JP2013221854A - 電子顕微鏡観察用染色剤および電子顕微鏡観察用試料の染色方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明に係る電子顕微鏡観察用染色剤は、三酢酸イッテルビウムを含有する。
【選択図】図1
Description
本発明に係る電子顕微鏡観察用染色剤に試料を接触させる工程を含む。
前記電子顕微鏡観察用染色剤に接触した試料を、鉛化合物を含有する染色液に接触させる工程をさらに含んでいてもよい。
1.1. 電子顕微鏡観察用染色剤
まず、第1実施形態に係る電子顕微鏡観察用染色剤について説明する。
次に、第1実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法について説明する。本実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法は、本実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の染色方法を含む。以下、本実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法の一例として、本実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法を、生体試料に適用した場合について説明する。
以下、実施例を挙げて本実施形態をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって制限されるものではない。
本実施例では、三酢酸イッテルビウムで染色された生体試料の(透過)電子顕微鏡観察用試料を作製した。生体試料としては、腎臓糸球体、肝臓、海馬、およびほうれん草の葉を用いた。具体的には、まず、灌流固定した生体試料(腎臓糸球体、肝臓、海馬、ほうれん草の葉)を切り出し、カコジル酸緩衝2%パラホルムアルデヒドと2%グルタールアルデヒドとの混合液に浸漬し、前固定した。次に、前固定された生体試料を、カコジル酸緩衝液で洗浄し、2%四酸化オスミウムで後固定した。そして、上昇エタノール系列で脱水し、エポキシ樹脂に包埋した。
このようにして作製された電子顕微鏡観察用試料を、透過電子顕微鏡で観察した。図1は、三酢酸イッテルビウムで染色された腎臓糸球体の透過電子顕微鏡像である。図2は、酢酸ウラニルで染色された腎臓糸球体の透過電子顕微鏡像である。
2.1. 電子顕微鏡観察用試料の作製方法
次に、第2実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法について説明する。
以下、実施例を挙げて本実施形態をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって制限されるものではない。
本実施例では、三酢酸イッテルビウムとクエン酸鉛染色液とで二重染色された生体試料の電子顕微鏡観察用試料を作製した。生体試料としては、腎臓糸球体、肝臓、海馬、およびほうれん草の葉を用いた。具体的には、上述した実施例1と同様の工程で、生体試料を三酢酸イッテルビウムで染色し、この三酢酸イッテルビウムで染色された生体試料をレイノルドのクエン酸鉛染色液に室温で10分間浸漬し、その後、純水で洗浄した。
このようにして作製された電子顕微鏡観察用試料を、透過電子顕微鏡で観察した。
3.1. 電子顕微鏡観察用試料の作製方法
次に、第3実施形態に係る電子顕微鏡観察用試料の作製方法について説明する。
以下、実施例を挙げて本実施形態をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって制限されるものではない。
本実施例では、三酢酸イッテルビウムで染色された、バクテリオファージの一種であるT4ファージの(透過)電子顕微鏡観察用試料を作製した。具体的には、支持膜を備えたグリッド上にT4ファージを吸着させ、三酢酸イッテルビウム水溶液を加える。そして、余分な三酢酸イッテルビウム水溶液を濾紙で吸い取り乾燥させた。なお、三酢酸イッテルビウム水溶液は、三酢酸イッテルビウム四水和物(和光純薬工業株式会社製)を、蒸留水で溶解させることによって作製した。また、三酢酸イッテルビウム水溶液の濃度は、2質量%とした。
このようにして作製された電子顕微鏡観察用試料を、透過電子顕微鏡で観察した。図17は、三酢酸イッテルビウムで染色(ネガティブ染色)されたT4ファージの透過電子顕微鏡像である。図18は、酢酸ウラニルで染色(ネガティブ染色)されたT4ファージの透過電子顕微鏡像である。
Claims (3)
- 三酢酸イッテルビウムを含有する、電子顕微鏡観察用染色剤。
- 請求項1に記載の電子顕微鏡観察用染色剤に試料を接触させる工程を含む、電子顕微鏡観察用試料の染色方法。
- 請求項2において、
前記電子顕微鏡観察用染色剤に接触した試料を、鉛化合物を含有する染色液に接触させる工程をさらに含む、電子顕微鏡観察用試料の染色方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015145854A (ja) * | 2014-02-04 | 2015-08-13 | 日本電子株式会社 | 電子顕微鏡観察用染色剤の製造方法、電子顕微鏡観察用試料の染色方法、および電子顕微鏡観察用染色剤の原液 |
