032号からの発行);米国特許出願第12/012,011号(米国特許出願第10/792,582号の継続出願);Nahrendorf, 2010, JACC: Cardiovascular Imaging, 2:10:1213-1222;Krajewski et al., 2005「Effect of Dimerization and Tetramerization on the Potency of HIV-Integrase Inhibitory Peptides」、S. Blondelle編「Understanding Biology Using Peptides」アメリカペプチド学会の411〜412頁)。
(βAATLLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、
(βAKALLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、
(βAKTALPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、
(βAKTLAPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、
(βAKTLLATPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、
(βAKTLLPAPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2、および
(βAKTLLPTAGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2
を包含する。
いくつかの実施形態では、キレート剤をペプチドに直接または間接的に取り付けて、放射性核種などの治療剤または診断剤をキレートするために使用することができる。典型的なキレーターには、DTPA(例えばMx-DTPA)、DOTA、TETA、NETAまたはNOTAなどがあるが、これらに限るわけではない。金属または他のリガンドをタンパク質に取り付けるためのキレート剤のコンジュゲーション方法または使用方法は、当技術分野ではよく知られている(例えば引用によりそのまま本明細書に組み込まれる米国特許出願第12/112,289号を参照されたい)。
本発明では、さらに、複合体の一部としてポリエチレングリコール(「PEG」)分子などの分子を使用することができる。ある態様では、PEGが約20,000m.w.であるか、約20,000m.w.未満である。もう一つの態様では、PEGが約18,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約16,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約14,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約12,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約10,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約8,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約7,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約6,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約5,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約4,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約3,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約2,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約1,000m.w.未満である。さらにもう一つの態様では、PEGが約500m.w.未満である。
ペプチドの製造は実施例で説明する。修飾されたアミノ酸残基を活性に影響を及ぼすことなく組み込みうることは、もちろん理解されるであろう。例えば、末端はブロッキング基(blocking group)、すなわちN末端およびC末端を「望ましくない分解」(この用語は、化合物の機能に影響を及ぼす可能性が高い、その末端におけるあらゆるタイプの酵素的、化学的または生化学的分解、すなわちその末端における化合物の逐次的分解を包含するものとする)から保護および/または安定化するのに適した化学置換基を含むように誘導体化することができる。
一定の実施形態では、ここに開示する方法および組成物が、1つ以上の置換アミノ酸残基を有するペプチドの製造を伴いうる。
セリン、スレオニン、ホモセリン、2,3-ジアミノプロピオン酸、およびセリンまたはスレオニンのアルキルまたは芳香族置換誘導体を含む。上に列挙した各カテゴリー内のアミノ酸で、同じグループの別のアミノ酸を置換できることも理解される。
さらに、本発明が包含する修飾には、結合部分または結合ポリペプチドのターゲティング配列と検出可能ラベルまたは治療剤との間にリンカーまたはスペーサーを導入することが含まれる。例えば、そのようなリンカー/スペーサーの使用は、結合ペプチドの関連する性質を改善すること(例えば血清中安定性を増加させることなど)ができる。これらのリンカーとして、当技術分野においてよく見られる置換または無置換アルキル鎖、ポリエチレングリコール誘導体、アミノ酸スペーサー、糖類、または脂肪族もしくは芳香族スペーサーなどを挙げることができるが、これらに制約されるわけではない。
別の態様では、本明細書に記載する多量体型ペプチドリガンド複合体を使用する時に、治療剤、例えば限定するわけではないが、細胞毒性剤、抗血管新生剤、アポトーシス促進剤、抗生物質、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素または他の薬剤を、補助治療として使用してもよい。本発明において有用な薬物は、例えば、抗有糸分裂剤、抗キナーゼ剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質、アルカロイド、抗血管新生剤、アポトーシス促進剤およびそれらの組合せからなる群より選択される医薬特性を保有しうる。
もう一つの態様において、本発明は、対象におけるがんを診断するための組成物および方法を提供する。本方法は、患者からの試料、例えば生検試料と、検出可能部分にコンジュゲートされていてもよい多量体型ペプチドリガンド複合体(ここで、ペプチドリガンド配列は、ある態様では、配列番号1〜4および9〜22の一つから選択される)を含む診断組成物とを用意すること、ペプチドを試料に加えること、および診断組成物を、例えば試料中の検出可能部分を検出することによって検出することを含む。いくつかの実施形態において、イメージングは、レーザー走査顕微鏡法、免疫組織化学、蛍光顕微鏡法、放射線イメージングなどを包含するが、これらに限るわけではない。
診断剤は、例えば、放射性核種、放射線造影剤、常磁性イオン、金属、蛍光ラベル、化学発光ラベル、超音波造影剤および光活性剤からなる群より選択される。そのような診断剤はよく知られており、そのような既知の診断剤はどれでも使用することができる。診断剤の限定でない例として、110In、111In、177Lu、18F、52Fe、62Cu、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、86Y、90Y、89Zr、94mTc、94Tc、99mTc、120I、123I、124I、125I、131I、154-158Gd、32P、11C、13N、15O、186Re、188Re、51Mn、52mMn、55Co、72As、75Br、76Br、82mRb、83Srなどの放射性核種、または他のガンマ放射体、ベータ放射体、もしくは陽電子放射体を挙げることができる。有用な常磁性イオンとして、クロム(III)、マンガン(II)、鉄(III)、鉄(II)、コバルト(II)、ニッケル(II)、銅(II)、ネオジム(III)、サマリウム(III)、イッテルビウム(III)、ガドリニウム(III)、バナジウム(II)、テルビウム(III)、ジスプロシウム(III)、ホルミウム(III)またはエルビウム(III)を挙げることができる。金属造影剤として、ランタン(III)、金(III)、鉛(II)またはビスマス(III)を挙げることができる。超音波造影剤は、気体充填(gas-filled)リポソームなどのリポソームを含みうる。放射線不透過性の診断剤は、化合物、バリウム化合物、ガリウム化合物、およびタリウム化合物から選択することができる。当技術分野では、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルアルデヒド(o-phthaldehyde)およびフルオレサミンなど(ただしこれらに限るわけではない)、多種多様な蛍光ラベルが知られている。有用な化学発光ラベルとして、ルミノール、イソルミノール、芳香族アクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジニウム塩またはシュウ酸エステルを挙げることができる。
本発明のタンパク質、ポリペプチド、またはそのペプチドフラグメントに対する抗体は、当技術分野において周知の方法を使って生成させることができる。例えば、引用によりそのまま本明細書に組み込まれる米国特許出願第07/481,491号には、ペプチドに対する抗体を産生させる方法が開示されている。抗体を生産するために、例えばウサギ、マウス、およびラットなど(ただしこれらに限るわけではない)といった、さまざまな宿主動物を、ポリペプチドまたはそのペプチドフラグメントの注射によって免疫することができる。免疫学的応答を増加させるために、例えば限定するわけではないが、フロイントの(完全および不完全)アジュバント、水酸化アルミニウムなどのミネラルゲル(mineral gel)、界面活性物質、例えばリゾレシチン、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、オイルエマルション、キーホールリンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、および潜在的に有用なヒトアジュバント、例えばBCG(カルメット・ゲラン桿菌)およびコリネバクテリウム・パルバム(corynebacterium parvum)など、宿主の種に応じてさまざまなアジュバントを使用することができる。
本発明は有用なアプタマーにも向けられる。ある実施形態において、アプタマーは、もう一つの化合物(この場合は同定されたタンパク質)に優先的に結合するようにインビトロで選択された化合物である。ある態様では、アプタマーが核酸またはペプチドである。なぜなら、ヌクレオチドまたはアミノ酸(どちらも天然物または合成物)からランダムな配列を容易に数多く生成させることができるからであるが、当然のことながら、アプタマーをこれらに限定する必要はない。もう一つの態様では、核酸アプタマーが、タンパク質ターゲットに結合する短いDNA鎖である。ある態様では、アプタマーがオリゴヌクレオチドアプタマーである。オリゴヌクレオチドアプタマーは、目的の特異的タンパク質配列に結合することができるオリゴヌクレオチドである。一般的なアプタマー同定方法は、部分的に縮重したオリゴヌクレオチドから開始し、次に何千ものオリゴヌクレオチドを、所望のタンパク質に結合する能力について同時にスクリーニングすることである。結合したオリゴヌクレオチドをタンパク質から溶離させ、配列決定して、特異的認識配列を同定することができる。化学的に安定化したアプタマーを細胞中に大量に導入すると、目的のポリペプチドへの特異的結合が起こり、それによってその機能の阻止が起こりうる。[例えば、アプタマーのインビトロ選択について記述している以下の刊行物を参照されたい:Klugら, Mol. Biol. Reports 20:97-107 (1994);Wallisら, Chem. Biol. 2:543-552 (1995);Ellington, Curr. Biol. 4:427-429 (1994);Latoら, Chem. Biol. 2:291-303 (1995);Conradら, Mol. Div. 1:69-78 (1995);およびUphoffら, Curr. Opin. Struct. Biol. 6:281-287 (1996)]。
本発明は、本発明の化合物を対象に投与する方法にも向けられる。ある実施形態において、本発明は、本明細書の方法(the method of the invention description)を使って同定された化合物を投与することによって、がんを診断し、Plec-1を検出し、Plec-1発現細胞を局在し、または対象を処置する方法を提供する。本化合物を含む医薬組成物は、それを必要とする対象に、例えば局所外用、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、髄腔内、脳室内、経皮、皮下、腹腔内、鼻腔内、経腸、局所外用、舌下、または直腸手段など(ただしこれらに限るわけではない)といった、いくつもの経路によって投与される。
組織試料
組織試料および生体試料は、施設内審査委員会(Institutional Review Board)の承認を得て、その要件に従って収集した。
動物実験は全て承認された。無胸腺雌マウス(nu/nu)を学内飼育施設(in-house breeding facility)から入手した。マウスは無菌環境で維持し、食物と水を自由に摂取させた。
急速凍結外科標本として入手した膵臓組織50mgを、プロテアーゼインヒビターカクテル(0.001mg/mlアプロチニン、ベスタチン、ペプスタチン、ロイペプチンおよび0.005mg/ml 20mM PMSF、Sigma-Aldrich、米国セントルイス)と組み合わせたRIPAバッファー(50mM Trizma塩基、pH7.4、1%Triton X-100、0.25%デオキシコール酸ナトリウム、100mM EDTA、150mM NaCl)中でホモジナイズした。溶解物を遠心分離によって清澄化し、極めて精密なアッセイ(2-D Quant Kit、Amersham Biosciences、ニュージャージー州)を使ってタンパク質濃度を決定した。20μgタンパク質/レーンをSDS-PAGEで分離し、ニトロセルロースメンブレンに転写した。抗原検出はヒトPlec1に対するウサギモノクローナル抗体(Abcam、マサチューセッツ州ケンブリッジ)を使って行った。二次抗体はHRP結合(coupled)ヤギ抗ウサギポリクローナル抗体(Sigma-Aldrich、米国セントルイス)とした。バンドをECLで可視化した(対照:ラット脳溶解物、Santa Cruz Biotechnology、カリフォルニア州ラホーヤ)。
パラフィン包埋切片を脱パラフィン化し、TBSで水和し、H2O2でブロッキングした。抗原回復は、Retrievit(BioGenex、カリフォルニア州サンラモン)中で組織を煮沸することによって達成した。TBS中、アビジン/ビオチン(Vector Laboratories、カリフォルニア州バーリンゲーム)および5%ヤギ血清でブロッキングした後、スライドを、1:250 Plec1抗体(Abcam)と共に4℃で終夜インキュベートした。切片をTBST中で3回洗浄した後、ビオチン化抗ウサギ・ヤギ二次抗体(Vector Laboratories、カリフォルニア州バーリンゲーム)と共にインキュベートし、次にDAB(Invitrogen、カリフォルニア州カールズバッド)を使って呈色させ、ヘマトキシリンで対比染色した。Y-FL顕微鏡(ニコン、日本)を使ってスライドを評価した。画像はDP-25カメラおよび収集ソフトウェア(オリンパス、日本)を使って収集した。
神経は、Plec1に関して中等度の染色強度を有することがわかり、全てのスライドに存在していた。そこで、各スライド内での神経におけるPlec1の発現を、染色対照および染色強度の基準として使用した。染色強度は、2人の独立した観察者によって記録され、結果が矛盾した場合は、3人目の観察者が評価した。異常な上皮細胞の染色を、神経に見られる中等度の染色との比較で、陰性、弱、中または強と分類した。