JP2015227831A (ja) * | 2014-06-02 | 2015-12-17 | 日本電子株式会社 | 電子顕微鏡観察用染色剤および電子顕微鏡観察用試料の染色方法 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06288882A (ja) * | 1993-03-31 | 1994-10-18 | Tonen Corp | 透過型電子顕微鏡用試料の作製方法及び試料染色用 装置 |
JPH10206301A (ja) * | 1997-01-17 | 1998-08-07 | Tatsuo Oguro | 電子顕微鏡観察用、生体標本作成方法および生体標本カード |
JP2000345052A (ja) * | 1999-03-31 | 2000-12-12 | Mitsubishi Chemicals Corp | 蛍光性重合体微粒子及びその製造方法、並びにこれを利用した蛍光免疫分析試薬及び蛍光免疫分析法 |
US20060240456A1 (en) * | 2005-03-22 | 2006-10-26 | Liaohai Chen | Nanosized biological container and manufacture thereof |
JP2010523141A (ja) * | 2007-04-11 | 2010-07-15 | コンセホ ナシオナル デ インベスティガシオネス シェンティフィサス イ テクニカス (コニセト) | 細胞株、黒色腫の治療のためにそれを含む組成物、組成物の製造手順および治療方法 |
JP2011112468A (ja) * | 2009-11-26 | 2011-06-09 | Univ Of Tokyo | 電子染色剤、染色液および電子染色方法 |
JP2012247411A (ja) * | 2011-05-02 | 2012-12-13 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | 電子顕微鏡観察用染色剤および該染色剤を用いた染色方法 |
JP2012255697A (ja) * | 2011-06-08 | 2012-12-27 | Jeol Ltd | 電子顕微鏡観察用染色剤および電子顕微鏡観察用試料の染色方法 |
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Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06288882A (ja) * | 1993-03-31 | 1994-10-18 | Tonen Corp | 透過型電子顕微鏡用試料の作製方法及び試料染色用 装置 |
JPH10206301A (ja) * | 1997-01-17 | 1998-08-07 | Tatsuo Oguro | 電子顕微鏡観察用、生体標本作成方法および生体標本カード |
JP2000345052A (ja) * | 1999-03-31 | 2000-12-12 | Mitsubishi Chemicals Corp | 蛍光性重合体微粒子及びその製造方法、並びにこれを利用した蛍光免疫分析試薬及び蛍光免疫分析法 |
US20060240456A1 (en) * | 2005-03-22 | 2006-10-26 | Liaohai Chen | Nanosized biological container and manufacture thereof |
JP2010523141A (ja) * | 2007-04-11 | 2010-07-15 | コンセホ ナシオナル デ インベスティガシオネス シェンティフィサス イ テクニカス (コニセト) | 細胞株、黒色腫の治療のためにそれを含む組成物、組成物の製造手順および治療方法 |
JP2011112468A (ja) * | 2009-11-26 | 2011-06-09 | Univ Of Tokyo | 電子染色剤、染色液および電子染色方法 |
JP2012247411A (ja) * | 2011-05-02 | 2012-12-13 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | 電子顕微鏡観察用染色剤および該染色剤を用いた染色方法 |
JP2012255697A (ja) * | 2011-06-08 | 2012-12-27 | Jeol Ltd | 電子顕微鏡観察用染色剤および電子顕微鏡観察用試料の染色方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6016011727; 山口正視: '電子顕微鏡試料作製におけるトラブルシューティング 微生物試料作製におけるトラブルシューティング' 顕微鏡 Vol.42 No.1, 20070330, Page.26-28 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015145854A (ja) * | 2014-02-04 | 2015-08-13 | 日本電子株式会社 | 電子顕微鏡観察用染色剤の製造方法、電子顕微鏡観察用試料の染色方法、および電子顕微鏡観察用染色剤の原液 |
JP2015227831A (ja) * | 2014-06-02 | 2015-12-17 | 日本電子株式会社 | 電子顕微鏡観察用染色剤および電子顕微鏡観察用試料の染色方法 |
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