四量体型プレクチン-1標的ペプチド(tPTP)複合体(βAKTLLPTP-GGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2(本明細書では[(βAla-Lys-Thr-Leu-Leu-Pro-Thr-Pro-Gly-Gly-Ser-PEG5K)2-Lys]2-Lys-Lys(DOTA)-βAla-NH2ともいう)は、プレクチン-1ターゲティングペプチドKTLLPTP(配列番号1)(Kellyら, 2008, PLoS Medicine, 5:4:e85:0657-0668)に基づいて、GMPグレード施設(CS Bio Company、カリフォルニア州メンローパーク)で合成された。
ペプチド配列(例)−
[(βAla-Lys-Thr-Leu-Leu-Pro-Thr-Pro-Gly-Gly-Ser-PEG5K)2-Lys]2-Lys-Lys(DOTA)-βAla-NH2
MW:25648
PEG5K:これは、Fmoc-PEG5000-NHSエステル(JenKem Tech)に由来する。
1)レジン:
Fmoc-Rink-アミドレジン(置換量(Sub):0.34mmol/g);
2)次のとおり特別な側鎖保護AAを使用した:
Lys-15:Lys(Mmt)、Lys-14、13:Fmoc-Lys(Fmoc);
3)カップリング試薬:Rx/AA/DIC/HOBt(1/3/3/3);
4)切断試薬:TFA/TIS/H2O;
5)精製:ACN/H2O/TFA
1)Rinkアミドレジンにβ-Alaを取り付け、Rx上のβ-Alaの脱Fmoc後に、Fmoc-Lys(Mmt)を取り付けた。
2)Fmoc基がついた状態で、脱Mmtし、Lys-15側鎖にTri-tBu-DOTAをカップリングした。カップリング:Rx/DOTA/DIC/HOBt(1/2/2/2)、カップリング1回(single coupling)。
3)脱Fmoc後に、Rx上の伸長したペプチドにFmoc-Lys(Fmoc)を取り付けた。Lys-14の脱Fmocを実施した。これにより、2つの遊離NH2基が(一方は主鎖上に、他方は側鎖上に)残るだろう。
4)Rx上の2つのNH2基にFmoc-Lys(Fmoc)を取り付けるために二倍量のカップリング試薬を使用した。脱Fmoc後に、Rx上の4つのNH2基が、次のカップリングに利用できるようになった。
5)次に、Fmoc-PEG5000-NHSを、促進剤としてDIPEAを使って、前記4つのNH2基に取り付けた(Rx/PEG 1/8)。Kaiserテスト陰性を確認した後、PEGを脱Fmocし、4つの分岐N末端へのAAカップリングをβ-Ala-1に達するまで1つずつ続けた。
6)最後の脱Fmoc後、Rxは切断できる状態になった。
試薬:95%TFA、2.5%H2O、2.5%TIS。室温で240分間撹拌した。
反応から減圧を使って溶媒を除去し、水/ACNの添加後に、その混合物を凍結乾燥した。
粗ペプチド(シロップ状)を水で希釈してからHPLCカラム(4.1×25cm×cm)にローディングし、60分で20−60%バッファーBの勾配で精製した。流速、TFAバッファー系中で25mL/分。0.1mmol合成で200mgの最終生成物が得られた(最適化はしていない)。
インジウム標識のために、ペプチド(100μg、nmol)を20μLのPBSに溶解してから100μLの酢酸アンモニウムバッファー(0.1M、pH4.5)で希釈した。塩化インジウム(水中5mCi)(Cardinal Health、バージニア州)をペプチドと混合し、40℃で15分間撹拌しながら平衡化した。DPBSとプレ平衡化しておいたPD10脱塩カラムを使ったサイズ排除によって、反応混合物を精製した。インビトロペプチド検証実験のために、細胞を、濃度が10-3〜10-9の範囲にあるtPTPまたはncPTPおよび5μCi tPTP-In111と共に、3つ一組にして、室温で1時間インキュベートした。1時間後に細胞を洗浄し、100μLの1M NaOHで5分間溶解した。次に、その混合物をチューブに移し、ガンマカウンターでカウント数を分析した。
同所性に注射されたL3.6pl膵がん腫瘍細胞を保持するマウス(n=4)に、1mCiの111In標識tPTPを注射し、次に注射の4時間後に、UVaにおいて設計され組み立てられたマイクロSPECT/CTスキャナでイメージングした。イメージング中は常に麻酔(酸素中1%〜2%イソフルラン)を送達した。CT収集(CT acquisition)には、約5分間にわたって200度にまたがる200の等間隔な投影を使用した。ピンホールSPECTスキャニングのためにマウスを軸方向に再位置決めし(repositioned axially)、2台のガンマカメラを同時に使って60の等間隔な投影像を180度にわたって得た。収集時間は約30分だった。2台のカメラに直径1mmのタングステンピンホールを装着した。復元したCTボクセルサイズは512×512×640画像マトリックス上に0.082×0.082×0.082mmだった。復元したSPECTボクセルサイズは、60×60×60イメージマトリックス上に0.65×0.65×0.65mmだった。全てのSPECT画像を放射能崩壊(radioactivity decay)について補正したが、ガンマ線減衰(gamma ray attenuation)については補正しなかった。
マウスをSPECT/CTでイメージングした後、動物を屠殺し、その臓器を収穫し、事前に計量しておいたエッペンドルフチューブに入れた。次に各チューブを再計量して、臓器の重量を決定し、放射線を測定した。プローブの血漿中寿命を決定するために、tPTP-Peg-111Inを注射したマウスから、注射後0、15、30、45、60、および120分に採血し、ウェルカウンターで放射能を測定した。
膵臓および腹膜転移からのPDAC標本を4%PFAで固定し、OCT中で凍結した。次に組織試料を薄切し、H&Eで染色した。
配列番号1のアミノ酸残基のそれぞれのアラニン置換の効果を決定した。この研究に使用したペプチドは、ファージ由来配列KTLLPTP(配列番号1)と、各残基を逐次アラニンに突然変異させたアラニン突然変異体ATLLPTP、KALLPTP、KTALPTP、KTLAPTP、KTLLATP、KTLLPAP、およびKTLLPTA(それぞれ配列番号9〜15)とからなる。2mgの各ペプチドを200μLのPBSに溶解し、1mgのFITCと混合し、終夜反応させた。ペプチドをC18逆相レジンでのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトニトリル/水混合物を使って精製し、分光法によって定量した。
Plec1はPADCでは発現するが、慢性膵炎および正常膵臓では発現しない
悪性膵臓疾患と良性膵臓疾患はPlec1発現によって明確に識別される(図1)。100%のPDAC(31/31)がPlec1に関して染色され、そのうち、77%(24/31)が強く染色され、23%は中等度に染色された(7/31)。PDACとは対照的に、正常膵臓にも(4/4)、大部分の慢性膵炎にも(10/15)、Plec1は同定されなかった。残りの慢性膵炎(5/15)は導管上皮においてPlec1に関して弱く染色された(図1B)。膵臓組織溶解物のウェスタンブロッティングによってIHC所見が裏付けられた。正常膵臓(2/2)および慢性膵炎(3/3)にはPlec1が検出されなかったのに対し、各PDACには存在した(3/3;図1D)。
Plec1発現強度は膵癌発生過程において増加する(図1)。病変がPanIN IからIIIへと進行するにつれて、Plec1に関するそれらの染色強度は増加し、Plec1陽性になる病変のパーセンテージが増加する。初期PDAC前駆病変であるPanIN Iは、大半がPlec1陰性である(11/14)。対照的に、PanIN II病変の過半数がPlec1を弱く(13/26)または中等度に(1/26)発現し、一方、PanIN III病変の87%がPlec1陽性だった(13/15;図1A、B)。注目すべきことに、Plec1の細胞局在も発癌過程において変化する。Plec1が早期PanIN病変において同定された場合、その局在は細胞膜に限定されていたが、悪性病変におけるPlec1発現は細胞質および膜局在を有していた。Plec1は、前浸潤性悪性PanIN IIIの27%(4/15)および浸潤性PCAC病変の100%(31/31)において、膜および細胞質に局在した(図1C)。
PDACは、通常はPlec1を発現しない腹膜、リンパ節および肝臓に、早期に転移する傾向(propensity)を有する。アッセイした転移巣(metastatic focus)は全て、そのPlec1発現を保持しており(8/8肝臓転移、1/1リンパ節転移および1/1腹膜転移)、これらの組織における転移沈着物(metastatic deposit)を明確に同定し、際立たせていた(図1A)。
ヒト腫瘍組織マイクロアレイのIHCにより、Plec1の有用性は膵がんに限定されないであろうことが明らかになった。食道、胃、および肺の標本においても、Plec1は、良性組織と悪性組織とを識別するために使用できる可能性がある差次的発現パターンを有していた(図2)。
Plec1が、ヒトPDACのインビボ検出を容易にするためのイメージングバイオマーカーとして機能しうるかどうかを決定するために、本発明者らは、ファージディスプレイスクリーン由来のPlec1標的ペプチドを使って、単光子放射型コンピュータ断層撮影(SPECT)用の臨床的に適切なイメージング剤として機能する四量体型合成ペプチド(tPTP)複合体(図8参照)を合成した。tPTPの特異性のインビトロ検証を、標識tPTPおよび非標識tPTPまたは陰性対照PTP(ncPTP)を使った競合アッセイによって行った。tPTPのKi(阻害解離定数)は、ncPTPの2.86×10-6Mに対して8.3×10-7Mだった(図3A)。膵がん細胞を同所性に注射した動物に、tPTPを投与し、4時間後にSPECT/CTでイメージングした。イメージングは、膵臓中の腫瘍だけでなく、それら動物の腹膜中に存在する転移も明らかにした(図3Bおよび図4)。イメージング後に行った体内分布研究により、膵腫瘍は3%注射量(injected dose)/g(id/g)組織を有し、一方、脾臓、肝臓、および心臓は1%id/g未満を有することが実証された(図3C)。プローブは腎臓にも蓄積し、実際、このペプチドの主要排除経路は、腎臓(図3C)および尿によるものであった。薄切した膵臓および腹膜のH&E染色により、膵臓および腹膜の転移における腫瘍の存在が実証された(図3D)。これらのデータは、tPTPがプレクチン-1の高度に特異的なイメージングツールとして機能することを示している。
同所性に移植されたL3.6細胞からの腫瘍を保持する無胸腺ヌードマウスに111IN-tPTPを注射し、注射の4時間後にSPECT/CTでイメージングした。SPECT/CTイメージングにより、tPTPはPDAC中に蓄積して、膵臓中および腹膜転移中の腫瘍のインビボイメージングを可能にすることが実証される。図4参照。
図6は、同所性に置かれたL3.6細胞からの腫瘍を保持する無胸腺ヌードマウスに注射された111IN-tPTPの血中半減期研究の結果を示している(図6A参照)。血液を注射の0、15、30、45、60、および120分後に採取した。tPTPの血中半減期は4.29分だった。SPECT/CTイメージング後(図4も参照されたい)に動物(n=5)を屠殺し、臓器を収穫し、ガンマカウント数を評価した。膵臓は3%注射量/グラムを示し、腹膜腔に見いだされた転移は1.5%注射量/グラムを示し、最も高い値は腎臓にあった(図6B参照)。111IN-tPTPの主要排泄経路は尿によるものである。
四量体型プレクチン-1標的ペプチド4(βAKTLLPTP-GGS(PEG5000))-KKKKDOTAβA-NH2(図8の化学構造参照)は、以前に記述された単量体型ペプチドよりも増加した感度を有することがわかった(すなわち、tPTPにおける600pmolというアフィニティに対して単量体型ペプチドによるアフィニティーは160nmolである)。さらに、β-アラニンおよびPEGが付加されているので、四量体型は単量体型ペプチドよりも良好な寿命および体内分布を有する。なぜなら、PETは毒性を低下させ、β-アラニンは分解を減少させるからである。さらにまた、標識四量体型ペプチド複合体が迅速に(すなわち1〜4時間で)可視化されうるのに対し、既知の単量体型ペプチドは可視化までにはるかに長い時間(すなわち48時間)を要する。
この研究に使用したペプチドは、Panc27ペプチドとも呼ばれるファージ由来配列KTLLPTP(配列番号1)からなる。7つの位置のそれぞれを個別にアラニンに突然変異させた。アラニン突然変異体ATLLPTP、KALLPTP、KTALPTP、KTLAPTP、KTLLATP、KTLLPAP、およびKTLLPTA(それぞれ配列番号9〜15)を作製し、アフィニティについて調べた。その結果を図9に記載する。アラニンによるスレオニンの置換はアフィニティを低下させたので、このデータは、スレオニンの重要性を示唆しているが、本発明の配列の他の位置のいずれかに1つ以上のスレオニンを付加することが、置換にとって有用である可能性を排除するものではない。同じことがプロリンについてもいえるが、データが示唆するとおり、その程度はスレオニンほどではない。しかし、置換を分析するための主たる基準は、得られた置換体がアフィニティーに対して実質的な効果を有するかどうかである。
現在のところ、早期PDACの検出を、または前浸潤性PDACの検出でさえ、補助するために利用できるバイオマーカーはない。利用可能なバイオマーカーはいずれも、PDACと良性膵臓疾患(最も注目すべきは慢性膵炎)とを、確実には識別しない。ここに本発明者らは、Plec1が、早期前浸潤性の原発および転移ヒトPDACにおいて特異的に発現される初めての新規バイオマーカーであり、一方、正常導管上皮および慢性膵炎における導管上皮細胞はこのタンパク質を発現しないことを確認した。さらにまた、本発明者らは、食道、胃、および肺におけるがん(転移を含む)を検出するためにPlec1発現を利用しうることを示す。これらの知見に加えて、本発明者らは、インビボ前臨床モデルにおいて、Plec1ターゲティングイメージング剤をPDACの非侵襲的イメージングに使用できることを実証する。これにより、PDACに関するルーチン臨床診断およびスクリーニング手段へのPlec1標的イメージングの組込みを考えることが可能になる。
1.Jemal A, Siegel R, Ward E, Murray T, Xu J, et al. (2007) Cancer statistics, 2007. CA Cancer J Clin 57: 43-66.
2.Hruban RH, Goggins M, Parsons J, Kern SE (2000) Progression model for pancreatic cancer. Clin Cancer Res 6: 2969-2972.
3.Maitra A, Fukushima N, Takaori K, Hruban RH (2005) Precursors to invasive pancreatic cancer. Adv Anat Pathol 12: 81-91.
4.Hruban RH, Takaori K, Klimstra DS, Adsay NV, Albores-Saavedra J, et al. (2004) An illustrated consensus on the classification of pancreatic intraepithelial neoplasia and intraductal papillary mucinous neoplasms. Am J Surg Pathol 28: 977-987.
5.Goggins M (2007) Identifying molecular markers for the early detection of pancreatic neoplasia. Semin Oncol 34: 303-310.
6.Ahmad NA, Kochman ML, Brensinger C, Brugge WR, Faigel DO, et al. (2003) Interobserver agreement among endosonographers for the diagnosis of neoplastic versus non-neoplastic pancreatic cystic lesions. Gastrointest Endosc 58: 59-64.
7.Meining A, Rosch T, Wolf A, Lorenz R, Allescher HD, et al. (2003) High interobserver variability in endosonographic staging of upper gastrointestinal cancers. Z Gastroenterol 41: 391-394.
8.Krishna NB, Mehra M, Reddy AV, Agarwal B (2009) EUS/EUS-FNA for suspected pancreatic cancer: influence of chronic pancreatitis and clinical presentation with or without obstructive jaundice on performance characteristics. Gastrointest Endosc 70: 70-79.
9.Varadarajulu S, Tamhane A, Eloubeidi MA (2005) Yield of EUS-guided FNA of pancreatic masses in the presence or the absence of chronic pancreatitis. Gastrointest Endosc 62: 728-736; quiz 751, 753.
10.Chari ST (2007) Detecting early pancreatic cancer: problems and prospects. Semin Oncol 34: 284-294.
11.Pelaez-Luna M, Takahashi N, Fletcher JG, Chari ST (2007) Resectability of presymptomatic pancreatic cancer and its relationship to onset of diabetes: a retrospective review of CT scans and fasting glucose values prior to diagnosis. Am J Gastroenterol 102: 2157-2163.
12.Fernandez-del Castillo C, Rattner DW, Warshaw AL (1995) Further experience with laparoscopy and peritoneal cytology in the staging of pancreatic cancer. Br J Surg 82: 1127-1129.
13.John TG, Greig JD, Carter DC, Garden OJ (1995) Carcinoma of the pancreatic head and periampullary region. Tumor staging with laparoscopy and laparoscopic ultrasonography. Ann Surg 221: 156-164.
14.Boll DT, Merkle EM (2003) Differentiating a chronic hyperplastic mass from pancreatic cancer: a challenge remaining in multidetector CT of the pancreas. Eur Radiol 13 Suppl 5: M42-49.
15.Oto A, Eltorky MA, Dave A, Ernst RD, Chen K, et al. (2006) Mimicks of pancreatic malignancy in patients with chronic pancreatitis: correlation of computed tomography imaging features with histopathologic findings. Curr Probl Diagn Radiol 35: 199-205.
16.Furukawa H, Okada S, Saisho H, Ariyama J, Karasawa E, et al. (1996) Clinicopathologic features of small pancreatic adenocarcinoma. A collective study. Cancer 78: 986-990.
17.Kelly KA, Bardeesy N, Anbazhagan R, Gurumurthy S, Berger J, et al. (2008) Targeted nanoparticles for imaging incipient pancreatic ductal adenocarcinoma. PLoS Med 5: e85.
18.Sonnenberg A, Liem RK (2007) Plakins in development and disease. Exp Cell Res 313: 2189-2203.
19.Pfendner E, Uitto J (2005) Plectin gene mutations can cause epidermolysis bullosa with pyloric atresia. J Invest Dermatol 124: 111-115.
20.Pulkkinen L, Smith FJ, Shimizu H, Murata S, Yaoita H, et al. (1996) Homozygous deletion mutations in the plectin gene (PLEC1) in patients with epidermolysis bullosa simplex associated with late-onset muscular dystrophy. Hum Mol Genet 5: 1539-1546.
21.Niwa T, Saito H, Imajoh-Ohmi S, Kaminishi M, Seto Y, et al. (2009) BRCA2 interacts with the cytoskeletal linker protein plectin to form a complex controlling centrosome localization. Cancer Sci.
22.Bausch et al., 2009, J. Gastrointest. Surg., 13:1948.
23.Harris, 2009, J. Clin. Oncology, 27, No. 15S (May 20 Supplement): e22118.
24.Lee, 2004, J. Med., 35:(1-6):141-149.
25.国際特許出願公開WO 2009/129220, Kelly, et al., 2009年10月22日公開.
26.Karlin and Altschul (1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268.
27.Karlin and Altschul (1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877.
28.Altschul, et al. (1990, J. Mol. Biol. 215:403-410.
29.Altschul et al. (1997, Nucleic Acids Res. 25:3389-3402.
30.Gross and Mienhofer, eds., The Peptides, vol. 3, pp. 3-88 (Academic Press, New York, 1981.
31.Gerhardt et al., eds., 1994, Methods for General and Molecular Bacteriology, American Society for Microbiology, Washington, DC, p. 574.
32.Devereux et al., 1984 Nucl. Acids Res. 12:387.
33.Altschul et al., 1990 Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990 87:14:5509-13.
34.Altschul et al., J. Mol. Biol. 1990 215:3:403-10; Altschul et al., 1997 Nucleic Acids Res. 25:3389-3402.
35.Li, 2007, J. Nuc. Med., 48:7:1162-1171「64Cu-labeled tetrameric and octameric RGD peptides for small-animal PET of tumor αvβ3 integrin expression」.
36.Choe and Lee, 2007, Current Pharmaceutical Design, 13:17-31に総説.
37.Chen et al., 2004, Mol. Imaging Biol. 6:350-9「MicroPET imaging of breast cancer alphav-integrin expression with 64Cu-labeled dimeric RGD peptides」.
38.Janssen, 2002, Cancer Biother. Radiophamr., 17:641-6「Comparison of monomeric and dimeric radiolabeled RGD-peptide for tumor targeting」.
39.Poethko, 2004, J. Nucl. Med. 45:892-902.
40.Chen, 2004, Bioconjugate Chem., 15:41-9.
41.Chen, 2004, Nucl. Med. Biol., 31:11-19「Pharmacokinetics and tumor retention of 125I-labeled RGD peptide are improved by PEGylation」.
42.Li et al., 2009, Mol. Cancer Ther., 8:5:1239-1249.
43.米国特許第7,666,979号(米国特許出願第10/661,032号から発行), Fan, et al.「Methods for Preparing Multivalent Constructs for Therapeutic and Diagnostic Applications and Methods of Preparing the Same」2010年2月23日
44.米国特許出願第12/012,011号(米国特許出願第10/792,582号の継続出願)
45.Nahrendorf, 2010, JACC: Cardiovascular Imaging, 2:10:1213-1222.
46.Krajewski et al., 2005「Effect of Dimerization and Tetramerization on the Potency of HIV-Integrase Inhibitory Peptides」、S. Blondelle編「Understanding Biology Using Peptides」(American Peptide Society)の411〜412頁.
47.Yim et al., 2010, J. Med. Chem., 53:3944-3953.
48.Dijkgraaf et al., 2010, Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging, 2010年9月21日オンライン発行.
49. 米国特許出願第10/792,582号;Dransfield et al., 米国特許公開番号US2010/0261875;米国特許第7,666,979号).
50.Sosabowski et al., Nature Protocols 1, -972-976 (2006)およびLeon-Rodriguez et al., Bioconjugate chemistry, 01/03/2008; 19(2):391-402)参照。
51.米国特許出願第12/112,289号
52.Kyte & Doolittle, 1982, J. Mol. Biol., 157:105-132.
53.Chou & Fasman, 1974, Biochemistry, 13:222-245;
54.1978, Ann. Rev. Biochem., 47: 251-276; 1979, Biophys. J., 26:367-384).
55.PROWLロックフェラー大学ウェブサイト
56.Stewart et al. in Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd Edition, 1984, Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois.
57. Bodanszky and Bodanszky in The Practice of Peptide Synthesis, 1984, Springer-Verlag, New York.
58.Deutscher et al. (ed., 1990, Guide to Protein Purification, Harcourt Brace Jovanovich, San Diego).
60.Gait, 1985, OLIGONUCLEOTIDE SYNTHESIS: A PRACTICAL APPROACH (IRL Press, Oxford, England.
61.Kohler and Milstein (1975, Nature 256:495-497.
62.Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4:72).
63.Cole et al., 1985, in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96.
64.Cote et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:2026-2030.
65.Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81:6851-6855;
66.Neuberger et al., 1984, Nature 312:604-608;
67.Takeda et al., 1985, Nature 314:452-454.
68.米国特許第4,946,778号
69.Huse et al., 1989, Science 246:1275-1281.
70.Harlow et al. (1988, In: Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY.
71.Tuszynski et al. (1988, Blood, 72:109-115).
72.Wright et al. (1992, Critical Rev. in Immunol. 12(3,4):125-168.
73.Gu et al. (1997, Thrombosis and Hematocyst 77(4):755-759.
74.Sambrook et al. (1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY).
75.Burton et al., 1994, Adv. Immunol. 57:191-280.
76.Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581-597.
77.Barbas, 1995, Nature Medicine 1:837-839; de Kruif et al. 1995, J. Mol. Biol.248:97-105.
78. Klug et al., Mol. Biol. Reports 20:97-107 (1994).
79.Wallis et al., Chem. Biol. 2:543-552 (1995).
80.Ellington, Curr. Biol. 4:427-429 (1994); Lato et al., Chem. Biol. 2:291-303 (1995).
81.Conrad et al., Mol. Div. 1:69-78 (1995).
82.Uphoff et al., Curr. Opin. Struct. Biol. 6:281-287 (1996).
83.Fields and Song, Nature (London), 340:245-246 (1989).
84.Chien et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:9578-9582 (1991).
85.Chevray and Nathans, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 5789-5793 (1991).
86.Watt, 2006, Nature Biotechnology, 24:177;
87.Watt, 米国特許第6,994,982号;
88.Watt, 米国特許出願公開第2005/0287580号;
89.Watt, 米国特許第6,510,495号
90.米国特許第5,789,543号
91.米国特許第6,207,718号
92.Remington's Pharmaceutical Science (15th ed., Mack Publishing, Easton, Pa., 1980).
93.Genaro, ed., 1985, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA.
94.Burrows, et al.「Peptide-MHC Class I Tetrameric Complexes Display Exquisite Ligand Specificity」J of Immunology, 2000; 6229-6234.
95.Chakraborty, et al.「Evaluation of 111In-Labeled Cyclic RGD Peptides: Tetrameric not Tetravalent」Biconjugate Chem., 2010, 21, 969-978.
96.Ponticelli, et al.「Modulation of Angiogenesis by a Tetrameric Tripeptide That Antagonizes Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1」J of Biological Chemistry, 2008, Vol. 283, No. 49, 34250-34259.
97.Choe, et al.「Targeted In Vivo of Angiogenesis: Present Status and Perspectives」Current Pharmaceutical Design, 2007, 13, 17-31.
98.Chang, et al.「Tetrameric Cytokines with Improved Biological Activity」July 29, 2010.
Claims (34)
- プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントに結合させるための多量体型ペプチドリガンド複合体であって、
プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントに独立して結合する少なくとも2つのペプチド
を含み、
プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントに結合する該ペプチドのそれぞれは、独立して、少なくとも1つの非標準アミノ酸置換または保存的アミノ酸置換を含んでもよく、
該ペプチドのそれぞれは、独立して、少なくとも1つの追加アミノ酸を付加することによって修飾されていてもよく、
該ペプチドのそれぞれは、ポリエチレングリコールにカップリングされていてもよく;
該ペプチドまたはポリエチレングリコールにカップリングされていてもよいペプチドのそれぞれは、さらにキレート剤にカップリングされており、該キレート剤は、少なくとも1つのリンカーによって、該ペプチドまたはポリエチレングリコールにカップリングされていてもよいペプチドに、カップリングされていてもよく、
少なくとも1つのイメージング剤が、該キレート剤にカップリングされていてもよく、そして
少なくとも1つの治療剤が、該キレート剤にカップリングされていてもよい、
多量体型ペプチドリガンド複合体。 - 該多量体がホモ多量体またはヘテロ多量体である、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該多量体が四量体である、請求項2に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該多量体型ペプチドリガンド複合体のペプチドが、配列番号1〜4および9〜22からなる群より選択される配列を独立して有する、請求項3に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該配列が配列番号1〜4からなる群より選択される、請求項4に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該四量体型複合体が約8.3×10-7MのKiを有する、請求項5に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該複合体が式(βAKTLLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2を有する、請求項6に記載の四量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該キレーターが、DTPA、DO3A、DOTA、EDTA、TETA、EHPG、HBED、NOTA、DOTMA、TETMA、PDTA、TTHA、LICAM、HYNIC、およびMECAMからなる群より選択される、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該イメージング剤が、放射性核種、放射線造影剤、常磁性イオン、金属、生物学的タグ、蛍光ラベル、化学発光ラベル、超音波造影剤および光活性剤からなる群より選択される、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該イメージング剤が放射性核種である、請求項9に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該放射性核種が、110In、111In、177Lu、18F、52Fe、62Cu、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、86Y、90Y、89Zr、94mTc、94Tc、99mTc、120I、123I、124I、125I、131I、154-158Gd、32P、11C、13N、15O、186Re、188Re、51Mn、52mMn、55Co、72As、75Br、76Br、82mRb、83Sr、および他のガンマ放射体、ベータ放射体、または陽電子放射体からなる群より選択される、請求項10に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該放射性核種が111Inである、請求項11に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 該ポリエチレングリコールがポリエチレングリコール5000である、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体。
- 対象におけるプレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントを検出するための方法であって、イメージング剤を含む請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体を対象に投与すること、およびプレクチン-1を含む細胞の場所を検出することを含む方法。
- 該多量体型ペプチドリガンド複合体が式(βAKTLLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2を有し、イメージング剤が111Inである、請求項14に記載の方法。
- 該イメージング剤が、コンピュータに接続されていてプログラムを使って画像データを解析するSPECT/CTスキャナで検出される、請求項14に記載の方法。
- 該多量体型ペプチドリガンドを構成するペプチドがそれぞれに、配列番号1〜4および9〜22からなる群より独立して選択される配列を有する、請求項14に記載の方法。
- 該イメージング剤が、放射性核種、放射線造影剤、常磁性イオン、金属、生物学的タグ、蛍光ラベル、化学発光ラベル、超音波造影剤および光活性剤からなる群より選択される、請求項14に記載の方法。
- 該プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントが、細胞表面プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントである、請求項14に記載の方法。
- がんを検出し、がんを診断し、がんの進行を監視し、またはがんの処置を監視する方法であって、ここで、該がんの細胞はプレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントを発現するものであり、該方法が、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体を含む医薬組成物を試験対象に投与すること、該イメージング剤を検出すること、該試験対象における該イメージング剤のレベルおよび場所を決定すること、ならびに該レベルおよび場所を、非罹患対象からの、他の点では同一な場所からの該イメージング剤のレベルおよび場所と比較するか、または該試験対象の非罹患区域と比較することを含み、ここで該複合体はイメージング剤を含み、さらにここで、非罹患対象または該試験対象の非罹患区域からの該試料における該イメージング剤のレベルまたは場所と比較して、該試験対象における該イメージング剤のより高いレベルまたは異なる場所は、該試験対象がプレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントを発現するがんを有することの指標であり、それによって、がんを検出し、がんを診断し、がんの進行を監視し、またはがんの処置を監視する方法であって、ここで、該がん細胞はプレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントを発現するものである、方法。
- 該がんが、頭頚部がん、肝がん、膵がん、食道がん、胃がん、肺がん、乳がん、卵巣がん、子宮がん、子宮内膜がん、子宮頸がん、前立腺がん、副腎がん、リンパ腫、唾液腺がん、骨がん、脳がん、小脳がん、結腸がん、直腸がん、直腸結腸がん、口鼻咽頭がん、NPC、腎がん、膀胱がん、皮膚がん、黒色腫、基底細胞癌、硬口蓋癌、舌扁平上皮細胞癌、髄膜腫、多形性腺腫、星状細胞腫、軟骨肉腫、皮質腺腫、肝細胞癌、膵がん、扁平上皮細胞癌、および腺癌からなる群より選択される、請求項20に記載の方法。
- 該がんが膵がんである、請求項21に記載の方法。
- 該膵がんが、膵管腺癌、膵上皮内新生物、腺腫、異形成を伴う腺腫、および上皮内癌からなる群より選択される、請求項22に記載の方法。
- 該がんが転移がんである、請求項20に記載の方法。
- 該多量体型ペプチドリガンド複合体を構成するペプチドがそれぞれに、配列番号1〜4および9〜22からなる群より独立して選択される配列を有する、請求項20に記載の方法。
- 該多量体型ペプチドリガンド複合体が式(βAKTLLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2を有し、イメージング剤が111Inである、請求項20に記載の方法。
- 該イメージング剤が、放射性核種、放射線造影剤、常磁性イオン、金属、生物学的タグ、蛍光ラベル、化学発光ラベル、超音波造影剤および光活性剤からなる群より選択される、請求項20に記載の方法。
- 該プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントが細胞表面プレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントである、請求項20に記載の方法。
- 対象におけるがんを診断するための方法であって、該がんの細胞はプレクチン-1またはそのホモログもしくはフラグメントを発現するものであり、該方法は、該対象から生物学的試料を得ること、該試料を、請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体を含む組成物と接触させること、該試験対象からの該試料における該プレクチン-1のレベルまたは場所を、非罹患対象から得られた他の点では同一な試料からのプレクチン-1のレベルまたは場所と比較するか、または既知量のプレクチン-1を含む標準試料と比較することを含み、ここで該複合体はイメージング剤を含むものであり、さらにここで、該試験対象からの該試料におけるプレクチン-1のより高いレベルは、該試験対象ががんを有することの指標である方法。
- 該多量体型ペプチドリガンド複合体が式(βAKTLLPTPGGS(PEG5000))4KKKKDOTAβA-NH2を有する、請求項29に記載の方法。
- 該イメージング剤が、放射性核種、放射線造影剤、常磁性イオン、金属、生物学的タグ、蛍光ラベル、化学発光ラベル、超音波造影剤および光活性剤からなる群より選択される請求項30に記載の方法。
- 医薬上許容される担体と請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体とを含む医薬組成物。
- 医薬上許容される担体と請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体とを含む医薬組成物、適用具、およびそれを使用するための指示書を含み、イメージング剤および治療剤を含んでいてもよいキット。
- 該複合体が、以下の構造を有する、イメージング剤を含む請求項1に記載の多量体型ペプチドリガンド複合体:
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US25824209P | 2009-11-05 | 2009-11-05 | |
US61/258,242 | 2009-11-05 | ||
PCT/US2010/055632 WO2011057078A2 (en) | 2009-11-05 | 2010-11-05 | Compositions and methods for detecting plectin-1 as a biomarker for cancer |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013510094A true JP2013510094A (ja) | 2013-03-21 |
JP2013510094A5 JP2013510094A5 (ja) | 2013-12-19 |
Family
ID=43970781
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012537233A Pending JP2013510094A (ja) | 2009-11-05 | 2010-11-05 | がんのバイオマーカーとしてプレクチン−1を検出するための組成物および方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9075059B2 (ja) |
EP (1) | EP2496948B1 (ja) |
JP (1) | JP2013510094A (ja) |
KR (1) | KR20120101054A (ja) |
CN (1) | CN102762984A (ja) |
CA (1) | CA2779730C (ja) |
WO (1) | WO2011057078A2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016525515A (ja) * | 2013-08-29 | 2016-08-25 | アイホル コーポレーション | グリコサミノグリカンの化合物及びその調製方法並びに応用 |
JP2018141795A (ja) * | 2014-10-17 | 2018-09-13 | エスケーテレコム カンパニー リミテッドSk Telecom Co., Ltd. | 膵臓癌診断用組成物およびこれを用いた膵臓癌診断方法 |
JP2020504161A (ja) * | 2017-01-12 | 2020-02-06 | イミューン レギュレーション リミテッド | 結核菌シャペロニン60.1ペプチドおよびその使用 |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102762984A (zh) | 2009-11-05 | 2012-10-31 | 弗吉尼亚大学专利基金会 | 用于检测作为癌症生物标志的网蛋白-1的组合物和方法 |
WO2013039477A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | University Of South Alabama | Non-invasive methods of detecting target molecules |
EP2972375A2 (en) * | 2013-03-13 | 2016-01-20 | Creatics LLC | Methods and compositions for detecting pancreatic cancer |
US9606123B2 (en) | 2013-03-29 | 2017-03-28 | University Of Virginia Patent Foundation | Compositions and methods for diagnosing and monitoring ovarian cancer progression and treatment |
CN104208727B (zh) * | 2013-08-10 | 2018-02-02 | 深圳市奥尼克斯基因技术有限公司 | 一种新型肿瘤显像剂(99m)TC‑HYNIC/EDDA‑TMTP1的制备与应用 |
US10611796B2 (en) | 2016-03-16 | 2020-04-07 | Council Of Scientific & Industrial Research | Method for regressing pancreatic tumor by a liposomal formulation along with DNA vaccines |
CN116333140A (zh) * | 2016-04-08 | 2023-06-27 | 埃缇健康公司D/B/A泽尔拜尔 | 网蛋白-1结合抗体及其用途 |
CN105938114B (zh) * | 2016-04-15 | 2018-06-08 | 中国科学院武汉物理与数学研究所 | 一种用于蛋白质顺磁标记的探针及其合成方法 |
US11890352B2 (en) | 2018-02-27 | 2024-02-06 | University Of Virginia Patent Foundation | Plectin-targeted liposomes/PARP inhibitor in the treatment of cancer |
CN108623661B (zh) * | 2018-05-14 | 2021-04-27 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 一种靶向胰腺癌肿瘤细胞的双特异性多肽分子探针及应用 |
US11666671B2 (en) | 2018-06-01 | 2023-06-06 | Northwestern University | Spatial mapping of kidney functions |
CN110935006B (zh) * | 2019-11-12 | 2021-05-18 | 中食都庆(山东)生物技术有限公司 | 地龙蛋白肽在制备预防和/或治疗血栓性疾病的药物中的应用 |
CA3203072A1 (en) * | 2020-12-22 | 2022-06-30 | Andrea CASAZZA | Compounds comprising a tetrapeptidic moiety |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009129220A2 (en) * | 2008-04-14 | 2009-10-22 | The Gereral Hospital Corporation | Plectin-1 targeted agents for detection and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1297902A (zh) | 1999-11-24 | 2001-06-06 | 上海博容基因开发有限公司 | 一种新的多肽——人网蛋白80和编码这种多肽的多核苷酸 |
US7666979B2 (en) | 2002-03-01 | 2010-02-23 | Bracco International B.V. | Methods for preparing multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications and methods of preparing the same |
US7261876B2 (en) | 2002-03-01 | 2007-08-28 | Bracco International Bv | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
US7563433B2 (en) | 2007-01-11 | 2009-07-21 | Immunomedics, Inc. | Methods and compositions for F-18 labeling of proteins, peptides and other molecules |
SI2949658T1 (sl) | 2003-03-03 | 2018-10-30 | Dyax Corp. | Peptidi, ki specifično vežejo HGF receptor (cMet) in njihove uporabe |
WO2005053731A1 (en) | 2003-11-25 | 2005-06-16 | Novartis Ag | Biomarkers for the efficacy of calcitonin and parathyroid hormone treatment |
US8034352B2 (en) | 2005-04-06 | 2011-10-11 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Tetrameric cytokines with improved biological activity |
US7807789B2 (en) | 2004-12-21 | 2010-10-05 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in EGFR-signaling pathways |
US20080267882A1 (en) | 2007-04-27 | 2008-10-30 | Stanford University | Imaging compounds, methods of making imaging compounds, methods of imaging, therapeutic compounds, methods of making therapeutic compounds, and methods of therapy |
WO2009097579A1 (en) | 2008-01-30 | 2009-08-06 | Proteogenix, Inc. | Gestational age dependent proteomic changes of human maternal serum for monitoring maternal and fetal health |
EP2268654B1 (en) | 2008-04-21 | 2017-01-25 | The Regents Of The University Of California | Selective high-affinity polydentate ligands and methods of making such |
CN102762984A (zh) | 2009-11-05 | 2012-10-31 | 弗吉尼亚大学专利基金会 | 用于检测作为癌症生物标志的网蛋白-1的组合物和方法 |
-
2010
- 2010-11-05 CN CN2010800602468A patent/CN102762984A/zh active Pending
- 2010-11-05 WO PCT/US2010/055632 patent/WO2011057078A2/en active Application Filing
- 2010-11-05 CA CA2779730A patent/CA2779730C/en active Active
- 2010-11-05 JP JP2012537233A patent/JP2013510094A/ja active Pending
- 2010-11-05 US US13/508,120 patent/US9075059B2/en active Active
- 2010-11-05 EP EP10829151.9A patent/EP2496948B1/en active Active
- 2010-11-05 KR KR1020127014652A patent/KR20120101054A/ko not_active Application Discontinuation
-
2015
- 2015-03-27 US US14/671,062 patent/US9623128B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009129220A2 (en) * | 2008-04-14 | 2009-10-22 | The Gereral Hospital Corporation | Plectin-1 targeted agents for detection and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6015000163; PLoS Med. vol.5, no.4, 2008, pp.e85(0657-0668) * |
JPN6015000166; J. Gastrointest. Surg. vol.13, no.11, 200909, pp.1948-1954 * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016525515A (ja) * | 2013-08-29 | 2016-08-25 | アイホル コーポレーション | グリコサミノグリカンの化合物及びその調製方法並びに応用 |
JP2016529362A (ja) * | 2013-08-29 | 2016-09-23 | ホーリー ストーン バイオテック カンパニー リミテッド | グリコサミノグリカン化合物、その調製方法および使用 |
JP2018141795A (ja) * | 2014-10-17 | 2018-09-13 | エスケーテレコム カンパニー リミテッドSk Telecom Co., Ltd. | 膵臓癌診断用組成物およびこれを用いた膵臓癌診断方法 |
JP2020504161A (ja) * | 2017-01-12 | 2020-02-06 | イミューン レギュレーション リミテッド | 結核菌シャペロニン60.1ペプチドおよびその使用 |
JP7252895B2 (ja) | 2017-01-12 | 2023-04-05 | レボロ バイオセラピューティクス リミテッド | 結核菌シャペロニン60.1ペプチドおよびその使用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2779730C (en) | 2019-04-30 |
US20120219499A1 (en) | 2012-08-30 |
EP2496948A2 (en) | 2012-09-12 |
WO2011057078A3 (en) | 2011-09-22 |
CA2779730A1 (en) | 2011-05-12 |
WO2011057078A2 (en) | 2011-05-12 |
US20150374862A1 (en) | 2015-12-31 |
EP2496948A4 (en) | 2014-05-07 |
KR20120101054A (ko) | 2012-09-12 |
AU2010315021A1 (en) | 2012-05-24 |
EP2496948B1 (en) | 2018-01-10 |
CN102762984A (zh) | 2012-10-31 |
US9075059B2 (en) | 2015-07-07 |
AU2010315021B2 (en) | 2016-03-17 |
US9623128B2 (en) | 2017-04-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9623128B2 (en) | Compositions and methods for detecting plectin-1 as a biomarker for cancer | |
US20130330274A1 (en) | Compositions and methods for detecting and treating cancer | |
US9606123B2 (en) | Compositions and methods for diagnosing and monitoring ovarian cancer progression and treatment | |
US20180326088A1 (en) | Compositions and methods for treating cancer | |
US20160195538A1 (en) | Compositions and methods for detecting, diagnosing, and treating cancer | |
US20230174616A1 (en) | Pd-l1 binding peptides | |
EP3459964A1 (en) | Galectin-1 binding peptides and use thereof for diagnostic and therapeutic purpose | |
AU2010315021B9 (en) | Compositions and methods for detecting Plectin-1 as a biomarker for cancer | |
US9581598B2 (en) | Diagnosis and treatment of brain tumor | |
CN115916234A (zh) | 靶向ras蛋白的分子 | |
US20170326166A1 (en) | Compositions and methods for treating pituitary tumors | |
US20220175975A1 (en) | HER3 Peptides for Imaging and Radiotherapy | |
US20160067314A1 (en) | Compositions and methods for inhibiting chemoresistance in cancer and improving response to therapy | |
CN117881413A (zh) | 颗粒酶可活化的膜相互作用肽和使用方法 | |
KR20220143730A (ko) | 단백질을 표적화하는 분자 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131031 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131031 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20140120 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150113 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150410 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150512 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150612 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150915 |